山茱萸納米粉抗2型糖尿病的應用
【技術(shù)領域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領域，具體涉及山茱萸納米粉抗2型糖尿病的應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是一種廣泛分布的流行性疾病，由于胰島素缺乏、胰島素分泌減少或胰島 β細胞功能受損所致。研宄表明，全球約有15億糖尿病患者并預計到2025年糖尿病發(fā)病 率將翻倍。因此，糖尿病藥物的研發(fā)成為一個迫在眉睫的任務，而西藥仍是目前治療糖尿病 的主要藥物，如，磺脲類、噻唑烷酮類、二甲雙胍類和α葡萄糖苷酶抑制劑等，盡管這些西 藥在治療糖尿病方面具有顯著地療效，但西藥會引發(fā)各種副作用、耐藥性且價格昂貴，尤其 是大多西藥僅針對單一通路控制高血糖，而糖尿病是一種具有多種病因的疾病，單純的降 糖療法只能緩解癥狀，卻不能解決其他諸如脂代謝紊亂，炎癥等癥狀。因此，從天然中草藥 中尋找更安全、更有效、多途徑、多靶點的口服降糖藥物，已成為糖尿病藥物開發(fā)的方向。
[0003] 中藥山茱萸（Cornus officinalis Sieb. et Zucc.)為山茱萸科植物山茱萸的干 燥成熟果實，其味酸、澀，性微溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補益肝腎、澀精固脫、眩暈耳鳴、內(nèi)熱消渴 等功效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種山茱萸納米粉抗2型糖尿病的應用，本發(fā)明以山茱萸 納米粉入藥，從降糖、抗氧化活性及消除氧化應激等多方面進行研宄，為山茱萸的開發(fā)研宄 提供一種新思路。
[0005] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：
[0006] 山茱萸納米粉在制備抗2型糖尿病的藥物和/或保健品中的應用，所述山茱萸納 米粉是將去核的山茱萸藥材果肉曬干后，先粉碎成80目細粉，然后將細粉在KTC下冷卻， 再經(jīng)納米級粉碎處理后制得。
[0007] 所述的藥物和/或保健品為增強機體糖耐量、升高胰島素敏感指數(shù)及降低胰島素 抵抗指數(shù)的藥物和/或保健品。
[0008] 所述的藥物和/或保健品為改善脂代謝異常的藥物和/或保健品。
[0009] 所述的藥物和/或保健品為降低總膽固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白的含量的藥 物和/或保健品。
[0010] 所述的藥物和/或保健品為升高高密度脂蛋白膽固醇含量的藥物和/或保健品。
[0011] 所述的藥物和/或保健品為通過抗氧化機制發(fā)揮降血糖作用的藥物和/或保健 品。
[0012] 所述的藥物和/或保健品為降低肝臟組織MDA含量、升高肝臟組織中SOD含量的 藥物和/或保健品。
[0013] 所述的藥物和/或保健品為干預骨骼肌中胰島素信號轉(zhuǎn)導通路PI-3K改善胰島素 抵抗的藥物和/或保健品。
[0014] 所述的藥物和/或保健品為升高組織中GLUT-4、INSR、PI3K及AKT的mRNA表達的 藥物和/或保健品。
[0015] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益的技術(shù)效果：
[0016] 本發(fā)明用山茱萸納米粉分別處理各組模型小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)山茱萸納米粉明顯改善 糖尿病小鼠的空腹血糖和糖耐量；提高糖尿病小鼠空腹胰島素和胰島素敏感指數(shù)，降低糖 尿病小鼠胰島素抵抗指數(shù)，從肝臟組織和胰腺組織的病理影響顯微照片結(jié)果可以看出，山 茱萸納米粉對T2DM小鼠肝臟及胰島組織有較好的保護作用；山茱萸納米粉可降低與脂代 謝密切相關(guān)的總膽固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白的含量，提高高密度脂蛋白膽固醇的含 量；升高糖尿病小鼠肝臟組織超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛水平，從而改善其氧化應激 方面的功能；從分子水平對糖尿病小鼠骨骼肌GLUT-4、INSR、PI3K及AKT基因 mRNA表達的 測定，結(jié)果表明山茱萸納米粉可提高GLUT-4、INSR、PI3K及AKT基因 mRNA的表達水平。因 此，山茱萸納米粉具有明顯的降血糖作用。
[0017] 與現(xiàn)有口服降糖藥相比，本發(fā)明的山茱萸納米粉更安全、更有效、溫和持久、無毒 副作用，且作用機理多效應、多靶點、多功能，其療效不僅在于降低血糖，同時在防治糖尿病 并發(fā)癥中也具有舉足輕重的地位。因此，山茱萸納米粉在改善糖尿病方面具有可觀的開發(fā) 和應用價值。
【附圖說明】
[0018] 圖1為山茱萸納米粉對T2DM小鼠口服糖耐量的影響；
[0019] 圖2山茱萸納米粉對T2DM小鼠口服糖耐量曲線下面積的影響；
[0020] 圖3為山茱萸納米粉對各組小鼠胰腺組織病理影響的熒光顯微照片；其中，A正常 對照組；B高劑量組；C :中劑量組；D低劑量組；E模型組；F陽性組；擴大倍數(shù)為400倍。
[0021] 圖4為山茱萸納米粉對各組小鼠肝臟組織病理影響的熒光顯微照片；其中，A正常 對照組；B高劑量組；C :中劑量組；D低劑量組；E模型組；F陽性組；擴大倍數(shù)為400倍。
[0022] 圖5山茱萸納米粉對各組小鼠肝臟組織HE染色結(jié)果（HEX200);其中，A正常對照 組；B高劑量組；C :中劑量組；D低劑量組；E模型組；F陽性組；擴大倍數(shù)為200倍。
[0023] 圖6山茱萸納米粉對T2DM小鼠骨骼肌組織中INSR、PI-3K、AKT、GLUT-4mRNA表 達量的影響圖表示與模型組比較，P〈〇. 05,有顯著性差異；#表示與模型組比較，P〈0. 01， 有極顯著性差異；Λ表示與空白組比較，P〈〇. 05,有顯著性差異；ΛΛ表示與空白組比較， Ρ〈〇. 01，有極顯著性差異。
【具體實施方式】
[0024] 下面結(jié)合具體的實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，所述是對本發(fā)明的解釋而 不是限定。
[0025] 一、實驗材料
[0026] 1、山茱萸：
[0027] 實驗所用山茱萸均是于2012年10月采收自陜西省佛坪縣，經(jīng)陜西師范大學生命 科學學院王m之教授鑒定為山茱萸科植物山茱萸（Cornus officinalis Sieb. Et Zucc.) 的成熟果實。
[0028] 2、實驗動物：SPF級、雄性昆明小鼠，體重15±2g，由西安交通大學醫(yī)學院動物中 心提供。
[0029] 3、實驗試劑：鏈脲佐菌素（sigma公司）；格列美脲（貴州天安藥業(yè)股份有限公 司）；甘油三酯（TG)試劑盒（北京北化康泰臨床試劑有限公司）；高密度脂蛋白膽固醇 (HDL)試劑盒（北京北化康泰臨床試劑有限公司）；總膽固醇（TC)試劑盒（北京北化康泰 臨床試劑有限公司）；低密度脂蛋白膽固醇（LDL)試劑盒（北京北化康泰臨床試劑有限公 司）；超氧化物歧化酶（SOD)(南京建成生物工程研宄所）；丙二醛（MDA)(南京建成生物 工程研宄所）；小鼠胰島素酶聯(lián)免疫分析試劑盒（北京科盈美科技有限公司）；C反應蛋白 (CRP)(北京科盈美科技有限公司）；白細胞介素6 (IL-6)(北京科盈美科技有限公司）；月中 瘤壞死因子α (TNF-α)(北京科盈美科技有限公司）；PrimeScript? RT reagent Kit with gDNA Eraser (TaKaRa(寶生物），貨號：RR047B) JRNzol總RNA提取試劑（天根生化科技 (北京）有限公司）DL2, 000DNA Marker (TaKaRa (寶生物），貨號：3427Q) ; SYBR? Premix Ex Taq? II (Tli RNaseH Plus)，ROX plus (TaKaRa (寶生物），貨號：RR82LR)。
[0030] 二、實驗方法
[0031] 1、藥品溶液的制備
[0032] 將采摘的山茱萸成熟果實用文火烘或置于溫水中略燙后，及時去核，剩余的果肉 曬干，常規(guī)粉碎成80目細粉，KTC冷卻，置于高能納米沖擊磨中，進行干法球磨處理，最終 球料過篩分離，原料經(jīng)SAXS GB/T13221納米粒度國標測試為納米級均質(zhì)超細粉末，密封備 用。
[0033] 高脂高糖飼料配比：蔗糖15% -20%，豬油5% -10%，膽固醇3% -8%，豬膽鹽 0· 02 % -0· 1 %，普通飼料 62. 06-66. 98 %。
[0034] 2、T2DM模型的構(gòu)建及分組
[0035] 選取SPF級雄性昆明小鼠，體重15±2g。均飼養(yǎng)于溫度保持在18-23°C，通風良 好，保持自然光照的動