用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，選擇plastic plus微載體作為細(xì)胞貼附生長的微載體；包括以下步驟：首先，稱量plastic plus微載體15-45g/L；其次，每次用pH為7.4的2L PBS液清洗3遍；然后，加入2L PBS液浸泡微載體3h-4h；最后，121℃蒸汽滅菌三十分鐘，冷卻靜置。本發(fā)明選用plastic plus微載體作為細(xì)胞生長的載體，該載體不含動物源的蛋白，滿足生物安全的要求，避免在細(xì)胞培養(yǎng)過程中引入不必要的蛋白源，提高了微載體的使用性能；本發(fā)明通過PSB對微載體進行清潔，然后在進行121℃蒸汽滅菌，能很好的將微載體清潔、滅菌完全，避免了微載體為后續(xù)的工藝引入不必要的病菌。
【專利說明】用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及疫苗制備領(lǐng)域，具體地，涉及一種用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]傳統(tǒng)的制備流感病毒疫苗的方法是使用雞胚制備的，國內(nèi)使用雞胚培養(yǎng)疫苗已經(jīng)有50多年的歷史。目前使用的流感疫苗主要是雞胚制備的滅活的流感三價裂解疫苗，包括甲型流感病毒株、陽吧和乙型流感病毒株以及大流感疫苗。病苗株的主要來源是由1?)根據(jù)每年全球流感病毒的變化規(guī)律推薦的用于下一年度流感疫苗生產(chǎn)用流感病毒流行株的表面抗原來決定的，將1?)推薦的流行野毒株與雞胚高產(chǎn)株雙重感染產(chǎn)生重配或反遺傳學(xué)重配，得到新的疫苗株，在雞胚上具有高產(chǎn)的特性，但雞胚存在有潛在污染的可能，以及潛在的雞胚蛋白引起的變態(tài)反應(yīng)，而且培養(yǎng)周期過長，不易于控制產(chǎn)量。不利于用于應(yīng)對大規(guī)模的流感爆發(fā)；該傳統(tǒng)工藝勞動強度大，耗時長、效率低，生產(chǎn)成本高；容易被環(huán)境污染；雞胚不同批次間的差異大；難以擴大生產(chǎn)；雞胚自身被細(xì)菌或其它病毒污染而致生產(chǎn)的疫苗存在質(zhì)量及安全隱患；生產(chǎn)疫苗后的廢胚數(shù)量多，無害化處理難度大，涉及生物安全和公共衛(wèi)生問題。故后來使用細(xì)胞法制備流感疫苗，細(xì)胞法制備方法中用微載體作為細(xì)胞的載體，微載體在使用前須經(jīng)過清潔。滅菌，傳統(tǒng)的微載體的清潔、滅菌的方法多達(dá)到的效果不是很好。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供一種用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，克服現(xiàn)有微載體的清潔、滅菌的方法滅菌清潔的效果不好的問題，提高微載體的清潔度，避免對后續(xù)的接毒工藝帶來雜質(zhì)病菌。
[0004]本發(fā)明還提供一種微載體的應(yīng)用。
[0005]本發(fā)明解決上述問題所采用的技術(shù)方案是:用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，選擇1)1118微載體作為細(xì)胞貼附生長的微載體。
[0006]選用微載體作為細(xì)胞生長的載體，該載體不含動物源的蛋白，滿足生物安全的要求，避免在細(xì)胞培養(yǎng)過程中引入不必要的蛋白源。
[0007]用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，包括以下步驟:
1)稱量￠1118微載體 15-458凡；
2)每次用邱為7.4的21 ？88液清洗3遍；
3)加入21？88液浸泡微載體36-41??；
4)1211:蒸汽滅菌三十分鐘，冷卻靜置。
[0008]？88為一種常用的緩沖溶液，能夠徹底的清潔？1%丨化？1118微載體，且不會在清潔？1118微載體的過程中引入不必要的病菌和雜質(zhì)；并且，？38的邱為7.4，基本呈中性，使得清潔完全后的1)1118微載體上不會殘留有多余的偏酸或是偏見的液體，若是用于培養(yǎng)細(xì)胞的？1%1化？1118微載體上殘留有偏酸或是偏見的液體，會對其所培養(yǎng)的細(xì)胞的生產(chǎn)產(chǎn)生影響，嚴(yán)重的會導(dǎo)致細(xì)胞脫水死亡；1211蒸汽滅菌為濕法滅菌，不僅能很好的將附著在微載體上的細(xì)菌清除，且具有較快的速度和效果。
[0009]微載體的應(yīng)用，將如權(quán)利要求2所述制備的微載體應(yīng)用到761*0細(xì)胞在生物反應(yīng)器中的微載體懸浮培養(yǎng)。
[0010]綜上，本發(fā)明的有益效果是:
1、本發(fā)明選用微載體作為細(xì)胞生長的載體，該載體不含動物源的蛋白，滿足生物安全的要求，避免在細(xì)胞培養(yǎng)過程中引入不必要的蛋白源，提高了微載體的使用性能。
[0011]2、本發(fā)明通過？38對微載體進行清潔，然后在進行12IX:蒸汽滅菌，能很好的將微載體清潔、滅菌完全，避免了微載體為后續(xù)的工藝引入不必要的病菌。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]圖1是細(xì)胞法制備流感疫苗的工藝流程圖。

【具體實施方式】
[0013]下面結(jié)合實施例及附圖，對發(fā)明作進一步地的詳細(xì)說明，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0014]實施例:
如圖1所示，用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，選擇￠1118微載體作為細(xì)胞貼附生長的微載體。
[0015]用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，包括以下步驟:
1)稱量￠1118微載體 15-458凡；
2)每次用邱為7.4的21 ？88液清洗3遍；
3)加入21？88液浸泡微載體36-41??；
4)1211:蒸汽滅菌三十分鐘，冷卻靜置。
[0016]如上所述，可較好的實現(xiàn)本發(fā)明。
【權(quán)利要求】
1.用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，其特征在于，選擇plasticplus微載體作為細(xì)胞貼附生長的微載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于制備疫苗工藝的微載體的清潔、滅菌的方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)稱量plastic plus 微載體 15_45g/L ； 2)每次用pH為7.4的2L PBS液清洗3遍； 3)加入2LPBS液浸泡微載體3h-4h ； 4)121°C蒸汽滅菌三十分鐘，冷卻靜置。
3.微載體的應(yīng)用，將如權(quán)利要求2所述制備的微載體應(yīng)用到Ve1細(xì)胞在生物反應(yīng)器中的微載體懸浮培養(yǎng)。
【文檔編號】A61L2/07GK104450604SQ201410685334
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月25日
【發(fā)明者】高鵬, 符曉陽, 左紅, 陶家春 申請人:成都威爾諾生物科技有限公司