專利名稱：具有抗菌活性的林可霉素衍生物的制作方法
根據(jù)35 U.S.C.§119(e)本申請(qǐng)要求2002年8月15日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)No.60/403,770的優(yōu)先權(quán)，所述文獻(xiàn)的內(nèi)容在此被引入以供參考。
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及表現(xiàn)出抗菌活性的林可霉素衍生物。
現(xiàn)有技術(shù)林可霉素是一種不利地影響多種微生物，特別是革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)的生物合成產(chǎn)物。林可霉素的特征和制備公開(kāi)在美國(guó)專利3,086,912中。已制備同樣具有抗菌活性的多種林可霉素的衍生物。例如，這些衍生物包括公開(kāi)在美國(guó)專利3,496,163中的氯林可霉素。
林可霉素衍生物仍是用于抗菌藥發(fā)現(xiàn)的有吸引力的目標(biāo)。因此，需要具有抗菌活性的林可霉素衍生物作為潛在的抗菌劑。
發(fā)明概述本發(fā)明提供具有抗菌活性的林可霉素衍生物。
在一個(gè)組成方面，本發(fā)明涉及式(I)的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽
其中R1為烷基，R2和R3獨(dú)立地為H、烷基、羥基、氟或氰基烷基，或者R2和R3之一為＝NOR7而另一個(gè)不存在，或者R2和R3之一為＝CH2而另一個(gè)不存在，條件是R2和R3不都為H；當(dāng)R2和R3之一為氟時(shí)，另一個(gè)不為氫或羥基；以及當(dāng)R2和R3之一為羥基時(shí)，另一個(gè)不為氟、氫或羥基；R6選自H、烷基、羥基烷基、-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]p-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]p-亞烷基-取代的雜環(huán)，其中p為0或1，條件是-C(O)O-取代的烷基不包括以下 R7為H或烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式I的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式(II)的化合物及其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基；R2和R3獨(dú)立地為H、烷基或氰基烷基，條件是R2和R3不都為H；R6為H、烷基或羥基烷基；
R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式II的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供式(III)的化合物及其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基；R2和R3為氟；
R6為H、烷基或羥基烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式III的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(IV)的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基；
R2和R3獨(dú)立地為H或烷基、羥基、氟或氰基烷基，或者R2和R3之一為＝NOR7而另一個(gè)不存在，或者R2和R3之一為＝CH2而另一個(gè)不存在，條件是R2和R3不都為H；當(dāng)R2和R3之一為氟時(shí)，另一個(gè)不為氫或羥基；當(dāng)R2和R3之一為羥基時(shí)，另一個(gè)不為氟、氫或羥基；R6選自-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]p-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]p-亞烷基-取代的雜環(huán)，其中p為0或1，條件是-C(O)O-取代的烷基不包括以下 R7為H或烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式IV的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
本發(fā)明范圍內(nèi)的林可霉素衍生物包括如下表I所述的那些
<p>
工業(yè)實(shí)用性實(shí)施例3用于胃癌篩選的LBFL301，LBFL304，LBFL305或LBFL306mRNA的檢測(cè)如實(shí)施例1中所述，即通過(guò)利用GeneChip篩選mRNA樣品，或者如實(shí)施例2中所述，即通過(guò)利用RNA印跡篩選mRNA樣品，測(cè)定了對(duì)應(yīng)于SEQ ID NO1，3，5，7，9，11，13，17，19或21的mRNA在胃組織活檢樣品中的表達(dá)水平?；蛘?，可以對(duì)得自惡性狀態(tài)或非惡性狀態(tài)的非-胃增生組織的樣品進(jìn)行分析。得自胃癌患者的胃組織樣品和得自正常個(gè)體的胃組織樣品可以被用作陽(yáng)性和陰性對(duì)照。利用任何分析基因表達(dá)的手段進(jìn)行檢測(cè)，表達(dá)水平高于正常對(duì)照則是胃癌的表征或表示有可能患上胃癌。
盡管參照上述實(shí)施例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳盡的描述，但是應(yīng)當(dāng)理解可以進(jìn)行各種修改而不偏離本發(fā)明的實(shí)質(zhì)。因此，本發(fā)明僅僅通過(guò)下列權(quán)利要求得到限定。本申請(qǐng)中引用的所有專利、專利申請(qǐng)和公開(kāi)出版物被本文全部引入作為參考。
1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基-3-氰基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-乙基哌啶基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-羥基-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-羥基亞氨基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲氧基亞氨基丙-1-基}乙酰胺；1-(-3-正丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3-甲基丁-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-(3-對(duì)氟苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-(3-對(duì)氯苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(2，2-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-(R)-甲基-2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-(S)-甲基-2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正戊基-N-(3-羥基丙-1-基)吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3-甲基丁-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟丙-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正戊基哌啶-6-基)-N-{[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(1-乙基丙-1-基)哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-異丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；
1-(4-環(huán)己基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-乙基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正戊基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正丙基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-N-(F-moc)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-N-(甲酸乙酯)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-N-(甲酸苯基酯)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(4，4-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟丁-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟戊-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(2，2-二氟乙-1-基)-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3，3-二氟丙-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(5，5-二氟戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；
1-(4-(5-氟戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(4-氟丁-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3-乙基-3-羥基戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-丁氧基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-戊氧基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(4-氟丁氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丁基丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基-烯丙基}乙酰胺；1-(4-乙基-N-乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3-氟丙氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3，3，3-三氟丙氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-異丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟-丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-4-氟-吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丁基-4-氟-吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；以及這些化合物的前藥、互變異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽。
本文定義的化合物、其互變異構(gòu)體、前藥和藥學(xué)上可接受的鹽可以具有抗細(xì)菌、原生動(dòng)物、真菌和寄生蟲(chóng)的活性。
在另一方面，本發(fā)明提供包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的本文定義的化合物的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物還可以包括一種或多種附加的抗菌劑，其中之一可以具有抗革蘭氏陰性菌的活性。其中之一還可以具有抗革蘭氏陽(yáng)性菌的活性。
在本發(fā)明的一個(gè)方法方面，本發(fā)明涉及一種治療哺乳動(dòng)物的微生物感染的方法，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的本發(fā)明的化合物。本發(fā)明的化合物可以在藥物組合物中通過(guò)口、腸胃外、透皮、局部、直腸或鼻內(nèi)給藥而施用于哺乳動(dòng)物。
在本發(fā)明的另一個(gè)方法方面，本發(fā)明涉及一種治療哺乳動(dòng)物的微生物感染的方法，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用包含治療有效量的本發(fā)明化合物的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物還可以包含一種或多種附加的抗菌劑，其中之一可以具有抗革蘭氏陰性菌活性。其中之一還可以具有抗革蘭氏陽(yáng)性菌活性。所述藥物組合物可以通過(guò)口、腸胃外、透皮、局部、直腸或鼻內(nèi)給藥而施用于哺乳動(dòng)物。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，受治療的微生物感染為革蘭氏陽(yáng)性菌感染。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述感染可以是革蘭氏陰性菌感染。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述感染可以是分枝桿菌感染、支原體感染或衣原體感染。
在另一方面，本發(fā)明提供用于制備式(I)、(II)和(III)的化合物的新的中間體和方法。
發(fā)明詳述如上述，本發(fā)明涉及表現(xiàn)出抗菌活性，特別是抗革蘭氏陽(yáng)性菌活性的林可霉素衍生物。但是，在進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明之前，首先定義以下的術(shù)語(yǔ)。
定義除非另外指出，以下用于說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)的術(shù)語(yǔ)具有下述含義。
“?；币庵富鶊F(tuán)-C(O)R′，其中R′為烷基、鏈烯基、炔基、芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基。
“酰氧基”意指基團(tuán)-C(O)OR′，其中R′為烷基、鏈烯基、炔基、芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基。
“鏈烯基”意指包含至少一個(gè)雙鍵(-C＝C-)的2-8個(gè)碳原子的直鏈不飽和一價(jià)烴基或3-8個(gè)碳原子的支鏈一價(jià)烴基。鏈烯基的實(shí)例包括但不限于烯丙基、乙烯基、2-丁烯基等。
“烷氧基”指基團(tuán)“烷基-O”，它包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1，2-二甲基丁氧基等。
“烷氧基烷氧基”指基團(tuán)烷基-O-亞烷基-O-，其中烷基如本文定義。
“烷基”意指1-8個(gè)碳原子的直鏈飽和一價(jià)烴基或3-8個(gè)碳原子的支鏈飽和一價(jià)烴基。烷基的實(shí)例包括但不限于諸如以下基團(tuán)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基等。
“亞烷基”意指1-8個(gè)碳原子的直鏈二價(jià)烴基或3-8個(gè)碳原子的支鏈二價(jià)烴基。亞烷基的實(shí)例包括但不限于亞甲基、亞乙基、2-甲基亞丙基等。
“烷硫基”指基團(tuán)“烷基-S-”，它包括例如甲硫基、丁硫基等。
“炔基”意指包含至少一個(gè)叁鍵(-C≡C-)的2-8個(gè)碳原子的直鏈一價(jià)烴基或3-8個(gè)碳原子的支鏈一價(jià)烴基。炔基的實(shí)例包括但不限于乙炔基、丙炔基、2-丁炔基等。
“氨基”或“取代的氮”指基團(tuán)“-NRaRb”，其中Ra和Rb獨(dú)立地為H、烷基、鹵代烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基。
“氨基羧基烷基”意指基團(tuán)“-RcC(O)NRaRb”，其中Rc為如以上定義的亞烷基，而Ra和Rb如以上定義。
“芳基”意指6-14個(gè)環(huán)原子的一價(jià)單環(huán)或二環(huán)芳香碳環(huán)基團(tuán)。實(shí)例包括但不限于苯基、萘基和蒽基。芳環(huán)可以任選與5-、6-或7-元單環(huán)非芳香環(huán)稠合，該非芳香環(huán)任選包含1或2個(gè)獨(dú)立地選自氧、氮或硫的雜原子，而剩余的環(huán)原子為C，其中至少一個(gè)或兩個(gè)C原子任選被羰基替換。具有稠合環(huán)的代表性芳基包括但不限于2，5-二氫-苯并[b]噁庚因基、2，3-二氫苯并[1，4]二噁烷基、色滿基、異色滿基、2，3-二氫苯并呋喃基、1，3-二氫異苯并呋喃基、苯并[1，3]二噁茂基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、1，2，3，4-四氫喹啉基、2，3-二氫-1H-吲哚基、2，3-二氫-1H-異吲哚基、苯并咪唑-2-酮基、2-H-苯并噁唑-2-酮基等。
“羰基”意指基團(tuán)“C(O)”。
“羧基”意指基團(tuán)“C(O)O”。
“氰基烷基”指被一個(gè)或多個(gè)氰基(-CN)基團(tuán)取代的烷基，其中烷基如以上定義，條件是如果存在兩個(gè)氰基，則它們不都在相同的碳原子上。氰基烷基的實(shí)例包括例如氰基甲基、2-氰基乙基、2-氰基丙基等。
“環(huán)烷基”指具有單環(huán)或多環(huán)的3-20個(gè)碳原子的環(huán)狀烷基，例如包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)辛基、金剛烷基等。本發(fā)明的環(huán)烷基還包括稠合的多環(huán)，其中多環(huán)體系中的一個(gè)或多個(gè)環(huán)為芳環(huán)，只要與該結(jié)構(gòu)的核心或骨架連接的點(diǎn)在非芳香環(huán)上，例如芴基。
“環(huán)烷基烷基”意指基團(tuán)-RcRd，其中Rc為亞烷基，而Rd為環(huán)烷基，如以上定義。實(shí)例包括但不限于環(huán)丙基亞甲基、環(huán)己基亞乙基等。
“鹵”或“鹵素”意指氟、氯、溴或碘。
“鹵代烷基”意指被一個(gè)或多個(gè)，優(yōu)選1-6個(gè)相同或不同的鹵原子取代的烷基，其中烷基如以上定義。例如，鹵代烷基的實(shí)例包括三氟甲基、3-氟丙基、2，2-二氯乙基等。
“雜芳基”意指包含1、2或3個(gè)選自N、O或S的環(huán)雜原子，其余環(huán)原子為C的5-10個(gè)環(huán)原子的一價(jià)單環(huán)或二環(huán)芳香基團(tuán)。代表性實(shí)例包括但不限于噻吩基、苯并噻吩基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、喹啉基、喹喔啉基、咪唑基、呋喃基、苯并呋喃基、噻唑基、異噁唑基、苯并異噁唑基、苯并咪唑基、三唑基、吡唑基、吡咯基、吲哚基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、N-烷基-2-吡啶酮基、吡嗪酮基、噠嗪酮基、嘧啶酮基、噁唑酮基等。
“雜環(huán)”或“雜環(huán)的”指具有單環(huán)或多個(gè)稠合環(huán)、環(huán)內(nèi)具有1-10個(gè)碳原子和1-4個(gè)選氮、硫或氧的雜原子的飽和或不飽和基團(tuán)，其中稠環(huán)體系中一個(gè)或多個(gè)環(huán)可以為如本文定義的芳基或雜芳基。雜環(huán)和雜芳基的實(shí)例包括但不限于吖丁啶、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吲嗪、異吲哚、吲哚、二氫吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、酞嗪、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚啉、苯鄰二甲酰亞胺、1，2，3，4-四氫-異喹啉、4，5，6，7-四氫苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯并[b]噻吩、嗎啉基、硫代嗎啉基(還稱為硫雜嗎啉基)、哌啶基、吡咯烷、四氫呋喃基等。
雜環(huán)可以任選被1-3個(gè)選自以下的取代基取代烷基、鏈烯基、炔基、鹵素、烷氧基、酰氧基、氨基、羥基、羧基、氰基、氧代、硝基和烷硫基，而這些術(shù)語(yǔ)如本文定義。
“羥基”或“羥基”意指基團(tuán)-OH。
“羥基烷基”指被一個(gè)或多個(gè)-OH基團(tuán)取代的烷基，其中烷基如以上定義，條件是如果存在兩個(gè)羥基，則它們不都在相同的碳原子上。羥基烷基的實(shí)例包括例如羥基甲基、2-羥基乙基、2-羥基丙基等。
“哺乳動(dòng)物”指所有哺乳動(dòng)物，包括人、家畜和伙伴動(dòng)物。
“任選的”或“任選地”意指隨后所述的事件或情況可以發(fā)生但不一定必須發(fā)生，且該描述包括該事件或情況發(fā)生和不發(fā)生的實(shí)例。例如，“任選被烷基一或二取代的芳基”意指烷基可以但不一定必須存在，且該描述包括芳基被烷基一或二取代的情況和芳基不被烷基取代的情況。
“藥學(xué)上可接受的載體”意指用于制備藥物組合物，通常安全、無(wú)毒并且不是生物學(xué)上或其它方面不期望的載體，包括對(duì)于獸醫(yī)用和人藥用可接受的載體。說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中所用的“藥學(xué)上可接受的載體”包括一種和多于一種這樣的載體。
化合物的“藥學(xué)上可接受的鹽”意指藥學(xué)上可接受的，具有期望的母體化合物的藥理學(xué)活性的鹽。這些鹽包括但不限于(1)酸加成鹽，與無(wú)機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成；或與有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、甘醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋(píng)果酸、馬來(lái)酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲?；?苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基二環(huán)[2.2.2]辛-2-烯-1-甲酸、葡糖庚酸、4，4’亞甲基雙(3-羥基-2-烯-1-甲酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、粘康酸等形成；或者(2)當(dāng)母體化合物中存在的酸質(zhì)子被金屬離子，例如堿金屬離子、堿土金屬離子或鋁離子替代時(shí)形成的鹽；或者與有機(jī)堿，例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、三甲基胺、N-甲基葡糖胺等配位時(shí)形成的鹽。
“前藥”意指當(dāng)這種前藥施用于哺乳動(dòng)物對(duì)象時(shí)在體內(nèi)釋放出本發(fā)明化合物的活性母體藥物的任何化合物。本發(fā)明的化合物的前藥通過(guò)這樣的方式修飾本發(fā)明化合物中存在的官能團(tuán)來(lái)制備該修飾可以在體內(nèi)裂解釋放母體化合物。前藥包括其中化合物的羥基、巰基或氨基與任何可以在體內(nèi)裂解分別再生成游離羥基、氨基或巰基的基團(tuán)連接的本發(fā)明的化合物。前藥的實(shí)例包括但不限于本發(fā)明化合物中的羥基官能團(tuán)的酯(例如乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物)、氨基甲酸酯(例如N，N-二甲基氨基羰基)等。特定的實(shí)例包括-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]p-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]p-亞烷基-取代的雜環(huán)，其中p為0或1，條件是-C(O)O-取代的烷基不包括以下 “取代的烷基”意指以上定義的烷基，其中一個(gè)或多個(gè)氫原子已被鹵素(即Cl、Br、F或I)、氧、羥基、胺(伯)、胺(被以上烷基取代的仲烷基)、胺(被以上烷基取代的叔烷基)、硫、-SH或苯基替代。取代的烷基的實(shí)例包括但不限于1-氟乙基、1-氯乙基、2-氟乙基、2-氯乙基、1-溴丙基、2-碘丙基、1-氯丁基、4-氟丁基和4-氯丁基。
“取代的芳基”意指被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1-3個(gè)選自以下的取代基取代的芳環(huán)烷基、鏈烯基、炔基、鹵素、烷氧基、酰氧基、氨基、羥基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基。芳環(huán)可以任選與5-、6-或7-元單環(huán)非芳香環(huán)稠合，所述非芳香環(huán)任選包含1或2個(gè)獨(dú)立地選自氧、氮或硫的雜原子，其它環(huán)原子為碳，其中一個(gè)或兩個(gè)碳原子任選被羰基替代。
“取代的環(huán)烷基”意指被烷基取代的環(huán)烷基，其中烷基如以上定義或以上關(guān)于取代的烷基定義的基團(tuán)。代表性實(shí)例包括但不限于2-環(huán)丙基乙基、3-環(huán)丁基丙基、4-環(huán)戊基丁基、4-環(huán)己基丁基等。
“取代的雜芳基”意指被一個(gè)或多個(gè)取代基，優(yōu)選1-3個(gè)選自以下的取代基取代的雜芳環(huán)(其中雜芳基如以上定義)烷基、鏈烯基、炔基、鹵素、烷氧基、酰氧基、氨基、羥基、羧基、氰基、硝基、烷硫基和硫代烷基、其中所述取代基如本文定義。
“取代的氧”指基團(tuán)“-O-Rd”，其中Rd為烷基、鹵代烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基，其中所述取代基如本文定義。
“取代的苯基”意指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子已被鹵素、羥基、烷基、胺(伯、仲和叔，后二者烷基取代)、-SH和苯基替代的苯環(huán)。代表性實(shí)例包括但不限于對(duì)溴苯基、間碘苯基、鄰氯苯基、對(duì)乙基苯基、間丙基苯基、鄰甲基苯基和對(duì)辛基苯基。
“硫代烷基”指被一個(gè)或多個(gè)-SH基團(tuán)取代的烷基，其中烷基如以上定義，條件是如果存在兩個(gè)羥基，則它們不都在相同的碳原子上。硫代烷基的實(shí)例包括例如硫代甲基、2-硫代乙基、2-硫代丙基等。
“治療有效量”意指在施用于哺乳動(dòng)物以治療疾病時(shí)足以實(shí)現(xiàn)這種對(duì)疾病的治療的化合物或組合物的量?！爸委熡行Я俊彪S化合物或組合物、疾病和它的嚴(yán)重程度以及待治療的哺乳動(dòng)物的年齡、體重等而變。
疾病的“治療(treating)”或“治療(treatment)”包括(1)預(yù)防疾病，即使疾病的臨床癥狀不在可能接觸或易患該疾病但尚未經(jīng)歷或表現(xiàn)出疾病癥狀的哺乳動(dòng)物中發(fā)生，(2)抑制疾病，即停滯或減輕疾病或其臨床癥狀的發(fā)展，或者(3)緩解疾病，即導(dǎo)致疾病或其臨床癥狀消退。
“互變異構(gòu)體”指氫原子的遷移形成兩種或更多種結(jié)構(gòu)的異構(gòu)體。
本發(fā)明的化合物一般根據(jù)IUPAC或CAS命名法系統(tǒng)來(lái)命名?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的縮寫(xiě)(例如″Ph″為苯基，″Me″為甲基，″Et″為乙基，″Bn″為芐基，″h″為小時(shí)，而″rt″為室溫)。
總體合成方案本發(fā)明的化合物可以由以下所示的反應(yīng)方案中所述的方法制備。
用于制備這些化合物的原料和試劑可購(gòu)自商業(yè)供應(yīng)商，例如Toronto Research Chemicals(North York，ON Canada)、AldrichChemical Co.(Milwaukee，Wisconsin，USA)、Bachem(Torrance，California，USA)、Emka-Chemie或Sigma(St.Louis，Missouri，USA)，或者由本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，遵循參考文獻(xiàn)中所述的操作來(lái)制備，所述參考文獻(xiàn)如Fieser and Fieser′s Reagents forOrganic Synthesis，Volumes 1-15(John Wiley and Sons，1991)、Rodd′s Chemistry of Carbon Compounds，Volumes 1-5和Supplementals(Elsevier Science Publishers，1989)，OrganicReactions，Volumes 1-40(John Wiley and Sons，1991)、March′sAdvanced Organic Chemistry，(John Wiley and Sons，4th Edition)和Larock′s Comprehensive Organic Transformations(VCHPublishers Inc.，1989)。這些方案僅例示某些可以合成本發(fā)明化合物的方法，可以對(duì)這些方案進(jìn)行多種修改，其對(duì)參考本說(shuō)明書(shū)的本領(lǐng)域技術(shù)人員是有啟發(fā)的。
本領(lǐng)域技術(shù)人員明顯知道，常規(guī)的保護(hù)基可能是防止某些官能團(tuán)發(fā)生不期望反應(yīng)所必需的。不同官能團(tuán)的適宜保護(hù)基以及用于保護(hù)和脫保護(hù)特定官能團(tuán)的適宜條件在本領(lǐng)域中是已知的。例如，許多保護(hù)基在T.W.Greene和G.M.Wuts，Protecting Groups inOrganic Synthesis，Second Edition，Wiley，New York，1991及其中引用的參考資料中作了描述。
如果需要，可以用常規(guī)技術(shù)，包括但不限于過(guò)濾、蒸餾、結(jié)晶、色譜法等來(lái)分離和純化反應(yīng)的原料和中間產(chǎn)物。這些材料可以用常規(guī)方法，包括物理常數(shù)和光譜數(shù)據(jù)來(lái)表征。
本發(fā)明的化合物一般包含一個(gè)或多個(gè)手性中心。因此，如果需要的話，這些化合物可以制備或分離為純立體異構(gòu)體。所有這些立體異構(gòu)體(和富集的混合物)包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，除非另外指出。純立體異構(gòu)體(或富集的混合物)可以用例如本領(lǐng)域中已知的光學(xué)活性原料或立體選擇性試劑來(lái)制備。作為可替代的選擇，可以使用例如手性柱色譜法、手性拆分試劑等分離這種化合物的外消旋混合物。
式(I)的化合物的制備一般而言，為制備本發(fā)明的式(I)化合物，將適宜地7-取代的林可胺(lincosamine)中間產(chǎn)物和適宜取代的吡咯烷基或哌啶基甲酸在反應(yīng)條件下，優(yōu)選在惰性有機(jī)溶劑中，在偶合劑和有機(jī)堿存在下縮合。此反應(yīng)可以用任何數(shù)目的已知偶合劑，例如O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)、1-羥基苯并三唑水合物(HOBT)和碳化二亞胺、異丁基氯甲酸酯、二苯基磷?；B氮化物(DPPA)等來(lái)進(jìn)行。適宜的有機(jī)堿包括二異丙基乙基胺(DIEA)、三乙胺(TEA)、吡啶、N-甲基嗎啉等?？梢允褂玫倪m宜的惰性有機(jī)溶劑包括例如N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、二氯甲烷等。此反應(yīng)一般使用相對(duì)于林可胺過(guò)量的羧酸于大約0℃至大約50℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。反應(yīng)繼續(xù)直至完成，它一般發(fā)生大約2-12小時(shí)。
如本發(fā)明定義的適宜地7-取代的林可胺中間產(chǎn)物(即R2/R3)用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，由甲基6-氨基-6，8-二脫氧-1-硫代-赤型-α-D-半乳-八吡喃糖苷合成，所述甲基6-氨基-6，8-二脫氧-1-硫代-赤型-α-D-半乳-八吡喃糖苷可以如Hoeksema等人，Journal of theAmerican Chemical Society，1967，892448-2452所述制備。7-取代的林可胺中間產(chǎn)物的例示性合成如以下方案1-5所示。
本發(fā)明定義的適宜取代的吡咯烷基或哌啶基甲酸中間產(chǎn)物(即R9)也由本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法由脯氨酸和吡啶合成。可以用于合成本發(fā)明的羧酸中間產(chǎn)物的脯氨酸和吡啶包括，例如，4-氧代脯氨酸和4-取代的吡啶。用于合成的脯氨酸和吡啶可商購(gòu)自銷售商，例如Aldrich和Sigma。作為可替代的選擇，這些脯氨酸和吡啶可以由本領(lǐng)域中已知的方法制備。適宜地取代的吡咯烷基或哌啶基甲酸中間產(chǎn)物的例示性合成如以下方案6-10所示。
以下方案1例示林可胺中間產(chǎn)物1c的一般合成，其中P為N-保護(hù)基，優(yōu)選Cbz或Boc，而R1如關(guān)于式(I)的定義。
方案1.林可胺中間產(chǎn)物1c的一般合成。
(a)N-保護(hù)(Boc，Cbz)；(b)O-甲硅烷基保護(hù)(TMS)；(c)Swern氧化。
如方案1所示，甲基6-氨基-6，8-二脫氧-1-硫代-赤型-α-D-半乳-八吡喃糖苷1a如Hoeksema等人，Journal of the AmericanChemical Society，1967，89 2448-2452所述制備。然后用適宜的保護(hù)基保護(hù)產(chǎn)物1a的氨基官能團(tuán)和羥基官能團(tuán)。適宜的N-保護(hù)基通過(guò)加入二碳酸二叔丁酯、N-(芐氧基羰基氧)琥珀酰亞胺等來(lái)形成。羥基可以作為甲硅烷基醚保護(hù)?？梢酝ㄟ^(guò)在適宜的有機(jī)堿如三乙胺(TEA)或氯化三甲基硅烷存在下，在有機(jī)堿如三乙胺存在下與N，O-雙(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺反應(yīng)而將羥基轉(zhuǎn)化成三甲基甲硅烷基(TMS)醚。N-保護(hù)一般在O-保護(hù)之前完成。蒸發(fā)溶劑之后用硅膠色譜處理粗產(chǎn)物得到受保護(hù)的產(chǎn)物1b。
將1b的7-O-三甲基甲硅烷基化學(xué)選擇性地脫保護(hù)，并氧化得到7-酮-林可胺衍生物1c。這種選擇性轉(zhuǎn)化通過(guò)將受保護(hù)的產(chǎn)物1b加到在惰性有機(jī)溶劑如二氯甲烷中的二甲亞砜和草酰氯，然后加入適宜的有機(jī)堿如三乙胺來(lái)進(jìn)行。作為可替代的選擇，該轉(zhuǎn)化可以通過(guò)將1b加到在惰性有機(jī)溶劑中的二甲亞砜和適宜的活化劑如三氟乙酸酐來(lái)進(jìn)行。該反應(yīng)一般在大約-70℃至80℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。將所得的反應(yīng)混合物于低溫下攪拌，然后將其加熱至大約-50℃。在此第二溫度下維持反應(yīng)約1-3小時(shí)。往反應(yīng)混合物中加入適宜的有機(jī)堿，例如TEA、吡啶等。將反應(yīng)混合物適宜地處理得到產(chǎn)物1c。用于將1b轉(zhuǎn)化成1c的總類條件在本領(lǐng)域中已知為Swern氧化條件。
以下方案2例示林可胺中間產(chǎn)物2b的一般合成，其中P為N-保護(hù)基，優(yōu)選為Cbz或Boc，R1如關(guān)于式(I)的定義，R2和R3之一為氫，而另一個(gè)如關(guān)于式(I)的定義。
方案2.林可胺中間產(chǎn)物2b的一般合成(a)Wittig烯化(R2PPh3+X-，R2PO(OEt)2，堿，溶劑)；(b)和(c)H2/Pd，Global脫保護(hù)如方案2所示，用Wittig或Homer-Wadsworth-Emmons反應(yīng)使酮-林可胺中間產(chǎn)物1c反應(yīng)形成烯烴。在此反應(yīng)中，用強(qiáng)堿將適宜的磷鎓鹽或膦酸鹽脫質(zhì)子化形成磷內(nèi)鎓鹽?？梢允褂玫倪m宜的磷鎓鹽為烷基三苯基磷鎓鹵化物，它可以通過(guò)三苯基膦和烷基鹵反應(yīng)來(lái)制備。適宜的磷化合物包括，例如，甲基三苯基磷鎓溴化物，二乙基(氰基甲基)膦酸酯等?？梢杂糜谛纬蓛?nèi)鎓鹽的適宜的強(qiáng)堿包括有機(jī)鋰試劑、叔丁醇鉀等。磷內(nèi)鎓鹽的形成一般在惰性氣氛下，例如N2氣氛下，在惰性有機(jī)溶劑如甲苯、THF等中，于低溫下進(jìn)行。
在形成磷內(nèi)鎓鹽之后，將產(chǎn)物1c加到反應(yīng)物。該反應(yīng)可以在-40℃至室溫的溫度下便利地進(jìn)行，并攪拌直至反應(yīng)完成，通常1-4小時(shí)。處理所得的有機(jī)溶液，并用硅膠色譜處理粗產(chǎn)物得到烯烴產(chǎn)物2a。
任選地，可以用常規(guī)技術(shù)例如色譜法純化產(chǎn)物2a，并可以將該純化的產(chǎn)物用于隨后的偶合反應(yīng)以得到本發(fā)明的乙烯基林可胺衍生物。
然后將產(chǎn)物2a氫化得到飽和產(chǎn)物2b。該氫化一般在Parr瓶?jī)?nèi)，在極性有機(jī)溶劑，例如甲醇、乙醇等中，使用10％擔(dān)載在碳上的鈀進(jìn)行。吹洗該瓶，并充入H2至大約50-70psi，并振蕩至完成，一般約12-24小時(shí)。將所得的反應(yīng)混合物過(guò)濾，例如通過(guò)硅藻土過(guò)濾，并用極性有機(jī)溶劑如甲醇沖洗。通過(guò)轉(zhuǎn)移至含干燥、洗滌過(guò)的Dowex50w-400x H+型樹(shù)脂漏斗并振蕩來(lái)處理有機(jī)溶液。用甲醇和水洗滌樹(shù)脂之后，用在MeOH中的5％TEA洗滌而從樹(shù)脂上洗脫產(chǎn)物2b。產(chǎn)物還可以用硅膠柱色譜法純化。
方案3例示林可胺中間產(chǎn)物3b的一般合成，其中P為N-保護(hù)基，優(yōu)選Cbz或Boc，R1如關(guān)于式(I)的定義，而R2或R3之一為烷基，另一個(gè)為-OH。
方案3.林可胺中間產(chǎn)物3b的一般合成。
(a)R2M(碳親核體)；(b)(i)TMS脫保護(hù)(H+或F-)和(ii)N-脫保護(hù)如方案3所示，將適宜的碳親核體加到在適宜的惰性有機(jī)溶劑中的7-酮林可胺中間產(chǎn)物1c得到7-羥基林可胺中間產(chǎn)物3b。適宜的碳親核體包括甲基氯化鎂、二乙基鋅，乙炔鈉等，而可以使用的適宜的惰性有機(jī)溶劑包括THF、乙醚、甲苯等。該反應(yīng)一般在降低的溫度，大約0℃下進(jìn)行大約3-5小時(shí)。然后用飽和酸性水溶液，例如飽和NH4Cl/H2O水溶液終止反應(yīng)。隨后處理終止反應(yīng)的混合物，并可以用色譜法純化得到產(chǎn)物3b。
以下方案4例示林可胺中間產(chǎn)物4b的一般合成，其中P為N-保護(hù)基，優(yōu)選Boc，R1如關(guān)于式(I)的定義，而R2/R3為肟(＝NOR7)，其中R7如關(guān)于式(I)的定義。
方案4.7-肟-林可胺4b的一般合成如方案4所示，通過(guò)在適宜的試劑如O-三甲基甲硅烷基羥基胺、O-烷基羥基胺鹽酸鹽(例如O-甲基羥基胺鹽酸鹽)等存在下進(jìn)行攪拌將林可胺中間產(chǎn)物1c轉(zhuǎn)化成肟。該反應(yīng)一般在極性有機(jī)溶劑如甲醇中進(jìn)行。該反應(yīng)可方便地在室溫下進(jìn)行大約8-24小時(shí)。除去溶劑得到N-保護(hù)的產(chǎn)物4a。
保護(hù)基的除去可以用酸，例如三氟乙酸(TFA)、鹽酸、對(duì)甲苯磺酸等，在惰性有機(jī)溶劑，例如二氯甲烷、二氯乙烷、二噁烷、THF等中完成。該除去一般在低溫，例如0℃下進(jìn)行，然后逐漸加熱至室溫，得到產(chǎn)物4b。
以下方案5例示林可胺中間產(chǎn)物5b的一般合成，其中R2和R3均為氟，P為N-保護(hù)基，優(yōu)選Cbz或Boc，而R1如關(guān)于式(I)的定義。
方案5.7-脫氧-7，7-二氟林可胺5b的一般合成。
(a)F-；(B)Ac2O，吡啶，DMAP；(c)DAST；(d)TFA如方案5所示，使林可胺中間產(chǎn)物1c與適宜的氟化物在惰性有機(jī)溶劑中接觸?？梢允褂玫倪m宜的氟化物包括四丁基氟化銨、Amberlite樹(shù)脂A-26F型、HF·吡啶等。適宜的惰性有機(jī)溶劑包括THF、乙腈、二氯甲烷、二噁烷等。反應(yīng)可便利地在室溫下進(jìn)行大約1-2小時(shí)?？梢杂霉枘z柱純化產(chǎn)物(未顯示)。
通過(guò)與乙酸酐和二甲基氨基吡啶(DMAP)在適宜的惰性有機(jī)溶劑和有機(jī)堿例如二氯甲烷和吡啶的混合物中接觸來(lái)轉(zhuǎn)化從柱上得到的產(chǎn)物上的O-保護(hù)基。該反應(yīng)可便利地在室溫下進(jìn)行大約6-12小時(shí)。可以用硅膠柱純化產(chǎn)物得到產(chǎn)物5a。
將產(chǎn)物5a與適宜的氟化試劑接觸，然后除去N-保護(hù)基得到產(chǎn)物5b?？梢允褂玫倪m宜的氟化試劑包括，例如二甲基氨基三氟化硫、[雙(2-甲氧基乙基)氨基]三氟化硫等。該反應(yīng)一般在惰性有機(jī)溶劑如二氯甲烷、乙酸乙酯、THF等中，于室溫下進(jìn)行大約6-12小時(shí)。
保護(hù)基的除去可以用酸，例如三氟乙酸(TFA)、鹽酸、對(duì)甲苯磺酸等，在惰性有機(jī)溶劑如二氯甲烷、二氯乙烷、二噁烷、THF等中完成。該除去一般在低溫，例如0℃下進(jìn)行，然后逐漸加熱至室溫，得到產(chǎn)物5b。
以下方案6例示脯氨酸中間產(chǎn)物6c的一般合成，其中R9如關(guān)于式(I)的定義。
方案6.順式/反式R9-脯氨酸中間產(chǎn)物混合物6c的一般合成。
(a)R9CH2Br+Ph3P，NaH，DMSO；(b)H2/Pt如方案6所示，產(chǎn)物6c如Birkenmeyer等人，Journal ofMedicinal Chemistry 1972，15，1255-1259所述制備。化合物6a可商購(gòu)自銷售商，例如RSP(Scientific Research Consortium，Inc.)。作為可替代的選擇，6a可以由可商購(gòu)得到的受保護(hù)的羥基脯氨酸，通過(guò)本領(lǐng)域中已知的方法制備。例如，參見(jiàn)Demange等人，Tetrahedron Letters 1998，39，1169-1172。
以下方案7例示反式-R9-脯氨酸中間產(chǎn)物7d的一般合成，其中R9為烷基或取代的烷基。
方案7.反式-烷基脯氨酸7d的一般合成。
(a)(i)LiHMDS，THF-78℃，(ii)溴烯烴；(b)(i)LiBHEt3，THF-78℃，(ii)BF3OEt2，Et3SiH；(c)H2Pd/C。
如以下方案7所述，在惰性有機(jī)溶劑中，用適宜的烯醇化試劑將受保護(hù)的4-氧代脯氨酸7a烯醇化，然后用適宜的烷基化試劑烷基化得到內(nèi)酰胺7b(其中R9’為鏈烯基)，如Zhang等人，J.A.C.S.1998，120 3894-3902的文獻(xiàn)方法所述?；衔?a可商購(gòu)自銷售商，例如Bachem。作為可替代的選擇，7a可以由本領(lǐng)域中已知的方法制備。適宜的烯醇化試劑包括LiHMDS、LiN(iPr)2等，而適宜的烷基化試劑包括烯丙型和芐型溴化物，例如4-溴-2-甲基-2-丁烯和順式-1-溴-2-戊烯、烯丙基溴等。
使用適宜的還原劑將內(nèi)酰胺7b還原得到吡咯烷7c，其中R9’為鏈烯基。該還原通過(guò)二步流程來(lái)進(jìn)行，包括將內(nèi)酰胺超氫化還原成半縮醛胺，然后還原該半縮醛胺?？梢允褂玫倪m宜的還原劑包括Et3SiH/BF3·OEt2、Et3SiH/TiCl4等。
然后將吡咯烷7c氫化以同時(shí)除去R9’取代基中的不飽和度，并從羧酸中除去芐基保護(hù)基，得到產(chǎn)物7d。該氫化一般在Parr瓶?jī)?nèi)，在極性有機(jī)溶劑，例如甲醇、乙醇等中，使用10％擔(dān)載在碳上的鈀進(jìn)行。吹洗該瓶，并充入H2至大約50-70psi，并振蕩至完成，一般約5-24小時(shí)。將所得的反應(yīng)混合物過(guò)濾，例如用硅藻土墊過(guò)濾，并用極性有機(jī)溶劑如甲醇沖洗。蒸發(fā)合并的洗液和濾液得到產(chǎn)物7d，其中R9為烷基或取代的烷基。
以下方案8例示反式-R9-脯氨酸中間產(chǎn)物8c的一般合成，其中R9為烷基或取代的烷基。

方案8.反式-R9-取代的脯氨酸8c的一般合成，其中R9為烷基或取代的烷基。
(a)O3，DCM，-78℃，DMS；(b)P+Ph3鹽，堿；(c)H2，Pd/C。
如方案8所示，將產(chǎn)物7d臭氧解得到醛8a。臭氧分解反應(yīng)一般在無(wú)水惰性有機(jī)溶劑，例如二氯甲烷、二噁烷、THF等中，于低溫，例如-78℃下進(jìn)行，然后用還原劑，例如DMS、Ph3P終止反應(yīng)。
使醛8a與適宜的磷鎓鹽在強(qiáng)堿存在下在惰性有機(jī)溶劑中反應(yīng)?？梢允褂玫倪m宜的磷鎓鹽包括，例如氟芐基磷鎓氯化物、4-氯芐基磷鎓氯化物、二溴氟甲烷和三苯基膦等?？梢允褂玫倪m宜的堿包括叔丁醇鉀、有機(jī)鋰試劑和活化的鋅。可以使用的適宜的有機(jī)溶劑包括甲苯、THF、二甲基乙酰胺等。該反應(yīng)一般在惰性氣氛下，例如在氮?dú)夥障逻M(jìn)行，并進(jìn)行劇烈攪拌。該反應(yīng)一般在室溫至大約110℃下進(jìn)行1-2小時(shí)。將所得的反應(yīng)混合物適宜地處理，并可以用色譜法純化，得到8b(其中R9’為鏈烯基)。
然后將產(chǎn)物8b氫化得到產(chǎn)物8c。該氫化一般在Parr瓶?jī)?nèi)，在極性有機(jī)溶劑，例如甲醇、乙醇等中，使用10％擔(dān)載在碳上的鈀進(jìn)行。吹洗該瓶，充入H2至大約40-70psi，并振蕩直至完成，一般約4-24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，例如用硅藻土濾墊過(guò)濾，并用極性有機(jī)溶劑，例如甲醇洗滌數(shù)次。將合并的洗液和濾液蒸發(fā)得到產(chǎn)物8c，其中R9為烷基或取代的烷基。
以下方案9例示反式-R9-脯氨酸中間產(chǎn)物9d的一般合成，其中R9為取代的烷基，其中X為鹵素。

方案9.反式鹵代烷基脯氨酸9d的實(shí)施例合成。
(a)四烯丙基錫，BF3Et2O；(b)DMSO，(COCl)2，TEA；(c)DAST(D)10％Pd/C，H2如在方案9中所示，用在惰性有機(jī)溶劑中的適宜的試劑將醛8a還原并烷基化得到羥基鏈烯基取代的脯氨酸9a。用于還原和烷基化醛的適宜的試劑包括四烯丙基錫/三氟化硼醚合物、烯丙基TMS/三氟化硼醚合物，而可以使用的適宜的惰性有機(jī)溶劑包括THF、二氯甲烷等。該反應(yīng)一般在低溫如0℃下進(jìn)行大約1-2小時(shí)。往反應(yīng)混合物加入在水中的適宜的氟化物鹽的溶液，例如在水中的氟化鉀，然后加入甲醇。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，例如，用硅藻土過(guò)濾?？梢杂蒙V法純化產(chǎn)物得到9a。
通過(guò)與適宜的氧化劑在惰性有機(jī)溶劑中接觸而將羥基鏈烯基取代的脯氨酸9a氧化成酮。適宜的氧化劑包括草酰氯/DMSO、DessMartin periodinane等。適宜的惰性有機(jī)溶劑包括二氯甲烷等。該反應(yīng)一般在降低的溫度，例如-72℃至-50℃下進(jìn)行大約30分鐘至2小時(shí)。往反應(yīng)混合物中加入適宜的有機(jī)堿，例如三乙胺。處理反應(yīng)混合物得到產(chǎn)物9b。
通過(guò)與適宜的鹵化試劑在惰性有機(jī)溶劑中接觸而將酮取代的產(chǎn)物9b鹵化?？梢允褂玫倪m宜的鹵化試劑包括二乙基氨基三氟化硫、[雙(2-甲氧基乙基)氨基]三氟化硫等。可以使用的適宜的惰性有機(jī)溶劑包括二氯甲烷、乙酸乙酯、THF等。該反應(yīng)一般在大約-30℃至-78℃的低溫范圍內(nèi)進(jìn)行。將反應(yīng)混合物逐漸加熱至室溫，并在室溫下攪拌至完成，一般6-12小時(shí)。處理反應(yīng)混合物，并可用色譜法純化得到9c。
然后將產(chǎn)物9c氫化得到產(chǎn)物9d。該氫化一般在Parr瓶?jī)?nèi)，在極性有機(jī)溶劑，例如甲醇、乙醇等中，使用10％擔(dān)載在碳上的鈀進(jìn)行。吹洗該瓶，充入H2至大約40-70psi，并振蕩直至完成，一般約4-24小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，例如用硅藻土濾墊過(guò)濾，并用極性有機(jī)溶劑例如甲醇洗數(shù)次。將合并的洗液和濾液蒸發(fā)得到產(chǎn)物9d。
以下方案10例示如Shuman，Journal of Organic Chemistry.1990，55，741-750所述的關(guān)于取代的吡啶甲酸中間產(chǎn)物10b的一般合成，其中R9如關(guān)于式(I)的定義。
方案10.取代的吡啶-2-基甲酸10b的一般合成如方案10所示，使適宜取代的吡啶與適宜的氧化劑在惰性有機(jī)溶劑中接觸。該適宜取代的吡啶原料可商購(gòu)自銷售商，例如Aldrich和Sigma。作為可替代的選擇，這些吡啶可以由本領(lǐng)域中已知的方法制備。可以使用的適宜的氧化劑包括過(guò)氧化氫、MCPBA等。該反應(yīng)一般回流進(jìn)行6-12小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物與適宜的氰化物試劑接觸，得到氰基-取代的吡啶10a?？梢允褂玫倪m宜的氰化物試劑包括三甲基甲硅烷基氰化物、HCN等。適宜的惰性有機(jī)溶劑包括二氯甲烷、二噁烷、THF等。該反應(yīng)可以便利地在室溫下進(jìn)行大約6-12小時(shí)。處理反應(yīng)混合物得到氰基-取代的吡啶10a。
然后通過(guò)與適宜的酸接觸而將氰基-取代的吡啶10a水解得到吡啶-2-基甲酸10b。用于將氰基水解成羧酸的適宜的酸包括鹽酸、硫酸水溶液等。反應(yīng)一般在回流下進(jìn)行6-12小時(shí)。
以下方案11例示如以上方案1-5所述制備的林可胺中間產(chǎn)物和如以上方案6-10所述制備的吡咯烷基或哌啶基甲酸的偶合反應(yīng)，其中R1、R2、R3、R6和R9如關(guān)于式(I)的定義，P1為適宜的O-保護(hù)基，而P2為適宜的N-保護(hù)基。
方案11.一般偶合和脫保護(hù)方法如方案11所示，將適宜地7-取代的林可胺中間產(chǎn)物(例如根據(jù)方案1-5之任一方案制備)和適宜取代的吡咯烷基或哌啶基甲酸(例如根據(jù)方案6-10之任一方案制備)在反應(yīng)條件下，優(yōu)選在惰性有機(jī)溶劑中，在偶合劑和有機(jī)堿存在下縮合。此反應(yīng)可以用任何數(shù)目的已知偶合試劑，例如O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)、1-羥基苯并三唑水合物(HOBT)和碳化二亞胺、二苯基磷?；B氮化物(DPPA)、異丁基氯甲酸酯等進(jìn)行。適宜的有機(jī)堿包括二異丙基乙基胺(DIEA)、三乙胺(TEA)、吡啶、N-甲基嗎啉等。可以使用的適宜的惰性有機(jī)溶劑包括，例如N，N-二甲基甲酰胺、乙腈、二氯甲烷等。此反應(yīng)一般使用相對(duì)于林可胺過(guò)量的羧酸在大約0℃至大約50℃范圍內(nèi)的溫度下進(jìn)行。該反應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行至完全，其一般大約2-12小時(shí)。
保護(hù)基的除去可以用酸，例如三氟乙酸(TFA)、鹽酸、對(duì)甲苯磺酸等，在惰性有機(jī)溶劑，例如二氯甲烷、二氯乙烷、二噁烷、THF等中完成。該除去一般在低溫，例如0℃下進(jìn)行，然后逐漸加熱至室溫得到產(chǎn)物。
還如方案11所示，將適宜地7-取代的林可胺中間產(chǎn)物(例如根據(jù)方案1-5之任一方案制備)和適宜取代的吡啶-2-基甲酸(例如根據(jù)方案10制備)在反應(yīng)條件下，優(yōu)選在惰性有機(jī)溶劑中，在偶合劑和有機(jī)堿存在下縮合，如上述。
將吡啶11b氫化得到哌啶基產(chǎn)物。該氫化一般在Parr瓶?jī)?nèi)，在極性有機(jī)溶劑，例如甲醇、乙醇等中，使用氧化鉑(IV)，在酸如HCl、乙酸等存在下進(jìn)行。吹洗該瓶，并充入H2至大約40-70psi，并振蕩直至完成，一般大約24小時(shí)。將該反應(yīng)混合物過(guò)濾，例如用硅藻土濾墊過(guò)濾，并用極性有機(jī)溶劑例如甲醇洗滌數(shù)次。蒸發(fā)合并的洗液和濾液得到哌啶基產(chǎn)物。
還可以如Birkenmeyer等人，Journal of Medicinal Chemistry1984，27，216-223所述將吡啶甲酸和林可胺類偶合得到吡啶11b，然后還原成哌啶基產(chǎn)物。
以下方案12例示吡咯烷基或哌啶基環(huán)的氮的烷基化，其中R6為烷基、羥基烷基、亞烷基-取代的雜環(huán)或亞烷基-雜環(huán)，而R1、R2、R3和R9如關(guān)于式(I)的定義。
方案12.1’-N-取代的林可胺的一般合成a.烷基化試劑如方案12所示，可以通過(guò)與烷基化試劑在適宜的堿存在下接觸而N-取代林可胺12a得到產(chǎn)物12b?？梢允褂玫倪m宜的烷基化試劑包括環(huán)氧化物、烷基溴等。可以使用的適宜的堿包括碳酸鉀、碳酸銫、三乙胺等。該烷基化反應(yīng)一般在極性有機(jī)溶劑例如甲醇或DMF中進(jìn)行。該烷基化反應(yīng)一般在0℃至-10℃的低溫下進(jìn)行10-20小時(shí)。
以下方案13例示吡咯烷基或哌啶基環(huán)的氮的?；渲蠷6為-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]-亞烷基-取代的雜環(huán)，而R1、R2、R3和R9如關(guān)于式(I)的定義。
方案13.1′-N-取代的林可胺的一般合成如方案13所示，可以通過(guò)與酰氯101(例如R6-X，其中X為適宜的離去基團(tuán)，并優(yōu)選鹵素，甚至更優(yōu)選氯)在適宜的堿存在下接觸來(lái)N-取代林可胺12a，得到產(chǎn)物102。化合物101的實(shí)例包括溴芴基、Cl-C(O)O-烷基、Cl-C(O)O-芳基等?？梢允褂玫倪m宜的堿包括DCC、TEA等。該反應(yīng)一般在極性有機(jī)溶劑，例如甲醇或DMF中進(jìn)行。該反應(yīng)一般在-10℃至20℃的低溫范圍內(nèi)進(jìn)行。
藥物制劑當(dāng)用作藥物時(shí)，本發(fā)明的化合物通常以藥物組合物的形式給藥。這些化合物可以通過(guò)多種途徑給藥，包括口服、腸胃外、透皮、局部、直腸和鼻內(nèi)途徑。這些化合物作為注射和口服組合物均有效。這些組合物以藥物領(lǐng)域中已知的方式制備，并包含至少一種活性化合物。
本發(fā)明還包括含有作為活性成分的一種或多種以上本發(fā)明的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。在本發(fā)明的組合物的制備中，通常將活性成分與賦形劑混合，用賦形劑稀釋或包封在可以是膠囊、小袋、紙或其它容器形式的載體中。所用的賦形劑一般是適于對(duì)人受試者或其它哺乳動(dòng)物給藥的賦形劑。當(dāng)賦形劑用作稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體材料，用作活性成分的賦形劑、載體或介質(zhì)。因此，組合物可以是片劑、丸劑、粉末劑、錠劑、小袋、扁囊劑、酏劑、懸浮液、乳劑、溶液、糖漿、氣霧劑(為一種固體或在液體介質(zhì)中)、包含例如多至10wt％的活性化合物的軟膏、軟和硬明膠膠囊、栓劑、無(wú)菌注射液和無(wú)菌包裝散劑的形式。
在制備制劑中，可能需要研磨活性化合物得到適宜的粒徑，然后與其它組分組合。如果活性化合物基本上不溶，則通常將它研磨成小于200目的粒徑。如果活性化合物為基本上水溶的，則一般通過(guò)研磨調(diào)整粒徑得到在制劑中基本上均一分布，例如大約40目。
適宜賦形劑的某些實(shí)例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、無(wú)菌水、糖漿和甲基纖維素。該制劑還可以包括潤(rùn)滑劑，例如滑石、硬脂酸鎂和礦物油；潤(rùn)濕劑；乳化劑和助懸劑；防腐劑，例如甲基-和丙基羥基-苯甲酸酯；甜味劑；和調(diào)味劑。本發(fā)明的組合物可以通過(guò)使用本領(lǐng)域中已知的方法進(jìn)行配制從而在對(duì)患者給藥之后快速、持續(xù)或延遲釋放活性成分。
活性成分，即本發(fā)明化合物在藥物組合物及其單位劑型中的量可以根據(jù)特定的應(yīng)用、特定化合物的效力和所需濃度而大幅改變或調(diào)整。該組合物優(yōu)選制成單位劑型，各劑量包含大約5至大約100mg，更通常為大約10至大約30mg的活性成分。術(shù)語(yǔ)“單位劑型”指適于作為人受試者和其它哺乳動(dòng)物的單位劑量的物理上分離的單位，各單位包含計(jì)算產(chǎn)生目標(biāo)治療效果的預(yù)定量的活性物質(zhì)和適宜的藥物賦形劑。優(yōu)選地，使用不大于藥物組合物的大約20wt％，更優(yōu)選不大于大約15wt％的以上本發(fā)明的化合物，余量為藥學(xué)上惰性的載體。
活性化合物在寬泛的劑量范圍內(nèi)有效，并且一般以藥學(xué)或治療學(xué)有效量給藥。但是應(yīng)該理解，實(shí)際給藥的化合物的量將由醫(yī)師根據(jù)相關(guān)情況，包括待治療的病癥、治療的細(xì)菌感染的嚴(yán)重程度、選擇的給藥途徑、實(shí)際給藥化合物、個(gè)體患者的年齡、體重和反應(yīng)、患者癥癥的嚴(yán)重程度等來(lái)決定。
在用于治療或?qū)箿匮獎(jiǎng)游锏募?xì)菌感染的治療應(yīng)用中，化合物或其藥物組合物將以一定的劑量通過(guò)口、局部、透皮和/或腸胃外給藥以獲得和保持一定的濃度，即在經(jīng)受治療的動(dòng)物中抗菌有效的活性組分的量或血液水平。一般地，活性成分這種抗菌或治療有效量的劑量(即有效劑量)的范圍為大約0.1至大約100，更優(yōu)選大約1.0至大約50mg/kg體重/天。
為制備固體組合物，例如片劑，將主要活性成分與藥用賦形劑混合形成包含本發(fā)明化合物的均一混合物的固體預(yù)制劑組合物。如果稱這些制劑組合物是均一的，則意味著活性成分均勻分散于組合物，從而使組合物可以容易地再分成同等有效的單位劑型，例如片劑、丸劑和膠囊。然后將該固體預(yù)制劑再分成包含例如0.1至大約500mg本發(fā)明活性成分的以上所述類型的單位劑型。
本發(fā)明的片劑或丸劑可以包衣或以其它方式復(fù)合得到提供延長(zhǎng)作用優(yōu)點(diǎn)的劑型。例如，片劑或丸劑可以包含內(nèi)部劑量和外部劑量組成部分，后者是在前者之上的包封的形式。可以通過(guò)用于抵抗在胃中崩解并使內(nèi)部組成部分完整通過(guò)進(jìn)入十二指腸或延遲釋放的腸層分開(kāi)這兩個(gè)組成部分。許多材料可以用于這種腸層或包衣，這些材料包括許多聚合酸和聚合酸與材料如蟲(chóng)膠、鯨蠟醇和醋酸纖維素的混合物。
可以引入本發(fā)明的新組合物以進(jìn)行口服或注射給藥的液體劑型包括水溶液、適宜調(diào)味的糖漿、水性或油性懸浮液和含有食用油如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的調(diào)味乳劑以及酏劑和類似的藥物賦形劑。
用于吸入或吹入的組合物包括在藥學(xué)上可接受的水性或有機(jī)溶劑或其混合物中的溶液和懸浮液以及粉末劑。液體或固體組合物可以包含上述的適宜的藥學(xué)上可接受的賦形劑。優(yōu)選該組合物通過(guò)口或鼻呼吸途徑給藥以發(fā)揮局部或系統(tǒng)作用。在優(yōu)選藥學(xué)上可接受的溶劑中的組合物可以使用惰性氣體來(lái)噴霧。噴霧的溶液可以從噴霧裝置中直接吸入，或者該噴霧裝置可以連接到面罩塞或間歇正壓呼吸機(jī)。溶液、懸浮液或粉末組合物可以優(yōu)選通過(guò)口或鼻從以適宜的方式遞送制劑的裝置中給藥。
以下制劑實(shí)施例例示代表性的本發(fā)明的藥物組合物。
制劑實(shí)施例1制備包含以下成分的硬明膠膠囊成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)活性成分 30.0淀粉 305.0硬脂酸鎂 5.0將以上成分混合，并以340mg量裝填至硬明膠膠囊。
制劑實(shí)施例2使用以下成分制備片劑配方成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)活性成分 25.0纖維素，微晶 200.0膠體二氧化硅 10.0硬脂酸 5.0將組分混合并壓成片劑，各片重240mg。
制劑實(shí)施例3制備包含以下組分的干粉吸入制劑成分重量％活性成分5乳糖95將活性成分與乳糖混合，并將混合物加到干粉吸入器。
制劑實(shí)施例4如下制備各自包含30mg活性成分的片劑。
成分?jǐn)?shù)量(mg/膠襄)活性成分30.0mg淀粉45.0mg微晶纖維素 35.0mg聚乙烯吡咯烷酮 4.0mg(為在無(wú)菌水中的10％溶液)羧甲基淀粉鈉4.5mg硬脂酸鎂0.5mg滑石1.0mg總量120mg使活性成分、淀粉和纖維素通過(guò)No.20目U.S.篩，并充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與所得的粉末混合，然后通過(guò)16目U.S.篩。將如此產(chǎn)生的顆粒在50℃至60℃下干燥，通過(guò)16目U.S.篩。然后將先前通過(guò)No.30目U.S.篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石加到顆粒，將其混合之后在壓片機(jī)上壓制得到每片重120mg的片劑。
制劑實(shí)施例5
如下制備各含40mg藥物的膠囊成分?jǐn)?shù)量(mg/膠襄)活性成分40.0mg淀粉109.0mg硬脂酸鎂1.0mg總量150.0mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過(guò)No.20目U.S.篩，并以150mg量填充至硬明膠膠囊。
制劑實(shí)施例6如下制備各自包含25mg活性成分的栓劑成分?jǐn)?shù)量活性成分25飽和脂肪酸甘油酯加至2,000mg使活性成分通過(guò)No.60目U.S.篩，并懸浮在先前用最小必需熱量熔化的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將混合物傾入名義上2.0g容量的栓劑模型中并使其冷卻。
制劑實(shí)施例7如下制備各包含50mg藥物/5.0mL劑量的懸浮液成分?jǐn)?shù)量活性成分50mg黃原膠 4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％)微晶纖維素(89％)50.0mg蔗糖1.75g苯甲酸鈉10.0mg
調(diào)味劑和色素 q.v.
純化水加至 5.0mL將活性成分、蔗糖和黃原膠混合，通過(guò)No.10目U.S.篩，然后與先前制備的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉在水中的溶液混合。用一些水稀釋苯甲酸鈉、調(diào)味劑和色素，并攪拌加入。然后加入足量的水以產(chǎn)生所需的體積。
制劑實(shí)施例8成分?jǐn)?shù)量(mg/膠囊)活性成分 15.0mg淀粉 407.0mg硬脂酸鎂 3.0mg總量 425.0mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過(guò)No.20目U.S.篩，并以425.0mg量填充至硬明膠膠囊中。
制劑實(shí)施例9可以如下制備皮下制劑成分?jǐn)?shù)量活性成分 5.0mg玉米油 1.0mL制劑實(shí)施例10
如下制備局部制劑成分?jǐn)?shù)量活性成分 1-10g乳化蠟 30g液體石蠟 20g白色軟石蠟加至 100g將白色軟石蠟加熱至熔化。引入液體石蠟與乳化蠟，并攪拌至溶解。加入活性成分，并繼續(xù)攪拌至分散。然后將混合物冷卻至固體。
制劑實(shí)施例11可以如下制備靜脈內(nèi)制劑成分?jǐn)?shù)量活性成分 250mg等滲鹽水 1000mg用于本發(fā)明方法的另一優(yōu)選的制劑使用透皮遞送裝置(“貼劑”)。這種透皮貼劑可以用于提供以受控的量連續(xù)或間斷灌輸本發(fā)明的化合物。用于遞送藥劑的透皮貼劑的構(gòu)造和使用在本領(lǐng)域中是已知的。例如參見(jiàn)1991年6月11日授權(quán)的美國(guó)專利5,023,252，本文引入以供參考。這些貼劑可以構(gòu)造用于連續(xù)、脈沖式或按需要遞送藥劑。
經(jīng)常期望或需要將藥物組合物直接或間接引入腦。直接技術(shù)通常包括將藥物遞送導(dǎo)管置于宿主腦室系統(tǒng)以繞過(guò)血-腦屏障。用于將生物因子轉(zhuǎn)運(yùn)至身體的特定解剖區(qū)域的一種這樣的可植入遞送系統(tǒng)如在美國(guó)專利5,011,472中所述，本文將其引入以供參考。
一般作為優(yōu)選的間接技術(shù)通常包括配制組合物以通過(guò)將親水藥物轉(zhuǎn)化成脂溶性藥物而得到藥物潛伏化。潛伏化一般通過(guò)阻斷藥物上存在的羥基、羰基、硫酸酯和伯胺基團(tuán)以使藥物更具脂溶性和適于轉(zhuǎn)運(yùn)通過(guò)血腦屏障來(lái)實(shí)現(xiàn)。作為可替代的選擇，親水藥物的遞送可以通過(guò)動(dòng)脈內(nèi)灌輸可以瞬間打開(kāi)血腦屏障的高滲溶液來(lái)得到增強(qiáng)。
其它用于本發(fā)明的適宜制劑可以見(jiàn)于Remington’sPharmaceutical Sciences，Mace Publishing Company，Philadelphia，PA，17th ed.(1985)。
如上述，本文所述的化合物適用于上述的多種藥物遞送系統(tǒng)。此外，為了增強(qiáng)給藥化合物的體內(nèi)血清半衰期，可以將化合物包囊，引入脂質(zhì)體腔，制成膠體，或者可以使用延長(zhǎng)化合物的血清半衰期的其它常規(guī)技術(shù)?？衫枚喾N用于制備脂質(zhì)體的方法，如Szoka等人，美國(guó)專利4,235,871，4,501,728和4,837,028所述，其中各篇專利在此被引入作為參考。
如上述，施用于患者的化合物為上述的藥物組合物形式。這些組合物可以用常規(guī)的滅菌技術(shù)滅菌或者可無(wú)菌過(guò)濾。所得的水溶液本身可以包裝使用，或者將其凍干，在給藥前將該凍干制劑與無(wú)菌水性載體混合。該化合物制劑的pH通常為3-11，更優(yōu)選5-9，最優(yōu)選7-8?？梢岳斫?，使用某些前述賦形劑、載體或穩(wěn)定劑將導(dǎo)致形成藥用鹽。
一般地，本發(fā)明的化合物可以治療有效量，通過(guò)任何可接受的用于作類似應(yīng)用的藥劑的給藥模式來(lái)給藥。這種化合物的毒性和療效可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)方法，在細(xì)胞培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物中測(cè)定，例如測(cè)定LD50(50％群體致死的劑量)和ED50(50％群體治療有效量)。毒性和治療效果之間的劑量比是治療指數(shù)，它可以表示為L(zhǎng)D50/ED50之比。優(yōu)選表現(xiàn)出大治療指數(shù)的化合物。
由細(xì)胞培養(yǎng)物試驗(yàn)和動(dòng)物研究得到的數(shù)據(jù)可以用于配制用于人的劑量范圍。這些化合物的劑量?jī)?yōu)選處在包括ED50同時(shí)毒性小或沒(méi)有的循環(huán)濃度范圍之內(nèi)。劑量可以在此范圍內(nèi)隨所用的劑型和所用的給藥途徑而變。對(duì)于用于本發(fā)明方法的任何化合物，治療有效量可以初步由細(xì)胞培養(yǎng)物試驗(yàn)來(lái)估計(jì)。劑量可以在動(dòng)物模型中制定以達(dá)到包括在細(xì)胞培養(yǎng)物中測(cè)定的IC50(實(shí)現(xiàn)癥狀半數(shù)最大抑制的測(cè)試化合物濃度)的循環(huán)血漿濃度范圍。這些信息可用于更精確地確定人的有用劑量。血漿水平可以例如通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定。
實(shí)用性本文定義的化合物、其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽可能具有抗多種細(xì)菌、原生動(dòng)物、真菌和寄生蟲(chóng)的活性。例如，所述化合物、其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽可以具有抗革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性菌活性。所述化合物、其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽可以具有抗不同真菌，包括來(lái)自毛霉菌屬和念珠菌屬的真菌例如總狀毛霉或白色念珠菌的活性。所述化合物、其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽可具有抗多種寄生蟲(chóng)，包括瘧疾和隱孢子蟲(chóng)寄生蟲(chóng)的活性。
本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出抗多種細(xì)菌感染，包括例如革蘭氏陽(yáng)性菌感染、革蘭氏陰性菌感染、分枝桿菌感染、支原體感染和衣原體感染的活性。
由于本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出有效的抗多種細(xì)菌，例如革蘭氏陽(yáng)性菌的活性，因此本發(fā)明的化合物是有用的抗微生物劑，并可以有效對(duì)抗許多人和獸醫(yī)病原體，包括革蘭氏陽(yáng)性菌。本發(fā)明化合物有效抵抗的革蘭氏陽(yáng)性生物包括肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichiacoii)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)等。
本發(fā)明的化合物可以與一種或多種附加的抗菌劑組合。一種或多種附加的抗菌劑可具有抗革蘭氏陰性菌活性。此外，一種或多種附加的抗菌劑可具有抗革蘭氏陽(yáng)性菌活性。本發(fā)明的化合物和一種或多種附加的抗菌劑的組合可以用于治療革蘭氏陰性菌感染。此外，本發(fā)明化合物與與一種或多種附加抗菌劑的組合可以用于治療革蘭氏陽(yáng)性菌感染。本發(fā)明的化合物和一種或多種附加的抗菌劑的組合還可以用于治療分枝桿菌感染、支原體感染或衣原體感染。
本發(fā)明化合物的體外活性可以用標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)方法，例如如1993年由National Committee for Clinical Laboratory standards，Villanova，Pennsylvania，USA出版的″Approved Standard.Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests forBacteria that Grow Aerobically，″3rd ed.所述通過(guò)瓊脂稀釋測(cè)定最小抑制濃度(MIC)來(lái)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
對(duì)哺乳動(dòng)物患者給藥的量將取決于所給的物質(zhì)、給藥目的(例如預(yù)防或治療)、患者狀態(tài)、給藥方式等而變。在治療應(yīng)用中，將足以治愈或至少部分抑制疾病的癥狀及其并發(fā)癥的量的組合物施用于已患病的患者。足夠完成此目的的量定義為“治療有效劑量”。有效地作此應(yīng)用的量將取決于治療的病癥，并由主治的臨床醫(yī)生根據(jù)諸如炎癥的嚴(yán)重程度、患者的年齡、體重和一般狀況等的因素判斷。
對(duì)患者給藥的組合物是上述的藥物組合物的形式。這些組合物可以通過(guò)常規(guī)的滅菌技術(shù)滅菌或者可以無(wú)菌過(guò)濾。所得的水溶液本身可以包裝供使用，或者將其凍干，將該凍干制劑與無(wú)菌水性載體組合后給藥?；衔镏苿┑膒H一般為3-11，更優(yōu)選5-9，最優(yōu)選7-8。可以理解使用某些前述的賦形劑、載體或穩(wěn)定劑將導(dǎo)致形成藥用鹽。
本發(fā)明化合物的治療劑量將根據(jù)例如特定的治療應(yīng)用、化合物的給藥方式、患者的健康和狀況以及處方醫(yī)師的判斷而變。例如，對(duì)于靜脈內(nèi)給藥，劑量范圍一般為大約20mg至大約500mg/千克體重，優(yōu)選大約100mg至大約300mg/千克體重。用于鼻內(nèi)給藥的適宜的劑量范圍一般為大約0.1mg-1mg/千克體重。有效劑量可以根據(jù)由體外或動(dòng)物模型試驗(yàn)系統(tǒng)得到的劑量-反應(yīng)曲線來(lái)推斷。
提供以下的合成和生物實(shí)施例以例示本發(fā)明，不應(yīng)以任何方式將其理解為限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例在以上討論和以下實(shí)施例中，以下縮寫(xiě)具有以下含義。如果縮寫(xiě)未定義，則它具有其常規(guī)接受的含義。
7-甲基/MTL ＝1-甲硫基-7-脫氧-7-甲基林可胺apt ＝明顯的三重峰atm ＝大氣壓Bn ＝芐基Boc ＝叔丁氧羰基保護(hù)基brs ＝寬單峰BSTFA ＝N，O-雙(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺Cbz ＝羰基氧芐氧基保護(hù)基CDCl3＝氘化氯仿CD3OD ＝氘化甲醇cfu ＝菌落形成單位D ＝雙重峰DAST＝二甲基氨基三氟化硫dd ＝雙重雙峰dddd＝雙重雙峰的雙重雙峰dt ＝雙重三峰DCE ＝二氯乙烷DCM ＝二氯甲烷DIEA＝二異丙基乙基胺DMAP＝二甲基氨基吡啶DMF ＝二甲基甲酰胺DMSO＝二甲亞砜DPPA＝二苯基磷?；B氮化物
ED50＝在50％群體中治療有效的劑量Equiv ＝當(dāng)量ESMS ＝電噴霧質(zhì)譜Et＝乙基EtOAc ＝乙酸乙酯Et2O ＝乙醚g ＝克h ＝小時(shí)HATU ＝O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽HOBT ＝1-羥基苯并三唑水合物1H NMR＝氫核磁共振光譜HPLC ＝高壓液相色譜法Hz＝赫茲IC50＝實(shí)現(xiàn)癥狀半數(shù)最大抑制的受試化合物的濃度J ＝以赫茲為單位的偶合常數(shù)L ＝升LD50＝50％群體致死的劑量LiHMDS＝六甲基二硅烷化鋰(lithiumhexamethyldisilazide)LiN(iPr)2＝二異丙基氮化鋰m 多重峰M ＝摩爾MCPBA ＝2-(4-氯-鄰甲苯氧基)乙酸Me＝甲基MeCN ＝乙腈MeOH ＝甲醇mg＝毫克MHz ＝兆赫
Min＝分鐘mL ＝毫升Mm ＝毫米mmol ＝毫摩爾MS(ESPOS) ＝通過(guò)正模式電噴霧電離進(jìn)行的質(zhì)譜測(cè)定MS(ESNEG) ＝通過(guò)負(fù)模式電噴霧電離進(jìn)行的質(zhì)譜測(cè)定MTL＝1-甲硫基林可胺(甲基6-氨基-6，8-二脫氧-1-硫代-赤型-α-D-半乳-八吡喃糖苷)N ＝正常NMR＝核磁共振OBz＝芐氧基保護(hù)基OtBu ＝叔丁氧基Pd/C ＝鈀/碳pg ＝微微克Ph ＝苯基Pro＝L-脯氨酸psi＝每平方英寸磅數(shù)q ＝四重峰q.v. ＝定量Rf＝保留因子Rt ＝室溫S ＝單峰Sat. ＝飽和T ＝三重峰TEA＝三乙胺TFA＝三氟乙酸THF＝四氫呋喃TLC＝薄層色譜法μg＝微克
μL＝微升μm＝微摩爾v/v＝體積除以體積w/w＝重量除以重量此外，術(shù)語(yǔ)″Aldrich″表示用于以下方法的化合物或試劑可商購(gòu)自Aldrich Chemical Company，Inc，1001 West Saint Paul Avenue，Milwaukee，WI 53233 USA；術(shù)語(yǔ)″Fluka″表示化合物或試劑可商購(gòu)自Fluka Chemical Corp.，980 South 2nd Street，Ronkonkoma NY11779 USA；術(shù)語(yǔ)″Lancaster″表示化合物或試劑可商購(gòu)自LancasterSynthesis，Inc.，P.O.Box 100 Windham，NH 03087 USA；術(shù)語(yǔ)″Sigma″表示化合物或試劑可商購(gòu)自Sigma，P.O.Box 14508，St.Louis MO 63178 USA；術(shù)語(yǔ)″Chemservice″表示化合物或試劑可商購(gòu)自Chemservice Inc.，Westchester，PA，USA；術(shù)語(yǔ)″Bachem″表示化合物或試劑可商購(gòu)自Bachem Bioscience Inc.，3700 HorizonDrive，Renaissance at Gulph Mills，King of Prussia，PA 19406USA；術(shù)語(yǔ)″Maybridge″表示化合物或試劑可商購(gòu)自MaybridgeChemical Co.Trevillett，Tintagel，Cornwall PL 34 OHW UnitedKingdom；術(shù)語(yǔ)″ RSP″表示化合物或試劑可商購(gòu)自RSP Amino AcidAnalogs，Inc.，106 South St.，Hopkinton，MA 01748，USA，而術(shù)語(yǔ)″TCI″表示化合物或試劑可商購(gòu)自TCI America，9211 NorthHarborgate St.，Portland，Oregon，97203，OR，USA；術(shù)語(yǔ)″Toronto″表示化合物或試劑可商購(gòu)自Toronto ReasearchChemicals，Inc.，2 Brisbane Rd.，New York，ON，Canada M3J2J8；術(shù)語(yǔ)″Alfa″表示化合物或試劑可商購(gòu)自Johnson Matthey CatalogCompany，Inc.30 Bond Street，Ward Hill，MA 018350747；而術(shù)語(yǔ)″Nova Biochem″表示化合物或試劑可商購(gòu)自NovaBiochem USA，10933 North Torrey Pines Road，P.O.Box 12087，La Jolla CA92039-2087。
在以下實(shí)施例中，所有的溫度以攝氏度為單位(除非另外指出)，并用以下的一般方法制備所示的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解以下的一般過(guò)程僅意在進(jìn)行例示，且這些方法可以拓寬至合成本發(fā)明的其它化合物。
一般方法方法A甲基6-氨基-6，8-二脫氧-1-硫代-赤型-α-D-半乳-八吡喃糖苷1a(R1＝Me)(MTL)如Hoeksema，H.等人，R Am.Chem.Soc，1967，89，2448-2452所述制備。將N-(芐氧基羰基氧)琥珀酰亞胺(5.8g23.1mmol)和1a(5.0g，19.7mmol)懸浮在吡啶(40mL)中，并在N2氮?dú)夥障聰嚢?6h。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后在2min內(nèi)通過(guò)注射器加入雙-N，O-三氟乙酰胺(15.7mL，59.0mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至rt并攪拌42h。加入甲苯(100mL)并將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干。用乙酸乙酯(400mL)吸收殘余物。用10％檸檬酸(200mL)、H2O(3×100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和鹽水(2×100mL)快速洗滌有機(jī)溶液，用Na2SO4干燥，并蒸發(fā)至干。在從甲苯(100mL)和環(huán)己烷(2×100mL)中共蒸發(fā)之后在硅膠上用含有0.2％TEA的10％EtOAc/己烷色譜處理粗產(chǎn)物，得到受保護(hù)的產(chǎn)物1b(P＝Cbz，R1＝Me)(7.2g，54％)，為一種無(wú)色油。
1H NMR(300MHz，CD3SOCD3)δ7.34-7.31(m，5)，7.05(d，J＝8.2，1)，5.19(d，J＝5.8，1)，5.01(d，J＝1.6，2)，3.99(apt dt，J＝5.5，9.3，9.3，2)，3.93-3.86(m，3)，3.49(dd，J＝2.5，9.6，1)，2.01(s，3)，1.03(D，J＝6.3，3)，0.10(s，9)，0.09(s，9)，0.04(m，18)。
1min內(nèi)往冷卻至-72℃的在DCM(1.5mL)中的二甲亞砜(413μL，5.82mmol)加入在DCM(1.49mL，2.98mmol)中的2M草酰氯。25min后通過(guò)套管加入在DCM(4.0mL)中的受保護(hù)的產(chǎn)物1b(1.92g，2.84mmol)。將所得的反應(yīng)混合物攪拌25min，然后加熱至-50℃(干冰乙腈)，并在此溫度下保持2h。往反應(yīng)混合物中加入TEA(1.29mL，3.30mmol)。25min后用EtOAc(300mL)稀釋反應(yīng)混合物。用5％檸檬酸(300mL)、H2O(2×300mL)、飽和NaHCO3(100mL)、鹽水(100mL)快速洗滌所得的有機(jī)溶液，用Na2SO4干燥，并借助甲苯(100mL)蒸發(fā)至干，得到產(chǎn)物1c。在與正戊烷共蒸發(fā)并在高真空下除去殘留溶劑之后得到產(chǎn)物1c(P＝Cbz，R1＝Me)，為一種無(wú)色結(jié)晶固體(1.60g，94％)。
1H NMR(300MHz CDCl3)δ7.37-7.33(m，5)，5.60(m，1)，5.21(d，J＝5.2，1)，5.17(d，J＝12.4，1)，5.08(d，J＝12.4，1)，4.74(m，1)，4.16-4.12(m，2)，3.87(d，J＝2.2，1)，3.69(dd，J＝2.5，9.3，1)，2.01(br s，3)，1.90(s，3)，0.19(s，9)，0.16(s，9)，0.15(s，9)。
方法B一般可以如上述制備Boc保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Boc，R1＝Me)。將1a(R1＝Me)(MTL)(在50℃高真空下干燥)(21.8g，86mmol)懸浮在甲醇(200mL)和TEA(26mL)中，并在冰上冷卻至0℃。往此混合物中加入二碳酸二叔丁酯(57.0g，0.26mol)。然后將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過(guò)夜。往反應(yīng)混合物加入甲苯(100mL)。除去溶劑至總體積為100mL，剩下稠懸浮液，往其中加入環(huán)己烷(300mL)。將所得的固體沉淀研磨，然后過(guò)濾，并用環(huán)己烷、乙醚和戊烷洗滌，并干燥至恒重。不經(jīng)進(jìn)一步純化使用粗Boc-保護(hù)的產(chǎn)物(87％)。
TLC Rf＝0.75(10％MeOH/DCM)；MS(ESPOS)354(M+H)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.14(d，J＝6.3，3)，1.43(s，9)，2.07(s，3)，3.55(dd，J＝3.3，10.43，1)，3.84-4.08(m，3)，4.10-4.15(m，2)，5.25(d，J＝5.5，1)。
0℃下往在DMF(5mL)中的N-Boc-1-甲硫基林可酰胺(lincosamide)(240mg，0.68mmol)加入BSTFA(0.52mL，2.0mmol)和三乙胺(0.14mL，1.42mmol)，然后在rt下攪拌過(guò)夜。除去DMF，并使粗產(chǎn)物快速地通過(guò)硅膠柱(用在乙酸乙酯中的2％TEA預(yù)處理)，用在己烷中的10％乙酸乙酯洗脫1b(P＝Boc，R1＝Me)(350mg，95％)。-60℃下往在二氯甲烷(5mL)中的草酰氯(0.16mL，0.78mmol)緩慢加入二甲亞砜(0.22mL，0.78mmol)，然后攪拌15分鐘。隨后緩慢加入在DCM(5mL)中的1b(370mg，0.65mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌45min，在此期間反應(yīng)溫度升至-40℃。然后加入三乙胺(0.70mL，3.25mmol)，并在-40℃下繼續(xù)攪拌另外15min。然后用DCM(100mL)萃取，并用10％檸檬酸(50mL)洗滌。然后在硅膠柱上用在己烷中的10％乙酸乙酯作為洗脫劑純化除去溶劑時(shí)得到的殘余物，1c(P＝Boc，R1＝Me)，為一種無(wú)色油(289mg，78％)。
TLCRf＝0.60(10％ETOAC/己烷)；MS(ESPOS)590(M+23)；HNMR(300MHz，CDCl3)δ0.11(s，18)，0.17(s，18)，1.40(s，9)，1.84(s，3)，2.26(s，3)，3.63(dd，J＝2.7，9.34，1)，3.82(d，J＝1.9，1)，4.01-4.12(m，2)，5.15(d，J＝5.5，1)。
方法C在N2氮?dú)夥障聦⑷交祖f溴化物(3.29g，9.2mmol)和叔丁醇鉀(715mg，6.4mmol)懸浮在甲苯(31mL)中，并劇烈攪拌。4h后，通過(guò)套管加入在甲苯(20mL)中的受保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Cbz，R1＝Me)(1.4g，2.36mmol)。將所得的反應(yīng)混合物攪拌2h，然后用EtOAc(250mL)稀釋。用H2O(2×100mL)、鹽水(1×100mL)快速地洗滌所得的有機(jī)溶液，用Na2SO4干燥，并蒸發(fā)至干。在硅膠上用含0.2％TEA的6％EtOAc/己烷色譜處理粗產(chǎn)物，得到烯烴產(chǎn)物2a(P＝Cbz，R1＝Me，R2＝CH2)，為一種無(wú)色油，它在用甲苯和環(huán)己烷共蒸發(fā)后結(jié)晶(0.65g，46％)。
1H NMR(300MHz CDCl3)δ7.35-7.27(m，5)，6.36(d，J＝7.1，1)，5.24(d，J＝5.5，1)，5.08(m，4)，4.34(m，1)，4.16(m，2)，3.88(d，J＝2.2，1)，3.61(dd，J＝2.2，9.3，1)，2.20(s，3)，1.79(s，3)，0.17-0.13(m，27)。
在par瓶中將在乙醇(50mL)中的產(chǎn)物2a(P＝Cbz，R1＝Me，R2＝CH2)(490mg，0.82mmol)加到10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(700mg)。將瓶吹洗，并充入H2至65psi，并振蕩24h。反應(yīng)混合物用硅藻土過(guò)濾，用甲醇沖洗。將有機(jī)溶液轉(zhuǎn)移至包含干燥、洗滌過(guò)的Dowex 50w-400x H+形式(0.8g)的樹(shù)脂漏斗，并振蕩10min。用甲醇洗滌樹(shù)脂三次和用水洗滌兩次之后，通過(guò)用在MeOH中的5％TEA(35mL，×10min×5)洗滌而從樹(shù)脂上洗脫飽和產(chǎn)物2b(R1＝Me，R2＝Me)。將合并的濾液蒸發(fā)至干，用EtOH共蒸發(fā)兩次，并用1∶1 MeCN/H2O凍干得到產(chǎn)物，為一種無(wú)色粉末(198.4mg96％)。
1HNMR(300MHz，D2O)δ5.17(d，J＝5.8，1)，3.97-3.84(m，3)，3.52(dd，J＝3.0，10.0，1)，2.82(dd，J＝4.4，8.5，1)，1.94(s，3)，1.89-1.81(m，1)，0.82(d，J＝6.9，3)，0.72(d，J＝6.9，3).MS(ESPOS)252.2[M+H]，(ESNEG)250.4[M-H]。
方法D在使用Boc-保護(hù)基的可替代選擇的方案中，將甲基三苯基磷鎓溴化物(12g，33.6mmol)和叔丁醇鉀(3g，26.7mmol)吸收于0℃的THF(70mL)，并在rt下攪拌4小時(shí)。然后加入在THF(30mL)中的Boc-保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Boc，R1＝Me)(4.7g，8.2mmol)，并在rt下攪拌2h。隨后用EtOAc(300mL)萃取，用鹽水(100mL)洗滌，并用硫酸鈉干燥。用硅膠柱色譜法純化粗烯烴產(chǎn)物2a(P＝Boc，R1＝Me，R2＝CH2)，使用在己烷中的10％EtOAc作為洗脫劑(4.1g，87.6％)。
TLCRf＝0.5(在己烷中的10％EtOAc)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.24(m，2)，5.22(d，J＝5.7，1)，4.21(m，1)，4.09(m，2)，3.87(d，J＝2.4，1)，3.60(dd，J＝2.7，9.3，1)，1.99(s，3)，1.76(s，3)；1.43(s，9)；MS(ESPOS)444(M-2TMS+Na)。
往在甲醇(30mL)中的產(chǎn)物2a(P＝Boc，R1＝Me，R2＝CH2)加入DowexH+樹(shù)脂(1g)，并在rt下攪拌1h。將樹(shù)脂過(guò)濾，并將除去溶劑時(shí)得到的產(chǎn)物(2.4g，6.8mmol)吸收于MeOH(30mL)。加入Pd/C(2.5g)，并在55psi下氫化過(guò)夜。用硅膠柱色譜法純化在過(guò)濾并除去溶劑時(shí)得到的粗產(chǎn)物，使用在DCM中的10％MeOH，得到Boc-保護(hù)的7-甲基MTL，為一種白色固體(2.06g，86％)。TLC Rf＝0.5(在DCM中的10％MeOH)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.23(d，J＝5.4，1)，4.11(m，1)，3.97(d，J＝10.2，1)，3.84(m，1)，3.52(m，1)，2.08(s，3)，1.44(s，9)，1.14(m，1)，0.93(d，J＝6.9，3)，0.85(d，J＝6.9，3)；MS(ESPOS)351(M+H)。
往在二氯乙烷(6mL)中的Boc-保護(hù)的7-甲基MTL(150mg，0.43mmol)加入二甲基硫醚(0.16mL，2.5mmol)，然后加入TFA(2mL)、水(0.16mL)，并在rt下攪拌1h。除去溶劑得到粗產(chǎn)物2b(R1＝Me，R2＝Me)。使用在DCM中的30％MeOH作為洗脫劑進(jìn)行硅膠柱色譜處理純化之后，得到產(chǎn)物2b(R1＝Me，R2＝Me)，其在所有方面與得自方法C的物質(zhì)相同。
方法E在N2氣氛下將氫化鈉(80mg，3.3mmol)懸浮在THF(4mL)中，并劇烈攪拌。將懸浮液冷卻至-30℃，并加入(氰基甲基)膦酸二乙酯(805μL，5.0mmol)。30分鐘后通過(guò)套管加入在THF(3mL)中的受保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Cbz，R1＝Me)(1.0g，1.7mmol)。將所得的反應(yīng)混合物攪拌4h，然后用EtOAc(250mL)稀釋。用飽和NaHCO3水溶液(1×100mL)、鹽水(1×50mL)快速洗滌所得的有機(jī)溶液，用Na2SO4干燥，并蒸發(fā)至干。在硅膠上用包含0.2％TEA的6％EtOAc/己烷-10％EtOAc/己烷色譜處理粗產(chǎn)物得到受保護(hù)的烯烴產(chǎn)物2a(P＝Cbz，R1＝Me，R2＝CHCN)，為一種無(wú)色油(0.38g，37％)。MS(ESPOS)625.5.2[M+H]，ES(NEG)659.5[M+Cl]。
在Parr瓶中將在乙醇(15mL)中的產(chǎn)物2a(P＝Cbz，R1＝Me，R2＝CHCN)(180mg，0.29mmol)加到10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(300mg)，并加入濃HCl(29μL)。將瓶吹洗，充入H2至65psi，并振蕩24小時(shí)。用硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，用甲醇沖洗。將有機(jī)溶液轉(zhuǎn)入含干燥、洗滌過(guò)的Dowex 50w-400xH+形式(1g)的樹(shù)脂漏斗，并振蕩10min。將樹(shù)脂用甲醇洗滌兩次并用水洗滌之后，通過(guò)用在MeOH中的5％TEA(20ml×20min×3)和MeCN(20mL×20min)洗滌而從樹(shù)脂上洗脫飽和產(chǎn)物2b(R1＝Me，R＝CH2CN)。將合并的有機(jī)濾液蒸發(fā)至干，用1∶1 MeCN/H2O凍干得到產(chǎn)物2b(R1＝Me，R2＝CH2CN)，為一種無(wú)色固體(70mg，91％)。ES(NEG)275.3[M-H]。
方法F0℃下往在THF(7.3mL)中的受保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Cbz，R1＝Me)(0.75g，1.3mmol)加入在THF(7.0mL 2.1mmol)中的MeMgCl(3M)。30分鐘內(nèi)，將反應(yīng)混合物加熱至4℃，并在4h后用1∶3飽和NH4Cl水溶液/H2O(10ml)終止反應(yīng)混合物反應(yīng)。用水將終止反應(yīng)的混合物稀釋至100mL，并用DCM(4×50mL)萃取。將合并的有機(jī)相干燥并蒸發(fā)。將殘余物溶于1∶2∶4 H2O/HOAC/THF(100mL)，并攪拌20h，然后借助甲苯(2×100mL)蒸發(fā)。用10∶1-10∶2DCM/MeOH進(jìn)行色譜處理得到產(chǎn)物3a(P＝Cbz，R1＝Me，R2＝Me)(153mg，31％)。
(ESNEG)399.5[M-H]。
在Parr瓶中將在乙醇(10mL)中的3a(P＝Cbz，R1＝Me，R2＝Me)(79mg，0.2mmol)加到10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(400mg)。將瓶吹洗，充入H2至65psi，并振蕩6小時(shí)。用硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，用甲醇沖洗。將合并的濾液蒸發(fā)至干，并用1∶1 MeCN/H2O凍干得到產(chǎn)物3b(R1＝Me，R2＝Me)，為一種無(wú)色粉末(42mg，80％)。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.33(d，J＝5.8，-1)，4.83-4.06(m，3)，3.65-3.60(m，1)，3.06-3.03(m，1)，2.18(s，3)，1.30(s，3)，1.23(s，3).MS(ESPOS)268.4[M+H]，MS(ESNEG)266.2[M-H]。
方法G往在甲醇(3mL)中的Boc-保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Boc，R1＝Me)(100mg，0.18mmol)加入O-三甲基甲硅烷基羥基胺(0.10mL，0.88mmol)，并在rt下攪拌過(guò)夜。除去溶劑得到粗Boc-保護(hù)的產(chǎn)物4a(P＝Boc，R1＝Me，R7＝H)。往粗產(chǎn)物4a(95mg，0.15mmol)加入在二氯乙烷(10mL)中的30％三氟乙酸和二甲基硫醚(0.5mL)，并攪拌1h。除去溶劑，并取產(chǎn)物4b(R1＝Me，R7＝H)本身用于下一步驟。
TLCRf＝0.35(10％MeOH/DCM)；MS(ESPOS)267(M+H)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ1.96(s，3)，2.09(s，3)，3.58(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.90(s，1)，4.11(dd，J＝5.7，10.20，1)，4.19(d，J＝5.4，1)，4.50(d，J＝5.1，1)，5.36(d，J＝5.7，1)。
方法H往在甲醇(4mL)和水(1mL)中的Boc-保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Boc，R1＝Me)(100mg，0.176mmol)加入O-烷基羥基胺鹽酸鹽(例如O-甲基羥基胺鹽酸鹽)(60mg，0.70mmol)和乙酸鈉(57mg，0.70mmol)，并在80℃下加熱3h，然后在rt下攪拌過(guò)夜。在高度真空下除去溶劑得到粗Boc-保護(hù)的產(chǎn)物4a(P＝Boc，R1＝H，R7＝Me)。將粗產(chǎn)物4a吸收于在二氯乙烷(10mL)中的30％三氟乙酸、二甲基硫醚(0.5mL)，并在rt下攪拌1h。除去溶劑，并將殘余物在高度真空下放置1小時(shí)，并取產(chǎn)物4b(R1＝Me，R7＝Me)本身用于下一步驟。
TLCRf-0.63(10％ MeOH/DCM)；MS(ESPOS)281(M+H).1HNMR(300MHz，CD3OD)δ1.95(s，3)，2.08(s，3)，3.60(dd，J＝3.3，10.20，1)，3.92(s，3)，4.13(dd，J＝4.8，10.20，1)，4.49(d，J＝1.2，1)，5.38(d，J＝5.4，1)。
方法I往在THF(10mL)中的Boc-保護(hù)的產(chǎn)物1c(P＝Boc，R1＝Me)(500mg，0.88mmol)加入四丁基氟化銨(2.5mmol，1M，在THF中)，并將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。除去溶劑，并用硅膠柱純化殘余物，使用在二氯甲烷中的5％甲醇作為洗脫劑。然后將從柱上得到的產(chǎn)物(111mg，0.31mmol)吸收于二氯甲烷(3mL)和吡啶(3mL)的混合物，往其中加入乙酸酐(0.5mL，10.6mmol)和二甲基氨基吡啶(80mg，1.7mmol)，并在rt下攪拌過(guò)夜。除去溶劑，并用硅膠柱純化粗產(chǎn)物，使用在己烷中的30％乙酸乙酯作為洗脫劑，得到5a(P＝Boc，R1＝Me)(58mg，38％)。
TLCRf＝0.73(50％EtOAc/己烷)；MS(BSPOS)500(M+NA).1HNMR(300MHz，CDCl3)δ1.38(s，9)，1.91(s，3)，1.98(s，3)，2.07(s，3)，2.18(s，3)，4.33(m，1)，4.72(m，1)，4.94(m，1)，5.21(m，2)，5.45(s，1)，5.57(m，1)。
往在DCM(5mL)中的產(chǎn)物5a(P＝Boc，R1＝Me)(158mg，0.331mmol)加入二甲基氨基三氟化硫(732μL，3.31mmol)，并攪拌過(guò)夜。加入更多的DCM，并用碳酸氫鈉洗滌有機(jī)部分。用硅膠柱色譜純化除去溶劑時(shí)得到的殘余物，使用在己烷中的20％乙酸乙酯作為洗脫劑(100mg，60％)以得到受保護(hù)的產(chǎn)物(P＝Boc，R1＝Me)。將Boc-保護(hù)的產(chǎn)物吸收于在二氯乙烷中的30％三氟乙酸和二甲基硫醚，并在rt下攪拌1h。除去溶劑得到產(chǎn)物5b(R1＝Me)。
TLCRf＝0.63(40％MeOH/己烷)；MS(ESPOS)522(M+23).1HNMR(300MHz，CDCl3)δ1.40(s，9)，1.69(t，J＝18.9，3)，1.98(s，3)，2.08(s，6)，2.13(s，3)，4.22-4.30(m，1)，4.53(dd，J＝10.9，25.3，1)，5.16-5.28(m，2)，5.52(s，1)，5.63(d，J＝5.2，1)。
方法J根據(jù)Zhang，R.等人，Journal of the American ChemicalSociety.1998，120，3894-3902的文獻(xiàn)方法，烯醇化(LiHMDS)和用4-溴-2-甲基-2-丁烯基烷基化7a得到內(nèi)酰胺7b(R9’＝2-甲基-2-丁烯基)(61％)的非對(duì)映異構(gòu)體的混合物?；衔?a可商購(gòu)自銷售商，例如Bachem。作為可替代的選擇，可以由本領(lǐng)域中已知的方法制備7a，例如參見(jiàn)Baldwin等人，Tetrahedron，1989，45，7449-7468。
通過(guò)包括將內(nèi)酰胺超氫化物還原成半縮醛胺和隨后用Et3SiH/BF3·OEt2還原半縮醛胺的兩步程序?qū)?nèi)酰胺7b還原成吡咯烷7c(R9’＝2-甲基-2-丁烯基)(70％)。將在無(wú)水甲醇(25mL)中的吡咯烷7c(R9’＝2-甲基-2-丁烯基)(778mg，2.08mmol)、10％擔(dān)載在碳上的鈀(230mg)在50psi進(jìn)行Parr氫解5h。用硅藻土濾墊過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用甲醇洗滌數(shù)次。將合并的洗液和濾液蒸發(fā)至干，不經(jīng)進(jìn)一步純化得到一種無(wú)色油7d(R9＝2-甲基丁基)。
TLCRf＝0.3[溶劑體系DCM∶己烷∶MeOH(6∶5∶1)].MS(負(fù))284.5[M-H]。
方法K-78℃和氮?dú)夥障孪┐蓟?LiHMDS，33mmol，33mL，1.1equiv)和用在無(wú)水THF中的順式-1-溴-2-戊烯(4.21mL，35.6mmol，1.2equiv)烷基化7a(9.47g，29.7mmol，1equiv)，用硅膠純化后得到內(nèi)酰胺7b(R9’＝2-戊烯基)(43.2％)的非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。通過(guò)兩步程序?qū)?nèi)酰胺7b(3.96g，10.22mmol)還原成吡咯烷7c(R9’＝2-戊烯基)，包括在-78℃下在無(wú)水THF中將內(nèi)酰胺超氫化物還原成半縮醛胺，然后在-78℃下用在無(wú)水DCM中的Et3SiH/BF3OEt2還原半縮醛胺，在硅膠純化之后得到7c(R9’＝2-戊烯基)(71％)。使在無(wú)水甲醇(30mL)中的吡咯烷7c(2.71g，7.26mmol)、10％擔(dān)載在碳上的鈀(560mg)在50psi進(jìn)行Parr氫解5h。用硅藻土濾墊過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用甲醇洗滌數(shù)次。將合并的洗液和濾液蒸發(fā)至干，不經(jīng)進(jìn)一步純化得到一種無(wú)色油7d(R9＝戊基)(1.68g，80％)。
TLCRf＝0.3[溶劑體系DCM∶己烷∶MeOH(6∶5∶1)].MS(ESNEG)284.5[M-H]。
方法L
在無(wú)水二氯甲烷中臭氧分解7d(R9＝2-甲基丁基)，然后在-78℃下用DMS處理得到醛8a(77％)。在氮?dú)夥障聦?-氟芐基磷鎓氯化物(0.87g，2.13mmol)和叔丁醇鉀(0.17g，1.48mmol)懸浮在甲苯中并劇烈攪拌。4h后，滴加在甲苯(4.6ml)中的醛8a(204mg，0.59mmol)的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌2h，并用乙酸乙酯(50mL)稀釋。用水(2×20mL)、鹽水洗滌有機(jī)層，干燥并濃縮。用色譜法純化殘余物，得到一種澄清的糖漿8b(R9′＝3-(4-氟苯基)丙-2-烯基)(171mg)。
往在Parr瓶?jī)?nèi)在MeOH(25mL)中的8b(R9’＝3-(4-氟苯基)丙-2-烯基)(171mg，0.39mmol)的溶液加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(200mg)。將瓶吹洗，充入H2至40psi，并振蕩4h。用硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用MeOH沖洗。將濾液濃縮得到一種黃色油8c(R9＝3-(4-氟苯基)丙基)(120mg)。
MS(ESPOS)374.5[M+Na]+，MS(ESNEG)350.3[M-H]-。
方法M在氮?dú)夥障聦?-氯芐基磷鎓氯化物(0.95g，2.24mmol，3.9equiv)和叔丁醇鉀(0.17g，1.55mmol，2.7equiv)懸浮在甲苯(7.5mL)中并劇烈攪拌。4h后，滴加在甲苯(4.9mL)中的醛8a(200mg，0.58mmol，1equiv)的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌2h，并用乙酸乙酯(50mL)稀釋。用水(2×20mL)、鹽水洗滌有機(jī)層，干燥并濃縮。用色譜法純化殘余物得到一種澄清的糖漿8b(R9’＝3-(4-氯苯基)丙-2-烯基)(216mg，82％)。
MS(ESPOS)478.5[M+Na]+，MS(ESNEG)454.4[M-H]-。
往在環(huán)己烷(50mL)中的8b(R9’＝3-(4-氯苯基)丙-2-烯基)(147mg，0.32mmol)的溶液加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(80mg)。將反應(yīng)混合物于rt和1atm H2下攪拌過(guò)夜。用硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用MeOH沖洗。將濾液濃縮得到烷烴產(chǎn)物8c(R9＝3-(4-氯苯基)丙基)，為一種澄清的油(131mg，89％)。往在THF(3mL)和水(1mL)中的該烷烴(131mg，0.29mmol，1equiv)的溶液加入氫氧化鋰一水合物(60mg，1.43mmol，5equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去THF。殘余物用水(5mL)稀釋并用乙醚(10mL)洗。將水層吸收于乙酸乙酯(60mL)，并用10％檸檬酸(30mL)分配。用水和鹽水洗滌有機(jī)層，干燥，并濃縮得到一種澄清的糖漿8c(R9＝3-(4-氯苯基)丙基)(105mg，100％)。
MS(ESPOS)390.4[M+Na]+，268.4[M-Boc+H]+。
方法N0℃下往在二甲基乙酰胺(0.25mL)中的醛8a(406.5mg，1.17mmol，1equiv)的溶液加入二溴二氟甲烷(0.21mL，2.34mmol，2equiv)。20分鐘內(nèi)在氮?dú)夥障峦鶖嚢璧幕旌衔锛尤朐诙谆阴０?0.5mL)中的三苯基膦(0.61g，2.34mmol，2equiv)的溶液。將反應(yīng)混合物加熱至rt，并攪拌30分鐘，然后加到借助二甲基乙酰胺(0.3mL)活化的鋅(0.25g，3.82mmol，3.3equiv)。將所得的反應(yīng)混合物于110℃下攪拌1h，冷卻至rt，并借助二甲基乙酰胺(7mL)過(guò)濾。將濾液傾入冰水(100mL)，并用乙醚(150mL)萃取。用鹽水洗滌醚層，干燥，并濃縮。用色譜法純化殘余物得到一種澄清的油8b(R9’＝3，3-二氟丙-2-烯基)(182mg，41％)。
MS(ESPOS)282.4[M-Boc+H]+。
往在MeOH(35mL)中的8a(R9’＝3，3-二氟丙-2-烯基)(126mg，0.33mmol)的溶液加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(120mg)。將反應(yīng)混合物于rt和氫氣氛(1atm)下攪拌過(guò)夜，并借助MeOH用硅藻土過(guò)濾。將濾液濃縮得到一種澄清的糖漿8c(R9＝3，3-二氟丙基)(97mg，100％)。
MS(ESPOS)194.4[M-Boc+H]+，MS(ESNEG)292.4[M-H]-。
方法O
0℃下往在THF(3mL)中的醛8b(258mg，0.74mmol，1equiv)的溶液加入四烯丙基錫(178μL，0.74mmol，1equiv)，然后在15分鐘內(nèi)滴加三氟化硼醚合物(94.3μL，0.74mmol，1equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌1.5h。然后加入在水(1.25mL)中的氟化鉀(125mg)的溶液。將所得的混合物加熱至rt，并在rt下攪拌20min。然后加入甲醇(10mL)，并將所得的混合物于rt下再攪拌20min。用硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物。將濾液蒸發(fā)至干。用二氯甲烷(100mL)稀釋殘余物，用水(50mL)洗滌，干燥，濃縮并用色譜法純化得到一種澄清的油9a(R9＝2-羥基戊-4-烯基)(261mg，90％)MS(ESPOS)412.5[M+Na]+，290.4[M-Boc+H]+。
-72℃下在1min內(nèi)往在二氯甲烷(0.5mL)中的二甲亞砜(0.17mL，2.42mmol，3equiv)的溶液加入在二氯甲烷(0.61mL，1.21mmol，1.5equiv)中的2M草酰氯的溶液。將混合物于-72℃下攪拌25min，然后在2min內(nèi)滴加在二氯甲烷(1.4mL)中的醇9a(314mg，0.81mmol，1equiv)的溶液。將反應(yīng)混合物于-72℃下攪拌25min，然后加熱至-50℃，并攪拌另外2h。加入三乙胺(0.56mL，4.04mmol，5equiv)，并在-50℃下攪拌25min。用乙酸乙酯(100mL)稀釋混合物，用5％檸檬酸(100mL)、水、飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，干燥，蒸發(fā)，并與無(wú)水甲苯共蒸發(fā)得到一種澄清的糖漿9b(R9＝2-丙烯基羧基甲基)(287mg，92％).MS(ESPOS)288.5[M-Boc+H]+；MS(ESNEG)386.2[M-H]-。
-78℃下往在二氯甲烷(2mL)中的酮9b(225.1mg，0.58mmol，1equiv)的溶液加入二乙基氨基三氟化硫(0.46mL，3.49mL，6equiv)。將反應(yīng)混合物加熱至rt，并在rt下攪拌3h，然后在-78℃下加入附加的(二乙基氨基)三氟化硫(0.46mL，3.49mL，6equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。然后用二氯甲烷(60mL)稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1x)、鹽水(1x)洗滌，干燥并蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到一種黃色油9c(X，X＝氟，氟)(75mg，32％)。
MS(ESPOS)310.5[M-Boc+H]+。
往在MeOH(20mL)中的9c(R9＝2，2-二氟戊-4-烯基)(85mg，0.21mmol)的溶液加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(100mg)。將反應(yīng)混合物于rt和氫氣氛(1atm)下攪拌過(guò)夜，借助MeOH(10mL)通過(guò)硅藻土過(guò)濾。往濾液中加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(Degussa濕形式50％w/w水)(130mg)。將反應(yīng)混合物于rt和氫氣氛(1atm)下攪拌過(guò)夜，借助MeOH(10mL)通過(guò)硅藻土過(guò)濾。將濾液濃縮得到鹵代烷基N-Boc-氨基酸9d(X，X＝氟，氟)(67.7mg，100％)，為一種澄清的糖漿。
MS(ESPOS)344.4[M+Na]+，222.4[M-Boc+H]+MS(ESNEG)320.2[M-H]-。
方法P往4-丙基吡啶(2.5g，20mmol)加入30％過(guò)氧化氫(2.4g)，并回流過(guò)夜。除去溶劑，并將所得的殘余物吸收于DCM(30mL)。將三甲基甲硅烷基氰化物(2.6g，26mmol)加到以上溶液，然后加入二甲基氨基甲酰氯(2.8g，26mmol)，并將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過(guò)夜。加入碳酸鉀(10％，100mL)。分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥，然后濃縮得到4-丙基-2-氰基吡啶(2.5g，93％)。隨后將其在鹽酸(6N，60mL)中回流過(guò)夜。用乙腈結(jié)晶之后得到4-丙基-2-甲酸吡啶10b(R9＝丙基)(2g，71％)。
MS(ESPOS)166(M+H)；1H NMR(300MH2，CD3OD)δ8.75(dd，J＝9.0，3.0，1)，8.42(s，1)、8.08(dd，J＝9.0，3.0，1)，3.00(t，J＝7.5，2)，1.82(m，2)，1.05(t，J＝7.2，3)。

方法Q將在亞硫酰氯(81mL)中的吡啶甲酸(Aldrich)(20g，162mmol，1equiv)和溴化鈉(33.43g，325mmol，2equiv)的混合物回流5h。在真空下除去溶劑。加入無(wú)水甲醇(160mL)，并將混合物于rt下攪拌30分鐘。蒸發(fā)溶劑，將殘余物吸收于5％碳酸氫鈉，并用乙酸乙酯(3x)萃取。合并有機(jī)層，用MgSO4干燥并蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-氯吡啶甲酸甲酯，為一種白色固體(19.9g，72％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.63(d，J＝5.4，1)，8.13(d，J＝2.1，1)，7.48(dd，J＝2.0，5.3，1)，4.00(s，3)。
將4-氯吡啶甲酸甲酯(2.4g，14.1mmol)、57％氫碘酸(13.3mL)和50％次磷酸水溶液(0.66mL)的混合物于85℃下攪拌2h，然后在107℃下攪拌過(guò)夜。將混合物冷卻至95℃。在此溫度下在30分鐘內(nèi)，加入10M氫氧化鈉水溶液(4.2mL)，然后加入水(15.2mL)。將混合物冷卻至rt，并在rt下攪拌1h。將沉淀過(guò)濾，用冷水洗滌，并在高度真空下干燥過(guò)夜，得到4-碘-2-哌啶酸13a(3.5g，66％)1HNMR(300MHz，DMSO d6)88.39(d，J＝5.1，1)，8.35(d，J＝1.8，1)，8.07(dd，J＝1.7，5.2，1)；MS(ESPOS)250.2[M+H]+。
0℃下往在無(wú)水DMF(1.8mL)中的7-Me MTL HCl鹽2b(R1＝Me，R2＝Me)(200mg，0.69mmol，1equiv)的混合物加入三乙胺(0.50mL，3.61mmol，5.2equiv)，然后加入BSTFA(0.28mL，1.04mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后在rt下攪拌50分鐘。往反應(yīng)混合物中加入酸13a(341mg，0.90mmol，1.3equiv)和HATU(423mg，1.11mmol，1.6equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯，用水(1x)、飽和NaHCO3(1x)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種黃色殘余物，將其溶于甲醇(20mL)，往其中加入無(wú)水Dowex樹(shù)脂(250mg)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。通過(guò)過(guò)濾除去樹(shù)脂，并用在甲醇中的2M氨洗脫粗產(chǎn)物。蒸發(fā)甲醇洗脫液，并用色譜法純化所得的殘余物，得到一種白色固體13b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H)(250mg，75％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.46(d，J＝1.8，1)，8.30(d，J＝5.4，1)，7.98(dd，J＝1.8，5.1，1)，5.25(d，J＝6.0，1)，4.32-4.23(m，2)，4.09(dd，J＝5.7，10.2，1)，3.87(d，J＝3.0，1)，3.54(dd，J＝3.3，10.2，1)，2.24-2.15(m，1)，2.11(s，3)，0.99-0.96(m，6)；MS(ESPOS)483.5[M+H]+；MS(ESNEG)481.4[M-H]-。
往干燥的燒瓶中加入13b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H)(133.9mg，0.28mmol，1equiv)、三苯基膦(46.7mg，0.18mmol，0.64equiv)、碘化銅(I)(33.9mg，0.18mmol，0.64equiv)、乙酸鈀(20mg，0.09mmol，0.32equiv)和三乙胺(1.6mL)。用氮使混合物脫氣，然后加入3-丙-2-炔基-環(huán)戊烷(120mg，1.11mmol，4equiv)。將混合物于50℃下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑得到一種深色殘余物。用色譜法純化殘余物得到13c(R1＝Me，R9′＝3-環(huán)戊基-丙-1-炔基，R2＝Me，R3＝H)，為一種黃色固體(106mg，83％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.55(d，J＝4.8，1)，7.98(s，1)，7.47(dd，J＝1.7，5.0，1)，5.26(d，J＝5.4，1)，4.33-4.22(m，2)，4.10(dd，J＝5.5，10.4，1)，3.86(d，J＝3.3，1)，3.55(dd，J＝3.3，10.5，1)，2.49(d，J＝6.9，2)，2.26-2.12(m，2)，2.11(s，3)，1.93-1.82(m，2)，1.73-1.55(m，4)，1.43-1.31(m，2)，1.00-0.96(m，6)；MS(ESPOS)463.6[M+H]+；MS(ESNEG)461.5[M-H]-。
方法R往處在甲醇(500mL)中的在一般方法Q(5g，13.26mmol)中制備的13a的溶液加入數(shù)滴濃硫酸。將反應(yīng)混合物回流過(guò)夜。蒸發(fā)溶劑，并用色譜法純化殘余物得到4-碘-2-哌啶酸甲酯14a，為一種黃色固體(3.0g，86％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.49(d，J＝1.5，1)，8.37(d，J＝5.4，1)，7.85(dd，J＝1.6，5.2，1)，4.00(s，3)；MS(ESPOS)264.3[M+H]+。
往干燥燒瓶中加入14a(1g，3.8mmol，1equiv)、三苯基膦(79.7mg，0.3mmol，0.08equiv)、碘化銅(I)(57.9mg，0.3mmol，0.08equiv)、乙酸鈀(34.1mg，0.15mmol，0.04equiv)和三乙胺(14mL)。用氮將混合物脫氣，然后加入3-丁炔-1-醇(0.53g，7.6mmol，2equiv)。將混合物于rt下攪拌3h。在真空下除去溶劑得到一種深色殘余物。用色譜法純化殘余物得到14b(R9’＝3-羥基-丁-1-炔基)，為一種黃色油(0.78g，100％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.66-8.63(m，1)，8.09-8.08(m，1)，7.43-7.40(m，1)，3.99(s，3)，3.88-3.82(m，2)，2.72(t，J＝6.3，2).MS(ESPOS)206.4[M+H]+。
往在甲醇(40mL)中的以上14b(R9’＝3-羥基-丁-1-炔基)(0.78g，3.8mmol)的溶液加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(0.4g)。吹洗包含反應(yīng)混合物的燒瓶，充入氫(1atm)，并在rt下攪拌過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去鈀，并將濾液濃縮得到14c(R9＝3-羥基丁基)，為一種油(0.77g，97％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.60(d，J＝4.5，1)，7.97(d，J＝1.2，1)，7.29(dd，J＝1.6，5.0，1)，3.99(s，3)，3.67(t，J＝6.3，2)，2.72(t，J＝7.7，2)，1.81-1.69(m，2)，1.62-1.54(m，2)；MS(ESPOS)210.4[M+H]+。
方法S往在DMF(2mL)中的4-羥基吡啶-2-甲酸(200mg，1.4mmol)加入碳酸鉀(397mg，2.8mmol)，然后加入正溴丁烷(197mg，1.4mmol)，在60℃下溫?zé)徇^(guò)夜。除去溶劑得到粗酯產(chǎn)物。將粗酯(360mg，1.4mmol)溶于THF(4mL)，加入氫氧化鋰(72mg，1.7mmol)，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌2h。使用在DCM中的10％MeOH進(jìn)行硅膠色譜處理來(lái)純化除去溶劑得到的殘余物，得到4-丁氧基吡啶-2-甲酸15a(R10＝丁基)(100mg，43％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.37(d，J＝6.0，1)，7.63(d，J＝2.7，1)，7.07(dd，J＝2.7，6.0，1)，4.15(t，J＝6.6，2)，1.82(m，2)，1.54(m，2)，1.01(t，J＝7.5，3).MS(ES-)194(M-1)。
往在DMF(2mL)中的4-丁氧基吡啶-2-甲酸15a(R10＝丁基)(100mg，0.5mmol)加入7-甲基α-硫代lincosaminide 2b(R1＝Me，R2＝Me)(147mg，0.5mmol)，然后加入HBTU(214mg，0.55mmol)和DIEA(132mg，1mmol)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌2h。然后除去溶劑。用硅膠柱色譜法純化粗物質(zhì)得到化合物15b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R10＝丁基)(201mg，91％)
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.42(m，1)，7.96(s，1)，7.09(m，1)，5.27(d，J＝5.4，1)，4.10-4.87(m，3)，3.85(d，J＝3.3，1)，3.76(m，1)，2.11(m，4)，1.81(m，2)，1.49(m，4)，0.99(m，9).MS(方法ES+)428(M+1)。
往在水(10mL)、AcOH(3mL)和MeOH(2mL)中的吡啶15b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R10＝丁基)(200mg，0.46mmol)的溶液加入PtO2(200mg)，并將所得的反應(yīng)混合物在55psi氫氣氛下振蕩過(guò)夜。用硅藻土過(guò)濾除去剩余的催化劑，并除去溶劑得到粗產(chǎn)物。使用在DCM中的20％MeOH 進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到林可酰胺類似物1(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R10＝丁基)(12mg，6％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.25(d，J＝5.4，1)，4.22(dd，J＝10.2；3.3，1)，4.08(m，2)，3.81(d，J＝3.0，1)，3.70(m，1)，3.54(m，4)，3.43(m，2)，2.90(m，1)，2.41(m，1)，2.19(m，1)，2.10(s，3)1.45(m，6)，0.92(m，9)；MS(ES+)435(M+1)。
實(shí)施例1制備1-(4-乙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 將4-乙基吡啶-2-甲酸HCl鹽(Toronto)(117mg，0.64mmol)懸浮在無(wú)水乙腈(4mL)中。加入三乙胺(180μl，1.28mmol)，并將反應(yīng)混合物冷卻至0℃。加入氯甲酸異丁酯(129μl，0.62mmol)，并將反應(yīng)混合物加熱至4℃。1.5h后將活化的酯溶液轉(zhuǎn)移至在1∶1丙酮/水(2mL)中的如方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)的溶液，并加熱至30℃以進(jìn)行溶解。然后將三乙胺(80μl，0.057mmol)加到反應(yīng)混合物。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌10h，然后蒸發(fā)至干，并用94∶5二氯甲烷∶在甲醇中的0.25％氨進(jìn)行硅膠色譜處理得到11b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝乙基)(167mg 69.7％)。
MS(ESPOS)385.2[M+H]。
在Parr瓶?jī)?nèi)將在3∶2甲醇/水(20mL)中的吡啶11b(m＝2，R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝乙基)(167mg，0.435mmol)的溶液加到氧化鉑(IV)(339mg，0.521mmol)。然后加入濃HCl(52μl，0.52mmol)。將瓶吹洗，充入H2至65psi并振蕩24h。用硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用甲醇沖洗。將合并的濾液蒸發(fā)至干，并用88∶12-80∶20二氯甲烷∶在甲醇中的0.25％氨進(jìn)行硅膠色譜處理得到43mg高Rf產(chǎn)物和49mg混合餾分。在氟硅氧烷(fluorosil)上用84∶16-80∶20二氯甲烷∶在甲醇中的0.25％氨色譜處理低Rf餾分得到1-(6-(S)-4-(R)-乙基哌啶-6-基)-N-{1-(R)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(21.9mg，12.9％)，將其吸收于1∶1乙腈∶水(50mL)，0.2μ微孔過(guò)濾，并冷卻至0℃。加入在水(20mL)中的1N HCl(67μL)，并重新凍干得到HCl鹽(24.0mg)，為一種無(wú)色粉末。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.32(d，J＝5.8，1)，4.14-4.06(m，1)，4.12(s，2)，3.85(d，J＝3.30，1)，3.60(dd，J＝3.3，10.4，1)，3.30(dd，J＝2.5，11.8，1)，3.09(m，1)，2.56(ddd，J＝2.8，12.9，15.7，1)，2.14(s，3)，2.14-2.05(m，1)，1.96-1.90(m，1)，1.74-1.69(m，1)，1.45-1.35(m，1)，1.33-1.23(m，2)，1.08-0.98(m，2)，0.86(m，9)；MS(ESPOS)391.4[M+H]，803.5.4[2M+Na]，(ESNEG)389.5[M-H]。
實(shí)施例2
制備1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 將由Hoeksema，H.等人，Journal of the American ChemicalSociety，1967，89 2448-2452的方法制備的4-正丙基毒芹酸(157mg，0.76mmol)懸浮在無(wú)水乙腈(5mL)中。加入三乙胺(421μL，3.02mmol)，并將反應(yīng)混合物冷卻至0℃。加入氯甲酸異丁酯(98μL，0.76mmol)，并在10min后將反應(yīng)加熱至4℃。1.5h后加入在1∶1丙酮∶水(5mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(190mg，0.76mmol)的溶液，將反應(yīng)混合物于rt下攪拌10h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，并在硅膠上，用94∶6二氯甲烷∶在甲醇中的0.25％氨進(jìn)行色譜處理。餾分14-18包含產(chǎn)物，為一種無(wú)色油(50.2mg，16.5％)。
1HNMR(300MHz，D2O)δ5.33(d，J＝6.0，1)，4.27-4.22(m，1)，4.18(s，1)，4.09(dd，J＝5.8，10.2，1)，3.92-3.81(m，1)，3.92-3.81(m，1)，3.64-3.59(m，1)，2.92(s，3)，2.92-2.85(m，1)，2.35-2.28(m，3)，2.13(s，3)，1.46-1.41(m，2)，1.40-1.28(m，2)，0.89-0.84(m，9)；MS(ESPOS)405.5[M+H]。
實(shí)施例3制備1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基-3-氰基丙-1-基}乙酰胺
將由方法E制備的林可胺2b(R1＝Me，R2＝CH2CN)(54.2mg，0.20mmol)溶于DMF(0.7mL)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并加入三乙胺(170μl，1.2mmol)和BSTFA(96 PL，0.36mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至rt并在rt下攪拌1h。加入由Hoeksema等人，J.Am.Chem.Soc.，1967，892448-2452的方法制備的4-正丙基毒芹酸(66.4mg，0.32mmol)和HATU(149mg，0.39mmol)，并將混合物于rt下攪拌3h。除去DMF，并將殘余物溶于DCM(100mL)，用飽和NaHCO3(30mL)和鹽水(30mL)洗滌，并用硫酸鈉干燥。將通過(guò)除去溶劑得到的殘余物溶于甲醇(20mL)，并用Dowex樹(shù)脂H+(300mg)處理15min。通過(guò)用在MeOH中的5％TEA(25mL×15min×2)和在MeCN中的5％TEA(25mL×15min)洗滌而從樹(shù)脂上洗脫粗產(chǎn)物。將合并的洗脫液蒸發(fā)至干，并用硅膠柱色譜法純化，使用在二氯甲烷中的7％0.25M NH3的甲醇溶液作為洗脫劑(24mg，28％)。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.61(d，J＝5.8，1)，4.59(d，J＝10.2，1)，4.46(d，J＝10.2，1)，4.46(dd，J＝6.0，10.4，1)，4.05(d，J＝3.0，1)，3.84(dd，J＝3.3，10.4，1)，3.48(dd，J＝5.8，8.0，1)，3.34(dd，J＝5.2，10.2，1)2.81-2.61(M，2)，2.65(s，3)，2.43(s，3)，2.31-2.10(m，2)，1.32(d，J＝6.0，1)，1.18(t，J＝7.1，3)；MS(ESPOS)430.5[M+H]MS(ESPOS)428.5[M-H]。
實(shí)施例4
制備1-(-4-乙基哌啶基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-羥基-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 將由方法F制備的林可胺3b(R1＝Me，R2-Me)(54.2mg，0.20mmol)溶于DMF(1.0mL)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并加入三乙胺(178，μl，1.3mmol)和BSTFA(85μL，0.32mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至rt并在rt下攪拌1h。加入4-乙基吡啶-2-甲酸HCl鹽(Toronto)(55.3mg，0.29mmol)和HATU(122mg，0.32mmol)，并將混合物于rt下攪拌3小時(shí)。除去DMF，將殘余物溶于THF(10mL)，并用(600mg)AmberliteA-26 F-型樹(shù)脂和催化量的TBAF處理5h。通過(guò)除去樹(shù)脂并蒸發(fā)溶劑至干得到粗產(chǎn)物并用硅膠柱色譜法進(jìn)行純化，使用在二氯甲烷中的10％0.25M NH3的甲醇溶液作為洗脫劑，得到吡啶產(chǎn)物11b(m＝2，R1＝Me，R2＝Me R3＝OH，R9＝乙基)(26mg，33％)。
MS(ESNEG)399.5[M-H]。
在Parr瓶?jī)?nèi)將在3∶2甲醇∶水(10mL)中的吡啶11b(m＝2，R1＝Me，R2＝Me R3＝OH，R9＝乙基)(26mg，0.065mmol)的溶液加到氧化鉑(IV)(51mg)。然后加入濃HCl(6.0μl，0.072mmol)。將瓶吹洗，充入H2至65psi，并振蕩24h。用硅藻土過(guò)濾反應(yīng)混合物，并用甲醇沖洗。將合并的濾液蒸發(fā)至干，并在硅膠上用80∶20二氯甲烷∶在甲醇中的0.25％氨進(jìn)行色譜處理得到高Rf產(chǎn)物和標(biāo)題化合物(5.8mg，21.8％)。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.37(d，J＝6.0，1)，4.41(d，J＝9.6，1)，4.32(d，J＝9.3，1)，4.08(dd，J＝6.6，11.0，1)，3.93-3.90(m，2)，3.59(dd，J＝3.0，10.7，1)，3.93-3.90(m，2)，3.04(apt dt，J＝7.1，14.6，14.6，1)，2.24-2.18(m，1)，2.20(s，3)，1.70-1.60(m，1)，1.42-1.13(m，1)，0.88(dd，J＝6.0，7.4，1)；MS(ESPOS)407.4[M+H]。
實(shí)施例5制備1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-羥基亞氨基丙-1-基}乙酰胺 0℃下將三乙胺(0.041mL，0.28mmol)和BSTFA(0.24mL，0.94mmol)加到在DMF(3mL)中的由方法G制備的粗肟4b(R1＝Me，R7＝H)，并將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。然后加入4-正丙基毒芹酸(63mg，0.37mmol)和HATU(142mg，0.37mmol)，并將混合物于rt下攪拌4h。除去DMF，用二氯甲烷(100mL)萃取殘余物，并用飽和碳酸氫鹽(20mL)和鹽水(20mL)洗滌。然后用在二氯乙烷(10mL)中的10％TFA和二甲基硫醚(0.5mL)將除去二氯甲烷時(shí)得到的殘余物處理1h。然后除去溶劑得到粗產(chǎn)物，用硅膠柱色譜法將其純化，使用在二氯甲烷中的20％甲醇作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物(20mg，25％)。
TLCRf＝0.67(20％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.93(t，J＝6.8，3)，1.31-1.44(m，4)，1.88(s，3)，1.99(s，3)，2.09(m，2)，2.11(m，1)，2.62-2.98(m，3)，2.76(s，3)，3.60(m，2)，4.10(dd，J＝5.7，10.20，1)，4.27(d，J＝9.6，1)，5.23(d，J＝5.5，1)，MS(ESPOS)420(M+H)。
實(shí)施例6制備1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲氧基亞氨基丙-1-基}乙酰胺 由方法H制備的粗肟產(chǎn)物4b(R1＝Me，R7＝Me)，如實(shí)施例5制備標(biāo)題化合物(10mg，47％)。
TLCRf＝0.55(10％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.91(m，3)，1.32(m，4)，1.88(S，3)，1.98(s，3)，1.78-2.04(m，2)，2.34(s，3)，2.90(dd，J＝5.1，6.30，8.10 1)，3.21(dd，J＝6.3，10.2，1)，3.57(dd，J＝3.3，10.2，1)，4.23(dd，J＝5.4，10.2，1)，5.25(d，J＝5.7，1)；MS(ESPOS)434(M+H)。
實(shí)施例7制備1-(-3-正丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
將由方法C制備的林可胺中間產(chǎn)物2b(R1＝Me，R2＝Me)溶于DMF(2mL)。加入三乙胺(80mg，1mmol)和BSTFA(307mg，1.1mmol)，并將混合物于rt下攪拌1.5h。然后加入鐮孢菌酸(143mg，0.7mmol)和HATU(184mg，0.5mmol)，并將混合物于rt下攪拌3h。除去DMF，將殘余物溶于EtOAc(50mL)，用碳酸氫鈉(10％，30mL)和鹽水(30mL)洗滌，并用硫酸鈉干燥。將通過(guò)除去溶劑得到的殘余物溶于甲醇，并用Dowex樹(shù)脂H+處理1h。用硅膠柱色譜法純化通過(guò)過(guò)濾樹(shù)脂和除去溶劑得到的粗產(chǎn)物，使用在二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物(100mg，61％)。
TLC Rf＝0.6(10％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.47(s，1)，8.02(d，J＝8.1，1)，7.80(d，J＝8.1，1)，5.27(d，J＝5.4，1)，4.31(m，2)，4.12(dd，J＝5.7，4.2，1)，3.85(d，J＝3.0，1)，3.56(dd，J＝3.3，6.9，1)，2.80(m，2)，2.24(m，1)，2.11(s，3)，1.67(m，2)，1.41(m，2)，1.00(m，9)；MS(ESPOS)413(M+H)。
將PtO2(50mg，0.22mmol)加到在甲醇(2mL)、水(10ml)和乙酸(3mL)中的化合物11b(m＝2，R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝丁基)(70mg，0.16mmol)，并將混合物在50psi下氫化過(guò)夜。用硅膠柱色譜法純化通過(guò)過(guò)濾催化劑并除去溶劑得到的產(chǎn)物，使用在二氯甲烷中的30％甲醇作為洗脫劑(16mg，46％)。
TLC Rf＝0.7(30％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.16(m，3)，3.82(d，J＝3.3，1)，3.53(m，2)，2.93(m，2)，2.09(s，3)，1.93(m，1)，1.76(m，2)，1.50(m，1)，1.30(m，7)，0.92(m，9)；MS(ESPOS)419(M+H)。
實(shí)施例8制備1-(4-(R，S)-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃和氮?dú)夥障峦跓o(wú)水DMF(2mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(100.4mg，0.4mmol，1equiv)的攪拌的懸浮液中加入三乙胺(0.2mL，1.44mmol，3.6equiv)，然后加入BSTFA(0.2mL，0.76mmol，1.9equiv)。將所得的混合物于0℃下攪拌10min，然后在rt下攪拌50min。將所得的溶液冷卻至0℃，并加入在無(wú)水DMF(1.5mL)中的如Birkenmeyer，R.D等人，Journal of MedicinalChemistry 1972，15，1255-1259.所述制備的6c(R9＝戊基)(方案6)(144mg，0.51mmol，1.2equiv)的溶液，然后加入固體HATU。將反應(yīng)混合物加熱至rt，并在2h后在真空下將反應(yīng)溶液蒸發(fā)至干。用EtOAc(150mL)稀釋所得的剩余油，依次用10％檸檬酸(2×30mL)、1∶1飽和NaHCO3水溶液、水(2×30mL)和鹽水(30mL)洗滌，用Na2SO4干燥并蒸發(fā)至干。
往以上得到的粗產(chǎn)物(267.5mg)中加入1，2-二氯乙烷(8mL)，然后加入二甲基硫醚(180.3μL)、TFA(2.7mL)和水(180.3μL)。將所得的混合物于rt下攪拌1h，并蒸發(fā)至最小體積，用DCE稀釋(3×30ml)，并蒸發(fā)至干。用硅膠色譜法純化所得的殘余物，用在二氯甲烷中的8-10％甲醇氨進(jìn)行梯度洗脫。將目標(biāo)餾分收集在一起，蒸發(fā)至干，并凍干得到標(biāo)題化合物，為一種白色絨毛狀粉末(35.6mg，21.2％)。
TLC，Rf＝0.15(16％0.25M甲醇氨，在二氯甲烷中)。1H NMR(300MHz，D2O)δ5.4(d，J＝5.8，1)，3.91(s，1)，3.69-3.66(m，3)，2.1(s，3)，1.32-1.15(m，3.37)，0.93-0.87(m，9.8)；MS(ESPOS)419.5[M+H]，(ESNEG)417.45[M-H]。
實(shí)施例9制備1-[4-(3-甲基丁-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃下往在無(wú)水DMF(0.8mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(75mg，0.30mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(0.13mL，0.96mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(0.12mL，0.45mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10min，然后在rt下攪拌50min。在25mL圓底燒瓶中往反應(yīng)混合物中加入由方法J制備的酸7d(R9＝2-甲基丁基)(160mg，0.56mmol，1.9equiv)。然后加入HATU(227mg，0.60mmol，2equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯(100mL)，用10％檸檬酸(2×60mL)、水(60mL)、半飽和NaHCO3(60mL)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種黃色糖漿。
將三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)加到在二氯甲烷(15ml)中的含有二甲硫醚(0.33mL)的以上糖漿的溶液中。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(75mg，60％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.4，1)，4.18-3.99(m，4)，3.75(d，J＝2.4，1)，3.51(dd，J＝3.3，10.5，1)，3.38-3.31(m，1)，2.68(dd，J＝8.2，10.6，1)，2.23-2.05(m，3)，2.10(s，3)，1.97-1.87(m，1)，1.59-1.47(m，1)，1.46-1.34(m，2)，1.25-1.16(m，2)，0.92-0.88(m，12)。MS(ESPOS)419.5[M+H]+，MS(ESNEG)417.5[M-H]-。
實(shí)施例10制備1-(-4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃和氮?dú)夥障峦跓o(wú)水DMF(5mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(298.8mg，1.19mmol，1equiv)的攪拌的懸浮液加入三乙胺(0.6mL，4.33mmol，3.6equiv)，然后加入BSTFA(0.6mL，2.27mmol，1.9equiv)。將所得的混合物于0℃下攪拌10min，然后在rt下攪拌50min。將所得的溶液冷卻至0℃，并加入在無(wú)水DMF(5mL)中的由方法K制備的7d(R9＝正戊基)(400.1mg，1.40mmol，1.2equiv)的溶液，然后加入固體HATU(678.7mg，1.79mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物加熱至rt，并在2h后在真空下將反應(yīng)溶液蒸發(fā)至干。用EtOAc(400mL)稀釋所得的剩余的油，依次用10％檸檬酸(2×100mL)，1∶1飽和NaHCOX3水溶液、水(2×100mL)和鹽水(100mL)洗滌，用Na2SO4干燥，并蒸發(fā)至干。
往以上得到的粗產(chǎn)物(1.14g)加入1，2-二氯乙烷(35mL)，然后加入二甲基硫醚(768μL)、TFA(11.5mL)和水(768μL)。將所得的混合物于rt下攪拌1h，蒸發(fā)至最小體積，用DCE(3×90mL)稀釋，并蒸發(fā)至干。用硅膠色譜法純化三分之一所得的殘余物，用在二氯甲烷中的8-12％甲醇氨進(jìn)行梯度洗脫。將目標(biāo)餾分收集在一起，蒸發(fā)至干，用氧化氘/無(wú)水乙腈處理，并凍干得到一種白色絨毛狀粉末(68.2mg，41.1％)；TLC，Rf＝0.15{16％0.25M甲醇氨，在二氯甲烷中}。1HNMR(300MHz，D2O)δ5.41(d，J＝5.8，1H)，4.55(m，1)，4.24(s，2)，4.14(m，1)，3.91(d，J＝3.3，1)，3.70-3.66(m，2)，3.15(m，1)，2.36-2.27(m，2)，2.19(s，5)，1.59-1.13(m，9H)，0.93-0.88(M，9)；13C NMR(D2O，)8 170.4，119.4，88.4，70.9，69.3，68.8，68.2，60.0，53.4，51.4，37.3，36.7，31.3，27.9，27.2，22.3，20.1，14.8，13.7，13.3；MS(ESPOS)419.6[M+H]；(ESNEG)417.5[M-H]。
實(shí)施例11制備1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺
將在二氯乙烷(10mL)中的30％三氟乙酸和二甲基硫醚(0.5mL)加到由方法H制備的林可胺中間產(chǎn)物5b(R1＝Me)(100mg，0.20mmol)。將混合物于rt下攪拌1h。除去溶劑，并將殘余物在高度真空下放置1h。將N-甲基-4-反式丙基脯氨酸(53mg，0.4mmol)和HATU(114mg，0.30mmol)加到在DMF(3mL)中的干燥化合物，并將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。除去DMF，然后用乙酸乙酯(100mL)萃取所得的殘余物，并用飽和碳酸氫鹽(50mL)洗滌。然后用硫酸鎂干燥有機(jī)部分，并除去溶劑以得到粗產(chǎn)物。用硅膠柱純化粗產(chǎn)物，使用乙酸乙酯作為洗脫劑(50mg，46％)。然后將產(chǎn)物(50mg，0.09mmol)吸收于甲醇(2mL)和水(1mL)，往其中加入固體碳酸鉀(124mg，0.90mmol)，并將混合物于rt下攪拌24h。然后除去溶劑，并用硅膠柱純化粗產(chǎn)物，使用在二氯甲烷中的20％甲醇作為洗脫劑(20mg，52％)。
TLCRf＝0.57(20％甲醇，在二氯甲烷中)；MS(ESPOS)427(M+H)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.91(m，3)，1.34(m，4)，1.69(t，J＝19.8，3)，1.98(s，3)，2.20(m，2)，2.46(s，3)，3.18(dd，J＝5.1，10.20，1)，3.93(d，J＝3.0，1)，4.08(dd，J＝3.3，10.20，1)，4.40-4.70(m，2)，5.28(d，J＝5.4，1)。
實(shí)施例12制備1-(-4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺
0℃下將Boc 4-反式戊基脯氨酸7d(R9＝正戊基)(179mg，0.631mmol)、HATU(299mg，0.789mmol)和二乙基異丙基胺(182mg，1.2mmol)加到在DMF(3mL)中的由方法H制備的林可胺中間產(chǎn)物5b(R1＝Me)(210mg，0.526mmol)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。除去DMF后，將殘余物吸收于乙酸乙酯，并用飽和碳酸氫鹽(30mL)洗滌。然后用硫酸鈉干燥有機(jī)部分，并除去溶劑得到粗產(chǎn)物。用柱色譜法純化粗產(chǎn)物，使用在己烷中的30％乙酸乙酯作為洗脫劑(200mg，57％)。將碳酸鉀(450mg，3.0mmol)加到在甲醇(3mL)和水(1mL)中的以上反應(yīng)的產(chǎn)物(200mg，0.30mmol)，并將混合物在rt下攪拌2h。除去溶劑，將所得殘余物吸收于在二氯乙烷中的30％三氟乙酸(10mL)和二甲基硫醚(0.5mL)，并攪拌1h。除去溶劑后，用柱純化所得的粗產(chǎn)物，使用在二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑(10mg，90％)。
TLCRf＝0.56(20％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.90(m，3)，1.31(m，7)，1.44(m，20)，1.73(t，J＝19.5，3)，2.02(m，1)，2.08(s，3)，2.24(m，2)，2.89(t，J＝9.9，1)，3.56(m，2)，3.86(s，1)，4.07(dd，J＝6.0，9.6，1)，4.37(m，2)，4.63(m，1)，5.28(d，J＝5.4，1)；MS(ESPOS)441(M+H)。
實(shí)施例13制備1-(-4-(3-對(duì)氟苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
0℃下往在無(wú)水DMF(0.8mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(75mg，0.30mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(0.13mL，0.96mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(0.12mL，0.45mmol，1.5equiv)。在0℃下將反應(yīng)混合物攪拌10min，然后于rt下攪拌50min。在25mL圓底燒瓶中將反應(yīng)混合物加到由方法L制備的酸8c(R9＝3-(4-氟苯基)丙基)(120mg，0.34mmol，1.1equiv)，然后加入HATU(160mg，0.42mmol，1.4equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯(100mL)，并用10％檸檬酸(2×60mL)、水(60mL)、半飽和NaHCO3(60mL)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種黃色糖漿。
將三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)加到在二氯甲烷(15mL)中的含二甲硫醚(0.33mL)的以上糖漿的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到1-(2-(S)-4-(R)-(3-對(duì)氟苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-(S)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(90mg，62％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.94(brs，1)，7.11-7.06(m，2)，6.97-6.90(m，2)，5.31(d，J＝5.4，1)，4.10(dd，J＝5.7，9.9，1)，3.96-3.82(m，3)，3.68-3.52(m，2)，3.10-3.20(m，1)，2.70-2.60(m，1)，2.56(dd，J＝7.4，7.4，2)，2.36-2.24(m，1)，2.13(s，3)，2.10-1.93(m，2)，1.85-1.73(m，1)，1.64-1.50(m，2)，1.40-1.30(m，2)，0.92-0.85-(M，6).MS(ESPOS)485.5[M+H]+，MS(ESNEG)483.5[M-H]-。
實(shí)施例14制備1-[2-(S)-4-(R)-(3，3-二氟丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
0℃往在無(wú)水DMF(0.8mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(75mg，0.30mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(0.13mL，0.96mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(0.12mL，0.45mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌10分鐘，然后在rt下攪拌50min。在25mL圓底燒瓶中將反應(yīng)混合物加到由方法N制備的酸8c(R9＝3，3-二氟丙基)(97mg，0.33mmol，1.1equiv)，然后加入HATU(170mg，0.45mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯(100mL)，并用10％檸檬酸(2×60mL)、水(60mL)、半飽和NaHCO3(60mL)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種黃色糖漿。
將三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)加到在二氯甲烷(15mL)中的含二甲硫醚(0.33mL)的以上糖漿的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到1-[2-(S)-4-(R)-(3，3-二氟丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(81mg，64％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.92(d，J＝8.1，1)，5.80(dddd，J＝4.2，4.2，57，57，1)，5.31(d，J＝5.7，1)，4.11(dd，J＝5.4，9.9，1)，3.96-3.82(m，3)，3.64-3.52(m，2)，3.23-3.10(m，1)，2.73-2.60(m，1)，2.36-2.23(m，1)，2.13(s，3)，2.18-1.95(m，2)，1.90-1.73(m，3)，1.56-1.43(m，2)，0.93-0.85(m，6).MS(ESPOS)427.5[M+H]+，MS(ESNBG)425.5[M-H]-。
實(shí)施例15制備1-(-4-(3-對(duì)氯苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃往在無(wú)水DMF(0.5mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(50mg，0.20mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(88.3μl，0.64mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(79.2mL，0.30mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10min，然后在rt下攪拌50min。在25mL圓底燒瓶中將反應(yīng)混合物加到由方法M制備的8c(R9＝3-(4-氯苯基)丙基)(97.3mg，0.26mmol，1.3equiv)，然后加入HATU(123mg，0.32mmol，1.6equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯(60mL)，并用10％檸檬酸(2×40mL)、水(40mL)、半飽和NaHCO3(40mL)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種黃色糖漿。
將三氟乙酸(3mL)和水(0.2mL)加到在二氯甲烷(9mL)中的含二甲硫醚(0.2mL)的以上糖漿的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到1-(2-(S)-4-(R)-(3-對(duì)氯苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-(S)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(41.6mg，42％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CDCl3)，δ7.26-7.21(m，2)，7.17-7.12(m，2)，5.23(d，J＝5.7，1)，4.10-4.00(m，3)，3.83-3.75(m，1)，3.74-3.70(m，1)，3.54-3.48(m，1)，3.25-3.18(m，1)，2.63-2.50(m，3)，2.20-2.00(m，3)，2.09(s，3)，1.85-1.74(m，1)，1.68-1.55(m，2)，1.42-1.33(m，2)，0.95-0.85(m，6).MS(ESPOS)501.5[M+H]+MS(ESNEG)499.4[M-H]-。
實(shí)施例16制備1-[2-(S)-4-(S)-(2，2-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃往在無(wú)水DMF(0.5mL)中的由方法C制備的2b(R1＝Me，R2＝Me)(50mg，0.20mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(88.3mL，0.64mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(79.2mL，0.30mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10min，然后于rt下攪拌50min。在25mL圓底燒瓶中將反應(yīng)混合物加到由方法O制備的酸9d(R9＝2，2-二氟戊基)(67.7mg，0.21mmol，1.1equiv)，然后加入HATU(101mg，0.27mmol，1.3equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯(60mL)，并用10％檸檬酸(2×40mL)、水(40mL)、半飽和NaHCO3(40mL)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種黃色糖漿。
將三氟乙酸(3mL)和水(0.20mL)加到在二氯甲烷(9mL)中的含二甲硫醚(0.20mL)的以上糖漿的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到1-[2-(S)-4-(S)-(2，2-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(56mg，62％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.17-4.04(m，3)，3.98(dd，J＝3.3，9.3，1)，3.77(d，J＝3，1)，3.51(dd，J＝3.4，10.3，1)，3.40(dd，J＝6.9，10.5，1)，2.71(dd，J＝10.2，10.2，1)，2.42-2.33(m，1)，2.23-2.11(m，2)，2.10(s，3)，2.08-1.73(m，5)，1.56-1.42(m，2)，0.99-0.89(m，9).MS(ESPOS)455.5[M+H]+；MS(ESNEG)453.5[M-H]-。
實(shí)施例17制備1-(-4-正丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃下將三乙胺(0.18mL，1.26mmol)和BSTFA(0.549mL，2.1mmol)加到在DMF(5mL)中的由方法D制備的林可胺中間產(chǎn)物2b(R1＝Me，R2＝Me)(102mg，0.42mmol)，并將混合物于rt下攪拌3h。加入由方法P制備的酸10b(R9＝丙基)(200mg，0.84mmol)和HATU(319mg，0.84mmol)，并將混合物于rt下攪拌4h。除去DMF，用乙酸乙酯(100mL)萃取殘余物，并用飽和碳酸氫鹽(40mL)洗滌。將通過(guò)除去溶劑得到的產(chǎn)物吸收于甲醇，并用Dowex H+樹(shù)脂處理1h。將樹(shù)脂過(guò)濾之后，除去甲醇得到粗產(chǎn)物。然后用硅膠柱純化粗產(chǎn)物，使用在二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑，得到吡啶11b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝丙基)(117mg，58％)。
TLCRf＝0.81(10％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CDCl3)B 1.20(t，J＝6.3，6H)，2.19(m，2)，2.32(s，3)，2.43(m，1}，2.84-2.97(m，4)，3.74(m，1)，4.06(m，1)，4.31(m，1)，4.52(m，2)，5.42(d，J＝5.7，1)，7.33-7.61(m，5)，7.80(m，1)，8.15(s，1)，8.69(d，J＝4.8，1)；MS(ESPOS)475(M+H)。
將PtO2(100mg，0.44mmol)加到在甲醇(2mL)、水(10ml)和乙酸(3ml)中的吡啶11b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝丙基)(150mg，0.37mmol)，并將混合物于50psi下氫化過(guò)夜。用硅膠柱色譜法純化過(guò)濾催化劑并除去溶劑之后得到的產(chǎn)物，使用在二氯甲烷中的30％甲醇作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物(20mg，14％)。
TLCRf＝0.7(50％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝6.9，1)，4.86(m，1)，4.13(m，2)，3.79(d，J＝3.3，1)，3.52(dd，J＝3.3，9.9，1)，3.32(m，1)，3.17(m，1)，2.67(M，1)，2.17(m，1)，2.10(s，3)，1.97(m，1)，1.74(m，1)，1.54(m，1)，1.38(m，2)，1.31(m，2)，1.14(m，2)，1.02(m，9)MS(ESPOS)405(M+H)。
實(shí)施例18制備1-[2-(S)-4-(R)-正戊基-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
0℃和氮?dú)夥障聦IEA(0.1mL，0.57mmol)和液體環(huán)氧乙烷(3mL)加到在無(wú)水甲醇(10mL)中的如實(shí)施例10制備的粗1-(-4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(237.4mg)的攪拌的溶液。將所得的溶液于-4℃下攪拌18h，并蒸發(fā)至干。用硅膠色譜法純化所得的殘余物，洗脫劑為在二氯甲烷中的5％甲醇氨。將目標(biāo)餾分蒸發(fā)，并凍干(氧化氘/無(wú)水乙腈，1∶1，v/v，10ml)得到標(biāo)題化合物，為一種絨毛狀白色粉末(50.1mg，30.2％)；TLC，Rf＝0.68(14％甲醇氨，在二氯甲烷中)；1HNMR(300MHz)δ5.40(d，J＝5.8，1)，4.55(m，1)，4.24(s，1)，4.17-4.11(m，1)，3.99-3.89(m，4)，3.69-3.65(m，1)，3.47(d，J＝4.4，2)，3.01(m，1)，2.33(br s，4)，2.18(s，4)，1.57-1.32(m，9)，0.94-0.87(m，9)。MS(ESPOS)464[M+H]；(ESNEG)497.5[M-H+HCl]。
實(shí)施例19制備1-[2-(S)-4-(R)-正戊基-N-(2-(R)-甲基-2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
0℃和氮?dú)夥障聦I EA(0.1mL，0.58mmol，1equiv)和R(+)-氧化丙烯(3ml)加到在無(wú)水甲醇(10ml)中的如實(shí)施例10制備的粗1-(2-(S)-4-(R)-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(307.6mg，0.58mmol，1equiv)的攪拌的冷溶液。將所得的溶液于-4℃下攪拌18h，并蒸發(fā)至干。用硅膠色譜法純化所得的殘余物，洗脫劑為在二氯甲烷中的6％甲醇氨。將目標(biāo)餾分蒸發(fā)，并凍干(氧化氘/無(wú)水乙腈，1∶1，v/v，20mL)得到標(biāo)題化合物，為一種絨毛狀白色粉末(91mg，48％)。
TLC，Rf＝0.7(14％甲醇氨，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.44(d，J＝5.5，1)，4.31(s，2)，4.26-4.11(m，1)，3.97(d，J＝3.3，1.1，1)，3.75(dd，J＝3.3，3.3，1)，3.39(dd，J＝3.8，3.8，1)，2.31(s，3)，1.5-0.95(m，12)，1.34(d，J＝6.0，4)，1.17-1.10(m，13)；MS(ESPOS)477.6[M+H]，(ESNEG)475.6[M-H]。
實(shí)施例20制備1-[2-(S)-4-(R)-正戊基-N-(2-(S)-甲基-2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
將二甲基硫醚(62μL)，TFA(1mL)和水(62μL)加到在無(wú)水二氯乙烷(3mL)中的如實(shí)施例10制備的Boc-保護(hù)的1-(2-(S)-4-(R)-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(92mg，0.18mmol)的攪拌的溶液。將所得的溶液于rt下攪拌1h，并蒸發(fā)至干。將無(wú)水甲醇(8mL)和DIEA(31μL，0.18mmol)加到所得的殘余物。將混合物冷卻至-4℃，并加入和S-(-)-氧化丙烯(2mL)。將所得的溶液于-4℃下攪拌18h，蒸發(fā)至干，并用硅膠色譜法純化，洗脫劑為在二氯甲烷中的6％甲醇氨。將目標(biāo)餾分蒸發(fā)，并凍干(氘/無(wú)水乙腈，1∶1，v/v，8ml)得到標(biāo)題化合物，為一種絨毛狀白色粉末(29.8mg，31.2％)。
TLC，Rf＝0.7(12％甲醇氨，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.44(d，J＝5.5，1)，4.35-4.19(m，4)，4.02(d，J＝3.3，2)，2.75(d，J＝6.3，2.2，3)，2.3(s，3)，1.50(m，11)，1.4(d，J＝6.0，3.5，3)，1.16-1.10(m，12).MS(ESPOS)477.6[M+H]；(ESNEG)475.4[M-H]。
實(shí)施例21制備1-(-4-正戊基-N-(3-羥基丙-1-基)吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
氮?dú)夥障峦跓o(wú)水乙腈(2mL)中的如實(shí)施例10制備的粗1-(2-(S)-4-(R)-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-(R)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(192.5mg，0.46mmol，1equiv)的攪拌的溶液加入三乙胺(0.2mL，1.38mmol，3equiv)，然后加入3-溴-1-丙醇(6 0μL，0.69mmol，1.5equiv)。將所得的混合物于rt下攪拌18h，并蒸發(fā)至干。用硅膠色譜法純化所得的殘余物，洗脫劑為在二氯甲烷中的5％甲醇氨。將目標(biāo)餾分收集在一起，蒸發(fā)至干，并凍干得到標(biāo)題化合物，為一種白色絨毛狀粉末(13.5mg，6％)。
TLC，Rf＝0.75(14％甲醇氨，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.44(d，J＝5.8，1)，4.33-4.26(m，4)，4.01(d，J＝2.7，1)，3.85-3.74(m，6)，2.29(s，3)，2.1(m，4)，1.54(m，8)，1.16-1.08(m，12)；MS(ESPOS)477.6[M+H]。
實(shí)施例22制備1-[2-(S)-4-(R)-(3-甲基丁-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
0℃下將環(huán)氧乙烷(0.6mL)加到在甲醇(3mL)中的如實(shí)施例9制備的1-[2-(S)-4-(R)-(3-甲基丁-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-(R)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)-四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(35.1mg，0.084mmol)的溶液。將反應(yīng)混合物于4℃下攪拌過(guò)夜。再加入環(huán)氧乙烷(0.6mL)，并在4℃下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物濃縮，并用色譜法純化得到一種白色固體，1-[2-(S)-4-(R)-(3-甲基丁-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-(R)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(24.1mg，62％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.68(d，J＝9.0，1)，5.32(d，J＝5.4，1)，5.24(d，J＝3.0，1)，4.13-4.07(m，1)，4.01(ddd，J＝2.8，9.9，9.9，1)，3.86(d，J＝10.8，1)，3.78-3.68(m，2)，3.61-3.57(m，1)，3.56-3.48(m，1)，3.36-3.32(m，1)，3.27-3.21(m，1)，2.94-2.85(m，1)，2.76-2.70(m，1)，2.55(ddd，J＝3.6，3.6，12.6，1)，2.41-2.37(m，1)，2.36-2.27(m，1)，2.15(s，3)，2.03-1.95(m，2)，1.93-1.81(m，1)，1.54-1.42(m，1)，1.39-1.26(m，2)，1.22-1.10(m，2)，0.99-0.92(m，6)，0.90-0.84(m，6).MS(ESPOS)463.5[M+H]+MS(ESNEG)461.5[M-H]-。
實(shí)施例23制備1-[4-(3，3-二氟丙-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃下將環(huán)氧乙烷(0.4mL)加到在甲醇(2mL)中的如實(shí)施例14制備的1-[2-(S)-4-(R)-(3，3-二氟丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-(R)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(29.7mg，0.07mmol)的溶液。將反應(yīng)混合物在4℃下攪拌過(guò)夜。再加入環(huán)氧乙烷(0.4mL)，并在4℃下攪拌過(guò)夜。濃縮反應(yīng)混合物，并用色譜法純化得到一種白色固體，1-[2-(S)-4-(R)-(3-甲基丁-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-(R)-[2-(S)-3-(S)，4-(S)，5-(R)-三羥基-6-(R)-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺(19.3mg，59％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.86(dddd，J＝4.3，4.3，57，57，1)，5.23(d，J＝5.7，1)，4.13-4.04(m，3)，3.75(d，J＝3.3，1)，3.73-3.57(m，2)，3.53(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.42-3.36(m，1)，3.26-3.18(m，1)，2.88-2.78(m，1)，2.62-2.55(m，1)，2.17-2.00(m，4)，2.10(s，3)，1.94-1.73(m，3)，1.55-1.45(m，2)，0.98-0.91(m，6)。
MS(ESPOS)471.5[M+H]+，MS(ESNEG)469.4[M-H]-。
實(shí)施例24制備1-[2-(S)-4-(R)-正戊基-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺 0℃下將環(huán)氧乙烷(1mL，過(guò)量)加到在甲醇(5mL)中的來(lái)自實(shí)施例12的標(biāo)題化合物(60mg，0.136mmol)，并將混合物于4℃下攪拌過(guò)夜。除去溶劑，并用硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，使用在二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑(25mg，38％)。
TLCRf＝0.76(5％甲醇，在二氯甲烷中)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.89(m，3)，1.30(m，8)，1.68(t，J＝19.4，3)，1.78(m，1)，1.99(m，2)，2.07(s，3)，2.63(m，1)，2.73(m，1)，3.19(m，1)，3.58(m，3)，3.95(m，1)，4.08(dd，J＝6.0，9.90，1)，4.44-4.60(m，2)，5.26(d，J＝5.4，1)；MS(ESPOS)485(M+H)。
實(shí)施例25制備1-(4-正戊基哌啶-6-基)-N-{[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
用一般方法P制備4-戊基吡啶-2-甲酸(10b)(R9＝戊基)。往在乙酸(30mL)中的4-戊基吡啶(3g，20mmol)加入過(guò)氧化氫(0.7g，30％，20mmol)，并回流過(guò)夜。除去溶劑得到殘余物，將其溶于DCM(100mL)，用MgSO4干燥，并過(guò)濾。除去DCM得到一種褐色液體，4-戊基吡啶-N-氧化物，(3.3g，100％)。往三甲基甲硅烷基氰化物(2.37g，24mmol)加入在DCM(10mL)中的4-戊基吡啶N-氧化物(3.3g，20mmol)，然后滴加在DCM(10mL)中的二甲基氨基甲酰氯(2.56g，24mmol)。室溫下攪拌過(guò)夜后，加入碳酸氫鈉(100mL，10％)，并分離有機(jī)層。用DCM(50mL)將水層萃取兩次，并用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層。除去溶劑得到化合物10a(R9＝戊基)(4.1g，100％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.52(m，1)，7.46(s，1)，7.27(m，1)，3.00(m，2)，2.60(m，2)，1.60(m，2)，1.27(m，2)，0.86(m，3).MS(ES+)175(M+1)。
將來(lái)自前面步驟的4-戊基-2-氰基吡啶(10a)(R9＝戊基)(3.4g，19.5mmol)溶于HCl(6N，100mL)，并回流過(guò)夜。用柱色譜法純化除去HCl時(shí)得到的殘余物，使用在DCM中的20％MeOH，得到產(chǎn)物化合物10(b)(3.7g，100％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.74(d，J＝6.3，1)，8.39(s，1)，8.06(D，J＝6.3，1)，2.98(t，J＝7.2，2)，1.77(m，2)，1.39(m，4)，0.95(t，J＝7.2，3H).MS(ES-)192(M-1)。
然后在0℃下往在DMF(2ml)中的7-甲基α-硫代lincosaminide2b(R1＝Me，R2＝Me)(90mg，0.35mmol)加入TEA(72mg，0.7mmol)、BSTFA(276mg，1.05mmol)，并在室溫下攪拌1.5小時(shí)。隨后將酸(10b)(R9＝戊基)(138mg，0.7mmol)和HATU(165mg，0.53mmol)加到反應(yīng)混合物，并在室溫下攪拌過(guò)夜。完全除去DMF，將殘余物吸收于EtOAc(50mL)，用碳酸氫鈉(10％，50mL)、鹽水(50mL)洗滌。將用硫酸鎂干燥和濃縮后得到的產(chǎn)物吸收于甲醇(10mL)，并用NR-50樹(shù)脂(150mg)處理3小時(shí)。將樹(shù)脂過(guò)濾，并除去溶劑。用硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，使用在DCM中的3％MeOH作為洗脫劑，得到化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝戊基)(90mg，59％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.50(d，J＝5.1，1)，7.95(s，1)，7.11(m，1)，5.25(d，J＝5.7，1)，4.20-4.87(m，3)，3.85(d，J＝3.3，1)，3.55(dd，J＝3.3，7.2，1)，2.72(m，2)，2.16(m，4)，1.67(m，2)，1.35(m，4)，0.96(m，9).MS(ES+)427(M+1)。
往在水(10mL)、AcOH(3mL)和MeOH(2mL)中的吡啶11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝戊基)(90mg，0.7mmol)加入PtO2(100mg)，在55psi下氫化過(guò)夜。除去溶劑得到粗產(chǎn)物。用硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，使用在DCM中的20％MeOH，得到標(biāo)題化合物(35mg，38％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.23(d，J＝5.1，1)，4.17(m，3)，3.79(d，J＝3.3，1)，3.52(m，1)，3.38(m，1)，3.07(m，1)，2.68(m，1)，2.14(m，4)，1.88(m，1)，1.71(m，1)，1.52(m，1)，1.30(m，8)，1.07(m，3)，0.90(m，9)；MS(ES+)433(M+1)。
實(shí)施例26制備1-(4-甲氧基哌啶-6-基)-N-{[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
用一般方法P制備4-甲氧基吡啶-2-甲酸，化合物10(b)(R9＝甲氧基)。往三甲基甲硅烷基氰化物(0.95g，9.6mmol)加入在DCM(10mL)中的4-甲氧基吡啶N-氧化物(1g，8mmol)，然后滴加在DCM(10mL)中的二甲基氨基甲酰氯(1.03g，9.6mmol)。室溫下攪拌過(guò)夜后，加入碳酸氫鈉(100mL，10％)，并分離有機(jī)層。用DCM(各50mL)萃取水層兩次。用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層，并除去溶劑得到產(chǎn)物，化合物10a(0.97g，90％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.52(m，1)，7.22(m，1)，7.01(m，1)，3.92(s，3H)；MS(ES+)135(M+1)。
將4-甲氧基-2-氰基吡啶，化合物10a(R9＝甲氧基)，(0.97g，7.2mmol)溶于HCl(6N，50mL)，并回流過(guò)夜。蒸發(fā)HCl，并用乙腈結(jié)晶所得的產(chǎn)物，得到化合物10b(R9＝甲氧基)(0.6g，60％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.65(m，1)，7.99(m，1)，7.68(m，1)，4.21(s，3H)。
MS(ES-)152(M-1)。
0℃下往在DMF(2ml)中的7-甲基α-硫代lincosaminide，化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)，(90mg，0.35mmol)加入TEA(72mg，0.7mmol)、BSTFA(276mg，1.05mmol)，并在室溫下攪拌1.5h。然后將化合物10b(R9＝甲氧基)(109mg，0.7mmol)和HATU(165mg，0.53mmol)加到反應(yīng)混合物，并在室溫下攪拌過(guò)夜。完全除去DMF，將殘余物吸收于EtOAc(50mL)，用碳酸氫鈉(10％，30mL)、鹽水洗滌，并用硫酸鎂干燥。除去溶劑得到一種褐色油樣液體，將其溶于甲醇(10mL)，并用NR-50樹(shù)脂處理1小時(shí)。將樹(shù)脂過(guò)濾，并除去溶劑得到粗物質(zhì)。使用EtOAc作為洗脫劑進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到化合物11b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝甲氧基)(100mg，72％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.42(m，1)，7.64(m，1)，7.07(m，1)，5.25(d，J＝5.4，1)，4.07-4.87(m，3)，3.94(m，4)，3.56(m，1)，2.99(m，2)，2.80(m，1)，2.22(m，1)，2.11(s，3)，0.96(m，3).MS(ES+)387(M+1)。
往在水(10mL)、AcOH(3mL)和MeOH(2mL)中的化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝甲氧基)(100mg，0.26mmol)加入PtO2(100mg)，并在55psi下氫化過(guò)夜。除去溶劑得到粗產(chǎn)物。用硅膠柱色譜法純化粗產(chǎn)物，使用在DCM中的20％MeOH，得到標(biāo)題化合物。(9mg，9％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.17(dd，J＝9.9；3.3，1)，4.07(m，2)，3.79(m，1)，3.52(dd，J＝10.5，3.3，1)，3.35(s，3)，3.18(m，2)，2.72(m，1)，2.16(m，1)，2.12(s，3)1.99(m，2)，1.50(m，1)，1.24(m，2)，0.90(d，J＝6.9，6)；MS(ES+)393(M+1)。
實(shí)施例27制備1-[4-(1-乙基丙-1-基)哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
用一般方法P制備4-異戊基吡啶-2-甲酸，化合物10b(R9＝1-乙基-丙基)。往在乙酸(30mL)中的4-(1-乙基-丙基)-吡啶(8.5g，57mmol)加入過(guò)氧化氫(17.8g，30％，57mmol)。將所得的反應(yīng)混合物回流過(guò)夜。將除去溶劑得到的殘余物溶于DCM(100mL)，用MgSO4干燥。過(guò)濾后，除去溶劑得到一種褐色液體，4-(1-乙基-丙基)-吡啶-N-氧化物(9g，95％)。
往在DCM(25mL)中的三甲基甲硅烷基氰化物(6.5g，65mmol)和4-(1-乙基-丙基)-吡啶-N-氧化物(9g，54mmol)的溶液滴加在DCM(10mL)中的二甲基氨基甲酰氯(7g，65mmol)的溶液。室溫下攪拌過(guò)夜后，加入碳酸氫鈉(100mL，10％)，并分離有機(jī)層。用DCM(50mL)萃取水層兩次。用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層，并除去溶劑得到產(chǎn)物，化合物10a(R9＝1-乙基-丙基)(9.6g，100％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.58(m，1)，7.46(m，1)，7.26(m，1)，2.42(m，1)，1.77(m，4))，0.78(t，J＝7.5，6).MS(ES+)175(M+1)。
將化合物10a(R9＝1-乙基-丙基)(9.5g，54mmol)溶于HCl(6N，50mL)，并回流過(guò)夜。蒸發(fā)HCl，并用乙腈結(jié)晶所得的產(chǎn)物，化合物10b(R9＝1-乙基-丙基)(10g；100％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.86(m，1)，8.45(m，1)，8.20(m，1)，2.92(m，1)，1.87(m，4)，0.84(t，J＝7.5，6).MS(ES-)192(M-1)。
往在DMF(2mL)中的酸10b(77mg，0.4mmol)加入7-甲基α-硫代lincosaminide，化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)(100mg，0.4mmol)，然后加入HBTU(166mg，0.44mmol)和DIEA(205mg，0.8mmol)。將混合物于室溫下攪拌2小時(shí)。使用乙酸乙酯進(jìn)行硅膠柱色譜處理來(lái)純化除去DMF得到的產(chǎn)物，得到化合物11b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝1-乙基-丙基)(150mg，89％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.42(d，J＝5.1，1)，7.37(s，1)，7.32(m，1)，5.27(d，J＝4.8，1)，4.21-4.88(m，3)，3.85(d，J＝3.6，1)，3.56(dd，J＝3.3，10.2，1)，2.48(m，1)，2.11(m，4)，1.00(m，12).MS(ES+)427(M+1)。
往在水(10mL)、AcOH(2mL)和MeOH(2mL)中的化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝1-乙基-丙基)(130mg，0.3mmol)加入PtO2(150mg)，并在55psi下氫化過(guò)夜。除去溶劑得到粗產(chǎn)物。
使用在DCM中的20％MeOH進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(40mg，30％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.17(dd，J＝9.9；3.3，1)，4.10(m，2)，3.78(m，1)，3.51(m，2)，2.81(m，2)，2.16(m，1)，2.10(s，3)1.90(m，2)，1.76(m，3)，1.40(m，8)，0.91(m，9)；MS(ES+)433(M+1)。
實(shí)施例28制備1-(4-異丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 用一般方法P制備4-異丙基吡啶-2-甲酸，化合物(10b)(R9＝異丙基)。往在乙酸(60mL)中的4-異丙基吡啶(5g，0.041mol)加入過(guò)氧化氫(30％，4.7g，0.13mol)，并回流過(guò)夜。除去溶液后，用硫酸鎂干燥溶于DCM的殘余物，其本身可被用于下一步驟。往在二氯甲烷(10mL)中的所得化合物加入三甲基甲硅烷基氰化物(7.0mL，0.07mol)和二甲基氨基甲酰氯(5.6mL，0.05mol)，并在室溫下攪拌24小時(shí)。加入碳酸鉀水溶液(10％，50mL)，并用二氯甲烷(100mL)萃取。將除去溶劑得到的粗產(chǎn)物吸收于鹽酸(6N，30mL)，并回流24小時(shí)。除去酸，然后用乙腈結(jié)晶粗產(chǎn)物得到酸10b(R9＝異丙基)(5g，75％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.78(d，J＝6，1)，8.42(s，1)，8.16(d，J＝6.0，1)，3.25(m，1)，1.33(d，J＝9.0，6)MS(ES-)164(M-1)。
0℃往在DMF(3mL)中的胺，化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)，(140mg，0.56mmol)加入BSTFA(0.59mL，2.24mmol)和三乙胺(0.18mL，1.26mmol)，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌3小時(shí)。合并酸10b(R9＝異丙基)(188mg，1.13mmol)和HATU(319mg，0.84mmol)，并將其在室溫下再攪拌4小時(shí)。除去DMF，用乙酸乙酯(100mL)萃取殘余物，并用飽和碳酸氫鹽(40mL)洗滌。將除去溶劑時(shí)得到的產(chǎn)物吸收于甲醇，并用Dowex H+樹(shù)脂處理1小時(shí)。過(guò)濾樹(shù)脂后，除去甲醇得到粗產(chǎn)物。然后用硅膠柱純化，使用在二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑，得到化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝異丙基)(120mg，53％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.42(d，J＝5.1，1)，7.37(s，1)，7.32(m，1)，5.27(d，J＝4.8，1)，4.21-4.88(m，3)，3.85(d，J＝3.6，1)，3.56(dd，J＝3.3，10.2，1)，2.48(m，1)，2.11(m，1)，2.10(s，3)，1.20(m，12).MS(ES+)399(M+1)。
往在甲醇(5mL)、水(10mL)和乙酸(5mL)中的11b(R1＝Me，R2＝MeR3＝H，R9＝異丙基)(100mg，0.257mmol)加入二氧化鉑(100mg，0.44mmol)，并在60psi下氫化16h。過(guò)濾催化劑之后，汽提出溶劑得到粗產(chǎn)物，然后用硅膠柱色譜法純化，使用在二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑。較低Rf化合物為標(biāo)題化合物(10mg，9％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.17(dd，J＝9.9；3.3，1)，4.10(m，2)，3.80(m，1)，3.51(m，1)，3.16(m，1)，2.61(m，1)，2.16(m，1)，2.10(s，3)1.90(m，1)，1.76(m，1)，1.50-1.09(m，5)，0.91(m，12)；MS(ES+)405(M+1)。
實(shí)施例29制備1-(4-正丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃下通過(guò)將叔丁醇鉀(0.68g，6mmol)加到在THF(10mL)中的丙基磷鎓溴化物(Aldrich)(2.4g，6.0mmol)并在室溫下攪拌1小時(shí)來(lái)制備4-丁基吡啶。加入吡啶-4-甲醛(428mg，4mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌2h。然后將反應(yīng)混合物傾入水，并用乙酸乙酯萃取。取除去溶劑后得到的產(chǎn)物本身吸收至甲醇(30mL)，往其中加入擔(dān)載在碳上的鈀(10％，300mg)，并在1atm壓力下氫化過(guò)夜。除去溶劑，并使用乙酸乙酯進(jìn)行柱色譜法純化，得到純產(chǎn)物4-丁基吡啶(500mg，92％)1H NMR(CDCl3)δ8.42(d，J＝6.0，2)，7.05(d，J＝6.0，1)，2.60(t，J＝6.5，2)，1.62(m，2)，1.37(m，2)，0.93(t，J＝7.0，3).MS(ES+)136(M+1)。
用一般方法P制備4-丁基吡啶-2-甲酸，化合物(10b)(R9＝丁基)。往在乙酸(15mL)中的4-丁基吡啶(2g，0.014mol)加入過(guò)氧化氫(30％，5mL，0.056mol)，并回流過(guò)夜。除去溶劑后，將殘余物溶于DCM，用硫酸鎂干燥，并取其本身用于下一步驟。往在二氯甲烷(10mL)中的來(lái)自前述步驟的化合物加入三甲基甲硅烷基氰化物(3.92mL，0.029mol)和二甲基氨基甲酰氯(2.67mL，0.028mol)，并在室溫下攪拌24小時(shí)。加入碳酸鉀水溶液(10％，50mL)，并用二氯甲烷(100mL)萃取。將除去溶劑時(shí)得到的粗產(chǎn)物吸收于鹽酸(6N，30mL)，并回流24小時(shí)。除去酸，然后用乙腈結(jié)晶粗產(chǎn)物得到酸10b(R9＝丁基)(1.5g，60％)。
1H NMR(CDCl3)δ8.92(d，J＝6.0，1)，8.65(s，1)，8.27(m，1)，3.23(t，J＝6.5，2)，1.98(m，2)，1.67(m，2)，1.20(t，J＝7.0，3).MS(ES-)178(M-1)。
0℃下往在DMF(3mL)中的胺，化合物2b(R1＝Me，R＝Me)，(140mg，0.56mmol)加入BSTFA(0.59mL，2.24mmol)和三乙胺(0.18mL，1.26mmol)，然后在室溫下攪拌3小時(shí)。加入酸10b(R9＝丁基)(203mg，1.13mmol)和HATU(319mg，0.84mmol)，并將反應(yīng)混合物于室溫下再攪拌4小時(shí)。除去DMF，用乙酸乙酯(100mL)萃取殘余物，并用飽和碳酸氫鹽(40mL)洗滌。將除去溶劑得到的產(chǎn)物吸收于甲醇，并用Dowex H+樹(shù)脂處理1小時(shí)。過(guò)濾樹(shù)脂后，除去甲醇得到粗產(chǎn)物。然后用硅膠柱純化產(chǎn)物，使用乙酸乙酯作為洗脫劑，得到化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝丁基)(200mg，86％)。
1H NMR(CDCl3)δ8.40(d，J＝4.2，1)，8.01(s，1)，7.29(m，1)，5.40(d，J＝5.4，1)，4.02-4.36(m，3)，4.80(s，1)，3.48-3.60(m，1)，3.72(t，J＝6.0，2)，2.49(m，1)，2.20 9s，3)，1.67(m，4)，1.40(M，3)，0.98-1.18(m，9).質(zhì)量413(M+1)。
往在甲醇(5mL)、水(10mL)和乙酸(5mL)中的化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9＝丁基)(200mg，0.49mmol)加入二氧化鉑(100mg，0.44mmol)，并在60psi下氫化16h。將催化劑過(guò)濾之后，汽提出溶劑以得到粗產(chǎn)物，然后用硅膠柱色譜法純化，使用在二氯甲烷中的20％甲醇作為洗脫劑。較低Rf餾分提供標(biāo)題化合物(60mg，29％)。
1H NMR(CDCl3)δ5.20(d，J＝3.6，1)，4.20(dd，J＝3.0，4.8，1)，4.04(m，2)，3.80(d，J＝3.0，1)，3.61-3.66(m，1)，3.52(dd，J＝3.3，10.2)，2.88(m，1)，2.17(m，1)，2.14(s，3)，1.87(m，2)，1.62(m，2)，1.32(m，6)，0.89(m，9)；MS(ES+)419(M+1)。
實(shí)施例30制備1-(4-環(huán)己基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 用一般方法P制備4-苯基吡啶-2-甲酸，化合物10b(R9＝苯基)。往在二氯甲烷(10mL)中的4-苯基吡啶-N-氧化物(1g，5.84mmol)加入三甲基甲硅烷基氰化物(1.5mL，11.6mmol)和二甲基氨基甲酰氯(1mL，11.6mmol)，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌24小時(shí)。加入碳酸鉀水溶液(10％，10mL)，并用二氯甲烷(100mL)萃取。將除去溶劑時(shí)得到的粗產(chǎn)物吸收于鹽酸(6N，30mL)，并回流24小時(shí)。除去酸，然后用乙腈結(jié)晶粗產(chǎn)物得到酸10b(R9’＝苯基)(1g，86％)。
MS(ES-)198(M-1)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ7.64-7.67(m，3)，8.02-8.06(m，2)，8.53-8.56(m，1)，8.82(s，1)，8.82-8.90(m，1)。
0℃下往在DMF(5mL)中的胺2b(R1＝Me，R2＝Me)(102mg，0.42mmol)加入BSTFA(0.549mL，2.1mmol)和三乙胺(0.183mL，1.26mmol)，然后在室溫下攪拌3小時(shí)。加入酸10b(R9＝苯基)(158mg，0.80mmol)和HATU(302mg，0.80mmol)，并將反應(yīng)物在室溫下再攪拌4小時(shí)。除去DMF，用乙酸乙酯(100mL)萃取殘余物，并用飽和碳酸氫鹽(40mL)洗滌。將除去溶劑得到的產(chǎn)物吸收于甲醇，并用Dowex H+樹(shù)脂處理1小時(shí)。過(guò)濾樹(shù)脂之后，除去甲醇得到粗產(chǎn)物。然后用硅膠色譜法純化所得的殘余物，使用在二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑，得到化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9′＝苯基)(50mg，58％)。
TLCRf＝0.70(10％MeOH/DCM)；MS(ES)435(M+1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.01(t，J＝6.6，6)，2.12(s，3)，2.28(m，1)，3.56(dd，J＝ 3.3，10.5，1)，3.90(d，J＝3.3，1)，4.12(dd，J＝5.4，10.5，1)，4.27-4.36(m，2)，4.52(m，2)，5.26(d，J＝5.7，1)，7.48-7.55(m，3)，7.77-7.80(M，2)，7.83-7.85(m，1)，8.37(s，1)，8.69(d，J＝5.4，1)。
往在甲醇(5mL)、水(10mL)和乙酸(5mL)中的化合物11b(R1＝Me，R2＝Me R3＝H，R9’＝苯基)(40mg，0.09mmol)加入二氧化鉑(100mg，0.44mmol)，并將反應(yīng)混合物于60psi氫氣氛下振蕩16h。過(guò)濾除去催化劑，并將溶劑蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物，然后使用在二氯甲烷中的10％甲醇進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(10mg，25％)。
TLCRf＝0.22(20％MeOH/DCM)；MS(ES+)447(M+1)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ0.90(d，J＝6.8，6)，0.93-1.05(m，5)，1.20(m，6)，1.33-1.47(m，4)，1.75(m，6)，2.10(s，3)，2.18-2.22(m，1)，2.97(t，J＝12.3，1)，3.39-3.52(m，2)，3.70-3.78(m，2)，4.05-4.21(m，3)，5.23(d，J＝5.7，1)。
實(shí)施例31制備1-(4-乙基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
往在甲醇(2mL)中的實(shí)施例1的產(chǎn)物(28mg，0.07mmol)加入環(huán)氧乙烷(0.5mL)，并在4℃下攪拌過(guò)夜。除去溶劑，并用柱色譜法純化所得的產(chǎn)物，使用在DCM中的20％MeOH作為洗脫劑得到標(biāo)題化合物(16mg，51％)，為一種白色粉末。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝6，1)，4.27(m，1)，4.10(m，2)，3.95(m，1)，3.79-3.50(m，4)，3.85(m，1)3.74(m，1)，3.26(m，1)，2.91(m，2)，2.33(m，1)，2.13(m，4)，1.92(m，1)，1.71(m，1)，1.17(m，7)，0.94(m，9)；MS(ES+)435(M+1)。
實(shí)施例32制備1-(4-正戊基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 利用實(shí)施例32的方法，用實(shí)施例25的產(chǎn)物作為原料制備標(biāo)題化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝6.0，1)，4.19(m，3)，3.79(d，J＝3.3，1)，3.74(m，1)，3.65(m，1)，3.54(dd，J＝3.0，10.2，1)，3.25(m，2)，2.82(m，2)，2.14(m，4)，1.89(m，1)，1.72(m，1)，1.28(m，12)，0.94(m，9)；MS(ES+)477(M+1)。
實(shí)施例33制備1-(4-正丙基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基
-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 利用實(shí)施例32的方法，用實(shí)施例17的產(chǎn)物作為原料制備標(biāo)題化合物。
1HNMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝6.0，1)，4.19(dd，J＝9.6；3.3，1)，4.11(m，2)，3.79(d，J＝3.3，1)，3.75(m，1)，3.65(m，1)，3.54(m，1)，3.28(m，1)，2.82(m，2)，2.27(m，5)1.90(m，1)，1.71(m，1)，1.36(m，8)，0.94(m，9)；MS(ES+)449(M+1)。
實(shí)施例34制備1-[4-正丙基-N-(F-moc)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 往在水(3mL)和二噁烷(3mL)中的實(shí)施例17的產(chǎn)物(50mg，0.123mmol)加入Fmoc-Cl(38mg，0.197mmol)和碳酸鈉(25mg，0.246mmol)，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過(guò)夜。除去溶劑，將粗物質(zhì)裝填至硅膠柱，并用乙酸乙酯洗脫得到標(biāo)題化合物，為一種白色固體(30mg，51％)。
TLCRf＝0.5(EtOAc).MS(ES+)＝627(M+1)，649(M+Na)；1HNMR(CD3OD，200MHz)7.79(d，J＝4.6Hz，2)，7.59-7.62(m，2)，7.28-7.41(m，4)，5.19(d，J＝3.8Hz，1)，4.45(m，2)，4.24(t，J＝4.2，1)，3.99-4.15(m，4)，3.93(m，1)，3.47-3.50(m，2)，2.05(s，3)，1.87(m，1)，1.67(s，2)，1.50(m，1)，1.30(m，4)，0.86-0.91(m，9)。
實(shí)施例35制備1-[4-正丙基-N-(甲酸乙酯)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 往在水(3mL)和二噁烷(3mL)中的實(shí)施例17的產(chǎn)物(50mg，0.123mmol)加入氯甲酸乙酯(20mg，0.147mmol)和碳酸鈉(25mg，0.246mmol)，并在室溫下攪拌過(guò)夜。除去溶劑，將粗物質(zhì)裝填至硅膠柱，并用乙酸乙酯洗脫得到標(biāo)題化合物，為一種白色固體(40mg，52％)。
TLCRf＝0.28(EtOAc).MS(ES+)＝477(M+1)，499(M+Na)；1HNMR(CD3OD，200MHz)5.22(d，J＝3.6Hz，1)，4.27(m，1)，4.03-4.14(m，5)，3.96(bs，1)，3.62(m，1)，3.54(d，J＝2.2Hz，1)，3.52(d，J＝2.2Hz，1)，2.08(s，3)，1.93-2.03(m，2)，1.75-1.85(m，3)，1.61(m，2)，1.33(m，4)，1.22-1.28(m，3)，0.90-0.94(m，9)。
實(shí)施例36制備1-[4-正丙基-N-(甲酸苯基酯)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 往在水(3mL)和二噁烷(3mL)中的實(shí)施例17的產(chǎn)物(50mg，0.123mmol)加入氯甲酸苯基酯(40mg，0.246mmol)和碳酸鈉(25mg，0.246mmol)，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過(guò)夜。除去溶劑，將粗物質(zhì)裝填于硅膠柱，并用乙酸乙酯洗脫得到標(biāo)題化合物，為一種白色固體(30mg，47％)。
TLCRf＝0.4(EtOAc).MS(ES+)＝526(M+1)，548(M+Na)；1HNMR(CD3OD，200MHz)7.36(t，J＝3.8Hz，2)，7.17-7.23(m，10)，7.10(d，J＝3.6Hz，2)，5.20(d，J＝3.6Hz，1)，4.09(m，3)，3.93(d，J＝2.2Hz，1)，3.82(m，2)，3.46(m，2)，2.01(s，3)，2.00(m，1)，1.71(m，1)，1.46-1.36(m，4)，0.96-0.90(m，9)。
實(shí)施例37制備1-[4-(4，4-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 往在苯(8mL)中的由一般方法L的第一步制備的醛8a(510mg，1.47mmol，1equiv)的溶液加入1-三苯基亞正膦基-2-丙酮(Aldrich)(702mg，2.2mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物回流過(guò)夜，并在真空下除去溶劑。用色譜法純化殘余物得到4-(4-氧代-戊-2-烯基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，為一種油(237mg，42％)。
MS(ESPOS)410.2[M+Na]+，288.3[M-Boc+H]+；MS(ESNEG)386.2[M-H]-。
往在苯(0.9mL)中的4-(4-氧代-戊-2-烯基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(193mg，0.5mmol，1equiv)的溶液加入在苯(3.6mL)中的三苯基膦-銅(I)氫化物六聚體的溶液。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜，并加入己烷(13mL)。將混合物過(guò)濾，并蒸發(fā)濾液。用色譜法純化殘余物得到4-(4-氧代-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(127mg，65％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35-7.30(m，5)，5.25-5.04(m，2)，4.42-4.25(m，1)，3.77-3.62(m，1)，3.00-2.85(m，1)，2.39(t，J＝7，2)，2.34-1.47(m，7)，2.10(s，3)，1.43(s，3H)，1.31(s，6H)；MS(ESPOS)412.3[M+Na]+，290.3[M-Boc+H]+；MS(ESNEG)388.4[M-H]-。
-78℃下往在二氯甲烷(1.5mL)中的4-(4-氧代-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(155mg，0.40mmol，1equiv)的溶液加入DAST(0.21mL，1.60mmol，4equiv)。將反應(yīng)混合物加熱至rt，并在rt下攪拌3h，然后在-78℃下再加入DAST(0.32mL，2.4mmol，6equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。用二氯甲烷稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)洗滌，干燥并蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-(4，4-二氟-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯，為一種黃色油(88mg，54％)。
MS(ESPOS)434.2[M+Na]+，312.3[M-Boc+H]+。
往在THF(1.2mL)和水(0.4mL)中的4-(4，4-二氟-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(88mg，0.21mmol，1equiv)的溶液加入氫氧化鋰一水合物(45mg，1.07mmol，5equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去THF，用水稀釋殘余物，并用乙醚洗滌。將水層吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸分配。用水(1x)、鹽水(1x)洗滌有機(jī)層，干燥并濃縮得到4-(4，4-二氟-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(66mg，96％)。
1HNMR(300MHz，CDCl3)δ4.39-4.34(m，1)，3.57-3.48(m，1)，2.92-2.83(m，1)，2.57-2.50(m，1)，2.30-2.18(m，1)，1.91-1.73(m，3)，1.64-1.36(m，7)，1.48(s，9)；MS(ESPOS)344.3[M+Na]+，222.3[M-Boc+H]+；MS(ESNEG)320.2[M-H]-。
0℃下往在無(wú)水DMF(0.5mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)(50mg，0.20mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(88.3up，0.64mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(79.2μL，0.30mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后在rt下攪拌50分鐘。在25mL圓底燒瓶中將反應(yīng)混合物加到酸(66mg，0.21mmol，1equiv)，然后加入HATU(96.8mg，0.25mmol，1.25equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸、水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)，不經(jīng)附加的純化而用于下一步。
往在DCM(9mL)中的含二甲硫醚(0.20mL)的以上Boc保護(hù)的林可酰胺的溶液加入三氟乙酸(3mL)和水(0.20mL)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(68mg，75％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.4，1)，4.16(dd，J＝3.3，9.9，1)，4.11-4.00(m，3)，3.75(d，J＝3.3，1)，3.51(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.40-3.32(m，1)，2.71(dd，J＝8.2，10.6，1)，2.23-2.05(m，3)，2.10(s，3)，1.98-1.76(m，3)，1.63-1.39(m，7)，0.94-0.87(m，6).MS(ESPOS)455.3[M+H]+。
實(shí)施例38制備1-[4-(3，3-二氟丁-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 在氮?dú)夥蘸蛣×覕嚢柘聦⒁一交祖f溴化物(Aldrich)(2.92g，7.86mmol，3.9equiv)和叔丁醇鉀(0.61g，5.44mmol，2.7equiv)懸浮在甲苯(26mL)中。4h后，滴加在甲苯(17mL)中的由一般方法L的第一步制備的醛8a(700mg，2.01mmol，1equiv)的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌2h，并用乙酸乙酯(150mL)稀釋。用水(2X)、鹽水洗滌有機(jī)層，干燥，并濃縮。用色譜法純化殘余物得到一種澄清的油4-丁-2-烯基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(360mg，50％)。
MS(ESPOS)260.3[M+H-Boc]+。
往在DMF(1.4mL)和水(0.2mL)中的4-丁-2-烯基-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(149mg，0.42mmol，1equiv)的溶液加入氯化鈀(II)(7.4mg，0.042mmol，0.1equiv)和氯化銅(I)(41.1mg，0.42mmol，1equiv)。將混合物于50℃下攪拌過(guò)夜，并使氧冒泡通入混合物。將混合物過(guò)濾，并在高度真空下濃縮濾液。用乙酸乙酯稀釋殘余物，用水(1X)、鹽水(1X)洗滌，干燥并濃縮。用制備型TLC純化殘余物得到4-(3-氧代-丁基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(110mg，71％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35-7.28(m，5)，5.24-5.03(m，2)，4.43-4.25(m，1)，3.75-3.61(m，1)，3.01-2.87(m，1)，2.44-2.35(m，2)，2.28-2.15(m，1)，2.11(s，3)，2.09-1.98(m，1)，1.91-1.51(m，3)，1.43(s，3.4H)，1.31(s，5.6H).MS(ESPOS)398.3[M+Na]+，276.3[M-Boc+H]+。
-78℃下往在二氯甲烷(1.1mL)中的4-(3-氧代-丁基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(110mg，0.29mmol，1equiv)的溶液加入DAST(0.16mL，1.17mmol，4equiv)。反應(yīng)混合物加熱至rt，并在rt下攪拌3h，然后在-78℃下加入附加的DAST(0.23mL，1.76mmol，6equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。然后用二氯甲烷稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)洗滌，干燥，蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-(3，3-二氟-丁基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(92.7mg，80％)。
MS(ESPOS)420.3[M+Na]+。
往在THF(1.2mL)和水(0.4mL)中的4-(3，3-二氟-丁基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(92.7mg，0.23mmol，1equiv)的混合物加入氫氧化鋰一水合物(49mg，1.17mmol，5equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去THF。用水稀釋殘余物，用乙醚洗滌。將水層吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸分配。用水(1x)、鹽水(1x)洗滌有機(jī)層，干燥并濃縮得到一種白色固體，4-(3，3-二氟-丁基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(59.7mg，83％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.40-4.36(m，1)，3.59-3.52(m，1)，2.94-2.86(m，1)，2.55-2.48(m，1)，2.33-2.15(m，1)，1.92-1.73(m，3)，1.66-1.40(m，5)，1.47(s，9)；MS(ESPOS)330.2[M+Na]+，208.2[M-Boc+H]+；MS(ESNEG)306.1[M-H]-。
0℃下往在無(wú)水DMF(0.5mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)(50mg，0.20mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(88.3up，0.64mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(79.2μL，0.30mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后在rt下攪拌50分鐘。在25mL圓底燒瓶?jī)?nèi)將反應(yīng)混合物加到酸4-(3，3-二氟-丁基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(59.7mg，0.20mmol，1equiv)，然后加入HATU(93.3mg，0.25mmol，1.25equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸、水、飽和NaHCO3和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種糖漿。
往在DCM(9mL)中的含二甲硫醚(0.20mL)的以上糖漿的溶液加入三氟乙酸(3mL)和水(0.20mL)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(63mg，72％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.22-4.13(m，2)，4.10-4.04(m，2)，3.76(d，J＝2.4，1)，3.54-3.42(m，2)，2.84-2.76(m，1)，2.29-1.83(m，5)，2.10(s，3)，1.67-1.51(m，6)，0.95-0.87(m，6).MS(ESPOS)441.3[M+H]+實(shí)施例39制備1-[4-(3，3-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
0℃下往在DMF(2.8mL)和水(0.4mL)中的用一般方法K的方法制備的化合物7c(R9’＝2-戊烯基)(323.7mg，0.87mmol，1equiv)的溶液加入氯化鈀(II)(15.4mg，0.087mmol，0.1equiv)和氯化銅(I)(85.9mg，0.87mmol，1equiv)。將混合物于50℃下攪拌過(guò)夜，并使氧冒泡通入混合物。將混合物過(guò)濾，在高度真空下濃縮濾液。用乙酸乙酯稀釋殘余物，用水(1X)、鹽水(1X)洗滌，干燥并濃縮。用制備型TLC純化殘余物得到4-(3-氧代-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(242mg，72％)。
MS(ESPOS)412.3[M+Na]+，290.3[M-Boc+H]+。
-78℃下往在二氯甲烷(2.3mL)中的4-(3-氧代-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(242mg，0.62mmol，1equiv)加入DAST(0.33mL，2.49mmol，4equiv)。將反應(yīng)混合物加熱至rt，并在rt下攪拌3h，然后在-78℃下再加入更多的DAST(0.49mL，3.73mmol，6equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。然后用二氯甲烷稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)洗滌，干燥，蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-(3，3-二氟-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(117mg，46％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.35-7.26(m，5)，5.25-5.04(m，2)，4.44-4.27(m，1)，3.79-3.64(m，1)，3.02-2.89(m，1)，2.32-2.17(m，1)，2.13-2.02(m，1)，1.91-1.68(m，5)，1.57-1.47(m，2)，1.44(s，3.5H)，1.31(s，5.5H)，0.97(t，J＝7.5，3)。
MS(ESPOS)434.3[M+Na]+，312.3[M-Boc+H]+。
往在THF(2.4mL)和水(0.8mL)中的4-(3，3-二氟-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯2-甲酯(106mg，0.26mmol，1equiv)的溶液加入氫氧化鋰一水合物(54mg，1.29mmol，5equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去THF。用水(10mL)稀釋殘余物，用乙醚(20mL)洗滌。將水層吸收于乙酸乙酯(50mL)，用10％檸檬酸(25mL)分配。用水(1x)、鹽水(1x)洗滌有機(jī)層，干燥并濃縮得到4-(3，3-二氟-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯，為一種澄清的油(82.1mg，99％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.40-4.36(m，1)，3.58-3.51(m，1)，2.94-2.86(m，1)，2.57-2.51(m，1)，2.30-2.15(m，1)，1.92-1.72(m，5)，1.62-1.53(m，2)，1.48(s，9)，0.99(t，J＝7.5，3)；MS(ESPOS)344.3[M+Na]+，222.3[M-Boc+H]+。
0℃下往在無(wú)水DMF(0.5mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)(50mg，0.20mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(88.3μl，0.64mmol，3.2equiv)，然后加入BSTFA(79.2μl，0.30mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后于rt下攪拌50分鐘。在25mL圓底燒瓶中將反應(yīng)混合物加到酸4-(3，3-二氟-戊基)-吡咯烷-1，2-二甲酸1-叔丁酯(76.6mg，0.24mmol，1.2equiv)，然后加入HATU(111.9mg，0.29mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯(60mL)，用10％檸檬酸(30mL)、水(30mL)、飽和NaHCO3(30mL)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種黃色油。
往在DCM(9mL)中的含二甲硫醚(0.20mL)的以上油的溶液加入三氟乙酸(3mL)和水(0.20mL)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(72mg，80％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.20-4.04(m，4)，3.76(d，J＝2.7，1)，3.51(dd，J＝3.4，10.3，1)，3.43(dd，J＝6.9，10.8，1)，2.77(dd，J＝8.4，10.8，1)，2.30-2.05(m，3)，2.10(s，3)，2.03-1.76(m，5)，1.64-1.54(m，2)，1.03-0.89(m，9)；MS(ESPOS)455.4[M+H]+。
實(shí)施例40制備1-[4-(3，3-二氟戊-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 0℃下往在MeOH(2ml)中的實(shí)施例42的產(chǎn)物(17.9mg，0.039mmol)的溶液加入環(huán)氧乙烷(0.4mL)。將反應(yīng)混合物于4℃下攪拌過(guò)夜。濃縮反應(yīng)混合物，并用色譜法純化得到標(biāo)題化合物，為一種白色固體(8.2mg，42％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.23(d，J＝5.7，1)，4.13-4.05(m，3)，3.75(d，J＝3.6，1)，3.72-3.57(m，2)，3.53(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.41-3.36(m，1)，3.22(dd，J＝3.3，10.8，1)，2.88-2.78(m，1)，2.63-2.54(m，1)，2.18-1.99(m，4)，2.10(s，3)，1.93-1.75(m，5)，1.57-1.46(m，2)，1.01-0.90(m，9)；MS(ESPOS)499.6[M+H]+；MS(ESNEG)497.5[M-H]-。
實(shí)施例41制備1-(4-(2，2-二氟乙-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 用一般方法R所述的方法制備化合物14c(R9＝2，2-二氟乙基)。
往干燥的燒瓶中加入化合物14a(1.4g，5.32mmol，1equiv)、三苯基膦(111.6mg，0.43mmol，0.08equiv)、碘化銅(I)(81mg，0.43mmol，0.08equiv)、乙酸鈀(47.7mg，0.21mmol，0.04equiv)和三乙胺(20mL)。用氮將混合物脫氣，然后加入丙炔醛二乙基乙?；?1.36g，10.65mmol，2equiv)。將混合物于rt下攪拌3小時(shí)。在真空下除去溶劑得到一種深色殘余物。用色譜法純化殘余物得到一種黃色油，化合物14b(R9’＝3，3-二乙氧基-丙-1-炔基)(1.4g，100％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.69(dd，J＝0.8，5.0，1)，8.15(dd，J＝0.8，1.4，1)，7.49(dd，J＝1.7，5.0，1)，5.48(s，1)，3.99(s，3)，3.82-3.73(m，2)，3.71-3.62(m，2)，1.26(t，J＝7.2，6).MS(ESPOS)264.5[M+H]+。
往在甲醇(100mL)中的14b(R9’＝3，3-二乙氧基-丙-1-炔基)(1.4g，5.32mmol)的溶液加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(0.3g)。吹掃混合物，充入氫(1atm)，并在rt下振蕩過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去鈀，并將濾液濃縮得到14c(R9＝3，3-二乙氧基丙基)，為一種油(1.39g，98％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.60(d，J＝5.1，1)，7.98(d，J＝0.9，1)，7.31-7.28(m，1)，4.45(t，J＝5.4，1)，3.98(s，3)，3.72-3.58(m，2)，3.52-3.39(m，2)，2.79-2.72(m，2)，1.99-1.90(m，2)，1.22-1.15(m，6)。
往在乙酸(8mL)和水(2mL)中的14c(R9＝3，3-二乙氧基丙基)(0.68g，2.55mmol)的混合物加入濃鹽酸(2滴)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜，并在高度真空下除去溶劑。用乙酸乙酯稀釋殘余物，用飽和碳酸氫鈉(1X)、鹽水(1X)洗滌。干燥有機(jī)層，并濃縮得到4-(3-氧代-丙基)-吡啶-2-甲酸甲酯，為一種黃色油(0.27g，55％)。
-78℃下往在DCM(5ml)中的醛4-(3-氧代-丙基)-吡啶-2-甲酸甲酯(0.27g，1.4mmol，1equiv)的溶液加入DAST(0.91g，5.6mmol，4equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。用二氯甲烷(60mL)稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)洗滌，干燥并蒸發(fā)。用制備型TLC純化殘余物(5％MeOH，在DCM中)得到4-(3，3-二氟-丙基)-吡啶-2-甲酸甲酯(137mg，45％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.64(d，J＝5.1，1)，8.00-7.98(m，1)，7.33-7.29(m，1)，5.85(dddd，J＝4.1，4.1，56.4，56.4，1)，3.99(s，3)，2.90-2.83(m，2)，2.28-2.09(m，2)；MS(ESPOS)216.4[M+H]+。
往在MeOH(3ml)和水(3mL)中的4-(3，3-二氟-丙基)-吡啶-2-甲酸甲酯(130mg，0.6mmol)(或化合物14c(R9＝2，2-二氟乙基)，在先前步驟中制備)的溶液加入濃HCl(0.25mL，3.0mmol，5equiv)和氧化鉑(65mg)。吹洗混合物，充入氫(1atm)并攪拌過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去氧化鉑，并將濾液蒸發(fā)得到一種澄清的糖漿。往以上殘余物加入2N NaOH(1.21mL)和叔丁醇(0.7mL)。將混合物于rt下攪拌2小時(shí)。然后加入二碳酸二叔丁酯(0.16g，0.73mmol)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑。用水(10mL)稀釋殘余物，用乙醚(20mL)洗滌。用2N HCl將水層酸化至pH＝2.0，并用乙酸乙酯(2x)萃取。將合并的有機(jī)層干燥，并濃縮得到4-(3，3-二氟-丙基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯，為一種澄清的糖漿(163mg，88％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ5.77(dddd，J＝4.2，4.2，56.6，56.6，1)，4.34(t，J＝6.4，1)，3.62-3.50(m，1)，3.41-3.30(m，1)，2.05-1.96(m，1)，1.92-1.73(m，4)，1.70-1.60(m，1)，1.52-1.32(m，3)，1.43(s，9)；MS(ESPOS)330.5[M+Na]+；MS(ESNEG)306.5[M-H]-。
0℃下往在無(wú)水DMF(1.2mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)的HCl鹽(140mg，0.49mmol，1equiv)的混合物加入三乙胺(0.34mL，2.43mmol，5equiv)，然后加入BSTFA(0.20mL，0.74mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后在rt下攪拌50分鐘。往反應(yīng)混合物中加入4-(3，3-二氟-丙基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯(153mg，0.50mmol，1.0equiv)和HATU(235mg，0.62mmol，1.26equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸(1X)、水(1X)、飽和NaHCO3(1X)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種粉紅色糖漿，將其不經(jīng)純化而使用。
往在DCM(15mL)中的含二甲硫醚(0.33mL)的以上糖漿的溶液加入三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(較低的異構(gòu)體，93mg，43％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.90(dddd，J＝4.2，4.2，56.7，56.7，1)，5.24(d，J＝6，1)，4.21(dd，J＝3.5，9.8，1)，4.11-4.04(m，2)，3.84-3.77(m，2)，3.51(dd，J＝3.2，10.3，1)，3.45-3.37(m，1)，3.07-2.98(m，1)，2.23-2.12(m，2)，2.11(s，3)，1.98-1.66(m，4)，1.52-1.26(m，4)，0.94-0.88(m，6).MS(ESPOS)441.7[M+H]+。
實(shí)施例42制備1-(4-(3，3-二氟丙-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
-72℃下在1分鐘內(nèi)往在二氯甲烷(1.8mL)中的二甲亞砜(0.58mL，8.16mmol，2.4equiv)的溶液加入在二氯甲烷(2.04mL，4.08mmol，1.2equiv)中的2M草酰氯溶液。將混合物于-72℃下攪拌25分鐘，然后在2分鐘內(nèi)滴加在二氯甲烷(4.8mL)中的使用一般方法R的方法制備的醇14c(R9＝4-羥基丁基)(0.71g，3.4mmol，1equiv)的溶液。將反應(yīng)混合物于-72℃下攪拌25分鐘，然后加熱至-50℃，并再攪拌2h。加入三乙胺(1.89mL，13.6mmol，4.0equiv)，并在-50℃下攪拌25分鐘。用乙酸乙酯稀釋混合物，用水(1X)、飽和NaHCO3水溶液(1X)、鹽水(1X)洗滌，干燥，蒸發(fā)，并與無(wú)水甲苯共蒸發(fā)得到醛4-(4-氧代-丁基)-吡啶-2-甲酸甲酯，為一種油(0.66mg，94％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.78(s，1)，8.62(d，J＝5.1，1)，7.97(s，1)，7.29(d，J＝5.1，1)，3.99(s，3)，2.72(t，J＝7.8，2)，2.50(t，J＝7.2，2)，2.04-1.93(m，2)；MS(ESPOS)230.4[M+Na]+。
-78℃下往在DCM(12mL)中的4-(4-氧代-丁基)-吡啶-2-甲酸甲酯(0.66g，3.19mmol，1equiv)的溶液加入DAST(1.69mL，12.75mmol，4equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。用二氯甲烷稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)、鹽水(1X)洗滌，干燥，蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-(4，4-二氟丁基)-吡啶-2-甲酸甲酯(0.54g，74％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.62(d，J＝5.1，1)，7.97-7.95(m，1)，7.29-7.26(m，1)，5.81(dddd，J＝3.9，3.9，56.6，56.6，1)，3.98(s，3)，2.74(t，J＝7.2，2)，1.93-1.77(m，4).MS(ESPOS)230.4[M+H]+，252.4[M+Na]+。
往混合物在MeOH(8mL)和水(8mL)中的4-(4，4-二氟丁基)-吡啶-2-甲酸甲酯(0.54g，2.36mmol，1equiv)加入濃HCl(0.59mL，7.07mmol，3equiv)和氧化鉑(0.2g)。吹洗混合物，充入氫(1atm)，并攪拌過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去氧化鉑，并蒸發(fā)濾液得到一種殘余物MS(ESPOS)236.6[M+H]+。
往以上制備的殘余物加入2N NaOH(4.72mL)和叔丁醇(2.5mL)。將混合物在rt下攪拌2小時(shí)。然后加入二碳酸二叔丁酯(0.77g，3.54mmol)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑。用水(10mL)稀釋殘余物，用乙醚(20mL)洗滌。用2N HCl將水層酸化至pH＝2.0，用乙酸乙酯(2x)萃取。將合并的有機(jī)層干燥，并濃縮得到4-(4，4-二氟-丁基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯(0.67g，89％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.77(dddd，J＝4.3，4.3，56.8，56.8，1)，4.30(t，J＝6.8，1)，3.58-3.47(m，1)，3.41-3.31(m，1)，2.05-1.96(m，1)，1.87-1.68(m，4)，1.65-1.56(m，1)，1.51-1.30(m，5)，1.43(s，9)；MS(ESPOS)344.5[M+Na]+。
0℃下往混合物在無(wú)水DMF(1.3mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)的HCl鹽(153mg，0.53mmol，1equiv)加入三乙胺(0.37mL，2.66mmol，5equiv)，然后加入BSTFA(0.21mL，0.80mmol，1.5equiv)。0℃下將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，然后在rt下攪拌50分鐘。往反應(yīng)混合物中加入4-(4，4-二氟-丁基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯(196mg，0.61mmol，1.15equiv)和HATU(293mg，0.77mmol，1.45equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸(1X)、水(1X)、飽和NaHCO3(1X)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種糖漿。將殘余物溶于甲醇(20mL)，然后加入干燥和洗滌過(guò)的Dowex樹(shù)脂(100mg)。將混合物于rt下攪拌30分鐘并過(guò)濾。將濾液濃縮得到一種澄清的糖漿，用色譜法將其純化得到一種澄清的糖漿(0.25g，85％)。
MS(ESPOS)555.8[M+H]+。
往在DCM(15mL)中的含二甲硫醚(0.33mL)的以上糖漿的溶液加入三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(較低的異構(gòu)體，70mg，34％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.88(DDDD，J＝4.4，4.4，57，57，1)，5.24(d，J＝5.4，1)，4.20(dd，J＝3.2，10.1，1)，4.12-4.03(m，2)，3.90-3.80(m，2)，3.52(dd，J＝3.5，10.3，1)，3.46-3.39(m，1)，3.09-2.98(m，1)，2.25-2.12(m，2)，2.11(s，3)，1.98-1.67(m，4)，1.56-1.30(m，6)，0.95-0.87(m，6)；MS(ESPOS)455.7[M+H]+。
實(shí)施例43制備1-(4-(5，5-二氟戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 用方法R制備化合物14c(R9’＝5-羥基戊基)(往干燥燒瓶中加入化合物14a(2g，7.60mmol，1equiv)、三苯基膦(159.4mg，0.61mmol，0.08equiv)、碘化銅(I)(115.8mg，0.61mmol，0.08equiv)、乙酸鈀(68.2mg，0.30mmol，0.04equiv)和三乙胺(28mL)。用氮將混合物脫氣，然后加入4-戊炔-1-醇(1.28g，15.21mmol，2equiv)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑得到一種深色殘余物。用色譜法純化殘余物得到14b(R9’＝5-羥基戊-1-炔-基)。
往在甲醇(60mL)中的14b(R9’＝5-羥基戊-1-炔-基)的溶液加入10％擔(dān)載在碳上的鈀(0.62g)。吹洗混合物，充入氫(1atm)，并在rt下攪拌過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去鈀，并將濾液濃縮得到一種黃色油14c(R9＝5-羥基戊基)(1.34g，79％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.62(d，J＝4.8，1)，7.97(s，1)，7.31(dd，J＝1.6，5，1)，3.99(s，3)，3.63(t，J＝6.5，2)，2.70(t，J＝7.7，2)，1.74-1.53(m，4)，1.46-1.34(m，2)。
-72℃下于1分鐘內(nèi)往在二氯甲烷(1.4mL)中的二甲亞砜(0.46mL，6.42mmol，2.6equiv)的溶液加入在二氯甲烷中的2M草酰氯溶液(1.61mL，3.21mmol，1.3equiv)。將混合物于-72℃下攪拌25分鐘，然后在2分鐘內(nèi)滴加在二氯甲烷(3.8mL)中的吡啶14c(R9＝5-羥基戊基)(0.55g，2.47mmol，1equiv)的溶液。將反應(yīng)混合物于-72℃下攪拌25分鐘，然后加熱至-50℃，并再攪拌2h。加入三乙胺(1.48mL，10.7mmol，4.33equiv)，并在-50℃下攪拌25分鐘。用乙酸乙酯稀釋混合物，用水(2x)、飽和NaHCO3水溶液(1X)、鹽水(1X)洗滌，干燥，蒸發(fā)并與無(wú)水甲苯共蒸發(fā)得到4-(5-氧代-戊基)-吡啶-2-甲酸甲酯(0.48mg，88％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.75(t，J＝1.4，1)，8.61(D，J＝5.1，1)，7.97-7.95(m，1)，7.28(dd，J＝1.7，5，1)，3.99(s，3)，2.73-2.67(m，2)，2.50-2.44(m，2)，1.71-1.63(m，4)。
-78℃下往在DCM(8mL)中的4-(5-氧代-戊基)-吡啶-2-甲酸甲酯油(0.48g，2.19mmol，1equiv)的溶液加入DAST(1.41g，8.74mmol，4equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。用二氯甲烷稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)洗滌，干燥并蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-(5，5-二氟-戊基)-吡啶-2-甲酸甲酯(278mg，52％)1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.61(dd，J＝0.6，4.8，1)，7.97-7.95(m，1)，7.28(dd，J＝1.5，4.8，1)，5.78(dddd，J＝4.3，4.3，57，57，1)，3.99(s，3)，2.70(t，J＝7.7，2)，1.94-1.66(m，4)，1.55-1.43(m，2)。
MS(ESPOS)244.2[M+H]+往在MeOH(5mL)和水(5mL)中的4-(5，5-二氟-戊基)-吡啶-2-甲酸甲酯(278mg，1.14mmol)的混合物加入濃HCl(0.286mL，3.43mmol，3equiv)和氧化鉑(140mg)。吹洗混合物，充入氫(1atm)，并攪拌過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去氧化鉑，并將濾液蒸發(fā)得到4-(5，5-二氟-戊基)-哌啶-2-甲酸2-甲酯。
MS(ESPOS)250.2[M+H]+。
往以上殘余物4-(5，5-二氟-戊基)-哌啶-2-甲酸-2-甲酯加入2NNaOH(2.3ml)和叔丁醇(1.2mL)。將混合物于rt下攪拌2小時(shí)。然后加入二碳酸二叔丁酯(0.37g，1.72mmol)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑。用水稀釋殘余物，用乙醚洗滌。用2N HCl將水層酸化至pH＝2.0，用乙酸乙酯(2x)萃取。將合并的有機(jī)層干燥，并濃縮得到4-(5，5-二氟-戊基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯(310mg，81％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.84(dddd，J＝4.5，4.5，57，57，1)，4.31(t，J＝6.3，1)，3.65-3.56(m，1)，3.35-3.25(m，1)，2.03-1.63(m，5)，1.48-1.30(m，8)，1.43(s，9)。
0℃下往在無(wú)水DMF(1.9mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)的HCl鹽(223.7mg，0.78mmol，1equiv)的混合物加入三乙胺(0.54mL，3.89mmol，5equiv)，然后加入BSTFA(0.31mL，1.17mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后于rt下攪拌50分鐘。往反應(yīng)混合物加入4-(5，5-二氟-戊基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯(272mg，0.81mmol，1.05equiv)和HATU(391mg，1.03mmol，1.32equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸(1X)、水(1X)、飽和NaHCO3(1X)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層并蒸發(fā)得到一種殘余物。將殘余物溶于甲醇(30mL)，然后加入干燥和洗滌過(guò)的Dowex樹(shù)脂(150mg)。將混合物于rt下攪拌1h并過(guò)濾。將濾液濃縮得到一種澄清的糖漿，用色譜法將其純化得到一種澄清的糖漿(0.26g，72％)。
往在DCM(15mL)中的含二甲硫醚(0.33mL)的以上糖漿的溶液加入三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(較低的異構(gòu)體，40mg，15％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.86(dddd，J＝4.5，4.5，57，57，1)，5.24(d，J＝5.7，1)，4.21(dd，J＝3.3，9.9，1)，4.11-4.04(m，2)，3.86-3.78(m，2)，3.51(dd，J＝3.5，10.4，1)，3.47-3.38(m，1)，3.07-2.97(m，1)，2.23-2.12(m，2)，2.11(s，3)，1.98-1.64(m，4)，1.50-1.27(m，8)，0.94-0.87(m，6)；MS(ESPOS)469.4[M+H]+。
實(shí)施例44制備1-(4-(5-氟戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 -78℃下往在DCM(11mL)中的如一般方法R和實(shí)施例47的合成所述制備的化合物14c(R9＝5-羥基戊基)(0.66g，2.96mmol，1equiv)的溶液加入DAST(1.91g，11.85mmol，4equiv)。將混合物加熱至rt，并攪拌過(guò)夜。用二氯甲烷稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)洗滌，干燥并蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-(5-氟-戊基)-吡啶-2-甲酸甲酯(254mg，38％)
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.62(d，J＝4.8，1)，7.97(d，J＝1.2，1)，7.30(dd，J＝1.7，5，1)，4.50(t，J＝5.9，1)，4.34(t，J＝6，1)，3.99(s，3)，2.70(t，J＝7.7，2)，1.80-1.62(m，4)，1.50-1.41(m，2)。
往在MeOH(5mL)和水(5mL)中的4-(5-氟-戊基)-吡啶-2-甲酸甲酯(254mg，1.13mmol)的混合物加入濃HCl(0.28mL，3.39mmol，3equiv)和氧化鉑(130mg)。吹洗混合物，充入氫(1atm)，并攪拌過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去氧化鉑，并蒸發(fā)濾液得到4-(5-氟-戊基)-哌啶-2-甲酸2-甲酯。
MS(ESPOS)232.4[M+H]+。
往4-(5-氟-戊基)-哌啶-2-甲酸2-甲酯加入2N NaOH(2.43mL)和叔丁醇(1.3mL)。將混合物于rt下攪拌2小時(shí)。然后加入二碳酸二叔丁酯(0.40g，1.82mmol)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑。用水稀釋殘余物，用乙醚洗滌。用2N HCl將水層酸化至pH＝2.0，用乙酸乙酯(2x)萃取。干燥合并的有機(jī)層，并濃縮得到4-(5-氟-戊基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯，為一種糖漿(254mg，71％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.52-4.06(m，3)，3.55-3.30(M，2)，2.03-1.94(m，1)，1.81-1.54(m，4)，1.45-1.20(m，8)，1.43(s，9).MS(ESPOS)218.3[M+Na-Boc]+0℃下往在無(wú)水DMF(1.8mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)的HCl鹽(213.8mg，0.74mmol，1equiv)的混合物加入三乙胺(0.52mL，3.72mmol，5equiv)，然后加入BSTFA(0.30mL，1.12mmol，1.5equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后于rt下攪拌50分鐘。往反應(yīng)混合物中加入為糖漿的4-(5-氟-戊基)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯(244mg，0.77mmol，1.04equiv)和HATU(370mg，0.97mmol，1.31equiv)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌3h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于乙酸乙酯，用10％檸檬酸(1X)、水(1X)，飽和NaHCO3(1X)和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)得到一種殘余物。將殘余物溶于甲醇(30mL)，然后加入干燥和洗滌過(guò)的Dowex樹(shù)脂(140mg)。將混合物于rt下攪拌1h并過(guò)濾。將濾液濃縮得到一種澄清的糖漿，用色譜法將其純化得到一種澄清的糖漿(212mg，52％)。
往在DCM(15mL)中的含二甲硫醚(0.33mL)的以上糖漿的溶液加入三氟乙酸(5mL)和水(0.33mL)。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌1h。在真空下除去溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)兩次。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物(較低的異構(gòu)體，40mg，17％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.49(t，J＝5.9，1)，4.33(t，J＝6，1)，4.20(dd，J＝3.5，10.1，1)，4.11-4.04(m，2)，3.83-3.77(m，2)，3.51(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.44-3.36(m，1)，3.06-2.94(m，1)，2.23-2.13(m，2)，2.11(s，3)，1.98-1.88(m，1)，1.77-1.59(m，3)，1.45-1.27(m，8)，0.94-0.87(m，6)。
MS(ESPOS)451.4[M+H]+實(shí)施例45制備1-(4-(4-氟丁-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 78℃下往在DCM(14mL)中的如一般方法R和實(shí)施例47的合成所述制備的化合物14c(R9＝4-羥基丁基)(0.76g，3.62mmol，1equiv)的溶液加入DAST(1.9mL，14.47mmol，4equiv)。將混合物加熱至rt并攪拌過(guò)夜。用二氯甲烷稀釋混合物，用飽和NaHCO3水溶液(1X)、鹽水(1X)洗滌，干燥，蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到4-(4-氟-丁基)-吡啶-2-甲酸甲酯，為一種黃色油(0.24g，31％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.57(d，J＝4.8，1)，7.92(d，J＝1.2，1)，7.27-7.23(m，1)，4.49(t，J＝5.6，1)，4.33(t，J＝5.6，1)，3.94(s，3)，2.69(t，J＝7.5，2)，1.79-1.59(m，4)。
往在THF(3mL)和水(1mL)中的4-(4-氟-丁基)-吡啶-2-甲酸甲酯(0.24g)的混合物加入氫氧化鋰一水合物(71.3mg，1.7mmol，1.5equiv)。將混合物于rt下攪拌過(guò)夜，用甲醇(20mL)稀釋。然后加入H+樹(shù)脂，并將混合物振蕩10分鐘。用甲醇(1x)、1∶1乙腈/水(1X)和乙腈(1X)洗滌樹(shù)脂。用在甲醇中的5％TEA(4x)和乙腈(1X)洗脫產(chǎn)物。蒸發(fā)合并的有機(jī)溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)得到4-(4-氟-丁基)-吡啶-2-甲酸(0.22g，65％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.46(d，J＝4.8，1)，7.95(s，1)，7.39-7.35(m，1)，4.52(t，J＝5.6，1)，4.36(t，J＝5.9，1)，3.22(q，J＝7.3，2.5H，TEA)，2.77(t，J＝7.5，2)，1.84-1.62(m，4)，1.28(t，J＝7.2，3.8H，TEA)。
0℃下往在無(wú)水乙腈(4mL)中的4-(4-氟-丁基)-吡啶-2-甲酸(0.22g，0.73mmol，1equiv)的溶液加入三乙胺(74mg，0.73mmol，1equiv)，然后加入氯甲酸異丁酯(100mg，0.73mmol，1equiv)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌15分鐘，然后在4℃下攪拌2h。往反應(yīng)混合物中加入在1∶1丙酮/水(4mL)中的化合物2b(R1＝Me，R2＝Me)的HCl鹽(263mg，0.91mmol，1.25equiv)和三乙胺(93mg，0.91mmol，1.25equiv)的溶液。將反應(yīng)混合物于4℃下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，吸收于DCM，用飽和NaHCO3(1X)洗滌。用Na2SO4干燥有機(jī)層并蒸發(fā)。用色譜法純化殘余物得到一種澄清的固體(110mg，35％)。
往在MeOH(6mL)和水(4mL)中的以上固體(110mg，0.25mmol，1equiv)的溶液加入濃HCl(20.2μl，0.24mmol，0.95equiv)和氧化鉑(220mg)。吹洗混合物，充入氫(65psi)，并振蕩過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去氧化鉑，并將濾液蒸發(fā)得到一種殘余物，用色譜法將其純化得到標(biāo)題化合物(較低的異構(gòu)體，33mg，30％)，為一種白色固體。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.25(d，J＝5.4，1)，4.51(t，J＝6，1)，4.35(t，J＝5.9，1)，4.21(dd，J＝3.3，10.2，1)，4.10-4.04(m，2)，3.93-3.80(m，2)，3.52(dd，J＝3.3，10.2，1)，3.46-3.38(m，1)，3.11-2.98(m，1)，2.26-2.13(m，2)，2.11(s，3)，2.00-1.92(m，1)，1.80-1.60(m，3)，1.54-1.27(m，6)，0.95-0.87(m，6)。
MS(ESPOS)437.4[M+H]+實(shí)施例46制備1-(4-(3-乙基-3-羥基戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 往干燥的燒瓶中加入用一般方法Q制備的化合物13b(R1＝Me，R2＝Me和R3＝H)(130mg，0.27mmol，1equiv)、三苯基膦(45.3mg，0.17mmol，0.64equiv)、碘化銅(I)(32.9mg，0.17mmol，0.64equiv)、乙酸鈀(19.4mg，0.086mmol，0.32equiv)和三乙胺(1.5mL)。用氮將混合物脫氣，然后加入3-乙基-1-戊炔-3-醇(174μl，1.35mmol，5equiv)。將混合物于50℃下攪拌過(guò)夜。在真空下除去溶劑得到一種深色殘余物。用色譜法純化殘余物得到13c(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝3-乙基-3-羥基-戊-1-炔基)。
MS(ESPOS)467.7[M+H]+；MS(ESNEG)465.5[M-H]-。
往在MeOH(12mL)和水(8mL)中的以上糖漿的混合物加入氧化鉑(300mg)和濃HCl(26μL)。吹洗混合物，充入氫(65psi)，并振蕩過(guò)夜。通過(guò)過(guò)濾除去氧化鉑，并蒸發(fā)濾液。用色譜法純化殘余物得到標(biāo)題化合物，為一種白色固體(19mg，15％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.17(dd，J＝3.1，10.0，1)，4.10-4.02(m，2)，3.80(d，J＝3，1)，3.53-3.48(m，1)，3.42-3.35(m，1)，3.23-3.15(m，1)，2.75-2.64(m，1)，2.22-2.11(m，1)，2.10(s，3)，2.04-1.97(m，1)，1.80-1.72(m，1)，1.50-1.40(m，6)，1.31-1.06(m，5)，0.94-0.80(m，12)；MS(ESPOS)477.8[M+H]+；MS(ESNEG)475.6[M-H]-。
實(shí)施例47制備1-(4-丁氧基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 往三甲基甲硅烷基氰化物(5.2g，52mmol)加入在DCM(20mL)中的4-芐氧基-吡啶1-氧化物(8.8g，44mmol)，然后滴加在DCM(10mL)中的二甲基氨基甲酰氯(5.6g，52mmol)，在室溫下攪拌過(guò)夜。加入碳酸氫鈉(100mL，10％)，攪拌10分鐘，用DCM(50mL)萃取兩次。用硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層，除去溶劑得到產(chǎn)物，化合物10a(R9＝芐氧基)(10.5g，100％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.34(D，J＝5.7，1)，7.24(m，5)，7.11(t，J＝2.4，1)，6.90(dd，J＝5.7，2.4，1)，MS(ES+)211(M+1)。
將化合物10a(R9＝芐氧基)(5g，23mmol)溶于HCl(6N，70mL)，并回流過(guò)夜。用乙腈結(jié)晶在除去HCl時(shí)得到的粗產(chǎn)物4-羥基吡啶-2-甲酸，化合物10b(R9＝羥基)(2.6g，80％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.55(d，J＝6.6，1)，7.78(d，J＝3.0，1)，6.90(dd，J＝2.7，6.9，1)，MS(ES-)138(M-1)。
用見(jiàn)于一般方法S的合成流程，從如以上制備的4-羥基吡啶-2-甲酸開(kāi)始完成標(biāo)題化合物的合成。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.25(d，J＝5.4，1)，4.22(dd，J＝10.2；3.3，1)，4.08(m，2)，3.81(d，J＝3.0，1)，3.70(m，1)，3.54(m，4)，3.43(m，2)，2.90(m，1)，2.41(m，1)，2.19(m，1)，2.10(s，3)1.45(m，6)，0.92(m，9)；MS(ES+)435(M+1)。
實(shí)施例48制備1-(4-戊氧基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
用見(jiàn)于一般方法S的合成流程，正戊基溴代替作為烷基化試劑，從4-羥基吡啶-2-甲酸10b(R9＝羥基)開(kāi)始，制備標(biāo)題化合物。
化合物15a(R10＝戊基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.38(d，J＝5.1，1)，7.64(s，1)，7.10(d，J＝3.3，1)，4.18(t，J＝6.6，2)，1.85(m，2)，1.49(m，4)，0.96(t，J＝7.2，3).MS(ES-)208(M-1)。
化合物15b(R1＝Me，R2＝Me，R10＝丁基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.41(d，J＝5.7，1)，7.61(d，J＝2.4，1)，7.07(dd，J＝2.4，5.4，1)，5.27(d，J＝5.4，1)，4.05-4.31(m，5)，3.85(d，J＝3.0，1)，3.57(dd，J＝3.3，7.2，1)，2.11(m，4)，1.81(m，2)，1.49(m，4)，1.00(m，9).MS(ES+)443(M+1)。
標(biāo)題化合物(20mg，10％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.22(dd，J＝9.9；3.3，1)，4.10(m，2)，3.76(m，3)，3.51(m，3)，3.39(m，1)，3.02(m，2)，2.43(m，1)，2.15(m，1)，2.10(s，3)1.95(m，2)，1.69(m，2)，1.53(m，2)，1.34(m，2)，0.93(m，9)；MS(ES+)449(M+1)。
實(shí)施例49制備1-(4-(4-氟丁氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 用見(jiàn)于一般方法S的合成流程，4-氟丁基溴代替作為烷基化試劑，從4-羥基吡啶-2-甲酸10b(R9＝羥基)開(kāi)始，制備標(biāo)題化合物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.25(d，J＝5.7，1)，4.53(t，J＝5.7，1)，4.37(t，J＝5.7，1)，4.21(dd，J＝3.3，6.6，1)，4.07(m，2)，3.80(d，J＝3.3，2)，3.60(m，5)，2.88(m，1)，2.38(m，1)，2.18(m，1)，2.10(s，3)1.33-1.83(m，8)，0.92(m，6)；MS(ES+)453(M+1)。
實(shí)施例50制備1-[4-正丁基丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基-烯丙基}乙酰胺 往在二氯乙烷(10mL)和二甲基硫醚(0.4mL，2.5mmol)的溶液中的由一般方法D從化合物2a(P＝Boc，R1＝Me)制備的Boc 7-亞甲基MTL(P＝Boc，R1＝Me，R2＝CH2)(391mg，1.1mmol)的溶液加入包含水(0.4mL)的TFA(5mL)，并將反應(yīng)混合物于rt下攪拌45min。除去溶劑，并用DCE將殘余物蒸發(fā)兩次得到粗產(chǎn)物。通過(guò)加入在乙醚中的2M HCl而于0℃從乙酸乙酯(4ml)中沉淀得到產(chǎn)物，為一種HCl鹽，并在真空下干燥(351mg g，86％)。將該白色固體產(chǎn)物不經(jīng)附加的純化而用于下一步反應(yīng)。
MS(ESPOS)350(M+H)。
0℃和氮?dú)夥障峦跓o(wú)水DMF(5mL)中的以上制備的化合物(351mg，1.22mmol，1equiv)的攪拌的懸浮液加入三乙胺(0.68mL，4.9mmol，4.0equiv)，然后加入BSTFA(0.58mL，2.20mmol，1.8equiv)。將所得的混合物于0℃下攪拌10min，然后于rt下攪拌50min。將所得的溶液冷卻至0℃，并加入通過(guò)方法K制備的化合物7d(R9＝正丁基)(400mg，1.47mmol，1.2equiv)的無(wú)水DMF(5ml)溶液，然后加入固體HATU(741mg，1.95mmol，1.6equiv)。將反應(yīng)混合物加熱至rt，并在2h后將反應(yīng)溶液在真空下蒸發(fā)至干。用EtOAc(200mL)稀釋所得的殘余油，依次用10％檸檬酸、1∶1飽和NaHCO3水溶液/水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，并蒸發(fā)至干。
往在1，2-二氯乙烷(6mL)中的50mg粗偶合產(chǎn)物的溶液加入二甲基硫醚(200μL)，然后加入TFA(11.5mL)和水(768μL)。將所得的混合物于rt下攪拌1h，蒸發(fā)至最小體積，用DCE(3×10ml)稀釋，并蒸發(fā)至干。用在二氯甲烷中的8％-12％0.25M甲醇氨對(duì)殘余物進(jìn)行柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(10.0mg，25％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.22(D，J＝5.8，1)，5.00(s，1)，4.95(s，1)，4.58(d，J＝8.8，1)4.19(d，J＝8.8，1)，4.09(dd，J-5.8，10.1，1)3.85-3.77(m，2)，3.57-3.52(m，1)，3.26-3.29(m，1)，2.59-2.53(m，1)，2.10-1.98(m，4)，1.80(s，3)，1.36-1.51-1.11(m，7)，0.91(t，，J＝6.9，3)；MS(ESPOS)403.6[M+H]+。
實(shí)施例51制備1-(4-乙基-N-乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
室溫下往在DMF(1mL)中的實(shí)施例1的產(chǎn)物(30mg，0.07mmol)加入DIEA(43mg，0.35mmol)并攪拌過(guò)夜。然后除去溶劑，并用在DCM中的20％MeOH對(duì)所得的產(chǎn)物進(jìn)行柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(20mg，66％)，為一種白色粉末。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝6.0，1)，4.26(dd，J＝3.6，9.6，1)，3.79(d，J＝3.0，1)，3.55(dd，J＝3.3，10.2，1)2.85(m，2)，2.13(m，4)，1.37(m，12)，0.94(m，9)；MS(ES+)420(M+1)。
實(shí)施例52制備1-(4-(3-氟丙氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
使用見(jiàn)于一般方法S的合成流程，3-氟丙基溴代替作為烷基化試劑，從4-羥基吡啶-2-甲酸開(kāi)始，制備標(biāo)題化合物。
化合物15a(R10＝3-氟丙基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.41(d，J＝5.1，1)，7.65(d，J＝2.1，1)，7.14(dd，J＝2.1，5.7，1)，4.59(m，2)，4.24(t，J＝6.0，2)，1.91(m，2)。
MS(ES-)212(M-1)。
化合物15b(R1＝Me，R2＝Me，R10＝3-氟丙基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.44(d，J＝5.7，1)，7.65(d，J＝2.4，1)，7.12(dd，J＝2.4，5.7，1)，5.48(d，J＝5.7，1)，4.87(m，2)，4.30(m，2)，4.12(dd，J＝3.0，10.2，1)，3.85(d，J＝3.3，1)，3.56(dd，J＝9.9，3.3，1)，2.26(m，1)，2.11(s，3)，1.37(m，4)，1.00(t，J＝5.1，6).MS(ES+)443(M+1)。
標(biāo)題化合物(60mg，31％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.25(d，J＝5.7，1)，4.50(m，2)，4.21(dd，J＝3.3，9.9，1)，4.06(m，2)，3.80(d，J＝2.7，1)，3.66(m，3)，3.59(m，1)，3.33(m，1)，2.87(m，1)，2.41(m，1)，2.18(m，1)，2.10(s，3)1.91(m，4)，1.51(m，2)，0.92(m，6)；MS(ES+)439(M+1)。
實(shí)施例53制備1-(4-(3，3，3-三氟丙氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
使用見(jiàn)于一般方法S的合成流程，2-三氟乙基溴代替作為烷基化試劑，從4-羥基吡啶-2-甲酸開(kāi)始，制備標(biāo)題化合物。
化合物15a(R10＝2-三氟乙基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.67(m，1)，7.92(s，1)，7.43(m，1)，4.65(m，2)，3.01(m，2).MS(ES-)234(M-1)。
化合物15b(R1＝Me，R2＝Me，R10＝2-三氟乙基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.46(d，J＝6.0，1)，7.65(d，J＝2.7，1)，7.13(dd，J＝2.7，6.0，1)，5.27(d，J＝5.7，1)，4.39(t，J＝6.0，2)，4.30(m，2)，4.11(m，1)，3.85(d，J＝3.0，1)，3.57(dd，J＝3.0，10.2，1)，2.88(m，2)，2.25(m，1)，2.11(s，3)，1.00(t，J＝6.9，6).MS(方法ES+)469(M+1)。
標(biāo)題化合物(10mg，10％)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.24(d，J＝5.7，1)，4.18(dd，J＝3.0，9.9，1)，4.15(m，2)，3.80(d，J＝3.6，1)，3.74(m，2)，3.52(dd，J＝3.3，10.2，2)，3.38(m，2)，3.18(m，1)，2.66(m，1)，2.66(m，1)，2.44(m，2)，2.22(m，1)，2.10(s，3)1.34(m，2)，0.91(d，J＝7.2，6)；MS(ES+)475(M+1)。
實(shí)施例54制備1-(4-異丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
如下制備4-異丁基-2-氰基吡啶。0℃下往在THF(20mL)中的異丁基三苯基磷鎓碘化物(Aldrich)(8g，18.5mmol)加入叔丁醇鉀(1.8g，16mmol)，在室溫下攪拌1小時(shí)。加入吡啶-4-甲醛(1g，9.3mmol)，在室溫下攪拌過(guò)夜。然后將反應(yīng)混合物傾入水(100mL)，并用EtOAc(100mL)萃取。用柱色譜法純化除去溶劑時(shí)得到的產(chǎn)物，使用在己烷中的40％EtOAc作為洗脫劑(1.05g，84％)。往所得的產(chǎn)物(4.2g，31.5mmol)加入10％Pd/C(0.4g)，并在1atm壓力下氫化過(guò)夜。除去溶劑，并用在己烷中的30％EtOAc進(jìn)行柱色譜法純化，得到4-異丁基吡啶(3.8g，90％)。
用一般方法P制備中間產(chǎn)物，4-異丁基吡啶-2-甲酸，化合物10b，(R9＝異丁基)。往在乙酸(20mL)中的4-異丁基吡啶(2g，14.8mmol)加入過(guò)氧化氫(3.35g，30％，30mmol)，并回流過(guò)夜。除去溶劑后，將殘余物溶于DCM，用硫酸鎂干燥，并取其本身用于下一步。往在DCM(10ml)中的化合物加入三甲基甲硅烷基氰化物(1.73g，17.4mmol)和二甲基碳酰氯(1.89g，17.4mmol)，并在室溫下攪拌24小時(shí)。加入碳酸氫鉀水溶液(100mL，10％)，并用DCM(各50mL)萃取兩次。將除去溶劑得到的粗產(chǎn)物吸收于HCl(6N，100mL)，并回流24小時(shí)。除去酸，并用柱色譜法純化粗產(chǎn)物，使用在DCM中的30％MeOH，得到酸10b(R9＝異丁基)(1.5g，100％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.78(d，J＝5.7，1)，8.44(s，1)，8.13(d，J＝5.7，1)，2.92(d，J＝7.5，1)，2.15(m，1)，0.98(d，J＝6.6，6).MS(ES-)178(M-1)。
0℃下往在DMF(2ml)中的胺2b(R1＝Me，R2＝Me)(200mg，0.79mmol)加入TEA(161mg，1.6mmol)、BSTFA(614mg，2.4mmol)，并在室溫下攪拌1.5小時(shí)。加入酸10b(R9＝異丁基)(214mg，1.2mmol)和HATU(368mg，1.2mmol)，并將其在室溫下攪拌4小時(shí)。除去DMF，用EtOAc(50mL)萃取殘余物，用碳酸氫鈉(10％，50mL)、鹽水(50mL)洗滌，并用硫酸鎂干燥。將除去溶劑時(shí)得到的產(chǎn)物溶于甲醇(10mL)，并用NR-50樹(shù)脂(300mg)處理3小時(shí)。過(guò)濾樹(shù)脂之后，除去甲醇得到粗產(chǎn)物。然后用在DCM中的3％MeOH進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到化合物11b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝異丁基)(200mg，60％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.41(d，J＝4.8，1)，8.28(d，J＝9.6，1)，7.95(s，1)，5.35(d，J＝5.4，1)，4.25(m，2)，3.99(d，J＝10.8，1)，3.78(d，J＝3.6，1)，3.55(dd，J＝3.6，10.8，1)，2.52(m，3)，2.15(s，3)，1.93(m，1)，1.02(m，12).MS(ES+)413(M+1)。
往在水(10mL)、AcOH(2ml)和MeOH(2mL)中的化合物11b(R1＝Me，R2＝Me，R3＝H，R9＝異丁基)(200mg，0.48mmol)加入PtO2(200mg)，在55psi下氫化16小時(shí)。過(guò)濾催化劑后，除去溶劑得到粗物質(zhì)，用硅膠柱純化，使用在DCM中的20％MeOH作為洗脫劑。較低Rf餾分提供標(biāo)題化合物(70mg，34％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.25(d，J＝5.7，1)，4.20(dd，J＝9.9；3.3，1)，4.07(m，2)，3.80(d，J＝3.0，1)，3.60(m，2)，3.34(m，2)，2.84(m，1)，2.17(m，1)，2.10(s，3)2.01(m，1)，1.77(m，3)，1.40(m，4)，0.91(m，12)；MS(ES+)419(M+1)。
實(shí)施例55制備1-(4-正丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟-丙-1-基}乙酰胺 0℃下往在DMF(3mL)中的由方法P制備的酸10b(R9＝丙基)(53mg，0.32mmol)加入由方法I制備的林可酰胺中間產(chǎn)物，化合物5b(R1＝Me)(63mg，0.16mmol)和HATU(121mg，0.32mmol)、三乙胺(70mg，0.48mmol)，并在室溫下攪拌16小時(shí)。除去DMF，將殘余物吸收于乙酸乙酯，并用飽和碳酸氫鹽(30mL)洗滌。在硅膠柱上用在己烷中的30％乙酸乙酯純化除去溶劑時(shí)得到的產(chǎn)物(40mg，45％)。往在甲醇(5mL)、水(5mL)和乙酸(5mL)中的純產(chǎn)物加入二氧化鉑(50mg，mmol)，并在60psi下氫化16小時(shí)。過(guò)濾催化劑之后，除去溶劑得到粗產(chǎn)物，將其吸收于甲醇(3mL)。往其中加入在水(1mL)中的碳酸鉀(125mg，0.83mmol)并攪拌16小時(shí)。然后除去溶劑，并用在二氯甲烷中的20％甲醇對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行柱色譜法純化。較低的Rf餾分得到標(biāo)題化合物(10mg，33％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.28(d，J＝5.4，1)，4.73(s，1)，4.57-4.65(m，1)，4.33-4.42(m，1)，4.05(m，1)，3.89(s，1)，3.53-3.57(m，2)，2.83(T，J＝12.3，1)，2.09(s，3)，1.63-1.84(m，5)，1.16-1.37(m，6)，0.93(m，3).MS(ES+)427(M+1)。
實(shí)施例56制備1-[4-正丙基-4-氟-吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺
0℃下往在甲醇(50mL)中的(2S，4R)-4-羥基脯氨酸(Aldrich)(25g，108mmol)的攪拌的溶液加入三甲基甲硅烷基重氮亞甲基(24.6g，216mmol)。將混合物于0℃下攪拌1小時(shí)。將除去溶劑并用在己烷中的50％乙酸乙酯進(jìn)行柱色譜法純化得到的殘余物(27g，100％)用于下一步。-78℃下在15分鐘內(nèi)往在DCM(15mL)中的草酰氯(15g，118mmol)緩慢加入DMSO(18.6mL，236mmol)。完成加入之后，在-78℃下在20分鐘內(nèi)加入在DCM(100mL)中的以上產(chǎn)物(2S，4R)-N-Boc-4-羥基脯氨酸甲酯(26.5g，108mmol)。加入三乙胺(54.6g，540mmol)，然后在室溫下攪拌2小時(shí)。隨后用10％HCl水溶液(200mL)洗滌反應(yīng)混合物，分離有機(jī)層，并用硫酸鈉干燥。用在己烷中的50％EtoAc將在除去溶劑時(shí)得到的粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到(2S，4R)-N-Boc-4-酮脯氨酸甲酯(20g，78％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.80(m，1)，3.88(d，J＝8.7，2)，3.77(s，3)，2.98(m，1)，2.58(m，1)，1.45(s，9)；MS(ES+)244(M+1)。
往在THF(10mL)中的(2S，4R)-N-Boc-4-酮脯氨酸甲酯(1g，4.11mmol)的攪拌的溶液加入在無(wú)水THF中的四烯丙基錫(1.08mL，4.52mmol)，然后冷卻至0℃，隨后滴加三氟化硼醚合物(0.520mL，4.11mmol)。將混合物于0℃下攪拌1h，然后在室溫下再攪拌2小時(shí)。加入氟化鉀(360mg，在5ml水中)和C鹽(1g)，并將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，并濃縮至干，將殘余物溶于DCM(200mL)，用水(100ml)和鹽水(100mL)洗滌，用MgSO4干燥，并蒸發(fā)至干。用在己烷中的50％EtOAc對(duì)除去溶劑時(shí)得到的殘余物進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到4-羥基-4-烯丙基脯氨酸甲酯(0.94g，80％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.87(m，1)，5.19(m，2)，4.34(m，1)，3.75(D，J＝4.8，3)，3.50(m，3)，2.37(m，1)，2.21(m，1)，1.39(d，J＝12.9，9)；MS(ES+)308(M+23)。
-78℃下往在DCM(10mL)中的DAST(1.06g，6.58mmol)的攪拌的溶液緩慢加入在無(wú)水DCM(10mL)中的4-羥基-4-烯丙基脯氨酸甲酯(940mg，3.3mmol)。然后將混合物于-78℃下攪拌1h，隨后在-10℃下再攪拌1h。加入DCM(50mL)，用NH4Cl(10％，150mL)終止反應(yīng)，并分離有機(jī)層，用硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)至干。使用在己烷中的5％EtOAc作為洗脫劑對(duì)除去溶劑時(shí)得到的殘余物進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到4-氟-4-烯丙基脯氨酸甲酯(330mg，34％)。
1H NMR(300MHz，CDCl13)δ5.82(m，1)，5.12(m，2)，4.43(m，1)，3.66(s，3)，3.47(m，1)，2.37(m，1)，2.43(m，4)，1.37(dd，J＝4.5，13.8，9)；MS(ES+)310(M+23)。
往在MeOH(15mL)中的4-氟-4-烯丙基脯氨酸甲酯(0.33g，1.15mmol)的溶液加入10％Pd/C(40mg)，并在1大氣壓下氫化。用硅藻土過(guò)濾催化劑，并用甲醇洗滌。往在THF(12mL)中的除去溶劑時(shí)得到的產(chǎn)物(330mg，1.15mmol)加入氫氧化鋰一水合物(60mg，1.38mmol)水溶液。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過(guò)夜。除去THF，并將殘余物吸收于乙酸乙酯(50mL)，用10％檸檬酸(100mL)和鹽水(20mL)洗滌。除去溶劑得到4-氟-4-丙基脯氨酸(310mg，100％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.43(m，1)，3.71(m，6)，2.51(m，2)，1.98(m，3)，1.45(m，9)，0.96(m，3)；MS(ES-)274(M-1)。
0℃下往在DMF(3mL)中的4-氟-4-丙基脯氨酸(310mg，1.15mmol)的溶液加入7-甲基MTL 2b(R1＝Me，R2＝Me)(272mg，1.15mmol)、HBTU(469mg，1.3mmol)和DIEA(290mg，2.3mmol)，在室溫下放置攪拌16小時(shí)。除去DMF，并用在DCM中的3％MeOH純化所得的殘余物(40mg，93％)。將來(lái)自柱純化的產(chǎn)物吸收于DCE(6mL)，往其中加入三乙基硅烷(0.16mL)、TFA(2mL)和水(0.16mL)，并在室溫下攪拌1.5小時(shí)。除去溶劑，然后用在DCM中的10％MeOH進(jìn)行硅膠柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物，為具有較低Rf餾分的異構(gòu)混合物(160mg，50％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.25(d，J＝5.7，1)，4.46(m，1)，4.24(dd，J＝5.7，10.2，1)，4.08(m，2)，3.81(D，J＝2.4，1)，3.52(m，3)，2.73(m，1)，2.10(m，4)，1.88(m，2)，1.50(m，2)，0.99(T，J＝7.5，3)，0.91(dd，J＝3.0，6.9，6)；MS(ES+)409(M+L)；)和較高Rf餾分(40mg，12％).1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.38(D，J＝5.4，1)，4.46(m，1)，4.24(dd，J＝2.7，7.2，1)，4.08(m，2)，3.81(d，J＝2.4，1)，3.64(m，3)，2.73(m，1)，2.11(m，4)，1.84(m，2)，1.47(m，2)，0.98(t，J＝7.5，3)，0.91(dd，J＝3.0，6.9，6)；MS(方法ES+)409(M+1)。
實(shí)施例57制備1-[4-正丁基-4-氟-吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺 -78℃下往在THF(5mL)中的乙基乙炔(140mg，2.6mmol)加入正丁基鋰(1.1mL，2.6mmol)，并在-78℃下攪拌1小時(shí)。然后在-78℃下加入在THF(5mL)中的正(叔丁氧基羰基)-L-脯氨酸-4-酮(如實(shí)施例56所述)(570mg，2.3mmol)，并攪拌2小時(shí)，然后在1小時(shí)內(nèi)將其加熱至-40℃。用EtoAc(20mL)萃取反應(yīng)混合物，用飽和NH4Cl(5mL)洗滌，并用硫酸鈉干燥。用在己烷中的50％EtOAc對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行硅膠色譜法純化，得到N-boc-4-丁基-4-羥基-脯氨酸甲酯(520mg，73％)。-78℃下往在DCM(5mL)中的DAST(556mg，3.4mmol)加入-78℃在DCM(5mL)中的以上酯(520mg，1.7mmol)的溶液，并攪拌1小時(shí)。用DCM(50mL)萃取反應(yīng)混合物，并用NaHCO3(30mL，10％)洗滌。用在己烷中的5％EtOAc對(duì)除去溶劑后得到的產(chǎn)物進(jìn)行硅膠色譜法純化，得到N-(叔丁氧基羰基)-L-脯氨酸-4-氟-4-丁烷(276mg，52％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.41(m，1)，3.83(m，1)，3.71(s，3)，3.45(m，1)，2.55-1.54(m，8)，1.39(m，9)，0.89(m，3)；MS(ES+)326(M+23)。
往在THF(12mL)和水(4mL)中的N-(叔丁氧基羰基)-L-脯氨酸-4-氟-4-丁烷(270mg，0.89mmol)的溶液加入氫氧化鋰一水合物(45mg，1.07mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌16小時(shí)。在真空下除去THF，并將殘余物吸收于乙酸乙酯(150mL)，用10％檸檬酸(100ml)和鹽水(20mL)洗滌。除去溶劑得到N-(叔丁氧基)-L-脯氨酸-4-氟-4-丁基-2-甲酸(260mg，100％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ4.32(m，1)，3.72(m，2)，2.58(m，2)，2.10-1.63(m，6)，1.42(m，9)，0.93(t，J＝6.6，3)；MS(ES-)288(M-1)。
0℃下往在DMF(3mL)中的N-(叔丁氧基)-L-脯氨酸-4-氟-4-丁基-2-甲酸(135mg，0.46mmol)的溶液加入7-甲基MTL 2b(R1＝Me，R2＝Me)(135mg，0.46mmol)、HBTU(194mg，0.51mmol)、DIEA(120mg，0.93mmol)，使其在室溫下放置16小時(shí)。將除去DMF并使用在DCM中的5％MeOH進(jìn)行柱色譜法純化之后得到的產(chǎn)物(189mg，77％)吸收于DCE(6mL)。加入三乙基硅烷(0.16mL)、TFA(2mL)和水(0.16mL)，并在室溫下攪拌1.5小時(shí)。用在DCM中的10％MeOH對(duì)除去溶劑時(shí)得到的殘余物進(jìn)行柱色譜法純化，得到標(biāo)題化合物(156mg，96％)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ5.26(d，J＝5.7，1)，4.55(m，1)，4.27(dd，J＝3.3，10.2，1)，4.08(m，2)，3.82(d，J＝3.0，1)，3.58(m，3)，2.79(m，1)，2.22(m，1)，2.10(s，3)，1.89(m，3)，1.40(m，4)，0.91(m，9)；MS(ES+)423(M+1)。
實(shí)施例58
4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺 將如在前述實(shí)施例中所述制備(除了用正丙基鋰代替正丁基鋰)的N-(叔丁氧基羰基)-4-氟-4-丙基-L-脯氨酸(164mg，0.57mmol)懸浮在無(wú)水乙腈(4mL)中。加入三乙胺(332μl，3.02mmol)，并將反應(yīng)混合物冷卻至0℃。加入氯甲酸異丁酯(78μL，0.57mmol)，并在10分鐘后將反應(yīng)物加熱至4℃。1.5h后加入在1∶1丙酮∶水(4mL)中的MTL(151mg，0.57mmol)的溶液，并將反應(yīng)混合物于rt下攪拌10h。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)至干，并用95∶5二氯甲烷/MeOH至95∶8二氯甲烷/MeOH進(jìn)行硅膠色譜處理得到產(chǎn)物，為一種無(wú)色油(137mg，45％)TLC Rf0.32(9∶1二氯甲烷/MeOH)。
往在DCM(2.0mL)中的以上Boc保護(hù)的林可酰胺(125mg)的溶液加入DCE(10.0mL)、三氟乙酸(5mL)二甲硫醚(0.3mL)和水(0.3mL)的溶液。將反應(yīng)混合物于rt下攪拌40min，然后用DCE(25.0mL)稀釋。在真空下除去溶劑，并與DCE共蒸發(fā)兩次。在氟硅氧烷上用在DCM中的20％MeOH(0.25M NH3)對(duì)殘余物進(jìn)行色譜法純化，得到產(chǎn)物，為一種無(wú)色固體(30.0mg，30％)。
實(shí)施例59制備4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺 用見(jiàn)于一般方法S的合成流程，2-甲氧基乙基溴代替作為烷基化試劑，從4-羥基吡啶-2-甲酸開(kāi)始，制備標(biāo)題化合物。
化合物15a(R10＝2-甲氧基乙基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.40(d，J＝6.0，1)，7.69(d，J＝2.4，1)，7.20(dd，J＝2.7，6.3，1)，4.35(m，2)，3.80(m，2)，3.40(s，3).MS(ES-)196(M-1)。
化合物15b(R1＝Me，R2＝Me，R10＝2-甲氧基乙基)1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.43(d，J＝5.7，1)，7.65(d，J＝2.4，1)，7.12(dd，J＝2.4，5.7，1)，5.27(d，J＝5.4，1)，4.10-4.87(m，4)，3.85(d，J＝3.3，1)，3.77(m，2)，3.55(m，1)，3.41(s，3)，2.26(m，1)，2.11(s，1)，0.998(m，6).MS(ES+)431(M+1)。
標(biāo)題化合物(10mg，10％).1H NMR(300MHz，D2O)δ5.18(d，J＝6.0，1)，4.00(m，3)，3.70(m，1)，3.56(m，1)，3.45(m，3)，3.26(m，1)，3.16(m，3)，3.10(m，1)，2.80(m，1)，2.48(m，1)，2.22(m，1)，1.96(m，4)，1.17-1.72(m，4)，0.70(m，6)；MS(ES+)437(M+1)。
上表1中所示的實(shí)施例60-65用本文所述的方法和技術(shù)，酌情使用可商購(gòu)的原料來(lái)制備。
以下實(shí)施例可用于測(cè)試本發(fā)明的化合物。
實(shí)施例A敏感性試驗(yàn)根據(jù)NCCLS(National Committee for Clinical LaboratoryStandards.Methods for dilution antimicrobial susceptibilitytests for bacteria that grow aerobically；Approved standard-第5版.NCCLS文件M7-A5，NCCLS，Wayne，PA.2000；NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards.Methods forantimicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria；Approved standard-第5版.NCCLS文件M11-A4，NCCLS，Wayne，PA.2001)的微量稀釋方法測(cè)試化合物。試驗(yàn)在具有圓底孔的無(wú)菌塑料96孔微滴盤(Greiner)中進(jìn)行。
化合物制備在DMSO中制備10mg/mL的受試化合物和對(duì)照抗生素的儲(chǔ)備液。各藥物的連續(xù)2倍稀釋在微滴平板上跨各行進(jìn)行，使用DMSO作為溶劑，100倍于目標(biāo)最終濃度。列#1-11中的孔包含藥物，而列#12保持作為不含藥物的生物生長(zhǎng)對(duì)照。母板中的各孔用無(wú)菌去離子水稀釋，混合，并將10μL體積分配至所得的試驗(yàn)平板的各孔。
接種物的制備用MicrobankTM方法(Pro-Lab Diagnostics)制備儲(chǔ)備培養(yǎng)物，并在-80℃下保存。為繁殖需氧菌株，從冷凍小瓶中移出一個(gè)珠，并無(wú)菌地在胰胨豆胨瓊脂(Difco)、巧克力瓊脂(Reme1)或血瓊脂(Reme1)上劃線，于35℃下培養(yǎng)過(guò)夜。在補(bǔ)充氯高鐵血紅素和維生素K的Brucella瓊脂(Reme1)中培養(yǎng)厭氧菌，并使用厭氧罐(Mitsubishi)在35℃下在厭氧環(huán)境中溫育24-48h。根據(jù)NCCLS指南(NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards.Methods fordilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria thatgrow aerobically；Approved standard-fifth edition.NCCLSdocument M7-A5，NCCLS，Wayne，PA.2000；National Committee forClinical Laboratory Standards.Methods for antimicrobialsusceptibility testing of anaerobic bacteria；Approvedstandard-fifth edition.NCCLS document M11-A4，NCCLS，Wayne，PA.2001)，用直接菌落懸浮方法制備標(biāo)準(zhǔn)接種物。從18-24h瓊脂平板上選擇分離的菌落，并再懸浮在0.9％無(wú)菌鹽水中以與0.5McFarland濁度標(biāo)準(zhǔn)相符。在制備15min內(nèi)使用該懸浮液。肺炎鏈球菌(Streptococcus 肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)VSPN1001 pneumoniae)ATCC 49619肺炎鏈球菌(Streptococcus 肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)VSPN3026 pneumoniae)R6x肺炎鏈球菌(Streptococcus 肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)VSPN4054 pneumoniae)488K肺炎鏈球菌(Streptococcus 肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)VSPN4021 pneumoniae)9金黃色葡萄球菌 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) (Staphylococcus aureus)VSAU1017 Smith金黃色葡萄球菌 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) (Staphylococcus aureus)ATCCVSAU1003 25923金黃色葡萄球菌 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) (Staphylococcus aureus)125VSAU4020金黃色葡萄球菌 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) (Staphylococcus aureus)VSAU4048 85-EPI金黃色葡萄球菌 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) (Staphylococcus aureus)VSAU4065VSAU4065表皮葡萄球菌(Staphylococcus 表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)VSEP1001epidermidis)ATCC 12228糞腸球菌(Enterococcus 糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)VEFL1003 faecalis)ATCC 51299屎腸球菌(Enterococcus 屎腸球菌(Enterococcusfaecium)VEFA1005faecium)BM4147.1流感嗜血菌(Haemophilus 流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)VHIN1003 influenzae)ATCC 49766流感嗜血菌(Haemophilus 流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)VHIN1004 influenzae)ATCC 31517流感嗜血菌(Haemophilus 流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)VHIN1005 acr influenzae)LS-2粘膜炎莫拉氏菌(Moraxella粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)VMCA1001catarrhalis)ATCC 25238大腸桿菌(Escherichia coli) 大腸桿菌(Escherichia coli)VECO2096MG1655大腸桿菌(Escherichia coli) 大腸桿菌(Escherichia coli)VECO2526 to1C MG1655 tolC脆弱擬桿菌(Bacteroides 脆弱擬桿菌(Bacteroidesfragilis)VBFR1001 fragilis)ATCC 25285多形擬桿菌(Bacteroides 多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron) VBTH 1001 thetaiotaomicron)ATCC#29741艱難梭菌(Clostridium艱難梭菌(Clostridiumdifficile)VCDI1001 difficile)ATCC 9689制備用于MICs的試驗(yàn)平板以1.1x濃度制備培養(yǎng)基。如NCCLS推薦的補(bǔ)充Ca++和Mg++的Mueller-Hinton肉湯MHB(Difco)，補(bǔ)充5％溶解的馬血的MHB，HTM肉湯(Reme1)或補(bǔ)充氯高鐵血紅素和維生素K的Brucella肉湯(Reme1)。對(duì)于每種生物，將標(biāo)準(zhǔn)化懸浮液稀釋至在無(wú)菌容器中的適宜的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中?；旌虾?，接種體積為90μL至含藥物試驗(yàn)平板中的孔。因此，對(duì)于每次MIC測(cè)定，各孔包含100μL的最終體積，而接種物大小為大約5*105cfu/mL，并不超過(guò)1％DMSO。
MIC解釋對(duì)于需氧菌將已完成的微滴平板在35℃下于環(huán)境空氣中培養(yǎng)16-20h，而對(duì)于厭氧菌則在35℃下在厭氧罐(Mitsubishi)中培養(yǎng)46-48h。在600nm處使用VersaMax Microplate讀數(shù)器(MolecularDevices，Sunnyvale，CA)測(cè)定每孔的光學(xué)密度。MIC定義為完全抑制可見(jiàn)的細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度。
實(shí)施例B對(duì)鼠金黃色葡萄球菌敗血癥的效力根據(jù)其它地方公開(kāi)的模型(Goldstein，B.P.，G.Candiani，T.M.Arain，G.Romano，I.Ciciliato，M.Berti，M.Abbondi，R.Scotti，M.Mainini，F(xiàn).Ripamonti等人，1995.Antimicrobialactivity of MDL 63，246，a new semisynthetic glycopeptideantibiotic Antimicrob Agents Chemother.391580-1588.；Misiek，M.，T.A.Pursiano，F(xiàn).Leitner和K.E.Price 1973.Microbiological properties of a new cephalosporin，BL-S 3397-(phenylacetimidoyl-aminoacetamido)-3-(2-methyl-1，3，4-thiadiazol-5-ylthio methyl)ceph-3-em-4-carboxylic acidAntimicrob Agents Chemother.340-48)完成在小鼠金黃色葡萄球敗血癥模型中的效力研究。
化合物制備將化合物溶于2％Tween 80以作口服或溶于0.9％NaCl以作靜脈內(nèi)給藥。化合物給藥在細(xì)菌接種之后1小時(shí)。將萬(wàn)古霉素或氨芐青霉素用作對(duì)照。
效力模型將購(gòu)自MDS Pharma Services的重22±2g的雄性或雌性ICR小鼠用于評(píng)價(jià)。任意地提供食物和水。將6只重22±g的小鼠組用于實(shí)驗(yàn)。給小鼠腹膜內(nèi)接種在0.5mL含有5％粘蛋白(Sigma)的腦心浸液肉湯(Difco)中的4 104 CFU的金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)Smith。在細(xì)菌接種后每天記錄一次死亡率，持續(xù)7天。
雖然已參考多種特定的物質(zhì)、方法和實(shí)施例在此描述和例示了本發(fā)明，但應(yīng)該理解本發(fā)明不限于選擇用于該目的的特定的物質(zhì)組合或物質(zhì)和方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解存在關(guān)于這些細(xì)節(jié)的多種改型的暗示。
實(shí)施例C體內(nèi)動(dòng)物模型在標(biāo)準(zhǔn)金黃色葡萄球菌敗血癥模型(MDS Pharma Services，Bothell，WA)中評(píng)價(jià)本發(fā)明的多種化合物的體內(nèi)活性。
給由MDS Pharma Services動(dòng)物飼養(yǎng)中心提供的雄性ICR衍生小鼠(ICR為遠(yuǎn)交系小鼠)腹膜內(nèi)接種在0.5ml包含5％粘蛋白(Sigma)的BHI肉湯中的LD90-100的金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)(Smith；ATCC19636)。在2％Tween 80(Sigma)中配制化合物，并在細(xì)菌接種之后1小時(shí)口服單一劑量。每天監(jiān)測(cè)死亡率，持續(xù)7天。
在前面的研究中，測(cè)定一種商購(gòu)林可酰胺-氯林可霉素(Sigma)的口服ED50(即保護(hù)50％小鼠的濃度)為19.9mg/kg。為篩選受試的本發(fā)明化合物，給一組8只ICR小鼠施用10mg/kg的化合物，將在此濃度下的存活者的數(shù)量與氯林可霉素作比較。結(jié)果如下表所示。
可以推斷如果測(cè)定更高劑量的來(lái)自實(shí)施例35的化合物，則存活小鼠數(shù)將增加。
權(quán)利要求書(shū)(按照條約第19條的修改)1.式(I)的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基，R2和R3獨(dú)立地為H、烷基、羥基、氟或氰基烷基，或者R2和R3之一為＝NOR7而另一個(gè)不存在，或者R2和R3之一為＝CH2而另一個(gè)不存在，條件是R2和R3不都為H；當(dāng)R2和R3之一為氟時(shí)，另一個(gè)不為氫或羥基；當(dāng)R2和R3之一為羥基時(shí)，另一個(gè)不為氟、氫或羥基；R6選自H、烷基、羥基烷基、-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]p-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]p-亞烷基-取代的雜環(huán)，其中p為0或1，條件是-C(O)O-取代的烷基不包括以下
R7為H或烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式I的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
2.式(II)的化合物及其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基；
R2和R3獨(dú)立地為H、烷基或氰基烷基，條件是R2和R3不都為H；R6為H、烷基或羥基烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Rq，其中Rq選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式II的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
3.式(III)的化合物及其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽 其中
R1為烷基；R2和R3為氟；R6為H、烷基或羥基烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式III的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
4.式(IV)的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽
其中R1為烷基；R2和R3獨(dú)立地為H或烷基、羥基、氟或氰基烷基，或者R2和R3之一為＝NOR7而另一個(gè)不存在，或者R2和R3之一為＝CH2而另一個(gè)不存在，條件是R2和R3不都為H；當(dāng)R2和R3之一為氟時(shí)，另一個(gè)不為氫或羥基；當(dāng)R2和R3之一為羥基時(shí)，另一個(gè)不為氟、氫或羥基；R6選自-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]p-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]p-亞烷基-取代的雜環(huán)，其中p為0或1，條件是-C(O)O-取代的烷基不包括以下 R7為H或烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式I的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R9為H、烷基或取代的烷基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為甲基。
7.選自以下的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽4-甲氧基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(4，4-二氟-丁基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-乙基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基-酰胺；1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[3-氰基-2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-乙基-哌啶-2-甲酸[2-羥基-2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基亞氨基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲氧基亞氨基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；5-丁基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-戊基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3-甲基-丁基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基-丙基]-酰胺；4-戊基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-甲基-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2，2-二氟-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-戊基-吡咯烷-2-甲酸[2，2-二氟-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-[3-(4-氟-苯基)-丙基]-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3，3-二氟-丙基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-[3-(4-氯-苯基)-丙基]-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(2，2-二氟-戊基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-丙基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-(2-羥基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-(2-羥基-丙基)-4-戊基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-(3-羥基-丙基)-4-戊基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
1-(2-羥基-乙基)-4-(3-甲基-丁基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3，3-二氟-丙基)-1-(2-羥基-乙基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-(2-羥基-乙基)-4-戊基-吡咯烷-2-甲酸[2，2-二氟-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-戊基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(1-乙基-丙基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-異丙基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-丁基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-環(huán)己基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-乙基-1-(2-羥基-乙基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-(2-羥基-乙基)-4-戊基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；1-(2-羥基-乙基)-4-丙基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基氨基甲?；鵠-4-丙基-哌啶-1-甲酸9H-芴-9-基甲酯；2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基氨基甲酰基]-4-丙基-哌啶-1-甲酸乙酯；2-[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基氨基甲?；鵠-4-丙基-哌啶-1-甲酸苯基酯；4-(4，4-二氟-戊基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3，3-二氟-丁基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3，3-二氟-戊基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3，3-二氟-戊基)-1-(2-羥基-乙基)-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(2，2-二氟-乙基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3，3-二氟-丙基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(5，5-二氟-戊基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(5-氟-戊基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(4-氟-丁基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3-乙基-3-羥基-戊基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-丁氧基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-戊氧基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(4-氟-丁氧基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-丁基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-烯丙基]-酰胺；1，4-二乙基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；
4-(3-氟-丙氧基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-(3，3，3-三氟-丙氧基)-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-異丁基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-丙基-哌啶-2-甲酸[2，2-二氟-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-丁基-4-氟-吡咯烷-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺。
8.藥物組合物，包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的權(quán)利要求1-7之任一項(xiàng)的化合物。
9.一種治療哺乳動(dòng)物微生物感染的方法，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的權(quán)利要求1-7之任一項(xiàng)的化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中所述化合物在藥物組合物中通過(guò)口、腸胃外、透皮、局部、直腸或鼻內(nèi)給藥施用于該哺乳動(dòng)物。
11.根據(jù)權(quán)利9的方法，其中所述化合物的給藥量為大約0.1至大約100mg/kg體重/天。
12.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中該化合物為4-丙基-哌啶-2-甲酸[2-甲基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺。
13.具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 14.藥物組合物，包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的權(quán)利要求13的化合物。
15.一種治療哺乳動(dòng)物微生物感染的方法，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的權(quán)利要求13的化合物。
16.一種治療哺乳動(dòng)物微生物感染的方法，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用權(quán)利要求14的藥物組合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2和R3之一為氫，而R2和R3中的另一個(gè)為甲基。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基，R2和R3獨(dú)立地為H、烷基、羥基、氟或氰基烷基，或者R2和R3之一為＝NOR7而另一個(gè)不存在，或者R2和R3之一為＝CH2而另一個(gè)不存在，條件是R2和R3不都為H；當(dāng)R2和R3之一為氟時(shí)，另一個(gè)不為氫或羥基；當(dāng)R2和R3之一為羥基時(shí)，另一個(gè)不為氟、氫或羥基；R6選自H、烷基、羥基烷基、-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]p-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]p-亞烷基-取代的雜環(huán)，其中p為0或1，條件是-C(O)O-取代的烷基不包括以下 R7為H或烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式I的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
2.式(II)的化合物及其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基；R2和R3獨(dú)立地為H、烷基或氰基烷基，條件是R2和R3不都為H；R6為H、烷基或羥基烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式II的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
3.式(III)的化合物及其前藥和藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基；R2和R3為氟；R6為H、烷基或羥基烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自一氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式III的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcuse pidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
4.式(IV)的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體或藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1為烷基；R2和R3獨(dú)立地為H或烷基、羥基、氟或氰基烷基，或者R2和R3之一為＝NOR7而另一個(gè)不存在，或者R2和R3之一為＝CH2而另一個(gè)不存在，條件是R2和R3不都為H；當(dāng)R2和R3之一為氟時(shí)，另一個(gè)不為氫或羥基；當(dāng)R2和R3之一為羥基時(shí)，另一個(gè)不為氟、氫或羥基；R6選自-C(O)O-亞烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-亞烷基-取代的環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基、-C(O)O-取代的芳基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O-取代的雜芳基、-[C(O)O]p-亞烷基-雜環(huán)、-[C(O)O]p-亞烷基-取代的雜環(huán)，其中p為0或1，條件是-C(O)O-取代的烷基不包括以下 R7為H或烷基；R9可以在環(huán)內(nèi)在相同或不同的碳上被單或多取代，獨(dú)立地選自氫、烷基、取代的烷基、烷氧基烷氧基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、烷氧基烷氧基、取代的氧、取代的氮、鹵素、苯基、取代的苯基、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-NR4R5、-亞烷基-Ra，其中Ra選自-氟苯基和一氯苯基，及其支鏈異構(gòu)體，其中n為包括端值的1-8的整數(shù)，而R4和R5為H或烷基；和m為1或2；條件是式I的化合物具有32μg/ml或更小的抗至少一種選自以下的生物的最小抑制濃度肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、糞腸球菌(Enterococcusfaecalis)、屎腸球菌(Enterococcus faecium)、流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)、粘膜炎莫拉氏菌(Moraxellacatarrhalis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)、多形擬桿菌(Bacteroidesthetaiotaomicron)和艱難梭菌(Clostridium difficile)。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R9為H、烷基或取代的烷基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為甲基。
7.選自以下的化合物及其前藥、互變異構(gòu)體和藥學(xué)上可接受的鹽1-(4-乙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基-3-氰基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-乙基哌啶基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-羥基-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-羥基亞氨基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲氧基亞氨基丙-1-基}乙酰胺；1-(-3-正丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3-甲基丁-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基-N-甲基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正戊基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-(3-對(duì)氟苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-(3-對(duì)氯苯基)丙-1-基吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(2，2-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(-4-正丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-(R)-甲基-2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-(S)-甲基-2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基乙酰胺；1-(-4-正戊基-N-(3-羥基丙-1-基)吡咯烷-2-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3-甲基丁-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟丙-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正戊基-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正戊基哌啶-6-基)-N-{[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(1-乙基丙-1-基)哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-異丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-環(huán)己基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-乙基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正戊基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正丙基-N-羥基乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-N-(F-moc)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-N-(甲酸乙酯)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-N-(甲酸苯基酯)-哌啶-6-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(4，4-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-[1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟丁-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟戊-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-(3，3-二氟戊-1-基)-N-(2-羥基乙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(2，2-二氟乙-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3，3-二氟丙-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(5，5-二氟戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(5-氟戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(4-氟丁-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3-乙基-3-羥基戊-1-基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-丁氧基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-戊氧基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(4-氟丁氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丁基丙-1-基)吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基-烯丙基}乙酰胺；1-(4-乙基-N-乙基-哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3-氟丙氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-(3，3，3-三氟丙氧基)哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-異丁基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-(4-正丙基哌啶-6-基)-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2，2-二氟-丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丙基-4-氟-吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；1-[4-正丁基-4-氟-吡咯烷-2-基]-N-{1-[3，4，5-三羥基-6-(甲硫基)四氫吡喃-2-基]-2-甲基丙-1-基}乙酰胺；4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺；4-氟-4-丙基-吡咯烷-2-甲酸[2-羥基-1-(3，4，5-三羥基-6-甲基硫烷基-四氫-吡喃-2-基)-丙基]-酰胺。
8.藥物組合物，包含藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的權(quán)利要求1-7之任一項(xiàng)的化合物。
9.一種治療哺乳動(dòng)物微生物感染的方法，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用治療有效量的權(quán)利要求1-7之任一項(xiàng)的化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中所述化合物在藥物組合物中通過(guò)口、腸胃外、透皮、局部、直腸或鼻內(nèi)給藥施用于該哺乳動(dòng)物。
11.根據(jù)權(quán)利9的方法，其中所述化合物的給藥量為大約0.1至大約100mg/kg體重/天。
全文摘要
公開(kāi)新的林可霉素衍生物。這些林可霉素衍生物表現(xiàn)出抗菌活性。由于本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出有效的抗細(xì)菌包括革蘭氏陽(yáng)性生物的活性，因此它們是有用的抗微生物劑。還公開(kāi)了所述化合物的合成和應(yīng)用方法。
文檔編號(hào)C07H17/00GK1681832SQ03821293
公開(kāi)日2005年10月12日 申請(qǐng)日期2003年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月15日
發(fā)明者J·劉易斯, D·V·帕特爾, S·K·阿納丹, M·F·戈?duì)柕俜?申請(qǐng)人:維庫(kù)羅恩醫(yī)藥品公司