本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種中藥組合物的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

急慢性胃腸炎是消化系統(tǒng)常見病，由于炎癥反應(yīng)及胃腸道平滑肌痙攣等原因，其主要癥狀是嘔吐、泄瀉、胃腸功能紊亂。

急性胃炎是指各種外在和內(nèi)在因素引起的急性廣泛性或局限性的胃黏膜急性炎癥；疾病誘因多樣，包括急性應(yīng)激、藥物、缺血、膽汁反流和感染等，臨床癥狀主要表現(xiàn)為上腹疼痛、腹脹不適、惡心、嘔吐，有時(shí)伴腹瀉，食欲下降等癥狀。寒邪客胃證是因外感寒邪，脘腹受涼；或過(guò)食寒涼傷中，氣機(jī)凝滯，胃氣不和，收引作痛；主癥為上腹疼痛、腹脹、惡心、嘔吐；次癥為惡寒喜暖、得溫痛減。

西醫(yī)對(duì)急慢性胃腸炎的治療主要是運(yùn)用抗生素進(jìn)行消炎、止痛、抗感染治療，或是采用激素治療包括灌腸治療，很多藥物只是止痛、消炎、消腫等，還是以癥狀的控制為主，雖然都可以暫時(shí)緩解其癥狀，但是治標(biāo)不治本，治療費(fèi)用高，治療時(shí)間長(zhǎng)，經(jīng)常反復(fù)，久治不愈，嚴(yán)重影響了患者的工作和生活，因此，提供一種高效無(wú)害的治療急慢性胃腸炎的藥物具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處而提供一種中藥組合物在制備治療急慢性胃腸炎的藥物中的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種中藥組合物在制備治療急慢性胃腸炎的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述中藥組合物包含以下重量份的組分：樟腦20～40份、水楊酸甲酯200～300份、松節(jié)油80～110份、薄荷素油200～300份、丁香羅勒油10～20份、樟油100～200份、八角茴香油10～30份、肉桂油10～30份、冰片2～4份、薄荷腦20～35份、桉油30～50份、茶油提取物40～120份。

優(yōu)選地，所述茶油提取物從茶油組合物中提取制得，所述茶油組合物包含以下重量份的組分：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長(zhǎng)卿1.0份、山銀花0.5份、救必應(yīng)0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風(fēng)0.25份、金耳環(huán)0.25份、一朵云0.25份、吊黃0.25份。

更優(yōu)選地，所述茶油組合物還包含以下重量份的組分：兩面針1.0份、九里香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千里光1.0份、大頭陳1.0份、當(dāng)歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節(jié)風(fēng)1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨(dú)活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細(xì)辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應(yīng)0.5份、地稔0.5份、防風(fēng)0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側(cè)柏葉0.25份、魚腥草0.25份。

優(yōu)選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎后用茶油浸漬提取，所述茶油的重量份為50～200份；更優(yōu)選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎后用二氧化碳超臨界法或水蒸氣蒸餾法提取，再用茶油定容得到的。

優(yōu)選地，所述急慢性胃腸炎為急性胃炎。

中醫(yī)理論認(rèn)為，“卒然而嘔吐，定是邪客胃府”(《古今醫(yī)筑·嘔吐噦門》)；“泄瀉之本，無(wú)不由于脾胃(《景岳全書·淮瀉》)，可見急慢性腸胃炎病位在脾胃，故中醫(yī)臨床治療以健運(yùn)脾胃、止吐降逆為主。本發(fā)明所述中藥組合物包括兩面針、徐長(zhǎng)卿、九里香、辛夷花、紅花、水芙蓉、還魂草、金不換、千里光、大頭陳、當(dāng)歸、鵝不食草、三七、腫節(jié)風(fēng)、雞骨香、砂仁、獨(dú)活、羌活、姜皮、陳皮、香附、野菊花、山白芷、桂枝、小羅傘、蔓荊子、桔梗、紫珠葉、地膽草、細(xì)辛、五指柑、肉豆蔻、木防己、三叉苦、金銀花、救必應(yīng)、白半楓荷、山蒼子、麻黃、地稔、防風(fēng)、半枝蓮、鐵包金、柴胡、飛天蠄蟧、雞骨草、荊芥、虎杖、鉤藤、一枝黃花、白花燈籠、白花蛇舌草、人字草、金線風(fēng)、石仙桃、五月艾、皂角刺、木香、山芝麻、益母草、紫蘇葉、倒扣草、側(cè)柏葉、金耳環(huán)、一朵云、七葉一枝花、魚腥草、吊黃、樟腦、水楊酸甲酯、松節(jié)油、薄荷油、丁香羅勒油、樟油、八角茴香油、肉桂油、冰片、薄荷腦、桉油等成分，輔料為茶油，具有祛風(fēng)解毒、消腫止痛的功能，已制作成中藥外用搽劑，在臨床應(yīng)用于治療感冒頭痛、蟲蚊咬傷、無(wú)名腫毒、舟車眩暈等多年，評(píng)價(jià)良好、療效確切、安全性好。根據(jù)所述中藥組合物組方特點(diǎn)、藥理藥效研究結(jié)果以及民間臨床用藥，對(duì)所述中藥組合物用于制備治療急慢性胃腸炎的藥物中的應(yīng)用進(jìn)行了研究，進(jìn)行了以安慰劑平行對(duì)照，分層區(qū)組隨機(jī)、雙盲、多中心臨床試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)所述中藥組合物對(duì)腹痛、腹脹、惡心、嘔吐等癥狀均有很好的改善作用，通過(guò)所述組合物對(duì)治療急性胃炎(寒邪客胃證)臨床癥狀的研究發(fā)現(xiàn)，由所述組合物制備的藥物，對(duì)治療急慢性胃腸炎，具有較好的臨床療效，且因?yàn)樗鼋M合物為中藥配方，安全性好。

優(yōu)選地，所述治療急慢性胃腸炎的藥物為外用制劑或口服制劑，

更優(yōu)選地，所述外用制劑為外用搽劑，所述口服制劑為軟膠囊劑。

優(yōu)選地，所述中藥外用搽劑的制備方法為：將所述中藥組合物中除樟腦、水楊酸甲酯、松節(jié)油、薄荷油、丁香羅勒油、樟油、八角茴香油、肉桂油、冰片、薄荷腦、桉油十一味成分外，其余兩面針等六十八味成分加適量茶油，浸漬15天，過(guò)濾，濾液中加入樟腦、水楊酸甲酯、松節(jié)油、薄荷油、丁香羅勒油、樟油、八角茴香油、肉桂油、冰片、薄荷腦、桉油十一味成分及適量葉綠素，攪拌，靜置5天，取澄清液，加茶油制成1000ml，即得所述搽劑。

本發(fā)明還提供一種治療急慢性胃腸炎的藥物，所述藥物包含有效量的中藥組合物和藥學(xué)上可接受的輔料，所述中藥組合物包含以下重量份的組分：樟腦20～40份、水楊酸甲酯200～300份、松節(jié)油80～110份、薄荷素油200～300份、丁香羅勒油10～20份、樟油100～200份、八角茴香油10～30份、肉桂油10～30份、冰片2～4份、薄荷腦20～35份、桉油30～50份、茶油提取物40～120份。

優(yōu)選地，所述茶油提取物從茶油組合物中提取制得，所述茶油組合物包含以下重量份的組分：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長(zhǎng)卿1.0份、山銀花0.5份、救必應(yīng)0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風(fēng)0.25份、金耳環(huán)0.25份、一朵云0.25份、吊黃0.25份。

更優(yōu)選地，所述茶油組合物還包含以下重量份的組分：兩面針1.0份、九里香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千里光1.0份、大頭陳1.0份、當(dāng)歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節(jié)風(fēng)1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨(dú)活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細(xì)辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應(yīng)0.5份、地稔0.5份、防風(fēng)0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側(cè)柏葉0.25份、魚腥草0.25份。

優(yōu)選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎后用茶油浸漬提取。更優(yōu)選地，所述中藥組合物的茶油提取物是由上述中藥組合物粉碎后用二氧化碳超臨界法或水蒸氣蒸餾法提取，再用茶油定容得到的。

優(yōu)選地，所述藥物為外用制劑或口服制劑。

優(yōu)選地，所述口服制劑為軟膠囊劑。

優(yōu)選地，所述治療急慢性胃腸炎的藥物為一種中藥外用搽劑。

相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明將所述中藥組合物應(yīng)用于制備治療急慢性胃腸炎的藥物，從病發(fā)本質(zhì)機(jī)理出發(fā)，成分為中藥配方，無(wú)毒無(wú)副作用，臨床研究發(fā)現(xiàn)所述藥物對(duì)腹痛、腹脹、惡心、嘔吐等癥狀均有很好的改善作用，對(duì)治療急慢性胃腸炎，尤其是急性胃炎(寒邪客胃證)具有很好的臨床療效。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明所制備治療急慢性腸胃炎藥物對(duì)ACH的對(duì)抗作用圖；

圖2為風(fēng)油精對(duì)ACH的對(duì)抗作用圖；

圖3為正常家兔小腸平滑肌加入ACH后的影響圖。

具體實(shí)施方式

為更好的說(shuō)明本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)，下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。

實(shí)施例1

本發(fā)明所述治療急慢性胃腸炎的藥物，本實(shí)施例所述藥物包含以下重量份的成分：

中藥組合物A：樟腦20份、水楊酸甲酯300份、松節(jié)油80份、薄荷素油300份、丁香羅勒油10份、樟油200份、八角茴香油10份、肉桂油30份、冰片2份、薄荷腦35份、桉油50份、茶油提取物40份；

其中，所述茶油提取物是由十八種中藥組合物粉碎后，再用50份茶油(由廣東羅浮山藥業(yè)有限公司提供)浸漬提取所得，所述茶油提取物包括以下重量份的十八種中藥組合物：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長(zhǎng)卿1.0份、山銀花0.5份、救必應(yīng)0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風(fēng)0.25份、金耳環(huán)0.25份、一朵云0.25份、吊黃0.25份；

制備方法

將所有中藥材粉碎成細(xì)粉，用茶油浸漬15天，濾過(guò)，與中藥組合物中除茶油提取物外的十一種精油混合，攪拌，靜置5天，取澄清液，加茶油稀釋，制成軟膠囊內(nèi)容物。囊材配比：明膠、甘油和水的比例為1：0.3：0.9。用壓制法制成軟膠囊。

實(shí)施例2

本發(fā)明所述治療急慢性胃腸炎的藥物，本實(shí)施例所述藥物為一種中藥外用搽劑，包含以下重量份的成分：

中藥組合物A：樟腦40份、水楊酸甲酯200份、松節(jié)油110份、薄荷素油200份、丁香羅勒油20份、樟油100份、八角茴香油30份、肉桂油10份、冰片4份、薄荷腦20份、桉油30份、茶油提取物120份；

其中，所述茶油提取物包括以下重量份的中藥組合物B：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長(zhǎng)卿1.0份、山銀花0.5份、救必應(yīng)0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風(fēng)0.25份、金耳環(huán)0.25份、一朵云0.25份、吊黃0.25份、兩面針1.0份、九里香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千里光1.0份、大頭陳1.0份、當(dāng)歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節(jié)風(fēng)1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨(dú)活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細(xì)辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應(yīng)0.5份、地稔0.5份、防風(fēng)0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側(cè)柏葉0.25份、魚腥草0.25份；

將組合物B中各成分混合粉碎成粗粉，混勻，加適量茶油，50℃浸漬15天，趁熱用300目篩濾過(guò)，濾液放置至室溫，再用400目篩濾過(guò)，濾液中加入組合物A中除茶油提取物以外的其他十一味成分及0.02g葉綠素，攪拌，靜置24小時(shí)，濾過(guò)，濾液加茶油制成1000ml，即得所述外用搽劑。

以下實(shí)施例中所用“本發(fā)明中所述的中藥組合物”包含以下重量份的組分：樟腦20～40份、水楊酸甲酯200～300份、松節(jié)油80～110份、薄荷素油200～300份、丁香羅勒油10～20份、樟油100～200份、八角茴香油10～30份、肉桂油10～30份、冰片2～4份、薄荷腦20～35份、桉油30～50份、茶油提取物40～120份。其中，所述茶油提取物從茶油組合物中提取制得，所述茶油組合物包含以下重量份的組分：卷柏1.0份、鵝不食草1.0份、水芙蓉1.0份、辛夷1.0份、山白芷0.5份、徐長(zhǎng)卿1.0份、山銀花0.5份、救必應(yīng)0.5份、金不換1.0份、白半楓荷0.5份、蓽澄茄0.5份、麻黃0.5份、重樓0.25份、人字草0.25份、金線風(fēng)0.25份、金耳環(huán)0.25份、一朵云0.25份、吊黃0.25份。更佳地，所述茶油組合物還包括以下重量份的組分：兩面針1.0份、九里香1.0份、紅花1.0份、水芙蓉1.0份、千里光1.0份、大頭陳1.0份、當(dāng)歸1.0份、鵝不食草1.0份、三七1.0份、腫節(jié)風(fēng)1.0份、雞骨香1.0份、砂仁0.55份、獨(dú)活0.55份、羌活0.55份、姜皮0.55份、陳皮0.55份、香附0.5份、野菊花0.5份、桂枝0.5份、小羅傘0.5份、蔓荊子0.5份、桔梗0.5份、紫珠葉0.5份、地膽草0.5份、細(xì)辛0.5份、五指柑0.5份、肉豆蔻0.5份、木防己0.5份、三叉苦0.5份、救必應(yīng)0.5份、地稔0.5份、防風(fēng)0.5份、半枝蓮0.5份、鐵包金0.5份、柴胡0.5份、飛天蠄蟧0.5份、雞骨草0.5份、荊芥0.5份、虎杖0.5份、鉤藤0.5份、一枝黃花0.45份、白花燈籠0.43份、白花蛇舌草0.43份、石仙桃0.25份、五月艾0.25份、皂角刺0.25份、木香0.25份、山芝麻0.25份、益母草0.25份、紫蘇葉0.25份、倒扣草0.25份、側(cè)柏葉0.25份、魚腥草0.25份。

實(shí)施例3

對(duì)本發(fā)明所制備得到治療急慢性腸胃炎藥物進(jìn)行抗炎實(shí)驗(yàn)研究。

實(shí)驗(yàn)試劑:吲哚美辛搽劑(進(jìn)口藥品注冊(cè)證號(hào)H20050406，批號(hào)：CBD7E，興和株式會(huì)社)；茶油，廣東羅浮山藥業(yè)有限公司提供；水合氯醛，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20080118。

藥物劑量：小鼠高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；吲哚美辛組0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。大鼠高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；吲哚美辛組0.2ml、空白組使用茶油0.4ml。

試驗(yàn)動(dòng)物：KM小鼠，雌雄兼用，體重18～22g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A003)；SD大鼠，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A002)。。

統(tǒng)計(jì)方法結(jié)果以表示，采用SPSS 11統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

①對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響

取KM小鼠60只，體重18～22g，雌雄兼用，隨機(jī)分為空白組，本發(fā)明所制備治療急慢性腸胃炎藥物高、中、低劑量組和吲哚美辛組，每組12只。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位，給藥劑量如表1，給藥方式為涂抹，給藥3d，末次給藥30min后用100％二甲苯0.1ml使用小鼠右耳的兩側(cè)致炎，左耳不涂做對(duì)照，涂藥后20min將小鼠處死，剪下兩耳，用直徑為0.8mm的打孔器切下兩耳圓形耳片，立即稱重，計(jì)算耳腫脹率，結(jié)果見表1所示。

表1本發(fā)明所制備治療急慢性腸胃炎藥物對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響(n＝12；)

注：與空白組比較*P<0.05**P<0.01

結(jié)果表明，本發(fā)明中所述的中藥組合物各劑量組和吲哚美辛組與空白組比較腫脹率均有減輕，其中本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中劑量的作用最強(qiáng)(P<0.01)，說(shuō)明對(duì)本發(fā)明中所述的中藥組合物二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用。

②對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響

選SD大鼠50只，體重180～220g，雌雄兼用，用3.5％水合氯醛麻醉后，于無(wú)菌條件下，在其背部切開小口，用眼科鑷將重量為10mg的滅菌棉球從小切口植入皮下，隨即縫合皮膚，用碘液、青霉素和氯霉素消毒后常規(guī)飼養(yǎng)備用。手術(shù)次日取造模成功大鼠50只，隨機(jī)分為模型組，本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組和吲哚美辛組，每組10只。將大鼠腹部部分剃毛做給藥部位，在手術(shù)次日開始給藥，給藥劑量如表2，給藥方式為涂抹，連續(xù)15d。15d后處死大鼠，打開原切口，將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出，剔除脂肪組織，放烘箱中60℃烘干12h至恒重，稱干重，減去棉球原重量即得肉芽腫的重量。結(jié)果見表2所示。

表2本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)大鼠棉球肉芽腫引起的慢性炎癥的影響(n＝10；)

注：與模型組比較*P<0.05**P<0.01

結(jié)果表明，與模型組比較，本發(fā)明中所述的中藥組合物各劑量組和吲哚美辛組均可降低棉球肉芽腫的干重。其中本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中劑量的作用最強(qiáng)(P<0.01)，說(shuō)明本發(fā)明中所述的中藥組合物有明顯抑制肉芽組織增生的作用。

實(shí)驗(yàn)例4

對(duì)本發(fā)明中所述的中藥組合物進(jìn)行抑菌試驗(yàn)研究。

①體外抑菌

試驗(yàn)藥物：本發(fā)明中所述的中藥組合物。

試驗(yàn)菌種：選用4種有代表性的引起皮膚感染的常見病原菌和條件致病菌：金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌，菌種均來(lái)自北京衛(wèi)生部生物制品研究所。

試驗(yàn)方法：(1)菌液制備：將不同菌株新鮮培養(yǎng)物(菌落)制成菌液.濃度相當(dāng)于0.5麥?zhǔn)媳葷峁堋?2)藥液制備：將本發(fā)明中所述的中藥組合物，每1ml藥液加0.4吐溫80助溶，再用營(yíng)養(yǎng)肉湯配置成0.2g/ml使用。(3)含藥試管制備取滅菌試管10只，第1管無(wú)菌操作加入2ml l M—H培養(yǎng)液作空白對(duì)照管，第2～9管無(wú)菌操作加入1ml菌液.第2管再加入1ml藥液，混勻后取1ml加入第3管，第4～9管依次倍比稀釋，第10管加入2ml菌液作陽(yáng)性對(duì)照管，35℃培養(yǎng)24～48h，觀察本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)4種致病菌的抑菌作用，結(jié)果見表3。

表3本發(fā)明中所述的中藥組合物體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)金黃色葡萄球菌最低抑菌濃度為0.00625g/ml、對(duì)乙型溶血性鏈球菌最低抑菌濃度為0.00151g/ml、對(duì)大腸桿菌最低抑菌濃度為0.00625g/ml、對(duì)綠膿桿菌最低抑菌濃度為0.2g/ml。說(shuō)明本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌等4種菌有一定的抑制作用。

②體內(nèi)抑菌

試驗(yàn)藥物：本發(fā)明中所述的中藥組合物。

試驗(yàn)菌種：大腸桿菌，菌種來(lái)自北京衛(wèi)生部生物制品研究所。

藥物劑量：小鼠高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；云南白藥酊組0.1ml；模型組使用茶油0.2ml。

試驗(yàn)動(dòng)物：KM小鼠，雌雄各半，體重18～22g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A003)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：取KM小鼠300只，體重18～22g，雌雄兼用，隨機(jī)分為5組，空白對(duì)照組、云南白藥酊組，本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組，每組20只。每鼠腹腔注射大腸桿菌菌懸液0.5ml。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位。于接種菌液前3d和感染后4d，按表4中所示劑量分別給藥，給藥方式為涂抹，共給藥7d。各組小鼠正常飼養(yǎng)，記錄各組動(dòng)物死亡情況，以動(dòng)物的死亡率來(lái)評(píng)價(jià)藥物的療效，結(jié)果見表4。

表4本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)大腸桿菌感染小鼠的治療作用

注：與空白組比較*P<0.05**P<0.01

結(jié)果表明，本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中劑量組對(duì)大腸桿菌感染小鼠具有較好的抗感染作用，且呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。

實(shí)驗(yàn)例5

對(duì)本發(fā)明中所述的中藥組合物進(jìn)行鎮(zhèn)痛試驗(yàn)研究。

藥物與試劑：本發(fā)明中所述的中藥組合物；云南白藥酊(國(guó)藥準(zhǔn)字Z53021238，批號(hào)：20080108，云南白藥集團(tuán)股份有限公司)；茶油，廣東羅浮山藥業(yè)有限公司。

藥物劑量：小鼠高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；云南白藥酊組0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。

試驗(yàn)動(dòng)物：KM小鼠，60只，雌雄各半，75只雌性，體重18～22g，均購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A003)。

統(tǒng)計(jì)方法結(jié)果以表示，采用SPSS 11統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：扭體法：取KM小鼠60只，體重18～22g，雌雄兼用，隨機(jī)分為空白組，本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組和云南白藥酊組，每組12只，分別對(duì)本發(fā)明所制得藥物進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn)。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位。給藥7d，給藥劑量如表5。于末次給藥60min后腹腔注射0.8％醋酸溶液0.2ml/只，觀察10min內(nèi)每只小鼠第一次因疼痛引起扭體的時(shí)間(扭體潛伏期)和扭體次數(shù)。結(jié)果見表5。

表5本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)醋酸致小鼠疼痛扭體的影響(n＝12；)

注：與空白組比較*P<0.05**P<0.01

結(jié)果表明，本發(fā)明中所述的中藥組合物各劑量組和云南白藥組小鼠扭體數(shù)與空白組相比均減少，扭體潛伏期延長(zhǎng)，其中本發(fā)明中所述的中藥組合物高劑量的作用最強(qiáng)(P<0.01)，說(shuō)明對(duì)醋酸致小鼠疼痛扭體有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

實(shí)驗(yàn)例6

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：KM小鼠，雌雄各半，體重18～22g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A003)

實(shí)驗(yàn)藥物:高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；阿托品組每日皮下注射0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。所使用的硫酸阿托品注射液(國(guó)藥準(zhǔn)字H31021172，批號(hào)：080301，上海禾豐制藥有限公司)；茶油，廣東羅浮山藥業(yè)有限公司。

統(tǒng)計(jì)方法結(jié)果以表示，采用SPSS 11統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

取KM小鼠75只，體重18～22g，雌雄兼用，隨機(jī)分為空白組，本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組和阿托品組，每組15只。將小鼠腹部部分剃毛做給藥部位，高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.2ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.05ml、用茶油配至0.2ml；阿托品組每日皮下注射0.1ml；空白組使用茶油0.2ml。連續(xù)給藥3d，給藥方式涂抹，給藥劑量如下，于末次給藥后，將已禁食不禁水18h的小鼠分別灌胃給予半固體營(yíng)養(yǎng)糊4％CMC-Na，每只0.8ml。20min后脫頸椎處死，打開腹腔，結(jié)扎胃賁門和幽門，取胃，用濾紙拭于后稱全胃重，然后沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物，拭干稱凈重。以胃全重和胃凈重的差值為胃內(nèi)殘留物重，計(jì)算胃內(nèi)殘留物占所灌半固體糊的重量百分比為胃內(nèi)殘留率。結(jié)果見表6。

表6本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)小鼠胃排空的影響(n＝15，)

注：與空白組比較*P<0.05**P<0.01

結(jié)果表明，高劑量的本發(fā)明中所述的中藥組合物和阿托品能增加小鼠胃殘留率，對(duì)正常小鼠的胃排空有明顯的抑制作用。

實(shí)驗(yàn)例7

對(duì)本發(fā)明中所述的中藥組合物進(jìn)行家鴿止嘔試驗(yàn)研究。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家鴿，雌雄兼用，體重200～250g。購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

實(shí)驗(yàn)藥物：高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；風(fēng)油精組0.2ml；空白組使用茶油0.4ml。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

取體重300～400g健康家鴿50只，雌雄兼用，隨機(jī)分為空白組、本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中、低劑量組、風(fēng)油精組5組。禁食12h后，腹部拔毛做給藥部位，本發(fā)明中所述的中藥組合物高劑量組使用0.4ml、本發(fā)明中所述的中藥組合物中劑量組0.2ml，用茶油配至0.4ml、本發(fā)明中所述的中藥組合物低劑量組0.1ml，用茶油配至0.4ml、風(fēng)油精組0.2ml、空白組使用茶油0.4ml。給藥方式涂抹，給藥后1h，每鴿灌服硫酸銅水溶液200mg/kg。記錄各鴿出現(xiàn)第一次嘔吐的時(shí)間(嘔吐潛伏期)和給硫酸銅1h內(nèi)嘔吐的次數(shù)(嘔吐頻率)。結(jié)果見表7。

表7本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)家鴿灌服硫酸銅所致嘔吐的影響(n＝10；)

注：與空白組比較*P<0.05**P<0.01

結(jié)果表明，本發(fā)明中所述的中藥組合物能明顯延長(zhǎng)形成嘔吐所需的時(shí)間，并有減少家鴿嘔吐頻率的趨勢(shì)。

實(shí)驗(yàn)例8

對(duì)本發(fā)明中所述的中藥組合物進(jìn)行大鼠胃液分析研究。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD大鼠，雌雄兼用，體重180～220g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A002)。

實(shí)驗(yàn)藥物：大鼠高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；嗎丁啉組灌胃給予1.54mg/kg，劑量1ml/100g。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：取SD大鼠50只，體重180～220g，雌雄兼用，隨機(jī)分成空白組、嗎丁啉組、本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中、低劑量5組，每組l0只。將大鼠腹部部分剃毛做給藥部位，高劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.4ml；中劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.2ml、用茶油配至0.4ml；低劑量組使用本發(fā)明中所述的中藥組合物0.1ml、用茶油配至0.4ml；嗎丁啉組灌胃給予1.54mg/kg，劑量1ml/100g；空白組使用茶油0.4ml。給藥方式涂抹，連續(xù)給藥3d，于末次給藥后禁食但不禁水24h。在乙醚麻醉下固定大鼠，沿腹中線剪開一小口，找出胃并結(jié)扎幽門?？p合切口，4h后拆線打開腹腔，結(jié)扎賁門，摘取全胃，用濾紙擦凈血跡，沿胃大彎剪開，傾出胃內(nèi)容物置離心管中，2000r/rain離心10min。記錄胃液量，并用精密pH試紙測(cè)定胃內(nèi)容物pH值。胃液總酸度的測(cè)定：取上清胃液1.0mL，加酚酞指示劑2滴，用0.02mol/L的NaOH滴定液滴定至終點(diǎn)，記錄所用去的Na0H溶液量，計(jì)算胃液總酸度?？偹岫?mind/L)＝所用的NaOH毫升數(shù)×20。胃蛋白酶活性測(cè)定：取上清胃液0.8mL放入10mL的具塞試管，加0.05mol/L鹽酸液5mL，放進(jìn)8cm長(zhǎng)的蛋白管2支，塞好管塞，在37℃水浴中孵育24h，取出蛋白管，測(cè)量每支蛋白管兩端透明部分的長(zhǎng)度，求平均值。結(jié)果見表8。

表8本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)大鼠胃液分泌的影響(n＝10；)

注：與空白組比較*P<0.05**P<0.01

結(jié)果表明，本發(fā)明中所述的中藥組合物中、高劑量組能抑制大鼠胃液酸度，高劑量組能提高胃蛋白酶活性，各組有抑制胃液分泌的傾向，但與空白對(duì)照組比較，差異無(wú)顯著性意義。

實(shí)驗(yàn)例9

對(duì)本發(fā)明中所述的中藥組合物進(jìn)行解痙試驗(yàn)研究。

實(shí)驗(yàn)藥物：本發(fā)明中所述的中藥組合物(國(guó)藥準(zhǔn)字Z44022355，批號(hào)：L08F041，廣東羅浮山藥業(yè)有限公司)；風(fēng)油精(國(guó)藥準(zhǔn)字Z44021847，批號(hào)：P1082，白云山制藥廠)。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：新西蘭大耳兔，雌雄兼用，體重2.5～3.0kg，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A006。SD大鼠，雌雄兼用，體重180～220g，廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號(hào)：SCXK(粵)2008-0020，粵監(jiān)證字2008A002)。

結(jié)果以表示，采用SPSS 11統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行組間t檢驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

①對(duì)離體家兔小腸平滑肌的作用：取饑餓24h的家兔，擊斃后，打開腹腔，剪取十二直腸2～3cm，立刻放入裝有37℃的克氏液的浴槽中并通以95％O₂和5％CO₂，穩(wěn)定約30min后，采用PowerLab多導(dǎo)生理記錄儀記錄正常值后，先加入1μmol/LAch 0.1ml，待穩(wěn)定后分別加入不同劑量的本發(fā)明中所述的中藥組合物、風(fēng)油精，并記錄5min。記錄兔腸道平滑肌在加人藥物后收縮活動(dòng)的改變和對(duì)Ach的對(duì)抗作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表9。

表9本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)家兔離體小腸平滑肌收縮活動(dòng)的影響(n＝6；)

注：與自身前后比較*P<0.05**P<0.01

表9結(jié)果表明，ACH可引起家兔離體小腸痙攣性收縮，本發(fā)明中所述的中藥組合物高、中劑量和風(fēng)油精均可顯著減少離體家兔小腸平滑肌的收縮振幅，說(shuō)明對(duì)ACH有明顯的對(duì)抗作用，能起到鎮(zhèn)痛解痙的療效。

②對(duì)大鼠離體胃條試驗(yàn)：取禁食48h的SD大鼠，擊斃后，打開腹腔，剪取胃立刻放入Krebs液中。沿胃小彎剪開胃腔，去除胃粘膜，并在胃底部橫向剪下胃肌條，將胃肌條放入裝有37℃的克氏液的浴槽中并通以95％O₂和5％CO₂，穩(wěn)定約30min，用PowerLab多導(dǎo)生理記錄儀記錄正常值后，先加入1μmol/LAch，待穩(wěn)定后分別加入不同劑量的本發(fā)明中所述的中藥組合物、風(fēng)油精，并記錄5min。記錄腸道平滑肌在加人藥物后收縮活動(dòng)的改變和對(duì)Ach的對(duì)抗作用，用基線(張力)下降的mv差值數(shù)來(lái)表示。結(jié)果見表10。

表10本發(fā)明所述中藥組合物對(duì)大鼠離體胃平滑肌收縮活動(dòng)的影響(n＝10；)

注：與自身前后比較*P<0.05**P<0.01

表10、圖1～3結(jié)果表明，ACH可引起胃條痙攣性收縮，本發(fā)明中所述的中藥組合物各劑量組和風(fēng)油精均可顯著減少大鼠離體胃平滑肌的收縮振幅，說(shuō)明對(duì)ACH有明顯的對(duì)抗作用。

通過(guò)以上藥理藥效學(xué)的研究可知，本發(fā)明中所述的中藥組合物，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗菌功能等藥理作用。在胃腸功能試驗(yàn)中，能明顯對(duì)抗由ACH引起的離體胃條、小腸痙攣性收縮，起到鎮(zhèn)痛解痙的作用；對(duì)正常小鼠的胃排空有明顯的抑制作用；能明顯延長(zhǎng)硫酸銅致家鴿嘔吐反應(yīng)時(shí)間，并有減少家鴿嘔吐頻率的趨勢(shì)；能抑制大鼠胃液分泌，并能提高胃蛋白酶活性，有抑制胃液酸度的傾向。對(duì)治療急、慢性胃腸炎引起的腹脹腹痛、惡心嘔吐有一定的療效。

實(shí)驗(yàn)例10

試驗(yàn)設(shè)計(jì)：分層區(qū)組隨機(jī)、雙盲、安慰劑平行對(duì)照、多中心試驗(yàn)

受試人群：符合急性胃炎西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及寒邪客胃證辨證標(biāo)準(zhǔn)；年齡在18-65歲；病程在12小時(shí)之內(nèi)；簽署知情同意書的患者。

治療方案：試驗(yàn)組：本發(fā)明中所述的中藥組合物0.5ml/次，中上腹部涂搽，每次涂搽1分鐘；15分鐘1次，共3次。安慰劑組：本發(fā)明中所述的中藥組合物模擬藥0.5ml/次，中上腹部涂搽，每次涂搽1分鐘；15分鐘1次，共3次。

療效指標(biāo)：主要指標(biāo)：腹痛、腹脹、惡心、嘔吐消失率。次要指標(biāo)：腹痛、腹脹、惡心、嘔吐消失時(shí)間。中醫(yī)證候療效。

安全性指標(biāo)：用藥局部皮膚觀察，有無(wú)皮膚過(guò)敏。不良事件及不良反應(yīng)。體檢和理化檢查。

受試者入組情況：本試驗(yàn)共有240例受試者進(jìn)入研究，全部進(jìn)行隨機(jī)分配。經(jīng)核查，有1例合并使用方案規(guī)定的禁用藥品、2例病程超過(guò)12小時(shí)而被剔除。共有合格受試者237例。所有合格受試者均完成觀察。所有進(jìn)行隨機(jī)分配的受試者，除按規(guī)定剔除者外，至少用一次藥品的全部病例均納入全分析集(FAS)。ITT分析采用該數(shù)據(jù)集。本次試驗(yàn)中試驗(yàn)組有1例病程超過(guò)方案規(guī)定的12小時(shí)，對(duì)照組有1例因合并使用方案規(guī)定的禁用藥品，1例病程超過(guò)方案規(guī)定的12小時(shí)，故在盲態(tài)審核時(shí)予以剔除。本集包含試驗(yàn)組119例、對(duì)照組118例，分別占入組病例的99.2％和98.3％。所有遵循研究方案要求、依從性好、完成全部療程治療的受試者納入方案集(PS)。該集用于PPA分析。本次試驗(yàn)中試驗(yàn)組和對(duì)照組分別有10例和5例未按方案規(guī)定的用藥間隔使用試驗(yàn)藥物，不納入PPS分析。故本集包含試驗(yàn)組109例、對(duì)照組113例，分別占入組病例的90.8％和94.2％。所有經(jīng)隨機(jī)化分組，至少使用一次試驗(yàn)藥物的全部病例納入安全性分析集(SS)。該集用于安全性評(píng)價(jià)分析。本集包含試驗(yàn)組120例、對(duì)照組120例。治療前兩組性別、年齡、婚姻、民族、體重、身高、生命體征及一般體檢、就診時(shí)治療史及合并疾病情況、病程及臨床癥狀體征等均具可比性(P＞0.05)。

主要療效指標(biāo)：各癥狀消失率比較，結(jié)果見表11-18。

PPS分析：上腹痛、腹脹、惡心、嘔吐、惡寒喜暖、得溫痛減用藥后1小時(shí)內(nèi)消失率，采用卡方檢驗(yàn)，試驗(yàn)組均優(yōu)于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均為P＜0.01)。

表11上腹痛(PPS)

表12腹脹(PPS)

表13惡心(PPS)

表14嘔吐(PPS)

表15惡寒喜暖(PPS)

表16得溫痛減(PPS)

次要癥狀指標(biāo)：主要臨床癥狀消失時(shí)間，結(jié)果見表17。

表17主要臨床癥狀消失時(shí)間(分鐘)(PPS)

中醫(yī)證候療效比較，結(jié)果見表18。

PPS分析：試驗(yàn)組例數(shù)109例，有效率71.6％，對(duì)照組例數(shù)113例，有效率38.1％，有效率差33.5％，秩和檢驗(yàn)：Z＝5.29，試驗(yàn)組有效率優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.01)。

表18兩組證候療效比較(PPS)

秩和檢驗(yàn)：Z＝5.29，P＜0.01

結(jié)果表明，本發(fā)明中所述的中藥組合物治療急性胃炎(寒邪客胃證)臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，用藥1小時(shí)后上腹痛、腹脹、惡心、嘔吐、惡寒喜暖、得溫痛減消失率試驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)，平均消失時(shí)間試驗(yàn)組短于對(duì)照組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。中醫(yī)證候療效試驗(yàn)組明顯優(yōu)于對(duì)照組(P值P＜0.01)。對(duì)痊愈或有效病例隨訪結(jié)果表明，試驗(yàn)組腹脹、惡心和嘔吐癥狀復(fù)發(fā)率低于對(duì)照組(P值＜0.05)，試驗(yàn)組上腹痛癥狀復(fù)發(fā)低于對(duì)照組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。綜合上述結(jié)果，說(shuō)明本發(fā)明中所述的中藥組合物對(duì)改善急性胃炎(寒邪客胃證)臨床癥狀具有較好的臨床療效。

最后所應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。