一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法，屬于中藥微生物發(fā)酵領域。該方法將中藥人參、黃芪粉碎，將人參和黃芪按照質(zhì)量比（1～9）：（1～9）混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻浸泡，調(diào)節(jié)含水量50%～65%，裝入培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中滅菌；將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的靈芝菌種分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于24～30℃避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。本發(fā)明的發(fā)酵方法得到的參芪芝藥性菌質(zhì)，抗氧化活性高于原中藥材，可以用現(xiàn)有的中藥制備技術(shù)和工藝方法制成任何固體劑型，包括片劑、散劑等。
【專利說明】一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明屬于中藥微生物發(fā)酵領域，具體涉及一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法。
【背景技術(shù)】
[0002]人參、黃芪均是臨床治療中常用的補氣藥。人參味甘微苦而性微溫，善補五臟之氣，補氣而兼能養(yǎng)陰，守而不走；黃苗味甘性溫，善走肌表，補氣兼能扶陽，走而不守。二藥配對，具有強大的補氣助陽作用，補元氣生精血，陰陽兼顧，一切氣虛不足之癥均可用之。靈芝自古又稱仙草，按本草綱目記載:“靈芝性平，味苦，無毒，主胸中結(jié)，益心氣，補中，增智慧，不忘，久服輕身不老，延年神仙?！爆F(xiàn)代藥理學證明，靈芝發(fā)酵菌絲體具有與靈芝子實體相同的藥理學功效。[0003]中國專利201210115166.9公開了一種靈芝發(fā)酵人參的方法及其藥性菌質(zhì)在治療肺癌中的應用，證實了所得藥性菌質(zhì)較原中藥在抑制肺癌方面具有更高的活性。但是，目前尚未有任何文獻公開以靈芝為發(fā)酵菌種，發(fā)酵人參、黃芪2種中藥組合的復配型發(fā)酵基質(zhì)的雙向固體發(fā)酵工藝及其及其藥性菌質(zhì)抗氧化方面的應用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是為了提供一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法，該方法得到的參芪芝藥性菌質(zhì)具有較高的生物活性。
[0005]本發(fā)明提供一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法，該方法包括:將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，將人參和黃芪按照質(zhì)量比(I~9): (I~9)混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻浸泡，調(diào)節(jié)含水量50%~65%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中115~121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的靈芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌土夾，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5 ±夾，封口，于24~30°C避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0006]優(yōu)選的是，所述的人參和黃芪質(zhì)量比(I~3): (I~5)。
[0007]優(yōu)選的是，所述的靈芝菌種包括寒芝和赤芝。
[0008]本發(fā)明的有益效果
[0009]本發(fā)明提供一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法，該方法利用雙向固體發(fā)酵技術(shù)將靈芝接種在人參、黃芪兩種中藥組成的復合基質(zhì)上，靈芝發(fā)酵產(chǎn)生菌絲體及代謝產(chǎn)物的同時，產(chǎn)生的酶可催化人參、黃芪的化學成分發(fā)生轉(zhuǎn)化，提高或降低中藥化學成分的含量，從而將三味具有增強免疫、調(diào)節(jié)機體代謝、延緩衰老的傳統(tǒng)藥材有機配伍，平衡藥理藥性，協(xié)調(diào)起效，提升原藥材的生物活性。
[0010]本發(fā)明的發(fā)酵方法得到的參芪芝藥性菌質(zhì)，抗氧化活性高于原中藥材，可以用現(xiàn)有的中藥制備技術(shù)和工藝方法制成任何固體劑型，包括片劑、散劑等?！揪唧w實施方式】
[0011]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進一步詳細的說明。
[0012]實施例1
[0013]將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比1:1混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達60%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中121°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于26°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0014]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于35mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于20mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.35mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于75mg。
[0015]實施例2
[0016]將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比1: 2混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達60%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中121°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于25°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0017]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于25mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.25mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于30mg。
[0018]實施例3
[0019]將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比1: 3混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達65%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中115°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于27°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0020]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于85mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.30mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于20mg。
[0021]實施例4
[0022]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比2:1混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達55%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中115°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于30°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0023]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于15mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.25mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于65mg。
[0024]實施例5
[0025]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比3:1混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達50%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于24°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0026]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.65mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于55mg。
[0027]實施例6[0028]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比5:1混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達50%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于28°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0029]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.45mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于50mg。
[0030]實施例7
[0031]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比1:1混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達60%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于28°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0032]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.20mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于40mg。
[0033]實施例8
[0034]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比1:2混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達60%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中115°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于26°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。[0035]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.20mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于45mg。
[0036]實施例9
[0037] 將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比1:3混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達65%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于25°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0038]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于65mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.25mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于20mg。
[0039]實施例10
[0040]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質(zhì)量比1:5混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻充分浸泡，調(diào)節(jié)含水量達65%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5塊，封口，于30°C條件下避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
[0041]將發(fā)酵得到Ig參芪芝藥性菌質(zhì)生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質(zhì)菌絲體干重計不低于70mg, Ig藥性菌質(zhì)總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質(zhì)總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.35mg, Ig藥性菌質(zhì)總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于15mg。
[0042]以上實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想。應當指出，對于本【技術(shù)領域】的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對本發(fā)明進行若干改進和修飾，這些改進和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護范圍內(nèi)。
[0043]對所公開的實施例的上述說明，使本領域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本發(fā)明。對這些實施例的多種修改對本領域的專業(yè)技術(shù)人員來說將是顯而易見的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，在其它實施例中實現(xiàn)。因此，本發(fā)明將不會被限制于本文所示的這些實施例，而是要符合與本文所公開的原理和新穎特點相一致的最寬的范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法，其特征在于，該方法包括:將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，將人參和黃芪按照質(zhì)量比(I~9): (I~9)混合，配制發(fā)酵基質(zhì)，加蒸餾水混勻浸泡，調(diào)節(jié)含水量50%~65%，裝入250ml培養(yǎng)瓶中，放入高壓滅菌鍋中115~121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養(yǎng)基中的靈芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌土夾，分別接入培養(yǎng)瓶中，每瓶接種5 ±夾，封口，于24~30°C避光培養(yǎng)，待菌絲體長滿整瓶時，終止發(fā)酵，收集發(fā)酵產(chǎn)物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法，其特征在于，所述的人參和黃芪質(zhì)量比(1~3):(1~5)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種參芪芝藥性菌質(zhì)雙向固體發(fā)酵方法，其特征在于，所述的靈芝菌 種包括寒芝和赤芝。
【文檔編號】A61K36/481GK103908489SQ201410086789
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年3月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月11日
【發(fā)明者】宋鳳瑞, 蘇玲, 陳維佳, 劉舒, 鄭重, 劉志強 申請人:中國科學院長春應用化學研究所