專利名稱：可作藥物的寡糖和其制備方法及含該寡糖的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于有免疫、抗腫瘤活性的，特別是涉及可用作增強免疫力、抗腫瘤，治療癌癥的保健品或藥物的寡糖。具體的涉及主鏈含α連接的寡糖，本發(fā)明還涉及所述寡糖的制備方法及含該寡糖的藥物組合物。
下圖為香菇多糖重復(fù)單元7糖的結(jié)構(gòu)。

由上結(jié)構(gòu)式可見，七糖中的連接全部為β連接。
本發(fā)明的目的在于確認主鏈含有α連接的寡糖具有免疫、抗腫瘤活性，可做為免疫增強劑、抗腫瘤，治療癌癥的保健品或藥物。
通過寡糖對健康人外周血單核細胞IL-2和TNF-α的基因表達水平的影響以及抑制腫瘤效果的情況進行寡糖的活性試驗。
通過這些試驗確定的有免疫、抗腫瘤活性并能作為增強免疫力、抗腫瘤，治療癌癥的寡糖的新結(jié)構(gòu)為(1)該寡糖主鏈為4糖或5糖。R→R→R→R R→R→R→R→RR＝葡萄糖、半乳糖或甘露糖或其它糖(2)該寡糖主鏈上具有兩個側(cè)鏈。R1R2R1R2↓↓ ↓↓R→R→R→RR→R→R→R→RR，R1，R2＝葡萄糖、半乳糖或甘露糖或其它糖(3)含有這種主鏈和側(cè)鏈基本結(jié)構(gòu)的更大的寡糖(如8糖-14糖)如R1R2R1R1R2R1R2↓↓↓ ↓↓↓↓R→R→R→R→R→R R→R→R→R→R→R→R→R→RR1R2R1R2R1↓↓ ↓↓↓R→R→R→R→R→R R→R→R→R→R→R→RR，R1，R2＝葡萄糖、半乳糖或甘露糖或其它糖所述的4糖或5糖主鏈中的糖為均一的葡萄糖或含有其它糖如含有半乳糖、甘露糖。如主鏈為Glu→Glu→Glu→Glu或Glu→Glu→Glu→Glu→Glu或Man→Glu→Glu→Glu或Man→Glu→Glu→Glu→Glu或Gal→Glu→Glu→Glu或Gal→Glu→Glu→Glu→GluGlu＝葡萄糖，Man＝甘露糖，Gal＝半乳糖所述的主鏈為1→3β或1→3α連接。
如主鏈為β-Glu-1→3-α-Glu-1→3-β-Glu-1→3-Glu或β-Glu-1→3-α-Glu-1→3-β-Glu-1→3-α-Glu-1→3-Glu或α-Man-1→3-α-Glu-1→3-β-Glu-1→3-Glu等所述的寡糖為游離寡糖(還原端為羥基)或為寡糖的烴基(烷基，烯基，炔基、芳基)苷或寡糖肽，其烴基碳鏈長度為1-20。
所述的側(cè)鏈R1及R2為單糖或寡糖。
所述的側(cè)鏈可緊密并排排列，亦可由主鏈的葡萄糖隔開排列。
如R1R2R1R↓ ↓ ↓ ↓R→R→R→RR→R→R→R→R所述的側(cè)鏈中的糖為葡萄糖、或其它的任何種糖。
所述的側(cè)鏈中的糖與主鏈的連接為1→6β或1→6α連接。
所述的側(cè)鏈中的寡糖可以任何方式連接。
所述的優(yōu)選的6糖為下式，βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-Glu式中任何一個葡萄糖的位置可用半乳糖或甘露糖代替，如βGal-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluβGlu-1→3-(βGal-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluβGal-1→3-(βGal-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGal-1→6)-GluαMan-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluαMan-1→3-(αMan-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluαMan-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-Glu所述的優(yōu)選的7糖為下式，βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-βGlu-1→3-Glu式中任何一個葡萄糖的位置可用半乳糖或甘露糖代替，如βGal-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-βGlu-1→3-GluβGlu-1→3-(βGal-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGal-1→6)-βGlu-1→3-GluαMan-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-βGlu-1→3-GluαMan-1→3-(αMan-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-βGlu-1→3-GluβGal-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-βGlu-1→3-GluαMan-1→3-(αMan-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGal-1→6)-βGlu-1→3-Glu本發(fā)明還涉及上述6糖、7糖及更大的糖的合成方法該方法包括以?；咸烟堑娜纫阴啺孵セ螓u代物1為糖基供體，以1，25，6-二-O-異丙叉基的葡萄糖2為糖基受體，首先得到1，3-β-連接的雙糖3，選擇性地水解掉5，6-O-異丙叉基，得到5，6位為游離羥基的雙糖4，再使糖基供體1與糖基受體4偶聯(lián)，得到三糖5，將5在酸性條件下水解得到6、接著乙酰化得到7、再選擇性地脫掉1位的乙?；玫?，對8進行活化，得到三糖供體9。 用類似的方法合成3位為游離羥基的葡萄糖的三糖受體，即用3-O-烯丙基-2，4，6-三-O-乙?；?α-D-葡萄糖的糖基供體10，使其與單糖受體2在路易斯酸催化下，室溫攪拌下偶聯(lián)得到相應(yīng)的雙糖11，水解掉異丙叉基得到雙糖12，使其與1偶聯(lián)得到三糖13，選擇性地水解掉3位的烯丙基，即得到三糖受體14，如下結(jié)構(gòu)式所示 X＝Br或Cl或CCl3C(NH)-(三氯乙酰亞胺基)將等摩爾比的三糖供體9與三糖受體14在路易斯酸催化下，室溫攪拌下偶聯(lián)，得到部分保護的6糖15，水解掉異丙叉基同時擴環(huán)得到16，將16乙?；?，然后用鹼脫掉?；?，即得到游離的6糖18。如下圖所示 X＝Br或Cl或CCl3C(＝NH)O-四糖受體用類似于制備三糖受體14的方法制備。可采用各種方法，這里只例舉一種，即將三糖13水解、擴環(huán)、活化，得到另一個三糖供體19，使其與三位為游離羥基的單糖20偶聯(lián)即得到四糖21，將其三位脫保護，即得到四糖受體22。

R’＝CH3CO-或PhCO- R”＝alkyl或aryl將三糖供體9與四糖受體22偶聯(lián)，得到保護的七糖23，再去保護即得到所需要的七糖24。 用類似的方法，可以合成更大的寡糖如九糖、十糖、十二糖、十四糖等。
所述的糖基供體制備中，R基為乙酰基或苯甲?；琗為溴、氯或三氯乙酰亞胺酯。
所述的糖基受體制備中，R基為乙酰基，氯乙?；?，烯丙基，卞基或取代的芐基等，X為溴、氯或三氯乙睛。
所述的保護的六糖、七糖中，R基為乙酰基或苯甲?；?br> 所述的四糖受體末端基及七糖末端基為α或β連接，非糖體部分為烴基(烷基，烯基，炔基或芳基)，烴基碳鏈長度為1-20。
所述的路易斯酸為銀鹽如碳酸銀、三氟甲磺酸銀，或為三氟化硼，或為三氟甲磺酸三甲基硅酯。
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進行詳細地說明。
實施例1·三糖供體9的制備(1)雙糖3，4的制備
苯甲?；咸烟侨纫阴啺孵?(5.6克，7.56毫摩爾)溶于40毫升二氯甲烷中，得溶液A，1，25，6-二-O-異丙叉基葡萄糖2(2.8克，10.77.毫摩爾)溶于20毫升二氯甲烷中，得溶液B，將B與A混合得溶液C，向C中加入三氟甲磺酸三甲基硅酯(TMSOTF，0.08毫摩爾)，在室溫反應(yīng)二小時后，薄層色譜分析表明反應(yīng)完成。將反應(yīng)液以100毫升二氯甲烷稀釋，用0.5％的HCl/CH3OH溶液稀釋并攪拌1小時，選擇性地水解掉5，6-O-異丙叉基，三乙胺中和，減壓蒸掉溶劑，用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到雙糖4(5.43克)，產(chǎn)率90％。
(2)三糖5的制備 苯甲酰基葡萄糖三氯乙酰亞胺酯1(3.7克，5.01毫摩爾)溶于30毫升二氯甲烷中，得溶液A，雙糖4(4.0克，5.01毫摩爾)溶于30毫升二氯甲烷，得溶液B，將B與A混合得溶液C，在冰鹽浴冷卻下，向C中加入TMSOTF 0.05毫摩爾，然后自然恢復(fù)至室溫，在室溫反應(yīng)3小時后，薄層色譜分析表明反應(yīng)完成。將反應(yīng)液以三乙胺中和，用水洗滌，棄去水相，有機相在真空下抽干，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到純的三糖7(5.86克)，產(chǎn)率85％。
(3)三糖7的制備
三糖5(6.0克，4.36毫摩爾)溶于50毫升80％乙酸水溶液中，在60℃攪拌下水解，用薄層色譜分析檢測反應(yīng)，反應(yīng)完成后。將反應(yīng)液在減壓下蒸干，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到純的三糖6(5.24克)產(chǎn)率90％，將6按常規(guī)方法用乙酸酐/吡啶定量乙?；?，得到全?；娜?。
(4)三糖供體9的制備 三糖7(5.5克，3.76毫克分子)溶于30毫升二甲基甲酰胺中，加入NH4HCO33克，反應(yīng)在室溫下進行，并用薄層色譜分析檢測反應(yīng)，反應(yīng)完成后，減壓蒸干溶劑，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到純的三糖8(4.8克)，產(chǎn)率90％，將8(6克，4.2毫克分子)溶于40毫升二氯甲烷中，加入三氯乙睛3毫升，碳酸鉀3克，室溫下攪23小時，薄層分析表明反應(yīng)完成，用常規(guī)方法進行后處理，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到純的三糖供體9(6.01克)，產(chǎn)率91％。
2·三糖受體14的制備 按1與2偶聯(lián)的條件，使3-O-烯丙基-2，4，6-三-O-乙?；?α-D-葡萄糖三氯乙酰亞胺酯10(4.10克，8.38毫克分子)與1，25，6異丙叉基葡萄糖2(2.13克8.20毫克分子)偶聯(lián)，反應(yīng)完成后，將反應(yīng)液以100毫升二氯甲烷稀釋，用0.5％的HCl/CH3OH溶液稀釋并攪拌1小時，選擇性地水解掉5，6-O-異丙叉基，三乙胺中和，減壓蒸掉溶劑，用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到雙糖12(4.12克)，產(chǎn)率88％。按1與2偶聯(lián)的條件，再使1與雙糖受體12偶聯(lián)，得到三糖13(5.07克，64％)，將13用乙酸酐-吡啶乙?；?，產(chǎn)率98％。將乙?；蟮?3溶于100毫升干燥的甲醇溶液中，加入氯化鈀0.5克，在室溫、攪拌下反應(yīng)，并以薄層分析檢測，當檢測表明烯丙基已被選擇性移除時，過濾，減壓下蒸干溶劑，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到三糖14(4.22克)，產(chǎn)率87％。
3.六糖18的制備 將三糖供體9(3克，1.92毫克分子)與三糖受體14(2.12克，1.91毫克分子)溶于40毫升二氯甲烷中，在冰鹽浴冷卻下加入TMSOTf(0.02亳摩爾)，然后自然恢復(fù)至室溫，在氮氣保護，室溫、攪拌下進行反應(yīng)，用薄層分析檢測，反應(yīng)完成后，用常規(guī)方法后處理，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(2/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，得到六糖15(4.11克)，產(chǎn)率80％。將15(3.5克，1.31毫摩爾)溶于40毫升80％乙酸水溶液中，在60℃攪拌下水解，用薄層色譜分析檢測反應(yīng)，反應(yīng)完成后。將反應(yīng)液在減壓下蒸干，粗產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，用乙酸乙酯/石油醚(2/1)作為淋洗液淋洗，收集相應(yīng)組分，將其按常規(guī)方法用乙酸酐/吡啶定量乙酰化，得到全?；牧?7(3.25克)。產(chǎn)率90％。將17(2克，0.72毫克分子)溶于40毫升甲醇中，用氨飽和，室溫過夜，用薄層分析檢測反應(yīng)，反應(yīng)完成后，減壓蒸干溶劑，用二氯甲烷洗滌，棄掉洗滌液，得到粉末裝產(chǎn)物18(681毫克)，產(chǎn)率95％。4.四糖受體22的制備 R’＝Ac R”＝Me按三糖5轉(zhuǎn)化為三糖供體9的條件，將三糖13轉(zhuǎn)化為三糖供體19，然后按1與2偶聯(lián)的條件，使19(3.12克，2.13毫克分子)與單糖受體20(0.80克，2.50毫克分子)偶聯(lián)，得到4糖21(2.34克，產(chǎn)率69％)。5.七糖24的制備按13到14的過程制備四糖受體22。按9和14偶聯(lián)制備六糖18的方法，由9(2.30克，1.4毫克分子)和22(2.26克，1.45毫克分子)偶聯(lián)，得到七糖23(3.02克，產(chǎn)率70％)。脫保護基得到香菇多糖重復(fù)單元七糖24。

所述的寡糖在使用時可注射或口服(單獨用或與其它物質(zhì)合用)?？捎米髟鰪娒庖吡?、抗腫瘤，治療癌癥的保健品或藥物。
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進行詳細地說明。
1.所述的寡糖對健康人外周血單核細胞IL-2和TNF-α的基因表達水平和活性有顯著影響，在0.5毫克/升-15毫克/升的濃度范圍內(nèi)，隨濃度增加該基因表達水平及活性增加，誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。
2.所述的寡糖對腫瘤的抑制作用所述的寡糖的抗癌及抑制癌細胞轉(zhuǎn)移作用的情況腫瘤 宿主 寡糖劑量途經(jīng) 注射時間 寡糖腫 腫瘤完全(1mg/kg×d) 瘤抑制率消退率肉瘤180 CD-1/JCR 1×10 i.p.1 to 10 10010/10A/J 5×4 i.p 1 to 4 96.59/10DBA/2N5×4 i.p.1 to 4 10010/10SWM/Ms1×10 i.p.1 to 10 10010/10艾氏腹腔癌CD-1/ICR 1×10 i.p.1 to 10 54.70/5CCM腺癌 SWM/Ms1×10 i.p.1 to 10 65.30/10MC.S1纖維肉瘤 A/J 1×10 i.p.1 to 10 10018/18MC.CS1纖維肉瘤DBA/2N1×10 i.p.1 to 10 76.52/7MM-46癌 C3H/HeN 5×2 i.v.13，15 1009/9M-109癌 BALB/c25×2 i.p.15，18 918/22MC-原發(fā)瘤 DBA/2N1×10 i.p.1 to 10 80.52/5MH，134肝癌 C3H/HeN 1×14 i.p.21 to 4010010/14甲基膽蒽 SWM/Ms1×10 i.p.21 to 3183→33％甲基膽蒽 DBA/2N1×10 i.p.14 to 2478→37％腺病12型 C3H/HeN 3×10 i.p.14 to 1879→40％
由此可見，所述的寡糖不僅對S180等同種移植癌而且對同系癌，自發(fā)癌的生長也能明顯抑制，并對化學(xué)致癌，病毒致癌均有預(yù)防效果。
所述的寡糖抑制腫瘤作用的特點是對腫瘤細胞沒有直接細胞毒作用，其作用依賴于宿主；有最適劑量，過量使用使抑制腫瘤作用及免疫增強作用減弱；其作用因小鼠種系不同而有顯著差異。A/J，DBA/2，CD-1等小鼠對寡糖最敏感，腫瘤可完全消失。對C3H/He不消失，BALB/C，CBA中等。對敏感小鼠接種甲基膽蒽(MC)，建立了纖維肉瘤株，以此移植于近交系小鼠后，給與寡糖后腫瘤消失。
所述的寡糖對化學(xué)致癌有強的抑制作用。接種MC 35周后幾乎所有小鼠均發(fā)生癌，但在接種MC 2～3周后開始腹腔投與寡糖，致癌率約降低至30％。這是因為接種MC產(chǎn)生的少數(shù)癌細胞由于注射寡糖增強了免疫功能而被消滅。寡糖還可使腺病毒的致癌率由80％降低至40％。表明寡糖不單是促進免疫排斥的物質(zhì)而是真正的抗癌物質(zhì)。
此外，所述的寡糖對各種細菌，病毒，寄生蟲的感染也有突出效果。
藥物組合物實施例配方實施例1將1000毫克、5000毫克和10000毫克式18的6糖分別溶于1000毫升的1％生理食鹽水中，分別配置成濃度為1毫克/毫升、5毫克/毫升及10毫克/毫升的注射用藥物，此注射藥物通常在使用時配置。配方實施例2使用與上述實施例1配方的相同方法，不同之處在于所用的寡糖為式24的7糖。配方實施例3取99克淀粉、99克葡萄糖和1克6糖，均勻混合，制成片劑，在此可制成1000片，每片為200毫克，內(nèi)含1毫克6糖。配方實施例4使用與上述實施例3配方的相同方法，不同之處在于所用的寡糖為式24的7糖。
權(quán)利要求
1.一種具有免疫、抗腫瘤活性并能作為增強免疫力、抗腫瘤，治療癌癥的寡糖，其特征在于寡糖的結(jié)構(gòu)為(1)該寡糖主鏈為4糖或5糖。R→R→R→R R→R→R→R→RR＝葡萄糖、半乳糖或甘露糖或其它糖(2)該寡糖主鏈上具有兩個側(cè)鏈。R1R2R1R2↓↓ ↓↓R→R→R→RR→R→R→R→RR，R1，R2＝葡萄糖、半乳糖或甘露糖或其它糖(3)含有這種主鏈和側(cè)鏈基本結(jié)構(gòu)的更大的寡糖(如8糖-14糖)如R1R2R1R1R2R1R2↓↓↓ ↓↓↓↓R→R→R→R→R→R R→R→R→R→R→R→R→R→RR1R2R1R2R1↓↓ ↓↓↓R→R→R→R→R→R R→R→R→R→R→R→RR，R1，R2＝葡萄糖、半乳糖或甘露糖或其它糖所述的4糖或5糖主鏈中的糖為均一的葡萄糖或含有其它糖如含有半乳糖、甘露糖。如主鏈為Glu→Glu→Glu→Glu或Glu→Glu→Glu→Glu→Glu或Man→Glu→Glu→Glu或Man→Glu→Glu→→Glu→Glu或Gal→Glu→Glu→Glu或Gal→Glu→Glu→Glu→GluGlu＝葡萄糖，Man＝甘露糖，Gal＝半乳糖所述的主鏈為1→3β或1→3α連接。如主鏈為β→Glu-1→3-α-Glu-1→3-β-Glu-1→3-Glu或β-Glu-1→3-α-Glu-1→3-β-Glu-1→3-α-Glu-1→3-Glu或α-Man-1→3-α-Glu-1→3-β-Glu-1→3-Glu等所述的寡糖為游離寡糖(還原端為羥基)或為寡糖的烴基、芳基苷或寡糖肽。所述的側(cè)鏈R1及R2為單糖或寡糖。所述的側(cè)鏈可緊密并排排列，亦可由主鏈的葡萄糖隔開排列。如R1R2R1R↓ ↓ ↓ ↓R→R→R→RR→R→R→R→R所述的側(cè)鏈中的糖為葡萄糖、或其它的任何種糖。所述的側(cè)鏈中的糖與主鏈的連接為1→6β或1→6α連接。所述的側(cè)鏈中的寡糖可以任何方式連接。所述的優(yōu)選的6糖為下式，βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-Glu式中任何一個葡萄糖的位置可用半乳糖或甘露糖代替，如βGal-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluβGlu-1→3-(βGal-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluβGal-1→3-(βGal-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGal-1→6)-GluαMan-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluαMan-1→3-(αMan-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-GluαMan-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-Glu所述的優(yōu)選的7糖為下式，βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-βGlu-1→3-Glu式中任何一個葡萄糖的位置可用半乳糖或甘露糖代替，如βGal-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGlu-1→6)-βGlu-1→3-GluβGlu-1→3-(βGal-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGal-1→6)-βGlu-1→3-GluαMan-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-βGlu-1→3-GluαMan-1→3-(αMan-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-βGlu-1→3-GluβGal-1→3-(βGlu-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(αMan-1→6)-βGlu-1→3-GluαMan-1→3-(αMan-1→6)-αGlu-1→3-βGlu-1→3-(βGal-1→6)-βGlu-1→3-Glu
2.一種具有免疫、抗腫瘤活性并能作為增強免疫力、抗腫瘤，治療癌癥的寡糖，其特征在于權(quán)利1中所述6糖、7糖及更大的糖的合成方法。該方法包括以?；咸烟堑娜纫阴啺孵セ螓u代物1為糖基供體，以1，25，6-二-O-異丙叉基的葡萄糖2為糖基受體，首先得到1，3-β-連接的雙糖3，選擇性地水解掉5，6-O-異丙叉基，得到5，6位為游離羥基的雙糖4，再使糖基供體1與糖基受體4偶聯(lián)，得到三糖5，將5在酸性條件下水解得到6、接著乙酰化得到7、再選擇性地脫掉1位的乙酰基得到8，對8進行活化，得到三糖供體9。 用類似的方法合成3位為游離羥基的葡萄糖的三糖受體，即用3-O-烯丙基-2，4，6-三-O-乙?；?α-D-葡萄糖的糖基供體10，使其與單糖受體2在路易斯酸催化下，室溫攪拌下偶聯(lián)得到相應(yīng)的雙糖11，水解掉異丙叉基得到雙糖12，使其與1偶聯(lián)得到三糖13，選擇性地水解掉3位的烯丙基，即得到三糖受體14，如下結(jié)構(gòu)式所示 X＝Br或Cl或CCl3C(NH)-(三氯乙酰亞胺基)將等摩爾比的三糖供體9與三糖受體14在路易斯酸催化下，室溫攪拌下偶聯(lián)，得到部分保護的6糖15，水解掉異丙叉基同時擴環(huán)得到16，將16乙?；?，然后用鹼脫掉?；?，即得到游離的6糖18。如下圖所示 X＝Br或Cl或CCl3C(＝NH)O-四糖受體用類似于制備三糖受體14的方法制備。可采用各種方法，這里只例舉一種，即將三糖13水解、擴環(huán)、活化，得到另一個三糖供體19，使其與三位為游離羥基的單糖20偶聯(lián)即得到四糖21，將其三位脫保護，即得到四糖受體22。 R’＝CH3CO-或PhCO- R”＝alkyl或aryl將三糖供體9與四糖受體22偶聯(lián)，得到保護的七糖23，再去保護即得到所需要的七糖24。 用類似的方法，可以合成更大的寡糖如九糖、十糖、十二糖、十四糖等。所述的糖基供體制備中，R基為乙酰基或苯甲?；?，X為溴、氯或三氯乙酰亞胺酯。所述的糖基受體制備中，R基為乙?；?，氯乙酰基，烯丙基，卞基或取代的芐基等，X為溴、氯或三氯乙睛。所述的保護的六糖、七糖中，R基為乙?；虮郊柞；?。所述的四糖受體末端基及七糖末端基為α或β連接，非糖體部分為烴基。所述的路易斯酸為銀鹽如碳酸銀、三氟甲磺酸銀，或為三氟化硼，或為三氟甲磺酸三甲基硅酯。
3.一種具有免疫、抗腫瘤活性并能作為增強免疫力、抗腫瘤，治療癌癥的寡糖，其特征在于所述的寡糖在使用時可注射或口服(單獨用或與其它物質(zhì)合用)?？捎米髟鰪娒庖吡?、抗腫瘤，治療癌癥的保健品或藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及有重要抗腫瘤作用的葡萄六糖、七糖的結(jié)構(gòu)及制備。其結(jié)構(gòu)為β，α交替的1－3連接主鏈，帶有1－6連接的側(cè)鏈。采用三糖加三糖或三糖加四糖的策略制備。
文檔編號C07H3/06GK1394867SQ01136218
公開日2003年2月5日 申請日期2001年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月6日
發(fā)明者寧君, 孫繁祚 申請人:中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心