重組人腦利鈉肽注射劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種重組人腦利鈉肽注射液制劑的 處方及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛋白的不穩(wěn)定性主要包括化學不穩(wěn)定性和物理不穩(wěn)定性，化學不穩(wěn)定性通過鍵的 形成或斷裂導致蛋白的修飾，主要包括脫酰胺化、消旋、水解、氧化、β -消除和二硫鍵斷裂 或交換等，物理不穩(wěn)定性不會導致蛋白的共價變化，而是包含蛋白的更高級結(jié)構(gòu)（二級結(jié)構(gòu) 及以上)變化，主要包括變性、吸附、聚集和沉淀等。蛋白類藥物制劑處方研宄目的是在維持 蛋白天然的、具有藥學活性的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，穩(wěn)定延長蛋白藥物的儲存時間，以保證蛋白藥物 可接受的貯存期限。
[0003] 重組人腦利鈉肽（Recombined Human Brain Natriuretic Peptide，rhBNP)由 32 個氨基酸殘基組成，是心力衰竭時人體分泌的作為代償功能的一種內(nèi)源性多肽。其目前作 為急性心力衰竭的治療藥物具有作用靶點明確，特異性強，非強制性地增強心肌的收縮能 力，且沒有目前擴血管藥和利尿藥物對血壓和心率改變的副作用；該藥物不論從其不良反 應的控制或者療效等方面考慮均明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的藥物，目前已被臨床上廣泛應用。
[0004] 目前已上市的藥物為凍干粉針劑。凍干粉制劑是在無菌環(huán)境下將藥液冷凍成固 態(tài)，抽真空將水分升華干燥而成的無菌粉注射劑。水針劑是指已經(jīng)溶解了藥物的注射液。與 水針劑型相比較，凍干粉劑型存在臨床使用較繁瑣，需要溶媒進行溶解，操作過程可能產(chǎn)生 二次污染等缺點；同時重組人腦利鈉肽在使用過程中需要根據(jù)體重調(diào)節(jié)藥物的靜脈沖擊劑 量和靜脈滴注速率，因此在給藥過程中對產(chǎn)品劑量準確性有較高的要求，此外該產(chǎn)品為心 力衰竭的急救藥物，對產(chǎn)品的使用過程的便捷性也應加以考慮。
[0005] 本發(fā)明旨在通過對不同輔料組合，進行處方篩選保證重組人腦利鈉肽產(chǎn)品穩(wěn)定性 和活性的基礎(chǔ)上，開發(fā)重組人腦利鈉肽預灌封注射液水針劑型，以解決目前該類藥品在液 體狀態(tài)下的穩(wěn)定性較差等問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種重組人腦利鈉肽液體制劑，其包含如下組分： 重組人腦利鈉肽0. 5 mg/ml、緩沖液體系、多元糖醇、氨基酸和鹽化合物。
[0007] 本發(fā)明所述緩沖液體系可包括磷酸鹽緩沖液體系，檸檬酸鹽緩沖液體系或醋酸 鹽緩沖液體系，優(yōu)選情況下為檸檬酸緩沖液體系或醋酸緩沖液體系，緩沖液濃度為20-100 mM，pH值為3-6。進一步優(yōu)選地，本發(fā)明所述緩沖液體系為檸檬酸鹽緩沖液體系，濃度為20 mM，pH 值為 3-4。
[0008] 本發(fā)明所述多元糖醇選自甘露醇、甘油、蔗糖或海藻糖的一種或多種。優(yōu)選情況下 為甘油或鹿糖或海藻糖，濃度分別為甘油1-10 mg/ml或鹿糖10-30 mg/ml或海藻糖20-60 mg/ml〇
[0009] 本發(fā)明所述氨基酸選自組氨酸、甘氨酸、精氨酸，濃度為1-5 mg/ml。優(yōu)選情況下， 所述氨基酸為精氨酸或組氨酸，濃度為1-5 mg/ml。
[0010] 本發(fā)明所述的鹽化合物為可以維持人體液平衡和離子濃度的鹽化合物或者以非 特異性方式與蛋白結(jié)合，增加蛋白的熱穩(wěn)定性，防止蛋白變性的鹽化合物，優(yōu)選為氯化鈉， 濃度為9 mg/ml。
[0011] 具體來講，本發(fā)明所述的重組人腦利鈉肽液體制劑可以為： 處方1 :重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，鹿糖10 mg/ml，組 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml ; 處方2 :重組人腦利鈉肽500 yg/ml，檸檬酸13 mM，檸檬酸鈉7 mM，甘油I mg/ml，組 氨酸 2. 5 mg/ml，氯化鈉 9 mg/ml ; 處方3:重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，甘油I mg/ml，組 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml ; 處方4:重組人腦利鈉肽500 μ g/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，鹿糖10 mg/ml，精 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml 處方5:重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸13 mM，朽1檬酸鈉7 mM，甘油I mg/ml，精 氨酸2. 5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml ;或 處方6:重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，甘油I mg/ml，精 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml。
[0012] 本發(fā)明還提供了該重組人腦利鈉肽液體制劑的制備方法，包括如下步驟： (1) 取處方量的人腦利鈉肽、緩沖液、多元糖醇、氨基酸、鹽化合物，用注射用水溶解，溶 液備用；或 (2) 取處方量的緩沖液、多元糖醇、氨基酸、鹽化合物，溶解于含有處方量的人腦利鈉肽 的溶液中，所得溶液備用； (3 )將步驟（1)或（2 )所得溶液濾過后灌封。
[0013] 本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明通過對輔料的優(yōu)選，包括對緩沖液體系、多元糖醇、氨 基酸、鹽化合物的優(yōu)選，使得重組人腦利鈉肽在液體制劑中具有良好的穩(wěn)定性和活性，并且 達到使用方便和用藥準確的效果。
【附圖說明】
[0014] 圖1.制劑處方1在4°C放置18個月的高效液相色譜法測定結(jié)果。
[0015] 圖2.制劑處方1在4°C放置18個月的活性測定結(jié)果。
[0016] 以下將通過【具體實施方式】對本發(fā)明的內(nèi)容進行詳細說明。然而應當理解，具體實 施例僅用于說明本發(fā)明，并不能理解為對本發(fā)明的保護范圍的限制?；诒景l(fā)明公開的技 術(shù)手段，利用本領(lǐng)域公知常識和慣用手段進行的各種常規(guī)的替換、變更等都屬于本發(fā)明的 范圍。
【具體實施方式】
[0017] 1.劑量選擇： 本產(chǎn)品采用靜脈推注與持續(xù)靜脈滴注相結(jié)合的給藥方式，首先以1. 5 μ g/kg靜脈沖擊 后，以0. 0075 μ g/kg/min的速度連續(xù)靜脈滴注24 h ;負荷劑量：I. 5-2 μ g/kg，維持劑量 速率：0. 0075-0. 01 μ g/kg/min。本專利根據(jù)國內(nèi)患者平均體重與給藥方式計算，并且參考 已上市產(chǎn)品規(guī)格最終選擇500 μ g/ml (劑量）。
[0018] 2. 緩沖體系篩選： 主要考察不同緩沖液、不同PH值與不同緩沖液濃度對重組人腦利鈉肽穩(wěn)定性的影響， 將500 yg重組人腦利鈉肽置于I ml不同類型的緩沖液之中，緩沖體系分別采用磷酸鹽緩 沖體系，醋酸鹽緩沖體系與檸檬酸鹽緩沖體系，各緩沖體系濃度分別為20 mM、50 mM與100 mM，PH范圍根據(jù)不同緩沖液的最適緩沖范圍確定，上述所有樣品于25°C放置1個月，通過高 效液相色譜法檢測產(chǎn)品濃度變化情況，實驗方案與結(jié)果見表1。結(jié)果表明，醋酸與檸檬酸緩 沖液在PH值為4和5時產(chǎn)品穩(wěn)定性最佳，且整體試驗結(jié)果與磷酸緩沖液相比較好，檸檬酸 緩沖液在同等條件下結(jié)果略好于醋酸緩沖液，同時不同濃度的醋酸與檸檬酸緩沖體系之間 未見顯著差異。
[0019] 表1.緩沖體系篩選試驗結(jié)果
【主權(quán)項】
1. 一種重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于包含重組人腦利鈉肽0. 5 mg/ml、緩沖液體 系、多元糖醇、氨基酸和鹽化合物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于所述緩沖液體系為檸檬 酸緩沖液體系或醋酸緩沖液體系，緩沖液濃度為20-100 mM，pH值為3-6。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于所述緩沖液體系為檸檬 酸鹽緩沖液體系，濃度為20 mM，pH值為3-4。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于所述多元糖醇選自甘露 醇、甘油、蔗糖或海藻糖的一種或多種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于所述多元糖醇選自甘 油、鹿糖或海藻糖，濃度分別為甘油1-10 mg/ml或鹿糖10-30 mg/ml或海藻糖20-60 mg/ ml 〇
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于所述氨基酸選自組氨 酸、甘氨酸、精氨酸的一種或多種，濃度為1-5 mg/ml。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于所述氨基酸為組氨酸或 精氨酸，濃度為卜5 mg/ml。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于所述鹽化合物為氯化 鈉，濃度為9 mg/ml。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組人腦利鈉肽注射劑，其特征在于其處方選自： 處方1 :重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，鹿糖10 mg/ml，組 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml ; 處方2 :重組人腦利鈉肽500 yg/ml，檸檬酸13 mM，檸檬酸鈉7 mM，甘油I mg/ml，組 氨酸 2. 5 mg/ml，氯化鈉 9 mg/ml ; 處方3:重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，甘油I mg/ml，組 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml ; 處方4:重組人腦利鈉肽500 μ g/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，鹿糖10 mg/ml，精 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml 處方5:重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸13 mM，朽1檬酸鈉7 mM，甘油I mg/ml，精 氨酸2. 5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml ;或 處方6:重組人腦利鈉肽500 yg/ml，朽1檬酸16 mM，朽1檬酸鈉4 mM，甘油I mg/ml，精 氨酸5 mg/ml，氯化鈉9 mg/ml。
10. 權(quán)利要求1-9任一項所述的重組人腦利鈉肽注射劑的制備方法，其特征在于包括 如下步驟： (1) 取處方量的人腦利鈉肽、緩沖液、多元糖醇、氨基酸、鹽化合物，用注射用水溶解， 溶液備用；或 (2) 取處方量的緩沖液、多元糖醇、氨基酸、鹽化合物，溶解于含有處方量的人腦利鈉 肽的溶液中，所得溶液備用； 將步驟（1)或（2 )所得溶液濾過后灌封。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種人腦利鈉肽液體制劑的配方，其包含如下組分：人腦利鈉肽0.5 mg/ml，緩沖液體系，多元糖醇，氨基酸，鹽化合物。發(fā)明還公開了人腦利鈉肽液體制劑的制備方法。發(fā)明通過對輔料的選擇，使得重組人腦利鈉肽液體制劑具有良好的穩(wěn)定性和活性，保證了用藥的安全性和有效性。
【IPC分類】A61K47-04, A61K47-18, A61K38-17, A61K9-08, A61P9-04, A61K47-12, A61K47-26
【公開號】CN104546702
【申請?zhí)枴緾N201510063404
【發(fā)明人】張世光, 周曉雷, 鄒衛(wèi), 張娜, 劉盼盼, 王雅, 周志艷, 張文君, 延志芬, 宋浩雷
【申請人】石家莊沃泰生物科技有限公司
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年2月6日