組合物及其在抗急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 痛風(fēng)（gouty)，又稱(chēng)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎（goutyarthritis)，是體內(nèi)噪呤代謝紊亂所致 的疾病，表現(xiàn)為血中尿酸過(guò)多，易于使尿酸鹽（MSU)在關(guān)節(jié)等組織析出結(jié)晶。痛風(fēng)的急性發(fā) 作是由于沉積在關(guān)節(jié)的MSU引起中性粒細(xì)胞局部浸潤(rùn)和炎性反應(yīng)。
[0003] 西藥在痛風(fēng)急性發(fā)作期選用三種藥：秋水仙堿、非留體抗炎藥和腎上腺皮質(zhì)激素。 秋水仙堿的作用機(jī)制是與中性粒細(xì)胞的微管蛋白結(jié)合，從而妨礙粒細(xì)胞的活動(dòng)，抑制粒細(xì) 胞浸潤(rùn)。非留體抗炎藥如吲哚美辛，抑制環(huán)氧酶（C0X)活性而發(fā)揮抗炎作用，以及選擇性 C0X2抑制藥。它們雖然消炎止痛作用快，但毒副作用也相當(dāng)明顯，如秋水仙堿的有效劑量與 產(chǎn)生腹瀉等胃腸道癥狀的劑量相近，非留體抗炎藥在有活動(dòng)性消化性潰瘍、胃腸道出血情 況下絕對(duì)禁用，而保泰松用藥短至3周也可致嚴(yán)重的粒細(xì)胞減少癥或再生障礙性貧血。
[0004] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0005] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2011年發(fā)表（Fan-YuMengetal.，2011. SchiglautoneA,aNewTricyclicTriterpenoidwithaUnique6/7/9-FusedSkeleton fromtheStemsofSchisandraglaucescens.OrganicLetters13(2011) 1502 - 1505) 的化合物，我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物 IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對(duì)該組合物抗抗急性痛風(fēng)活性進(jìn)行了評(píng) 價(jià)，其具有抗急性痛風(fēng)活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明公開(kāi)了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為30%和70%。
[0007]
[0008] 本發(fā)明公開(kāi)的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0009] 本發(fā)明用尿酸鈉（MSU)致人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)損傷的急性痛風(fēng)模型評(píng)價(jià)顯 示，本發(fā)明組合物對(duì)MSU致HUVEC損傷具有保護(hù)作用，并抑制ICAM-1表達(dá)，可用于制備治療 急性痛風(fēng)炎癥藥物。本發(fā)明的目的在于提供本發(fā)明組合物在醫(yī)學(xué)中的新用途，具體地說(shuō)是 涉及本發(fā)明組合物在制備治療急性痛風(fēng)藥物中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明的目的是通過(guò)以下的技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：
[0011] 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)病理研究說(shuō)明，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎是MSU引起中性粒細(xì)胞局部浸潤(rùn)和炎 性反應(yīng)，急性痛風(fēng)產(chǎn)生的本質(zhì)是中性粒細(xì)胞（PMN)-血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)黏連增強(qiáng)(TerkeltaubR，etal.Themurinehomologoftheinterleukin-8receptorcxcr-2is essentialfortheoccurrenceofneutrophilicinflammationinair pouchmodelofacuteuratecrystal-inducedgoutysynovitis.Arthritis Rheum, 1998, 41 (5) :900-909.)，HUVEC損傷，其分子生物學(xué)基礎(chǔ)在于PMN與HUVEC表面黏 附分子的相互作用(FujiwaraY,etal.Interleukin_8stimulatesleukocytemigration acrossamonolayerofculturedrabbitNF_a，IL-1β，IL-8,andIL-lrainMonosodium UrateCrystalinducedrabbitarthritis.Labinvest, 19998, 78 (5): 559-569·)，其中細(xì) 胞間黏附分子-l(ICAM-l)與粘附功能關(guān)系最密切，是急性痛風(fēng)炎癥的重要指標(biāo)之一（張 春，唐怡，劉軍，等.痛風(fēng)靈方對(duì)尿酸鈉致大鼠模型關(guān)節(jié)軟組織ICAM-1表達(dá)的影響，重慶醫(yī) 學(xué)，2002, 31 (12) :1211-1213.)。
[0012] 因此，針對(duì)急性痛風(fēng)MSU致HUVEC損傷，ICAM-1表達(dá)增多的病理特征，本發(fā)明用 MSU致HUVEC損傷的體外急性痛風(fēng)模型（楊妍華，尹蓮，王明艷，等.尿酸鈉誘導(dǎo)HUVEC損傷 的急性痛風(fēng)模型研究，中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2010, 28(3) :592-594.)，評(píng)價(jià)本發(fā)明組合物抗急性 痛風(fēng)炎癥活性。MSU致人血管內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC)損傷的急性痛風(fēng)模型評(píng)價(jià)顯示，本發(fā)明組合 物對(duì)MSU致HUVEC損傷具有保護(hù)作用，并抑制ICAM-1表達(dá)。
[0013] 有益效果
[0014] 研究結(jié)果表明，用MSU致HUVEC損傷的急性痛風(fēng)模型評(píng)價(jià)顯示，本發(fā)明組合物可保 護(hù)MSU致HUVEC損傷，減少細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞活性，抑制ICAM-1表達(dá)，具有抗急性痛風(fēng)炎 癥的活性，本發(fā)明組合物可用于制備治療急性痛風(fēng)炎癥藥物。
[0015] 以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 實(shí)施例1化合物SchiglautoneA的制備
[0017] 化合物SchiglautoneA(I)的制備方法參照Fan-YuMeng等人發(fā)表的文獻(xiàn) (Fan-YuMengetal., 2011.SchiglautoneA,aNewTricyclicTriterpenoidwitha Unique6/7/9-FusedSkeletonfromtheStemsofSchisandraglaucescens.Organic Letters13(2011) 1502 - 1505)的方法。
[0018]
[0019] 實(shí)施例2SchiglautoneA的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0020] 將化合物I(502mg，1.OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（7. 520g，40.OOmmol)和6mL的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝 氏度攪拌8h。8h之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然 后對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去 除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動(dòng)相為：石油醚/丙酮=100:1. 〇， v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末（508mg，71% )。
[0021] 4NMR(500MHz，DMS0-d6)δ13. 40 (s，1H)，6. 10 (s，1H)，5. 63 (s，1H)，5. 53 (s，1H)，3 .85 (d,J= 11. 2Hz, 4H),3. 52 (d,J= 10. 8Hz, 4H),2. 96 (s, 1H),2. 20 (s, 1H),2. 16 (s, 2H),2. 00 (s, 1H), 1. 84 (d,J= 13. 9Hz, 4H), 1. 69 (s, 1H), 1. 58 (dd,J= 22. 2, 8. 5Hz, 4H),L51 (s, 1 H),1. 47 (s, 1H),1. 26 (dd,J= 9. 1，4. 4Hz, 4H),1. 21 (s, 1H),1. 08 - 0· 98 (m, 4H)，0· 96-0. 94 (m, 9H),0. 94-0. 85 (m, 6H).
[0022] 13CNMR(125MHz，DMS0-d6)δ211. 46(s)，209. 14(s)，170. 06(s)，161. 12(s)，143. 5 1 (s), 132. 01 (s), 127. 77 (s), 85. 96 (s), 82. 40 (s), 70. 19 (s), 69. 10 (s), 57. 14 (s), 52. 73(s ),51. 90 (s),45. 77 (s),40. 67 (s),38. 57 (s),38. 32 (s),35. 04 (s),33. 55 (s),33. 27 (s),29. 85 (s),28. 98 (s),26. 71 (s),25. 50 (s),24. 05 (s),22. 31 (s),21. 06 (s),20. 56 (s),20. 00 (s) ,18. 69 (s), 18. 11 (s), 15. 07 (s).
[0023] HRMS(ESI)m/z[M-H]calcdforC34H51Br206： 715. 2032；found715.2027.
[0024]
[0025] 實(shí)施例3SchiglautoneA的0-(四氫吡咯基）乙基衍生物（III)的合成
[0026] 將化合物II(358mg，0. 5mmol)溶于15mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀 (690mg，5.0mmol)，碘化鉀（168mg，1.0mmol)和吡略燒（2840mg，40mmol)，混合物加熱回流 6h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取4次，合并有機(jī)相。依次用水和 飽和食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗 品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動(dòng)相為：石油醚/丙酮=100:1. 5,v/v)，收集棕色集 中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物ΠΙ的棕色粉末（215. 8mg，62% )。
[0027]NMR(500MHz,DMS〇-d6)δ13. 06 (s, 1Η), 6. 10 (s, 1H), 5. 65 (d,J= 43. 0Hz, 2H), 3. 61 (s, 2H),3. 52 (s, 2H),3. 01 (s, 1H),2. 77 (s, 1H),2. 67 (d,J= 14. 2Hz, 4H),2. 51 (s, 8H), 2. 37 (s, 2H),2. 23 (s, 1H),L92 - 1. 81 (m, 5H),1. 73 (s, 1H),1. 68 (d,J= 3. 5Hz, 8H),L61 - I. 53 (m, 4H), 1. 44 (d,J= 64. 7Hz, 2H), 1. 28 (dd,J= 21.0,9.0Hz,4H),1.08-0. 98 (m, 4H), 0. 96 (d,J= 20. 0Hz, 6H), 0. 94 (d,J= 20.OHz, 3H), 0. 90 (d,J= 20. OHz, 3H), 0. 86 (d,J= 20.OHz, 3H).
[0028] 13CNMR(125MHz,DMS0-d6)δ211. 57 (