黃帚橐吾提取物及其制備方法和在降糖方面的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黃帚橐吾提取物及其制備方法和在 糖尿病治療中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病是一種與胰島素產(chǎn)生和作用異常相關(guān)、以高血糖癥為主要特征的代謝性疾 病，尚無(wú)根治辦法。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病病發(fā)過程往往先出現(xiàn)餐后高血糖，而后發(fā)展成糖 尿病，即前者是后者的先期征兆。對(duì)于糖尿病患者，特別是II型病人，餐后高血糖對(duì)機(jī)體的 危害遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過空腹高血糖，餐后高血糖的出現(xiàn)刺激胰腺大量分泌胰島素，可引起多種代謝 異常和血管病變，同時(shí)使胰腺功能進(jìn)一步受到損害。因此，降低餐后血糖對(duì)于治療II型糖尿 病和預(yù)防該病，減少并發(fā)癥和降低死亡率的重要措施之一。
[0003]α-葡萄糖苷酶抑制劑是二十世紀(jì)八十年代出現(xiàn)的一類新的抗糖尿病藥物，它通 過競(jìng)爭(zhēng)性抑制小腸絨毛膜上的糖苷酶的作用來(lái)減少糖類的降解，延緩糖類的消化和吸收， 從而有效地降低糖尿病人餐后血糖濃度的峰值。該抑制劑已被第三次亞太地區(qū)糖尿病治療 藥物指南推薦為降餐后血糖的一線藥物，被醫(yī)學(xué)界列為第3類口服降糖藥。然而目前已上 市的該產(chǎn)品如阿卡波糖、伏格列波糖等多為合成產(chǎn)品，雖藥效好但對(duì)人體毒副作用較大，如 胃腸道反應(yīng)、過敏反應(yīng)等。以中草藥為原料，尋找服用安全對(duì)于治療和預(yù)防糖尿病具有重要 意義，也是目前國(guó)內(nèi)外研究α-葡萄糖苷酶抑制劑的一個(gè)熱點(diǎn)。
[0004] 黃帚橐吾（Ligulariavirgaurea)是常見于青藏高原高寒草甸上的多年生草本植 物。該植物為菊科橐吾屬植物，大毒，性味甘、苦，入藥有清宿熱、解毒愈瘡，催吐等功效。橐 吾屬植物在我國(guó)約有112種，絕大多數(shù)分布在青藏高原地區(qū)，其中多種有藥用價(jià)值，然而對(duì) 該屬植物的降糖作用研究較少，并且未見關(guān)于黃帚橐吾的相關(guān)研究和報(bào)道。近年來(lái)，隨著青 藏高原草場(chǎng)的不斷退化，群落結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，毒雜草增多，黃帚橐吾就是其中之一，資源十 分豐富。本專利對(duì)于黃帚橐吾組織降糖作用的深入研究，變害為寶，工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低， 易于工業(yè)化，而且對(duì)于青藏高原生態(tài)環(huán)境的綜合開發(fā)和保護(hù)利用具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了一種黃帚橐吾提取物的制備方法，該提取物取材于黃帚橐吾組織 (葉片、或根、或花）。黃帚橐吾在青藏高原分布廣泛，資源豐富。本發(fā)明技術(shù)原料充足，工 藝簡(jiǎn)單，可以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。
[0006] 同時(shí)本發(fā)明公開黃帚橐吾提取物在治療和預(yù)防糖尿病中的應(yīng)用，為尋找安全可靠 的α-葡萄糖苷酶抑制劑提供理論基礎(chǔ)，對(duì)于科學(xué)綜合地開發(fā)黃帚橐吾資源具有非常重要 的意義。經(jīng)過驗(yàn)證，該提取物能夠有效地降低α-葡萄糖苷酶的活性，從而對(duì)于糖尿病的治 療有積極的意義。
[0007] 以下是黃帚橐吾提取物的制備方法：
[0008] 所述方法是采集黃帚橐吾成熟期組織，陰干粉碎后，用5-50倍無(wú)水乙醇或其它有 機(jī)溶劑，超聲或加熱回流提取10-100分鐘，重復(fù)提取2-4次，減壓濃縮，陰干，得到黃帚橐吾 提取物。將黃帚橐吾提取物用1-10體積的水溶解，先用與水溶液1-10體積的石油醚萃取 1-10次，將石油醚部分合并，減壓濃縮風(fēng)干，制得石油醚部位；再用水溶液1-10體積的乙酸 乙酯萃取剩余水溶液1-10次，將乙酸乙酯部分合并，減壓濃縮風(fēng)干，制得乙酸乙酯部位。剩 余水溶液減壓濃縮，風(fēng)干，制得水相部位。
[0009] 進(jìn)一步地，對(duì)于糖尿病效果最好部位為黃帚橐吾花提取物。
[0010] 進(jìn)一步地，對(duì)于糖尿病有效作用部位主要保留在乙酸乙酯部位。
[0011] 進(jìn)一步地，有機(jī)溶劑提取的是中小極性的植物次生代謝物，高溫可能誘導(dǎo)植物中 的部分產(chǎn)物發(fā)生氧化或其它反應(yīng)而轉(zhuǎn)變成其它成分，常溫容易保持成分的穩(wěn)定，所以萃取 溫度不宜高于40 °C。
[0012] 進(jìn)一步地，對(duì)于萃取過程中出現(xiàn)的乳化現(xiàn)象，可以通過加入NaCl的方式解決。
[0013] 進(jìn)一步地，根據(jù)臨床需要，可以將有效部位加工成為藥片或膠囊。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn) 方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為自 常規(guī)生化試劑商店購(gòu)買得到的。
[0015] 實(shí)施例1
[0016] 本發(fā)明的黃帚橐吾葉提取物的制備方法如下：
[0017] 采集于甘南地區(qū)8月的黃帚橐吾成熟期新鮮葉片，陰干粉碎，通過100目篩子得細(xì) 粉。將葉片細(xì)粉用20倍無(wú)水乙醇溶液，超聲波提取60分鐘后，重復(fù)提取3次，低于40°C溫 度下減壓濃縮。在陰暗低溫和通風(fēng)較好的地方，晾干，制得提取物。提取物為深綠色固體。
[0018] 實(shí)施例2
[0019] 本發(fā)明的黃帚橐吾根提取物的制備方法如下：
[0020] 采集于甘南地區(qū)8月的黃帚橐吾成熟期新鮮根，陰干粉碎，通過100目篩子得細(xì) 粉。將葉片細(xì)粉用20倍無(wú)水乙醇溶液，超聲波提取60分鐘后，重復(fù)提取3次，低于40°C溫 度下減壓濃縮。在陰暗低溫和通風(fēng)較好的地方，晾干，制得提取物。提取物為黑色固體。
[0021] 實(shí)施例3
[0022] 本發(fā)明的黃帚橐吾花提取物的制備方法如下：
[0023] 采集于甘南地區(qū)8月的黃帚橐吾成熟期新鮮花（黃色），陰干粉碎，通過100目篩 子得細(xì)粉。將葉片細(xì)粉用20倍無(wú)水乙醇溶液，超聲波提取60分鐘后，重復(fù)提取3次，低于 40°C溫度下減壓濃縮。在陰暗低溫和通風(fēng)較好的地方，晾干，制得提取物。提取物為深褐色 粘稠固體。
[0024] 實(shí)施例4
[0025] 本發(fā)明的黃帚橐吾花提取物的萃取物制備方法如下：
[0026]將黃帚橐吾花提取物（2. 76g)用25倍體積的水（30-40°C，50mL)溶解，用與水溶 液2倍體積的石油醚（100mL)萃取3次，將上層石油醚部分在低于40°C溫度下減壓濃縮風(fēng) 干，制得石油醚部位。如果萃取過程中出現(xiàn)嚴(yán)重乳化現(xiàn)