一種組合物及其在抗病毒藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及有機合成和藥物化學領域，具體設及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 單純瘤疹病毒1型Ofe巧essimplexvirus,服V-1)和單純瘤疹病毒2型Ofe巧es simplexvirus,服V-2)屬于瘤疹科病毒，服V-I和服V-2不僅引起口唇或生殖粘膜瘤疹，同 時也是引起腦炎、肝炎、全身嚴重感染甚至宮內(nèi)感染的重要病原。
[0003] 呼吸道合胞病毒巧espiratcxrySyn巧tialVirus,RSV)主要引起呼吸系統(tǒng)感染， 在嬰幼兒、老年W及免疫缺陷人群引起嚴重肺炎，是人類上呼吸道感染的重要病原之一。
[0004] 甲型流感病毒（InfluenzaAvirus,Flu-A)屬于正粘科病毒，在人類和其他生物 每年都有小范圍的流行，引起上呼吸系統(tǒng)感染。大流行時，可引起嚴重呼吸系統(tǒng)感染，甚者 引起肺炎、腦炎甚至死亡。
[0005] 上述=種病毒的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產(chǎn)物 中尋找化合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物 最有重要價值。
[0006] 本發(fā)明設及的化合物I是一個2010年發(fā)表（MengShaoetal. , 2010.Psiguadials AandB,TwoNovelMeroterpenoidswithUnusualSkeletonsfromtheLeavesof Psidiumguajava.OrganicLetters12(2010)5040 - 5043)的化合物，我們對化合物I進行 了結構修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物 IV制備了組合物，并對該組合物抗病毒活性進行了評價，其具有抗病毒活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分數(shù)分別為45%和55%。
[0008]
[0009] 本發(fā)明公開的組合物可W制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0010] 藥效學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗病毒作用。本發(fā)明的藥學上可接 受的鹽具有同樣的藥效。
[0011] 組合物的體外實驗表明，組合物具有很強的抗服V-1、服V-2、RSV和fluA的活性， 因此本發(fā)明的組合物有望被用于制備新型抗病毒藥物。
[0012] W下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加W限定。
【具體實施方式】 陽01引實施例1化合物PsiguadialA的制備
[0014]化合物PsiguadialA(I)的制備方法參照Meng化ao等人發(fā)表的文獻（Meng化ao etal. , 2010.PsiguadialsAandB,TwoNovelMeroterpenoidswithUnusualSkeletons fromtheLeavesofPsidiumguajava.OrganicLetters12(2010)5040 - 5043)的方法。
[0015]
[0016] 實施例2PsiguadialA的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0017] 將化合物I(474mg，1.OOmmol)溶于20血苯，向溶液中加入四下基漠化錠燈BAB) (0. 16g)，1，2-二漠乙燒（7. 520g，40.OOmmol)和12血的50 %氨氧化鋼溶液?；旌衔镌?5攝 氏度攬拌化?；髮⒎磻旱谷氡?，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機相溶液。然 后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂3次，再用無水硫酸鋼干燥，最后減壓濃縮去 除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:0. 5， v/v)，收集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末（502mg，73% )。 陽0化]咱NMR巧OOMHz,DMSO-de) 5 10. 44 (S, 2H)，7. 24 (S, 2H)，7. 20 化J= 10.OHz, 3H)，4 .31 (s, 4H), 3. 89 (s, 1H), 3. 74 (s, 4H), 2. 30 (s, 1H), 2. 12 (s, 1H), 2. 02 (s, 1H), 1. 92 (s, 1H), 1 .79 (S, 1H)，1. 73 (S, 1H)，1. 51 化J= 19.8Hz, 3H)，0. 99 (S, 3H)，0. 95 化J= 4. 7Hz, 7H)，0.8 5(s，3H)，0. 53(s, 1H)，0. 43(s, 1H).
[0019] "cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 69 (S)，170. 54 (S)，165. 42 (S)，163. 38 (S)，142. 7 2 (S)，129. 71 (S)，127. 96 (S)，127. 08 (S)，118. 00 (S)，116. 82 (S)，114. 82 (S)，72. 73 (S)，40. 19 (S)，34. 75 (S)，34. 32 (S)，31. 75 (S)，30. 93 (S)，28. 09 (S)，26. 43 (S)，24. 48 (S)，23. 74 (S) ，21. 18 (S)，20. 77 (S)，19. 99 (S)，14. 39 (S).
[0020] HRMS(ES〇m/z[M+田+calcdforC3化擊。05:689. 1300;found689. 1303.
[0021]
陽02引實施例3PsiguadialA的0-(四氨化咯基）乙基衍生物（III)的合成 [002引將化合物II(344mg，0. 5mmol)溶于20血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (690mg，5.Ommol),艦化鐘（168mg，1.0mmol)和[I比咯燒（2840mg，40mmol)，混合物加熱回流 6h。反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取4次，合并有機相。依次用水和 飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗 品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:1. 5,v/v)，收集黃色集 中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的黃色粉末（223. 8mg，67% )。 W24]'HNMR(500MHz,DMS〇-d6) 5 10. 43 (s, 2H) , 7. 2I(s, 2H) , 7. 15 (d,J= 10.OHz, 3H)，3. 99 (d,J= 19. 6Hz, 5H)，2. 57 (s, 4H)，2. 43 (s, 8H)，2. 21 (s,IH)，I. 95 (s,IH)， I. 85 (d,J= 7.甜z, 2H)，I. 78 (s,IH)，I. 62 (d,J= 12. 9Hz, 9H)，I. 39 (s, 2H)，I. 37 (s,IH)，I. 25 (s,IH)，0. 93 (s, 3H)，0. 90 (s, 6H)，0. 83 (s, 3H)，0. 46 (s,IH)，0. 21 (s,IH). 陽0巧]"cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 52 (S)，170. 23 (S)，164. 97 (S)，163. 14 (S)，142. 38(S)，129. 22 (S)，127. 70 (S)，126. 72 (S)，117. 54 (S)，116. 59 (S)，114. 44 (S) ,69. 04 (S) ,54. 36 (d,J= 16.6Hz)，39. 83 (S)，34. 29 (S)，34. 09 (S)，30. 56 (S)，27. 62 (S)，26. 19 (S)，24. 93 ( s), 24. 03 (S)，23. 47 (S)，20. 81 (S)，20. 41 (S)，19. 54 (S)，14.Il(S).
[0026]HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC42H5挪05:669. 4267 ;found:669. 4261。
[0027]
陽02引實施例4PsiguadialA的0-(嗎嘟基）乙基衍生物（IV)的合成[0029]將化合物II(344mg，0. 5mmol)溶于20血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (690mg，5.Ommol)，艦化鐘（168mg，1.Ommol)和嗎嘟（1742mg，20mmol)，混合物加熱回流化。 反應結束后將反應液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲燒萃取2次，合并有機相。依次用水 和飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物 粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:1. 5,v/v)，收集黃色 集中洗脫帶即得到化合物IV的黃色膠狀固體（252.Img, 72% )。 W30]IhNMR巧OOMHz,DMS0-d6) 5 10. 53(S,2H)，8. 69- 6. 34 (m, 5H)，4. 11 (dd,J=30. 6,16. 3Hz，5H)，3. 61(t，J= 9. 4Hz,細），2. 74(t，J= 14. 3Hz，4H)，2. 56(t，J= 9. 3Hz, 8H)，2. 30 - 2. 13 (m,IH)，2. 07 -I. 62 (m, 5H)，I. 57 -I. 28 (m, 4H)，I. 06 (s, 3H)，I. 02 ( s, 6H)，0. 94 (d,J= 12. 9Hz, 3H)，0. 61 (d,J=I. 5Hz,IH)，0. 32 (dt,J= 21. 0, 17. 3Hz,IH). 陽的1 ] "cNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 188. 63(S)，170. 36(S)，165. 06(S)，163. 25(S)，142. 4 9(S)，129. 33(S)，127. 81(S)，126. 83(S)，117. 65(S)，116. 70(S)，114. 55(S)，69. 15(S)，66. 69 (S)，54. 73 (S)，52. 73 (S)，39. 83 (S)，34. 62 (S)，34. 09 (S)，30. 56 (S)，27. 95 (S)，26. 19 (S) ，24. 14 (S)，23. 58 (S)，20. 92 (S)，20. 41 (S)，19. 87 (S)，14.Il(S).
[0032]HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdfor〔42馬挪〇7:701. 4166 ;found:701. 4163。
[0033]
[0034] 實施例5組合物抗病毒活性
[0035](一）實驗例：組合物對瘤疹病毒的作用研究：
[0036] (1)細胞株與病毒株：
[0037] 人胚腎細胞（肥K293,為服V-1、服V-2病毒敏感細胞）購自美國Clontech公司； 單純瘤疹病毒1型化SV-1)Sm44株、單純瘤癥病毒2型化SV-2) 333株引自中國CDC病毒病 研究所。 陽〇3引 似細胞毒性測定：
[0039] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的45mg化合物III的粉末和研磨之后過 200目網(wǎng)的55mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用滿輪攬拌儀混合即得到IOOmg組 合物，使用時用水溶解運IOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0040] 參照文獻（汪受傳，王霖，陳超等，清肺口服液含藥血清對病毒抑制作用的實驗研 究，南京中醫(yī)藥大學學報，2008 ;24(1) :25~27)的方法，將各樣品W2倍比做系列稀釋 (2°一 5)，然后按稀釋順序橫向接種于96板孔中的肥K293上，每孔100祉，每稀釋度縱向重 復3孔（A、B、C行），平行設微孔板D的1~6孔為細胞對照，7~12孔不接種細胞為空白 對照，顯微鏡下每日觀察CPE，連續(xù)觀察7山中性紅染色，在540nm波長測定OD值，將實驗組 與細胞對照組OD值相比計算細胞存活率，用Reed-Muench方法計算藥物半數(shù)細胞中毒濃度 (TDso)O 柳41] (4)抑毒試驗：
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