一種主動(dòng)靶向阿霉素-兩親性硫酸軟骨素膠束的制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種含有葉酸靶向基團(tuán)的、由硫酸軟骨素的親水集團(tuán)作為親水鏈段、長(zhǎng)鏈脂肪酸作為疏水鏈段的兩親性多糖—葉酸-脂肪酰-硫酸軟骨素的制備方法，及其在阿霉素類(lèi)抗腫瘤藥物制劑方面的應(yīng)用。葉酸-脂肪酰-硫酸軟骨素的平均分子量（ M w）為3,100~53,　000Da，通式如下：其中x為碳原子的個(gè)數(shù)，是10~22的整數(shù)；y為雙鍵的個(gè)數(shù)，為0~6的整數(shù)；n為8~150的整數(shù)； O -烷基取代度為5％~50％；葉酸取代度為0.5-2%。
【專(zhuān)利說(shuō)明】-種主動(dòng)靶向阿霉素-兩親性硫酸軟骨素膠束的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種載有阿霉素的葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束的制備 方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 阿霉素又稱(chēng)多柔比星（doxorubicin)，屬于蒽環(huán)類(lèi)抗腫瘤抗生素，在臨床上已有 四十余年的應(yīng)用歷史。其結(jié)構(gòu)式如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種阿霉素-葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束，其特征在于，葉酸受體靶 向兩親性硫酸軟骨素平均分子量0/W)為3, ΚΚΓ53, OOODa，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
其中X為碳原子的個(gè)數(shù)，是ΚΓ22的整數(shù)；y為雙鍵的個(gè)數(shù)，為(Γ6的整數(shù)；η為8~150 的整數(shù)烷基取代度為5%?50 % ;葉酸取代度為0. 1-5% ; 優(yōu)選的，x=16, y=3 烷基取代度為5%?20% ;葉酸取代度為0. 5-2% ; 上述的阿霉素-葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束，其制備方法如下： 根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩親性硫酸軟骨素衍生物，其特征在于，x=16,y=3 烷基取代 度為5%?20 % ;葉酸取代度為0. 5-2%。
2. 權(quán)利要求1或2所述的一種阿霉素-葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素納米膠束的制 備方法，其特征在于，步驟如下： (1)將分子量為3, 00(T40, OOODa的硫酸軟骨素溶于甲酰胺中，加入二甲基氨基吡啶 (DMP)溶解后，攪拌下滴加脂肪酰氯，2(T70°C攪拌l~8h，透析去除未反應(yīng)的試劑及溶劑，真 空干燥即得微黃色的脂肪酰-硫酸軟骨素固體粉末；其中，硫酸軟骨素、脂肪酰氯、DMAP、甲 酰胺的質(zhì)量比為1:2.5?0.07:1?0.1 :20?10; (2) 葉酸加入DMSO中，滴加3-5滴三乙胺后攪拌使其完全溶解，待用；脂肪酰-硫酸軟 骨素溶于甲酰胺中，加入N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺（DCC)、DMAP溶解后，避光攪拌反應(yīng)lh，將 硫酸軟骨素的羧基活化，滴加葉酸DMSO溶液，20-50°C下避光反應(yīng)24h ;反應(yīng)結(jié)束后，離心除 去1，3_二環(huán)己基脲（D⑶）沉淀，得粘稠橙紅色上清液；取上清乙醇沉淀，離心收集沉淀，無(wú) 水乙醇反復(fù)洗滌沉淀至上清液不在顯黃色為止；透析去除未反應(yīng)的試劑及溶劑，〇. lmol/L 的Na2CO3-NaHCO3 (pH 10)緩沖溶液中避光透析去除未反應(yīng)的葉酸，去離子水中避光透析除 去緩沖溶液，95%乙醇溶液中繼續(xù)透析48h，得沉淀，真空干燥后即得葉酸-脂肪酰-硫酸軟 骨素；其中，脂肪酰-硫酸軟骨素、DMAP、DCC、甲酰胺、葉酸、DMSO的質(zhì)量比為1:1?0. 1:0. 5? 0. 1:20^10:0. Γ〇. 01:10^10 ； (3) 稱(chēng)取阿霉素溶于DMSO中，葉酸-脂肪酰-硫酸軟骨素溶于甲酰胺后，將阿霉素 DMSO 溶液滴入葉酸-脂肪酰-硫酸軟骨素甲酰胺溶液中攪拌均勻，去離子水避光透析，冷凍干 燥，即得阿霉素葉酸-脂肪酰-硫酸軟骨素納米膠束。
3. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1)中，長(zhǎng)鏈脂肪酰氯為、棕 櫚酰氯、棕櫚一烯酰氯、十七烷酰氯、十七碳一烯酰氯、硬脂酰氯、油酰氯、亞油酰氯、花生酰 氯、花生一烯酰氯、花生二烯酰氯中的一種或幾種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1)中，硫酸軟骨素為豬硫 酸軟骨素、牛硫酸軟骨素、鯊魚(yú)硫酸軟骨素、雞硫酸軟骨素、鴨硫酸軟骨素中的一種或幾種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2)中，后處理的具體方法 是： 離心轉(zhuǎn)速為5000-10000轉(zhuǎn)/分鐘，時(shí)間為20-40min ; 透析的具體方法是：〇. lmol/L的Na2CO3-NaHCO3 (pH 10)緩沖溶液中避光透析48h去除 未反應(yīng)的葉酸，去離子水中避光透析48h除去緩沖溶液，95%乙醇透析得沉淀，95%乙醇、甲 醇或丙酮洗滌2次，45°C下真空干燥l(T20h。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1)中，脂肪酰氯與硫酸軟 骨素的質(zhì)量比為2. 7、. 07 :1，硫酸軟骨素的分子量為3, 000-40, OOODa。
7. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（2)中，葉酸與硫酸軟骨素 的質(zhì)量比為〇. 1?〇. 01 :1。
8. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1) (2) (3)中，所述透析 袋的截留分子量為l〇〇(Tl〇〇〇〇,透析是指利用該透析袋對(duì)去離子水透析48h。
9. 權(quán)利要求1或2所述的一種葉酸受體靶向兩親性硫酸軟骨素衍生物作為藥物載體的 應(yīng)用。
10. 權(quán)利要求1或2所述的一種阿霉素兩親性硫酸軟骨素納米膠束在腫瘤疾病治療物 中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K47/36GK104368005SQ201410584680
【公開(kāi)日】2015年2月25日 申請(qǐng)日期:2014年10月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月28日
【發(fā)明者】肖玉良, 武夏明, 韓俊芬 申請(qǐng)人:泰山醫(yī)學(xué)院