一種組合物及其在抗急性腎衰藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 急性腎功能衰竭（Acute Renal Failure，ARF)是由多種原因引起的臨床綜合征， 可見于臨床各科病人，發(fā)病率高且往往帶來嚴重后果，其特點為短期內（數(shù)小時至數(shù)天）腎 功能急劇下降，臨床表現(xiàn)為急性少尿（尿量<400mLPd)或無尿（尿量〈lOOmLPd)，體內氮質 代謝產物排出產生障礙，迅速出現(xiàn)氮質血癥，水及電解質、酸堿平衡紊亂，并引起全身各系 統(tǒng)相應功能失調。引起急性腎衰的主要因素是腎血流量的急劇減少，以及由于腎組織缺血 引起的氧化應激和細胞損傷，最終導致腎臟組織結構的破壞和功能的惡化。目前臨床上尚 無公認的治療急性腎衰有效的藥物，僅能通過糾正水電解質平衡，糾正酸中毒等對癥治療 措施改善癥狀，后期還需要通過血液透析維持機體機能。在改善腎臟血流灌注障礙和減輕 腎組織損傷方面有明顯療效的臨床藥物少見。
[0003] 從天然產物中尋找化合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個2011年發(fā)表（Ayumi Ohsaki et al.，2011. Salviskinone A, a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii. Tetrahedron Letters 52(2011) 1375 - 1377)的化合物，我們對化合物I進行了結構修飾， 獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合 物并對該組合物抗急性腎衰活性進行了評價，其具有抗急性腎衰活性。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質量百分數(shù)分別為55%和45%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物用于治療急性腎衰的用途，即用于制備治療急性腎衰 藥物的用途。
[0009] 本發(fā)明的組合物對急性腎衰疾病有明顯的治療作用。
[0010] 通過我們的研究發(fā)現(xiàn)組合物能夠改善腎臟的功能。
[0011] 以下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。
【具體實施方式】
[0012] 實施例1化合物Salviskinone A的制備
[0013] 化合物Salviskinone A(I)的制備方法參照Ayumi Ohsaki等人發(fā)表的文獻 (Ayumi Ohsaki et al. , 2011. Salviskinone A, a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii. Tetrahedron Letters 52 (2011) 1375 - 1377)的方法。
[0015] 實施例2Salviskinone A的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0016] 將化合物I (312mg，1. OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0. 08g)，1，2-二溴乙烷（3. 760g，20.0 Ommol)和6mL的50 %氫氧化鈉溶液。混合物在35 攝氏度攪拌12h。12h之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機相 溶液。然后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌4次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減 壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮 =100:1.5, v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末（327mg， 78% ) 〇
[0017] 4匪1?(5001抱，0150-(16)5 6.63(8，1!1)，6.37(8，1!1)，5.81(8，1!1)，4.51(8,2!1)，3· 84 (s, 1H), 3. 79 (s, 2H), 2. 15 (s, 1H), 2. 04 (s, 1H) ,1-91 (s, 1H), 1. 65 (s, 1H), 1. 39 (s, 3H), 1. 08 (s, 6H), 0. 99 (s, 6H).
[0018] 13C NMR(125MHz, DMS0-d6) δ 188. 07 (s)，183. 70 (s)，154. 38 (s)，147. 57 (s)，140. 2 1 (s), 136. 40 (s), 134. 71 (s), 131. 25 (s), 128. 40 (s), 118. 83 (s), 72. 12 (s), 45. 49 (s), 37. 5 4 (s), 33. 58 (s), 31. 78 (s), 26. 17 (s), 25. 12 (s), 24. 66 (s), 23. 51 (s), 23. 17 (s), 22. 65 (s).
[0019] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for C22H28Br03:4 1 9. 12 2 2 ；found 419. 1220.
[0020]
[0021] 實施例3Salviskinone A的0-(二羥乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0022] 將化合物II (209mg，0. 5mmol)溶于30mL乙腈當中，向其中加入無水碳酸鉀 (690mg，5.0mmol)，碘化鉀（252mg，1.5mmol)和二乙醇胺（1051mg，10mmol)，混合物加熱回 流9h。反應結束后將反應液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機相。依 次用水和飽和食鹽水洗滌合并之后的有機相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得 到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油醚/丙酮=100:0. 5, v/v)，收 集黃色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的淡黃色固體（159. 5mg，72% )。
[0023] 4匪1?(5001抱，0150-(16)5 6.52(8，1!1)，6.40(8，1!1)，5.71(8，1!1)，4.15(8,2!1)，3· 70 (s, 1H), 3. 37 (s, 4H), 3. 00 (s, 2H), 2. 50 (s, 4H), 2. 07 (s, 1H), 1. 96 (s, 1H), 1. 83 (s, 1H), 1. 57 (d, J = 1. 4Hz, 3H), 1. 30 (s, 3H), 0. 99 (s, 6H), 0. 90 (s, 6H).
[0024] 13C NMR(125MHz, DMS0-d6) δ 188. 01 (s)，183. 52 (s)，154. 08 (s)，147. 15 (s)，140. 1 l(s), 136. 23 (s), 134. 42 (s), 130. 84 (s), 128. 31 (s), 118. 62 (s), 68. 93 (s), 58. 73 (s), 56. 6 1 (s), 53. 94 (s), 45. 20 (s), 37. 13 (s), 33. 49 (s), 25. 96 (s), 24. 84 (s), 24. 26 (s), 23. 43 (s), 22. 97(s), 22. 33 (s).
[0025] HRMS (ESI) :m/z[M+H]+calcd for C26H3SN05:444. 2 7 50 ;found:444. 2746。
[0026]
[0027] 實施例4Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（IV)的合成
[0028] 將化合物111 (0. 222g，0. 5mmol)溶于6mL氯仿，逐滴加入氯化亞砜（0. 238g， 2_〇1)，反應物加熱回流lh。將反應物冷卻至室溫，滴加甲醇分解過量的氯化亞砜，減壓濃 縮除去溶劑。產物經硅膠柱層析純化（石油醚/丙酮100:0. 3, v/v)，得到化合物IV的淡 黃色固體（170. 0mg，71% )。
[0029] 4 NMR(500MHz，Chloroform-dl) S6.51(s，lH)，6.22(s，lH)，5.72(s，1H)，4. 16(s， 1H), 3. 66 (s, 1H), 3. 44 (s, 4H), 3. 01 (s, 2H), 2. 80 (s, 2H), 2. 64 (s, 2H), 2. 04 (s, 1H), 1. 98 (s, 1H), 1. 85 (s, 1H), 1. 59 (s, 1H), 1. 28 (s, 3H), 0. 97 (s, 6H), 0. 93 (s, 6H).
[0030] 13C NMR (125MHz，DMS0-d6) δ 187. 90 (s)，183. 41 (s)，153. 97 (s)，147. 04 (s)，140. 0 0 (s), 136. 12 (s), 134. 31 (s), 130. 73 (s), 128. 20 (s), 118. 51 (s), 68. 82 (s), 55. 57 (s), 53. 9 4 (s), 45. 20 (s), 39. 10 (s), 37. 02 (s), 33. 39 (s), 25. 87 (s), 24. 76 (s), 24. 19 (s), 23. 33 (s), 22. 88(s), 22. 25 (s).
[0031] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C26H36C12N03:480 . 20 7 2 ;found:480. 2070。
[0032]
[0033] 實施例5組合物對急性腎衰大鼠的治療作用
[0034] ( -）實驗方法
[0035] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的55mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網(wǎng)的45mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組 合物，使用時用水溶解這l〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。
[0036] 采用肌肉注射甘油致急性腎功能衰竭大鼠動物模型。選用180~220g健康雄性 SD大鼠30只，隨機分為5組：假手術組（肌肉注射生理鹽水）；模型組（肌肉注射甘油）； 給藥干預組（組合物、化合物III或者化合物IV 0. 6mg/Kg，肌肉注射甘油），各組大鼠在甘 油造模后立即尾靜脈注射生理鹽水或待試藥物，12和24小時后再給藥一次。
[0037] (二）觀察指標
[0038] 大鼠末次給藥或生理鹽水后放入代謝籠收集24小時尿，留尿后6小時用4%水合 氯醛腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流儀測定造模后及治療后雙側腎臟血流量，取平均 值作為單只動物腎血流量；取血制備血清，測定血BUN和Cre (均按試劑盒說明書操作）。
[0039] (三）實驗結果
[0040] 1.組合物可增加急性腎衰小鼠腎血流量
[0041] 組合物可顯著增加急性腎衰小鼠腎血流量，而化合物III和化合物IV無此作用。
[0042] 表1組合物對急性腎衰小鼠腎血流量的影響
[0044] *Ρ〈0· 05vs急性腎衰模型組
[0045] 2.組合物對急性腎衰小鼠腎功能具保護作用
[0046] 急性腎衰大鼠靜脈注射生理鹽水24小時后，血清BUN和Cre見表2。急性腎衰模 型組明顯高于假手術組，說明模型組動物腎功能損害嚴重。組合物能改善急性腎衰大鼠的 腎功能（P〈〇. 05)，而化合物III和化合物IV無此作用。見表2。
[0047] 表2各試驗組大鼠腎功能指標比較
[0049] *P〈0. 05vs急性腎衰模型組
[0050] 結論：組合物能夠保護腎臟的功能，可以用來制備抗急性腎衰藥物。而化合物III 和化合物IV不能夠保護腎臟，不可用來制備抗急性腎衰藥物。
[0051 ] 實施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0052] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0053] 實施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0054] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100 粒。
【主權項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質量百分數(shù)分別為55%和45%，2. 如權利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為：將化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照質量百分數(shù)分別為55 %和45 %充分混合。3. -種如權利要求1所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應用。4. 如權利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應用，其特征為：所述組合物 改善急性腎衰所引起的腎臟血流量的降低。5. 如權利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應用，其特征為：所述組合物 改善急性腎衰引起的血清BUN的升高。6. 如權利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應用，其特征為：所述組合物 改善急性腎衰引起的血清Cre的升高。
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備抗急性腎衰藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有抗急性腎衰的作用，具有開發(fā)抗急性腎衰藥物的價值。
【IPC分類】A61P13/12, A61K31/138
【公開號】CN105287463
【申請?zhí)枴緾N201510881734
【發(fā)明人】王卓婷
【申請人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年2月3日
【申請日】2015年12月3日