專利名稱：從生產(chǎn)葛粉的廢水中提取葛根黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取葛根黃酮的方法，特別是一種從生產(chǎn)葛粉的廢水中提取葛根黃酮的方法。
葛根為我國傳統(tǒng)中藥，系豆科植物野葛(pueraria Lobata wildohwi)或粉葛(p.thomsonii Benth)的根。我國東南大部分省區(qū)都有分布，資源量較大，是我國已公布的藥食兼用植物。根中含淀粉及葛根黃酮，其淀粉可食，現(xiàn)已開發(fā)為保健食品。葛根中所含的葛根黃酮具有多種藥理活性，如擴張冠狀動脈血管，增加冠狀動脈血流量，降血壓、降血糖、改善腦循環(huán)、抑制血小板凝聚等。產(chǎn)品已進入國內(nèi)外市場，并在東南亞、歐美等國際市場上暢銷。為此，國內(nèi)許多葛粉廠應(yīng)運而生，但規(guī)模較小，資源利用率低，只從葛根中提取了葛粉，而經(jīng)濟價值、藥用價值都較高的葛根黃酮隨廢水白白流失。由于廢水量大、含黃酮濃度低，用一般方法提取其中的黃酮難于奏效。至今尚未看到國內(nèi)外有從生產(chǎn)葛粉的廢水(以下簡稱為廢水)中提取葛根黃酮的報道。
本發(fā)明的目的就是提供一種利用大孔吸附樹脂吸附富集和解吸的性能，從生產(chǎn)葛粉的廢水中提取黃酮的方法。
本發(fā)明可由如下方式來實現(xiàn)將廢水(PH值4-6)流經(jīng)大孔吸附樹脂層析柱進行吸附，或者將大孔吸附樹脂放入廢水中，搖動吸附1小時，二者在完成吸附后，再用有機溶劑洗脫解吸被樹脂吸附的葛根黃酮，減壓回收溶劑可得到粗葛根黃酮。用752紫外光柵分光光度計測其紫外吸收度方法跟蹤檢測黃酮濃度。大孔吸附樹脂是S-8、AB-8、X-5、D4020，本方法適用于含葛根黃酮的水液，包括野葛、粉、峨眉葛(pueraria omeiensis)等的根為原料生產(chǎn)葛粉的廢水，或它們的水提取液或它們的提取物的水溶液，有機溶劑是90-95％的食用乙醇。
本發(fā)明利用了葛粉生產(chǎn)廠家的廢水，提取葛根黃酮，充分利用葛根資源，降低了生產(chǎn)成本，且避免了廢水對環(huán)境的污染。
本發(fā)明方法的操作程序如下1、大孔吸附樹脂，按醫(yī)藥使用標(biāo)準(zhǔn)進行處理先用蒸餾水浸泡48小時并去固體雜質(zhì)，接著用2MOL NaOH溶液浸泡4小時，用水洗至中性后，再用2MOL HCl溶液浸泡8小時，水洗至中性，再用95％食用乙醇洗至少量醇洗液加水不出現(xiàn)白色混濁為止，最后用水洗到洗脫水液無醇味為止。
2、葛根黃酮的檢測①、葛根素標(biāo)樣(中國藥品生物制品檢定所提供化學(xué)對照品，753-200007)的梯度濃度與紫外吸收的相關(guān)性標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制于25ml容量瓶中，加入5mg葛根素，用95％乙醇溶解并定容，精密吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于10ml容量瓶中，分別加入4ml95％乙醇，再分別用水定容至10ml，搖勻，以同樣溶劑為空白對照，在250nm波長處測定各濃度的紫外吸收度，在此區(qū)間內(nèi)，葛根素濃度與相應(yīng)紫外吸收度呈線性關(guān)系，以吸收度為縱座標(biāo)，以濃度(mg/ml)為橫座標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程是Y＝0.075＋43.35X r＝0.9989(y代表紫外吸收度，x代表葛根素濃度)。
②、以葛根素為指標(biāo)測定葛根黃酮含量用752紫外光柵分光光度計測定吸附之前的原始廢水、吸附后的廢水、洗脫液中的葛根黃酮的紫外吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出相應(yīng)的葛根黃酮的濃度，計算出大孔吸附樹脂對葛根黃酮的吸附量，單位干重樹脂的吸附量、洗脫量、洗脫率、提取率等吸附量＝試液中原始含量－試液中的殘留量洗脫率＝洗脫量/吸附量×100％提取率＝洗脫量/試液中原始含量×100％3、測定廢水等含葛根黃酮的水溶液的PH值，為4-6。
4、吸附將處理好的大孔吸附樹脂裝填層析柱中，使過濾后的含葛根黃酮的廢水流經(jīng)層析柱，葛根黃酮被吸附在樹脂上；或把大孔吸附樹脂放進含葛根黃酮的廢水溶液中，搖動吸附1小時，同樣可使葛根黃酮吸附在樹脂上，然后過濾，將樹脂與水分離。
5、洗脫解吸用90～95％食用乙醇洗脫解吸被大孔吸附樹脂吸附的葛根黃酮。
6、減壓回收乙醇，得到粗葛根黃酮。
下面結(jié)合實施例，對本發(fā)明作進一步的描述。
實施例一稱取已處理好的濕基大孔吸附樹脂S-8(干重0.6g)、X-5(干重0.8g)、AB-8(干重0.55g)、D4020(干重0.55g)各2g，分別裝填4根40cm×1.4cm的玻璃層析柱中，用水平衡后進樣。量取4份各20ml的廢水，該廢水取自湖北省隨州市洪山葛粉廠，系由當(dāng)?shù)禺a(chǎn)的野葛根得到，PH值4，含葛根黃酮濃度為1.08mg/ml，分別流經(jīng)上述4種大孔吸附樹脂的層析柱進行吸附，控制流出速度為3-5滴/分，流出液再反復(fù)2次流經(jīng)樹脂，吸附完成后，首先用少量水洗樹脂，再加入20ml95％食用乙醇洗脫解吸被樹脂吸附的葛根黃酮，重復(fù)洗脫3次，洗脫液計有60ml，再加20ml乙醇定容為80ml并稀釋20倍；經(jīng)過吸附后的廢水定容20ml并稀釋至10倍。再用752紫外光柵分光光度計分別以水和95％的食用乙醇為空白對照在250nm波長處測定紫外吸收度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上分別查出乙醇洗脫液中及吸附過的廢水中的葛根黃酮濃度。再計算出各種樹脂的吸附量、單位干重樹脂吸附量、洗脫量、洗脫率、提取率等；減壓回收乙醇洗脫液得到粗葛根黃酮。相關(guān)數(shù)據(jù)詳見表一。表一柱層析吸附中4種樹脂對廢水中葛根黃酮的吸附及洗脫
從上表數(shù)據(jù)看出，4種樹脂以柱層析方式對廢水中的葛根黃酮進行吸附，其吸附量、洗脫量、洗脫率均在90％以上；提取率在86％到94.4％之間，廢水中絕大部分葛根黃酮得到提取。
實施例二稱取2g濕基大孔吸附樹脂S-8(干重0.6g)、X-5(干重0.8g)、AB-8(干重0.5g)、D4020(干重0.5g)分別放入三角瓶中，各加20ml廢水，廢水來源同實施例一，PH值6，葛根黃酮濃度為1.46mg/ml，放入搖床搖動進行吸附1小時，過濾分離樹脂與試液；吸附了葛根黃酮的樹脂用水淋洗后放入三角瓶中，加20ml90％的食用乙醇，放入搖床上搖動進行洗脫解吸2小時，過濾、收集乙醇洗脫液，樹脂再用20ml食用乙醇搖動洗脫，重復(fù)2次，合并三次乙醇洗脫液，定容至80ml，再稀釋20倍，用紫外光柵分光光度計在250nm處測定其吸收度；在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的濃度(這是被洗脫的葛根黃酮的濃度)；經(jīng)過吸附的廢水液定容至20ml并稀釋10倍，測定其紫外吸收度并在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出相對應(yīng)的濃度，這便是吸附后廢水液中殘留的葛根黃酮濃度，其他數(shù)據(jù)由計算得出，列于表二中。減壓回收乙醇洗脫液，得到粗葛根黃酮。各種數(shù)據(jù)詳見表二。表二搖動吸附中4種樹脂對廢水中的葛根黃酮吸附及洗脫
從表二中可以看出，4種樹脂在搖動中對廢水中的葛根黃酮進行吸附與洗脫的效果，均在90％左右，提取率在83.6％與87.6％之間，其效果比大孔吸附樹脂柱層析吸附方法稍低一點，但仍不失為一種從廢水中提取葛根黃酮的有效方法，從便于操作及效果兩方面考慮，柱層析方法優(yōu)于搖動吸附。
權(quán)利要求
1.一種從生產(chǎn)葛粉的廢水中提取葛根黃酮的方法，其特征在于以層析柱和搖動二種方式，用大孔吸附樹脂吸附廢水中的葛根黃酮，廢水PH值為4-6，吸附完成后，用有機溶劑洗脫被樹脂吸附的葛根黃酮，回收溶劑后可得到粗葛根總黃酮。
2.依權(quán)利要求1所述的提取葛根黃酮的方法，其特征在于讓生產(chǎn)葛粉的廢水流經(jīng)大孔吸附樹脂層析柱進行吸附。
3.依權(quán)利要求1所述的提取葛根黃酮的方法，其特征在于將大孔吸附樹脂放入生產(chǎn)葛粉的廢水中，搖動1小時進行吸附。
4.依權(quán)利要求1所述的提取葛根黃酮的方法，其特征在于大孔吸附樹脂是S-8、X-5、AB-8、D4020。
5.依權(quán)利要求1所述的提取葛根黃酮的方法，其特征在于生產(chǎn)葛粉的廢水是野葛、粉葛、峨眉葛的根為原料生產(chǎn)葛粉所產(chǎn)生的廢水。
6.依權(quán)利要求1所述的提取葛根黃酮的方法，其特征在于生產(chǎn)葛粉的廢水是野葛、粉葛、峨眉葛的根為原料的水提取液。
7.依權(quán)利要求1所述的提取葛根黃酮的方法，其特征在于生產(chǎn)葛粉的廢水可用野葛、粉葛、峨眉葛的根為原料的粗提物的水溶液。
8.依權(quán)利要求1所述的提取葛根黃酮的方法，其特征在于有機溶劑是90-95％的食用乙醇。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從生產(chǎn)葛粉的廢水中提取葛根黃酮的方法,其技術(shù)要點是將生產(chǎn)葛粉的廢水流經(jīng)大孔吸附樹脂層析柱或是將大孔吸附樹脂與廢水充分混合搖動進行吸附富集,有機溶劑洗脫被樹脂吸附的葛根黃酮,減壓回收溶劑得到的粗葛根黃酮,本發(fā)明利用了葛粉生產(chǎn)廠家的廢水,提取粗葛根黃酮,提取率在83.6%到94.4%之間,充分利用了葛根資源,降低了成本,且避免了廢水對環(huán)境的污染。
文檔編號C07D311/00GK1326932SQ0111481
公開日2001年12月19日 申請日期2001年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2001年6月14日
發(fā)明者王國亮, 駱雪蘭, 謝維權(quán), 黃巧明, 侯嵩生 申請人:梅縣梅雁生物工程研究所