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      一種蠶蛹的超高壓提取方法

      文檔序號:8370537閱讀:1118來源:國知局
      一種蠶蛹的超高壓提取方法
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001] 本發(fā)明涉及一種蠶蛹的超高壓提取方法。
      【背景技術(shù)】
      [0002] 蠶蛹性平味甘,具有祛風(fēng)、健脾、止消渴、鎮(zhèn)驚安神、益精助陽等功效?!秱浼鼻Ы鹨?方》說它"益精氣,強(qiáng)男子陽道,治泄精。"《本草綱目》記載:"為末飲服,治小兒疳瘦,長肌, 退熱,除蛔蟲;煎汁飲,止消渴。"藥理研究表明,蠶蛹對機(jī)體糖、脂肪代謝能起到一定的調(diào) 整作用。白僵蠶蛹油有降血脂的作用;用蠶蛹油提純品制成丸劑,用于治療高膽固醇血癥, 對降低膽固醇和改善肝功能有顯著療效。適量食用蠶蛹,對高血壓、高血脂、慢性肝炎及營 養(yǎng)不良患者有較好的輔助治療功效。此外,蠶蛹中含有一種廣譜免疫物質(zhì),對癌癥有特殊療 效。據(jù)報道,日本等國已經(jīng)從蠶蛹中生產(chǎn)出了 α-干擾素,臨床用于抗癌治療。
      [0003] 蠶蛹具有極高的營養(yǎng)價值,含有豐富的蛋白質(zhì)(鮮蠶蛹含粗蛋白占51%)、脂肪酸 (粗脂肪占29%)、維生素(包括維生素 Α、維生素 Β2、維生素 D及麥角留醇等)。蠶蛹的蛋白質(zhì) 含量在50%以上,遠(yuǎn)遠(yuǎn)商于一般食品,而且蛋白質(zhì)中的必需氣基酸種類齊全。香蛹蛋白質(zhì)由 18種氨基酸組成,其中人體必需的8種氨基酸含量很高。蠶蛹中的這8種人體必需的氨基 酸含量大約是豬肉的2倍、雞蛋的4倍、牛奶的10倍,且營養(yǎng)均衡、比例適當(dāng),是一種優(yōu)質(zhì)的 昆蟲蛋白質(zhì)。
      [0004] 超高壓提?。╱ ltrah igh-pressure ex traction, UHPE),也稱超高冷等靜壓提 取,是指用100~1000 MPa的流體靜壓力作用于提取溶劑和中藥的混合液上,并在預(yù)定壓力 下保持一段時間,使植物細(xì)胞內(nèi)外壓力達(dá)到平衡后迅速卸壓。由于細(xì)胞內(nèi)外滲透壓力忽然 增大,細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,使得細(xì)胞內(nèi)的有效成分能夠穿過細(xì)胞的各種膜而轉(zhuǎn)移到細(xì) 胞外的提取液中,達(dá)到提取中藥有效成分的目的。超高壓提取可以有效提取黃酮類、皂苷 類、多糖類和生物堿類等有效成。
      [0005] 目前,未見采用超高壓方法提取蠶蛹的報道。

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0006] 本發(fā)明提供了 一種新的蠶蛹的超高壓提取方法。
      [0007] 本發(fā)明蠶蛹的超高壓提取方法,包括如下步驟:
      [0008] ( 1)取新鮮、干蠶蛹,以水或濃度為50%~90%乙醇溶液為溶劑,勻漿,超高壓提 取1~5次,每次5~20min,即得提取液,其中,超高壓提取的壓強(qiáng)為100-800MPa,溫度為 20 ~80? ;
      [0009] (2)過濾步驟(1)的提取液,得上清液,濃縮,濃縮液中加入10%~40% (w/v)的中 性氧化鋁;
      [0010] (3)將步驟(2)的濃縮液冷藏24~48h,去除上層油脂,離心,得上清液,濃縮,干 燥,粉碎,即可。
      [0011] 步驟(1)中,所述溶劑的用量為蠶蛹的6~10倍(v/w)。優(yōu)選地,所述溶劑的用量 為蠶蛹的6~8倍(v/w)。
      [0012] 步驟(1)中,用勻漿機(jī)對加入溶劑的蠶蛹進(jìn)行勻漿。
      [0013] 步驟(1)中,所述乙醇溶液的濃度為60%~80%。優(yōu)選地,所述乙醇溶液的濃度為 70%。
      [0014] 步驟(1)中,所述超高壓提取的次數(shù)為2~3次,提取時間為15~20min。
      [0015] 步驟(1)中,所述超商壓提取的壓強(qiáng)為200~600MPa。優(yōu)選地,所述超商壓提取的 壓強(qiáng)為500MPa
      [0016] 步驟(1)中,所述超高壓提取的溫度為50~70°C。優(yōu)選地,所述超高壓提取的溫 度為60°C。
      [0017] 步驟(2)中,所述濃縮是濃縮至相對密度為1. 05~1. 25 (50°C測)。
      [0018] 步驟(2)中,所述濃縮液中加入20~30% (w/v)中性氧化鋁脫色、脫臭。優(yōu)選地, 所述中性氧化鋁的用量為25% (w/v)。
      [0019] 步驟(3)中,所述冷藏的溫度為0~15°C。
      [0020] 步驟(3)中,所述離心的溫度為5~15°C,轉(zhuǎn)速10000r/min。
      [0021] 目前通常采用酶解的方法來提高蠶蛹蛋白質(zhì)的收率,操作復(fù)雜、耗時長,在制備過 程中易受微生物的污染。在質(zhì)量控制方面未對蠶蛹的功效成分氨基酸進(jìn)行檢測。
      [0022] 而本發(fā)明采用超高壓提取方法,可以高效提取蠶蛹的有效成分,收率高、耗時短、 不易被污染,制得的提取物中,氨基酸總量高達(dá)199g,蛋白質(zhì)總量高達(dá)326g。
      [0023] 以下通過實施例形式的【具體實施方式】,對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明權(quán)利要 求書記載的內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
      【附圖說明】 圖1為氨基酸的含量測定方法的標(biāo)準(zhǔn)圖譜。
      【具體實施方式】
      [0024] I、氨基酸的含量測定方法(方法來源:食品中氨基酸的測定方法GB/ T5009. 124-2003)
      [0025] 1.原理
      [0026] 食品蛋白質(zhì)經(jīng)鹽酸水解成為游離氨基酸,經(jīng)氨基酸分析儀的離子交換柱分離后, 與茚三酮溶液產(chǎn)生顏色反應(yīng),再通過分光光度計比色測定氨基酸含量。
      [0027] 2.試劑
      [0028] 全部試劑除注明外均為分析純,實驗用水為往離子水。
      [0029] 2.1濃鹽酸:優(yōu)級純。
      [0030] 2. 26mol/L鹽酸:濃鹽酸與水1 :1混合而成。
      [0031] 2. 3苯酚:需重蒸餾。
      [0032] 2. 4混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)液(儀器制造公司出售):0· 0025mol/L
      [0033] 2. 5 緩沖液:
      [0034] 2· 5· 1ρΗ2· 2的檸檬酸鈉緩沖液:稱取19. 6g檸檬酸鈉(Na3C6H5O7. 2H20)和16. 5ml 濃鹽酸加水稀釋到1000ml,用濃鹽酸或50%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至2. 2。
      [0035] 2. 5. 2pH3. 3的檸檬酸鈉緩沖液:稱取19. 6g檸檬酸鈉和12ml濃鹽酸加水稀釋到 1000ml,用濃鹽酸或50%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至pH至3. 3。
      [0036] 2. 5. 3pH4. 0的檸檬酸鈉緩沖液:稱取19. 6g檸檬酸鈉和9ml濃鹽酸加水稀釋到 1000ml,用濃鹽酸或50%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至4. 0。
      [0037] 2. 5. 4pH6. 4的檸檬酸鈉緩沖液:稱取19. 6g檸檬酸鈉和46. 8g氯化鈉(優(yōu)級純)加 水稀釋到1000ml,用濃鹽酸或50%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6. 4。
      [0038] 2. 6茚三酮溶液
      [0039] 2· 6· 1ρΗ5· 2的乙酸鋰溶液:稱取氫氧化鋰(LiOH. H20) 168g,加進(jìn)冰乙酸(優(yōu)級純) 279ml,加水稀釋到1000 ml,用濃鹽酸或50%的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至5. 2。
      [0040] 2. 6. 2茚三酮溶液:取150ml二甲基亞砜(C2H60S)和乙酸鋰溶液(2. 6. l)50ml加 進(jìn)4g水合茚三酮(C9H403. H20)和0. 12g還原茚三酮(C18HltlO6. 2H20)攪拌至完全溶解。
      [0041] 2. 7高純氮氣:純度99. 99%。
      [0042] 2. 8冷凍劑:市售食鹽與冰按1 :3混合
      [0043] 3.儀器和設(shè)備
      [0044] 3. 1真空泵
      [0045] 3. 2恒溫干燥箱
      [0046] 3. 3水解管:耐壓螺蓋玻璃管或硬質(zhì)玻璃管,體積20~30ml。用往離子水沖洗干 凈并烘干。
      [0047] 3. 4真空干燥器(溫度可調(diào)節(jié))
      [0048] 3. 5日本日立(Hitachi, Japan)L_8900型全自動氨基酸分析儀天美(中國)科學(xué) 儀器有限公司
      [0049] 4.檢測方法
      [0050] 4. 1試樣處理
      [0051] 樣品采集后用勻漿機(jī)打成勻漿(或者將樣品盡量粉碎)于低溫冰箱中冷凍保存,分 析用時將其解凍后使用。
      [0052] 4. 2分析步驟
      [0053] 4. 2. 1 稱樣
      [0054] 正確稱取一定量樣品,精確到0.0 OOlg。均勻性好的樣品如奶粉等,使樣品蛋白質(zhì) 含量在10~20mg范圍內(nèi);均勻性差的樣品如鮮肉等,為減少誤差可適當(dāng)增大稱樣量,測定 前再稀釋。將稱好的樣品防于水解管中。
      [0055] 4. 2. 2 水解
      [0056] 在水解管內(nèi)加6mol/L鹽酸10~15ml (視樣品蛋白質(zhì)含量而定),含水量高的樣 品(如牛奶)可加進(jìn)等體積的濃鹽酸,加進(jìn)新蒸餾的苯酚3~4滴,再將水解管放進(jìn)冷凍 劑中,冷凍3~5min,再接到真空泵的抽氣管上,抽真空(接近Opsi),然后充進(jìn)高純氮氣; 再抽真空充氮氣,重復(fù)三次后,在充氮氣狀態(tài)下封口或擰緊螺絲蓋將已封口的水解管放在 110 ± I °C的恒溫干燥箱內(nèi),水解22h后,取出冷卻。
      [0057] 打開水解管,將水解液過濾后,用往離子水多次沖洗水解管,將水解液全部轉(zhuǎn)移到 50ml容量瓶內(nèi),用往離子水定容。吸取濾液Iml于5ml容量瓶內(nèi),用真空干燥器在40~ 50°C干燥,殘留物用1~2ml水溶解,再干燥,反復(fù)進(jìn)行兩次,最后蒸干,用lmlpH2. 2的緩沖 液溶解,供儀器測定用。
      [0058] 4. 2. 3 測定
      [0059] 正確吸取0. 200ml混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn),用pH2. 2的緩沖液稀釋到5ml,此標(biāo)準(zhǔn)稀釋濃 度為5. 00nmol/50 μ L,作為上機(jī)測定用的氨基酸標(biāo)準(zhǔn),用氨基酸自動分析儀以外標(biāo)法測定 樣品測定液的氨基酸含量。
      [0060] 4. 2. 4結(jié)果計算
      [0061] 按下式計算
      【主權(quán)項】
      1. 一種蠶蛹的超高壓提取方法,其特征在于:包括如下步驟: (1) 取新鮮、干蠶蛹,加入水或濃度為509T90%乙醇溶液,勻漿,在溫度為2(T80°C,壓強(qiáng) 為100-800MPa條件下,超高壓提取1飛次,每次5~20min,即得提取液; (2) 過濾步驟(1)的提取液,得上清液,濃縮,濃縮液中加入109T40% (w/v)的中性氧化 錯; (3) 將步驟(2)的濃縮液冷藏24~48h,去除上層油脂后,離心,得上清液,濃縮,干燥,粉 碎,即可。
      2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于:步驟(1)中,所述溶劑的用量為蠶蛹 的6~10倍(v/w)。
      3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于:步驟(1)中,所述用勻漿機(jī)對加入溶 劑的蠶蛹進(jìn)行勻漿。
      4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的提取方法,其特征在于:所述溶劑的用量為蠶蛹的6~8倍(v/ w)。
      5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于:步驟(1)中,所述乙醇溶液的濃度為 60%~80%。
      6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于:步驟(1)中,所述超高壓提取的次數(shù) 為2~3次,提取時間為15~20min。
      7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于:步驟(1)中,所述超高壓提取的壓強(qiáng) 為30(T600MPa,選為提取的壓強(qiáng)為500MPa。
      8. 權(quán)利要求1~7任一項所述方法制備的蠶蛹提取物。
      【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蠶蛹的超高壓提取方法,包括如下步驟:(1)取新鮮、干蠶蛹、加入水或濃度為50%~90%乙醇溶液,超高壓提取1~5次,每次5~20min,即得提取液,其中,超高壓提取的壓強(qiáng)為200-600MPa,溫度為20~80℃;(2)離心步驟(1)的提取液,得上清,濃縮,得濃縮液;(3)將步驟(2)的濃縮液冷藏24~48h,去除上層油脂,離心,濃縮,干燥,粉碎,即可。本發(fā)明超高壓提取方法可以有效提取蠶蛹的有效成分,收率高,操作簡便,應(yīng)用前景良好。
      【IPC分類】A23L1-29, A61K35-64
      【公開號】CN104688779
      【申請?zhí)枴緾N201310655824
      【發(fā)明人】舒梅
      【申請人】舒梅
      【公開日】2015年6月10日
      【申請日】2013年12月9日
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