人工生物心臟瓣膜材料及制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及心臟瓣膜材料領(lǐng)域，尤其涉及一種原花青素（PC)與戊二醛（GA)共交 聯(lián)的心臟瓣膜材料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 世界范圍內(nèi)心臟瓣膜疾病發(fā)病率和致死率都很高，美國毎年要進行6萬例人 エ心臟瓣膜置換手術(shù)，同時大約有2萬人直接死于此病[Fuchs,J.R.，B.A.Nasseri,and J.P.Vacanti,Tissueengineering:a2丄stcenturysolutiontosurgical reconstruction.TheAnnalsofThoracicSurgery, 2001? 72(2):p. 577-591.]〇 臨床 上人工心臟瓣膜主要采用機械瓣膜和異種生物瓣膜移植替換治療。低溫貯藏的人同種 異體生物瓣膜也被用于臨床，但由于來源不足應用極少。異種生物瓣膜結(jié)構(gòu)如同同種生 物瓣膜，具有類似人體中心血流特點，因幾乎不引起凝血，患者術(shù)后不需象機械瓣膜術(shù)后 那樣服用價格高昂的抗凝血藥物[Fuchs,J.R.，B.A.Nasseri,andJ.P.Vacanti,Tissue engineering:a21stcenturysolutiontosurgicalreconstruction.TheArmaisoi ThoracicSurgery, 2001? 72 (2) :p. 577-591.]。在尺寸大小和解剖結(jié)構(gòu)等方面，豬的心臟瓣 膜因結(jié)構(gòu)和尺寸與人的心臟瓣膜最為相似，所以豬心臟主動脈瓣膜是制備異種生物瓣膜的 理想材料之一 [Fuchs,J.R. ,B.A.Nasseri,andJ.P.Vacanti,Tissueengineering:a21st centurysolutiontosurgicalreconstruction.TheAnnalsofThoracic Surgery, 2001. 72 (2) :p. 577-591.]。為提高所植入異種生物瓣膜的穩(wěn)定性和持久性，降低 免疫原性，提高抗菌性，臨床上所用的人工生物心臟瓣膜均采用戊二醛交聯(lián)處理。但戊二 醛本身具有細胞毒性，抑制生物瓣膜在宿主體內(nèi)內(nèi)皮化，容易引起瓣膜鈣化、變脆、易撕裂， 致使瓣膜工作平均壽命僅機械瓣膜的1/3左右[Schmidt,C.E.andJ.M.Baier，Acellular vasculartissues:naturalDiomaterialsfortissuerepairandtissueengineering. Biomaterials，2000? 21 (22) :p. 2215-2231.]。另外，盡管戊二醛有殺菌和降低免疫原性的 能力，但效果有限。
[0003] 原花青素（Procyanidins,PC)是ー種黃酮類化合物，廣泛存在于各種食 物中，如水果、蔬菜、堅果、種子、花朵、樹皮、茶葉等[Dixon,R.A.，D. -Y.Xie,and S.B.Sharma,Proanthocyaniains-afinalfrontierinflavonoidresearchNew Phytologist, 2005. 165(1) :p. 9-28. ;Packer，L，G.Rimbach，andF.VirgiIi，Antioxidant activityandbiologicpropertiesofaprocyanidin-richextractfrompine(pinus maritima)bark，pycnogenol.FreeRadicalBiologyandMedicine, 1999. 27 (5-6):p.70 4-724.]，具有抗氧化、清除自由基[Packer，L，G.Rimbach，andF.Virgili，Antioxidant activityandbiologicpropertiesofaprocyanidin-richextractfrompine(pinus maritima)bark,pycnogenol.FreeRadicalBiologyandMedicine, 1999. 27 (5-6):p.7 04-/24. ；Andry,M.C.,etal. ,Proanthocyanidinmicrocapsules:preparation，proper tiesandfreeradicalscavengingactivity.InternationalJournalofPharmace utics，1998. 171 (2) :p. 217-226.]、抗癌[Zhang,X. -Y. ,etal. ,Proanthocyanidinfrom grapeseedspotentiatesanti-tumoractivityofdoxoruoicinviaimmunomodulatory mechanism.InternationalImmunopharmacology，2005? 5 (7-8) :p. 1247-1257.]、保護心血 ^ [Sato,M. ,etal. ,Grapeseedproanthocyanidinreducescardiomyocyteapoptosis byinhibitingischemia/reperfusion-inducedactivationoijNK-IandC-jUN.；Free RadicalBiologyandMedicine，2001? 31 (6) :p. 729-737.Shao,Z. -H.，etal.，Grape seedproanthocyanidinextractattenuatesoxidantinjuryincardiomyocytes. PharmacologicalResearch, 2003. 47 (6) :p. 463-469. ；Du,Y.andH.Lou,Catechinand proanthocyanidinB4fromgrapeseedspreventdoxorubicin-inducedtoxicityin cardiomyocytes.EuropeanJournalofPharmacology，2008? 591 (1-3):p.96-101.]、 抗 柄-母[Gescher，K.，etal. ,Proanthocyanidin-enrichedextractfromMyrothamnus flabelliioliaWelw.exertsantiviralactivityagainstherpessimplexvirus typelbyinhibitionofviraladsorptionandpenetration.JournalofEthnopharma cology,2011.134(2):p. 468-474. ;Gescher，K.，etal. ,Oligomericproanthocyaniains fromRumexacetosaLinhibittheattachmentofherpessimplexvirustype-1. AntiviralResearch，2011.89(1):p. 9-18.]、抗菌消炎[Baydar，N.G.，G.Ozkan，and 0.Oagdi^9Totalphenoliccontentsandantibacterialactivitiesofgrape(Vitis viniferaL. )extracts.FoodControl, 2004. 15 (5) :p. 335-339. ；Mvakumaran,S. ,et al. ,VariationinantimicrooialactionofproanthocyanidinsfromDorycnium rectumagainstrumenbacteria.Phytochemistry,2004.65 (17):p.2485-2497.； Furiga,A. ,A.Lonvaud-FuneI,andC.Badet,Invitrostudyofantioxidantcapacity andantibacterialactivityonoralanaerobesofagrapeseedextract.FoodC hemistry, 2009. 113 (4) :p. 1037-1040.；RodriguezVaquero,M.J. ,etal. ,Antioxidant capacityandantibacterialactivityofphenoliccompoundsfromargentmean herbsinfusions.FoodControl，2010.21(5) :p. 779-785.]等多種生物活性。尤其是近 年來發(fā)現(xiàn)原花青素具有抗膠原降解[Green，B.，etal.，Grapeseedproanthocyanidins increasecollagenDiodegradationresistanceinthedentin/adhesiveinterface whenincludedinanadhesive.JournaloiDentistry，2010? 38(11):p. 908-915. ]、抗血栓形成[Sano,T.，etal. ,Anti-thromboticeffectofproanthocyanidin,a purifiedingredientofgrapeseed.ThrombosisResearch,2005. 115 (1-2):p. 115-121. ] ^ 抑制?丐化[Zhai，W.，etal. ,Procyanidins-crosslinkedheartvalve matrix:Anticalcificationeffect.JournalofBiomedicalMaterialsResearch PartB:AppliedBiomaterials，2009? 90B(2) :p. 913-921.]、降低免疫原性[Liu，Y.Z.，et al. ,ImmunomodulatoryeffectsofproanthocyanidinA-Iderivedinvitrofrom Rhododendronspiciferum.Fitoterapia，2010.81(2):p. 108-114.]的特點，使得原花青素 可能成為ー種潛在的人工生物辧膜交聯(lián)劑。Zhai等[Zhai，W.，etal.,Crosslinkingof decellularizedporcineheartvalvematrixbyprocyanidins.Biomaterials, 2006. 2 7 (19) :p. 3684-3690. ] 2006年發(fā)現(xiàn)，PC用作交聯(lián)劑交聯(lián)豬脫細胞心臟瓣膜，具有力學性能 好、穩(wěn)定性強、抑制鈣化生成等優(yōu)點。與戊二醛交聯(lián)相比，其突出優(yōu)點即有效抑制瓣膜鈣化、 無細胞毒性。但也存在著一