本發(fā)明屬于益生菌生物醫(yī)藥與保健品
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種防治糖尿病并控制體重的復(fù)合益生菌液及其制備方法。
背景技術(shù)：
：糖尿病是一系列新陳代謝紊亂的總稱，它會(huì)造成體內(nèi)胰島素?cái)?shù)量減少或者胰島素利用不充分，從而引起高血糖。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，就是血液里的糖分過(guò)高，但是血液卻無(wú)法正確利用那些糖分。糖尿病分兩種。I型糖尿病(或稱胰島素依賴型糖尿病)中，身體只生成少量或根本不生成胰島素，這被認(rèn)為是一種自身免疫性疾病。這種糖尿病通常很早就會(huì)被診斷出來(lái)，因此有時(shí)被稱為青少年糖尿病。II型糖尿病(或稱非胰島素依賴型糖尿病)中，身體控制血糖的能力下降。因?yàn)檫@種糖尿病常常是在年齡較大的時(shí)候被診斷出來(lái)，所以有時(shí)它又被叫做成人糖尿病。糖尿病是一種很廣泛的疾病，是全世界最常見(jiàn)的代謝紊亂現(xiàn)象。估計(jì)有6%的美國(guó)人患有糖尿病，人數(shù)大約在1600萬(wàn)。其中大多數(shù)人患有II型糖尿病，是心臟病、腎病、中風(fēng)、失明和早逝的最主要誘因。與糖尿病相關(guān)的體重問(wèn)題也是個(gè)世界性問(wèn)題，特別是在美國(guó)和其他西方發(fā)達(dá)國(guó)家。大家公認(rèn)，西方人之所以體重易超標(biāo)是因?yàn)樗麄內(nèi)狈\(yùn)動(dòng)、食物脂肪含量過(guò)高。最近在美國(guó)的一項(xiàng)調(diào)查中，65%的答卷者聲稱自己的體重超標(biāo)5-30磅。而全國(guó)健康和營(yíng)養(yǎng)中心的一項(xiàng)研究也得出了類似的結(jié)論，現(xiàn)在體重超標(biāo)的成年人占64.5%。令人擔(dān)憂的是，這種現(xiàn)象也同樣出現(xiàn)在孩子中，這為我們敲響了警鐘。類似的研究得出了兩個(gè)令人堪憂的結(jié)論:第一，體重超標(biāo)現(xiàn)象并沒(méi)有年齡、性別和種族之分，這也就意味著社會(huì)整體都出現(xiàn)了超重問(wèn)題，而不是特定群組的人。第二，從20世紀(jì)70年代起，超重人群的比例正在穩(wěn)步上升。糖尿病是由什么引起的？通過(guò)對(duì)大多數(shù)病例的研究，人們認(rèn)為糖尿病是由基因紊亂引起的，因?yàn)橐扰K無(wú)法生成和分泌足夠的胰島素。但對(duì)于II型糖尿病來(lái)說(shuō)，生活方式、患病時(shí)間和能否得到有效治療有密切聯(lián)系。這些生活因素中最主要的就是體重超標(biāo)。體重超標(biāo)的人患II型糖尿病的可能性是正常人的兩倍。體重超標(biāo)和患糖尿病之間的關(guān)系是"先有雞還是先有蛋"的問(wèn)題。事實(shí)上，肥胖癥和胰島素抵抗之間的關(guān)系相當(dāng)復(fù)雜?？茖W(xué)家們對(duì)這兩者之間關(guān)系的研究，也才初見(jiàn)成效。然而，我們所知道的是，如果一個(gè)人變得肥胖，他或她的身體對(duì)胰島素的敏感度就會(huì)下降。胰島素又被稱為"致肥荷爾蒙"。在食物中能量過(guò)多時(shí)，它幫助身體利用葡萄糖制造脂肪。胰島素是這樣工作的：它是由胰腺中的特殊細(xì)胞分泌出來(lái)的，通過(guò)附著在細(xì)胞表面受體上來(lái)發(fā)揮作用。胰島素通過(guò)復(fù)雜的信號(hào)組織通知大腦去利用葡萄糖。除了胰島素，某些循環(huán)荷爾蒙對(duì)糖尿病和體重超標(biāo)影響也很大。例如，瘦素在很大程度上控制著身體對(duì)胰島素的反應(yīng)能力，也指示大腦表現(xiàn)出飽足感?？梢园阉胂蟪?。"飽足荷爾蒙"，因?yàn)樗嬷眢w"你己經(jīng)吃飽了"。腸內(nèi)細(xì)菌和糖尿病的發(fā)病雖然沒(méi)有直接關(guān)系，但腸內(nèi)專家認(rèn)為：有害細(xì)菌在腸內(nèi)占據(jù)優(yōu)勢(shì)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生大量的有害物質(zhì)，為了幫助排毒，肝臟的負(fù)荷會(huì)大大加重。因?yàn)楫a(chǎn)生胰島素的胰腺與肝臟有密切關(guān)系，肝臟的負(fù)荷加大也會(huì)影響胰腺的不足，對(duì)胰島素的分泌發(fā)生影響。糖尿病會(huì)引起許多其他的健康問(wèn)題，包括視網(wǎng)膜變性、失明、腎病、神經(jīng)系統(tǒng)損傷。糖尿病還會(huì)引起動(dòng)脈粥樣硬化——一種常見(jiàn)的動(dòng)脈硬化(動(dòng)脈變厚變硬)。在一些極端病例中，由此引起的動(dòng)脈循環(huán)功能不良會(huì)導(dǎo)致截肢甚至死亡。體重超標(biāo)同樣也會(huì)引起其他健康問(wèn)題，例如心臟病、某些癌癥、痛風(fēng)(和體內(nèi)過(guò)量尿酸共同引起)、膽囊病。除此之外，它還會(huì)導(dǎo)致睡眠窒息(睡眠中呼吸中斷現(xiàn)象)和骨關(guān)節(jié)炎(關(guān)節(jié)磨損)。體重越重，出現(xiàn)健康問(wèn)題的可能性就越大。纖維類食品對(duì)于防治糖尿病與控制體重來(lái)說(shuō)是一個(gè)不錯(cuò)的選擇?，F(xiàn)在己有許多研究證實(shí)，纖維含量較多的食品(它們是容易滋生益生菌的益生元)有助于預(yù)防II型糖尿病與控制體重。德國(guó)研究人員在新的研究中發(fā)現(xiàn)，全谷類食品和很多蔬菜所含的非水溶性纖維能夠改善人體對(duì)胰島素的利用狀況，從而有助于預(yù)防II型糖尿病，食用大量的纖維素，可以減少更多能源的攝入，達(dá)到減肥效果。胰島素能調(diào)節(jié)血糖，胰島素敏感度下降是人體罹患II型糖尿病的前兆。以往的一些研究己經(jīng)表明，非水溶性纖維含量高的飲食有助于降低罹患糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)。為查明其中的關(guān)聯(lián)，德國(guó)人類營(yíng)養(yǎng)研究所研究人員為17位體重超標(biāo)的女性設(shè)計(jì)了不同的飲食方案，以探索非水溶性纖維的功用。研究人員讓參加實(shí)驗(yàn)的女性先連續(xù)3天吃富含非水溶性纖維的面包，此后3天再改吃纖維含量少的面包。對(duì)比分析表明，富含非水溶性纖維的飲食提高了這些女性的胰島素敏感度。他們把研究成果發(fā)表在最新一期的《糖尿病護(hù)理》上。糖尿病的藥物治療分胰島素治療、口服降糖西藥治療和中醫(yī)藥治療，目前已發(fā)展到生物技術(shù)治療。中國(guó)專利99105621“一種治療糖尿病的藥品”是用單菌種的代謝產(chǎn)品稅物提取液制成用于治療糖尿病的藥品。中國(guó)專利00804999“治療糖尿病的藥物”涉及生理上可接受的來(lái)源于微生物或動(dòng)物的酶混合物。中國(guó)專利01130450“生物降糖制劑”是由放線菌、乳酸菌和酵母菌三種益生菌組成，經(jīng)常規(guī)的活化、擴(kuò)大培養(yǎng)、發(fā)酵、過(guò)濾、除渣、除菌、冷凍干燥等方法制成。中國(guó)專利200810031455.4“預(yù)防或治療糖尿病和相關(guān)病癥的微生物制劑”是表達(dá)活性苯丙氨酸脫氨酶和/或苯丙氨酸解氨酶的非致病菌。中國(guó)專利01801286.8“治療或預(yù)防肥胖癥和糖尿病的微生物及含有所述微生物的藥物組合物”主要是由醋酸菌與乳酸菌的組合物，利用醋酸菌與乳酸菌進(jìn)入腸道后將單糖如葡萄糖、果糖和半乳糖等和二糖轉(zhuǎn)化為聚合物，而這些聚合物不能腸道吸收，因此可減少被吸收入人體中單糖或二糖的量。提供了兩個(gè)菌種，但沒(méi)有具體的制備方法，只是在小鼠體內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，沒(méi)有在人體中進(jìn)行驗(yàn)證；中國(guó)專利200910238778.5“一種治療糖尿病的復(fù)合微生物制劑及其制備方法和應(yīng)用”主要由光合細(xì)菌、芽孢桿菌、酵母菌、乳酸桿菌、放線菌等經(jīng)過(guò)多級(jí)復(fù)合而成。但放線菌還未列入食品添加劑的行列，不能直接給人體飲用。本發(fā)明人在專利號(hào)2013100002892中提供一種復(fù)合益生菌發(fā)酵中草藥活性保健液及其制備方法，制備該保健液的原料為：銀杏葉、銀杏花粉、枸杞、茶葉、納豆芽孢桿菌、釀酒酵母、乳桿菌、木醋桿菌、雙歧桿菌、白砂糖、紅糖、脫脂大豆粉、蜂蜜、低聚糖、氯化鈉、去離子水，等，能防治多種病癥，但銀杏葉與銀杏花粉較難獲得，難以大規(guī)模生產(chǎn)。對(duì)病人來(lái)說(shuō)，使用外源胰島素是很昂貴和痛苦的方法，而且還會(huì)給病人帶來(lái)多種有害的現(xiàn)象和并發(fā)癥。例如，由于沒(méi)有吃飯或不正常鍛煉，胰島素劑量的計(jì)算錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致胰島素響應(yīng)（低血糖），而有時(shí)并找不到具體的原因。此外，胰島素注身可能發(fā)生對(duì)胰島素的局部或全身過(guò)敏或免疫抗性。有幾種方法可用來(lái)預(yù)防或治療肥胖和糖尿病，如飲食—鍛煉療法、手術(shù)或化療等。飲食—鍛煉療法為一種方法，即吃低熱量，低脂肪食物和進(jìn)行有氧鍛煉，但這種方法一般認(rèn)為對(duì)普通大眾不成功，因?yàn)槠湫枰L(zhǎng)期地經(jīng)常性地堅(jiān)持這種療法。去除體內(nèi)脂肪手述能達(dá)到立竿見(jiàn)影的效果，但存在諸多限制，如手術(shù)風(fēng)除、除脂效果難持久和花費(fèi)太高等。二甲雙胍是臨床常用的治療糖尿病的雙胍類藥物，適用于單用飲食和運(yùn)動(dòng)治不能獲良好控制的2型糖尿病患者?？蓡为?dú)用藥，也可與磺脲類或胰島素合用。用于治療肥胖型的糖尿病效果很好，因些臨床應(yīng)用廣泛，二甲雙胍常見(jiàn)的不良反應(yīng)為胃腸道不適，如惡心、嘔吐、腹瀉、腹痛、便秘、腹脹、消化不良、胃灼熱，這種不良反應(yīng)高達(dá)30%，此不良反應(yīng)限制了二甲雙胍的使用。采用益生菌療法能降低血糖水平，抑制葡萄糖的吸收，加強(qiáng)胰島素的作用或者誘導(dǎo)減少食欲等，是一種目前在該領(lǐng)域最積極開(kāi)發(fā)的方法。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種復(fù)合益生菌活菌含量高、活性高、穩(wěn)定性高、作用效果快的、無(wú)副作用，具有防治糖尿病與控制人體重的復(fù)合益生菌液及其制備方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種防治糖尿病并控制體重的復(fù)合益生菌液，其特征在于，所述復(fù)合益生菌組份及重量份數(shù)配比為：丁酸梭菌種子液10-20份、脫脂大豆粉10-20份、布拉氏酵母菌種子液10-40份、植物乳桿菌種子液5-15份、木醋桿菌種子液5-10份、青春雙歧桿菌種子液10-20份、地衣芽孢桿菌種子液10-20份、紅糖30-60份、脫脂奶粉10-20份、蜂蜜10-20份、氯化鈉2-4份、阿拉伯糖10-20份、低聚木糖2-10份和純化水800份，其制備過(guò)程包括：（1）.在1000L發(fā)酵罐A中加入紅糖30-60份、脫脂大豆粉10-20份、氯化鈉1-2份、純化水400份，混勻后再在115℃下保溫30分鐘，然后降溫至30℃；再向發(fā)酵罐A中加入布拉氏酵母菌種子液10-40份、植物乳桿菌種子液5-15份、木醋桿菌種子液5-10份，在30℃-35℃下培養(yǎng)72-120小時(shí)，每24小時(shí)攪拌30分鐘；培養(yǎng)前期48小時(shí)，通氣量為每分鐘的液氣比為1：0.8，通氣過(guò)程維持發(fā)酵液pH5.8-6.8，48小時(shí)后不再通氣，同時(shí)不再調(diào)pH，繼續(xù)靜置培養(yǎng)，待PH降低至4.2，布拉氏酵母菌含量不低于1億CFU/ml，細(xì)菌纖維含量不低于1g/L，殘葡萄糖含量低于0.2g/L,總菌含量不低于10億CFU/ml，即可停止A罐的第一階段發(fā)酵；（2）.在600L發(fā)酵罐B中加入蜂蜜10-20份、脫脂奶粉10-20份、阿拉伯糖10-20份、低聚木糖2-10份、氯化鈉1-2份、純化水400份，混勻后再在108℃下保溫30分鐘，然后降溫至37℃；向發(fā)酵罐B中加入丁酸梭菌種子液10-20份、青春雙歧桿菌種子液10-20份、地衣芽孢桿菌種子液10-20份，在35℃-37℃下靜止厭氧培養(yǎng)72-96小時(shí)，檢測(cè)丁酸梭菌的芽孢含量不低于20億CFU/ml，總菌含量不低于30億CFU/ml，即可停止發(fā)酵；（3）.當(dāng)兩個(gè)發(fā)酵罐達(dá)到指標(biāo)后，將發(fā)酵罐B中的菌液移至發(fā)酵罐A中，攪拌均勻，在30℃-33℃下靜止繼續(xù)厭氧培養(yǎng)24-48小時(shí)，檢測(cè)其PH降至3.0-3.2，總活菌含量不低于30億CFU/ml，細(xì)菌纖維含量不低于0.5g/L，檢測(cè)丁酸梭菌的芽孢含量不低于15億CFU/ml，即可停止發(fā)酵，無(wú)菌灌裝，100ml/瓶，包裝成品。其中，布拉氏酵母菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用YPD固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種150毫升YPD培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中30℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)。種子采用5%的接種量，接種至裝有2L酵母菌培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，30℃震蕩培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)5億CFU/ml，即可作為布拉氏酵母菌種子液接種；其中，所述的YPD固體培養(yǎng)基：酵母膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL；其中，所述的酵母菌培養(yǎng)基：紅糖15g/L，酵母膏3g/L，蛋白胨5g/L，硫酸銨3g/L，硫酸鎂0.5g/L；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘；其中，植物乳桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用MRS固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，37℃厭氧培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種250毫升MRS培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中37℃厭氧培養(yǎng)24小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有9L乳酸菌培養(yǎng)基的10L大三角瓶中，37℃厭氧培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)50億CFU/ml，即可作為植物乳桿菌種子液接種，其中，所述的MRS培養(yǎng)基：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏10g/L，葡萄糖20g/L，醋酸鈉5g/L，檸檬酸二銨2g/L，吐溫-801ml/L，硫酸鎂0.6g/L，硫酸錳0.05g/L，磷酸氫二鉀2g/L，瓊脂20g/L，碳酸鈣20g/L；其中，所述的乳酸菌培養(yǎng)基：葡萄糖4%，蛋白胨1.2%，牛肉膏0.75%，氯化鈉0.1%，硫酸錳0.001%，硫酸鎂0.02%，醋酸鈉0.05%，碳酸鈣1%，pH6.0；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。其中，木醋桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用木醋桿菌固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種至50毫升木醋桿菌液體培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中30℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有2L木醋桿菌液體培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，30℃，150r/min震蕩培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)10億CFU/ml，即可作為木醋桿菌種子液接種，其中，所述木醋桿菌固體培養(yǎng)基：葡萄糖40.0，蛋白胨8，檸檬酸1.2，磷酸氫二鈉1.0，磷酸二氫鈉2.0，硫酸鎂0.3，瓊脂18.0，去離子水1L，pH6.8，121℃滅菌20分鐘；其中，所述的木醋桿菌液體培養(yǎng)基：葡萄糖20.0，蛋白胨4.0，檸檬酸2.0，磷酸二氫鈉2.7，硫酸鎂0.25，去離子水1L，pH6.8，12l℃滅菌20分鐘。其中，地衣芽孢桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用LB固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，37℃培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種50毫升LB培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中37℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有2L地衣芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，37℃震蕩培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，芽孢含量超過(guò)60億CFU/ml，即可作為地衣芽孢桿菌種子液接種。其中所述LB固體培養(yǎng)基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂20g，水1000mL，pH7.2；其中所述地衣芽孢桿菌液體培養(yǎng)基：葡萄糖10g/L，玉米淀粉10g/L，豆粕粉30g/L，硫酸鎂0.5g/L，硫酸錳0.5g/L，磷酸二氫鈉0.5g/L，氯化鈉2g/L，pH7.2；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。其中，青春雙歧桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用雙歧桿菌固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，37℃厭氧培養(yǎng)72小時(shí)。在平板下挑取單個(gè)菌落接種50毫升雙歧桿菌培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中37℃厭氧培養(yǎng)48小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有9.5L雙歧桿菌培養(yǎng)基的10L大三角瓶中，37℃厭氧培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)10億CFU/ml，即可作為青春雙歧桿菌種子液接種；其中，所述的雙歧桿菌培養(yǎng)基：蛋白胨5.0g/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏5.0g/L，胰蛋白胨10.0g/L，葡萄糖10.0g/L，醋酸鈉5.0g/L，檸檬酸二銨2.0g/L，吐溫-801.0ml/L，硫酸鎂0.1g/L，硫酸鋅0.25g/L，磷酸氫二鉀2g/L，瓊脂20g；培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。其中，丁酸梭菌種子液按以下方法制備：取-80℃甘油管保藏的菌種1mL接種于裝有9mLRCM培養(yǎng)基的試管中，37℃條件下靜態(tài)厭氧活化48h，將活化好的菌種按1%(v/v)的接種量轉(zhuǎn)接到滅過(guò)菌的10L丁酸梭菌種子培養(yǎng)基中，37℃條件下靜態(tài)厭氧培養(yǎng)24h~36h，菌含量超過(guò)5億CFU/ml，即可作為丁酸梭菌種子液接種；其中，所述的RCM培養(yǎng)基：胰蛋白陳10g/L，牛肉膏10g，酵母膏10g/L，葡萄糖5g/L，氯化鈉5g/L，可溶性淀粉1g/L，半胱氨酸鹽酸鹽0.5克/L，醋酸鈉3g/L，pH7.0，121℃滅菌20min；其中，所述的丁酸梭菌種子培養(yǎng)基：:酵母膏15g/L，牛肉膏5g/L，KH2PO42g/L硫酸鎂1g/L，半胱氨酸鹽酸鹽1g/L，NaHCO31g/L，CaCO31g/L，葡萄糖20g/L，PH7.0，121℃滅菌20min。對(duì)于患有II型糖尿病的人來(lái)說(shuō)，減肥、參加鍛煉、使用藥物（胰島素）合改變生活方式可以控制血糖濃度。除了這些常規(guī)療法外，益生菌療法作為一種新的方式越來(lái)越顯示出其優(yōu)越性。從病理學(xué)上來(lái)講，對(duì)付糖尿病有三個(gè)基本策略(益生菌在其中都發(fā)揮著重要作用)：(1)通過(guò)控制食物或服用藥物減少腸道中葡萄糖的吸收量；(2)減少肝里葡萄糖的合成;(3)促進(jìn)代謝過(guò)程對(duì)葡萄糖的使用。葡萄糖在第一和第三個(gè)策略中都十分有用，而在第二個(gè)策略中的作用卻不大，所以我們?cè)谶@里就不討論這一點(diǎn)了。第一個(gè)治療策略一一減少胃腸道對(duì)葡萄糖的吸收——可以通過(guò)含益生菌或益生元的食品來(lái)抑制葡萄糖的吸收。葡萄糖在腸道里可以以不同形式存在。正如前面提到的，葡萄糖可以和其他糖類結(jié)合，形成更復(fù)雜的種類。然后它們將被身體分解，釋放出葡萄糖，使其能被吸收。例如，身體要把蔗糖分解成最基本的組成部分——葡萄糖和果糖，然后再吸收它們，那么腸道里就一定要有蔗糖。事實(shí)上，身體里的各個(gè)組成部分都喜歡葡萄糖。它是最基本的能量來(lái)源，任何身體組織都能輕易地對(duì)其加以利用。所以，身體組織的代謝系統(tǒng)都把葡萄糖作為主要的能量來(lái)源。既然如此，腸道里的益生菌是怎樣幫助治療糖尿病和控制體重的呢?假設(shè)你攝入了很多糖(為了簡(jiǎn)單起見(jiàn)，假設(shè)這些糖是葡萄糖，但是對(duì)其他糖類來(lái)說(shuō)，原理也是一樣的)。如果你吃下了純葡萄糖，會(huì)發(fā)生什么呢?不是發(fā)生糖尿病昏迷，就是葡萄糖被全部吸收。為了達(dá)到這個(gè)目的，葡萄糖必須先進(jìn)入腸道，通過(guò)腸道上皮細(xì)胞中的任何東西(如果有的話)。在健康的胃里，益生菌包圍著這些上皮細(xì)胞(或者說(shuō)層疊其上);而在一個(gè)不健康的胃里，只有一堆病原細(xì)菌。葡萄糖被這些腸道上皮細(xì)胞吸收，然后進(jìn)入身體其他部分(當(dāng)然，這是建立在假設(shè)所有的葡萄糖都能被上皮細(xì)胞利用的基礎(chǔ)上)?？偠灾?，胃腸道內(nèi)的益生菌提供了第一個(gè)防護(hù)層，以免大量葡萄糖被吸收。這就是說(shuō)，如果你補(bǔ)充大量益生菌，那么已經(jīng)加強(qiáng)了這第一個(gè)防護(hù)層，因?yàn)橐嫔矚g利用葡萄糖。那么，葡萄糖是益生元嗎?不是。根據(jù)定義，益生元是含有某些益生菌而非大腸桿菌等病原有機(jī)體的食物。這也不會(huì)改變益生菌需要葡萄糖的事實(shí)。如果周圍有大量葡萄糖的話，它們甚至都不碰其他的糖類。原因很簡(jiǎn)單，因?yàn)橥淌称咸烟菍?duì)益生菌來(lái)說(shuō)毫不費(fèi)力。所有生物都認(rèn)同成本/收益率。越容易做的事情，生命體就越有可能去做。益生菌體內(nèi)有可以利用葡萄糖的組織，所以它們會(huì)吸收葡萄糖，然后吃掉它?，F(xiàn)在，回到我們攝取糖的例子：如果體內(nèi)有大量益生菌存在，而且它們都在積極消耗有害菌，那么在體內(nèi)輸送的葡萄糖就會(huì)減少。直接結(jié)果就是血液里的葡萄糖減少。如果血液里葡萄糖含量減少，被肝用來(lái)制造肝糖(或進(jìn)行其他活動(dòng))的葡萄糖就減少了，而身體就是通過(guò)把葡萄糖轉(zhuǎn)化成肝糖來(lái)對(duì)其進(jìn)行儲(chǔ)存的。最后，如果制造的肝糖減少了，一段時(shí)間之后，身體能夠轉(zhuǎn)化為葡萄糖的肝糖就減少了。記住，只需要提供大量益生菌，就能讓這些變化發(fā)生。這又把我們帶回到控制體重和糖尿病的關(guān)系這個(gè)主題上來(lái)了。葡萄糖是一種非常好的能量來(lái)源，隨時(shí)貢獻(xiàn)自我以便生成其他物質(zhì)。如果體內(nèi)以葡萄糖形式存在的能量過(guò)多，超過(guò)了可以使用的量，那么身體會(huì)怎么做呢?它會(huì)以脂肪的形式儲(chǔ)存起來(lái)，而那些肥肉很可能會(huì)陪伴你一生。公式很簡(jiǎn)單:過(guò)多能量(即葡萄糖)=體重上升。如果你攝入的卡路里比消耗的要多，你的體重就會(huì)上升。在前面，我們談到有三種主要的策略可以用來(lái)治療糖尿病，第三種就是加速葡萄糖的代謝。有幾種方法可以使你體內(nèi)的細(xì)胞更多地使用葡萄糖，食用益生菌是最有效的手段之一；它能夠很大限度地影響腸道里的活動(dòng)。事實(shí)上，發(fā)生在腸道里的活動(dòng)比發(fā)生在身體里的活動(dòng)更加重要。為了證明這一點(diǎn)，可以把你的腸和它外部的身體想象成是相對(duì)的。科學(xué)家們就是這么干的。他們認(rèn)為腸道是一個(gè)中空的管道，從口腔到肛門，身體就包裹在其外?！?管道"是個(gè)很形象的比喻，因?yàn)橥ㄟ^(guò)腸道的任何東西都不直接和身體產(chǎn)生聯(lián)系。換句話說(shuō)，你咽下的一切東西從管道的一頭進(jìn)去，又從另一頭出來(lái)——在此期間一直停留在管道里。不僅食物如此，益生菌也一樣。它們?cè)谀c道自成一體的環(huán)境中運(yùn)行良好。正如前面提到的，人體內(nèi)的細(xì)菌數(shù)量比細(xì)胞還多。這也就意味著，益生菌這種有益細(xì)菌能在整個(gè)代謝過(guò)程中起很大作用。如果在進(jìn)餐時(shí)補(bǔ)充大量益生菌，它們對(duì)食物的消耗將遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)你的身體對(duì)食物的利用。你吞下的食物很少會(huì)被真正吸收。不相信?那就自己試試吧。如果攝入1000億個(gè)微生物(100毫升益生菌)，你會(huì)感覺(jué)自己非常餓。益生菌會(huì)消耗體內(nèi)大量的卡路里，這就是為什么你會(huì)有饑餓感。你需要同饑餓感作戰(zhàn)。我們會(huì)把一膳食纖維之類的東西和益生菌共同使用，以減少饑餓感。纖維類食品對(duì)于防治糖尿病與控制體重來(lái)說(shuō)是一個(gè)不錯(cuò)的選擇?，F(xiàn)在己有許多研究證實(shí)，纖維含量較多的食品(它們是容易滋生益生菌的益生元)有助于預(yù)防II型糖尿病與控制體重。德國(guó)研究人員在新的研究中發(fā)現(xiàn)，全谷類食品和很多蔬菜所含的非水溶性纖維能夠改善人體對(duì)胰島素的利用狀況，從而有助于預(yù)防II型糖尿病，食用大量的纖維素，可以減少更多能源的攝入，達(dá)到減肥效果。綜上所述，好的益生菌與益生元是完全可以防治糖尿病并控制體重的，但如何選擇出效果顯著的防治糖尿病并控制體重的益生菌群與益生元配合，則是我們臨床試驗(yàn)的重點(diǎn)，本發(fā)明中的幾種益生菌與益生元是經(jīng)過(guò)多年的臨床試驗(yàn)應(yīng)用效果組合研究得到的。本發(fā)明的復(fù)合益生菌液中含有大量的木醋桿菌，木醋桿菌具有很強(qiáng)的纖維素的合成能力，一個(gè)木醋桿菌細(xì)胞每小時(shí)能夠把一億個(gè)葡萄糖單位連成纖維素，每天能產(chǎn)生3-4cm的纖維素。這些細(xì)菌纖維素完全不為人體消化吸收，食后具有飽腹感，可減少食量而作為低熱量的減肥食品。且可增加糞便體積，稀釋毒物，促進(jìn)腸蠕動(dòng)及排便，防治便秘?，F(xiàn)在己有許多研究證實(shí)，纖維含量較多的食品(它們是容易滋生益生菌的益生元)有助于預(yù)防II型糖尿病。德國(guó)研究人員在新的研究中發(fā)現(xiàn)，全谷類食品和很多蔬菜所含的非水溶性纖維能夠改善人體對(duì)胰島素的利用狀況，從而有助于預(yù)防II型糖尿病。胰島素能調(diào)節(jié)血糖，胰島素敏感度下降是人體罹患II型糖尿病的前兆。以往的一些研究己經(jīng)表明，非水溶性纖維含量高的飲食有助于降低罹患糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)。為查明其中的關(guān)聯(lián)，德國(guó)人類營(yíng)養(yǎng)研究所研究人員為17位體重超標(biāo)的女性設(shè)計(jì)了不同的飲食方案，以探索非水溶性纖維的功用。研究人員讓參加實(shí)驗(yàn)的女性先連續(xù)3天吃富含非水溶性纖維的面包，此后3天再改吃纖維含量少的面包。對(duì)比分析表明，富含非水溶性纖維的飲食提高了這些女性的胰島素敏感度。他們把研究成果發(fā)表在《糖尿病護(hù)理》上。本發(fā)明中的復(fù)合益生菌液中細(xì)菌纖維含量不低于0.5g/L，是其他產(chǎn)品無(wú)法比擬的。木醋桿菌是好氣性細(xì)菌，需在有氧的條件下才能迅速大量的生長(zhǎng)。但它和其它的醋酸菌不同，在缺氧的條件下，它可以利用葡萄糖進(jìn)行嫌氣發(fā)酵，可以使葡萄糖轉(zhuǎn)化為醋酸和乳酸，不會(huì)因?yàn)槿毖醵杆俚卮罅克劳?。而在有氧的條件下木醋桿菌可以迅速使葡萄糖氧化成葡萄糖酸、2-酮葡萄糖酸，氧化乙醇為醋酸；因?yàn)檫@個(gè)特點(diǎn)，它在發(fā)酵液中除在培養(yǎng)液表層氧量足的情況下大量繁殖形成菌膜外，在菌液中也可以形成絮狀物，保持相當(dāng)數(shù)量的菌體。在有氧的條件下，木醋桿菌對(duì)葡萄糖有很強(qiáng)的氧化能力，具體途徑為：葡萄糖→葡萄糖酸→葡萄糖醛酸→葡萄糖二酸→葡萄糖二酸1，4內(nèi)酯，其中間產(chǎn)物均為解毒、抗癌的功能因子。葡萄糖醛酸，它是人體肝臟中最主要的解毒物質(zhì)之一。葡萄糖醛酸可與外源的毒素或人體代謝產(chǎn)生的內(nèi)源有毒物質(zhì)相結(jié)合，變成水溶性的葡萄糖苷酸，并一起排出體外，從而使可能引起身體各種病變的或已經(jīng)發(fā)生病變的毒素被及時(shí)清除，起到防病和治病的良好效果。木醋桿菌在發(fā)酵過(guò)程中存在的另一種功能性成分葡萄糖二酸1，4內(nèi)酯可使肝素、透明質(zhì)酸、硫酸粘多糖以及葡萄糖醛酸的破壞大大減少，幫助身體更有效地排出毒素，防癌抗癌，并緩解關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、氣喘和相關(guān)組織功能下降所引起的其它不適。葡萄糖酸能與重金屬結(jié)合形成水溶性復(fù)合物，幫助人體排出有害的重金屬元素。本發(fā)明中的復(fù)合益生菌液中含有阿拉伯糖，它進(jìn)入人體有以下幾方面的作用：一是能抑制水解雙糖的酶，因此抑制因攝入蔗糖(在小腸蔗糖酶的作用下分解成葡萄糖和果糖而被吸收)而導(dǎo)致的血糖升高；簡(jiǎn)稱抑制雙糖水解的降糖作用。二是因阿拉伯糖對(duì)雙糖水解酶的抑制作用，使在小腸里沒(méi)被分解的蔗糖在大腸里被微生物分解產(chǎn)生出大量的有機(jī)酸，這種有機(jī)酸對(duì)肝臟合成脂肪有抑制作用，再加上阿拉伯糖在小腸里對(duì)吸收蔗糖的抑制作用，從而減少體內(nèi)新脂肪的產(chǎn)生。阿拉伯糖可以與蔗糖配伍使用也可單獨(dú)食用。在蔗糖中加入3.5%的比例，能夠抑制人體60-70%蔗糖的吸收，長(zhǎng)期使用可以降低血糖。三預(yù)防便秘，促進(jìn)雙歧桿菌的生長(zhǎng)，日本的研究結(jié)果顯示：有便秘傾向的女性將添加了3%阿拉伯糖的蔗糖加入紅茶等飲品中連續(xù)服用，每周的排便次數(shù)有明顯增加。據(jù)三和淀粉株式會(huì)社試驗(yàn)證明，攝入添加5%阿拉伯糖的蔗糖還可以有效促進(jìn)雙歧桿菌(Bifidobacterium)的生長(zhǎng)。阿拉伯糖本身是難以被消化道吸收的糖，在體內(nèi)得不到利用的部分可從尿中排出。本發(fā)明中含有低聚木糖（一種較好的益生元），低聚木糖對(duì)病原菌有較強(qiáng)的吸附力，如大腸桿菌、腸炎門氏菌、肺炎克雷伯氏菌、嗜水氣單胞菌等都能吸附到低聚木糖上，由于低聚木糖不被腸道中的消化酶所降解，可攜帶附著的病原菌通過(guò)腸道排出體外，從而防止疾病在腸道中集群，達(dá)到防止腹瀉的目的。低取出木糖可以促進(jìn)腸道中的雙歧桿菌快速生長(zhǎng)，是其他低聚糖等益生元效果20倍以上。雙歧桿菌利用低聚木糖，產(chǎn)生大量的短鏈脂肪酸；能刺激腸道蠕動(dòng)，增加糞便濕潤(rùn)度，并保持一定的滲透壓，從而防止便秘發(fā)生。攝入低聚木糖，可減少有毒代謝產(chǎn)物形成，大大減少了肝臟分解毒素的負(fù)擔(dān)。攝入低聚木糖，持續(xù)2周至3個(gè)月，總血清膽固醇可降低20-50dl。還可提高女性血清中多密度脂蛋白膽固醇占總膽固醇的比率。研究表明，46個(gè)高血脂患者攝入低聚木糖持續(xù)5周后，其心臟舒張壓平均下降了799.8Pa(6mmHg)。結(jié)果顯示，人的心臟舒張壓的高低與其糞便中雙歧桿菌占總菌數(shù)的比率呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系。本發(fā)明的復(fù)合益生菌液中含有大量的地衣芽孢桿菌，地衣芽孢桿菌是具有耐酸、耐熱特性的有益菌，在胃酸下四小時(shí)存活率為100%，同時(shí)具有強(qiáng)力的病原菌抑制能力,是各種益菌當(dāng)中，對(duì)環(huán)境耐受力最好可以直達(dá)小腸的菌種之一，口服后可改變?nèi)梭w腸道菌群生態(tài)，幫助消化道機(jī)能正?；?，以使排便順暢，維持體內(nèi)生理環(huán)保。能調(diào)節(jié)腸道菌群，增強(qiáng)動(dòng)物細(xì)胞免疫放應(yīng)。地衣芽孢桿菌為兼性厭氧菌，在腸道中可以起到整腸作用，能有效防治腹瀉，便秘，可以快速吸收利用腸道中的葡萄糖，從而減少腸道對(duì)葡萄糖的吸收，降低血糖。本發(fā)明的復(fù)合益生菌液中含有布拉氏酵母菌，布拉氏酵母菌是一種非致病性，目前為止唯一在臨床使用的真菌類微生態(tài)制劑，其具有獨(dú)特的藥理作用，通過(guò)抑制致病微生物的生長(zhǎng)繁殖，減少致病微生物對(duì)粘膜上皮細(xì)胞的粘附和侵襲，釋放短肽蛋白中和、鈍化和降解細(xì)菌毒素，從而發(fā)揮抗致病微生物的作用，另一方面，在腸道內(nèi)布拉氏酵母菌通過(guò)代謝釋放多胺類物質(zhì)(亞精胺和精胺)發(fā)揮許多生理功能，如提高小腸絨毛膜二糖酶水平，提高堿性磷酸酶，刺激腸道釋放分泌型IgA，提高腸道局部抗感染能力，尤其最近研究發(fā)現(xiàn)，布拉氏酵母菌通過(guò)抑制炎癥信號(hào)途徑中NF-κB的易位而抑制炎癥信號(hào)途徑，發(fā)揮抗炎癥作用。以上研究表明使用布拉氏酵母菌可加快病情恢復(fù)，縮短住院時(shí)間。對(duì)于小兒腹瀉的治療和預(yù)防都有很顯著的作用，并且具有較好的療效及安全性，更重要的，布拉氏酵母菌具有強(qiáng)大的利用葡萄糖的能力，能快速降低腸道中葡萄糖的含量，減少血糖含量。本發(fā)明復(fù)合益生菌液含有大量活的青春雙歧桿菌與植物乳桿菌，本發(fā)明中的保健液中含有大量的活性的乳桿菌與雙歧桿菌，乳桿菌與雙歧桿菌能促進(jìn)蛋白質(zhì)、單糖及鈣、鎂等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，產(chǎn)生維生素B族等大量有益物質(zhì)；使腸道菌群的構(gòu)成發(fā)生有益變化，改善人體胃腸道功能，恢復(fù)人體腸道內(nèi)菌群平衡，形成抗菌生物屏障，維護(hù)人體健康；抑制腐敗菌的繁殖，消解腐敗菌產(chǎn)生的毒素，清除腸道垃圾；抑制膽固醇吸收，降血脂、降血壓作用；可提高SOD酶活力，消除人體自由基，具抗衰老、延年益壽作用；有效預(yù)防女性泌尿生殖系統(tǒng)細(xì)菌感染；控制人體內(nèi)毒素水平，保護(hù)肝臟并增強(qiáng)肝臟的解毒、排毒功能。本發(fā)明中含有大量的丁酸梭菌，丁酸梭菌能促進(jìn)有益的雙歧桿菌、乳酸菌、擬桿菌的增殖和有效的抑制引起疾病的葡萄球菌、念珠菌、克雷伯菌、彎曲桿菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、痢疾桿菌和傷寒沙門菌以及腐敗菌的繁殖，從而減少了胺類、吲哚類和硫化氫等有害物質(zhì)。丁酸梭菌通過(guò)利用大量的葡萄糖等還原糖代謝的主要產(chǎn)物為丁酸，而丁酸是腸道上皮組織細(xì)胞的再生和修復(fù)的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。因此，對(duì)腸道上皮組織的再生和修復(fù)有很重要的意義。用丁酸梭菌或與雙歧桿菌、益生元等合用，對(duì)于因菌群失調(diào)而引起的急慢性腹瀉、腸易激綜合癥、抗生素相關(guān)性腸炎、便秘等癥狀有良好的療效，對(duì)于腸炎、肝硬化和放療、化療造成的免疫功能下降也能起到輔助的治療作用。不少資料還說(shuō)明，該菌還能促進(jìn)維生素E的吸收，降解膽酸和提高抗氧能力。本發(fā)明的有益效果與優(yōu)點(diǎn)：、本發(fā)明的復(fù)合益生菌液使用的布拉氏酵母菌、木醋桿菌、植物乳桿菌、青春雙歧桿菌、地衣芽孢桿菌，丁酸梭菌是經(jīng)過(guò)仔細(xì)篩選，在發(fā)酵過(guò)程中是互惠互利的共生關(guān)系，采用了特殊的發(fā)酵工藝生產(chǎn)的。在發(fā)酵開(kāi)始階段（A發(fā)酵罐中），由于木醋桿菌不能直接利用蔗糖或利用蔗糖的速度很慢，由布拉氏酵母菌將蔗糖降解為葡萄糖和果糖，并進(jìn)一步發(fā)酵產(chǎn)生乙醇，木醋桿菌則在培養(yǎng)液中有了葡萄糖、果糖和乙醇之后開(kāi)始大量生長(zhǎng)繁殖，將葡萄糖和果糖氧化產(chǎn)生葡萄糖酸、乙酸等代謝產(chǎn)物，并將酵母產(chǎn)生的乙醇氧化生成乙酸。在整個(gè)發(fā)酵的前期階段布拉氏酵母菌繁殖起重要作用。有資料表明，酵母菌產(chǎn)生的乙醇能刺激木醋桿菌的生長(zhǎng)，產(chǎn)生更多的纖維素膜和乙酸，而木醋桿菌產(chǎn)生的乙酸又會(huì)刺激酵母菌產(chǎn)生乙醇，而乙酸、乙醇的存在可保護(hù)木醋桿菌和酵母菌，從而使得殘葡萄糖含量低于0.2g/L,可以說(shuō)其葡萄基本上都被代謝掉了，要么成為細(xì)菌纖維素，要么成為葡萄糖酸、乙酸等代謝產(chǎn)物。同樣，在發(fā)酵罐B中，前期有較多的溶氧的時(shí)候，地衣芽孢桿菌會(huì)快速生長(zhǎng)，隨著溶氧的下降，地衣芽孢生長(zhǎng)速度下降，此時(shí)，青春雙歧桿菌、丁酸梭菌在L-阿拉伯糖與低聚木糖的促進(jìn)下，快速生長(zhǎng)，特別是丁酸梭菌在混菌發(fā)酵時(shí)，能達(dá)到20億CFU/ml是沒(méi)有預(yù)料到的。、本發(fā)明中通過(guò)發(fā)酵產(chǎn)生了大量的細(xì)菌纖維素，其會(huì)使人體感到飽腹效果，從而減少糖類物質(zhì)的食用，從而控制體重與降低血糖。、本發(fā)明的復(fù)合益生菌液進(jìn)入人體后，其中的L-阿拉伯糖能抑制水解雙糖的酶，因此抑制因攝入蔗糖(在小腸蔗糖酶的作用下分解成葡萄糖和果糖而被吸收)而導(dǎo)致的血糖升高；另外，本發(fā)明的復(fù)合益生菌液本身的殘葡萄糖含量就很低，攝入后其殘葡萄糖無(wú)法被人體吸收。、本發(fā)明中的布拉氏酵母菌，地衣芽孢桿菌，丁酸梭菌，木醋桿菌，青春雙歧桿菌，植物乳桿菌，在腸道中大量繁殖，吸收利用大量的葡萄糖，果糖，起到了腸道的第一層防護(hù)，減少腸道對(duì)葡萄糖等糖原的吸收，從而控制體重與降低血糖。、本發(fā)明中的低聚木糖，布拉氏酵母菌，地衣芽孢桿菌，丁酸梭菌，木醋桿菌，青春雙歧桿菌，植物乳桿菌都可以調(diào)節(jié)腸道菌群，抑制有害菌的生長(zhǎng)，體內(nèi)有大量益生菌存在，而且它們都在積極消耗有害菌，從而在體內(nèi)輸送的葡萄糖就會(huì)減少。直接結(jié)果就是血液里的葡萄糖減少。如果血液里葡萄糖含量減少，被肝用來(lái)制造肝糖(或進(jìn)行其他活動(dòng))的葡萄糖就減少了，而身體就是通過(guò)把葡萄糖轉(zhuǎn)化成肝糖來(lái)對(duì)其進(jìn)行儲(chǔ)存的。最后，如果制造的肝糖減少了，一段時(shí)間之后，身體能夠轉(zhuǎn)化為葡萄糖的肝糖就減少了，因此，體重與血糖也下降了。、本發(fā)明復(fù)合益生菌液含有的多種益生菌都能促進(jìn)蛋白質(zhì)、單糖及鈣、鎂等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，產(chǎn)生維生素B族等大量有益物質(zhì)；使腸道菌群的構(gòu)成發(fā)生有益變化，改善人體胃腸道功能，恢復(fù)人體腸道內(nèi)菌群平衡，形成抗菌生物屏障，維護(hù)人體健康；抑制腐敗菌的繁殖，消解腐敗菌產(chǎn)生的毒素，清除腸道垃圾；抑制膽固醇吸收，降血脂、降血壓作用；可提高SOD酶活力，消除人體自由基，具抗衰老、延年益壽作用；控制人體內(nèi)毒素水平，保護(hù)肝臟并增強(qiáng)肝臟的解毒、排毒功能。、臨床試驗(yàn)結(jié)果表明：口服本發(fā)明的復(fù)合益生菌液的患者，初步判定在血糖達(dá)標(biāo)時(shí)間、改善糖耐量、改善胰島素及c膚釋放方面要優(yōu)于單純應(yīng)用二甲雙胍者。另外，本發(fā)明的復(fù)合益生菌液在改善胰島素抵抗、保護(hù)胰島細(xì)胞功能方面確有療效，并且無(wú)副作用。具體實(shí)施方式實(shí)施例1一種防治糖尿病并控制體重的復(fù)合益生菌液，其特征在于，所述復(fù)合益生菌組份及重量份數(shù)配比為：丁酸梭菌種子液15份、脫脂大豆粉15份、布拉氏酵母菌種子液30份、植物乳桿菌種子液10份、木醋桿菌種子液8份、青春雙歧桿菌種子液15份、地衣芽孢桿菌種子液15份、紅糖40份、脫脂奶粉15份、蜂蜜15份、氯化鈉3份、阿拉伯糖15份、低聚木糖8份和純化水800份，其制備過(guò)程包括：（1）.在1000L發(fā)酵罐A中加入紅糖40份、脫脂大豆粉15份、氯化鈉2份、純化水400份，混勻后再在115℃下保溫30分鐘，然后降溫至30℃；再向發(fā)酵罐A中加入布拉氏酵母菌種子液30份、植物乳桿菌種子液10份、木醋桿菌種子液8份，每24小時(shí)攪拌30分鐘；培養(yǎng)前期48小時(shí)，通氣量為每分鐘的液氣比為1：0.8，通氣過(guò)程維持發(fā)酵液pH5.8-6.8，48小時(shí)后不再通氣，同時(shí)不再調(diào)pH，繼續(xù)靜置培養(yǎng)，在30℃-35℃下培養(yǎng)116小時(shí)，待PH降低至4.2，檢測(cè)布拉氏酵母菌含量為1.8億CFU/ml，細(xì)菌纖維含量為1.6g/L，殘葡萄糖含量為0.12g/L,總菌含量為15億CFU/ml，即可停止A罐的第一階段發(fā)酵；（2）.在600L發(fā)酵罐B中加入蜂蜜15份、脫脂奶粉15份、阿拉伯糖15份、低聚木糖8份、氯化鈉1份、純化水400份，混勻后再在108℃下保溫30分鐘，然后降溫至37℃；向發(fā)酵罐B中加入丁酸梭菌種子液15份、青春雙歧桿菌種子液15份、地衣芽孢桿菌種子液15份，在35℃-37℃下靜止厭氧培養(yǎng)88小時(shí)，檢測(cè)丁酸梭菌的芽孢含量為24億CFU/ml，總菌含量為45億CFU/ml，即可停止發(fā)酵；（3）.當(dāng)兩個(gè)發(fā)酵罐達(dá)到指標(biāo)后，將發(fā)酵罐B中的菌液移至發(fā)酵罐A中，攪拌均勻，在30℃-33℃下靜止繼續(xù)厭氧培養(yǎng)44小時(shí)，檢測(cè)其PH降至3.0，總活菌含量為38億CFU/ml，細(xì)菌纖維含量為0.9g/L，檢測(cè)丁酸梭菌的芽孢含量為19億CFU/ml，即可停止發(fā)酵，無(wú)菌灌裝，100ml/瓶，包裝成品。其中，布拉氏酵母菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用YPD固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種150毫升YPD培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中30℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)。種子采用5%的接種量，接種至裝有2L酵母菌培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，30℃震蕩培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)5億CFU/ml，即可作為布拉氏酵母菌種子液接種；其中，所述的YPD固體培養(yǎng)基：酵母膏10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL；其中，所述的酵母菌培養(yǎng)基：紅糖15g/L，酵母膏3g/L，蛋白胨5g/L，硫酸銨3g/L，硫酸鎂0.5g/L；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。其中，植物乳桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用MRS固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，37℃厭氧培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種250毫升MRS培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中37℃厭氧培養(yǎng)24小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有9L乳酸菌培養(yǎng)基的10L大三角瓶中，37℃厭氧培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)50億CFU/ml，即可作為植物乳桿菌種子液接種，其中，所述的MRS培養(yǎng)基：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏10g/L，葡萄糖20g/L，醋酸鈉5g/L，檸檬酸二銨2g/L，吐溫-801ml/L，硫酸鎂0.6g/L，硫酸錳0.05g/L，磷酸氫二鉀2g/L，瓊脂20g/L，碳酸鈣20g/L；其中，所述的乳酸菌培養(yǎng)基：葡萄糖4%，蛋白胨1.2%，牛肉膏0.75%，氯化鈉0.1%，硫酸錳0.001%，硫酸鎂0.02%，醋酸鈉0.05%，碳酸鈣1%，pH6.0；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。其中，木醋桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用木醋桿菌固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，30℃培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種至50毫升木醋桿菌液體培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中30℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有2L木醋桿菌液體培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，30℃，150r/min震蕩培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)10億CFU/ml，即可作為木醋桿菌種子液接種，其中，所述木醋桿菌固體培養(yǎng)基：葡萄糖40.0，蛋白胨8，檸檬酸1.2，磷酸氫二鈉1.0，磷酸二氫鈉2.0，硫酸鎂0.3，瓊脂18.0，去離子水1L，pH6.8，121℃滅菌20分鐘；其中，所述的木醋桿菌液體培養(yǎng)基：葡萄糖20.0，蛋白胨4.0，檸檬酸2.0，磷酸二氫鈉2.7，硫酸鎂0.25，去離子水1L，pH6.8，12l℃滅菌20分鐘。其中，地衣芽孢桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用LB固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，37℃培養(yǎng)48小時(shí)，在平板下挑取單個(gè)菌落接種50毫升LB培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中37℃震蕩培養(yǎng)24小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有2L地衣芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的5L大三角瓶中，37℃震蕩培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，芽孢含量超過(guò)60億CFU/ml，即可作為地衣芽孢桿菌種子液接種。其中所述LB固體培養(yǎng)基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂20g，水1000mL，pH7.2；其中所述地衣芽孢桿菌液體培養(yǎng)基：葡萄糖10g/L，玉米淀粉10g/L，豆粕粉30g/L，硫酸鎂0.5g/L，硫酸錳0.5g/L，磷酸二氫鈉0.5g/L，氯化鈉2g/L，pH7.2；各培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。其中，青春雙歧桿菌種子液按以下方法制備：取出菌種保藏管，用雙歧桿菌固體培養(yǎng)基劃平板進(jìn)行復(fù)蘇，37℃厭氧培養(yǎng)72小時(shí)。在平板下挑取單個(gè)菌落接種50毫升雙歧桿菌培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)箱中37℃厭氧培養(yǎng)48小時(shí)，種子采用5%的接種量，接種至裝有9.5L雙歧桿菌培養(yǎng)基的10L大三角瓶中，37℃厭氧培養(yǎng)20-28小時(shí)，檢測(cè)其菌液濃度，菌含量超過(guò)10億CFU/ml，即可作為青春雙歧桿菌種子液接種；其中，所述的雙歧桿菌培養(yǎng)基：蛋白胨5.0g/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏5.0g/L，胰蛋白胨10.0g/L，葡萄糖10.0g/L，醋酸鈉5.0g/L，檸檬酸二銨2.0g/L，吐溫-801.0ml/L，硫酸鎂0.1g/L，硫酸鋅0.25g/L，磷酸氫二鉀2g/L，瓊脂20g；培養(yǎng)基滅菌的條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌30分鐘。其中，丁酸梭菌種子液按以下方法制備：取-80℃甘油管保藏的菌種1mL接種于裝有9mLRCM培養(yǎng)基的試管中，37℃條件下靜態(tài)厭氧活化48h，將活化好的菌種按1%(v/v)的接種量轉(zhuǎn)接到滅過(guò)菌的10L丁酸梭菌種子培養(yǎng)基中，37℃條件下靜態(tài)厭氧培養(yǎng)24h~36h，菌含量超過(guò)5億CFU/ml，即可作為丁酸梭菌種子液接種；其中，所述的RCM培養(yǎng)基：胰蛋白陳10g/L，牛肉膏10g，酵母膏10g/L，葡萄糖5g/L，氯化鈉5g/L，可溶性淀粉1g/L，半胱氨酸鹽酸鹽0.5克/L，醋酸鈉3g/L，pH7.0，121℃滅菌20min；其中，所述的丁酸梭菌種子培養(yǎng)基：:酵母膏15g/L，牛肉膏5g/L，KH2PO42g/L硫酸鎂1g/L，半胱氨酸鹽酸鹽1g/L，NaHCO31g/L，CaCO31g/L，葡萄糖20g/L，PH7.0，121℃滅菌20min。實(shí)施例2在240例2型肥胖型糖尿病患者進(jìn)行試驗(yàn)，均符合WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)，且符合以下條件：初次確診或確診不超過(guò)半年未治療且空腹血糖≥10.9mmol/L；無(wú)嚴(yán)重急慢性并發(fā)癥。治療方法：將符合條件的240例患者按肥胖程度與糖尿病嚴(yán)重程度分為兩組。對(duì)照組：在對(duì)患者進(jìn)行糖尿病健康知識(shí)教育和飲食治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用二甲雙胍，二甲雙胍每次0.5g，每日2次。試驗(yàn)組：在對(duì)患者進(jìn)行糖尿病健康知識(shí)教育和飲食治療的基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用復(fù)合益生菌液，每日三次，飯前飲用，每日一瓶。兩組患者在性別，年齡、體重指數(shù)、糖化血紅蛋白，空腹血糖、大致發(fā)病時(shí)間分布上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察指標(biāo)安全性指標(biāo)：如血常規(guī)，大便常規(guī)，肝功能、腎功能檢查、心電圖等；療效性指標(biāo)：治療前后體重指數(shù)，血糖達(dá)標(biāo)時(shí)間；實(shí)驗(yàn)室檢查：治療后糖化血紅蛋白，糖耐量實(shí)驗(yàn)、胰島素及C肽釋放試驗(yàn)。胃腸道不良反應(yīng)指標(biāo)：如惡心、嘔吐、腹脹、腹痛等。2結(jié)果只經(jīng)過(guò)一個(gè)月的試驗(yàn)，試驗(yàn)組對(duì)減輕肥胖程度有明顯的效果，體重指數(shù)治療前后變化見(jiàn)表1。后來(lái)在試驗(yàn)組的基礎(chǔ)上，繼續(xù)服用本發(fā)明的復(fù)合益生菌液一天一次，每次30mL，總共三個(gè)月后，試驗(yàn)組有28人BMI達(dá)到正常指標(biāo)（小于24），偏胖（BMI24-27.9）人數(shù)為58人，肥胖（BMI27.9-29）20人，肥胖（BMI29-30）13人，重度肥胖（BMI30-35）1人。表1體重指數(shù)變化肥胖程度BMI對(duì)照組治療前對(duì)照組治療后試驗(yàn)組治療前試驗(yàn)組治療后偏胖24-27.92830285027.9-294848464429-3032303520重度肥胖30-351212116血糖達(dá)標(biāo)時(shí)間試驗(yàn)組明顯少于對(duì)照組，見(jiàn)表2。表2血糖達(dá)標(biāo)時(shí)間治療后的實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果糖化血紅蛋白試驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組。.糖耐量試驗(yàn)：餐后3小時(shí)兩組無(wú)顯著差異，余時(shí)間試驗(yàn)組比對(duì)照組明顯降低。C肽釋放試驗(yàn)：試驗(yàn)組較對(duì)照組在空腹及餐后1小時(shí)釋放明顯增多，餐后2小時(shí)，3小時(shí)也差異明顯。胰島素釋放試驗(yàn)：試驗(yàn)組1小時(shí)較對(duì)照組胰島素釋放明顯增多，見(jiàn)表3-6。表3兩組患者治療前后HbAlc(%)結(jié)果比較組別治療前治療后試驗(yàn)組9.8±2.45.3±1.2對(duì)照組9.7±2.26.7±1.8表4兩組患者治療前后糖耐量試驗(yàn)（mmol/L）結(jié)果表5兩組患者治療前后C肽釋放試驗(yàn)（ng/ml）結(jié)果表6兩組患者治療前后胰島素釋放試驗(yàn)結(jié)果（Uu/ml）安全性觀察結(jié)果本發(fā)明中的試驗(yàn)組受試者于治療前后分別進(jìn)行安全性指標(biāo)檢測(cè)，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)明顯異常改變，說(shuō)明本發(fā)明的復(fù)合益生菌液使用安全，無(wú)明顯不良反應(yīng)。胃腸道不良反應(yīng)結(jié)果見(jiàn)表7。表7胃腸道不良反應(yīng)結(jié)果組別胃腸道反應(yīng)人數(shù)試驗(yàn)組0對(duì)照組55曲型病例：張某：男，57歲，患糖尿病10年，打胰島素5年，肥胖BMI系數(shù)為30.24，未服用本發(fā)明的復(fù)合益生菌液前，控制飲食，體質(zhì)虛弱，最高血糖18.4mmol/L、甘油三脂7.9mmol/L、總膽固醇9.5mmol/L。服用本發(fā)明復(fù)合益生菌液33mL/次，一天三次，15天后，即停止打胰島素，30天后，改為一天服用本發(fā)明復(fù)合益生菌液一天一次，每次33mL，兩個(gè)月后，檢查，血糖5.4mmol/L、甘油三脂2.1mmol/L、總膽固醇4.3mmol/L、BMI系為28.1，體質(zhì)全面恢復(fù)正常。孫某：男，69歲，患糖尿病18年，打胰島素13年，肥胖BMI系數(shù)為29.93，未服用本發(fā)明的復(fù)合益生菌液前，控制飲食，最高血糖17.8mmol/L、甘油三脂7.7mmol/L、總膽固醇9.5mmol/L。服用本發(fā)明復(fù)合益生菌液33mL/次，一天三次，15天后，即停止打胰島素，30天后，改為一天服用本發(fā)明復(fù)合益生菌液一天兩次，每次30mL，45天后，檢查，血糖5.7mmol/L、甘油三脂2.4mmol/L、總膽固醇4.5mmol/L、BMI系為28.3，體質(zhì)全面恢復(fù)正常。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3