一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發(fā)油的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發(fā)油的方法，其包括如下步驟：將藁本藥材粉碎至20～40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度40～60℃、萃取壓力15～25Mpa、CO2流量20～30kg/h，時間為0.5～2小時，收集藁本揮發(fā)油。本發(fā)明的方法提高了從藁本藥材中萃取藁本內(nèi)酯的回收率，同時也提高了藁本內(nèi)酯在總提物中的含量，故而其可以為藁本內(nèi)酯的工業(yè)制備提供高質量的原料。
【專利說明】一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發(fā)油的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于天然藥物領域，特別是涉及一種采用超臨界二氧化碳從藁本中提取揮發(fā)油的方法。
【背景技術】
[0002]藁本(Ligusticum sinense Oliv.)為傘形科藁本屬植物,其藥用部位為根莖。藁本為我國傳統(tǒng)中藥，具有活血行氣，祛風止痛的功效，是風濕痹痛與偏頭痛的常用中藥。
[0003]藁本內(nèi)酯(Ligustilide)為藁本油中的主要成分，據(jù)文獻報道，其對心腦血管、循環(huán)系統(tǒng)、免疫功能等均有較好的藥理作用。
[0004]目前藁本油的提取采用常壓水蒸汽蒸餾提取法、有機溶劑提取法和超臨界萃取。常壓水蒸氣蒸餾提取法的缺點是得率低(藁本內(nèi)酯在高溫下不穩(wěn)定)，且需要長時間的浸泡，耗時過長。有機溶劑提取法很容易將藁本中非活性物質如糖、氨基酸等小分子有機物提取出來，給后來的藁本內(nèi)酯的分離提純帶來了很大的困難。而且有機試劑很難完全去除。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的旨在提供一種采用超臨界二氧化碳從藁本中提取藁本揮發(fā)油的方法。
[0006]具體地說，本發(fā)明的 第一方面是提供了一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發(fā)油的方法，所述方法包括如下步驟:
[0007]將藁本藥材粉碎至20~40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度40~60°C、萃取壓力15~25Mpa、C02流量20~30kg/h，時間為0.5~2小時，收集藁本揮發(fā)油。
[0008]在一優(yōu)選例中，所述干燥步驟包括將粉碎后的藁本藥材在35~50°C下干燥6~10h。
[0009]在另一優(yōu)選例中，所述方法包括如下步驟:將藁本藥材粉碎至40目，在50°C下干燥6h，投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、CO2流量25kg/h，時間為1.5小時，收集藁本揮發(fā)油。
[0010]本發(fā)明各個方面的細節(jié)將在隨后的章節(jié)中得以詳盡描述。通過下文以及權利要求的描述，本發(fā)明的特點、目的和優(yōu)勢將更為明顯。
【具體實施方式】
[0011]本發(fā)明人基于其多年以來使用超臨界萃取藁本藥材的經(jīng)驗，對現(xiàn)有技術中采用超臨界二氧化碳從藁本中提取藁本揮發(fā)油的方法做了進一步的優(yōu)化和改進。
[0012]具體地說，本發(fā)明提供了一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發(fā)油的方法，所述方法包括如下步驟:
[0013]將藁本藥材粉碎至20~40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度40~60°C、萃取壓力15~25Mpa、C02流量20~30kg/h，時間為0.5~2小時，收集藁本揮發(fā)油。[0014]較優(yōu)選地，所述干燥步驟包括將粉碎后的藁本藥材在35~50°C下干燥6~10h。
[0015]更優(yōu)選地，所述方法包括如下步驟:將藁本藥材粉碎至40目，在50°C下干燥6h，投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、C02流量25kg/h，時間為1.5小時，收集藁本揮發(fā)油。
[0016]藁本藥材及其揮發(fā)油中的藁本內(nèi)酯的含量及其轉移率可用液相色譜法測得，具體操作步驟如:取500mg藁本藥材或其揮發(fā)油置于100ml的棕色瓶中，加入25ml甲醇，密閉、稱重、超聲90ml后取出，稱重,補足失重,搖勻,靜置后取上清液過濾后,取5ul進液相。
[0017]測定藁本內(nèi)酯的液相條件如下:Agilent Zorbax C18柱(4.6mmX250mm);流動相:乙腈-水(60:40);檢測波長:350nm ;流速1.0mL.min—1 ;柱溫:20°C ;進樣量:2uL。
[0018]標準品配制:精密稱取蒿苯內(nèi)酯對照品約IOmg,置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約1.0mg/mL的對照品溶液母液。取其中2.5mL溶液置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約0.25mg/mL的對照品溶液，作為常用的含量測定用的標定液。
[0019]供試品配制:密稱取藁本藥材樣品(20目)約0.5g，置60mL具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25mL，密閉，稱重。超聲提取90min，取出稱重，補足失重。搖勻，靜置，取上清液經(jīng)微孔濾過濾，作為供試品溶液。
[0020]本發(fā)明的方法與現(xiàn)有技術相比，其具有如下優(yōu)點:
[0021]I)本發(fā)明的方法在低溫下操作，使藁本內(nèi)酯不易轉化；
[0022]2)本發(fā)明的方法優(yōu)化了超臨界萃取藁本的條件，使得藁本內(nèi)酯能較完全地被提取出來，同時保證了藁本內(nèi)酯在總提物(藁本揮發(fā)油)中的含量；
[0023]3)本發(fā)明的方法操作簡便(不加改性劑)，耗時短(最少僅需0.5小時)，重復性好。
[0024]本發(fā)明的方法提高了從藁本藥材中萃取藁本內(nèi)酯的回收率(80%以上)，同時也提高了藁本內(nèi)酯在總提物中的含量(15~25%)，故而可以為藁本內(nèi)酯的工業(yè)制備提供高質量的原料。
[0025]下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數(shù)、比率、比例、或份數(shù)按
重量計。
[0026]除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學用語與本領域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。
[0027]本發(fā)明提到的上述特征，或實施例提到的特征可以任意組合。本專利說明書所揭示的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特征的一般性例子。
[0028]實施例1藁本揮發(fā)油的超臨界提取(最佳例)
[0029]藁本飲片1kg，粉碎成40目粉末，50°C下干燥6h，將上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、C02流量25kg/h，時間為1.5h，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發(fā)油。最終得藁本揮發(fā)油21.7g，揮發(fā)油得率為2.17%，經(jīng)液相檢測(步驟及條件如下)，其中藁本內(nèi)酯含量為24.5%，藁本內(nèi)酯的轉移率為
95.4%。
[0030]測定藁本內(nèi)酯的步驟如下:取500mg藁本藥材或其揮發(fā)油置于100ml的棕色瓶中，加入25ml甲醇,密閉、稱重、超聲90ml后取出，稱重,補足失重,搖勻,靜置后取上清液過濾后，取5ul進液相。
[0031]測定藁本內(nèi)酯的液相條件如下:Agilent Zorbax C18柱(4.6mmX250mm);流動相:乙腈-水(60:40);檢測波長:350nm ;流速1.0mL.min—1 ;柱溫:20°C ;進樣量:2uL。
[0032]標準品配制:精密稱取蒿苯內(nèi)酯對照品約IOmg,置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約1.0mg/mL的對照品溶液母液。取其中2.5mL溶液置IOmL棕色量瓶容量瓶中，加無水甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得約0.25mg/mL的對照品溶液，作為常用的含量測定用的標定液。
[0033]供試品配制:密稱取樣品(20目)約0.5g，置60mL具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25mL,密閉,稱重。超聲提取90min,取出稱重,補足失重。搖勻,靜置,取上清液經(jīng)微孔濾過濾，作為供試品溶液。
[0034]實施例2藁本揮發(fā)油的超臨界提取
[0035]藁本飲片1kg，粉碎成20目粉末，35°C下干燥10h，將上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度40°C、萃取壓力15Mpa、CO2流量30kg/h，時間為0.5小時，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發(fā)油。最終得藁本揮發(fā)油19.3g，得率為
1.93%，經(jīng)液相檢測(步驟和條件同實施例1)，其中藁本內(nèi)酯含量為23.9%，藁本內(nèi)酯的轉移率為82.8%ο
`[0036]實施例3藁本揮發(fā)油的超臨界提取
[0037]藁本飲片1kg，去除雜質后粉碎成40目粉末，45°C下干燥7h，上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度60°C、萃取壓力25Mpa、CO2流量20kg/h，時間為2小時，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發(fā)油。最終得藁本揮發(fā)油29.6g，得率為
2.96%，經(jīng)液相檢測(步驟和條件同實施例1)，其中藁本內(nèi)酯含量為16.5%，藁本內(nèi)酯的轉移率為87.6%ο
[0038]實施例4藁本揮發(fā)油的超臨界提取
[0039]藁本飲片1kg，去除雜質后粉碎成30目粉末，40°C下干燥8h，上述干燥后的藁本樣品投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度50°C、萃取壓力20Mpa、CO2流量25kg/h，時間為I小時，直接在萃取釜出口用棕色廣口瓶收集藁本揮發(fā)油。最終得藁本揮發(fā)油25.6g，得率為
2.56%，經(jīng)液相檢測(步驟和條件同實施例1)，其中藁本內(nèi)酯含量為17.8%，藁本內(nèi)酯的轉移率為81.7%。
[0040]本發(fā)明所涉及的多個方面已做如上闡述。然而，應理解的是，在不偏離本發(fā)明精神之前提下，本領域專業(yè)人員可對其進行等同改變和修飾，所述改變和修飾同樣落入本申請所附權利要求的覆蓋范圍。
【權利要求】
1.一種超臨界二氧化碳提取藁本揮發(fā)油的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟:將藁本藥材粉碎至20~40目，干燥，投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度40~60°C、萃取壓力15~25Mpa、C02流量20~30kg/h，時間為0.5~2小時，收集藁本揮發(fā)油。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述干燥步驟包括將粉碎后的藁本藥材在35~50°C下干燥6~10h。
3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，它包括如下步驟: 將藁本藥材粉碎至40目，在50°C下干燥6h，投入超臨界萃取裝置中，調(diào)節(jié)萃取溫度55°C、萃取壓力20Mpa、C(V流量25kg/h，時間為1.5小時，收集藁本揮發(fā)油。
【文檔編號】C11B9/02GK103484253SQ201310429044
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月18日 優(yōu)先權日:2013年9月18日
【發(fā)明者】胡佳亮, 鄭向煒, 梁爽, 馮怡 申請人:上海中醫(yī)藥大學