專利名稱：作為γ－分泌素酶抑制劑的橋聯(lián)N－芳基磺?；哙さ闹谱鞣椒?br> 與申請有關(guān)的對照檢索本申請書要求2003年5月13日提交的美國臨時申請第60/470,146號的權(quán)益。
背景技術(shù)：
于2000年8月13日公布的WO 00/50391公開了具有磺胺部分的化合物，所述化合物用于治療和預(yù)防阿爾茨海默氏病和其它與淀粉樣蛋白沉積有關(guān)的疾病。
由于目前對治療或預(yù)防神經(jīng)退性性疾病，如阿爾茨海默氏病的關(guān)注，用于這類治療或預(yù)防的化合物將是對本領(lǐng)域受歡迎的貢獻(xiàn)。本發(fā)明提供了這種貢獻(xiàn)。
發(fā)明概述一方面，本發(fā)明提供了作為γ-分泌素酶(secretase)抑制劑的新化合物、用于制備這樣的化合物的方法、含有一種或多種這樣的化合物的藥用組合物、制備含有一種或多種這樣的化合物的藥物制劑的方法，以及應(yīng)用這樣的化合物或藥用組合物治療、預(yù)防、抑制或改善與γ-分泌素酶有關(guān)的一種或多種疾病的方法。
一方面，本發(fā)明申請公開了一種化合物，和/或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，所述化合物具有式I所示的通用結(jié)構(gòu)
式I其中Ar是芳基或雜芳基；X是O、NH或NR6；m是0、1、2或3，前提是當(dāng)m＝0時，不存在雙鍵，而當(dāng)m＞0時，可以存在或不存在雙鍵，或者可以存在或不存在三鍵；n是0、1、2或3；R1是1到3個取代基，所述取代基獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、鹵素、-CF3、-OCF3、-NR6R7、-CN、-NO2、-NH2、-亞烷基-NR6R7、-亞烷基-O-烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)NR6R7、-N(R6)C(O)烷基、-N(R6)C(O)環(huán)烷基、-N(R6)C(O)芳基、-N(R6)C(O)雜芳基、-N(R6)C(O)O-烷基、-N(R6)C(O)NR6R7、-N(R6)S(O)2烷基、-OH、-O-烷基和-O環(huán)烷基；R2是氫、-烷基、-環(huán)烷基、-亞烷基-環(huán)烷基、-環(huán)烷基、-NR6R7、-亞烷基-NR6R7、-亞烷基-O-烷基、-O-烷基、-雜芳基或-芳基；R3是1到6個取代基，所述取代基可以相同或不同，各自獨(dú)立選自氫、鹵素、-烷基、-環(huán)烷基、-OH、-OCF3、-CF3、O-烷基、-O-環(huán)烷基或-NR6R7；R4是氫、-烷基、-環(huán)烷基、-芳基或-雜芳基；或者R3和R4可以結(jié)合在一起形成3到6元環(huán)；R5是-NR6R7、-N(R6)-亞烷基-NR6R7、-烷基、-環(huán)烷基、-芳基、-雜芳基、-環(huán)烷基、-亞烷基-芳基、-亞烷基-雜芳基、-環(huán)亞烷基-芳基、-環(huán)亞烷基-雜芳基、-雜環(huán)烷基-芳基或-雜環(huán)烷基-雜芳基；或者R5選自 和 R6和R7可以相同或不同，各自獨(dú)立選自氫、-芳基、-雜芳基、-烷基、-環(huán)烷基、-亞烷基-芳基、-亞烷基-雜芳基、 和 r是0、1、2、3或4；s是0、1、2或3；R8是氫、-OH、-烷基、-C(O)NR6R7、-C(O)O-烷基或芳基，其中所述烷基部分可以未被取代或被1到4個羥基取代，而所述芳基可以未被取代或被至少一個選自以下取代基取代-烷基、-環(huán)烷基、鹵素、-CF3、-OCF3、-NR6R7、-CN、-NO2、-NH2、-亞烷基-NR6R7、-亞烷基-O-烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)NR6R7、-N(R6)C(O)烷基、-N(R6)C(O)環(huán)烷基、-N(R6)C(O)芳基、-N(R6)C(O)雜芳基、-N(R6)C(O)O-烷基、-N(R6)C(O)NR6R7、-N(R6)S(O)2烷基、-OH、-O-烷基和-O-環(huán)烷基；
R9是選自氫、-烷基、-環(huán)烷基、-亞烷基-芳基、-亞烷基-雜芳基、-烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-亞烷基-O-亞烷基-OH、-芳基和-雜芳基，其中所述烷基和環(huán)烷基部分各自可獨(dú)立被取代或不被取代，并且如果被取代，則被1到4個羥基或至少一個-NR6R7基團(tuán)所取代；R10各自獨(dú)立選自氫或烷基，其中所述烷基可被取代或不被取代，并且如果被取代，則R10被1到4個羥基所取代；R11和R12各自獨(dú)立選自氫、鹵素、-烷基、-環(huán)烷基、-OH、-OCF3、-CF3、-O-烷基、-O-環(huán)烷基、-NR6R7或芳基；或者R11和R12與它們在式I中所示的連接的環(huán)碳原子一起，形成一個環(huán)烷基環(huán)，并且其中所述由此形成的環(huán)烷基環(huán)可以不被取代或被烷基、烷氧基、芳基或鹵素所取代；p是0、1、2、3或4；并且q是0、1、或2。
除非有特別的說明，上述定義的烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基、亞烷基和雜環(huán)烷基(也稱為雜環(huán)基)部分可以是未取代的或各自獨(dú)立任選被一個或多個合適的基團(tuán)取代，所述基團(tuán)可以相同或不同，且被獨(dú)立地選擇。在下述詳細(xì)描述部分的定義中提供了這類適合作為取代基的基團(tuán)的非限制性實(shí)例。上述部分的這類非-取代的和獨(dú)立的任選取代的可能性被很好地包含于本發(fā)明中。
本發(fā)明還提供了一種藥用組合物，所述組合物含有治療有效量的一種或多種式I化合物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明還提供了一種抑制γ-分泌素酶的方法，所述方法包括對有這種抑制需要的患者給予治療有效量的一種或多種式I化合物。
本發(fā)明還提供了治療一種或多種神經(jīng)退行性疾病的方法，所述方法包括對有治療需要的患者給予治療有效量的一種或多種式I化合物。
本發(fā)明還提供了抑制淀粉樣蛋白(如淀粉樣β蛋白)在神經(jīng)組織(如腦)內(nèi)、神經(jīng)組織上或其周圍沉積的方法，所述方法包括對有治療需要的患者給予治療有效量的一種或多種式I化合物。
本發(fā)明還提供了治療阿爾茨海默氏病的方法，所述方法包括對有治療需要的患者給予治療有效量的一種或多種式I化合物。
發(fā)明詳述在一個實(shí)施方案中，本申請書公開了一種化合物、或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，所述化合物具有式I所示的通用結(jié)構(gòu)。
在一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，Ar是芳基。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，X是O。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，m是0或1。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，n是1或2。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1是鹵素。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，R2是氫。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3是氫。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4是氫或CH3。
在另一個優(yōu)選的實(shí)施方案中，R5是-NR6R7、-NR6-亞烷基-NR6R7， 或 在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，Ar是苯基。
在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1是4-鹵基，更優(yōu)選4-氯基。
在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，R5是 或 在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，在式I代表的雙環(huán)結(jié)構(gòu)中存在著一個雙鍵。
在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，m＝1且n＝2。
在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，m＝1且n＝1。
在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，m＝0且n＝1。
在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，R5是 在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11和R12都是H。
在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，Ar是芳基；X＝O；R1是鹵基；R2是H；R3是H；R4是H；且R5是
或 在一個另外的優(yōu)選的實(shí)施方案中，m是1，無雙鍵或三鍵存在，及R11和R12與它們在式I中所示的連接的環(huán)碳原子一起，形成一個環(huán)丙基環(huán)。
本發(fā)明的某些優(yōu)選的化合物包括


除了另有說明之外，本說明書和權(quán)利要求書全文采用下述定義。無論單獨(dú)應(yīng)用術(shù)語或與其它術(shù)語聯(lián)合應(yīng)用，所述定義均適用。因此，“烷基”的定義可應(yīng)用于“烷基”以及“雜芳基烷基”、“-N(R6)C(O)O-烷基”等的“烷基”部分。
如以上及本說明書全文所用的，除非另有說明，應(yīng)該理解下述術(shù)語具有下述含義“患者”包括人和動物。
“哺乳動物”指人和其他哺乳動物。
“烷基”指脂族烴基，所述脂族烴基可以是直鏈或支鏈并且在鏈中含有約1到約20個碳原子。優(yōu)選的烷基在鏈中含有約1到約12個碳原子。更優(yōu)選的烷基在鏈中含有約1到約6個碳原子。支鏈指有一個或多個低級烷基如甲基、乙基或丙基連接在直鏈烷基鏈上。“低級烷基”指在可以是直鏈或支鏈的鏈上含有約1個到約6個碳原子的基團(tuán)。術(shù)語“取代的烷基”指所述烷基可以被一個或多個可以相同的或不同的取代基所取代，每一個取代基獨(dú)自選自鹵基、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(環(huán)烷基)、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。合適的烷基的非限制性實(shí)例包括甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、叔-丁基、正-戊基、庚基、壬基、癸基、氟甲基、三氟甲基和環(huán)丙基甲基。
“烯基”指含有至少一個碳-碳雙鍵并且可以是直鏈或支鏈的脂族烴基，且在鏈中含有約2個到約15個碳原子。優(yōu)選的烯基在鏈上含有約2個到約12個碳原子；而更優(yōu)選在鏈上含有約2個到約6個碳原子。支鏈指有一個或多個低級烷基如甲基、乙基或丙基連接在直鏈烯基鏈上。“低級烯基”指在可以是直鏈或支鏈的鏈上含有約2個到約6個碳原子。術(shù)語“取代的烯基”指所述烯基可以被一個或多個可以相同的或不同的取代基所取代，每一個取代基獨(dú)自選自鹵基、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基和烷氧基。合適的烯基的非限制性實(shí)例包括乙烯基、丙烯基、正-丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正-戊烯基、辛烯基和癸烯基。
“炔基”指含有至少一個碳-碳三鍵并且可以是直鏈或支鏈的脂族烴基，且在鏈上含有約2個到約15個碳原子。優(yōu)選的炔基在鏈上含有約2個到約12個碳原子；而更優(yōu)選在鏈上含有約2個到約4個碳原子。支鏈指有一個或多個低級烷基如甲基、乙基或丙基連接在直鏈炔基鏈上。“較低級炔基”指在可以是直鏈或支鏈的鏈上含有約2個到約6個碳原子。合適的炔基的非限制性實(shí)例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基、3-甲基丁炔基、正-戊炔基和癸炔基。術(shù)語“被取代的炔基”指所述炔基可以被一個或多個可以相同的或不同的取代基所取代，每一個取代基獨(dú)自選自烷基、芳基和環(huán)烷基。
“亞烷基”指從上述定義的烷基中去除氫原子而獲得的雙官能基團(tuán)。亞烷基的非限制性實(shí)例包括亞甲基、亞乙基和亞丙基。
“芳基”指含有約6個到約14個碳原子，優(yōu)選約6個到約10個碳原子的芳族單環(huán)或多環(huán)系統(tǒng)。如同本文所定義的，所述芳基可隨意地被一個或多個可以相同或不同的“環(huán)系統(tǒng)取代基”所取代。合適的芳基的非限制性實(shí)例包括苯基和萘基。本文有時用縮寫“ar”來表示“芳基”。
“雜芳基”指含有約5個到約14個環(huán)原子，優(yōu)選約5個到約10個環(huán)原子的芳族單環(huán)或多環(huán)系統(tǒng)，其中一個或多個環(huán)原子是除了碳以外的其它元素，如氮、氧或硫(單獨(dú)或這些元素的組合)。優(yōu)選的雜芳基含約5至約6個環(huán)原子。如同本文所定義的，所述“雜芳基”可隨意地被一個或多個可以相同或不同的“環(huán)系統(tǒng)取代基”所取代。在雜芳基詞根名稱之前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別指至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子存在。雜芳基的氮原子可隨意地被氧化成為對應(yīng)的N-氧化物。合適的雜芳基的非限制性實(shí)例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、異噁唑基、異噻唑基、噁唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、噠嗪基、喹喔啉基、2，3-二氮雜萘基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。
“芳烷基”指芳基-烷基基團(tuán)，其中所述芳基和烷基如前所述。優(yōu)選的芳烷基含有低級烷基。合適的芳烷基的非限制性實(shí)例包括芐基、2-苯乙基和萘基甲基。與母體部分的連接通過烷基連接。
“烷芳基”指烷基-芳基基團(tuán)，其中所述烷基和芳基如前所述。優(yōu)選的烷芳基含有低級烷基。合適的烷芳基的非限制性實(shí)例包括鄰-甲苯基、對-甲苯基和二甲苯基。與母體部分的連接通過芳基連接。
“環(huán)烷基”指含有約3個到約10個碳原子的非-芳族的、單-或多-環(huán)系統(tǒng)，優(yōu)選約5個到約10個碳原子。優(yōu)選的環(huán)烷基環(huán)含有約5個到約7個環(huán)原子。如上述所定義的，所述環(huán)烷基可隨意地被一個或多個可以相同或不同的“環(huán)系統(tǒng)取代基”所取代。合適的單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。合適的多環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括1-萘烷、降冰片基、金剛烷基等。縮寫“cy”代表環(huán)己基。
“鹵基”指氟基、氯基、溴基或碘基。優(yōu)選氟基、氯基或溴基，更優(yōu)選氟基和氯基。
“鹵素”指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選氟、氯或溴，更優(yōu)選氟和氯。
“鹵代烷基”指其中在所述烷基上有一個或多個氫原子被上述所定義的鹵基取代的如上所定義的烷基。
“環(huán)系統(tǒng)取代基”指連接在芳族或非-芳族環(huán)系統(tǒng)上的取代基，例如，所述取代基在所述環(huán)系統(tǒng)上替換可利用的氫。環(huán)系統(tǒng)取代基可以是相同的或不同的，各自獨(dú)立選自芳基、雜芳基、芳烷基、烷芳基、芳烯基、雜芳烷基、烷基雜芳基、雜芳烯基、羥基、羥基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、?；?、芳?；Ⅺu基、硝基、氰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、雜芳基磺?；?、烷基亞硫?；⒎蓟鶃喠蝓；㈦s芳基亞硫?；⑼榱蚧?、芳硫基、雜芳硫基、芳烷硫基、雜芳烷硫基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)基、雜環(huán)烯基、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，其中Y1和Y2可以相同或不同，并且獨(dú)立選自氫、烷基、芳基和芳烷基?！碍h(huán)系統(tǒng)取代基”也指3到7個環(huán)原子的環(huán)(其中1-2個環(huán)原子可以是雜原子)，所述環(huán)通過同時在芳基、雜芳基、雜環(huán)基或雜環(huán)烯基環(huán)上取代2個環(huán)氫原子而連接到所述芳基、雜芳基、雜環(huán)基或雜環(huán)烯基環(huán)上。非限制性實(shí)例包括 等。
“環(huán)烯基”指含有約3個到約10個碳原子，優(yōu)選約5個到約10個碳原子的非芳族的單環(huán)或多環(huán)系統(tǒng)，所述環(huán)系統(tǒng)含有至少一個碳-碳雙鍵。優(yōu)選的環(huán)烯基環(huán)含有約5個到約7個環(huán)原子。如上述所定義的，所述環(huán)烯基可隨意地被一個或多個可以相同或不同的“環(huán)系統(tǒng)取代基”所取代。合適的單環(huán)環(huán)烯基的非限制性實(shí)例包括環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基等。合適的多環(huán)環(huán)烯基的非限制性實(shí)例是降冰片烯基。
“雜環(huán)烯基”指含有約3個到約10個環(huán)原子，優(yōu)選約5個到約10個環(huán)原子的非芳族單環(huán)或多環(huán)系統(tǒng)，其中在所述環(huán)系統(tǒng)上的一個或多個原子是碳以外的元素，如氮、氧或硫原子(這些元素可單獨(dú)或組合存在)，并且所述環(huán)系統(tǒng)含有至少一個碳-碳雙鍵或碳-氮雙鍵。在所述環(huán)系統(tǒng)中無相鄰的氧和/或硫原子存在。優(yōu)選的雜環(huán)烯基環(huán)含有約5個到約6個環(huán)原子。在雜環(huán)烯基詞根名稱之前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別指至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子存在。所述雜環(huán)烯基可隨意地被一個或多個環(huán)系統(tǒng)取代基所取代，其中“環(huán)系統(tǒng)取代基”如上述所定義。雜環(huán)烯基的氮或硫原子可隨意地被氧化為對應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合適的單環(huán)氮雜環(huán)烯基的非限制性實(shí)例包括1，2，3，4-四氫吡啶、1，2-二氫吡啶基、1，4-二氫吡啶基、1，2，3，6-四氫吡啶、1，4，5，6-四氫嘧啶、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、2-咪唑啉基、2-吡唑啉基等。合適的氧雜環(huán)烯基的非限制性實(shí)例包括3，4-二氫-2H-吡喃、二氫呋喃基、氟二氫呋喃基等。合適的多環(huán)氧雜環(huán)烯基的非限制性實(shí)例是7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚烯基。合適的單環(huán)硫雜環(huán)烯基環(huán)的非限制性實(shí)例包括二氫噻吩基、二氫噻喃基等。
“雜環(huán)基”(或雜環(huán)烷基)指含有約3個到約10個環(huán)原子，優(yōu)選約5個到約10個環(huán)原子的非芳族飽和單環(huán)或多環(huán)系統(tǒng)，其中在所述環(huán)系統(tǒng)上的一個或多個原子是碳以外的元素，如氮、氧或硫原子，所述元素單獨(dú)或聯(lián)合存在。在所述環(huán)系統(tǒng)中無相鄰的氧和/或硫原子存在。優(yōu)選的雜環(huán)基含有約5個到約6個環(huán)原子。在雜環(huán)基詞根名稱之前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別指至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子存在。如本文所定義的，所述雜環(huán)基可隨意地被一個或多個可以相同或不同的“環(huán)系統(tǒng)取代基”所取代。雜環(huán)基的氮或硫原子可隨意地被氧化為對應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合適的單環(huán)的雜環(huán)基環(huán)的非限制性實(shí)例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫代碼啉基、噻唑烷基、1，3-二氧戊環(huán)基、1，4-二噁烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫噻喃基等。
“芳基環(huán)烯基”指從稠合的芳基和環(huán)烯基衍生的基團(tuán)，其中所述芳基和環(huán)烯基環(huán)共享兩個環(huán)碳原子。優(yōu)選的芳基環(huán)烯基是其中的芳基是苯基而環(huán)烯基由約5個到約6個環(huán)原子組成的那些芳基環(huán)烯基。所述芳基環(huán)烯基可隨意地被一個或多個環(huán)系統(tǒng)取代基所取代，其中“環(huán)系統(tǒng)取代基”如上述所定義。合適的芳基環(huán)烯基的非限制性實(shí)例包括1，2-二氫萘、茚等。與母體部分的連接通過非-芳族碳原子連接。
“環(huán)烯基芳基”指從如上述所定義的稠合的芳基環(huán)烯基衍生的基團(tuán)。除了與母體部分的連接是通過芳族碳原子連接之外，合適的環(huán)烯基芳基的非限制性實(shí)例為例如本文所描述的芳基環(huán)烯基。
“芳基環(huán)烷基”指從稠合的芳基和環(huán)烷基衍生的基團(tuán)，其中所述芳基和環(huán)烷基環(huán)共享兩個環(huán)碳原子。優(yōu)選的芳基環(huán)烷基是其中的芳基是苯基而環(huán)烷基由約5個到約6個環(huán)原子組成的那些芳基環(huán)烷基。所述芳基環(huán)烷基可隨意地被一個或多個環(huán)系統(tǒng)取代基所取代，其中“環(huán)系統(tǒng)取代基”如上述所定義。合適的芳基環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括1，2，3，4-四氫萘基等。與母體部分的連接通過非-芳族碳原子連接。
“環(huán)烷基芳基”指從如上所定義的稠合的芳基環(huán)烷基衍生的基團(tuán)。除了與母體部分的連接通過芳族碳原子連接之外，合適的環(huán)烷基芳基的非限制性實(shí)例為例如本文所描述的環(huán)烷基芳基。
“雜芳基環(huán)烷基”指從稠合的雜芳基和環(huán)烷基衍生的基團(tuán)，其中所述雜芳基和環(huán)烷基共享兩個環(huán)原子。所述共享的環(huán)原子可以二者均為碳原子，或共享的環(huán)原子中的一個可以是能夠與至少3個其它原子結(jié)合的雜原子，例如氮。優(yōu)選的雜芳基環(huán)烷基是其中所述雜芳基由約5個到約6個環(huán)原子組成而環(huán)烷基由約5個到約6個環(huán)原子組成的那些雜芳基環(huán)烷基。在雜芳基詞根名稱之前的前綴氮雜、氧雜或硫雜分別指至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子存在。所述雜芳基環(huán)烷基可隨意地被一個或多個可能環(huán)系統(tǒng)取代基所取代，其中“環(huán)系統(tǒng)取代基”如上所定義。雜芳基環(huán)烷基的雜芳基部分的氮原子可隨意地被氧化為對應(yīng)的N-氧化物。合適的雜芳基環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包括5，6，7，8-四氫喹啉基、5，6，7，8-四氫異喹啉基、5，6，7，8-四氫喹喔啉基、5，6，7，8-四氫喹唑啉基、4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑基、4，5，6，7-四氫苯并噁唑基、1H-4-氧雜-1，5-二氮雜萘-2-酮基、1，3-二氫咪唑-[4，5]-吡啶-2-酮基等。與母體部分的連接通過非-芳族碳原子連接。
“環(huán)烷基雜芳基”指從如上所定義的稠合的雜芳基環(huán)烷基衍生的基團(tuán)。除了與母體部分的連接是通過芳族碳原子連接之外，合適的環(huán)烷基雜芳基的非限制性實(shí)例為如本文所描述的雜芳基環(huán)烷基。
“芳烯基”指芳基-烯基-基團(tuán)，其中所述芳基和烯基如前所述。優(yōu)選的芳烯基含有一個較低級的烯基。合適的芳烯基的非限制性實(shí)例包括2-苯基乙烯基和2-萘基乙烯基。與母體部分的連接通過烯基連接。
“芳炔基”指芳基-炔基-基團(tuán)，其中所述芳基和炔基如前所述。優(yōu)選的芳炔基含有一個較低級的炔基。與母體部分的連接通過炔基連接。合適的芳炔基的非限制性實(shí)例包括苯基乙炔基和萘基乙炔基。
“雜芳烷基”指雜芳基-烷基-基團(tuán)，其中所述雜芳基和烷基如前所述。優(yōu)選的雜芳烷基含有一個低級烷基。合適的芳烷基的非限制性實(shí)例包括吡啶基甲基、2-(呋喃-3-基)乙基和喹啉-3-基甲基。與母體部分的連接通過烷基連接。
“雜芳烯基”指雜芳基-烯基-基團(tuán)，其中所述雜芳基和烯基如前所述。優(yōu)選的雜芳烯基含有一個較低級的烯基。合適的雜芳烯基的非限制性實(shí)例包括2-(吡啶-3-基)乙烯基和2-(喹啉-3-基)乙烯基。與母體部分的連接通過烯基連接。
“雜芳炔基”指雜芳基-炔基-基團(tuán)，其中所述雜芳基和炔基如前所述。優(yōu)選的雜芳炔基含有一個較低級的炔基。合適的雜芳炔基的非限制性實(shí)例包括吡啶-3-基乙炔基和喹啉-3-基乙炔基。與母體部分的連接通過炔基連接。
“羥基烷基”指HO-烷基-基團(tuán)，其中所述烷基如前所述。優(yōu)選的羥基烷基含有一個低級烷基。合適的羥基烷基的非限制性實(shí)例包括羥基甲基和2-羥基乙基。
“?；敝窰-C(O)-、烷基-C(O)-、烯基-C(O)-、炔基-C(O)-、環(huán)烷基-C(O)-、環(huán)烯基-C(O)-或環(huán)炔基-C(O)-基團(tuán)，其中所述各種基團(tuán)如前所述。與母體部分的連接通過羰基連接。優(yōu)選的酰基含有低級烷基。合適的?；姆窍拗菩詫?shí)例包括甲?；?、乙?；⒈；?-甲基丙?；⒍□；铜h(huán)己?；?。
“芳酰基”指芳基-C(O)-基團(tuán)，其中所述芳基如前所述。與母體部分的連接通過羰基連接。合適基團(tuán)的非限制性實(shí)例包括苯甲酰基及1-和2-萘甲?；?br> “雜芳?；敝鸽s芳基-C(O)-基團(tuán)，其中所述雜芳基如前所述。合適基團(tuán)的非限制性實(shí)例包括煙?；瓦量?2-基羰基。與母體部分的連接通過羰基連接。
“烷氧基”指烷基-O-基團(tuán)，其中所述烷基如前所述。合適的烷氧基的非限制性實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基、正-丁氧基和庚氧基。與母體部分的連接通過醚氧連接。
“芳氧基”指芳基-O-基團(tuán)，其中所述芳基如前所述。合適的芳氧基的非限制性實(shí)例包括苯氧基和萘氧基。與母體部分的連接通過醚氧連接。
“芳烷氧基”指芳烷基-O-基團(tuán)，其中所述芳烷基如前所述。合適的芳烷氧基的非限制性實(shí)例包括芐氧基和1-或2-萘甲氧基。與母體部分的連接通過醚氧連接。
“烷基氨基”指-NH2或-NH3+基團(tuán)，其中所述氮上的一個或多個氫原子被如上述所定義的烷基所替換。
“芳基氨基”指-NH2或-NH3+基團(tuán)，其中所述氮上的一個或多個氫原子被如上述所定義的芳基所替換。
“烷硫基”指烷基-S-基團(tuán)，其中所述烷基如前所述。合適的烷硫基的非限制性實(shí)例包括甲硫基、乙硫基、異-丙硫基和庚硫基。與母體部分的連接通過硫連接。
“芳基硫代”指芳基-S-基團(tuán)，其中所述芳基如前所述。合適的芳硫基的非限制性實(shí)例包括苯硫基及萘硫基。與母體部分的連接通過硫連接。
“芳烷硫基”指芳烷基-S-基團(tuán)，其中所述芳烷基如前所述。合適的芳烷硫基的非限制性實(shí)例是芐硫基。與母體部分的連接通過硫連接。
“烷氧基羰基”指烷基-O-CO-基團(tuán)，合適的烷氧基羰基的非限制性實(shí)例包括甲氧基羰基和乙氧基羰基。與母體部分的連接通過羰基連接。
“芳氧基羰基”指芳基-O-C(O)-基團(tuán)，合適的芳氧基羰基的非限制性實(shí)例包括苯氧基羰基和萘氧基羰基。與母體部分的連接通過羰基連接。
“芳烷氧基羰基”指芳烷基-O-C(O)-基團(tuán)，合適的芳烷氧基羰基的非限制性實(shí)例為芐氧基羰基。與母體部分的連接通過羰基連接。
“烷基磺酰基”指烷基-S(O)2-基團(tuán)。優(yōu)選的基團(tuán)是其中所述烷基為低級烷基的那些基團(tuán)。與母體部分的連接通過磺酰基連接。
“烷基亞硫?；敝竿榛?S(O)-基團(tuán)。優(yōu)選的基團(tuán)是其中所述烷基為低級烷基的那些基團(tuán)。與母體部分的連接通過亞硫酰基連接。
“芳基磺?；敝阜蓟?S(O)2-基團(tuán)。與母體部分的連接通過磺酰基連接。
“芳基亞硫?；敝阜蓟?S(O)-基團(tuán)。與母體部分的連接通過亞硫酰基連接。
術(shù)語“任選被取代”指在可利用的一個位置或多個位置上用特定的基團(tuán)、原子團(tuán)或部分任選取代。
關(guān)于化合物中部分(例如取代基、基團(tuán)或環(huán))的數(shù)目，除非另有定義，所述短語“一個或多個”和“至少一個”即表示可以有化學(xué)上允許的那么多部分，而且本領(lǐng)域技術(shù)人員充分了解對這類部分的最大數(shù)目的檢測。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將了解術(shù)語“神經(jīng)退行性疾病”具有其共同的被認(rèn)同的醫(yī)學(xué)意義，以及對由神經(jīng)元的異常功能引起的疾病和病癥的描述，所述神經(jīng)元異常功能包括神經(jīng)細(xì)胞的死亡和神經(jīng)遞質(zhì)或神經(jīng)毒性物質(zhì)的異常釋放。在這種情況下，它也包括由β淀粉樣蛋白水平的異常引起的所有疾病。這類疾病的實(shí)例包括，但不限于，阿爾茨海默氏病、老年癡呆、大腦或全身性淀粉樣變性、因?yàn)榈矸蹣幼冃砸l(fā)的遺傳性腦出血以及DoWn’s綜合征。
在環(huán)系統(tǒng)中引出的線表示所示的鍵可以連接到任何可取代的環(huán)碳原子上。
如本領(lǐng)域所熟知的，從特定原子(其中在所述鍵的末端未描繪出部分)引出的鍵表示甲基通過所述鍵與所述原子結(jié)合。例如
代表 代表 和 代表 本領(lǐng)域技術(shù)人員將了解雙環(huán)結(jié)構(gòu)，下述所示的圖代表了所述結(jié)構(gòu)的兩個實(shí)例。為了便于描述，可將碳原子相應(yīng)地標(biāo)號。
在環(huán)結(jié)構(gòu)內(nèi)的虛線，下圖所示為其中一個實(shí)例，代表任選的鍵或任選的雙鍵。例如，對于一個任選的鍵，
上述結(jié)構(gòu)可以表示下述化合物 此外，所述雙鍵或三鍵可在所述結(jié)構(gòu)中的任何環(huán)上的任何兩個可利用的元素之間形成鍵。例如，對于一個形成的雙鍵， 上述結(jié)構(gòu)可以表示下述結(jié)構(gòu) 如本文所應(yīng)用的，術(shù)語“組合物”意欲包括含有特定量的特定成分的產(chǎn)品，以及任何直接的或間接的由含有特定量的特定成分的組合所產(chǎn)生的產(chǎn)品。
本文也設(shè)計本發(fā)明化合物的前藥和溶劑化物。如同在本文中所采用的，術(shù)語“前藥”表示為藥物前體的化合物，將所述前體藥物給予受試者之后通過代謝或化學(xué)過程所經(jīng)歷的化學(xué)轉(zhuǎn)換，產(chǎn)生式I化合物或其鹽和/或其溶劑化物。在T.Higuchi和V.Stella的“Pro-drugas Novel Delivery Systems(1987年)”，A.C.S.Symposium Series，第14冊，以及在“in Bioreversible Carriers in Drug Design(1987年)”EdwardB.Roche編輯，American Pharmaceutical Association and PergamonPress中均提供了對前藥的討論，上述二者均通過引用結(jié)合到本文中。
“溶劑化物”指本發(fā)明的化合物與一個或多個溶劑分子的物理締合。所述物理締合包括離子和共價鍵連接，包括氫鍵的連接的改變程度。在特定情況下，所述溶劑化物將能夠分離，例如當(dāng)一個或多個溶劑分子結(jié)合到結(jié)晶固體的晶格中時?！叭軇┗铩奔劝ㄒ合嗟囊舶煞蛛x的溶劑化物。合適的溶劑化物的非限制性實(shí)例包括乙醇化物、甲醇化物等?！八衔铩本褪瞧淙軇┓肿訛樗娜軇┗铩?br> “有效量”或“治療有效量”指用以描述本發(fā)明的化合物或組合物有效抑制γ分泌素酶并由此產(chǎn)生所期望的治療效果的量。
所述式I化合物產(chǎn)生的鹽同樣在本發(fā)明的范圍內(nèi)。除非另有說明，應(yīng)該了解本文涉及式I化合物時也包括涉及到其鹽。如同本文所采用的，術(shù)語“鹽”表示與無機(jī)酸和/或有機(jī)酸形成的酸性鹽，以及與無機(jī)堿和/或有機(jī)堿形成的堿性鹽。此外，當(dāng)式I化合物既含有堿性部分(例如但不限于吡啶或咪唑)，也含有酸性部分(例如但不限于羧酸)時，可形成兩性離子(“內(nèi)鹽”)，并包括于本文所用的術(shù)語“鹽”之中。盡管也應(yīng)用其它鹽，但優(yōu)選藥學(xué)上可接受的(例如，無毒、生理上可接受的)鹽。例如，通過式I化合物與一定量例如等當(dāng)量的酸或堿在介質(zhì)(例如所述鹽能在其中沉淀的介質(zhì))或在隨后進(jìn)行冷凍干燥的水性介質(zhì)中反應(yīng)，可以形成所述式I化合物的鹽。
示范性的酸加成鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、門冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊并丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡萄糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲烷磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、果膠糖酸鹽(pectinates)、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽(例如本文中提到的)、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(也稱為甲苯基磺酸鹽)、十一酸鹽等。此外，討論了通常為認(rèn)為適合用于從堿性藥用化合物中形成藥學(xué)上有用的鹽的酸，例如，S.Berge等Journal of Pharmaceutical Sciences(1977年)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986年)33 201-217；Anderson等The Practice of Medicinal Chemistry(1996年)，Academic Press，New York；以及在The Orange Book(Food & DrugAdministration，Washington，D.C.的網(wǎng)站上)。這些公開內(nèi)容均通過引用結(jié)合到本文中。
示范性的堿性鹽包括銨鹽；堿金屬鹽，例如鈉鹽、鋰鹽和鉀鹽；堿土金屬鹽，例如鈣鹽和鎂鹽；與以下有機(jī)堿(例如有機(jī)胺)所成的鹽例如芐星青霉素鹽、二環(huán)己氨、海巴明(由N，N-雙(脫氫松香基)乙二胺形成)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-葡糖酰胺、叔-丁胺；與氨基酸(例如精氨酸、賴氨酸等)所成的鹽?？梢杂迷噭⒑膲A性基團(tuán)季銨化，所述試劑有例如低級烷基鹵化物(例如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、二烷基硫酸酯(例如硫酸的二甲酯、二乙基酯、二丁基酯和二戊基酯)、長鏈鹵化物(例如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂酰基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基鹵化物(例如芐基和苯乙基的溴化物)及其它試劑。
計劃將所有這些酸性鹽和堿性鹽在本發(fā)明的范圍內(nèi)用作藥學(xué)上可接受的鹽，并且認(rèn)為所有這些酸性鹽和堿性鹽在本發(fā)明的效果上與所述相應(yīng)化合物的游離形式等效。
式I化合物及其鹽、溶劑化物和前藥，可以以它們的互變異構(gòu)體(例如，作為酰胺或亞氨基醚)存在。所有這些互變異構(gòu)體被設(shè)計為本發(fā)明的一部分。
所述化合物(包括所述化合物的鹽、溶劑化物和前藥以及所述前藥的鹽和溶劑化物)的所有立體異構(gòu)體(例如，幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體等)，例如那些可能由于在各種取代基上的不對稱碳原子而存在的立體異構(gòu)體，包括對映異構(gòu)體(它們甚至可在缺乏不對稱碳原子時存在)、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體以及非對映異構(gòu)體，均在本發(fā)明范圍內(nèi)。例如，本發(fā)明所述化合物的單一立體異構(gòu)體基本上可不含其它異構(gòu)體，患者可以被混合，例如，成為外消旋體或與所有其它、或其它選擇的立體異構(gòu)體混合。本發(fā)明的手性中心可具有如IUPAC 1974Recommendations所定義的S或R構(gòu)型。打算將所采用的術(shù)語“鹽”、“溶劑化物”、“前藥”等同樣應(yīng)用于本發(fā)明化合物的對映異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋體或前藥的鹽、溶劑化物和前藥。
所述式I化合物的多晶型及其鹽、溶劑化物和/或所述式I化合物的前藥均包括在本發(fā)明內(nèi)。
本發(fā)明也涉及含有至少一個式I化合物、或一個所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以及至少一種藥學(xué)上可接受的載體的藥用組合物。藥用組合物可含有一個或多個式I化合物。
為了從本發(fā)明所描述的化合物制備藥用組合物，藥學(xué)上可接受的惰性載體可以是固體也可以是液體。固體形式的制劑包括粉劑、片劑、可分散的顆粒劑、膠囊、扁膠囊劑和栓劑。所述粉劑和片劑可含有約5％到95％的活性化合物。本領(lǐng)域中已知的合適的固體載體是，例如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、蔗糖或乳糖。片劑、粉劑、扁膠囊劑和膠囊可用作適于口服的固體劑型?？稍贏.Gennaro(ed.)，Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1990年)，MackPublishing Co.，Easton，Pennsylvania.中找得藥學(xué)上可接受的載體和制備各種組合物的方法的實(shí)例。
液體形式的制劑包括溶液、懸浮液和乳液。作為實(shí)例可以提及的是用于胃腸外注射或用于口服溶液、懸浮液和乳液的添加甜味劑和遮光劑的水或水-丙二醇溶液。液體形式的制劑也可包括用于鼻內(nèi)給藥的溶液。
合適的用于吸入的噴霧劑可包括溶液和粉末形式的固體，所述噴霧劑可與藥學(xué)上可接受的載體，如惰性壓縮氣體(例如氮?dú)?組合。
也包括那些在使用前即刻轉(zhuǎn)化為液體形式制劑的既可用于口服也可用于胃腸外給藥的固體形式的制劑。這類液體劑型包括溶液、懸浮液和乳液。
本發(fā)明所述的化合物也可經(jīng)皮膚傳遞。所述經(jīng)皮膚的組合物可采用霜劑、洗液、氣霧劑和/或乳液的形式，并且可被包括在基質(zhì)型或貯庫型的皮膚貼片之中，為達(dá)到該目的，這是本領(lǐng)域內(nèi)的常規(guī)方法。
所述藥用制劑優(yōu)選為單位劑型。在這種劑型中，將所述制劑再次分為含有適量的所述活性化合物的合適大小的單位劑量，例如有效達(dá)到所需目的的量。
在單位劑量的制劑中，所述活性化合物的量可根據(jù)具體的應(yīng)用，在從約0.01mg到約1000mg，優(yōu)選從約0.01mg到約750mg，更優(yōu)選從約0.01mg到約500mg，以及最優(yōu)選從約0.01mg到約250mg之間變化或調(diào)整。
所采用的實(shí)際劑量可根據(jù)患者的需要和被治療的疾病的嚴(yán)重程度而變化。對于具體情況判定合適的劑量方案在本領(lǐng)域的技術(shù)人員的知識范圍內(nèi)。為了方便，可將每日的總劑量根據(jù)需要分次在一天內(nèi)分成幾部分服用。
本發(fā)明的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽的服用量和服用頻度將根據(jù)臨床主治醫(yī)生在考慮年齡、疾病和患者體格以及被治療的癥狀的嚴(yán)重程度等因素后所做出的判斷進(jìn)行調(diào)整。用于口服的每日劑量典型的推薦方案可在從約0.04mg/天到約4000mg/天的范圍內(nèi)，分為1到4個分劑量。
本發(fā)明的另一方面是含有治療有效量的至少一個式I化合物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以及藥學(xué)上可接受的載體、媒介物或稀釋劑的藥劑盒。
實(shí)施例通過下述制備和實(shí)施例舉例說明本文公開的發(fā)明，不應(yīng)該將所述制劑和實(shí)施例理解成是為了限制所述公開的范圍。對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員，可替代的機(jī)械途徑和類似結(jié)構(gòu)是顯而易見的。
在提出的NMR數(shù)據(jù)中，在Varian VXR-200(200MHz，1H)、VarianGemini-300(300MHz)或XL-400(400MHz)上獲得1H光譜，并從Me4Si中以ppm低場紀(jì)錄，括號內(nèi)說明質(zhì)子數(shù)、多重性和以赫茲表示的偶合常數(shù)。在提出的LC/MS數(shù)據(jù)中，應(yīng)用Applied Biosystems API-100質(zhì)譜儀和Shimadzu SCL-10A LC柱進(jìn)行分析Alltech platinum C18，3微米，33mm×7mm內(nèi)徑；梯度流0分鐘-10％CH3CN水溶液，5分鐘-95％CH3CN水溶液，7分鐘-95％CH3CN水溶液，7.5分鐘-10％CH3CN水溶液，9分鐘，給出了保留時間和觀測的母離子。
可通過圓括號中的縮寫表示下述溶劑和試劑AcOEt表示乙酸乙酯；AcOH表示乙酸；AIBN表示2，2’-偶氮二異丁腈；DCM表示二氯甲烷；DCE表示二氯乙烷；DIBAH表示二異丁基氫化鋁；DEAD表示偶氮二羧酸二乙基酯；DMF表示二甲基甲酰胺；
EDCl表示1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺；Et2O表示二乙醚；EtOAc表示乙酸乙酯；HOBT表示1-羥基苯并三唑；LDA表示二異丙基氨化鋰；MS表示質(zhì)譜分析；Me表示甲基；MeOH表示甲醇；NMO表示N-甲基嗎啉N-氧化物；NaOH表示氫氧化鈉；NMR表示核磁共振；HRMS表示高分辨度質(zhì)譜分析；OTBDMS表示叔-丁基二甲基甲硅烷基氧基(或叔-丁基二甲基甲硅烷基醚)；OTBDPS表示叔-丁基二苯基甲硅烷基氧基(或叔-丁基二苯基甲硅烷基醚)；P表示保護(hù)基團(tuán)；Ph表示苯基；RT表示室溫；TBAF表示氟化四丁胺；TBDMS表示叔-丁基二甲基甲硅烷基；TBDMSCl表示叔-丁基二甲基甲硅烷基氯；TBDPSCl表示叔-丁基二苯基甲硅烷基氯；TBS表示叔-丁基甲硅烷基；TFA表示三氟乙酸；THF表示四氫呋喃；TMS表示三甲基硅烷；TMSCl表示三甲基甲硅烷基氯；
本領(lǐng)域技術(shù)人員可通過各種熟知的方法以及通過下述的方法制備式I化合物。下述方法是典型的方法1在方法1中，制備了具有結(jié)構(gòu)A的式I化合物。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)條件除去乙醇1中的保護(hù)基團(tuán)以產(chǎn)生胺，所述胺通過與磺?；u化物反應(yīng)進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為醇2。應(yīng)用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法可將醇2轉(zhuǎn)化為各種A型化合物。例如，通過使2與氯甲酸4-硝基苯基酯反應(yīng)，繼之通過使生成的碳酸酯與伯胺或仲胺的反應(yīng)可制備氨基甲酸酯?；蛘撸ㄟ^使2與酸鹵或羧酸在合適的偶合試劑如EDCl和HOBT存在下反應(yīng)可制備酯。
方法2在方法2中，制備具有結(jié)構(gòu)B的式I化合物。
通過環(huán)狀胺3與磺酰鹵的反應(yīng)將其轉(zhuǎn)化為磺酰胺，然后應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)條件如用LDA去質(zhì)子化，繼之與TMSCl反應(yīng)，使所述磺酰胺轉(zhuǎn)化為烯醇醚4。用合適的諸如四氧化鋨和NMO的試劑的混合物氧化烯醇醚4，繼之應(yīng)用典型的保護(hù)基團(tuán)例如叔-丁基二甲基甲硅烷基氯保護(hù)所述醇，最后產(chǎn)生酮5。應(yīng)用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的各種方法可將酮5去氧化成為亞烷基7，所述方法包括但不限于Wolf-Kishner型反應(yīng)和自由基去氧化反應(yīng)。例如，使酮5與合適的還原劑如氫硼化鈉反應(yīng)產(chǎn)生醇，繼之應(yīng)用氯硫代甲酸苯酯將所述醇轉(zhuǎn)化為硫代碳酸酯6。然后用自由基-引起的還原條件例如AIBN和三丁基氫化錫將硫代碳酸酯6還原為亞烷基7。然后除去亞烷基7中的醇保護(hù)基，并用方法1中描述的方法將所述醇轉(zhuǎn)化為B型化合物。
方法3在方法3中，制備了具有結(jié)構(gòu)C的式I化合物。
在方法3中，應(yīng)用典型的保護(hù)基如叔-丁基二甲基甲硅烷基氯對2-(羥甲基)-6-吡啶羧酸甲基酯8的醇官能團(tuán)進(jìn)行保護(hù)，然后用合適的催化劑如氧化鉑(優(yōu)選在乙酸存在下)氫化所述吡啶，得到胺9。通過使環(huán)胺9與磺酰鹵反應(yīng)將環(huán)狀胺9進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為磺酰胺，隨后用氫化物試劑如二異丁基氫化鋁還原，得到醛10。然后對醛10進(jìn)行Wittig反應(yīng)，并在標(biāo)準(zhǔn)條件如TBAF下去除所述醇保護(hù)基，得到醇11。然后應(yīng)用氧化劑如Dess-Martin periodinate將醇11氧化為醛，并使中間體醛與金屬烯如Grignard烯反應(yīng)，得到雙-烯醇12。在雙-烯醇12上用試劑如RuCl2(CHPh)[PCy3]2(Grubbs’s第二代催化劑)進(jìn)行閉環(huán)-置換反應(yīng)，獲得二環(huán)醇13。最后用方法1中描述的方法將所述醇13轉(zhuǎn)化為C型化合物。
方法4在方法4中，制備具有結(jié)構(gòu)D的式I化合物。
應(yīng)用合適的催化劑如氧化鉑氫化烯醇13，并應(yīng)用方法1中描述的方法將所產(chǎn)生的烷基醇轉(zhuǎn)化為D型化合物。
制備實(shí)施例1 步驟1向2-(羥甲基)-6-吡啶羧酸甲基酯(44.5g，0.26mol)的DCE(500ml)溶液中加入三乙胺(44ml，0.31mol)，隨后加入TBDMSCl(44g，0.29mol)，然后于70℃將反應(yīng)物加熱2天。濃縮后，在硅膠上(用己烷/AcOEt90∶10到50∶50洗脫)純化所述殘留物，得到68.5g TBS-保護(hù)的吡啶酯。
步驟2將步驟1中的TBS-保護(hù)的吡啶酯(68g，0.24mmol)和氧化鉑(IV)(6g，0.026mmol)的MeOH(500ml)和AcOH(50ml)溶液在40psi下氫化過夜。將所述混合物在Celite上過濾并濃縮。用1N的氫氧化鈉水溶液稀釋所述殘渣，用DCM和AcOEt萃取，用Na2SO4干燥并濃縮，獲得66g TBS-保護(hù)的哌啶酯。
步驟3將步驟2中的TBS-保護(hù)的哌啶酯(63g，0.22mol)、三乙胺(100ml，0.66mol)和4-氯苯磺酰基氯(93g，0.44mol)的DCE(500ml)溶液加熱至40℃過夜。濃縮后，在硅膠上(用己烷/AcOEt 97∶3到90∶10，然后用DCM/AcOEt 90∶10洗脫)純化所述殘留物，得到89g TBS-保護(hù)的哌啶磺酰胺酯。
步驟4在-78℃下，向步驟3中的TBS-保護(hù)的哌啶磺酰胺酯(23.5g，50.9mmol)的無水DCM(250ml)溶液中，緩緩加入1N的DIBAH的甲苯溶液(55ml，55mmol)，并在該溫度下攪拌所述反應(yīng)混合物1小時。然后在-78℃下，用15％Rochelle鹽溶液(300ml)猝滅所述最終的混合物。然后用DCM稀釋所述反應(yīng)，加入Celite并在室溫下攪拌所述混合物1小時，然后過濾，用DCM和AcOEt萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt 95∶5到80∶20洗脫)純化所述殘留物，得到16.37gTBS-保護(hù)的哌啶磺酰胺醛。
步驟5在-78℃下，向甲基三苯基溴化鏻(14.65g，41mmol)的THF(150ml)溶液中加入2.5N的正-丁基鋰的己烷(16.4ml，41mmol)溶液，然后將所述反應(yīng)加溫到0℃。然后再冷卻到-78℃并在-78℃下將插管插入步驟4的TBS-保護(hù)的哌啶磺酰胺醛(16.35g，37.8mmol)的THF(100ml)溶液中。在-78℃下攪拌反應(yīng)物30分鐘，然后在室溫下攪拌30分鐘。濃縮最終的混合物，用5％NaHCO3水溶液和DCM稀釋，用DCM萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt 95∶5到80∶20洗脫)純化，得到9.81g TBS-保護(hù)的烯。
步驟6將步驟5的TBS-保護(hù)的烯(9.81g，22.8mmol)和溶于THF(45ml，45mmol)中的TBAF(1N)的THF(50ml)的溶液在50℃下攪拌1小時，然后濃縮。將所述殘渣溶于水中，用DCM、AcOEt萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt 80∶20到60∶40洗脫)純化所述殘留物，得到7.00g烯醇。
步驟7向步驟6中的烯醇(7.00g，22.2mmol)的DCM(100ml)的溶液中加入Dess-Martin periodinate(18.8g，44.4mmol)和NaHCO3(5.59g，66.6mmol)。將所述溶液在室溫下攪拌3小時，然后用5％Na2S2O3(400ml)稀釋，用DCM萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt95∶5到80∶20洗脫)純化所述殘留物，得到4.78g烯醛。
步驟8在-40℃下，向步驟7中的烯醛(3.68g，11.73mmol)的THF(60ml)的溶液中加入溶于己烷(14ml，14mmol)的1N的乙烯基溴化鎂并將所述反應(yīng)加溫到-20℃。在該溫度下放置30分鐘后，用飽和的NH4Cl水溶液猝滅所述反應(yīng)，用DCM、AcOEt萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt 93∶7到50∶50洗脫)純化所述殘渣，按洗脫順序得到540mg起始烯醛、675mg雙-烯醇異構(gòu)體A(12a)和2.63g雙-烯醇異構(gòu)體B(12b)。
步驟9將步驟8中的雙-烯醇異構(gòu)體B(2.55g，7.46mmol)的DCM(350ml)的溶液在真空脫氣，然后放置于氮?dú)庀?。然后加入雙(三環(huán)己基膦)次芐基二氯化釕(IV)(930mg，1.11mmol)，并將所述反應(yīng)物在50℃下攪拌過夜。然后濃縮所述最終溶液并在硅膠上(用己烷/AcOEt 85∶15到40∶60洗脫)純化，按洗脫順序得到4.35mg起始原料和1.31g氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷烯醇。
步驟10將步驟9中的氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷烯醇(1.40g，4.46mmol)和氧化鉑(IV)(215mg)的AcOEt(30ml)的溶液在大氣壓下氫化2小時。將所述最終的混合物在Celite上過濾并濃縮。然后在硅膠上(用己烷/AcOEt90∶10到60∶40洗脫)純化所述殘留物，得到1.24g氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷醇。
步驟11向步驟10中的氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷醇(170mg，0.54mmol)的DCE(2.7ml)溶液中加入對-硝基苯基氯甲酸酯(217mg，1.10mmol)，隨后加入三乙胺(0.4ml)并將所述反應(yīng)在室溫下攪拌過夜。濃縮后，在硅膠上(用DCM洗脫)純化所述殘留物，得到192mg氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷碳酸酯。
步驟12向氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷碳酸酯(200mg，0.40mmol)的DCE溶液中加入N-(2-羥乙基)哌嗪(0.1ml，0.80mmol)，并將所述反應(yīng)加熱至50℃過夜。用0.5的NaOH水溶液稀釋所述混合物，用DCM和AcOEt萃取，并用Na2SO4干燥。將濃縮后獲得的殘留物在硅膠上(用DCM/MeOH 9∶1洗脫)純化，得到40mg式14的產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ7.76(d，J＝8.4Hz，2H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，4.77(m，1H)，4.28(m，1H)，3.95(m，1H)，3.55-3.70(m，4H)，3.35-3.55(m，2H)，2.40-2.65(m，8H)，1.45-1.90(m，9H)；HRMS(MH+)472.1994。
按照與制備實(shí)施例1的方法相同的方法，并在合成中采用(步驟8中的)雙-烯醇異構(gòu)體A或雙-烯醇異構(gòu)體B，可制備表1中的化合物
表1





制備實(shí)施例2 式33使上述制備實(shí)施例1步驟9中的醇經(jīng)歷與制備實(shí)施例1步驟11和步驟12所描述的那些條件相同的條件，在最后的步驟中采用4-哌啶子基哌啶代替N-(2-羥乙基)哌嗪，獲得所期望的式33的產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ7.78(d，J＝8.4Hz，2H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，5.95-6.05(m，2H)，4.86(brs，1H)，4.10-4.45(m，3H)，3.75-4.05(m，1H)，2.40-2.85(m，8H)，1.30-2.00(m，15H)；MS(ES)m/e 508.1(M+H)+；保留時間5.35分鐘。
按照與制備實(shí)施例2的方法相同的方法，并在合成中采用雙-烯醇異構(gòu)體A，可制備下述表2中的化合物
表2 制備實(shí)施例3 式35步驟1在50℃下，將外(exo)-7-芐基-7-氮雜-雙環(huán)[2.2.1]庚-2-醇(1.86g，9.1mmol)、甲酸銨(3.47g，55mmol)和10％Pd/C(200mg)的MeOH(20ml)混合液攪拌2小時。將所述溶液在Celite上過濾，用MeOH漂洗，然后用1N的HCl漂洗直至pH值為1。然后用水稀釋所述溶液，用Et2O洗滌并濃縮。將剩余的固體(4.8g)溶于1N的NaOH(100ml)中，用4-氯苯-磺酰氯(10.55g，50mmol)的DCM(40ml)溶液處理過夜。用水和DCM稀釋所述混合物，用DCM萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用DCM/AcOEt 90∶10到80∶20洗脫)純化，得到1.87g磺酰胺醇。
步驟2使步驟1中的產(chǎn)物經(jīng)歷與上述制備實(shí)施例1步驟11和步驟12所描述的條件相同的條件，在最后的步驟中采用4-哌啶子基哌啶，獲得所期望的式35的產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ7.81(d，J＝8.4Hz，2H)，7.42(d，J＝8.4Hz，2H)，4.64(m，1H)，3.90-4.25(m，4H)，2.55-2.75(m，2H)，2.30-2.55(m，5H)，1.65-1.95(m，6H)，1.50-1.60(m，4H)，1.30-1.45(m，6H)；MS(ES)m/e 482.3(M+H)+；保留時間3.71分鐘。
按照與制備實(shí)施例3的方法相同的方法，可制備下述表3中的化合物
表3

制備實(shí)施例4 式42步驟1將去甲-托品酮?dú)滗寤?6.05g，29.5mmol)、4-氯苯基磺酰氯(6.65g，31.5mmol)、K2CO3(9.70g，70mmol)和四丁基溴化銨(200mg)的DCM(70ml)和水(70ml)的溶液在室溫下攪拌過夜。用DCM萃取所述混合物，用Na2SO4干燥，濃縮。并在硅膠上(用DCM/AcOEt 95∶5洗脫)純化，獲得9.04g去甲(nor)-托品酮磺酰胺。
步驟2在-78℃下，用10分鐘向溶于庚烷(16.1ml，32.2mmol)的LDA(2N)的THF(120ml)溶液中緩緩加入步驟1中的去甲-托品酮磺酰胺(8.06g，26.9mmol)的THF(160ml)溶液。在-78℃下35分鐘后，加入氯三甲基硅烷(6.8ml)，將所述反應(yīng)在-78℃下攪拌20分鐘，加入飽和的NaHCO3水溶液并將所述混合物加溫至室溫。在用Et2O萃取，用Na2SO4干燥并濃縮后，在硅膠上(用己烷/DCM 1∶1到DCM洗脫)純化所述殘留物，獲得3.88g去甲-托品酮磺酰胺烯醇醚。
步驟3在0℃下，向步驟2中的去甲-托品酮磺酰胺烯醇醚(3.88g，10.43mmol)和NMO(1.51g，12.9mmol)的THF(40ml)和水(15ml)溶液中加入OsO4(100mg，0.40mmol)，然后將所述反應(yīng)在室溫下攪拌過夜。濃縮后，用AcOEt和10％Na2SO3水溶液稀釋所述溶液，用AcOEt萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用DCM/AcOEt 90∶10到80∶20洗脫)純化所述殘留物，獲得1.51gα-羥基酮磺酰胺。
步驟4將步驟3中的α-羥基酮磺酰胺(1.50g，4.75mmol)、TBDMSCl(860mg，5.70mmol)和咪唑(390mg，5.70mmol)的DMF(6ml)溶液在40℃下攪拌過夜。用水和Et2O稀釋所述冷卻的溶液，用Et2O萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/DCM 1∶1到DCM洗脫)純化所述殘留物，獲得1.53g O-TBS酮磺酰胺。
步驟5在0℃下，向步驟4中的O-TBS酮磺酰胺(1.53g，3.56mmol)的MeOH(10ml)溶液中緩緩加入NaBH4(135mg，3.56mmol)，并將所述溶液在此溫度下攪拌2小時。濃縮最終的混合物，用水稀釋，用DCM和AcOEt萃取，并用Na2SO4干燥。將濃縮后獲得的殘留物在硅膠上(用DCM到DCM/AcOEt 9∶1洗脫)純化，獲得1.51g O-TBS醇磺酰胺。
步驟6在-78℃下，向步驟5中的O-TBS醇磺酰胺(1.10g，2.55mmol)的THF(10ml)溶液中加入2.5N的正-丁基鋰的己烷(1.l0ml，2.80mmol)溶液，繼而在1分鐘后，加入硫羰基氯甲酸苯基酯(460μl，3.32mmol)。將所述反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌30分鐘，然后加溫到室溫下并攪拌1小時。用5％NaHCO3處理最終的溶液，用DCM(3×)、AcOEt(1×)萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/DCM 60∶40到DCM洗脫)純化所述殘留物，獲得1.34g O-TBS硫代碳酸酯磺酰胺。
步驟7將步驟6中的O-TBS硫代碳酸酯磺酰胺(1.34g，2.36mmol)、氯化三丁錫(1.35ml，5.0mmol)和AIBN(107mg，0.65mmol)溶液在回流下攪拌6小時，然后濃縮。在硅膠上(用己烷/DCM 60∶40到DCM洗脫)純化所述粗品，獲得514mg含有其它成分的O-TBS磺酰胺。
步驟8將步驟7中的O-TBS磺酰胺(754mg，1.23mmol)和溶于THF(2ml，2.0mmol)的TBAF(1N)的THF(3ml)溶液在40℃下攪拌2小時，然后濃縮。用飽和的NH4Cl水溶液、DCM和AcOEt處理得到殘留物，所述殘留物在硅膠上(用DCM/AcOEt 88∶12到85∶15洗脫)純化，獲得105mg醇磺酰胺。
步驟9使步驟8中的產(chǎn)物經(jīng)歷與實(shí)施例1步驟11和步驟12所描述的條件相同的條件，在最后的步驟中采用N-(2-羥乙基)-哌嗪，獲得所期望的式42的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3300MHz)δ7.77(d，J＝8.4Hz，2H)，7.43(d，J＝8.4Hz，2H)，4.59(br s，1H)，4.28(br d，2H)，3.30-3.70(m，6H)，2.45-2.65(m，7H)，2.06(m，1H)，1.40-1.85(m，7H)；MS(ES)m/e 458.1(M+H)+；保留時間3.65分鐘。
按照與制備實(shí)施例4的方法相同的方法，可制備表4中的化合物表4
制備實(shí)施例5 式44步驟1將制備實(shí)施例1步驟10中的產(chǎn)物醇(450mg，1.42mmol)和Dess-Martin periodinate(15％溶于DCM中，4.80g，1.70mmol)的DCM(5ml)溶液在室溫下攪拌3小時。用5％硫代硫酸鈉處理所述混合物，用DCM萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt 90∶10到60∶40洗脫)純化所述殘留物，獲得460mg酮。
步驟2在-20℃下，向步驟1中的酮(150mg，0.48mmol)的THF(3ml)溶液中緩緩加入3N的MeMgBr(190μl，0.56mmol)溶液，然后將所述反應(yīng)加溫到0℃。1小時后，將所述最終的溶液傾倒到飽和的NH4Cl中，并用DCM、AcOEt萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt 90∶10到60∶40洗脫)純化所述殘留物，獲得125mg醇。
步驟3使步驟2中的產(chǎn)物經(jīng)歷與制備實(shí)施例1步驟11和步驟12所描述的條件相同的條件，在最后的步驟中采用N-(2-羥乙基)-哌嗪，獲得所期望的式44的產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ7.79(d，J＝8.4Hz，2H)，7.46(d，J＝8.4Hz，2H)，4.43(m，1H)，4.08(m，1H)，3.60-3.70(m，3H)，3.40-3.55(m，4H)，2.40-2.70(m，8H)，1.40-2.20(m，9H)，1.54(s，3H)；MS(ES)m/e 486.1(M+H)+；保留時間4.06分鐘。
按照與制備實(shí)施例5的方法相同的方法，可制備表5中的化合物表5 制備實(shí)施例6 式46
步驟1在-20℃下，向二乙基鋅(1N溶于己烷中，5ml，5mmol)的DCE(20ml)溶液中緩緩加入氯代碘甲烷(370μl，5mmol)，并將所述反應(yīng)在此溫度下攪拌5分鐘。然后加入制備實(shí)施例1步驟9中的產(chǎn)物醇(740mg，2.36mmol)的DCE(3ml)溶液，然后將所述反應(yīng)在-10℃下攪拌1小時，在室溫下攪拌1小時。用飽和的NH4Cl猝滅所述最終的混合物，用DCM萃取，用Na2SO4干燥并濃縮。在硅膠上(用己烷/AcOEt 80∶20到50∶50洗脫)純化所述粗品以獲得512mg環(huán)丙基醇。
步驟2使步驟1中的產(chǎn)物經(jīng)歷與制備實(shí)施例1步驟11和步驟12所描述的條件相同的條件，在最后的步驟中采用N-(2-羥乙基)-哌嗪，獲得所期望的式46的產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3300MHz)δ7.74(d，J＝8.4Hz，2H)，7.45(d，J＝8.4Hz，2H)，4.91(d，J＝7.5Hz，1H)，4.30(br s，1H)，3.90(m，1H)，3.63(m，2H)，3.30-3.55(m，4H)，2.40-2.60(m，8H)，1.90-2.10(m，1H)，1.35-1.70(m，8H)，0.98(m，1H)，0.50-0.62(m，2H)；MS(ES)m/e 484.1(M+H)+；保留時間4.28分鐘。
按照與制備實(shí)施例6的方法相同的方法，可制備表6中的化合物
表6 檢測可通過大量的藥理學(xué)檢測法證實(shí)本發(fā)明化合物的藥理學(xué)性質(zhì)。使用本發(fā)明的化合物及其鹽已進(jìn)行了此后將要描述的示范性的藥理學(xué)檢測。
按照Zhang等(Biochemistry)，40(16)，5049-5055，2001)描述的方法檢測γ-分泌素酶的活性，所述方法通過引用結(jié)合在本文中。既可以用抑制百分率也可以用使酶活性產(chǎn)生50％抑制的化合物的濃度來表示活性。
試劑?？贵wW02、G2-10和G2-11獲自Dr.Konrad Beyreuther(University of Heidelberg，Heidelberg，Germany)。W02識別Aβ多肽的5-8位殘基，而G2-10和G2-11分別識別Aβ40和Aβ42的特異性C-末端結(jié)構(gòu)。生物素-4G8購自Senetec(St.Louis，MO)。除非另有特別說明，所有應(yīng)用于本工作的組織培養(yǎng)試劑來自Life Technologies，Inc.。胃蛋白酶抑制劑A購自Roche Molecular Biochemicals；DFK 167來自Enzyme Systems Products(Livemore，CA)。
cDNA的構(gòu)建、組織培養(yǎng)和細(xì)胞系構(gòu)建。含有APP(攜帶London突變體)的第一段18位殘基和C-末端99位氨基酸的SPC99-Lon的構(gòu)建已在Zhang，L.，Song，L.，和Parker，E.，(1999年)J.Biol.Chem.274，8966-8972中描述。17氨基酸信號肽在導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)時，所述信號肽被處理，將AβSPC99-lon的N-末端留下的另外的亮氨酸克隆到pcDNA4/TO載體(Invitrogen)中并轉(zhuǎn)染到293個細(xì)胞中，所述細(xì)胞可用pcDNA6/TR穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染，所述載體由T-REx系統(tǒng)(Invitrogen)提供。在Dulbecco的改良Eagle’s培養(yǎng)基(DMEM)中選擇轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，所述培養(yǎng)基添加有10％胎牛血清、100單位/ml青霉素、100g/ml鏈霉素、250g/ml zeocin和5g/ml殺稻瘟菌素(Invitrogen)。用0.1g/ml四環(huán)素16-20小時，誘導(dǎo)C99表達(dá)并用sandwich免疫法(見下述)檢測分析條件培養(yǎng)基，通過上述方法篩選產(chǎn)生Aβ的菌落。將克隆之一(被指定為pTRE.15)用于所述研究。
膜制備。用0.1g/ml四環(huán)素誘導(dǎo)細(xì)胞中C 99的表達(dá)20小時。在收集細(xì)胞前，用1M佛波醇12-豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)和1M布雷菲德菌素A(BFA)將所述細(xì)胞于37℃下預(yù)處理5-6小時。將所述細(xì)胞用冷的磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次，并在含有20mM的Hepes(pH7.5)、250mM的蔗糖、50mM的KCl、2mM的EDTA、2mM的EGTA和全蛋白酶抑制劑片劑(Roche Molecular Biochemicals)的緩沖液A中收集細(xì)胞。在液氮中快速冷凍所述細(xì)胞沉淀并在使用前貯藏于-70℃。
為了制備膜，將所述細(xì)胞混懸于緩沖液A中并在600psi下將其溶解于氮?dú)夤拗小⑺黾?xì)胞的溶解產(chǎn)物于1500g離心10分鐘以去除核及大的細(xì)胞碎片。以100000g離心上清液1小時。將所述膜的沉淀混懸于緩沖液A加0.5M的NaCl中，并以200000g離心1小時以收集所述膜。將鹽水-洗滌的膜的沉淀用緩沖液A再次洗滌并以100000g離心1小時。用Teflon-玻璃勻漿器將最終的膜沉淀重新混懸于少量體積的緩沖液A中。測定所述蛋白的濃度，并將所述膜等分試樣在液氮中快速冷凍并貯藏于-70℃。
γ-分泌素酶反應(yīng)和Aβ分析。為測定γ-分泌素酶的活性，將膜置于50μl含有20mM的Hepes(pH7.0)和2mM的EDTA的緩沖液中于37℃孵育1小時。在所述孵育結(jié)束時，用電化學(xué)發(fā)光(ECL)-為基礎(chǔ)的免疫分析法測定Aβ40和Aβ42。用抗體對TAG-G2-10和生物素-W02鑒別Aβ40，同時用TAG-G2-11和生物素-4G8鑒別Aβ42。根據(jù)制造規(guī)程用ECL-M8儀器(IGEN International，Inc.)測定所述ECL信號。在每一個實(shí)驗(yàn)中，呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)是一式兩份或一式三份測定的平均值。采用多于5次的獨(dú)立的膜制備物驗(yàn)證所述γ-分泌素酶活性的特征。
實(shí)施例16的化合物具有約16nM的IC50。實(shí)施例18、19、20、33和48的化合物具有范圍約50nM到約0.1μM的IC50。實(shí)施例14、17、21、22、23、24、25、26、27、28、29、34和43的化合物具有范圍約0.1μM到約1.0μM的IC50。實(shí)施例15、35、36、37和40的化合物具有范圍約1μM到約10μM的IC50。
盡管結(jié)合上述的具體實(shí)施方案已描述了本發(fā)明，但其許多替代、修改和變化對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。所有這些替代、修改和變化均包含于本發(fā)明的精神和范疇之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種化合物或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽和/或溶劑化物，所述化合物具有式I所示的通用結(jié)構(gòu) 式I其中Ar是芳基或雜芳基；X是O、NH或NR6；m是0、1、2或3，前提是當(dāng)m＝0時，不存在雙鍵，而當(dāng)m＞0時，可以存在或不存在雙鍵，或者可以存在或不存在三鍵；n是0、1、2或3；R1是1到3個取代基，所述取代基獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、鹵素、-CF3、-OCF3、-NR6R7、-CN、-NO2、-NH2、-亞烷基-NR6R7、-亞烷基-O-烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)NR6R7、-N(R6)C(O)烷基、-N(R6)C(O)環(huán)烷基、-N(R6)C(O)芳基、-N(R6)C(O)雜芳基、-N(R6)C(O)O-烷基、-N(R6)C(O)NR6R7、-N(R6)S(O)2烷基、-OH、-O-烷基和-O環(huán)烷基；R2是氫、-烷基、-環(huán)烷基、-亞烷基-環(huán)烷基、-環(huán)烷基、-NR6R7、-亞烷基-NR6R7、-亞烷基-O-烷基、-O-烷基、-雜芳基或-芳基；R3是1到6個取代基，所述取代基可以相同或不同，各自獨(dú)立選自氫、鹵素、-烷基、-環(huán)烷基、-OH、-OCF3、-CF3、O-烷基、-O-環(huán)烷基或-NR6R7；R4是氫、-烷基、-環(huán)烷基、-芳基或-雜芳基；或者R3和R4可以結(jié)合在一起形成3到6元環(huán)；R5是-NR6R7、-N(R6)-亞烷基-NR6R7、-烷基、-環(huán)烷基、-芳基、-雜芳基、-環(huán)烷基、-亞烷基-芳基、-亞烷基-雜芳基、-環(huán)亞烷基-芳基、-環(huán)亞烷基-雜芳基、-雜環(huán)烷基-芳基或-雜環(huán)烷基-雜芳基；或者R5選自 和 R6和R7可以相同或不同，各自獨(dú)立選自氫、-芳基、-雜芳基、-烷基、-環(huán)烷基、-亞烷基-芳基、-亞烷基-雜芳基、 和 r是0、1、2、3或4；s是0、1、2或3；R8是氫、-OH、-烷基、-C(O)NR6R7、-C(O)O-烷基或芳基，其中所述烷基部分可以未被取代或被1到4個羥基取代，而所述芳基可以未被取代或被至少一個選自以下取代基取代烷基、環(huán)烷基、鹵素、-CF3、-OCF3、-NR6R7、-CN、-NO2、-NH2、-亞烷基-NR6R7、-亞烷基-O-烷基、-C(O)O-烷基、-C(O)NR6R7、-N(R6)C(O)烷基、-N(R6)C(O)環(huán)烷基、-N(R6)C(O)芳基、-N(R6)C(O)雜芳基、-N(R6)C(O)O-烷基、-N(R6)C(O)NR6R7、-N(R6)S(O)2烷基、-OH、-O-烷基和-O-環(huán)烷基；R9是選自氫、烷基、-環(huán)烷基、-亞烷基-芳基、-亞烷基-雜芳基、-烷基-環(huán)烷基、-C(O)O-烷基、-亞烷基-O-亞烷基-OH、-芳基和-雜芳基，其中所述烷基和環(huán)烷基部分各自可獨(dú)立被取代或不被取代，并且如果被取代，則被1到4個羥基或至少一個-NR6R7基團(tuán)所取代；R10各自獨(dú)立選自氫或烷基，其中所述烷基可被取代或不被取代，并且如果被取代，則R10被1到4個羥基所取代；R11和R12各自獨(dú)立選自氫、-烷基或芳基；或者R11和R12與它們在式I中所示的連接的環(huán)碳原子一起，形成一個環(huán)烷基環(huán)，并且其中所述由此而形成的環(huán)烷基環(huán)可以不被取代或被烷基、烷氧基、芳基或鹵素所取代；p是0、1、2、3或4；并且q是0、1、或2。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是芳基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中X＝O。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是鹵基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是H。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R3是H。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中R4是氫。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中R5是NR6R7、-NR6-亞烷基-NR6R7， 或
9.權(quán)利要求1的化合物，其中m是0或1。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中n是1或2。
11.權(quán)利要求2的化合物，其中Ar是苯基。
12.權(quán)利要求7的化合物，其中R4是-CH3。
13.權(quán)利要求4的化合物，其中R1是4-氯基。
14.權(quán)利要求8的化合物，其中R5是 或
15.權(quán)利要求1的化合物，其中Ar是芳基；X＝O；R1是鹵基；R2是H；R3是H；R4是H；以及R5是 或
16.權(quán)利要求15的化合物，其中在式I代表的雙環(huán)結(jié)構(gòu)中存在一個雙鍵。
17.權(quán)利要求15的化合物，其中m＝1且n＝2。
18.權(quán)利要求15的化合物，其中m＝1且n＝1。
19.權(quán)利要求15的化合物，其中m＝0且n＝1。
20.權(quán)利要求15的化合物，其中R5是
21.一種化合物，所述化合物選自
22.一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或溶劑化物，其中所述化合物具有下述結(jié)構(gòu)
23.一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或溶劑化物，其中所述化合物具有下述結(jié)構(gòu)
24.一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或溶劑化物，其中所述化合物具有下述結(jié)構(gòu)
25.一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或溶劑化物，其中所述化合物具有下述結(jié)構(gòu)
26.一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或溶劑化物，其中所述化合物具有下述結(jié)構(gòu)
27.一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或溶劑化物，其中所述化合物具有下述結(jié)構(gòu)
28.一種藥用組合物，所述組合物含有至少一種權(quán)利要求1的化合物和至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
29.一種在有這種治療需要的患者中抑制γ-分泌素酶的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1的化合物。
30.一種在有這種治療需要的患者中治療一種或多種神經(jīng)退行性疾病的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1的化合物。
31.一種在有這種抑制需要的患者中抑制β淀粉樣蛋白沉積的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1的化合物。
32.一種在有這種治療需要的患者中治療阿爾茨海默氏病的方法，所述方法包括給予所述患者治療有效量的一種或多種權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明公開了式(I)的新的γ－分泌素酶抑制劑，其中各部分在本文中均有描述。同時公開了一種使用式(I)化合物或含有式(I)化合物的組合物治療阿爾茨海默氏病的方法。
文檔編號C07D451/14GK1820010SQ200480019637
公開日2006年8月16日 申請日期2004年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月13日
發(fā)明者H·喬希恩 申請人:先靈公司