背景技術(shù)：

本發(fā)明涉及用于改善伴隨慢性肝炎向肝硬化的發(fā)展而生成的肝纖維化的營(yíng)養(yǎng)功能食品和醫(yī)藥品。其為一種鋅硒配合劑，相比于鋅制劑聚普瑞鋅(polaprezinc)(l-肌肽鋅酸鹽)顯示出優(yōu)勢(shì)性。

慢性肝炎按致病原因可大體分為兩類。一類是由肝炎病毒引起的病毒性慢性肝炎。另一類并未感染肝炎病毒，稱之為慢性肝功能障礙。病毒性慢性肝炎分為乙型慢性肝炎和丙型慢性肝炎等。非病毒性慢性肝炎分為酒精性肝炎，自身免疫性肝炎，藥物性肝炎，脂肪肝，中毒性肝炎等。

這些慢性肝炎繼續(xù)發(fā)展就變成肝硬化。其病理觀點(diǎn)為引起肝細(xì)胞的崩壞。在病情不太嚴(yán)重，障礙度還比較低的時(shí)候，可以通過(guò)肝細(xì)胞的再生進(jìn)行修復(fù)；但當(dāng)炎癥反應(yīng)長(zhǎng)期持續(xù)，反復(fù)發(fā)作，會(huì)使肝內(nèi)纖維增多變硬，殘存的肝細(xì)胞強(qiáng)烈再生，新生成的肝細(xì)胞和纖維化及硬化的肝組織相互纏繞，使肝內(nèi)形成結(jié)節(jié)。該結(jié)節(jié)壓迫血管系統(tǒng)，加重肝內(nèi)血液循環(huán)障礙。由此引起肝門靜脈壓升高，肝血流減少等，進(jìn)一步加重肝細(xì)胞障礙，產(chǎn)生惡性循環(huán)。

慢性肝炎在向肝硬化發(fā)展的過(guò)程中，肝細(xì)胞的纖維化亢進(jìn)，形成肝硬化。慢性肝炎和初期的肝硬化是可逆的狀態(tài)，而隨著肝纖維化的進(jìn)展，逐漸演變?yōu)椴豢赡鏍顟B(tài)的肝硬化。因此，抑制進(jìn)行性慢性肝炎并發(fā)產(chǎn)生的肝纖維化的營(yíng)養(yǎng)功能食品及藥品，作為抑制慢性肝炎進(jìn)展為肝硬化的治療藥物是十分重要的。

現(xiàn)有已知的慢性肝炎治療藥物，有以干擾素(interferon)、利巴韋林(ribavirin)、拉米夫定(lamivudine)和特拉匹韋(telaprevir)為代表的抗病毒藥物，以及以膽烷酸(ursodeoxycholicacid)為代表的肝保護(hù)劑等。但它們各自雖然顯示出抗病毒作用、抑制肝細(xì)胞炎癥的作用，但沒(méi)有顯示出改善肝纖維化的作用。

鋅制劑聚普瑞鋅(polaprezinc)(l-肌肽鋅酸鹽)作為胃潰瘍治療藥被廣泛使用。有報(bào)道稱其對(duì)于慢性肝炎的肝纖維化有一定的抑制效果(專利文獻(xiàn)1)，并已經(jīng)作為日本專利第jp4802470號(hào)獲得授權(quán)。

硒是人體中存在的一種微量元素，具有抗氧化作用。有報(bào)道稱，血清中的硒值隨著慢性肝炎向肝硬化、肝癌的推進(jìn)過(guò)程中逐漸減少(非專利文獻(xiàn)1)。除此之外，有研究表明，硒可以抑制由四氯化碳誘發(fā)的試驗(yàn)白鼠的肝纖維化進(jìn)展，但是其改善作用并不明確。在服用硒的試驗(yàn)組中，肝纖維化的標(biāo)志性指標(biāo)：ⅰ型膠原α鏈基因mrna(和組織內(nèi)羥脯氨酸(hydroxyproline)含量具有相關(guān)性)顯現(xiàn)出上升趨勢(shì)。但不能證明其具有改善肝纖維化的作用(非專利文獻(xiàn)2)。

分別有研究報(bào)告認(rèn)為，鋅和硒各自具有一定的抗纖維化作用。但是，并沒(méi)有任何相關(guān)文件表明，將兩者進(jìn)行配比使用后會(huì)產(chǎn)生協(xié)同增效作用。而且現(xiàn)有研究主要是針對(duì)抑制炎癥方面，對(duì)于表示纖維化狀態(tài)的羥脯氨酸含量或i型膠原蛋白基因的值并沒(méi)有提及(非專利論文3)。

都是涉及施用硒所帶來(lái)的肝臟的“抗炎癥作用”，還沒(méi)有關(guān)于“改善”纖維化方面的報(bào)道。

甚至，更有研究認(rèn)為硒和鋅一起使用會(huì)產(chǎn)生拮抗反應(yīng)，即相互抑制作用。從未有人對(duì)硒和鋅的配合劑具有預(yù)防肝功能障礙，特別是對(duì)肝纖維化的藥效進(jìn)行過(guò)研究(非專利文件4)。

近年來(lái)，隨著老齡社會(huì)的發(fā)展，以擁有療養(yǎng)型病床的醫(yī)院為中心，對(duì)患者采用經(jīng)由導(dǎo)管喂食使其攝取營(yíng)養(yǎng)的病例逐漸增加。通過(guò)實(shí)施經(jīng)皮內(nèi)視鏡下胃造瘺術(shù)(以下稱之為peg)，用經(jīng)導(dǎo)管給藥的方式，對(duì)患者的營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行管理。以此類患者為對(duì)象，通過(guò)peg孔向胃內(nèi)給藥聚普瑞鋅(polaprezinc)(l-肌肽鋅酸鹽)后，觀察到血清含鋅值有顯著的上升。另一方面血清含硒值有明顯的下降，大幅度地下降至正常下限以下(非專利文件5)。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：專利第jp4802470號(hào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：ching-chianglin等3人，《selenium、iron、copper、andzinclevelsandcopper-to-zincratiosinserumofpatientsatdifferentstagesofviralhepaticdiseases》,、biologicaltraceelementresearch、(美國(guó))、springerus、2006年1月1日、volume109、issue1、p.15-23

非專利文獻(xiàn)2：mingding等4人，《seleniumsupplementationdecreaseshepaticfibrosisinmiceafterchroniccarbontetrachlorideadministration》、biologicaltraceelementresearch、(美國(guó))、springerus，2010年1月1日，volume133、issue1、p.83-97

非專利文獻(xiàn)3：lai、yurongetal、theprotectiveroleofseandznonliverinjuryinducedbycarbontetrachloride、weishengdulixuezazhi、1995年9(2)、pp.80-83

非專利文獻(xiàn)4：j.chmielnicka等3人，《zinc-seleniuminteractionintherat》、biologicaltraceelementresearch(美國(guó))、humanapress、1988年1月1日、volume15、issue1、p.267-276

非專利文件5：伊藤明彥、《經(jīng)管攝取營(yíng)養(yǎng)和鋅的長(zhǎng)期管理中的問(wèn)題點(diǎn)和對(duì)策》、鋅的營(yíng)養(yǎng)治療，近畿地區(qū)鋅營(yíng)養(yǎng)治療研究會(huì)，2012年3月31日、第2卷，第2號(hào)，p.27-34

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

需要解決的技術(shù)問(wèn)題

因?yàn)槲覀冇^察到由肝炎向肝硬化發(fā)展的過(guò)程中，體內(nèi)鋅硒含量會(huì)隨著肝臟功能惡化而下降，產(chǎn)生顯著的肝纖維化；又因?yàn)榛钚匝跄芷鸬酱龠M(jìn)肝纖維化進(jìn)行的作用；所以我們猜想，將具有抑制肝纖維化作用的鋅和具有抗氧化作用的硒并用，能夠得到更加優(yōu)秀的抗纖維化藥品，因此進(jìn)行了本發(fā)明研究。在本研究中使用的硫代乙酰胺肝功能障礙模型，是重癥非代償性肝硬化模型；肝纖維化高度發(fā)展，改善起來(lái)比從原始狀態(tài)抑制其進(jìn)展更為困難。因此選取其作為重癥肝功能障礙模型進(jìn)行研究。

本發(fā)明的目的是將鋅硒配合劑和作為鋅制劑的聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)相比較，證明并提供了在使用硫代乙酰胺的肝功能障礙模型的肝炎、肝硬化中的肝纖維化改善效果方面具有顯著的優(yōu)勢(shì)性。

本發(fā)明中，與單獨(dú)使用鋅制劑聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)相比，使用鋅硒配合劑顯示出更優(yōu)異的抗纖維化改善作用。鋅和硒被吸收后會(huì)進(jìn)入到肝臟中，均會(huì)反映到肝功能上。在單獨(dú)給藥鋅時(shí)，硒會(huì)根據(jù)給藥量而減少，我們不否認(rèn)其可能對(duì)肝臟中的硒的比例帶來(lái)影響。這是最初的臨床病例報(bào)告，其給出了通過(guò)給藥鋅和硒兩種制劑能夠維持血清中硒的濃度，能夠使肝臟中各個(gè)成分的比例變得有效且靈活的啟示。

解決技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)手段

本發(fā)明者采用硫代乙酰胺造成的肝功能障礙模型探索肝纖維化改善藥物的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)和聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)單獨(dú)使用相比，鋅硒配合劑呈現(xiàn)出更加優(yōu)異的抗纖維化改善效果,從醫(yī)學(xué)和科學(xué)的角度將此配比的意義明確化。

本發(fā)明是通過(guò)鋅硒配合劑來(lái)得到的肝纖維化改善劑，用于慢性肝炎、自身免疫性肝炎、酒精性及非酒精性脂肪性肝炎和肝硬化中的肝纖維化的改善。

此外，本發(fā)明是通過(guò)鋅硒配合劑來(lái)得到的肝纖維化改善劑，用于慢性肝炎、自身免疫性肝炎、酒精性及非酒精性脂肪性肝炎和肝硬化中的肝纖維化的改善，其為至少含有鉻、鎂、鉀及維他命c(diǎn)中的一種以上的肝纖維化改善劑。

發(fā)明的效果

本發(fā)明能夠改善肝炎向肝硬化發(fā)展過(guò)程中產(chǎn)生的肝纖維化，防止其發(fā)展為重癥肝硬化，或治療肝硬化，促進(jìn)肝臟細(xì)胞的再生。

附圖說(shuō)明

圖1是分別服用作為鋅制劑的聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)和本發(fā)明的一種實(shí)施例的鋅硒配合劑后，表示對(duì)肝臟中羥脯胺酸含量產(chǎn)生的作用的圖。

圖2是分別服用作為鋅制劑的聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)和本發(fā)明的一種實(shí)施例的鋅硒配合劑后，表示對(duì)纖維溶解類酶前體prommp-9的表達(dá)產(chǎn)生的作用的圖。

圖3是服用本發(fā)明的一種實(shí)施例的鋅硒配合劑后，表示對(duì)血清中硒含量產(chǎn)生的作用的圖。

圖4是服用本發(fā)明的一種實(shí)施例的鋅硒配合劑后的肝臟組織圖。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的鋅硒配合劑的效果，是在先服用硫代乙酰胺使其致病為肝硬化，在確認(rèn)到肝纖維化后，再服用本發(fā)明的鋅硒配合劑后得到的結(jié)果，這一點(diǎn)極為重要。使得肝臟組織中的羥脯氨酸的含量降低，按組織學(xué)的原理顯著地抑制肝纖維化，可以治療肝炎，肝硬化，抑制其向肝癌發(fā)展。和聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)相比，在臨床上極為有用。

本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)功能食品及醫(yī)藥品，傾向于經(jīng)口服用。劑型優(yōu)選片劑，膠囊劑，顆粒劑，散劑，液劑等。作為肝纖維化改善劑的服用量，和年齡、體重、病狀、服用時(shí)間、服用期限有關(guān)，優(yōu)選每次的服用量為：鋅7.5mg-15mg，硒25μg至50μg，每天口服2-3次。

制造此配合劑可以適當(dāng)采用添加劑，可以適當(dāng)選擇并組合使用如麥芽糖醇、明膠、纖維素、蔗糖酯、阿拉伯樹(shù)膠、普魯蘭多糖、玉米蛋白、還原淀粉糖化物、卵殼鈣等。也可以和其他的礦物質(zhì)如鉻、鎂、鉀、蜂王漿、維生素c等組合使用。

實(shí)施例

列舉以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的說(shuō)明，但并不僅限于該實(shí)施例。

實(shí)施例1

將大鼠每十只分為一組。對(duì)照組以硫代乙酰胺水溶液(300mg/l)作為飲料水，連續(xù)令大鼠服用10周或者20周；試驗(yàn)組以硫代乙酰胺水溶液(300mg/l)作為飲料水，連續(xù)服用20周后，繼續(xù)服用10周聚普瑞鋅200mg/天/kg或繼續(xù)服用10周鋅硒配合劑(zn45mg/天/kg,se150μg/天/kg)。兩者一天所攝取的鋅量相同。

在服用結(jié)束后，殺死對(duì)照組和試驗(yàn)組的大鼠，取出肝臟，使用鹽酸處理后的氯胺及歐利布試劑(ehrlich'sreagent)，以吸光度測(cè)定肝組織纖維化的指標(biāo)羥脯胺酸。

肝臟中的羥脯胺酸含量如圖1所示。改善肝纖維化的纖維溶解類酶前體prommp-9的表達(dá)量如圖2所示。血清硒含量的測(cè)定結(jié)果如圖3所示。

圖1表明，本發(fā)明的鋅硒配合劑，盡管在硫代乙酰胺投入20周后才進(jìn)行給藥，作為肝纖維化指標(biāo)的羥脯胺酸量有明顯的降低，和作為鋅制劑的聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)相比處于明顯的優(yōu)勢(shì)。

圖2表明，prommp-9為用于溶解肝纖維而起作用的纖維溶解類酶前體。本發(fā)明的鋅硒配合劑使prommp-9的含量激增，和服用聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)后相比有明顯的增加，確認(rèn)了本發(fā)明的肝纖維化改善效果。

圖3顯示出服用硫代乙酰胺20周后，血清硒含量有明顯的減少。但是服用鋅硒配合劑10周后，血清硒值有明顯的增加，比服用硫代乙酰胺前含量更高，有明顯的改善。在服用作為鋅制劑的聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)組，未見(jiàn)血清硒含量增加，可以認(rèn)為血清硒的增加是因服用鋅硒配合劑而導(dǎo)致的。

因此，可以認(rèn)為鋅硒配合劑在肝功能障礙時(shí)不會(huì)發(fā)生拮抗，補(bǔ)充本發(fā)明物可以使其吸收率提高。

圖4是分別服用鋅制劑聚普瑞鋅(l-肌肽鋅酸鹽)和本發(fā)明的一種實(shí)施例鋅硒配合劑后，表征肝纖維化改善作用的肝組織染色圖。

明確地體現(xiàn)了鋅硒配合劑具有改善炎癥，改善肝纖維化的效果。