專利名稱：一種非晶狀阿德福韋酯的制備方法
所屬領(lǐng)域本發(fā)明涉及非晶狀體有機(jī)化合物的制備方法，具體地說是非晶狀9-[2-[[雙(新戊酰氧基)甲氧基]氧膦基甲氧基]乙基]腺嘌呤(阿德福韋酯，簡稱AD)的制備方法。
背景技術(shù)：
化合物的狀態(tài)可分為晶型和非晶型兩類。晶型特點(diǎn)為晶體內(nèi)部的質(zhì)點(diǎn)是一定空間點(diǎn)陣有規(guī)則地排列。而非晶型的特點(diǎn)為晶體內(nèi)部的質(zhì)點(diǎn)是呈不規(guī)則排列，它有較高的表面能，溶解性能好，生物利用度較高。目前關(guān)于AD晶體的報道很多。如CN1251592A公開了四種結(jié)晶形態(tài)的AD(即無水晶形、水合形、甲醇溶劑化形、富馬酸鹽或復(fù)合物)。CN13996170A還公開了一種基本不含水及其他溶劑的結(jié)晶形態(tài)。AD晶體與一般的晶狀化合物一樣，存在表面能低、溶解性差、性狀粘著、流動性以及堆積密度性差、生物利用度低的缺點(diǎn)。據(jù)報道以Cynmolglus猴為實(shí)驗(yàn)動物，生物利用度為15～25％(詳見Cundy K C，F(xiàn)ishback JA，Shonv P C，etal.Oral bioavailability of the antitetrovial agent9-(2-phosphonylmethoxyethyl)adenine(PMEN)from three formulations of theprodrug bis(pivaloyloxymethyl)-PMEA in fasted male cynomolgus monkeys[J].pharm..Res.11839-843)，以大鼠作為實(shí)驗(yàn)動物，生物利用度為38.2％，(詳見Cundy K C.1994，oral bioavailability of PMEA(GS-0393)from the prodrugbis-POM PMEA(GS-0840)in HIV-infected patients.A reportDDM-GS-94-401.Gilead science，Inc.，F(xiàn)oster city，Calif.)，以土撥鼠作為實(shí)驗(yàn)動物，生物利用度22.9％(詳見Barditch-crovo P，Cundy K C，Wachsman M，etal.Programand Abstract.The Secod National Conference on Human Retroviruses，1995，Abstract 488.)。AD晶體所具有的性狀粘著、流動性差的特性，還導(dǎo)致其在制備片劑制劑時必須采用濕法制備。
非晶狀A(yù)D也可以用于制藥業(yè)。現(xiàn)有的非晶狀A(yù)D(也稱為無定形固化物)通常以油狀物形式獲得，故也存在流動性差、堆積密度不良的缺點(diǎn)，所以也不利于藥物的生產(chǎn)應(yīng)用。CN1374314A公開了一種阿德福韋酯無定形固化物的制備方法。該文獻(xiàn)中所述的阿德福韋酯無定形固化物是指將阿德福韋酯無定形油狀物經(jīng)過一定的方法，使其固化，形成粉狀固體。其具體制備方法包括下列步驟在阿德福韋酯無定形油狀物中加入1～3倍溶劑溶解，在-120℃～-30℃條件下固化，-120℃～-0℃真空冷凍干燥24～48小時，然后升溫至-10℃～10℃干燥。該方法存在的問題是制備工藝需在超低溫條件下進(jìn)行，耗能大，成本高，且該方法采用凍干法將AD中的溶劑去除，故所制備AD雜質(zhì)多，產(chǎn)品純度低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是要提供一種工藝條件要求低、生產(chǎn)成本低的非晶狀阿德福韋酯的制備方法，用該方法制備的產(chǎn)品其純度高、流動性好、生物利用度高。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明所提供的制備方法，包括有下步驟將阿德福韋，按其重量比，加入1-2倍的有機(jī)溶劑，溶解后，在-8℃～-2℃冷凍4～6小時，在該溫度條件下，加入6～10倍量的冷凍轉(zhuǎn)向溶劑，在-4℃～-20℃溫度下的抽濾，真空干燥。
本發(fā)明所選用的有機(jī)溶劑可選用丙酮、乙酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、乙酸異丙酯、二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇、異丙醇、叔丁醇、四氫呋喃、甲苯，或以上所述有機(jī)溶劑的兩種或多種混合液。優(yōu)選二氯甲烷或丙酮。
本發(fā)明所選用的轉(zhuǎn)向化溶劑為異丙醚、正丙醚、丁醚、正丁醚。優(yōu)選異丙醚。
在常溫狀態(tài)下，阿德福韋加入有機(jī)溶劑溶解后，再加入不同的有機(jī)溶劑即可形成重結(jié)晶(即晶體AD)。
本發(fā)明方法將阿德福韋在低溫狀態(tài)加入有機(jī)溶劑、轉(zhuǎn)向化溶劑后，產(chǎn)生了意想不到的事情，即該反應(yīng)瞬時形成了非晶狀A(yù)D。將其在低溫狀態(tài)下抽濾，真空干燥，獲得了流動性非常好、生物利用度高的非晶狀A(yù)D。
經(jīng)本發(fā)明方法制備的AD，以X-衍射、差示掃描呈熱法證明，其在50℃、80℃各有一次吸熱過程，說明其沒有固定的熔點(diǎn)，明顯屬于非晶狀化合物。
由于本發(fā)明方法采用低溫狀態(tài)下抽濾的方式將非晶狀A(yù)D與溶劑進(jìn)行分離，故制備的非晶狀A(yù)D純度高，從而克服了凍干溶劑法難以克服的雜質(zhì)含量高的缺點(diǎn)。
本發(fā)明方法無需在-70℃條件下凍干溶劑，因而可有效降低生產(chǎn)工藝對溫度條件的要求，同時也大大降低生產(chǎn)能耗及生產(chǎn)制造成本。
用本發(fā)明方法制得的AD，分子內(nèi)部呈無序排列，故表面能較好，大大提高了溶解度，改善了吸收狀態(tài)，提高了生物利用度。
用本發(fā)明中的非晶狀A(yù)D以大鼠作為動物實(shí)驗(yàn)，其生物利用度為45～50％。明顯高于AD晶體的生物利用度。
實(shí)驗(yàn)表明，用本發(fā)明方法制得的非晶狀A(yù)D具有良好的流動性。
為了比較非晶狀A(yù)D和晶體AD的流動性，各測定了三批樣品粉末的休止角。用20g粉末，裝入三角形漏斗中，使粉末自然下落，形成一圓錐形堆，用游標(biāo)卡尺測量其底部直徑，用高度游標(biāo)卡尺測量堆高，計算其休止角。結(jié)果如下非晶狀A(yù)D三批測試結(jié)果

晶體AD三批測試結(jié)果

以上表中結(jié)果可見非晶狀A(yù)D粉末休止角為35.51°，晶體AD粉末的休止角為50.01°，說明本發(fā)明制備的非晶狀A(yù)D粉末的流動性比晶狀A(yù)D粉末的流動性好。


圖1本發(fā)明制備的非晶狀A(yù)D的X-射線衍射圖。
圖2晶狀A(yù)D X-射線衍射圖。
本發(fā)明制備的非晶狀A(yù)D經(jīng)檢測表明其具有以下特征X-射線衍射儀器法國布魯克AXS公司 D8ADVANCE型靶Cu-Ka輻射(λ＝1.54178) 2θ＝5-35℃管壓30KV濾片空本發(fā)明提供的非晶狀A(yù)D使用Cu-Ka輻射，其X-射線衍射圖(見附圖1)，以度表示的2θ角在一個較廣的范圍內(nèi)(5-35℃)有一些雜亂的、非常細(xì)小的吸收峰，其與晶狀A(yù)D(即專利CN1251592A公開的“無水晶形AD”)X-射線衍射圖(見附圖2)相比較，顯然不同。
用附圖1中該峰面積計算結(jié)晶度，本發(fā)明制備的非晶狀A(yù)D，結(jié)晶度小于30％，即非晶體所占比例大于70％，通常為80％或更高。
差示掃描量熱法(DSC)儀器美國P-E公司 DSC-7量熱分析儀測試條件靜態(tài)空氣升溫速度10℃/分鐘本發(fā)明所涉及的非晶的AD在高溫下可明顯向晶型AD轉(zhuǎn)化。其DSC圖在約54℃、95℃及99℃處有吸收峰，表明本發(fā)明所涉及的非晶AD在較高溫度下可向晶型AD轉(zhuǎn)化。
熔點(diǎn)儀器YTR-3型熔點(diǎn)儀(天津大學(xué)精密儀器廠)本品的熔點(diǎn)測定表明當(dāng)初始溫度至80℃時放入樣品，則樣品首先顯示出一個熔化過程，隨后轉(zhuǎn)化為晶體AD，最后至97-99℃完全熔化。
理化性質(zhì)比較用本發(fā)明方法制備的非晶狀A(yù)D與晶態(tài)AD進(jìn)行研究比較外觀性狀比較本發(fā)明制備的非晶狀A(yù)D的外觀為疏松、細(xì)滑的干粉。晶態(tài)AD為粘著、含水的結(jié)晶塊。
以上實(shí)驗(yàn)均可證實(shí)本發(fā)明制造的AD為非結(jié)晶形AD。
穩(wěn)定性比較光照實(shí)驗(yàn)溫度20-28℃ 相對濕度40-60％，結(jié)果見表1、表2。
表1晶狀A(yù)D光照實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2非晶狀A(yù)D光照實(shí)驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明非晶狀A(yù)D溫度的穩(wěn)定性相似，但在高溫下由于非晶的AD向晶型AD轉(zhuǎn)化，所以樣品在80℃下的熔融現(xiàn)象不明顯。
高溫實(shí)驗(yàn)取阿德福韋酯原料置于稱量瓶中，厚度約5mm，敞口置于60℃恒溫容器中，放置十天，分別于第5天和第10天取樣，置五氧化二磷干燥器中干燥，按測定項(xiàng)目進(jìn)行檢查，結(jié)果見表3表3非晶狀A(yù)D高溫實(shí)驗(yàn)結(jié)果

高濕實(shí)驗(yàn)(結(jié)果見表4)表4非晶狀A(yù)D高濕實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本品在高濕條件下易吸濕降解，且在高濕條件下，由于水分子的存在使本品向結(jié)晶狀轉(zhuǎn)化，高濕第1天的X衍射圖表明非晶狀態(tài)的本品已轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪唤Y(jié)晶狀阿德福韋酯，其熔點(diǎn)已降至80℃以下。
加速實(shí)驗(yàn)本發(fā)明方法制備的非晶狀A(yù)D模擬市售包裝，置于裝有NaCl飽和溶液的干燥器中，在40℃條件下放置6個月，于第1、2、3、6個月末取樣一次，按阿德福韋酯原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案中的測定項(xiàng)目進(jìn)行檢查，其結(jié)果見表5表5加速試驗(yàn)結(jié)果(40℃、75％濕度)

加速實(shí)驗(yàn)表明，在絕濕密封條件下，本品基本穩(wěn)定，晶型無轉(zhuǎn)化，但有關(guān)物質(zhì)有較大的增加，提示本品在密閉、40℃條件下有少量降解。
鑒于上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為了避免非晶狀A(yù)D向晶型AD轉(zhuǎn)化而降低非晶狀A(yù)D的優(yōu)良品質(zhì)，用本發(fā)明制備的非晶狀A(yù)D在生產(chǎn)、儲運(yùn)、存放過程中要在常溫以下進(jìn)行。存放時還應(yīng)保持密閉、防潮。
具體實(shí)施例實(shí)施例1AD粗品可以從市場上購買，也可以按以下方法制得將4g(0.05mol)PMEA(阿德福韋)加入到通有N2的圓底三口瓶中，依次加入60ml干燥的DMF，N-N′二環(huán)己基-4-嗎啉8.32g(0.029mol)和11g特戊酸氯甲酯，攪拌15min，混合物變成均相，在60℃反應(yīng)4h，加熱至60℃攪拌反應(yīng)4h，降溫至25℃，加入乙酸異丙酯55ml，攪拌30min，抽濾，濾餅用5ml乙酸異丙酯洗滌2遍，將有機(jī)層用10ml水洗2遍，水層再用5ml乙酸異丙酯反萃2遍，合并有機(jī)相，減壓蒸餾至油狀物，加入等體積的乙醇，使其溶解0℃下加入5倍量的水，析出結(jié)晶，抽濾，得白色固體，減壓干燥，得AD粗品。
稱取粗品AD原料50g，用60ml二氯甲烷充分溶解后，置于冰箱中，-8℃下冷凍4小時，在此低溫下迅速加入400ml，-10℃的異丙醚，振搖出現(xiàn)白色沉淀，用經(jīng)過低溫處理的漏斗及抽濾瓶在-4℃的低溫下抽濾，得白色固體，室溫下真空干燥24小時，得46g非晶狀A(yù)D，其純度為99％。
實(shí)施例2稱取粗品AD原料50g用100ml無水乙醇充分溶解置冰箱中-5℃下冷凍6小時，在此低溫下迅速加入800ml，-8℃丁醚，振搖出現(xiàn)白色沉淀，用經(jīng)過低溫處理的漏斗及抽濾瓶在-10℃的低溫下抽濾，得白色固體，室溫下真空干燥，得44g以非晶狀形態(tài)為主的AD(非晶狀形態(tài)為90％)。
實(shí)施例3稱取粗品AD原料50g，用100ml丙酮充分溶解置冰箱中，-2℃下冷凍5小時，在此低溫下迅速加入1000ml-10℃的異丙醚，振搖出現(xiàn)白色沉淀，用經(jīng)過低溫處理的漏斗及抽濾瓶在-20℃低溫下抽濾，得白色固體，室溫下真空干燥，得45g以非晶狀形態(tài)為主的AD(非晶狀形態(tài)為85％)，純度為98.6％。
實(shí)施例4稱取粗品AD原料50g，用80ml無水乙醇∶二氯甲烷(10∶1)的混合溶劑中充分溶解置冰箱中，-5℃下冷凍4小時，在此低溫下迅速加入500ml-4℃的異丙醚，振搖出現(xiàn)白色沉淀，用經(jīng)過低溫處理的漏斗及抽濾瓶在-10℃低溫下抽濾，得白色固體，室溫下真空干燥得43g以非晶狀形態(tài)為主的AD(非晶狀形態(tài)為93％)，純度為98.5％。
權(quán)利要求
1.一種制備非晶狀阿德福韋酯的方法，其特征在于它包括以下步驟將阿德福韋酯粗品，按其重量比，加入1-2倍的有機(jī)溶劑，溶解后，在-10℃～-2℃冷凍4～6小時，在該溫度條件下，加入6～10倍量的冷凍轉(zhuǎn)向化溶劑，在-4℃～-20℃溫度下的抽濾，真空干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備非晶狀阿德福韋酯的方法，其特征在于所說的有機(jī)溶劑為二氯甲烷或丙酮。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備非晶狀阿德福韋酯的方法，其特征在于所說的轉(zhuǎn)向化溶劑是異丙醚。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種非晶狀阿德福韋酯的制備方法，其方法為將阿德福韋，按其重量比，加入1－2倍的有機(jī)溶劑，溶解后，在－8℃～－2℃冷凍4～6小時，在該溫度條件下，加入6～10倍量的冷凍轉(zhuǎn)向溶劑，在－4℃～－20℃溫度下的抽濾，真空干燥。本發(fā)明方法工藝條件要求低、生產(chǎn)成本低的，用該方法制備的產(chǎn)品其純度高、流動性好、生物利用度高。
文檔編號C07F9/00GK1670025SQ20041001221
公開日2005年9月21日 申請日期2004年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月31日
發(fā)明者蔣曄, 康麗娟, 張麗芳 申請人:河北醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程中心