專利名稱：制備含1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-s-氧化物的藥劑的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及5-苯基-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物作為藥理活性物質的應用，特別對大的哺乳動物，尤其是人類的肝損傷的治療和預防作用，本發(fā)明還涉及含有作為有效成分的5-苯基-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的藥劑，以及具有有價值的藥用性質、特別是肝保護性質的新的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的化合物。
Perez等(Libiegs Ann.Chem(李比?；瘜W年報).1981，1510-1512)、Tamayaki等(Chem.Lett(化學通迅)1980，619-620)和Boehringer等(Phospholus and Sulfur(磷和硫)，12(1981)，115-122)研究三硫酮的氧化反應，從中得知了5-苯基-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物，但該化合物迄今未見報導有藥理活性。
茴香三硫酮(5-(4-甲氧基苯基)-3 H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮)作為利膽藥是現(xiàn)有有售的藥劑(商品名為Suifarlem 、Felvitin)，該藥劑也已知是具有保肝性質的藥品。
本發(fā)明的目的是開發(fā)對肝損傷有預防和治療作用的新藥劑。本發(fā)明進一步目的是制備具有有價值的藥理性質的新的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮衍生物。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)通式為Ⅰ的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物這一類化合物具有有價值的藥理性質，特別是顯示出肝保護性質。
式中，R1為氫、C1-2烷基、低碳烷氧基、羥基、鹵素、三氟甲基或硝基;
R2為氫、鹵素或低碳烷氧基;或R1與R2連結于相鄰的碳原子上，共同形成含1-2個碳原子的亞烷二氧基。
它們的顯著特點是，有好的配伍性，較少毒性，特別是對肝臟有保護作用，使之免于受外源性肝毒性物質的損傷。
基于它們的藥理性質，特別是基于肝保護作用，式Ⅰ所示的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物適宜于作為藥物，特別是用于預防和治療肝損傷，例如由于藥物的使肝中毒的劑量、化學毒物或射線引起的肝損傷。
通式Ⅰ所示的化合物的R1和R2所含的低碳烷基可以是直鏈或支鏈，含C1-C4較好，尤其是1-2個碳原子的更好。低碳烷氧基R1或R2最好是甲氧基。R1或R2為鹵素取代基時可考慮是氟、氯或溴，最好是氯或氟。
若R1是一個烷基時，最好是甲基，并處于2-位或3-位。R1若是鹵素取代基時，最好處于4-位。R2最好是氫。
通式Ⅰ的5-苯基-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物顯示有價值的藥理性質，尤其是肝保護性質，并且有較好的配伍性和毒性小的特征。
這樣，這類物質能夠使肝臟免受損傷，例如能夠保護肝臟免受外源性肝毒物質引起的損傷或對抗這些毒物。
眾所周知，一定劑量的一些化學物質和某些藥物可引起肝細胞的損傷，并導致肝臟細胞溶解和肝壞死。肝細胞發(fā)生細胞溶解性的損傷時，某些轉氨酶由受損傷的肝細胞中釋放到循環(huán)血液的量增加了，測定這些轉氨酶在血清中的活性，就能夠確定肝臟的損傷和評價受損傷的程度。
醋氨酚(即撲熱息痛或稱4-(N-乙?；被?酚)就是一種已知的有肝損傷作用的物質。在生理允許的劑量下，通常它作為鎮(zhèn)痛劑，但在大劑量時，卻是一種很強的肝毒物質。高劑量的醋氨酚引起嚙齒類的肝損傷，類此可知它能引起人的肝壞死。因此醋氨酚作為致肝毒的標準物，用于動物的標準化藥理試驗，以評價受試物質的肝保護作用。
通式Ⅰ的化合物對醋氨酚的肝損傷作用具有明顯的防護作用，如同后面所述的動物藥理標準化試驗所指出的那樣。
文獻上對醋氨酚的代謝作用及肝毒性作用已作了詳盡的討論。例如，已知醋氨酚代謝物與谷胱甘肽的結合作用，對于醋氨酚的解毒和清除起著重要的作用，還知，當給以過量的醋氨酚時，造成了細胞中谷胱甘肽的匱乏，這時就出現(xiàn)了特別強烈的肝毒性。此外還已知，肝毒性作用還部分地由于代謝作用生成的活性物質與肝組織的大分子形成共價鍵;還已知，由于細胞膜的脂質過氧化作用以及其中產(chǎn)生的過量的活潑自由基、特別是氧自由基，它們在醋氨酚的肝毒性作用中起著關鍵的作用。這樣，通式Ⅰ所示的5-苯基-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物對于因醋氨酚誘發(fā)的肝損傷的防護作用表明，這些化合物具有阻斷脂質過氧化的性質，它們可能起到了自由基捕獲劑的作用和具有抗氧化作用。
藥理試驗的說明A)對于過量醋氨酚引起的小鼠死亡的保護作用的測定每組試驗用雌性小鼠20-30只，體重約20g。試驗中，動物給以常規(guī)的飼料量，可隨時攝取pH為3的飲水。
這些動物的致毒作用是給腹腔注入1000mg/kg的醋氨酚(懸浮于0.5ml的阿拉伯膠的水溶液中)而產(chǎn)生的。
致毒前1小時，用灌胃器對一個試驗組的動物給予懸浮劑形式的受試化合物50mg/kg。對照組用同樣數(shù)量的動物，致毒前1小時只給所說懸浮劑。
觀察在6天內各試驗組的動物死亡的數(shù)目，并由此計算受試物的保護作用，用達到的百分保護率表示(即受試組動物的死亡數(shù)與對照組動物的死亡數(shù)之差，除以各組的動物數(shù))。
下面的表A列出了用上述試驗方法得到的結果。對式Ⅰ化合物列出的實施例號是指后面所述的制備實施例號。
表A
<p>B)對醋氨酚誘導的小鼠肝損傷，使血清中轉氨酶值增高的防護作用的測定本試驗用體重約25g的雌性小鼠，動物可攝取所給食物和隨意飲用pH為3的飲水。
動物的致毒作用是將450mg/kg的醋氨酚(懸浮于0.5ml的阿拉伯膠水溶液中)注入腹腔而產(chǎn)生的。
致毒前1小時，作為一種防毒措施，用灌胃器給這些動物以懸浮劑形式的受試有效物質75mg/kg;對照組動物在致毒前1小時只給懸浮劑。
給醋氨酚18小時后，處死動物，切斷頸切脈放血。
對上述兩種藥效試驗的每一種情況，取兩只動物的血樣放在一個試管中，室溫放置2-3小時，在4℃傾析1小時，然后于2500xg離心10分鐘。
血清上清液轉移到塑料試管中，測定其中的轉氨酶SGOT(即血清谷氨酸-草酰乙酸轉氨酶)及SGPT(即血清谷氨酸-丙酮酸轉氨酶)的活性，按照由德國臨床化學協(xié)會推薦的優(yōu)化的標準條件下的已知標準方法測定(見臨床化學及臨床生物化學雜志(Z.Klin.Chem.U.Klin.Biochem.)8(1970)，658-660和同上雜志10(1972)，281-283)，用國際單位/升/分鐘表示。在波長為334nm用自動光譜儀(Eppendorff廠制造，光譜儀No.61)測定其活性。為測定GOT和GPT所用的試劑盒是由Boehringer-Mannheim公司制造的(即GOT和GPT自動測試盒，診斷劑No.258 822和258 784，由Boehringer-Mannheim有限公司制造)。
按上述的試驗方法得到的結果列于表B中。表中的轉氨酶活性用國際單位/升/分鐘表示。從未進行預處理的對照組和進行了預處理的試驗組測得的各個結果求出的平均值(m)和標準偏差(sem)也列于表中。此外，保護作用以達到的百分保護率表示，計算后列于表中(保護率＝對照與試驗組的血清活性平均值之差除以對照組平均值)。

基于通式Ⅰ的化合物的藥理性質，特別是它們的保肝作用，這些化合物適用于預防和治療肝臟損傷。因此這些物質適用于預防和治療由于肝損傷所造成的病理狀態(tài)，例如肝硬化、無意的或事故性的被肝毒化學物質所引起的中毒例如除莠劑、超劑量藥物造成的肝中毒、使用具有肝毒副作用的藥物進行治療，例如癌化療、射線引起的肝損傷，例如癌放療。
使用的劑量隨個體而不同，并根據(jù)接受治療的患者的狀況、使用的物質和給藥方式自然加以變更。用于較大的哺乳動物，特別是人的劑型，一般是每單個劑量含有效物質5-50mg為宜。
本發(fā)明還涉及通式為Ⅰa的新的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的化合物及其制備法。
式中，R1′為C1-2烷基、低碳烷氧基、羥基、鹵素、三氟甲基或硝基;
R2為氫、鹵素或低碳烷氧基;或R1′與R2連結于相鄰的碳原子上，共同形成含1-2個碳原子的亞烷二氧基。
通式Ⅰ表示的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物，可由相應的通式為Ⅱ的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮化合物用已知的方法氧化而獲得。
式中R1與R2的含義同上。
通式Ⅱ表示的化合物的氧化以生成相應的通式Ⅰ化合物的反應，可根據(jù)將1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮氧化成相應的S-氧化物的已知的方法來進行，例如用前面所列的文章中所述的方法進行。
前面引用的文獻中給出了適宜的氧化劑，例如在有含羥基的一種有機溶劑(例如乙酸或甲醇)存在下的過氧化氫;過乙酸的芳香烴(例如苯)溶液;在對反應條件呈惰性的非質子傳遞溶劑例如鹵代烷烴(如二氯甲烷或氯仿)或丙酮中的3-氯過苯甲酸;或在丙酮和低碳醇(特別是甲醇)組成的混合物中的過碘酸鈉。氧化劑的用量以大約等當量為好，最好不要過量，當反應混合物中檢測不出原料了時，反應就立即中止。反應溫度按使用的氧化劑種類而變化，可在-10℃到50℃之間。如需要的話，還可將另外的有機溶劑加到反應介質中，所說有機溶劑在反應條件下呈惰性，例如芳烴(如苯或甲苯)。采用大約等當量(直至過量15%)的3-氯過苯甲酸，在較低的溫度下(例如-25℃到室溫之間)進行氧化，證明是特別適宜的。
生成的通式Ⅰ的化合物用已知的方法能自反應混合物中分離出并純化。
作為原料使用的通式Ⅱ的5-苯基-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮化合物是已知的，且/或可按已知的方法或類似于已知方法的方法制備。
例如，為了制備通式Ⅱb的化合物，可將通式Ⅲ的酮酯用已知的方法進行環(huán)硫化，例如用P4S10處理，更好的是按Pedersen及Lawesson所述的方法(見四面體(Terahedron)35，2433-2437)與式Ⅳ表示的2，4-雙(4-甲氧苯基)-1，3-二硫代-2，4-二膦丁環(huán)-2，4-二硫化物(2，4-bis(4-methoxyphenyl)-1，3-dithia-2，4-oliphosphetan-2，4-disulphide，稱為Lawesson試劑)反應，若在元素硫的存在下則更好。
式Ⅱb中，R1″的定義與前述的R1相同，但羥基除外;R2的定義同前述。
式Ⅲ中，R1″和R2與上述的定義相同，R4為低碳烷烴，特別是乙基。
與Lawesson試劑和元素硫的反應是在惰性溶劑、特別是無水芳香烴如甲苯中、在較高溫度(最好是在反應混合物的沸騰溫度)下進行。每1mol的通式Ⅲ的酮酯采用通式Ⅳ的化合物1-2mol、元素硫1-2mol來進行反應是較好的。
由通式Ⅴ的烯類化合物，在高溫下于一種有機溶劑中與硫磺反應，可獲得通式Ⅱ的化合物 式中R1和R2的定義同前。
該反應最好在高溫、例如175-235℃下進行，用四氫噻吟礬作溶劑，按美國專利No.3，847，943所述的方法進行操作。
通式Ⅱb的化合物的制備，是由式Ⅵ的苯乙酮化合物(式中R1″和R2的定義同前)起始，在堿存在下首先與二硫化碳反應，生成式Ⅶ的化合物(式中R1″和R2的定義同前)
該中間體進而與五硫化二磷反應，生成通式Ⅱ的化合物。
式Ⅵ的化合物與二硫化碳的反應，可以按照(例如)由Thuillier等所述的方法進行(法國化學會志(Bull.Soc.Chim.France)，Série 5，化學會報告集(Mémoires Présentes ála Soc.Chim.)(1959)，1398-1401)。該反應最好是在惰性有機溶劑中例如苯或乙醚中進行，用叔醇的堿金屬如叔丁醇鈉或叔戊醇鈉催化。此時生成的中間體與P2S5反應，最好是在芳香烴如甲苯或二甲苯中、在反應混合物的沸騰溫度下進行。
為了制備通式Ⅱ的、其中R1為羥基的化合物，可將通式Ⅱ中R1為甲氧基的相應的化合物用已知的方法去甲基化。例如甲氧基用氯化吡啶鎓處理，進行酸性裂解。
依據(jù)本發(fā)明，通式Ⅰ的化合物可以與常規(guī)的藥用輔助劑和/或載體共同制成固態(tài)或液態(tài)的藥物制劑。固體制劑的實例有口服制劑如膠囊、片劑、顆粒劑或糖錠劑，或者栓劑。固體制劑可含有制藥上常用的無機和/或有機載體，如滑石粉、乳糖或淀粉;此外，制藥上常用的輔助劑，例如潤滑劑如硬脂酸鎂，或片劑崩解劑。栓劑可含有熟知的栓劑基質。液體劑型如溶液劑、懸浮液或乳劑，可含有常用的稀釋劑如水或石臘油，還可含有分散劑如聚乙二醇等。還可以加入其它的輔料，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、矯味劑。
有效成分可以同藥用輔料和/或載體用已知的方法混合，制成制劑。為了制成固體藥品，例如將有效成分與輔料和/或載體按常規(guī)方法混合，在濕的或干的狀態(tài)下成粒。根據(jù)所用輔料的類型，必要時也可以經(jīng)簡單混合，制成可直接壓片的粉劑。顆粒或粉劑可直接裝入膠囊，或用常規(guī)方法壓成素片，最好是用已知的方法將它們包上糖衣。
下面的實施例對本發(fā)明加以說明，但不應認為以此限制本發(fā)明的范圍。
實施例15-(4-氯苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物a)在100ml無水的甲苯中加入乙酸4-氯苯甲酰乙酯22.7g(0.1mol)、Lawesson試劑(2，4-雙(4-甲氧苯基)-1，3-二噻-2，4-二膦丁環(huán)-2，4-二硫化物)100g(0.25mol)和元素硫6.4g(0.2mol)，于100℃攪拌10小時。反應畢，將含有生成的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮的反應混合物在室溫下冷卻。過濾，濾液倒入300g硅膠柱中。甲苯用輕石油醚洗脫，然后，用甲苯/輕石油醚混合液(50∶50)洗脫5-(4-氯苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮。得到的粗品再一次經(jīng)硅膠柱、用甲苯/輕石油醚洗脫純制后，用甲苯重結晶，得到5-(4-氯苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮9.6g，熔點135℃。
b)將4.9g(0.02mol)的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮溶解于60ml氯仿中。溶液冷卻到0℃，將5.3g純度為80-90%的3-氯代過苯甲酸(約為0.026mol)于150ml氯仿中的溶液滴加到上述的冷溶液中。大約30分鐘滴加完畢，紅色的反應混合物于0℃再保持1小時。
反應畢，反應混合物先用100ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后用水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾。濾液在室溫下減壓濃縮成30ml，殘留物經(jīng)過175g硅膠柱，用氯仿洗脫。此時未反應的原料首先洗脫出，并可回收。然后得到氧化生成的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物。將含有該S-氧化物的洗脫部分在室溫下減壓蒸干，剩余物加入輕石油醚使之結晶，將得到的5-(4-氯苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物紅色固體濾集。在空氣中迅速干燥，得到S-氧化物3.4g，熔點123-125℃。
實施例25-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物a)100g(0.41mol)5-(4-甲氧苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮和335g(2.9mol)的氯化吡啶鎓組成的混合物在210-215℃溫度下加熱4小時。然后將反應混合物冷卻到80℃，用2升的溫水洗滌，以除去吡啶鎓鹽。將400ml 10%的氫氧化鈉水溶液加到剩余物中。將生成的5-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮的鈉鹽濾集，用500ml溫水溶解，加入乙酸，使5-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮沉淀。吸濾并干燥沉淀物。得到的粗品溶解于300ml乙醇與25ml二乙胺的熱混合液中，所得溶液流經(jīng)氧化鋁短柱。用100ml熱乙醇洗脫柱子。得到的紅色洗脫液減壓濃縮到原體積的一半，此時5-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮的二乙胺鹽結晶析出。濾集該紅色結晶，加到250ml烯鹽酸中。得到的懸浮液在室溫下攪拌1小時。沉淀出的5-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮濾出，水洗后，用五氧化二磷干燥。得5-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮23.5g，熔點192℃。
b)在室溫、劇烈攪拌下，將9.4g80-90%的3-氯代基苯甲酸(約0.046mol)于200ml丙酮中的溶液，1小時內加到10g，0.004mol)的5-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮溶于300ml的丙酮溶液中。在室溫下將反應混合物再保持一小時。析出的紅色沉淀5-(4-羥基苯基)-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物吸濾收集，五氧化二磷干燥。得到S-氧化物9.4g，熔點118-124℃。
按照斜面實施例中所敘述的方法，通過氧化通式Ⅱ的對應化合物，也可以制備下表中所列的相應的通式Ⅰ的化合物。
表1
實施例Ⅰ含有5-(4-氯苯基)-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的片劑制備的片劑每片含有如下的組分5-(4-氯苯基)-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物 15mg玉米淀粉 65mg乳糖 135mg明膠(10%溶液形式) 6mg將活性物質、玉米淀粉和乳糖用10%明膠溶液覆蓋，糊狀物攪拌研磨并制成顆粒，放到適當?shù)慕饘俦P上，于45℃干燥。干燥后的顆粒進入粉碎機，并于混合機內與下列的輔助劑再混合滑石粉 5mg硬脂酸鎂 5mg玉米淀粉 9mg然后壓制成240mg片劑。
實施例Ⅱ含有5-苯基-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的膠囊制成的膠囊每個具有如下的組分5-苯基-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物 10mg乳糖 65mg玉米淀粉 40mg可溶性淀粉 4mg硬脂酸鎂 1mg將活性物質、乳糖和玉米淀粉混合，混合物用15%的可溶性淀粉溶液充分濕潤并制成顆粒。濕化物料過1.6mm篩，40℃干燥，然后再過1.0mm篩。所得顆粒與硬脂酸鎂混合后，制成含120mg的膠囊。
按實施例Ⅱ所述的制膠囊方法，也可制造含有作為有效物質的5-(2-甲氧苯基)-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物或5-(4-氟苯基)-3H-1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的膠囊。
權利要求
1.制備具有保肝性質的含通式Ⅰ的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的藥劑的方法， 式中，R1為氫、C1-2烷基、低碳烷氧基、羥基、鹵素、三氟甲基或硝基；R2為氫、鹵素或低碳烷氧基；或R1和R2連結于相鄰的碳原子上，共同形成含1-2個碳原子的亞烷二氧基，其特征是，將有效保肝量的通式Ⅰ的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物與制藥上常用的輔料和/或載體共同制成適宜的藥劑劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及制備含有通式I的1，2-二硫雜環(huán)戊烯-3-硫酮-S-氧化物的保肝藥劑的方法。通式I中R
文檔編號A61K31/365GK1101348SQ9410157
公開日1995年4月12日 申請日期1994年2月9日 優(yōu)先權日1988年5月27日
發(fā)明者多米尼克·拜爾德, 馬利-歐迪·克里斯坦, 帕特里克·丹塞特, 丹尼爾·亞瑟蘭德, 丹尼爾·曼蘇, 亞莫·薩西 申請人:卡利藥物化學股份公司