Schiglautone A衍生物的組合物用于制備抗急性腎衰藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備抗急性腎衰藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有抗急性腎衰的作用，具有開發(fā)抗急性腎衰藥物的價(jià)值。
【專利說明】
Sch i g I autone A衍生物的組合物用于制備抗急性腎衰藥物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 急性腎功能衰竭(Acute Renal Failure，ARF)是由多種原因引起的臨床綜合征， 可見于臨床各科病人，發(fā)病率高且往往帶來嚴(yán)重后果，其特點(diǎn)為短期內(nèi)（數(shù)小時(shí)至數(shù)天）腎 功能急劇下降，臨床表現(xiàn)為急性少尿(尿量<400mLPd)或無尿(尿量〈lOOmLPd)，體內(nèi)氮質(zhì)代 謝產(chǎn)物排出產(chǎn)生障礙，迅速出現(xiàn)氮質(zhì)血癥，水及電解質(zhì)、酸堿平衡紊亂，并引起全身各系統(tǒng) 相應(yīng)功能失調(diào)。引起急性腎衰的主要因素是腎血流量的急劇減少，以及由于腎組織缺血引 起的氧化應(yīng)激和細(xì)胞損傷，最終導(dǎo)致腎臟組織結(jié)構(gòu)的破壞和功能的惡化。目前臨床上尚無 公認(rèn)的治療急性腎衰有效的藥物，僅能通過糾正水電解質(zhì)平衡，糾正酸中毒等對(duì)癥治療措 施改善癥狀，后期還需要通過血液透析維持機(jī)體機(jī)能。在改善腎臟血流灌注障礙和減輕腎 組織損傷方面有明顯療效的臨床藥物少見。
[0003] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)201 1年發(fā)表（Fan-Yu Meng et al .， 2011.Schiglautone A,a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens.Organic Letters 13(2011) 1502-1505)的化合物，我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物 III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合物并對(duì)該組合物抗急性腎衰活性進(jìn) 行了評(píng)價(jià)，其具有抗急性腎衰活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為55%和45%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物用于治療急性腎衰的用途，即用于制備治療急性腎衰 藥物的用途。
[0009] 本發(fā)明的組合物對(duì)急性腎衰疾病有明顯的治療作用。
[0010]通過我們的研究發(fā)現(xiàn)組合物能夠改善腎臟的功能。
[0011] 以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 實(shí)施例1化合物Schiglautone A的制備
[0013] 化合物Schiglautone A(I)的制備方法參照Fan-Yu Meng等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Fan-Yu Meng et al.,2011.Schiglautone A,a New Tricyclic Triterpenoid with a Unique 6/ 7/9-Fused Skeleton from the Stems of Schisandra glaucescens.Organic Letters 13(2011 )1502-1505)的方法。
[0014]
[0015] 實(shí)施例2 Schiglautone A的0-溴乙基衍生物（II)的合成
[0016] 將化合物I(502mg，l.OOmmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙烷(7.52(^，40.00111111〇1)和61^的50%氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝氏 度攪拌Sh13Sh之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然后 對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌3次，再用無水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除溶 劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:1. 〇，v/V)，收 集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(508mg，71 % )。
[0017] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5l3.40(s,lH),6.10(s,lH),5.63(s,lH),5.53(s,lH), 3.85(d,J = 11.2Hz,4H) ,3.52(d,J=10.8Hz,4H) ,2.96(s,lH) ,2.20(s,lH) ,2.16(s,2H), 2.00(s,lH),1.84(d ,J=13.9Hz,4H),1.69(s,lH),1.58(dd ,J = 22.2, 8.5Hz ,4H), 1.51 (s, lH),1.47(s,lH),1.26(dd,J=9.1,4.4Hz,4H),1.21(s,lH),I.08-0.98(m,4H),0.96-0.94 (m,9H),0.94-0.85(m,6H).
[0018] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S211.46(s),209.14(s),170.06(s),161.12(s),143.51 (s) ,132.01(s) ,127.77(s) ,85.96(s),82.40(s),70.19(s),69.10(s),57.14(s),52.73 (s),51.90(s),45.77(s),40.67(s),38.57(s),38.32(s),35.04(s),33.55(s),33.27(s), 29.85(s),28.98(s),26.71(s),25.50(s),24.05(s),22.31(s),21.06(s),20.56(s),20.00 (s),18.69(s),18.11(s),15.07(s).
[0019] HRMS(ESI)m/z[M-H]_calcd for C34HsiBr2O6:715.2032；found 715.2027.
[0020]
[0021] 實(shí)施例3 Schiglautone A的0-(lH-四氮唑基）乙基衍生物（III)的合成
[0022] 將化合物II(358mg，0.5mmoI)溶于15mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmo 1)，碘化鉀（84mg，O · 5mmo 1)和IH-四氮唑（140 Img，20mmo 1)，混合物加熱回流5h。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。因 為互變異構(gòu)作用，在反應(yīng)條件下會(huì)生成IH-四氮唑基和2H-四氮唑基兩種取代產(chǎn)物。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:1，v/v)，收集淡黃色集中洗脫帶，再將 淡黃色洗脫帶濃縮，用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮=100:0.5，v/v)，依次收集 兩個(gè)淡黃色的洗脫帶，濃縮前1個(gè)洗脫帶即得到化合物III的淡黃色固體(79.8mg，23%)。
[0023] 1H NMR(500MHz,DMS0-d6)5l6.29(s,lH),9.99(s,lH),9.93(s,lH),6.25(s,lH), 5.76(s,lH),5.40(s,lH) ,4.57(s, 1H) ,4.38(s , 1H) ,4.32(s, 1H) ,4.21 (s , 1H), 3.96(d J = 11.9Hz,4H),3.33(s,1H),2.55(s,1H),2.51(s,2H),2.39(s,1H),1.98(s, 3H), 1.82-1.76 (m,3H),1.73(s,lH),1.65(d,J=6.5Hz,2H),1.60(s,lH),1.53(s,lH),1.47-1.37(m,4H), 1.30(s,lH) ,1.19(s,lH),1.10(t ,J=12.5Hz,3H) ,1.08(t ,J=12.5Hz,9H) ,1.03(s,3H), 0.86(s,3H).
[0024] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)S211.72(s),209.42(s),170.36(s),161.38(s),145.37 (s),143.80(s),132.29(s),128.04(s),86.25(s),82.68(s),66.14(s),65.60(s),57.33 (s),52.91(s),52.08(s),46.81(s),45.95(s),40.84(s),38.76(s),38.50(s),35.21(s), 33.74(s),30.01(s),29.16(s),26.91(s),25.66(s),24.23(s),22.51(s),21.22(s),20.74 (s),20.20(s),18.85(s),18.29(s),15.27(s).
[0025] HRMS(ESI) :m/z[M+H].calcd for C36H55N8〇6:695.4245;found:695.4248〇
[0026]
7.39(s,2H),7.32(s,2H) ,6.25(s, 1H), 5.64(d J= 18.7Hz , 2H) ,4.34(s , 1H) ,4.28(s,lH), 4.18(d ,J=13.7Hz,2H) ,4.04(s, 2H), 3.99(s , 2H), 3.13(s, 1H), 2.65(s , 2H), 2.26(s, 1H), 2.17(s,lH) ,2.06(s,lH),1.98(s,3H) ,1.87(d,J=16.4Hz,2H) ,1.66(dd,J = 8.0,6.6Hz, 4H),1.62(s,lH),1.49(s,lH),1.41(dd J=19.6,10.4Hz,2H),1.37(d,2H),1.20-l.ll(m, 4H) ,1.07(d,J = 20.0Hz,6H),103(d,J = 20.0Hz,3H),1.01(d,J = 20.0Hz,3H) ,0.95(d J = 20.0Hz,3H).
[0030] 13C NMR(I25MHz,DMS0-d6)δ21I·30(s),208·98(s),169·90(s),160·96(s),146·28 (s),143.34(s),139.64(s),133.48(s),131.85(s),127.61(s),123.92(s), 123.35(s), 118.55(s),110.85(s),85.79(s),82.26(s),67.74(s),67.20(s),57.00(s),52.56(s), 51.73(s),45.63(s),44.94(s),40.49(s),38.42(s),38.17(s),34.86(s),33.40(s),29.68 (s),28.81(s),26.57(s),25.33(s),23.88(s),22.17(s),20.89(s),20.39(s),19.86(s), 18.52(s),17.87(s),14.93(s).
[0031] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for C48H63N4〇6:791.4748;found:791.4744。
[0032]
[0033] 實(shí)施例5組合物對(duì)急性腎衰大鼠的治療作用 [0034](一)實(shí)驗(yàn)方法
[0035] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的55mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的45mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到IOOmg組合物， 使用時(shí)用水溶解這IOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0036]采用肌肉注射甘油致急性腎功能衰竭大鼠動(dòng)物模型。選用180~220g健康雄性SD 大鼠30只，隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組(肌肉注射生理鹽水）；模型組(肌肉注射甘油）；給藥干預(yù) 組(組合物、化合物III或者化合物IV 0.6mg/Kg，肌肉注射甘油），各組大鼠在甘油造模后立 即尾靜脈注射生理鹽水或待試藥物，12和24小時(shí)后再給藥一次。
[0037](二)觀察指標(biāo)
[0038]大鼠末次給藥或生理鹽水后放入代謝籠收集24小時(shí)尿，留尿后6小時(shí)用4%水合 氯醛腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流儀測(cè)定造模后及治療后雙側(cè)腎臟血流量，取平均 值作為單只動(dòng)物腎血流量;取血制備血清，測(cè)定血BUN和Cre(均按試劑盒說明書操作）。 [0039](三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0040] 1.組合物可增加急性腎衰小鼠腎血流量
[0041] 組合物可顯著增加急性腎衰小鼠腎血流量，而化合物III和化合物IV無此作用。
[0042] 表1組合物對(duì)急性腎衰小鼠腎血流量的影響
[0044] *P〈0.05vs急性腎衰模型組
[0045] 2.組合物對(duì)急性腎衰小鼠腎功能具保護(hù)作用
[0046]急性腎衰大鼠靜脈注射生理鹽水24小時(shí)后，血清BUN和Cre見表2。急性腎衰模型組 明顯高于假手術(shù)組，說明模型組動(dòng)物腎功能損害嚴(yán)重。組合物能改善急性腎衰大鼠的腎功 能(P〈0.05)，而化合物III和化合物IV無此作用。見表2。
[0047]表2各試驗(yàn)組大鼠腎功能指標(biāo)比較
[0049] *P〈0.05vs急性腎衰模型組
[0050] 結(jié)論:組合物能夠保護(hù)腎臟的功能，可以用來制備抗急性腎衰藥物。而化合物III 和化合物IV不能夠保護(hù)腎臟，不可用來制備抗急性腎衰藥物。
[0051] 實(shí)施例6本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0052] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0053] 實(shí)施例7本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0054] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物HI和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為55%和45%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為55%和45%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰所引起的腎臟血流量的降低。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰引起的血清BUN的升高。6. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰引起的血清化e的升高。
【文檔編號(hào)】A61K31/4184GK106074525SQ201610416172
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月13日 公開號(hào)201610416172.6, CN 106074525 A, CN 106074525A, CN 201610416172, CN-A-106074525, CN106074525 A, CN106074525A, CN201610416172, CN201610416172.6
【發(fā)明人】陸賢
【申請(qǐng)人】南京廣康協(xié)生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司