相關(guān)申請(qǐng)

本申請(qǐng)要求2015年2月8日提交的美國臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)62/113,496的優(yōu)先權(quán)，該申請(qǐng)的內(nèi)容據(jù)此以引用的方式整體并入本文中。

發(fā)明背景

富馬酸酯(fae)在德國被批準(zhǔn)用于治療銀屑病，在美國正在進(jìn)行有關(guān)治療銀屑病和多發(fā)性硬化的評(píng)價(jià)，并且已經(jīng)被提出用于治療眾多免疫性、自身免疫性及炎癥性疾病和病狀。

fae和其它富馬酸衍生物已經(jīng)被提出用于治療涉及免疫過程、自身免疫過程和/或炎癥性過程的眾多疾病和病狀，所述疾病和病狀包括銀屑病(joshi和strebel，wo1999/49858；美國專利號(hào)6,277,882；mrowietz和asadullah，trendsmolmed2005，111(1)，43-48；以及yazdi和mrowietz，clinicsdermatology2008，26，522-526)；哮喘和慢性阻塞性肺病(joshi等人，wo2005/023241和us2007/0027076)；心功能不全，包括左心室功能不全、心肌梗塞及心絞痛(joshi等人，wo2005/023241；joshi等人，us2007/0027076)；線粒體和神經(jīng)變性疾病，如帕金森氏病(parkinson′sdisease)、阿爾茨海默氏病(alzheimer′sdisease)、亨廷頓氏病(huntington′sdisease)、視網(wǎng)膜色素變性及線粒體腦肌病(joshi和strebel，wo2002/055063、us2006/0205659、美國專利號(hào)6,509,376、美國專利號(hào)6,858,750及美國專利號(hào)7,157,423)；移植(joshi和strebel，wo2002/055063、us2006/0205659、美國專利號(hào)6,359,003、美國專利號(hào)6,509,376及美國專利號(hào)7,157,423；及l(fā)ehmann等人，archdermatolres2002，294，399-404)；自身免疫性疾病(joshi和strebel，wo2002/055063、美國專利號(hào)6,509,376、美國專利號(hào)7,157,423及us2006/0205659)，包括多發(fā)性硬化(ms)(joshi和strebel，wo1998/52549和美國專利號(hào)6,436,992；went和lieberburg，us2008/0089896；schimrigk等人，eurjneurology2006，13，604-610；及schilling等人，clinexperimentalimmunology2006，145，101-107)；局部缺血和再灌注損傷(joshi等人，us2007/0027076)；age誘發(fā)的基因組損傷(heidland，wo2005/027899)；炎癥性腸病，如克羅恩氏病(crohn′sdisease)和潰瘍性結(jié)腸炎等等(nilsson等人，wo2006/037342，及nilsson和muller，wo2007/042034)。

fumaderm在德國于1994年被批準(zhǔn)用于治療銀屑病，它是一種含有富馬酸單乙酯和富馬酸二甲酯(dmf)的鹽混合物的腸溶包衣片劑，迅速水解成被視為主要生物活性代謝物的富馬酸單甲酯。fumaderm在藥物吸收方面展現(xiàn)高度的患者間變化性，并且食物明顯降低生物利用率。吸收被認(rèn)為是在小腸中發(fā)生，并且在口服施用后5-6小時(shí)達(dá)到峰值水平。在70-90％的患者中發(fā)生顯著副作用(brewer和rogers，clinexpt′ldermatology2007，32，246-49；及hoefnagel等人，brjdermatology2003，149，363-369)。當(dāng)前fae療法的副作用包括胃腸不適，包括反胃、嘔吐、腹瀉，和/或皮膚短暫潮紅。

富馬酸二甲酯(dmf)是被批準(zhǔn)用于治療患有復(fù)發(fā)型多發(fā)性硬化(ms)的患者的市售藥物(biogen)的活性成分。在iib期rrms研究中，bg-12(dmf)明顯減少釓增強(qiáng)的腦病變。在臨床前研究中，經(jīng)顯示，施用dmf可抑制鼠類和大鼠eae的cns炎癥。還發(fā)現(xiàn)dmf可以抑制與eae有關(guān)的星形膠質(zhì)增生和小膠質(zhì)細(xì)胞活化。參見例如，美國公布的申請(qǐng)?zhí)?012/0165404。

富馬酸二甲酯還伴隨顯著缺點(diǎn)。舉例來說，已知富馬酸二甲酯在口服施用后在受試者中引起副作用，如潮紅和胃腸事件，包括反胃、腹瀉和/或上腹部疼痛。參見例如，gold等人，n.eng.j.med.，2012，367(12)，1098-1107。富馬酸二甲酯是bid給藥，并且總?cè)談┝渴羌s480mg。

鑒于上文所描述的富馬酸二甲酯的缺點(diǎn)，仍然需要減少副作用和/或改善與dmf有關(guān)的物理化學(xué)特性。因此，迫切需要保持dmf的藥理學(xué)益處但克服其在配制方面的缺點(diǎn)和/或在施用后的不良作用的產(chǎn)品來治療如ms等神經(jīng)疾病。

附圖簡述

圖1是有關(guān)囊封的延遲釋放微型片劑的工藝流程圖。

圖2是有關(guān)囊封的擠出球粒的工藝流程圖。

圖3描繪了基于第一配方，囊封的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物1)的延遲釋放微型片劑的溶出曲線。

圖4描繪了基于其它配方，囊封的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物1)的延遲釋放微型片劑的溶出曲線。

圖5描繪了囊封的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物1)的延遲釋放擠出球粒的溶出曲線。

圖6描繪了在單次口服施用一系列劑量的化合物1之后的血漿富馬酸單甲酯濃度。

圖7描繪了在施用包含富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯的藥物組合物之后血漿中富馬酸單甲酯的cmax劑量依賴性增加。

圖8顯示在施用包含富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯的藥物組合物之后血漿中富馬酸單甲酯的auclast劑量依賴性增加。

圖9描繪了進(jìn)行420mg富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯或240mg富馬酸二甲酯給藥的受試者的富馬酸單甲酯暴露情況。

圖10描繪了施用包含420mg富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯的藥物組合物或240mg富馬酸二甲酯的受試者的富馬酸單甲酯的最大血漿濃度(cmax)。

圖11描繪了施用包含420mg富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯的藥物組合物或240mg富馬酸二甲酯的受試者的血漿富馬酸單甲酯的曲線下面積(auclast)。

發(fā)明概述

本發(fā)明的藥物組合物包含如以下所定義的式(i)的前藥，例如富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽(mmf前藥)，及控制釋放聚合物，其中所述控制釋放聚合物呈施加至一個(gè)或多個(gè)含有該前藥的藥芯的包衣形式。本發(fā)明的組合物適于每天一次或兩次施用富馬酸單甲酯(mmf)前藥并且適用于治療mmf和/或mmf前藥適用的病狀，諸如例如多發(fā)性硬化和銀屑病。所述藥芯可以呈包含mmf前藥的一個(gè)或多個(gè)藥片或一個(gè)或多個(gè)藥丸的形式。

優(yōu)選地，控制釋放包衣是腸溶包衣，用于保護(hù)藥芯免受胃液損害并且僅在組合物從胃進(jìn)入胃腸道ph較高的區(qū)域后釋放前藥。因此，用某些mmf前藥可能觀察到的對(duì)胃粘膜的刺激可以通過在組合物到達(dá)小腸或git下段之前延遲釋放而避免?？刂漆尫?cr)聚合物可以提供有效腸保護(hù)，同時(shí)還允許在組合物通過胃后高效釋放前藥的任何量存在。舉例來說，cr聚合物典型地以約2％至約30％的重量增加水平(即，在施加包覆溶液/懸浮液后基于cr聚合物和存在的任何包衣賦形劑，如增塑劑、防黏劑等計(jì)算的重量增加)施加于藥芯。替代地，包衣水平可以關(guān)于每單位面積的重量定義并且包衣(cr聚合物和存在的任何包衣賦形劑)典型地以約0.95至約14.75mg/cm²的水平施加于藥芯。作為另一替代方案，控制釋放包衣可以關(guān)于其厚度定義并且典型地施加至藥芯以達(dá)到約40至約60μm(微米)的包衣厚度。

優(yōu)選地，在去除腸溶包衣(當(dāng)組合物遇到約6.8或更高的ph時(shí))后，式(i)的前藥，例如富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽迅速，例如在約3小時(shí)內(nèi)，或優(yōu)選在約2小時(shí)內(nèi)基本上完全(如果不是100％的話)釋放。舉例來說，如使用usp設(shè)備i40目網(wǎng)籃以100至150rpm旋轉(zhuǎn)速度測量，在ph6.8下該前藥在約2小時(shí)內(nèi)基本上完全從組合物釋放。優(yōu)選的是，如使用usp設(shè)備i40目網(wǎng)籃以100至150rpm旋轉(zhuǎn)速度測量，在ph6.8下該前藥在約2小時(shí)內(nèi)100％從組合物釋放。

在一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物包括包含式(i)化合物，例如富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽、稀釋劑及崩解劑的藥芯；以及施加至所述前藥藥芯的包含控制釋放聚合物的包衣。

在另一實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物包含了分散于整個(gè)載體基質(zhì)中以形成多個(gè)藥丸的式(i)化合物，例如富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽。所述藥丸可以通過熔融擠出制造，隨后用控制釋放聚合物包覆。

優(yōu)選地，用于包覆藥芯的包衣還包含增塑劑和一種或多種防黏劑，以及cr聚合物。

本發(fā)明還提供了包含提供于膠囊中的多個(gè)以上描述的控制釋放藥片或藥丸的固體口服劑型，所述藥片或藥丸包含式(i)化合物，例如富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽。相對(duì)于整體式片劑，此類劑型的優(yōu)勢(shì)在于，這些劑型有助于含前藥的藥芯沿git擴(kuò)散，與在整體式片劑情況下在一個(gè)部位提供前藥形成對(duì)比。據(jù)信，此類擴(kuò)散作用可以幫助使胃腸刺激的發(fā)生最少或減少。

已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，如以上所描述的本發(fā)明的固體口服劑型在施用給人類受試者后可具有有益的藥物動(dòng)力學(xué)特征。舉例來說，此類劑型可以提供以下藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：

i)在所述受試者的血漿中約1.8μg/ml至約2.5μg/ml的平均富馬酸單甲酯cmax；

ii)在所述受試者的血漿中約4.0μg·hr/ml至約5.0μg·hr/ml的平均富馬酸單甲酯auclast；

iii)在所述受試者的血漿中約2.75小時(shí)至約3.5小時(shí)的中值富馬酸單甲酯tmax；

iv)在所述受試者的血漿中約0.65小時(shí)至約0.8小時(shí)的中值富馬酸單甲酯終末消除半衰期(t1/2)；及

v)在施用后約1小時(shí)至約2小時(shí)的中值富馬酸單甲酯的吸收tlag。

發(fā)明詳述

在一個(gè)方面，本文提供了包含式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的控制釋放藥物組合物。這些藥物組合物可用于治療有需要的受試者的神經(jīng)疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是多發(fā)性硬化。在另一方面，本文提供了包含式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的控制釋放藥物組合物，這些藥物組合物可用于治療銀屑病。

在另一方面，本文提供了具有特定藥物動(dòng)力學(xué)特征的化合物和控制釋放藥物組合物，所述特征例如cmax、tmax、吸收滯后時(shí)間(tlag)、t1/2、表觀口服清除率(cl/f；僅針對(duì)母體化合物)、表觀分布體積(vd/f；僅針對(duì)母體化合物)、從時(shí)間零到最后一個(gè)可定量時(shí)間間隔的濃度-時(shí)間曲線下面積(auclast)及auc無窮。

控制釋放藥物組合物

本文提供了藥物組合物，這些藥物組合物包含控制釋放聚合物，及式(i)化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽，

其中：

r¹是c1-c6烷基；

是

m是1或2；

t是0、1、2、3、4、5或6；

r⁶、r⁷、r⁸及r⁹各自獨(dú)立地是h、c1-c6烷基或c(o)or^a；

r^a是h或c1-c6烷基；并且

r¹⁰各自獨(dú)立地是h、鹵素、c1-c6烷基、c3-c10碳環(huán)、包含一個(gè)或兩個(gè)5元或6元環(huán)及1-4個(gè)選自n、o及s的雜原子的雜環(huán)，或包含一個(gè)或兩個(gè)5元或6元環(huán)及1-4個(gè)選自n、o及s的雜原子的雜芳基；

或者，替代地，連接至同一碳原子的兩個(gè)r¹⁰連同其所連接的碳原子一起形成羰基；

或者，替代地，連接至相鄰原子的兩個(gè)r¹⁰連同其所連接的碳原子一起形成稠合c3-6環(huán)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中r¹是甲基。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中r⁶、r⁷、r⁸及r⁹各自是h。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中m是2。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中t是4、5或6并且四個(gè)r¹⁰(其中兩對(duì)r¹⁰各自連接至同一碳原子，連同其所連接的碳原子一起)形成兩個(gè)羰基。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中r¹是甲基，并且t是4、5或6，且四個(gè)r¹⁰(其中兩對(duì)r¹⁰各自連接至同一碳原子，連同其所連接的碳原子一起)形成兩個(gè)羰基。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中r⁶、r⁷、r⁸及r⁹各自是h，t是4、5或6，且四個(gè)r¹⁰(其中兩對(duì)r¹⁰各自連接至同一碳原子，連同其所連接的碳原子一起)形成兩個(gè)羰基。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中m是2，t是4、5或6，且四個(gè)r¹⁰(其中兩對(duì)r¹⁰各自連接至同一碳原子，連同其所連接的碳原子一起)形成兩個(gè)羰基。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中m是2并且r¹是甲基。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中m是2并且r⁶、r⁷、r⁸及r⁹各自是h。

在另一實(shí)施方案中，本文提供的藥物組合物包含式(i)化合物，其中r¹是甲基并且r⁶、r⁷、r⁸及r⁹各自是h。

本文提供的藥物組合物可以提供用先前已知的富馬酸酯制備物，如富馬酸二甲酯組合物或當(dāng)前市售的制劑無法獲得的許多治療益處。舉例來說，本文公開的藥物組合物的一個(gè)益處在于，這些藥物組合物可以維持較低、較穩(wěn)定的血漿峰值，例如cmax(參見表4.1和圖10)，由此降低可能的副作用的發(fā)生率及嚴(yán)重程度(參見表4.2)。作為另一益處，本文公開的藥物組合物可以具有較長的吸收滯后時(shí)間tlag(參見表4.1)，由此增加施用藥物組合物與可檢測到藥物的血漿水平之間的時(shí)間段。

在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物制劑包含以重量計(jì)約50％至約90％的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。在另一實(shí)施方案中，該藥物組合物包含以重量計(jì)約70％至約80％的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物組合物呈片劑或多個(gè)微型片劑的形式。這些微型片劑典型地是控制釋放或延遲釋放微型片劑?？刂漆尫趴梢岳缤ㄟ^在微型片劑芯上施加腸溶聚合物包衣來實(shí)現(xiàn)。舉例來說，微型片劑的直徑可以是約2mm，厚度是約2mm并且腸溶聚合物包衣厚度是約40至約60微米。這些微型片劑可以填充于膠囊(如明膠或羥丙基甲基纖維素(hpmc)膠囊)中以制造最終劑型。

所述藥物組合物包含約210mg、420mg、630mg、840mg或980mg富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。在另一實(shí)施方案中，該藥物組合物包含約420mg富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本文提供了一種藥物組合物，該藥物組合物包含富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽、微晶纖維素及c型甲基丙烯酸共聚物。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物組合物另外包含交聯(lián)聚維酮(crospovidone)或硬脂酸鎂。在另一實(shí)施方案中，該藥物組合物包含微晶纖維素、交聯(lián)聚維酮、硬脂酸鎂及c型甲基丙烯酸共聚物。在另一實(shí)施方案中，該藥物組合物包含微晶纖維素、交聯(lián)聚維酮、硬脂酸鎂、c型甲基丙烯酸共聚物、滑石、膠態(tài)二氧化硅及檸檬酸三乙酯。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物組合物包含以重量計(jì)約50％至約90％的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。在又另一實(shí)施方案中，該藥物組合物包含以重量計(jì)約70％至約80％的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

本文提供的藥物組合物可以使用可根據(jù)待治療疾病狀態(tài)的嚴(yán)重程度調(diào)整的適宜的每日劑量方案口服施用。

在另一實(shí)施方案中，式(i)化合物，例如富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯在口服施用后，高效地轉(zhuǎn)化成活性物質(zhì)，即富馬酸單甲酯。

為了使藥物達(dá)到其治療作用，有必要提供適當(dāng)水平的血液或血漿濃度。許多藥物，包括富馬酸二甲酯在內(nèi)，都必須一天多次施用以維持所需的濃度。另外，即使每天多次施用此類藥物，但活性成分的血液或血漿濃度可能仍隨時(shí)間變化，即在施用之間某些時(shí)間點(diǎn)的活性成分濃度高于其它時(shí)間。因此，在24小時(shí)時(shí)間段的某些時(shí)間點(diǎn)，患者可以接受治療有效量的活性成分，而在其它時(shí)間點(diǎn)，血液中活性成分的濃度可能降至治療水平以下。本發(fā)明提供如以下所描述的控制釋放或延遲釋放組合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，藥物組合物是包含式(i)化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載劑的延遲釋放或緩慢釋放組合物，其中該藥物組合物向受試者提供治療有效量的富馬酸單甲酯。在另一實(shí)施方案中，該藥物組合物向受試者提供治療有效量的富馬酸單甲酯，持續(xù)至少約8小時(shí)至至少約24小時(shí)。在另一實(shí)施方案中，該藥物組合物向受試者提供治療有效量的富馬酸單甲酯，持續(xù)至少約8小時(shí)、至少約10小時(shí)、至少約12小時(shí)、至少約13小時(shí)、至少約14小時(shí)、至少約15小時(shí)、至少約16小時(shí)、至少約17小時(shí)、至少約18小時(shí)、至少約19小時(shí)、至少約20小時(shí)、至少約21小時(shí)、至少約22小時(shí)、至少約23小時(shí)，或至少約24小時(shí)或更長時(shí)間。例如，至少約18小時(shí)。例如，至少約12小時(shí)。例如，約12小時(shí)。例如，超過12小時(shí)。例如，至少約16小時(shí)。例如，至少約20小時(shí)。例如，至少約24小時(shí)。

如本文所使用，術(shù)語“延遲釋放”是指藥物不會(huì)立即崩解并在體內(nèi)釋放活性成分。術(shù)語“延遲釋放”是關(guān)于具有在施用后于釋放藥物方面存在預(yù)定延遲的釋放特征的藥物組合物使用。在一些實(shí)施方案中，延遲釋放組合物包括腸溶包衣，該包衣是施加至口服藥物以防止藥物在到達(dá)小腸之前釋放的屏障。延遲釋放組合物，如腸溶包衣，防止對(duì)胃具有刺激作用的藥物溶解于胃中。此類包衣也用于保護(hù)酸不穩(wěn)定性藥物免于胃的酸性暴露，取而代之的是將其遞送至更具堿性ph的腸環(huán)境，在其中這些藥物不會(huì)降解，并且發(fā)揮其所希望的作用。

本發(fā)明的控制釋放組合物可以呈片劑或微型片劑(取決于微型片劑的形狀和用于容納其的膠囊大小，其直徑典型地是約1mm至約6mm)形式。片劑藥芯可以通過將mmf前藥與合適的賦形劑(如助流劑、稀釋劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等)摻混在一起，隨后在配備有適于制造所希望大小和形狀的片劑或微型片劑的工具的壓片機(jī)中壓片來制造。片劑或微型片劑的控制釋放特征可以通過選擇用于形成片劑藥芯的賦形劑和/或通過將控制釋放包衣施加至片劑藥芯來定制。微型片劑可以填充于適當(dāng)大小的膠囊中以制造最終劑型。

在使用稀釋劑的情況下，稀釋劑優(yōu)先選自由以下組成的組：微晶纖維素、右旋糖、乳糖、蔗糖、甘露糖醇、磷酸二鈣及其組合或混合物。

在使用崩解劑的情況下，崩解劑優(yōu)先選自由以下組成的組：羧甲基纖維素鈉、淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮(交聯(lián)聚維酮)及其組合或混合物。

替代地，本發(fā)明的控制釋放組合物可以呈擠出物形式。典型地，該擠出物將呈團(tuán)粒的形式，這些團(tuán)粒可以經(jīng)歷滾圓處理以制造球粒。這些擠出物藥芯在填充至適當(dāng)大小的膠囊中之前，可以經(jīng)歷進(jìn)一步加工，如包覆，以制造最終劑型。擠出球粒的控制釋放特征可以通過選擇在擠出工藝期間使用的賦形劑和/或通過將控制釋放包衣施加至擠出物藥芯來定制。

在一個(gè)實(shí)施方案中，控制釋放組合物包含包覆有腸溶包衣的延遲釋放擠出球粒或微型片劑。腸溶包衣保護(hù)原料藥免受胃中低ph環(huán)境影響，同時(shí)在微型片劑離開胃并進(jìn)入小腸較高ph環(huán)境后提供迅速釋放。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，包覆水平可以通過各種方式、術(shù)語表征，如重量增加百分比(％wt)；每單位面積添加的包覆材料的重量(mg/cm²)，或以包衣厚度(μm)表征。從制造的觀點(diǎn)看，包覆達(dá)到指定百分比的重量增加更實(shí)用，因?yàn)檫@在過程中更容易確定和控制。不過，其它參數(shù)，即每單位面積添加的包衣重量和包衣厚度，也是有益的。任何量的聚合物都可以施加至擠出球粒或微型片劑，只要在球粒/微型片劑沿胃腸道通過時(shí)，該聚合物足以賦予以上提到的保護(hù)作用和迅速釋放特征。

控制釋放聚合物優(yōu)選是腸溶聚合物，諸如例如乙酸鄰苯二甲酸纖維素、聚乙酸乙烯鄰苯二甲酸酯以及丙烯酸和丙烯酸酯聚合物和共聚物?？梢允褂冒沦x形劑，如增塑劑和防黏劑(有時(shí)又稱為防粘附劑)以改善包覆過程及包衣的釋放和耐久性特征。

在使用增塑劑的情況下，該增塑劑優(yōu)先選自由以下組成的組：三醋精、檸檬酸三丁酯、檸檬酸三乙酯、癸二酸二丁酯、鄰苯二甲酸二乙酯及其組合或混合物。

在使用防黏劑的情況下，該防黏劑優(yōu)先選自由膠態(tài)二氧化硅、滑石及其組合或混合物組成的組。

對(duì)于延遲釋放微型片劑或擠出球粒，以重量增加百分比(即，在施加包衣之后微型片劑/球粒的重量增加百分比)表征的施加的包衣水平適合地是約2％至約30％重量增加(即，以未包覆珠粒的重量百分比表述的添加的聚合物和包衣賦形劑(如果存在的話)的干重)并且優(yōu)選是2％至15％重量增加。

包衣水平也可以包衣厚度(mm或μm)表征。然而，技術(shù)人員應(yīng)理解，未包覆的微型片劑(微型片劑芯)典型地呈圓柱形，具有平坦或彎曲的端部，而不是呈球狀，而且在藥芯整個(gè)表面上施加的包覆材料并非完全均一的。另外，擠出的藥芯盡管大致呈球形，但也可能展現(xiàn)某種表面不均一性，由此可能導(dǎo)致包覆過程的變化和不理想。因此，包衣厚度可能在任何給定藥芯的不同區(qū)域以及各藥芯之間略有不同。出于延遲釋放微型片劑或擠出球粒的目的，對(duì)微型片劑/擠出球粒藥芯提供腸保護(hù)，同時(shí)有助于在離開胃部低ph環(huán)境后迅速釋放前藥的任何包衣厚度將是足夠的。延遲釋放包衣優(yōu)選包含甲基丙烯酸共聚物并且將具有約40至約60μm(微米)厚度。

圖1是涉及根據(jù)本發(fā)明的用于制造囊封的經(jīng)包覆的微型片劑的方法的工藝流程的示意性表示。有關(guān)該方法的更多細(xì)節(jié)描述于下文及以下實(shí)施例中。所得劑型(膠囊)遞送治療有效水平的mmf，同時(shí)使胃刺激相較于其它mmf-前藥組合物有所降低。參看圖1：

○在中間散粒物容器、v型摻混機(jī)等中摻混mmf-前藥與壓片賦形劑(除潤滑劑外)，并且任選地共研磨；

○添加潤滑劑并且再摻混該混合物一段時(shí)間；

○將所得摻混物進(jìn)料至壓片機(jī)中，在該壓片機(jī)中將其壓制成微型片劑；

○由此制造的微型片劑芯可以用作立即釋放片劑，或者可以進(jìn)一步加工(通過施加一個(gè)或多個(gè)功能性包衣，以制造改良型微型片劑)，在此情況下，應(yīng)用以下包覆步驟：

○將微型片劑進(jìn)料至片劑包衣機(jī)中，在該包衣機(jī)中施加包含包衣賦形劑和溶劑的呈包衣溶液或呈分散體形式的包衣；

○使用封裝機(jī)將微型片劑填入膠囊中達(dá)到所希望的劑量強(qiáng)度。

施加的包衣的類型和數(shù)量將決定改良釋放的微型片劑的釋放特征。舉例來說，可以施加腸溶包衣以提供延遲釋放，由此在微型片劑通過胃之后，突然釋放前藥。替代地，可以通過在腸溶包衣之下施加緩慢釋放包衣來提供緩慢釋放，由此在微型片劑離開胃后，即以緩慢、連續(xù)的控制性方式釋放藥物。不同類型的微型片劑可以組合于單一膠囊中以產(chǎn)生所希望的釋放特征。舉例來說，可以采用延遲釋放與緩慢釋放微型片劑的組合。替代地，立即釋放和改良釋放的微型片劑可以按不同比例混合并填充于膠囊中，從而提供具有不同強(qiáng)度和釋放特征的劑型。

圖2是涉及根據(jù)本發(fā)明的用于制造囊封的經(jīng)包覆的擠出球粒的方法的工藝流程的示意性表示。有關(guān)該方法的更多細(xì)節(jié)描述于下文及以下實(shí)施例中。所得劑型(膠囊)遞送治療有效水平的mmf。另外，據(jù)信本發(fā)明的經(jīng)包覆的擠出球?？梢詼p少胃刺激以及通常與mmf前藥治療有關(guān)的其它副作用。參看圖2：

○在中間散粒物容器、v型摻混機(jī)等中摻混mmf-前藥與擠出聚合物，及可能需要的任何其它賦形劑；

○將所得摻混物進(jìn)料至擠出機(jī)中，在擠出機(jī)中，該摻混物經(jīng)歷加熱并且隨后被推進(jìn)通過模具以制造擠出物條(當(dāng)利用圓形模具時(shí)，這些擠出物條將呈圓柱形)；

○將擠出物條切成較小的圓柱形或桿狀團(tuán)粒，這些團(tuán)粒滾圓成球粒；

○接著，將擠出物球粒進(jìn)料至包衣機(jī)中，在該包衣機(jī)中施加包含包衣賦形劑和溶劑的呈包衣溶液或呈分散體形式的包衣；

○使用封裝機(jī)將經(jīng)包覆的擠出物球粒填入膠囊中達(dá)到所希望的劑量強(qiáng)度。

施加的包衣的類型和數(shù)量將決定最終劑型的釋放特征。舉例來說，可以施加腸溶包衣以提供延遲釋放，由此在擠出球粒通過胃之后，突然釋放前藥。替代地，可以通過在腸溶包衣之下施加緩慢釋放包衣來提供緩慢釋放，由此在擠出球粒離開胃后，即以緩慢、連續(xù)的控制性方式釋放藥物。不同類型的球粒可以組合于單一膠囊中以產(chǎn)生所希望的釋放特征。舉例來說，可以采用延遲釋放與緩慢釋放球粒的組合。替代地，立即釋放和改良釋放的擠出球粒可以按不同比例混合并填充于膠囊中，從而提供具有不同強(qiáng)度和釋放特征的劑型。

本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，在決定選擇壓片和包衣賦形劑時(shí)，關(guān)鍵的考慮因素是(i)所討論的賦形劑與前藥之間的相容性；及(ii)賦形劑影響前藥從組合物釋放的可能性。前者(賦形劑/前藥相容性)可以由相容性研究容易地確定，這項(xiàng)研究是制藥學(xué)領(lǐng)域中的常規(guī)實(shí)踐。而后者(對(duì)前藥釋放的影響)可以通過體外溶出試驗(yàn)容易地確定，該試驗(yàn)也屬常規(guī)實(shí)踐。因此，技術(shù)人員應(yīng)易于了解，以上一般術(shù)語中所描述的賦形劑的各種列舉和組合都可以使用，只要獲得可接受的相容性和釋放特征即可。

化合物

本文提供了包含式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，及腸溶聚合物的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物組合物另外包含崩解劑或潤滑劑。在另一實(shí)施方案中，該藥物組合物包含崩解劑、潤滑劑及腸溶聚合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物組合物包含式(i)化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽，

其中r¹、r⁶、r⁷、r⁸及r⁹如上文所述定義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物組合物包含本文表a中所列的化合物。

表a

在另一實(shí)施方案中，在口服施用后，式(i)化合物高效地轉(zhuǎn)化成活性物質(zhì)，即富馬酸單甲酯。舉例來說，在口服施用后，施用的式(i)化合物的總劑量中約50摩爾％、約55摩爾％、約60摩爾％、約65摩爾％、約70摩爾％、約75摩爾％、約80摩爾％、約85摩爾％、約90摩爾％或超過90摩爾％轉(zhuǎn)化成富馬酸單甲酯。在另一實(shí)施方案中，在口服施用后，化合物1-12中的任一種高效地轉(zhuǎn)化成活性物質(zhì)，即富馬酸單甲酯。舉例來說，在口服施用后，施用的化合物1-12中任一種的總劑量中約50％、約55％、約60％、約65％、約70％、約75％、約80％、約85％、約90％或超過90％轉(zhuǎn)化成富馬酸單甲酯。

如本文所使用，“烷基”、“c1、c2、c3、c4、c5或c6烷基”或“c1-c6烷基”意圖包括c1、c2、c3、c4、c5或c6直鏈(線性)飽和脂肪烴基及c3、c4、c5或c6支鏈飽和脂肪烴基。舉例來說，c1-c6烷基意圖包括c1、c2、c3、c4、c5及c6烷基。烷基的實(shí)例包括具有一個(gè)至六個(gè)碳原子的部分，如但不限于，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、仲戊基或正己基。

在某些實(shí)施方案中，直鏈或支鏈烷基具有六個(gè)或更少的碳原子(例如對(duì)于直鏈?zhǔn)莄1-c6，對(duì)于支鏈?zhǔn)莄3-c6)，并且在其它實(shí)施方案中，直鏈或支鏈烷基具有四個(gè)或更少的碳原子。

“芳基”包括具有芳香性的基團(tuán)，包括與至少一個(gè)芳香環(huán)“共軛的”或多環(huán)系統(tǒng)。實(shí)例包括苯基、苯甲基、萘基等。

“雜芳基”是指在環(huán)結(jié)構(gòu)中具有一個(gè)至四個(gè)雜原子的如以上所定義的芳基，并且也可以稱為“芳基雜環(huán)”或“雜芳族基團(tuán)”。如本文所使用，術(shù)語“雜芳基”意圖包括由碳原子及獨(dú)立地選自由氮、氧及硫組成的組的一個(gè)或多個(gè)雜原子，例如1個(gè)或1-2個(gè)或1-3個(gè)或1-4個(gè)或1-5個(gè)或1-6個(gè)雜原子組成的穩(wěn)定5元、6元或7元單環(huán)或7元、8元、9元、10元、11元或12元雙環(huán)芳族雜環(huán)。氮原子可以是被取代或未被取代的(即，n或nr，其中r是h或所定義的其它取代基)。氮雜原子和硫雜原子可以任選被氧化(即，n→o和s(o)p，其中p＝1或2)。應(yīng)注意，雜芳基中s和o原子的總數(shù)不超過1。

雜芳基的實(shí)例包括吡咯、呋喃、噻吩、噻唑、異噻唑、咪唑、三唑、四唑、吡唑、噁唑、異噁唑、吡啶、吡嗪、噠嗪、嘧啶等。

如本文所使用，“py”是指吡啶基。

另外，術(shù)語“芳基”和“雜芳基”包括多環(huán)芳基及雜芳基，例如三環(huán)、雙環(huán)，例如萘、苯并噁唑、苯并二噁唑、苯并噻唑、苯并咪唑、苯并噻吩、亞甲基二氧苯基、喹啉、異喹啉、萘啶、吲哚、苯并呋喃、嘌呤、苯并呋喃、脫氮嘌呤或吲嗪。

在多環(huán)芳族環(huán)的情況下，只需要一個(gè)環(huán)是芳族環(huán)(例如2，3-二氫吲哚)，不過所有環(huán)都可以是芳族環(huán)(例如喹啉)。第二個(gè)環(huán)也可以是稠合或橋連的。

芳基或雜芳基芳族環(huán)可以在一個(gè)或多個(gè)環(huán)位置處被如以上所描述的取代基取代，例如烷基、烯基、炔基、鹵素、羥基、烷氧基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸酯基、烷基羰基、烷基氨基羰基、芳烷基氨基羰基、烯基氨基羰基、烷基羰基、芳基羰基、芳烷基羰基、烯基羰基、烷氧羰基、氨基羰基、烷基硫代羰基、磷酸酯基、膦酸基(phosphonato)、次膦酸基(phosphinato)、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基及烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨甲?；半寤?、脒基、亞氨基、氫硫基、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸酯基、硫酸酯基、烷基亞磺酰基、磺酸基、氨磺?；?、亞磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環(huán)基、烷基芳基，或者芳族或雜芳族部分。芳基也可以與非芳族基團(tuán)的脂環(huán)族環(huán)或雜環(huán)稠合或橋連，由此形成多環(huán)系統(tǒng)(例如萘滿、亞甲基二氧苯基)。

如本文所使用，“碳環(huán)(carbocycle/carbocyclicring)”意圖包括具有指定數(shù)目的碳的任何穩(wěn)定單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)，其中任一個(gè)可以是飽和、不飽和或芳族環(huán)。舉例來說，c3-c14碳環(huán)意圖包括具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14個(gè)碳原子的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)。碳環(huán)的實(shí)例包括但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)庚烯基、環(huán)庚基、環(huán)庚烯基、金剛烷基、環(huán)辛基、環(huán)辛烯基、環(huán)辛二烯基、芴基、苯基、萘基、茚滿基、金剛烷基及四氫萘基。碳環(huán)的定義中還包括橋連環(huán)，包括例如，[3.3.0]雙環(huán)辛烷、[4.3.0]雙環(huán)壬烷、[4.4.0]雙環(huán)癸烷及[2.2.2]雙環(huán)辛烷。當(dāng)一個(gè)或多個(gè)碳原子連接兩個(gè)不相鄰碳原子時(shí)，產(chǎn)生橋連環(huán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，橋環(huán)是一個(gè)或兩個(gè)碳原子。應(yīng)注意，橋通常將單環(huán)轉(zhuǎn)化成三環(huán)。當(dāng)環(huán)橋連時(shí)，關(guān)于該環(huán)所述的取代基也可以存在于該橋上。也包括稠合環(huán)(例如萘基、四氫萘基)和螺環(huán)。

如本文所使用，“雜環(huán)”包括含有至少一個(gè)環(huán)雜原子(例如n、o或s)的任何環(huán)結(jié)構(gòu)(飽和或部分不飽和)。雜環(huán)的實(shí)例包括但不限于，嗎啉、吡咯烷、四氫噻吩、哌啶、哌嗪和四氫呋喃。

雜環(huán)基的實(shí)例包括但不限于吖啶基、吖辛因基(azocinyl)、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并異噁唑基、苯并異噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4ah-咔唑基、咔啉基、苯并二氫吡喃基、色烯基、噌啉基、十氫喹啉基、2h，6h-1，5，2-二噻嗪基、二氫呋喃并[2，3-b]四氫呋喃、呋喃基、呋咱基(furazanyl)、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1h-吲唑基、吲哚烯基、吲哚啉基、吲嗪基、吲哚基、3h-吲哚基、靛紅?；?isatinoyl)、異苯并呋喃基、異苯并二氫吡喃基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異噁唑基、亞甲基二氧苯基、嗎啉基、萘啶基、八氫異喹啉基、噁二唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，2，4-噁二唑5(4h)-酮、噁唑烷基、噁唑基、羥吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基(phenanthrolinyl)、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基(phenoxathinyl)、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并噁唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基(pyridinyl/pyridyl)、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2h-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4h-喹啉嗪基、喹喔啉基、奎寧環(huán)基(quinuclidinyl)、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基、6h-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，3，4-三唑基及呫噸基。

本文中公開內(nèi)容的說明應(yīng)依照化學(xué)鍵合規(guī)律和原理進(jìn)行解釋。舉例來說，為了在任何給定位置容納取代基，有必要去除氫原子。另外，應(yīng)了解，本發(fā)明式(i)中的變量(即，“r基團(tuán)”)的定義以及鍵位置將與本領(lǐng)域中已知的化學(xué)鍵合的規(guī)律一致。還應(yīng)了解，必要時(shí)，以上描述的所有本發(fā)明化合物都將在相鄰原子和/或氫之間另外包括鍵以滿足每個(gè)原子價(jià)態(tài)。也就是說，添加鍵和/或氫原子以使以下類型原子各自具有以下總鍵數(shù)：碳：四個(gè)鍵；氮：三個(gè)鍵；氧：兩個(gè)鍵；及硫：二至六個(gè)鍵。

本發(fā)明的化合物可以使用可商購獲得的起始物質(zhì)、文獻(xiàn)中已知的化合物，或由易于制備的中間物，通過采用標(biāo)準(zhǔn)合成方法及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知或技術(shù)人員根據(jù)本文的教義而顯而易知的程序，通過多種方式制備。用于制備有機(jī)分子的標(biāo)準(zhǔn)合成方法和程序及官能團(tuán)轉(zhuǎn)化和操作可以從相關(guān)科學(xué)文獻(xiàn)或從本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)教科書獲得。盡管不局限于任一或若干來源，但以引用的方式并入本文中的經(jīng)典教科書，如smith，m.b.，march，j.，march′sadvancedorganicchemistryreactions，mechanisms，andstructure，第5版，johnwiley&sons：newyork，2001；及greene，t.w.，wuts，p.g.m.，protectivegroupsinorganicsynthesis，第3版，johnwiley&sons：newyork，1999，是有用并且公認(rèn)的本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的有機(jī)合成參考教科書。有關(guān)本文所描述的合成方法的說明被設(shè)計(jì)成說明但非限制用于制備本發(fā)明化合物的一般程序。

藥物動(dòng)力學(xué)

在一個(gè)實(shí)施方案中，藥物組合物展示了某些希望的藥物動(dòng)力學(xué)特征。活性成分或藥物在最大濃度點(diǎn)cmax的血漿濃度可能與在施用一定劑量藥物，如富馬酸二甲酯后的短期副作用或不良事件有關(guān)。典型地，在施用一種藥物后，受試者經(jīng)歷藥物血漿濃度的快速激增。高cmax會(huì)在受試者中表現(xiàn)為一種或多種不良事件。因此，為了降低此類不良事件的發(fā)生概率，希望藥物產(chǎn)生較低cmax。另外，延長藥物的吸收時(shí)間(tlag)也是合乎需要的，因?yàn)檫@表示藥物在受試者中的較長暴露，由此可以提供比間斷地藥物血漿濃度更有效的治療。

本文提供的藥物組合物可以提供用先前已知的富馬酸酯制劑，如富馬酸二甲酯組合物或當(dāng)前市售的配制物無法獲得的許多治療益處。舉例來說，本文公開的藥物組合物的一個(gè)益處是，這些藥物組合物可以維持較長的吸收滯后時(shí)間tlag(參見表4.1)，由此增加施用藥物組合物與可檢測到藥物的血漿水平之間的時(shí)間。作為另一個(gè)益處，本文公開的藥物組合物可以具有較低、較穩(wěn)定的血漿峰值，例如cmax(參見表4.1和圖10)，由此降低可能的副作用的發(fā)生率及嚴(yán)重程度(參見表4.2)。

在一個(gè)方面，本文提供了一種治療多發(fā)性硬化的方法，該方法包括向有需要的受試者施用藥物組合物，該藥物組合物包含式(i)化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽，

其中r¹、r⁶、r⁷、r⁸及r⁹如上文所述定義；并且

另外其中施用所述藥物組合物提供以下藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：

i)在所述受試者的血漿中約1.8μg/ml至約2.5μg/ml的平均富馬酸單甲酯cmax；

ii)在所述受試者的血漿中約4.0μg·hr/ml至約5.0μg·hr/ml的平均富馬酸單甲酯auclast；

iii)在所述受試者的血漿中約2.75小時(shí)至約3.5小時(shí)的中值富馬酸單甲酯tmax；

iv)在所述受試者的血漿中約0.65小時(shí)至約0.8小時(shí)的中值富馬酸單甲酯終末消除半衰期(t1/2)；及

v)約1小時(shí)至約2小時(shí)的中值富馬酸單甲酯的吸收tlag。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物提供以下藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：

i)在所述受試者的血漿中約2.0μg/ml的平均富馬酸單甲酯cmax；

ii)在所述受試者的血漿中約4.2μg·hr/ml的平均富馬酸單甲酯auclast；

iii)在所述受試者的血漿中約3小時(shí)的中值富馬酸單甲酯tmax；

iv)在所述受試者的血漿中約0.75小時(shí)的中值富馬酸單甲酯終末消除半衰期(t1/2)；及

v)約1.5小時(shí)的中值富馬酸單甲酯吸收tlag。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物提供了以下藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)：

i)在所述受試者的血漿中約2.0μg/ml的平均富馬酸單甲酯cmax；

ii)在所述受試者的血漿中約4.2μg·hr/ml的平均富馬酸單甲酯auclast；及

iii)約1.5小時(shí)的平均富馬酸單甲酯吸收tlag。

在一個(gè)實(shí)施方案中，式(i)化合物是富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物組合物呈固體口服劑型。在另一實(shí)施方案中，該固體口服劑型包含約210mg至約630mg富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯，并且另外其中施用給受試者提供以下藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：

i)在所述受試者的血漿中約1.8μg/ml至約2.5μg/ml的平均富馬酸單甲酯cmax；

ii)在所述受試者的血漿中約4.0μg·hr/ml至約5.0μg·hr/ml的平均富馬酸單甲酯auclast；

iii)在所述受試者的血漿中約2.75小時(shí)至約3.5小時(shí)的中值富馬酸單甲酯tmax；

iv)在所述受試者的血漿中約0.65小時(shí)至約0.8小時(shí)的中值富馬酸單甲酯終末消除半衰期(t1/2)；及

v)約1小時(shí)至約2小時(shí)的中值富馬酸單甲酯的吸收tlag。

在另一實(shí)施方案中，該固體口服劑型含有約420mg富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

本文提供的藥物組合物還可以通過其藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)表征。如本文所使用，“藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)”描述了活性成分隨時(shí)間推移的體內(nèi)特征，包括例如，活性成分的血漿濃度。

如本文所使用，“cmax”意指活性成分或藥物(如富馬酸單甲酯(mmf))在最大濃度點(diǎn)的血漿濃度測量值。

如本文所使用，“tmax”是指活性成分或藥物(如mmf)的血漿濃度最高時(shí)的時(shí)間。

如本文所使用，“auc”是從一個(gè)時(shí)間到另一個(gè)時(shí)間測量的活性成分或藥物(如mmf)濃度(典型地，血漿濃度)相對(duì)于時(shí)間曲線下面積。

如本文所使用，“tlag”是指活性成分吸收滯后時(shí)間。

如本文所使用，“tl/2”是指活性成分或藥物(如mmf)在受試者中(典型地，在血漿中)的半衰期。

如本文所使用，“tlast”是指記錄數(shù)據(jù)的最終時(shí)間點(diǎn)。

如本文所使用，“％cv”是指受試者間的變異系數(shù)。

治療方法

神經(jīng)疾病是受試者腦部、脊髓或神經(jīng)的病癥。在一個(gè)實(shí)施方案中，神經(jīng)疾病是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘，或髓鞘退化為特征。髓鞘促進(jìn)神經(jīng)脈沖傳播通過神經(jīng)纖維或軸突。在另一實(shí)施方案中，神經(jīng)疾病選自由以下組成的組：多發(fā)性硬化(ms)、阿爾茨海默氏病、大腦麻痹、脊髓損傷、肌萎縮性側(cè)索硬化(als)、中風(fēng)、亨廷頓氏病、帕金森氏病、視神經(jīng)炎、德維克病(devicdisease)、橫貫性脊髓炎、急性播散性腦脊髓炎、腎上腺腦白質(zhì)營養(yǎng)不良和腎上腺脊髓神經(jīng)病、急性炎癥性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病(aidp)、慢性炎癥性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病(cidp)、急性橫貫性脊髓炎、進(jìn)行性多灶性白質(zhì)腦病(pml)、急性播散性腦脊髓炎(adem)，及其它遺傳性病癥，如腦白質(zhì)營養(yǎng)不良、萊伯氏視神經(jīng)萎縮(leber′sopticatrophy)及夏科-馬里-圖思病(charcot-marie-toothdisease)。在一些實(shí)施方案中，神經(jīng)病癥是自身免疫疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是多發(fā)性硬化。在另一實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是中風(fēng)。在另一實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是阿爾茨海默氏病。在另一實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是大腦麻痹。在另一實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是脊髓損傷。在另一實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是als。在另一實(shí)施方案中，該神經(jīng)疾病是亨廷頓氏病。參見例如，美國專利號(hào)8,007,826、wo2005/099701及wo2004/082684，各案以引用的方式整體并入。

ms存在四種主要臨床類型：1)復(fù)發(fā)-緩解型ms(rrms)，以明確確定的復(fù)發(fā)以及完全恢復(fù)或恢復(fù)后伴隨后遺癥和殘留缺陷為特征；時(shí)間介于以疾病未進(jìn)展為特征的疾病復(fù)發(fā)之間；2)繼發(fā)進(jìn)行性ms(spms)，以最初是復(fù)發(fā)緩解過程，隨后進(jìn)展并伴隨或不伴隨偶然復(fù)發(fā)、輕微緩解和穩(wěn)定期為特征；3)原發(fā)進(jìn)行性ms(ppms)，以發(fā)作時(shí)疾病進(jìn)展，伴隨偶然的穩(wěn)定期和所允許的暫時(shí)性輕微改善為特征；及4)進(jìn)行性復(fù)發(fā)型ms(prms)，以進(jìn)行性疾病發(fā)作，伴隨明顯急性發(fā)作，存在或不存在完全恢復(fù)為特征；時(shí)間介于以持續(xù)進(jìn)展為特征的復(fù)發(fā)之間。

在臨床上，該疾病最常表現(xiàn)為復(fù)發(fā)-緩解型疾病，并且在較低程度上，表現(xiàn)為神經(jīng)失常的穩(wěn)定進(jìn)展。復(fù)發(fā)-緩解型ms(rrms)呈現(xiàn)局灶性或多灶性神經(jīng)功能失常的反復(fù)發(fā)作形式。發(fā)作可能在多年內(nèi)隨機(jī)發(fā)生、緩解和復(fù)發(fā)。緩解通常是不完全的并且隨著發(fā)作接連發(fā)生，疾病逐步惡化并伴隨持久神經(jīng)系統(tǒng)缺陷的逐漸增加。對(duì)于大多數(shù)患者，rrms的常見發(fā)展以相關(guān)聯(lián)的反復(fù)復(fù)發(fā)，且最終發(fā)生疾病進(jìn)展為特征。該疾病接下來的發(fā)展是不可預(yù)測的，不過患有復(fù)發(fā)-緩解型疾病的大多數(shù)患者最終將發(fā)展繼發(fā)進(jìn)行性疾病。在復(fù)發(fā)-緩解期中，復(fù)發(fā)與臨床靜止期交替出現(xiàn)，并且取決于各階段之間神經(jīng)系統(tǒng)缺陷的存在，可能以或可能不以后遺癥為標(biāo)志。在復(fù)發(fā)-緩解期間每次復(fù)發(fā)之間的時(shí)間段在臨床上是恒定的。另一方面，如以上所定義以及從發(fā)作開始或在一段時(shí)間后，患有進(jìn)行性ms的患者展現(xiàn)缺陷的穩(wěn)定增加，但這一規(guī)定不排除新復(fù)發(fā)的進(jìn)一步發(fā)生。

本文提供了一種治療多發(fā)性硬化的方法，該方法包括向有需要的受試者施用治療有效量的本文所描述的藥物組合物。

本文還提供了一種治療神經(jīng)病癥的方法，該方法是通過向有需要的受試者施用治療有效量的以上描述的藥物組合物實(shí)現(xiàn)，所述藥物組合物包含式(i)化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽，

其中r¹、r⁶、r⁷、r⁸及r⁹如上文所述定義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物是富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

本文還提供了一種治療銀屑病的方法，該方法是通過向有需要的受試者施用治療有效量的以上描述的藥物組合物實(shí)現(xiàn)，所述藥物組合物包含式(i)化合物：

或其藥學(xué)上可接受的鹽，

其中r¹、r⁶、r⁷、r⁸及r⁹如上文所述定義。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物是富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

本文另外提供了降低當(dāng)前正用富馬酸二甲酯(如)治療或正考慮用富馬酸二甲酯治療的受試者發(fā)生藥物誘發(fā)的胃腸病癥的可能性的方法。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種降低當(dāng)前正用富馬酸二甲酯(如)治療或正考慮用富馬酸二甲酯治療的受試者發(fā)生藥物誘發(fā)的胃腸病癥的可能性的方法，該方法包括向所述受試者施用本發(fā)明的藥物組合物。在另一實(shí)施方案中，本文提供了一種降低當(dāng)前正用富馬酸二甲酯(如)治療或正考慮用富馬酸二甲酯治療的受試者發(fā)生藥物誘發(fā)的胃腸病癥的可能性的方法，該方法包括向所述受試者施用有效量的富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯。

在一個(gè)實(shí)施方案中，所述胃腸病癥選自由腹瀉、噯氣、胃腸氣脹、反胃及干嘔組成的組。在另一實(shí)施方案中，所述胃腸病癥是反胃。

本文還提供了降低用富馬酸二甲酯(如)治療的患者群中富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的患者間變化性的方法。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種降低用富馬酸二甲酯治療的患者群中富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的患者間變化性的方法，該方法包括施用有效量的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。

在一個(gè)實(shí)施方案中，富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)是平均cmax，并且另外其中在受試者的血漿中平均富馬酸單甲酯cmax達(dá)到約2.0μg/ml，并且％cv小于40％。

在一個(gè)實(shí)施方案中，富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)是平均auclast，并且另外其中在受試者的血漿中平均富馬酸單甲酯auclast達(dá)到約4.2μg·hr/ml，并且％cv小于35％。

本文還提供了治療患者群的神經(jīng)病癥的方法，所述方法包括向每位患者施用治療有效量的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種治療患者群的神經(jīng)病癥的方法，該方法包括向每位患者施用治療有效量的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽；

其中在所述患者群中富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的患者間變化性相對(duì)于用富馬酸二甲酯治療時(shí)的所述患者群減小。

在一個(gè)實(shí)施方案中，富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)是平均cmax，并且另外其中在受試者的血漿中平均富馬酸單甲酯cmax達(dá)到約2.0μg/ml，并且％cv小于40％。

在一個(gè)實(shí)施方案中，富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)是平均auclast，并且另外其中在受試者的血漿中平均富馬酸單甲酯auclast達(dá)到約4.2μg·hr/ml，并且％cv小于35％。

在一個(gè)實(shí)施方案中，神經(jīng)病癥是多發(fā)性硬化或銀屑病。

本文還提供了治療受試者的神經(jīng)病癥的方法，所述方法包括施用治療有效量的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了一種治療受試者的神經(jīng)病癥的方法，該方法包括施用治療有效量的式(i)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽；

其中所得富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)展現(xiàn)相對(duì)于用富馬酸二甲酯治療的患者群減小的變化性。

在一個(gè)實(shí)施方案中，富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)是平均cmax，并且另外其中在受試者的血漿中平均富馬酸單甲酯cmax達(dá)到約2.0μg/ml，并且％cv小于40％。

在一個(gè)實(shí)施方案中，富馬酸單甲酯藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)是平均auclast，并且另外其中在受試者的血漿中平均富馬酸單甲酯auclast達(dá)到約4.2μg·hr/ml，并且％cv小于35％。

在一個(gè)實(shí)施方案中，神經(jīng)病癥是多發(fā)性硬化或銀屑病。

如本文所使用，術(shù)語“治療(treating/treatment)”一種疾病、病癥或綜合癥，意指抑制該疾病、病癥或綜合癥，即，停滯其發(fā)展；以及減輕該疾病、病癥或綜合癥，即，使該疾病、病癥或綜合癥消退。

如本文所使用，術(shù)語“有效量”或“藥物有效量”或“治療有效量”是指足以提供所希望的生物學(xué)、治療和/或預(yù)防結(jié)果的藥劑量。這種結(jié)果可以是一種或多種疾病的病征、癥狀或病因的減少、改善、緩和、減輕、延遲和/或緩解，或是生物系統(tǒng)的任何其它所希望的改變。

如本文所使用，“有需要的受試者”是患有神經(jīng)疾病的受試者。在一個(gè)實(shí)施方案中，有需要的受試者患有多發(fā)性硬化?！笆茉囌摺卑ú溉閯?dòng)物。該哺乳動(dòng)物可以是例如任何哺乳動(dòng)物，例如人類、靈長類動(dòng)物、鳥類、小鼠、大鼠、家禽、狗、貓、牛、馬、山羊、駱駝、綿羊或豬。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述哺乳動(dòng)物是人類。

實(shí)驗(yàn)

實(shí)施例1-合成選定的式(i)化合物

一般程序1

向富馬酸單甲酯(mmf)(1.0當(dāng)量)和hbtu(1.5當(dāng)量)于二甲基甲酰胺(25ml/gmmf)中的混合物中添加hünigs堿(2.0當(dāng)量)。攪拌深褐色溶液10分鐘，此時(shí)溶液變?yōu)楹稚珣腋∫海S后添加醇(1.0-1.5當(dāng)量)。在室溫下攪拌反應(yīng)18小時(shí)。添加水，并將產(chǎn)物萃取至乙酸乙酯中三次。用水洗滌合并的有機(jī)層三次，用硫酸鎂干燥，過濾并在45℃下真空濃縮，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物通過硅膠色譜法純化，并在一些情況下通過用乙醚研磨進(jìn)一步純化，得到純凈的所需酯產(chǎn)物。所有醇都是可商購獲得的或是遵循已知的文獻(xiàn)程序制備的。

作為hbtu(六氟磷酸n，n，n′，n′-四甲基-o-(1h-苯并三唑-1-基)脲鎓)的替代，可以使用以下任一種偶合劑：edci/hobt(n-(3-二甲基氨基丙基)-n′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽/羥基苯并三唑水合物)；comu(六氟磷酸(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亞乙基氨基氧基)二甲基氨基-嗎啉基-碳鎓)；tbtu(四氟硼酸o-(苯并三唑-1-基)-n，n，n′，n′-四甲基脲鎓)；tatu(四氟硼酸o-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓)；oxyma((羥基亞氨基)氰基乙酸乙酯)；pybop(六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷磷鎓)；hott(六氟磷酸s-(1-氧橋-2-吡啶基)-n，n，n′，n′-四甲基硫脲鎓)；fdpp(二苯基亞膦酸五氟苯酯)；t3p(丙基膦酸酐)；dmtmm(四氟硼酸4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉鎓)；pyoxim([六氟磷酸乙基氰基(羥基亞氨基)乙酸根合-o²]三-1-吡咯烷基磷鎓)；tstu(四氟硼酸n，n，n′，n′-四甲基-o-(n-琥珀酰亞胺基)脲鎓)；tdbtu(四氟硼酸o-(3，4-二氫-4-氧代-1，2，3-苯并三嗪-3-基)-n，n，n′，n′-四甲基脲鎓)；tptu(四氟硼酸o-(2-氧代-1(2h)吡啶基)-n，n，n′，n′-四甲基脲鎓)；totu(四氟硼酸o-[(乙氧羰基)氰基亞甲基氨基]-n，n，n′，n′-四甲基脲鎓)；iidq(1，2-二氫-2-異丁氧基-1-喹啉甲酸異丁酯)；或pyciu(六氟磷酸氯代二吡咯烷基碳鎓)。

作為hünig堿(二異丙基乙胺)的替代，可以使用以下任一種胺堿：三乙胺；三丁胺；三苯胺；吡啶；盧剔啶(lutidine)(2，6-二甲基吡啶)；可力定(collidine)(2，4，6-三甲基吡啶)；咪唑；dmap(4-(二甲基氨基)吡啶)；dabco(1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷)；dbu(1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯)；dbn(1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯)；或質(zhì)子海綿(protonsponge)(n，n，n′，n′-四甲基-1，8-萘二胺)。

一般程序2-酯產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽

向酯產(chǎn)物于乙醚(25ml/g)的混合物中添加2mhcl的乙醚溶液(1.5當(dāng)量)。在室溫下攪拌混合物兩小時(shí)。傾析出溶劑，再添加乙醚并且再次傾析出溶劑。然后，在45℃下真空濃縮剩余混合物，并在真空烘箱中于55℃下再干燥18小時(shí)，得到固體hcl鹽。

一般程序3

在20℃下，向配備有磁力攪拌器和氮?dú)膺M(jìn)口/出口的100ml單頸圓底燒瓶中添加11ml含有新鮮制備的單甲基反富馬酰氯(4.9g，33mmol)的mtbe溶液和另外50mlmtbe。用冰水浴將所得黃色溶液冷卻至＜20℃。接著，在約10分鐘內(nèi)經(jīng)注射器逐滴添加醇(33mmol，1eq)。在＜20℃下攪拌反應(yīng)混合物10分鐘，之后移除冷卻浴并使反應(yīng)物升溫至20℃并在20℃溫度下攪拌16小時(shí)。在室溫下16小時(shí)后，tlc確定反應(yīng)完成。經(jīng)由中等玻璃燒結(jié)漏斗過濾反應(yīng)混合物，收集到灰白色固體。在真空烘箱中在25℃下干燥固體過夜，得到呈hcl鹽形式的終產(chǎn)物。所有醇都是可商購獲得的或是遵循已知的文獻(xiàn)程序制備的。

一般程序4-用適當(dāng)烷基氯進(jìn)行烷基化

在20至65℃下將富馬酸單甲酯(mmf)(1.3當(dāng)量)、烷基氯(1當(dāng)量)及碳酸鉀(1.5當(dāng)量)于乙腈或二甲基甲酰胺(50ml/gmmf)的混合物加熱過夜。使混合物在乙酸乙酯與飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配，并干燥(mgso4)有機(jī)相。過濾并減壓去除溶劑，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠色譜法進(jìn)一步純化。

化學(xué)分析/程序

本文所描述的nmr譜是使用本領(lǐng)域中已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，利用varian400mhznmr光譜儀獲得。

富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物1)

富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯1是遵循一般程序1合成(1.03g，35％)。

¹hnmr(400mhz，dmso)：δ6.81(2h，dd，j＝15.8hz)；4.36(2h，t，j＝5.3hz)；3.84(2h，t，j＝5.1hz)；3.80(3h，s)；2.73(4h，s)。[m+h]⁺＝256.07。

(2-(吡咯烷-1-基)乙基)富馬酸甲酯鹽酸鹽(化合物2)

(2-(吡咯烷-1-基)乙基)富馬酸甲酯鹽酸鹽2是遵循一般程序3合成。

¹hnmr(400mhz，dmso-d6)δ11.12(s，1h)，6.94(d，j＝15.8hz，1h)，6.82(d，j＝15.8hz，1h)，4.53-4.46(m，2h)，3.76(s，3h)，3.61-3.45(m，4h)，3.11-2.94(m，2h)，2.06-1.79(m，4h)。[m+h]⁺＝228.46。

富馬酸2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)乙酯甲酯鹽酸鹽(化合物3)

富馬酸2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)乙酯甲酯3是遵循一般程序1，由2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)乙醇合成

遵循一般程序2，將富馬酸2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)乙酯甲酯轉(zhuǎn)化成富馬酸2-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)乙酯甲酯鹽酸鹽(0.55g，69％)。

¹hnmr(300mhz，dmso)；δ6.79(2h，d)；4.20-4.39(2h，m)，3.81(2h，t)，3.66(3h，s)，3.53-3.65(4h，m)，2.54(2h，sep)。m/z[m+h]⁺＝264.14。

富馬酸2-(2，4-二氧代-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酯甲酯(化合物4)

在200℃下，在無溶劑情況下加熱3-氧雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，4-二酮(1.0g，8.9mmol)和乙醇胺(545mg，8.9mmol)2小時(shí)。通過硅膠色譜法(etoac)純化粗反應(yīng)混合物，得到3-(2-羥基乙基)-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，4-二酮(1.06g，77％)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)：δ3.71(2h，t)，3.56(2h，t)，2.51(2h，dd)，1.95(1h，brs)，1.59-1.43(2h，m)。

富馬酸2-(2，4-二氧代-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酯甲酯4是遵循一般程序1，由3-(2-羥基乙基)-3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，4-二酮合成(452mg，53％)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)：δ6.81(2h，d)，4.28(2h，t)，3.80(3h，s)，3.69(2h，t)，2.48(2h，dd)，1.59-1.49(1h，m)，1.44-1.38(1h，m)。m/z[m+h]⁺＝268.11。

富馬酸2-((3r，4s)-3，4-二甲基-2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物5)

外消旋富馬酸2-((3r，4s)-3，4-二甲基-2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯5是遵循一般程序1，由外消旋(3r，4s)-1-(2-羥基乙基)-3，4-二甲基吡咯烷-2，5-二酮合成(0.54g，44％)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)；6.81-6.80(2h，m)，4.37(2h，t)，3.82(2h，t)，3.80(3h，s)，3.00-2.88(2h，m)，1.25-1.18(6h，m)。m/z[m+h]⁺＝284.2

富馬酸2-(2，2-二甲基-5-氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物6)

經(jīng)10分鐘將丙烯酸叔丁酯(19.7ml，134.8mmol)逐滴添加至2-硝基丙烷和tritonb(40％的甲醇溶液)(440μl)于乙醇(50ml)中的回流溶液中。在回流下加熱反應(yīng)過夜。減壓去除反應(yīng)溶劑，得到粗殘余物，將其溶解于乙醇(200ml)中并使用雷尼鎳(約15g)氫化過夜(300psi)。經(jīng)由硅藻土過濾反應(yīng)物。減壓去除溶劑，得到4-氨基-4-甲基戊酸叔丁酯(15.82g，63％產(chǎn)率)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)：δ2.26(2h，t)，1.65(2h，t)，1.43(9h，s)，1.68(6h，s)。

向4-氨基-4-甲基戊酸叔丁酯(3.0g，16.04mmol)于甲醇(100ml)中的溶液中添加氯乙醛(45％的水溶液)(6.7ml，38.4mmol)，隨后添加乙酸(2ml，35.0mmol)。1.5小時(shí)后，添加氰基硼氫化鈉(1.51g，24.0mmol)并在室溫下攪拌混合物3小時(shí)。使反應(yīng)物在飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)與二氯甲烷(300ml)之間分配。干燥(mgso4)有機(jī)相。過濾并減壓去除溶劑，得到4-((2-氯乙基)氨基)-4-甲基戊酸叔丁酯(3.90g，98％產(chǎn)率)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)：δ3.63(2h，t)，2.85(2h，t)，2.24(2h，t)，1.67(2h，t)，1，44(9h，s)，1.07(6h，s)。

在室溫下攪拌4-((2-氯乙基)氨基)-4-甲基戊酸叔丁酯(3.9g，15.7mmol)和三氟乙酸(27ml)于二氯甲烷(80ml)中的混合物過夜。減壓濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物再溶解于二氯甲烷中并且再次濃縮。再重復(fù)此操作3次，直到去除大部分過量的三氟乙酸。將殘余物溶解于二氯甲烷(500ml)中并添加n-(3-二甲基氨基丙基)-n′-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(4.61g，24.1mmol)、羥基苯并三唑水合物(3.25g，24.1mmol)及二異丙基乙胺(21ml，120mmol)。在室溫下攪拌混合物過夜。用水(300ml)洗滌反應(yīng)物并干燥(mgso4)。過濾并減壓去除溶劑，得到粗殘余物，通過硅膠色譜法(庚烷至乙酸乙酯)純化，得到1-(2-氯乙基)-5，5-二甲基吡咯烷-2-酮(1.24g，44％產(chǎn)率)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)：δ3.61(2h，t)，3.41(2h，t)，2.38(2h，t)，1.88(2h，t)，1.24(6h，s)。

富馬酸2-(2，2-二甲基-5-氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯6是遵循一般程序4，由1-(2-氯乙基)-5，5-二甲基吡咯烷-2-酮合成(1.02g，41％)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)；6.85(2h，d)，4.33(2h，t)，3.80(3h，s)，3.41(2h，t)，2.39(2h，t)，1.88(2h，t)，1.23(6h，s)。m/z[m+h]⁺＝270.17。

富馬酸2-(1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)乙酯甲酯(化合物7)

富馬酸2-(1，3-二氧代異吲哚啉-2-基)乙酯甲酯7是遵循一般程序1，由2-(2-羥基乙基)異吲哚啉-1，3-二酮合成(0.63g，79％)。

¹hnmr(300mhz，meod)；7.87-7.77(4h，m)，6.74-6.73(2h，m)，4.45-4.40(2h，m)，4.01-3.96(2h，m)，3.76(3h，s)。m/z[m+h]⁺＝304.1

富馬酸2-(3，3-二甲基-2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物8)

富馬酸2-(3，3-二甲基-2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯8是遵循一般程序1，由1-(2-羥基乙基)-3，3-二甲基吡咯烷-2，5-二酮合成(0.72g，74％)。

¹hnmr(300mhz，cdcl3)；6.83(1h，d)，6.77(1h，d)，4.38(2h，t)，3.82(1h，t)，3.80(3h，s)，2.55(2h，s)，1.31(6h，s)。m/z[m+h]⁺＝284.1(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)富馬酸甲酯(化合物9)

(2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)富馬酸甲酯9是遵循一般程序1，由1-(2-羥基乙基)吡咯烷-2-酮合成(0.68g，73％)。

¹hnmr(300mhz，meod)；6.85(2h，s)，4.33(2h，t)，3.80(3h，s)，3.59(2h，t)，3.46(2h，t)，2.37(2h，t)，2.03(2h，dt)。[m+h]⁺＝242.1

實(shí)施例2.富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯(化合物1)的控制釋放組合物.

各種材料和設(shè)備的來源在整個(gè)實(shí)施例中指示。在未指示來源時(shí)，熟練技術(shù)人員將易于得到該材料和設(shè)備。在以下實(shí)施例中：“ep”意指歐洲藥典；“nf”意指國家處方集；及“usp”意指美國藥典。

實(shí)施例2.1.

2.1.1化合物1微型片劑芯(未包覆)

適用于根據(jù)本發(fā)明的組合物中的微型片劑芯是使用下表2.1.1中所陳述的材料制備。

表2.1.1.化合物1的微型片劑芯。

4.5kg規(guī)模的微型片劑芯制造如下：

1.摻混：使前藥(化合物1)、膠態(tài)二氧化硅及交聯(lián)聚維酮通過500微米篩網(wǎng)并裝入25l的v型壁摻混機(jī)中。將混合物以18rpm摻混15分鐘。接著添加硬脂酸鎂，隨后再以18rpm摻混5分鐘。

2.壓制：使用配備單頭沖頭的rivapiccola8沖壓片機(jī)(rivaeurope-aldershot，uk)將前一步驟的摻混物壓制成微型片劑，其中每個(gè)沖頭具有2mm的普通標(biāo)準(zhǔn)凹狀尖頭。所得微型片劑的重量是約8mg(范圍是7.2至8.8mg)，厚度是約2.00mm(+/-5％)并且硬度是約9n。

2.1.2化合物1延遲釋放微型片劑

通過將eudragitl100-55(0.210kg)溶解于異丙醇(ipa)與水(2.644kg)的60：40混合物中，并混入檸檬酸三乙酯(0.042kg)、膠態(tài)二氧化硅(0.042g)及滑石(0.042kg)來制備包衣分散體。使用vectorldcs-3包衣機(jī)(freund-vectorcorp，iowa，usa)將包衣溶液施加至來自第2.1.1部分的微型片劑芯。施加包衣獲得15％重量增加，對(duì)應(yīng)于約40-60μm的包衣厚度。

dr微型片劑的最終組成顯示于表2.1.2中。接著，將這些微型片劑填充于oo號(hào)hpmc膠囊中，達(dá)到所希望的化合物1濃度。舉例來說，將適當(dāng)數(shù)量的微型片劑填充于1、2或3個(gè)oo號(hào)膠囊中以達(dá)到49mg、70mg、105mg、210mg、420mg、455mg、630mg、840mg、980mg、1120mg及1470mg劑量濃度(所有重量都是前藥的毫克數(shù))。

表2.1.2.dr微型片劑組成。^[1]根據(jù)實(shí)施例1制備；^*在施加包衣期間使用純化水和異丙醇作為dr聚合物的溶劑，但如果存在，僅微量存在于最終組合物中；^**usp/nfeudragitl100-55，evonikindustriesag，essen，german

2.1.3體外釋放特征

表2.1.3展示了以上制備的囊封的延遲釋放微型片劑(455mg化合物1)的體外溶出特征。使用以下設(shè)備和條件，利用經(jīng)過驗(yàn)證的hplc方法測定總釋放量(即，mmf、化合物1及除mmf外的化合物1水解產(chǎn)物的組合濃度)：usp設(shè)備i(40目網(wǎng)籃)；轉(zhuǎn)速：150rpm；介質(zhì)：前兩小時(shí)，900ml1.0nhcl，之后換成ph6.8磷酸鹽緩沖液；溫度：37.0+/-0.5℃。

表2.1.3.oo號(hào)hpmc膠囊中化合物1延遲釋放微型片劑的溶出數(shù)據(jù)。

*兩小時(shí)后從1.0n鹽酸換成磷酸鹽緩沖液(ph6.8)。

表2.1.3中的數(shù)據(jù)描繪于圖3中，由這些數(shù)據(jù)可知，在從低ph環(huán)境換成ph6.8的磷酸鹽緩沖液后，前藥迅速釋放。這表明，施加至微型片劑的腸溶包衣在酸性介質(zhì)中保護(hù)前藥，而一旦微型片劑被換至磷酸鹽緩沖液中，即易于促進(jìn)釋放。

2.1.4穩(wěn)定性

在25℃/60％rh和40℃/75％rh的溫度/相對(duì)濕度條件下，將含有以上制備的微型片劑(455mg化合物1)的膠囊放到無干燥劑的hdpe感應(yīng)式密封瓶中以測試穩(wěn)定性。在儲(chǔ)存三個(gè)月(t＝3個(gè)月)后，觀察到良好穩(wěn)定性，并且在每組條件下，總雜質(zhì)小于0.2％。根據(jù)以上第1.3部分中陳述的方法測得在兩種情況下膠囊在t＝3個(gè)月時(shí)的體外釋放特征與t＝0時(shí)基本上相同(詳述于表2.1.3和圖3中)。

實(shí)施例2.2.

2.2.1微型片劑芯

根據(jù)第2.1.1部分中陳述的方法另外制備包含化合物1并且具有表2.2.1中展示的組成2(a)至2(f)的微型片劑芯。這些藥芯可以包覆有延遲釋放包衣，如第2.1.2部分中所述的包衣。

表2.2.1.化合物1dr微型片劑芯組成2(a)-2(f).^*材料來源遵照表2.1.2。

2.2.2dr包衣水平

使用具有表2.1.1中展示的組成的微型片劑芯制備包含化合物1并且具有不同水平的延遲釋放聚合物包衣的延遲釋放微型片劑。包衣分散體是根據(jù)第2.1.2部分制備，但省略膠態(tài)二氧化硅并且采用的溶劑系統(tǒng)是90∶10ipa/水混合物。包覆微型片劑芯達(dá)到2％、7％、12％及13％的重量增加水平(組成分別是2(g)至2(j))。溶出曲線(根據(jù)第2.1.3部分中陳述的方法繪制)顯示于圖4中。從圖中可以看出，每種組合物都提供良好的腸保護(hù)作用，并且在換成ph6.8磷酸鹽緩沖液之前，出現(xiàn)基本上零釋放。

實(shí)施例2.3.

根據(jù)表2.3.1中陳述的細(xì)節(jié)，使用three-tec的“微型擠出機(jī)”(配備有12mm雙螺桿和2mm圓形模具；three-tecgmbh，seon，switzerland)擠出化合物1與聚氧化乙烯(peo)的混合物。切斷擠出物條并滾圓(three-tec切斷器和滾圓機(jī)；three-tecgmbh，seon，switzerland)，得到滾圓的擠出的載藥藥芯。用腸溶包衣(根據(jù)以上表2.1.2，包含l100-55)包覆由此產(chǎn)生的擠出球粒達(dá)到15％重量增加。將擠出球粒填充于oo號(hào)hpmc膠囊中，得到455mg前藥濃度。

表2.3.1.擠出概述。(*前藥＝化合物1；polyox^tm303＝聚氧化乙烯7,000,000cp，polyox^tmn10＝聚氧化乙烯100,000；thedowchemicalcompany，midland，michigan，usa)

使用以上第2.1.3部分中描述的設(shè)備、方法及條件，但改用100rpm旋轉(zhuǎn)速度(而非實(shí)施例2.1中的150rpm)進(jìn)行含有未包覆的擠出球粒和被包覆的擠出球粒(455mg前藥)的膠囊的體外溶出。

發(fā)現(xiàn)未包覆的擠出球粒在ph6.8磷酸鹽緩沖液中于2小時(shí)內(nèi)釋放出基本上所有化合物1(及相關(guān)化合物，即mmf和除mmf外的化合物1水解產(chǎn)物)。帶有腸溶包衣的擠出球粒3(e)和3(f)的溶出曲線顯示于圖5中。從圖中可以看出，在酸性介質(zhì)中未觀察到釋放，表明腸溶包衣提供保護(hù)作用。在轉(zhuǎn)移至磷酸鹽緩沖液中后，在約2小時(shí)內(nèi)迅速并且完全地釋放。這種在去除腸溶包衣后發(fā)生的立即、突然釋放與關(guān)于未包覆的擠出球粒所觀察到的迅速釋放一致。

發(fā)現(xiàn)基于表2.3.1的組成3(e)的未加工擠出物、滾圓的藥芯及經(jīng)包覆的球粒在25℃/60％rh和40℃/75％rh下儲(chǔ)存三個(gè)月后仍具有良好穩(wěn)定性。在每種情況下，在三個(gè)月時(shí)間點(diǎn)時(shí)都觀察到超過99.95％的測定值和小于0.05％的總雜質(zhì)。

實(shí)施例3-含有化合物1的延遲釋放(dr)劑型的安全性、耐受性及藥物動(dòng)力學(xué)(第1部分)

在健康受試者中進(jìn)行隨機(jī)化、雙盲、安慰劑對(duì)照的連續(xù)單次遞增劑量研究以研究含有來自實(shí)施例2.1的化合物1延遲釋放(dr)微型片劑的膠囊(“化合物1dr膠囊”)的安全性、耐受性及藥物動(dòng)力學(xué)。包括至多7組，每組納入8位受試者。在每個(gè)組中，在空腹條件下，6位受試者接受化合物1dr膠囊并且2位受試者用安慰劑治療。所研究的化合物1劑量是49mg(第1組)、105mg(第2組)、210mg(第3組)、420mg(第4組)、630mg(第5組)、840mg(第6組)及980mg(第7組)(所有重量都是前藥的毫克數(shù))。

在給藥前及給藥后0.25小時(shí)、0.50小時(shí)、1小時(shí)、1.50小時(shí)、2小時(shí)、2.50小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)及24小時(shí)，從所有受試者收集血液樣品。使用驗(yàn)證的lc-ms/ms方法分析從血液樣品獲得的血漿中的化合物1、mmf及另一代謝物。使用6.3版phoenixwinnonlin，經(jīng)由非房室分析(nca)來分析血漿濃度-時(shí)間曲線。

口服化合物1后mmf的平均血漿濃度顯示于圖6中。施用化合物1的受試者中的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)cmax和auclast顯示于圖7和圖8中。表3.1概述了所研究的每一化合物1劑量水平的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。試驗(yàn)期間，藥物是良好耐受的，并且全部56位受試者都完成了研究?；衔?在血漿中迅速轉(zhuǎn)化成其代謝物mmf。隨著化合物1劑量水平增加，mmf暴露量增加。

無死亡、無嚴(yán)重不良事件(ae)、無重度ae并且無導(dǎo)致中斷研究的ae。所有ae都是輕度的，但有兩例中度事件(一例事件是在840mg時(shí)發(fā)生的潮紅，及一例事件是在980mg時(shí)與輕度體位性低血壓事件有關(guān)的暈厥)。最常見的ae是潮紅和胃腸(gi)相關(guān)ae。在劑量水平≥420mg時(shí)，有＞50％的受試者發(fā)生潮紅，并且主要在最高劑量水平980mg下觀察到gi相關(guān)ae的發(fā)生。參見表3.2。關(guān)于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)、ecg或生命體征并無臨床上顯著的發(fā)現(xiàn)(暈厥/體位性低血壓事件除外)。

表3.1

n＝6位受試者的平均值(sd)

^an＝1至5位受試者的平均值

^b中值(范圍)

表3.2.根據(jù)劑量水平發(fā)生gi相關(guān)ae和潮紅ae的受試者(第1部分)

應(yīng)注意：soc＝系統(tǒng)器官分類

實(shí)施例4-有關(guān)在健康受試者中比較420mg化合物1延遲釋放(dr)劑型相對(duì)于240mg富馬酸二甲酯(dmf)的安全性、耐受性及藥物動(dòng)力學(xué)的i期研究(第2部分)

進(jìn)行隨機(jī)化、雙盲、安慰劑對(duì)照、2種治療、2個(gè)階段交叉研究，以研究化合物1dr和dmf口服劑型的安全性、耐受性及藥物動(dòng)力學(xué)。(本研究中使用的dmf口服劑型是(biogenidec，inccambridge，ma，usa))。招募總計(jì)16位受試者并隨機(jī)分入治療程序中。

在程序1中，六位受試者在空腹條件下口服420mg化合物1dr(給藥期1)，隨后口服240mgdmf(給藥期2)。每一給藥期間隔7天的清除(wash-out)期。

在程序2中，六位受試者在空腹條件下口服240mgdmf(給藥期1)，隨后口服420mg化合物1dr(給藥期2)。每一給藥期間隔7天的清除期。

在程序3中，四位受試者在兩個(gè)給藥期(給藥期1和給藥期2)間在空腹條件下接受安慰劑治療。每一給藥期間隔7天的清除期。

在給藥前及給藥后0.25小時(shí)、0.50小時(shí)、1小時(shí)、1.50小時(shí)、2小時(shí)、2.50小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、8小時(shí)、10小時(shí)、12小時(shí)及24小時(shí)，從所有受試者收集血液樣品。使用驗(yàn)證的lc-ms/ms方法分析從血液樣品獲得的血漿中的化合物1、mmf及另一代謝物。使用6.3版phoenixwinnonlin，經(jīng)由非房室分析(nca)來分析血漿濃度-時(shí)間曲線。

兩個(gè)治療程序中的所有受試者都完成研究。在兩種治療后mmf的平均血漿濃度顯示于圖9中。表4.1概述了這兩個(gè)治療組的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。相較于dmf，化合物1治療組中mmf的最大血漿濃度(cmax)減小約34％。當(dāng)與dmf(0.5小時(shí))相比較時(shí)，化合物1dr劑型的中值吸收滯后時(shí)間(tlag)較長(1.5小時(shí))。然而，這兩種劑型之間的mmf暴露量(通過auclast測量)相當(dāng)。另外，如從相對(duì)較低的％cv值可知，用化合物1劑型治療引起的pk變化性低于dmf治療(表4.1)。

無死亡、無嚴(yán)重ae、無重度ae并且無導(dǎo)致中斷研究的ae。所有ae都是輕度的，但有兩例中度事件(一例事件是潮紅及一例事件是用dmf治療的兩位受試者發(fā)生的干嘔)。最常見的ae是潮紅和gi相關(guān)ae。參見表4.2。潮紅見于8位(66.7％)用dmf治療的受試者及8位(66.7％)用化合物1治療的受試者。相比之下，gi相關(guān)ae見于5位(41.7％)用dmf治療的受試者及1位(8.3％)用化合物1治療的受試者。關(guān)于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)、ecg或生命體征并無臨床上顯著的發(fā)現(xiàn)。

在該用化合物1治療的受試者中所見的單一gi相關(guān)ae是在給藥后約40小時(shí)發(fā)生的便秘事件，并且研究人員認(rèn)為與研究藥物無關(guān)。經(jīng)歷明顯gi相關(guān)ae的受試者僅在用dmf治療后發(fā)生，并且包括3位(25％)受試者出現(xiàn)反胃，1位(8.3％)受試者出現(xiàn)腹瀉，及1位(8.3％)受試者出現(xiàn)干嘔(1位受試者經(jīng)歷全部三個(gè)事件)。

與化合物1dr的tlag長于dmf的發(fā)現(xiàn)一致，相較于dmf(平均發(fā)作時(shí)間1.2小時(shí))，用化合物1dr(平均發(fā)作時(shí)間2.6小時(shí))使潮紅事件延遲。

表4.1

^an＝5至8位受試者的平均值

^b中值(范圍)

表4.2.治療組中發(fā)生gi相關(guān)ae和潮紅ae的受試者(第2部分)

第1組與第2組之間的血漿富馬酸單甲酯暴露量(auclast)相當(dāng)。意外的是，盡管富馬酸單甲酯的等效劑量基本上相同，但相較于富馬酸二甲酯，在施用富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯后，富馬酸單甲酯的cmax減小約34％。此外還觀察到，相較于施用富馬酸二甲酯的受試者，在施用富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯的受試者間藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)cmax和auclast的變化較小(圖10和圖11)。此外，施用富馬酸2-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)乙酯甲酯的受試者的中值吸收滯后時(shí)間是1.5小時(shí)，與施用富馬酸二甲酯的受試者的0.5小時(shí)形成對(duì)比(圖9)。