一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種復(fù)合酶提取中藥材中三七總皂苷的方法，屬中藥領(lǐng)域。特別涉及一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，本發(fā)明采用鮮三七為提取原料，經(jīng)過粉碎制粒，酶解處理，合并濾液濃縮處理，醇沉處理，洗脫處理和脫色處理從而進行三七總皂苷的提取，將β-淀粉酶引入酶提取鮮三七中皂苷成分的新工藝中，以鮮三七為原料，縮短傳統(tǒng)生產(chǎn)周期，提高三七總皂苷的質(zhì)量和提取率，本發(fā)明有利于云南三七的市場調(diào)節(jié)、控制能力，實現(xiàn)對鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟效益增長，從而促進三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
【專利說明】一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法
[0001]【技術(shù)領(lǐng)域】:
本發(fā)明涉及一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，屬中藥領(lǐng)域。
[0002]【背景技術(shù)】:
三七為五加科人參屬植物，主產(chǎn)于云南，始載于本草綱目，為我國傳統(tǒng)名貴中藥材，具有活血化瘀，消腫定痛，止血化瘀等功效，三七不同生長部位含有二十多種皂苷成分，其主要活性成分為三七總皂苷，三七總皂苷具有增加冠脈血流量，保護腦組織，擴血管和降壓等作用。
[0003]目前的三七總皂苷提取工藝主要有水煎醇沉法、乙醇回流法和滲漉法。其中水煎醇沉法在水煎煮過程中因三七藥材含有大量的淀粉和多糖容易糊化；醇沉后由于沉淀的吸附作用皂苷損失較大，提取率較低，且產(chǎn)品組分的含量不太穩(wěn)定，多用于食品的開發(fā)；滲漉法提取率較高，操作簡單，提取液所含雜質(zhì)少，但是溶劑消耗過大，主要用于藥品；乙醇回流法方法簡便，工藝條件易于控制，但提取率較低，并且這幾種提取方法均要求原料選用干燥的三七根莖(剪口)、加工邊角料進行提取，明顯使提取周期延長。
[0004]而新興的酶解法和上述方法如水煎醇沉法相結(jié)合，從而提取鮮三七中的三七總皂苷，有效的縮短了加工周期，增加三七皂苷的產(chǎn)率，提高提取效率，然而在傳統(tǒng)的酶解法中多采用纖維素酶或果膠酶進行酶解處理，傳統(tǒng)的酶解法中纖維素酶或果膠酶，無法有效解決煎醇過程中的糊化問題，卻很少采用β -淀粉酶或草酸青霉胞外糖苷酶進行混合酶解處理，其中β_淀粉酶常用于用作果汁加工中的淀粉分解和提高過濾速度，而草酸青霉胞外糖苷酶常用于糖苷化合物的轉(zhuǎn)化。
[0005]同時，現(xiàn)在多采用干三七為原料提取三七皂苷，周期長，成本高，不利于相關(guān)產(chǎn)業(yè)的集約化，也不利于云南三七的市場調(diào)節(jié)、控制能力，對鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟效益增長，對促進三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展產(chǎn)生不利影響。
[0006]
【發(fā)明內(nèi)容】
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本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有提取方法的不足，提供一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，將β_淀粉酶進行酶引入提取鮮三七中皂苷成分的新工藝中，以鮮三七為原料，縮短傳統(tǒng)生產(chǎn)周期，提高三七總皂苷的質(zhì)量和提取率，本方法有利于云南三七的市場調(diào)節(jié)、控制能力，實現(xiàn)對鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟效益增長，促進三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。
[0007]一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，包括以下步驟:
第一步:粉碎制粒，將原料鮮三七材料進行凈選，清洗，陰涼處晾干表面水份后用粉碎機破碎成10-20目的鮮顆粒；
第二步:酶解處理，將粉碎好的鮮三七10-20目鮮顆粒樣品置提取溶器中，加入復(fù)合酶進行酶解處理2-3h，復(fù)合酶由纖維素酶(0.05ml-0.2ml/200g),果膠酶(0.lml-0.3ml/200g)，β -淀粉酶(0.lml-0.2ml/200g)和草酸青霉胞外糖苷酶(0.05ml_0.15ml /200g)構(gòu)成，再加入6-10倍量的50%-90%乙醇進行回流提取，過濾，收集濾液,備用；
第三步:合并濾液，濃縮，真空0.075-0.08帕減壓回收乙醇，溫度70°C，得鮮三七提取
液；第四步:醇沉處理，將鮮三七提取用絮凝劑和醇沉乙醇來進行醇沉處理，醇沉?xí)r間為12-36h，醇沉乙醇濃度為60%-90%，醇沉次數(shù)為1-3次，醇沉濃度與樣液比例為1:1_1: 3，絮凝劑濃度為4%-7% ；
第五步:洗脫處理，將醇沉處理好的鮮三七提取液通過DlOl大孔吸附樹脂柱，樹脂用量為原料的1.2-1.8倍，先用蒸餾水洗脫，后用60%-90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，備用；第六步:脫色處理，將乙醇洗脫液回收乙醇，濃縮至干，水溶解后通過陰離子交換樹脂D-941柱子來脫色，用65%-80%乙醇洗脫，收集流出液，濃縮至干，即得三七總皂苷。
[0008]進一步，在第一步的粉碎過程中，鮮三七材料破碎成10目的鮮顆粒為最佳。
[0009]進一步，在第二步酶解處理中，復(fù)合酶的最佳配比為:纖維素酶(0.1ml /200g)，果膠酶 B (0.2ml/200g), β-淀粉酶(0.lml/200g)，草酸青霉胞外糖苷酶(0.05 ml /200g)。
[0010]用鮮三七為原料提取三七皂苷，是拓寬三七加工，促進三七資源的多樣化綜合利用，加強對產(chǎn)業(yè)鏈結(jié)構(gòu)控制的重要方面。相應(yīng)的提取技術(shù)研發(fā)，是具有共性的關(guān)鍵技術(shù)問題。
[0011]本發(fā)明用一種 酶處理提取鮮三七中皂苷，根據(jù)研究結(jié)果，鮮三七的總皂苷含量比干燥三七的含量約高20%，本方法采用鮮三七作為原料進行提取，最大程度地保證了三七總皂苷的完整。
[0012]本發(fā)明與其它三七總皂苷提取工藝的比較:
1、本發(fā)明以鮮三七為原料，提取率不低于相應(yīng)的干三七原料，綜合成本低于以干三七為原料提取三七皂苷，周期短，成本低，適用于工業(yè)化生產(chǎn)，同時，利用開發(fā)以鮮三七為原料提取皂苷的深加工技術(shù)，能使本土企業(yè)充分發(fā)揮利用產(chǎn)地優(yōu)勢，直接介入三七產(chǎn)業(yè)鏈的中游，提高產(chǎn)品附加值，以鮮三七為原料進行產(chǎn)地加工，將有助于相關(guān)產(chǎn)業(yè)的集約化，有助于提高云南三七的市場調(diào)節(jié)、控制能力，對鄉(xiāng)土企業(yè)的技術(shù)提升、經(jīng)濟效益增長，對促進三七產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，具有顯而易見的作用。
[0013]2、利用β_淀粉酶進行處理，將β_淀粉酶引入提取工藝中，提高了三七總皂苷的質(zhì)量和提取率，其他提取方法只能達到12-13%，本方法可使三七總皂苷提取率達到14%以上，鑒于三七總皂苷昂貴的價格，兩個百分點的提高可以帶來巨大的經(jīng)濟效益；同時有效的解決了糊化問題。
[0014]3、兩種吸附柱進行吸附處理，有效提高三七總皂苷的純度，本發(fā)明三個單體(Rl+Rgl+Rbl)含量能達到65%以上，高于現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)(60%以上)。
[0015]4、本發(fā)明操作簡單，有利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制和工業(yè)實施。
[0016]【具體實施方式】:
下面結(jié)合具體實施例，對本發(fā)明做進一步詳細(xì)說明，以方便技術(shù)人員理，但本發(fā)明并不限于這些實施例。
[0017]表1:復(fù)合酶配比正交實驗結(jié)果:
【權(quán)利要求】
1.一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，其特征在于:包括以下步驟: 第一步:粉碎制粒，將原料鮮三七材料進行凈選，清洗，陰涼處晾干表面水份后用粉碎機破碎成10-20目的鮮顆粒； 第二步:酶解處理，將粉碎好的鮮三七10-20目鮮顆粒樣品置提取溶器中，加入復(fù)合酶進行酶解處理2-3h，復(fù)合酶由纖維素酶(0.05ml-0.2ml /200g),果膠酶(0.lml-0.3ml/200g), β-淀粉酶(0.05ml-(X2ml /200g)，草酸青霉胞外糖苷酶(0.05ml_0.15ml /200g)構(gòu)成，再加入6-10倍量的50%-90%乙醇進行回流提取，過濾，收集濾液,備用； 第三步:合并濾液，濃縮，真空0.075-0.08帕減壓回收乙醇，溫度70°C，得鮮三七提取液； 第四步:醇沉處理，將鮮三七提取用絮凝劑和醇沉乙醇來進行醇沉處理，醇沉?xí)r間為12-36h，醇沉乙醇濃度為60%-90%，醇沉次數(shù)為1-3次，醇沉濃度與樣液比例為1:1_1: 3，絮凝劑濃度為4%-7% ； 第五步:洗脫處理，將醇沉處理好的鮮三七提取液通過DlOl大孔吸附樹脂柱，樹脂用量為原料的1.2-1.8倍，先用蒸餾水洗脫，后用60%-90%乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，備用；第六步:脫色處理，將乙醇洗脫液回收乙醇，濃縮至干，水溶解后通過陰離子交換樹脂D-941柱子來脫色，用65%-80%乙醇洗脫，收集流出液，濃縮至干，即得三七總皂苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，其特征在于:第一步將鮮三七材料破碎成10目的鮮顆粒。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種復(fù)合酶提取鮮三七中三七總皂苷的方法，其特征在于:第二步中將粉碎好的鮮三七顆粒樣品置提取溶器中，加入纖維素酶(0.1ml /200g)，果膠酶B (0.2ml/200g)，β-淀粉酶(0.lml/200g)，草酸青霉胞外糖苷酶(0.05 ml /200g)進行酶解處理；再加入6倍量的70%乙醇進行回流提取，提取3次，溫度70°C，過濾，收集濾液，備用。
【文檔編號】A61K36/258GK103933092SQ201410141879
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月10日
【發(fā)明者】周家明, 高明菊, 趙愛, 馬妮, 朱琳 申請人:文山學(xué)院文山三七研究院