牛樟芝培養(yǎng)方法、牛樟芝酒萃物的制備方法及該牛樟芝酒萃物的用途
【專利摘要】一種提升樟芝酸C及樟菇酸C含量的牛樟芝培養(yǎng)方法，包含：提供一牛樟樹椴木；提供一牛樟芝菌體，將該牛樟芝菌體接種于該牛樟芝椴木，使每公斤的該牛樟芝椴木含有干重為0.162克的菌絲及菌絲球；及再以波長為600至700nm的一光源照射該接種有牛樟芝菌體的牛樟樹椴木，以獲得一牛樟芝子實(shí)體；其中，該接種有牛樟芝菌體的牛樟樹椴木以該光源每天照射8至12小時(shí)，且連續(xù)照射30至40天。此種牛樟芝培養(yǎng)方法，可以產(chǎn)生大量樟芝酸C及樟菇酸C，以提升牛樟芝的營養(yǎng)價(jià)值。又可以縮短牛樟芝的培養(yǎng)時(shí)間，降低栽培成本，進(jìn)而利于進(jìn)行牛樟芝的大量生產(chǎn)。
【專利說明】牛樟芝培養(yǎng)方法、牛樟芝酒萃物的制備方法及該牛樟芝酒 萃物的用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明是關(guān)于一種牛樟芝培養(yǎng)方法，特別是一種能夠提升牛樟芝的樟芝酸C及樟 燕酸C含量的牛樟芝培養(yǎng)方法，本發(fā)明更關(guān)于一種牛樟芝萃取方法，可以獲得含有較高含 量的樟芝酸C及樟菇酸C含量的牛樟芝酒萃物，以及該牛樟芝酒萃物用以抑制腫瘤細(xì)胞生 長的用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 牛樟芝（Antrodia cinnamomea)為臺灣特有珍貴藥材，僅生長于臺灣保育類 的牛樟樹（Cinnamomum kanehirai )的中空芯材內(nèi)壁，野生牛樟芝含有豐富的三廠類 (Triterpenoids)，三萜類具有抑制腫瘤細(xì)胞生長、修復(fù)肝臟及促進(jìn)肝功能、降低血脂及血 壓、提升免疫能力等功能，而使野生牛樟芝價(jià)格水漲船高。
[0003] 然而，由于野生牛樟芝量少且不易取得，因此業(yè)界是以人工培育牛樟芝的方式，獲 得牛樟芝菌絲體或子實(shí)體，以進(jìn)一步萃取該牛樟芝菌絲體或子實(shí)體內(nèi)的生理活性物質(zhì)(如 三萜類化合物)。
[0004] 現(xiàn)有牛樟芝培養(yǎng)方法包含有：液態(tài)發(fā)酵法、固態(tài)培養(yǎng)法及椴木栽培法，其中，現(xiàn)有 液態(tài)發(fā)酵法生長速度較快，但是由于發(fā)酵菌絲體的生化及生理代謝途徑與野生牛樟芝不 同，生成的營養(yǎng)成分與野生牛樟芝也相去甚遠(yuǎn)；現(xiàn)有固態(tài)培養(yǎng)法雖然可以生成與野生牛樟 芝較為相似的子實(shí)體，但以現(xiàn)有固態(tài)培養(yǎng)法生成的子實(shí)體的營養(yǎng)成分仍然與野生牛樟芝子 實(shí)體有些許不同。
[0005] 現(xiàn)有椴木栽培法是利用枯死的牛樟樹椴木，將牛樟芝菌體接種于該牛樟樹椴木 中，使該牛樟芝菌體可以于該牛樟樹椴木中生長，借此采取子實(shí)體，其優(yōu)點(diǎn)在于可以生成與 野生牛樟芝子實(shí)體相同的成分。然而，現(xiàn)有椴木栽培法須經(jīng)過長達(dá)2至3年的培養(yǎng)時(shí)間，且 培養(yǎng)過程必須維持適當(dāng)?shù)沫h(huán)境溫度，因此，現(xiàn)有椴木栽培法具有栽培成本高、栽培時(shí)間長等 問題，因而不利進(jìn)行量產(chǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的主要目的是提供一種牛樟芝培養(yǎng)方法，可以產(chǎn)生大量樟芝酸C及樟燕酸 C，以提升牛樟芝的營養(yǎng)價(jià)值。
[0007] 本發(fā)明的再一目的是提供一種牛樟芝培養(yǎng)方法，可以縮短牛樟芝的培養(yǎng)時(shí)間，降 低栽培成本，進(jìn)而利于進(jìn)行牛樟芝的大量生產(chǎn)。
[0008] 本發(fā)明的又一目的是提供一種牛樟芝酒萃物的制備方法，該牛樟芝酒萃物具有高 含量的樟芝酸C及樟菇酸C，可以降低腫瘤細(xì)胞的存活率。
[0009] 本發(fā)明的再一目的是提供一種牛樟芝酒萃物的用途，以該牛樟芝酒萃物作為一有 效成分，用以抑制腫瘤細(xì)胞的生長。
[0010] 為達(dá)到前述發(fā)明目的，本發(fā)明所運(yùn)用的技術(shù)手段及借助該技術(shù)手段所能達(dá)到的功 效包含有：
[0011] 一種提升樟芝酸c及樟菇酸C含量的牛樟芝培養(yǎng)方法，包含：提供一牛樟樹椴木； 提供一牛樟芝菌體，將該牛樟芝菌體接種于該牛樟芝椴木，使每公斤的該牛樟芝椴木含有 干重為0. 162克的菌絲及菌絲球；然后以波長為600至700nm的一光源照射該接種有牛樟 芝菌體的牛樟樹椴木，以獲得一牛樟芝子實(shí)體；其中，該接種有牛樟芝菌體的牛樟樹椴木是 以該波長為600至700nm的光源每天照射8至12小時(shí)，且連續(xù)照射30至40天。
[0012] 本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，其中，該牛樟芝菌體呈液態(tài)，且每公升的該牛樟芝菌體 含有8. 1克干重的菌絲和菌絲球。
[0013] 本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，其中，該光源的波長較佳選擇為660nm。
[0014] 本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，其中，該光源較佳可以來自發(fā)光二極管。
[0015] 本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，其中，以該光源每天照射該接種有牛樟芝菌體的牛樟 樹椴木的時(shí)間較佳選擇為8小時(shí)。
[0016] 本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，其中，較佳以該光源選擇連續(xù)照射該接種有牛樟芝菌 體的牛樟樹椴木30天。
[0017] 本發(fā)明還提供一種具有高含量樟芝酸C及樟菇酸C的牛樟芝酒萃物的制備方法， 包含：提供如前述的牛樟芝子實(shí)體；及于25°C下，利用95%乙醇以超聲波震蕩萃取該牛樟芝 子實(shí)體，以獲得一牛樟芝酒萃物。
[0018] 本發(fā)明還提供一種牛樟芝酒萃物用于抑制肝腫瘤細(xì)胞生長的用途，是將如前述的 牛樟芝酒萃物作為一活性成分，應(yīng)用于制備用以治療肝腫瘤的藥物組成分。
[0019] 本發(fā)明還提供一種牛樟芝酒萃物用于抑制肺腫瘤細(xì)胞生長的用途，是將如前述的 牛樟芝酒萃物作為一活性成分，應(yīng)用于制備用以治療肺腫瘤的藥物組成分。
[0020] 本發(fā)明還提供一種牛樟芝酒萃物用于抑制大腸腫瘤細(xì)胞生長的用途，是將如前述 的牛樟芝酒萃物作為一活性成分，應(yīng)用于制備用以治療大腸腫瘤的藥物組成分。
[0021] 本發(fā)明還提供一種牛樟芝酒萃物用于抑制肉瘤細(xì)胞生長的用途，是將如前述的牛 樟芝酒萃物作為一活性成分，應(yīng)用于制備用以治療肉瘤的藥物組成分。
[0022] 本發(fā)明還提供一種牛樟芝酒萃物用于抑制乳房腫瘤細(xì)胞生長的用途，是將如前述 的牛樟芝酒萃物作為一活性成分，應(yīng)用于制備用以治療乳房腫瘤的藥物組成分。
[0023] 本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，可以使培養(yǎng)出的牛樟芝含有大量樟芝酸C及樟菇酸C， 進(jìn)而達(dá)到提升牛樟芝的營養(yǎng)價(jià)值的功效。
[0024] 本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，可以縮短牛樟芝的培養(yǎng)時(shí)間，進(jìn)而達(dá)到提升牛樟芝的 經(jīng)濟(jì)價(jià)值的功效。
[0025] 經(jīng)本發(fā)明的牛樟芝酒萃物的制備方法所制備的牛樟芝酒萃物，具有高含量的樟芝 酸C及樟菇酸C，可以降低腫瘤細(xì)胞的存活率，可以作為抑制腫瘤細(xì)胞生長的有效成分，為 本發(fā)明的功效。
[0026] 本發(fā)明的牛樟芝酒萃物可以作為一活性成分，可以有效抑制肝腫瘤細(xì)胞、肺腫瘤 細(xì)胞、大腸腫瘤細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、乳房腫瘤細(xì)胞等腫瘤細(xì)胞的生長，具有使腫瘤細(xì)胞發(fā)生毒 殺作用而無法增生或擴(kuò)散的功效。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0027] 圖1為樟芝酸C的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖。
[0028] 圖2為樟菇酸C的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖。

【具體實(shí)施方式】
[0029] 為讓本發(fā)明的上述及其他目的、特征及優(yōu)點(diǎn)能更明顯易懂，下文特舉本發(fā)明的較 佳實(shí)施例，并配合附圖，作詳細(xì)說明如下：
[0030] 本發(fā)明的提升樟芝酸C及樟菇酸C含量的牛樟芝培養(yǎng)方法，包含以下步驟：提供一 牛樟樹椴木；提供一牛樟芝菌體，將該牛樟芝菌體接種于該牛樟芝椴木，使每公斤的該牛樟 芝椴木含有干重為〇. 162克的菌絲及菌絲球；及然后以波長為600至700nm的一光源照射 該接種有牛樟芝菌體的牛樟樹椴木，以獲得一牛樟芝子實(shí)體。
[0031] 上述提供一牛樟樹鍛木的步驟，包括將該牛樟樹鍛木可以隔水培養(yǎng)于一培養(yǎng)箱 中，維持該培養(yǎng)箱的溫度為28?30°C，且濕度為80%以上；較佳地，為避免其他微生物的競 爭，可以將該牛樟樹椴木及該培養(yǎng)箱進(jìn)行滅菌后，再進(jìn)行后續(xù)步驟。
[0032] 上述提供一牛樟芝菌體的步驟，是將該牛樟芝菌體接種于該牛樟樹椴木。舉例而 言，本發(fā)明所使用的牛樟芝菌體可以選擇為購自中國臺灣食品工業(yè)發(fā)展研究所生物資源保 存及研究中心的牛樟菌菌株，如該牛樟菌菌株編號為BCRC35396,但并不以此為限；本較佳 實(shí)施例中，可以于接種時(shí)，選擇使用液態(tài)的該牛樟芝菌體，并且將1公升的該牛樟芝菌體 (每公升約含有8. 1克干重的菌絲和菌絲球)接種于50公斤的該牛樟樹椴木，使該牛樟芝菌 體能夠自該牛樟樹椴木中獲得足夠的生長空間及養(yǎng)分；此外，本實(shí)施例的接種方式可以選 擇將該牛樟芝菌體以噴灑方式均勻地灑在該牛樟樹鍛木表面。
[0033] 完成上述步驟后，再以波長為600至700nm的一光源照射該接種有牛樟芝菌體的 牛樟樹鍛木，較佳地，該光源選擇為紅光，且該光源的波長為660nm，該光源較佳可以選擇來 自于發(fā)光二極管，其具有高光電轉(zhuǎn)換效率、波長固定及低發(fā)熱等多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)，并且容易調(diào)整其 光量、光質(zhì)(紅/藍(lán)光比例)，因而適用于封閉式生長環(huán)境；于本較佳實(shí)施例中，可選擇以波 長為660nm的光源，每天照射接種有該牛樟芝菌體的該牛樟樹椴木8至12小時(shí)，且連續(xù)照 射30至40天，使接種的該牛樟芝菌體可以于該牛樟樹椴木成長為一牛樟芝子實(shí)體；據(jù)此， 可以提高該牛樟芝子實(shí)體所含樟芝酸C及樟菇酸C的含量。
[0034] 此外，本發(fā)明也提供一種牛樟芝酒萃物的制備方法，可以提升該牛樟芝酒萃物的 樟芝酸C及樟菇酸C的含量，包含：提供如上述的牛樟芝子實(shí)體；及于25°C下，利用95%乙 醇以超聲波震蕩萃取該牛樟芝子實(shí)體。
[0035] 詳而言之，于本較佳實(shí)施例中，取5克牛樟芝子實(shí)體，置于600毫升的95%乙醇，于 25°C環(huán)境下，以頻率為40KHz的超聲波進(jìn)行震蕩萃取，使該牛樟芝子實(shí)體中的有效成份(如 三萜類）可以溶出至乙醇；較佳地，該萃取時(shí)間為8小時(shí)，并重復(fù)萃取3次，可以提高總萃取 量，以獲得該牛樟芝酒萃物；另外也可以再通過冷凍干燥以獲得一濃縮的牛樟芝酒萃物。
[0036] 為證實(shí)本發(fā)明的牛樟芝培養(yǎng)方法，確實(shí)可以提升樟芝酸C及樟菇酸C的含量，并可 以提升牛樟芝對于腫瘤的抑制效果，遂進(jìn)行以下試驗(yàn)：
[0037] (A)三萜類含量檢測
[0038] 本試驗(yàn)可以取如第1表所示的牛樟芝酒萃物，第A1組經(jīng)本較佳實(shí)施例的牛樟芝培 養(yǎng)方法所獲得的牛樟芝酒萃物，第A2組則為于牛樟芝培養(yǎng)過程中，未以波長為600至700nm 的光源照射獲得的牛樟芝酒萃物。分別秤取0. 2克的該等牛樟芝酒萃物至一螺旋試管中， 加入5暈升甲醇，以超聲波震蕩15分鐘，再以3000轉(zhuǎn)尚心10分鐘后，取5暈升上清液，置 入一干凈試管，再以l〇〇°C水浴加熱至干燥。
[0039] 第1表、本試驗(yàn)各組別所選用的牛樟芝酒萃物
[0040]

【權(quán)利要求】
1. 一種提升樟芝酸C及樟菇酸C含量的牛樟芝培養(yǎng)方法，其特征在于，包含： 提供牛樟樹椴木； 提供牛樟芝菌體，將該牛樟芝菌體接種于該牛樟芝椴木，使每公斤的該牛樟芝椴木含 有干重為0. 162克的菌絲及菌絲球；及 再以波長為600至700nm的光源照射該接種有牛樟芝菌體的牛樟樹椴木，以獲得牛樟 芝子實(shí)體； 其中，該接種有牛樟芝菌體的牛樟樹椴木以該光源每天照射8至12小時(shí)，且連續(xù)照射 30至40天。
2. 如權(quán)利要求1所述的牛樟芝培養(yǎng)方法，其特征在于，該牛樟芝菌體呈液態(tài)，且每公升 的該牛樟芝菌體含有8. 1克干重的菌絲和菌絲球。
3. 如權(quán)利要求1所述的牛樟芝培養(yǎng)方法，其特征在于，該光源的波長為660nm。
4. 如權(quán)利要求1所述的牛樟芝培養(yǎng)方法，其特征在于，該光源來自發(fā)光二極管。
5. 如權(quán)利要求1所述的牛樟芝培養(yǎng)方法，其特征在于，以該光源每天照射該接種有牛 樟芝菌體的牛樟樹椴木的時(shí)間為8小時(shí)。
6. 如權(quán)利要求1所述的牛樟芝培養(yǎng)方法，其特征在于，以該光源連續(xù)照射該接種有牛 樟芝菌體的牛樟樹椴木30天。
7. -種具有高含量樟芝酸C及樟菇酸C的牛樟芝酒萃物的制備方法，其特征在于，包 含： 提供如權(quán)利要求1所述的牛樟芝子實(shí)體；及 于25°C下，利用95%乙醇以超聲波震蕩萃取該牛樟芝子實(shí)體，以獲得一個(gè)牛樟芝酒萃 物。
8. -種牛樟芝酒萃物用于抑制肝腫瘤細(xì)胞生長的用途，其特征在于，將如權(quán)利要求7 所述的牛樟芝酒萃物作為一個(gè)活性成分，應(yīng)用于制備用以治療肝腫瘤的藥物組成分。
9. 一種牛樟芝酒萃物用于抑制肺腫瘤細(xì)胞生長的用途，其特征在于，將如權(quán)利要求7 所述的牛樟芝酒萃物作為一個(gè)活性成分，應(yīng)用于制備用以治療肺腫瘤的藥物組成分。
10. -種牛樟芝酒萃物用于抑制大腸腫瘤生長的用途，其特征在于，將如權(quán)利要求7所 述的牛樟芝酒萃物作為一個(gè)活性成分，應(yīng)用于制備用以治療大腸腫瘤的藥物組成分。
11. 一種牛樟芝酒萃物用于抑制肉瘤生長的用途，其特征在于，將如權(quán)利要求7所述的 牛樟芝酒萃物作為一個(gè)活性成分，應(yīng)用于制備用以治療肉瘤的藥物組成分。
12. -種牛樟芝酒萃物用于抑制乳房腫瘤生長的用途，其特征在于，將如權(quán)利要求7所 述的牛樟芝酒萃物作為一個(gè)活性成分，應(yīng)用于制備用以治療乳房腫瘤的藥物組成分。
【文檔編號】A61P35/00GK104115669SQ201310151562
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2013年4月27日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月27日
【發(fā)明者】祝文定, 洪耀坤, 劉崇喜, 劉怡旻, 陳威丞 申請人:德士通科技股份有限公司