專利名稱：：生產(chǎn)2’-脫氧-β-L-核苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于配制藥物的2'-脫氧核苷及其3'-0-酰基前藥(如3'-0-L-氨?；?',5'-0-L-二氨酰基前藥)的生產(chǎn)方法，所述藥物具體地說是用于治療和/或預(yù)防病毒感染(例如乙肝病毒感染)的藥物。具體地說，本發(fā)明涉及由穩(wěn)定原料生產(chǎn)至少一種任選受保護(hù)的1-面代-2-脫氧核糖、P-L-胸苷、(5-L-2'-脫氧尿苷、p-L-2'-脫氧胞苷、3'-0-L-纈氨酰-2'-脫氧-p-L-胞苷和3',5'-0-L-二纈氨酰-2'-脫氧-P-L-胞苷的方法。
背景技術(shù)：
：HBV是僅次于煙草的笫二大人類癌癥病因。HBV誘發(fā)癌癥的機(jī)制尚不清楚，不過有人推測HBV可直接引發(fā)腫瘤生長，或通過慢性炎癥、肝石更化以及與感染相關(guān)的細(xì)胞再生間接$1發(fā)腫瘤生長。HBV達(dá)到了全世界流行的程度。在宿主不知道感染的2-6個(gè)月潛伏期之后，HBV感染可導(dǎo)致急性肝炎和肝損傷，引起腹痛、黃疽和某些酶的血液水平升高。HBV可引起爆發(fā)性肝炎，這是該疾病快速進(jìn)展的、經(jīng)常致命的形式，其中肝臟受到大面積破壞。急性肝炎患者通常會(huì)痊愈。但是，某些患者血液中的病毒抗原在長期或不確定的時(shí)期內(nèi)持續(xù)高水平，引起慢性感染。慢性感染可導(dǎo)致慢性遷延性肝炎。感染慢性遷延性HBV的患者在發(fā)展中國家最常見。1991年年中，僅在亞洲就大約有2.25億HBV慢性攜帶者，而在全世界，幾乎有3億攜帶者。慢性遷延性肝炎可導(dǎo)致疲勞、肝〃哽化和肝細(xì)胞癌(一種原發(fā)性肝癌)。已經(jīng)確定許多合成核苷具有抗HBV活性。稱為3TC的BCH-189參見BioChemPharma,Inc.提交的US5,532,246以及EPA0494119Al。阿德福韋(9-{2-(膦?；籽趸?乙基}腺噪呤)，也稱為PMEA或((2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)乙氧基〉曱基磷酸)，在美國也已經(jīng)被批準(zhǔn)用于治療HBV感染患者。參見例如美國專利No.5,641,763和5,142,051。已經(jīng)記錄到HBV患者對(duì)阿德福韋治療的抗性。Liotta等的美國專利No.5,814,639和5,914,331要求保護(hù)的(3-2-羥曱基-5-(5-氟代胞嘧啶-l-基)-l,3-氧硫雜環(huán)戊烷("FTC")具有抗HBV活性。參見Furman等,"TheAnti-HepatitisBVirusActivities,Cytotoxicities,andAnabolicProfilesofthe(-)and(+)Enantiomersofcis-5-Fluoro-l-{2-(Hydroxymethyl)-l,3-oxathiolane-5-yl}-Cytosine，，^4w"m/cro6/a//4gewtoC/^wo^enapj/,December1992,2686-2692;和Cheng等，Jow廠"a/o/說o/og/ca/C/zew/對(duì)o;，1992,267(20),13938-13942。美國專利No.5,565,438、5,567,688和5,587,362(Chu等)公開了2'-氟-5-甲基-p-L-呋喃阿糖基尿苷(L-FMAU)治療HBV和EB病毒的用途。YaleUniversity和TheUniversityofGeorgiaResearchFoundation,Inc.在WO92/18517中公開了L-FDDC(5-氟-3'-硫代-2',3'-雙脫氧胞苷)治療HBV的用途。EmoryUniversity,UABResearchFoundation和theCentreNationaldelaRechercheScientifique(CNRS)提交的WO96/40164公開了多種用于治療乙型肝炎的P-L-2',3'-雙脫氧核苷。還是由EmoryUniversity,UABResearchFoundation和theCentreNationaldelaRechercheScientifique(CNRS)提交的WO95/07287公開了用于治療HIV感染的2'-或3'-脫氧和2',3'-雙脫氧-p-L-呋喃戊糖基核苷。GenencorInternational,Inc.禾口Lipitek,Inc.才是交6勺WO96/13512乂>開了作為抗肺瘤劑和殺病毒劑的L-呋喃核糖基核苷的制備。WO95/32984公開了為免疫抑制藥物的核苷一磷酸酯的脂酯。DE4224737公開了胞嘧啶核苷及其藥物用途。IdenixPharmaceuticals,Ltd.在美國專利No.6,395,716、6,444,652、6,566,344和6,539，837中公開了2'-脫氧-L-赤呋喃戊糖核苷及其治療HBV的用途。另參見WO00/09531。公開了一種治療人和其它宿主動(dòng)物中乙型肝炎感染的方法，該方法包括給予有效量的生物活性2'-脫氧-P-L-赤-呋喃戊糖核苷(也稱為J3-L-dN或p-L-2'-dN)或其藥物可接受的鹽、酯或前藥，包括[3-L-脫氧核糖胸苷((3-L-dT)、P-L-脫氧核糖胞苷(P-L-dC)、j3-L-脫氧核糖尿苷((3-L-dU)、p-L-脫氧核糖鳥苷(P-L-dG)、p-L-脫氧核糖腺苷(P-L-dA)和P-L-脫氧核糖肌苷(P-L-dl),它們?nèi)芜x在藥物可接受栽體中單獨(dú)給予或聯(lián)合給予。還公開了該活性化合物的5'和N4(胞苷)或N6(腺香)?；蛲榛苌?，或5'-磷脂或5'-醚脂。vonJanta-Lipinski等，丄C&m.，1998,47(12),2040-2046公開了3'-氟-修飾的P-2'-脫氧核糖核苷5'-三磷酸酯的L-對(duì)映體抑制HBV聚合酶的應(yīng)用。具體地說，公開了3'-脫氧-3'-氟-(3-L-胸苷(p-L國FTTP)、2',3'-雙脫氧畫3'-氟-p-L-胞普((3誦L-FdCTP)和2',3'-雙脫氧-3'-氟國P-L-5-曱基胞香(f3-L-FMethCTP)的5'-三磷酸為HBVDNA聚合酶的有效抑制劑。另外，vonJanta-Lipinski等公開了為HBV和DHBV內(nèi)源DNA聚合酶核苷抑制劑的(3-L-胸苷(但不是f3-L-2'-dC)三磷酸酯的生物活性。但是，僅評(píng)測了三磷酸化P-L-胸苷，而不是要求保護(hù)的非磷酸化形式，并且在文章中沒有關(guān)于(3-L-核香在細(xì)胞內(nèi)或體內(nèi)是否磷酸化的論述，更重要的是，沒有關(guān)于(3-L-核苷體內(nèi)磷酸化的效力的論述。因此，該文章沒有教導(dǎo)(3-L-核苷在細(xì)胞內(nèi)或體內(nèi)會(huì)具有任何乙型肝炎活性。另參見WO96/1204。Johansson等的歐洲專利申請(qǐng)No.0"2248Al公開了L-呔喃核糖化合物治療乙型肝炎的用途。Verri等公開了2'-脫氧-p-L-赤-呋喃戊糖核苷作為抗肺瘤劑和抗皰滲劑的用途(Mo/.尸/wrwaco/.(1997)，51(1),132-138和S/oc/zem.J(1997),328(1),317-20)。Saneyoshi等證實(shí)了2'-脫氧-L-核糖核苷作為反轉(zhuǎn)錄酶(I)抑制劑控制逆轉(zhuǎn)錄病毒和治療AIDS的用途，Jpn.KokaiTokkyoKohoJP06293645(1994)。Giovanni等測試了2'-脫氧-(3-L-赤-呋喃戊糖核苷抗部分假狂犬病毒(PRV),說oc/2e附.丄(1993)，294(2),381-5。Tyrsted等(說oc/n'm.說o/7/:^.(1968),155(2),619-22)和Bloch等(丄MedC7z亂(1967),10(5),908-12)研究了2'-脫氧畫p國L畫赤^夫喃戊糖核普的化療用途。MorrisS.Zedeck等首先公開了|3-L-dA抑制睪丸酮假單胞菌(i^ewfifomowasfetosteram.)中i秀導(dǎo)酶的合成，Mo/._P/i)as.(1967),3(4),386-95。另外，胞苷衍生物可用作藥物(如胞苷二磷酸膽堿，其通用名為Citicoline)生產(chǎn)的中間體。Lin等"SynthesisofSeveralPyrimidineL-NucleosideAnaloguesasPotentialAntiviralAgents"T^raM腦，1995,5/(4),1055-1068討論了P-L-5-碘-2'-脫氧尿苷(P-L-IudR,化合物7)具有抗皰滲感染和各種其它DNA病毒的活性，BVdU和p-L-BV-ara-U也具有抗皰滲活性，(3-L-BV-ara-U具有抗水痘-帶狀皰滲病毒活性，而2'，3'-雙脫氧-L-氮雜胞苷被發(fā)現(xiàn)具有抗HBV活性。IdenixPharmaceuticals,Ltd.的美國專利公開No.20030083306公開了2'-脫氧-(M核苷的S'-前藥以治療HBV。另參見W001/96353。Beauchamp的美國專利No.4,957,924公開了阿昔洛韋的各種治療性酯。在2002年4月17至21日于西班牙馬德里舉行的歐洲肝研究協(xié)會(huì)會(huì)議上，GileadSciences,Inc.的Stihnel等發(fā)表了一篇報(bào)告，指出阿德福韋與P-L-2'脫氧胸苷聯(lián)用在體外產(chǎn)生抗HBV的附加抗病毒作用。LokandMcMahon,AASLDPracticeGuidelines,pp.1225-1241(2001)也描述了對(duì)乙型肝炎感染的治療，包括用干擾素治療。使用土撥鼠肝炎病毒(WHV)慢性感染的東方旱獺作為HBV感染模型，研究l-(2-氟-5-曱基-l3-L-呋喃阿糖基)-尿嗜啶(L-FMAU)和WHV表面抗原疫苗的抗病毒作用。與L-FMAU和疫苗聯(lián)用相關(guān)的體液和細(xì)胞免疫類似于在自限性WHV感染中觀察到的。Menne等，/P7ra/ogy,76(11):5305-5314(2002)。這種治療性L-脫氧核苷可通過許多常規(guī)方法制備。最早的數(shù)據(jù)可追；朔至!]Holy,"Preparationof2'國deoxy-L-ribonucleosidesofthePyrimidineSeries",Co〃e"Czec/z.CTem.Co附麵w.(1972),37(12),4072-87的P-L-2'-脫氧胞苦和(3-L-2'-脫氧胸苷的合成。該方法包括通過多步構(gòu)建嘧啶環(huán)，將阿拉伯糖轉(zhuǎn)變?yōu)猷奏ず塑铡５?，因?yàn)樵摲椒ò嘿F且不通用，又開發(fā)了其它方法。一種更通用的方法包括將曱硅烷基化嘧啶或嗜呤堿基偶聯(lián)至活化的脫氧核糖。為使該方法成功，必須用良好的離去基團(tuán)在C-l活化脫氧核糖。而且，該離去基團(tuán)必須具有oc構(gòu)型。該構(gòu)型必須在整個(gè)反應(yīng)中保持穩(wěn)定，另外，N-糖苷鍵的形成與離去基團(tuán)的置換必須與構(gòu)型轉(zhuǎn)換一起發(fā)生，由此產(chǎn)生需要的(3核苷。如果這些條件不滿足，則產(chǎn)生的產(chǎn)物通常是ot和(3核苷的混合物，用層析以外的方法幾乎不能由該混合物中分離出異構(gòu)體。值得指出的是，即使用正確活化的2-脫氧-糖，與曱硅烷基化胞嘧啶的偶聯(lián)也沒有出現(xiàn)可接受的立體選擇性。因此，胞嘧啶核苷由其對(duì)應(yīng)的尿嗜啶類似物制備更有利。為大規(guī)模合成3'-氨?；?2'-脫氧胞苷，必須慮及其尿嘧啶核苷前體的胺化步驟。因此，必須開發(fā)一種非常溫和的方法保持氨基酸部分的特性，得到以純化形式釋放目的前藥之前易于純化的中間體?！┲惯@樣，該方法還應(yīng)當(dāng)是通用的。該方法應(yīng)產(chǎn)生高產(chǎn)的終產(chǎn)物和中間體，它們應(yīng)當(dāng)穩(wěn)定、易于處理和易于放大至工業(yè)失見^^莫。00/09531中，他們通過本領(lǐng)域眾所周知的方法獲得了各種2'-脫氧-(3-L-赤-呋喃戊糖核苷衍生物，它們可按照Holy,Collect.Czech.Chem.Commun.(1972),37(12),4072-87和Mol.Phys.(1967),3(4),386-95公開的方法制備。另外，活性核苷的一、二和三磷酸衍生物可按公開的方法所述制備。單磷酸酯可按照Imai等，J.Org.Chem.,34(6),1547-1550(1969年6月)的方法制備。二磷酸酯可按照Davisson等，J.Org.Chem.,52(9),1794-1801(1987)的方法制備。三磷酸酯可按照Hoard等，J.Am.Chem.Soc.,87(8),1785-1788(1965)的方法制備。然后，他們使用Lawesson試劑能夠?qū)⒛蜍昭苌镛D(zhuǎn)變?yōu)榘昭苌?。Lawesson試劑將Lawesson試劑加入到l-(3，5-二-(9-苯曱酰-2-脫氧-p-L-赤-呋喃戊糖)尿嘧啶的無水1，2-二氯乙烷溶液中，回流攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。然后減壓蒸發(fā)溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱層析純化，獲得黃色泡沫狀4-硫代中間體。在不銹鋼貯罐中將該硫代中間體(1.5g,3.31mmol)的曱醇氨溶液(預(yù)先在-10。C飽和，并緊密塞住)(50ml)加熱至IOO'C達(dá)3小時(shí)，然后冷卻至0°C。減壓蒸發(fā)溶液。獲得的粗品經(jīng)硅膠柱層析純化[洗脫劑分級(jí)梯度的曱醇(0-20%)的二氯曱烷溶液]。最后，合并合適的級(jí)分，通過一個(gè)單元式MillexHV-4(0.45|om,Millipore)過濾，減壓蒸發(fā)，獲得泡沫狀目的物2'-脫氧-(3-L-胞苷("p-L-dC，，)(0.6g，80%),其由無水EtOH結(jié)晶。該方法是1959年J.Amer.Chem.Soc.,81，178中公開的尿苷向胞苷的歷史性轉(zhuǎn)變方法的衍生。傳統(tǒng)上，糖部分羥基受保護(hù)的尿苷衍生物可以與五硫化二磷反應(yīng)，生成4-硫代衍生物。然后可用氨或其它物質(zhì)在4-位胺化這些4-硫代衍生物。一旦糖羥基去保護(hù)，就可獲得胞苷衍生物。已經(jīng)提出了其它幾種方法將尿嘧啶糖普衍生物轉(zhuǎn)變?yōu)榘奏ぬ窍銜∩?。Drs.HelmutVorbrueggen和UlrichNiedballa在名為VerfahrenZurHerstellungvonCytosin-Und6-Azacytosinnucleosiden(1982)的德國專利No.DE2122991中公開了一種方法，其中羥基受保護(hù)的尿苷或尿苷衍生物可與曱硅烷化劑如六曱基二硅氮烷(HMDS)反應(yīng)，產(chǎn)生4-0-三曱基-曱硅烷基尿苷衍生物。這些4-0-三曱基-曱硅烷基尿苷衍生物同樣可用氨或其它物質(zhì)在4位胺化，去保護(hù)獲得胞苷書亍生物。1972年，Chem.Pharm.Bull.,20，1050中公開了一種方法，其中在存在鹽酸二乙基苯胺作為催化劑的情況下，用磷酰氯氯化羥基受保護(hù)的尿苷，獲得胞苷。GDRPat.No.140,254OfficialGazette(1980)公開了一種方法，其中在氫化鈉存在下，羥基受保護(hù)的尿苷衍生物與有機(jī)磺酰化劑反應(yīng)，產(chǎn)生4-0-磺酰尿苷衍生物，然后用氨于4位對(duì)其胺化，去保護(hù)，獲得胞苷衍生物。但是，這些方法在工業(yè)上有缺陷，因?yàn)槟康奈锏漠a(chǎn)量未必令人滿意，使用的易燃劑如氫化鈉難以處理。MitsuruKawada(1988)的名為"ConversionofUracilDerivativestoCytosineDerivatives"的美國專利No.4,754,026描述了由糖部分羥基受保護(hù)的尿苷衍生物與有機(jī)磺?；瘎┓磻?yīng)，產(chǎn)生4-0-磺酰尿苷衍生物。當(dāng)在磺酰化中使用無水碳酸鉀作為除酸劑時(shí)，可獲得幾乎定量的4-0-磺酰衍生物。碳酸鉀的特異性活化作用令人驚訝，因?yàn)橛脡A如碳酸鈉作為除酸劑不能充分進(jìn)行磺酰化。但是，如果使用某些保護(hù)基或者如果需要大規(guī)模生產(chǎn)，則該反應(yīng)的產(chǎn)量仍然較低。前藥藥物活性化合物有時(shí)以酯化前藥的形式給予。羧酸酯最常用，而膦酸酯和磷酸酯不經(jīng)常使用，因?yàn)樗鼈冊隗w內(nèi)不能水解，并可產(chǎn)生毒性副產(chǎn)物(參見Erion等的美國專利6，312,662)。酰氧基烷基酯有時(shí)用作磷酸酯和膦酸酯化合物的前藥，環(huán)膦酸酯和芳基酯也可以，尤其是苯酯和芐酯(Farquhar等，J.Pharm.Sci.,(1983),72(3):324;Erion等的美國專利6,312,662)。同核苷一樣，膦酸如膦曱酸和PMEA(阿德福韋；9-(2-(膦?；鶗跹趸?乙基)腺。票呤)，顯示出和核苷的羧酸或醚脂前藥一樣的抗病毒活性(Gosselin等的美國專利6，458,773)。先前已經(jīng)描述了治療其它類型肝炎的核苷前藥。IndenixPharmaceuticals,Ltd的WO01/96353(2001年6月15日提交)公開了2'-脫氧-p-L-核苷的3'-前藥用于治療HBV。Beauchamp的美國專利No.4,957，924公開了阿昔洛韋的各種治療性酯。在工業(yè)上已經(jīng)開始使用氨?；苌镆愿倪M(jìn)阿昔洛韋的特性。實(shí)際上伐昔洛韋是阿昔洛韋的L-纈氨酸酯前藥(MERCKINDEX12THEDITION,NUMBER10039,P10044)。過去，前藥合成和制備通常涉及核苷或核苷類似物的5'-位。Gosselin等(同上文)報(bào)道了其中5'-OH.的H由以下任一種基團(tuán)取代的核苷?；?，包括其中酯基的非羰基部分選自直鏈、支鏈或環(huán)狀CVC加烷基、苯基或芐基的?；惶烊换蚍翘烊话被?；5'-醚脂或5'-磷醚脂；烷氧基烷基，包括甲氧基甲基；芳烷基，包括千基；芳氧基烷基，例如苯氧基曱基；芳基，包括任選地由囟素、C廣C4烷基或CVC4烷氧基取代的苯基；二羧酸，例如琥珀酸；磺酸酯，例如烷基或芳烷基磺?；?，包括曱磺?；?；或一、二或三磷酸酯。Matulic-Adamic等(美國專利6,248,878)報(bào)道了核苷類似物的合成，該核苷類似物包括含磷基團(tuán)通過氧原子連接至3'-位的呋喃核糖和取代的嗜啶堿基。含磷基團(tuán)包括二硫代羧酸酯或氨基磷酸酯，或者可以是寡核苷酸的一部分。這些化合物是前藥，因?yàn)樗鼈冞M(jìn)一步反應(yīng)提供最終的目的核苷和核苷類似物。所迷化合物以多步方法合成將在C-l具有羥基或乙酰氧基和在C-2、C-3和C-5具有苯曱酰保護(hù)基的呋喃核糖原料與4-OSiMe3嘧啶偶聯(lián)，產(chǎn)生l-(2,3,5-三-0-苯曱酰-呋喃核糖基)-嘧啶-4-酮；然后向第一步反應(yīng)的產(chǎn)物中加入氨的曱醇溶液，以去除苯曱酰保護(hù)基；接著使DMT-Cl/Pyr與未保護(hù)的產(chǎn)物化合物反應(yīng)，這使DMT加入到呋喃核糖的5'-0位；然后使TBDMS-C1、AgN03和Pyr/THF與5'-0-DMT取代的吹喃核糖反應(yīng)；最后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的亞磷酸化，產(chǎn)生定位于3'-0的含磷基團(tuán)。所提出的每個(gè)合成都包括至少4-7步。Chu等描述了為疊氮衍生物化合物和組合物的前藥，包括核苷和磷酸化核苷類似物(U.S.6,271,212)。這種疊氮前藥的優(yōu)勢在于其能夠穿越血腦屏障，與先前觀測到的相比，提供更長的半衰期，使活性形式藥物的生物利用度更高，穩(wěn)定性增強(qiáng)。但是，Chu等報(bào)道，制備其疊氮化物前藥需要冗長的多步合成。Borretzen等描述了為核苦和核苷類似物的抗病毒前藥。他們報(bào)道了抗病毒核苷和核普類似物的某些脂肪酸酯，其中在單不飽和C18或C加脂肪酸中的脂肪酸通過?；^程與核苷和核苷類似物的5'-位鍵合(U.S.6,153,594)。該過程在催化劑存在下進(jìn)行，可進(jìn)行24-60小時(shí)。產(chǎn)物分離通過以下方法實(shí)現(xiàn)用有機(jī)溶劑提取，以及層析純化和/或由合適溶劑重結(jié)晶。產(chǎn)物的百分比收率由15-82%大范圍波動(dòng)。但是，Borretzen等不使用術(shù)語"前藥，，。1999年，McCormick等描述了使用未被保護(hù)的核糖作為原料在鳥苷的3'-OH形成碳酸酯(McCormick等，J.Zm.C/iew.Soc.1999,"7f2":5661-5)。McCormick能夠應(yīng)用某些保護(hù)基、磺化和最終去保護(hù)，通過連續(xù)分步導(dǎo)入O-和AM唐苷鍵合成所述化合物。作為其方法中的一步，McCormick等使未被保護(hù)的鳥苷和BOC-酐、DMAP、Et3N和DMSO于室溫反應(yīng)4小時(shí)，直接在鳥苷的3'-OH獲得碳酸酯。還是在1999年，Tang等公開了一種制備2'-C-(5-甲基-胞苷核糖核苷的氨基磷酸酯前藥的方法(Tang等，JC/2em.,1999,":74入754)。同其許多同行一樣，Tang等在Lewis酸、SnCl4存在的情況下，使1,2,3,5-四-0-苯曱酰-2-C-曱基-(3-D呋喃核糖與過曱硅烷基化苯甲酰胞苷反應(yīng)，作為其合成的第一步(I4在748頁，Schemela)。2000年，NovirioPharmaceuticals(現(xiàn)在的Idenix)/〉開了通過纟會(huì)予氨基酸酯形式的抗病毒核苷增強(qiáng)抗病毒核苷類似物的穩(wěn)定性和生物利用度(美國專利序號(hào)No.09/864,078,審查中；美國專利序號(hào)No.10/261,327,審查中；WO01/90121和美國臨時(shí)申請(qǐng)60/377,983和60/392,351)。用于制備這些核苷和核香類似物的氨基酸酯的方法是利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法(Zhang等，r"ra/2e&0w1992，33:1177-80;Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis.JohnWiley&Sons,2ndEdition(1991);Kerr等，J.尸/iarmc(cew"'ca/Scz'e"ces,1994,W:582-6;Tang等，JOg.CTzew.,1999，6吖":747國754;和Cavelier等，r"ra/2Mro"1996,37:5131-4)，由適宜支鏈的(3-D或j3-L核苷開始，所述p-D或p-L核苷任選由合適的保護(hù)基(例如曱硅烷基)保護(hù)并隨后去保護(hù)。然后在合適的質(zhì)子或非質(zhì)子溶劑中于合適的反應(yīng)溫度下，任選地在合適的偶聯(lián)劑存在下，將任選受保護(hù)的支鏈核苦與合適的?；w(例如?；群?或酰基酐或活化酸)偶聯(lián)，產(chǎn)生r、2'、3'或4'支鏈j3-D或P-L核苷的2'或3'前藥(參見^"A幼'cOmmwm'ca"om，1978,^":3:27-M;JC72ew.Soc.,1999，7"f2":5661-5;Bryant等，顛7m'craZ.#他C/2柳o紐.，2001,45,229-235;Standring等，顛v/ra/C72亂&C72e膨紐.，2001,12(S卿/.7),119-129;Benzaria等，顛〖Wra/2001,風(fēng)A79;Pierra等，顛v/ra/2001,50,A79;和Cretton-Scott等，爿油w'ra/尺e&,2001，50,A44)?？赡艿呐悸?lián)劑是任何能使化合物或部分連接至另一個(gè)的試劑，包括但不限于各種碳二亞胺、CDI、BOP和羰基二咪唑。例如，對(duì)于2'-支鏈核苷的3'-前藥，優(yōu)選核苷未被保護(hù)，但通過碳二亞胺偶聯(lián)劑直接偶聯(lián)至鏈烷酸或氨基酸殘基。因此，需要開發(fā)一種活化形式的2-脫氧核糖的可放大工業(yè)化合成方法，其中所述2-脫氧核糖在其1位具有良好的離去基團(tuán)，以在偶聯(lián)反應(yīng)過程中和儲(chǔ)存時(shí)保持其手性特征。此外，需要提供一種P-L-2'-脫氧核苷(如p-L-胸苷、P-L-2'-脫氧尿苦和(3-L-2'-脫氧胞苷)及其衍生物的合成方法，其中所述衍生物例如為3'-0-?；?',5'-二?；八帲?'-0-L-氨?；?',5'-0-L-二氨?；八?，特別是3'-0-L-纈氨酰和3',5'-0-L-二纈氨酰前藥。還需要提供一種在溫和條件下獲得P-L-2'-脫氧胞苷及其衍生物的合成方法，所述衍生物例如為其3'-0-?；?'，5'-二?；八?，包括3'-0-L-氨酰基和3',5'-0-L-二氨?；八帲貏e是3'-0-L-纈氨酰和3',5'-0-L-二纈氨酰前藥。另外，需要提供一種更有效的獲得P-L-2'-脫氧胞苷及其衍生物的合成方法，所述衍生物例如為其3'-0-酰基或3'，5'-二?；八?，包括3'-0-L-氨?；?',5'-0-L-二氨酰基前藥，特別是3'-0-L-纈氨酰和3'，5'-0-L-二纈氨酰前藥。還需要提供一種在溫和條件下由(3-L-2'-脫氧尿苷獲得(3-L-2'-脫氧胞普及其衍生物的合成方法，所述衍生物例如為其3'-0-?；?',5'-二?；八帲?'-0-L-氨?；?',5'-0-L-二氨?；八?，特別是3'-0-L-纈氨酰和3'，5'-0-L-二纈氨酰前藥。發(fā)明概述本發(fā)明涉及任選受保護(hù)的1-卣代-2-脫氧核糖的有效合成路線，所述l-囟代-2-脫氧核糖優(yōu)選在其可儲(chǔ)存和/或船運(yùn)的條件下形成。該方法包括形成呋喃糖(例如2-脫氧核糖)的烷基縮醛(如曱縮醛)，此后任選地以例如芳香酯的形式保護(hù)剩余的雍基。然后在溫和條件下將任選受保護(hù)的縮醛轉(zhuǎn)變?yōu)閘-卣代-呋喃糖，例如l-卣代-2-脫氧核糖(卣糖)。所述條件包括使用由酰卣(如酰氯，特別是乙酰氯)與亞當(dāng)量的醇(例如曱醇)反應(yīng)原位產(chǎn)生的無水氫囟酸(acidhalide)(如HC1)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，取代反應(yīng)在無水條件下完成。在一個(gè)實(shí)施方案中，在所述反應(yīng)條件下，完成烷氧基(例如曱氧基)對(duì)囟化物(例如氯化物)的立體選擇性取代。在一個(gè)實(shí)施方案中，產(chǎn)物形成時(shí)易于結(jié)晶，由此避免了經(jīng)常由其它方法觀察到的分解。在一個(gè)具體的子實(shí)施方案中，2-脫氧核糖與曱醇反應(yīng)，形成2-脫氧核糖的l-曱縮醛，接著以芳香酯的形式保護(hù)3-和5-羥基。然后在溫和條件下將受保護(hù)的縮醛轉(zhuǎn)變?yōu)閘-氯-2-脫氧核糖衍生物(氯糖)。所述條件包括使用由乙酰氯與亞當(dāng)量的曱醇反應(yīng)原位生成的無水HC1。取代反應(yīng)優(yōu)選在無水條件下完成。在所述反應(yīng)條件下，完成曱氧基對(duì)氯化物的立體選擇性取代。產(chǎn)物形成時(shí)易于結(jié)晶，由此避免了由其它方法觀察到的分解。收率通常較高(例如對(duì)2-脫氧核糖收率超過80%)，產(chǎn)物穩(wěn)定且通常具有很高的活性中間體含量(例如根據(jù)HPLC法或銀量法評(píng)價(jià)超過97%)。卣糖生產(chǎn)方法的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案包括一系列步驟將2-脫氧核糖的1-羥基轉(zhuǎn)變?yōu)辂u素基團(tuán)。按照該合成方法，首先通過酸催化的將半縮醛基團(tuán)轉(zhuǎn)變?yōu)榭s醛或2'-脫氧核糖烷基糖苷的醇轉(zhuǎn)化，將原料2-脫氧核糖(半縮醛)轉(zhuǎn)變?yōu)閘-0-烷基-2-脫氧核糖(縮醛)。在一個(gè)實(shí)施方案中，烷基糖苷的烷基是曱基或乙基，優(yōu)選曱基。然后通過轉(zhuǎn)變?yōu)轷ト芜x地保護(hù)2-脫氧核糖烷基糖苦的羥基。烷基糖苷與芳族酰卣和除酸劑反應(yīng)，形成3,5-二-0-二芳?；?2-脫氧核糖烷基糖苷。優(yōu)選的芳酰基是對(duì)應(yīng)于芳香酸甲苯曱酸的曱苯曱?；Ｘ仗巧a(chǎn)余下的步驟包括烷氧基縮趁基團(tuán)的取代反應(yīng)。按照本發(fā)明，優(yōu)選在無水條件下，3，5-0-二芳?；?2-脫氧核糖烷基糖苷的烷氧基與卣化物進(jìn)行取代反應(yīng)，形成l-囟代-3,5-0-二芳?；?2-脫氧核糖。已發(fā)現(xiàn)偶聯(lián)反應(yīng)依賴于溶劑以及曱硅烷基化堿基對(duì)氯-糖的比率。溶劑要求可能非常嚴(yán)格。例如，氯仿獲得高產(chǎn)以及高立體選擇性。過量的曱硅烷基化堿基促使P核苷以較高比例形成。盡管1:1的比率可使(3/oc約為10-12，但摩爾過量(例如2倍摩爾過量)的曱硅烷基化堿基可提供高達(dá)40-45的比率。當(dāng)使用過量堿基時(shí)，過量的堿基分解后借助于助濾劑易于去除。而且，通過選擇性結(jié)晶，例如由95%乙醇結(jié)晶，易于去除a異構(gòu)體。然后，將由此分離的受保護(hù)純P核苷在甲醇中進(jìn)行甲醇鈉催化的轉(zhuǎn)酯反應(yīng)。游離的核苷很容易地以幾乎定量的收率結(jié)晶。以此方式，可以輕易地大量制備L-dT和LdU。本發(fā)明還公開了由任選導(dǎo)入所需官能團(tuán)的可利用前體有效合成胞苦核苷如L-2'-脫氧胞苷(L-dC)的路線。合成方法可應(yīng)用于廣泛的胞苦衍生物。按照本發(fā)明制備的L-dC化合物還可用作制備各種其它核苷類似物的合成中間體，所述核苷類似物包括但不限于2',3'-雙脫氧衍生物和其它通過隨后的官能團(tuán)操作獲得的衍生物。該方法任選在相轉(zhuǎn)移催化劑如吡啶鏡鹽存在下，利用磺酰卣(如甲苯磺酰氯)與IHD或L)-或a-(D或L)-尿苷(如P-L-2'-脫氧尿苷)反應(yīng)，隨后用例如氣態(tài)或液態(tài)氨實(shí)現(xiàn)胺化，以生產(chǎn)(3-(D或L)-或a-(D或L)-胞普，例如(3-L-dC。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，胺化順序由例如用BOC選擇性封閉5'-OH開始。尿嘧啶部分的活化在非常溫和的條件下實(shí)現(xiàn)，方法是使任選受保護(hù)的衍生物(例如二-BOC衍生物)與磺酰卣(如曱苯磺酰氯)反應(yīng)，接著加入液態(tài)(或氣態(tài))氨，使混合物在室溫反應(yīng)。氨解是區(qū)域選擇性的，獲得尿嘧啶和胞嘧啶的混合物，核苷比率約為1:12。在本發(fā)明的再一個(gè)實(shí)施方案中，在胞嘧咬核苷去保護(hù)前去除尿嗜啶核苷。因此，本發(fā)明還涉及有效地由胞苷衍生物中非層析分離出殘余的尿苷衍生物，其中取代基R1至R5幾乎可以是任何有機(jī)基團(tuán)。該分離方法可放大至公斤規(guī)模制品。該方法利用胞苦衍生物的堿性與鹽酸形成相對(duì)水溶性的鹽，并利用了反應(yīng)混合物非堿性組分的選擇性提取。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，需要封閉的胞嘧啶核香的回收是定量的。簡而言之，(3-(D或L)-或a-(D或L)-胞苷的制備方法包括以下內(nèi)谷a)制備或獲得結(jié)構(gòu)(I)的P-(D或L)-或a-(D或L)-尿普<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>其中，Ri是H原子、烷基、取代烷基、卣原子、烷氧基或取代烷氧基，其中在某些實(shí)施方案中，R!的烷基包括l-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，例如曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和所有同分異構(gòu)形式的偕二曱基丁基(即6個(gè)碳原子)；卣素包括氟和氯；烷氧基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基，例如曱氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基和正丁氧基；而烷基和烷氧基可由羥基、氨基或卣原子(例如氟、氯、溴和碘)取代；每個(gè)I^和RS獨(dú)立為H、直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基、CO-烷基、CO-芳基、CO-烷氧基烷基、CO-芳氧基烷基、CO-取代芳基、烷基磺?；⒎蓟酋；?、芳烷基磺?；?、氨基酸殘基、一、二或三磷酸酯，或磷酸酯衍生物，其中在某些實(shí)施方案中，每個(gè)烷基可為1-6個(gè)碳；每個(gè)烷氧基烷基可為2-10個(gè)碳；每個(gè)芳氧基烷基可為7-15個(gè)碳；每個(gè)芳基可為6-18個(gè)碳；每個(gè)芳烷基可為7-15個(gè)碳；每個(gè)氨基酸殘基可為任一種天然存在的a氨基酸，另外，還可以為非天然氨基酸，如?；撬?、P氨基丙酸或Y氨基丁酸；每個(gè)W和W獨(dú)立為H原子、烷基、取代烷基、卣原子、烷氧基、取代烷氧基或酰氧基，其中在某些實(shí)施方案中，W和/或RS定義中提及的烷基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，例如曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和偕二甲基丁基；卣素包括氟、溴和氯；烷氧基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基，例如曱氧基、乙氧基、正丙氧基和正環(huán)氧基(n-epoxy);酰氧基包括脂族或芳族基團(tuán)羧基-O,所述基團(tuán)例如為乙?；⒈郊柞；?、曱苯曱?；?、對(duì)-Cl-苯甲?；欢榛屯檠趸捎闪u基、氨基或鹵原子(例如氟、氯、溴和碘)取代；然后b)用結(jié)構(gòu)(II)的磺酰面如曱苯磺酰氯，任選地在相轉(zhuǎn)移催化劑如結(jié)構(gòu)(III)的吡啶錫鹽存在下活化結(jié)構(gòu)(I)的化合物其中，X是鹵素(F、Cl、Br和I);R11、R12、R"獨(dú)立地為H、烷基、烯基或炔基，但優(yōu)選為低級(jí)烷基；和Y1、Y2、YS和Y"蟲立地為H、囟素、烷基、烯基或炔基、酰基、烷氧基或硫代烷基，但優(yōu)選為H;然后c)使活化的化合物與胺(如氣態(tài)或液態(tài)氨)反應(yīng)，形成結(jié)構(gòu)(IV)的(3-或ot-月包苷o=s=o<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>其中，R1、R2、R3、R4和R5如上定義。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法涉及P-L-2'-脫氧胞苷的制備，其包括以下內(nèi)容a)制備或獲得結(jié)構(gòu)(I"的P-L-2'-脫氧-尿苷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>(IV)其中，W和RS獨(dú)立地為H、?；?、曱硅烷基或氨基酸衍生物；R1為H、卣素、烷基、烯基或炔基、?；?、胺、烷基胺、氨基烷基、羥基、烷氧基、氧烷基、巰基、硫代烷基或烷基硫醇；然后b)用結(jié)構(gòu)(II)的磺酰囟如甲苯磺酰氯，任選地在相轉(zhuǎn)移催化劑如結(jié)構(gòu)(111)的吡啶鏡鹽存在下活化結(jié)構(gòu)(1*)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>(III)其中，X是鹵素(F、Cl、Br和I);R11、R12、R"獨(dú)立地為H、烷基、烯基或炔基，但優(yōu)選為低級(jí)烷基；Y1、Y2、ys和Y^蟲立地為H、卣素、烷基、烯基或炔基、?；⑼檠趸蛄虼榛?，但優(yōu)選為H;然后c)使活化的化合物與胺(如氣態(tài)或液態(tài)氨)反應(yīng)，形成結(jié)構(gòu)(IV^)的(3-L-2'-脫氧-胞苦其中，R1、112和113如上定義。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該方法還包括酯化核苷如2'-脫氧-(3-L-核苷，獲得對(duì)應(yīng)的5'、3'和/或3',5'-前藥，例如5'-氨?；?、3'-氨?；?或3',5'-二氨酰基前藥，特別是5'-L-纈氨酰、3'-L-纈氨酰和/或3',5'-L-二纈氨酰前藥，具體地說是L-dT和L-dC的5'-L-纈氨酰、3'-L-纈氨酰和/或3',5'-L-二纈氨酰前藥。簡而言之，此附加的方法步驟包括以下步驟a)制備或獲得下式(V)的(3-L-或D-核苷其中，B是任選被保護(hù)的嘧啶、噤呤、雜環(huán)或雜芳族石威基；和每個(gè)W和RS獨(dú)立為H原子、烷基、取代烷基、卣原子、烷氧基、取代烷氧基或酰氧基，其中在某些實(shí)施方案中，R"和/或RS定義中提及的烷基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，例如曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和偕二甲基丁基；卣素包括氟、溴和氯；烷氧基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基，例如曱氧基、乙氧基、正丙氧基和正環(huán)氧基；酰氧基包括脂族或芳族羧基-O,所述基團(tuán)例如為乙酰基、苯曱?；?、曱苯曱酰基、對(duì)-Cl-苯甲?；欢榛屯檠趸捎闪u基、氨基或囟原子(例如氟、氯、溴和碘)取代；然后b)獲得下式(VI)的氨?；苌锲渲?，W和W獨(dú)立地為H、?；?、曱硅烷基或氨基酸衍生物;而W和Rs'中至少有一個(gè)是氨基酸衍生物。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，此附加的方法步驟包括以下步驟a)制備或獲得下式(V"的f3-L-2'-脫氧核苷oh(v;"其中，B是任選被保護(hù)的嗜啶、噪呤、雜環(huán)或雜芳族磁基;b)制備下式(VI"的氨?；苌锲渲?，W和W獨(dú)立地為H、酰基、曱硅烷基或氨基酸衍生物；而R"和W中至少有一個(gè)是氨基酸衍生物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，僅酯化3'-羥基。在一個(gè)這種實(shí)施方案中，通過預(yù)先選擇性封閉5'-OH在3'-OH引入酰基部分，例如纈氨酰部分。這在受控的條件下使用三苯曱基氯很容易實(shí)現(xiàn)。由此形成的中間體在保持纈氨酰部分的叔丁基-氧基-羰基(BOC)保護(hù)基完整的條件下選擇性去三苯甲基化。產(chǎn)生的中間體是一種穩(wěn)定的晶體中間體3'-0-BOC-L-纈氨酰-L-dU。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括一種合成L-dC的3'-前藥或3',5'-前藥的方法，所述前藥例如L-dC的3'-0-?；?前藥或3',5'-二酰基前藥，如L-dC的3'-0-氨?；?',5'-0-二氨?；八帲貏e是L-dC的3'-0-L-纈氨酰-前藥或3',5'-0-L-二纈氨酰前藥，其中3'和/或5'-羥基酯化，然后胺化任選受保護(hù)的2'-脫氧尿苷。在一個(gè)替代實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種合成L-dC的3'-前藥或3',5'-前藥的方法，所述前藥例如L-dC的3'-0-?；?前藥或3',5'-二?；八?，如LdC的3'-O-氨?；?',5'-0-二氨?；八帲貏e是L-dC的3'-0-L-纈氨酰-前藥或3',5'-0-L-二纈氨酰前藥，其中3'和/或5'-羥基酯化為所需的生物不穩(wěn)定取代基，隨后胺化任選受保護(hù)的2'-脫氧尿苷。作為非限制性實(shí)施例，所述合成可遵循以下流程2-脫氧-L-核糖——>->-^活化糖曱硅烷基尿嘧啶二曱苯甲?；?L-dU解封閉二-L-Boc-纈氨酸-L-dli1)"磺酰卣"J2)NH3二-L-Boc-纈氨酸-L-dGHC1的乙酸乙酯溶液二-L-纈氨酸-L-dG.HCl除了描述了非常有效且可放大地合成l-a-氯-3,5-二-0-對(duì)曱苯曱?；?2-脫氧-L-核糖、LdT、LdU、3'-0-L-纈氨酰-LdC和3',5'-0-L-二纈氨酰-LdC之外，本發(fā)明還呈現(xiàn)了在最終胞苷化合物的合成路徑中為中間體的5個(gè)化合物。這些化合物包括5'-0-三苯曱基-2'-脫氧-p-丄-尿苷及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；S'一0-N-Boc-丄-纈氨酰-S'-0-三苯曱基J'-脫氧-f3-L-尿香及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；3'-0-N-Boc-L-纈氨酰-2'-脫氧-(3-丄-尿苷及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；3'-0-N-Boc-L-纈氨酰-5'-0-Boc-2'-脫氧-p-丄-尿苦及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；和3'-0-N-Boc-L-纈氨酰-5'-0-Boc-2'-脫氧-(3-丄-胞苷及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體。這些化合物的藥物可接受的鹽或旋光異構(gòu)體也包括在本發(fā)明中。下文更詳細(xì)地描述了這些化合物。本發(fā)明所述方法的優(yōu)勢包括至少以下要點(diǎn)1.溫和和穩(wěn)定地大量生產(chǎn)穩(wěn)定的活化2-脫氧-糖的步驟的發(fā)明，所述2-脫氧-糖能夠產(chǎn)生得到(3-2'-脫氧-核苷的高度立體選擇性偶聯(lián)反應(yīng)。2.在N-BOC保護(hù)的氨-?；嬖谙逻M(jìn)行的溫和和選擇性的去三苯甲基化步驟。3.能分離純胞嗜啶氨?；讼愕倪x擇性提取步驟，由此避免過于昂貴的層析步驟。4.使用BOC保護(hù)氨酰基部分和5'-OH的概念，其使兩個(gè)位置同時(shí)去保護(hù)，而沒有形成難以去除的副產(chǎn)物，又形成所需要的晶體二-鹽酸鹽。附圖詳述圖1是本發(fā)明的一個(gè)非限制性的說明性實(shí)施例，描述了由DMAP和TsOH合成4-甲苯磺酸4-(WW-二甲基氨基)吡啶鏡。圖2是本發(fā)明的一個(gè)非限制性的說明性實(shí)施例，描述了由3',5'-二-(AMBoc-L-纈氨酰)-2'-脫氧-P-L-尿香合成3',5'-二-(iV-Boc-L-纈氨酰)-2'-脫氧-P-L-胞苷。圖3是本發(fā)明的一個(gè)說明性流程圖，描述了2'-脫氧核糖轉(zhuǎn)變?yōu)閘'-氯-2'-脫氧核糖，該化合物與曱硅烷基化胸腺嘧啶偶聯(lián)，去保護(hù)后獲得P-L-胸腺嘧啶。圖4是本發(fā)明的一個(gè)非限制性的說明性流程圖，描述了L-dU轉(zhuǎn)變?yōu)閂al-L-dC二鹽酸鹽。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及任選受保護(hù)的1-卣代-2-脫氧核糖的有效合成路線，所述l-卣代-2-脫氧核糖優(yōu)選在其可儲(chǔ)存和/或船運(yùn)的條件下形成。該方法包括形成呋喃糖(如2-脫氧核糖)的烷基縮醛(如曱縮醛)，之后任選地例如以芳香酯的形式保護(hù)剩余的羥基。然后在溫和條件下將任選受保護(hù)的縮醛轉(zhuǎn)變?yōu)閘-卣代-呋喃糖，例如l-由代-2-脫氧核糖(卣糖)。所述條件包括使用由酰卣(如酰氯，特別是乙酰氯)與亞當(dāng)量的醇(例如曱醇)反應(yīng)原位產(chǎn)生的無水氫囟酸(如HC1)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，取代反應(yīng)在無水條件下完成。在一個(gè)實(shí)施方案中，在所述反應(yīng)條件下，完成烷氧基(例如曱氧基)對(duì)卣化物(例如氯化物)的立體選擇性取代。在一個(gè)實(shí)施方案中，產(chǎn)物形成時(shí)易于結(jié)晶，由此避免了經(jīng)常由其它方法觀察到的分解。在一個(gè)具體的子實(shí)施方案中，2-脫氧核糖與曱醇反應(yīng)，形成2-脫氧核糖的l-曱縮醛，接著以芳香酯的形式保護(hù)3-和5-羥基。然后在溫和條件下將受保護(hù)的縮酪轉(zhuǎn)變?yōu)閘-氯-2-脫氧核糖(氯糖)。所述條件包括使用由乙酰氯與亞當(dāng)量的甲醇反應(yīng)原位產(chǎn)生的無水HC1。取代反應(yīng)優(yōu)選在無水條件下完成。在所述反應(yīng)條件下，完成甲氧基對(duì)氯化物的立體選擇性取代。產(chǎn)物形成時(shí)易于結(jié)晶，由此避免了經(jīng)常由其它方法觀察到的分解。收率通常較高(例如對(duì)2-脫氧核糖收率超過80%)，產(chǎn)物穩(wěn)定且通常具有很高的活性中間體含量(例如根據(jù)HPLC法或銀量法評(píng)價(jià)超過97%)。由糖生產(chǎn)方法的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案包括一系列步驟將2-脫氧核糖的1-輕基轉(zhuǎn)變?yōu)樨账鼗鶊F(tuán)。按照該合成方法，首先通過酸催化的將半縮醛基團(tuán)轉(zhuǎn)變?yōu)榭s醛或2'-脫氧核糖烷基糖苷的醇轉(zhuǎn)化，將原料2-脫氧核糖(半縮醛)轉(zhuǎn)變?yōu)閘-0-烷基-2-脫氧核糖(縮醛)。在一個(gè)實(shí)施方案中，烷基糖苷的烷基是曱基或乙基，優(yōu)選曱基。然后通過轉(zhuǎn)變?yōu)轷ト芜x地保護(hù)2'-脫氧核糖烷基糖香的羥基。烷基糖普與芳族酰卣和除酸劑反應(yīng)，形成3,5-二-0-二芳?；?2-脫氧核糖烷基糖苷。優(yōu)選的芳?；菍?duì)應(yīng)于芳香酸甲苯曱酸的曱苯甲?；Ｘ短巧a(chǎn)余下的步驟包括烷氧基縮醛基團(tuán)的取代反應(yīng)。按照本發(fā)明，優(yōu)選在無水條件下，3,5-0-二芳基?；?2-脫氧核糖烷基糖苷的烷氧基與囟化物進(jìn)行取代反應(yīng)，形成l-卣代-3，5-0-二芳基?；?2-脫氧核糖。已發(fā)現(xiàn)偶聯(lián)反應(yīng)依賴于溶劑以及曱硅烷基化堿基對(duì)氯-糖的比率。溶劑要求可能非常嚴(yán)格。例如，氯仿獲得高產(chǎn)以及高立體選擇性。過量的曱硅烷基化石威基促使P核苷以較高比例形成。盡管1:1的比率可使(3/oc約為10-12,但摩爾過量(例如2倍摩爾過量)的甲硅烷基化堿基可提供高達(dá)40-45的比率。當(dāng)使用過量堿基時(shí)，過量的堿基分解后借助于助濾劑易于去除。而且，通過選擇性結(jié)晶，例如由95%乙醇結(jié)晶，易于去除a異構(gòu)體。然后，將由此分離的受保護(hù)純(3核苷在甲醇中進(jìn)行曱醇鈉催化的轉(zhuǎn)酯反應(yīng)。游離的核苷很容易地以幾乎定量的收率結(jié)晶。以此方式，可以輕易地大量制備L-dT和LdU。本發(fā)明還公開了由任選導(dǎo)入所需官能團(tuán)的可利用前體有效合成胞苷核苷如L-2'-脫氧胞苷(L-dC)的路線。合成方法可應(yīng)用于廣泛的胞普衍生物。按照本發(fā)明制備的L-dC化合物還可用作制備各種其它核苷類似物的合成中間體，所述核苷類似物包括但不限于2'，3'-雙脫氧衍生物和其它通過隨后的官能團(tuán)操作獲得的衍生物。該方法任選在相轉(zhuǎn)移催化劑如吡啶鏡鹽存在下，利用磺酰囟(如曱苯磺酰氯)與P-(D或L)-或ot-(D或L)-尿苷(如(3-L-2'-脫氧尿苷)反應(yīng)，隨后用例如氣態(tài)或液態(tài)氨實(shí)現(xiàn)胺化，以生產(chǎn)P-(D或L)-或a-(D或L)-胞苷，例如P-L-dC。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，胺化順序由例如用BOC選擇性封閉5'-OH開始。尿嘧啶部分的活化在非常溫和的條件下實(shí)現(xiàn)，方法是使任選受保護(hù)的衍生物(例如二-BOC衍生物)與磺酰卣(如曱苯磺酰氯)反應(yīng)，接著加入液態(tài)(或氣態(tài))氨，使混合物在室溫反應(yīng)。氨解是區(qū)域選擇性的，獲得尿嘧啶和胞嘧啶核苷比率約為1:12的混合物。在本發(fā)明的再一個(gè)實(shí)施方案中，在胞嘧啶核苷去保護(hù)前去除尿嘧啶核苷。因此，本發(fā)明還涉及由胞苷衍生物中有效地非層析分離殘余的尿苷衍生物，其中取代基R1至R5幾乎可以是任何有機(jī)基團(tuán)。該分離方法可放大至公斤規(guī)模制品。該方法利用胞苷衍生物的堿性與鹽酸形成相對(duì)水溶性的鹽，并利用了反應(yīng)混合物非堿性組分的選擇性提取。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，需要封閉的胞嘧啶核苷的回收是定量的。簡而言之，p-(D或L)-或a-(D或L)-胞普的制備方法包括以下內(nèi)容a)制備或獲得結(jié)構(gòu)(I)的p-(D或L)-或a-(D或L)-尿苷其中，W是H原子、烷基、取代烷基、鹵原子、烷氧基或取代烷氧基，其中在某些實(shí)施方案中，Ri的烷基包括l-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，例如曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和所有同分異構(gòu)形式的偕二曱基丁基(即6個(gè)碳原子)；面素包括氟和氯；烷氧基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基，例如曱氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基和正丁氧基；而烷基和烷氧基可由羥基、氨基或卣原子(例如氟、氯、溴和硤)取代；每個(gè)RS和RS獨(dú)立為H、直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基、CO-烷基、CO-芳基、CO-烷氧基烷基、CO-芳氧基烷基、CO-取代芳基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺?；被釟埢?、一、二或三磷酸酯，或磷酸酯衍生物，其中在某些實(shí)施方案中，每個(gè)烷基可為1-6個(gè)碳；每個(gè)烷氧基烷基可為2-10個(gè)碳；每個(gè)芳氧基烷基可為7-15個(gè)碳；每個(gè)芳基可為6-18個(gè)碳；每個(gè)芳烷基可為7-15個(gè)碳；每個(gè)氨基酸殘基可為任一種天然存在的a氨基酸，另外，還可以為非天然氨基酸，如?；撬帷?3氨基丙酸或y氨基丁酸；以及每個(gè)114和115獨(dú)立為H原子、烷基、取代烷基、卣原子、烷氧基、取代烷氧基或酰氧基，其中在某些實(shí)施方案中，114和/或115定義中提及的烷基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，例如曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和偕二曱基丁基；囟素包括氟、溴和氯；烷氧基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基，例如曱氧基、乙氧基、正丙氧基和正環(huán)氧基；酰氧基包括脂族或芳族基團(tuán)羧基-O，所述基團(tuán)例如為乙酰基、苯曱酰基、曱苯曱酰基、對(duì)-Cl-苯曱酰基；而烷基和烷氧基可由羥基、氨基或卣原子(例如氟、氯、溴和碘)取代；然后b)用結(jié)構(gòu)(II)的磺酰卣如曱苯磺酰氯，任選地在相轉(zhuǎn)移催化劑如結(jié)構(gòu)(III)的吡啶镥鹽存在下活化結(jié)構(gòu)(I)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula>其中，X是卣素(F、Cl、Br和I);R11、R12、R"獨(dú)立地為H、烷基、烯基或炔基，但優(yōu)選為低級(jí)烷基；和Y1、Y2、YS和Y^蟲立地為H、囟素、烷基、烯基或炔基、?；⑼檠趸蛄虼榛?，但優(yōu)選為H;然后c)使活化的化合物與胺(如氣態(tài)或液態(tài)氨)反應(yīng)，形成結(jié)構(gòu)(IV)的p-或a-胞苷其中，R1、R2、R3、R4和R5如上定義。RLR5中的任一個(gè)基團(tuán)(例如烷基烷氧基、環(huán)烷基和芳族基團(tuán))可任選地獨(dú)立被取代。式I的尿嘧啶核苦的優(yōu)選實(shí)施方案包括其中R1、114和115為H的實(shí)施方案；其中W為曱基而114和115為H的實(shí)施方案；其中RS為氨基酸殘基特別是丄-纈氨酰的實(shí)施方案；以及其中R2和RS各自獨(dú)立地為氨基酸殘基特別是丄-纈氨酰的實(shí)施方案。在一個(gè)實(shí)施方案中，該方法涉及f3-L-2'-脫氧-胞苷的制備，其包括以下內(nèi)容a)制備或獲得結(jié)構(gòu)(I"的P-L-2'-脫氧-尿苷其中，RS和RS獨(dú)立地為H、?；?、曱硅烷基或氨基酸衍生物；W為H、卣素、烷基、烯基或炔基、?；?、胺、烷基胺、氨基烷基、羥基、烷氧基、氧烷基、巰基、硫代烷基或烷基硫醇；然后b)用結(jié)構(gòu)(II)的磺酰卣如曱苯磺酰氯，任選地在相轉(zhuǎn)移催化劑如結(jié)構(gòu)(III)的吡啶鐠鹽存在下活化結(jié)構(gòu)(I"的化合物其中，X是鹵素(F、Cl、Br和I);R11、R12、R"獨(dú)立地為H、烷基、烯基或炔基，但優(yōu)選為低級(jí)烷基；Y1、Y2、ys和Y-獨(dú)立地為H、卣素、烷基、烯基或炔基、?；?、烷氧基或硫代烷基，但優(yōu)選為H;然后c)使活化的化合物與胺(如氣態(tài)或液態(tài)氨)反應(yīng)，形成結(jié)構(gòu)(IV"的p-L-2'-脫氧-胞苷其中，R1、112和113如上定義。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該方法還包括酯化核苷如2'-脫氧-(3-L-核苷，獲得對(duì)應(yīng)的5'、3'和/或3',5'-前藥，例如5'-氨?；?'-氨?；?或3',5'-二氨酰基前藥，特別是5'-L-纈氨酰、3'-L-纈氨酰和/或3'，5'-L-二纈氨酰前藥，具體地說是L-dT和L-dC的5'-L-纈氨酰、x3'-L-纈氨酰和/或3',5'-L-二纈氨酰前藥。簡而言之，此附加的方法步驟包括以下步驟:a)制備或獲得下式(V)的P-L-或D-核苷HO&w其中，B是任選被保護(hù)的嘧啶、噤呤、雜環(huán)或雜芳族威基；和每個(gè)W和W獨(dú)立為H原子、烷基、取代烷基、卣原子、烷氧基、取代烷氧基或酰氧基，其中在某些實(shí)施方案中，114和/或115定義中提及的烷基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，例如曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基和偕二曱基丁基；由素包括氟、溴和氯；烷氧基包括1-6個(gè)碳原子的低級(jí)烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基和正環(huán)氧基；酰氧基包括脂族或芳族基團(tuán)羧基-O，所述基團(tuán)例如為乙?；?、苯曱酰基、曱苯甲?；?、對(duì)-Cl-苯曱?；?；而烷基和烷氧基可由羥基、氨基或囟原子(例如氟、氯、溴和碘)取代；然后b)獲得下式(VI)的氨酰基衍生物其中，R"和W獨(dú)立地為H、?；?、甲硅烷基或氨基酸衍生物;而W和W中至少有一個(gè)是氨基酸衍生物。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，此附加的方法步驟包括以下步驟a)制備或獲得下式(V"的P-L-2'-脫氧核苷其中，B是任選被保護(hù)的嘧啶、噤呤、雜環(huán)或雜芳族石成基;b)制備下式(VP)的氨酰基衍生物、^^oVOR3'(VI*)其中，W和W獨(dú)立地為H、酰基、曱硅烷基或氨基酸衍生物；而W和Rs'中至少有一個(gè)是氨基酸衍生物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，僅酯化3'-羥基。在一個(gè)這種實(shí)施方案中，通過預(yù)先選擇性封閉5'-OH在3'-OH引入?；糠郑缋i氨酰部分。這在受控的條件下使用三苯曱基氯很容易實(shí)現(xiàn)。由此形成的中間體在保持纈氨酰部分的叔丁基-氧基-羰基(BOC)保護(hù)基完整的條件下選擇性去三苯曱基化。產(chǎn)生的中間體是一種穩(wěn)定的晶體中間體3'-0-BOC-L-纈氨酰-L-dU。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括一種合成L-dC的3'-前藥或3',5'-前藥的方法，所述前藥例如為L-dC的3'-0-?；?前藥或3',5'-二酰基前藥，如L-dC的3'-0-氨酰基或3'，5'-0-二氨?；八?，特別是L-dC的3'-0-L-纈氨酰-前藥或3',5'-0-L-二纈氨酰前藥，其中3'和/或5'-羥基酯化，然后胺化任選受保護(hù)的2'-脫氧尿苷。在一個(gè)替代實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種合成L-dC的3'-前藥或3',5'-前藥的方法，所述前藥例如為L-dC的3'-0-?；?前藥或3',5'-二?；八?，如LdC的3'-0-氨?；?'，5'-0-二氨?；八?，特別是L-dC的3'-0-L-纈氨酰-前藥或3',5'-0-L-二纈氨酰前藥，其中3'和/或5'-羥基酯化為所需的生物不穩(wěn)定取代基，隨后胺化任選受保護(hù)的2'-脫氧尿苷。作為非限制性實(shí)施例，所述合成可遵循以下流程2-脫氧-L-核糖->->->活化糖甲硅烷基尿嘧啶二甲苯曱酰基-L-dU解封閉二-L-Boc-纈氨酸-L-dLI1)"磺酰卣"v2)NH3二-L-Boc-纈氨酸-L-dCHC1的乙酸乙酯溶液二-L-纈氨酸-L-dC.HCl除了描述了非常有效且可放大地合成l-0t-氯-3,5-二-O-對(duì)曱苯甲?；?2-脫氧-L-核糖、LdT、LdU、3'-0-L-纈氨酰-LdC和3',5'-0-L-二纈氨酰-L-dC之外，本發(fā)明還呈現(xiàn)了在最后胞苷化合物的合成路徑中為中間體的5個(gè)化合物。這些化合物包括5'-0-三苯甲基-2'-脫氧-p-丄-尿苷及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；3'-0-N-Boc-丄-纈氨酰-5'-0-三苯曱基-2'-脫氧-P-丄-尿苷及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；3'-0-N-Boc-丄-纈氨酰-2'-脫氧-p-丄-尿苷及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；3'-0-N-Boc-丄-纈氨酰-5'-0-Boc-2'-脫氧-(3-丄-尿香及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體；和3'-0-N-Boc-丄-纈氨酰-5'-0-Boc-2'-脫氧-P-丄-胞香及其藥物可接受的鹽或異構(gòu)體。這些化合物的藥物可接受的鹽或旋光異構(gòu)體也包括在本發(fā)明中。下文更詳細(xì)地描述了這些化合物。本發(fā)明所述方法的優(yōu)勢包括至少以下要點(diǎn)1.溫和和穩(wěn)定地大量生產(chǎn)穩(wěn)定活化的2-脫氧-糖的步驟的發(fā)明，所述2-脫氧-糖能夠產(chǎn)生得到P-2'-脫氧-核苷的高度立體選擇性偶聯(lián)反應(yīng)。2.在N-BOC保護(hù)的氨-?；嬖谙逻M(jìn)行的溫和和選擇性的去三苯曱基化步驟。3.能分離純胞嘧啶氨酰基核苷的選擇性提取步驟，由此避免過于昂貴的層析步驟。4.使用BOC保護(hù)氨?；糠趾?'-OH的概念，其使兩個(gè)位置同時(shí)去保護(hù)，而沒有形成難以去除的副產(chǎn)物，又形成所需要的晶體二-鹽酸鹽。反應(yīng)條件的選擇應(yīng)當(dāng)考慮用磺酰卣活化L-2'-脫氧尿苦的方便性。某些溫度和溶劑的組合可使收率下降。例如，偶聯(lián)反應(yīng)是放熱的，因此可潛在地產(chǎn)生副產(chǎn)物，例如酐和/或尿素。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，為克服這些不需要的副反應(yīng)，用過量較多的選擇試劑如碳二亞胺和纈氨酸在室溫下進(jìn)行反應(yīng)。在一個(gè)替代實(shí)施方案中，偶聯(lián)反應(yīng)在較低溫度如15士2。C下進(jìn)行，以獲得幾乎純的產(chǎn)物。另外，溶劑體系可能也很關(guān)鍵。作為一個(gè)非限制性實(shí)施例，當(dāng)用HC1的二嚼烷溶液去保護(hù)前藥前體二-L-Boc-纈氨酸-L-dC時(shí)，二噁烷對(duì)前藥的親和性增加，不能由目的產(chǎn)物中完全去除，有5-6%的產(chǎn)物為二瞎烷。另一方面，如果使用乙酸乙酯作為溶劑，則目的產(chǎn)物幾乎連痕量溶劑都沒有。此外，如果前藥二-氨基酸-L-dC為目的產(chǎn)物，則美國專利No.4,754,026所提出的反應(yīng)條件是不適用的，原因是中間體不穩(wěn)定而釋放出HC1,或者是氨基酸或核苷外消旋乃至分解。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)需要使用更溫和的條件時(shí)，使用相轉(zhuǎn)移催化劑。如果有需要，接下來可以使用已知方法將L-dC核苷還原為L-2',3'-雙脫氧胞苷或L-2',3'-雙脫氧-2',3'-二脫氬胞香；作為非限制性的說明性實(shí)例，Townsend,等，ChemistryofNucleosidesandNucleotides^VolumelrPlenumPress:NewYork教導(dǎo)了在3'位還原核香，產(chǎn)生2',3'-雙脫氧核苷，并消去3'-鞋基，產(chǎn)生2',3'-雙脫氧-2',3'-二脫氬核香。或者，也可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的化學(xué)方法修飾3'位，以形成3'或5'取代的胞香衍生物或其組合。作為非限制性實(shí)例，Kuzuhara,H.等的美國專利No.5,144,018(1992)教導(dǎo)了通過活化以及隨后取代官能化相關(guān)的羥基。定義應(yīng)當(dāng)理解的是，除非另有說明，否則以上和本文所提及基團(tuán)的各種可能的立體異構(gòu)體在各個(gè)術(shù)語和實(shí)例的含義范圍內(nèi)。作為說明性實(shí)例，"l-甲基-丁基，，存在(R)型和(S)型，因此，除非另有說明，否則術(shù)語"l-甲基-丁基"同時(shí)涵蓋了(R)-l-甲基-丁基和(S)-l-曱基-丁基。根據(jù)4'碳周圍的立體化學(xué)，幾種生物化合物分別定為(D)和(L)型，而不是(R)和(S)型。作為另一個(gè)說明性實(shí)例，"甘氨酸"存在(D)型和(L)型；因此，除非另有說明，否則術(shù)語"甘氨酸"同時(shí)涵蓋了(D)-甘氨酸和(L)-甘氨酸。本文使用的術(shù)語"基本沒有"或"基本不存在"是指這種核苷組合物其按重量計(jì)包含至少85%或90%的該核苦的指定對(duì)映體，優(yōu)選95%-98%,再更優(yōu)選99%-100%。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明方法和組合物中的化合物基本沒有對(duì)映體。同樣，術(shù)語"分離的"是指這種核苷組合物其按重量計(jì)包含至少85%或90%的該核苷，優(yōu)選95%-98%，再更優(yōu)選99%-100%，剩余部分包含其他化學(xué)物類或?qū)τ丑w。除非另有說明，否則本文使用的術(shù)語"烷基"是指飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀伯、仲或叔烴，包括但不限于C廣C^烷基，具體地說包括曱基、三氟曱基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、環(huán)戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、環(huán)己基、環(huán)己基曱基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基和2,3-二曱基丁基。所述烷基可任選地由一個(gè)或多個(gè)部分取代，例如卣素(F、Cl、Br或I，例如CH2F或CF。、烷基、囟代烷基、羥基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷氨基、二烷氨基、芳氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、巰基、亞胺基、磺酸、硫酸、磺酰基、硫烷基、亞磺酰基、氨磺?；?、酯、羧酸、酰胺、膦?；?、次膦?；⒘柞；?、膦、硫酯、硫醚、酰離、酐、肝、肼、氨基曱酸、膦酸、磷酸酯、膦酸酯或任何其它可行的不抑制該化合物藥理活性的官能團(tuán)，這些官能團(tuán)或者未受保護(hù)，或者根據(jù)需要受保護(hù)，保護(hù)方法如本領(lǐng)域4支術(shù)人員所知，如Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,JohnWileyandSons,SecondEdition,1991所教導(dǎo)的方法，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。除非另有說明，否則本文使用的術(shù)語"低級(jí)烷基"是指C廣Q飽和直鏈、支鏈或環(huán)狀(如果合適的話，例如環(huán)丙基)烷基，同時(shí)包括取代和未取代形式。術(shù)語"亞烷基"或"烯基"是指直鏈或支鏈構(gòu)型的飽和烴二基，包括但不限于具有1-10個(gè)碳原子的飽和烴二基。包含在該術(shù)語范圍內(nèi)的是亞曱基、1,2-乙-二基、1,1-乙-二基、1,3-丙-二基、1,3-丁-二基、1,4-丁-二基等。本文公開的亞烷基或其他二價(jià)部分可任選地由一個(gè)或多個(gè)選自以下的部分取代烷基、卣素、卣代烷基、羥基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷氨基、二烷氨基、芳氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺基、磺?；?、硫烷基、亞磺?；被酋；Ⅴ?、羧酸、酰胺、膦酰基、次膦?；?、磷?；?、膦、硫酯、硫醚、酰囟、酐、肟、肼、氨基曱酸、膦酸、膦酸酯或任何其它可行的不抑制該化合物藥理活性的官能團(tuán)，這些官能團(tuán)或者未受保護(hù)，或者根據(jù)需要受保護(hù)，保護(hù)方法如本領(lǐng)域才支術(shù)人員所知，如Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,JohnWileyandSons,SecondEdition,1991所教導(dǎo)的方法，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。除非另有說明，否則本文使用的術(shù)語"芳基"是指苯基、聯(lián)苯基或萘基，優(yōu)選苯基。該術(shù)語同時(shí)包括取代和未取代部分。所述芳基可由一個(gè)或多個(gè)選自以下的部分取代溴、氯、氟、碘、羥基、氨基、烷氨基、芳氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸酯、磷酸、磷酸酯或膦酸酯，這些官能團(tuán)或者未受保護(hù)，或者根據(jù)需要受保護(hù)，保護(hù)方法如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，如Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis:JohnWileyandSons,SecondEdition,1991所教導(dǎo)的方法。除非另有定義，否則本文使用的術(shù)語"受保護(hù)的"是指這種基團(tuán)向其加入雜原子，以防止其進(jìn)一步反應(yīng)或?yàn)榱似渌康?。有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員已知各種各樣的氧和氮保護(hù)基。本文使用的術(shù)語"卣代"或"卣素"包括氯、溴、碘和氟。除非另有說明，否則本文使用的術(shù)語"烷氧基"是指結(jié)構(gòu)為-O-烷基的部分，其中烷基如上定義。本文使用的術(shù)語"?；?是指式C(O)R'的基團(tuán)，其中R'為烷基、芳基、烷芳基或芳烷基，或者為取代的烷基、芳基、烷芳基或芳烷基，其中這些基團(tuán)如上定義。本文使用的術(shù)語"雜芳族堿基"是指在芳環(huán)中包含至少一個(gè)硫、氧、氮或磷的芳基。術(shù)語"雜環(huán)堿基"是指在環(huán)中具有至少一個(gè)雜原子如氧、硫、氮或磷的非芳族環(huán)狀基團(tuán)。雜芳族基團(tuán)如上文對(duì)芳基的描述一樣任選地被取代。雜環(huán)基可任選地由一個(gè)或多個(gè)選自以下基團(tuán)的部分取代烷基、面素、囟代烷基、幾基、羧基、?；?、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷氨基、二烷氨基、芳氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巰基、亞胺基、磺?；⒘蛲榛?、亞磺?；?、氨磺酰基、酯、羧酸、酰胺、膦?；?、次膦?；⒘柞；㈧?、硫酯、硫醚、酰卣、酐、肟、肼、氨基曱酸、膦酸、膦酸酯或任何其它可行的不抑制該化合物藥理活性的官能團(tuán)，這些官能團(tuán)或者未受保護(hù)，或者根據(jù)需要受保護(hù)，保護(hù)方法如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知，如Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,JohnWileyandSons,SecondEdition,1991所教導(dǎo)的方法，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中。雜芳族基團(tuán)可根據(jù)需要部分或全部氫化。作為一個(gè)非限制性實(shí)施例，可使用二氫吡啶代替吡啶?？筛鶕?jù)需要或預(yù)期保護(hù)雜芳基上的氧和氮官能團(tuán)。適合的保護(hù)基是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，包括三曱基曱硅烷基、二曱基己基曱硅烷基、叔丁基二曱基曱硅烷基和叔丁基二苯基曱硅烷基、三苯曱基或取代三苯甲基、烷基、?；?，如乙?；?、丙酰基、曱磺酰基和對(duì)曱苯磺?；?。術(shù)語嗜啶、噤呤、雜芳族堿基或雜環(huán)堿基包括但不限于腺嘌呤、N、烷基嘌呤、NS-?；堰?其中?；鶠镃(O)(烷基、芳基、烷芳基或芳烷基)、W-芐基嘌呤、N^鹵代噤呤、N氣乙烯基嘌呤、N氣乙炔基嘌呤、NS-?；堰?、N^羥烷基嘌呤、Nt硫烷基嘌呤、N、烷基嘌呤、v-烷基-6-硫代噤呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-氟胞嘧咬、5-曱基胞嘧"定、6-氮雜嘧啶(包括6-氮雜胞嘧咬)、2-和/或4-巰基嘧啶、尿嘧啶、5-鹵代尿嘧啶(包括5-氟尿嘧啶)、C^-烷基嘧啶、CS-芐基嘧啶、CS-卣代嘧啶、(35-乙烯基嘧啶、CL乙炔基嘧啶、CL?；滓?、CS-羥烷基嘌呤、C、酰氨基嘧啶、C、氰基嘧啶、CS-硝基嘧啶、CS-氨基嘧啶、N、烷基噪呤、N、烷基-6-硫代嘌呤、5-氮雜胞苷基、5-氮雜尿嘧啶基、三唑p比咬基、咪唑并吡啶基、吡咯并嘧啶基和吡唑并嘧咬基。嘌呤》咸基具體地包括但不限于鳥。票呤、腺噤呤、次黃噤呤、2,6-二氨基嘌呤和6-氯嘌呤。可根據(jù)需要或期望對(duì)堿基上的氧和氮官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)。適合的保護(hù)基是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，包括三曱基曱硅烷基、二甲基己基曱硅烷基、叔丁基二曱基曱硅烷基和叔丁基二苯基曱硅烷基、三苯曱基、烷基，以及?；?，如乙酰基和丙?；趸轻G基和對(duì)甲苯磺?；?。或者，嘧啶、噪呤、雜芳族堿基或雜環(huán)堿基可任選地被取代，使其形成可在體內(nèi)被裂解的可行前藥。適合取代基的實(shí)例包括酰基部分、胺或環(huán)丙基(例如2-氨基、2，6-二氨基或環(huán)丙基鳥苷)。術(shù)語"氨基酸"包括天然存在的和合成的a、(3、Y或S氨基酸，包括但不限于丙氨酰、纈氨酰、亮氨酰、異亮氨酰、脯氨酰、苯丙氨酰、色氨酰、曱硫氨酰、甘氨酰、絲氨酰、蘇氨酰、半胱氨酰、酪氨酰、天冬酰胺酰、谷氨酰胺酰、天冬氨酰、谷氨酰、賴氨酰、精氨酰、組氨酰、P-丙氨酰、(3-纈氨酰、P-亮氨酰、(3-異亮氨酰、(3-脯氨酰、P-苯丙氨酰、P-色氨酰、(3-甲硫氨酰、(3-甘氨酰、(3-絲氨酰、P-蘇氨酰、(3-半胱氨酰、p-酪氨酰、P-天冬酰胺酰、(3-谷氨酰胺酰、(3-天冬氨酰、(3-谷氨酰、p-賴氨酰、(3-精氨酰和P-組氨酰。方法步驟詳述1.合成活化糖(1-01-氯-3，5-二-0-甲苯酰-2-脫氧-L-核糖)以下描述的合成步驟能分離和儲(chǔ)存卣-糖(例如氯-糖)，并保持手性特征。迄今為止還沒有獲得過這種成果。生產(chǎn)卣-糖(例如氯-糖)有三個(gè)步驟首先將為半縮醛的呋喃糖(如2-脫氧核糖)轉(zhuǎn)變?yōu)橥榛s醛或烷基糖苷(如l-0-曱基-2-脫氧核糖)；然后如果需要的話，任選地保護(hù)剩余的游離羥基為例如酯基(保護(hù)酯可由約3-20個(gè)碳的?；纬桑瑑?yōu)選為7-15個(gè)碳的芳?；?，更優(yōu)選為苯曱酰基或取代苯曱?；?，最優(yōu)選為曱苯曱?；?；第三是使用無水氫卣酸(如原位產(chǎn)生的HC1)以囟素(例如氯)取代烷氧基(例如甲氧基)。l)烷基糖苷的形成盡管可使用任何醇(如曱醇或乙醇)由^^喃糖(如2-脫氧核糖)的半縮醛形成縮醛基團(tuán)，但優(yōu)選甲醇。曱醇基團(tuán)是隨后卣素取代反應(yīng)的良好離去基團(tuán)。盡管以下的描述可能包含曱醇，但應(yīng)當(dāng)理解的是，還可以使用另一種醇，例如乙醇。在酸性條件下進(jìn)行半縮醛向烷基糖香(例如曱基糖苦)的轉(zhuǎn)變，隨后用除酸劑猝滅。將起始化合物如2-脫氧核糖與和化學(xué)計(jì)量過量的醇(例如曱醇)以及催化量的酸混合。適合的催化酸包括有機(jī)磺酸，如曱苯磺酸和曱磺酸，以及羧酸，優(yōu)選有機(jī)磺酸，如曱苯磺酸和曱磺酸。監(jiān)測反應(yīng)至結(jié)束，然后加入除酸劑猝滅酸催化劑。適合的除酸劑包括本領(lǐng)域已知的任何除酸劑，包括但不限于三乙胺、吡啶和二曱基氨基吡啶。通過去除過量醇來完成糖苷分離，優(yōu)選通過真空蒸餾。半縮醛向烷基糖苷的轉(zhuǎn)變可在任何達(dá)到需要結(jié)果的溫度進(jìn)行，即以適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行。優(yōu)選的溫度是由室溫至30'C。2)任選地保護(hù)烷基糖苷的游離羥基可任選地保護(hù)烷基糖苷的游離羥基，以防止其在后續(xù)的卣化物取代步驟中相互作用。保護(hù)基包括本領(lǐng)域已知的任何合適的保護(hù)基，包括?；蜁豕柰榛??？赏ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法完成對(duì)游離羥基的保護(hù),如Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis:JohnWileyandSons,SecondEdition,1991所教導(dǎo)的方法。例如，可通過將烷基糖苦溶解在合適的溶劑中，任選地在除酸劑存在下使其與合適的酰卣反應(yīng)，以?；Ｗo(hù)前一步驟的糖苷。適合的除酸劑包括本領(lǐng)域已知的任何除酸劑，包括但不限于三乙胺、吡啶和二曱基氨基吡啶。保護(hù)可在任何適合試劑的溫度和溶解性的溶劑中進(jìn)行。溶劑可由任何質(zhì)子惰性溶劑組成，包括但不限于烷基溶劑(如己烷和環(huán)己烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二嗯烷、乙腈、二氯甲烷、二氯乙烷、二乙醚、他啶、二甲基曱酰胺(DMF)、二曱亞石風(fēng)(DMSO)、二曱基乙酰胺或其任意組合，但優(yōu)選乙酸乙酯。該反應(yīng)可在任何使反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行。優(yōu)選的溫度是室溫。可通過合適的鑒定技術(shù)跟蹤反應(yīng)過程。當(dāng)反應(yīng)結(jié)束后，可將除酸劑鹽提取入酸性水溶液中，有機(jī)溶液濃縮待以后使用。3)生產(chǎn)鹵糖按照本發(fā)明，通過使受保護(hù)的烷基糖苷進(jìn)行取代反應(yīng)，可使步驟2)的任選受保護(hù)的糖苷轉(zhuǎn)變?yōu)樨仗?，?yōu)選氯糖。為進(jìn)行該轉(zhuǎn)變，將受保護(hù)糖苷的有機(jī)溶液與化學(xué)計(jì)量過量的酰卣混合，接著加入醇。囟糖可在任何適于試劑的溫度和溶解性的溶劑中進(jìn)行。溶劑可由任何質(zhì)子惰性溶劑構(gòu)成，包括但不限于烷基溶劑(如己烷和環(huán)己烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二嗯烷、乙腈、二氯曱烷、二氯乙烷、二乙醚、吡啶、二曱基曱酰胺(DMF)、二曱亞砜(DMSO)、二曱基乙酰胺或其任意組合，但優(yōu)選無雜質(zhì)。優(yōu)選通過將受保護(hù)的糖苷混合在非極性質(zhì)子惰性溶劑(如醚或石油醚)中完成該轉(zhuǎn)變烯糖可在任何適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行，優(yōu)選溫度在室溫以下，如1(TC。在一個(gè)實(shí)施方案中，產(chǎn)物形成時(shí)就結(jié)晶。然后過濾晶體卣糖，用溶劑如石油醚漂洗，干燥，獲得可儲(chǔ)存形式的卣糖。2.偶聯(lián)反應(yīng)偶聯(lián)反應(yīng)在l-卣糖(如l-卣代-2-脫氧核糖)的l-碳與嘧啶、嘌呤、雜環(huán)或雜芳?jí)A基環(huán)上的氮之間形成C-N鍵。為控制環(huán)上氮的偶聯(lián)，可任選地用本領(lǐng)域已知的任何合適保護(hù)基保護(hù)堿基的羰基和胺基(如果有的話)。用于例如尿嘧啶、胸腺嘧啶的羰基的保護(hù)基包括三曱基曱硅烷基和三乙基曱硅烷基、叔丁基二曱基甲硅烷基、甲基和其它烷基醚。用于例如腺噪呤和鳥。票呤的胺基的保護(hù)基包括三苯曱基、曱苯磺酸酯、酰基如乙?；?、苯曱酰以及烷氧基羰基，如苯曱酰氧基羰基、叔丁氧基羰基和芴曱基羰基。可使用本領(lǐng)域已知的任何方法使卣糖與嘧啶、嘌呤、雜環(huán)或雜芳?jí)A基偶聯(lián)，以獲得任選受保護(hù)的核苷。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，任選在Lewis酸(如四氯化錫、四氯化鈦或三氟曱磺酸三曱基曱硅烷酯)存在下，將活化的。票呤或嘧啶堿基(優(yōu)選曱硅烷化堿基)偶聯(lián)至環(huán)。對(duì)于卣糖與嘧啶、噤呤、雜環(huán)或雜芳?jí)A基(如尿嘧啶或胸腺嘧啶)的偶聯(lián)，可首先將堿基與曱硅烷化劑如六曱基二硅氮烷混合來活化堿基，例如在尿嘧啶或胸腺嘧啶的情況下曱硅烷化酰胺羰基。然后可將獲得的活化堿基與上文描述的任選受保護(hù)的卣糖混合，形成受保護(hù)的核苷。圖3描述了這種偶聯(lián)的一個(gè)非限制性實(shí)施例。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選在弱酸催化劑如硫酸銨存在下，在提高的溫度下，使嘧啶、嘌呤、雜環(huán)或雜芳?jí)A基(如尿嘧啶或胸腺嘧啶)與化學(xué)計(jì)量過量的曱硅烷化劑如六曱基二硅氮烷混合，以形成曱硅烷化衍生物。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，曱硅烷化衍生物與溶劑化條件下先前未分離的卣糖混合，以形成核苷。然后，如果有需要，可利用本領(lǐng)域已知的任何方法，去保護(hù)任選受保護(hù)的核苷。在一個(gè)非限制性實(shí)例中，如果核苷用甲苯甲?；Ｗo(hù)，則用弱堿處理受保護(hù)的核苷可去除二曱苯曱酰基，得到去保護(hù)的核苷。3.制備芳基磺酸吡啶鏘的方法<formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula>該方法關(guān)鍵的原料是合適取代的芳基磺酸和吡啶翁t類似物。芳基磺酸和吡咬鏡堿類似物可購買，或通過任何已知方法制備，包括標(biāo)準(zhǔn)的親核和親電子芳族取代。使芳基磺酸和吡啶鏡堿平衡，形成標(biāo)題化合物，優(yōu)選未進(jìn)一步催化。質(zhì)子交換反應(yīng)可在任何達(dá)到需要結(jié)果的溫度進(jìn)行，即以適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行。優(yōu)選的溫度是由室溫至75。C?？蛇x擇任何可達(dá)到必需溫度并可溶解反應(yīng)組分的反應(yīng)溶劑，但優(yōu)選不溶解目的鹽產(chǎn)物。非限制性實(shí)例是任何質(zhì)子惰性溶劑，包括但不限于烷基或卣代烷基溶劑(如己烷、環(huán)己烷、二氯曱烷或二氯乙烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二螺烷、乙腈、二乙醚、吡啶、二曱基曱酰胺(DMF)、二曱亞砜(DMSO)、二曱基乙酰胺或其任意組合。優(yōu)選的溶劑體系是無水二氯甲烷，然后是環(huán)己烷，以促進(jìn)鹽產(chǎn)物的原位沉淀。4.由尿苷核苷制備胞苷核苷的方法該方法關(guān)鍵的原料是合適取代的尿苷核香，如P-L-2'-脫氧尿苷。合適取代的尿苷核苷，如(3-L-2'-脫氧尿苦，可購買或通過任何已知方法(包括本文公開的方法)制備。任選在相轉(zhuǎn)移催化劑如上文公開的芳基磺酸吡啶輸存在下，與磺酰卣(如曱苯磺酰卣，特別是曱苯磺酰氯)反應(yīng)，接著用氨(氣態(tài)或液態(tài))處理，完成合適受保護(hù)/取代的尿苷核苷(如任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧尿苷)的胺化，獲得標(biāo)題化合物。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，反應(yīng)在碳酸鉀存在下進(jìn)行。,',"NJxA)碌酰卣(例如Tsa)p,'化N入P'c/"^RB)NH3一P'(/"^胺化反應(yīng)可在任何達(dá)到需要結(jié)果的溫度進(jìn)行，即以適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行，優(yōu)選室溫?？蛇x擇任何可達(dá)到必需溫度并可溶解反應(yīng)組分的反應(yīng)溶劑。非限制性實(shí)例是任何質(zhì)子惰性溶劑，包括但不限于烷基或卣代烷基溶劑(如己烷、環(huán)己烷、二氯甲烷(DCM)或二氯乙烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二嗨烷、乙腈、二乙醚、吡咬、二曱基曱酰胺(DMF)、二曱亞砜(DMSO)、二曱基乙酰胺或其任意組合，優(yōu)選二氯甲烷。如果有必要，可利用本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法，如Greene等，ProtectiveGroupsinOrganicSyntiiesis:JohnWileyandSons,SecondEdition,1991所教導(dǎo)的方法，去保護(hù)任選受保護(hù)的胞香核苦，如AM呆護(hù)的氨基酸型前藥。例如可用HC1的乙酸乙酯溶液于室溫去保護(hù)Boc保護(hù)的氨基酸。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及圖4描述的方法，該方法使進(jìn)行的每個(gè)步驟的生產(chǎn)能力和效率提升，安全性和技術(shù)便利性增加，并使每步的產(chǎn)物純度提高。按照本發(fā)明，一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案由例如用三苯曱基衍生物任選地保護(hù)糖部分5'-位的尿嘧啶核苷原料開始。如下所述任選純化后，任選通過直接加入需要的保護(hù)基如氨?；?'-位保護(hù)(如氨?；?純化的5'-0-受保護(hù)的-尿嘧啶核苷。此3'-受保護(hù)的中間體，例如氨?；虚g體，可任選地在糖部分的5'-位選擇性去保護(hù)。例如，在5'-位三苯甲基化的3'-受保護(hù)中間體可在弱酸性條件下去三苯曱基化，3'-受保護(hù)中間體如氨?；?尿嘧啶核苷轉(zhuǎn)變?yōu)?'-氨酰化胞嘧啶基核苷。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，尿苷核普的5'-位三苯甲基化，接著在3'-位氨酰化，在5'-位選擇性地去保護(hù)，胺化獲得3'-氨?；蘸塑?。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，轉(zhuǎn)變包括以下連續(xù)的步驟1)3'-氨?；蜍蘸塑盏?'-位進(jìn)行0-Boc-保護(hù)；2)尿嘧啶部分曱苯磺?；?；3)胺化甲苯磺酰化尿嘧啶部分，形成胞嘧啶基部分；和4)去除Boc-保護(hù)基，獲得3'-氨酰基-胞嘧啶核普。前述尿嘧啶衍生物轉(zhuǎn)化為胞嘧咬衍生物的步驟顯著改進(jìn)了公斤規(guī)模生產(chǎn)藥用高純度胞苷衍生物。單個(gè)步驟的組合提供了額外的優(yōu)勢使廢物最少，使工廠效率最大化。具體地說，使用0-Boc保護(hù)5'-羥基使終產(chǎn)物中步驟數(shù)和雜質(zhì)最少。此應(yīng)用在3'-Boc-氨酰基為取代基RS時(shí)特別適用。通過此方案，單一去保護(hù)步驟就獲得了目的前藥。由目的胞嘧啶衍生物中分離出尿嘧啶衍生物的選擇性提取步驟也傳遞了上述優(yōu)勢。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，使用以下步驟制備2'-脫氧胞苷核苷。三苯甲基化歩驟此三苯曱基化步驟在有機(jī)溶劑中混合脫氧核糖核苷(2,圖3)與三苯曱基化劑、除酸劑和催化劑。此三苯曱基化步驟將保護(hù)基加入到2-脫氧核糖部分的5'-羥基而不是3'-羥基。三苯甲基化劑可以是三苯曱基卣化物或取代的三苯曱基囟化物，其中所述取代基可以是1-3個(gè)碳的一、二或三烷基，或一、二或三卣素基團(tuán)。除酸劑可以是有機(jī)堿，例如三乙胺或吡啶。優(yōu)選的催化劑是二曱基氨基吡啶(DMAP)。具體地說，該步驟可如下實(shí)施。在除酸劑和催化劑存在下將起始物脫氧核糖核苷與無水有機(jī)溶劑混合。反應(yīng)溶劑是氯化烴、酯和醚，優(yōu)選二氯曱烷或乙酸乙酯，其量在5-30份(體積)/份起始核苷(重量)之間變化，更優(yōu)選為8、9、10或11份。優(yōu)選的除酸劑為吡啶，最小需要量是1份起始核苷，以促進(jìn)核苷部分溶解。優(yōu)選的催化劑是DMAP，其量在1-10mol%/mol起始核苦之間變化，更優(yōu)選為5mol%/mol^士會(huì)沖亥*。然后使混合物與三苯曱基化劑反應(yīng)，形成5'-受保護(hù)的脫氧核糖核普產(chǎn)物。優(yōu)選的三苯曱基化劑是三苯甲基氯和取代的三苯曱基氯，使用量在1-1.3mol/mol起始核苷之間變化，更優(yōu)選為1.1mol/mol起始核苦。三苯甲基化反應(yīng)優(yōu)選在約10。C至約4(TC的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行，更優(yōu)選為3(TC至35。C。反應(yīng)混合物可通過任何已知用于從非極性物質(zhì)中分離極性物質(zhì)的便利技術(shù)純化。例如，可通過水性液-液提取去除含核苷溶液中的吡啶和其它極性雜質(zhì)。優(yōu)選通過水性液-液提取進(jìn)行純化，方法是用酸水溶液連續(xù)提取有機(jī)反應(yīng)混合物，直至基本完全去除吡啶，接著用碳酸氫鈉水溶液和水提取，以將含受保護(hù)核香的溶液的pH調(diào)節(jié)至5-6。產(chǎn)物可由能夠保留非極性雜質(zhì)的有機(jī)溶劑混合物中結(jié)晶出來。優(yōu)選的有機(jī)溶劑是氯化烴和酮，優(yōu)選比率為1:1的二氯曱烷和曱基異丁酮(MIBK)。在該方法中，非極性雜質(zhì)保留在溶液中，獲得高純度產(chǎn)物。?；?去三苯甲基化歩驟如圖3所示，由化合物3至4和化合物4至5的連續(xù)?；腿ト綍趸襟E，包括?；?-脫氧核糖部分的3'羥基，以及去除5'羥基的保護(hù)基。?；蓙碓从谌魏嗡幬锟山邮艿聂人帷⑷魏翁烊籥-氨基酸或如上所述的任何藥物可接受的非天然氨基酸。?；?包括氨?；?提供了表現(xiàn)終產(chǎn)物特征的前藥。酰化可按照任何用醇酯化酸或氨基酸的酯化技術(shù)進(jìn)行。在氨基酸情況下，其氨基由BOC保護(hù)。該步驟的優(yōu)選實(shí)施例包括在催化劑存在下，使無水有機(jī)溶劑中的5'-三苯曱基-脫氧核糖核苷和羧酸的混合物與碳二亞胺在相同有機(jī)溶劑中的溶液于低溫(10-14。C)反應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述羧酸是N-保護(hù)的氨基酸，優(yōu)選Boc-丄-纈氨酸，其量在1-1.3mol起始核苷的范圍內(nèi)變化，優(yōu)選1.1mol。反應(yīng)的優(yōu)選溶劑是氯化烴、酯或醚，優(yōu)選二氯曱烷和/或乙酸乙酯，其量在5-15份(體積)/份起始核苷(重量)之間變化，更優(yōu)選為6、7或8份。優(yōu)選的催化劑是取代的吡啶，優(yōu)選DMAP,其量在1-10molQ/。/mol起始核苷之間變化，更優(yōu)選最多5mol%/mol起始核苷。優(yōu)選的碳二亞胺是DCC,其量在1-1.5mol起始核苷的范圍內(nèi)變化，優(yōu)選1.2mo1。通過過濾中性尿素副產(chǎn)物，并提取含核普的溶液，以去除極性雜質(zhì)，由反應(yīng)混合物中分離出?；虚g體。優(yōu)選通過水性液-液^是取進(jìn)行純化，方法是用酸水溶液連續(xù)提取有機(jī)反應(yīng)混合物，以去除DMAP,接著用碳酸氬鈉水溶液進(jìn)行提取，以將有機(jī)相的pH調(diào)節(jié)至5-6,最后用鹽水提取。在部分蒸餾反應(yīng)溶劑之后可能必須再進(jìn)行過濾來去除DCU。通過酸催化硫醇交換完成去三苯曱基化。例如，在酸催化劑存在下，在20-40。C的溫度范圍內(nèi)，優(yōu)選28-32°C,使部分蒸餾的氨?；綍趸?核苷溶液與硫醇反應(yīng)。硫醇優(yōu)選為巰基乙醇和乙硫醇，其量在1-1.3mol/mol起始核苷的范圍內(nèi)變化，優(yōu)選1.1mol。優(yōu)選的催化劑是對(duì)曱苯磺酸，其量在1-10mol。/。/mol起始核苦之間變化，更優(yōu)選7-8mol%/mol起始核苷。反應(yīng)用胺猝滅，優(yōu)選三乙胺，其量在1-10mol%/mol起始核芬之間變化，更優(yōu)選7-8mol%/mol起始核苷。反應(yīng)混合物用鹽水提取，以去除胺鹽。在蒸餾反應(yīng)溶劑后，酰化中間體由能夠保留大部分非極性雜質(zhì)的有機(jī)溶劑混合物中結(jié)晶出來。優(yōu)選的有機(jī)溶劑是烴和芳烴，優(yōu)選l:l比率的二曱苯和己烷，其量在2-4份(體積)/份起始核苷(重量)之間變化。通過用以上使用的相同溶劑混合物處理產(chǎn)物幾次(通常3-5次)，直至由受保護(hù)的核苷中去除非極性雜質(zhì)，籍此去除非極性雜質(zhì)。Boc-保護(hù)-曱苯磺?；?胺化-去保護(hù)歩驟本發(fā)明至少部分基于以下發(fā)現(xiàn)可在不用分離中間體的情況下，連續(xù)地對(duì)5'羥基進(jìn)行Boc保護(hù)，對(duì)尿嘧啶部分的C-4曱苯磺?；⑵滢D(zhuǎn)變?yōu)榘被?，換句話說，可以不間斷的方式進(jìn)行。為達(dá)到有效高產(chǎn)，反應(yīng)一完成就使用Boc-保護(hù)的尿嘧啶核苦?？赏ㄟ^任何便利的鑒定技術(shù)，如高效液相層析(HPLC)、薄層層析(TLC)等跟蹤反應(yīng)，以測定反應(yīng)終點(diǎn)。在終點(diǎn)后立即向反應(yīng)混合物中加入曱苯磺?；磻?yīng)的反應(yīng)物。優(yōu)選不讓Boc保護(hù)的中間體以完成形式靜置超過3小時(shí)，更優(yōu)選不超過1小時(shí)。另外，碳酸鉀堿為倍半水合物形式，要新鮮制備，以使甲苯磺?；磻?yīng)在甲苯磺酰化劑一加入時(shí)就快速完成。另外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，尤其是對(duì)于公斤規(guī)模制品，使用不新鮮的碳酸鉀鹽倍半水合物使反應(yīng)非常慢，導(dǎo)致反應(yīng)中間體分解，必須額外加入試劑。已發(fā)現(xiàn)倍半水合物形式的碳酸鉀使曱苯磺醜化反應(yīng)可在低溫下進(jìn)行，這在存在氨?；鶗r(shí)特別理想，避免了外消旋。曱苯磺?；磻?yīng)一完成，就在惰性氣氛和低真空下過濾反應(yīng)混合物，以使所接觸的濕度最小。胺化反應(yīng)使用液態(tài)氨的二氯曱烷溶液也是本發(fā)明的重要特征，因?yàn)槠湓试S加入更精確量的胺化劑。當(dāng)曱苯磺酰化劑為曱苯磺酰氯時(shí)，胺化結(jié)束時(shí)胞普對(duì)尿苦的比率在12-15比1的范圍內(nèi)。生物開始大規(guī)模制備胞苷核苷的重要成就，因?yàn)樵谝郧斑@只能通過柱層析實(shí)現(xiàn)。因此，選擇性提取有效去除了反應(yīng)溶液中的尿苷衍生物。去保護(hù)步驟可在溶液中雜質(zhì)尿苷衍生物最大為2%的情況下進(jìn)行，而不會(huì)損害終產(chǎn)物的純度。在本發(fā)明的一個(gè)具體的實(shí)施方案中，使用以下步驟制備2'-脫氧胞普核苷。a)在催化劑存在的情況下，于受控溫度(23-26。C)使3'-?；?脫氧核糖核苷與BOC-酐在無水有機(jī)溶劑中的溶液反應(yīng)。反應(yīng)的優(yōu)選溶劑是氯化烴、酯或醚，優(yōu)選二氯曱烷和/或乙酸乙酯，其量在5-15份(體積)/份起始核苷(重量)之間變化，更優(yōu)選為6、7或8份。優(yōu)選的催化劑是取代的吡啶，優(yōu)選DMAP,其量在l-10mol。/。/mol起始核苷之間變化，更優(yōu)選5mol%/mol起始核苷。b)在碳酸鉀倍半水合物和DMAP-曱苯磺酸鹽存在下，于25-27°C使a)的反應(yīng)溶液與磺酸衍生物如對(duì)曱苯磺酰氯反應(yīng)。c)過濾鹽，用二氯曱烷稀釋反應(yīng)溶液，接著與氨在18-22。C反應(yīng)。d)在胞苷衍生物轉(zhuǎn)變?yōu)槠潲}酸鹽時(shí)，通過用有機(jī)溶劑混合物選擇性提取尿苷衍生物，純化胞苷衍生物。優(yōu)選的極性溶劑組合是在約1:1至約5:1(體積)范圍內(nèi)的水和曱醇，更優(yōu)選梯度比例由1.5:1至3:1。優(yōu)選的非極性溶劑組合是在約4:1至約2:1(體積)范圍內(nèi)的己烷和乙酸乙酯，更優(yōu)選梯度比例由3:1至2:1。e)在33-35°C，使胞苷衍生物的曱醇溶液與3-6當(dāng)量、更優(yōu)選4當(dāng)量的HC1反應(yīng)。f)加入乙酸乙酯使產(chǎn)物結(jié)晶。5.制備2'-脫氧-P-L-核苷的5'-0-氨?；苌锏姆椒╮-。丄oi.0H"V、,d,zNHR"—「0丄(CRR')^NHR'P「unzV乂NHR"B廠(_卜"H。八(cRR')ir卿。HOH去保護(hù)W-1OH該方法的關(guān)鍵原料是合適取代的2'-脫氧-P-D或(3-L-核苷。2'-脫氧-(3-D或(3-L-核苷可購買，或通過任何已知方法制備，包括用D或L脫氧核糖的標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)反應(yīng)。然后可通過將氨基酸選擇性偶聯(lián)至核苷沒有任何保護(hù)的2'-脫氧-p-核苷，制備標(biāo)題化合物。偶聯(lián)反應(yīng)可使用促進(jìn)偶聯(lián)的合適偶聯(lián)劑完成。偶聯(lián)劑的一些非限制性實(shí)例是Mitsunobu型試劑(例如偶氮二羧酸二烷基酯，如偶氮二羧酸二異丙酯和偶氮二羧酸二乙酯)以及三苯基膦或各種類型的碳二亞胺。偶聯(lián)反應(yīng)可在任何達(dá)到需要結(jié)果的溫度進(jìn)行，即以適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行?？蛇x擇任何可達(dá)到必需溫度并可溶解反應(yīng)組分的反應(yīng)溶劑。非限制性實(shí)例是任何質(zhì)子惰性溶劑，包括但不限于烷基或卣代烷基溶劑(如己烷、環(huán)己烷、二氯曱烷或二氯乙烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二嗯烷、乙腈、二乙醚、吡啶、二曱基曱酰胺(DMF)、二曱亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺或其任意組合。6.制備2'-脫氧-(3-L-核苷的3'力-氨?；苌锏姆椒ㄔ摲椒ǖ年P(guān)鍵原料也是合適取代的2'-脫氧-P-D或p-L-核苷。2'-脫氧-P-D或p-L-核普可購買，或通過任何已知方法制備，包括用D或L脫氧核糖的標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)反應(yīng)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>去保護(hù)l1±^°"首先通過用合適的氧保護(hù)基如?；驎豕柰榛Ｗo(hù)基選擇性保護(hù)5'-羥基，并任選地保護(hù)雜環(huán)或雜芳石ij^中的任意游離氨基，制備標(biāo)題化合物。隨后，可將游離的3'-羥基偶聯(lián)至AM呆護(hù)的oc或f3氨基酸。偶聯(lián)反應(yīng)可使用促進(jìn)偶聯(lián)的合適偶聯(lián)劑完成。偶聯(lián)劑的一些非限制性實(shí)例是Mitsunobu型試劑(例如偶氮二羧酸二烷基酯，如偶氮二羧酸二異丙酯和偶氮二羧酸二乙酯)以及三苯基膦或各種類型的碳二亞胺。偶聯(lián)反應(yīng)可在任何達(dá)到需要結(jié)果的溫度進(jìn)行，即以適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行?？蛇x擇任何可達(dá)到必需溫度并可溶解反應(yīng)組分的反應(yīng)溶劑。非限制性實(shí)例是任何質(zhì)子惰性溶劑，包括但不限于烷基或面代烷基溶劑(如己烷、環(huán)己烷、二氯曱烷或二氯乙烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二螺烷、乙腈、二乙醚、吡啶、二甲基曱酰胺(DMF)、二曱亞砜(DMSO)、二曱基乙酰胺或其任意組合。7.制備2'-脫氧-p-L-核苷的3'，5'-雙-0-氨?；苌锏姆椒ㄔ摲椒ǖ年P(guān)鍵原料也是合適取代的2'-脫氧-P-D或p-L-核苦。2'-脫氧-(3-D或p-L-核苷可購買，或通過任何已知方法制備，包括用D或L脫氧核糖的標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)反應(yīng)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>反應(yīng)可在任何達(dá)到需要結(jié)果的溫度進(jìn)行，即以適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行?？蛇x擇任何可達(dá)到需要溫度并可溶解反應(yīng)組分的反應(yīng)溶劑。非限制性實(shí)例是任何質(zhì)子惰性溶劑，包括但不限于烷基或卣代烷基溶劑(如己烷、環(huán)己烷、二氯曱烷或二氯乙烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二噁烷、乙腈、二乙醚、吡啶、二曱基曱酰胺(DMF)、二甲亞砜(DMSO)、二曱基乙酰胺或其任意組合。隨后，可將游離的3'-輕基偶聯(lián)至AM呆護(hù)的ct或(3氨基酸。偶聯(lián)反應(yīng)可使用促進(jìn)偶聯(lián)的合適偶聯(lián)劑完成。偶聯(lián)劑的一些非限制性實(shí)例是Mitsunobu型試劑(例如偶氮二羧酸二烷基酯，如偶氮二羧酸二異丙酯和偶氮二羧酸二乙酯)以及三苯基膦或各種類型的碳二亞胺。偶聯(lián)反應(yīng)可在任何達(dá)到需要結(jié)果的溫度進(jìn)行，即以適于反應(yīng)以可接受速率進(jìn)行且沒有促進(jìn)分解或過量副產(chǎn)物形成的溫度進(jìn)行?？蛇x擇任何可達(dá)到必需溫度并可溶解反應(yīng)組分的反應(yīng)溶劑。非限制性實(shí)例是任何質(zhì)子惰性溶劑，包括但不限于烷基或卣代烷基溶劑(如己烷、環(huán)己烷、二氯曱烷或二氯乙烷)、曱苯、丙酮、乙酸乙酯、二噻烷、THF、二嚼烷、乙腈、二乙醚、吡啶、二甲基甲酰胺(DMF)、二曱亞砜(DMSO)、二曱基乙酰胺或其任意組合。本文提供了優(yōu)選實(shí)施方案的詳述。但是，應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明可以各種形式實(shí)施。因此，本文公開的具體詳述不能被理解為是限制性的，而應(yīng)當(dāng)理解為是權(quán)利要求書的依據(jù)，以及教導(dǎo)本領(lǐng)域技術(shù)人員在幾乎任何合適的詳細(xì)體系、結(jié)構(gòu)或方式中應(yīng)用本發(fā)明的代表性依據(jù)。盡管以其代表性實(shí)施方案呈現(xiàn)和描述了本發(fā)明，但可對(duì)其在形式和細(xì)節(jié)上進(jìn)行各種其它改變、省略和添加，而不偏離本發(fā)明的精4申和范圍。盡管結(jié)合優(yōu)選實(shí)施方案描述了本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍不限于所提出的具體形式，正相反，其涵蓋了改變、修飾和等價(jià)方案，這些方案同樣包括在所附權(quán)利要求所定義的本發(fā)明精神和范圍之內(nèi)。本發(fā)明由以下的章節(jié)進(jìn)一步闡述。提出其中包含的工作實(shí)施例以有助于理解本發(fā)明。以下的實(shí)施例闡述了本發(fā)明的方法和產(chǎn)物，但該章節(jié)無意也不應(yīng)被解釋為以任何方式限制后附權(quán)利要求書所提出的本發(fā)明。等同、相似或合適的溶劑、試劑或反應(yīng)條件可代替本文描述的那些具體的溶劑、試劑或反應(yīng)條件，而不偏離合成方法的一般范圍。實(shí)施例實(shí)施例12-脫氣-L-核糖曱基糖苷原料包括2-脫氧-L-核糖，27Kg;曱醇，189Lt;甲磺酸，0.27Lt;二曱基氨基吡啶，2.46Kg;曱苯，55Lt;乙酸乙酯，28Lt。為進(jìn)行曱基糖苷形成，將162Lt曱醇注入到攪拌的反應(yīng)器中。然后將27Kg起始糖L-2-脫氧核糖溶解在甲醇中，溫度保持在25-30。C。接著將酸性催化劑甲磺酸MSA0.27Lt溶解在27Lt曱醇中，并力口入反應(yīng)物中。反應(yīng)用薄層層析跟蹤，以確認(rèn)完全轉(zhuǎn)化(通常15-30分鐘)(TLCDCM/MeOH,9:1)。然后加入2.46Kg的二甲基氨基p比咬DMAP猝滅酸性催化劑。攪拌反應(yīng)介質(zhì)約30分鐘，確認(rèn)此時(shí)的pH約為9。真空蒸餾曱醇，小心保持溫度在5(TC以下。然后，在蒸餾結(jié)束時(shí)，導(dǎo)入27Lt曱苯，繼續(xù)真空蒸餾，直至其終止。還需要用曱苯(14Lt)進(jìn)行兩次蒸餾，以確保去除殘余的曱醇。然后用乙酸乙酯(14Lt)蒸餾混合物兩次。過程分析水(KarlFisher)在0.1%以下。未檢測到甲醇(依據(jù)是當(dāng)使等份的混合物與對(duì)曱苯酰氯反應(yīng)時(shí)沒有生成對(duì)曱基苯甲酸曱酯)。實(shí)施例23,5-0-二甲苯曱?；?2-脫氧核糖甲基糖苷試劑包括乙酸乙酯，100Lt;甲苯酰氯，55.8Lt;三乙胺，66Lt。通過酰化實(shí)施例1的曱基糖苷生產(chǎn)受保護(hù)的曱基糖苷。將步驟1的產(chǎn)物溶解在54Lt乙酸乙酯中，在氬氣下，攪拌內(nèi)容物并冷卻至3-5。C。加入6Lt三乙胺TEA，于3-5。C循環(huán)冷卻的液體。然后將55.8Lt曱苯酰氯的54Lt乙酸乙酯溶液泵入上述混合物中，其速率使反應(yīng)混合物的溫度不升至15-17。C以上。在加入前50%時(shí)保持該條件。此后，停止冷卻系統(tǒng)，繼續(xù)加入，使反應(yīng)物達(dá)到32-35。C。繼續(xù)攪拌，每2小時(shí)通過TLC(己烷/乙酸乙酯，3/1)評(píng)價(jià)反應(yīng)進(jìn)程，當(dāng)反應(yīng)明顯完成時(shí)，通過HPLC評(píng)價(jià)反應(yīng)進(jìn)程。在加入曱苯酰氯后反應(yīng)時(shí)間通常約為12小時(shí)。用含0.54Lt乙酸的5.4Lt硫酸的54Lt水溶液漂洗獲得的混合物(攪拌30分鐘)。用二氯甲烷DCM(2x11Lt)提取7jc相兩次，將DCM提取物與總有機(jī)相混合。用鹽水(2x34Lt)漂洗有機(jī)相，然后蒸餾約50%的溶劑，保存濃縮物(107.3Kg)用于下一步驟。實(shí)施例3氯糖試劑包括步驟2的產(chǎn)物，相當(dāng)于7.5Kg2-脫氧-L-核糖；乙酰氯，30Lt;石油醚，36Lt;甲醇，6Lt。通過使實(shí)施例2的產(chǎn)物進(jìn)行支鏈取代反應(yīng)生產(chǎn)氯糖。按照本發(fā)明的發(fā)現(xiàn)，將含相當(dāng)于7.5Kg2-脫氧-L-核糖的步驟2的乙酸乙酯溶液注入玻璃襯里的反應(yīng)器。通過真空蒸餾去除乙酸乙酯(夾套溫度為5(TC)?；旌衔餃囟鹊陀?5°C,消除真空使氬氣進(jìn)入反應(yīng)器。去除乙酸乙酯后，將30Lt乙酰氯注入反應(yīng)器，接著注入30Lt石油醚。在氬氣下攪拌混合物，使溶液溫度低于8-10。C。然后將6Lt曱醇的6Lt石油醚溶液泵入反應(yīng)器，使溫度保持在8-10。C之間。加入的總時(shí)間約為3.5-4小時(shí)。當(dāng)加入約50%的曱醇時(shí)，觀察到出現(xiàn)大量沉淀，同時(shí)溫度升高至約15-16°C。使溫度降至8-l(TC以下，繼續(xù)加入曱醇。然后于8-10。C再攪拌反應(yīng)混合物4小時(shí)。反應(yīng)混合物包含懸浮在有機(jī)相中的氯糖沉淀。在氬氣下用玻璃濾器過濾產(chǎn)物。當(dāng)沉積出濾餅但還沒干燥時(shí)，用5Lt石油醚漂洗產(chǎn)物兩次。然后將濾餅懸浮在80Lt石油醚中，在氬氣下于2S'C攪拌10分鐘。再過濾產(chǎn)物，如前清洗濾餅。當(dāng)過濾完成時(shí)，用流穿濾餅的氬氣流置換真空，以完全去除溶劑。然后將干燥的濾餅轉(zhuǎn)移至氬氣下的雙層聚乙烯袋中，儲(chǔ)存于15°C。產(chǎn)量為17.7Kg。匯集了超過20個(gè)大規(guī)模批次(17-22Kg)生產(chǎn)的氯糖，這些氯糖具有一致的規(guī)格，限度如下旋光度(1%的DCM溶液，25。C):-119至-123。含量(HPLC):95-97%。含量(氯4艮量滴定)97-98%。實(shí)施例4偶聯(lián)氯糖和曱硅烷基化胸腺嘧啶以生產(chǎn)受保護(hù)的(3-L-胸香(L-TDT)用于該偶聯(lián)反應(yīng)的反應(yīng)物如下。胸腺嘧咬，41.8Kg;硫酸銨，0.67Kg;六甲基二硅氮烷，75Lt;甲苯，42Lt;氯糖，83.53Kg;氯仿，919Lt;乙醇,869Lt。反應(yīng)器用N2(g)流洗10分鐘。將胸腺嘧啶(41.8Kg)、硫酸銨(0.67Kg)、1,1,1,3,3,3-六曱基二硅氮烷(75Lt)和曱苯(42Lt)注入反應(yīng)器中。攪拌反應(yīng)混合物，加熱5-8小時(shí)至輕孩i回流(夾套溫度達(dá)到130。C)(應(yīng)已發(fā)生溶解)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至60°C,真空蒸餾溶劑，同時(shí)加熱至130。C(此步驟去除了過量的1,1,1,3,3,3-六曱基二硅氮烷和曱苯)。注入甲苯(42Lt),繼續(xù)真空蒸餾，夾套達(dá)到145。C。反應(yīng)器可用N2沖洗，同時(shí)于IOO'C真空蒸餾，以餾出僅剩的HMDS(如果有的話)。實(shí)際上，該步驟產(chǎn)生了粘稠可攪拌的反應(yīng)混合物，頂部有白色層，這是所有HMDS都已去除的信號(hào)。可使用氣相層析確保所有的HMDS都已去除。當(dāng)所有的HMDS都已去除時(shí)，將反應(yīng)混合物冷卻至60。C。N2(g)下將無乙醇的氯仿(835Lt)注入反應(yīng)混合物中。攪拌溶液，并冷卻至22°C(+/-2°C)。然后，22。C(+A2。C)下快速分部加入(0.5分鐘)l-氯-2-脫氧-3，5-二-0-曱苯酰丄-核糖(83.53Kg)。在加入前不應(yīng)制備活化糖的溶液。攪拌反應(yīng)混合物2.5小時(shí)。進(jìn)行薄層層析和HPLC，以確保去除了活化糖(TLC),并測定中間體L-TDT(p/oc-23)。當(dāng)TLC不再能顯示出活化糖的點(diǎn)時(shí)，于22。C(+A2。C)再攪拌反應(yīng)混合物l小時(shí)。然后，加入Cdite(約41.86Kg)，將淤漿冷卻至15°C(+/-2°C),緩慢注入乙醇(48L)。攪拌淤漿30分鐘，然后加入碳酸氬鈉(52Kg)的飽和水溶液(約57Lt水)。溶液的pH應(yīng)在5-7之間。通過Celite濾片過濾反應(yīng)混合物，以42Lt氯仿漂洗濾餅兩次。合并濾液(澄清)和清洗液。然后將水(90Lt)注入濾液中。攪拌內(nèi)容物30分鐘，停止攪拌，使內(nèi)容物沉降10分鐘。進(jìn)行HPLC測定胸腺嘧啶是否清除。轉(zhuǎn)移內(nèi)容物進(jìn)行分離，保留底部有機(jī)層。頂部水層作為廢物廢棄。將有機(jī)層再注入反應(yīng)器中。將水(90Lt)注入反應(yīng)器中，攪拌內(nèi)容物30分鐘，停止攪拌，使內(nèi)容物沉降10分鐘。可于約6(TC真空蒸餾內(nèi)容物。保留底部有機(jī)層，廢棄頂部水層。真空蒸餾去除了大部分的有機(jī)溶劑，然后于室溫在攪拌下將95%乙醇(95L)注入反應(yīng)器中。攪拌反應(yīng)混合物，并加熱至60-70。C達(dá)0.5小時(shí)，然后通過真空蒸餾去除大部分的溶劑。對(duì)中間體L-TDT進(jìn)行HPLC分析。a-核苷:(3核苷為1:306。將乙醇(678Lt)注入反應(yīng)混合物中，于6(TC攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至20。C,于此溫度攪拌l小時(shí)。過濾反應(yīng)混合物，用95%乙醇(3xl6Lt)徹底清洗。于真空干燥箱中以60'C/800mbar干燥固體至恒重。產(chǎn)量=85.125Kg(82.8%)。實(shí)施例5制備(3-丄-胸苷用曱醇鈉的曱醇溶液去保護(hù)獲得95%收率的純L-dT。實(shí)施例6偶聯(lián)氯糖和甲硅烷基化尿嘧啶以生產(chǎn)受保護(hù)的(3-L-2'-脫氣尿苷(L-丁DTJ)將由尿嘧啶(5.35Kg)、六曱基二硅氮烷(11.9L)、硫酸銨(93g)和曱苯(6.0L)組成的懸浮液加熱至140-150°C,直至獲得澄清溶液(約12小時(shí))。通過減壓蒸餾完全去除曱苯和過量的HMDS/NH3。在氬氣下將曱硅烷基化尿嘧啶轉(zhuǎn)移至含50LCHC13的25加侖玻璃襯里反應(yīng)器中，用20LCHCl3淋洗曱硅烷基化尿嘧啶管道。將霧狀溶液冷卻至22-25°C，一次性加入固體氯糖(8.7Kg)。當(dāng)TLC顯示反應(yīng)結(jié)束時(shí)，攪拌獲得的懸浮液約3小時(shí)。HPLC分析顯示氯-糖的完全消耗，p/a比率=12。用乙醇(15L)稀釋反應(yīng)混合物，攪拌30分鐘。蒸餾氯仿，由反應(yīng)混合物中結(jié)晶出產(chǎn)物。加入水(80L)，繼續(xù)蒸餾。過濾收集固體，于65。C用水(2x80L)、乙醇(50L)和水(2x80L)清洗。過濾濾餅，用乙醇清洗，于60-65。C真空干燥。產(chǎn)量7.31Kg(71%)。該中間體的HPLC分析顯示存在1.36%的a-異構(gòu)體。實(shí)施例7制備P-丄-脫氣尿苷用曱醇鈉的曱醇溶液去保護(hù)荻得96%收率的純L-dU。實(shí)施例8制備5'-0-三苯曱基-2'-脫氧-丄-尿苷(X-TRU)氬氣下將113升二氯曱烷、11升無水吡啶、0.305KgDMAP、11.3Kg粉碎的干燥2'-脫氧-丄-尿苷以及15.3Kg三苯甲基氯加入100加侖玻璃襯里反應(yīng)器中，在劇烈攪拌的情況下將混合物加熱至30-34。C達(dá)12-16小時(shí)。不均勻的化合物逐漸變均勻。反應(yīng)進(jìn)程通過TLC監(jiān)測。結(jié)束時(shí)，用900ml曱醇猝滅反應(yīng)，并冷卻至24-28。C。用38L硫酸水溶液(6.9Kg濃硫酸的70L水溶液)提取混合物兩次，用10%碳酸氬鈉水溶液(30L)提取一次。然后用水(30L)提取混合物，直至pH為5-6。接著將反應(yīng)器夾套加熱至65。C，餾出85%的二氯甲烷。將濃縮的混合物冷卻至25-3(TC，在適度攪拌下用12L曱基異丁酮稀釋。將混合物冷卻至8-l(TC達(dá)2小時(shí)。過濾結(jié)晶塊，用冷二氯曱烷(2-5L)漂洗固體，然后于5(TC真空干燥至恒重，獲得19.18Kg(81.6%)的5'-三苯甲基-L-dU。實(shí)施例9制備5'-0-三苯曱基-3'-CKN-Boc-丄-纈氨酰)-2'-脫氣-丄-尿苷(LTBVU)氬氣下將133升二氯曱烷、0.247KgDMAP、9.65KgN畫Boc-丄國纈氨酸和19.0Kg精細(xì)研磨的干燥5'-0-三苯曱基-2'-脫氧-丄-尿苷加入100加侖的玻璃襯里反應(yīng)器中，在攪拌下將混合物冷卻至10-14°C。氬氣下向25加侖的玻璃襯里反應(yīng)器中加入19L二氯甲烷和10KgDCC(于40。C溶解)。以保持內(nèi)部溫度處于10-14。C之間的速度將DCC溶液緩慢轉(zhuǎn)移至100加侖反應(yīng)器中(l-2小時(shí))。反應(yīng)進(jìn)程通過TLC監(jiān)觀']。結(jié)束時(shí)(2-3小時(shí))，通過助濾劑過濾反應(yīng)物，溶液用硫酸水溶液(1.37L濃硫酸的27.2L水溶液)提取，用10%碳酸氫鈉水溶液(27.2L)提取，直至pH為5-6，用鹽水提取。然后將反應(yīng)器夾套加熱至65°C,餾出85%的二氯曱烷。該濃縮溶液可原樣用于下一步，或者可加入晶種結(jié)晶產(chǎn)物。實(shí)施例10制備3'-0-(N-Boc-丄-纈氨酰V2'-脫氣-丄-尿苷(LBVU)將實(shí)施例9獲得的濃縮溶液冷卻至20-30°C,劇烈攪拌下加入巰基乙醇(3.12L)和對(duì)曱苯磺酸(0.57Kg)。將反應(yīng)混合物加熱至28-32°C,直至TLC顯示反應(yīng)結(jié)束(約5小時(shí))。然后加入三乙胺(0.436L),攪拌溶液30分鐘。用54L鹽水提取溶液，將有機(jī)相濃縮成糊漿。向濃縮物中加入二曱苯(51L),繼續(xù)蒸餾殘余的二氯曱烷。加入己烷(51L),攪拌懸浮液30分鐘。過濾固體，用二曱苯/己烷(l:l)漂洗，直至非極性雜質(zhì)完全去除(約5x)。然后于55。C真空干燥固體至恒重，獲得14.95Kg(87.4%)的3'-0-(N-Boc-L-纈氨酰)-L-dU。實(shí)施例11制備5'-0-Boc-3'-0-(N-Boc-l-纈氨酰)-2'-脫氧-丄-尿香(LBBVU)氬氣下，在攪拌下于23-26。C將32升二氯甲烷、5.29KgLBVU和73gDMAP加入到25加侖的玻璃襯里反應(yīng)器中。在劇烈攪拌下將混合物冷卻至10-14°C。氬氣下向10加侖的玻璃容器中加入11L二氯曱烷和2.7Kg二碳酸二叔丁酯，于22-25。C攪拌。以保持內(nèi)部溫度處于23-26t:之間的速度將二碳酸二叔丁酯溶液緩慢轉(zhuǎn)移至25加侖反應(yīng)器中(l-2小時(shí))。反應(yīng)進(jìn)程通過TLC(10%MeOH的二氯曱烷溶液)監(jiān)測。結(jié)束時(shí)(2-3小時(shí))，將反應(yīng)物立即用于實(shí)施例12。實(shí)施例12制備5'-0曙Boc-3'隱0畫(N-Boc國L-纈氨酰)-2'-脫氧國L國胞香(LBBVC)向?qū)嵤├?1的LBBVU溶液中加入3.96Kg粉碎的新鮮制備的K2C031.5H20,將混合物于23-26。C攪拌15分鐘。然后加入DMAP曱苯磺酸鹽(0.117Kg)和曱苯磺酰氯(2.4Kg)，于25-27。C劇烈攪拌混合物。使用己烷/乙酸乙西旨/曱醇(l:l:0.1)通過TLC監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。7小時(shí)后在弱真空和氬氣流下通過助濾劑過濾反應(yīng)混合物，以卩吏接觸的空氣和濕度最小。用二氯曱烷(3x5L)漂洗鹽。氬氣下將二氯曱烷溶液和漂洗液合并在100加侖的玻璃襯里反應(yīng)器中。在加入32L二氯甲烷后，將溶液冷卻至3-5。C,加入2.1L液態(tài)氨。密封反應(yīng)器，使反應(yīng)混合物緩慢升至18-22°C。反應(yīng)在10小時(shí)內(nèi)完成，對(duì)反應(yīng)混合物的分析(HPLC)揭示胞苷/尿苷的比率為11。實(shí)施例13選擇性去除尿苦和其它非堿性組分將反應(yīng)溶液加熱至28-30°C,用水提取兩次，并用硫酸水溶液提取，直至pH達(dá)到6.5-7.0。將二氯曱烷蒸餾至1/4體積，用甲醇(27L)稀釋反應(yīng)溶液。繼續(xù)蒸餾，直至二氯曱烷完全去除。將反應(yīng)溶液冷卻至10-15。C,用稀HCl水溶液酸化至pH2，并用水(27L)稀釋。力口入水(19Kg),接著加入乙酸乙酯(9Kg)。于l(TC攪拌混合物IO分鐘。加入己烷(8.5Kg)、乙酸乙酯(8.5Kg)和水(12.5Kg);攪拌混合物15分鐘，然后分離各相。如前所述再處理一次水相，但提取溶劑加入的順序變?yōu)榧和?8.5Kg)、水(12.5Kg)和乙酸乙酯(8.5Kg)。后一操作再重復(fù)一次，獲得的水相用HPLC評(píng)價(jià)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)BOC-val-LdU低于2%。用活性炭澄清后，用10%碳酸氬鈉溶液處理反應(yīng)溶液，直至pH為6.5-7.5。用二氯曱烷(33L)提取水溶液。有機(jī)相用鹽水漂洗，將有機(jī)相濃縮成糊漿。用曱醇(37L)稀釋反應(yīng)溶液，繼續(xù)蒸餾，直至二氯曱烷完全去除。實(shí)施例14去保護(hù)制備3'-0-(N-Boc-丄-纈氨酰)-2'-脫氣-丄-胞苷(LVC)將曱醇(15L)冷卻至l(TC,緩慢加入乙酰氯(4.7Kg),以使內(nèi)部溫度保持在15-18。C(約1-2小時(shí))。在氬氣下，于40分鐘內(nèi)將氯化氫溶液泵入實(shí)施例13的反應(yīng)溶液中。當(dāng)使用乙酸乙酉旨/曱醇(3:l)的TLC顯示反應(yīng)結(jié)束時(shí)，于33-35°C攪拌反應(yīng)混合物過夜。將反應(yīng)溶液冷卻至25-27°C,加入乙酸乙酯(l5L)。溫和攪拌反應(yīng)溶液，直至產(chǎn)物結(jié)晶。然后將懸浮液冷卻至1CTC達(dá)2小時(shí)。在氬氣下真空過濾產(chǎn)物，用乙酸乙酯漂洗，于5(TC(真空)干燥至恒重(產(chǎn)量2.97Kg,62%)。據(jù)分析該產(chǎn)物〉99%(HPLC或氯滴定法)，表現(xiàn)出的光譜特性與提出的結(jié)構(gòu)完全一致。實(shí)施例154-(W-二曱基氨基)吡啶鎰4-甲苯磺酸鹽〖圖1)將DMAP(6.1g,0.050mol)溶解在CH2C12(50ml)中，然后在撹拌下加入TsOH—水合物(8.5g,0.050mol)。試劑溶解產(chǎn)生淺黃/棕褐色溶液。將其煮沸，降至大約一半體積，然后加入環(huán)己烷(-50ml)。鹽沉淀為粘塊，但隨著繼續(xù)煮沸，推測鹽將共沸干燥，晶體變成淺色并互相分離。使混合物過夜沉降。然后，過濾混合物，用環(huán)己烷淋洗，接著在泵上(機(jī)械)干燥，獲得淺米色固體。以下的表1更明確地描述了試劑和條件。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage66</column></row><table>實(shí)施例16由3',5'-二-(N-Boc-L-纈氨酰)-L-2'-脫氧尿苷生產(chǎn)3',5'-二-(N-Boc-L-纈氨酰)-L-2'-脫氧胞苷(圖2)向配有機(jī)械攪拌、加液管、溫度計(jì)和底部排放口的2L帶夾套反應(yīng)器中加入CH2C12(500ml)。加入DMAPH+TsCr,接著加入二-Boc-Val-2'dU。此溶劑量無法溶解所有的底物。將水合^033研磨成粉末，然后加入，其使大量底物溶解。于22。C攪拌混合物30分鐘。然后加入TsCl(固體)。這使溫度升高2-3。C，對(duì)于該規(guī)模來說不顯著。TLC(1:1EtOAc-己烷)顯示立即發(fā)生曱苯^5黃酰化作用。約30分鐘后，看起來反應(yīng)似乎完成一半。過夜攪拌后，TLC分析顯示反應(yīng)結(jié)束，所有的TsCl都已反應(yīng)。將反應(yīng)器排空至2LErlenmeyer搖瓶中，用無水Na2S04干燥溶液，用活性炭(2g)處理，然后用Perlite澄清。隨后，化合物在2L帶夾套的圓柱形反應(yīng)器中胺化，該反應(yīng)器配有氣體進(jìn)口管、機(jī)械攪拌、溫度計(jì)、氬氣進(jìn)口和氣體出口，氬氣由底部注入。將澄清的曱苯磺酸鹽溶液加入反應(yīng)器中，加入己烷(lL)。夾套溫度設(shè)定于9.5。c,保持反應(yīng)溫度在irc以下。在將溶液冷卻至10。C所需的階段中，反應(yīng)器保持在氬氣覆蓋下。當(dāng)溶液達(dá)到該溫度時(shí)，以可控的盡量緩慢的氣流導(dǎo)入NH3。繼續(xù)通入NH3達(dá)4小時(shí)。此時(shí)可清楚看出溶液已飽和。于此溫度反應(yīng)約1小時(shí)后，出現(xiàn)大量白色沉淀。TLC顯示仍然存留相當(dāng)多的曱苯磺酸鹽，并形成了顯著量的尿苷。使反應(yīng)于IO'C進(jìn)行過夜。攪拌過夜后，TLC顯示反應(yīng)結(jié)束。將反應(yīng)器升溫至20°C,然后過濾內(nèi)容物。用CH2Cl2淋洗濾餅(NH4+TsO),然后風(fēng)干；其量達(dá)到24.87g(82%)。然后通過蒸發(fā)濃縮濾過液，以去除過量麗3。用0.1MHC1(4x100ml)提取過濾的反應(yīng)溶液，以去除過量的DMAP和水。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，EtOAc是^f吏材料掛柱的最佳溶劑。以下的表2更明確地描述了試劑和條件。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage68</column></row><table>實(shí)施例17用于二Boc纈氨酰-2'-dC和二Boc-纈氨酰-2'-dU的HPLC實(shí)驗(yàn)方法分析參數(shù)HPLC柱NOVAPAKC18-4pm-3.9x150mm(WATERS)流動(dòng)相泵A:KH2P040.015MpH=3.30-3.50(用H3P0410%v/v調(diào)節(jié));泵B:乙腈HPLC級(jí)混合室體積-0.5ml梯度模式#時(shí)間模塊事件體積注釋10.01泵T.Flow120.01泵B.Conc.4512.00泵B.Conc.45420.00泵B.Conc.7028.00泵B.Conc.70628.00泵B.Conc.45732.00泵B.Conc.45832.01SCL-lOAvpSTOP0968流速1ml/分鐘柱溫35°C注射體積20)iil使用以下波長進(jìn)行特異性檢測二-Boc2'dC，275nm;二國Boc2'dU,260nm;進(jìn)行15分鐘后的雜質(zhì)，204nm。樣品制備使用無水乙醇作為溶劑，制備濃度約為1.0mg/ml的樣品溶液。使用(50o/o)(MeOH)/(50。/o)(KH2P040.015Mpf^3.30曙3.50)作為溶劑，稀釋至濃度約為0.16mg/ml。在一個(gè)實(shí)施方案中，將樣品儲(chǔ)存在惰性氣氛中，例如氬氣或氮?dú)?。在另一個(gè)實(shí)施方案中，溶劑在使用前脫氣。在再一個(gè)實(shí)施方案中，樣品在制備后立即注射。實(shí)施例18用于二val-L-dC'2HCl的HPLC實(shí)驗(yàn)方法分析參數(shù)HPLC柱HYPERSILBDSC18-5pm-4.6x250mm(PHASESEPARATION)流動(dòng)相泵A:TEAAc20mMpH=6.20-6.30(用乙酸或trietilamine調(diào)節(jié))；泵B:乙腈HPLC級(jí)混合室體積-0.5ml梯度模式<table>tableseeoriginaldocumentpage70</column></row><table>流速1ml/分鐘才主溫:30C注射體積20^x1使用以下波長進(jìn)行特異性檢測270nm。才羊品制備*使用泵A的流動(dòng)相(參見上文)作為溶劑，制備濃度約為1.0mg/ml的樣品溶液。使用泵A的流動(dòng)相(參見上文)稀釋至濃度約為0.5mg/ml。在一個(gè)實(shí)施方案中，將樣品儲(chǔ)存在惰性氣氛中，例如氬氣或氮?dú)狻Ｔ诹硪粋€(gè)實(shí)施方案中，溶劑在使用前脫氣。在再一個(gè)實(shí)施方案中，樣品在制備后立即注射。所有的出版物、專利和專利文件都通過引用結(jié)合到本文中，如同其個(gè)別通過引用結(jié)合到本文中一樣。已經(jīng)參照各種具體和優(yōu)選的實(shí)施方案和技術(shù)描述了本發(fā)明。但是應(yīng)當(dāng)理解的是，根據(jù)前文的本發(fā)明詳述，多種改變和修飾對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的，并可在本發(fā)明精神和范圍內(nèi)作出這種改變和修飾。權(quán)利要求1.一種制備任選受保護(hù)的1-鹵代-呋喃糖的方法，所述方法包括以下步驟(a)使呋喃糖與醇反應(yīng)，形成烷基縮醛；(b)任選地保護(hù)呋喃糖烷基縮醛剩余的游離羥基，以形成任選受保護(hù)的呋喃糖烷基縮醛；然后(c)使任選受保護(hù)的呋喃糖烷基縮醛與酰鹵反應(yīng)，所述酰鹵原位產(chǎn)生無水氫鹵酸，以形成任選受保護(hù)的1-鹵代-呋喃糖。2.—種制備任選受保護(hù)的l-卣代-2-脫氧核糖的方法，所述方法包括以下步驟(a)使2-脫氧核糖與醇反應(yīng)，形成l-0-烷基-2-脫氧核糖；(b)任選地保護(hù)l-0-烷基-2-脫氧核糖剩余的游離羥基，以形成任選受保護(hù)的l-0-烷基-2-脫氧核糖；然后(c)使任選受保護(hù)的l-0-烷基-2-脫氧核糖與酰鹵反應(yīng)，所述酰鹵原位產(chǎn)生無水氬卣酸，以形成任選受保護(hù)的l-卣代-2-脫氧核糖。3.權(quán)利要求2的方法，其中所述2-脫氧核糖的烷基縮醛由芳香酯保護(hù)。4.權(quán)利要求3的方法，其中所述2-脫氧核糖的烷基縮醛由曱苯曱?；Ｗo(hù)。5.權(quán)利要求2的方法，其中步驟(a)的醇是曱醇或乙醇，以形成甲基縮醛或乙基縮醛。6.權(quán)利要求2的方法，其中步驟(a)的醇是甲醇，以形成曱基縮醛。7.權(quán)利要求6的方法，其中所述酰鹵是乙酰氯，以原位產(chǎn)生無水HC1,以形成任選受保護(hù)的l-氯-2-脫氧核糖。8.權(quán)利要求2的方法，其中所述任選受保護(hù)的l-鹵代-2-脫氧核糖進(jìn)一步偶聯(lián)至甲硅烷基化堿基。9.權(quán)利要求8的方法，其中所述偶聯(lián)反應(yīng)在氯仿中進(jìn)行。10.權(quán)利要求8的方法，其中加入過量所述曱硅烷基化堿基。11.權(quán)利要求10的方法，爭中所述曱硅烷基化堿基以2摩爾過量加入。12.權(quán)利要求8的方法，其中所述曱硅烷基化堿基是甲硅烷基化尿嘧啶或曱硅烷基化胸腺嘧啶。13.—種制備任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧胸普的方法，所述方法包括以下步驟(a)使L-2-脫氧核糖與醇反應(yīng)，形成L-l-0-烷基-2-脫氧核糖；(b)任選地保護(hù)L-l-0-烷基-2-脫氧核糖剩余的游離羥基，形成任選受保護(hù)的L-l-0-烷基-2-脫氧核糖；(c)使任選受保護(hù)的L-l-0-烷基-2-脫氧核糖與酰卣反應(yīng)，所述酰卣原位產(chǎn)生無水氫卣酸，以形成任選受保護(hù)的L-l-卣代-2-脫氧核糖；(d)偶聯(lián)任選受保護(hù)的L-l-卣代-2-脫氧核糖和曱硅烷基化胸腺嘧啶，形成任選受保護(hù)的p-L-2'-脫氧胸苷；然后(e)如果有必要，去保護(hù)任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧胸苷，獲得(3-L-2'-脫氧胸苷。14.權(quán)利要求13的方法，其中所述偶聯(lián)反應(yīng)在氯仿中進(jìn)行。15.權(quán)利要求13的方法，其中加入過量所述曱硅烷基化胸腺嘧啶。16.權(quán)利要求15的方法，其中所述甲硅烷基化胸腺嘧啶以2摩爾過量力口入。17.—種制備任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧尿苷的方法，所述方法包括以下步驟(a)使L-2-脫氧核糖與醇反應(yīng)，形成L-l-0-烷基-2-脫氧核糖；(b)任選地保護(hù)L-l-0-烷基-2-脫氧核糖剩余的游離羥基，形成任選受保護(hù)的L-l-0-烷基-2-脫氧核糖；(c)使任選受保護(hù)的L-l-0-烷基-2-脫氧核糖與酰鹵反應(yīng)，所述酰鹵原位產(chǎn)生無水氬卣酸，以形成任選受保護(hù)的L-l-卣代-2-脫氧核糖；(d)偶聯(lián)任選受保護(hù)的L-l-囟代-2-脫氧核糖和曱硅烷基化尿嘧啶，形成任選受保護(hù)的p-L-2'-脫氧尿苷；然后(e)如果有必要，去保護(hù)任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧尿苷，獲得P-L-2'-脫氧尿香。18.權(quán)利要求17的方法，其中所述偶聯(lián)反應(yīng)在氯仿中進(jìn)行。19.權(quán)利要求17的方法，其中加入過量所述曱硅烷基化尿嘧啶。20.權(quán)利要求19的方法，其中所述曱硅烷基化尿嘧啶以2摩爾過量力口入。21.—種制備任選地受保護(hù)的胞苷核苦的方法，所述方法包括以下步驟(a)使任選受保護(hù)的尿苷核苷與磺酰卣和氨反應(yīng)，形成任選受保護(hù)的胞苷核苷。22.權(quán)利要求21的方法，其中所述磺酰卣為曱苯磺酰氯。23.權(quán)利要求21的方法，其中所述氨為液態(tài)氨。24.權(quán)利要求21的方法，其中所述反應(yīng)于室溫完成。25.權(quán)利要求21的方法，其中所述任選受保護(hù)的尿苷核苷為任選受保護(hù)的P-L-2'脫氧尿苷，以形成任選受保護(hù)的P-L-2'脫氧胞苷。26.權(quán)利要求21的方法，所述方法還包括以下步驟從未反應(yīng)的任選受保護(hù)的尿苷核苷中分離任選受保護(hù)的胞苷核苷。27.權(quán)利要求26的方法，其中所述分離以非層析方式完成。28.權(quán)利要求26的方法，其中所述分離經(jīng)提取完成。29.—種制備P-(D或L)-或a-(D或L)-胞苷核苷的方法，所述方法包括以下步驟a)制備或獲得結(jié)構(gòu)(I)的P-(D或L)-或a-(D或L)-尿嘧啶核苷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，W是H原子、烷基、取代烷基、鹵原子、烷氧基或取代烷氧基；每個(gè)RS和R"蟲立為H、直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基、CO-烷基、CO-芳基、CO-烷氧基烷基、CO-芳氧基烷基、CO-取代芳基、烷基磺?；⒎蓟酋；⒎纪榛酋；被釟埢?、一、二或三磷酸酯，或磷酸酯衍生物；每個(gè)W和RS獨(dú)立為H原子、烷基、取代烷基、卣原子、烷氧基、取代烷氧基或酰氧基；然后b)任選地在結(jié)構(gòu)(III)的吡啶鎖鹽存在下用結(jié)構(gòu)(II)的磺酰卣活化結(jié)構(gòu)(I)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，X是鹵素(F、Cl、Br和I);R11、R12、R。獨(dú)立地為H、烷基、烯基或炔基，但優(yōu)選為低級(jí)烷基；Y1、Y2、Y和Y"蟲立地為H、卣素、烷基、烯基或炔基、?；⑼檠趸蛄虼榛?，但優(yōu)選為H;然后c)使活化的化合物與氣態(tài)或液態(tài)氨反應(yīng)，形成結(jié)構(gòu)(IV)的(3-(D或L)-或a-(D或L)-胞苷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中，R1、R2、R3、114和115如上定義。30.權(quán)利要求29的方法，其中R1、W和RS為H。31.權(quán)利要求29的方法，其中W為甲基；114和115為&112為氨基酸殘基。32.權(quán)利要求31的方法，其中所述氨基酸殘基為丄-纈氨酰。33.權(quán)利要求29的方法，其中W為曱基；！^和RS為H;每個(gè)R2和113獨(dú)立地為氨基酸殘基。34.權(quán)利要求33的方法，其中所述氨基酸殘基為A-纈氨酰。35.權(quán)利要求29的方法，其中所述磺酰鹵為曱苯磺酰氯。36.權(quán)利要求29的方法，所述方法還包括以下步驟從未反應(yīng)的JHD或L)-或a-(D或L)-尿苷核苷中分離(3-(D或L)-或a-(D或L)-胞苷核普。37.權(quán)利要求36的方法，其中所述分離以非層析方式完成。38.權(quán)利要求36的方法，其中所述分離經(jīng)提取完成。39.—種制備(3-L-2'-脫氧-胞苷的方法，所述方法包括以下步驟a)制備或獲得結(jié)構(gòu)(I"的(3-L-2'-脫氧-尿苷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中，R"和R獨(dú)立地為H、?；?、曱硅烷基或氨基酸衍生物；W為H、卣素、烷基、烯基或炔基、酰基、胺、烷基胺、氨基烷基、羥基、烷氧基、氧烷基、巰基、硫代烷基或烷基硫醇；然后b)任選地在結(jié)構(gòu)(III)的吡啶镥鹽存在下，用結(jié)構(gòu)(II)的磺酰卣活化結(jié)構(gòu)(")的化合物其中，X是鹵素(F、Cl、Br和I);R11、R12、R"獨(dú)立地為H、烷基、烯基或炔基，但優(yōu)選為低級(jí)烷基；Y1、Y2、Y和Y"獨(dú)立地為H、卣素、烷基、烯基或炔基、酰基、烷氧基或硫代烷基，但優(yōu)選為H;然后c)使活化的化合物與氣態(tài)或液態(tài)軋義應(yīng)，形成結(jié)構(gòu)(IV"的p-L-2'-脫氧-胞苷其中，R1、P"和RS如上定義。40.權(quán)利要求39的方法，其中W為H。41.權(quán)利要求39的方法，其中W為H;W為氨基酸殘基。42.權(quán)利要求42的方法，其中所述氨基酸殘基為丄-纈氨酰。43.權(quán)利要求39的方法，其中W為H;每個(gè)R"和R獨(dú)立地為氨基酸殘基。44.權(quán)利要求43的方法，其中所述氨基酸殘基為L-纈氨酰。45.權(quán)利要求39的方法，其中所述磺酰囟為曱苯磺酰氯。46.權(quán)利要求39的方法，所述方法還包括以下步驟從未反應(yīng)的P-L-2'-脫氧尿苷中分離需要的(3-L-2'-脫氧胞苷。47.權(quán)利要求46的方法，其中所述分離以非層析方式完成。48.權(quán)利要求46的方法，其中所述分離經(jīng)提取完成。49.一種制備P-L-2'-脫氧-胞苷的方法，所述方法包括以下步驟(a)使L-2-脫氧核糖與醇反應(yīng)，形成L-l-0-烷基-2-脫氧核糖；(b)任選地保護(hù)L-l-0-烷基-2-脫氧核糖剩余的游離羥基，形成任選受保護(hù)的L-l-0-烷基-2-脫氧核糖；(c)使任選受保護(hù)的L-l-0-烷基-2-脫氧核糖與酰鹵反應(yīng)，所述酰鹵原位產(chǎn)生無水氫卣酸，以形成任選受保護(hù)的L-l-囟代-2-脫氧核糖；(d)偶聯(lián)任選受保護(hù)的L-l-囟代-2-脫氧核糖和曱硅烷基化尿嘧啶，形成任選受保護(hù)的結(jié)構(gòu)(1*)的P-L-2'-脫氧尿苷其中，112和113獨(dú)立地為11、酰基、曱硅烷基或氨基酸衍生物；W為H、卣素、烷基、烯基或炔基、?；?、烷基胺、氨基烷基、雍基、烷氧基、氧烷基、巰基、硫代烷基或烷基硫醇；然后(e)任選地在結(jié)構(gòu)(III)的吡啶鏡鹽存在下，用結(jié)構(gòu)(II)的磺酰自活化結(jié)構(gòu)(1*)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>其中，X是鹵素(F、Cl、Br和I);R11、R12、R"獨(dú)立地為H、烷基、烯基或炔基，但優(yōu)選為低級(jí)烷基；Y1、Y2、YS和Y"獨(dú)立地為H、卣素、烷基、烯基或炔基、?；?、烷氧基或硫代烷基，但優(yōu)選為H;然后(f)使活化的化合物與胺如氣態(tài)或液態(tài)氨反應(yīng)，形成結(jié)構(gòu)(rv^)的(3-L-2'-脫氧-胞苷<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>OR(IV*)其中，R1、112和113如上定義。50.權(quán)利要求49的方法，其中所述L-l-0-烷基-2-脫氧核糖由芳香酯保護(hù)。51.權(quán)利要求50的方法，其中所述L-l-0-烷基-2-脫氧核糖由曱苯曱?；Ｗo(hù)。52.權(quán)利要求49的方法，其中步驟(a)的醇是甲醇或乙醇，以形成L-l-O-(曱基或乙基)-2-脫氧核糖。53.權(quán)利要求49的方法，其中步驟(a)的醇是甲醇，以形成L-l-0-曱基-2-脫氧核糖。54.權(quán)利要求49的方法，其中所述酰面是乙酰氯，原位產(chǎn)生無水HC1，以形成任選受保護(hù)的l-氯-2-脫氧核糖。55.權(quán)利要求49的方法，其中所述偶聯(lián)反應(yīng)在氯仿中進(jìn)行。56.權(quán)利要求49的方法，其中加入過量所述曱硅烷基化堿基。57.權(quán)利要求56的方法，其中所述曱硅烷基化堿基以2摩爾過量加入。58.權(quán)利要求49的方法，其中W為H。59.權(quán)利要求49的方法，其中W為H;W為氨基酸殘基。60.權(quán)利要求59的方法，其中所述氨基酸殘基為L-纈氨酰。61.權(quán)利要求49的方法，其中W為H;每個(gè)112和113獨(dú)立地為氨基酸殘基。62.權(quán)利要求61的方法，其中所述氨基酸殘基為丄-纈氨酰。63.權(quán)利要求49的方法，其中所述磺酰鹵為曱苯磺酰氯。64.權(quán)利要求49的方法，所述方法還包括以下步驟從未反應(yīng)的任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧尿苷中分離需要的(3-L-2'-脫氧胞苷。65.權(quán)利要求64的方法，其中所述分離以非層析方式完成。66.權(quán)利要求64的方法，其中所述分離經(jīng)提取完成。67.—種制備任選受保護(hù)的(3-L-2'-脫氧胞苷的方法，所述方法包括以下步驟(a)胺化任選受保護(hù)的(3-L-2'-脫氧尿苷，獲得任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧胞苷；然后(b)以非層析方式從任選受保護(hù)的(3-L-2'-脫氧尿苷中分離任選受保護(hù)的P-L-2'-脫氧胞苷。68.權(quán)利要求58的方法，其中所述分離經(jīng)提取完成。全文摘要本發(fā)明涉及2′-脫氧-β-L-胸苷、2'-脫氧-β-L-尿苷和2'-脫氧-β-L-胞苷及其衍生物的合成，其中所述衍生物例如為3'-O-?；?'，5'-O-二酰基前藥，包括3′-O-L-氨?；?'，5'-O-L-二氨?；八?，特別是3'-O-L-纈氨酰和3'，5'-O-L-二纈氨酰前藥。文檔編號(hào)C07H1/00GK101415719SQ200480012961公開日2009年4月22日申請(qǐng)日期2004年3月22日優(yōu)先權(quán)日2003年3月20日發(fā)明者J·A·拉比申請(qǐng)人:微生物化學(xué)及藥品有限公司