專利名稱：甘珀酸或其鹽在制備治療炎癥性疾病的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
敗血癥或膿毒血癥是一種對(duì)重度感染的全身性的高強(qiáng)度的炎癥反應(yīng)。它與內(nèi)毒素血癥的區(qū)別在于患者血液中不僅有大量的內(nèi)毒素，而且有病源微生物。內(nèi)毒素血癥的動(dòng)物模型一般是通過直接注射細(xì)菌內(nèi)毒素來形成，由于這個(gè)模型并不引起動(dòng)物感染，因此不能有效復(fù)制敗血癥的各種體征而不被認(rèn)為是理想的敗血癥模型。所以，目前最常用的并被廣泛接受的敗血癥或膿毒血癥動(dòng)物模型是通過結(jié)扎闌尾并造成穿孔而引起嚴(yán)重腹腔感染來建立。敗血癥或膿毒血癥至今仍是醫(yī)院內(nèi)重癥病房病人的主要致死原因。例如:敗血癥在臺(tái)灣每年致死約1000人.在美國(guó)有750，000人患敗血癥，其中20%的敗血癥病人死亡。在中國(guó)醫(yī)院內(nèi)感染的患者中敗血癥發(fā)病率聞達(dá)10%左右。目如敗血癥或胺毒血癥的治療方法主要是支持性的，并且經(jīng)常無效。因此，繼續(xù)尋找有效的治療辦法十分必要。數(shù)個(gè)世紀(jì)以來，甘草在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中被用于治療類似胃潰瘍，肝炎和支氣管炎的炎癥性疾病。甘草的抗炎作用歸功于其主要成分甘草酸。有證據(jù)表明甘草酸在流感，肝炎，毒血癥，肺部感染和腸炎的動(dòng)物模型中有益。用琥珀酸替代甘草酸中的葡糖醛酸產(chǎn)生新的分子稱為甘珀酸(carbenoxolone，CBX)。甘珀酸鹽是一種用于治療食道潰瘍和炎癥的處方藥。甘珀酸與甘草酸的生物效應(yīng)有所不同。比如，甘草酸不能阻斷縫隙連接通道，對(duì)缺血?jiǎng)游餂]有保護(hù)作用，而甘珀酸可以有效地抑制縫隙連接通道并保護(hù)新生鼠腦部缺血損傷。而到目前為止，還沒有報(bào)道甘珀酸(鹽)是否對(duì)患致死性的敗血癥的動(dòng)物有保護(hù)作用
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種已知化合物一甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的藥物中的新用途。本發(fā)明的第一方面提供了一種甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途，其用于制備治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的藥物。在另一優(yōu)選例中，所述全身性的感染或全身性的炎癥性疾病針對(duì)選自下組的疾病或癥狀:敗血癥、膿毒血癥、由細(xì)菌或細(xì)菌成分引起的炎癥性疾病。在另一優(yōu)選例中，所述全身性的感染或全身性的炎癥性疾病為敗血癥和/或膿毒血癥。在另一優(yōu)選例中，所述藥物還用于抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性。在另一優(yōu)選例中，所述藥物為組合物。在另一優(yōu)選例中，所述組合物中甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的含量為0.001 -99.9wt%,按組合物的總重量計(jì)。
在另一優(yōu)選例中，所述組合物中甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的含量?jī)?yōu)選為
0.01 — 95wt%,更優(yōu)選0.1 — 90wt%,按組合物的總重量計(jì)。在另一優(yōu)選例中，所述甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽是天然分離的或化學(xué)合成的。在另一優(yōu)選例中，在使用所述藥物之前、同時(shí)或之后，配合使用其他治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的活性物質(zhì)。在另一優(yōu)選例中，所述藥物的施用對(duì)象為哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人類。在另一優(yōu)選例中，所述藥物的劑型選自:口服劑型、注射劑或凍干劑。在另一優(yōu)選例中，所述藥物的劑型為注射劑。在另一優(yōu)選例中，注射給藥方式包括:靜脈注射，肌肉注射，皮下注射，腔內(nèi)注射。在另一優(yōu)選例中，所述藥物包括:(i)甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽；(ii)藥學(xué)上可接受的載體。(iii)任選的一種或多種其他治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的活性物質(zhì)。在另一優(yōu)選·例中，所述活性物質(zhì)選自下組的一種或多種:抗生素、抑制感染的藥物、抑制炎癥反應(yīng)的藥物。在另一優(yōu)選例中，所述的抑制感染的藥物是激素類藥物。在另一優(yōu)選例中，所述的抑制炎癥反應(yīng)的藥物是激素類藥物。本發(fā)明的第二方面提供了另一種甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途，其用于制備(a)抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的抑制劑；和/或(b)治療由雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶介導(dǎo)的疾病的藥物。在另一優(yōu)選例中，所述抑制劑或藥物還用于治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病。本發(fā)明的第三方面提供了一種治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的方法，所述方法包括步驟:給予需要的對(duì)象施用安全有效量的甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽。應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。


圖1顯示了甘珀酸鈉的施用量分別為1.2和3.0毫克/公斤體重時(shí)敗血癥動(dòng)物的
存活率。圖2顯示了甘珀酸鈉的施用量為6.0毫克/公斤體重時(shí)敗血癥動(dòng)物的存活率。圖3顯示了細(xì)菌脂多糖對(duì)巨噬細(xì)胞內(nèi)雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的表達(dá)和磷酸化的刺激作用。
具體實(shí)施方式
發(fā)明人經(jīng)過廣泛深入的研究，意外地發(fā)現(xiàn)已知化合物甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽對(duì)全身性的感染或全身性的炎癥性疾病，特別是對(duì)敗血癥和膿毒血癥具有明顯的治療作用，且?guī)缀鯖]有毒副作用，可安全有效地治愈上述疾病，由此發(fā)明人開發(fā)了可用于制備治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病特別是敗血癥和膿毒血癥的藥物。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽對(duì)全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的治療活性及應(yīng)用本發(fā)明提供了甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽在治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病，特別是在治療敗血癥和膿毒血癥中的新用途，本發(fā)明中甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，或者含有此類化合物作為活性成分的組合物，能有效地起到治療敗血癥和膿毒血癥的效果。不限于理論，本發(fā)明甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽可通過如下機(jī)理治療敗血癥和膿毒血癥:通過抑制細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導(dǎo)的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性。細(xì)菌內(nèi)毒素引起的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性增加是重度炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，細(xì)菌脂多糖可以刺激炎癥細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)內(nèi)雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的表達(dá)(PKR)和磷酸化(P-PKR)，甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽可以抑制由細(xì)菌脂多糖激發(fā)的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的表達(dá)和磷酸化，從而抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性。因此，甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及含有甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的組合物可用于制備抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的抑制劑或治療由雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶介導(dǎo)的疾病的藥物。此外也可以用于制備治療敗血癥和膿毒血癥的藥物，以有 效治療目前支持性治療方法所無法治愈的敗血癥和膿毒血癥。藥物及施用方法本發(fā)明所述的藥物可以是組合物(藥品)，其含有有效量的甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽，藥學(xué)上可接受的載體或賦性劑，以及任選的其他治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的活性物質(zhì)。如本文所用，術(shù)語“含有”或“包括”包括了“包含”、“基本上由……構(gòu)成”、和“由……構(gòu)成”。如本文所用，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”的成分是適用于人和/或動(dòng)物而無過度不良副反應(yīng)(如毒性、刺激和變態(tài)反應(yīng))的，即有合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比的物質(zhì)。如本文所用，術(shù)語“有效量”是指可對(duì)人和/或動(dòng)物產(chǎn)生功能或活性的且可被人和/或動(dòng)物所接受的量。如本文所用，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的載體”指用于治療劑給藥的載體，包括各種賦形劑和稀釋劑。該術(shù)語指這樣一些藥劑載體:它們本身并不是必要的活性成分，且施用后沒有過分的毒性。合適的載體是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的。在《雷明頓藥物科學(xué)》(Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Pub.C0.,N.J.1991)中可找到關(guān)于藥學(xué)上可接受的賦形劑的充分討論。本文所述的甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽可以經(jīng)天然分離得到或通過化學(xué)合成得到。
本發(fā)明的組合物中，甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的有效成分占組合物總重量的
0.001-99.9wt% ;優(yōu)選為組合物總重量的0.01-95wt%，較優(yōu)選為0.l_90wt%，余量為藥學(xué)上可接受的載體以及其它添加劑等物質(zhì)。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方式中，所述藥物除可以是適宜口服給藥的各種劑型(例如包括片劑、膠囊、丸劑等)夕卜，還可以是各種外用給藥制劑或其它胃腸道外給藥制劑，如注射劑。本發(fā)明的藥物還可以做成凍干制劑。在使用前可對(duì)其進(jìn)行稀釋，按稀釋物的總重量計(jì)，甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的含量為0.01-99.9%。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選例中，每天一次或多次施用本發(fā)明的藥物，例如1、2、3、4、5或6次。其中給藥途徑包括但并不限于:口服給藥，注射給藥，腔內(nèi)給藥，透皮給藥；優(yōu)選的注射給藥包括:靜脈注射,肌肉注射,皮下注射,腔內(nèi)注射。在施用本發(fā)明的藥物時(shí)，具體劑量還應(yīng)考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是在熟練醫(yī)師技能范圍之內(nèi)的。甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的安全有效量通常至少約
0.5mg/千克體重/天，而且在大多數(shù)情況下不超過約30毫克/千克體重/天。較佳地的劑量是約2-10mg/千克體重/天。在使用本發(fā)明的藥物之前、同時(shí)或之后，還可以配合使用其他治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的活性物質(zhì)。只要能達(dá)到治療的目的，其他活性物質(zhì)可選自常用的治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的抗生素、抑制感染的藥物或抑制炎癥反應(yīng)的藥物。其中，抑制感染的藥物為激素類藥物。抑制炎癥反應(yīng)的藥物為激素類藥物。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)包括:(i)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)甘珀`酸或其藥學(xué)上可接受的鹽能有效治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病，特別是治療敗血癥和膿毒血癥，從而為敗血癥和膿毒血癥的治療提供了新的途徑。(ii)本發(fā)明提供了含有甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽作為有效成分的組合物，該組合物對(duì)于治療敗血癥和膿毒血癥非常有效，能治愈目前支持性治療方法所無法治愈的敗血癥和膿毒血癥。(iii)本發(fā)明運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)方法，揭示了甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽治療敗血癥和膿毒血癥的機(jī)理:通過抑制由細(xì)菌脂多糖激發(fā)的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的表達(dá)和磷酸化，從而抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性，從而有效治療敗血癥和
膿毒血癥。本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本案說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個(gè)特征，可以任何被提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實(shí)施方法與材料僅作示范之用。實(shí)施例1甘珀酸鈉劑量依賴性的提高患敗血癥小鼠的存活率試劑:甘珀酸鈉購自Sigma-Aldrich公司(甘珀酸鈉商品號(hào):C4790)。Balb/C小鼠敗血癥模型:根據(jù)闌尾被結(jié)扎并穿孔(cecal ligation andpuncture, CLP)方法來建立，建立方法詳見文獻(xiàn) J.Vis.Exp.(62)，e3926, do1: 10.3791/3926(2012)。動(dòng)物存活時(shí)間從手術(shù)完成開始計(jì)算。給藥方法:將甘珀酸鈉溶于生理鹽水，并按以下所描述的劑量通過腹腔注射。第一次給藥是CLP后24小時(shí)。然后每隔24小時(shí)給藥一次?？偣?次。劑量分別是每公斤體重
1.2、3.0、和6.0暈克。容積是0.2暈升。對(duì)照組只注射相同容積的生理鹽水。圖1和圖2為不同的實(shí)驗(yàn)組。圖1顯示1.2和3.0毫克/公斤體重的甘珀酸鈉分別將敗血癥動(dòng)物在第八天的存活率從21%提高到50%和57%。圖2顯示6.0毫克/公斤體重的甘珀酸鈉將敗血癥動(dòng)物的存活率從42%提高到85%。這些結(jié)果表明甘珀酸鈉可以治愈患嚴(yán)重?cái)⊙Y小鼠。實(shí)施例2甘珀酸鈉抑制細(xì)菌內(nèi)毒素引起的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性小鼠腹腔巨噬細(xì)胞收集和培養(yǎng)的方法參照以下文獻(xiàn):((a)Biochemical Pharmacology,81,9, 1152-1163, (b)Nature488, 670-674。(c)PLoSOne.2011Feb8; 6 (2): e l6945.do1: 10.1371/journal, pone.0016945。(d) J.Vis.Exp.(62), e3926，do1:10.3791/3926(2012))。對(duì)細(xì)胞的干預(yù)是在杜爾伯科極限必需培養(yǎng)基中進(jìn)行并持續(xù)16小時(shí)。細(xì)菌脂多糖的濃度是0.5微克/毫升(細(xì)菌脂多糖商品號(hào):L2630，Sigma-Aldrich, U.S.A.)。甘珀酸鈉的濃度是10微摩。細(xì)胞內(nèi)雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的表達(dá)和磷酸化是通過蛋白印跡法來確定。雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的總量是用一種抗雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的抗體(商品名:鼠抗鼠蛋白激酶R單克隆抗體。商品號(hào):SC-6282，生產(chǎn)商:SantaCruz Biotechnology)來檢測(cè)。磷酸化的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶是用一種抗磷酸化的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的抗體(商品名:兔抗人磷酸化的蛋白激酶R抗體。商品號(hào):07-886。生產(chǎn)商:Millipore，U.S.A.)來檢測(cè)。圖3顯示細(xì)菌脂多糖可以刺激巨噬細(xì)胞內(nèi)雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的表達(dá)(PKR)和磷酸化(P-PKR)。而甘珀酸鈉可以顯著抑制由細(xì)菌脂多糖激發(fā)的雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的表達(dá)和磷酸化。這些結(jié)果表明甘珀酸可以抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性。在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
權(quán)利要求
1.一種甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途，其特征在于，用于制備治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的藥物。
2.如權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述全身性的感染或全身性的炎癥性疾病針對(duì)選自下組的疾病或癥狀敗血癥、膿毒血癥、由細(xì)菌或細(xì)菌成分引起的炎癥性疾病。
3.如權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述藥物還用于抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的活性。
4.如權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述藥物為組合物。
5.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述組合物中甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的含量為O. OOl — 99. 9wt %，按組合物的總重量計(jì)。
6.如權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述藥物的劑型選自口服劑型、注射劑或凍干劑。
7.如權(quán)利要求I所述的用途，其特征在于，所述藥物包括 (i)甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽； ( )藥學(xué)上可接受的載體； (iii)任選的一種或多種其他治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病的活性物質(zhì)。
8.如權(quán)利要求7所述的用途，所述活性物質(zhì)選自下組的一種或多種抗生素、抑制感染的藥物、抑制炎癥反應(yīng)的藥物。
9.一種甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途，其特征在于，用于制備 (a)抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的抑制劑；和/或 (b)治療由雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶介導(dǎo)的疾病的藥物。
10.如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于，所述抑制劑或藥物還用于治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及甘珀酸或其鹽在制備治療炎癥性疾病的藥物中的應(yīng)用。具體地，公開了甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病，尤其是敗血癥和膿毒血癥的藥物中的新用途。此外，本發(fā)明還公開了甘珀酸或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備抑制雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶的抑制劑和/或治療由雙鏈核糖核酸依賴的蛋白質(zhì)激酶介導(dǎo)的疾病的藥物中的用途。本發(fā)明的方法和藥物可有效地治療全身性的感染或全身性的炎癥性疾病，特別敗血癥和膿毒血癥，具有廣泛的臨床應(yīng)用和市場(chǎng)開發(fā)前景。
文檔編號(hào)A61P31/04GK103251627SQ20131017346
公開日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2013年5月10日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月10日
發(fā)明者李偉, 王海潮, 田文志 申請(qǐng)人:李偉, 王海潮, 田文志