專利名稱：N－(芳基/雜芳基/烷基乙酰基)氨基酸酰胺類，含有這類化合物的藥物組合物，及用這類 ...的制作方法
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背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及能夠抑制細(xì)胞β-淀粉樣肽釋放和/或合成的化合物，因此該化合物被用于治療阿爾茨海默病。本發(fā)明還涉及含有這類化合物的藥物組合物，以及抑制β-淀粉樣肽釋放的方法。
參考文獻(xiàn)下列公開物，專利和專利申請(qǐng)?jiān)诒旧暾?qǐng)中引用，分別由上標(biāo)數(shù)字代表1Glenner等人，“阿爾茨海默病新型腦血管淀粉蛋白的純化和特征化作用的最初報(bào)告(Alzheimer’s Disease:Initial Report of thePurification and Characterization of a Novel Cerebrovascular AmyloidProtein)”，《生物化學(xué)，生物物理研究通訊(Biochem.Biophys.ResCommun.)》，120:885-890(1984)。
2Glenner等人，“針對(duì)阿爾茨海默病的多肽標(biāo)記及其在診斷學(xué)中的應(yīng)用(Polypeptide Marker for Alzheimer’s Disease and its Use forDiagnosis)”，美國(guó)專利4,666,829，授權(quán)于1987年5月19日。
3Selkoe，“阿爾茨海默病的分子病理學(xué)(The Molecular Pathology ofAlzheimer’s Disease)”，《神經(jīng)元(Neuron)》,6:487-498(1991)。
4Goate等人，“具有家族阿爾茨海默病的淀粉樣前體蛋白基因中的錯(cuò)義突變基因的分離(Segregation of a Missense Mutation in theAmyloid Precursor Protein Gene with Familial Alzheimer’s Disease)”，《自然(Nature)》,349:704-706(1990)。
5Chartier-Harlan等人，“因β-淀粉樣前體蛋白基因中的717密碼子突變引起的早期發(fā)作的阿爾茨海默病(Early-Onset Alzheimer’sDisease Caused by Mutations at Codon 717 of the β-Amyloid PrecursorProtein Gene)”，《自然(Nature)》,353:844-846(1989)。
6Murrell等人，“與遺傳的阿爾茨海默病有關(guān)的淀粉樣前體蛋白中的突變(A Mutation in the Amyloid Precursor Protein Associated withHereditary Alzheimer’s Disease)”，《科學(xué)(Science)》,254:97-99(1991)。
7Mullan等人，“可能造成阿爾茨海默病的β-淀粉樣蛋白N末端的APP基因病理性突變(A Pathogenic Mutation for Probable Alzheimer’sDisease in the APP Gene at the N-Terminus of β-Amyloid)”，《自然遺傳學(xué)(Nature Genet.)》,1:345-347(1992)。
8Schenk等人，“檢測(cè)可溶性β-淀粉樣肽的組合物和方法(Methodsand Compositions for the Detection of Soluble β-Amyloid Peptide)”，國(guó)際專利申請(qǐng)公開WO 94/10569，公開于1994年5月11日。
9Selkoe等人，“淀粉樣蛋白和阿爾茨海默病 (Amyloid Protein andAlzheimer’s Disease)”，《科學(xué)的美國(guó)(Scientific American)》，第2-8頁(yè)，1991年11月。
10《四面體通訊(Tetrahedron Letters)》,34(48),7685(1993)。
11Losse等人，《四面體(Tetrahedron)》,27:1423-1434(1971)。
12Citron等人，“具有家族阿爾茨海默病中的β-淀粉樣前體蛋白的突變?cè)黾恿甩?蛋白的產(chǎn)生(Mutation of the β-Amyloid PrecursorProtein in Familial Alzheimer’s Disease Increases β-ProteinProduction)”，《自然(Nature)》，360:672-674(1992)。
13Hansen等人，“快速準(zhǔn)確測(cè)量細(xì)胞生長(zhǎng)/細(xì)胞死亡的染色法的重新檢驗(yàn)和進(jìn)一步發(fā)展(Reexamination and Further Development of aPrecise and Rapid Dye Method for Measuring Cell Growth/CellKill)”，《免疫學(xué)方法雜志(J.Immun.Meth.)》,119:203-210(1989)。
所有上述公開物，專利和專利申請(qǐng)?jiān)谶@里全部引作參考，就仿佛每個(gè)公開物，專利和專利申請(qǐng)都具體和單獨(dú)地全文在這里引用。
現(xiàn)有技術(shù)阿爾茨海默病(AD)是一種腦退化病，其臨床特征是記憶、識(shí)別、推理、判斷和情緒穩(wěn)定性逐漸喪失，導(dǎo)致智力衰退逐漸加深，最終導(dǎo)致死亡。AD是引起老年人進(jìn)行行智力衰竭(癡呆)的很常見的原因，并被認(rèn)為是在美國(guó)造成死亡的第四大常見病因。在世界各種族和人種中都發(fā)現(xiàn)有人患有AD，并且，它是現(xiàn)在和將來影響公眾健康的一個(gè)主要問題。目前估計(jì)，僅在美國(guó)就有2-3百萬人受到這種疾病的危害?，F(xiàn)在還無法治愈AD。目前還不知道能夠有效預(yù)防AD或扭轉(zhuǎn)其癥狀和病程的治療方法。
患有AD的人腦表現(xiàn)為稱為老年(或淀粉樣)斑，淀粉樣血管病(淀粉樣蛋白沉積在血管中)和神經(jīng)纖維纏結(jié)的特征性損害。大量的這些損害，特別是淀粉樣斑和神經(jīng)纖維纏結(jié)，一般都是在AD患者的對(duì)記憶和識(shí)別功能有重要作用的人腦的幾個(gè)區(qū)域中發(fā)現(xiàn)的。解剖學(xué)分布限定性更強(qiáng)的少量這些損害也在沒有AD臨床癥狀的大多數(shù)老年人腦中發(fā)現(xiàn)了。淀粉樣斑和淀粉樣血管病也是患有21三體型綜合征(唐氏綜合征)和有荷蘭型淀粉樣變性的遺傳性腦出血(HCHWA-D)的人腦的特征。目前，AD的決定性診斷需要觀察已死于AD的患者腦組織中的上述損害，或者(但很少如此)觀察在侵入性神經(jīng)外科手術(shù)期間從腦組織中提取的少量活組織樣本中的上述損害。
作為AD和其它疾病特征的淀粉樣斑和血管淀粉樣沉積(淀粉樣血管病)的主要化學(xué)組成是稱為β-淀粉肽(βAP)或有時(shí)稱為Aβ、AβP或β/A4的約有39-43個(gè)氨基酸的接近4.2千道爾頓(kD)的蛋白質(zhì)。Glenner等人1最先純化了β-淀粉樣肽并且提供了一部分氨基酸的序列。分離方法和前28個(gè)氨基酸的序列數(shù)據(jù)如美國(guó)專利4,666,8292所述。
分子生物學(xué)和蛋白質(zhì)化學(xué)分析的結(jié)果已經(jīng)表明，β-淀粉樣肽只是較其大很多的前體蛋白質(zhì)(APP)上的一小段肽，它是由多種動(dòng)物(包括人類)的許多組織中的細(xì)胞正常產(chǎn)生的?；蚓幋aAPP的結(jié)構(gòu)知識(shí)已經(jīng)證實(shí)，β-淀粉樣肽是用蛋白酶從APP上裂解下來的一段肽段。β-淀粉樣肽段從APP上裂解下來，然后以淀粉樣斑的形式沉積在腦組織和腦壁和腦膜血管壁中，這種現(xiàn)象的準(zhǔn)確的生物化學(xué)機(jī)理目前還是未知的。
幾條證據(jù)都表明，β-淀粉樣肽在腦中的逐漸沉積對(duì)AD的發(fā)病機(jī)理起著種子作用，而且可以先于可識(shí)別的綜合征數(shù)年或數(shù)十年，例如，見Selkoe3。最重要的證據(jù)是發(fā)現(xiàn)了在APP的770氨基酸同種型的717位氨基酸的錯(cuò)義DNA突變可以在有遺傳(家族)性AD的幾個(gè)家族的患病成員中找到，但在未患病成員中沒有找到(Goate等人4；ChartierHarlan等人5；和Murrell等人6)，而且被稱作瑞士變種。1992年Mullan等人7報(bào)告了在瑞士家族中發(fā)現(xiàn)賴氨酸595-蛋氨酸596經(jīng)過雙突變變成天冬氨酸595-亮氨酸596(在695氨基酸同種型)。遺傳連鎖分析已經(jīng)表明，這些突變以及APP基因中的某些其它突變都是這種家族中患病成員患上AD的具體分子原因。另外，在APP的770氨基酸同種型的693位氨基酸的突變已經(jīng)被一致認(rèn)為是β-淀粉樣肽沉積病，HCHWA-D的誘因，而且，在692位氨基酸上，丙氨酸變成甘氨酸看來似乎是造成一些患者有象AD的表現(xiàn)型而其它患者有象HCHWA-D的表現(xiàn)型的原因。這些發(fā)現(xiàn)和其它一般基于AD情況的APP中的突變都證明APP的改變和隨后產(chǎn)生的其β-淀粉樣肽片斷的沉積都會(huì)引起AD。盡管在對(duì)AD和其它與β-淀粉樣肽相關(guān)疾病的機(jī)理的解釋方面已經(jīng)取得的一些進(jìn)展，但治療這些疾病的組合物和方法仍有待開發(fā)。理想的方法是利用能夠在體內(nèi)抑制β-淀粉肽釋放和/或合成的藥物進(jìn)行治療。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及發(fā)現(xiàn)了一類能夠抑制β-淀粉樣肽釋放和/或合成的化合物，因此，該化合物被用于在懷疑可能會(huì)患AD的對(duì)象中預(yù)防AD和/或治療已經(jīng)患有AD的患者以遏制患者病情的進(jìn)一步噁化。這類具有所述性質(zhì)的化合物由下面式(Ⅰ)定義，
其中，R1選自
(a)烷基，鏈烯基，烷芳基，烷基環(huán)烷基，芳基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，雜芳基和雜環(huán)，其中雜芳基或雜環(huán)可以任意被1-3個(gè)下列基團(tuán)取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，硫代烷氧基和硫代芳氧基；(b)式(Ⅱ)取代的苯基，
其中R是有1-8個(gè)碳原子的亞烷基，m是0或1，Ra和Ra’獨(dú)立地選自氫，羥基，氟和甲基；Rb和Rb’獨(dú)立地選自氫，烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，雜芳基，雜芳氧基，雜環(huán)，硝基，三鹵代甲基，硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代雜芳氧基及-C(O)R4，其中R4選自烷基，芳基，烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫，烷基，芳基，氰基，鹵素，硝基，而且Rb和Rc與苯環(huán)一起被稠合成亞甲基二氧基環(huán)；及如果Rb和/或Rb’和/或Rc是氟，氯，溴和/或硝基，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及(c)在5,6,7和/或8位被1-4個(gè)下列取代基取代的1-或2-萘基烷基，烷氧基，鹵素，氰基，硝基，三鹵代甲基和硫代烷氧基；R2選自氫，有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基，有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基；及R3和R3’獨(dú)立地選自(a)氫，條件是R3和R3’不能同時(shí)為氫；(b)烷基，條件是，如果R3是氫，則R3’烷基是從氮原子算起至少有5個(gè)碳原子鏈長(zhǎng)的直鏈，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代，還一個(gè)條件是如果R3和R3’均為烷基，則至少其中一個(gè)烷基的鏈長(zhǎng)至少有5個(gè)碳原子，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代；
(c)-(R7)n(W)p，其中R7是亞烷基，W選自(ⅰ)下式
其中R5,R5’,R9和R9’分獨(dú)立地選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，酰基，?；被?，酰氧基，氨基?；?，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)；及R6選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，酰基，?；被Ｑ趸?，烷氧基，取代的烷氧基，氨基?；杌?，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)，且R6與R5或R5’之一稠合成有4-10個(gè)原子的雜環(huán)，其中1-3個(gè)雜原子選自氧，氮和硫；條件是，如果n是0，則R9和R9’是氫；(ⅱ)雜芳基；及(ⅲ)N-雜環(huán)，條件是，如果W是N-雜環(huán)，則n非0；及n是0或1，及p是1-3的整數(shù)，條件是，如果n是0，則p等于1；及(d)-CH(φ)CH2C(O)O-Q，其中Q選自烷基，芳基，雜芳基和雜環(huán)；X′是氫，羥基或氟；X″是氫，羥基或氟，或者X′和X″一起形成氧基，Z選自共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鏈，氧和硫；及條件是，如果R1是苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
則(ⅰ)R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫，及(ⅱ)R5,R5’,R9,R9’是氫，R6是甲氧基；還一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是1且p是1,R7是亞乙基及W是
則R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫；及再一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
以及R5’,R9,R9’是氫，則R5和R6不能與它們相連的苯環(huán)稠合成苯二酰亞氨基。
因此，在其方法方面，本發(fā)明涉及抑制β-淀粉樣肽在細(xì)胞中釋放和/或合成的方法，該方法包括將上述式Ⅰ化合物或其混合物以能有效抑制β-淀粉樣肽在細(xì)胞內(nèi)釋放和/或合成的量給這種細(xì)胞使用。由于β-淀粉樣肽在體內(nèi)的產(chǎn)生與AD的發(fā)病機(jī)理有關(guān)8,9，所以，式Ⅰ化合物可以用在藥物組合物中以預(yù)防性和/或治療性地預(yù)防和/或治療AD。因此，作為方法的另一方面，本發(fā)明涉及在有AD發(fā)展危險(xiǎn)的患者中預(yù)防AD發(fā)作的預(yù)防方法，該方法包括給所說患者使用含有藥用惰性載體和有效量的上述式Ⅰ化合物或其混合物的藥物組合物。
本發(fā)明方法還有一個(gè)方面是本發(fā)明涉及治療患有AD的患者的治療方法以遏制所說患者的病情進(jìn)一步噁化，該方法包括給所說患者使用含有藥用惰性載體和有效量的上述式Ⅰ化合物或其混合物的藥物組合物。
在上述式Ⅰ中，優(yōu)選的R1中的未取代芳基包括，例如，苯基，1-萘基，2-萘基等。
優(yōu)選的R1中的取代的芳基包括，例如，在2,3或4位有單個(gè)取代基的單取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Rb和Rc基團(tuán)代表；二取代苯基包括在2,3-位，2,4-位，2,5-位，2,6-位，3,4-位，3,5-位或3,6-位有兩個(gè)取代基的苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表；三取代苯基包括在2,3,4-位，2,3,5-位，2,3,6-位，3,4,5-位或3,4,6-位有三個(gè)取代基的苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表。取代的苯基最好只包括三個(gè)以下(含三個(gè))取代基。
取代的苯基的實(shí)例包括，例如，4-氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-硝基苯基，4-甲基苯基，3-甲氧基苯基，3-硝基苯基，3-氟苯基，3-氯苯基，3-溴苯基，3-硫代甲氧基苯基，3-甲基苯基，3-三氟甲基苯基，2-羥基苯基，2-甲基苯基，2-氟苯基，3,4-二氯苯基，3,4-亞甲基二氧基苯基，3,5-二氟苯基，3,5-二氯苯基，2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
優(yōu)選的R1中的烷芳基包括，例如，芐基，3-苯乙基，4-苯基-正丙基等。
優(yōu)選的R1中的烷基，環(huán)烷基和環(huán)烯基包括，例如，仲丁基，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)己基，環(huán)戊基，環(huán)己-1-烯基，-CH2-環(huán)丙基，-CH2-環(huán)丁基，-CH2-環(huán)己基，-CH2-環(huán)戊基，-CH2CH2-環(huán)丙基，-CH2CH2-環(huán)丁基，-CH2CH2-環(huán)己基，-CH2CH2-環(huán)戊基等。
優(yōu)選的R1中的雜芳基和取代的雜芳基包括，例如，吡啶-3-基，吡啶-4-基，噻吩-2-基，噻吩-3-基，苯并噻唑-4-基，2-苯基苯并噁唑-5-基，呋喃-2-基，苯并呋喃-2-基，硫代萘-2-基，2-氯噻吩-5-基，3-甲基異噁唑-5-基，2-(硫代苯基)噻吩-5-基，6-甲氧基硫代萘-2-基，3-苯基-1,2,4-硫代噁二唑-5-基，2-苯基噁唑-4-基等。
優(yōu)選的R2選自有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基和有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基。特別優(yōu)選的R2取代基包括，例如，甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，-CH2CH2SCH3等。
優(yōu)選的R3是氫，而R3’選自3-羥基苯基，3-甲氧基苯基，3-乙氧羰基苯基，正己基，正辛基，4-乙氧羰基苯基，4-甲氧羰基苯基，3-氯苯基，3-氰基苯基，3,5-二氯苯基，-CH(CH3)φ(R立體異構(gòu)體)，-CH(CH3)φ(S立體異構(gòu)體)，酞-6-基，2-羥基吡啶-3-基，2-(甲氧羰基甲基)芐基，3-(甲氧羰基)芐基，2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基和2-苯基芐基。
用于本發(fā)明方法和組合物的特別優(yōu)選的化合物包括，例如，N-(3-羥基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(正己基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(正辛基)-N’-(3,5-二氯苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺
N-(3-氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3,5-二氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-氰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(酞-6-基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(4-甲氧羰基苯基)甲基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(1-氰基-1-苯基甲基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(R)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(S)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-羥基吡啶-3-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[2-甲氧羰基-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[α-吡啶-2-基-芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[1-(N-鄰苯二甲酰氨基)戊-2-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-(甲氧羰基甲基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[3-(甲氧羰基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[2-苯基芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺。
而且，本發(fā)明提供了上述式Ⅰ新的化合物。優(yōu)選的化合物由下面式Ⅱ和表Ⅰ表示。
表
<p>發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明涉及能夠抑制β-淀粉樣肽釋放和/或合成的化合物，因此該化合物被用于治療阿爾茨海默病。但是，在更詳細(xì)地描述本發(fā)明之前將先對(duì)下列術(shù)語(yǔ)進(jìn)行定義。
定義術(shù)語(yǔ)“β-淀粉樣肽”指分子量約為4.2kD的39-43氨基酸肽，該肽基本類似于Glenner等人1所述的蛋白質(zhì)形式，它包括正常β-淀粉樣肽的突變和轉(zhuǎn)譯后被修飾的肽。無論什么形式，該β-淀粉肽都近似是大膜跨度糖蛋白的39-43氨基酸片段，被稱為β-淀粉樣前體蛋白(APP)。它的43-氨基酸序列是1Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr11Glu Val His His Gln Lys Leu Val Phe Phe21Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala31Ile Ile Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val41Ile Ala Tyr(序列索引號(hào)1)或是一個(gè)基本相似的序列。
“烷基”指有1-20個(gè)碳原子的單價(jià)烷基，優(yōu)選有1-10個(gè)碳原子，更優(yōu)選1-6個(gè)碳原子。該術(shù)語(yǔ)的實(shí)例有甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，正己基等。
“取代的烷基”指優(yōu)選有1-10個(gè)碳原子并有1-3個(gè)下列取代基的烷基烷氧基，取代的烷氧基，?；?，酰氧基，?；被?，氨基，氨基?；?，氨基羧基酯，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羥基，羧基，羧基酯，巰基，硫代烷氧基，取代的硫代烷氧基，芳基，雜芳基，雜環(huán)，硝基，一-和二-烷基氨基，一-和二-(取代的烷基)氨基，一-和二-芳基氨基，一-和二-雜芳基氨基，一-和二-雜環(huán)氨基，以及不對(duì)稱二取代胺，兩個(gè)取代基不同，分別選自烷基，取代的烷基，芳基雜芳基和雜環(huán)。
“亞烷基”指二價(jià)亞烷基，優(yōu)選有1-10個(gè)碳原子，更優(yōu)選有1-6個(gè)碳原子，可以是直鏈或支鏈的。該術(shù)語(yǔ)的實(shí)例有，例如亞甲基(-CH2-)，亞乙基(-CH2CH2-)，亞丙基異構(gòu)體(如-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等。
“烷芳基”指-亞烷基-芳基，優(yōu)選亞烷基部分有1-10個(gè)碳原子，芳基部分有6-14個(gè)碳原子。這種烷芳基的實(shí)例有芐基，苯乙基等。
“烷基環(huán)烷基”指-亞烷基-環(huán)烷基，優(yōu)選亞烷基部分有1-10個(gè)碳原子，環(huán)烷基部分有3-8個(gè)碳原子。這種烷環(huán)烷基的實(shí)例有-CH2-環(huán)丙基，-CH2CH2-環(huán)己基等。
“烷氧基”指“烷基-O-”基團(tuán)。優(yōu)選的烷氧基包括，例如，甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，叔丁氧基，仲丁氧基，正戊氧基，正己氧基，1,2-二甲基丁氧基等。
“取代的烷氧基”指“取代的烷基-O-”基團(tuán)，其中，“取代的烷基”定義如上。
“烷基烷氧基”指“亞烷基-O-烷基”基團(tuán)，它包括，例如，亞甲基甲氧基(-CH2OCH3)，亞乙基甲氧基(-CH2CH2OCH3)，亞甲基異丙氧基(-CH2-O-CH(CH3)2)等。
“烷硫基烷氧基”指“-亞烷基-S-烷基”基團(tuán)，它包括，例如，亞甲基硫代甲氧基(-CH2SCH3)，亞乙基硫代甲氧基(-CH2CH2SCH3)，亞甲基異硫代丙氧基(-CH2SCH(CH3)2)等。
“鏈烯基”指優(yōu)選有2-10個(gè)碳原子的鏈烯基，更優(yōu)選有2-6個(gè)碳原子，并至少有1個(gè)，最好有1-2處烯基的未飽和部分。優(yōu)選的鏈烯基包括乙烯基(-CH=CH2)，正丙烯基(-CH2CH=CH2)，異丙烯基(-C(CH3)=CH2)等。
“炔基”指優(yōu)選有2-10個(gè)碳原子的炔基，更優(yōu)選有2-6個(gè)碳原子，并至少有1個(gè)，最好有1-2處炔基的未飽和部分。優(yōu)選的炔基包括乙炔基(-CH≡CH2)，炔丙基(-CH2CH≡CH2)等。
“酰基”指烷基-C(O)-，取代的烷基-C(O)-，環(huán)烷基-C(O)-，芳基-C(O)-，雜芳基-C(O)-和雜環(huán)-C(O)-，其中，烷基，取代的烷基，環(huán)烷基，芳基和雜芳基定義如上。
“?；被敝?C(O)NRR基團(tuán)，其中各R獨(dú)立地是氫或烷基。
“氨基酰基”指-NRC(O)R基團(tuán)，其中各R獨(dú)立地是氫或烷基。
“酰氧基”指烷基-C(O)O-，取代的烷基-C(O)O-，環(huán)烷基-C(O)O-，芳基-C(O)O-，雜芳基-C(O)O-和雜環(huán)-C(O)O-，其中，烷基，取代的烷基，環(huán)烷基，芳基、雜芳基和雜環(huán)定義如上。
“芳基”指有6-14個(gè)碳原子并具有單環(huán)(如苯基)或多環(huán)稠合(如萘基或蒽基)的未飽和芳香碳環(huán)。優(yōu)選的芳基包括苯基，萘基等。除非對(duì)個(gè)別取代基另外定義，這種芳基可以任選被1-3個(gè)下列取代基取代羥基，?；?，酰氧基，烷基，烷氧基，鏈烯基，炔基，氨基，氨基酰基，芳基，芳氧基，羧基，羧基酯，氨基羧基酯，氰基，鹵素，硝基，雜芳基，雜環(huán)，硫代烷氧基，三鹵代甲基等。優(yōu)選的取代基包括烷基，烷氧基，鹵素，氰基，硝基，三鹵代甲基和硫代烷氧基。
“芳氧基”指芳基-O-基團(tuán)，其中芳基定義如上，包括上面定義的任選取代的芳基。
“羧基”指-C(O)OH基團(tuán)；“羧基酯”指-C(O)O-烷基，-C(O)O-取代的烷基，-C(O)O-芳基，-C(O)O-雜芳基和-C(O)O-雜環(huán)；而“氨基羧基酯”指-NHC(O)OR基團(tuán)，其中R是烷基，取代的烷基，芳基，環(huán)烷基，雜芳基或雜環(huán)。
“環(huán)烷基”指有3-10個(gè)碳原子并有一個(gè)單環(huán)或多環(huán)稠合的環(huán)形烷基，它可以任意被1-3個(gè)烷基取代。這種環(huán)烷基包括，例如，單環(huán)結(jié)構(gòu)的如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)辛基，1-甲基環(huán)丙基，和2-甲基環(huán)戊基，2-甲基環(huán)辛基等，或多環(huán)結(jié)構(gòu)的如金剛烷基等。
“不烯基”指有4-10個(gè)碳原子并有一個(gè)單環(huán)并至少有一個(gè)內(nèi)部不飽和點(diǎn)的環(huán)形烯基，它可以任意被1-3個(gè)烷基取代。合適的環(huán)烯基的實(shí)例包括，例如，環(huán)丁-2-烯基，環(huán)戊-3-烯基，環(huán)辛-3-烯基等。
“鹵”或“鹵素”指氟，氯，溴和碘，并優(yōu)選氟或氯。
“雜芳基”指有1-10個(gè)碳原子的單價(jià)芳香碳環(huán)，并且環(huán)上有1-4個(gè)選自氧，氮和硫的雜原子。
除非對(duì)個(gè)別取代基另外定義，這種雜芳基可以任選被1-3個(gè)下列取代基取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，雜芳基，羥基，硫代烷氧基，硫代芳氧基等。這種雜芳基可以有單個(gè)環(huán)(如吡啶基或呋喃基)或多環(huán)稠合(如吲嗪基或苯并噻吩基)。優(yōu)選的雜芳基包括吡啶基，吡咯基和呋喃基。
“雜芳氧基”指雜芳基-O-基團(tuán)，其中雜芳基，包括任選取代的雜芳基，定義如上。
“雜環(huán)”或“雜環(huán)的”指有一個(gè)單環(huán)或多環(huán)稠合并在環(huán)上有1-10個(gè)碳原子和1-4個(gè)選自氮，硫或氧的雜原子的單價(jià)飽和或不飽和基團(tuán)。除非對(duì)這些雜環(huán)取代基另外定義，這種雜環(huán)可以任選被1-3個(gè)下列取代基取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，雜芳基，硫代烷氧基，硫代芳氧基等。這種雜環(huán)基可以有單個(gè)環(huán)(如六氫吡啶基或四氫呋喃基)或多環(huán)稠合。
雜環(huán)和雜芳基的實(shí)例包括，但不限于，吡咯，咪唑，吡唑，吡啶，吡嗪，嘧啶，噠嗪，吲嗪，異吲哚(isoindole)，吲哚，吲唑，嘌呤，喹嗪，異喹啉，喹啉，酞嗪，萘基吡啶，喹喔啉，喹唑啉，噌啉，蝶啶，咔唑，咔啉，菲啶，吖啶，菲咯啉，異噻唑，吩嗪，異噁唑，吩卓嗪，吩噻嗪，咪唑烷，咪唑啉，哌啶，哌嗪，二氫吲哚，鄰苯二甲酰亞胺，1,2,3,4-四氫異喹啉，4,5,6,7-四氫苯并[b]噻吩，噻唑，噻唑烷，噻吩，苯并[b]噻吩，嗎啉基，哌啶基，吡咯烷，四氫呋喃基等。
“雜環(huán)氧基”指雜環(huán)-O-基團(tuán)，其中雜環(huán)，包括任選取代的雜環(huán)，定義如上。
“巰基”指-SH基團(tuán)。
“硫代烷氧基”指-S-烷基基團(tuán)，其中烷基定義如上。
“硫代取代的烷氧基”指-S-取代的烷氧基基團(tuán)，其中取代的烷氧基定義如上。
“硫代芳氧基”指芳基-S-基團(tuán)，其中芳基，包括任選取代的芳基，定義如上。
“硫代雜芳氧基”指雜芳基-S-基團(tuán)，其中雜芳基，包括任選取代的芳基，定義如上。
“可藥用鹽”指式Ⅰ化合物的可藥用鹽，該鹽由現(xiàn)有技術(shù)中熟知的各種有機(jī)和無機(jī)反荷離子衍生而來，它包括，例如，鈉鹽，鉀鹽，鈣鹽，鎂鹽，銨鹽，四烷基銨鹽等；如果分子中含有堿官能團(tuán)，則包括有機(jī)酸或無機(jī)酸鹽，如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，酒石酸鹽，甲磺酸鹽，乙酸鹽，馬來酸鹽，草酸鹽等。
化合物的制備從幾個(gè)合成路徑分支中選出易于化合物制備且原料商品化的具體途徑，很容易制備式Ⅰ化合物。
第一種方法包括酸衍生物與酯化氨基酸的伯胺的常規(guī)偶合反應(yīng)，如下面反應(yīng)(1)所示
其中，R1,R2,X′和X″定義如上，R′優(yōu)選氫或烷基。反應(yīng)(1)僅包括適當(dāng)?shù)乃嵫苌?與氨基酸/氨基酸酯的伯胺2在能獲得N-乙?；苌?的條件下的偶合反應(yīng)。該反應(yīng)常被用于合成肽，而且此處所用合成方法也可用于制備N-乙酰氨基酸/氨基酸酯3。例如，眾所周知的偶合劑如碳二亞胺，以及用或不用已知的添加劑如N-羥基琥珀酰亞胺，1-羥基苯并三唑等，也可以被用于偶合反應(yīng)。該反應(yīng)一般在惰性非質(zhì)子傳遞稀釋劑如二甲基甲酰胺，二氯甲烷，氯仿，乙腈，四氫呋喃等中進(jìn)行。
或者，在優(yōu)選實(shí)施方案中，將化合物1的酰鹵用于反應(yīng)(1)中，而且，如果使用，一般要在適當(dāng)堿存在下使用，以清除反應(yīng)過程中產(chǎn)生的酸。適當(dāng)?shù)膲A包括，例如，三乙胺，二異丙基乙胺，N-甲基嗎啉等。
反應(yīng)(1)優(yōu)選在約0-約60℃進(jìn)行，直到反應(yīng)結(jié)束，一般約為1-約24小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后可用常規(guī)方法如沉淀法，色譜法，過濾法等回收N-乙酰氨基酸/氨基酸酯3，或者，如果是酯，可將其水解成對(duì)應(yīng)的羧酸，而不用常規(guī)處理法(如水相萃取等)之外的純化法和/或分離法。如果形成的是N-乙酰氨基酸酯，在與胺HNR3R3’偶合之前一般將其轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的酸。偶合反應(yīng)是用已知的肽偶合化學(xué)方法，用已知的偶合劑如碳二亞胺，以及用或不用已知的能促進(jìn)偶合的添加劑如N-羥基琥珀酰亞胺，1-羥基苯并三唑等完成。該反應(yīng)一般在惰性非質(zhì)子極性稀釋劑如二甲基甲酰胺，二氯甲烷，氯仿，乙腈，四氫呋喃等中進(jìn)行。或者，在有些情況下，可以通過現(xiàn)有技術(shù)中已知的常用酯/酰胺交換反應(yīng)將酯3直接轉(zhuǎn)變成酰胺。
在反應(yīng)(1)中，各反應(yīng)劑(乙酸衍生物1和氨基酸/氨基酸酯2)是現(xiàn)有技術(shù)中已知的，而且絕大多數(shù)是商品化的。
或者，可以通過先形成氨基酸酰胺，然后N’-乙?；@些酯來制備式Ⅰ化合物。也就是說，經(jīng)過常規(guī)偶合過程將胺HNR3R3’與N’-阻斷的氨基酸BlockNHCHR2COOH偶合，得到N’-阻斷的氨基酸酰胺BlockNHCHR2C(O)NR3R3’。然后利用常規(guī)方法除去阻斷基團(tuán)，得到游離胺，然后用上述方法將其N’-乙?；?，得到式Ⅰ化合物。
偶合和N’-乙?；磻?yīng)完成后(無論順序如何)，所得酰胺可以通過常規(guī)化學(xué)方法衍化，得到所合成的化合物的衍生物。例如，被阻斷在R2和/或R3上的反應(yīng)官能團(tuán)可以被解脫，然后被衍化。例如，R2上Boc保護(hù)的氨基(如賴氨酸側(cè)鏈)可以在合成之后被解脫，氨基被乙?；蜓芑?br> 本文所述化合物也可以用聚合物載體形式的碳二亞胺肽偶合劑制備。例如，聚合物載體形式的EDC在文獻(xiàn)(《四面體通訊(TetrahedronLetter)》,34(48),7685(1993))10中已有論述。另外，還發(fā)現(xiàn)了一種新的碳二亞胺偶合劑PEPC和其相應(yīng)的聚合物載體形式，它們對(duì)制備本發(fā)明化合物是非常有用的。
適用于制備聚合物載體偶合劑的聚合物可以是商品化的，也可以是用聚合物領(lǐng)域?qū)I(yè)人員熟知方法制備的。適宜的聚合物必須是具有帶有與碳二亞胺末端胺反應(yīng)部分的下垂側(cè)鏈的。該反應(yīng)部分包括氯，溴，碘和甲磺?；瑑?yōu)選的反應(yīng)部分是氯甲基。另外，該聚合物的主鏈必須對(duì)碳二亞胺和反應(yīng)條件(在此條件下將使用最終聚合物連接偶合劑)是惰性的。
某些羥基甲基化樹脂轉(zhuǎn)化成氯甲基化樹脂后可用于制備聚合物載體偶合劑。這些羥基化樹脂的實(shí)例包括4-羥甲基-苯基乙酰氨基甲基樹脂(Pam Resin)和4-芐氧基芐醇樹脂(Wang Resin)，這兩種樹脂可從Advanced Chemtech of Louisville,Kentucky,USA購(gòu)得(見AdvancedChemtech 1993-1994產(chǎn)品目錄，第115頁(yè))。采用本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員已知的任何一種方法都可以將這些樹脂的羥甲基轉(zhuǎn)變成所要的氯甲基。
優(yōu)選的樹脂是氯甲基化的苯乙烯/二乙烯苯樹脂，因?yàn)樗鼈內(nèi)菀踪I到。由于命名的要求，這些樹脂已經(jīng)被氯甲基化，而且在使用前要求不得化學(xué)改性。這些樹脂中人們比較熟悉的是Merrfield樹脂，它可以從Aldrich Chemical Company of Milwaukee,Wisconsin,USA購(gòu)得(見Aldrich 1994-1995產(chǎn)品目錄，第899頁(yè))。PEPC及其聚合物載體形式的制備方法可用以下流程圖概括。
這些方法在美國(guó)專利申請(qǐng)(申請(qǐng)?zhí)?0/019,790申請(qǐng)日為1996年6月14日，該申請(qǐng)?jiān)诖巳恳鲄⒖?中有更全面的描述。簡(jiǎn)而言之，PEPC的制備首先是將異氰酸乙酯與1-(3-氨基丙基)吡咯烷反應(yīng)，然后用4-甲苯磺酰氯處理所得脲，得到PEPC。其聚合物載體形式是通過PEPC與適當(dāng)樹脂在給出所要試劑的標(biāo)準(zhǔn)條件下反應(yīng)制得。
使用這些試劑的羧酸偶合反應(yīng)在約環(huán)境溫度至約45℃反應(yīng)約3-120小時(shí)。一般可以通過用CHCl3洗滌反應(yīng)物，然后減壓濃縮剩下的有機(jī)物分離出產(chǎn)物。如上所述，從使用聚合物結(jié)合試劑的反應(yīng)中分離產(chǎn)物的過程被大大簡(jiǎn)化，即只需要過濾反應(yīng)混合物，然后減壓濃縮濾液。
酯的其它制備方法由下面實(shí)施例提供。
在這些合成方法中，原料可以具有手性中心(如L-丙氨酸)，而且，如果用外消旋原料，所得產(chǎn)物是R,S對(duì)映體混合物?；蛘撸捎檬中援悩?gòu)體原料，而且，如果所用反應(yīng)方案不外消旋該原料，則得到手性產(chǎn)物。這種反應(yīng)方案可以包括手性中心在合成期間的反轉(zhuǎn)。
因此，除非另有說明，本發(fā)明產(chǎn)物是R,S對(duì)映體混合物。但是，如果想要手性產(chǎn)品，則優(yōu)選手性產(chǎn)物對(duì)應(yīng)于L-氨基酸衍生物?；蛘?，可以采用從R,S混合物分離對(duì)映體的純化技術(shù)得到一種和另一種立體異構(gòu)體，從而獲得手性產(chǎn)品。這些技術(shù)都是本領(lǐng)域已知的。
藥物制劑如果被用作藥物，式Ⅰ化合物常常是以藥物組合物形式給藥。這些化合物可以多種途徑給藥，包括口服，直腸，透皮，皮下，靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)和鼻內(nèi)給藥。這些化合物是可注射和口服組合物的有效成分。這些組合物可以藥物學(xué)領(lǐng)域已知的方法制備，并且至少含有一種活性化合物。
本發(fā)明還包括含有作為活性成分的一種或多種上述式Ⅰ化合物以及可藥用載體的藥物組合物。在制備本發(fā)明組合物時(shí)，活性成分通常與一種賦形劑混合，被賦形劑稀釋或被包在載體內(nèi)，即包在膠囊，香囊，紙或其它容器內(nèi)。如果賦形劑被用作稀釋劑，它可以是固體、半固體或液體材料，作為活性成分的媒體，載體或介質(zhì)。因此，組合物的形式可以是片劑，丸劑，粉劑，錠劑，香囊，扁囊劑，酏劑，懸浮液，乳液，溶液，糖漿，氣溶膠(固體或在液體介質(zhì)中)，含有例如，高達(dá)1 0％(重量)活性化合物的軟膏，軟和硬明膠膠囊，栓劑，無菌注射液和無菌包裝的粉劑。
在制備制劑時(shí)，可能在與其它成分混合之前需要將活性化合物研磨成大小適當(dāng)?shù)念w粒。如果活性化合物基本不溶，一般要將其磨至粒劑小于200目。如果活性化合物基本可溶于水，則可將其磨至在制劑中分布基本均勻即可，例如，約40目。
適當(dāng)賦形劑的一些實(shí)例包括乳糖，葡萄糖，蔗糖，山梨糖醇，甘露糖醇，淀粉，阿拉伯膠，磷酸鈣，藻酸鹽，西黃蓍膠，明膠，硅酸鈣，微晶纖維素，聚乙烯吡咯烷酮，纖維素，無菌水，糖漿和甲基纖維素。制劑中還可以添加潤(rùn)滑劑，如滑石，硬脂酸鎂和礦物油；潤(rùn)濕劑；乳化劑和懸浮劑；防腐劑如甲基-和丙羥基-苯甲酸酯；甜味劑和調(diào)味劑。還可以用本領(lǐng)域已知方法將本發(fā)明組合物制成給患者給藥之后活性成分迅速、持續(xù)或推遲釋放的制劑。
本發(fā)明組合物優(yōu)選制成單位劑量形式，每個(gè)單劑含有約5-約100mg，更優(yōu)選約10-約30mg活性成分。術(shù)語(yǔ)“單位劑量形式”指適合以單一劑量給人和其它哺乳動(dòng)物給藥的物理上離散的單位，每單位含有通過計(jì)算得到的能夠產(chǎn)生所需治療效果的預(yù)定量的活性成分以及適量可藥用賦形劑。優(yōu)選地，上述式Ⅰ化合物的用量不超過藥物組合物重量的約20％，更優(yōu)選不超過約15％(重量)，以及均衡的藥物惰性載體。
活性化合物在很寬的劑量范圍內(nèi)使用都是有效的，而且，一般以藥物有效量給藥。但是，應(yīng)該理解，本化合物的實(shí)際給藥量要由醫(yī)生根據(jù)相關(guān)情況決定，這些情況包括所要治療的病情，選擇的給藥途徑，實(shí)際給藥的化合物，各患者的年齡、體重和反應(yīng)，患者癥狀的嚴(yán)重程度等。
對(duì)于制備固體組合物如片劑，是將主要的活性成分與藥物賦形劑混合，形成含有本發(fā)明化合物均勻混合物的固體預(yù)成組合物。如果稱這些預(yù)成組合物是均勻的，那就意味著活性成分均勻地分散在整個(gè)組合物中使得該組合物可以很容易地被分成等效的單位劑量形式，如片劑，丸劑和囊劑。然后，這種固體預(yù)成組合物被分成上述單位劑量形式，每個(gè)單劑含有，例如，0.1-約500mg本發(fā)明活性成分。
可以將本發(fā)明片劑或丸劑包衣或另外化合，得到能夠延長(zhǎng)作用效果的劑量形式。例如，片劑或丸劑可以含有內(nèi)劑量和外劑量成分，后者以封裝前者的形式存在。這兩種成分可以用腸衣層隔開，其作用是阻礙藥劑在胃中崩解，并讓內(nèi)劑量成分完整地通過胃進(jìn)入十二指腸，或延遲釋放。有多種材料可用作腸衣層或包衣，包括多種聚合的酸和聚合酸與如蟲膠，鯨蠟醇和纖維素乙酸酯的材料的混合物。
含有本發(fā)明新組合物并可用于口服或注射給藥的液體形式包括水溶液，味道合適的糖漿，水或油性懸浮液，以及用食用油如棉籽油，芝麻油，椰子油或花生油調(diào)味的乳液，及酏劑和類似的可藥用載體。
以吸入或吹入方式給藥的組合物包括在可藥用的水性或有機(jī)溶劑或它們的混合物中的溶液和懸浮液，或粉末。液體或固體組合物可以含有適當(dāng)?shù)纳鲜隹伤幱觅x形劑。組合物優(yōu)選以口服或鼻子吸入途徑給藥，以達(dá)到局部或全身效果。在優(yōu)選的可藥用溶劑中的組合物可以用惰性氣體噴成霧狀?？梢詮膰婌F儀器中直接吸入噴霧化的溶液，或?qū)婌F儀接到面罩的罩子或間歇式正壓呼吸器上。溶液、懸浮液或粉末組合物都可以通過以適當(dāng)方式傳輸藥劑的儀器給藥，優(yōu)選口服或鼻吸給藥。下列制劑實(shí)施例將說明本發(fā)明藥物組合物。
制劑實(shí)施例1制成含有下列成分的硬明膠膠囊成分含量(mg/囊)活性成分30.0淀粉305.0硬脂酸鎂5.0將上述成分混合并以340mg為單位裝入硬明膠膠囊。
制劑實(shí)施例2用下列成分制備片劑成分 含量(mg/片)活性成分 25.0微晶纖維素200.0膠狀二氧化硅 10.0硬脂酸5.0將上述成分摻合并壓制成片，每片重240mg。
制劑實(shí)施例3制成含有下列成分的吸入器用干粉劑成分 重量％活性成分5乳糖95將活性成分與乳糖混合，然后將混合物裝入干粉吸入裝置。
制劑實(shí)施例4每片含有30mg活性成分的片劑制備如下成分 含量(mg/片4)活性成分 30.0淀粉 45.0微晶纖維素 35.0聚乙烯吡咯烷酮(10％的 4.0無菌水溶液)羧甲基鈉淀粉 4.5硬脂酸鎂 0.5滑石 1.0總計(jì) 120將通過20目美國(guó)篩的活性成分、淀粉和纖維素充分混合，然后在所得粉末中加入聚乙烯吡咯烷酮溶液并混合，并用16目美國(guó)篩篩過。將篩過的顆粒在50-60℃干燥并用16目美國(guó)篩篩過。向顆粒中加入事先用30目美國(guó)篩篩過的羧甲基鈉淀粉、硬脂酸鎂和滑石，攪拌后在制片機(jī)上制成每片重150mg的片劑。
制劑實(shí)施例5每個(gè)含有40mg活性成分的膠囊制備如下成分 含量(mg/囊)活性成分40.0淀粉109.0硬脂酸鎂1.0總計(jì)150.0將活性成分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂摻合在一起并用20目美國(guó)篩篩過，以150mg為單位裝入硬明膠膠囊。
制劑實(shí)施例6每個(gè)含有25mg活性成分的栓劑制備如下成分 含量(mg)活性成分25飽和脂肪酸甘油酯發(fā)加至2000將用60目美國(guó)篩篩過的活性成分懸浮于事先用盡可能少的加熱使其熔化的飽和脂肪酸甘油酯中。將混合物倒入約有2.0g容量的栓劑模后讓其慢慢冷卻。
制劑實(shí)施例7每5.0mL劑量含有50mg活性成分的懸浮劑制備如下成分含量活性成分 50.0mg黃蓍膠4.0mg羧甲基鈉纖維素(11％)/微 50.0mg晶纖維素(89％)蔗糖 1.75g苯甲酸鈉 10.0mg調(diào)味劑和調(diào)色劑適量純化水加至5.0mL將活性成分、蔗糖和黃蓍膠摻合在一起后用10目美國(guó)篩篩過，然后與事先制好的微晶纖維素和羧甲基鈉纖維素水溶液混合。用一些水稀釋苯甲酸鈉、調(diào)味劑和調(diào)色劑，然后邊攪拌邊加到上述混合液中。最后，加水至所要求的體積。
制劑實(shí)施例8成分含量(mg/囊)活性成分15.0淀粉407.0硬脂酸鎂3.0總計(jì)425.0將活性成分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂摻合在一起并用20目美國(guó)篩篩過，以560mg為單位裝入硬明膠膠囊。
制劑實(shí)施例9皮下給藥制劑制備如下成分含量活性成分 5.0mg玉米油 1mL制劑實(shí)施例10皮膚表面給藥制劑制備如下成分含量(g)活性成分 1-10乳化蠟 30液體石蠟 20白軟石蠟 加至100加熱白軟石蠟直至熔化。在其中加入液體石蠟和乳化蠟并攪拌直至溶解。加入活性成分并繼續(xù)攪拌直至分散其中?；旌衔锢鋮s至呈固體狀。
用于本發(fā)明方法的另一種優(yōu)選制劑采用了經(jīng)皮膚傳遞的載體(“貼片”)。這種透皮給藥貼劑可用來獲得以控制劑量連續(xù)或間斷釋放的本發(fā)明化合物。用來傳遞藥劑的透皮給藥貼劑的結(jié)構(gòu)和用途都是本領(lǐng)域已知的，例如，見美國(guó)專利5,023,252(授權(quán)于1991年6月11日，該文在此全部引作參考)。這種貼劑可以被制成連續(xù)、脈動(dòng)式或根據(jù)要求傳遞藥劑的形式。
通常希望或需要將藥物組合物直接或間接引入腦。直接引起的技術(shù)常常包括將藥物傳遞導(dǎo)管插入宿主腦室系統(tǒng)以繞過血腦屏障。用于向身體特定解剖學(xué)區(qū)域傳送生物因子的一種可植入傳遞系統(tǒng)在美國(guó)專利5,011,472中有所描述，該文在此引作參考。
通常優(yōu)選間接引起技術(shù)，它常常包括將組合物制劑，通過親水性藥物向脂溶性藥物的轉(zhuǎn)變獲得藥物潛伏作用(latentiation)。潛伏作用通常是通過阻斷藥物上存在的羥基、羰基、硫酸根和伯胺基存在來實(shí)現(xiàn)的，這樣能使藥物更容易溶解于脂，而且更順利地穿過血腦屏障進(jìn)行傳輸?；蛘撸ㄟ^動(dòng)脈內(nèi)灌注可以暫時(shí)打開腦血管屏障的高滲溶液以提高親水性藥物的傳輸能力。
用于本發(fā)明的其它合適的制劑可以在《Remington藥物科學(xué)(Remington’s Pharmaceutical Sciences)》,Mace Publishing Company,Philadelphia,PA,17th.ed.(1985)中查到。
應(yīng)用本發(fā)明化合物和組合物被用于抑制β-淀粉樣肽釋放和/或合成,因此，被用于治療哺乳動(dòng)物包括人的阿爾茨海默病。
正如上面所述，本文所述化合物適用于上述各種藥物傳遞系統(tǒng)，另外，為了提高給藥后化合物在體內(nèi)的血清半衰期，可以將化合物裝入膠囊，或裝到微脂粒內(nèi)腔中，或制成膠體，或采用能夠延長(zhǎng)化合物血清半衰期的其它常規(guī)技術(shù)。可用于制備微脂粒的多種方法在，例如，Szoka等人的美國(guó)專利4,235,871,4,501,728和4,837,028中有所描述，這些文獻(xiàn)均在此引作參考。
給患者給藥化合物的用量將取決于使用什么樣的化合物，給藥目的，例如，是預(yù)防還是治療，患者的狀態(tài)，給藥方式等等。對(duì)于治療應(yīng)用，是給已經(jīng)患有AD的患者給藥足夠量的藥物組合物，該用量至少可以部分阻止這種疾病和其并發(fā)癥狀的進(jìn)一步發(fā)作。適合達(dá)到這一效果的用量被定義為“治療有效劑量”。用于這種應(yīng)用的有效量將取決于負(fù)責(zé)醫(yī)生根據(jù)多種因素所作的判斷，例如，根據(jù)AD患者的嚴(yán)重程度，患者的年齡、體重和身體情況等。用于治療的本發(fā)明化合物優(yōu)選以約1-500mg/kg/天的劑量給藥。
對(duì)于預(yù)防應(yīng)用，是給具有可能發(fā)展成AD危險(xiǎn)(例如，根據(jù)基因甄別或家族追蹤確定)的患者使用足夠量的藥物組合物，該用量可以抑制疾病癥狀的發(fā)作。適合達(dá)到這一效果的用量被定義為“預(yù)防有效劑量”。用于這種應(yīng)用的有效量將取決于負(fù)責(zé)醫(yī)生根據(jù)多種因素所作的判斷，例如，根據(jù)患者的年齡、體重和身體情況等。用于預(yù)防的本發(fā)明化合物優(yōu)選以約1-500mg/kg/天的劑量給藥。
如上所述，給患者給藥的化合物是以上述藥物組合物的形式。這些組合物可以用常規(guī)滅菌技術(shù)滅菌，或者過濾消毒。得到的水溶液可以封裝起來，或者凍干，給藥前再將凍干的制劑與無菌水載體混合?；衔镏苿┑膒H一般在3-11之間，更優(yōu)選5-9，最優(yōu)選7-8。應(yīng)該理解，上述某些賦形劑、載體或穩(wěn)定劑的使用同樣適用于可藥用鹽形式。
下面的合成和生物實(shí)施例用于說明本發(fā)明而非以各種方式限制本發(fā)明范圍。除非另有說明，所有溫度均為攝氏度。
實(shí)施例在下列實(shí)施例中，下列縮寫具有以下含義。如果有縮寫沒有定義，則它具有普遍可以接受的喻義。
aq. = 水Boc = 叔丁氧羰基BOP = 六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)磷鎓bd = 寬雙峰bs = 寬單峰c= 濃度(g/mL)cc = 立方厘米CDI = 1,1’-羰基二咪唑d= 雙峰dd = 雙雙峰DMAP = 二甲氨基吡啶DMF = 二甲基甲酰胺DMSO = 二甲亞砜EDC = 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EDTA = 乙二胺四乙酸eq. = 當(dāng)量EtOAc= 乙酸乙酯EtOH = 乙醇g= 克h= 小時(shí)L= 升m= 多重峰M％ = 摩爾百分比
max =最大MeOH =甲醇meq =毫當(dāng)量mg=毫克mL=毫升mm=毫米mM=毫摩爾mmol =毫摩爾mp=熔點(diǎn)N =正常ng=納克nm=納米OD=光學(xué)密度PEPC =1-[3-(1-吡咯烷基)丙基]-3-乙基碳二亞胺pg=微微克pM=微微摩爾psi =磅每平方英寸q =四重峰quint.=五重峰rpm =轉(zhuǎn)每分鐘s =單峰t =三重峰TFA =三氟乙酸THF =四氫呋喃tlc =薄層色譜μg =微克μL =微升UV=紫外線在下列實(shí)施例中，所有溫度均為攝氏度(除非另有說明)。
下列通用方法A’-K’、實(shí)施例A’-D’和實(shí)施例 A1-A81用來說明各種N-(芳基/雜芳基乙酰基)氨基酸酯的合成方法，將這些氨基酸酯水解可以得到用作本發(fā)明酰胺化合物起始原料的N-(芳基/雜芳基乙酰基)氨基酸。
通用方法A′R1C(X′)(X″)C(O)Cl與H2NCH(R2)C(O)XR3的偶合反應(yīng)向攪拌的(D,L)-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自下面實(shí)施例B)(4.6mmol)的5mL吡啶溶液中加入4.6mmol酰氯，立刻發(fā)生沉淀。將混合物攪拌3.5h，然后用100mL乙醚稀釋，10％HCl洗滌三次，鹽水洗滌一次，20％碳酸鉀洗滌一次，再用鹽水洗滌一次。溶液用硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，得到標(biāo)題產(chǎn)物。其它氨基酸酯也可以用于此方法。
通用方法B′R1C(X′)(X″)C(O)OH與H2NCH(R2)C(O)XR3的偶合反應(yīng)將酸(3.3mmol)和CDI的20mL THF溶液攪拌2h。加入L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自下面實(shí)施例B)(3.6mmol)，然后加入1.5mL(10.8mmol)三乙胺。將反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后用100mL乙醚稀釋，10％HCl洗滌三次，鹽水洗滌一次，20％碳酸鉀洗滌一次，再用鹽水洗滌一次。溶液用硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，得到標(biāo)題產(chǎn)物。其它氨基酸酯也可以用于此方法。
通用方法C′用HOR3酯化R1C(X′)(X″)C(O)NHCH(R2)C(O)OH向攪拌的苯基乙?；i氨酸(1.6470g,7.0mmol)的20mL THF溶液中加入CDI(1.05g,6.5mmol)，并將混合物攪拌1.5h。在混合物中加入2-甲基丁醇(0.53g,6mmol)，接著加入NaH(0.16g,6.5mmol)，立刻產(chǎn)生氣泡。將反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后用100mL乙醚稀釋，10％HCl洗滌三次，鹽水洗滌一次，20％碳酸鉀洗滌一次，再用鹽水洗滌一次。溶液用硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，得到標(biāo)題產(chǎn)物。其它N-?；被岷痛家部梢杂糜诖朔椒?。
通用方法D′酯水解成游離酸將酯水解成游離酸的反應(yīng)采用常規(guī)方法進(jìn)行。下面是兩個(gè)這種常規(guī)脫酯方法的實(shí)施例。向在CH3OH/H2O 1∶1混合物中的酯加入2-5當(dāng)量K2CO3。將混合物加熱至約50℃約0.5-1.5小時(shí)，直到反應(yīng)顯示已經(jīng)完成。將反應(yīng)冷卻到室溫，減壓除去甲醇。將剩下的水溶液的pH調(diào)至約為2，并加入乙酸乙酯萃取產(chǎn)物。有機(jī)相用NaCl飽和水溶液洗滌，MgSO4干燥。減壓除去溶液中的溶劑，得到標(biāo)題產(chǎn)物。
將氨基酸酯溶解于二噁烷/水(4∶1)，并在其中加入溶解于水的LiOH(約2當(dāng)量)，使添加后整個(gè)溶劑的比例約為二噁烷∶水=2∶1。攪拌反應(yīng)混合物直到反應(yīng)完成，然后減壓除去二噁烷。剩余物用EtOAc稀釋，分離各相，將水相酸化至pH2。再返回來用EtOAc萃取水相，用Na2SO4干燥干燥合并的有機(jī)相，過濾后減壓除去溶劑。用常規(guī)方法(如重結(jié)晶)純化剩余物。
下面將具體化后面那個(gè)實(shí)施例。將9.27g(0.0348mol)3-NO2苯基乙酰基丙氨酸甲酯溶解于60mL二噁烷和15mL H2O，然后加入LiOH(3.06g,0.0731mol)的15mL H2O溶液。攪拌4小時(shí)后減壓除去二噁烷。用EtOAc稀釋剩余物，分離各相，將水相酸化至pH2。再返回來用EtOAc(4×100mL)萃取水相，用Na2SO4干燥合并的有機(jī)相，過濾后減壓除去溶劑。剩余物從EtOAc/異辛烷重結(jié)晶，得到7.5g(85％)3-硝基苯基乙?；彼帷?br> C11H12N2O5元素分析計(jì)算值C,52.38；H,4.80；N,11.11；實(shí)測(cè)值C,52.54；H,4.85；N,11.08。23=-29.9@589nm。
通用方法E′酸和醇的低溫BOP偶合反應(yīng)將含有羧酸(100M％)和N-甲基嗎啉(150M％)的二氯甲烷溶液在氮?dú)庀吕鋮s到-20℃。加入一批BOP(105M％)，并將反應(yīng)混合物保持在-20℃15分鐘。加入相應(yīng)的醇(120M％)，允許反應(yīng)混合物升至室溫并攪拌12小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取三次。合并的乙酸乙酯相依次用飽和檸檬酸水溶液(2×)，飽和碳酸氫鈉水溶液(2×)和鹽水(1×)洗滌，無水硫酸鎂或硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑，得到粗產(chǎn)物。
通用方法F′酸和胺的EDC偶合反應(yīng)將酸衍生物溶解于二氯甲烷。依次加入胺(1eq.),N-甲基嗎啉(5eq.)和羥基苯并三唑一水合物(1.2eq.)。將反應(yīng)物冷卻至約0℃，然后加入1.2eq.1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽?？梢栽诘?dú)庀聦⑷芤簲嚢柽^夜，使之回到室溫。通過用飽和Na2CO3水溶液，0.1M檸檬酸和鹽水洗滌整理反應(yīng)混合物，然后用Na2SO4干燥，除去溶劑后得到粗產(chǎn)物。經(jīng)過在適當(dāng)溶劑中進(jìn)行快速色譜純化得到純產(chǎn)物。
通用方法G′酸和胺的EDC偶合反應(yīng)氮?dú)庀略谝粋€(gè)圓底燒瓶中裝入溶于THF中的羧酸(1.0eq.)，羥基苯并三唑水合物(1.1eq.)和胺(1.0eq.)。在充分?jǐn)嚢璧幕旌衔镏屑尤脒m量堿(對(duì)于游離胺為1.1eq.，對(duì)于鹽酸鹽胺鹽為2.2eq.)，如Hunig堿，然后加入EDC(1.1eq.)。在室溫?cái)嚢?-17小時(shí)后減壓除去溶劑，將剩余物溶解于EtOAc(或類似的溶劑)/水。有機(jī)相用飽和碳酸氫鈉水溶液、1NHCl和鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。有些時(shí)候，這個(gè)階段得到的分離產(chǎn)物已經(jīng)是分析純的了，而另一些時(shí)候，在生物評(píng)價(jià)之前要用色譜法和/重結(jié)晶法進(jìn)行純化。
通用方法H′R1C(X′)(X″)C(O)Cl與H2NCH(R2)C(O)XR3的偶合反應(yīng)將過量草酰氯的二氯甲烷加到酸衍生物中，并加一滴DMF。攪拌所得混合物約2小時(shí)或直到停止冒泡。減壓除去溶劑，重新干燥的用二氯甲烷稀釋。在所得溶液中加入約1.1eq.適當(dāng)氨基酸酯和三乙胺(1.1eq.于二氯甲烷)。將該反應(yīng)在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后減壓除去溶劑。將剩余物溶解于乙酸乙酯，先后用1N HCl和1N NaOH洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓除去溶劑，得到所要產(chǎn)物。
通用方法I′P-EPC偶合反應(yīng)P-EPC偶合反應(yīng)使用了氨基酸酯和取代的乙酸。該乙酸衍生物是本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員熟知的，而且一般是商品化的。該氨基酸酯可用常規(guī)方法由已知的和一般是商品化的N-BOC氨基酸按下面通用方法J′所述制備。
具體來說，是將適當(dāng)氨基酯游離堿(0.0346mmol)和取代的苯基乙酸(0.069mmol)溶解于2.0mL CHCl3(無EtOH)。加入150mg P-EPC(0.87meq./g)，并將反應(yīng)在23℃攪拌4天。通過棉塞過濾反應(yīng)物，用2.0mLCHCl3漂洗，在氮?dú)饬飨抡舭l(fā)濾液。用1H NMR測(cè)定各樣品的純度，純度為50％至＞95％。從各反應(yīng)得到的最終產(chǎn)物在8.0mg至15.0mg之間。不用進(jìn)一步純化即可進(jìn)行試驗(yàn)。
通用方法J′從相應(yīng)的N-BOC氨基酸合成氨基酸酯A．酸的酯化將N-BOC氨基酸溶解于二噁烷，并在0℃用過量醇(～1.5eq.)和催化用的DMAP(100mg)處理。持續(xù)攪拌直到反應(yīng)完成，然后用常規(guī)方法回收產(chǎn)物。
B.N-BOC基團(tuán)的去除將N-BOC保護(hù)的氨基酸溶解于二氯甲烷(0.05M)，并在室溫和氮?dú)庀掠?0eq.TFA處理。用tlc監(jiān)視反應(yīng)，直到原料全部耗盡(一般需要1-5小時(shí))。如果5小時(shí)后反應(yīng)物中仍有原料存在，則再加入10eq.TFA。用Na2CO3細(xì)心地中和反應(yīng)，分離，有機(jī)相用鹽水洗滌，無水Na2SO4干燥。所得粗胺無需純化即可使用。
這些方法的具體實(shí)例如下1．將外消旋體(+/-)-N-BOC-α-氨基丁酸(Aldrich)(9.29g,0.0457mol)溶解于100mL二噁烷，并在0℃用異丁醇(6.26mL,0.0686mol),EDC(8.72g,0.0457mol)和催化用的DMAP(100mg)處理。攪拌17小時(shí)后減壓蒸發(fā)有機(jī)相，剩余物用EtOAc稀釋，NaHCO3和鹽水洗滌，Na2SO4干燥，蒸發(fā)后得到8.42g(71％)油狀物。
C13H25NO4元素分析計(jì)算值C,60.21；H,9.72；N,5.40；實(shí)測(cè)值C,59.91；H,9.89；N,5.67。
將上述N-BOC氨基酸酯(8.00g,0.032mol)按上述方法脫保護(hù)，得到3.12g(61％)游離堿為無色油，放置一段時(shí)間后固化。
2.在0℃將L-N-BOC-丙氨酸(Aldrich)(8.97g,0.047mol)溶解于100mL CH2Cl2，并用異丁醇(21.9mL,0.238mol),DMAP(100mg)和EDC(10.0g,0.052mol)處理。將混合物攪拌17小時(shí)后用H2O稀釋，先后用1.0N HCl,NaHCO3和鹽水洗滌，Na2SO4干燥有機(jī)相，過濾并蒸發(fā)后得到11.8g(定量的)L-N-BOC-丙氨酸異丁酯，其中含有少量溶劑。真空干燥后得到分析純樣品。
C12H23NO4元素分析計(jì)算值C,58.79；H,9.38；N,5.71；實(shí)測(cè)值C,58.73；H,9.55；N,5.96。
將上述N-BOC氨基酸酯(11.8g,0.0481mol)按上述方法脫保護(hù)。用飽和HCl(g)/EtOAc將游離堿轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的HCl鹽，得到L-N-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽。得到4.2g(48％)無色固體。
C7H15NO2·HCl元素分析計(jì)算值C,46.28；H,8.88；N,7.71；實(shí)測(cè)值C,46.01；H,8.85；N,7.68。
通用方法K′從氨基酸制備甲酯將氨基酸(氨基酸或氨基酸鹽酸鹽)懸浮于甲醇并冷卻到0℃。向溶液中鼓入HCl氣體5分鐘。允許反應(yīng)物升至室溫，然后攪拌4小時(shí)。減壓除去溶劑，得到所要的氨基酸甲酯鹽酸鹽。該產(chǎn)物通常無需進(jìn)一步純化即可使用。
實(shí)施例A′游離和聚合物結(jié)合的PEPC的合成N-乙基-N’-3-(1-吡咯烷基)丙基脲冷卻的同時(shí)向27.7g(0.39mol)異氰酸乙酯的250mL氯仿中滴加50g(0.39mol) 3-(1-吡咯烷基)丙胺。一旦添加結(jié)束就去掉冷卻浴，然后將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合物，得到74.5g(96.4％)所要的脲，為清澈的油。
1[3-(1-吡咯烷基)丙基]-3-乙基碳二亞胺(P-EPC)在31.0g(0.156mol)N-乙基-N’-3-(1-吡咯烷基)丙基脲的500mL二氯甲烷中加入62.6g(0.62mol)三乙胺，并將溶液冷卻到0℃。然后以保持反應(yīng)在0-5℃的速率在溶液中滴加59.17g(0.31mol)4-甲苯磺酰氯的400mL二氯甲烷。添加結(jié)束后將反應(yīng)混合物升至室溫，然后加熱回流4小時(shí)。冷卻到室溫后反應(yīng)混合物用飽和碳酸鉀水溶液洗滌(3×150mL)。合并水相并用二氯甲烷萃取。合并所有的有機(jī)相并減壓濃縮。將所得橙色漿液懸浮于250mL乙醚并潷析掉固體。將漿液/潷析過程重復(fù)三次以上。合并醚溶液并減壓濃縮，得到18.9g(67％)所要產(chǎn)物，為粗橙色油。將一部分油真空蒸餾，得到無色油，蒸餾在78-82℃(0.4mmHg)進(jìn)行。
聚合物作載體的1-[3-(1-吡咯烷基)丙基]-3-乙基碳二亞胺(P-EPC)的制備將8.75g(48.3mmol)1-[3-(1-吡咯烷基)丙基]-3-乙基碳二亞胺和24.17g(24.17mmol)Merrfield樹脂(2％交聯(lián)的，200-400目，氯甲基化的苯乙烯/二乙烯基苯共聚物，1meq.Cl/g)的二甲基甲酰胺懸浮液在100℃加熱2天。然后冷卻反應(yīng)并過濾，依次用1L DMF,1L THF和1L乙醚洗滌所得樹脂。真空干燥剩下的樹脂18小時(shí)。
實(shí)施例B′丙氨酸異丁酯鹽酸鹽的制備35.64g(0.4mol)(D,L)-丙氨酸(Aldrich)(或L-丙氨酸(Aldrich))，44mL(0.6mol)亞硫酰氯(Aldrich)和200mL異丁醇的混合物回流1.5小時(shí)，然后在90℃低壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中徹底除去揮發(fā)物，得到(D,L)-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(或L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽)，其純度足以用于下一步反應(yīng)。
實(shí)施例C3,5-二氯苯基乙酸的制備在0℃向3.5g 3,5-二氯芐醇(Aldrich)的75mL二氯甲烷溶液中加入1.8mL甲磺酰氯，接著滴加3.5mL三乙胺。2小時(shí)后用二氯甲烷將溶液稀釋到150mL，先后用3N HCl和飽和NaHCO3水溶液洗滌，Na2SO4干燥，除去溶劑后得到所要的甲磺酸3,5-二氯芐酯，為黃色油，無需純化即可使用。
在0℃將此粗磺酸鹽溶解于50mL DMF，然后加入3g KCN。2小時(shí)后再加入50mL DMF，并將溶液攪拌16小時(shí)。用1LH2O稀釋所得紅色溶液，并用3NHCl酸化至pH3。用二氯甲烷萃取該水溶液，合并的有機(jī)相用3NHCl洗滌，Na2SO4干燥，減壓除去溶劑后得到粗3,5-二氯苯基乙腈，無需純化即可使用。
將該腈加到40mL濃硫酸和50mL H2O的混合物中，并加熱回流48小時(shí)。冷卻到室溫后再攪拌48小時(shí)。將反應(yīng)物倒入1L碎冰稀釋，升至室溫后依次用2×200mL二氯甲烷和2×200mL乙酸乙酯萃取。合并兩套有機(jī)相并用飽和NaHCO3水溶液洗滌。合并NaHCO3部分并用3NHCl酸化至pH1。產(chǎn)生的白色固體太細(xì)以致無法濾掉，可用2×200mL二氯甲烷萃取出來。合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥，減壓除去溶劑，得到粗3,5-二氯苯基乙酸，為白色固體。用己烷將所得固體制漿，過濾得到1.75g白色固體。
NMR(CDCl3):(in ppm)3.61(s,2H),7.19(s,1H),7.30(s,1H)實(shí)施例D′N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸的合成用L-丙氨酸(Nova Biochem)和3-氯苯基乙酸(Aldrich)，按照通用方法F’或G’，接著用通用方法D’進(jìn)行水解，制備標(biāo)題化合物。
實(shí)施例A1N-(苯基乙?；?-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法A’，用苯基乙酰氯(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.23-7.36(m,5H),6.18(d,1H),4.58(t,J=7.3Hz,1H),3.87(m,2H),3.57(s,2H),1.90(m,1H),1.34(d,J=7.2 Hz,3H),0.89(d,J=6.8 Hz,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=172.7,170.3,134.5,129.2,128.8,127.2,71.3,48.1,43.4,27.5,18.8,18.3.
C15H21NO3(MW=263.34；質(zhì)譜(MH+=264))實(shí)施例A2N-(3-苯基丙酰基)-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法A′，用3-苯基丙酰氯(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在51-54℃的固體。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.25(m,2H),7.19(r,3H),6.28(d,J=7.2 Hz,1H),4.58(quint.,J=7.2 Hz,1H),3.89(m,2H),2.95(t,J=7.7 Hz,2H),2.50(m,2H),1.92(m,1H),1.33(d,J=7.1 Hz,3H),0.91(d,J=6.7 Hz,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.0,171.5,140.6,128.3,128.1,126.0,71.2,47.8,37.9,31.4,27.5,18.79,18.77,18.3.
C16H23NO3(MW=277.37；質(zhì)譜(MH+=278))實(shí)施例A3N-(3-甲基戊酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用3-甲基戊酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為油。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.08(d,J=5.9 Hz,1H),4.62(quint.,J=7.3 Hz,1H),3.92(m,2H),2.22(m,1H),1.84-2.00(m,3H),1.40(d,J=7.2 Hz,3H),1.35(m,1H),1.20(m,1H),0.85-0.96(m,12H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.3,172.1,71.4,47.9,43.9,32.3,29.38,29.35,27.6,19.10,19.06,18.93,18.91,18.72,18.67,11.3C13H25NO3(MW=243.35；質(zhì)譜(MH+=244))實(shí)施例A4N-[(4-氯苯基)乙?；鵠-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’,用4-氯苯基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物,為熔點(diǎn)在111-113℃的固體。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng),通過用Et2O萃取,接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.30(d,J=8.2 Hz,2H),7.21(d,J=8.3 Hz,2H),6.18(d,J=5.5 Hz,1H),4.57(quint.,J=7.2 Hz,1H),3.88(m,2H).3.53(s,2H),1.91(m,1H),1.36(d,J=7.1 Hz,3H),0.90(d,J=6.8 Hz,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=172.8,169.8,133.1,133.0,130.6,128.9,71.4,48.2,42.6,27.6,18.85,18.82,18.4.
C15H20NO3Cl(MW=297.78；質(zhì)譜(MH+298))實(shí)施例A5N-[(3,4-二氯苯基)乙?；鵠-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用3,4-二氯苯基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在81-83℃的固體。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.90(d,J=6.8 Hz,6H),1.38(d,J=7.1 Hz,3H),1.91(m,1H),3.50(s,2H),3.90(m,2H),4.57(quint.,J=7.1 Hz,1H),6.31(d,J=4.9 Hz,1H),7.12(m,1H),7.38(m,2H).
13C-nmr(CDCl3):δ=18.4,18.8,18.9,27.6,42.2,48.3,71.5,128.6,130.6,131.2,131.3,132.6,134.7,169.2,172.8.
C15H19NO3Cl2(MW=332.23；質(zhì)譜(MH+332))實(shí)施例A6N-[(4-甲基苯基)乙?；鵠-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用4-甲基苯基乙酸(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在102-104℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.6于33％乙酸乙酯/己烷)監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.90(d,J=6.7 Hz,6H),1.35(d,J=7.2 Hz,3H),1.91(m,1H),2.34(s,3H),3.55(s,2H),3.88(m,2H),4.58(m,1H),6.05(bd,1H),7.16(s,4H).
13C-nmr(CDCl3):δ=18.5,18.85,18.87,21.0,27.6,43.1,48.1,71.3,129.2,129.6,131.3,136.9,170.6,172.8.
C16H23NO3(MW=277.37；質(zhì)譜(MH+278))實(shí)施例A7N-[(3-吡啶基)乙?；鵠-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法F’，用3-吡啶基乙酸鹽酸鹽(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在62-64℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.48于10％甲醇/二氯甲烷)監(jiān)視反應(yīng)，經(jīng)硅膠色譜純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.40(d,J=2.8,2H)；7.6(m,1H):7.16(m,2H)；4.5(quint.,J=7.2,7.2,1H)；3.8(m,2H)；3.48(s,2H)；1.8(m,1H)；1.30(d,J=7.2,3H)；0.81(d,J=6.7,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.4,170.1,150.6,148.8,137.4,131.4,124.1,71.9,48.9,40.6,28.1,19.5,19.4,18.6.
C14H20N2O3(MW=264；質(zhì)譜(MH+265))實(shí)施例A8N-[(1-萘基)乙?；鵠-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用1-萘基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在69-73℃的固體。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.83(m,6H),1.25(d,,J=7.1 Hz,3H),1.81(m,1H),3.79(m,2H),4.04(2s,2H),4.57(quint.,J=7.3 Hz,1H),5.99(d,J=7.1 Hz,1H),7.44(m,2H),7.53(m,2H),7.85(m,2H),7.98(m,1H).
13C-nmr(CDCl3):δ=18.2,18.81,18.83,27.5,41.5,48.2,71.3,123.7,125.6,126.1,126.6,128.2,128.5,128.7,130.7,132.0,133.9,170.3,172.5.
C19H23NO3(MW=313.40；質(zhì)譜(MH+314))實(shí)施例A9N-[(2-萘基)乙?；鵠-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用2-萘基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在128-129℃的固體。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.86(m,6H),1.35(d,J=7.1 Hz,3H),1.78(m,1H),3.76(s,2H),3.87(m,2H),4.62(quint.,J=7.2 Hz,1H),6.13(d,J=7.1 Hz,1H),7.41(m,1H),7.48(m,2H),7.74(s,1H),7.83(m,3H).
13C-nm-r(CDCl3):δ=18.4,18.82,18.85,27.6,43.7,48.2,71.4,125.9,126.3,127.2,127.6,127.7,128.2,128.7,132.0,132.5,133.5,170.3,172.8.
C19H23NO3(MW=313.40；質(zhì)譜(MH+314))實(shí)施例A10N-(4-苯基丁?；?-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用4-苯基丁酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為油。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.92(d,J=6.7 Hz,6H),1.38(d,J=7.1 Hz,3H),1.96(m,3H),2.21(t,J=7.1 Hz,2H),2.64(t,J=7.3 Hz,2H),3.90(m,2H),4.59(quint.,J=7.2 Hz,1H),6.31(d,1H),7.16(m,3H),7.24(m,2H).
13C-mnr(CDCl3):δ=18.3,18.75,18.78,26.8,27.5,34.9,35.3,47.8,71.2,125.7,128.2,128.3,141.3,172.1,173.0.
C17H25NO3(MW=291.39；質(zhì)譜(MH+292))實(shí)施例A11N-(5-苯基戊酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用5-苯基戊酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為油。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.23(m,2H),7.17(m,3H),6.30(d,1H),4.59(quint.,J=7.3 Hz,1H),3.91(m,2H),2.61(t,J=7.2 Hz,2H),2.22(t,J=7.2 Hz,2H),1.93(m,1H),1.66(m,4H),1.38(d,J=7.2 Hz,3H),0.92(d,J=6.7 Hz,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.1,172.3,142.0,128.2,128.1,125.6,71.2,47.8,36.1,35.5,30.8,27.5,25.0,18.80,18.77,18.4.
C18H27NO3(MW=305.39；質(zhì)譜(MH+306))實(shí)施例A12N-[(4-吡啶基)乙?；鵠-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法F’，用4-吡啶基乙酸鹽酸鹽(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在64-66℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.43于10％甲醇/二氯甲烷)監(jiān)視反應(yīng)，經(jīng)硅膠色譜純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.51(dd,J=1.6,2.8,1.6,2H)；7.23(dd,J=4.3,1.6,4.4,2H)；6.71(d,J=6.8,1H)；4.56(quint.,J=7.3,7.2,1H)；3.88(m,2H)；3.53(s,2H)；1.89(m,1H)；1.36(d,J=7.2,3H)；0.88(d,J=6.7,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.5,169.3,150.5,144.4,125.1,72.1,48.9,43.0,28.2,19.5,19.5,18.9.
C14H20N2O3(MW=264；質(zhì)譜(MH+265))
實(shí)施例A13N-(苯基乙?；?-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用苯基乙酰氯(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在45-47℃的固體。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.24-7.39(m,5H),6.14(d,1H),4.58(t,J=7.3Hz,1H),3.88(m,2H),3.58(s,2H),1.90(m,1H),1.35(d,J=7.2 Hz,3H),0.89(d,J=6.7 Hz,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=172.8,170.4,134.5,129.3,128.9,127.2,71.3,48.1,43.5,27.5,18.9,18.8,18.4.
C15H21NO3(MW=263.34；質(zhì)譜(MH+264))實(shí)施例A142-[(3,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3,4-二氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng),用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.36(m,3H),6.03(bd,1H),4.54(m,1H),3.87(m,2H),3.49(s,2H),1.93(m,2H),1.72(m,1H),0.88(d,6H),0.80(t,3H).
實(shí)施例A152-[(3-甲氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-甲氧基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.75(m,4H),5.93(bd,1H),4.51(m,1H),3.83(m,2H),3.75(s,2H),3.52(s,2H),1.82(m,2H),1.60(m,1H),0.84(d,6H),0.74(t,3H).
C17H25NO4(MW=307.39；質(zhì)譜(MH+309))實(shí)施例A162-[(4-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用4-硝基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.16(d,2H),7.44(d,2H),6.04(bd,1H),4.55(mr,1H),3.86(m,2H),3.66(s,2H),1.86(m,2H),1.67(m,1H),0.85(d,6H),0.81(t,3H).
C16H22N2O5(MW=322.36；質(zhì)譜(MH+323))實(shí)施例A172-[(3,4-亞甲基二氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3,4-(亞甲基二氧基)苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.72(m,3H),5.92(bd,1H),4.54(m,1H),3.86(m,2H),3.66(s,2H),1.86(m,2H),1.66(m,1H),0.89(d,6H),0.79(t,3H).
實(shí)施例A182-[(噻吩-3-基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-噻吩乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.37(m,1H),7.16(m,1H),7.04(m,1H),6.05(bd,1H),4.57(m,1H),3.66(s,2H),1.93(m,2H),1.67(m,1H),0.91(d,6H),0.86(t,3H).
實(shí)施例A192-[(4-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用4-氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22(m,2H),7.11(m,2H),5.80(m,1H),4.44(m,1H),3.78(m,2H),3.43(s,2H),1.77(m,2H),1.56(m,1H),0.83(d,6H)0.71(t,3H).
實(shí)施例A202-[(3-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-硝基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.15(m,2H),7.65(m,1H),6.08(m,1H),4.46(m,1H),3.92(m,2H),3.68(s,2H),1.91(m,2H),1.75(m,1H),0.98(d,6H)0.71(t,3H).
實(shí)施例A212-[(2-羥基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2-羥基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.14(m,1H),7.01(m,1H),6.93(m,1H),6.79(m,1H),6.46(m,1H),4.51(m,1H),3.87(m,2H),3.57(s,2H),2.01(m,2H),1.75(m,1H),0.89(d,6H),0.85(t,3H).
實(shí)施例A222-[(2-萘基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2-萘基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.83(m,7H),5.95(m,1H),4.58(m,1H),3.84(m,2H),3.75(s,2H),1.89(m,2H),1.63(m,1H),0.91(d,6H),0.81(t,3H).
C20H25NO3(MW=327.42；質(zhì)譜(MH+328))實(shí)施例A232-[(2,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2,4-二氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.49(m,1H),7.22(m,2H)5.98(m,1H),4.52(m,1H),3.86(m,2H),3.61(s,2H),1.84(m,2H),1.62(m,1H)0.87(d,6H),0.80(t,3H).
實(shí)施例A242-[(4-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用4-溴苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.43(d,2H),7.19(d,2H)5.85(m,1H),4.51(m,1H),3.81(m,2H),3.47(s,2H),1.84(m,2H),1.61(m,1H)0.84(d,6H),0.76(t,3H).
C16H22NO3Br(MW=356.26；質(zhì)譜(MH+358))實(shí)施例A252-[(3-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’,用3-氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng),用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.25(m,3H),7.12(m,1H)5.80(m,1H),4.52(m,1H),3.86(m,2H),3.50(s,2H),1.87(m,2H),1.67(m,1H)0.88(d,6H),0.77(t,3H).
C15H22NO3Cl(MW=311.81；質(zhì)譜(MH+313))實(shí)施例A262-[(3-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-氟苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.31(m,1H),7.01(m,3H)5.95(m,1H),4.54(m,1H),3.84(m,2H),3.54(s,2H),1.88(m,2H),1.65(m,1H)0.87(d,6H),0.81(t,3H).
C16H22NO3F(MW=295.35；質(zhì)譜(MH+296))實(shí)施例A272-[(苯并噻唑-4-基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用4-苯并噻唑-4-基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.82(m,1H),7.51-7.21(m,4H)5.84(m,1H),4.51(m,1H),3.90(s,2H),3.79(m,2H),1.78(m,2H),1.58(m,1H)0.80(d,6H),0.66(t,3H).
實(shí)施例A282-[(2-甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2-甲基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.18(m,4H),5.79(m,1H),4.54(m,1H),3.85(m,2H),3.59(s,2H),3.29(s,3H),1.81(m,2H),1.59(m,1H)0.87(d,6H),0.77(t,3H).
C17H25NO3(MW=291.39；質(zhì)譜(MH+291))實(shí)施例A292-[(2-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2-氟苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.28(m,1H),7.09(m,3H)6.03(m,1H),4.54(m,1H),3.87(m,2H),3.57(s,2H),1.89(m,2H),1.64(m,1H)0.88(d,6H),0.80(t,3H).
實(shí)施例A302-[(4-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用4-氟苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7 20(m,2H),6.97(m,2H)5.87(m,1H),4.492(m,1H),3.83(m,2H),3.48(s,2H),1.86(m,2H),1.60(m,1H)0.87(d,6H),0.78(t,3H).
C16H22NO3F(MW=295.35；質(zhì)譜(MH+296))實(shí)施例A312-[(3-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-溴苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.45(m,2H),7.23(m,2H)5.95(m,1H),4.55(m,1H)3.84(m,2H)3.55(s,2H),1.89(m,2H),1.68(m,1H)0.91(d,6H),0.81(t,3H).
C16H22NO3Br(MW=356.26；質(zhì)譜(M+357))實(shí)施例A322-[(3-三氟甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-三氟甲基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.52(m,1H),7.47(m,2H)6.01(m,1H),4.56(m,1H),3.86(m,2H),3.61(s,2H),1.84(m,2H),1.62(m,1H)0.87(d,6H),0.80(t,3H)C17H22NO3F3(MW=345.36；質(zhì)譜(M+345))實(shí)施例A332-[(2-噻吩基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2-噻吩基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.89(m,3H),6.07(bd,1H),4.50(m,1H),3.82(m,2H),3.71(s,2H),1.85(m,2H),1.62(m,1H),0.81(d,6H),0.75(t,3H).
C14H21NO3S(MW=283.39；質(zhì)譜(MH+284))實(shí)施例A342-(苯基乙酰氨基)丁酸異丁酯的合成按照通用方法H’，用苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，經(jīng)硅膠色譜純化，用9∶1的甲苯EtOAc作洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.17-7.28(m,5H),6.23(bd,1H),4.51(m,1H),3.86(m,2H),3.54(s,2H),1.87(m,2H),1.62(m,1H),0.87(d,6H),0.78(t,3H).
C16H23NO3(MW=277.36；質(zhì)譜(M+277))實(shí)施例A35N-(苯基乙?；?纈氨酸2-甲基丁酯的合成步驟A N-(苯基乙?；?纈氨酸的制備向冷卻到0℃的攪拌著的5.15g(44mmol)纈氨酸(Bachem)的50mL(100mmol)2N NaOH溶液中滴加5.3mL(40mmol)苯基乙酰氯(Aldrich)，沉淀出無色油。允許反應(yīng)混合物升至室溫。攪拌18小時(shí)，然后用50mL乙醚洗滌，用HCl水溶液酸化至pH2-3。濾出白色的沉淀，用水徹底洗滌，接著用乙醚洗滌，得到7.1g(30mmol,69％產(chǎn)率)標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(DMSO-d6):δ=12.63(s,1H),8.25(d,J=8.6 Hz,1H),7.27(m,5H),4.15(m,1H),3.56(d,J=13.8 Hz,1H),3.47(d,J=13.8 Hz,1H),2.05(m,1H),0.87(d,J=6.8,Hz,3H),0.84(d,J=6.8 Hz,3)13C-nmr(DMSO-d6):δ=173.2,170.4,136.6,129.0,128.2,126.3,57.1,41.9,30.0,19.2,18.0C13H17NO3(MW=235.29；質(zhì)譜(MH+=236))步驟B N-(苯基乙酰基)纈氨酸2-甲基丁酯的合成按照通用方法C’，用步驟A制備的N-(苯基乙酰基)纈氨酸和2-甲基丁-1-醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為非對(duì)映體的混合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.25-7.40(m,5H),5.95(d,1H),4.56(m,1H),3.84-4.00(m,2H),3.61(s,2H),2.10(m,1H),1.68(m,1H),1.38(m,1H),1.15(m 1H),0.82-0.94(m,9H),0.76(d,3H).
13C-nmr(CDCl3):δ=171.84,171.81,170.7,134.6,129.31,129.27,128.9,127.3,69.8,57.0,43.7,33.9,31.3,25.9,25.8,,18.9,17.4,16.34,16.27,11.12,11.07C18H27NO3(MW=305.42；質(zhì)譜(MH 306))實(shí)施例A36N-(苯基乙酰基)-L-蛋氨酸異丁酯的合成將L-蛋氨酸(O.129g,0.869mmol)(Aldrich)溶解于二口噁烷(5.OmL)，先后用碳酸氫鈉飽和溶液(5.0mL)和苯基乙酰氯(Aldrich)(0.114mL, 0.822mmol)處理。在室溫?cái)嚢?7小時(shí)后用乙酸乙酯稀釋混合物。分離各相，水相用5N HCl酸化至pH2。粗產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，硫酸鈉干燥，真空干燥，無需進(jìn)-步純化即可使用。
將N-苯基乙?；?L-蛋氨酸(0.1285g,0.447mmol)溶解于3.0mL二口噁烷和異丁醇(0.2mL),然后加入EDC(0.094g,0.492mmol)和催化用的DMAP(0.015g)。在23℃攪拌17小時(shí)后減壓蒸發(fā)混合物。所剩油狀物用EtOAc稀釋，先后用0.1NHCl和飽和碳酸氫鈉洗滌。經(jīng)硅膠色譜純化(用98∶2 CHCl3/MeOH作洗脫劑)得到純產(chǎn)物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.4-7.23(m,5H),6.14(bd,1H),4.70(m,1H),3.89(d,2H),3.62(s,2H),2.43(m,2H),2.12(m,1H),1.93(m,2H),0.94(d,6H).
C17H25NO3S(MW=323.17；質(zhì)譜(M+323))實(shí)施例A37N-(苯基乙?；?-L-亮氨酸異丁酯的合成將L-亮氨酸(0.1149,0.869mmol)(Aldrich)溶解于二口噁烷(5.0mL)，先后用碳酸氫鈉飽和溶液(5.0mL)和苯基乙酰氯(Aldrich)(0.114mL,0.822mmol)處理。在室溫?cái)嚢?7小時(shí)后用乙酸乙酯稀釋混合物。分離各相，水相用5N HCl酸化至pH2。粗產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，硫酸鈉干燥，真空干燥，無需進(jìn)-步純化即可使用。
將N-苯基乙酰基-L-亮氨酸(0.0081g,0.038mmol)溶解于2.0mLCHCl3(無EtOH)和異丁醇(0.055mL)，然后用P-PEC(100mg,0.87meq.)處理。將混合物旋轉(zhuǎn)4天，經(jīng)棉塞過濾，減壓蒸發(fā)濾液，得到油狀物，其純度足以用于試驗(yàn)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22(m,5H),5.57(d,1H),4.35(m,1H),3.35(m,3H),1.35(m,4H),0.68(m,9H).
C18H27NO3(MW=305.40；質(zhì)譜(M+305))實(shí)施例A38N-[(3-氯苯基)乙?；鵠丙氨酸3-甲基丁-2-烯酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和3-甲基丁-2-烯-1-醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜進(jìn)行純化(用30％EtOAc/己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.39-7.16(m,4H),6.06(bd,1H),5.38-5.29(m,1H),4.63(d,J=9Hz,2H),3.56(s,2H),1.79(s,3H),1.7(s,3H),1.39(d,J=9Hz,3H).
實(shí)施例A39N-[(3-氯苯基)乙?；鵠丙氨酸環(huán)丙基甲酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和環(huán)丙基甲醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng),用液相色譜進(jìn)行純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.2-7.1(m,4H),6.09(bs,1H),4.6(dq,J=9 Hz,1H),3.96(dd,J=9Hz,2H),3.59(s,2H),1.2(d,J=9Hz,3H),1.2-1.0(m,1H),0.60-0.50(m,2H),0.30-0.20(m,2H).
實(shí)施例A40N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-噻吩基甲酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和2-噻吩甲醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜進(jìn)行純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.37-6.97(m,7H),5.97(q,J=14 Hz,2H),4.6(dq,J=9 Hz,1H),3.76(s,2H),1.38(d,J=9Hz,3H).
實(shí)施例A41N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸(1-甲基環(huán)丙基)甲酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和(1-甲基環(huán)丙基)甲醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜進(jìn)行純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.6(bd,J=9 Hz,1H),3.86(q,J=14 Hz,2H),3.4(s,2H),2.29(q,J=9 Hz,1H),1.3(d,J=9Hz,3H),1.03(s,3H),0.5-0.4(m,2H),0.4-0.28(m,2H).
實(shí)施例A42N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-噻吩基甲酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和3-噻吩甲醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜進(jìn)行純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.03(bd,J=9 Hz,1H),7.56-7.5(m,1H),7.47(bs,1H),7.4-7.17(m,4H),7.06(d,J=9 Hz,1H),5.1(s,2H),4.3(dq,1H),1.3(d,J=9 Hz,3H).
實(shí)施例A43N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基環(huán)戊酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和2-甲基環(huán)戊醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜進(jìn)行純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.39-7.16(m,4H),6.3(bd,1H),4.79-4.7(m,1H),4.64.25(m,J=9 Hz,1H),3.58(s,2H),2.09-1.8(m,2H),1.74-1.6(m,2H),1.39(dd,J=9 Hz,3H),1.2(dt,J=9 Hz,1H),0.98(dd,J=9 Hz,2H)C17H22NO3Cl(MW=323.82；質(zhì)譜(M+323))實(shí)施例A44N-[(3-氯苯基)乙?；鵠丙氨酸2-甲基丙-2-烯酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙?；?丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和2-甲基丙-2-烯-1-醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜進(jìn)行純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.39-7.16(m,4H),6.03(bs,1H),4.77(s,2H),4.7-4.29(m,3H),2.59(s,2H),1.73(s,3H),1.43(d,J=9 Hz,3H)
C15H18NO3Cl(MW=295.76；質(zhì)譜(M+295))實(shí)施例A45N-[(3-氯苯基)乙?；鵠丙氨酸環(huán)己-2-烯酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙酰基)丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和環(huán)己-2-烯-1-醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜進(jìn)行純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.6(bd,J=9 Hz,1H),7.4-7.2(m,4H),6.0-5.8(m,1H),5.7-5.5(m,1H),5.1(bs,1H),4.13-4.29(m,1H),3.5(s,2H),2.1-1.9(m,2H),1.8-1.69(m,1H),r.69-1.49(m,4H),1.3(dd,J=9 Hz,3H)C17H20NO3Cl(MW=321.8；質(zhì)譜(M+321.2)).
實(shí)施例A46N-[(2-苯基苯并噁唑-5-基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用5-(2-苯基苯并噁唑)-基-乙酸(CAS#62143-69-5)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.24(m,3H),7.68(m,1H),7.51(m,5H),6.04(m,1H),4.58(m,1H),3.85(m,2H),3.68(s,2H),1.9(m,1H),1.35(d,3H),0.87(d,6H).
C22H24N2O4(MW=380；質(zhì)譜(MH+381))實(shí)施例A47N-[(3-甲硫基苯基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-甲硫基苯基乙酸(CAS#18698-73-2)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.14(m,2H),7.01(m,1H),4.56(m,1H),3.88(m,2H),3.54(s,2H),2.46(s,3H),1.89(m,1H),1.35(d,3H)0.85(d,6H).
C16H23NO3S(MW=309,質(zhì)譜(MH+310))實(shí)施例A48N-4-[(2-呋喃基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2-呋喃基乙酸(CAS#2745-26-8)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.36(m,1H),6.34(m,1H),6.21(m,1H),4.56(m,1H),3.91(m,2H),3.61(s,2H),1.92(m,1H),1.38(d,3H)0.89(d,6H).
C13H19NO4(MW=253，質(zhì)譜(MH+254))實(shí)施例A49N-[(苯并呋喃-2-基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用苯并呋喃-2-基乙酸(Maybridge)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.51(m,1H),7.44(m,1H),7.25(m,2H),6.67(s,1H),4.60(m,1H),3.87(m,2H),3.77(s,2H),1.88(m,1H),1.38(d,3H),0.87(d,6H).
C17H21NO4(MW=303；質(zhì)譜(MH+304))實(shí)施例A50N-[(苯并噻吩-3-基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用硫茚-3-基乙酸(Lancaster)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.89(m,1H),7.76(m,1H),7.38(m,3H),6.07(m,1H),4.57(m,1H),3.92(m,2H),3.82(s,4H),1.84(m,1H),1.32(d,3H)0.85(d,6H).
C17H21NO3S(MW=319；質(zhì)譜(MH+320))實(shí)施例A51N-[(2-氯-5-噻吩基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用(5-氯-2-噻吩基)乙酸(CAS#13669-19-7)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.77(m,1H),6.68(d,1H),6.31(bm,1H),4.59(m,1H),3.91(m,2H),3.38(s,2H),1.90(m,1H),1.39(d,3H)0.89(d,6H).
C13H18NO3SCl(MW=303；質(zhì)譜(M+303))實(shí)施例A52N-[(3-甲基異噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用(3-甲基異噁唑-5-基)乙酸(CAS#19668-85-0)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.07(s,2H),4.56(m,1H),3.92(m,2H),3.68(s,2H),2.29(s,3H),1.94(m,1H),1.89(d,3H)0.91(d,6H).
C13H20N2O4(MW=268；質(zhì)譜(MH+269))實(shí)施例A53N-[(2-苯硫基噻吩基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用(2-苯硫基噻吩基)乙酸和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21-7.11(m,6H),6.92(d,1H),4.56(m,1H),3.87(m,2H),3.72(s,2H),1.94(m,1H),1.38(d,3H)0.89(d,6H).
C19H23NO3S2(MW=377，質(zhì)譜(MH+378))實(shí)施例A54N-[(6-甲氧基苯并噻吩-2-基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用(6-甲氧基苯并噻吩-2-基)乙酸和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nrnr(CDCl3):δ=7.59(d,1H),7.33(d,1H),7.16(s,1H),7.03(dd,1H),4.56(m,1H),3.87(s,3H),3.84(m,2H),3.76(s,2H),1.85(m,1H),1.30(d,3H)0.86(d,6H).
C18H23NO4S(MW=349；質(zhì)譜(MH+350))實(shí)施例A55N-[(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙酸(CAS#90771-06-5)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.47(m,5H),4.66(m,1H),4.16(s,2H),3.91(m,2H),1.93(m,1H),1.48(d,3H)0.93(d,6H).
C17H21N3O3S(MW=347；質(zhì)譜(MH+348))實(shí)施例A56N-[(2-苯基噁唑-4-基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用(2-苯基噁唑-4-基)乙酸(CAS#22086-89-1)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下實(shí)施例A57N-[(3-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-甲基苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(m,1H),7.07(m,3H),4.54(m,1H),3.83(m,2H),3.52(s,2H),2.35(s,3H),1.87(m,1H),1.32(d,3H),0.88(d,6H).
C16H23NO3(MW=277；質(zhì)譜(MH+278))實(shí)施例A58N-[(2,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用2,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.08-6.94(m,3H),4.57(m,1H),3.91(m,2H),3.56(s,2H),1.92(m,1H),1.41(d,3H)0.91(d,6H).
C15H19NO3F2(MW=299；質(zhì)譜(MH+300))實(shí)施例A59N-[(3,5-二氟苯基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.81(m,2H),6.74(m,1H),6.06(m,1H),4.57(m,1H),3.92(m,2H),3.51(s,2H),1.94(m,1H),1.36(d,3H)0.87(d,6H).
C15H19NO3F2(MW=299；質(zhì)譜(MH+300))實(shí)施例A60N-[(3-噻吩基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用3-噻吩乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.33(m,1H),7.14(m,1H),7.01(m,1H),6.09(m,1H),4.58(m,1H),3.88(m,2H),3.60(s,2H),1.91(m,1H),1.37(d,3H)0.92(d,6H).
旋光度[α]23-52(cl MeOH)@589nm.
C13H19NO3S(MW=269；質(zhì)譜(MH+269))實(shí)施例A61N-[(4-甲基苯基)乙?；鵠-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法I’，用4-甲基苯基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯(按照實(shí)施例J’方法制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用通用方法中的過濾技術(shù)進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.11(s,4H),5.93(m,1H),4.58(m,1H),3.88(m,2H),3.54(s,2H),2.33(s,3H),1.89(m,1H),1.32(d,3H),0.89(d,6H).
C16H23NO3(MW=277.35；質(zhì)譜(MH+278))
實(shí)施例A62N-(苯基乙?；?-L-丙氨酸S-1-(甲氧羰基)異丁酯的合成按照通用方法K’，用(S)-(+)-2-羥基-2-甲基丁酸(Aldrich)代替氨基酸，制備(S)-(+)-2-羥基-2-甲基丁酸甲酯。
用通用方法E’將(S)-(+)-2-羥基-2-甲基丁酸甲酯與芐氧羰基-L-丙氨酸(Aldrich)偶合，得到芐氧羰基-L-丙氨酸S-1-(甲氧羰基)異丁酯。
將芐氧羰基-L-丙氨酸S-1-(甲氧羰基)異丁酯(1.0g)溶解于20mL甲醇，并加入6N Hcl(0.5mL)和10％鈀碳(0.1g)。室溫下將反應(yīng)混合物在Parr儀器中用40psi的氫氣氫化5小時(shí)，然后用Celite濾板過濾。減壓濃縮濾液，得到L-丙氨酸S-1-(甲氧羰基)異丁酯鹽酸鹽(98％產(chǎn)率)。
然后用通用方法G’將L-丙氨酸S-1-(甲氧羰基)異丁酯鹽酸鹽與苯基乙酸偶合，得到標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.35-7.20(m,5H),6.22(bd,1H),4.83(d,1H),4.65(p,1H),3.68(s,3H),3.55(s,2H),2.21(m,1H),1.40(d,3H),0.97(d,3H),0.93(d,3H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.25,171.18,170.22,135.11,129.94,129.50,127.88,52.67,48.49,43.98,30.53,19.21,18.75,17.58.
實(shí)施例A63N-[(3-硝基苯基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法H’，用3-硝基苯基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，從丁基氯重結(jié)晶純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.17(m,2H),7.68(d,1H),7.52(t,1H),6.18(m,1H),4.48(m,1H),3.94(m,2H),3.67(s,2H),1.93(m,1H),1.42(d,3H),0.91(d,3H).
旋光度[α]23-49(c5,MeOH).
實(shí)施例A64N-[(3,5-二氟苯基)乙?；鵠丙氨酸乙酯的合成按照通用方法G’，用3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸乙酯(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在93-95℃的固體。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)(Rf=0.8于EtOAc)，先進(jìn)行硅膠色譜(用EtOAc作洗脫劑)，再?gòu)?-氯丁烷重結(jié)晶純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.30(d.3H)；3.52(s,2H).
C13H15NO3F2(MW=271.26；質(zhì)譜(M+271))實(shí)施例A65N-[(3-硝基苯基)乙?；鵠蛋氨酸乙酯的合成按照通用方法G’，用3-硝基苯基乙酸(Aldrich)和蛋氨酸乙酯鹽酸鹽(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，從丁基氯重結(jié)晶純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.18(s,1H),8.15(d,1H)7.66(d,1H),7.48(t,1H),6.30(m,1H),4.67(m,1H),4.21(t,2H),3.67(s,2H),2.47(t,2H),2.12(m,2H),2.08(s,3H),1.27(t,3H).
旋光度[α]23-30(c5,MeOH).
實(shí)施例A66N-[(3-氯苯基)乙?；鵠丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法G’，用3-氯苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(按照通用方法J’制備)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.29(m,3H),7.18(m,1H),6.0(m,1H),4.56(m,1H),3.89(m,2H),3.53(s,2H),1.91(m,1H),1.39(d,3H),0.91(d,3H).
旋光度[α]23-45(c 5,MeOH).
C15H20NO3Cl(MW=297.78；質(zhì)譜(M+297))
實(shí)施例A67N-[(3-氯苯基)乙?；鵠丙氨酸2-(N,N-二甲基氨基)乙酯的合成按照通用方法C’，用N-(3-氯苯基乙酰基)丙氨酸(得自實(shí)施例D’)和2-(N,N-二甲基氨基)乙醇(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，用液相色譜純化(用0.1∶2∶0.79 NH4OH∶EtOH∶CHCl3作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):7.37(s,1H),7.33-7.2(m,3H),4.675-4.6(m,1H),4.5-4.37(m,1H),4.25-4.13(m,1H),3.6(d,J=7 Hz,2H),2.86(bs,2H),2.3(s,6H),1.23(d,J=9 Hz,3H).
C15H21N2O3Cl(MW=313.799；質(zhì)譜(M+313))實(shí)施例A682-[(3,5-二氯苯基)乙酰氨基]己酸甲酯的合成按照通用方法F’，用3,5-二氯苯基乙酸(得自實(shí)施例C’)和L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在77-78℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.70于40％EtOAc/己烷)監(jiān)視反應(yīng)，經(jīng)硅膠快速色譜純化(用40％EtOAc/己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.20(s),7.18(s),6.6-(m),4.55(m),3.7(s),3.5(s),3.4(s),2.0(s),1.8(m),1.6(m),1.2(m),0.8(t).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.54,169.67,138.43,135.72,128.33,128.07,78.04,77.62,77.19,53.04,52.90,43.14,32.57,27.87,22.81,14.41.
實(shí)施例A69N-[(3,5-二氯苯基)乙?；鵠-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法F’，用3,5-二氯苯基乙酸(得自實(shí)施例C’)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在115-116℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.40于3％甲醇/二氯甲烷)監(jiān)視反應(yīng)，經(jīng)硅膠快速色譜純化(用3％甲醇/二氯甲烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.27(d,J=2 Hz,1H),7.19(s,2H),6.22(d,J=6 Hz,1H),4.59(quint.,J=7 Hz,1H),3.9(q,J=4 Hz,2H),3.5(s,2H),1.9(m,1H),1.4(d,J=7 Hz,3H),0.91(d,J=7 Hz,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.45,169.37,138.31,135.75,128.39,128.11,78.04,77.61,77.19,72.19,54.03,48.97,43.12,28.24,19.52,19.49,19.09.
C15H19NO3Cl2(MW=331.9；質(zhì)譜(M+332))實(shí)施例A70N-(環(huán)己基乙?；?-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用環(huán)己基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在92-93℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.39于1∶3 EtOAc∶己烷)監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.93(d,J=6.7 Hz,6H),0.85-1.01(m,2H),1.05,1.35(m,3H),1.40(d,J=7.1 Hz,3H),1.60-1.85(m,6H),1.95(m,1H),2.06(d,J=7.0 Hz,2H),3.92(m,2H),4.61(m,1H),6.08(bd,1H).
13C-nmr(CDCl3):δ=18.7,18.9,26.0,26.1,27.6,33.0,35.3,44.6,47.9,71.4,171.8,173.3.
C15H27NO3(MW=269.39；質(zhì)譜(M+270))實(shí)施例A71N-(環(huán)戊基乙?；?-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用環(huán)戊基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在62-64℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.37于1∶3 EtOAc∶己烷)監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.87(d,J=6.8 Hz,6H),1.01-1.17(m,2H),1.34(d,J=7.2 Hz,3H),1.40-1.62(m,4H),1.70-1.83(m,2H),1.89(m,1H),2.15(m,3H),3.86(m,2H),4.55(m,1H),6.30(d,J=7.1 Hz,1H).
13C-nmr(CDCl3):δ=18.4,18.78,18.80,24.8(非常高),27.5,32.27，32.32,36.9,42.5,47.7,71.2,172.2,173.2.
元素分析，計(jì)算值(％):C,65.85；H,9.87；N,5.49；實(shí)測(cè)值(％):C,66.01；H,10.08；N,5.49.
C14H25NO3(MW=255.36；質(zhì)譜(M+256))實(shí)施例A72N-[(環(huán)己-1-烯基)乙?；鵠-L-丙氨酸異丁酯的合成按照通用方法B’，用環(huán)己-1-烯基乙酸(Alfa)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自實(shí)施例B’)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在49-51℃的固體。用硅膠tlc(Rf=0.40于1∶3 EtOAc∶己烷)監(jiān)視反應(yīng)，通過用Et2O萃取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌進(jìn)行純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.91(d,J=4.5 Hz,3H),0.93(d,J=6.7 Hz,3H),1.40(d,J=7.2 Hz,3H),1.52-1.70(m,4H),1.97(m,3H),2.06(bs,2H),2.89(s,2H),3.92(m,2H),4.59(m,1H),5.65(s,1H),6.33(d,J=6.6Hz,1H).
13C-nmr(CDCl3):δ=18.7,18.91,18.93,21.9,22.7,25.3,27.6,28.3,46.1,47.9,71.4,127.1,132.5,170.6,173.1.
元素分析，計(jì)算值(％):C,67.38；H,9.42；N,5.24；實(shí)測(cè)值(％):C,67.34；H,9.54；N,5.16.
C15H25NO3(MW=267.37；質(zhì)譜(M+268))實(shí)施例A73N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基硫代酸酯的合成按照通用方法C’，用N-[(3-氯苯基)乙?；鵠丙氨酸和3-甲基-2-丁烯硫代酸酯(TCI)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)，液相色譜純化(用3∶7 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=5.2-5.075(m,1H),4.37(dq,J=9 Hz,1H),3.56(s),3.43(d,J=12 Hz,2H),1.266(d,J=12 Hz,6H)1.3(d,J=9Hz,3H).
C16H26NO2ClS(MW=325.86；質(zhì)譜(M+325))
實(shí)施例A74N-[(2-苯基)-2-氟乙?；鵠丙氨酸乙酯的合成按照通用方法F’，用α-氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸乙酯(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用硅膠tlc(Rf=0.75于1∶1 EtOAc∶己烷)監(jiān)視反應(yīng)，硅膠色譜純化(用1∶2 EtOAc∶己烷作洗脫劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.14(q,3H),1.34(d,3H),4.07(m,2H),4.33(m,1H),5.84(d,1H),6.01(d,1H),7.40-7.55(m,5H),8.87(m,1H).
C13H16NO3F(MW=253.27；質(zhì)譜(M+253))實(shí)施例A75N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-苯基甘氨酸甲酯的合成按照通用方法F’，用3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.4-7.3(m,5H),6.9-6.7(m,3H),6.55(d 1H,7.1Hz),5.56(d 1H7Hz),3.72(s 3H),3.57(s2H)13C-nmr(CDCl3):δ=197.6,177.6,171.8,169.3,136.7,129.6,129.3,127.8,113.0,112.9,112.7,111.4,103.8,103.5,65.1,57.2,53.5,45.1,43.3,43.3C17H15NO3F2(MW=319.31；質(zhì)譜(MH+320))實(shí)施例A76N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-苯基甘氨酸異丁酯的合成經(jīng)過通用方法F’，使3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)與L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)實(shí)現(xiàn)EDC偶合。
將所得化合物放入大大過量的所需醇中。加入催化量的無水NaH，繼續(xù)反應(yīng)直到用tlc探測(cè)不到原料的存在。用很少幾毫升1N HCl淬滅反應(yīng)，攪拌幾分鐘后加入飽和NaHCO3水溶液。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)反應(yīng)混合物直到除去過量的醇，然后將留下的剩余物溶解于乙酸乙酯并加水。有機(jī)相用飽和NaCl飽和水溶液洗滌，MgSO4干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶液中的溶劑，剩下的粗產(chǎn)物用色譜法進(jìn)一步純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.35-7.3(m 5H),6.8-6.7(m 3H)6.60(d 1H,7 Hz),5.55(d1H7.1Hz),3.9(m 2H),3.60(s 2H),1.85(m 1H 7 Hz),0.8(q 6H 7Hz)13C-nmr(CDCl3):δ=171.3,169.3,165.4,138.5,137.0,129.5,129.2,127.6,113.1,113.0,112.8,112.7,103.8,103.5,103.2,75.5,57.2,43.4,43.3,28.2,19.3C20H21NO3F2(MW=361.39；質(zhì)譜(MH+362))實(shí)施例A77N-(環(huán)戊基乙酰基)-L-苯基甘氨酸甲酯的合成按照通用方法D’，用環(huán)戊基乙酸(Aldrich)和L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.35(s,5H),6.44(bd,1H),5.6(d,1H),3.72(s,3H),2.24(bs,3H),1.9-1.4(m,6H),1.2-1.05(m,2H)13C-nmr(CDCl3):δ=172.3,171.7,136.7,129.0,128.6,127.3,56.2,52.7,42.5,36.9,32.40,32.38,24.8實(shí)施例A78N-(環(huán)戊基乙?；?-L-丙氨酸甲酯的合成按照通用方法D’,用環(huán)戊基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.38(d,1H),4.50(m,1H),3.65(s,3H),2.13(bs,3H),1.80-1.00(m(includesd at 1.30,3H),11H)13C-nmr(CDCl3):δ=173.7,172.5,52.1,47.6,42.3,36.8,32.15,32.14，18.0C11H19NO3(MW=213.28；質(zhì)譜(M+214))
實(shí)施例A79N-(環(huán)丙基乙?；?-L-苯基甘氨酸甲酯的合成按照通用方法D’，用環(huán)丙基乙酸(Aldrich)和L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.35(m,5H)6.97(bd,J=7.2 Hz,1H)5.59(d,J=7.8 Hz,1H),3.71(s,3H),2.17(m,2H),1.05-0.95(m,1H),0.62(m,2H),0.02(m,2H)13C-nmr(CDCl3):δ=171.9,174.6,136.6,129.0,128.5,127.2,56.1,52.7,41.0,6.9,4.37,4.33實(shí)施例A80N-(環(huán)丙基乙?；?-L-丙氨酸甲酯的合成按照通用方法D’，用環(huán)丙基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.60(d,1H),4.55(m,1H),3.69(s,3H),2.10(m,2H),1.34(d,3H),0.95(m,1H),0.58(m,2H)0.15(m,2H)13C-nmr(CDCl3):δ=173.7,172.3,52.3,47.7,41.0,18.2,6.7,4.27,4.22實(shí)施例A81N-[(3-硝基苯基)乙?；鵠-L-蛋氨酸異T酯的合成按照通用方法H’，用硝基苯基乙酸(Aldrich)和L-蛋氨酸(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為褐色油。用硅膠tlc監(jiān)視反應(yīng)。NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.16(m,2H)7.67(d,1H)7.32(t,1H),6.31(bd,1H),4.69(m,1H),3.90(d,2H),3.68(s,2H),2.47(t,2H),2.15(m,1H),2.02(s,3H),1.90(m,2H),0.91(d,6H).
C17H24N2O5S(MW=368.4；質(zhì)譜(M+368))下面用通用方法A″-B″和實(shí)施例B1-B2說明用N-(芳基/雜芳基乙?；?氨基酸作原料制備本發(fā)明酰胺的另一些合成方法。
通用方法A″酰氯的制備將3,5-二氟苯基乙酸(30g,0.174mol)(Aldrich)溶解于二氯甲烷，并將溶液冷卻到0℃。加入DMF(0.5mL，催化量)，然后用5分鐘時(shí)間滴加草酰氯(18mL,0.20mol)。將反應(yīng)物攪拌3h，然后減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。剩余物用高真空泵處理1h，得到3,5-二氟苯基乙酰氯為稀黃色油。其它種酰氯也可用類似方法制備。
通用方法B″Schotten-Bauman法將3,5-二氟苯基乙酰氯(得自通用方法A”)滴加到0℃的L-丙氨酸(Aldrich)(16.7g,0.187mol)的2N氫氧化鈉溶液(215mL,0.43mol)中。將反應(yīng)物在0℃攪拌1h，然后在室溫?cái)嚢柽^夜。反應(yīng)物用水(100mL)稀釋，乙酸乙酯(3×150mL)萃取。有機(jī)相用鹽水(200mL)洗滌，MgSO4干燥，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到剩余物。剩余物從乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶，得到所要產(chǎn)物(34.5g,82％產(chǎn)率)。其它酰氯也可用于本方法，以得到用于本發(fā)明的中間體。
實(shí)施例B1N-(苯基乙?；?-L-丙氨酸的合成按照通用方法B″，用苯基乙酰氯(Aldrich)和L-丙氨酸(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在102-104℃的固體。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=9.14(br s,1H),7.21-7.40(m,5H),6.20(d,J=7.0 Hz,1H),4.55(m,1H),3.61(s,2H),1.37(d,J=7.1 Hz,3H).
13C-nmr(CDCl3):δ=176.0,171.8,134.0,129.4,127.5,48.3,43.2,17.9.
實(shí)施例B2N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸的合成按照通用方法B”，用3,5-二氟苯基乙酰氯(得自通用方法A”)和L-丙氯酸(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=8.32(br s,0.3H),6.71(m,2H),6.60(m,1H),4.74(brs,1.7H),4.16(m,1H),3.36(s,2H),1.19(d,J=7.3 Hz,3H).
13C-nmr(CD3OD):δ=175.9,172.4,164.4(dd,J=13.0,245.3 Hz),141.1,113.1(dd,J=7.8,17.1 Hz),102.9(t,J=25.7 Hz),49.5,42.7,17.5.
除非另有說明，實(shí)施例1-22中出現(xiàn)的化合物由下面通用方法A-G之一制備。
通用方法AEDC偶合方法Ⅰ在0℃向相應(yīng)的羧酸和氨基酯/酰胺的1∶1混合物的CH2Cl2中加入1.5當(dāng)量三乙胺，接著加入2.0當(dāng)量羥基苯并三唑一水合物，再加入1.25當(dāng)量1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后轉(zhuǎn)移到分液漏斗中。依次用水，NaHCO3飽和水溶液，1N鹽酸水溶液和氯化鈉飽和水溶液洗滌混合物，然后用MgSO4干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上除去溶液中的溶劑，得到粗產(chǎn)物。
通用方法BEDC偶合方法Ⅱ氮?dú)庀略谝粋€(gè)圓底燒瓶中裝入適當(dāng)羧酸(1.0eq.)，羥基苯并三唑水合物(1.1eq.)和適當(dāng)胺(1.0eq.)的THF。攪拌混合物并在其中加入適量(對(duì)于游離胺，是1.1eq.；對(duì)于胺鹽酸鹽，是2.2eq.)合適的堿，如Hunig堿，然后加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)(1.1eq.)。在室溫?cái)嚢杓s4-17小時(shí)后減壓除去溶劑，然后將剩余物溶解于EtOAc(或類似的溶劑)/H2O。依次用水，NaHCO3飽和水溶液，1N鹽酸水溶液和鹽水洗滌萃取液，然后用Na2SO4干燥。在有些情況下，需要將分離的產(chǎn)物用標(biāo)準(zhǔn)方法如色譜法和/或重結(jié)晶法進(jìn)一步純化。
通用方法CEDC偶合方法Ⅲ將在冰水浴中冷卻的適當(dāng)羧酸(1eq.)，1-羥基苯并三唑(1.6eq.),適當(dāng)胺(1eq.),N-甲基嗎啉(3eq.)和二氯甲烷(或者，對(duì)不溶性物質(zhì)，用DMF)的混合物攪拌直到成為清澈溶液。將(EDC)(1.3eq.)加到反應(yīng)混合物中，允許冷卻浴在1-2h內(nèi)升至室溫。將反應(yīng)物攪拌過夜，然后將反應(yīng)混合物真空蒸發(fā)至干。在剩余物中加入20％碳酸鉀水溶液，猛烈搖晃混合物，然后放置數(shù)小時(shí)或過夜，如果需要，直到油狀產(chǎn)物固化。濾出固化的產(chǎn)物，先后用20％碳酸鉀，水，10％HCl和水充分洗滌，得到產(chǎn)物。用這種方法觀察不到外消旋作用。
通用方法DCDI偶合方法Ⅰ將適當(dāng)酸(3.3mmol)和1,1’-羰基二咪唑(CDI)的20mL THF溶液攪拌2小時(shí)。先后加入氨基酸酯鹽酸鹽(3.6mmol)和1.5mL(10.8mmol)三乙胺。將反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后將之溶解于100mL乙醚。用10％HCl洗滌三次，鹽水一次，20％碳酸鉀一次及鹽水一次。溶液經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物。
通用方法ECDI偶合方法Ⅱ?qū)⑦m當(dāng)酸(1.08mmol)和1,1’-羰基二咪唑(CDI)(0.972mmol)的10mL THF溶液攪拌1-2小時(shí)。加入適當(dāng)胺(1.188mmol)，將反應(yīng)混合物攪拌過夜。將全部反應(yīng)混合物溶解于100mL乙酸乙酯，用10％HCl洗滌(50×2mL)，鹽水一次，20％碳酸鉀一次及鹽水一次。溶液經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾和蒸發(fā)，得到產(chǎn)物。
通用方法FEDC偶合方法Ⅳ氮?dú)庀略谝粋€(gè)圓底燒瓶中裝入適當(dāng)羧酸(1.0eq.)，羥基苯并三唑水合物(1.1eq.)和適當(dāng)胺(1.0eq.)的THF。在攪拌的混合物中加入適量(對(duì)于游離胺，是1.1eq.；對(duì)于胺鹽酸鹽，是2.2eq.)合適的堿，如Hunig堿，然后加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)(1.1eq.)。在室溫?cái)嚢杓s4-17小時(shí)后減壓除去溶劑，然后將剩余物溶解于EtOAc(或類似的溶劑)/H2O。依次用NaHCO3飽和水溶液，1N鹽酸水溶液和鹽水洗滌萃取液，然后用Na2SO4干燥。在有些情況下，需要將分離的產(chǎn)物用標(biāo)準(zhǔn)方法如色譜法和/或重結(jié)晶法進(jìn)一步純化。
實(shí)施例A2-氨基-1-苯二酰亞氨基戊烷鹽酸鹽的合成將2-氨基-1-戊醇在氯仿和碳酸氫鈉飽和水溶液的混合物中攪拌。一次性加入碳酸氫二叔丁酯(1.05eq.)，并攪拌混合物直到原料耗盡。分離出有機(jī)相，硫酸鈉干燥并濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化，用1；1乙酸乙酯∶己烷洗脫。
將產(chǎn)物溶解于THF。加入三乙胺(1.1eq.)并在冰浴中冷卻混合物。滴加甲磺酰氯(1.1eq.)，攪拌混合物直到原料耗盡。減壓濃縮混合物，然后在乙酸乙酯和水之間分配。分離有機(jī)相，硫酸鈉干燥并濃縮，得到白色固體。將其用硅膠色譜純化，用30％乙酸乙酯/己烷洗脫，最后從1-氯丁烷/己烷結(jié)晶。
將晶體產(chǎn)物在無水DMF中攪拌并加入苯二酰亞氨化鉀(1.1eq.)。將混合物攪拌18h，然后減壓濃縮。將剩余物在乙酸乙酯和水之間分配。干燥并濃縮有機(jī)相，得到白色固體。將固體溶解于氯仿，經(jīng)氧化硅塞過濾。濃縮含有稀釋劑的產(chǎn)物，得到的粗產(chǎn)物為白色固體。
將白色固體溶解于無水二噁烷，所得溶液用HCl氣體飽和。攪拌30分鐘后濃縮混合物，得到白色固體。將其在乙醚中研磨，得到標(biāo)題化合物。收集后用乙醚洗滌，在真空爐中干燥。
實(shí)施例B5-氨基二苯并環(huán)庚烷的合成將5-氯二苯并環(huán)庚烷(Aldrich)在7N NH3的MeOH中加熱回流。18小時(shí)后，將反應(yīng)混合物濃縮成固體。經(jīng)過硅膠色譜純化，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例1N-(3-羥基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法C，用N-(苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B1)和3-羥基苯胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在164-167℃的固體。產(chǎn)物經(jīng)EtOAc萃取及NaHCO3水溶液和HCl水溶液的洗滌得以純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=9.90(s,1H),9.40(s,1H),8.41(d,J=7.4 Hz,1H),7.27(m,4H),7.20(m,2H),7.07(t,J=8.0 Hz,1H),6.98(m,1H),6.46(dd,J=1.7,7.1Hz,1H),4.43(m,1H),3.50(s,2H),1.30(d,J=7.1Hz,3H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=171.2,170.0,157.6,140.0,136.4,129.4,129.1,128.2,126.3,110.5,110.0,106.4,49.1,41.9,18.4.
C17H18N2O3(MW=298.34)；質(zhì)譜(MH+)297(M-H)+實(shí)施例2N-(3-甲氧基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(苯基乙酰基)-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B1)和3-甲氧基苯胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在154-157℃的固體。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=9.38(s,1H),7.20-7.35(m,6H),7.00-7.15(m,2H),6.91(d,J=8.2 Hz,1H),6.62(dd,J=2.2,8.1 Hz,1H),4.85(quint.,J=7.2 Hz,1H),3.70(s,3H),3.57(s,2H),1.42(d,J=7.0 Hz,3H).
13C-nmr(CDCl3):δ=171.6,171.0,159.9,139.1,134.4,129.5,129.2,128.8,127.2,112.2,110.1,105.5,55.1,49.8,43.3,18.5.
C18H20N2O3(MW=312.37)；質(zhì)譜(MH+)313實(shí)施例3N-(3-乙氧羰基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B1)和3-氨基苯甲酸乙酯(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在142-145℃的固體。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=9.44(s,1H),8.16(d,J=1.8 Hz,1H),7.74(dd,J=5.0,8.0 Hz,2H),7.21-7.36(m,6H),6.71(d,J=7.6 Hz,1H),4.86(m,1H),4.35(q,J=7.1 Hz,2H),3.65(s,2H),1.42(d,J=7.0 Hz,3H),1.35(t,J=7.8 Hz,3H).
13C-nmr(CDCl3):δ=171.5,170.8,166.2,138.2,134.2,131.0,129.2,129.0,128.9,127.4,125.2,124.2,120.7,61.1,49.7,43.5,18.5,14.3.
C20H22N2O4(MW=354.41)；質(zhì)譜(MH+)355實(shí)施例4N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B1)和4-氨基苯甲酸乙酯(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在175-178℃的固體。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=9.61(s,1H),7.91(dd,J=7.1,8.9 Hz,2H),7.50(dd,J=5.2,8.7 Hz,2H),7.21-7.38(m,5H),6.86(d,J=7.6 Hz,1H),4.88(quint.,J=7.1 Hz,1H),4.35(q,J=7.1 Hz,2H),3.62(s,2H),1.36-1.44(m,6H).
13C-nmr(CDCl3):δ=171.7,171.0,166.1,142.1,134.2,130.5,129.2,128.9,127.5,125.7,118.9,60.8,49.8,43.3,18.6,14.3.
C20H22N2O4(MW=354.41)；質(zhì)譜(MH+)353(M-H)+實(shí)施例5N-(正己基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法B，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和正己胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為油。用tlc(Rf=0.31于5％MeOH/CH2Cl2)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)快速柱色譜純化，用5％MeOH/CH2Cl2作洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.62(d,1H),7.14(t,1H),6.80-6.60(m,3H),4.62(p,1H),3.44(s,2H),3.23-3.01(m,2H),1.41(m,2H),1.39(d,3H),1.23(m,8H),0.83(t,3H).
13C-nmr(CDCl3):δ=173.0,170.3,165.1,165.0,161.8,161.7,139.47,139.3,139.2,112.8,112.7,112.6,112.5,103.3,103.0,102.6,49.5,42.9,40.1,31.9,29.8,27.0,23.0,19.4,14.5.
C17H24N2O2F2(MW=326.39)；質(zhì)譜(MH+)327實(shí)施例6N-(正辛基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法B，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和正辛胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為油。tlc(Rf=035于5％MeOH/CH2Cl2)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)快速柱色譜純化，用5％MeOH/CH2Cl2作洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.50(d,1H),7.03(t,1H),6.75-6.60(m,5H),4.60(p,1H),3.48(s,2H),3.24-3.04(m,2H),1.40(m,2H),1.38(d,3H),1.23(m,10H),0.86(t,3H).
13C-nmr(CDCl3):δ=172.9,170.2,165.2,165.0,161.9,161.7,139.3,139.2,139.1,112.8,112.7,112.6,112.5,103.4,103.0,102.7,49.5,43.0,40.1,32.3,29.9,29.7,27.4,23.1,19.4,14.6.C19H28N2O2F2(MW=354.44)；質(zhì)譜(MH+)355實(shí)施例7N-(3-甲氧基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和3-甲氧基苯胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.30(d,J=7.0 Hz,3H),3.54(s,2H),3.71(s,3H),4.40(quint.,J=7.0 Hz,1H),6.62(d,J=6.7 Hz,1H),6.96-7.26(m,5H),7.29(s,1H),8.51(d,J=7.1 Hz,1H),10.04(s,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=18.2,41.2,49.2,54.9,101.9(t,J=25.5 Hz),104.9,108.7,111.4,112.2(dd,J=7.3,17.0 Hz),129.5,140.1,140.7,159.5,162.1(m),168.9,171.3.
C18H18N2O3F2(MW=348.35)；質(zhì)譜(MH+)349實(shí)施例8N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和4-氨基苯甲酸乙酯(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.32(m,6H),3.55(s,2H),4.27(q,J=7.0 Hz,2H),4.42(quint.,J=7.0 Hz,1H),7.00(m,2H),7.08(m,1H),7.73(d,J=8.5 Hz,2H),7.91(d,J=8.7 Hz,2H),8.57(d,J=6.7 Hz,1H),10.40(s,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=14.2,17.9,41.1,49.4,60.5,101.9(t,J=25.3Hz),112.2(dd,J=7.4,16.9 Hz),118.6,124.3,130.3,140.6,140.8,143.3,162.1(dd,J=13.1,243.7 Hz),165.3,169.0,171.9.
C20H20N2O4F2(MW=390.39)；質(zhì)譜(MH+)391實(shí)施例9N-(3-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和3-氨基苯甲酸乙酯(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=1.34(t,J=7.1 Hz,3H),1.47(d,J=6.9 Hz,3H),3.57(s,2H),4.33(q,J=7.1 Hz,2H),4.85(quint,J=7.1 Hz,1H),6.66(m,1H),6.78(m,2H),7.16(d,J=7.4 Hz,1H),7.30(m,1H),7.74(t,J=7.8 Hz,2H),8.12(d,J=1.8 Hz,1H),9.38(s,1H).
13C-nmr(CDCl3):δ=14.2,18.6,42.7,49.9,61.2,102.8(t,J=25.1Hz),112.2(dd'J=8.0,17.1 Hz),120.9,124.3,125.4,129.0,131.1,137.9,138.0,163.0(dd,J=12.6,247.7 Hz),166.2,170.2,171.0.
C20H20N2O4F2(MW=390.39)；質(zhì)譜(MH+)391實(shí)施例10N-(3-氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和3-氯苯胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.31(d,J=7.1 Hz,3H),3.55(s,2H),4.38(quint,J=7.1 Hz,1H),7.00(m,2H),7.09(m,2H),7.33(m,1H),7.46(d,J=8.2 Hz,1H),7.80(s,1H),8.57(d,7.0 Hz,1H),10.26(s,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=18.0,41.2,49.3,101.9(t,J=25.5 Hz),112.2(dd,J=7.3,16.7 Hz),117.6,118.6,123.0,130.5,133.1,140.4,140.5.140.7,162.2(m),169.0,171.7.
C17H15N2O2F2Cl(MW=352.77)；質(zhì)譜(MH+)353實(shí)施例11N-(3,5-二氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和3,5-二氯苯胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.31(d,J=7.0 Hz,3H),3.55(s,2H),4.34(m,1H),7.00(m,2H),7.07(m,1H),7.27(s,1H),7.66(s,2H),8.59(d,J=6.6Hz,1H),10.39(s,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=17.7,41.1,49.5,101.9(t,J=25.5 Hz),112.3(dd,J=7.7,16.9 Hz),117.3,122.6,134.1,140.4,140.6,140.7,141.2,162.1(dd,J=13.4,243.9 Hz),169.1,172.0.
C17H14N2O2F2Cl2(MW=387.22)；質(zhì)譜(MH+)387實(shí)施例12N-(3-氰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和3-氰基苯胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.32(t,J=7.1 Hz,3H),3.55(s,2H),4.39(quint,J=7.0 Hz,1H),7.00(m,2H),7.08(m,1H),7.52(m,2H),7.82(m,1H),8.08(s,1H),8.60(d,J=6.8 Hz,1H),10.42(s,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=17.9,41.1,49.4,101.9(t,J=25.4 Hz),112.2(dd,J=7.7,17.0 Hz),118.7,121.8,123.7,126.9,130.3,139.7,140.6,140.8,162.1(dd,J=13.3,243.6 Hz),169.1,172.0.
C18H15N3O3F2(MW=343.34)；質(zhì)譜(MH+)344實(shí)施例13N-(酞-6-基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法E，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和6-氨基鄰羥甲基苯甲酸內(nèi)酯(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在241-245℃(分解)的固體。用tlc(Rf=0.11于1∶1EtOAc/己烷)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)過水中沉淀純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.34(d,J=7.1 Hz,3H),3.56(s,2H),4.42(m,1H),5.36(s,2H),7.00(d,J=6.9 Hz,2H),7.08(m,1H),7.62(d,J=8.4Hz,1H),7.81(m,1H),8.21(s,1H),8.59(d,J=6.8 Hz,1H),10.42(s,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=18.0,41.2,49.3,69.8,101.9(t,J=25.7 Hz),112.3(dd,J=7.4,16.9 Hz),114.2,123.4,125.3,125.5,139.7,140.6,141.9,162.1(dd,J=13.4,243.7 Hz),169.1,170.8,171.8.
C19H16N2O4F2(MW=374.35)；質(zhì)譜(MH+)375實(shí)施例14N-[(4-甲氧羰基苯基)甲基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法D，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和4-氨基甲基苯甲酸甲酯鹽酸鹽(Aldrich)制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在191-192℃的固體。用tlc(Rf=0.19于1∶1 EtOAc/己烷)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)過水中沉淀純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.25(d,J=7.0 Hz,3H),3.53(s,2H),3.84(s,3H),4.30(m,1H),4.35(d,J=6.0 Hz,2H),6.99(d,J=6.9 Hz,2H),7.08(t,J=2.1 Hz,1H),7.35(d,J=8.3 Hz,2H),7.88(d,J=8.2 Hz,2H),8.43(d,J=7.2 Hz,1H),8.57(t,5.9 Hz,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=18.2,41.3,41.7,48.5,52.1,101.9(t,25.4 Hz),112.2(dd,J=7.5,17.0 Hz),127.1,128.1,129.2,(140.6,140.8 as多重峰)，145.2,162.1(dd,J=13.4,243.7 Hz),166.1,168.9,172.5.
C20H20N2O4F2(MW=390.39)；質(zhì)譜(MH+)391實(shí)施例15N-(1-氰基-1-苯基甲基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法B,用N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和1-氰基-1-苯基甲胺鹽酸鹽制備標(biāo)題化合物，為熔點(diǎn)在209-213℃的固體。用tlc(Rf=0.5于10％MeOH/CHCl3)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)過從1-氯丁烷/乙腈重結(jié)晶純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=3.50-3.55(單峰，2H),6.18(d,1H).
C19H17F2N3O2(MW=357.36)；質(zhì)譜(M+)357
實(shí)施例16N-[(S)-1-苯基乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法B，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和(S)-(-)-1-苯基乙胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用tlc(Rf=0.45于9∶1 CHCl3/MeOH)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)過硅膠色譜純化，用95∶5 CHCl3/MeOH作洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.18-7.28(m,5H),6.81(m,1H),6.67(m,2H),6.63(m,1H),6.60(m,1H),5.01(m,1H),4.44(m,1H),3.36(m,2H),1.43(d,3H),1.36(d,3H).
旋光度[α]23=-103°(cl,MeOH).
C19H20F2N2O2(MW=346.38)；質(zhì)譜(M+)346.
實(shí)施例17N-[(R)-1-苯基乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法B，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和(R)-(+)-1-苯基乙胺(Aldrich)制備標(biāo)題化合物。用tlc(Rf=0.35于9∶1 CHCl3/MeOH)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)過硅膠色譜純化，用96∶4 CHCl3/MeOH作洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.31(m,5H),6.78(m,2H),6.71(m,1H),6.32(m,1H),5.01(m,1H),4.46(m,1H),3.45(m,2H),1.43(d,3H),1.30(d,3H).
旋光度[α]23=+5.97°(cl,MeOH).
C19H20F2N2O2(MW=346.38)；質(zhì)譜(M+)346.
實(shí)施例18N-[2-甲氧羰基-1-苯基乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法B，用N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和3-氨基-3-苯基丙酸甲酯鹽酸鹽制備標(biāo)題化合物。用tlc(Rf=0.45于9∶1 CHCl3/MeOH)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)過硅膠色譜純化，用95∶5 CHCl3/MeOH作洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.28(m,5H),6.89-6.67(m,2H),6.37(m,1H),5.36(m,1H),4.52(m,1H),3.63 and 3.60 s,3H),3.51 and 3.45(s,2H),2.80(m,2H),1.37(t,3H).
C21H22F2N2O4(MW=404.41)；質(zhì)譜(M+)404.
實(shí)施例19N-[2-羥基吡啶-3-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法C,用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和3-氨基-2-羥基吡啶(通過在EtOH/HOAc中在標(biāo)準(zhǔn)條件下2-羥基-3-硝基吡啶的Pd/C氫化制備)制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.28(d,J=7 Hz,3H),3.55(s,2H),4.51(brq,J=7 Hz,1H),6.20(t,J=7 Hz,1H),6.95-7.2(m,4H),8.18(dd,J=1.7,7.3Hz,1H),8.64(d,J=7.0 Hz,1H),9.24(s,1H).
13C-nmr(DMSO-d6):δ=17.9,41.5,49.7,102.0,102.3,102.6,105.6,112.5,112.6,112.8,112.9,123.4,128.20,112.21,129.2,140.8,160.9,164.0,164.2,169.6,172.1.
C16H15F2N3O3(MW=335)..
實(shí)施例20N-1-(鄰苯二甲酰亞氨基)戊-2-基-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法F，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和2-氨基-1-鄰苯二甲酰亞氨基戊烷鹽酸鹽(得自實(shí)施例A)制備標(biāo)題化合物。用tlc(Rf=0.3于5％MeOH/CHCl3)監(jiān)視反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)過硅膠色譜純化，用5％MeOH/CHCl3作洗脫劑，接著從氯丁烷/乙腈重結(jié)晶。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=4.1(m,2H),7.83(bs,4H).
C24H25N3O4F2(MW=457.48)；質(zhì)譜(MH+)457.
實(shí)施例21N-[α-吡啶-2-基-芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺的合成按照通用方法F，用N-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)和α-(2-吡啶基)芐胺(Maybridge)制備標(biāo)題化合物。產(chǎn)物經(jīng)過硅膠色譜純化，用5％MeOH/CHCl3作洗脫劑，接著從正氯丁烷/乙腈重結(jié)晶。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=6.10(d,1H),4.46(m,1H).
C23H21F2N3O2(MW=409.44)；質(zhì)譜(MH+)409.
實(shí)施例22N-[2-(甲氧羰基甲基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成將2-(氨基甲基)-苯乙酸酯鹽酸鹽在無水甲醇中攪拌。滴加亞硫酰氯(1.1eq.)，并將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，得到2-(氨基甲基)-苯乙酸甲酯鹽酸鹽為白色固體。
用EDC,HOBT,DIEA將N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸(得自實(shí)施例B2)的二氯甲烷與2-(氨基甲基)-苯乙酸甲酯鹽酸鹽偶合制備標(biāo)題化合物。
MS(M+)404.1實(shí)施例23N-[3-(甲氧羰基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺的合成按照實(shí)施例22方法，但用3-(氨基甲基)-苯乙酸甲酯鹽酸鹽代替3-(氨基甲基)-苯甲酸甲酯鹽酸鹽，制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=1.410(d,3H),3.56(s,2H).MS(M+)390.
實(shí)施例24N-[2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照實(shí)施例22方法，但用2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐胺代替3-(氨基甲基)-苯甲酸甲酯鹽酸鹽，制備標(biāo)題化合物。
實(shí)施例25N-[2-苯基芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺的合成按照實(shí)施例22方法，但用2-苯基芐胺代替3-(氨基甲基)-苯甲酸甲酯鹽酸鹽，制備標(biāo)題化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=1.22(d,3H),3.46(s,2H).
實(shí)施例26用于檢測(cè)β-淀粉樣蛋白產(chǎn)生的抑制劑的細(xì)胞篩選對(duì)上述大量式Ⅰ化合物進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定它們?cè)诰哂腥鸬渫蛔兊募?xì)胞系中抑制β-淀粉樣蛋白產(chǎn)生的能力。該篩選測(cè)定法使用的細(xì)胞(K293=人體腎細(xì)胞系)是用國(guó)際專利申請(qǐng)公開94/105698和Citron等人12所述方法通過基因穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染上含有雙突變Lys651Met652至Asn651Leu652(APP751編號(hào))的淀粉樣前體蛋白751(APP751)的基因的細(xì)胞。該突變通常被稱為瑞典突變，該細(xì)胞被命名為“293 751 SWE”。以每孔1.5-2.5×104個(gè)細(xì)胞的量將該細(xì)胞放入盛有Dulbecco最小基本培養(yǎng)基加10％胎牛血清的96孔板的各孔中。為了成功地獲得該測(cè)定法線性范圍內(nèi)(約0.2-2.5ng/mL)的β-淀粉樣蛋白ELISA結(jié)果，細(xì)胞數(shù)量是很重要的。
在37℃的用10％二氧化碳平衡的培養(yǎng)器中培養(yǎng)過夜之后去掉培養(yǎng)基，代之以每孔200μL含式Ⅰ化合物(藥物)的培養(yǎng)液進(jìn)行2個(gè)小時(shí)的預(yù)處理，然后同上法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。在100％二甲亞砜中制備藥物儲(chǔ)備液，以在用于處理的最終藥物濃度中二甲亞砜的濃度不得超過0.5％，事實(shí)上，一般為0.1％。
預(yù)處理結(jié)束時(shí)再次去掉培養(yǎng)液，代之以新的上述含藥物培養(yǎng)液，再培養(yǎng)細(xì)胞2小時(shí)。處理后于室溫在βeckman GPR上以1200rpm的速度離心96孔板5分鐘，使細(xì)胞碎屑從此條件培養(yǎng)液中沉淀下來。從每個(gè)孔中各取出100μL條件培養(yǎng)液或經(jīng)過適當(dāng)稀釋，然后將它們轉(zhuǎn)移到事先用國(guó)際專利申請(qǐng)公開號(hào)94/105698所述的針對(duì)β-淀粉樣肽之13-28氨基酸的抗體26614包裹的ELISA板中，并在4℃貯存過夜。第二天，用針對(duì)β-淀粉樣肽之1-16氨基酸的標(biāo)記過的抗體6C614進(jìn)行ELISA測(cè)定，以測(cè)量β-淀粉樣肽產(chǎn)生的數(shù)量。
用改進(jìn)后的Hansen等人13方法測(cè)量本化合物的細(xì)胞毒性作用。向留在組織培養(yǎng)板上的細(xì)胞中添加25μL溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)2,5-二苯基四唑鎓(MTT)儲(chǔ)備液(5mg/mL)，使最終濃度達(dá)到1mg/mL。細(xì)胞在37℃培養(yǎng)1小時(shí)后添加等體積MTT溶胞緩沖液(20％w/v十二基硫酸鈉的50％二甲基甲酰胺，pH4.7)使細(xì)胞的活動(dòng)停止。在室溫?fù)u動(dòng)過夜后達(dá)到完全的萃取效果。用Molecular Device’s UVmax微板讀數(shù)儀(microplate reader)測(cè)量OD562nm和OD650nm的差別，用來表示細(xì)胞的存活率。
將β-淀粉樣肽的ELISA測(cè)定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合，表示為ng/mLβ-淀粉樣肽。為了使細(xì)胞毒性歸一化，要將這些結(jié)果值除以MTT結(jié)果值，表示占不含藥物的對(duì)照組的測(cè)定結(jié)果的百分比。所有這些結(jié)果是至少6次重復(fù)測(cè)定結(jié)果的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。
這種測(cè)定法是用來測(cè)定試驗(yàn)化合物在細(xì)胞內(nèi)對(duì)β-淀粉樣肽產(chǎn)生的抑制活性。該測(cè)定結(jié)果說明，每個(gè)被試驗(yàn)的本發(fā)明化合物相比對(duì)照組至少可以使β-淀粉樣肽的產(chǎn)生減少30％。
實(shí)施例27β-淀粉樣蛋白的釋放和/或合成的體內(nèi)抑制本實(shí)施例說明如何試驗(yàn)本發(fā)明化合物在體內(nèi)抑制β-淀粉的釋放和/或合成。對(duì)于這些實(shí)驗(yàn)，用到3-4個(gè)月大的PDAPP小鼠[Games等人，(1995)，《自然(Nature)》，373:523-527]。據(jù)此，通常將被試驗(yàn)的化合物配制成5或10mg/mL。由于化合物低溶解性的原因，因此在制劑時(shí)要加入多種載體，如玉米油(Safeway,South San Francisco,CA)；10％EtOH的玉米油(Safeway)；2-羥丙基-β-環(huán)糊精(ResearchBiochemicals International,Natick MA)；及羧甲基纖維素(SigmaChemical Co.,St.Louis MO)。具體來說，實(shí)施例141的載體是羧甲基纖維素(Sigma)。
用26號(hào)刻度針頭給小鼠皮下給藥，3小時(shí)后通過CO2麻醉使鼠安樂死，用由0.5M EDTA溶液(pH8.0)包著的1cc 25G 5/8”結(jié)核菌素注射器/針頭進(jìn)行心臟穿刺，取出血液。將該血液放入盛有EDTA溶液的Becton-Dickinson.vacutainer中，并在5℃以1500×g旋轉(zhuǎn)15分鐘。然后，取出鼠腦，割下皮質(zhì)和海馬并放在冰上。
1.腦測(cè)定為了制備用于酶連接的免疫吸附劑測(cè)定法(ELISA)的海馬和皮質(zhì)組織，將各腦組織放在10倍體積冰冷的胍緩沖液(5.0M胍-HCl,50mMTris-HCl,pH 8.0)中用Kontes電動(dòng)杵(Fisher,Pittsbergh PA)勻化。室溫下將勻化的物質(zhì)放在旋轉(zhuǎn)臺(tái)上輕輕搖動(dòng)3-4小時(shí)，然后貯存于-20℃以備β-淀粉樣蛋白的定量測(cè)定。
將上述腦勻化物用冰冷的酪蛋白緩沖液
以1∶10的比例稀釋，因此將胍的最終濃度降低到0.5M，然后在4℃以16,000×g的速度離心20分鐘。制備β-淀粉標(biāo)樣蛋白準(zhǔn)液(1-40或1-42氨基酸)，使得最后的組合物為在0.1％胎牛血清白蛋白(BSA)中的0.5M胍。
對(duì)β-淀粉樣蛋白(aa 1-40)和β-淀粉樣蛋白(aa 1-42)都進(jìn)行定量分析的β-淀粉樣蛋白的夾心ELISA使用了兩個(gè)單克隆抗體(mAb)。捕捉抗體26614對(duì)β-淀粉樣蛋白的13-28氨基酸是特異性的?？贵w3D615對(duì)β-淀粉樣蛋白的1-5氨基酸是特異性的，它是生物素化的，并在測(cè)定中被用作報(bào)道抗體。除了使用了100mM碳酸氫鈉緩沖液(pH8.0)之外，3D6的生物素化過程使用了制造者(Pierce,RockfordIL)關(guān)于免疫球蛋白的NHS-生物素標(biāo)記的使用說明。3D6抗體不積別分泌的淀粉樣前體蛋白(APP)或全長(zhǎng)APP，而只能探測(cè)到帶氨基末端天冬氨酸的β-淀粉樣蛋白類。該測(cè)定法的靈敏度下限約為50pg/mL(11pM)，并且對(duì)濃度高達(dá)1ng/mL的內(nèi)生的鼠β-淀粉樣肽沒有表現(xiàn)出一點(diǎn)交叉活性。
定量測(cè)定B-淀粉樣蛋白(aa1-42)水平的夾心ELISA中使用了mAb21F1215(它識(shí)別β-淀粉樣蛋白的33-42氨基酸)作為捕捉抗體。生物素化的3D6也是此測(cè)定法中的報(bào)道抗體，其靈敏度下限約為125Pg/mL(28pM)。
室溫下將266和21F12捕捉mAb放在96孔免疫測(cè)定板(Costar,Cambridge MA)上以10μg/mL進(jìn)行包裹。然后抽吸該板，并在室溫下用0.25％人血清白蛋白的PBS緩沖液封閉至少1小時(shí)，然后在4℃干燥保存直到使用。使用前用洗液(Tris緩沖的鹽水，0.05％Tween20)將該板重新水化。將樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣加到板上，然后在4℃培養(yǎng)過夜。測(cè)定的每一步之間用洗液洗滌該板3次以上。將生物素化的3D6用酪蛋白培養(yǎng)緩沖液(0.25％酪蛋白，PBS,0.05％Tween,pH 7.4)稀釋到0.5μg/mL，然后在室溫下在孔中培養(yǎng)1小時(shí)。將用酪蛋白培養(yǎng)緩沖液以1∶4000的比例稀釋的Avidin-HRP(Vector,Burlingame CA)加到各孔中并在室溫培養(yǎng)1小時(shí)。加入比色底物Slow TMB-E LISA(Pierce,Cambridge MA)，并允許反應(yīng)15分鐘，然后加入2N H2SO4停止該酶反應(yīng)。通過用Molecular Devices Vmax(Molecular Devices,Menlo Park CA)測(cè)量450nm和650nm兩處的吸收差對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行定量。
2．血液測(cè)定將EDTA血漿在樣品稀釋劑(0.2g/L磷酸鈉H2O(一堿價(jià)的)，2.16g/L磷酸鈉·7H2O(二堿價(jià)的)，0.5g/L硫汞撒，8.5g/L氯化鈉，0.5mL TritonX-405,6.0g/L無球蛋白胎牛血清白蛋白；和水)中以1∶1的比例稀釋。除了用樣品稀釋劑代替上述酪蛋白稀釋劑外其它不變，用上述腦測(cè)定中的全β-淀粉樣蛋白測(cè)定法(266捕捉/3D6報(bào)道)測(cè)定于樣品稀釋劑中的樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣。
根據(jù)以上說明本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員可以對(duì)組合物和方法采取各種改進(jìn)和改變。所有屬于所附權(quán)利要求書的要求范圍之內(nèi)的那些改進(jìn)都將包括在本發(fā)明之內(nèi)。
權(quán)利要求
1．抑制細(xì)胞內(nèi)β-淀粉樣肽釋放和/或合成的方法，包括給這種細(xì)胞使用有效抑制β-淀粉樣肽在細(xì)胞內(nèi)釋放和/或合成的化合物或化合物的混合物，所說化合物由式Ⅰ表示，
其中，R1選自(a)烷基，鏈烯基，烷芳基，烷基環(huán)烷基，芳基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，雜芳基和雜環(huán)，其中雜芳基或雜環(huán)可以任意被1-3個(gè)下列基團(tuán)取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，硫代烷氧基和硫代芳氧基；(b)式(Ⅱ)取代的苯基，
其中R是有1-8個(gè)碳原子的亞烷基，m是0或1，Ra和Ra’獨(dú)立地選自氫，羥基，氟和甲基；Rb和Rb’獨(dú)立地選自氫，烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，雜芳基，雜芳氧基，雜環(huán)，硝基，三鹵代甲基，硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代雜芳氧基及-C(O)R4，其中R4選自烷基，芳基，烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫，烷基，芳基，氰基，鹵素，硝基，而且Rb和Rc與苯環(huán)一起被稠合成亞甲基二氧基環(huán)；及如果Rb和/或Rb’和/或Rc是氟，氯，溴和/或硝基，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及(c)在5,6,7和/或8位被1-4個(gè)下列取代基取代的1-或2-萘基烷基，烷氧基，鹵素，氰基，硝基，三鹵代甲基和硫代烷氧基；R2選自氫，有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基，有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基；及R3和R3’獨(dú)立地選自(a)氫，條件是R3和R3’不能同時(shí)為氫；(b)烷基，條件是，如果R3是氫，則R3’烷基是從氮原子算起至少有5個(gè)碳原子鏈長(zhǎng)的直鏈，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代，還一個(gè)條件是，如果R3和R3’均為烷基，則至少其中一個(gè)烷基的鏈長(zhǎng)至少有5個(gè)碳原子，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代；(c)-(R7)n(W)p，其中R7是亞烷基，W選自(ⅰ)下式
其中R5,R5’,R9和R9’獨(dú)立地選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，?；?，?；被?，酰氧基，氨基?；?，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)；及R6選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，?；；被?，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基?；杌?，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)，且R6與R5或R5’之一稠合成有4-10個(gè)原子的雜環(huán)，其中1-3個(gè)雜原子選自氧，氮和硫；條件是，如果n是0，則R9和R9’是氫；(ⅱ)雜芳基；及(ⅲ)N-雜環(huán)，條件是，如果W是N-雜環(huán)，則n非0；及n是0或1，及p是1-3的整數(shù)，條件是，如果n是0，則p等于1；及(d)-CH(φ)CH2C(O)O-Q，其中Q選自烷基，芳基，雜芳基和雜環(huán)；X′是氫，羥基或氟；X″是氫，羥基或氟，或者X′和X″一起形成氧基，Z選自其價(jià)連接R1與-CX'X″-的鍵，氧和硫；及條件是，如果R1是苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX'X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3′是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
則(ⅰ)R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫，及(ⅱ)R5,R5’,R9,R9’是氫，R6是甲氧基；還一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX'X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是1且p是1,R7是亞乙基及W是
則R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫；及再一個(gè)條件是，如果R1是3,5二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
以及R’,R9,R’是氫，則R5和R6不能與它們相連的苯環(huán)稠合成苯二酰亞氨基。
2．預(yù)防有發(fā)展成AD危險(xiǎn)的患者的AD發(fā)作的方法，包括給所說患者使用含有藥物惰性載體和有效量的式Ⅰ化合物或化合物的混合物的藥物組合物，
其中，R1選自(a)烷基，鏈烯基，烷芳基，烷基環(huán)烷基，芳基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，雜芳基和雜環(huán)，其中雜芳基或雜環(huán)可以任意被1-3個(gè)下列基團(tuán)取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，硫代烷氧基和硫代芳氧基；(b)式(Ⅱ)取代的苯基，
其中R是有1-8個(gè)碳原子的亞烷基，m是0或1，Ra和Ra’獨(dú)立地選自氫，羥基，氟和甲基；Rb和Rb獨(dú)立地選自氫，烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，雜芳基，雜芳氧基，雜環(huán)，硝基，三鹵代甲基，硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代雜芳氧基及-C(O)R4，其中R4選自烷基，芳基，烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫，烷基，芳基，氰基，鹵素，硝基，而且Rb和Rc與苯環(huán)一起被稠合成亞甲基二氧基環(huán)；及如果Rb和/或Rb’和/或Rc是氟，氯，溴和/或硝基，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及(c)在5,6,7和/或8位被1-4個(gè)下列取代基取代的1-或2-萘基烷基，烷氧基，鹵素，氰基，硝基，三鹵代甲基和硫代烷氧基；R2選自氫，有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基，有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基；及R3和R3’獨(dú)立地選自(a)氫，條件是R3和R3’不能同時(shí)為氫；(b)烷基，條件是，如果R3是氫，則R3’烷基是從氮原子算起至少有5個(gè)碳原子鏈長(zhǎng)的直鏈，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代，還一個(gè)條件是，如果R3和R3’均為烷基，則至少其中一個(gè)烷基的鏈長(zhǎng)至少有5個(gè)碳原子，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代；(c)-(R7)n(W)p，其中R7是亞烷基，W選自(ⅰ)下式
其中R5,R5’,R9和R9’獨(dú)立地選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，?；?，?；被?，酰氧基，氨基酰基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)；及R6選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，?；?，?；被?，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基?；?，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)，且R6與R5或R5’之一稠合成有4-10個(gè)原子的雜環(huán)，其中1-3個(gè)雜原子選自氧，氮和硫；條件是，如果n是0，則R9和R9’是氫；(ⅱ)雜芳基；及(ⅲ) N-雜環(huán)，條件是，如果W是N-雜環(huán)，則n非0；及n是0或1，及p是1-3的整數(shù)，條件是，如果n是0，則p等于1；及(d)-CH(φ)CH2C(O)O-Q，其中Q選自烷基，芳基，雜芳基和雜環(huán)；X′是氫，羥基或氟；X″是氫，羥基或氟，或者X′和X″一起形成氧基，Z選自共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，氧和硫；及條件是，如果R1是苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
則(ⅰ)R5’,R9,R9’,R9和R6不都是氫，及(ⅱ)R5,R5’,R9,R9’是氫，R6是甲氧基；還一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是1且p是1,R7是亞乙基及W是
則R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫；及再一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
以及R5’,R9,R9’是氫，則R5和R6不能與它們相連的苯環(huán)稠合成苯二酰亞氨基。
3．治療已經(jīng)患有AD的患者以遏制病情的進(jìn)一步惡化的方法，包括給所說患者使用含有藥物惰性載體和有效量的式Ⅰ化合物或化合物的混合物的藥物組合物，
其中，R1選自(a)烷基，鏈烯基，烷芳基，烷基環(huán)烷基，芳基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，雜芳基和雜環(huán)，其中雜芳基或雜環(huán)可以任意被1-3個(gè)下列基團(tuán)取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，硫代烷氧基和硫代芳氧基；(b)式(Ⅱ)取代的苯基，
其中R是有1-8個(gè)碳原子的亞烷基，m是0或1，Ra和Ra’獨(dú)立地選自氫，羥基，氟和甲基；Rb和Rb’獨(dú)立地選自氫，烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，雜芳基，雜芳氧基，雜環(huán)，硝基，三鹵代甲基，硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代雜芳氧基及-C(O)R4，其中R4選自烷基，芳基，烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫，烷基，芳基，氰基，鹵素，硝基，而且Rb和Rc與苯環(huán)一起被稠合成亞甲基二氧基環(huán)；及如果Rb和/或Rb’和/或Rc是氟，氯，溴和/或硝基，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及(c)在5,6,7和/或8位被1-4個(gè)下列取代基取代的1-或2-萘基烷基，烷氧基，鹵素，氰基，硝基，三鹵代甲基和硫代烷氧基；R2選自氫，有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基，有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基；及R3和R3’獨(dú)立地選自(a)氫，條件是R3和R3’不能同時(shí)為氫；(b)烷基，條件是，如果R3是氫，則R3’烷基是從氮原子算起至少有5個(gè)碳原子鏈長(zhǎng)的直鏈，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代，還一個(gè)條件是，如果R3和R3’均為烷基，則至少其中一個(gè)烷基的鏈長(zhǎng)至少有5個(gè)碳原子，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代；(c)-(R7)n(W)p，其中R7是亞烷基，W選自(ⅰ)下式
其中R5,R5’,R9和R9’獨(dú)立地選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基酰基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)；及R6選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，?；；被?，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基?；?，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)，且R6與R5或R5’之一稠合成有4-10個(gè)原子的雜環(huán)，其中1-3個(gè)雜原子選自氧，氮和硫；條件是，如果n是0，則R9和R9’是氫；(ⅱ)雜芳基；及(ⅲ)N-雜環(huán)，條件是，如果W是N-雜環(huán)，則n非0；及n是0或1，及p是1-3的整數(shù)，條件是，如果n是0，則p等于1；及(d)-CH(φ)CH2C(O)O-Q，其中Q選自烷基，芳基，雜芳基和雜環(huán)；X′是氫，羥基或氟；X″是氫，羥基或氟，或者X′和″一起形成氧基，Z選自共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，氧和硫；及條件是，如果R1是苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
則(ⅱ)R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫，及(ⅱ)R5,R5’,R9,R9’是氫，R6是甲氧基；還一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是1且p是1,R7是亞乙基及W是
則R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫；及再一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
以及R5’,R9,R9’是氫，則R5和R6不能與它們相連的苯環(huán)稠合成苯二酰亞氨基。
4．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中R1是未取代的芳基。
5．根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中未取代的芳基R1選自苯基，1-萘基和2-萘基。
6．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中R1是取代的芳基。
7．根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中取代的芳基是由下面定義的取代的苯基(a)在2,3或4位有單個(gè)取代基的單取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Rb和Rc基團(tuán)代表；(b)在2,3-位，2,4-位，2,5-位，2,6-位，3,4-位，3,5-位或3,6-位有兩個(gè)取代基的二取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表；及(c)在2,3,4-位，2,3,5-位，2,3,6-位，3,4,5-位或3,4,6-位有三個(gè)取代基的三取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表。
8．根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中取代的苯基選自4-氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-硝基苯基，4-甲基苯基，3-甲氧基苯基，3-硝基苯基，3-氟苯基，3-氯苯基，3-溴苯基，3-硫代甲氧基苯基，3-甲基苯基，3-三氟甲基苯基，2-羥基苯基，2-甲基苯基，2-氟苯基，3,4-二氯苯基，3,4-亞甲基二氧基苯基，3,5-二氟苯基，3,5-二氯苯基，2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
9．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中R1是烷芳基。
10．根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中烷芳基R1選自芐基，苯乙基，3-苯基-正丙基和4-苯基-正丁基。
11．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中R1選自烷基，鏈烯基，環(huán)烷基和環(huán)烯基。
12．根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中R1是烷基。
13．根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中R1是環(huán)烷基。
14．根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中R1是鏈烯基。
15．根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中R1是環(huán)烯基。
16．根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中烷基，環(huán)烷基，鏈烯基和環(huán)烯基R1選自仲丁基，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)己基，環(huán)戊基，環(huán)己-1-烯基，-CH2-環(huán)丙基，-CH2-環(huán)丁基，-CH2-環(huán)己基，-CH2-環(huán)戊基，-CH2CH2-環(huán)丙基，-CH2CH2-環(huán)丁基，-CH2CH2-環(huán)己基和-CH2CH2-環(huán)戊基。
17．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中R1選自雜芳基和取代的雜芳基。
18．根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中雜芳基和取代的雜芳基R1選自吡啶-3-基，吡啶-4-基，噻吩-2-基，噻吩-3-基，苯并噻唑-4-基，2-苯基苯并噁唑-5-基，呋喃-2-基，苯并呋喃-2-基，硫代萘-2-基，2-氯噻吩-5-基，3-甲基異噁唑-5-基，2-(硫代苯基)噻吩-5-基，6-甲氧基硫代萘-2-基，3-苯基-1,2,4-硫代噁二唑-5-基和2-苯基噁唑-4-基。
19．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中R2選自有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基和有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基。
20．根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中R2選自甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基和-CH2CH2SCH3。
21．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中X′和X″都是氫，且Z是連接R1至-CX′X″-的共價(jià)鍵。
22．根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中R3是氫，而R3’選自3-羥基苯基，3-甲氧基苯基，3-乙氧羰基苯基，正己基，正辛基，4-乙氧羰基苯基，4-甲氧羰基苯基，3-氯苯基，3-氰基苯基，3,5-二氯苯基，-CH(CH3)φ(R立體異構(gòu)體)，-CH(CH3)φ(S立體異構(gòu)體)，酞-6-基，2-羥基吡啶-3-基，2-(甲氧羰基甲基)芐基，3-(甲氧羰基)芐基，2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基和2-苯基芐基。
23．根據(jù)權(quán)利要求1,2或3的方法，其中式Ⅰ化合物選自N-(3-羥基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧基苯基)-N’-(苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(正己基)-N’-(,3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(正辛基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3,5-二氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(3-氰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(酞-6-基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[(4-甲氧羰基苯基)甲基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(1-氰基-1-苯基甲基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(R)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[(S)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-羥基吡啶-3-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[2-甲氧羰基-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[α-吡啶-2-基-芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[1-(N-鄰苯二甲酰氨基)戊-2-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-(甲氧羰基甲基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[3-(甲氧羰基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-苯基芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺。
24．含有藥物惰性載體和有效藥量的式Ⅰ化合物的藥物組合物，
其中，R1選自(a)烷基，鏈烯基，烷芳基，烷基環(huán)烷基，芳基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，雜芳基和雜環(huán)，其中雜芳基或雜環(huán)可以任意被1-3個(gè)下列基團(tuán)取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，硫代烷氧基和硫代芳氧基；(b)式(Ⅱ)取代的苯基，
其中R是有1-8個(gè)碳原子的亞烷基，m是0或1，Ra和Ra’獨(dú)立地選自氫，羥基，氟和甲基；Rb和Rb’獨(dú)立地選自氫，烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，雜芳基，雜芳氧基，雜環(huán)，硝基，三鹵代甲基，硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代雜芳氧基及-C(O)R4，其中R4選自烷基，芳基，烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫，烷基，芳基，氰基，鹵素，硝基，而且Rb和Rc與苯環(huán)一起被稠合成亞甲基二氧基環(huán)；及如果Rb和/或Rb’和/或Rc是氟，氯，溴和/或硝基，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及(c)在5,6,7和/或8位被1-4個(gè)下列取代基取代的1-或2-萘基烷基,烷氧基，鹵素，氰基，硝基，三鹵代甲基和硫代烷氧基；R2選自氫，有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基，有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基；及R3和R3’獨(dú)立地選自(a)氫，條件是R3和R3’不能同時(shí)為氫；(b)烷基，條件是，如果R3是氫，則R3’烷基是從氮原子算起至少有5個(gè)碳原子鏈長(zhǎng)的直鏈，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代，還一個(gè)條件是，如果R3和R3’均為烷基，則至少其中一個(gè)烷基的鏈長(zhǎng)至少有5個(gè)碳原子，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代；(c)-(R7)n(W)p，其中R7是亞烷基，W選自(ⅰ)下式
其中R5,R5’,R9和R9’獨(dú)立地選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，酰基，?；被?，酰氧基，氨基酰基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)；及R6選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，?；?，?；被?，酰氧基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基?；杌?，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)，且R6與R5或R5’之一稠合成有4-10個(gè)原子的雜環(huán)，其中1-3個(gè)雜原子選自氧，氮和硫；條件是，如果n是0，則R9和R9’是氫；(ⅱ)雜芳基；及(ⅲ)N-雜環(huán)，條件是，如果W是N-雜環(huán)，則n非0；及n是0或1，及p是1-3的整數(shù)，條件是，如果n是0，則p等于1；及(d)-CH(φ)CH2C(O)O-Q，其中Q選自烷基，芳基，雜芳基和雜環(huán)；X′是氫，羥基或氟；X″是氫，羥基或氟，或者X′和X″一起形成氧基，Z選自共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，氧和硫；及條件是，如果R1是苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
則(ⅰ)R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫，及(ⅱ)R5,R5’,R9,R9’是氫，R6是甲氧基；還一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是1且p是1,R7是亞乙基及W是
則R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫；及再一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
以及R5’,R9,R9’是氫，則R5和R6不能與它們相連的苯環(huán)稠合成苯二酰亞氨基。
25．根據(jù)權(quán)利要求24的藥物組合物，其中R1是未取代的芳基。
26．根據(jù)權(quán)利要求25的藥物組合物，其中未取代的芳基R1選自苯基，1-萘基和2-萘基。
27．根據(jù)權(quán)利要求24的藥物組合物，其中R1是取代的芳基。
28．根據(jù)權(quán)利要求27的藥物組合物，其中取代的芳基是由下面定義的取代的苯基(a)在2,3或4位有單個(gè)取代基的單取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Rb和Rc基團(tuán)代表；(b)在2,3-位，2,4-位，2,5-位，2,6-位，3,4-位，3,5-位或3,6-位有兩個(gè)取代基的二取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表；及(c)在2,3,4-位，2,3,5-位，2,3,6-位，3,4,5-位或3,4,6-位有三個(gè)取代基的三取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表。
29．根據(jù)權(quán)利要求28的藥物組合物，其中取代的苯基選自4-氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-硝基苯基，4-甲基苯基，3-甲氧基苯基，3-硝基苯基，3-氟苯基，3-氯苯基，3-溴苯基，3-硫代甲氧基苯基，3-甲基苯基，3-三氟甲基苯基，2-羥基苯基，2-甲基苯基，2-氟苯基，3,4-二氯苯基，3,4-亞甲基二氧基苯基，3,5-二氟苯基，3,5-二氯苯基，2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
30．根據(jù)權(quán)利要求24的藥物組合物，其中R1是烷芳基。
31．根據(jù)權(quán)利要求30的藥物組合物，其中烷芳基R1選自芐基，苯乙基，3-苯基-正丙基和4-苯基-正丁基。
32．根據(jù)權(quán)利要求24的藥物組合物，其中R1選自烷基，鏈烯基，環(huán)烷基和環(huán)烯基。
33．根據(jù)權(quán)利要求32的藥物組合物，其中R1是烷基。
34．根據(jù)權(quán)利要求32的藥物組合物，其中R1是環(huán)烷基。
35．根據(jù)權(quán)利要求32的藥物組合物，其中R1是鏈烯基。
36．根據(jù)權(quán)利要求32的藥物組合物，其中R1是環(huán)烯基。
37．根據(jù)權(quán)利要求32的藥物組合物，其中烷基，環(huán)烷基，鏈烯基和環(huán)烯基R1選自仲丁基，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)己基，環(huán)戊基，環(huán)己-1-烯基，-CH2-環(huán)丙基，-CH2-環(huán)丁基，-CH2-環(huán)己基，-CH2-環(huán)戊基，-CH2CH2-環(huán)丙基，-CH2CH2-環(huán)丁基，-CH2CH2-環(huán)己基和-CH2CH2-環(huán)戊基。
38．根據(jù)權(quán)利要求24的藥物組合物，其中R1選自雜芳基和取代的雜芳基。
39．根據(jù)權(quán)利要求38的藥物組合物，其中雜芳基和取代的雜芳基R1選自吡啶-3-基，吡啶-4-基，噻吩-2-基，噻吩-3-基，苯并噻唑-4-基，2-苯基苯并噁唑-5-基，呋喃-2-基，苯并呋喃-2-基，硫代萘-2-基，2-氯噻吩-5-基，3-甲基異噁唑-5-基，2-(硫代苯基)噻吩-5-基，6-甲氧基硫代萘-2-基，3-苯基-1,2,4-硫代噁二唑-5-基和2-苯基噁唑-4-基。
40．根據(jù)權(quán)利要求24的藥物組合物，其中R2選自有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基和有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基。
41．根據(jù)權(quán)利要求40的藥物組合物，其中R2選自甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基和-CH2CH2SCH3。
42．根據(jù)權(quán)利要求26的藥物組合物，其中X′和X″都是氫，且Z是連接R1至-CX′X″-的共價(jià)鍵。
43．根據(jù)權(quán)利要求42的藥物組合物，其中R3是氫，而R3’選自3-羥基苯基，3-甲氧基苯基，3-乙氧羰基苯基，正己基，正辛基，4-乙氧羰基苯基，4-甲氧羰基苯基，3-氯苯基，3-氰基苯基，3,5-二氯苯基，-CH(CH3)φ(R立體異構(gòu)體)，-CH(CH3)φ(S立體異構(gòu)體)，酞-6-基，2-羥基吡啶-3-基，2-(甲氧羰基甲基)芐基，3-(甲氧羰基)芐基，2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基和2-苯基芐基。
44．根據(jù)權(quán)利要求24的藥物組合物，其中式Ⅰ化合物選自N-(3-羥基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(正己基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(正辛基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3,5-二氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-氰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(酞-6-基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(4-甲氧羰基苯基)甲基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(1-氰基-1-苯基甲基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[(R)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(S)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-羥基吡啶-3-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[2-甲氧羰基-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[α-吡啶-2-基-芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[1-(N-鄰苯二甲酰氨基)戊-2-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-(甲氧羰基甲基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[3-(甲氧羰基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-苯基芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺。
45．式Ⅰ化合物，
其中，R1選自(a)烷基，鏈烯基，烷芳基，烷基環(huán)烷基，芳基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，雜芳基和雜環(huán)，其中雜芳基或雜環(huán)可以任意被1-3個(gè)下列基團(tuán)取代烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，鹵素，硝基，硫代烷氧基和硫代芳氧基；(b)式(Ⅱ)取代的苯基，
其中R是有1-8個(gè)碳原子的亞烷基，m是0或1，Ra和Ra’獨(dú)立地選自氫，羥基，氟和甲基；Rb和Rb’獨(dú)立地選自氫，烷基，烷氧基，芳基，芳氧基，氰基，環(huán)烷基，鹵素，雜芳基，雜芳氧基，雜環(huán)，硝基，三鹵代甲基，硫代烷氧基，硫代芳氧基，硫代雜芳氧基及-C(O)R4，其中R4選自烷基，芳基，烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫，烷基，芳基，氰基，鹵素，硝基，而且Rb和Rc與苯環(huán)一起被稠合成亞甲基二氧基環(huán)；及如果Rb和/或Rb’和/或Rc是氟，氯，溴和/或硝基，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及(c)在5,6,7和/或8位被1-4個(gè)下列取代基取代的1-或2-萘基烷基，烷氧基，鹵素，氰基，硝基，三鹵代甲基和硫代烷氧基；R2選自氫，有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基，有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基；及R3和R3’獨(dú)立地選自(a)氫，條件是R3和R3’不能同時(shí)為氫；(b)烷基，條件是，如果R3是氫，則R3’烷基是從氮原子算起至少有5個(gè)碳原子鏈長(zhǎng)的直鏈，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代，還一個(gè)條件是，如果R3和R3’均為烷基，則至少其中一個(gè)烷基的鏈長(zhǎng)至少有5個(gè)碳原子，且該鏈可以任意被一個(gè)或多個(gè)烷基取代；(c)-(R7)n(W)p，其中R7是亞烷基，W選自(ⅰ)下式
其中R5,R5’,R9和R9’獨(dú)立地選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，烷氧基，取代的烷氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，酰基，酰基氨基，酰氧基，氨基?；?，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)；及R6選自氫，羥基，烷基，取代的烷基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，芳基，?；；被Ｑ趸?，烷氧基，取代的烷氧基，氨基?；?，氰基，環(huán)烷基，鹵素，羧基，羧基酯，雜芳基和雜環(huán)，且R6與R5或R5’之一稠合成有4-10個(gè)原子的雜環(huán)，其中1-3個(gè)雜原子選自氧，氮和硫；條件是，如果n是0，則R9和R9’是氫；(ⅱ)雜芳基；及(ⅲ)N-雜環(huán)，條件是，如果W是N-雜環(huán)，則n非0；及n是0或1，及p是1-3的整數(shù)，條件是，如果n是0，則p等于1；及(d)-CH(φ)CH2C(O)O-Q，其中Q選自烷基，芳基，雜芳基和雜環(huán)；X′是氫，羥基或氟；X″是氫，羥基或氟，或者X′和X″一起形成氧基，Z選自共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，氧和硫；及條件是，如果R1是苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
則(ⅰ)R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫，及(ⅱ)R5,R5’,R9,R9’是氫，R6是甲氧基；還一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是1且p是1,R7是亞乙基及W是
則R5,R5’,R9,R9’和R6不都是氫；及再一個(gè)條件是，如果R1是3,5-二氟苯基，R2是甲基，X′和X″是氫，Z是共價(jià)連接R1與-CX′X″-的鍵，m是0,R3是氫，R3’是-(R7)n(W)p，其中n是0且p是1，及W是
以及R5’,R9,R9’是氫，則R5和R6不能與它們相連的苯環(huán)稠合成苯二酰亞氨基。
46．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R1是未取代的芳基。
47．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中未取代的芳基R1選自苯基，1-萘基和2-萘基。
48．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R1是取代的芳基。
49．根據(jù)權(quán)利要求48的化合物，其中取代的芳基是由下面定義的取代的苯基(a)在2,3或4位有單個(gè)取代基的單取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Rb和Rc基團(tuán)代表；(b)在2,3-位，2,4-位，2,5-位，2,6-位，3,4-位，3,5-位或3,6-位有兩個(gè)取代基的二取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表；及(c)在2,3,4-位，2,3,5-位，2,3,6-位，3,4,5-位或3,4,6-位有三個(gè)取代基的三取代苯基，每個(gè)取代基分別由Ra,Ra’,Rb,Rb’和Rc基團(tuán)代表。
50．根據(jù)權(quán)利要求49的化合物，其中取代的苯基選自4-氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-硝基苯基，4-甲基苯基，3-甲氧基苯基，3-硝基苯基，3-氟苯基，3-氯苯基，3-溴苯基，3-硫代甲氧基苯基，3-甲基苯基，3-三氟甲基苯基，2-羥基苯基，2-甲基苯基，2-氟苯基，3,4-二氯苯基，3,4-亞甲基二氧基苯基，3,5-二氟苯基，3,5-二氯苯基，2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
51．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R1是烷芳基。
52．根據(jù)權(quán)利要求51的化合物，其中烷芳基R1選自芐基，苯乙基，3-苯基-正丙基和4-苯基-正丁基。
53．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R1選自烷基，鏈烯基，環(huán)烷基和環(huán)烯基。
54．根據(jù)權(quán)利要求53的化合物，其中R1是烷基。
55．根據(jù)權(quán)利要求53的化合物，其中R1是環(huán)烷基。
56．根據(jù)權(quán)利要求53的化合物，其中R1是鏈烯基。
57．根據(jù)權(quán)利要求53的化合物，其中R1是環(huán)烯基。
58．根據(jù)權(quán)利要求53的化合物，其中烷基，環(huán)烷基，鏈烯基和環(huán)烯基R1選自仲丁基，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)己基，環(huán)戊基，環(huán)己-1-烯基，-CH2-環(huán)丙基，-CH2-環(huán)丁基，-CH2-環(huán)己基，-CH2-環(huán)戊基，-CH2CH2-環(huán)丙基，-CH2CH2-環(huán)丁基，-CH2CH2-環(huán)己基和-CH2CH2-環(huán)戊基。
59．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R1選自雜芳基和取代的雜芳基。
60．根據(jù)權(quán)利要求59的化合物，其中雜芳基和取代的雜芳基R1選自吡啶-3-基，吡啶-4-基，噻吩-2-基，噻吩-3-基，苯并噻唑-4-基，2-苯基苯并噁唑-5-基，呋喃-2-基，苯并呋喃-2-基，硫代萘-2-基，2-氯噻吩-5-基，3-甲基異噁唑-5-基，2-(硫代苯基)噻吩-5-基，6-甲氧基硫代萘-2-基，3-苯基-1,2,4-硫代噁二唑-5-基和2-苯基噁唑-4-基。
61．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R2選自有1-4個(gè)碳原子的烷基，有1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基和有1-4個(gè)碳原子的烷硫基烷氧基。
62．根據(jù)權(quán)利要求61的化合物，其中R2選自甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基和-CH2CH2SCH3。
63．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中X′和X″都是氫，且Z是連接R1和-CX′X″-的共價(jià)鍵。
64．根據(jù)權(quán)利要求45的化合物，其中R3是氫，而R3’選自3-羥基苯基，3-甲氧基苯基，3-乙氧羰基苯基，正己基，正辛基，4-乙氧羰基苯基，4-甲氧羰基苯基，3-氯苯基，3-氰基苯基，3,5-二氯苯基，-CH(CH3)φ(R立體異構(gòu)體)，-CH(CH3)φ(S立體異構(gòu)體)，酞-6-基，2-羥基吡啶-3-基，2-(甲氧羰基甲基)芐基，3-(甲氧羰基)芐基，2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基和2-苯基芐基。
65．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中式Ⅰ化合物選自N-(3-羥基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(正己基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(正辛基)-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(3-甲氧基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(4-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-乙氧羰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-氯苯基)-N’-( 3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3,5-二氯苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(3-氰基苯基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-(酞-6-基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(4-甲氧羰基苯基)甲基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-(1-氰基-1-苯基甲基)-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(R)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[(S)-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-羥基吡啶-3-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[2-甲氧羰基-1-苯乙基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[α-吡啶-2-基-芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[1-(N-鄰苯二甲酰氨基)戊-2-基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-(甲氧羰基甲基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[3-(甲氧羰基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-丙氨酸酰胺N-[2-(2’-甲氧羰基甲基苯基)芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺N-[2-苯基芐基]-N’-(3,5-二氟苯基乙?；?-L-丙氨酸酰胺。
全文摘要
本發(fā)明公開了能夠抑制β－淀粉樣肽釋放和/或合成的化合物，該化合物因此被用于治療阿爾茨海默病。本發(fā)明還公開了含有能夠抑制β－淀粉樣肽釋放和/或合成的化合物的藥物組合物，以及用該藥物組合物預(yù)防和治療阿爾茨海默病的方法。所說化合物由式(Ⅰ)表示，其中，R
文檔編號(hào)C07D263/57GK1238760SQ97199988
公開日1999年12月15日 申請(qǐng)日期1997年11月21日 優(yōu)先權(quán)日1996年11月22日
發(fā)明者J·吳, J·S·通, J·S·尼森, T·E·馬布賴, L·H·拉蒂默, C·N·埃德, J·E·奧迪爾 申請(qǐng)人:伊蘭藥品公司, 伊萊利利公司