專利名稱：吡咯和吡唑daao抑制劑的制作方法
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背景技術：
酶D氨基酸氧化酶(DAAO)代謝D氨基酸，特別是，在生理pH下在體外代謝D-絲氨酸。DAAO在哺乳動物腦和外周中表達。D-絲氨酸作為神經(jīng)遞質(zhì)在谷氨酸受體的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)選擇性亞型的激活中起重要的作用，谷氨酸受體的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)選擇性亞型是在神經(jīng)元中表達的離子通道，本文稱之為NMDA受體。抑制DAAO酶周期的有機小分子可能控制D-絲氨酸的水平，并因此影響腦中NMDA受體的活性。NMDA受體的活性在多種疾病狀態(tài)，例如精神分裂癥、精神病、共濟失調(diào)、缺血、包括神經(jīng)性疼痛在內(nèi)的幾種形式的疼痛以及記憶和認知缺陷中是重要的。
抑制DAAO酶周期的有機小分子還可能控制D-絲氨酸氧化的毒代謝物，例如過氧化氫和氨的產(chǎn)生。因此，這些分子可能影響神經(jīng)變性病癥中細胞丟失的進程。神經(jīng)變性疾病是其中CNS神經(jīng)元和/或外周神經(jīng)元發(fā)生進行性功能喪失的疾病，通常伴隨神經(jīng)元本身或神經(jīng)元與其它神經(jīng)元之間的接觸面的結構的物理退化。這些病癥包括帕金森氏病、阿爾茨海默氏病、亨廷頓氏病和神經(jīng)性疼痛。N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)-谷氨酸受體在整個中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的興奮性突觸部位表達。這些受體介導與某些類型的記憶形成和學習有關的多種腦過程，包括突觸可塑性。NMDA谷氨酸受體需要與兩個激動劑結合以實現(xiàn)神經(jīng)傳遞。這些激動劑之一是興奮性氨基酸L-谷氨酸，而在所謂的“馬錢子堿不敏感的甘氨酸位點”的第二種激動劑現(xiàn)在認為是D-絲氨酸。在動物中，D-絲氨酸通過絲氨酸消旋酶從L絲氨酸合成，并被DAAO降解為其相應的酮酸。絲氨酸消旋酶與DAAO一起被認為通過調(diào)節(jié)CNS中D-絲氨酸的濃度而在調(diào)節(jié)NMDA神經(jīng)傳遞中發(fā)揮關鍵的作用。
阿爾茨海默氏病表現(xiàn)為一種形式的癡呆，其通常涉及心智退化，反映在記憶喪失、精神錯亂和定向障礙。在本發(fā)明的上下文中，癡呆定義為在認知功能的多方面發(fā)生進行性衰退的綜合征，最終導致不能維持正常的社會和/或職業(yè)表現(xiàn)。早期癥狀包括記憶減退和特定的認知功能的輕度但進行性退化，所述特定的認知功能例如語言(失語癥)、運動技能(失用癥)和知覺(失認癥)。阿爾茨海默氏病最早表現(xiàn)通常為記憶障礙，其是特定針對阿爾茨海默氏病的the National Instituteof Neurological and Communicative Disorders and Stroke-Alzheimer′sDisease-and the Alzheimer′s Disease and Related Disorders Association(NINCDS-ADRDA)標準(McKhann等，1984，Neurology 34939-944)和適用于所有形式的癡呆的美國精神病學協(xié)會的Diagnostic andStatistical Manual of Mental Disorders，第四版(DSM-IV)標準中對癡呆診斷的要求。還可以根據(jù)the Alzheimer’s disease AssessmentScale-cognitive subscale(ADAS-cog；Rosen等，1984，Am.J.Psychiatry1411356-1364)對患者的認知功能進行評價。阿爾茨海默氏病通常用乙酰膽堿酯酶抑制劑如鹽酸他克林或多奈哌齊進行治療。遺憾的是，認為現(xiàn)有的幾種形式的記憶喪失和學習障礙的治療還不足以對患者產(chǎn)生顯著的效果，目前仍缺乏用于這種治療的標準益智藥。
神經(jīng)精神病癥包括精神分裂癥、孤獨癥和注意力缺陷病癥。臨床醫(yī)師識別這些病癥之間的區(qū)別，并有多種方案對它們進行分類。美國精神病學協(xié)會出版的Diagnostic and Statistical Manual of MentalDisorders，修訂版，第四版(DSM-IV-R)為本領域技術人員提供了參考的標準診斷系統(tǒng)，該文獻引入本文作為參考。根據(jù)DSM-IV的框架，軸I的精神病癥包括兒童中診斷的病癥(如注意力缺陷病癥(ADD)和注意力缺陷過動癥(ADHD))和成人中診斷的病癥。成人中診斷的病癥包括(1)精神分裂癥和精神病癥；(2)認知障礙；(3)心境障礙；(4)焦慮相關病癥；(5)進食障礙；(6)物質(zhì)相關病癥；(7)人格障礙；以及(8)該方案中“尚未包括在內(nèi)的病癥”。
ADD和ADHD是兒童中最普遍的病癥，與運動活性增加和注意力時長下降有關。這些病癥通常通過給予精神興奮藥如哌醋甲酯和硫酸右旋苯異丙胺來治療。
精神分裂癥代表一組神經(jīng)精神病癥，其特征為思考過程的功能障礙，如妄想、幻覺和患者對其它人的興趣大幅減退。世界人口中約有百分之一的人罹患精神分裂癥，這一病癥伴有高發(fā)病率和高死亡率。所謂的精神分裂癥的陰性癥狀包括情感遲鈍、無力、失語和社會退縮，可以使用SANS(Andreasen，1983，Scales for the Assessment ofNegative Symptoms(SANS)，Iowa City，Iowa)對其進行評價。精神分裂癥的陽性癥狀包括妄想和幻覺，可以使用PANSS(Positive andNegative Syndrome Scale)(Kay等，1987，Schizophrenia Bulletin 13261-276)對其進行評價。精神分裂癥的認知癥狀包括獲取、組織和使用知識的能力障礙，可以使用the Positive and Negative SyndromeScale-cognitive subscale(PANSS-cognitive subscale)(Lindenmayer等，1994，J.Nerv.Ment.Dis.182631-638)對其進行評價或者利用認知任務如the Wisconsin Card Sorting Test對其進行評價。作用于多巴胺D2受體的常規(guī)抗精神病藥物可用于治療精神分裂癥的陽性癥狀，例如妄想和幻覺。一般而言，作用于多巴胺D2受體和5HT25-羥色胺受體的常規(guī)抗精神病藥物和非典型抗精神病藥物對治療認知缺陷和陰性癥狀例如情感遲鈍(即缺乏面部表情)、無力和社會退縮效果有限。
表現(xiàn)為記憶和學習缺陷的其它病癥包括良性遺忘癥和閉合性頭部損傷。良性遺忘癥指不能找回或回憶起曾經(jīng)記錄、學習或儲存于記憶中的信息(例如不能記起鑰匙放在哪里或車停在哪里)的輕微傾向。良性遺忘癥通常影響40歲以上的個體，并且可以通過標準評價工具如the Wechsler Memory Scale進行識別。閉合性頭部損傷是指頭部損傷或創(chuàng)傷后的臨床病癥。根據(jù)DSM-IV，這種以認知和記憶障礙為特征的病癥可以被診斷為“由一般醫(yī)學病癥引起的遺忘性病癥”。
如Frisell等，J.Biol.Chem.，22375-83(1956)和Parikh等，JACS，80953(1958)所述，已知的DAAO抑制劑包括苯甲酸、吡咯-2-羧酸和吲哚-2-羧酸。吲哚衍生物，特別是某些吲哚-2-羧酸酯在治療神經(jīng)變性疾病和神經(jīng)毒性損傷的文獻中已有描述。EP 396124公開了吲哚-2-羧酸酯及其衍生物用于由CNS病癥或創(chuàng)傷事件導致的神經(jīng)毒性損傷的治療或控制或用于神經(jīng)變性疾病的治療或控制。給出了可能導致神經(jīng)毒性損傷的創(chuàng)傷事件的幾個實例，包括與圍產(chǎn)期窒息、心臟停搏或中風相關的低氧、缺氧和缺血。神經(jīng)變性與CNS病癥，例如驚厥和癲癇有關。Cugola的美國專利5,373,018、5,374,649、5,686,461、5,962,496和6,100,289公開了使用吲哚衍生物治療神經(jīng)毒性損傷和神經(jīng)變性疾病。上述參考文獻中沒有一篇提及學習、記憶或認知的改善或提高。
WO 03/039540公開了使用DAAO抑制劑，包括吲哚-2-羧酸增強學習、記憶和認知和治療神經(jīng)變性病癥。但是，仍然需要臨床上有效治療記憶缺陷、學習障礙和認知喪失以及與NMDA受體活性或其缺乏有關的其它癥狀的新藥。
van Herk等(J.Med.Chem.，46(18)3945-51(2003))將某些吡唑-3-羧酸描述為煙酸受體的部分激動劑。還給出了制備該化合物的合成路線，并測定了該化合物對煙酸結合的抑制。沒有提及對NMDA受體的活性或?qū)AAO的抑制。

發(fā)明內(nèi)容
意想不到地發(fā)現(xiàn)某些吡咯和吡唑衍生物表現(xiàn)比已知抑制劑具有更強的DAAO抑制活性。已觀察到，特別是相對于已知的DAAO抑制劑，例如苯甲酸、吡咯-2-羧酸和吲哚-2-羧酸而言，這些化合物在體外抑制DAAO的濃度要低的多。由于具有這種抑制DAAO活性的能力，這些吡咯和吡唑衍生物用于治療其中通過調(diào)節(jié)D-絲氨酸水平和/或其氧化產(chǎn)物以有效緩解癥狀的各種疾病和/或病癥，同時減輕不期望的副作用。具體而言，這些化合物可用于增加D-絲氨酸水平并降低D-絲氨酸氧化產(chǎn)生的毒性產(chǎn)物的水平；因此，這些化合物用于增強學習、記憶和/或認知，或用于治療精神分裂癥，用于治療或預防與阿爾茨海默氏病有關的記憶和/或認知喪失，用于治療共濟失調(diào)，或者用于預防神經(jīng)變性疾病特征性的神經(jīng)元功能喪失。
因此，一方面，本發(fā)明涉及用于增加D-絲氨酸并降低D-絲氨酸氧化產(chǎn)生的毒性產(chǎn)物，用于增強學習、記憶和/或認知，或用于治療精神分裂癥，用于治療或預防與阿爾茨海默氏病有關的記憶和/或認知喪失，用于治療共濟失調(diào)，用于治療神經(jīng)性疼痛，或者用于預防神經(jīng)變性疾病特征性的神經(jīng)元功能喪失的方法。
所述方法包括給予個體治療量的式I的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、酰基、烷基芳基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；R6和R7獨立地選自氫和烷基；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
第二個方面，本發(fā)明涉及用于治療孤獨癥、精神分裂癥、阿爾茨海默氏病、共濟失調(diào)、神經(jīng)性疼痛或神經(jīng)變性疾病的方法，所述方法包括向需要對這些病癥中的一種或多種進行治療的個體給予治療有效量的上述式I的D氨基酸氧化酶(DAAO)抑制劑。
在優(yōu)選的實施方案中，式I的化合物是取代的吡咯-2-羧酸或吡唑-3-羧酸，例如具體實施方式
本發(fā)明涉及用于增加D-絲氨酸并降低D-絲氨酸氧化產(chǎn)生的毒性產(chǎn)物，用于增強學習、記憶和/或認知，或用于治療精神分裂癥，用于治療或預防與阿爾茨海默氏病有關的記憶和/或認知喪失，用于治療共濟失調(diào)，或者用于預防神經(jīng)變性疾病特征性的神經(jīng)元功能喪失的方法。所述方法包括給予個體治療量的式I的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、酰基、烷基芳基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；R6和R7獨立地選自氫和烷基；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
用式I的化合物進行治療改善和/或增強記憶、學習和認知，特別是在患神經(jīng)變性疾病如阿爾茨海默氏病、亨廷頓氏病或帕金森氏病的個體中。這些化合物還緩解與衰老有關的認知功能障礙并改善緊張型精神分裂癥。
式I的化合物在DAAO抑制方面具有獨特的藥理學特征，特別是通過控制D-絲氨酸水平影響腦中NMDA受體的活性。因此，這些化合物有效地治療由DAAO、D-絲氨酸和/或NMDA受體活性調(diào)節(jié)的疾病和病癥，特別是CNS相關病癥，同時與給予目前的標準治療相比副作用減輕。這些疾病或病癥包括但不限于神經(jīng)精神病癥，例如精神分裂癥、孤獨癥、注意力缺陷病癥(ADD和ADHD)和兒童期學習障礙，以及神經(jīng)變性疾病和病癥，例如MLS(小腦共濟失調(diào))、阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷頓氏病、肌萎縮性側索硬化、唐氏綜合征、神經(jīng)性疼痛、多發(fā)性硬化性癡呆、癲癇持續(xù)狀態(tài)、挫傷(如脊髓損傷和頭部損傷)、病毒感染引起的神經(jīng)變性(如AIDS、腦病)、癲癇、良性遺忘癥和閉合性頭部損傷。式I的化合物還可用于治療腦中風、血栓栓塞性中風、出血性中風、腦缺血、腦血管痙攣、低血糖、遺忘癥、低氧、缺氧、圍產(chǎn)期窒息和心臟停搏后的神經(jīng)毒性損傷。
因此，本發(fā)明涉及用于增加哺乳動物中D-絲氨酸的濃度和/或降低D-絲氨酸被DAAO氧化產(chǎn)生的毒性產(chǎn)物的濃度，用于治療精神分裂癥，用于治療或預防與阿爾茨海默氏病有關的記憶和/或認知喪失，用于治療共濟失調(diào)，或用于預防神經(jīng)變性疾病特征性的神經(jīng)元功能喪失，用于增強學習、記憶和/或認知，或者用于治療神經(jīng)性疼痛的方法。所有這些方法都包括向有需要的個體給予治療有效量的式I的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、?；⑼榛蓟?、芳基烷基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；
X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
在一些實施方案中，D-絲氨酸或環(huán)絲氨酸可以與式I的化合物聯(lián)合給予。
式I的化合物一般比包括吲哚-2-羧酸酯在內(nèi)的已知DAAO抑制劑具有更高的選擇性，而且相對于在NMDA受體的D-絲氨酸結合位點的結合而言，表現(xiàn)對DAAO抑制的更高選擇性。這些化合物還表現(xiàn)出包括良好的生物利用度在內(nèi)的有利的活性特征(profile)。因此，與本領域已知的用于治療由DAAO、D-絲氨酸或NMDA受體活性調(diào)節(jié)的病癥的許多方法相比，它們提供了優(yōu)勢。例如，與許多常規(guī)的抗精神病治療方法不同，DAAO抑制劑能使精神分裂癥的認知癥狀如所期望地降低。常規(guī)的抗精神病藥常常產(chǎn)生不期望的副作用，包括遲發(fā)性運動障礙(不可逆性不隨意性運動障礙)、錐體外系癥狀和靜坐不能，而給予式I的化合物可以減輕或消除這些癥狀。
另一方面，本發(fā)明還涉及式IA的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物以及含有它們的藥物組合物
其中R1a、R2a和R4獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、芳基烷基、烷基芳基和XYR5；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；Z是N或CR4；n是1-6的整數(shù)；R1a和R2a中至少一個是XYR5；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n；條件是式IA不包括5-苯乙基-1H-吡唑-3-羧酸，即當R1a是氫，R2a是XYR5，X和Y是(CR6R7)n，R3是氫，R6和R7是氫，Z是N，n是2時，則R5不能是苯基。
式IA的化合物形成式I的化合物的子集，因此可以無限制地用于本發(fā)明的方法中。
在優(yōu)選的實施方案中，式I和IA的化合物是4位取代的吡咯-2-羧酸或5位取代的吡唑-3-羧酸。對于式I和IA的化合物4位取代的吡咯-2-羧酸和5位取代的吡唑-3-羧酸，優(yōu)選的取代基是芳基烷基、取代的芳基烷基和高級烷基(C6-C20)。優(yōu)選的芳基烷基取代基是芳基乙基，特別是苯乙基，在這些實施方案中，式I和IA的化合物是在4位被取代或未取代的芳基取代的吡咯-2-羧酸，所述芳基通過兩個原子的鏈與吡咯環(huán)的4位相連，或者是在5位被取代或未取代的芳基取代的吡唑-3-羧酸，所述芳基通過兩個原子的鏈與吡唑環(huán)的5位相連。在式I和IA的化合物吡咯-2-羧酸和吡唑-3-羧酸的其它優(yōu)選實施方案中，R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團。
特別優(yōu)選的吡咯和吡唑D氨基酸氧化酶抑制劑包括
本發(fā)明包括式I和IA的化合物以及這些化合物的藥學可接受的鹽和溶劑合物。術語“化合物或化合物的藥學可接受的鹽或溶劑合物”意指“或”的包括意義，即鹽和溶劑合物的物質(zhì)均包括。藥學可接受的鹽包括但不限于鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉和鋅的無機鹽以及賴氨酸、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺(N-甲基葡糖胺)、普魯卡因和氨丁三醇的有機鹽。
式I和IA的化合物可以通過已知的方法、通過實施例中例示的方法或通過路線1-5中所示方法制備。
路線13-取代-1H-吡咯-2-羧酸酯原料的合成方法 在路線1中，R1是氫、鹵素、硝基、烷基、酰基、烷基芳基、芳基烷基或XYR5；且R5是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基。
路線25-取代-1H-吡咯-2-羧酸酯原料的合成方法 路線34-取代-、3，4-二取代-、4，5-二取代-或3，4，5-三取代-1H-吡咯-2-羧酸的合成方法
注所使用的全部酰氯原料均是可商購獲得的，或者是使用亞硫酰氯或草酰氯從必需的可商購獲得的羧酸開始合成的。以下是一般的實驗條件將必需酸在亞硫酰氯(或含有10當量亞硫酰氯的甲苯)中的溶液在60℃下加熱1-4小時，得到相應的酰氯，然后真空蒸發(fā)溶劑。酰氯未經(jīng)進一步純化而用于?；磻小?br> 路線4使用還原氨化合成胺-取代1H-吡咯-2-羧酸的方法 路線5合成3，4-二取代1H-吡咯-2-羧酸的Barton-Zard方法 在這一路線中，Ar是芳族基團如苯基或取代的芳族基團如4-氯苯基，n＝0、1或2，或雜芳基或取代的雜芳基，且R＝氫、鹵素、硝基、烷基或?；?br> 本發(fā)明的治療個體包括需要對所述病癥進行治療的人(患者)和其它哺乳動物。需要對改善或增強學習和記憶進行治療的患者是那些表現(xiàn)出癡呆或?qū)W習和記憶喪失癥狀的患者。具有遺忘病癥的個體他們的學習新信息的能力受到損傷或者不能回憶起以前學習過的信息或過去的事件。記憶缺陷在要求自發(fā)回憶的任務時最為明顯，以及當檢查者晚些時候向個體提供刺激以回憶時也可能明顯。記憶障礙必須是嚴重到足以引起明顯的社會或職業(yè)功能障礙，且必須比以前的功能水平有顯著下降。記憶缺陷可以是年齡相關的，也可以是疾病或其它原因的結果。癡呆的特征是與以前功能水平相比具有顯著變化的臨床上顯著的多重認知缺陷，包括涉及不能學習新信息或忘記以前學過的信息的記憶障礙。可以通過測試記錄、保持、回憶和識別信息的能力在形式上測試記憶。對癡呆的診斷還要求至少具有以下認知障礙之一失語、運動不能、認識不能或執(zhí)行功能障礙。這些分別在語言、運動功能、客觀識別和抽象思考方面的缺陷必須嚴重到與記憶缺陷結合起來足以導致職業(yè)或社會功能障礙，且與以前較高的功能水平相比降低。
式I和IA的化合物還可以與涉及給予D-絲氨酸或其類似物如D-絲氨酸鹽、D-絲氨酸酯、烷基化D-絲氨酸或D-絲氨酸前體的治療聯(lián)合使用，或者可以與涉及給予抗精神病藥、抗抑郁藥、精神興奮藥和/或阿爾茨海默氏病治療劑的治療聯(lián)合使用。
在動物中，已有幾種學習和記憶模型可用于檢測治療對認知增強的有益效果和潛在的相關副作用。Sarter，Martin，Intern.J.Neuroscience，32765-774(1987)中給出了關于可用于評價非人物種認知改變的測試描述。該測試包括Morris水迷宮法(Stewart和Morris，Behavioral Neuroscience，R.Saghal，Ed.，p.107(1993))、非配對延遲作業(yè)法和社交分辨模型(social discrimination model)。
Morris水迷宮是被確認為最有效的學習記憶模型，它對多種藥理學活性劑增強認知的作用敏感。在該迷宮中進行的任務對腦中海馬區(qū)的操作特別敏感，海馬區(qū)是腦中對動物的空間學習和人的記憶鞏固重要的區(qū)域。此外，在Morris水迷宮中行為表現(xiàn)的改善預測化合物作為認知增強劑的臨床效能。例如，用膽堿酯酶抑制劑或選擇性毒蕈堿膽堿能激動劑治療，在Morris迷宮動物學習記憶模型中逆轉(zhuǎn)學習缺陷，而在臨床癡呆人群中也有同樣效果。此外，這一動物模型準確地模擬了障礙隨年齡增長而程度加劇，以及記憶痕跡對測試前延遲或干擾的脆弱性的增加，而這種脆弱性的增加是遺忘癥患者的特征。該測試是簡單的空間學習任務，其中將動物置于微溫的水槽中，由于加入奶粉其為不透明的。動物學習平臺相對于迷宮中和測試房間內(nèi)視覺線索的位置；這一學習被稱為位置學習。各組動物在訓練前或訓練后以期望的時間間隔接受對照溶液或一定劑量的治療活性劑(therapeuticagent)。訓練3天后對照動物通常在5-10秒內(nèi)到達平臺。治療活性劑的記憶調(diào)節(jié)的度量是這一時間段的變化。在測試的第二階段或探查階段，將先前學習過平臺位置的動物置于平臺已被移走的水槽中。記住平臺位置的動物將在本來具有平臺的象限停留較長時間并將穿過先前被平臺占據(jù)的位置較多次。記憶或認知能力的增強表現(xiàn)為與對照動物相比，動物在正確的象限花更多的時間或在先前被平臺占據(jù)的位置穿梭更多次。記憶或認知能力的下降表現(xiàn)為與對照動物相比，動物在正確的象限花較短的時間或在先前被平臺占據(jù)的位置穿梭次數(shù)減少。
在非配對延遲測試中提供給動物一個刺激(例如杠桿A)。一段時間后，提供給動物兩個選擇(例如杠桿A和杠桿B)。挑選與原刺激不配對的選擇(杠桿B)則得到獎勵。若挑選正確選擇的次數(shù)大于隨機幾率則表明記住了原始刺激。隨著刺激與選擇反應之間的時間間隔的增加，行為表現(xiàn)下降并接近純粹的隨機幾率。在給定時間所作出的正確選擇的次數(shù)與認知能力有關。認知或記憶缺陷可能由生理、生化原因誘發(fā)或通過使用老齡動物實現(xiàn)。
在社交相互作用測試中，將外來動物(動物B)引入測試動物(動物A)的家籠中。動物A將識別出引入的動物是外來動物并對其進行調(diào)查。若移走動物B，遲后一段時間再將其引入，則測試動物(動物A)因為其記得以前的引入所以花在研究籠中新成員上的時間將減少。隨著引入之間的時間間隔加長，測試動物因為記憶越來越不清晰所以調(diào)查第二次引入新動物所花的時間也隨之加長。調(diào)查第二次引入的籠中新動物所花的時間與認知能力成反比。認知或記憶缺陷可能由生理、生化原因誘發(fā)或通過使用老齡動物實現(xiàn)。
在人中，用于改善學習記憶的方法可以由諸如Wechsler MemoryScale和Minimental測試的測試度量。測定患者是否患有學習記憶障礙的標準臨床測試是Minimental Test for Learning and Memory(Folstein等，J.Psychiatric Res.12185，1975)，特別是對于患頭部創(chuàng)傷、Korsakoff病或中風的患者更為適用。測試結果作為在癡呆或遺忘癥的早期階段發(fā)生迅速退化的短期工作記憶的指數(shù)。向受試者宣讀10對不相關的詞(如軍隊-表格)。然后當給出每對中的第一個詞時請受試者回憶第二個詞。記憶障礙的度量是，與匹配的對照組相比，回憶起的配對相關詞數(shù)量的減少。學習記憶的改善包括(a)與安慰劑組的成員相比，接受治療的患者的行為表現(xiàn)具有統(tǒng)計學上顯著性差異；或(b)對與疾病模型有關的測量行為表現(xiàn)具有向正常方向的統(tǒng)計學顯著性變化。動物模型或臨床疾病實例表現(xiàn)出與正常對照在定義上不同的癥狀。因此有效的藥理學治療的度量將是顯著的、但不一定是完全的癥狀逆轉(zhuǎn)。使用臨床上有效的用于改善記憶任務行為表現(xiàn)的“認知增強”藥物可以在動物和人記憶病理模型中有助于改善。例如在患癡呆和阿爾茨海默氏病型記憶喪失的患者中作為擬膽堿替代治療的認知增強劑在諸如配對相關詞任務這樣的模型中顯著地改善短期工作記憶。年齡相關的行為表現(xiàn)缺陷提示對針對記憶障礙的治療性干預的另一潛在的應用，而在衰老小鼠中進行的近期記憶縱向研究有效地模擬了年齡相關的行為表現(xiàn)缺陷。
Wechsler Memory Scale是被廣泛使用的認知功能和記憶能力的筆-紙(pencil-and-paper)測試。在正常群體中，標準化測試的結果是平均值為100，標準差為15，這樣分數(shù)下降10-15點則可以檢測到輕度的遺忘癥，下降20-30點則為較重度的遺忘癥，依此類推。在臨床采訪期間，應用一組測試包括但不限于Minimental測試、WechslerMemory Scale或配對相關詞學習來診斷記憶喪失的癥狀。這些測試對一般認知障礙和特殊學習/記憶能力喪失的靈敏度一般(Squire，1987)。除了對癡呆或遺忘癥的特定診斷之外，這些臨床工具還鑒別年齡相關的認知下降，其反映由給定的個體年齡正常范圍內(nèi)的衰老過程引起的心智功能的客觀衰退(DSM IV，1994)。如上所述，當在配對相關詞測試中，例如，在治療活性劑治療的患者與安慰劑組的成員之間或者在對同一患者進行的連續(xù)測試之間行為表現(xiàn)具有向正常方向的統(tǒng)計學上顯著性差異時，則發(fā)生本發(fā)明中的學習記憶的“改善”。
前脈沖抑制測試可用于鑒別有效治療精神分裂癥的化合物。該測試基于動物或人接觸強聲響會表現(xiàn)驚跳反射，而動物或人在接觸較高強度聲響之前聽到一系列較低強度的聲響則驚跳反射的強度會減弱的觀察。這被稱為前脈沖抑制。被診斷為精神分裂癥的患者表現(xiàn)前脈沖抑制缺陷，即較低強度的前脈沖不再抑制對強測試聲響的驚跳反射。經(jīng)過藥物治療(東莨菪堿、氯胺酮、PCP或MK801)或通過隔離飼養(yǎng)幼崽可以在動物中誘發(fā)類似的前脈沖抑制缺陷。已知對精神分裂癥患者有效的藥物能夠部分地逆轉(zhuǎn)這些前脈沖抑制缺陷。認為動物前脈沖抑制模型在預測化合物治療精神分裂癥患者的效能上具有價值。
如果期望，式I和IA的化合物還可以與涉及給予D-絲氨酸或其類似物如D-絲氨酸鹽、D-絲氨酸酯、烷基化D-絲氨酸或D-絲氨酸前體的治療聯(lián)合使用。這些化合物還可以與涉及給予(用于治療精神分裂癥及其它精神病癥的)抗精神病藥、(用于治療注意力缺陷病癥、抑郁癥或?qū)W習障礙的)精神興奮藥、抗抑郁藥、益智藥(例如吡拉西坦、奧拉西坦或阿尼西坦)、乙酰膽堿酯酶抑制劑(例如毒扁豆堿相關的化合物、他克林或多奈哌齊)和/或(用于治療阿爾茨海默氏病的)阿爾茨海默氏病治療劑的治療聯(lián)合使用。這些用于聯(lián)合治療的方法也包括在本發(fā)明中。
本文使用的術語“治療有效量“是指化合物、物質(zhì)或包含本發(fā)明的化合物的組合物的量，所述量為通過抑制動物中至少一種細胞亞群中的DAAO并從而阻斷在所處理的細胞中的該路徑的生物結果而以適用于任何醫(yī)學治療的合理的效益/風險比有效地產(chǎn)生一些期望的治療效果的量。
術語“藥學可接受的鹽”是指從藥學可接受的無毒堿，包括無機堿和有機堿制備的鹽。本發(fā)明的化合物的合適的藥學可接受的堿加成鹽包括從鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉和鋅制備的金屬鹽或從賴氨酸、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺(N-甲基葡糖胺)、普魯卡因和氨三丁醇制備的有機鹽。
一般而言，本發(fā)明的化合物可商購獲得或者可通過本領域技術人員已知的方法制備。此外，還可以使用可容易地獲得的原料、試劑以及常規(guī)合成方法根據(jù)以下所述的方法或其修改制備。在這些反應中，還可以使用本身是已知的但本文未提及的變體。
在本發(fā)明中，烷基意在包括直鏈、支鏈或環(huán)狀烴結構及它們的組合，包括低級烷基和高級烷基。優(yōu)選的烷基是C20或小于C20的烷基。低級烷基是指1-6個碳原子，優(yōu)選1-4個碳原子的烷基，包括甲基、乙基、正丙基、異丙基以及正丁基、仲丁基和叔丁基。高級烷基是指具有7個或更多碳原子，優(yōu)選7-20個碳原子的烷基，包括例如正庚基、仲庚基和叔庚基、辛基和十二烷基。環(huán)烷基是烷基的子集，包括3-8個碳原子的環(huán)狀烴基。環(huán)烷基的實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和降冰片基。
芳基和雜芳基是指含有0-3個選自氮、氧或硫的雜原子的5或6元芳環(huán)或雜芳環(huán)，含有0-3個選自氮、氧或硫的雜原子的9或10元二環(huán)芳環(huán)或雜芳環(huán)系統(tǒng)，或含有0-3個選自氮、氧或硫的雜原子的13或14元三環(huán)芳環(huán)或雜芳環(huán)系統(tǒng)。6元至14元芳族碳環(huán)包括例如苯、萘、茚滿、1，2，3，4-四氫化萘和芴，而5元至10元芳族雜環(huán)包括例如咪唑、吡啶、吲哚、噻吩、苯并吡喃酮、噻唑、吡咯、呋喃、苯并咪唑、喹啉、異喹啉、喹喔啉、嘧啶、吡嗪、四唑和吡唑。
芳基烷基是指與芳環(huán)連接的烷基。實例為芐基和苯乙基。雜芳基烷基是指與雜芳環(huán)連接的烷基。實例包括吡啶基甲基和嘧啶基乙基。烷基芳基是指具有一個或多個烷基與其相連的芳基。實例為甲苯基和2，4，6-三甲苯基。
烷氧基或烴氧基是指1-8個碳原子的通過氧與母體結構相連的直鏈、支鏈、環(huán)狀結構的基團及其組合。實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、環(huán)丙氧基和環(huán)己氧基。低級烷氧基是指含有1-4個碳原子的基團。
酰基是指1-20個碳原子的通過羰基官能團與母體結構相連的飽和、不飽和和芳香性的直鏈、支鏈、環(huán)狀結構基團及其組合。只要與母體結構的連接點在羰基處，?；幸粋€或多個碳原子可以被氮、氧或硫替代。實例包括乙酰基、苯甲酰基、丙酰基、異丁?；?、叔丁氧羰基和芐氧羰基。低級?；侵负?-4個碳原子的基團。
雜環(huán)或雜環(huán)基是指其中一個或兩個碳原子被諸如氧、氮、硫的雜原子替代的環(huán)烷基或芳基。本發(fā)明范圍內(nèi)的雜環(huán)的實例包括吡咯烷、吡唑、吡咯、吲哚、喹啉、異喹啉、四氫異喹啉、苯并呋喃、苯并二噁烷、苯并間二氧雜環(huán)二戊烯(當作為取代基出現(xiàn)時通常稱為亞甲二氧基苯基)、四唑、嗎啉、噻唑、吡啶、噠嗪、嘧啶、噻吩、呋喃、噁唑、噁唑啉、異噁唑、二噁烷和四氫呋喃。
取代的是指殘基中最多三個H原子被低級烷基、取代的烷基、取代的炔基、鹵代烷基、烷氧基、羰基、羧基、羧烷氧基、酰氨基(carboxamido)、酰氧基、脒基、硝基、鹵素、羥基、OCH(COOH)2、氰基、伯氨基、仲氨基、酰氨基(acylamino)、烷硫基、亞砜、砜、苯基、芐基、苯氧基、芐氧基、雜芳基或雜芳氧基替代的殘基，包括但不限于烷基、烷基芳基、芳基、芳基烷基和雜芳基。
鹵代烷基是指其中一個或多個H原子被鹵素原子替代的烷基，術語鹵代烷基包括全鹵代烷基。本發(fā)明范圍內(nèi)的鹵代烷基的實例包括CH2F、CHF2和CF3。
氧雜烷基是指其中一個或多個碳被氧替代的烷基。它與母體結構通過烷基相連。實例包括甲氧基丙氧基、3，6，9-三氧雜癸基等。術語氧雜烷基意指本領域所理解的含義[參見Naming and Indexing ofChemical Substances for Chemical Abstracts，American ChemicalSociety出版， 但不受 的限制]，即，它是指其中氧原子通過單鍵與相鄰的原子連接(形成醚鍵)，它不是指諸如羰基中存在的雙鍵氧。類似地，硫雜烷基和氮雜烷基是指其中一個或多個碳分別被硫或氮替代的烷基殘基。實例包括乙基氨基乙基和甲硫基丙基。
在本發(fā)明中，被認為具有DAAO抑制劑活性的化合物是在濃度為約≤100μM，優(yōu)選約≤10μM，更優(yōu)選約≤1μM時表現(xiàn)對DAAO酶周期的抑制為50％(IC50)的化合物。
本文描述的許多化合物可能具有一個或多個不對稱中心，因此可能產(chǎn)生對映體、非對映體和在絕對立體化學上可能被定義為(R)-或(S)-的其它立體異構形式。本發(fā)明意在包括所有這些可能的異構體以及它們的外消旋形式和旋光純形式。(R)-和(S)-旋光異構體可以使用手性合成子或手性試劑合成，或使用常規(guī)技術拆分。當本文所述的化合物含有烯烴雙鍵或其它幾何不對稱中心時，則除非另外說明，意指該化合物包括E和Z型幾何異構體。同樣，所有的互變異構體也包括在內(nèi)。
雖然式I和IA的化合物可以以原化學藥品的形式給予，但是優(yōu)選將它們作為藥物組合物提供。根據(jù)另一方面，本發(fā)明提供包含式I或IA的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物以及一種或多種藥學載體和任選的一種或多種其它治療成分的藥物組合物。所述載體必須是與制劑中其它成分相容且對其接受者無害意義上的“可接受的”。
所述制劑包括適合于口服、腸胃外(包括皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)和關節(jié)內(nèi))、直腸和局部(包括經(jīng)皮、口含、舌下和眼內(nèi))途徑給予的制劑。最合適的途徑取決于接受者的病癥和疾病。所述制劑可以方便地以單元劑型提供，可以通過藥學領域熟知的任一方法制備。所有的方法都包括將化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物(“活性成分”)與由一種或多種輔助成分組成的載體混合在一起。一般而言，如下制備制劑將活性成分與液體載體或微細固體載體或與兩者一起均勻、充分地混合，然后如果需要，將產(chǎn)品制備成期望的制劑形狀?？诜苿┦潜绢I域技術人員熟知的制劑，它的一般制備方法可以在任何標準的藥學院課本中找到，例如RemingtonThe Science and Practice ofPharmacy.，A.R.Gennaro，ed.(1995)，該文獻的全部公開內(nèi)容引入本文作為參考。
適合于口服給予的本發(fā)明的化合物可以以下劑型提供各自含有預定量的活性成分的不連續(xù)單元如膠囊劑、扁囊劑或片劑；散劑或顆粒劑；水成液或非水成液的溶液劑或混懸劑；或水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。活性成分還可以以大丸劑、藥糖劑或糊劑提供。
片劑可以通過壓制或模壓，任選與一種或多種輔助成分一起制備。壓制的片劑可以通過在合適的機器中壓制任選與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、潤滑劑、表面活性劑或分散劑混合的自由流動形式如粉末或顆粒形式的活性成分來制備。模壓的片劑可以通過在合適的機器中將用惰性液體稀釋劑潤濕的化合物粉末的混合物模壓來制備。片劑任選包衣或壓痕，并可以制成提供緩釋、延遲釋放或控釋其中的活性成分的制劑。口服和腸胃外緩釋藥物遞送系統(tǒng)是本領域技術人員熟知的，實現(xiàn)口服或腸胃外給予藥物的緩釋的一般方法見于例如RemingtonThe Science and Practice of Pharrnacy，第1660-1675頁，(1995)中。
腸胃外給予的制劑包括含水和非水無菌注射溶液劑，其可以含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使制劑與目標接受者的血液等滲的溶質(zhì)。腸胃外給予的制劑還包括含水或非水無菌混懸劑，其可以含有助懸劑和增稠劑。所述制劑還可以以多劑量容器，例如密封安瓿或小瓶的單元劑量提供，可以在冷凍干燥(凍干)條件下儲存，使用前即刻僅需要加入無菌液體載體如鹽水、磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)等即可?？梢詮那笆龇N類的無菌散劑、顆粒劑和片劑制備即時注射溶液和懸浮液。直腸給予的制劑可以以栓劑提供，通常使用的載體例如可可脂或聚乙二醇。用于口中局部給予例如口含或舌下給予的制劑包括含有活性成分和調(diào)味基質(zhì)如蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠的錠劑，以及含有活性成分和諸如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠的基質(zhì)的軟錠劑。
包含式I或IA的化合物的藥物組合物可以常規(guī)地以單元劑型提供，并可以根據(jù)藥學領域熟知的任一方法制備。優(yōu)選的單元給藥制劑是含有所述活性成分或其藥學可接受的鹽的有效劑量或有效劑量的適當部分的制劑。預防或治療劑量的大小通常隨要治療的病癥的性質(zhì)和嚴重程度以及給藥途徑而變化。劑量以及允許的給藥頻率也將隨個體患者的年齡、體重和反應而變化。一般而言，總的日劑量為約1mg/日至約7000mg/日，優(yōu)選約1mg/日至約100mg/日，更優(yōu)選約25mg/日至約50mg/日，可以是單劑量或分次劑量。在一些實施方案中，總的日劑量可以為約50mg/日至約500mg/日，優(yōu)選約100mg/日至約500mg/日。另外推薦兒童、65歲以上的患者以及腎功能或肝功能障礙的患者開始應接受低劑量，并根據(jù)個體反應和血漿水平逐步增加劑量。如本領域技術人員所清楚的，某些情況下可能需要使用這些范圍之外的劑量。此外，要注意臨床醫(yī)師或主治醫(yī)生知道結合患者的個體反應來如何和何時中斷、調(diào)整或終止治療。
應理解除了以上具體提及的成分之外，本發(fā)明的制劑還可以包含本領域常規(guī)的、與所述的該類制劑有關的其它試劑，例如適合于口服給予的制劑可以包含調(diào)味劑。
實施例吡唑的制備方法實施例1.6，6-二甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(3)的合成 (3，3-二甲基-2-氧代環(huán)戊基)-乙醛酸乙酯(1)的合成將氫化鈉(0.428g，17.8mmol)緩慢加入在氮氣下攪拌的含有EtOH(5.4mL，3.3M)的NaCl冰浴中。將2，2-二甲基環(huán)戊酮(2.00g，17.83mmol)和草酸二乙酯(2.42mL，17.8mmol)混合在一起，然后加入該冷的NaOEt溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫，攪拌6小時，此時通過TLC判斷反應完全。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到3.4084g(90.0％)粗產(chǎn)物2，經(jīng)NMR確定其純度足以進行下一步而不用進一步純化。注可以使用從Aldrich購買的NaOEt代替原位合成的NaOEt。1H(CDCl3，400MHz)δ4.29(2H，q，J＝7.3Hz)，2.82(2H，t，J＝7.3Hz)，1.76(2H，t，J＝7.3Hz)，1.32(3H，t，J＝7.3Hz)，1.07(6H，s)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ218，162.89，153.15，115.98，62.12，46.16，36.39，23.98，23.87，14.22ppm。
6，6-二甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸乙酯(2)的合成在氮氣下，將水合肼(0.229mL，4.71mmol)加入1(0.9961g，4.71mmol)在EtOH(4.7mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷反應完全(2h)為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，70∶30∶2己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2NNH3)。只將純的部分合并、濃縮，得到0.6955g(71.2％)2。1H(CDCl3，400MHz)δ11.04(1H，寬s)，4.33(2H，q，J＝7.3Hz)，2.76(2H，t，J＝6.8Hz)，2.26(2H，t，J＝6.8Hz)，1.33(3H，t，J＝7.3Hz)，1.31(6H，s)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ168.08，160.61，128.73，127.27，61.15，47.22，38.64，27.57，22.00，14.48ppm。
6，6-二甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(3)的合成在氮氣下，將新制的aq.NaOH(10M，在水中，15.1mmol)加入2(0.6289g，3.02mmol)在MeOH(7.6mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷反應完全(2.5h)為止。將反應物濃縮，重新溶解于EtOAc和水中，并用EtOAc萃取。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝4，然后移去有機層，水層再用EtOAc萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。將少量二氯甲烷和己烷加入有色固體產(chǎn)物中，吸去有色雜質(zhì)。將剩余的固體干燥，得到0.2371g(43.6％)3，為灰白色固體。注以下使用的沉淀方法看起來是優(yōu)選的方案。1H(CD3OD，400MHz)δ2.75(2H，t，J＝6.8Hz)，2.29(2H，t，J＝6.8Hz)，1.29(6H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ166.15，162.23，130.46，126.93，47.10，38.22，26.62，21.52ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳26.62；CH2碳47.10，21.52ppmLCMS181.4(M+1)；163.6((M+1)-18)。HPLC7.538min。
實施例2. 3-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(6)的合成 (3-甲基-2-氧代環(huán)戊基)-乙醛酸乙酯(4)的合成將2-甲基環(huán)戊酮(1.0058g，10.2mmol)和草酸二乙酯(1.38mL，10.2mmol)混合在一起，然后加入在氮氣下在冰浴中攪拌的NaOEt(～3M，3.4mL)溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫，攪拌過夜。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物4。該粗品經(jīng)98∶2-96∶4己烷∶EtOAc純化，得到0.5635g(27.7％)4。1H(CDCl3，400MHz)δ4.29(2H，q，J＝7.1Hz)，2.96(1H，ddd，J＝17.6，8.1，1.5Hz)，2.69(1H，ddd，J＝17.6，9.5，8.1Hz)，2.57-2.47(1H，m)，2.24(1H，dtd，J＝12.5，8.3，2.4Hz)，1.49(1H，dtd，J＝12.5，10.3，8.4Hz)，1.34(3H，t，J＝7.1Hz)，1.13(3H，d，J＝7.0Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ164.09，153.19，117.67，62.92，44.76，30.60，30.36，26.55，14.63，14.37ppm。
6-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸乙酯(5)的合成在氮氣下，將水合肼(0.101mL，2.05mmol)加入4(0.4055g，2.05mmol)在EtOH(2.0mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷為反應完全為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，96∶4己烷∶在EtOH中的2N NH3)純化只將各純部分合并并濃縮，得到0.2003g(50.4％)5。1H(CDCl3，400MHz)δ9.55(1H，寬s)，4.35(2H，q，J＝7.1Hz)，3.26-3.16(1H，m)，2.89-2.63(3H，m)，2.09-1.98(1H，m)，1.37(3H，t，J＝7.2Hz)，1.30(3H，d，J＝6.9Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ128.67，61.32，39.73，32.64，22.94，19.62，14.52ppm。HPLC8.901min。
6-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(6)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，5.02mmol)加入5(0.1949g，1.00mmol)在MeOH(12.5mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷為反應完全(0.5h)為止。將反應物濃縮，然后溶于2mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜，得到0.1223g(73.3％)6。1H(CD3OD，400MHz)δ3.18-3.07(1H，m)，2.84-2.62(3H，m)，2.08-1.96(1H，m)，1.25(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.49，163.43，131.67，129.41，40.87，33.40，23.61，19.73ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳19.73；CH2碳40.87，23.61；CH碳33.40ppm。HPLC7.006min。
實施例3. 4-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(11)和5-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(12)的合成 (2-甲基-5-氧代環(huán)戊基)-乙醛酸乙酯(7)和(4-甲基-2-氧代環(huán)戊基)-乙醛酸乙酯(8)的合成將氫化鈉(0.122g，5.09mmol)緩慢加入在氮氣下攪拌的含有EtOH(1.54mL，3.3M)的NaCl冰浴中。將3-甲基環(huán)戊酮(0.500g，5.09mmol)和草酸二乙酯(0.69mL，5.09mmol)混合在一起，然后加入冷的NaOEt溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫并攪拌6小時，此時經(jīng)TLC判斷為反應完全為止。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到0.5591g(55.4％)粗產(chǎn)物7和8的約1∶1.1的混合物。雖然未找到分離異構體的條件，但該混合物經(jīng)NMR確定為足夠純以進行下一步而不用進一步純化。注可以使用從Aldrich購買的NaOEt代替原位合成的NaOEt。1H(CDCl3，400MHz)δ4.33 & 4.31(2H，q，J＝7.3Hz，3.54-3.45，3.20-3.08，2.64-2.30，2.15-2.04，1.74-1.66，1.35 & 1.34(3H，t，J＝7.3Hz，1.16 & 1.10(3H，d，J＝7.3 & 6.4Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ214.05，162.98，152.36，117.34，62.23，46.44，35.92 & 35.76，29.45 & 28.65，21.00 & 20.91，14.25 & 14.17ppm。
4-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(9)和5-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸乙酯(10)的合成在氮氣下，將水合肼(0.127mL，2.62mmol)加入7和8(0.5064g，2.62mmol)在EtOH(2.6mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷為反應完全(2.3h)為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，70∶30∶2己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2N NH3)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到0.3132g(63.1％)9和10。未找到分離異構體的條件。1H(CDCl3，400MHz)δ11.26 &11.18(1H，寬s)，4.35 & 4.34(2H，q，J＝7.3Hz)，3.28-3.18(0.48H，m)，3.02-2.90(1.5H，m)，2.86-2.76(0.52H，m)，2.74-2.61(1H，m)，2.09-1.88(1H，m)，2.15-1.80(0.52H，m)，1.36 & 1.35(3H，t，J＝7.3Hz)，1.28 &1.19(3H，d，J＝6.3Hz，對于1.28 & J＝4.4Hz，對于1.19)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ133.67，128.61，61.12，40.25 & 39.35，33.24 &32.46，32.30 & 23.91，21.69 & 20.55，14.48 & 14.46ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳21.69 & 20.55，14.48 & 14.46；CH2碳61.12，39.35，33.24 & 32.46，23.91；CH碳40.25，32.30ppm。HPLC8.974min。
4-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(11)和5-甲基-1，4，5，6-四氫環(huán)戊吡唑-3-羧酸(12)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，8.07mmol)加入9和10(0.3132g，1.61mmol)在MeOH(4.0mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷為反應完全為止。將反應物濃縮并溶于3mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.1781g(66.4％)11和12的混合物。1H(CD3OD，400MHz)δ3.34-3.16，3.02-2.84，2.80-2.58，2.40-2.26，2.10-1.98，1.28 & 1.20(3H，d，J＝7.0 & 6.3Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ162.36 & 162.19，158.43 & 158.43，133.52，128.16，40.37 & 39.18，32.39 & 32.06，32.03 &22.91，20.61 & 19.68ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳20.61 &19.68；CH2碳39.18，32.39 & 32.06，22.91；CH碳40.37，32.03ppm。LCMS167.4(M+1)；149.4((M+1)-18)HPLC6.984min。
實施例4. 1，4，5，6，7，8-六氫環(huán)庚吡唑-3-羧酸(15)的合成 氧代-(2-氧代環(huán)庚基)-乙酸乙酯(13)的合成將環(huán)庚酮(1.9998g，17.8mmol)和草酸二乙酯(2.42mL，17.8mmol)混合在一起，然后加入在氮氣下在冰浴中攪拌的NaOEt(～3M，5.94mL)溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫，攪拌過夜。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物13。將粗品經(jīng)1∶1己烷∶二氯甲烷純化，得到1.9775g(52.3％)13。注該產(chǎn)物此時不是完全純化的，但是繼續(xù)用于下一步中。1H(CDCl3，400MHz)δ4.31(2H，q，J＝7.3Hz)，2.66-2.58(2H，m)，2.48-2.43(2H，m)，1.77-1.59(6H，m)，1.34(3H，t，J＝7.3H)ppm。
1，4，5，6，7，8-六氫環(huán)庚吡唑-3-羧酸乙酯(14)的合成在氮氣下，將水合肼(0.142mL，2.94mmol)加入13(0.6229g，2.94mmol)在EtOH(2.9mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷為反應完全(4.5h)為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，70∶30∶2己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2N NH3)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到0.4428g(72.3％)14。1H(CDCl3，400MHz)δ8.56(1H，寬s)，4.30(2H，q，J＝7.1Hz)，2.92-2.86(2H，m)，2.73-2.78(2H，m)，1.84-1.76(2H，m)，1.65-1.57(4H，m)，1.30(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ162.11，150.70，134.97，124.58，60.85，32.33，28.63，28.32，27.39，24.42，14.47ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳14.47；CH2碳60.85，32.33，28.63，28.32，27.39，24.42；ppm。HPLC9.19min。
1，4，5，6，7，8-六氫環(huán)庚吡唑-3-羧酸(15)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，9.66mmol)加入14(0.4029g，1.93mmol)在MeOH(4.8mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷為反應完全(0.5h)為止。將反應物濃縮，然后溶解于3.8mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到15。注一種當加入HCl時不沉淀出來的不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為8.708min。1H(CD3OD，400MHz)δ2.98-2.90(2H，m)，2.80-2.72(2H，m)，1.92-1.82(2H，m)，1.70-1.58(4H，m)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.81，151.31，136.87，125.13，33.36，29.73，28.78，28.49，25.17ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳33.36，29.73，28.78，28.49，25.17ppm。HPLC7.545min。
實施例5. 5-(4-甲基戊基)-1H-吡唑-3-羧酸(18)的合成 8-甲基-2，4-二氧代壬酸乙酯(16)的合成將6-甲基-2-庚酮(0.9981g，7.80mmol)和草酸二乙酯(1.06mL，7.80mmol)混合在一起，然后加入在氮氣下在冰浴中攪拌的NaOEt(～3M，2.6mL)溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫并攪拌過夜。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物16。該粗品經(jīng)1∶1己烷∶二氯甲烷純化，得到0.8342g(46.9％)16。1H(CD3OD，400MHz)δ6.36(1H，s)，4.30(2H，q，J＝7.1Hz)，2.50(2H，t，J＝7.3Hz)，1.68-1.59(2H，m)，1.61-1.50(1H，m)，1.33(3H，t，J＝7.1Hz)，1.25-1.17(2H，m)，0.89(6H，d，J＝7.0Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ204.41，166.93，163.28，102.66，63.29，41.89，39.41，28.92，23.65，22.89，14.33ppm。
5-(4-甲基戊基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(17)的合成在氮氣下，將水合肼(0.943mL，1.91mmol)加入16(0.4354g，1.91mmol)在EtOH(1.9mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)TLC判斷為反應完全為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，96∶4己烷∶在EtOH中的2N NH3)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到0.3132g(63.1％)17。1H(CDCl3，400MHz)δ9.60(1H，寬s)，6.58(1H，s)，4.34(2H，q，J＝7.2Hz)，2.66(2H，t，J＝7.7Hz)，1.67-1.57(2H，m)，1.58(1H，m)，1.36(3H，t，J＝7.2Hz)，1.24-1.15(2H，m)，0.85(6H，d，J＝6.5Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ162.22，106.59，61.17，38.58，27.99，27.20，26.57，22.72，14.48ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳22.72，14.48；CH2碳61.17，38.58，27.20，26.57；CH碳106.59，27.99ppm。HPLC10.072min。
5-(4-甲基戊基)-1H-吡唑-3-羧酸(18)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，4.97mmol)加入17(0.2229g，0.994mmol)在MeOH(12.4mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(20分鐘)為止。將反應物濃縮，然后溶于2.0mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.1565g(80.2％)18。1H(CD3OD，400MHz)δ6.56(1H，s)，2.68(2H，t，J＝7.6Hz)，1.67(2H，五重峰，J＝7.8Hz)，1.63-1.51(1H，m)，1.23(2H，dt，J＝8.8，7.1Hz)，0.89(6H，d，J＝6.4Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ163.79，149.69，142.80，107.65，39.46，28.92，28.11，26.90，22.91ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳22.91；CH2碳39.46，28.11，26.90；CH碳107.65，28.92ppm。HPLC8.579min。
實施例6. 5-苯乙基-1H-吡唑-3-羧酸(21)的合成 2，4-二氧代-6-苯基己酸乙酯(19)的合成將芐基丙酮(1.0g，6.75mmol)和草酸二乙酯(0.92mL，6.75mmol)混合在一起，然后加入在氮氣下在冰浴中攪拌的NaOEt(～3M，2.3mL)溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫并攪拌過夜。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物19。該粗品經(jīng)1∶1己烷∶二氯甲烷純化，得到0.7348g(43.9％)19。1H(CD3OD，400MHz)δ7.27-7.12(5H，m)，4.26(2H，q，J＝7.2Hz)，2.89(2H，t，J＝7.3Hz)，2.81(2H，t，J＝7.3Hz)，1.30(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。部分13C(CD3OD，100MHz)δ163.32，141.74，129.43，129.29，127.16，126.95，103.06，63.34，43.46，31.34，14.24ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳14.24；CH2碳63.34，43.46，31.34；CH碳129.43，129.29，127.16，103.06ppm。HPLC10.279min。
5-苯乙基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(20)的合成在氮氣下，將水合肼(0.109mL，2.24mmol)加入19(0.5570g，2.24mmol)在EtOH(2.2mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，70∶30∶2己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2NNH3)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到0.2983g(54.4％)20。1H(CDCl3，400MHz)δ11.7(1H，寬s)，7.30-7.11(5H，m)，6.60(1H，s)，4.32(2H，q，J＝7.1Hz)，3.07-2.92(4H，m)，1.31(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ162.13，147.42，140.97，128.72，128.59，126.48，106.79，61.16，35.63，28.18，14.47ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.47；CH2碳61.16，35.63，28.18；CH碳128.72，128.59，126.48，106.79ppm。HPLC9.299min。
5-苯乙基-1H-吡唑-3-羧酸(21)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，5.06mmol)加入17(0.2477g，1.01mmol)在MeOH(2.5mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷反應物反應完全(30分鐘)為止。將反應物濃縮，然后溶于2.0mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將該固體真空干燥過夜得到21。注一種當加入HCl時不沉淀出來的不期望雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為8.919min。1H(CD3OD，400MHz)δ7.28-7.20(2H，m)，7.20-6.92(3H，m)，6.66(1H，s)，3.02-2.92(4H，m)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.79，148.33，142.96，142.11，129.45，129.43，127.21，107.51，36.56，28.97ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳36.50，28.91；CH碳129.45，129.43，127.24，107.60ppm。HPLC8.050min。
實施例7. 5-[2-(4-甲氧基苯基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸(24)的合成
6-(4-甲氧基苯基)-2，4-二氧代己酸乙酯(22)的合成將4-(4-甲氧基苯基)-2-丁酮(14.9908g，84.2mmol)和草酸二乙酯(12.3434g，84.2mmol)混合在一起，然后加入在氮氣下在冰浴中攪拌的NaOEt(～3M，28.1mL)溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫并攪拌。10分鐘后，反應完全停止。再加入100mL EtOH，將反應物置于機械振蕩器上過夜。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物22。將該粗品經(jīng)1∶1己烷∶二氯甲烷純化，得到22。1H(CDCl3，400MHz)δ14.39(1H，寬s)，7.10(2H，d，J＝7.1Hz)，6.82(2H，d，J＝6.3Hz)，6.34(1H，s)，4.33(2H，q，J＝7.1Hz)，3.77(3H，s)，2.91(2H，t，J＝7.3Hz)，2.78(2H，t，J＝7.3Hz)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ202.53，166.46，162.29，158.36，132.36，129.44，114.20，102.11，62.75，55.47，43.02，29.94，14.27ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳55.47，14.27；CH2碳62.75，43.02，29.94；CH碳129.44，114.20，102.11ppm。HPLC10.12min。(原料HPLC9.10min。)5-[2-(4-甲氧基苯基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(23)的合成在氮氣下，將水合肼(0.513mL，10.6mmol)加入22(2.9241g，10.5mmol)在EtOH(10.6mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(45分鐘)為止。將反應物濃縮并從乙醇中結晶得到23。1H(CDCl3，400MHz)δ11.67(1H，寬s)，7.06(2H，d，J＝8.3Hz)，6.78(2H，d，J＝8.3Hz)，6.57(1H，s)，4.30(2H，q，J＝7.0Hz)，3.76(3H，s)，2.98(2H，t，J＝7.7Hz)，2.88(2H，t，J＝7.7Hz)，1.30(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ162.20，158.13，147.05，141.79，132.94，129.42，113.98，106.61，61.02，55.36，34.65，28.23，14.37ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳55.36，14.37；CH2碳61.02，34.65，28.23；CH碳129.42，113.98，106.61ppm。HPLC9.200min。
5-[2-(4-甲氧基苯基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸(24)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，25.4mmol)加入23(1.391g，5.07mmol)在MeOH(12.7mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(30分鐘)為止。將反應物濃縮，然后溶于10mL水中。用少量EtOAc萃取反應物，然后逐滴加入10％aq.HCl將水層酸化(pH＝2)。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.3771g相對純的24。從溫的MeOH中重結晶進一步純化24。未嘗試進一步從母液中回收剩余的24。1H(CD3OD，400MHz)δ7.07(2H，d，J＝8.2Hz)，6.84(2H，d，J＝8.6Hz)，6.53(1H，s)，3.73(3H，s)，2.97-2.84(4H，m)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.86，159.60，148.26，143.15，134.01，130.36，114.81，107.50，55.60，35.67，29.10ppm。
實施例8. 4-芐基-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(26)的合成 4-芐基-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(25)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(0.215mL，1.35mmol)加入甲基-4-苯甲?；?1H-吡咯-2-羧酸酯(0.1118g，0.488mmol)在三氟乙酸(TFA)(1.04mL，0.47M)中的攪拌的室溫溶液中。攪拌過夜后，經(jīng)HPLC確認反應完全。真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，95∶5己烷∶EtOAc)純化，得到純25(0.0604g，57.5％)1H(CDCl3，400MHz)δ9.44(1H，寬s)，7.34-7.21(5H，m)，6.78(1H，s)，6.75(1H，s)，3.853(2H，s)，3.846(3H，s)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ162.09，141.68，128.85，128.70，126.25，125.55，122.67，121.86，115.74，51.70，33.41ppm。HPLC9.693min。(原料8.611min。)4-芐基-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(26)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，1.40mmol)加入25(0.0602g，0.280mmol)在MeOH(0.70mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。由于原料沉淀，所以再加入0.7mL MeOH，將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全。將反應物濃縮，然后溶于0.55mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.0495g(94.5％)26。1H(CD3OD，400MHz)δ10.83(1H，寬s)，7.27-7.11(5H，m)，6.71(1H，s)，6.66(1H，s)，3.78(2H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.45，143.25，129.58，129.31，126.81，126.18，123.70，122.96，116.68，34.03ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳34.03；CH碳129.58，129.31，126.81，122.96，116.68ppm。HPLC8.647min。
實施例9. 4-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸(28)的合成 4-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸甲酯(27)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(0.323mL，2.03mmol)加入甲基-4-苯基乙?；?1H-吡咯-2-羧酸酯(0.1593g，0.655mmol)在三氟乙酸(TFA)(1.47mL，0.45M)中的攪拌的室溫溶液中。攪拌過夜后，經(jīng)HPLC確認反應完全。真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，95∶5己烷∶EtOAc)純化，得到純的27(0.0755g，50.3％)1H(CDCl3，400MHz)δ9.17(1H，寬s)，7.32-7.25(2H，m)，7.23-7.17(3H，m)，6.80(1H，s)，6.69(1H，s)，3.85(3H，s)，2.93-2.85(2H，m)，2.84-2.75(2H，m)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.97，142.15，128.70，128.55，126.13，125.96，122.40，121.26，115.28，51.67，37.57，28.92ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳51.67；CH2碳37.57，28.92；CH碳128.70，128.55，126.13，121.26，115.28ppm。HPLC10.033min。(原料8.751min。)4-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸(28)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，1.65mmol)加入27(0.0755g，0.329mmol)在MeOH(0.82mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。由于原料沉淀，所以再加入0.7mL MeOH，將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(2h)為止。將反應物濃縮，然后溶于0.55mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到28。1H(CDCl3，400MHz)δ10.87(1H，寬s)，7.25-7.18(2H，m)，7.17-7.69(3H，m)，6.70(1H，s)，6.67(1H，s)，2.83(2H，t，J＝7.6Hz)，2.74(2H，t，J＝7.6Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ164.53，143.39，129.50，129.21，126.76，126.38，123.49，122.85，116.48，38.68，29.94ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳38.68，29.94；CH碳129.50，129.21，126.76，122.85，116.48ppm。HPLC8.579min。
實施例10. 5-芐基-1H-吡咯-2-羧酸(32)的合成 5-苯甲酰基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(29)和4-苯甲?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯(30)的合成在氮氣下，將在最少量(2.5mL)二氯乙烷中的吡咯-2-羧酸乙酯(1.0013g，7.20mmol)加入氯化鋅(1.96g，14.4mmol)和苯甲酰氯(1.67mL，14.4mmol)在二氯乙烷(10.9mL，0.66M)中的冰冷的攪拌混合物中。攪拌10分鐘后，移去冰浴，將反應物加熱至50℃，直至經(jīng)TLC判斷為反應完全(35min，9∶1己烷∶EtOAc)為止。將反應物冷卻，小心地傾至冰水上。用3份溶劑將反應物萃取入二氯甲烷中。將合并的有機層用水、稀鹽酸和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，95∶5-50∶50己烷∶EtOAc)純化，得到29(較高Rf)和純的30(較低Rf，0.5646g，32.3％)。29經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，100％二氯甲烷)進一步純化，得到0.6168g(35.2％)29。
29的光譜數(shù)據(jù)1H(CDCl3，400MHz)δ10.19(1H，寬s)，7.90(2H，d，J＝7.6Hz)，7.59(1H，t，J＝7.3Hz)，7.49(2H，t，J＝7.3Hz)，6.94(1H，dd，J＝3.9，2.4Hz)，6.83(1H，dd，J＝3.9，2.4Hz)，4.38(2H，q，J＝7.0Hz)，1.38(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ185.37，160.56，137.69，133.30，132.72，129.27，128.69，127.97，118.75，115.72，61.39，14.55ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.55；CH2碳61.39；CH碳132.72，129.27，128.69，118.75，115.72ppm。HPLC9.792min。(原料8.36min。)30的光譜數(shù)據(jù)1H(CDCl3，400MHz)δ10.29(1H，寬s)，7.84(2H，dd，J＝8.0，1.2Hz)，7.59-7.53(2H，m)，7.48(2H，t，J＝7.6Hz)，7.36(1H，dd，J＝2.4，1.5Hz)，4.38(2H，t，J＝7.3Hz)，1.35(3H，t，J＝7.3Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ190.93，161.47，139.21，132.23，129.22，128.77，128.61，124.35，116.91，112.82，61.30，14.55ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.55；CH2碳61.30；CH碳132.23，129.22，128.77，128.61，116.91ppm。HPLC9.048min。
5-芐基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(31)的合成
在氮氣下，將三乙基硅烷(0.323mL，2.03mmol)加入5-苯甲?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯(29)(0.4180g，1.72mmol)在三氟乙酸(TFA)(4.1mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。攪拌過夜后，經(jīng)HPLC判斷并沒有顯示反應完全。再加入額外量的三乙基硅烷，經(jīng)HPLC分析沒有產(chǎn)生任何進一步的變化，所以對反應物進行處理。真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，98∶2-95∶5己烷∶EtOAc)純化，得到純的31(0.2190g，55.6％)。1H(CDCl3，400MHz)δ9.05(1H，寬s)，7.35-7.28(2H，m)，7.28-7.23(1H，m)，7.23-7.18(2H，m)，6.85(1H，t，J＝3.2Hz)，6.0(1H，t，J＝3.2Hz)，4.27(2H，q，J＝7.1Hz)，4.00(2H，s)，1.32(3H，t，J＝7.3Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ138.51，136.86，128.99，128.88，126.98，122.26，116.08，109.41，60.39，34.37，14.70ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.70；CH2碳60.39，34.37；CH碳128.99，128.88，126.98，116.08，109.41ppm。HPLC10.014min。
5-芐基-1H-吡咯-2-羧酸(32)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，4.78mmol)加入31(0.2190g，0.955mmol)在MeOH(2.4mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(40分鐘)為止。將產(chǎn)物濃縮，然后溶于1.9mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到32，為淺桃紅色不純固體(0.0845g)。加入氯仿進一步純化32，攪拌，并濾出純的白色32(0.0445g)。注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為9.643。此外，32在室溫下的13C NMR顯示與吡咯碳、芐基碳和酸碳相應的雙峰。將NMR探針加熱至28℃時所有的雙峰都變?yōu)閱畏?，如以下所報告?H(CD3OD，400MHz)δ11.04(1H，寬s)，7.27-7.13(5H，m)，6.80(1H，d，J＝3.4Hz)，5.87(1H，d，J＝3.4Hz)3.93(2H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.52，140.71，139.04，129.56，129.42，127.27，122.77，117.59，109.66，34.65ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳34.65；CH碳129.56，129.42，127.27，117.59，109.66ppm。HPLC8.698min。
實施例11. 5-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸(36)的合成 5-苯基乙酰基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(33)和4-苯基乙?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯(34)的合成在氮氣下，將在最少量二氯乙烷中的吡咯-2-羧酸乙酯(2.5182g，18.1mmol)加入氯化鋅(4.9891g，36.6mmol)和苯乙酰氯(4.76mL，35.9mmol)在二氯乙烷(25mL，0.72M)中的冰冷的攪拌溶液中。攪拌10分鐘后，移去冰浴，將反應物加熱至50℃，直至經(jīng)TLC判斷為反應完全(30分鐘，9∶1己烷∶EtOAc)為止。將反應物冷卻，小心地傾至冰水上。用3份溶劑將反應物萃取入二氯甲烷中。將合并的有機層用水、稀鹽酸和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，90∶10-60∶40己烷∶EtOAc)純化，得到33(較低Rf)和34(較高Rf)。發(fā)現(xiàn)33含有有色雜質(zhì)，其通過加入己烷并去除有色溶液而容易地除去。用己烷處理后，33(0.7239g，15.5％)足夠純以繼續(xù)用于下一步中。
33的光譜數(shù)據(jù)1H(CDCl3，400MHz)δ9.87(1H，寬s)，7.35-7.23(5H，m)，6.92-6.87(2H，m)，4.34(2H，q，J＝7.1Hz)，4.09(2H，s)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ188.72，160.49，134.40，133.63，129.57，128.96，127.82，127.32，116.60，115.73，61.39，45.59，14.54ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.54；CH2碳61.39，45.59；CH碳129.57，128.96，127.32，116.60，115.73ppm。HPLC9.714min。(原料8.36min。)34的光譜數(shù)據(jù)1H(CDCl3，400MHz)δ10.16(1H，寬s)，7.74(1H，s)，7.72(1H，s)，7.44-7.23(5H，m)，4.33(2H，q，J＝7.1Hz)，4.18(2H，s)，1.34(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ193.45，160.64，61.43，47.97，14.49ppm。HPLC10.7min。
5-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(35)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(0.46mL，2.88mmol)加入5-苯基乙酰基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(33)(0.240g，0.929mmol)在三氟乙酸(TFA)(2.2mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。3.5小時后經(jīng)HPLC判斷反應完全。真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，60∶40己烷∶二氯甲烷)純化，得到35，TLC顯示其是純的，但HPLC顯示其是不純的。用以下條件經(jīng)制備反相HPLC獲得純的350-10分鐘，35∶65 H2O∶CH3CN。10-11分鐘，35∶65-0∶100 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nM；50.8mg/mL，0.8mL/注射。1H(CDCl3，400MHz)δ9.46(1H，寬s)，7.33-7.16(5H，m)，6.85(1H，t，J＝2.9Hz)，5.99(1H，t，J＝2.9Hz)，4.29(2H，q，J＝7.1Hz)，2.97(4H，s)，1.33(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.76，141.16，138.18，128.69，128.52，126.46，121.52，116.06，108.46，60.36，35.89，29.83，14.67ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.67；CH2碳60.36，35.89，29.83；CH碳128.69，128.52，126.46，116.06，108.46ppm。HPLC10.392min。
5-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸(36)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，1.67mmol)加入35(0.0814g，0.333mmol)在MeOH(0.83mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。加入0.4mL iPrOH使35溶解。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全為止。將產(chǎn)物濃縮，然后溶于1.9mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到36，為淺桃紅色固體。(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為12.055，此外，36在室溫下的13C NMR顯示與吡咯碳、芐基碳和酸碳相應的雙峰。將NMR探針加熱至28℃時所有的雙峰都變?yōu)閱畏?，如以下所報告?H(CD3OD，400MHz)δ10.97(1H，寬s)，7.25-7.20(2H，m)，7.18-7.11(3H，m)，6.76(1H，d，J＝3.4Hz)，5.90(1H，d，J＝3.4Hz)，2.94-2.84(4H，m)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.51，142.68，139.79，129.40，129.30，126.98，122.36，117.47，108.90，37.00，30.67ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳37.00，30.67；CH碳129.40，129.30，126.98，117.47，108.90ppm。HPLC11.239min。
實施例12. 4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(39)的合成 4-[2-(4-氯苯基)-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(37)的合成在氮氣下，將在最少量二氯乙烷中的吡咯-2-羧酸乙酯(1.0195g，7.33mmol)加入氯化鋁(1.934g，14.5mmol)和氯苯乙酰氯(2.7841g，14.73mmol)在二氯乙烷(10.9mL，0.67M)中的冰冷的攪拌混合物中。攪拌10分鐘后，移去冰浴，將反應物在室溫下攪拌60分鐘，經(jīng)TLC判斷為變化很小(9∶1己烷∶EtOAc)。在60℃下再加熱1小時后，經(jīng)TLC確認只有少量的原料剩余。將反應物冷卻至室溫，加入PS-TrisamineTM樹脂(6.3954g，24.30mmol)和二氯乙烷(10mL)，將反應物攪拌3小時。然后將反應物通過玻璃漏斗直接過濾至冰水中。用二氯甲烷洗滌樹脂，然后除去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，95∶5-50∶50己烷∶EtOAc)純化，得到1.0345g(48.4％)37，為淺橙色固體。注將產(chǎn)物置于硅膠柱上之前需要用少量二氯甲烷溶解粗產(chǎn)物。1H(CDCl3，400MHz)δ10.07(1H，寬s)，7.55-7.52(1H，m)，7.33-7.30(1H，m)，7.27(2H，d，J＝8.3Hz)，7.14(2H，d，J＝8.3Hz)，4.35(2H，q，J＝7.0Hz)，4.04(2H，s)，1.37(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ192.55，160.97，133.10，132.75，130.76，128.69，126.80，126.25，124.30，114.95，61.06，45.79，14.31ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.31；CH2碳61.06，45.79；CH碳130.76，128.69，126.80，114.96ppm。HPLC10.049min。
4-[2-(4-氯苯基)-乙基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(38)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(1.13mL，7.08mmol)加入4-[2-(4-氯苯基)-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(37)(0.6662g，2.28mmol)在三氟乙酸(TFA)(5.54mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。在室溫下攪拌4小時后，真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并用如下條件經(jīng)制備反相HPLC純化0-12分鐘，35∶65 H2O∶CH3CN。12-13分鐘，35∶65-0∶100 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nM；137mg/mL，1.0mL/注射。得到0.2704g(42.6％)38，為松散的白色固體。(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為12.055分鐘)。1H(CDCl3，400MHz)δ8.99(1H，寬s)，7.23(2H，d，J＝8.3Hz)，7.09(2H，d，J＝8.3Hz)，6.76(1H，s)，6.64(1H，s)，4.30(2H，q，J＝7.0Hz)，2.84(2H，t，J＝7.6Hz)，2.75(2H，t，J＝7.6Hz)，1.35(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.14，140.25，131.52，129.80，128.32，125.17，122.62，120.66，114.73，60.25，36.62，28.53，14.43ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.43；CH2碳60.25，36.62，28.53；CH碳129.80，128.32，120.66，114.73ppm。HPLC11.049min。
4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(39)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，4.84mmol)加入38(0.2689g，0.968mmol)在MeOH(2.42mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(30分鐘)為止。將產(chǎn)物濃縮，然后溶于5mL水中。用EtOAc萃取產(chǎn)物，然后逐滴加入10％aq.HCl將水層酸化(pH＝2)。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到39，為淺桃紅色固體(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為10.956分鐘)。1H(CD3OD，400MHz)δ10.89(1H，寬s)，7.22(2H，d，J＝8.3Hz)，7.13(2H，d，J＝8.3Hz)，6.69(1H，s)，6.66(1H，s)，2.82(2H，t，J＝7.1Hz)，2.73(2H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.48，142.15，132.49，131.15，129.21，125.97，123.60，122.88，116.44，37.92，29.70ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳37.92，29.70；CH碳131.15，129.21，122.88，116.44ppm。HPLC9.996min。
實施例13. 5-苯氧基甲基-1H-吡唑-3-羧酸(42)的合成 2，4-二氧代-5-苯氧基戊酸乙酯(40)的合成將苯氧基丙酮(5.0240g，33.46mmol)和草酸二乙酯(4.52mL，33.29mmol)混合在一起，然后加入在氮氣下在冰浴中攪拌的NaOEt(～3M，11.1mL)溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫并攪拌過夜。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物40。該粗品經(jīng)1∶1己烷∶二氯甲烷純化，得到1.3490g(15.4％)40。1H(CDCl3，400MHz)δ7.31(2H，t，J＝7.5Hz)，7.01(1H，t，J＝7.3Hz)，6.91(2H，d，J＝8.8Hz)，6.76(1H，s)，4.67(2H，s)，4.35(2H，q，J＝7.1Hz)，1.38(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ199.61，166.38，161.55，157.37，129.63，121.89，114.48，98.97，70.13，62.60，13.90ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳13.90；CH2碳70.13，62.60；CH碳129.63，121.89，114.48，98.97ppm。HPLC10.180min。(原料9.053分鐘)5-苯氧基甲基-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(41)的合成在氮氣下，將水合肼(0.197mL，4.06mmol)加入40(1.0163g，4.06mmol)在EtOH(4.1mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，92∶4∶4己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2NNH3)。只將各純部分合并并濃縮，得到0.5474g(54.7％)41。1H(CDCl3，400MHz)δ12.12(1H，寬s)，7.28(2H，t，J＝7.8Hz)，7.01-6.94(3H，m)，6.91(1H，s)，5.17(2H，s)，4.36(2H，q，J＝7.0Hz)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ158.11，129.48，121.26，114.71，107.83，62.61，61.31，14.17ppm。HPLC9.505min。
5-苯氧基甲基-1H-吡唑-3-羧酸(42)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，10.49mmol)加入41(0.5164g，2.10mmol)在MeOH(5.2mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(20分鐘)為止。將反應物濃縮，然后溶于4.2mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.4044g(88.4％)42，為白色固體。注一種當加入HCl時不沉淀出來的不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為9.127min。1H(CDCl3，400MHz)δ7.26(2H，t，J＝8.0Hz)，6.99(2H，d，J＝8.3Hz)，6.94(1H，t，J＝7.3Hz)，6.85(1H，s)，5.10(2H，s)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ163.68，159.73，146.60，141.13，130.51，122.27，115.83，108.88，63.06ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳63.06；CH碳130.51，122.27，115.83，108.88ppm。HPLC8.272min。
實施例14. 4-(3-苯基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(45)的合成 4-(3-苯基丙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(43)的合成在氮氣下，將在最少量二氯乙烷中的吡咯-2-羧酸乙酯(1.6236g，11.67mmol)加入氯化鋁(3.1085g，23.30mmol)和氫化肉桂酰氯(3.9058g，23.16mmol)在二氯乙烷(17.7mL，0.67M)中的冰冷的攪拌混合物中。攪拌10分鐘后，移去冰浴，將反應物在室溫下攪拌60分鐘，經(jīng)TLC判斷為變化很小(9∶1己烷∶EtOAc)。在60℃下再加熱1小時后，經(jīng)TLC確認只有少量的原料剩余。將反應物冷卻至室溫，加入多胺樹脂HL(2.60mmol/g，16.41g，42.67mmol)和二氯乙烷(10mL)，將反應物攪拌3小時。將反應物通過玻璃漏斗直接過濾至冰水中。用二氯甲烷洗滌樹脂，然后除去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，92∶8∶4己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2N NH3)純化，得到0.5501g(14.1％)43，為淺橙色固體。1H(CDCl3，400MHz)δ10.70(1H，寬s)，7.56(1H，s)，7.36-7.17(6H，m)，4.35(2H，q，J＝7.0Hz)，3.18-3.10(2H，m)，3.10-3.01(2H，m)，1.37(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ194.98，161.18，141.13，128.31，128.20，126.64，126.42，125.92，123.96，114.72，60.84，41.19，30.04，14.16ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.16；CH2碳60.84，41.19，30.04；CH碳128.31，128.20，126.64，125.92，114.72ppm。HPLC9.975min。
4-(3-苯基丙基)1H-吡咯-2羧酸乙酯(44)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(0.776mL，4.87mmol)加入43(0.5266g，1.57mmol)在三氟乙酸(TFA)(3.74mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。在室溫下攪拌4小時后，真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并用以下條件經(jīng)制備反相HPLC純化0-11分鐘，35∶65 H2O∶CH3CN。11.5-20分鐘，35∶65-0∶100H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nM；200mg/mL，0.7mL/注射。得到0.2455g(48.7％)44，為松散的白色固體。(注不期望的雜質(zhì)HPLC分析中的保留時間為12.062分鐘)。1H(CDCl3，400MHz)δ9.27(1H，寬s)，7.34-7.26(2H，m)，7.24-7.17(3H，m)，6.81(1H，s)，6.75(1H，s)，4.33(2H，q，J＝7.1Hz)，2.67(2H，t，J＝7.8Hz)，2.53(2H，t，J＝7.8Hz)，1.93(2H，五重峰，J＝7.8Hz)，1.37(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.34，142.31，128.40，128.22，125.99，125.64，122.47，120.73，114.82，60.17，35.33，32.47，26.17，14.41ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.41；CH2碳60.17，35.33，32.47，26.17；CH碳128.40，128.22，125.64，120.73，114.82ppm。HPLC11.140min。
4-(3-苯基丙基)1H-吡咯-2-羧酸(45)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，3.82mmol)加入44(0.2455g，0.7644mmol)在MeOH(1.9mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(25分鐘)為止。將產(chǎn)物濃縮，然后溶于1.5mL水中。用EtOAc萃取產(chǎn)物，然后逐滴加入10％aq.HCl將水層酸化(pH＝2)。加入EtOAc，將產(chǎn)物萃取入有機層中。有機層用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到56.1mg產(chǎn)物，經(jīng)HPLC分析含有一些次要雜質(zhì)。在加熱下，用最少量的氯仿吸收產(chǎn)物，加入少量己烷使產(chǎn)物沉淀。濾出產(chǎn)物，干燥得到16.0mg 45。(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為10.843分鐘)。1H(CD3OD，400MHz)δ7.24(2H，t，J＝7.3Hz)，7.16(2H，d，J＝7.3Hz)，7.13(1H，t，J＝7.3Hz)，6.75(1H，s)，6.71(1H，s)，2.61(2H，t，J＝7.8Hz)，2.46(2H，t，J＝7.8Hz)，1.86(2H，五重峰，J＝7.8Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.54，143.73，129.47，129.27，126.73，126.66，123.49，122.56，116.34，36.41，34.23，27.21ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳36.41，34.23，27.21；CH碳129.47，129.27，126.66，122.56，116.34ppm。HPLC9.845min。
實施例15. 5-(3-甲基丁基)-1H-吡唑-3-羧酸(48)的合成 7-甲基-2，4-二氧代辛酸乙酯(46)的合成將5-甲基-2-己酮(5.0084g，43.9mmol)和草酸二乙酯(5.95mL，43.8mmol)混合在一起，然后加入在氮氣下在冰浴中攪拌的NaOEt(～3M，14.6mL)溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫并攪拌過夜。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物46。該粗品經(jīng)1∶1己烷∶二氯甲烷純化，得到6.6035g(70.3％)46。1H(CDCl3，400MHz)δ6.28(1H，s)，4.25(2H，q，J＝7.0Hz)，2.40(2H，t，7.6Hz)，1.54-1.41(3H，m)，1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，0.82(6H，d，J＝6.3Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ203.40，166.27，161.85，101.37，62.15，38.74，33.39，27.46，21.99，13.77ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳21.99，13.77；CH2碳62.15，38.74，33.39；CH碳101.37，27.46ppm。HPLC11.038min。
5-(3-甲基丁基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(47)的合成在氮氣下，將水合肼(1.43mL，2.95mmol)加入46(6.3112g，2.95mmol)在EtOH(29.5mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。將反應物在室溫下攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(35分鐘)為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，96∶4己烷∶在EtOH中的2N NH3)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到4.3911g(70.9％)47。1H(CDCl3，400MHz)δ13.01(1H，寬s)，6.52(1H，s)，4.29(2H，q，J＝7.1Hz)，2.64(2H，t，J＝7.8Hz)，1.57-1.41(3H，m)，1.26(3H，t，J＝7.1Hz)，5.85(6H，d，J＝5.9Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ162.37，146.26，143.1，105.73，60.53，37.88，27.35，23.42，22.11，14.06ppm。HPLC10.006min。
5-(3-甲基丁基)-1H-吡唑-3-羧酸(48)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，80.85mmol)加入47(3.40g，16.17mmol)在MeOH(40.4mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(6分鐘)為止。將反應物濃縮，然后溶于14mL水中。逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到2.8753g(97.6％)48。(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為9.522分鐘)。1H(CDCl3，400MHz)δ6.61(1H，s)，2.70(2H，t，J＝7.8Hz)，1.63-1.51(3H，m)，0.94(6H，d，J＝6.3Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ164.35，149.48，143.00，107.34，39.35，28.71，24.69，22.65ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳22.65；CH2碳39.35，24.69；CH碳107.34，28.71ppm。HPLC9.522min。
實施例16. 5-(4-甲基戊-3-烯基)-1H-吡唑-3-羧酸(51)的合成 8-甲基-2，4-二氧代壬-7-烯酸乙酯(49)的合成將氫化鈉(0.465g，19.4mmol)緩慢加入在氮氣下攪拌的含有EtOH(5.88mL，3.3M)的NaCl冰浴中。將6-甲基庚-5-烯-2-酮(2.4412g，19.3mmol)和草酸二乙酯(2.63mL，19.4mmol)混合在一起，然后加入冷的NaOEt溶液中。攪拌15分鐘后，將反應物暖至室溫并攪拌6小時，此時經(jīng)TLC判斷反應完全。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，70∶30∶3己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2N NH3)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到1.9190g(43.8％)49。1H(CDCl3，400MHz)δ14.44(1H，寬s)，6.34(1H，s)，5.06(1H，t，J＝7.3Hz，4.33(2H，q，J＝7.1Hz)，2.49(2H，t，J＝7.3Hz)，2.31(2H，q，J＝7.3Hz)，1.66(3H，s)，1.60(3H，s)，1.35(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ202.83，166.39，162.08，133.42，121.90，101.64，62.40，40.92，25.59，23.34，17.61，13.96ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳25.59，17.62，13.97；CH2碳62.40，40.92，23.34；CH碳121.90，101.64ppm。HPLC11.007min。
5-(4-甲基戊-3-烯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(50)的合成在氮氣下，將水合肼(0.41mL，8.48mmol)加入49(0.1.9190g，8.48mmol)在EtOH(8.5mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(1/2h)為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，96∶4己烷∶在EtOH中的2N NH3)純化。1H(CDCl3，400MHz)δ12.73(1H，寬s)，6.57(1H，s)，5.09(1H，t，J＝6.8Hz)，4.32(2H，q，J＝7.1Hz)，2.70(2H，t，J＝7.5Hz)，2.29(2H，q，J＝7.5Hz)，1.63(3H，s)，1.52(3H，s)，1.30(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ162.27，106.11，60.65，31.49，27.53，25.52，17.51，13.10ppm。HPLC9.986min。
5-(4-甲基戊-3-烯基)-1H-吡唑-3-羧酸(51)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，11.85mmol)加入50(0.0.5269g，2.37mmol)在MeOH(5.9mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(5分鐘)為止。將反應物濃縮，再溶于水中，用EtOAc萃取。逐滴加入10％aq.HCl使水層pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.4034g(87.6％)51。1H(CD3OD，400MHz)δ6.56(1H，s)，5.14(1H，t)，2.68(2H，t，J＝7.3Hz)，2.33(2H，q，J＝7.3Hz)，1.67(3H，s)，1.56(3H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.94，148.55，143.23，123.94，107.32，28.89，27.04，25.85，17.69ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳25.85，17.69；CH2碳28.89，27.04；CH碳123.94，107.32ppmHPLC8.475min。
實施例17. 5-[2-(2，2，6-三甲基環(huán)己基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸(54)的合成 2，4-二氧代-6-(2，2，6-三甲基環(huán)己基)-己酸乙酯(52)的合成將氫化鈉(0.6447g，25.52mmol)緩慢加入在氮氣下攪拌的含有EtOH(10mL，2.6M)的NaCl冰浴中。將4-(2，2，6-三甲基環(huán)己基)-丁-2-酮(5.0072g，25.50mmol)和草酸二乙酯(3.7241g，25.48mmol)混合在一起，然后加入冷的NaOEt溶液中。攪拌5分鐘后，將反應物暖至室溫。反應迅速停止。再加入10mL EtOH，將反應物放置3小時。在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，1∶1己烷∶二氯甲烷)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到52。1H(CDCl3，400MHz)δ14.51(1H，寬s)，6.34(1H，s)，4.34(2H，q，J＝7.1Hz)，2.44(2H，t，J＝8.3Hz)，1.96-1.84(1H，m)，1.68-1.22(m)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)，1.18-0.98(m)，0.94(3H，s)，0.87(3H，s)，0.85(3H，d，J＝7.3Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ203.45，167.17，162.40，101.80，62.71，49.28，42.60，30.46，20.86，14.27ppm。部分DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.27；CH2碳62.71；CH碳101.80ppm。HPLC12.576min。
5-[2-(2，2，6-三甲基環(huán)己基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(53)的合成在氮氣下，將水合肼(0.867mL，17.9mmol)加入52(5.2981g，17.9mmol)在EtOH(17.9mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，97∶3己烷∶在EtOH中的2N NH3)純化，得到1.6604g(31.8％)53。部分1H(CDCl3，400MHz)δ12.45(1H，寬s)，6.58(1H，s)，4.32(2H，q，J＝7.1Hz)，2.63(2H，t，J＝8.3Hz)，1.31(3H，t，J＝7.1Hz)，0.90(3H，s)，0.83(3H，s)，0.78(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。部分13C(CDCl3，100MHz)δ106.04，60.66，48.99，34.03，30.10，24.89，14.17ppm。HPLC12.000min。
5-[2-(2，2，6-三甲基環(huán)己基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸(54)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，2.73mmol)加入53(0.1594g，0.5451mmol)在MeOH(1.36mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(5分鐘)為止。將反應物濃縮，再溶于水中，用EtOAc萃取。向水層中逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.0119g(8.2％)54。從EtOAc層中又得到0.0590g(40.9％)54，不過有少許雜質(zhì)。1H(CD3OD，400MHz)δ6.56(1H，s)，2.64(2H，t，J＝7.8Hz)，2.03-1.89(1H，m)，1.69-1.53(2H，m)，1.55-1.41(2H，m)，1.39-1.27(2H，m)，1.20-1.06(3H，m)，0.97(3H，s)，0.91(3H，s)，0.86(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ165.07，149.02，143.33，107.26，50.24，37.04，35.11，31.58，31.33，29.00，28.87，28.37，26.30，22.13，18.90ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳29.00，28.87，18.90；CH2碳37.04，31.33，28.37，26.30，22.13；CH碳107.26，50.24，31.58ppm。HPLC10.497min。
實施例18. 5-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-3-羧酸(58)的合成
4-苯基戊-2-酮(55)的合成在1小時內(nèi)將1.6M甲基鋰(22.8mL，36.5mmol)加入3-苯基丁酸(1.8298g，11.14mmol)在無水Et2O(56mL，0.2M)中的攪拌的0℃溶液中。移去冰浴，將反應物在室溫下再攪拌22/3小時。再加入0.8mLMeLi(1.12mmol，0.10當量)，將反應物再攪拌30min。然后將反應物傾入快速攪拌的含有aq.HCl的冰水中。移去有機層，用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到純的55(1.2324g，68.2％)1H(CDCl3，400MHz)δ7.30(2H，t，J＝7.3Hz)，7.22(2H，d，J＝7.3Hz)，7.20(2H，t，J＝7.3Hz)，3.37-3.27(1H，m)，2.76(1H，dd，J＝16.1，6.3Hz)，2.66(1H，dd，J＝16.1，7.8Hz)，2.05(3H，s)，1.28(3H，d，J＝7.3Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ208.01，146.42，128.80，127.03，126.57，52.16，35.67，30.77，22.28ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳30.77，22.28；CH2碳52.16；CH碳128.80，127.03，126.57，35.67ppm。HPLC10.017min。(注SM的HPLC保留時間為9.041min。)2，4-二氧代-6-苯基庚酸乙酯(56)的合成將氫化鈉(0.1702g，7.09mmol)加入在氮氣下攪拌的含有EtOH(2.6mL，2.7M)的NaCl冰浴中。將4-苯基戊-2-酮(55)(1.0493g，6.47mmol)和草酸二乙酯(0.88mL，6.47mmol)混合在一起，然后加入冷的NaOEt溶液中。攪拌5分鐘后將反應物暖至室溫。90分鐘后，在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到56(0.7230g，42.6％)，其沒有經(jīng)進一步純化而用于下一步。1H(CDCl3，400MHz)δ7.34-7.16(5H，m)，6.30(1H，s)，4.33(2H，q，J＝7.0Hz)，3.39-3.26(1H，m)，2.82(1H，dd，J＝15.1，6.8Hz)，2.72(1H，dd，J＝15.1，7.8Hz)，1.36(3H，t，J＝7.0Hz)，1.32(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。HPLC10.934min。
5-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(57)的合成在氮氣下，將水合肼(0.134mL，2.76mmol)加入56(0.7230g，2.76mmol)在EtOH(2.8mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(50分鐘)為止。將反應物濃縮，并用以下條件經(jīng)制備反相HPLC純化0-24分鐘，55∶45 H2O∶CH3CN；24-25分鐘，55∶45-0∶100 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝214nM；100mg/mL，0.2mL/注射。得到0.0489g 57。1H(CDCl3，300MHz)δ10.77(1H，寬s)，7.36-7.14(5H，m)，6.49(1H，s)，4.33(2H，q，J＝7.0Hz)，3.16-2.86(3H，m)，1.33(3H，t，J＝7.0Hz)，1.27(3H，d，J＝5.9Hz)ppm。13C(CDCl3，75MHz)δ162.01，145.94，145.75，141.50，128.43，126.76，126.32，106.98，60.87，39.94，34.64，21.34，14.12ppm。DEPT(CDCl3，75MHz)CH3碳21.34，14.12；CH2碳60.87，34.64；CH碳128.43，126.77，126.32，106.98，39.94ppm。HPLC10.052min。
5-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-3-羧酸(58)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，0.947mmol)加入57(0.0489g，0.1893mmol)在MeOH(0.47mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(8分鐘)為止。將反應物濃縮，再溶于水中，用EtOAc(1mL)萃取。向水層中逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.0298g(68.3％)58。1H(CD3OD，400MHz)δ7.24(2H，t，J＝7.3Hz)，7.18(2H，d，J＝7.3Hz)，7.14(1H，t，J＝7.3Hz)，6.42(1H，s)，3.11-3.01(1H，m)，2.95(1H，dd，J＝14.1，7.3Hz)，2.89(1H，dd，J＝14.1，7.8Hz)，1.26(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.83，147.35，147.13，143.02，129.45，127.92，127.35，108.07，41.46，35.58，22.05ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳22.05；CH2碳35.58；CH碳129.45，127.92，127.35，108.07，41.46ppm。HPLC8.764min。
實施例19. 5-(1-甲基-2-苯基乙基)-1H-吡唑-3-羧酸(62)的合成 3-甲基-4-苯基丁-2-酮(59)的合成在70分鐘內(nèi)將1.4M甲基鋰(34.8mL，48.72mmol)加入α-甲基氫化肉桂酸(4.0019g，24.36mmol)在無水Et2O(122mL，0.2M)中的攪拌的0℃溶液中。移去冰浴，將反應物在室溫下再攪拌2小時。將反應物傾入快速攪拌的含有aq.HCl的冰水中。移去有機層，用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，95∶5己烷∶EtOAc)純化，得到純的59(2.3038g，58.3％)。1H(CDCl3，400MHz)δ7.28(2H，t，J＝7.3Hz)，7.20(1H，t，J＝7.3Hz)，7.16(2H，d，J＝7.3Hz)，3.00(1H，dd，J＝13.7，6.8Hz)，2.83(1H，app sex，7.0Hz)，2.56(1H，dd，J＝13.7，7.8Hz)，2.08(3H，s)，1.09(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ211.99，139.53，128.79，128.28，126.10，48.65，38.75，28.74，16.10ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳28.74，16.10；CH2碳38.75；CH碳128.79，128.28，126.10，48.65ppm。HPLC10.229min。(注SM的HPLC保留時間為9.225min。)5-甲基-2，4-二氧代-6-苯基己酸乙酯(60)的合成將氫化鈉(0.3965g，16.52mmol)緩慢加入在氮氣下攪拌的含有EtOH(5.6mL，2.6M)的NaCl冰浴中。將59(2.2727g，14.01mmol)和草酸二乙酯(2.0649g，14.13mmol)混合在一起，然后加入冷的NaOEt溶液中。攪拌5分鐘后，將反應物暖至室溫。攪拌5小時后，在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，67∶30∶3己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2N NH3)純化。只將各純部分合并并濃縮，得到60。1H(CDCl3，400MHz)δ14.55(1H，寬s)，7.32-7.12(5H，m)，6.36(1H，s)，4.33(2H，q，J＝7.0Hz)，3.05(1H，dd，J＝13.5，6.8Hz)，2.84(1H，app sex，J＝7.0Hz)，2.67(1H，dd，J＝13.5，7.8Hz)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)，2.33(3H，d，J＝7.0Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ205.78，166.96，161.88，138.75，128.80，128.30，126.29，100.75，62.32，46.35，39.10，16.51，13.88ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳16.51，13.88；CH2碳62.32，39.10；CH碳128.80，128.30，126.29，100.75，46.35ppm。HPLC11.084min。
5-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(61)的合成在氮氣下，將水合肼(0.1564mL，3.23mmol)加入60(0.8460g，3.223mmol)在EtOH(3.2mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全為止。將反應物濃縮，經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，87∶7∶4己烷∶二氯甲烷∶在EtOH中的2NNH3)純化，得到0.6423g(77.1％)61。1H(CDCl3，300MHz)δ7.26-7.14(3H，m)，7.08(2H，d，J＝7.0Hz)，6.61(1H，s)，4.34(2H，q，J＝7.2Hz)，3.23(1H，app sex，J＝7.1Hz)，3.00(1H，dd，J＝13.5，6.7Hz)，2.77(1H，dd，J＝13.5，8.0Hz)，1.34(3H，t，J＝7.1Hz)，1.26(3H，d，J＝7.3Hz)ppm。部分13C(CDCl3，75MHz)δ161.86，139.47，128.99，128.20，126.14，104.99，60.80，43.37，33.39，19.60，14.18ppm。DEPT(CDCl3，75MHz)CH3碳19.60，14.18；CH2碳60.80，43.37；CH碳128.99，128.20，126.14，104.99，33.39ppm。HPLC10.129min。
5-(2-苯基丙基-1H-吡唑-3-羧酸(62)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，1.01mmol)加入61(0.0523g，0.2024mmol)在MeOH(0.51mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(9分鐘)為止。將反應物濃縮，再溶于水中，用EtOAc萃取。向水層中逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。當白色固體未如預期中那樣沉淀出，則加入EtOAc，移去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到純的62。1H(CD3OD，400MHz)δ7.24-7.18(2H，m)，7.17-7.05(3H，m)，6.56(1H，s)，3.17(1H，app sex，J＝7.3Hz)，2.96(1H，dd，J＝13.6，7.3Hz)，2.80(1H，dd，J＝13.7，7.8Hz)，1.25(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.88，153.40，142.91，140.97，130.09，129.25，127.21，106.11，44.41，34.96，20.35ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳20.35；CH2碳44.41；CH碳130.09，129.25，127.21，106.11，34.96ppm。HPLC8.849min。
實施例20. 4-[2-(2-溴苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(65)的合成 4-[2-(2-溴苯基)-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(63)的合成在氮氣下，將在最少量(～5mL)二氯乙烷中的吡咯-2-羧酸乙酯(1.9428g，13.96mmol)加入氯化鋁(4.0458g，30.34mmol)和2-溴苯乙酰氯(6.7116g，28.74mmol)在二氯乙烷(44mL，0.66M)中的冰冷的攪拌混合物中。移去冰浴，將反應物在室溫下再攪拌2小時。加入19.2977g(2.6mMol/g)多胺HL樹脂(200-400目)和二氯乙烷(20mL)，將反應物攪拌～100min。然后將反應物通過玻璃漏斗直接過濾至冰水中。用二氯甲烷洗滌樹脂，然后除去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，80∶20-60∶40己烷∶EtOAc)純化，得到2.5751g(54.9％)63，為白色固體。注將產(chǎn)物置于硅膠柱上之前需要用少量二氯甲烷溶解粗產(chǎn)物。1H(CDCl3，400MHz)δ10.32(1H，寬s)，7.57-7.53(2H，m)，7.38-7.37(1H，m)，7.29-7.21(2H，m)，7.13-7.07(1H，m)，4.35(2H，q，J＝7.2Hz)，4.25(2H，s)，1.36(3H，t，J＝7.2Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ191.78，161.04，134.91，132.62，131.66，128.59，127.40，126.95，126.25，124.98，124.17，114.88，60.92，46.56，14.26ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.26；CH2碳60.92，46.56；CH碳132.62，131.66，128.59，127.40，126.95，114.88ppm。HPLC10.078min。
4-[2-(2-溴苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(64)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(2.25mL，14.1mmol)加入63(1.5291g，4.55mmol)在三氟乙酸(TFA)(10.8mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。將反應物在室溫下攪拌3小時后，加熱至35℃，保持35分鐘，然后真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并用以下條件經(jīng)制備反相HPLC純化0-12分鐘，35∶65 H2O∶CH3CN；14-15分鐘，35∶65-0∶100 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nM；3.67g/mL，0.2mL/注射。得到0.8402g(57.3％)64，為松散的白色固體。(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為12.281分鐘)。1H(CDCl3，400MHz)δ9.07(1H，寬s)，7.55(1H，dd，J＝8.0，1.3Hz)，7.21(1H，td，J＝7.3，1.3Hz)，7.17(1H，dd，J＝7.6，2.4Hz)，7.06(1H，ddd，J＝7.9，7.0，2.3Hz)，6.82(1H，s)，6.72(1H，s)，4.32(2H，t，J＝7.2Hz)，2.99(2H，t，J＝8.0Hz)，2.78(2H，t，J＝7.9Hz)，1.36(3H，t，J＝7.2Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.21，141.03，132.75，130.41，127.63，127.32，125.31，124.43，122.66，120.68，114.83，60.22，37.78，27.03，14.48ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.48；CH2碳60.22，37.78，27.03；CH碳132.75，130.41，127.63，127.32，120.68，114.83ppm。HPLC11.355min。
4-[2-(2-溴苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(65)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，13.04mmol)加入64(0.8402g，2.608mmol)在MeOH(6.5mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(10分鐘)為止。將產(chǎn)物濃縮，然后溶于10mL水中。用EtOAc萃取產(chǎn)物至有機層不再變黃，然后逐滴加入10％aq.HCl將水層酸化(pH＝2)。產(chǎn)物從溶液中以油的形式析出，所以加入EtOAc，移去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到65(0.3934g，51.3％)，為白色固體(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為11.066分鐘)。1H(CD3OD，400MHz)δ7.51(1H，d，J＝7.8Hz)，7.24-7.16(2H，m)，7.05(1H，ddd，J＝8.2，6.3，2.9Hz)，6.72(1H，s)，6.71(1H，s)，2.96(2H，t，J＝8.0Hz)，2.73(2H，t，J＝7.8Hz))ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.48，142.42，133.71，131.80，128.79，128.53，125.89，125.20，123.54，122.61，116.38，38.99，28.20ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳38.99，28.20；CH碳133.71，131.80，128.79，128.53，122.61，116.38ppm。HPLC10.035min。
實施例21. 5-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸(69)的合成 4-(4-氯苯基)-丁-2-酮(66)的合成在70分鐘內(nèi)將1.6M甲基鋰(33.9mL，54.17mmol)加入3-(4-氯苯基)-丙酸(5.0072g，27.08mmol)在無水Et2O(135mL，0.2M)中的攪拌的0℃溶液中。移去冰浴，將反應物在室溫攪拌過夜。將反應物傾入快速攪拌的含有aq.HCl的冰水中。移去有機層，用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，98∶2-95∶5己烷∶EtOAc)純化，得到66(2.4253g，49.0％)。1H(CDCl3，400MHz)δ7.14(2H，d，J＝8.3Hz)，7.03(2H，d，J＝8.3Hz)，2.77(2H，t，J＝7.5Hz)，2.64(2H，t，J＝7.5Hz)，2.04(3H，s)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ207.12，139.38，131.59，129.55，128.35，44.62，29.82，28.78ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳29.82；CH2碳44.62，28.78；CH碳129.55，128.35ppm。HPLC10.361min。(注SM的HPLC保留時間為9.409分鐘)。
6-(4-氯苯基)-2，4-二氧代己酸乙酯(67)的合成將氫化鈉(0.4163g，17.35mmol)緩慢加入在氮氣下攪拌的含有EtOH(5.3mL，2.5M)的NaCl冰浴中。將66(2.4253g，13.28mmol)和草酸二乙酯(1.803g，13.28mmol)混合在一起，然后加入該冷的NaOEt溶液中。攪拌5分鐘后，將反應物暖至室溫。10分鐘后，反應完全，再加入10mL EtOH。攪拌～5h后，在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，1∶1己烷∶二氯甲烷)。只將各純部分合并并濃縮，得到67(1.7561g，46.8％)1H(CDCl3，400MHz)δ14.27(1H，寬s)，7.22(2H，d，J＝8.3Hz)，7.10(2H，d，J＝8.3Hz)，6.32(1H，s)，4.31(2H，q，J＝7.2Hz)，2.92(2H，t，J＝7.8Hz)，2.78(2H，t，J＝7.8Hz)，1.34(3H，t，J＝7.2Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ201.59，166.07，161.79，138.51，132.00，128.53，128.54，101.72，62.38，42.08，29.60，13.88ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳13.88；CH2碳62.38，42.08，29.60；CH碳129.53，128.54，101.72ppm。HPLC11.103min。
5-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(68)的合成在氮氣下，將水合肼(0.300mL，6.18mmol)加入67(0.1.7484g，6.18mmol)在EtOH(6.2mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(40分鐘)為止。冷卻時，有白色結晶固體從反應物中沉淀出來。過濾分離固體，用乙醇洗滌并干燥，得到純的68(0.9092g，52.7％)。1H(CDCl3，300MHz)δ12.44(1H，寬s)，7.21(2H，d，J＝8.3Hz)，7.08(2H，d，J＝8.1Hz)，6.58(1H，s)，4.33(2H，q，J＝7.0Hz)，3.00(2H，t，J＝7.0Hz)，2.93(2H，t，J＝7.0Hz)，1.33(3H，t，J＝7.0Hz)ppm。部分13C(CDCl3，75MHz)δ139.12，131.93，129.67，128.50，106.49，60.94，34.72，14.20ppm。HPLC10.269min。
5-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡唑-3-羧酸(69)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，16.31mmol)加入68(0.9092g，3.26mmol)在MeOH(8.2mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(7分鐘)為止。將反應物濃縮，再溶于水中(5mL)，用EtOAc(2mL)萃取。向水層中逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.7543g(92.2％)69。由于69還含有很少量的雜質(zhì)，所以將其溶于38mL甲苯、10mL EtOAc和14mL EtOH中，同時加熱回流。放置過夜后從反應物中沉淀出純白色固體(0.4052g)。固體(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為9.904分鐘)。1H(CD3OD，400MHz)δ7.24(2H，d，J＝8.3Hz)，7.15(2H，d，J＝8.3Hz)，6.54(1H，s)，2.95(4H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.68，148.23，142.84，140.91，133.00，131.08，129.46，107.59，35.83，28.78ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳35.83，28.78；CH碳131.08，129.46，107.59ppm。HPLC9.026min。
實施例22. 5-溴-4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(70)的合成 5-溴-4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(70)的合成
在5分鐘內(nèi)將溴(0.049mL，0.962mmol)逐滴加入39(0.200g，0.802mmol)在乙酸(2.5mL)中的攪拌溶液中。當經(jīng)HPLC判斷反應完全(30分鐘)時，加入水，將沉淀出的固體過濾，用水洗滌。將所得的淡紫色固體溶于EtOAc中，用亞硫酸鈉和水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。產(chǎn)物經(jīng)制備反相HPLC純化，條件為40∶60 H2O∶CH3CN(w/0.05％ TFA)；20mL/min.；λ＝214nM。得到0.1520g(57.7％)70，為松散的白色固體。1H(CD3OD，400MHz)δ7.22(2H，d，J＝8.8Hz)，7.12(2H，d，J＝8.8Hz)，6.65(1H，s)，2.81(2H，t，J＝7.3Hz)，2.67(2H，t，J＝7.3Hz)ppm。部分13C(CD3OD，100MHz)δ163.33，141.42，132.54，131.03，129.18，124.73，117.15，105.84，36.72，29.04ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳36.72，29.04；CH碳131.03，129.18，117.15ppm。HPLC10.484min。
實施例23. 4-[(2-(2-溴苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(73)的合成 4-[2-(4-氟苯基)-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(71)的合成在氮氣下，將在最少量二氯乙烷中的吡咯-2-羧酸乙酯(2.0589g，14.80mmol)加入氯化鋁(3.9913g，29.93mmol)和4-氟苯乙酰氯(5.1338g，29.75mmol)在二氯乙烷(22mL，0.66M)中的冰冷的攪拌溶液中。移去冰浴，將反應物在室溫下攪拌3.5小時。加入20.6195g(2.6mMol/g)多胺樹脂HL(200-400目)和二氯乙烷(20mL)，將反應物攪拌60min。然后將反應物通過玻璃漏斗直接過濾至冰水中。用二氯甲烷洗滌樹脂，然后除去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。當加入6.5mL 80∶20己烷∶EtOAc時，有機液體變黃，留下褐色固體。濾出固體，用80∶20己烷∶EtOAc洗滌并干燥，得到純的71(2.1838g，53.6％)。1H(CDCl3，400MHz)δ10.03(1H，寬s)，7.54(1H，s)，7.32(1H，s)，7.23(2H，dd，J＝8.6，5.3Hz)，6.99(2H，t，J＝8.6Hz)，4.35(2H，q，J＝7.1Hz)，4.04(2H，s)，1.37(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ192.81，161.84(d，J＝244Hz)，160.95，130.89(d，J＝7.8Hz)，130.37(d，J＝3.2Hz)，126.72，126.36，124.30，115.40(d，J＝21.4Hz)，114.96，61.02，45.63，14.29ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.29；CH2碳61.02，45.63；CH碳130.89(d，J＝7.8Hz)，126.72，115.40(d，J＝21.4Hz)，114.96ppm。HPLC9.689min。
4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(72)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(3.84mL，24.1mmol)加入71(2.1400g，7.77mmol)在三氟乙酸(TFA)(18.5mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。當經(jīng)HPLC判斷反應完全時，真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并用以下條件經(jīng)制備反相HPLC純化0-12分鐘，35∶65 H2O∶CH3CN；14-15分鐘，35∶65-0∶100 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nM；3.67g/mL，0.2mL/注射。得到1.1571g(57.0％)72，為松散白色固體。(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為11.414分鐘)。1H(CDCl3，400MHz)δ9.33(1H，寬s)，7.13(2H，dd，J＝8.5，5.6Hz)，6.96(2H，t，J＝8.8Hz)，6.79(1H，s)，6.66(1H，s)，4.33(2H，t，J＝7.1Hz)，2.86(2H，t，J＝7.1Hz)，2.77(2H，t，J＝7.1Hz)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.31，161.22(d，J＝242Hz)，137.46(d，J＝3.2Hz)，129.71(d，J＝7.7Hz)，125.22，122.52，120.84，114.89(d，J＝21.9Hz)，114.79，60.19，36.44，28.73，14.37ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.37；CH2碳60.19，36.44，28.73；CH碳129.71(d，J＝7.7Hz)，120.84，114.89(d，J＝21.9Hz)，114.79ppm。HPLC10.797min。
4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(73)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，22.14mmol)加入72(1.1571g，4.428mmol)在MeOH(11.1mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(10分鐘)為止，冷卻后反應停止。將產(chǎn)物濃縮，然后溶于水中。產(chǎn)物用EtOAc萃取，然后逐滴加入10％aq.HCl將水層酸化(pH＝2)。產(chǎn)物從溶液中以油的形式析出，所以加入EtOAc，移去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到73(0.8724g，84.4％)，為灰白色固體。重復上述方法進一步純化該產(chǎn)物。將產(chǎn)物溶于10％NaOH，用EtOAc洗滌，然后用10％HCl酸化。如上，產(chǎn)物以油的形式析出，因此萃取入EtOAc中，然后用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。1H(CD3OD，400MHz)δ7.14(2H，dd，J＝8.8，5.4Hz)，6.94(2H，t，J＝8.8Hz)，6.68(1H，d，J＝1.7Hz)，6.66(1H，d，J＝7.1Hz)，2.82(2H，t，J＝7.3Hz)，2.72(2H，t，J＝7.3Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.48，162.69(d，J＝241Hz)，139.28(d，J＝3.2Hz)，131.08(d，J＝8.2Hz)，126.08，123.47，122.68，116.41，115.68(d，J＝21.0Hz)，37.77，29.94ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳37.77，29.94；CH碳131.08(d，J＝8.2Hz)，122.68，116.41，115.68(d，J＝21.0Hz)ppm。HPLC9.575min。
實施例24. 4-(3-環(huán)戊基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(76)的合成 4-(3-環(huán)戊基丙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(74)的合成在氮氣下，將在最少量二氯乙烷中的吡咯-2-羧酸乙酯(1.8593g，13.36mmol)加入氯化鋁(3.5756g，26.82mmol)和3-環(huán)戊基丙酰氯(4.1mL，26.59mmol)在二氯乙烷(20mL，0.66M)中的冰冷的攪拌混合物中。移去冰浴，將反應物在室溫下攪拌4小時。加入18.18g(2.6mMol/g)多胺樹脂HL(200-400目)和二氯乙烷(20mL)，將反應物攪拌～60min。將反應物通過玻璃漏斗直接過濾至冰水中。用二氯甲烷洗滌樹脂，然后除去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)己烷/乙酸乙酯重結晶。將粗產(chǎn)物溶于最少量的熱EtOAc中，然后緩慢冷卻至室溫。當沒有產(chǎn)物結晶時，用移液管將少量己烷沿燒瓶壁加入。放置過夜后得到期望產(chǎn)物的純晶體(2.3068g，65.6％)。1H(CDCl3，400MHz)δ10.04(1H，寬s)，7.55(1H，s)，7.29(1H，s)，4.34(2H，q，J＝7.1Hz)，2.77(2H，t，J＝7.6Hz)，1.85-1.67(5H，m)，1.64-1.46(4H，m)，1.36(3H，t，J＝7.1Hz)，1.78-1.06(2H，m)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ196.38，161.09，127.03，126.14，124.05，114.76，60.91，39.82，39.06，32.53，30.82，25.11，14.31ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.31；CH2碳60.91，39.06，32.53，30.82，25.11；CH碳126.14，114.76，39.82ppm。HPLC10.800min。
4-(3-環(huán)戊基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(75)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(4.28mL，26.86mmol)加入74(2.2816g，8.66mmol)在三氟乙酸(TFA)(20.6mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。當經(jīng)HPLC判斷反應完全時，真空除去TFA，用EtOAc吸收粗產(chǎn)物，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并用以下條件經(jīng)制備反相HPLC純化30∶70 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nm。獲得75，為松散的白色固體。1H(CDCl3，400MHz)δ9.43(1H，寬s)，6.77(1H，s)，6.74(1H，s)，4.32(2H，q，J＝7.1Hz)，2.46(2H，t，J＝7.6Hz)，1.83-1.71(3H，m)，1.64-1.46(6H，m)，1.35(3H，t，J＝7.1Hz)，1.36-1.31(2H，m)，1.14-1.02(2H，m)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.46，126.62，122.33，120.74，114.86，60.10，40.00，35.82，32.65，30.14，26.94，25.13，14.39ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3碳14.39；CH2碳60.10，35.82，32.65，30.14，26.94，25.13；CH碳120.74，114.86，40.00ppm。HPLC12.379min。
4-(3-環(huán)戊基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(76)的合成
在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，11.23mmol)加入75(0.56g，2.25mmol)在MeOH(5.6mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(10分鐘)為止。當冷卻時，反應停止。將產(chǎn)物濃縮，加入水。當產(chǎn)物不溶于水時，加入EtOAc，然后加入10％ HCl酸化水層。然后移去有機層，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并用以下條件經(jīng)制備反相HPLC純化30∶70 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nm。得到76，為松散的白色固體。(注不期望的雜質(zhì)在HPLC中的保留時間為12.073分鐘)。1H(CD3OD，400MHz)δ10.80(1H，s)，6.72(1H，s)，6.68(1H，s)，2.43(2H，t，J＝7.6Hz)，1.82-1.70(3H，m)，1.64-1.46(6H，m)，1.38-1.29(2H)，1.14-1.02(2H，m)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.45，127.29，122.45，116.39，41.31，37.00，33.73，31.43，27.96，26.11ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH2碳37.00，33.73，31.43，27.96，26.11；CH碳122.45，116.39，41.31ppm。HPLC10.977min。
實施例25. (S)-5-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-3-羧酸(80)的合成 (S)-4-苯基戊-2-酮(77)的合成在1小時內(nèi)將1.6M甲基鋰(17.8mL，24.9mmol)加入(S)-3-苯基丁酸(2.0147g，12.18mmol)在無水Et2O(61mL，0.2M)中的攪拌的0℃溶液中。移去冰浴，將反應物在室溫下再攪拌11/2小時。然后將反應物傾入快速攪拌的含有aq.HCl的冰水中。移去有機層，用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到純的77(2.0487g，(2.0487g，～100％)HPLC10.081min。(注SM的HPLC保留時間為9.127分鐘)。
(S)-2，4-二氧代-6-苯基庚酸乙酯(78)的合成將氫化鈉(0.3790g，15.8mmol)緩慢加入在氮氣下攪拌的含EtOH(4.9mL，2.5M)的NaCl冰浴中。將(S)-4-苯基戊-2-酮(78)(2.0487g，12.63mmol)和草酸二乙酯(1.67mL，12.30mmol)混合在一起，然后加入冷的NaOEt溶液中。攪拌5分鐘后，將反應物暖至室溫。60分鐘后，在0℃下用1N HCl終止反應物反應，并用二氯甲烷萃取兩次。將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)1∶1-1∶3己烷∶二氯甲烷純化，得到78(0.6895g，20.8％)HPLC10.940min。
(S)-5-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(79)的合成在氮氣下，將水合肼(0.126mL，2.59mmol)加入78(0.0.6895g，2.63mmol)在EtOH(2.6mL，1M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(45分鐘)為止。將反應物濃縮，經(jīng)9∶1-8∶1己烷(3∶1二氯甲烷∶在EtOH中的2N NH3)純化，得到0.6153g(90.6％)79。HPLC10.001min。(S)-5-(2-苯基丙基)-1H-吡唑-3-羧酸(80)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，11.9mmol)加入79(0.6153g，0.2.38mmol)在MeOH(6mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(7分鐘)為止。將反應物濃縮，再溶于水中，用EtOAc(1mL)萃取。向水層中逐滴加入10％aq.HCl至水層的pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.250g(45.6％)80。1H(CD3OD，400MHz)δ7.30-7.23(2H，m)，7.22-7.13(3H，m)，6.62(1H，s)，3.14(1H，app sex，J＝7.3Hz)，3.03(2H，d，J＝7.8Hz)，1.31(3H，d，J＝6.8Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ162.00，149.20，146.35，141.76，129.62，127.93，127.64，109.16，41.21，35.22，22.11ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳22.11；CH2碳35.22；CH碳129.62，127.93，127.64，109.16，41.21ppm。HPLC8.771min。
HPLC分析條件反相分析柱。時間＝0處，95∶5 H2O∶CH3CN；經(jīng)4分鐘逐漸增至60∶40 H2O∶CH3CN。
實施例26DAAO活性的體外測量將純化的豬DAAO加入緩沖的50mM D-絲氨酸混合物中，對于每個氧化的D-絲氨酸分子都產(chǎn)生化學計量量的過氧化氫。過氧化氫的生成可以用可商購獲得的染料Amplex Red進行監(jiān)測，Amplex Red在過氧化氫存在下被轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物9-羥基-3-異吩噁唑酮。對于每種所述的抑制劑，還測量在DAAO不存在下加入80μM過氧化氫時的熒光，以為染料轉(zhuǎn)化的人為抑制提供對照，并對產(chǎn)生的過氧化氫進行定量。在另外的DAAO活性測定法中，在化合物存在下將純化的豬DAAO加入緩沖的1mM苯基甘氨酸混合物中。通過苯基甘氨酸酶促轉(zhuǎn)化為在252nm處有光吸收的苯甲酰甲酸以分光光度法監(jiān)測DAAO的活性。
將DAAO酶周期抑制劑系列稀釋以降低抑制的水平。將非線性方程的參數(shù)進行調(diào)整以擬合所得的系列抑制水平，以外推獲得50％抑制的化合物濃度(IC50)。將這些數(shù)對抑制的獨立測量(在不同的日子)的次數(shù)(n)進行平均。抑制報告于表1中。
表1化合物編號或結DAAO抑制，化合物編號或結構DAAO抑制，

化合物編號或結DAAO抑制，化合物編號或結構DAAO抑制，
化合物編號或結DAAO抑制，化合物編號或結構DAAO抑制，
化合物編號或結DAAO抑制，化合物編號或結構DAAO抑制， 從表1中可以看出，對于DAAO活性抑制大于50％的情況，以前報道的DAAO抑制劑的IC50值均大于1μM化合物。本發(fā)明的吡咯和吡唑衍生物顯示至少是如此的抑制活性，而且?guī)讉€單個的實例具有5倍或更大的活性，僅需要小于200nM的這些化合物就抑制DAAO活性的50％。
實施例27NMDA受體親和力的測量為測量本文報告的化合物對于NMDA受體上D-絲氨酸結合位點(也稱為“甘氨酸位點”或“馬錢子堿不敏感的甘氨酸位點”)的親和力，用從大鼠大腦皮層制備的膜進行放射性配體結合測定。放射性配體是[3H]MDL 105519。所述化合物顯示的放射性的量通過閃爍計數(shù)進行評價。非特異性結合在1mM甘氨酸存在下測定。從測試化合物抑制[3H]MDL 105519特異性結合的％計算親和力。
對于NMDA受體的D-絲氨酸結合位點，當在100μM下測試時，吲哚-2-羧酸將所述放射性標記化合物的特異性結合抑制77％，而下面的作為取代吡咯和吡唑?qū)嵗幕衔镲@示沒有親和力(當在100μM下測試時對[3H]MDL-105519特異性結合的抑制小于20％)
實施例28大鼠腦攝取的測量評價測試化合物穿透大鼠腦的實驗使用灌流系統(tǒng)，其中對左頸動脈進行插管，并將分支動脈結扎。將在pH7.4的磷酸鹽緩沖鹽水中的測試化合物和內(nèi)標對照一起于30秒內(nèi)灌注于左半球內(nèi)。內(nèi)標對照是阿替洛爾(腦攝取低)和安替比林(腦攝取高)。用灌流液沖洗30秒后，手術將腦取出。將左半球勻漿，將測試化合物(和內(nèi)標)從腦勻漿物中提取出來，用LC/MS/MS分析以測定腦中測試化合物和內(nèi)標對照的濃度。所選的化合物的腦攝取率表示為N為4的大鼠的pmol/g腦/秒±SD，如表2所示。
表2 實施例29腦中D-絲氨酸水平的測量哺乳動物腦中D-絲氨酸的測量表明內(nèi)源性產(chǎn)生的水平通過D-絲氨酸的降解來平衡。D-絲氨酸經(jīng)絲氨酸外消旋酶的作用從L絲氨酸產(chǎn)生，而D-絲氨酸通過DAAO的作用而代謝。由于DAAO的作用，外源給予的D-絲氨酸在腦中產(chǎn)生D-絲氨酸水平的持續(xù)短時間的升高。同樣，在本發(fā)明中顯示的DAAO抑制劑使腦中D-絲氨酸水平增加7倍。已表明外源給予D-絲氨酸具有精神分裂癥方面的臨床應用，參見Coyle，Joseph J.，Ann.N.Y Acad.Sci.，1003318-327(2003)和美國專利6,227,875、6,420,351和6,667,297。因此，測量大鼠腦中D-絲氨酸水平可用于評價DAAO抑制劑在升高D-絲氨酸水平以治療精神分裂癥方面的潛在治療作用。
腦中D-絲氨酸的體內(nèi)升高將化合物懸浮于磷酸鹽緩沖鹽水(pH7.4，含2％吐溫80)中，腹膜內(nèi)給予成年雄性Sprague Daly大鼠(年齡40-60天，Charles RiverLaboratories，Inc.)，實驗時體重為185-225g。幾小時后，經(jīng)斷頭術處死大鼠，迅速取出小腦，在-80℃下冷凍以進一步分析。腦的其余部分同樣取出并冷凍。分析當日，將腦組織在冰冷的5％三氯乙酸中以其5倍體積勻漿。將勻漿物在18000×g下離心30min。棄去沉淀物。將上清液用水飽和的乙醚洗滌三次，棄去有機層。將水層濾過孔徑為0.45μM的濾膜后，樣品就可以根據(jù)Hashimoto及其同事的方法(Hashimoto A等，J Chromatogr.，582(1-2)41-8(1992))用鄰苯二甲醛(OPA)和BOC L-Cys-OH進行衍生化。簡言之，將50mg的每種衍生化試劑溶于5ml甲醇中。將其中的200μl等分試樣加入溶于700μl硼酸鹽緩沖液(0.4M，用氫氧化鈉將pH調(diào)至9.0)中的100μl樣品中。通過將10μl等分試樣注入高效液相色譜系統(tǒng)中經(jīng)熒光法(激發(fā)波長344nm，發(fā)射波長443nm)測定D-絲氨酸水平。
本專利中的化合物實例在大鼠腦中產(chǎn)生D-絲氨酸強烈且顯著的D-絲氨酸水平升高。特別是，以兩個單獨劑量(125mg/kg，3小時后75mg/kg)給予的吡咯衍生物在第一劑量給予后6小時使小腦中D-絲氨酸水平增加4倍。
實施例30動物模型中DAAO抑制劑對神經(jīng)性疼痛的緩解(脊神經(jīng)結扎(SNL)模型)動物雄性Sprague-Dawley大鼠(HsdSprague-DawleyTMSDTM，Harlan，Indianapolis，Indiana，U.S.A.)，行為測試當天體重為232±2g，大鼠分每籠三只飼養(yǎng)。動物可以自由進食和飲水，整個研究過程中保持12∶12h照明/黑暗時間表。將動物群保持在21℃和60％濕度下。所有的實驗均按照the InternationalAssociation for the Study of Pain指南進行并得到了Animal Care andUse Committee的批準。
慢性神經(jīng)性疼痛的誘導使用脊神經(jīng)結扎(SNL)模型(Kim andChung，1992)誘導慢性神經(jīng)性疼痛。用異氟烷將動物麻醉，切除L5左橫突，將L5和L6脊神經(jīng)用6-0絲縫線緊緊結扎。然后通過內(nèi)部縫線和外部U形釘(staple)閉合傷口。手術后10-11天除去U形釘。
機械性異常疼痛測試根據(jù)up-down方法(Chaplan等，1994)使用8種不同硬度(0.4、0.7、1.2、2.0、3.6、5.5、8.5和15g)的Semmes-Weinstein絲(Stoelting，Wood Dale，IL，USA)對無害機械敏感性的基線、損傷后以及治療后值進行評價。將動物置于有孔的金屬平臺上，測試開始前給它們最少30分鐘的時間熟悉環(huán)境。對每個治療組中每只動物都測定均值和平均標準誤(SEM)。由于通常認為這一刺激不是疼痛，因此將在這一項測試中損傷誘發(fā)的顯著性反應增強解釋為機械性異常疼痛的量度。
實驗組

流程4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(39)和(載體)
(1)von Frey測試(基線)(2)0分鐘給藥(3)120分鐘von Frey測試(4)240分鐘von Frey測試(5)360分鐘von Frey測試(6)480分鐘von Frey測試(7)495分鐘，采集血漿盲法由不參與進行行為測試的單獨實驗者給藥。該盲性直至研究結束才破盲。
數(shù)據(jù)分析用Prism 4.01(GraphPad，San Diego，CA，USA)進行統(tǒng)計學分析。損傷足的機械超敏性由載體組內(nèi)的對側足值與同側足值的比較來確定。用Mann-Whitney檢驗分析數(shù)據(jù)。載體組損傷足值隨時間的穩(wěn)定性用Friedman雙因素方差分析進行秩檢驗。每個時間點的藥物作用通過Kruskal-Wallis單因素方差分析進行秩檢驗，然后進行Dunn′s post hoc檢驗或Mann-Whitney符號秩檢驗來分析。
結果4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸使機械性異常疼痛相當大的降低，在240分鐘和360分鐘時具有統(tǒng)計學上的顯著性。最大作用為給藥后360分鐘時。
參考文獻Chaplan SR，Bach FW，Pogrel JW，Chung JM和Yaksh TL(1994)Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.J NeurosciMethods 5355-63.
Kim SH和Chung JM(1992)An experimental model for peripheralneuropathy produced by segmental spinal nerve ligation in the rat.Pain50355-63.
實施例31劑型不含乳糖的片劑劑型表3提供式I的化合物的不含乳糖的片劑劑型的成分

*水在制備過程中蒸發(fā)。
將活性成分與纖維素混合至形成均一混合物。將較少量玉米淀粉與適當量的水混合形成玉米淀粉糊。然后將其與所述均一混合物混合至形成均一濕料。將剩余的玉米淀粉加入所得的濕料中，并混合至得到均一的顆粒。然后將顆粒篩過合適的碾磨機，使用1/4英寸的不銹鋼篩。然后將碾磨的顆粒在合適的干燥烘箱中干燥直至獲得期望的水分含量。然后將干燥的顆粒篩過合適的碾磨機，使用1/4目的不銹鋼篩。然后摻入硬脂酸鎂，并將所得混合物壓制成為期望的形狀、厚度、硬度和崩解度的片劑。用標準的水成或非水成技術將片劑包衣。
片劑劑型另一適用于本發(fā)明的活性成分的片劑制劑在表4中提供。

將活性成分過篩并與纖維素、淀粉和預膠化玉米淀粉混合。加入適當量的純水，將粉末制粒。干燥后，將顆粒過篩并與硬脂酸鎂混合。然后用沖頭將顆粒壓制為片劑。
通過改變活性成分與藥學可接受的載體的比例、壓制重量或通過使用不同的沖頭可以制備其它強度的片劑。
實施例32. 4-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(87)的合成

(甲苯-4-磺酰氨基)-乙酸乙酯(81)的合成將甲苯磺酰氯(14.75g，77.37mmol)加入甘氨酸乙酯鹽酸鹽(9.0g，64.48mmol)和吡啶(11.45mL，141.85mmol)在100mL二氯甲烷中的攪拌混合物中。攪拌過夜后，用水和稀氫氧化鈉洗滌混合物。將合并的有機層用硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，得到16.0g(96％)81，不經(jīng)純化而用于下一反應中。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.18(t，3H)，2.42(s，3H)，3.76(d，2H)，4.08(q，2H)，5.22(m，1H)，7.30(d，2H)，7.75(d，2H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ13.99，21.55，44.19，61.89，127.28，129.76，136.20，143.81，168.87ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳13.99，21.55；CH2碳44.19，61.89；CH碳127.28，129.76ppm。LC/MS95％，m/z＝257。
3-羥基-3-甲基-1-(甲苯-4-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸乙酯(82)的合成將1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]-十一-7-烯(DBU)(7mL，47.08mmol)加入乙基乙烯酮(1.75mL，21.4mmol)和N-p-甲苯磺?；拾彼嵋阴?1(5.5g，21.4mL)在THF(50mL)中的攪拌溶液中。將所得溶液在室溫下攪拌過夜。用乙醚稀釋混合物，用5％aq.HCl、5％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。將合并的有機層用硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物82(5.3g，76％)，為黃色油狀物(非對映體混合物)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.29(m，6H)，1.75(m，1H)，2.09(m，1H)，2.43(s，3H)，3.40(m，1H)，3.56(m，1H)，4.04(s，1H)，4.20(m，2H)，7.30(d，2H)，7.75(d，2H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ14.12，15.28，23.04，25.60，26.27，38.20，38.86，46.26，46.46，61.49，61.65，69.10，71.69，127.51，129.70，134.83，134.91，143.58，143.84，170.03，170.45ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳14.12，15.28，23.04，25.60，26.27；CH2碳38.20，38.86，46.26，46.46，61.49，61.65；CH碳69.10，71.69，127.51，129.70ppm。
LC/MS97.60％，m/z＝327。
3-甲基-1-(甲苯-4-磺?；?-2，5-二氫-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(83)的合成將吡咯烷油狀物82(10.5g，32.11mmol)溶于吡啶(86mL)中。逐滴加入POCl3(7.48mL，80.27mmol)，并將所得混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物傾倒在冰上，用乙醚萃取，并用5％aq.HCl、5％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。將乙醚層用硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，得到粗固體83(8.80g，88％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.28(t，3H)，1.69(m，3H)，2.43(s，3H)，4.10(m，1H)，4.20(q，2H)，4.21(m，1H)，7.31(d，2H)，7.75(d，2H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ13.58，14.10，21.56，54.64，61.62，70.55，110.02，122.51，127.51，129.73，169.87ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳13.58，14.10，21.56；CH2碳54.64，61.62；CH碳70.55，122.51，127.51，129.73ppm.LC/MS100％，m/z＝309。
3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(84)的合成將吡咯啉83(8.80g，28.48mmol)溶于THF(70mL)中。逐滴加入DBU(9.78mL，65.50mmol)，將所得溶液回流下攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫，用乙醚稀釋混合物，用5％aq.HCl、5％碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。有機層用硫酸鈉干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，到粗固體(4.30g，98％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.37(t，3H)，2.35(s，3H)，4.31(q，2H)，6.08(d，1H)，6.81(d，1H)，8.90(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ12.76，14.53，59.96，112.58，119.35，121.53，127.96，162.01ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳12.76，14.53；CH2碳59.96；CH碳112.58，121.53ppm。LC/MS90.74％，m/z＝153。
4-[2-(4-氯-苯基)-乙酰基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(85)的合成將(4-氯苯基)-乙酰氯(3mmol)在二氯甲烷或1，2-二氯乙烷(4mL)中的溶液加入在-40℃下冷卻的84(0.229g，1.5mmol)溶液中，加入AlCl3(0.400g，3mmol)。將反應混合物在相一溫度下攪拌30min。將反應混合物傾入冰水中，用乙酸乙酯萃取。有機層用NaOH(2M)和鹽水萃取，用硫酸鈉干燥，真空蒸發(fā)至干，得到粗產(chǎn)物85。粗收率96％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.37(t，3H)，2.60(s，3H)，4.00(s，2H)，4.35(q，2H)，7.27(m，4H)，7.49(d，1H)，8.83(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ11.81，14.38，46.52，60.94，121.65，124.57，127.46，128.81，130.81，133.54，162.13，193.36ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳11.81，14.38；CH2碳46.52，60.94；CH碳121.65，128.81，130.81ppm。LC/MS90.32％，m/z＝305。
4-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(86)的合成將三乙基硅烷(3當量)加入85在三氟乙酸(2mL/mmol)中的溶液中。將混合物在室溫下攪拌48小時。真空除去TFA，用AcOEt吸收粗產(chǎn)物，用NaOH(2M)、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。殘余物經(jīng)HPLC純化。收率兩步46％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.35(t，3H)，2.26(s，3H)，2.69(m，2H)，2.78(m，2H)，4.31(q，2H)，6.55(d，1H)，7.08(d，2H)，7.22(d，2H)，8.86(s寬，1H)ppm。
4-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(87)的合成在室溫將新制的aq.NaOH(1M，在水中，10當量)加入86(1當量)在1，4-二噁烷和水(v/v 3∶1)的混合物中的攪拌溶液中。將反應物加熱至80℃，直至經(jīng)TLC判斷反應完全為止。用Et2O萃取產(chǎn)物，逐滴加入10％aq.HCl將水層酸化(pH＝1)。濾出固體，用水洗滌。固體真空干燥過夜，得到87。收率66％。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ2.19(s，3H)，2.69(m，2H)，2.78(m，2H)，6.58(d，1H)，7.11(d，2H)，7.22(d，2H)ppm。LC/MS100％，m/z＝263。HPLC(200-400nm)95.93％。
實施例33. 4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(90)的合成 4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙酰基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(88)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(84)合成4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(88)。粗收率97％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.61(s，3H)，3.79(s，3H)，3.97(s，2H)，4.33(q，2H)，6.50(d，2H)，7.16(d，2H)，7.46(d，1H)，9.27(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ11.75，14.41，46.60，55.27，60.68，114.07，127.09，130.43，158.45，194.19ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳11.75，14.41，55.27；CH2碳46.60，60.68；CH碳114.07，127.09，130.43ppm。LC/MS76.86％，m/z＝301。
4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(89)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(88)合成4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(89)。收率23％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.27(s，3H)，2.69(m，2H)，2.76(m，2H)，3.79(s，3H)，4.31(q，2H)，6.59(d，1H)，6.82(m，2H)，7.08(m，2H)，8.70(s寬，1H)ppm。
13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.23，14.56，27.34，35.78，55.27，59.85，113.70，119.69，129.35，134.14，157.81ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.23，14.56，55.27；CH2碳27.34，35.78，59.85；CH碳113.70，119.69，129.35，134.14ppm。LC/MS100％，m/z＝287。
4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(93)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(92)合成4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(93)。收率66％。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ2.19(s，3H)，2.65(m，2H)，2.72(m，2H)，3.75(s，3H)，6.59(d，1H)，6.79(m，2H)，7.04(m，2H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.46，28.51，37.32，55.62，114.64，121.89，125.45，127.46，130.44，135.54，165.07ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.46，55.62；CH2碳28.51，37.32；CH碳114.64，121.89，130.44ppm。LC/MS100％，m/z＝259。HPLC(200-400nm)94.17％。
實施例34. 4-[2-(3-甲氧基苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(90)的合成 4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(91)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(84)和(3-甲氧基苯基)-乙酰氯合成4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(91)。粗收率95％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.61(s，3H)，3.77(s，3H)，3.99(s，2H)，4.32(q，2H)，6.81(m，3H)，7.24(m，1H)，7.45(d，1H)，9.41(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ11.75，14.40，47.59，55.19，60.66，112.19，115.04，121.71，127.22，129.58，136.75，159.75，193.65ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳11.75，14.40，55.19；CH2碳47.59，60.66；CH碳112.19，115.04，121.71，127.22，129.58ppm。LC/MS60.20％，m/z＝301。
4-[2-(3-甲氧基苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(92)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(3-甲氧基苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(91)合成4-[2-(3-甲氧基苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(92)。收率18％。1H-NMR(400MHz CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.28(s，3H)，2.72(m，2H)，2.79(m，2H)，3.79(s，3H)，4.31(q，2H)，6.61(d，1H)，6.67(m，3H)，7.20(m，1H)，8.72(s寬，1H)ppm。
13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.24，14.56，26.99，36.73，55.16，59.87，111.11，114.27，119.65，120.89，129.28，159.04ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.24，14.56，55.16；CH2碳26.99，36.73，59.87；CH碳111.11，114.27，119.65，120.89，129.28ppm。LC/MS100％，m/z＝287。
4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(93)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(3-甲氧基苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(92)合成4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(93)。收率57％。1H-NMR(400MHz，CD3OD)δ2.20(s，3H)，2.70(m，2H)，2.76(m，2H)，3.73(s，3H)，6.61(d，1H)，6.72(m，3H)，7.13(m，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.48，28.18，38.25，55.51，112.30，115.17，121.95，125.37，130.18，145.05，161.10ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.48，55.51；CH2碳28.18，38.25；CH碳112.30，115.17，121.95，130.18ppm。LC/MS93.45％，m/z＝259。HPLC(200-400nm)69.03％。
實施例35. 4-[2-(4-氟-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(96)的合成
4-[2-(4-氟苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(94)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(84)和(4-氟苯基)-乙酰氯合成4-[2-(4-氟苯基)-乙酰基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(94)。[MLG-INCOMP.SENTENCE？]粗收率94％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.61(s，3H)，4.01(s，2H)，4.35(q，2H)，7.01(m，2H)，7.22(m，2H)，7.50(d，1H)，9.70(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ11.79，14.38，46.36，60.89，115.51，127.27，129.93，130.77，162.04，193.62ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳11.79，14.38；CH2碳46.36，60.89；CH碳115.51，127.27，129.93，130.77ppm。LC/MS77.48％，m/z＝289。
4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(95)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(4-氟苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(94)合成4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(95)。收率23％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.26(s，3H)，2.69(m，2H)，2.78(m，2H)，4.31(q，2H)，6.57(d，1H)，6.95(m，2H)，7.10(m，2H)，8.70(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.21，14.55，27.20，35.90，59.89，114.89，115.10，119.70，124.60，129.77，137.58，160.00ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.21，14.55；CH2碳27.20，35.90，59.89；CH碳121.65，128.81，130.81ppm。LC/MS100％，m/z＝275。
4-[2-(4-氟-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(96)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(95)合成4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(96)。收率22％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.19(s，3H)，2.68(m，2H)，2.77(m，2H)，6.58(d，1H)，6.95(m，2H)，7.12(m，2H)ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.43；CH2碳28.32，37.31；CH碳115.61，121.90，131.11ppm。LC/MS100％，m/z＝247。HPLC(200-400nm)98.44％。
實施例36. 4-[2-(3-氟苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(99)的合成 4-[2-(3-氟苯基)-乙酰基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(97)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(84)和(3-氟苯基)-乙酰氯合成4-[2-(3-氟苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯。粗收率93％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.37(t，3H)，2.61(s，3H)，4.03(s，2H)，4.35(q，2H)，7.00(m，3H)，7.27(m，1H)，7.49(d，1H)，9.57(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ11.76，14.38，46.93，60.84，113.64，116.30，125.13，127.17，129.94，137.42，161.64，193.02ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳11.76，14.38；CH2碳46.93，60.84；CH碳116.30，125.13，127.17，129.94ppm。LC/MS91.29％，m/z＝289。
4-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(98)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(3-氟苯基)-乙?；鵠-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(98)合成4-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(98)。收率27％。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.27(s，3H)，2.72(m，2H)，2.81(m，2H)，4.31(q，2H)，6.59(d，1H)，6.88(m，3H)，7.22(m，1H)，8.79(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.22，14.55，26.80，36.43，59.93，112.64，115.18，119.72，124.16，129.72，144.51，161.65ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.22，14.55；CH2碳26.80，36.43，59.93；CH碳112.64，115.18，119.72，124.16，129.72ppm。LC/MS100％，m/z＝275。
4-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(99)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(3-氟苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(98)合成4-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(99)。收率55％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.20(s，3H)，2.69(m，2H)，2.81(m，2H)，6.61(d，1H)，6.87(m，2H)，6.95(m，1H)，7.24(m，1H)ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.43；CH2碳27.95，37.84；CH碳113.53，116.27，121.87，125.48，130.79ppm。LC/MS100％，m/z＝247。HPLC(200-400nm)80.81％。
實施例37. 3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(93)的合成 3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(100)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(84)和(4-三氟甲基苯基)-乙酰氯合成3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(100)。粗收率96％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.38(t，3H)，2.61(s，3H)，4.11(s，2H)，4.35(q，2H)，7.37(m，2H)，7.51(d，1H)，7.58(m，2H)，9.29(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ11.71，14.41，46.90，60.78，123.70，124.70，125.49，126.75，129.41，129.85，130.00，161.98，193.49ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳11.71，14.41；CH碳46.90，60.78；CH碳123.70，124.70，125.49，126.75，129.41，129.85，130.00ppm。LC/MS73.23％，m/z＝339。
3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(101)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(10)合成3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(101)。收率22％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.27(s，3H)，2.73(m，2H)，2.87(m，2H)，4.31(q，2H)，6.56(d，1H)，7.26(m，2H)，7.52(m，2H)，8.72(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.21，14.54，26.78，36.51，59.95，119.70，124.23，125.18，128.81，161.68ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.21，14.54；CH2碳26.78，36.51，59.95；CH碳119.70，124.23，125.18，128.81ppm。
LC/MS100％，m/z＝325。
3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(102)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(101)合成3-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(102)。收率60％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.20(s，3H)，2.73(m，2H)，2.89(m，2H)，6.59(d，1H)，7.32(m，2H)，7.54(m，2H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.42，27.84，37.90，120.14，121.92，124.74，126.04，127.37，130.26，148.11，164.99ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.42；CH2碳27.84，37.90；CH碳121.92，126.04，130.27ppm。LC/MS100％，m/z＝297。HPLC(200-400nm)94.63％。
實施例38. 3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(96)的合成 3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(105)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(84)和(3-三氟甲基苯基)-乙酰氯合成3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(103)。粗收率97％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.38(t，3H)，2.62(s，3H)，4.11(s，2H)，4.35(q，2H)，7.45(m，2H)，7.51(m，3H)，9.40(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ11.73，14.40，46.73，60.78，123.70，124.70，126.82，128.93，129.71，133.01，135.85，161.61，192.58ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳11.73，14.40；CH2碳46.73，60.78；CH碳123.70，126.82，128.93，129.71，133.01ppm。LC/MS79.18％，m/z＝339。
3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(104)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(103)合成3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(104)。收率16％。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.36(t，3H)，2.26(s，3H)，2.74(m，2H)，2.87(m，2H)，4.31(q，2H)，6.58(d，1H)，7.38(m，4H)，8.72(s寬，1H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.20，14.54，26.87，35.56，59.93，119.67，122.77，124.25，125.16，128.67，131.95，142.77ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.20，14.54；CH2碳26.87，35.56，59.93；CH碳119.67，122.77，125.16，128.67，131.95ppm。LC/MS100％，m/z＝325。
3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(105)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(104)合成3-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(105)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ2.18(s，3H)，2.73(m，2H)，2.89(m，2H)，6.60(d，1H)，7.42(m，4H)ppm。13C-NMR(100MHz，CDCl3)δ10.39，27.93，37.87，121.93，123.57，124.69，126.22，127.40，129.94，133.52，144.72，165.01ppm。DEPT(100MHz，CDCl3)CH3碳10.39；CH2碳27.93，37.87；CH碳121.93，123.57，126.22，129.94，133.52ppm。LC/MS100％，m/z＝297。HPLC(200-400nm)96.89％。
實施例39. 4-2-(4-氯苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(110)的合成 5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)的合成將在水(20ml)中的亞硝酸鈉(11.5g；0.160mol)逐滴加入乙酰乙酸乙酯(20.7g；0.159mol)在乙酸(20ml)中的冰冷的攪拌溶液中。將反應溫度維持在低于10℃。將混合物在5℃下再攪拌1小時，在0℃儲存過夜，得到肟97，為橙紅色溶液。將該溶液加入預先暖至60℃的乙酰乙醛二甲基縮醛(21g；0.159mol)和冰乙酸(35ml)的混合物中，同時緩慢加入鋅粉(30g；0.459mol)和乙酸鈉(30g；0.364mol)的混合物。加入完畢后，將混合物再攪拌2小時。將混合物傾入冰水(300mL)中，得到黃色沉淀。過濾并從甲醇/水中重結晶，得到3.5g(27％)5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)，為米色針狀物。1H(CDCl3，400MHz)δ9.10(NH，寬s)，6.82(1H，d)，5.95(1H，s)，4.29(2H，q)，2.31(3H，s)，1.35(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.5，134.1，121.2，116.1，101.8，60.1，15.5，13.1ppm。LC/MS97％。
4-[2-(4-氯苯基)-乙酰基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(108)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和(4-氯苯基)-乙酰氯合成4-[2-(4-氯苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(108)。反應條件1，2-二氯乙烷/室溫。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率83％。1H(CDCl3，400MHz)δ9.65(NH，寬s)，7.28(3H，m)，7.2(2H，d)，4.35(2H，q)，4.04(2H，s)，2.57(3H，s)，1.38(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ193.7，161.5，141.0，133.5，132.6，130.9，130.7，128.9，128.6，121.4，120.5，116.9，61.0，46.1，14.4，14.0ppm。LC/MS100％。
4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-5-甲基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(109)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(4-氯苯基)-乙酰基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(108)合成4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(109)。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率82％。1H(CDCl3，400MHz)δ9.65(NH，寬s)，7.20(2H，d)，7.04(2H，d)，6.72(1H，s)，4.29(2H，q)，2.78(2H，dd)，2.64(2H，dd)，2.04(3H，s)，1.35(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.6，140.4，131.5，131.2，129.9，128.3，121.3，119.8，115.7，60.1，36.7，27.8 14.5，11.O ppm。LC/MS96％。
4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(110)的合成向4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(109)在二噁烷中的溶液中加入10當量NaOH aq(1.5M)，然后將混合物在80℃下加熱3小時。當判斷反應完全時，真空除去溶劑，加入水和等體積的Et2O。然后除去有機層，用HCl(1M)將水層酸化。如果產(chǎn)物此時沉淀出，則濾出，用水洗滌并干燥，得到純的期望產(chǎn)物。如果當水層被酸化時產(chǎn)物未析出，則加入Et2O，移去有機層(2x)。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并濃縮，得到期望的產(chǎn)物。純化沉淀。量20.6mg。1H(MeOD，400MHz)δ7.2(2H，dd)，7.08(2H，dd)，6.59(1H，s)，2.76(2H，dd)，2.63(2H，dd)，1.97(3H，s)ppm。DEPT(CD3OD，100 MHz)CH3δ10.8，CH2δ28.9，38.0，CH116.4，129.1，131.3ppm。HPLC(20分鐘)97.8％。LC/MS100％。
實施例40. 4-[2-(4-氟-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(113)的合成 4-[2-(4-氟苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(111)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和(4-氟苯基)-乙酰氯合成4-[2-(4-氟苯基)-乙酰基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(111)。反應條件1，2-二氯乙烷/室溫。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率76％。1H(CDCl3，400MHz)δ10.5(NH，寬s)，7.31(1H，s)，7.22(2H，dd)，6.99(2H，dd)，4.36(2H，q)，4.06(2H，s)，2.58(3H，s)，1.39(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ194.1，163.0，161.5，160.6，141.0，131.1，130.7，121.5，120.5，116.9，115.4，115.2，61.0，45.9，14.4，14.0ppm。LC/MS100％。
4-[2-(4-氟-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(112)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(4-氟-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(111)合成4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(112)。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率86％。1H(CDCl3，400MHz)δ9.45(NH，寬s)，7.06(2H，m)，6.94(2H，m)，6.72(1H，s)，4.29(2H，q)，2.78(2H，dd)，2.64(2H，dd)，2.03(3H，s)，1.34(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ162.5，160.1，137.6，131.1，129.9，121.4，119.8，115.7，115.0，60.0，36.5，28.0 14.5，11.0ppm。LC/MS100％。
4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(113)的合成根據(jù)實施例39中所述方法從4-[2-(4-氟-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(112)合成4-[2-(4-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(113)。純化沉淀。量21.5mg。1H(CD3OD，400MHz)δ7.10(2H，dd)，6.94(2H，dd)，6.60(1H，s)，2.77(2H，dd)，2.64(2H，dd)，1.97(3H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ166.0，161.5，139.4，131.5，131.3，131.2，122.5，121.9，116.6，115.8，115.5，37.8，29.1，10.8ppm。HPLC(20分鐘)96.6％。LC/MS100％。
實施例41. 4-[2-(3-氟-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(116)的合成
4-[2-(3-氟-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(114)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和(3-氟苯基)-乙酰氯合成4-[2-(3-氟苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(114)。反應條件1，2-二氯乙烷/室溫。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率78％。1H(CDCl3，400MHz)δ10.6(NH，寬s)，7.30(1H，s)，7.26(1H，dd)，7.04(1H，d)，6.99(1H，d)，6.92(1H，dd)，4.37(2H，q)，4.07(2H，s)，2.58(3H，s)，1.39(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ193.5，164.0，161.6，141.0，137.4，130.0，125.3，121.5，120.5，116.9，116.4，113.7，61.0，46.4，14.4，14.0ppm。LC/MS98％。
4-[2-(3-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(115)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(3-氟-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(114)合成4-[2-(3-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(115)。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率79％。1H(CDCl3，400MHz)δ9.55(NH，寬s)，7.19(1H，m)，6.86(3H，m)，6.72(1H，s)，4.29(2H，q)，2.80(2H，dd)，2.66(2H，dd)，2.07(3H，s)，1.34(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ164.1，161.6，144.6，131.1，129.7，124.2，121.3，119.8，115.6，115.2，112.6，60.1，37.1，27.6，14.5，11.0ppm。LC/MS93％。
4-[2-(3-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(116)的合成根據(jù)實施例39中所述方法從4-[2-(3-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(116)合成4-[2-(3-氟苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(117)。純化萃取。量10mg。1H(MeOD，400MHz)δ7.23(1H，m)，6.94(1H，d)，6.84(2H，m)，6.65(1H，s)，2.79(2H，dd)，2.66(2H，dd)，2.0(3H，s)ppm。DEPT(MeOD，100MHz)CH3δ10.8，CH28 28.7，38.3，CH113.3，116.3，117.4，125.5，130.7ppm。HPLC(20mn)96.4％。LC/MS94％。
實施例42. 5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(119)的合成 5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(117)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和(4-三氟甲基苯基)-乙酰氯合成5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(117)。反應條件1，2-二氯乙烷/-40℃。純化制備/HPLC。收率33％。1H(CDCl3，400MHz)δ10.5(NH，寬s)，7.56(2H，d)，7.34(2H，d)，7.32(1H，s)，4.37(2H，q)，4.15(2H，s)，2.59(3H，s)，1.38(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ193.3，161.5，141.0，139.0，130.9，125.5，128.6，121.4，120.6，114.0 61.0，46.5，14.5，14.0ppm。LC/MS98％。
5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(118)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(117)合成5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(118)。純化制備/HPLC。收率50％。1H(CDCl3，400MHz)δ9.35(NH，寬s)，7.50(2H，d7.23(2H，d)，6.72(1H，s)，4.29(2H，q)，2.85(2H，dd)，2.66(2H，dd)，2.03(3H，s)，1.34(3H，t)ppm。HPLC100％。
5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(119)的合成根據(jù)實施例39中所述方法從5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(118)合成5-甲基-4-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(119)。純化萃取。量11.6mg。1H(CDCl3，400MHz)δ9.15(NH，.寬s)，7.50(2H，d)，7.24(2H，d)，6.86(1H，s)，2.89(2H，dd)，2.68(2H，dd)，2.04(3H，s)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ165.7，145.9，132.5，128.4，128.13，125.2，122.0，118.8，117.9，37.0，27.5，11.2ppm。HPLC(20分鐘)94.5％。LC/MS97％。
實施例43. 5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(122)的合成 5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(120)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和(3-三氟甲基苯基)-乙酰氯合成5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(120)。反應條件1，2-二氯乙烷/-40℃。純化制備/HPLC。收率16％。1H(CDCl3，400MHz)δ10.7(NH，寬s)，7.48(4H，m)，7.34(1H，s)，4.37(2H，q)，4.15(2H，s)，2.59(3H，s)，1.39(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ193.3，161.6，141.2，136.0，133.2，131.2，128.8，128.2，126.4，123.6，121.4，120.6，116.9，61.0，46.3，14.3，13.9ppm。LC/MS100％。
5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(121)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(120)合成5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(121)。純化制備/HPLC。1H(CDCl3，400MHz)δ9.25(NH，寬s)，7.4(4H，m)，6.72(1H，s)，4.30(2H，q)，2.87(2H，dd)，2.68(2H，dd)，2.03(3H，s)，1.35(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.5，142.8，132.0，130.9，130.7，130.4，128.7，125.2，122.7，121.0，120.0，115.6，60.1，37.2，27.7，14.5，11.0ppm。LC/MS94％。
5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(122)的合成根據(jù)實施例39中所述方法從5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(121)合成5-甲基-4-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(122)。純化萃取。量9.5mg。1H(CD3OD，400MHz)δ7.4(4H，m)，6.65(1H，s)，2.87(2H，dd)，2.69(2H，dd)，1.95(3H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.5，144.7，133.6，132.6，131.3，129.9，126.3，123.6，121.8，121.0，117.4，38.3，28.7，10.7ppm。HPLC(20分鐘)95.6％。LC/MS100％。
實施例44. 4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(125)的合成 4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(123)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和(4-甲氧基苯基)-乙酰氯合成4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(123)。反應條件1，2-二氯乙烷/-40℃。純化制備/HPLC。收率72％。1H(CDCl3，400MHz)δ10.45(NH，寬s)，7.31(1H，s)，7.18(2H，d)，6.84(2H，d)，4.37(2H，q)，4.01(2H，s)，3.74(3H，s)，2.57(3H，s)，1.38(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ194.7，161.5，158.4，140.8，130.5，127.1，121.6，120.4，117.1，114.0，60.8，55.2，46.0，14.4，14.0ppm。LC/MS100％。
4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(124)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(123)合成4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(124)。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率75％。1H(CDCl3，400MHz)δ9.0(NH，寬s)，7.05(2H，d)，6.82(2H，d)，6.74(1H，s)，4.29(2H，q)，3.78(3H，s)，2.75(2H，dd)，2.64(2H，dd)，2.05(3H，s)，1.34(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ158.8，135.2，131.7，130.4，122.9，120.8，116.6，114.7，63.0，61.0，56.3，37.4，29.2，15.5，12.2ppm。
4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(125)的合成根據(jù)實施例39中所述方法從4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(124)合成4-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(125)。純化沉淀。量27.4mg。1H(CD3OD，400MHz)δ7.01(2H，dd)，6.78(2H，dd)，6.64(1H，s)，3.30(3H，s)，2.71(2H，dd)，2.62(2H，dd)，1.98(3H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ159.3，135.5，132.7，130.5，122.7，120.7，117.5，114.6，55.6，37.8，29.3，10.8ppm。HPLC(20分鐘)95.6％。LC/MS100％。
實施例45. 4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(128)的合成
4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(126)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和(3-甲氧基苯基)-乙酰氯合成4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙酰基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(126)。反應條件1，2-二氯乙烷/-40℃。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率50％。1H(CDCl3，400MHz)δ10.80(NH，寬s)，7.32(1H，s)，7.18(1H，dd)，6.85(1H，d)，6.83(1H，s)，6.75(1H，d)，4.33(2H，q)，4.04(2H，s)，3.74(3H，s)，2.55(3H，s)，1.36(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ194.3，161.5，159.7，141.1，136.7，129.4，121.9，121.6，120.4，117.2，115.2，112.1，60.8，55.1，47.0，14.4，13.9ppm。LC/MS100％。
4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(127)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙?；鵠-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(126)合成4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(127)。純化從乙醚/戊烷中重結晶。收率82％。1H(CDCl3，400MHz)δ9.40(NH，寬s)，6.74(4H，m)，4.30(2H，q)，3.77(3H，s)，2.78(2H，dd)，2.67(2H，dd)，2.08(3H，s)，1.34(3H，t)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ161.5，159.6，143.7，131.0，129.3，121.8，121.0，119.8，115.7，114.3，111.2，60.0，55.2，37.4，27.9，14.5，11.1ppm。LC/MS93％。
4-[2-(3-甲氧基苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸(128)的合成向4-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(127)在EtOH中的溶液中，加入3當量aq.NaOH(3M)，然后將混合物在80℃下加熱1小時。當判斷反應完全時，真空除去溶劑，加入水和等體積的乙醚。移去有機層，用HCl(1M)將水層酸化。如果產(chǎn)物此時沉淀出，則濾出，用水洗滌并干燥，得到純的期望產(chǎn)物。如果當使水層酸化時產(chǎn)物未析出，則加入乙醚，并移去有機層(2x)。用硫酸鈉干燥有機層，過濾并濃縮，得到期望的產(chǎn)物。純化萃取。量37mg。1H(CDCl3，400MHz)δ8.90(NH，寬s)，7.19(1H，dd)，6.88(1H，s)，6.75(2H，m)，6.94(1H，s)，3.78(3H，s)，2.80(2H，dd)，2.68(2H，dd)，2.08(3H，s)ppm。13C(CDCl3，100MHz)δ165.5，159.6，143.5，132.3，129.3，122.6，121.0，118.7，117.8，114.2，111.2，55.2，37.3，27.8，11.3ppm。HPLC(20分鐘)91.6％。LC/MS97％。
實施例46. 5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(131)的合成 5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(129)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)合成5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(129)。反應條件1，2-二氯乙烷/-40℃。純化制備/HPLC。收率52％。LC/MS62％。
5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(130)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(129)合成5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(130)。純化未純化。
5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(131)的合成
根據(jù)實施例45中所述方法從5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(130)合成5-甲基-4-(2-萘-1-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(131)。純化制備/HPLC。量5.2mg。1H(CD3OD，400MHz)δ8.06(1H，d)，7.82(1H，d)，7.67(1H，d)，7.45(2H，m)，7.31(1H，dd)，7.18(1H，d)，6.72(1H，s)，3.24(2H，dd)，2.76(2H，dd)，1.84(3H，s)ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3δ10.8，CH2δ28.4，35.9，CH116.8，124.8，126.4，126.5，126.7，127.4，127.6，129.8ppm。HPLC(20分鐘)98.6％。LC/MS100％。
實施例47. 5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(134)的合成 5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙烯酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(132)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和3-萘-2-基-丙烯酰氯合成5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙烯?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(132)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。LC/MS40％。
5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(133)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙烯?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(132)合成5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(133)。將132還原得到羰基和雙鍵的還原產(chǎn)物。純化未純化。收率LC/MS，100％。
5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙基-1H-吡咯-2-羧酸(134)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(133)合成5-甲基-4-(3-萘-2-基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(134)。純化萃取和制備/HPLC。量20mg。1H(CDCl3，400MHz)δ8.95(NH，寬s)，7.77(3H，m)，7.60(1H，s)，7.42(2H，m)，7.32(1H，d)，6.89(1H，s)，2.80(2H，m)，2.46(2H，m)，2.18(3H，s)，1.96(2H，m)ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3δ11.6，CH2δ25.2，32.0，35.5，CH117.9，125.0，125.9，126.4，127.4，127.6，127.7，127.8ppm。HPLC(20分鐘)88.4％。LC/MS94％。
實施例48. 5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(137)的合成 5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(135)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和萘-2-基-乙酰氯合成5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(135)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃。純化未純化。LC/MS80％。
5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(136)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(135)合成5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(136)。純化未純化。
5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(137)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(136)合成5-甲基-4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(137)。純化制備HPLC。量12.6mg。1H(CD3OD，400MHz)δ7.77(1H，d)，7.73(2H，m)，7.54(1H，s)，7.38(2H，m)，7.28(1H，dd)，6.68(1H，s)，2.95(2H，dd)，2.74(2H，dd)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ165.8，141.04，135.15，133.6，131.9，128.7，128.6，128.5，128.4，127.6，126.7，126.1，122.3，122.0，116.9，38.8，29.0，10.9ppm。HPLC(20分鐘)99.0％。LC/MS100％。
實施例49. 5-甲基-4-(2-苯基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(140)的合成 5-甲基-4-(2-苯基-丙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(138)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(107)和2-苯基-丙酰氯合成5-甲基-4-(2-苯基-丙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(138)。純化未純化。LC/MS86％。
5-甲基-4-(2-苯基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(139)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從5-甲基-4-(2-苯基-丙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(138)合成5-甲基-4-(2-苯基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(139)。純化未純化。
5-甲基-4-(2-苯基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(140)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從5-甲基-4-(2-苯基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(139)合成5-甲基-4-(2-苯基-丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(140)。純化制備HPLC。量13mg。1H(CDCl3，400MHz)δ8.7(NH，.寬s)，7.27(3H，m)，7.18(2H，m)，6.77(1H，s)，2.90(1H，m)，2.62(2H，m)，1.97(3H，s)，1.27(3H，d)ppm。DEPT(CDCl3，100MHz)CH3δ11.3，20.9CH2δ35.0，CH41.4，118.6，126.0，127.1，128.3ppm。HPLC(20分鐘)93.1％。LC/MS96％。
實施例50. 4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(128)的合成 4-(2-萘-2-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(141)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和萘-2-基-乙酰氯合成4-(2-萘-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(141)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。LC/MS78％。
4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(142)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-萘-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(141)合成4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(142)。純化未純化。
4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(143)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(142)合成4-(2-萘-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(143)。純化硅膠色譜法(洗脫劑二氯甲烷→AcOEt)。1H(MeOD，400MHz)δ7.77(3H，m)，7.61(1H，s)，7.54(1H，s)，7.38(3H，m)，7.34(1H，s)，6.68(1H，s)，3.01(2H，dd)，2.86(2H，dd)ppm。DEPT(MeOD，100MHz)CH2δ29.8，38.9，CH116.4，122.7，126.1，126.8，127.5，128.4，128.5，128.6，128.7ppm。HPLC(20mn)96.9％LC/MS100％。
實施例51. 4-(2-[4-溴苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(146)的合成
4-(2-[4-溴苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(144)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和4-溴苯基-2-基-乙酰氯合成4-(2-[4-溴苯基]-2-基-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(144)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[4-溴苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(145)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[4-溴苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(144)合成4-(2-[4-溴苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(145)。純化未純化。
4-(2-[4-溴苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(146)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[4-溴苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(145)合成4-(2-[4-溴苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(146)。純化從水中結晶。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.36(2H，d)，7.07(2H，d)，6.69(1H，s)；6.67(1H，s)；2.81(2H，m)；2.72(2H，m)ppm。13C NMR(CD3OD，100MHz)164.5，142.7，132.26，131.6，125.9，123.5，122.8，120.4，116.4，38.0，29.7ppm。HPLC(20mn)92.75％收率91％。
實施例52. 4-(2-[2-氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(149)的合成 4-(2-[4-氟苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(147)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和(4-氟苯基)-2-基-乙酰氯合成4-(2-[4-氟苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(147)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[4-氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(148)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[4-氟苯基]-2-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(147)合成4-(2-[4-氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(1481)。純化未純化。
4-(2-[4氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(149)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[4-氟苯基]-2-基-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(148)合成4-(2-[4-氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(149)。純化從水中結晶。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.16(2H，m)，7.03(2H，m)，6.70(2H，m)；2.87(2H，m)，2.73(2H，m)ppm。13C NMR(CD3OD，100MHz)164.4，161.4，132.0，130.0，128.8，126.0，125.0，123.5，122.8，116.4，115.8，31.8，28.5ppm。收率71％。HPLC 20分鐘97.76％。
實施例53. 4-(2-[4-甲基苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(152)的合成 4-(2-[4-甲基苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(150)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和對甲苯基-2-基-乙酰氯合成4-(2-[4-甲基苯基]-2-基-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(150)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[4-甲基苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(151)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[4-甲基苯基]-2-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(150)合成4-(2-[4-甲基苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(151)。純化未純化。
4-(2-[4-甲基苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(152)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[4-甲基苯基]-2-基-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(151)合成4-(2-[4-甲基苯基]-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(152)。純化從水中結晶。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.04(4H，m)，6.68(1H，s)；6.67(1H，s)；2.78(2H，m)，2.72(2H，m)，2.27(3H，s)ppm。13C NMR(CD3OD，100MHz)164.5，140.3，136.2，129.9，129.4，126.5，123.3，122.7，116.5，38.3，30.1，21.1ppm。收率55％。HPLC 20mn96.23％。
實施例54. 4-(2-[2-甲基苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(155) 4-(2-[2-甲基苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(153)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和鄰甲苯基-2-基-乙酰氯合成4-(2-[2-甲基苯基]-2-基-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(153)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[2-甲基苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(154)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[2-甲基苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(153)合成4-(2-[2-甲基苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(154)。純化未純化。
4-(2-[2-甲基苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(155)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[2-甲基苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(153)合成4-(2-[2-甲基苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(155)。純化從水中結晶。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.08(4H，m)，6.71(1H，s)；6.69(1H，s)；2.83(2H，m)，2.69(2H，m)，2.27(3H，s)ppm。13C NMR(CD3OD，100MHz)164.5，141.5，136.9，131.0，130.0，127.0，126.9，126.58，123.4，122.6，116.4，63.1，28.9，19.4ppm。收率73％HPLC 20mn96.95％。
實施例55. 4-(2-[3-甲基苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(158)的合成 4-(2-[3-甲基苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(156)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和間甲苯基-2-基-乙酰氯合成4-(2-[3-甲基苯基]-2-基-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(156)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[3-甲基苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(157)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[3-甲基苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(156)合成4-(2-[3-甲基苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(157)。純化未純化。
4-(2-[3-甲基苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(158)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[3-甲基苯基]-2-基-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(157)合成4-(2-[3-甲基苯基]-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(158)。純化從水中結晶。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ9.00(1H，寬s)，7.18(1H，m)，7.00(3H，m)，6.91(1H，s)，6.75(1H，s)，2.82(4H，m)，2.38(3H，s)ppm。LC/MS100％，m/z-229g/mol。收率＝72％。
實施例56. 4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(161)的合成 4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(159)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和(2-氯-4-氟苯基)-2-基-乙酰氯合成4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-2-基-乙?；鵠-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(159)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(160)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(159)合成4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(160)。純化未純化。
4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(161)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(160)合成4-(2-[2-氯-4-氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(161)。純化從水中沉淀。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.19(2H，m)，6.96(1H，m)；6.70(2H，m)；2.95(2H，m)，2.73(2H，m)ppm。13C NMR(CD3OD，100MHz)164.4，161.2，136.9，135.4，132.9，125.7，123.6，122.7，117.4，116.4，114.7，35.7，28.0ppm。收率51％。HPLC 20mn98.85％。
實施例57. 4-(2-[2，4-二氯苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(164)的合成 4-(2-[2，4-二氯苯基]-2-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(162)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和鄰，對-二氯苯基-2-基-乙酰氯合成4-(2-[2，4-二氯苯基]-2-基-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(162)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[2，4-二氯苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(163)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[2，4-二氯苯基]-2-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(162)合成4-(2-[2，4-二氯苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(163)。純化未純化。
4-(2-[2，4-二氯苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(164)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[2，4-二氯苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(163)合成4-(2-[2，4-二氯苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(164)。(注反應溶劑改為乙醇)。純化從水中沉淀。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.43(1H，s)，7.20(2H，m)，6.69(2H，s)，2.96(2H，t)，2.78(2H，t)ppm。收率＝46％。
實施例58. 4-(2-[3，4-二氯苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(167)的合成
4-(2-[3，4-二氯苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(165)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和間，對-二氯苯基-2-基-乙酰氯合成4-(2-[3，4-二氯苯基]-2-基-乙酰基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(165)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[3，4-二氯苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(166)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[3，4-二氯苯基]-2-基-乙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(165)合成4-(2-[3，4-二氯苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(166)。純化未純化。
4-(2-[3，4-二氯苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(167)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[3，4-二氯苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(166)合成4-(2-[3，4-二氯苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(167)。(注溶劑改為乙醇)。純化從水中沉淀。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ7.36(2H，m)，7.08(1H，m)，6.68(2H，m)，2.83(4H，m)ppm。收率＝87％。
實施例59. 4-(2-[2，4-二氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(170)的合成
4-(2-[2，4-二氟苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(168)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從1H-吡咯-2-羧酸乙酯和鄰，對-二氟苯基-2-基-乙酰氯合成4-(2-[2，4-二氟苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(168)。反應條件1，2-二氯甲烷/-40℃→室溫。純化未純化。
4-(2-[2，4-二氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(169)的合成根據(jù)實施例32中所述方法從4-(2-[2，4-二氟苯基]-2-基-乙?；?-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(168)合成4-(2-[2，4-二氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(169)。純化未純化。
4-(2-[2，4-二氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(170)的合成根據(jù)實施例45中所述方法從4-(2-[2，4-二氟苯基]-2-基-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(169)合成4-(2-[2，4-二氟苯基]-乙基)-1H-吡咯-2-羧酸(170)。純化從水中沉淀。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ6.76(2H，m)，6.70(3H，m)；2.87(2H，m)，2.75(2H，m)ppm。13C NMR(CD3OD，100MHz)165.6，164.5，163.2，148.0，125.6，123.6，122.7，116.3，112.4，112.2，101.9，38.3，29.2ppm。收率70％。HPLC 20mn99.05％實施例60. 4，5，6，7-四氫-2H-異吲哚-1-羧酸(172)的合成
4，5，6，7-四氫-2H-異吲哚-1-羧酸乙酯(171)的合成將在2-丙醇(45mL)中的1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]-十一-7-烯(6.2mL，41.5mmol)在25分鐘內(nèi)用添加漏斗加入1-硝基環(huán)己烯(5.0441g，39.67mmol)和異氰乙酸乙酯(4.3340g，37.16mmol)在THF(45mL)中的攪拌溶液中。在室溫下攪拌過夜后判斷反應完全。加入2N HCl(～100mL)和EtOAc(～50mL)。移去有機層，然后用水、5％ NaHCO3和水洗滌。粗產(chǎn)物用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，100％二氯甲烷)純化，得到171，有少量雜質(zhì)污染。試圖從己烷中重結晶未能除去雜質(zhì)，所以該產(chǎn)物未經(jīng)進一步純化而用于下一步中。1H(CDCl3，400MHz)δ9.01(1H，寬s)，6.64(1H，s)，4.31(3H，q，J＝7.2Hz)，2.82(2H，t，J＝5.6Hz)，2.55(2H，t，J＝5.6Hz)，1.80-1.68(4H，m)，1.36(3H，t，J＝7.2Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ161.71，128.06和127.84，121.98和121.96，118.74和118.55，118.03和117.71，59.62，23.41和23.39，23.36和23.33，23.16和23.13，21.88和21.86，14.48ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳14.48；CH2碳59.62，23.41和23.39，23.36和23.33，23.16和23.13，21.88和21.86；CH碳118.74和118.55ppm。HPLC10.689min。
4，5，6，7-四氫-2H-異吲哚-1-羧酸(172)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，10.3mmol)加入171(0.3966g，2.05mmol)在MeOH(5.1mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流20min。有少量原料剩余。經(jīng)HPLC觀察到大量的不期望的產(chǎn)物和僅僅少量的的期望的產(chǎn)物。將反應物濃縮，再溶于水中，用EtOAc(1mL)萃取。向水層中逐滴加入10％aq.HCl至pH＝2。將從反應物中沉淀出的白色固體濾出，用冷水洗滌。將固體真空干燥過夜得到0.0076g(11.6％)172。1H(CD3OD，400MHz)δ5.62(1H，s)，2.77(2H，t，J＝5.6Hz)，2.52(2H，t，J＝5.4Hz)，1.78-1.66(4H，m)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.87，129.69，122.48，120.57，118.42，24.74，24.69，24.35，22.94ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳24.74，24.69，24.35，22.94；CH碳120.57ppm。HPLC8.896min。
實施例61. 5-溴-4-[2-(2-溴苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(173)的合成 5-溴-4-[2-(2-溴苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(173)的合成在5分鐘內(nèi)將溴(0.021mL，0.414mmol)逐滴加入65(0.1014g，0.345mmol)在乙酸(1.1mL)中的攪拌溶液中。當經(jīng)HPLC判斷反應完全(20分鐘)時，加入水，將沉淀出的固體濾出，并用水洗滌。將所得的淡紫色固體溶于EtOAc中，用亞硫酸鈉和水洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。產(chǎn)物經(jīng)制備反相HPLC純化，條件為40∶60 H2O∶CH3CN(w/0.05％ TFA)；20mL/min.；λ＝214nM。得到0.0574g(44.6％)173，為松散的淺桃紅色固體。1H(CD3OD，400MHz)δ7.50(1H，d，J＝7.8Hz)，7.24-7.00(3H，m)，6.68(1H，s)，2.92(2H，t，J＝～7.8Hz)，2.67(2H，t，J＝～7.8Hz)ppm。部分13C(CD3OD，100MHz)δ163.25，141.86，133.73，131.85，128.89，128.54，125.26，124.68，117.16，105.89，37.91，27.62ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳37.91，27.62；CH碳133.73，131.85，128.89，128.54，117.16ppm。HPLC10.473min。
實施例62. 5-溴-4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(174)的合成 5-溴-4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(174)的合成使用實施例61中所述方法制備5-溴-4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸。1H(CD3OD，400MHz)δ7.22(2H，d，J＝8.8Hz)，7.12(2H，d，J＝8.8Hz)，6.65(1H，s)，2.81(2H，t，J＝7.3Hz)，2.67(2H，t，J＝7.3Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ163.33，141.42，132.54，131.03，129.18，124.73，117.46，105.84，36.72，29.04ppm。
實施例63. 5-(3-苯基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(177)的合成 5-(3-苯基丙?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯(175)和4-(3-苯基丙酰基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(43)的合成在氮氣下，將在最少量二氯乙烷(2mL)中的吡咯-2-羧酸乙酯(2.0211g，14.5mmol)加入氯化鋅(4.0151g，29.5mmol)和氫化肉桂酰氯(5.0348g，29.9mmol)在二氯乙烷(20mL，0.66M)中的冰冷的攪拌溶液中。攪拌10分鐘后，移去冰浴，將反應物暖至室溫直至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(2小時45分鐘)為止。加入PS-TrisamineTM樹脂(13.44g)，將反應物在室溫下攪拌1.5小時。將反應物濾過玻璃漏斗至含有冰水的燒瓶中。用二氯甲烷洗滌玻璃漏斗，然后將合并的有機層用水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾、濃縮并經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，25∶75己烷∶二氯甲烷)純化，得到0.5374g(14％)175(較低Rf)。未嘗試分離43(較高Rf)。HPLC10.58min。(原料8.90min。)。
5-(3-苯基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(176)的合成在氮氣下，將三乙基硅烷(0.977mL，6.14mmol)加入5-(3-苯基丙?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯(175)(0.5374g，1.98mmol)在三氟乙酸(TFA)(4.72mL，0.42M)中的攪拌的室溫溶液中。在室溫下攪拌過夜后經(jīng)HPLC判斷反應完全。真空除去TFA，粗產(chǎn)物用以下條件經(jīng)制備反相HPLC純化35∶65 H2O∶CH3CN；20mL/min.；λ＝254nM。HPLC11.12min。
5-(3-苯基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸(177)的合成在氮氣下，將新制aq.NaOH(10M，在水中，1.22mmol)加入5-(3-苯基丙基)-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(85)(0.0629g，0.244mmol)在MeOH(0.61mL，0.4M)中的攪拌的室溫溶液中。然后將反應物加熱回流至經(jīng)HPLC判斷為反應完全為止。將產(chǎn)物濃縮，然后加入2mL乙醚和2mL水。移去有機層并棄去，然后加入2mL乙醚，逐滴加入10％aq.HCl直至pH＝2。移去乙醚層，水層再用一份乙醚萃取。將合并的有機層干燥并濃縮，得到期望的產(chǎn)物。(注不期望的雜質(zhì)的HPLC保留時間為10.85分鐘)。HPLC9.91min。
實施例64. 4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸向鈉鹽(178)的轉(zhuǎn)化
4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸鈉鹽(178)的形成將4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸(39)(4.2668g，17.09mmol)溶于60mL(0.17M)MeOH中。將溶液置于0℃冰浴中冷卻，攪拌下緩慢加入氫氧化鈉水溶液(0.6872g，17.09mmol NaOH，2.7M)。白色固體以油的形式從溶液中析出。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上除去甲醇，然后加入32mL水，將燒瓶充分混勻，使之在室溫下溶解。將溶液濾過濾紙時，原料酸溶于甲醇中時觀察到的淡粉紅色脫色現(xiàn)象去除。將無色溶液凍干，得到4.5345g(97.7％)松散的白色固體。
實施例65. 4-甲基-2-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(182)的合成 4-硝基-1-苯基-戊-3-醇(179)的合成根據(jù)One等，J.Heterocyclic Chem.，1994，31，707-710中所述的方法合成，將硝基乙烷(10mL，139.2mmol，96％)和3-苯基丙醛(18.49mL，139.9mmol)溶于THF(70mL，2M)中，該文獻引入本文作為參考。在鹽水浴中冷卻至-10℃后，加入1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]-十一-7-烯(DBU)(1.46mL，9.74mmol)，攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(75分鐘)為止。用乙醚和水稀釋反應物，然后移去有機層，用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。水層用乙醚反萃取，將合并的有機層用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到179，未經(jīng)進一步純化而用于下一步。HPLC9.68min。(注原料的保留時間如下硝基乙烷6.49分鐘；3-苯基丙醛9.45分鐘)。
乙酸2-硝基-1-苯乙基丙酯(180)的合成將來于以上的粗產(chǎn)物4-硝基-1-苯基-戊-3-醇(179)溶于二氯甲烷(60mL)中，在氮氣下在冰浴中冷卻。緩慢加入濃硫酸(0.76mL，14.2mmol)然后加入乙酸酐(13.83mL，146.2mmol)，將反應物暖至室溫，攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(3小時40分鐘)為止。(注加入乙酸酐后不久反應物變?yōu)楹谏?。將反應物緩慢傾入水中終止反應物反應，移去有機層，用碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥，過濾并濃縮。該粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，95∶5己烷∶EtOAc)純化，得到純的180(21.4447g，兩步65.5％)。HPLC10.45min。
4-甲基-2-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(181)的合成將乙酸2-硝基-1-苯乙基丙酯(180)(10.4302g，44.2mmol)和異氰酸乙酯(4.957g，44.2mmol)稱重后置于250mL圓底燒瓶中，用膜密封，通入氮氣凈化，然后溶于THF和異丙醇(1.6∶1，44mL，1M)溶液中。將反應物在冰浴中冷卻，然后加入DBU(13.6mL，2.05mmol)。將反應物暖至室溫，并在室溫下攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(2小時25分鐘)為止。用水和乙醚稀釋反應物，移去有機層，用2N HCl、水和碳酸氫鈉萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥并濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，95∶5己烷∶EtOAc)純化。從合并的Combiflash部分中結晶的產(chǎn)物中得到一批3.3224g(29％)純的181和3.7709g含有少量雜質(zhì)的181。HPLC11.27min。
4-甲基-2-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸(182)的合成如上所述將4-甲基-2-苯乙基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(181)水解得到期望的純產(chǎn)物。1H(CD3OD，400MHz)δ10.60(1H，br s)，7.24-7.00(5H，m)，6.62(1H，s)，2.99(2H，dd，J＝9.6，7.3Hz)，2.67(2H，dd，J＝9.6，7.8Hz)，1.83(3H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.75，143.86，132.12，129.58，129.10，126.61，122.27，122.10，120.68，38.32，28.61，9.80ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳38.32，28.61；CH碳129.58，129.10，126.61，122.27ppm。HPLC9.947min。
實施例66. 4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(38)的合成 4-[2-(4-氯苯基)-乙基]-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(38)的合成向39(0.5026g，2.01mmol)在二氯甲烷(8.4mL，0.24M)中的溶液中加入1-[3-(二甲胺)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCl，0.4700g，2.42mmol)、4-(二甲氨基)吡啶(DMAP，0.0270g，0.20mmol)和EtOH(0.352mL，6.04mmol)，并將反應物在室溫下攪拌過夜。濾出固體副產(chǎn)物，用二氯甲烷洗滌，然后將合并的有機層用5％ NaHCO3水溶液、5％aq.HCl和水洗滌。用硫酸鈉干燥合并的有機層，過濾并濃縮。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，90∶10己烷∶EtOAc)純化，得到0.2974g(53.2％)38。38的分析數(shù)據(jù)與先前用不同方法合成的分析數(shù)據(jù)匹配。HPLC11.261分鐘。(注原料的HPLC＝10.028分鐘)實施例67. 4-苯基氨基甲基-1H-吡咯-2-羧酸(184)的合成 4-苯基氨基甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(183)的合成將0.2012g(1.20mmol)4-甲?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯溶于4.8mL(0.25M)在甲醇中的5％乙酸中。加入苯胺(0.13mL g，1.44mmol)，將反應物在室溫和氮氣下攪拌45分鐘，然后緩慢加入硼氫化鈉(0.1244g，1.98mmol)，將反應物在室溫下攪拌過夜。加入約2mL飽和K2CO3，并用乙酸乙酯將反應物萃取2次。將合并的有機層用飽和碳酸氫鈉(～3mL)和鹽水(～3mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥合并的有機層，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，85∶15己烷∶乙酸乙酯)純化，得到0.2663g(91％)4-苯基氨基甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(183)，為無色粘稠的油狀物。注原料4-甲?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯的HPLC保留時間＝7.337min。1H(CDCl3，400MHz)δ9.49(1H，寬s)，7.19(2H，dd，J＝8.6，7.3Hz)，6.73(1H，tt，J＝7.3，1.1Hz)，6.66(2H，dd，J＝8.6，1.1Hz)，6.91(1H，d，J＝2.0Hz)，6.90(1H，d，J＝2.0Hz)，4.33(2H，q，J＝7.2Hz)，4.19(2H，s)，3.90(1H，寬s)，1.36(3H，t，J＝7.2Hz)ppm。HPLC6.936min。
4-苯基氨基甲基-1H-吡咯-2-羧酸(184)的合成將4-苯基氨基甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(183)(0.0773g，0.316mmol)稱重后置于圓底燒瓶中。加上攪拌棒、冷凝器和密封膜，用氮氣凈化燒瓶。將酯溶于EtOH(0.70mL，0.45M)中，然后將新制的aq.NaOH(0.0354g，0.283mL水)在攪拌下加入該酯溶液中。將反應燒瓶立即浸入預先加熱至85℃的油浴中，將反應物在氮氣下加熱并攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(15分鐘)為止。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，加入0.8mL水。用10％ HCl水溶液將水層緩慢小心地酸化。產(chǎn)物經(jīng)反相制備HPLC(45∶55含0.05％ TFA的水∶含0.05％ TFA的CH3CN)純化，得到純的4-苯基氨基甲基-1H-吡咯-2-羧酸。1H(CD3OD，400MHz)δ7.51-7.40(5H，m)，6.99(1H，d，J＝1.5Hz)，6.86(1H，d，J＝1.5Hz)，4.46(2H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ163.92，137.17，131.10，129.97，125.95，125.07，123.71，117.37，115.77，49.38ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳49.38；CH碳131.10，129.97，125.94，123.71，117.37ppm。HPLC5.724min。
實施例68. 4-[(乙酰基苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(186)的合成 4-[(乙?；交被?-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(185)的合成將4-苯基氨基甲基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(183)(0.1523g，0.623mmol)稱重后置于10mL燒瓶中。加上攪拌棒和密封膜，用氮氣凈化燒瓶。將胺溶于二氯甲烷(1.6mL，0.4M)中，然后將燒瓶冷卻至0℃。加入N，N-二異丙基乙胺(0.1194mL，0.686mmol)，然后向攪拌的0℃溶液中用注射器緩慢加入乙酰氯(0.0488mL，0.686mmol)。然后將反應物暖至室溫。當經(jīng)HPLC判斷為反應完全(35分鐘)時，用二氯甲烷稀釋反應物并用水終止反應。移去有機層，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。經(jīng)HPLC和NMR分析產(chǎn)物足夠純，可以不經(jīng)進一步純化而用于下一步(0.1625g，91％，白色結晶固體)。1H(CD3OD，400MHz)δ11.22(1H，寬s)，7.43-7.31(3H，m)，7.08(2H，dd，J＝7.0，1.5Hz)，6.75(1H，d，J＝1.5Hz)，6.68(1H，d，J＝1.5Hz)，4.70(2H，s)，4.24(2H，q，J＝7.0Hz)，1.81(3H，s)，1.31(3H，t，J＝7.0Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ172.47，162.64，143.86，130.68，129.34，129.27，124.50，124.33，122.19，116.72，61.16，46.60，22.64，14.75ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳22.64，14.75；CH2碳61.16，46.60；CH碳130.68，129.34，129.27，124.33，116.72ppm。HPLC8.738min。
4-[(乙?；交被?-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(186)的合成將4-[(乙?；交被?-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(185)(0.1353g，0.473mmol)稱重后置于圓底燒瓶中。加上攪拌棒、冷凝器和密封膜，并用氮氣凈化燒瓶。將酯溶于EtOH(1.05mL，0.45M)中，然后將新制的NaOH水溶液(0.0529g，0.42mL水)在攪拌下加入該酯溶液中。將反應燒瓶立即浸入預先加熱至85℃的油浴中，將反應物在氮氣下加熱并攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(45分鐘)為止。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，加入1.0mL二氯甲烷和1.0mL水。用10％HCl水溶液將水層緩慢小心地酸化。雖然水層變得渾濁，但沒有沉淀析出。產(chǎn)物用三份二氯甲烷從水層萃取，用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到純的4-[(乙?；交被?-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(186，0.0968mg，79％)。1H(CD3OD，400MHz)δ11.11(1H，寬s)，7.46-7.31(3H，m)，7.09(2H，dd，J＝7.0，1.5Hz)，6.74(1H，s)，6.68(1H，s)，4.71(2H，s)，1.82(3H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ172.49，164.19，143.87，130.69，129.37，129.28，124.41，124.24，122.14，116.88，46.64，22.64ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳22.64；CH2碳46.64；CH碳130.69，129.37，129.28，124.24，116.88ppm。HPLC7.518min。
實施例69. 4-[(4-氯苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(188)的合成 4-[(4-氯苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(187)的合成將0.5052g(3.02mmol)4-甲酰基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯溶于12.0mL(0.25M)在甲醇中的5％乙酸中。加入4-氯苯胺(0.4633g，3.63mmol)，在室溫和氮氣下將反應物攪拌30分鐘，然后緩慢加入硼氫化鈉(0.3013g，4.79mmol)，將反應物在室溫下攪拌過夜。加入約5mL飽和碳酸鉀，用乙酸乙酯將反應物萃取兩次。將合并的有機層用飽和碳酸氫鈉(～6mL)和鹽水(～6mL)洗滌，然后將合并的有機層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，85∶15己烷∶乙酸乙酯)純化，得到0.5806g(69％)4-[(4-氯苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(187)，為淡褐色固體。注原料4-甲酰基-1H-吡咯-2-羧酸乙酯的HPLC保留時間＝7.337min。HPLC8.543min。
4-[(4-氯苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(188)的合成將4-[(4-氯苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(187)(0.1070g，0.384mmol)稱重后置于圓底燒瓶中。加上攪拌棒、冷凝器和密封膜，用氮氣凈化燒瓶。將酯溶于EtOH(0.85mL，0.45M)中，然后將新制的NaOH水溶液(0.0432g，0.123mL水)在攪拌下加入該酯溶液中。將反應燒瓶立即浸入預先加熱至85℃的油浴中，將反應物在氮氣下加熱并攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(30分鐘)為止。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，加入0.8mL水。用10％HCl水溶液將水層緩慢小心地酸化。產(chǎn)物經(jīng)反相制備HPLC純化(45∶55含0.05％ TFA的水∶含0.05％TFA的CH3CN)，得到純的4-[(4-氯苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(188)。1H(CD3OD，400MHz)δ7.12(2H，d，J＝8.4Hz)，6.92(1H，s)，6.85(1H，s)，6.95(2H，d，J＝8.4Hz)，4.16(2H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ164.24，146.44，129.96，124.87，124.15，123.56，122.98，117.22，116.24，43.18ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH2碳43.18；CH碳129.96，123.56，117.22，116.24ppm。HPLC7.137min。
實施例70. 4-[(乙?；?(4-氯苯基)-氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(190)的合成 4-[(乙?；?(4-氯苯基)-氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(189)的合成
將4-[(4-氯苯基氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(187)(0.2868g，1.03mmol)稱重后置于10mL燒瓶中。加上攪拌棒和密封膜，并用氮氣凈化燒瓶。將胺溶于二氯甲烷(2.6mL，0.4M)中，然后將燒瓶冷卻至0℃。加入N，N-二異丙基乙胺(0.1971mL，1.13mmol)，然后向攪拌的0℃溶液中用注射器緩慢加入乙酰氯(0.0805mL，1.13mmol)。然后將反應物暖至室溫。當經(jīng)HPLC判斷為反應完全(90分鐘)時，用二氯甲烷稀釋反應物，并用水終止反應。移去有機層，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，2∶1己烷∶乙酸乙酯)純化，得到4-[(乙?；?(4-氯苯基)-氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(189，0.2701g，82％)，為白色粘稠固體。1H(CD3OD，400MHz)δ11.25(1H，寬s)，7.35(2H，d，J＝8.4Hz)，7.05(2H，d，J＝8.4Hz)，6.76(1H，s)，6.69(1H，s)，4.68(2H，s)，4.22(2H，q，J＝7.1Hz)，1.81(3H，s)，1.29(3H，t，J＝7.1Hz)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ172.17，162.50，142.39，134.87，130.94，130.70，124.46 &124.30，123.94，121.91 & 121.88，116.64，61.13，46.43，22.70，14.75ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳22.70，14.75；CH2碳61.13，46.43；CH碳130.94，130.70，124.46 & 124.30，116.64ppm。HPLC9.247min。
4-[(乙酰基-(4-氯苯基)-氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(190)的合成將4-[(乙?；?(4-氯苯基)-氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(0.2701g，0.842mmol)稱重后置于圓底燒瓶中。加上攪拌棒、冷凝器和密封膜，用氮氣凈化燒瓶。將酯溶于EtOH(1.87mL，0.45M)中，然后將新制的NaOH水溶液(0.0943g，0.75mL水)在攪拌下加入該酯溶液中。將反應燒瓶立即浸入預先加熱至85℃的油浴中，將反應物在氮氣下加熱并攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(11分鐘)為止。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，加入1.6mL二氯甲烷和1.6mL水。用10％HCl水溶液將水層緩慢小心地酸化。產(chǎn)物以油的形式析出。用三份二氯甲烷萃取水層，用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到純的4-[(乙?；?(4-氯苯基)-氨基)-甲基]-1H-吡咯-2-羧酸(190，0.2242mg，91％)。1H(CD3OD，400MHz)δ11.14(1H，寬s)，7.38(2H，d，J＝8.4Hz)，7.07(2H，d，J＝8.4Hz)，6.75(1H，s)，6.69(1H，s)，4.69(2H，s)，1.82(3H，s)ppm。13C(CD3OD，100MHz)δ172.32，164.16 & 164.13，142.41，134.98，131.02，130.74，124.43，124.27，121.90 & 121.86，116.85 &116.81，46.49，22.67ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳22.67；CH2碳46.49；CH碳131.02，130.74，124.27 & 124.09，116.85 & 116.81ppm。HPLC8.077min。
實施例71. 4-{[(4-氯苯基)-甲氨基]甲基}-1H-吡咯-2-羧酸(192)的合成 4-{[(4-氯苯基)-甲氨基]甲基}-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(191)的合成在氮氣下，將4-氯-N-甲基苯胺(0.225mL，1.86mmol)加入4-甲?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯(0.2585g，1.55mmol)在5％乙酸甲醇中的攪拌的室溫溶液中。在室溫下攪拌30分鐘后，加入硼氫化鈉(0.1585g，2.52mmol)，將反應物在室溫下攪拌過夜。加入約3mL飽和碳酸鉀，用乙酸乙酯將反應物萃取兩次。將合并的有機層用飽和碳酸氫鈉(～4mL)和鹽水(-4mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(Combiflash柱，85∶15己烷∶乙酸乙酯)純化，得到0.3419g(76％)4-{[(4-氯苯基)-甲氨基]甲基}-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(191)，為淡褐色固體。注原料4-甲?；?1H-吡咯-2-羧酸乙酯的HPLC保留時間＝7.337min。HPLC8.478min。
4-{[(4-氯苯基)-甲氨基]甲基}-1H-吡咯-2-羧酸(192)的合成
4-{[(4-氯苯基)-甲氨基]甲基}-1H-吡咯-2-羧酸乙酯(191)(0.3419g，1.17mmol)稱重后置于圓底燒瓶中。加上攪拌棒、冷凝器和密封膜，用氮氣凈化燒瓶。將酯溶于EtOH(2.6mL，0.45M)中，將新制的NaOH水溶液(0.1336g，1.0mL水)在攪拌下加入該酯溶液中。將反應燒瓶立即浸入預先加熱至85℃的油浴中，將反應物在氮氣下加熱并攪拌至經(jīng)HPLC判斷為反應完全(15分鐘)為止。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，粗產(chǎn)物立即經(jīng)反相制備HPLC(45∶55含0.05％ TFA的水∶含0.05％TFA的CH3CN)純化，得到純的4-{[(4-氯苯基)-甲氨基]甲基}-1H-吡咯-2-羧酸(192)。
1H(CD3OD，400MHz)δ7.22(2H，d，J＝9.2Hz)，6.95(2H，d，J＝9.2Hz)，6.81(1H，d，J＝1.5Hz)，6.70(1H，d，J＝1.5Hz)，4.43(2H，s)，3.00(3H，s)ppm。部分13C(CD3OD，100MHz)δ130.12，124.02，117.99，116.47，52.37，39.91ppm。DEPT(CD3OD，100MHz)CH3碳14.48；CH2碳59.62，23.41和23.39，23.36和23.33，23.16和23.13，21.88和21.86；CH碳118.74和118.55ppm。
實施例72. 4-芐基-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-羧酸(198)的合成
4-氧代-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-羧酸甲酯(193)的合成將4-氧代-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-腈(4.5g，28.1mmol，如Synth.Comm.1995，25，507-514中所述制備)在HCl氣體飽和的甲醇(200ml)中的溶液回流6天。真空除去溶劑。經(jīng)NMR分析表明所得產(chǎn)物(3.5g)是期望的酯和原料的65/35的混合物。這一混合物未經(jīng)任何進一步的純化而用于下一步中。
4-氧代-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧甲基)-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-羧酸甲酯(194)將酯(500mg，2.6mmol)的DMF(3ml)溶液加入氫化鈉(114mg，60％，在油中，2.8mmol)在DMF(2ml)中的冷(0℃)懸浮液中。10分鐘后，加入SEM-Cl(550μl，3.1mmol)。然后將混合物在室溫下攪拌2小時，然后傾入冰水中并用乙酸乙酯萃取。濃縮后，得到期望的化合物，為粗油狀物(930mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.27(1H，s)，5.78(2H，s)，3.61(2H，m)，2.94(2H，m)，2.50(2H，m)，2.18(2H，m)，0.92(2H，m)ppm。
LC/MS60％。
4-亞芐基-1-(2-三甲基甲硅烷基-乙氧甲基)-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-羧酸甲酯(195)的合成將保護的酯(900mg，2.78mmol)的無水THF溶液(7ml)加入氯化芐基鎂(3.4ml，2M，在THF中，6.8mmol)在THF(10ml)中的溶液中。在室溫下2小時后，再加入一些氯化芐基鎂(1.7ml，2M，在THF中，3.4mmol)。然后將混合物回流一夜。然后加入水，用乙酸乙酯萃取混合物。有機層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到上述標題化合物(900mg)。LC/MS50％，m/z＝397g/mol。
4-亞芐基-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-羧酸甲酯(196)的合成將氟化四丁基銨(23mL，1M，在THF中，23mmol)在5分鐘內(nèi)加入酯(900mg，2.26mmol)在冷THF(0℃)中的溶液中。將反應混合物在80℃下加熱4小時。在室溫下48小時后，將反應混合物在乙醚和水之間分配。有機層用硫酸鎂干燥，減壓濃縮，得到以上標題化合物的粗產(chǎn)物。經(jīng)硅膠色譜法(洗脫劑環(huán)己烷/AcOEt80/20)得到純的原料(100mg)和相應的脫保護的腈(80mg)。將仍受保護的純酯(100mg，0.25mmol)與TBAF(750μl，0.75mmol)混合。真空除去THF。濃縮后，將反應混合物與乙二胺(0.25ml)在DMF(1ml)中一起加熱16小時。濃縮后得到以上標題化合物，為油狀物(80mg)。LC/MS76％，m/z＝267g/mol。
4-芐基-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-羧酸甲酯(197)的合成將飽和酯衍生物在常壓下在EtOH中經(jīng)Pd氫化3小時。過濾除去催化劑，減壓蒸發(fā)除去溶劑，得到上述標題化合物，經(jīng)硅膠色譜法(洗脫劑環(huán)己烷/二氯甲烷50/50)純化。收率20mg.LC/MS60％，m/z＝269g/mol。
4-芐基-4，5，6，7-四氫-1H-吲哚-2-羧酸(198)的合成
在室溫下將新制aq.NaOH(1M，在水中，0.8ml，0.8mmol)加入酯(20mg，0.08mmol)在EtOH(5mL)中的攪拌溶液中。將反應物加熱至80℃，直至經(jīng)TLC判斷為反應完全為止。用乙醚萃取產(chǎn)物，然后向水層中逐滴加入10％aq.HCl將水層酸化(pH＝1)。濾出固體，并用水洗滌。將固體真空干燥過夜，得到上述標題化合物(19mg)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.8(1H，br s)，7.3-7.33(2H，m)，7.2-7.26(3H，m)，6.81(1H，s)，3.09(1H，dd)，2.9(1H，m)，2.55-2.65(3H，m)，1.9-2.0(1H，m)，1.6-1.8(2H，m)，1.3-1.4(1H，m)。LC/MS89％，m/z＝255g/mol。
權利要求
1.式IA的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1a和R2a獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、芳基烷基、烷基芳基和XYR5；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、芳基烷基、烷基芳基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；n是1-6的整數(shù)；R1a和R2a中至少一個是XYR5；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n；條件是式IA不包括5-苯乙基-1H-吡唑-3-羧酸。
2.根據(jù)權利要求1的化合物，其中R3是氫。
3.根據(jù)權利要求1的化合物，其中Z是N。
4.根據(jù)權利要求1的化合物，其中Z是CR4。
5.根據(jù)權利要求1的化合物，其中R1a是氫，且R2a是XYR5。
6.根據(jù)權利要求4或5的化合物，其中X和Y是CR6R7。
7.根據(jù)權利要求5的化合物，其中R5是取代的芳基。
8.根據(jù)權利要求6的化合物，其中R6和R7是氫。
9.根據(jù)權利要求1的化合物，其中所述化合物選自
10.根據(jù)權利要求1的化合物，其中所述化合物是
11.根據(jù)權利要求1的化合物，其中所述化合物是
12.一種用于增加哺乳動物中D-絲氨酸濃度和/或降低D-絲氨酸被DAAO氧化產(chǎn)生的毒性產(chǎn)物濃度的方法，所述方法包括給予個體治療有效量的式I的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、酰基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
13.一種用于治療精神分裂癥，用于治療或預防與阿爾茨海默氏病有關的記憶和/或認知喪失，用于治療共濟失調(diào)，或用于預防神經(jīng)變性疾病特征性的神經(jīng)元功能喪失的方法，所述方法包括給予需要其的個體治療有效量的式I的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、酰基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
14.一種用于增強學習、記憶和/或認知的方法，所述方法包括給予需要其的個體治療有效量的式I的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、?；?、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
15.一種用于治療神經(jīng)性疼痛的方法，所述方法包括給予需要其的個體治療有效量的式I的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、?；?、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅或它們的混合物；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
16.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、芳基烷基、烷基芳基和XYR5；R1和R2中至少一個是XYR5；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
17.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中R3是氫。
18.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中Z是N。
19.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中Z是CR4。
20.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中n是1或2。
21.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中X和Y是(CR6R7)n，且n是1。
22.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中R6和R7是氫。
23.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中R1是氫，且R2是XYR5。
24.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中R5是取代的芳基。
25.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中所述式I的化合物選自
26.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中所述式I的化合物是
27.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其中所述式I的化合物是
28.根據(jù)權利要求12-15之任一項的方法，其還包括聯(lián)合給予D-絲氨酸或環(huán)絲氨酸。
29.一種藥物組合物，所述組合物包含式I的化合物和藥學可接受的載體 其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、?；?、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；或R1和R2一起形成取代或未取代的5、6、7或8元碳環(huán)或雜環(huán)基團；X和Y獨立地選自O、S、NH和(CR6R7)n；R3是氫、烷基或M+；M是鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉、鋅離子或它們的混合物；Z是N或CR4；R4選自氫、鹵素、硝基、烷基、烷基芳基、芳基烷基和XYR5；R5選自芳基、取代的芳基、雜芳基和取代的雜芳基；R6和R7獨立地選自氫和烷基；n是1-6的整數(shù)；R1、R2和R4中至少一個不是氫；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
30.根據(jù)權利要求29的藥物組合物，其另外還包含D-絲氨酸或環(huán)絲氨酸。
31.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中R1和R2獨立地選自氫、鹵素、硝基、烷基、芳基烷基、烷基芳基和XYR5；R1和R2中至少一個是XYR5；且X和Y中至少一個是(CR6R7)n。
32.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中R3是氫。
33.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中Z是N。
34.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中Z是CR4。
35.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中n是1或2。
36.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中X和Y是(CR6R7)n，且n是1。
37.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中R6和R7是氫。
38.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中R1是氫。
39.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中R5是取代的芳基。
40.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中所述式I的化合物選自
41.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中所述式I的化合物是
42.根據(jù)權利要求29或30的藥物組合物，其中所述式I的化合物是
全文摘要
本發(fā)明涉及用于增加D－絲氨酸濃度并降低D－絲氨酸氧化產(chǎn)生的毒性產(chǎn)物的濃度，用于增強學習、記憶和/或認知，或用于治療精神分裂癥、阿爾茨海默氏病、共濟失調(diào)或神經(jīng)性疼痛，或用于預防神經(jīng)變性疾病特征性的神經(jīng)元功能喪失的方法，所述方法包括給予需要治療的個體治療有效量的式(I)的化合物或其藥學可接受的鹽或溶劑合物其中R
文檔編號C07D231/16GK1922149SQ200480042186
公開日2007年2月28日 申請日期2004年12月28日 優(yōu)先權日2003年12月29日
發(fā)明者方群, 塞思·霍普金斯, 史蒂文·瓊斯 申請人:塞普拉科公司