Bcr-Ab1抑制劑及其用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物化學領域，具體涉及21個化合物及含有送些化合物的藥用組合 物W及它們的醫(yī)療用途，特別是作為Bcr-Abl激酶抑制劑的用途。
【背景技術】
[0002] 慢性粒細胞白血病是一種起源于造血干細胞的血液系統(tǒng)惡性疾病，是一種常見的 白血病，其發(fā)病率居白血病的第3位，約有60%~70%的患者最終死于慢性粒細胞急變。 多年的醫(yī)學研究證實Bcr-Abl酪氨酸激酶在CML患者的病理過程中起著重要作用。1960 年，Nowell和Hauger-化ro在CML細胞中首次發(fā)現(xiàn)變異染色體化染色體（Philadelphia Chromosome)。
[000引慢性粒細胞白血病的特點是：其細胞遺傳標志為存在特異的PH染色體，也即U9 ; 22) (q34;q21)。位于9q34的原癌基因Abl與22qll的Bcr基因發(fā)生重組，形成Bcr-Abl融 合基因，送是CML的始動突變，與CML的發(fā)病發(fā)展密切相關，編碼的蛋白WP210為主。與正 常的Abl蛋白相比，具有較強的酪氨酸激酶活性，從而促進細胞的分裂，降低細胞對調(diào)亡信 號的反應，延長細胞存活時間，導致白血病的發(fā)生。化染色體作為CML的遺傳學特征，見于 90%~95%的CML病例，而在5%的成人A化及3%~5%的急性非淋己細胞性血病（ANLL) 和極少數(shù)骨髓增生異常綜合征（MD巧等也發(fā)現(xiàn)化染色體。總之，Bcr-Abl融合基因的形成， 使Abl原癌基因被激活，產(chǎn)生了Bcr-Abl融合蛋白，該蛋白具有異常酪氨酸激酶活性，擾亂 了細胞正常的信號傳導，影響細胞的生長和調(diào)亡，誘導細胞惡變。
[0004] 獻表明，Bcr-Abl融合基因的表達狀況和CML細胞的成熟度呈負相關，CML從慢性 期發(fā)展到急變期，往往伴隨著Bcr-AblmRNA水平的明升高。Bcr-Abl融合基因是診斷慢性 粒細胞白血病（CML)類型及分期的一個重要指標之一。
[0005]GleevecQmatinibMes}date，STI-571)被認為是第一代酪氨酸激酶抑制劑。 Gleevec是一種小分子的2-苯胺嚼巧衍生物。它是由瑞±諾華公司開發(fā)的一種酪氨酸激酶 抑制劑，于2001年5月10日獲美國FDA批準上市，用于治療干擾素（IFN)治療失敗的CML 慢性期、危象期、加速期。由于該藥物是在理解疾病分子機制的基礎上，針對CML特異的分 子異常進行的一種祀向治療，因而與傳統(tǒng)化療藥物有很大的不同，從而引起了人們的普遍 關注，送一重大成就被美國《科學》雜志列入2001年度十大科技新聞。盡管Gleevec治療 CML早期患者具有很好的療效，但是該藥物對于一些中晚期患者已經(jīng)產(chǎn)生了耐藥性，送與 Bcr-Abl的再次激活有關。
[0006] 目前認為，Gleevec產(chǎn)生耐藥性主要有W下H種機制；（1)患者體內(nèi)細胞中的 Bcr-Abl過表，Bcr-Abl大量擴增后超出了藥物能夠抑制的有效范圍，導致了患者的耐藥 性，送與早期細胞和動物實驗的研究結果是一致的。（2)患者體內(nèi)的Bcr-Abl蛋白發(fā)生了點 突變，點突變阻礙了Gleevec與Bcr-Abl的結合，但不影響蛋白激酶活性，所W導致Gleevec 藥物失效。早期序列分析發(fā)現(xiàn)，點突變體均為Bcr-Abl蛋白的第315位的蘇氨酸燈虹，T)突 變?yōu)楫惲涟彼幔╨ie,I)。該點突變位置處于Bcr-Abl的酶活性區(qū)域，X晶體衍射分析顯示， 該點突變的位置對Gleevec和Bcr-Abl的結合很重要。該點突變在阻遏Gleevec的結合同 時，并不喪失Bcr-Abl的激酶活。到2007年為止，已發(fā)現(xiàn)Bcr-Abl激酶域內(nèi)的17種不同氨 基酸突變與CML病人對Gleevee(STI-571)的臨床耐藥有關。其中有一小部分突變直接影 響Abl與Gleevec(STI-571)的結合，另一大部分突變影響到其他Bcr-Abl選擇性抑制劑的 設計、合成與篩選。Gleevee(STI-571)產(chǎn)生耐藥是由于削弱了有利于Gleevee(STI-571)結 合的Abl非活性構像激酶的活。研究表明，Bcr-Abl激酶區(qū)發(fā)生的送些特異性的點突變，可 能是導致CML患者對藥物產(chǎn)生耐藥性最主要的原因。（3)患者體內(nèi)a1酸糖蛋白（AG巧能 夠結合并抑制Gleevec,可能是產(chǎn)生耐藥的一個新機制。
[0007] 雖然Gleevec耐藥性的發(fā)現(xiàn)使利用該藥物治療CML受到新的挑戰(zhàn)，但Bcr-Abl蛋 白激酶在Gleevec耐藥細胞株中依然保持激酶活性的事實說明，該融合蛋白仍然是一個理 想的治療CML的藥物作用祀點。通過對耐藥機制的研究，有利于早日克服耐藥性。如果耐 藥是由于Bcr-Abl表達量過高，可W增加用藥劑量；如果是由于Gleevec結合了AGP,可W 給患者服用氯林可霉素，一種能與Gleevec競爭結合AGP的藥物，提高體內(nèi)Gleevec濃度； 如果是由于Bcr-Abl蛋白激酶發(fā)生了點突變，可W進一步篩選新的Bcr-Abl激酶抑制劑， 與Gleevec合并用藥，降低細胞對藥物作用產(chǎn)生的耐藥。也正是因為STI-571的耐藥性， 使得人們不得不不斷地去探索和尋找新型的抗STI-571酪氨酸激酶抑制。目前為止，有兩 類候選藥物作為單一療法治療CMU它們是第二代選擇性Bcr-Abl酪氨酸激酶抑制劑，女口 AMN107 ;W及雙重AW-Src激酶抑制劑，如BMS-354825,AZD05：M0,SKI-606 等。此外還有 一些其他類型的抑制劑，如0N012380等。
[0008] 基于碎片的藥物設計方法是當前藥物研發(fā)的主要手段之一。它是通過小分子碎片 構建先導化合物及最終藥物的。在其最成功的實施過程中，結合了集中的、高濃度的并由結 構指導的配體設計的篩選方法。雖然送個方法在幾十年前就被明確闡述，然而只是在最近 十年才被實際運用，是化sik與其同事于1996年引入核磁共振法來解釋構效關系才開始 的。他們的研究工作證明核磁共振光譜法可W用來篩選結合能力很弱的碎片并將它們連接 成具有高親和力的、集中的、結構新穎的配體。如今，從很小的生物技術公司到全球性的制 藥公司W(wǎng)及一些學術機構都在研究基于碎片的方法發(fā)現(xiàn)先導化合物和藥物的新形式。雖然 如此，在探索此方法的潛力方面仍有大量的工作需要做，文獻中出現(xiàn)的成功運用實例，包括 用送種方法獲得的第一個臨床候選藥物，都強烈地證實了送種方法的生命力。相對于傳統(tǒng) 高通量篩選方法而言，基于碎片的全新藥物設計其具有提高配體效率，降低配體