抗癌組合物及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本申請涉及一種抗癌組合物W及治療癌癥的方法，具體地，涉及一種包含膠原酶 的抗癌組合物W及其在制備治療癌癥的藥物中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 據(jù)中國新聞周刊報道（2013年04月07日），全國每6分鐘就有一人被確診為癌 癥，每天有8550人成為癌癥患者，每走到八人中就有一人死于癌癥。未來10年，中國的癌 癥發(fā)病率與死亡率仍將持續(xù)攀升。
[0003] 癌癥擴散轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致癌癥患者治療失敗的主要原因。癌癥的轉(zhuǎn)移是一個復(fù)雜的 多因素參與的過程，其中基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrix Metalloproteinases, MMPs)在此過程 中起到重要作用（Kumar A, Collins HM, Scholefield JH, Watson SA=Increased type-IV colIagenase(MMP-2and MMP-9)activity following preoperative radiotherapy in rectal cancer.化J Cancer 82:960 - 965,2000)。MMPs不僅介導(dǎo)腫瘤細胞對宿主的包括 基底膜在內(nèi)的細胞外基質(zhì)（extracellular matrix, ECM)降解，還調(diào)控腫瘤新生血管生長、 影響細胞粘連分子的功能并在腫瘤發(fā)生發(fā)展、浸潤、擴散、轉(zhuǎn)移方面起著重要的作用。因此 多年來，科學(xué)家一直試圖通過抑制或降低MMPs活性或表達來實現(xiàn)治療腫瘤的目的，如使用 各種MMPs抑制劑、抗MMPs單抗等。然而，到目前為止此類嘗試尚未見臨床成功的先例。另 夕F，也有研究試圖通過激活或促進細胞外基質(zhì)降解W實現(xiàn)治療腫瘤的目的，但均未能取得 理想療效。
[0004] 膠原酶為MMP的一個亞型，其種類繁多，功能尚不清楚；而且不同膠原酶之間的關(guān) 系也不清楚，與其它MMPs的關(guān)系更有待探討。粗制的膠原酶還含有其它水解酶，因此容易 產(chǎn)生其它意想不到的副作用。
[0005] 尋求一種有效的抗癌組合物是治療癌癥的關(guān)鍵，也是目前研究的焦點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] -方面，本申請?zhí)峁┝艘环N抗癌組合物，其包含抗癌有效成分W及藥學(xué)上可接受 的載體，其中所述抗癌有效成分包含膠原酶II、膠原酶IV或其組合。
[0007] 在優(yōu)選的實施方案中，抗癌組合物中的有效成分選自膠原酶II和膠原酶IV或其組 合。在更優(yōu)選的實施方案中，抗癌組合物中的有效成分為膠原酶II。
[0008] 在某些實施方案中，上述抗癌組合物被配制成藥學(xué)上可接受的劑型，優(yōu)選為注射 劑或植入劑。在一些實施方案中，膠原酶II濃度為0. 5-250, OOOU/ml，優(yōu)選為25-25, OOOU/ ml，更優(yōu)選為 50-25, OOOU/ml，最優(yōu)選為 500-10, OOOU/ml。
[0009] 另一方面，提供了上述抗癌組合物在治療癌癥中的用途。
[0010] 在某些實施方案中，所述癌癥可W是原發(fā)性癌癥，也可W是轉(zhuǎn)移癌，優(yōu)選地，所述 癌癥選自肝癌、肺癌、直腸癌、甲狀腺癌或其轉(zhuǎn)移癌。
[0011] 另一方面，提供了本發(fā)明的抗癌組合物在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
[0012] 在某些實施方案中，包含本發(fā)明抗癌有效成分的藥物W注射、灌注或植入的方式 給藥，優(yōu)選地，所述藥物經(jīng)局部給藥。在優(yōu)選的實施方案中，所述藥物經(jīng)癌灶內(nèi)注射、癌周注 射或癌癥手術(shù)后瘤腔內(nèi)注射給藥，優(yōu)選地經(jīng)癌灶內(nèi)注射給藥。在另一實施方案中，所述藥物 經(jīng)癌灶內(nèi)植入、癌周植入或癌癥手術(shù)后瘤腔內(nèi)植入給藥，優(yōu)選地經(jīng)癌灶內(nèi)植入給藥。
[0013] 在一些實施方案中，本發(fā)明的抗癌有效成分，優(yōu)選為膠原酶II的給藥劑量為每千 克個體體重給予0.0 l到5, 000, 000U，優(yōu)選為10到500, 000U，更優(yōu)選為10到100, 000U，最 優(yōu)選為 10-50, 000U。
[0014] 再一方面，提供了治療癌癥，特別是實體腫瘤的方法，該方法包括將抗癌組合物給 予患癌個體來治療癌癥。所述癌癥可W是原發(fā)性癌癥，也可W是轉(zhuǎn)移癌，優(yōu)選地，所述癌癥 選自肝癌、肺癌、直腸癌、甲狀腺癌或其轉(zhuǎn)移癌。
【具體實施方式】
[0015] 本申請?zhí)峁┝艘环N抗癌組合物，其包含抗癌有效成分W及藥學(xué)上可接受的載體， 其中所述抗癌有效成分包含膠原酶II、膠原酶IV或其組合。
[0016] 在優(yōu)選的實施方案中，上述抗癌組合物包含的抗癌有效成分選自膠原酶II和膠原 酶IV或其組合。在更優(yōu)選的實施方案中，所述抗癌有效成分為膠原酶II。
[0017] 本發(fā)明所述的"膠原酶II"和"膠原酶IV"是基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs)家族的 成員。MMPs是一類對細胞外基質(zhì)巧CM)有特殊降解作用的蛋白水解酶，能降解細胞 外基質(zhì)的多種成分。到目前為止，已有報道的MMPs有二十多種，根據(jù)其蛋白結(jié)構(gòu)和作 用底物的特異性可W分為5個亞型；（1)膠原酶、（2)明膠、（3)間質(zhì)溶解素、（4)模型 MTMMPs (MMP14, 15, 16, 17, 24, 25) W及（5)其他亞群（MMP7, 12, 20, 23)等。目前認為膠原酶 至少有5種W上。膠原酶在其活性位點含有化2+，且與其底物的結(jié)合及形成完全催化活性 所需的構(gòu)型需要Ca 2+。通過在H股螺旋上多個位點的水解，它將膠原降解成短膚。
[001引膠原酶II (又稱MMP-8)作為一種金屬蛋白酶，在體內(nèi)少量蛋白水解酶存在的情況 下便可W增加其活性，即所存在的蛋白酶的量不能高到蛋白酶將膠原酶消化到使其失活的 程度。膠原酶II不僅可W裂解多種膠原蛋白，還參與機體免疫及蛋白跨膜運動。除膠原蛋 白外，膠原酶II對其它細胞外間質(zhì)及其中的巨瞻細胞、免疫細胞、細胞生長因子、血管生長 因子可能也有不同程度的直接或間接的降解作用。在本文中，膠原酶II與MMP-8可互換使 用。膠原酶IV包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68邸到130邸不等，它能消化多種組織。
[0019] 本發(fā)明人經(jīng)過大量研究發(fā)現(xiàn)，單獨應(yīng)用膠原酶II或膠原酶IV或其組合能夠抑制癌 癥的生長，特別是單獨應(yīng)用膠原酶II對癌癥的生長具有明顯的劑量依賴性抑制作用。本發(fā) 明應(yīng)用的外源性膠原酶II可能在作用于癌細胞的同時，還會作用于細胞外間質(zhì)，通過對間 質(zhì)的水解作用使腫瘤生長失去支撐和必要的營養(yǎng)，同時還可能誘發(fā)或激活一系列的抗腫瘤 免疫反應(yīng)，從而抑制腫瘤的生長和擴散。
[0020] 本申請所述的"藥學(xué)上可接受的載體"指不干擾活性成分的生物活性有效性的載 體。本申請的藥學(xué)上可接受的載體可W為固體或液體，包括藥學(xué)上可接受的賦形劑、緩沖 劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、稀釋劑、封裝劑、填充劑等。例如，藥學(xué)上可接受的緩沖劑進一 步包括磯酸鹽、醋酸鹽、巧樣酸鹽、測酸鹽W及碳酸鹽等。
[0021] 本申請的藥物組合物可W呈現(xiàn)為單位劑量形式，并且可W通過任一制藥領(lǐng)域公知 的方法制備。所有方法都包括將本申請的活性成分與一種或幾種藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合 的步驟。通常，通過將活性成分與液體載體、固體載體或二者結(jié)合來制備組合物，隨后根據(jù) 需要來定型制備的產(chǎn)物。例如，適于胃腸外給藥的組合物可W是包含活性組分的無菌水性 或非水性制劑。可W根據(jù)已知的方法，使用合適的分散劑或濕潤劑W及懸浮劑制備上述制 劑。在可接受的載體或溶劑中，可W使用水、林格氏液W及等滲的氯化鋼溶液等。
[0022] 在某些實施方案中，本發(fā)明所述的抗癌組合物被配制成藥學(xué)上或臨床上可接受的 任一劑型。在優(yōu)選的實施方案中，所述劑型為緩釋劑。更優(yōu)選地，配制的劑型為注射劑或植 入劑。
[0023] 本發(fā)明的"注射劑"是指由藥物制成的供注入體內(nèi)的溶液（包括乳濁液和混懸液） W及供臨用前配成溶液或混懸液的粉末或溶液。所述注射劑包括但不限于水溶液注射劑、 微球注射劑、凝膠型注射劑、脂質(zhì)體注射劑、納米粒注射劑、儲庫型控釋注射劑、無針注射釋 藥系統(tǒng)等。
[0024] 本發(fā)明的"植入劑"指將藥物與輔料制成的小塊狀或條狀供植入體內(nèi)的無菌固體 制劑。植入劑可采用特制的注射器植入，也可用手術(shù)切開植入。本發(fā)明的植入劑還包括W 液體形式注射于人體、在生理條件下轉(zhuǎn)變?yōu)楣腆w或半固體藥物膽庫的植入劑形式，即注射 型原位形成植入劑（inject油Ie in si1:u forming implants)。
[00巧]在優(yōu)選的實施方案中，將本發(fā)明的抗癌組合物制備成局部應(yīng)用的水溶液。優(yōu)選地， 將所述組合物制備成在相對小體積中膠原酶II濃度較高的水溶液?？蛇x地，也可W將本發(fā) 明的抗癌組合物先冷凍干燥，裝在安剖瓶中，臨用前將其配制成適用于注射入腫瘤內(nèi)的藥 學(xué)上可接受的水溶液。
[0026] 優(yōu)選地，用新鮮蒸傭的去離子無菌水來制備用于可注射用溶液的緩沖液?？蒞 使用任何合適的緩沖溶液如磯酸緩沖液、Ringers緩沖液或化is緩沖液來配制抗癌組合 物。優(yōu)選的緩沖液的抑范圍約為6. 0到8. 0,優(yōu)選為6. 5到7. 5。例如，可W使用濃度為 0. 1-0. 25mol/L、優(yōu)選0. 15-0. 2mol/L的氯化鋼來溶解或稀釋組合物。