一種組合物及其在抗肝纖維化藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體設(shè)及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 肝纖維化是慢性肝損傷向肝硬化發(fā)展的動(dòng)態(tài)過程，表現(xiàn)為細(xì)胞外基質(zhì)化CM)大量 合成、分泌，而降解絕對(duì)或相對(duì)不足，使ECM在肝臟內(nèi)彌漫沉積。其起始于肝細(xì)胞化C)壞死， 隨之是炎癥反應(yīng)、纖維生成介質(zhì)釋放，肝星狀細(xì)胞(FSC)激活，最終W肝臟結(jié)締組織成分的 合成與降解明顯失去平衡。肝纖維化是多種慢性肝病共同的病理過程，是影響預(yù)后的重要 因素。
[0003] 過去的20年間，肝纖維化的研究取得了長(zhǎng)足進(jìn)展，證實(shí)肝纖維化與一定程度的肝 硬化都是可逆的。近年來(lái)陸續(xù)出現(xiàn)了一些抗肝纖維化治療方法，包括化學(xué)藥、生物制劑、中 藥與基因療法等，但是理想的臨床治療手段仍然缺乏巧IJ平.加強(qiáng)抗肝纖維化作用機(jī)制的研 究.中華肝病雜志，2005，8( 13): 561)。目前防治肝纖維的關(guān)鍵是針對(duì)與肝星狀細(xì)胞激活相 關(guān)的環(huán)節(jié)，主要是:減輕肝損傷;抑制星狀細(xì)胞激活，減少細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生;調(diào)節(jié)細(xì)胞因子素 亂，促進(jìn)活化肝星狀細(xì)胞調(diào)亡；抑制肝臟成纖維細(xì)胞的增殖W及星狀細(xì)胞激活大量分泌誘 導(dǎo)肝臟成纖維細(xì)胞的增殖。
[0004] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[000引本發(fā)明設(shè)及的化合物I是一個(gè)2011年發(fā)表（Fan-Yu Meng et al.， 2011.Schiglautone A,a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens.Organic Letters 13(2011) 1502-1505)的化合物，我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物 III和化合物IV，并用化合物HI和化合物IV制備了組合物并對(duì)該組合物抗肝纖維化活性進(jìn) 行了評(píng)價(jià)，其具有抗肝纖維化活性。
[0006] 由于肝臟星狀細(xì)胞的激活，從而引起了多種生長(zhǎng)因子的大量分泌，運(yùn)些生長(zhǎng)因子 會(huì)誘導(dǎo)肝臟成纖維細(xì)胞的快速增殖，從而加速纖維化，其中最重要的生長(zhǎng)因子之一就是 TGF。因此，篩選抗肝纖維化藥物的一個(gè)重要思路就是篩選能夠抑制肝臟成纖維細(xì)胞增殖的 藥物或者篩選能夠抑制TGF等生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞的增殖，篩選常常在成纖維細(xì)胞 上進(jìn)行，NIH/3T3細(xì)胞是最常用的細(xì)胞株。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物 中化合物HI和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為60 %和40 %。
[0010] 本發(fā)明公開的組合物可W制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0011] 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗肝纖維化作用。本發(fā)明的藥學(xué)上 可接受的鹽具有同樣的藥效。
[0012] 進(jìn)一步的，組合物的體外實(shí)驗(yàn)表明，組合物具有很強(qiáng)的抗成纖維細(xì)胞增殖的活性， 因此本發(fā)明的組合物有望被用于制備新型抗肝纖維化藥物。
[0013] 進(jìn)一步的，組合物的體外實(shí)驗(yàn)表明，組合物具有很強(qiáng)的抗生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的成纖維 細(xì)胞增殖的活性，組合物是一個(gè)極具開發(fā)潛力的化合物，它可直接用于相應(yīng)疾病的治療W 及相關(guān)藥物的制備。
[0014] W下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加W限定。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 實(shí)施例1化合物Schiglautone A的制備
[0016] 化合物Schiglautone A(I)的制備方法參照!^in-Yu Meng等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Fan-化 Meng et al.,2011.Schiglautone A,a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/ 7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens.Organic Letters 13(2011 )1502-1505)的方法。
[001引實(shí)施例2 Schiglautone A的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0019] 將化合物I(502mg，l.OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四下基漠化錠（TBAB) (0.08旨），1，2-二漠乙燒(7.520旨，40.00111111〇1)和61111的50%氨氧化鋼溶液。混合物在35攝氏 度攬拌化。她之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然后 對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂3次，再用無(wú)水硫酸鋼干燥，最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬=100:1.0，v/v)，收 集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末(508mg，71 % )。
[0020] Ih NMR(500MHz，DMS0-d6)Sl3.40(s，lH)，6.10(s，lH)，5.63(s，lH)，5.53(s，lH), 3.85(d，J = 11.2Hz，4H)，3.52(d，J=10.8Hz，4H)，2.96(s，lH)，2.20(s，lH)，2.16(s，2H)， 2.00(s，lH)，1.84(d，J=13.9Hz，4H)，1.69(s，lH)，1.58(dd，J = 22.2,8.5Hz，4H)，1.51(s， lH),1.47(s,lH),1.26(dd J = 9.1,4.4Hz,4H), 1.21 (s,lH), 1.08-0.98(m,4H), 0.96-0.94 (m，9H)，0.94-0.85(m，6H).
[00^] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.46(s),209.14(s),170.06(s),161.12(s),143.51 (s),132.01(s),127.77(s),85.96(s),82.40(s),70.19(s),69.10(s),57.14(s),52.73 (s)，51.90(s)，45.77(s)，40.67(s)，38.57(s)，38.32(s)，35.04(s)，33.55(s)，33.27(s), 29.85(s),28.98(s),26.71(s),25.50(s),24.05(s),22.31(s),21.06(s),20.56(s),20.00 (s)，18.69(s)，18.11(s)，15.07(s).
[0022] HRMS(ESI)m/z[M-扣-calcd for C34也巧r206:715.2032;found 715.2027.
[0024] 實(shí)施例3 Schiglautone A的0-(嗎嘟基）乙基衍生物（III)的合成
[0025] 將化合物II(358mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙臘當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鐘(345mg， 2.51111]1〇1)，艦化鐘（1681]1旨，1.〇1111]1〇1)和嗎嘟（34841]1旨，4〇1111]1〇1)，混合物加熱回流411。反應(yīng)結(jié)束 后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲燒萃取2次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗涂合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬= 100:0.5，v/v)，收集黃色集中洗脫帶并揮 去溶劑即得到化合物HI的棟色粉末(247.5mg，68 % )。
[0026] Ih 醒R(500MHz，DMS0-d6)Sl5.28(s，lH)，6.10(s，lH)，5.55(s，lH)，5.30(s，lH), 3.53(s，細(xì)），3.46(d，J = 4.5Hz，4H)，2.98(s，lH)，2.52(d，J = l.細(xì)z，4H)，2.45(s，8H)，2.28 (s,2H),2.16(s,lH),1.87-1.77(m,5H),1.78(s,lH),1.67(s,lH),1.59(s,lH),1.57-1.50 (m，3H)，1.46(s，lH)，1.31(s，lH)，1.26(dd，J=19.5，10.甜z，4H)，1.04-0.92(m，10H)，0.89 (s，3H)，0.87(d，J = 20.0Hz，3H)，0.82(s，3H).
[0027] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)S211.29(S)，208.87(S)，169.90(S)，160.93(S)，143.32 (s),131.85(s),127.58(s),85.77(s),82.24(s),66.79(s),66.55(s),65.94(s),56.97 (s),54.25(s),52.72(s),52.54(s),51.71(s),45.61(s),40.48(s),38.38(s),38.16(s), 34.85(s),33.36(s),29.67(s),28.80(s),26.53(s),25.32(s),23.87(s),22.13(s),20.88 (s),20.38(s),19.82(s),18.51(s),17.93(s),14.89(s).
[002引 HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C4抽69化08:729.5054;found:729.5051。
[0030] 實(shí)施例4 Schiglautone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物的合成
[0031] 將化合物II(358mg，0.5mmol)溶于15mL乙臘，加入無(wú)水碳酸鐘（0.345g，2.5mmol)， 艦化鐘(0. 〇84g，0.5mmo 1)和二乙醇胺（1.0514g，1 Ommo 1)，混合物加熱回流化。反應(yīng)結(jié)束后 將反應(yīng)液倒入冷水中，用二氯甲燒萃取=次，合并有機(jī)相，依次用水和飽和食鹽水洗涂，無(wú) 水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑。產(chǎn)物用硅膠柱層析純化(石油酸/丙酬100:1，v/v)，得到 Schiglautone A的0-(二徑乙胺基）乙基衍生物的淡黃色固體(0.199g,52% )。
[0032] Ih NMR(500MHz，DMS