專利名稱：采用二氫異吲哚衍生物抑制淀粉樣蛋白聚集和使淀粉樣蛋白沉積成像的方法
和使淀粉樣蛋白沉積成像的方法淀粉樣沉積的存在會表現(xiàn)在各種疾病中，每一種疾病又與特定結(jié)合的蛋白相關(guān)，如地中海熱、綜合征、自發(fā)性骨髓瘤、淀粉樣多神經(jīng)病、淀粉樣心肌病、系統(tǒng)性老年性淀粉樣變性、淀粉樣多神經(jīng)病、遺傳性腦出血伴淀粉樣變性、早老性癡呆、唐氏綜合征、羊遲發(fā)性病毒感染、Creutzfeldt-Jacob疾病、庫魯病、Gerstmann-Straussler-Scheinker綜合征、甲狀腺髓樣癌、孤立性心房淀粉樣變性、在滲析患者中的β2-微球蛋白淀粉樣蛋白、包涵體肌炎、在肌肉萎縮疾病中的β2-淀粉樣蛋白沉積、鐮狀細(xì)胞性貧血、帕金森氏病、蘭格漢斯島II型糖尿病胰島瘤。
早老性癡呆是一種變性性腦疾病，其臨床特征是，記憶、認(rèn)知、推理、判斷和情緒穩(wěn)定性的進(jìn)行性喪失，逐漸地導(dǎo)致精神頹廢，最終導(dǎo)致死亡。由于早老性癡呆和相關(guān)的變性性腦疾病是日益增加的老年化人口的主要醫(yī)療問題，因此，就迫切需要對此類疾病新的治療方法和診斷方法。
人們一直在尋求一種在患者中進(jìn)行的簡單而無損傷的檢測和定量淀粉樣沉積的方法。目前，對淀粉樣沉積的檢測涉及活組織檢查或尸體解剖材料的組織學(xué)分析。兩種方法均存在嚴(yán)重缺陷。例如，尸體解剖僅可用于驗(yàn)尸診斷。
體內(nèi)淀粉樣沉積的直接成像是非常困難的，這是因?yàn)?，沉積物與正常的組織一樣具有相同的物理性質(zhì)(即，密度和含水量)。直接采用磁共振成像(MRI)和計(jì)算機(jī)輔助斷層攝影術(shù)(CAT)對淀粉樣沉積物進(jìn)行成像的努力并未成功，僅僅在某些特定有利的條件下才能檢測淀粉樣沉積。此外，人們還試圖采用抗體、血清淀粉樣P蛋白或其它蛋白質(zhì)分子來標(biāo)記淀粉樣沉積物，這對于組織外周提供了某些選擇，但是組織內(nèi)部成像還是很差。
因此，用于對患者淀粉樣蛋白沉積進(jìn)行成像和定量的非侵入性技術(shù)是非常有用的。此外，抑制淀粉樣蛋白聚集而形成淀粉樣沉積的化合物也是非常有用的。
在式I化合物的優(yōu)選實(shí)施方案中，X為取代的苯基，取代的苯基具有1-3個取代基，其彼此獨(dú)立地選自-OC1-C6烷基、鹵素、C1-C6烷基、-CF3或苯基。
在式I化合物的優(yōu)選實(shí)施方案中，Y為取代的苯基，取代的苯基具有1-3個取代基，其彼此獨(dú)立地選自-CO2H、-NO2、-OC1-C12烷基、-CN、四唑基、-(CH2)nCO2H、-SO2NR1R2、-CF3、咪唑基、-(CH2)n-四唑基、-(CH2)n咪唑基、-CH＝CH-四唑基或-CH＝CH-咪唑基。
在式I化合物的優(yōu)選實(shí)施方案中，Y為取代的苯基，取代的苯基具有1-3個取代基，其中一個選自-CO2H。
在式I化合物的更優(yōu)選實(shí)施方案中，Y為取代的苯基，其中，取代基為-CO2H，其位于苯環(huán)的2位。
在式I化合物的更優(yōu)選實(shí)施方案中，其中，X為取代的苯基，取代的苯基具有兩個氯取代基，它們位于苯環(huán)的3和4位。
本發(fā)明還提供了具有下式I的化合物或其可藥用鹽 其中X為苯基或取代的苯基，其中，當(dāng)X為取代的苯基時，取代的苯基具有1-4個取代基，其彼此獨(dú)立地選自-OC1-C6烷基、鹵素、C1-C6烷基、-CF3或苯基；Y為苯基、取代的苯基、吡啶基或取代的吡啶基；其中，當(dāng)Y為取代的苯基或取代的吡啶基時，取代的苯基或取代的吡啶基具有1-4取代基，其彼此獨(dú)立地選自-CO2H、-NO2、-OC1-C12烷基、-CN、-CF3、-(CH2)nCO2H、-SO2NR1R2、四唑基、-(CH2)n-四唑基、十氫異喹啉基、苯基、咪唑基、-(CH2)n咪唑基、-CH＝CH-四唑基或-CH＝CH-咪唑基；R1和R2獨(dú)立地為氫或C1-C6烷基；每一個n獨(dú)立地為0-5(含)。
特別優(yōu)選的化合物和其可藥用鹽具有通式II 其中R3為鹵素；R4為氫或鹵素；和R5為氫、鹵素、C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-CF3、-NO2或-NR1R2。
本發(fā)明的另一組優(yōu)選的化合物和其可藥用鹽具有通式III 其中R3為鹵素；R4為氫或鹵素；和R5為氫、鹵素、C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-CF3、-NO2或-NR1R2。
本發(fā)明還提供了下述化合物2-[2-(2，3，4-三甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；5-硝基-2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；4-甲氧基-5-硝基-2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-甲氧基-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(4-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3，4-二甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-聯(lián)苯-4-基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；5-硝基-2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]芐腈；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基]-(2-四唑-1-基-苯基)-胺；{2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯基}-乙酸；3-{2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯基}-丙酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-6-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-硝基苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲磺酰基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-氨磺?；?苯甲酸；4-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-間苯二甲酸；3-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-鄰苯二甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-三氟甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-咪唑-1-基-苯甲酸；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-(2-四唑-1-基甲基-苯基)-胺；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-[2-(2-四唑-1-基-乙基)-苯基]-胺；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-[2-(2-四唑-1-基-乙烯基)-苯基]-胺；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-硝基苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3，5-二硝基-苯甲酸；3-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-2-甲基苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-甲氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-丙氧基-苯甲酸；4-丁氧基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-戊氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-己氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-庚氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-辛氧基-苯甲酸；
2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-壬氧基-苯甲酸；4-癸氧基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-異丙氧基-苯甲酸；2-[2-(4-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-(2-聯(lián)苯基-4-基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-5-硝基-苯甲酸；或2-[2-(3，4-二甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基苯甲酸。
本發(fā)明還提供了包含式I化合物及可藥用載體、稀釋劑或賦形劑的藥物組合物。
本發(fā)明還提供了一種治療早老性癡呆的方法，該方法包括向患有早老性癡呆疾病的患者給藥治療有效量的式I化合物。
本發(fā)明還提供了抑制淀粉樣蛋白聚集以形成淀粉樣沉積的方法，該方法包括向需要抑制淀粉樣蛋白聚集的患者給藥淀粉樣蛋白聚集抑制量的式I化合物。
本發(fā)明還提供了使淀粉樣沉積物成像的方法，包括下述步驟a.向患者引入可檢測量的經(jīng)標(biāo)記的式I化合物或其可藥用鹽
其中X為苯基或取代的苯基；Y為苯基、取代的苯基；其中，取代的苯基可具有1-5個取代基，每一個取代基彼此獨(dú)立地選自-OC1-C12烷基、鹵素、-C1-C6烷基、苯基、 -NR1R1，-(CH2)nCO2H，-(CH2)nCO2R1，-SO2NR1R1，四唑基、-(CH2)n-四唑基、咪唑基、-(CH2)n咪唑基、-CH＝CH-四唑基或-CH＝CH-咪唑基；每一R1獨(dú)立地為氫或C1-C6烷基；每一個n獨(dú)立地為0-5(含)；R″為氫、C1-C6烷基或苯基；和R’為氫、C1-C6烷基、-CF3或苯基。
b.使標(biāo)記的化合物有足夠的時間與淀粉樣沉積物進(jìn)行締合(associated)；和c.檢測與淀粉樣沉積物締合的標(biāo)記的化合物。
在該方法的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，患者患有或懷疑患有早老性癡呆。
在該方法的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，標(biāo)記的化合物為放射性標(biāo)記的化合物。
在該方法的一個優(yōu)選實(shí)施方案中，標(biāo)記的化合物采用MRI進(jìn)行檢測。發(fā)明詳述術(shù)語“烷基”是指直鏈或支鏈的烴基。烷基的代表性實(shí)例為甲基、乙基、丙基、異丙基、異丁基、丁基、叔丁基、仲丁基、戊基和己基。
優(yōu)選的烷基為C1-C6烷基。
術(shù)語“烷氧基”是指連接有氧原子的烷基。烷氧基的代表性實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、叔丁氧基、丙氧基和異丁氧基。
術(shù)語“鹵素”包括氯、氟、溴和碘。
術(shù)語“取代的”是指分子的一個或多個氫原子被另一個原子或原子基團(tuán)取代。例如，取代基包括鹵素、-OH、-CF3、-NO2、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C1-C6烷基、-OC1-C6烷基、-CN、-CF3、-CO2H和-CO2C1-C6烷基。
術(shù)語“取代的苯基”是指其中1-4個氫原子彼此獨(dú)立地被一個取代基代替的苯環(huán)，優(yōu)選取代基選自上面列出的那些。其實(shí)例包括3-氯苯基、2，6-二溴苯基、4-硝基苯基、3，4，5-三甲氧基苯基和3-二乙氨基苯基。
符號“-”是指共價鍵。
本文中所采用的術(shù)語“可藥用鹽、酯、酰胺和前藥”是指本發(fā)明化合物的羧酸鹽、氨基酸加成鹽、酯、酰胺和前藥，在合理的藥物判斷范圍內(nèi)，它們適用于與患者的組織進(jìn)行接觸，無毒、無刺激性、無過敏反應(yīng)等，具有合理的效益/風(fēng)險比，對其使用目標(biāo)是有效的，本發(fā)明的化合物在可能時還為兩性離子形式。術(shù)語“鹽”是指本發(fā)明化合物相對無毒的無機(jī)和有機(jī)酸加成鹽。這些鹽可在化合物的最后分離與純化期間就地生產(chǎn)，或者分別通過使游離堿形式的純化后的化合物與適宜的有機(jī)或無酸酸進(jìn)行反應(yīng)，再分離形成的鹽。代表性的鹽包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、硼酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖酸鹽和十二烷基磺酸鹽等。它們可包含基于堿金屬和堿土金屬的陽離子，如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等，以及無毒的銨、季銨和胺陽離子，包括但不限于銨、四甲基銨、四乙基銨、甲基胺、二甲基胺、三甲基胺、三乙基胺、乙胺等(例如參見，Berge S.M.等，藥用鹽(Pharmaceutical Salts)，藥學(xué)雜志(J.Pharm.Sci.)，661-19(1977)，該文獻(xiàn)引入本文作為參考)。
藥學(xué)上可接受的實(shí)例，本發(fā)明化合物無毒酯包括C1-C6烷基酯，其中，烷基為直鏈或支鏈?？山邮艿孽ミ€包括C5-C7環(huán)烷基酯和芳香基烷基酯，例如但不限于芐基。優(yōu)選C1-C4烷基酯。本發(fā)明化合物酯可以根據(jù)常規(guī)的方法制備。
藥學(xué)上可接受的實(shí)例，本發(fā)明化合物無毒酰胺包括來自氨、伯C1-C6烷基胺和仲C1-C6二烷基胺的酰胺，其中該烷基為直鏈或支鏈。在仲胺的情況下，該胺還可以是含有一個氮原子的5-或6-元雜環(huán)。優(yōu)選來自氨、C1-C3烷基伯酰胺和C1-C2二烷基仲酰胺的酰胺?？梢愿鶕?jù)常規(guī)方法制備本發(fā)明化合物的酰胺。
術(shù)語“前體藥物”指在體內(nèi)快速轉(zhuǎn)化得到上式的母體化合物的化合物，例如通過在血液中的水解。在T.Higuchi和V.Stella，作為新的給藥體系的前體藥物(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series和藥物設(shè)計(jì)中的生物可逆的載體(Bioreversible Carriers in Drug Design)，ed.EdwardB.Roche，美國藥學(xué)會(American Pharmaceutical Association)和Pergamon Press，1987中提供了詳細(xì)的討論，本文引用二者作為參考。
此外，本發(fā)明的化合物可以未溶劑化或與藥學(xué)上可接受的溶劑如水、乙醇等溶劑化的形式存在。一般而言，認(rèn)為在本發(fā)明目的方面溶劑化形式等同于未溶劑化形式。
本發(fā)明化合物可以由于該化合物中不對稱中心的存在而以不同的立體異構(gòu)體形存在?？紤]該化合物的所有立體異構(gòu)形式和其混合物，包括外消旋混合物構(gòu)成本發(fā)明部分。
在本發(fā)明成像方法的第一步，將式I的標(biāo)記化合物以可檢測量引入到組織或患者。該化合物一般為藥學(xué)組合物的部分并采用現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法給予組織或患者。
在本發(fā)明的方法中，可以口服、直腸、不經(jīng)腸道(靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下)、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、膀胱內(nèi)、局部(散劑、軟膏或滴劑)給藥，或者作為口腔或鼻噴霧劑。
適于腸胃外注射的組合物可以包括生理學(xué)上可接受的無菌水或非水溶液、分散體、懸浮體或乳劑和用于重新構(gòu)成無菌可注射溶液或分散體的無菌粉劑。適宜的含水和無水載體、釋釋劑、溶劑或賦形劑的實(shí)例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等等)、其適宜的混合物、植物油(如橄欖油)和可注射的有機(jī)酯如油酸乙酯?？梢员３至己玫牧鲃有?，例如可以采用包衣如卵磷脂，在分散體的情況下保持所需的顆粒大小和采用表面活性劑。
這些組合物還可以包括助劑如防腐劑、濕潤劑、乳化劑和分散劑?？梢圆捎酶鞣N抗菌和抗真菌劑如parabens、氯丁醇、苯酚、山梨酸等來防止微生物的作用。它還可以適宜的包括等滲劑如糖、氯化鈉等等。采用延遲吸收劑如單硬脂酸鋁和明膠可以產(chǎn)生延時吸收的可注射藥劑。
用于口服的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性成分與至少一種惰性的常規(guī)賦形劑(或載體)混合，如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或者(a)填充劑和膨脹劑，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；(b)粘合劑如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠；(c)濕潤劑，如甘油；(d)崩解劑，如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣和碳酸鈉；(e)溶解阻滯劑如石蠟；(f)吸收加速劑，如季銨化合物；(g)濕潤劑如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯；(h)吸附劑如高嶺土和皂粘土；和(i)潤滑劑，如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂酰硫酸鈉或它們的混合物。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，該劑型還可以包括緩沖劑。
類似類型的固體組合物還可以用作采用賦形劑如乳糖或乳糖如高分子量的聚乙二醇等的軟-和硬填充明膠膠囊的填充劑。
可以用包衣和殼如腸包衣和現(xiàn)有技術(shù)中已知的其它包衣制備固體劑型如片劑、糖衣丸、膠囊、丸劑和顆粒劑。它們可以含有遮光劑并還可以是這樣的組合物以延時的方式在腸道的某一部分釋放出活性化合物?？梢杂糜诎窠M合物的實(shí)例是聚合物質(zhì)和蜂蠟。如果合適的話，該活性化合物還可以是與一種或多種上述賦形劑一起的微囊包束的形式。
用于口服的液體劑型包括藥學(xué)上可接受的乳劑、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除了這些活性化合物以外，該液體劑型可以含有現(xiàn)有技術(shù)中常用的惰性稀釋劑，如水和其它溶劑、助溶劑和乳化劑，如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、聚乙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油，尤其是棉籽油、野豆油、玉米胚芽油、橄欖油、海貍油和芝麻油、甘油、氫糠醇、聚乙二醇和脫水山梨糖醇的脂肪酸酯或者這些物質(zhì)的混合物等等。
除了這些惰性稀釋劑以外，該組合物還可包括助劑如濕潤劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、調(diào)味劑和芳香劑。
懸浮液除了該活性化合物以外，可以含有助懸劑，如乙氧基化的異硬脂酰醇、聚氧化乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯，微晶纖維素、間氫氧化鋁、皂粘土、瓊脂-瓊脂和黃芪膠或者這些物質(zhì)的混合物等等。
直腸給藥的組合物優(yōu)選為可以通過混合本發(fā)明混合物與適宜非電離賦形或載體如可可油、聚乙二醇或栓劑蠟等的栓劑，它在常溫下為固體但在體溫下為液體，因而它在直腸或陰道內(nèi)熔解并釋放出活性成分。
用于局部給予本發(fā)明化合物的劑型包括軟膏、散劑、噴霧劑和吸入劑。在無菌條件下將該活性成分與生理學(xué)上可接受的載體和任何防腐劑、緩沖劑或可能需要的拋射劑混合。本發(fā)明的范圍內(nèi)還考慮眼用制劑、眼用軟膏、散劑和溶液。
在本發(fā)明的優(yōu)選的實(shí)施方案中，將標(biāo)記化合物以可檢測的數(shù)量引入到患者，并在經(jīng)過足夠時間使該化合物變成與淀粉狀蛋白沉積物締合之后，在患者體內(nèi)非侵入性檢測該標(biāo)記化合物。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，將式I的標(biāo)記化合物引入到患者，并使該化合物有足夠的時間變成與淀粉狀蛋白沉積物締合，然后從患者身上取出組織試樣，在患者之外檢測組織中的該標(biāo)記化合物。在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，從患者身上取出組織試樣并將式I的標(biāo)記化合物引入到該組織試樣上。在充足的時間使該化合物與淀粉狀蛋白沉積物結(jié)合后，檢測該化合物。
可以通過普遍的或局部給藥途徑將該標(biāo)記化合物給予患者。例如，可以通過使該標(biāo)記化合物被全身轉(zhuǎn)運(yùn)而將其給予患者?；蛘?，將該標(biāo)記化合物給予有興趣的特定的器官或組織。例如，需要在腦部定位和定量淀粉狀蛋白沉積物以診斷或跟蹤患者阿耳茨海默氏病的進(jìn)展。
術(shù)語“組織”是指患者身體的部分。組織的實(shí)例包括腦、心臟、肝臟、血管和動脈。可檢測量為由所選擇的檢測方法檢測所需的標(biāo)記化合物數(shù)量。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地確定用于測定引入到患者身上的標(biāo)記化合物的數(shù)量。例如，可以將增大數(shù)量的標(biāo)記化合物給予患者直到用所選擇的檢測方法檢測到該化合物。將該標(biāo)記引入到該化合物中以檢測該化合物。
術(shù)語“患者”是指人或其它動物。本領(lǐng)域技術(shù)人員也熟悉確定使化合物與淀粉狀蛋白沉積物締合的足夠的時間的量。可以通過以下方法容易地測定所需的時間將可檢測量的式I的標(biāo)記化合物引入到患者身上，然后在給藥后的各時間處檢測該標(biāo)記化合物。式I的標(biāo)記化合物為任何具有至少一個作為其結(jié)構(gòu)的一部分的放射性元素的其化合物。
術(shù)語“締合”是指標(biāo)記化合物和淀粉狀蛋白沉積物之間的化學(xué)相互作用。締合的實(shí)例包括共價鍵、離子鍵、親水-親水相互作用、疏水疏水相互作用和配合物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉各種檢測標(biāo)記化合物的方法。例如，可以使用磁共振成像(MRI)、正電子發(fā)射體層攝影術(shù)(PET)或單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)體層攝影術(shù)(SPECT)檢測放射標(biāo)記的化合物。引入到化合物的標(biāo)記將取決于所需的檢測方法。例如，如果選擇PET作為檢測方法，則該化合物必須具有正電子發(fā)射原子如11C或18F。
式I化合物中適宜標(biāo)記的另一實(shí)例為諸如13C、15N或19F的原子，可以采用有時還被稱為核磁共振(NMR)的磁共振成像(MRI)檢測這些原子。此外，可以通過MRI采用順磁性造影劑檢測式I的標(biāo)記化合物?？梢酝ㄟ^標(biāo)準(zhǔn)合成方法容易地制備具有放射性元素作為其結(jié)構(gòu)一部分的化合物。
另一種檢測的實(shí)例為電子順磁性共振(EPR)。在這種情況下，可以使用現(xiàn)有技術(shù)中已知的EPR探針如硝基氧化物(nitroxides)。
還可以定量進(jìn)行淀粉狀蛋白沉積物成像以可以檢測淀粉狀蛋白沉積物的數(shù)量。
本發(fā)明還提供了一種抑制淀粉狀蛋白聚集形成淀粉狀蛋白沉積物的方法，它通過給予需要抑制淀粉狀蛋白聚集的患者一種淀粉狀蛋白抑制量的式I化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地通過簡單地給予患者式I的化合物，并增大用量直至淀粉狀蛋白沉積物的生長減少或停止來測定淀粉狀蛋白抑制量?？梢圆捎贸上窕驈幕颊呱铣槿〗M織試樣并觀察其中的淀粉狀蛋白沉積物來評價其生長率。
需要抑制淀粉狀蛋白聚集的患者為具有淀粉狀蛋白聚集的疾病或病癥的患者。這種疾病和病癥的實(shí)例包括地中海熱、默-韋綜合癥、自發(fā)性骨髓瘤、淀粉狀蛋白性多神經(jīng)病、淀粉狀蛋白性心肌病、系統(tǒng)性老年淀粉樣變性、淀粉狀蛋白多神經(jīng)病、具有淀粉樣變性的遺傳性小腦出血、阿耳茨海默氏病、唐氏綜合癥、瘙癢病、克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布疾病、庫魯病、格-施-沙綜合癥、甲狀腺骨髓癌、分離的心房淀粉狀蛋白、滲析患者的淀粉狀β2-微球蛋白、包埋體肌炎、肌肉消耗性疾病的β2-淀粉狀蛋白沉積物、鐮狀細(xì)胞性貧血、帕金森氏病和朗格罕島糖尿病2型胰島素瘤。
本發(fā)明還提供了式I的標(biāo)記化合物，其中已用放射性同位素取代該化合物中的一或多個原子。該放射性同位素可以是任意的放射性同位素。但是優(yōu)選3H、123I、125I、131I、11C和18F。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉用于往化合物中引入放射性同位素的方法。例如，制備其中的一個碳原子為11C和14C的式I的化合物，因?yàn)樗且环N標(biāo)記化合物。
可以以大約0.1-1,000mg每天的劑量水平將本發(fā)明的化合物給予患者。對于體重約為70kg的正常成年人，每天大約0.01-100mg每公斤體重的劑量足矣。但是可以采用特定的劑量。例如，該劑量取決于許多因素包括患者的需求、所治療疾病的嚴(yán)重性和所用化合物的藥學(xué)活性。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知具體患者的最佳劑量的測定。
以下所示的實(shí)施例意在說明本發(fā)明的具體實(shí)施方案，而不是意圖以任何方式限定說明書，包括權(quán)利要求。
實(shí)施例可以通過在方案1所列的合成途徑制備式I的化合物。適宜取代的苯胺(I)和5-硝基異苯并呋喃1，3-二酮(II)或類似取代的呋喃在乙酸中被加熱時產(chǎn)生對應(yīng)的鄰苯二甲酰亞胺(III)。(III)的標(biāo)準(zhǔn)氫化條件如Raney-nickel/DMF，產(chǎn)生還原的鄰苯二甲酰亞胺(IV)。采用標(biāo)準(zhǔn)還原劑如氫化鋰鋁還原鄰苯二甲酰亞胺(IV)產(chǎn)生胺(V)。采用Buchwald反應(yīng)條件(J.F.Hartwig，AngewChem.Int.Ed 1998372046-2067)，通過在碳酸銫、三(二亞芐基丙酮)-二鈀(O)和(S)-(2，2’-二(二-對甲苯基膦?；?1，1’-聯(lián)萘)(BINAP)的存在下使(V)和各種取代的2-溴苯甲酸甲基酯(VI)反應(yīng)，可將(V)轉(zhuǎn)化為(VIII)(方法A)。此外，還可以通過在二甲基雙(三甲基甲硅烷基)氨基化鋰(LHMDS)的存在下使(V)與各種取代的2-氟苯甲酸甲基酯的反應(yīng)而得到(VIII)(方法B)。然后采用標(biāo)準(zhǔn)條件如含水氫氧化鈉皂化(VIII)得到期望的式I取代的異二氫吲哚。此外，可以通過在LHMDS的存在下使(V)與2-氟苯甲酸(VII)反應(yīng)而將(V)直接轉(zhuǎn)化成式I的化合物。
方案I
實(shí)施例1制備2-[2-(2，3，4-三甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸步驟A制備5-硝基-2-(2，3，4-三甲氧基-苯基)異吲哚-1，3-二酮將2，3，4-三甲氧基苯基胺(91.61g，0.50mol)和5-硝基異苯并呋喃-1，3-二酮(96.56g，0.5mol)在乙酸(1000mL)中的混合物加熱回流2小時。冷卻后，濾出沉淀，用H2O(1L)，1N NaOH(1.5L)和H2O(1L)洗滌。將形成的沉淀用沸騰的MeOH研制，過濾，隨后在真空爐(67℃)中干燥16小時，得到一種所需產(chǎn)物的黃色固體144.0g(0.40mol，80％)。
熔點(diǎn)(mp)245-247℃。對C17H14N2O4的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，56.98；H，3.94；N，7.82；實(shí)測值C，56.80；H，4.08；N，7.80。步驟B制備5-氨基-2-(2，3，4-三甲氧基-苯基)異吲哚-1，3-二酮在Ra-Ni(12g)存在下，在28-36℃(ΔP＝7.5psi)下，還原5-硝基-2-(2，3，4-三甲氧基-苯基)異吲哚-1，3-二酮(89.0g，0.25mol)在THF(1.25L)，MeOH(1.25L)和DMF(100mL)中的樣品。將反應(yīng)混合物過濾，，并將濾液進(jìn)行真空濃縮，在真空爐(67℃)中干燥16小時，得到所需產(chǎn)物的灰白色固體81.6g(0.25mol，85％)，mp＞280℃。對C17H16N2O5的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，62.09；H，4.92；N，8.52；實(shí)測值C，61.71；H，4.94；N，8.48。
步驟C制備2-(2，3，4-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺在-40℃下，將AlCl3(8.12g，60.92mmol)的THF(200mL)溶液緩慢地加至LiAlH4(1M/THF，183mL，182.75mmol)的THF(100mL)懸浮液中，將其攪拌10分鐘。將溫度升至0℃，再緩慢地滴加入5-氨基-2-(2，3，4-三甲氧基苯基)-異吲哚-1，3-二酮(20.0g，60.92mmol)的THF(500mL)懸浮液。將反應(yīng)混合物攪拌3小時，同時升溫至室溫。將混合物再冷卻至0℃，小心地加入25％NaOH(33mL)，然后加入H2O(7.3mL)。然后，將該混合物在室溫下攪拌2小時，用硅藻土過濾，濃縮，在60℃的真空爐中干燥16小時，得到所需產(chǎn)物的蒼白色固體10.8g(35.96mmol，59％)，mp213-215℃。對C17H20N2O3·0.14H2O的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，67.41；H，6.75；N，9.25；實(shí)測值C，67.03；H，6.62；N，8.98。步驟D1制備2-[2-(2，3，4-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸甲酯在氮?dú)夥障?，?-(2，3，4-三甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(1.2g，4.0mmol)，2-溴-苯甲酸甲酯(0.72g，3.3mmol)，碳酸銫(1.52g，4.7mmol)，三(二亞芐基丙酮-二鈀(O)(91mg，0.1mmol)和(S)-(2，2’-二(二對甲苯基膦?；?1，1’-聯(lián)萘(98％，(S)-tol-BINAP)(102mg，0.15mmol)(L/Pd＝1.5)在無水甲苯(30mL)中的混合物在100℃下加熱24小時。冷卻后，將反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，用硅藻土過濾，充分用乙醚漂洗。將濾液蒸發(fā)至干，得到一種褐色殘余物。通過快速色譜純化(硅膠，10％EtOAc/己烷)，得到1.39g(3.2mmol，80％)的所需產(chǎn)物，mp128-129℃。對C25H26N2O5的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，69.11；H，6.03；N，6.45；實(shí)測值C，69.39；H，5.99；N，6.13。步驟E制備2-[2-(2，3，4-三甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸將2-[2-(2，3，4-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸甲酯(1.30g，2.99mmol)和1N NaOH(aq.)(20.0mL)在EtOH(5.0mL)和THF(20mL)中的溶液加熱回流16小時。真空除去溶劑。將殘余物用H2O稀釋，再用濃HCl酸化至pH1。過濾收集形成的沉淀，再與沸騰的MeOH-H2O(4∶1)研制，在真空爐中干燥16小時，得到實(shí)施例1的化合物，為一種褐色固體(0.96g，2.28mmol，76％)，mp194-195℃。對C24H24N2O5的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，68.56；H，5.75；N，6.66；實(shí)測值C，68.19；H，5.57；N，6.47。
實(shí)施例2制備5-硝基-2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚5-基氨基]苯甲酸在氮?dú)夥障?，?-(2，3，4-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(1.81g，6.03mmol)，2-溴-5-硝基-苯甲酸甲酯(1.49g，6.02mmol)，碳酸銫(2.75g，8.44mmol)，三(二亞芐基丙酮二鈀(O)(166mg，0.18mmol)和(S)-(2，2’-二(二對甲苯基膦?；?1，1’-聯(lián)萘(98％，(S)-tol-BINAP)(184g，0.27mmol)(L/Pd＝1.5)在無水甲苯(30mL)中的混合物在100℃下加熱48小時。將反應(yīng)混合物用乙醚稀釋，用硅藻土過濾，充分用乙醚漂洗。將濾液蒸發(fā)至干，得到一種褐色殘余物(6.3g)。將形成的殘余物溶解于EtOH(10mL)和THF(20mL)中，加入5N NaOH(aq.)(40mL)，將混合物回流16小時。真空除去溶劑。將殘余物用濃HCl酸化至pH3。過濾收集形成的沉淀，再與沸騰的MeOH-H2O(4∶1)研制，在真空爐中干燥16小時，得到實(shí)施例2的化合物，為一種黃色固體(1.8g，3.87mmol，64％)。mp＞220℃。對C24H23N3O7·0.71H2O的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，60.27；H，5.15；N，8.79；實(shí)測值C，59.88；H，4.90；N，8.42。
實(shí)施例3制備4-甲氧基-5-硝基-2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸向冷卻(-78℃)下的2-(2，3，4-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(535mg，1.78mmol)的THF(15mL)溶液中滴加入LHMDS(3.56mL，1M在THF中，3.56mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌10分鐘。再滴加入2-氟-4-甲氧基-5-硝基-苯甲酸甲酯(408g，1.78mmol)的THF(10mL)溶液。將該溶液在-78℃下攪拌30分鐘。再將反應(yīng)混合物逐漸升溫至室溫，再在氮?dú)夥障聰嚢?小時。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋，再用5N HCl酸化(pH3)。將有機(jī)層用干燥(Na2SO4)，過濾和真空濃縮，得到一種褐色殘余物。向該殘余物的EtOH(20mL)和THF(40mL)溶液中，加入5N NaOH(aq.，50mL)，再將混合物回流16小時。除去溶劑，將殘余物用濃HCl酸化(pH3)。過濾收集形成的沉淀，再與沸騰的MeOH-H2O(2∶1)研制，在真空爐中干燥16小時，得到實(shí)施例3的化合物，為一種蒼白色固體(550g，1.11mmol，62％)。mp＞200℃。對C25H25N8·0.42H2O的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，59.09；H，5.18；N，8.35；實(shí)測值C，59.30；H，4.80；N，8.24。
實(shí)施例4制備2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸步驟A制備2-(3，4-二氯苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例1步驟A所述的過程，由3，4-二氯苯基胺(48.6g，0.3mol)和5-硝基-異苯并呋喃-1，3-二酮(57.9g，0.3mol)在乙酸(50mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的黃色固體72.6g(0.22mol，72％)，mp210-211℃。對C14H6N2O4Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，49.88；H，1.79；N，8.31；實(shí)測值C，49.71；H，1.87；N，8.34。
步驟B制備5-氨基-2-(3，4-二氯苯基)-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例1步驟B所述的過程，由2-(3，4-二氯苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮(106.9g，0.32mol)，Ra-Ni(5g)在THF(0.8L)中在20-76℃(AP＝9.5psi)下制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的黃色固體80.0g(0.26mol，81％)，mp255-257℃。對C14H8N2O4Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，54.74；H，2.63；N，9.12；實(shí)測值C，54.59；H，2.65；N，9.57。步驟D1制備2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺采用實(shí)施例1步驟C所述的過程，由5-氨基-2-(3，4-二氯苯基)-異吲哚-1，3-二酮(15.0g，0.049mol)，AlCl3(6.51g，0.049mol)，LiAlH4(5.56g，0.147mol)在THF(1000mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的黃褐色固體，12.23g(0.044mol，90％)，mp207-209℃。對C14H12N2Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，60.23；H，4.33；N，10.03；實(shí)測值C，59.91；H，4.36；N，9.90。步驟C制備2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸采用實(shí)施例2所述的過程，由2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(4.04g，14.47mmol)，2-溴-苯甲酸甲酯(2.59g，12.06mmol)，碳酸銫(5.50g，16.88mmol)，三(二亞芐基丙酮-二鈀(O)(331mg，0.36mmol)和(S)-(2，2’-二(二-對甲苯基膦?；?1，1’-聯(lián)萘(98％，(S)-tol-BINAP)(368g，0.54mmol)(L/Pd＝1.5)在無水甲苯(80mL)和5N NaOH(aq.)(100mL)在EtOH(20mL)和THF(40mL)中制備標(biāo)題化合物，得到所需產(chǎn)物的褐色固體，3.11g(7.79mmol，54％)，mp＞210℃。對C21H16N2O2Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，63.17；H，4.04；N，7.02；Cl，17.76；實(shí)測值C，63.31，H，3.94；N，6.73；Cl，17.75。
實(shí)施例5制備2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸采用實(shí)施例2所述的過程，由2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(3.00g，10.75mmol)，2-溴-5-硝基苯甲酸甲酯(2.67g，10.75mmol)，碳酸銫(4.90g，15.04mmol)，三(二亞芐基丙酮-二鈀(O)(295mg，0.32mmol)和(S)-(2，2’二(二-對甲苯基膦?；?1，1’-聯(lián)萘(98％，(S)-tol-BINAP)(328g，0.48mmol)(L/Pd＝1.5)在無水甲苯(80mL)中和5N NaOH(aq.)(100mL)在EtOH(40mL)和THF(100mL)中制備標(biāo)題化合物，得到所需產(chǎn)物的褐色固體，3.64g(8.19mmol，76％)，mp＞222℃。對C21H15N3O4Cl2·0.1H2O·0.25MeOH的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，56.21；H，3.60；N，9.25；實(shí)測值C，56.54；H，3.74；N，8.86。
實(shí)施例6制備2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-甲氧基-5-硝基-苯甲酸采用實(shí)施例3所述的過程，由2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(801mg，2.87mmol)，LHDMS(5.74mL，1M的THF溶液，5.74mmol)，2-氟-4-甲氧基-5-硝基-苯甲酸甲酯(658g，2.87mmol)的THF(50mL)溶液和5N NaOH(aq.，100mL)的EtOH(20mL)和THF(40mL)溶液制備標(biāo)題化合物，得到所需產(chǎn)物的褐色固體，1.07g(2.26mmol，79％)，mp＞230℃。對C22H17N3O5Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，55.71；H，3.61；N，8.86；實(shí)測值C，55.43；H，3.57；N，8.80。
實(shí)施例7制備2-[2-(3-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸步驟A制備2-(3-氯苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮將3-氯苯胺(31.89g，0.25mol)和5-硝基-異苯并呋喃-1，3-二酮(48.28g，0.250mol)在乙酸(800mL)中的混合物加熱回流4.5小時(130-140℃)。冷卻后，濾出沉淀，用水(650mL)，1N NaOH(330mL)和水(500mL)洗滌，得到一種白色固體狀的產(chǎn)物，61.0lg(0.202mol，81％)，mp210-212℃。對C14H6N2O4Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，55.56；H，2.33；N，9.26；實(shí)測值C，55.78；H，1.69；N，9.15。
步驟B制備5-氨基-2-(3-氯苯基)-異吲哚-1，3-二酮由2-(3-氯-苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮(60.94g，0.20mol)的DMF(1.2L)溶液制備，并在Ra-Ni(60g)存在下，在22＝28℃(AP＝6.0psi)下還原，制備標(biāo)題化合物。將反應(yīng)混合物過濾，并將濾液進(jìn)行真空濃縮，然后在60℃下的真空爐中干燥18小時，獲得所需產(chǎn)物的綠色固體54.31g(0.20mol，99％)，mp203-205℃。對C14H8N2O2Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，61.66；H，3.33；N，10.27；實(shí)測值C，61.27；H，3.40；N，9.98。
步驟C制備2-(3-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺在-40℃下，將AlCl3(4.89g，0.037mol)的THF(200mL)溶液緩慢地加至LiAlH4(4.17g，0.110mol)的THF(150mL)懸浮液中，將其攪拌10分鐘。將溫度升至室溫，再攪拌10分鐘。滴加入5-氨基-2-(3-氯苯基)-異吲哚-1，3-二酮(10g，0.037mol)的THF(300mL)溶液。將反應(yīng)物攪拌3小時，同時將溶液升溫至室溫。再將反應(yīng)物冷卻至0℃，并先用30％NaOH(20mL)，再用H2O(40mL)使反應(yīng)停止。將溶液用硅藻土過濾，濃縮和在60℃的真空爐中干燥16小時，得到所需產(chǎn)物，為一種淺褐色固體，5.24g(0.021mol，58％)，mp178-186℃。對C14H12N2Cl2·0.11mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，68.16；H，5.40；N，11.36；實(shí)測值C，68.33；H，5.46；N，10.96。步驟D2制備2-[2-(3-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸在-78℃下，向THF(100mL)中的2-(3-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(3g，0.012mol)中滴加入LHDMS(36.78mL，1M的THF溶液，36.78mmol)，并在-78℃下攪拌10分鐘。滴加入2-氟苯甲酸(1.72g，.012mol)的THF(100mL)溶液，將溶液在-78℃下攪拌1小時，然后使其逐漸升溫至室溫，并攪拌16小時。將反應(yīng)混合物濃縮，用3M HCl(100mL)酸化，然后用CH2Cl2(3×150mL)萃取。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾和真空濃縮，獲得一種褐色固體。將產(chǎn)物溶解于MeOH(25mL)中，并在室溫下攪拌10分鐘。中入水以沉淀出殘余物。將產(chǎn)物過濾，并用1∶4MeOH∶H2O(400mL)洗滌，得到所需產(chǎn)物的褐色固體，1.02g(2.80mmol，23％)，mp209-212℃。對C22H17N3O5Cl2·0.29mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，68.16；H，4.79；N，7.57；實(shí)測值C，67.76；H，4.56；N，7.83。
實(shí)施例8制備2-[2-(4-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸步驟A制備2-(4-氯苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例1步驟A的過程，由4-氯苯基胺(19.14g，0.150mol)和5-硝基-異苯并呋喃-1，3-二酮(28.97g，0.150mol)在乙酸(300mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的橙色固體，42.49g(0.140mol，94％)，mp198-200℃。對C14H6N2O4Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，55.56；H，2.33；N，9.26；實(shí)測值C，55.52；H，1.74；N，8.90。
步驟B制備5-氨基-2-(4-氯苯基)-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例1步驟B的過程，由2-(4-氯苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮(41.68g，0.138mol)，Ra-Ni(40g)DMF(1.0L)，在20-27℃(AP＝28.5psi)制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的綠色固體，40.13g(0.147mol，107％)，mp0.228-230℃。對C14H8N2O2Cl2·0.34molH2O的實(shí)驗(yàn)分析C，60.31；H，3.50；N，10.05；實(shí)測值C，59.92；H，4.05；N，11.01。
步驟C制備2-(4-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺采用實(shí)施例1步驟C的過程，由5-氨基-2-(4-氯苯基)-異吲哚-1，3-二酮(10.0g，0.037mol)，AlCl3(4.89g，0.037mol)，LiAlH4(4.17g，0.110mol)在THF(650mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的褐色固體，6.39g(0.026mol，71％)，mp204-210℃。對C14H12N2Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，68.72；H，5.35；N，11.45；實(shí)測值C，68.54；H，5.39；N，11.16。步驟D2制備2-[2-(4-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸采用實(shí)施例1步驟D2的過程，由2-(4-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(3g，0.012mol)，LHDMS(36.78mL，1M的THF溶液，36.78mmol)，2-氟苯甲酸(1.72g，0.012mol)在THF(200mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的褐色固體1.26g(0.003mol，28％)，mp210-212℃。對C22H17N3O5Cl2·0.11mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，68.76；H，4.73；N，7.64；實(shí)測值C，68.39；H，4.47；N，7.76。
實(shí)施例9制備2-[2-(3，4-二甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸步驟A制備2-(3，4-二甲基苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例7步驟A的過程，由3，4-二甲基苯胺(30.30g，0.250mol)和5-硝基異苯并呋喃-1，3-二酮(48.28g，0.250mol)在乙酸(500mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的黃色固體，63.37g(0.234mol，94％)，mp173-174℃。對C14H6N2O4Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，64.86；H，4.08；N，9.45；實(shí)測值C，64.87；H，3.74；N，9.39。
步驟B制備5-氨基-2-(3，4-二甲基苯基)-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例7步驟B的過程，由2-(3，4-二甲基苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮(63.37g，0.213mol)，Ra-Ni(50g)DMF(1.0L)，MeOH(500mL)，在22-32℃(ΔP＝4.8psi)下制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的褐色固體，57.67g(0.217mol，100％)，mp215-218℃。對C14H8N2O2Cl2·0.06mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，71.87；H，5.32；N，10.48；實(shí)測值C，71.49；H，5.17；N，10.49。步驟C制備2-(3，4-二甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺采用實(shí)施例7步驟C的過程，由5-氨基-2-(3，4-二甲基苯基)-異吲哚-1，3-二酮(7.5g，0.028mol)，AlCl3(3.75g，0.028mol)，LiAlH4(3.19g，0.084mol)在THF(725mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的淺褐色固體，4.69g(0.020mol，70％)，mp152-155℃。對C14H12N2Cl2·0.09mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，80.09；H，7.64；N，11.67；實(shí)測值C，79.72；H，7.45；N，11.49。步驟D2制備2-[2-(3，4-二甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸采用實(shí)施例7步驟D2的過程，由2-(3，4-二甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(4g，0.017mol)，LHDMS(50.34mL，1M的THF溶液，50.34mmol)，2-氟-苯甲酸(2.35g，0.017mol)在THF(200mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的褐色固體，2.95g(0.008mol，49％)，mp198-202℃。對C22H17N3O5Cl2·0.52mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，75.11；H，6.31；N，7.62；實(shí)測值C，74.73；H，6.02；N，7.75。
實(shí)施例10制備2-[2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚5-基氨基]苯甲酸步驟A制備2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例7步驟A的過程，由5-氨基-2-氯三氯甲苯(48.89g，0.250mol)和5-硝基異苯并呋喃-1，3-二酮(48.28g，0.250mol)在乙酸(500mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需的灰白色固體，84.4g(0.222mol，90％)，mp165-168℃。對C14H6N2O4Cl2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，48.61；H，1.63；N，7.56；實(shí)測值C，48.50；H，1.29；N，7.37。步驟B制備5-氨基-2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-異吲哚-1，3-二酮采用實(shí)施例7步驟B的過程，由2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-5-硝基-異吲哚-1，3-二酮(55.88g，0.150mol)，Ra-Ni(11.5g)DMF(1.0L)在27℃(ΔP＝4.5psi)下制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的黃色固體，56.60g(0.166mol，＞100％)，mp198-201℃。對C14H8N2O2Cl2·0.42mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，51.73；H，2.56；N，8.04；實(shí)測值C，52.12；H，2.70；N，7.62。步驟C制備2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺采用實(shí)施例7步驟C的過程，由5-氨基-2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-異吲哚-1，3-二酮(7.5g，0.022mol)，AlCl3(2.94g，0.022mol)，LiAlH4(2.51g，0.066mol)在THF(700mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的黃色固體，5.78g(0.018mol，84％)，mp148-151℃。對C14H12N2Cl2·0.26mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，56.76；H，3.98；N，8.83；實(shí)測值C，56.42；H，3.79；N，8.43。步驟D2制備2-[2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚5-基氨基]苯甲酸采用實(shí)施例7步驟D2的過程，由2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺](1.75g，0.006mol)，LHDMS(16.80mL，1M的THF溶液，16.80mmol)，2-氟-苯甲酸(0.79g，0.006mol)在THF(200mL)中制備標(biāo)題化合物，獲得所需產(chǎn)物的褐色固體，0.690g(0.002mol，28％)，mp229-233℃。對C22H17N3O5Cl2·0.47mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，59.88；H，3.87；N，6.35；實(shí)測值C，59.48；H，3.81；N，6.60。
實(shí)施例11制備2-[2-(3-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸步驟D2制備2-[2-(3-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸在-78℃下，向來自實(shí)施例7步驟C的2-(3-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-胺(2g，0.008mol)的THF(100mL)溶液中滴加入LHDMS(24.51mL，1M的THF溶液，24.15mmol)，并在-78℃下攪拌10分鐘。滴加入2-氟-5-硝基-苯甲酸(1.51g，0.008mol)的THF(100mL)溶液，將溶液在-78℃下攪拌1小時，逐漸升溫至室溫，再攪拌16小時。將反應(yīng)物濃縮，再用3M HCl(100mL)酸化。濾出形成的固體，用10％HCl酸化，然后真空干燥，獲得一種褐色固體。將產(chǎn)物用MeOH和水進(jìn)行重結(jié)晶，得到所需產(chǎn)物的褐色固體，0.250g(0.0006mmol，7.5％)，mp在130℃下發(fā)生顏色變化，不會熔化＞260℃。對C21H16N3O4Cl·0.24mol H2O的實(shí)驗(yàn)分析C，60.90；H，4.01；N，10.15。實(shí)測值C，60.91；H，4.01；N，9.75。
在上述實(shí)施例所述的一般方法制備下述化合物。
實(shí)施例122-[2-(3，4-二甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。mp＞280℃。對C23H21N3O4的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，68.26；H，5.27；N，10.38；實(shí)測值C，67.87；H，5.17；N，10.29。
實(shí)施例132-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸。mp220-224℃。對C21H18N2O4的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，75.97；H，5.52；N，8.44；實(shí)測值C，75.59；H，5.70；N，8.40。
實(shí)施例142-[2-(3-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。mp＞260℃。對C21H16ClN3的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，60.90；H，4.01；N，10.15；實(shí)測值C，60.91；H，4.01；N，9.75。
實(shí)施例152-[2-(4-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。mp＞275℃，MS410(MH+)。
實(shí)施例16[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基]-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-胺按照實(shí)施例4所述合成，采用四唑氟中間體，其是由商購的2-氟苯甲腈和疊氮化鈉采用標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件制得。mp203-208℃，MS423(M-)。
實(shí)施例175-氨基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸是由來自實(shí)施例5的硝基衍生物與氫氣在雷內(nèi)鎳存在下反應(yīng)制備的，mp242-244℃。對C21H17Cl2N3的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，60.08；H，4.43；N，9.79；實(shí)測值C，60.44；H，4.22；N，9.40。
實(shí)施例185-硝基-2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸。mp＞265℃。對C21H17N3O4的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，67.19；H，4.56；N，11.19；實(shí)測值C，66.98；H，4.30；N，10.86。
實(shí)施例192-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。mp＞260℃。對C22H15ClF3的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，51.55；H，3.71；N，8.20；實(shí)測值C，51.15；H，3.41；N，8.17。
實(shí)施例20
2-[2-(3-氟-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。mp＞265℃，MS392(M+)。
實(shí)施例212-[2-(3-甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。mp＞290℃。對C22H19N3O5的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，64.52；H，4.91；N，10.12；實(shí)測值C，64.84；H，4.90；N，9.72。
實(shí)施例222-[2-(3-氟-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸。MS349(M+)。對C21H17FN2的實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，70.79；H，5.06；N，7.86；實(shí)測值C，70.41；H，4.80；N，7.68。
實(shí)施例232-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-氟-苯甲酸。mp230-236℃，MS417(M+)。
實(shí)施例242-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-煙酸。mp213-225℃。C20H15Cl2N3實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C，59.80；H，3.80；N，10.46；實(shí)測值C，59.41；H，3.82；N，10.21。
實(shí)施例252-[2-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-芐腈。mp129-131℃。C24H23N3O3實(shí)驗(yàn)分析計(jì)算值C71.80；H，5.77；N，10.47；實(shí)測值C，72.09；H，5.64；N，10.23。
實(shí)施例262-[2-(3-甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸。mp206-211℃。
通式I的本發(fā)明的化合物也可采用組合工藝過程制備。該過程可以少量地迅速合成用于實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡亩喾N由通式I包括的類似物，然后，大多數(shù)有效的化合物可通過常規(guī)方法大量合成。例如，對于通式II的化合物來說，一種典型的組合合成工藝過程是使鹵代的苯甲酸酯與胺異吲哚進(jìn)行反應(yīng)，形成相應(yīng)的芳基氨基異吲哚，隨后將其皂化成通式I的羧酸(例如，其中y為苯甲酸部分)。該反應(yīng)按照下述在0.15mmol的規(guī)模下進(jìn)行。將鹵代的苯甲酸酯反應(yīng)物(0.18M)的甲苯溶液放置在2個微量反應(yīng)瓶中。將氨基異吲哚反應(yīng)物溶解于無水甲苯中得到0.15M的溶液。采用Distriman移液管向每個微量反應(yīng)瓶中加入1mL(0.15mmol，1當(dāng)量)的鹵代苯甲酸酯溶液，這些反應(yīng)瓶中包含1mL(0.18mmol，1.2當(dāng)量)的氨基異吲哚反應(yīng)物。通過在甲苯中溶解0.025M的Pd2(dba)3(二鈀-三二亞芐基丙酮)和0.075M的BINAP(2，2’-二(二苯基膦?；?-1，1’-聯(lián)萘)制得催化劑溶液，向每個反應(yīng)瓶中加入0.25mL的催化劑溶液。再向每個反應(yīng)瓶中加入一種堿，通常另入碳酸銫(68mg，0.21mmol，1.40當(dāng)量)，將反應(yīng)瓶蓋上，放置在搖動烘箱中，并在100℃下加熱48小時。然后，將反應(yīng)混合物冷卻，通過蒸發(fā)除去反應(yīng)溶劑。將固體殘余物懸于400μL的乙酸乙酯中，過濾除去所有的催化劑。將濾液經(jīng)蒸發(fā)濃縮至干，得到通式I的化合物，其中，苯甲酸部分被酯化(如芐基或甲基酯)。將酯溶解于500μL的THF/乙醇(1∶1v/v)中，向其中加入300μL的5M氫氧化鈉。將溶液在60℃下?lián)u動5小時，然后冷卻并通過蒸出溶劑而濃縮至干，得到所需的通式I的化合物。
按照如上所述的過程也可制備下述化合物2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；5-硝基-2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-芐腈；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-(2-四唑-1-基-苯基)-胺；{2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯基}乙酸；3-{2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯基}-丙酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-6-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲磺?；?苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-氨磺?；?苯甲酸；4-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-間苯二甲酸；3-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-鄰苯二甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-三氟甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-咪唑-1-基-苯甲酸；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-(2-四唑-1-基-甲基-苯基)-胺；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-[2-(2-四唑-1-基-乙基)-苯基]-胺；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-[2-(2-四唑-1-基-乙烯基)-苯基]-胺；
2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3，5-二硝基-苯甲酸；3-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-2-甲基苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-甲氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-丙氧基-苯甲酸；4-丁氧基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-戊氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-己氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-庚氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-辛氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-壬氧式-苯甲酸；4-癸氧基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-異丙氧基-苯甲酸；2-[2-(4-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-(2-聯(lián)苯-4-基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-硝基-苯甲酸；3-硝基-2-{2-[(4aS，8aR)-4-(八氫-異喹啉-2-基)-苯基]-2，3二氫-1H-異吲哚-5-基氨基}-苯甲酸；2-{2-[(4aS，8aR)-4-(八氫-異喹啉-2-基)-苯基]-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基}-苯甲酸；4-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-煙酸；2-[2-(4-二丁基氨基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3-二丁基氨基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3-溴-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(2-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；5-二丁基氨基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲氧基-苯甲酸；4-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-間苯二甲酸；2-(2-聯(lián)苯-4-基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；2-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二羥基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氟-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3，4，5-三羥基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(4-甲基-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，5-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(2，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；或2-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5基氨基]-苯甲酸。
已在淀粉狀蛋白研究的普通技術(shù)人員所常規(guī)采用的體內(nèi)和體外測定標(biāo)準(zhǔn)中評估了式I化合物，其目的是評估該化合物在防止淀粉狀蛋白形成及其聚集中的用途以及確定其在治療與淀粉狀蛋白有關(guān)的疾病如阿耳茨海默氏病中的潛在用途。以下的測定為良好建立的作為臨床應(yīng)用預(yù)測。
生物學(xué)實(shí)施例淀粉狀蛋白測定BASSR(β-淀粉狀蛋白自播種(self-seeding)放射測定)測定自播種淀粉狀蛋白原纖維生長抑制劑材料儲備液測定緩沖劑-50mM磷酸鈉，pH 7.5，100mM NaCl，0.02％NaN3，1M尿素(過濾并在4℃下貯存)。
在貯存1周以后，在去離子H2O中的可溶Aβ(I-40)肽(Bachem，Torrance，CA)-2.2mg/mL(在-20℃下等分試樣貯存，融化時保持在冰上)將自播種。一般應(yīng)將該溶液貯存直至在該測定中沒有觀察到遲滯期。
在100％乙腈-0.1％三氟乙酸(TFA)-1％β-氫硫基乙醇中的125I-標(biāo)記的Aβ(1-40)-150K-350K cpm/μL(-20℃下等分試樣貯存)。
可以根據(jù)H.LeVine，III在Neurobiol.Aging，16755(1995)中提出的方法制備125I-標(biāo)記的Aβ(1-40)，本文引用其作為參考，或者這種反應(yīng)劑可以從Amersham，Arlington Heights，IIIinois購得。
最終測定條件每一測定在測定緩沖劑的去離子水中的30μM可溶Aβ(1-40)+20-50Kcpm125I-標(biāo)記的Aβ(1-40)。將用于測試的化合物溶于二甲基亞砜(DMSO)，一般5-50mM貯存物，使得在測定中的DMSO的最終濃度為＜1％v/v。
測定用于50個測定(在冰上)的反應(yīng)混合物包括0.1-0.2μL的125I-標(biāo)記的A125I-標(biāo)記的Aβ(1-40)+1μL可溶Aβ(1-40)+13.5μL測定緩沖劑每一測定。以下為足以用于50測定孔的反應(yīng)混合物成分?jǐn)?shù)量。
干燥過的5-10μL125I-標(biāo)記的Aβ(1-40)675μL測定緩沖劑50μL可溶Aβ(1-40)測定方法1)通過混合組分并在冰上貯存而制備反應(yīng)混合物。
2)移取14.5μL的反應(yīng)混合物至處在冰上的聚丙烯U底96-孔微滴平皿(Costar3794)的50孔中的每一孔。
3)將1.7μL的欲測試的稀釋化合物到每一八柱孔中，包括溶劑對照。
在測定緩沖劑中從1mM連續(xù)3倍稀釋(最終100μM)-尿素＝7稀釋物+零。因此每個96-孔平皿可以容納11份試樣+1剛果紅對照(在2-重步驟中最終0.039-5uM)。
4)用鋁薄膜(Beckman538619)熔封該平皿并在冰上培養(yǎng)10分鐘。
5)升高溫度至37℃并培養(yǎng)3-5小時(取決于肽的批量)。
6)除去鋁薄膜并加入200μL/孔的冰冷測定緩沖劑和尿素，通過96-孔平皿上的0.2μm孔大小的GVWP過濾器(Millipore MAGV N22，Bedford，MA)上的真空過濾收集放射標(biāo)記的纖維。采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)方法測定過濾器的放射性。
BASST(β-淀粉狀蛋白自播種，硫黃素T(Thioflavin T))測定自播種淀粉狀蛋白原纖維生長抑制劑方法材料儲備液
測定緩沖劑-50mM磷酸鈉，pH7.5，100mM NaCl，0.02％NaN3，1M尿素(過濾并在4℃下貯存)。
在貯存1周以后，在去離子H2O中的可溶Aβ(I-40)肽-2.2mg/mL(在-20℃下等分試樣貯存，融化時保持在冰上)將自播種。一般應(yīng)將該溶液貯存直至在該測定中沒有觀察到遲滯期。
最終測定條件在測定緩沖劑的去離子水中的30μM可溶Aβ(1-40)。將欲測試的化合物溶于DMSO，一般5-5mM貯存物，使得在該測定中DMSO的最終濃度為＜1％v/v。
測定用于50個測定(在冰上)的反應(yīng)混合物包括1μL可溶Aβ(1-40)+13.5μL測定緩沖劑每一測定。以下為用于50個測定孔的每一孔的反應(yīng)混合物成分?jǐn)?shù)量。
50μL可溶Aβ(1-40)675μL測定緩沖劑測定方法1)通過混合組分并在冰上貯存而制備反應(yīng)混合物。
2)移取14.5μL的反應(yīng)混合物至處在冰上的聚丙烯U底96-孔微滴平皿(Corning25881-96)的50孔中的每一孔。
3)將1.7μL的欲測試的稀釋化合物到每一八柱孔中，包括溶劑對照。在測定緩沖劑中從1mM連續(xù)3倍稀釋(最終100μM)-尿素＝7稀釋物+零。因此每個96-孔平皿可以容納11份試樣+1剛果紅對照(在2-重步驟中最終0.039-5uM)。
4)用鋁薄膜熔封該平皿并在冰上培養(yǎng)10分鐘。
5)升高溫度至37℃并培養(yǎng)3-5小時(取決于肽的批量)。
6)除去鋁薄膜并加入250μL/孔的在50mM甘氨酸-NaOH，pH8.55μM中的硫黃素(ThT)[T-3516，Sigma-Aldrich]，5分鐘內(nèi)讀取平皿閱讀器上的熒光(ex＝440nm/20nm；em＝485nm/20nm)。
BAPA(β-淀粉狀蛋白肽聚集)該測定用于提供測定化合物對β淀粉狀蛋白肽的聚集行為的抑制作用。
該測定的目的在于提供采用基于過濾的末端測定來測定β淀粉狀蛋白聚集體的更高容量的方法。在該測定中，六氟異丙醇(HFIP)用于分解最初的淀粉狀蛋白肽至單體狀態(tài)并采用33pM的濃度，這種高濃度足以使在PH6.0下的聚集在數(shù)小時后發(fā)生。
方法6-淀粉狀蛋白肽聚集，pH6.0(BAPA)在96-孔平皿(Costar3794)中，加入25μl50mM磷酸鹽緩沖劑，在20％HFIP中的pH6.0，10μL0.5mg/mL的Aβ(1-40)肽+0.1μL/測定放射碘處理的125IAβ(1-40)[125I Aβ(1-40)]和1μL起始于50mM的受試化合物和濃度＜1的DMSO。然后在室溫下培養(yǎng)2-4小時。用200μl50mM的磷酸鹽緩沖劑，PH6.0終止反應(yīng)并通過0.2μm96-孔過濾平皿(Millipore MAGU N22)過濾。用100μl的相同磷酸鹽緩沖劑洗滌該過濾平皿。在用Meltilex(1450-441)浸滲該過濾器后和校正背景后在Microbeta計(jì)數(shù)器上檢測聚集BATYM測定方法
所需的Aβ(1-42)(加利福尼亞肽)從它的六氟異丙醇(HFIP)儲備液中干燥得到。將Aβ(1-42)溶于二甲基亞砜(DMSO)然后與磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)(pH7.4)混合。通過0.2μM Omnipore膜注射過濾器(Millipore，Bedford，MA)過濾該混合的Aβ(1-42)溶液。將在DMSO中的受試化合物(50倍濃縮)置于96-孔平皿中的每一孔(0.5μL/孔)。將Aβ(1-42)溶液加到每一孔(24.5μL/孔)。在1,000g下將該平皿離心5分鐘并在37℃培養(yǎng)1天(Aβ1-42；最終濃度100M)。
培養(yǎng)后，將在甘氨酸-NaOH緩沖劑(pH8.5，50mM)中的硫黃素T(ThT)(30μM)溶液加到每孔(250μL/孔)，采用熒光平皿閱讀器測定熒光(ex.440/20nm；em485/20nm)。用下式計(jì)算抑制活性作為熒光的減少。
抑制作用(％)＝{(F(Aβ)-F(Aβ+化合物)}/{F(Aβ)-F(溶劑+化合物)}×100通過采用以下方程式的曲線匹配程序計(jì)算IC50(導(dǎo)致50％聚集抑制作用所需的受試化合物濃度)。數(shù)據(jù)來自三重實(shí)驗(yàn)中的兩組不同實(shí)驗(yàn)。
抑制作用(×)＝100-100/{1+(x/IC50)n}，x＝受試化合物的濃度IC50＝(M)，n＝Hill系數(shù)。
在前面的測定中，式I的代表性化合物已表現(xiàn)出約為1μM至大于100μM范圍的抑制活性(IC50)。這些對本發(fā)明的具體代表性化合物的測定的結(jié)果如以下表1所示。
表1淀粉狀蛋白抑制活性實(shí)施例 BASSRBASST BATYMBAPA號 IC50μM IC50μM IC50μM IC50μM15，6，10，5(P)2，1.6(P) 11.3(P) 7230，20(Q) 3，3(Q) 46.4(Q)＞100，15(R) 15，15(R) 59.7(R)2 30，7.5，10 2，2，2 14.13 15，6.2，3.1，4，6，4.5， 3，2.117.4 6410，12412，11，11(P) 2，2，2(P)26.1(P) 101(P)15，15，15，(Q) 2(Q) 22.2(Q)＞100，93(Q)5 5，4.1，3 3，3，3 11.46 7，7，12(P) 1(P) 13.5(P) 144，5(Q)1.5(Q) 14.6(Q)790，80，＞1001.137.3 288＞100，＞100 1 33.4 199＞100(ppt)，＞1001.532.9 1310100，58，55，70 3 34.6 16112.5，3.8，5.2，1.2(P) 0.8，1 12.6＞10012＞100(ppt) 1.111.7 513＞100(P) 1(P) 90.2，60(P) 4，21(P)＞100(Q) 8(Q) ＞100(Q) 32(Q)＞100(R) 30(R) ＞100(R) 11(R)52(S) 4(S) 79.7(S)60(T) 2(T) 83(T)142.5，1.2，3.8，5.2 0.8，1.0 12.6 ＞10015＞100，＞100 0.632.5 ＞10016＞100，＞100(ppt)1.829.5 861720(ppt)，80 1.520 40
表1(續(xù))實(shí)施例 BASSR BASST BATYM BAPA號 IC50μM IC50μM IC50μMIC50μM187(ppt)，4，5 0.9，1.0，0.6 16.6 97191.1(v-形) 1.0 12.8 ＞101(v-形)1(v-形)20 ＞100 2 11.5 ＞60217，2.2，2.0 0.7 9.64 ＞602210，3，3，6.5，8 6，2 84 ＞6023＞100，50，70 3，2，234.16224 5，18，18 0.8，0.3，0.325 ＞100(ppt)，＞100，＞100 15 ＞100 2526＞100(ppt) 1064.9 ＞60
特定數(shù)值后的括號內(nèi)字母表示受試化合物的批量。例如，10(P)表示受試化合物來自批量P。如果沒有指定批量，則該化合物的批量為批量P。P、Q、R、S和T為該化合物的不同批量。
本發(fā)明的化合物還在常用于評估藥劑治療與淀粉狀蛋白聚集相關(guān)的疾病，特別是阿耳茨海默氏病和其它淀粉樣變性的體內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)測定中表現(xiàn)出良好的活性。在一種測定中，通過皮下注射硝酸銀、Freund’s完全佐劑和靜脈內(nèi)注射淀粉狀蛋白增強(qiáng)因子而將淀粉狀蛋白引到小鼠的脾上。每天給予硝酸銀，經(jīng)過11天。從第1天起至第11天每天給予小鼠受試化合物。在第12天將動物處死并除去脾臟，組織分離，用剛果紅染色并用顯微鏡定量被雙折射的剛果紅染色的淀粉狀蛋白所占據(jù)的脾臟百分區(qū)域。
另一種已評估本發(fā)明化合物的體內(nèi)測定采用轉(zhuǎn)基因小鼠。該小鼠攜帶人β-淀粉狀蛋白前體蛋白轉(zhuǎn)基因和啟動子，如Hsiao等人所述，″轉(zhuǎn)基因小鼠中的相關(guān)的記憶缺陷，Aβ升高，和淀粉狀蛋白斑，″Science1966；27499-102。這些轉(zhuǎn)基因小鼠在約9月齡時產(chǎn)生β-淀粉狀蛋白沉積物。到15個月時，擴(kuò)散和緊湊的衰老斑豐富，主要存在于新皮質(zhì)、嗅球和海馬。讓8月齡的小鼠口服發(fā)明化合物(剛好就在發(fā)生淀粉狀蛋白沉積之前)，并持續(xù)數(shù)個月(直至約14-18個月)。處死動物并除去腦。組織學(xué)和生物化學(xué)定量腦中淀粉狀蛋白的數(shù)量。
以上的數(shù)據(jù)表明代表性的本發(fā)明化合物在用于測定蛋白聚集抑制作用的標(biāo)準(zhǔn)測定中具有活性。該化合物表現(xiàn)出優(yōu)良的特異性，如在BASST測定和BATYM以及BAPA測定中所示。因此這些化合物用于臨床上抑制淀粉狀蛋白的聚集和成像淀粉狀蛋白沉積物以用于診斷。該化合物將以藥物制劑的形式使用，以下的實(shí)施例例舉了典型的組合物。
實(shí)施例27片劑成分 數(shù)量實(shí)施例1的化合物 50mg乳糖 80mg玉米淀粉(用于混合) 10mg玉米淀粉(用于粘合)8mg硬脂酸鎂(1％) 2mg150mg將實(shí)施例1的化合物與乳糖和玉米淀粉(用于混合)混合，并混合均勻至散劑。將玉米淀粉(用于粘合)懸浮在6mL水中并攪拌加熱形成糊劑。將該相加到該混合的散劑中并將該混合物制粒。將濕顆粒通過8號硬篩并在50℃下干燥。用硬脂酸鎂潤滑該混合物并壓制成片劑。以1-4顆每天的速率將該片劑給予患者以預(yù)防淀粉狀蛋白的聚集和治療阿耳茨海默氏病。
實(shí)施例28胃腸道外溶液在700ml的丙二醇和200ml的注射用水溶液中加入20.0g的9號化合物。攪拌該混合物并用鹽酸將PH調(diào)節(jié)至5.5。用注射用水將體積調(diào)節(jié)至1000ml。消毒該溶液，將其裝填至5.0ml的安瓿中，每個安瓿含有2.0ml(40mg的8號化合物)并在氮下封口。將該溶液注射給予患有甲狀腺髓癌和需要治療的患者。
實(shí)施例29貼劑將10毫克的2-{4-[3-(3，4-二氯-苯基)丙基]苯基氨基}苯甲酸與1ml丙二醇和2μg含有樹脂交聯(lián)劑的基于丙烯酸的聚合物粘合劑混合。將該混合物用于非滲透性襯墊(30cm2)，并將其用于患者的上背以持續(xù)釋放治療淀粉狀蛋白多神經(jīng)病。
現(xiàn)在以如此完整、清楚、簡明和確切的術(shù)語描述本發(fā)明及其制造與使用它的方式與方法以使任何屬于本領(lǐng)域的技術(shù)人員制造和使用本發(fā)明。應(yīng)該認(rèn)識到，以上描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，而在不背離權(quán)利要求所述的本發(fā)明的精神和范圍的情況下可對本發(fā)明進(jìn)行改動。為了特別指出和清楚地要求保護(hù)認(rèn)為是本發(fā)明的主題，以下的權(quán)利要求概括了本說明書。
權(quán)利要求
1.式I的化合物或其可藥用鹽 其中X為苯基或取代的苯基；Y為苯基、取代的苯基、吡啶基或取代的吡啶基；其中，取代的苯基和取代的吡啶基可具有1-4個取代基，每一個取代基彼此獨(dú)立地選自-OC1-C12烷基、鹵素、-C1-C6烷基、苯基、 -CO2H，-CO2R1，-NO2，-CF3，-CN，-NR1R2，-(CH2)nCO2H，-(CH2)nCO2R1，-SO2NR1R2，四唑基、-(CH2)n-四唑基、十氫異喹啉基、咪唑基、-(CH2)n咪唑基、-CH＝CH-四唑基、-CH＝CH-咪唑基或苯基；R1和R2獨(dú)立地為氫或C1-C6烷基；每一個n獨(dú)立地為0-5，包括0和5；R″為氫、C1-C6烷基或苯基；和R’為氫、C1-C6烷基、-CF3或苯基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X為取代的苯基，而該取代的苯基具有1-3個取代基，取代基彼此獨(dú)立地選自-OC1-C6烷基、鹵素、C1-C6烷基、-CF3或苯基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y為取代的苯基，而該取代的苯基具有1-3個取代基，取代基彼此獨(dú)立地選自-CO2H、-NO2、-OC1-C12烷基、-CN、四唑基、-(CH2)nCO2H、-SO2NR1R2、-CF3、咪唑基、-(CH2)n-四唑基、-(CH2)n咪唑基、-CH＝CH-四唑基或-CH＝CH-咪唑基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中Y為取代的苯基，而該取代的苯基具有1-3個取代基，取代基之一選自-CO2H。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中基團(tuán)-CO2H位于苯環(huán)的2-位上。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，其中取代的苯基具有兩個氯取代基，它們位于苯環(huán)的3和4位上。
7.式I的化合物或其可藥用鹽 其中X為苯基或取代的苯基，其中，當(dāng)X為取代的苯基時，該取代的苯基具有1-4個取代基，取代基彼此獨(dú)立地選自-OC1-C6烷基、鹵素、C1-C6烷基、-CF3或苯基；Y為苯基或取代的苯基，其中，當(dāng)Y為取代的苯基時，該取代的苯基具有1-4個取代基，取代基彼此獨(dú)立地選自-CO2H、-NO2、-OC1-C12烷基、-CN、-CF3、-(CH2)nCO2H、-SO2NR1R2、四唑基、-(CH2)n-四唑基、咪唑基、-(CH2)n咪唑基、-CH＝CH-四唑基或-CH＝CH-咪唑基；R1和R2獨(dú)立地為氫或C1-C6烷基；和每一個n獨(dú)立地為0-5，包括0和5。
8.化合物2-[2-(2，3，4-三甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；5-硝基-2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；4-甲氧基-5-硝基-2-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-甲氧基-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(4-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(3，4-二甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-(4-氯-3-三氟甲基苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；2-[2-聯(lián)苯-4-基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；或2-[2-(3-氯苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。
9.化合物2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；5-硝基-2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-芐腈；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基]-(2-四唑-1-基-苯基)-胺；{2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯基}-乙酸；3-{2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯基}-丙酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-6-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲磺?；?苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-氨磺?；?苯甲酸；4-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]間苯二甲酸；3-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]鄰苯二甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-三氟甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-咪唑-1-基-苯甲酸；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-(2四唑-1-基-甲基-苯基)-胺；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-[2-(2-四唑-1-基-乙基)-苯基]-胺；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-]-[2-(2-四唑-1-基-乙烯基)-苯基]-胺；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲基-苯甲酸；或2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-甲基-苯甲酸。
10.化合物2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-硝基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3，5-二硝基-苯甲酸；3-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-2-甲基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-甲氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-丙氧基-苯甲酸；4-丁氧基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-戊氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-己氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-庚氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-辛氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-壬氧基-苯甲酸；4-癸氧基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-4-異丙氧基-苯甲酸；2-[2-(4-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-(2-聯(lián)苯-4-基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-5-硝基-苯甲酸；或2-[2-(3，4-二甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸。
11.化合物2-[2-(3，4-二甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；2-[2-(3-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(4-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基]-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-胺；5-氨基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；5-硝基-2-(2-苯基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；2-[2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基-氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3-氟-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3-甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-硝基-苯甲酸；2-[2-(3-氟-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-氟-苯甲酸；和2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-煙酸。
12.化合物2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲氧基-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-3-硝基-苯甲酸；3-硝基-2-{2-[(4aS，8aR)-4-(八氫-異喹啉-2-基)-苯基]-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基}-苯甲酸；2-{2-[(4aS，8aR)-4-(八氫-異喹啉-2-基)-苯基]-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基}-苯甲酸；4-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-煙酸；2-[2-(4-二丁基氨基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3-二丁基氨基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3-溴-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(2-氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]苯甲酸；5-二丁基氨基-2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-5-甲氧基-苯甲酸；4-[2-(3，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-間苯二甲酸；2-(2-聯(lián)苯-4-基-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基)-苯甲酸；2-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二羥基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4-二氟-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3-氟-4-甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4，5-三羥基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(4-甲基-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，5-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(2，4-二氯-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸；2-[2-(3，4，5-三甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-芐腈；或2-[2-(3-甲氧基-苯基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-5-基氨基]-苯甲酸。
13.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1的化合物和其可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
14.一種治療早老性癡呆的方法，該方法包括向患有早老性癡呆的患者給藥治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
15.一種抑制淀粉樣蛋白聚集形成淀粉樣蛋白沉積物的方法，該方法包括向需要抑制淀粉樣蛋白聚集的患者給藥淀粉樣蛋白聚集抑制量的權(quán)利要求1的化合物。
16.一種淀粉樣蛋白沉積物的成像方法，該方法包括如下步驟a.向患者引入可檢測量的標(biāo)記的通式I的化合物或其可藥用鹽 其中X為苯基或取代的苯基；Y為苯基、取代的苯基、吡啶基或取代的吡啶基；其中，取代的苯基和取代的吡啶基可具有1-4個取代基，每一個取代基彼此獨(dú)立地選自-OC1-C12烷基、鹵素、-C1-C6烷基、苯基、-CO2H，-CO2R1，-NO2，-CF3，-CN， -(CH2)nCO2R1，-SO2NR1R2，四唑基、-(CH2)n-四唑基、十氫異喹啉基、咪唑基、-(CH2)n咪唑基、-CH＝CH-四唑基、苯基或-CH＝CH-咪唑基；R1和R2獨(dú)立地為氫或C1-C6烷基；和每一個n獨(dú)立地為0-5，包括0和5；R″為氫、C1-C6烷基或苯基；和R’為氫、C1-C6烷基、-CF3或苯基；b.使標(biāo)記的化合物有足夠的時間與淀粉樣蛋白沉積物締合；和c.對與淀粉樣蛋白沉積物締合的標(biāo)記的化合物進(jìn)行檢測。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中所述患者患有或懷疑患有早老性癡呆。
18.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中標(biāo)記的化合物為放射性標(biāo)記的化合物。
19.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中標(biāo)記的化合物采用MRI進(jìn)行檢測。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種使用式(I)的新化合物治療早老性癡呆的方法,其中X是苯基或取代的苯基;Y是苯基,取代的苯基,吡啶基,或取代的吡啶基。還提供了用式(I)化合物抑制淀粉樣蛋白聚集的方法和用二氫異吲哚衍生物使淀粉樣蛋白沉積成像的方法。
文檔編號C07D209/44GK1355790SQ00808728
公開日2002年6月26日 申請日期2000年5月31日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月10日
發(fā)明者C·E·奧格利薩弗蘭, Y·賴, A·T·薩卡比, L·C·沃克爾 申請人:沃尼爾·朗伯公司