種補(bǔ)氣養(yǎng)血、提高免疫力的中藥組合物,該組合物由下列重量份數(shù)的原料經(jīng)加 工制備而成:仙茅8、白茯苓20、薏苡仁16、川貝母15、洋甘菊23、巖白菜12、北蟲草4。
[0040] 制備方法:
[0041] 1)取配方量的白茯苓和洋甘菊,用體積比為1:5的甲醇和乙酸乙酯的混合溶液回 流提取三次,每次加入原料總重量5倍的混合溶液回流提取2h,合并提取液后,減壓濃縮,得 浸膏待用;
[0042] 2)取配方量的巖白菜、仙茅和北蟲草,用50%-75%的乙醇水溶液回流提取三次, 每次加入原料總重量3倍的乙醇回流提取3h,合并提取液后,減壓濃縮,得浸膏待用;
[0043] 3)取薏苡仁和川貝母,水煎三次,每次原料總重量6倍的水煎液
[0044] 3h,合并水煎液后,減壓濃縮,得細(xì)粉待用;
[0045] 4)將步驟1)和步驟2)得到的浸膏與步驟3)得到的細(xì)粉混合均勻,即得所述組合 物。
[0046] 實(shí)施例7
[0047] -種補(bǔ)氣養(yǎng)血、提高免疫力的中藥組合物,由下列重量份的原料經(jīng)加工制備而成: 仙茅10、白茯苓25、薏苡仁23、川貝母20、洋甘菊30、巖白菜16、北蟲草5、益智仁12、雞公柴 15、洛神花16。制備方法:
[0048] 1)取配方量的白茯苓、洋甘菊和益智仁,用體積比為1:5的甲醇和乙酸乙酯的混合 溶液回流提取三次,每次加入原料總重量3倍的混合溶液回流提取4h,合并提取液后,減壓 濃縮,得浸膏待用;
[0049] 2)取配方量的仙茅、巖白菜、洛神花和北蟲草,用75%的乙醇水溶液回流提取三 次,每次加入原料總重量5倍的乙醇回流提取2h,合并提取液后,減壓濃縮,得浸膏待用;
[0050] 3)取薏苡仁、雞公柴和川貝母,水煎三次,每次原料總重量4倍的水煎液2h,合并水 煎液后,減壓濃縮,得細(xì)粉待用;
[0051] 4)將步驟1)和步驟2)得到的浸膏與步驟3)得到的細(xì)粉混合均勻,即得所述組合 物。
[0052] 實(shí)施例8
[0053] 一種補(bǔ)氣養(yǎng)血、提高免疫力的中藥組合物,由下列重量份的原料經(jīng)加工制備而成: 仙茅5、白茯苓18、薏苡仁10、川貝母12、洋甘菊20、巖白菜8、北蟲草1、益智仁5、雞公柴5、洛 神花5、白芷8、蛇白蘞15。
[0054]制備方法:
[0055] 1)取配方量的白茯苓、洋甘菊、白芷和益智仁,用體積比為1:5的甲醇和乙酸乙酯 的混合溶液回流提取三次,每次加入原料總重量3倍的混合溶液回流提取4h,合并提取液 后,減壓濃縮,得浸膏待用;
[0056] 2)取配方量的仙茅、巖白菜、洛神花和北蟲草,用75%的乙醇水溶液回流提取三 次,每次加入原料總重量5倍的乙醇回流提取2h,合并提取液后,減壓濃縮,得浸膏待用; [0057] 3)取薏苡仁、雞公柴、蛇白蘞和川貝母,水煎三次,每次原料總重量4倍的水煎液 2h,合并水煎液后,減壓濃縮,得細(xì)粉待用;
[0058] 4)將步驟1)和步驟2)得到的浸膏與步驟3)得到的細(xì)粉混合均勻,即得所述組合 物。
[0059]實(shí)施例9膠囊劑 實(shí)施例1所制備的組合物 10g 輔料:乳糖醇 3. 42g: L-香茅醛 1 Hg 乳酸乙酯 1.14g
[0060] 糖胺聚糖 1.91g 輕苯丙酯 0. 95g 羧甲基纖維素鈉 0 893g 聚 丁二烯 5:3:5
[0061 ]制備方法:
[0062] 1)將乳糖醇、L-香茅醛和乳酸乙酯加入到重量加入2倍量的50%乙醇中,充分研磨 至糊狀物,將實(shí)施例1所制備的組合物、三分之二量的糖胺聚糖和的羥苯丙酯混合物、羧甲 基纖維素鈉和聚丁二烯加入到糊狀物中,混合均勻后制濕粒;
[0063] 2)將剩余糖胺聚糖和的羥苯丙酯的混合物和步驟1)得到的濕?;旌暇鶆?,干燥后 過篩,計(jì)量裝入膠囊殼中,得到所述膠囊劑。
[0064]實(shí)施例10膠囊劑 實(shí)施例2所制備的組合物 10g 輔料::乳糖醇 5. 292g L-香茅醛 1.761g 乳酸乙酯 1.7fHg 糖胺聚糖 2.烈3g
[0065] 羥苯丙酯 1. 177g 羧甲基纖維素鈉 1.65g 聚丁二烯 0. 993g 聚乙烯吡咯烷酮 1. 053g 聚三亞甲基碳酸酯 0. 701g 氯化鈉 0. 246g
[0066] 制備方法:
[0067] 1)將聚三亞甲基碳酸酯加入到重量30倍的水中,加入聚乙烯吡咯烷酮和氯化鈉, 混合均勻得到水相,將糖胺聚糖、羥苯丙酯、1/2的乳糖醇、1/2L-香茅醛、1/2乳酸乙酯、羧甲 基纖維素鈉、聚丁二烯和實(shí)施例2所制備的組合物溶于總重量5倍的95%乙醇中,形成油相; 將油相加入到水相中混合均勻,連續(xù)超聲處理25min后,制得初乳;將初乳置于高壓勻質(zhì)機(jī) 中乳化,制得乳液;將乳液超微粉碎,制得粒徑范圍為ΙΟμπι的含藥微囊;
[0068] 2)將步驟1)得到的含藥微囊與剩余的乳糖醇、乳酸乙酯和L-香茅醛混合均勻,制 得混合粉,并計(jì)量后裝入膠囊中,即得所述膠囊劑。
[0069]實(shí)施例11膠囊劑 實(shí)施例3所制備的組合物 1Q g 輔料:乳糖醇 3. 927g 乳酸乙酯 2.618g
[0070] 糖胺聚糖 2. l§:2g 羥苯丙酯 1. &9:l.g 羧甲基纖維素鈉 2.182g
[0071 ]制備方法:按實(shí)施例9所述的方法進(jìn)行制備。
[0072]試驗(yàn)1組合物增強(qiáng)免疫力功能試驗(yàn) [0073] 1試驗(yàn)材料
[0074] 1.1受試藥物:
[0075] 試驗(yàn)1組為實(shí)施例1制備的組合物,試驗(yàn)2組為實(shí)施例2所述的組合物,試驗(yàn)3組為實(shí) 施例3制備的組合物,試驗(yàn)4組為實(shí)施例5制備的組合物,對(duì)照組使用市售藥物"匹多莫德", 天津金世制藥有限公司。
[0076] 1.2試驗(yàn)動(dòng)物:
[0077]昆明種磁性小白鼠,體重18_22g,實(shí)驗(yàn)條件為環(huán)境溫度22 °C~24 °C,濕度45 % -50% 〇
[0078] 2試驗(yàn)方法與結(jié)果
[0079] 2.1試驗(yàn)方法
[0080] 取小鼠隨機(jī)分為六組,及試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組、對(duì)照組和空白組, 每組15只,各組試驗(yàn)劑量均為3g/kg,每天按照上述劑量灌胃一次,其中空白組灌胃等體積 生理鹽水,連續(xù)30天后分別對(duì)小鼠進(jìn)行各項(xiàng)免疫指標(biāo)測(cè)定,具體試驗(yàn)方法如下:
[0081 ] 2.1 · 1小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)測(cè)定:
[0082]于灌胃第26天,給小鼠腹腔注射2%綿羊紅細(xì)胞(SRBC)O. 2ml/只進(jìn)行致敏,于免疫 后第4天每鼠左后足跖部皮下注射20%SRBC(20yl/只)進(jìn)行攻擊。24h后處死小鼠,取每鼠左 后足腸同一部位厚度,計(jì)算攻擊前、后的差值,結(jié)果見表1。
[0083] 2.1.2ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(MTT法):
[0084] 于灌胃第26天對(duì)各組小鼠無菌取脾,制脾細(xì)胞懸液,用RPMI 1640完全培養(yǎng)液調(diào)整 脾細(xì)胞濃度為3 X 106/ml,按照程序中MTT法進(jìn)行淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng),最后在波長(zhǎng)570nm處測(cè) 其吸光度值(A),計(jì)算ConA+(加 ConA孔的A值)與ConA-(不加 ConA孔的A值)各孔的吸光度值 差,結(jié)果見表2。
[0085] 2.1.3抗體生成細(xì)胞(PFC)檢測(cè):
[0086] 試驗(yàn)結(jié)束前5天給小鼠腹腔注射20%SRBC(0.2ml/只)進(jìn)行免疫,于免疫后第5天處 死,解剖無菌取脾并制備脾細(xì)胞懸液,用RPMI 1640完全培養(yǎng)液調(diào)整脾細(xì)胞濃度為為5 X l〇6/ml,按程序方法制備瓊脂糖玻片,在C02培養(yǎng)箱(37 °C、5 % C02)中溫育1.5h后加補(bǔ)體,再 溫育1.5h,計(jì)數(shù)每張瓊脂薄層玻片上形成的溶血空斑數(shù),用溶血空斑數(shù)/10 6脾細(xì)胞表示抗 體生成細(xì)胞數(shù),結(jié)果見表3。
[0087] 2.1.4小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn):
[0088] 于末次給予受試物后各組小鼠腹腔注射20%雞紅細(xì)胞懸液lml/只,間隔30min處 死小鼠,腹腔注人生理鹽水2ml/只,振搖lmin后取腹腔洗液制片,37°C溫育30min,漂洗、固 定后染色鏡檢,計(jì)數(shù)吞噬雞紅的巨噬細(xì)胞數(shù)和巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞數(shù),結(jié)果見表4。
[0089] 2.2試驗(yàn)結(jié)果
[0090] 2.2.1組合物對(duì)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)測(cè)定
[0091] 表1小鼠 DTH測(cè)定結(jié)果(24h)
[0092]
[0093] 由上述試驗(yàn)結(jié)果可看出,試驗(yàn)組小鼠足拓厚度差值相較空白組均有顯著增高,與 對(duì)照相比,均有顯著差異;其中試驗(yàn)3組效果最佳,試驗(yàn)4組其他試驗(yàn)組相比效果略差但也顯 著優(yōu)于對(duì)照組。
[0094] 2.2.2 Co