專利名稱：治療淀粉樣相關(guān)疾病用的方法與組合物的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)
本申請(qǐng)要求享有2004年12月22日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/638,636的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)。本申請(qǐng)與2004年6月18日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/871,514的美國(guó)專利申請(qǐng)有關(guān)，其要求享有以下專利申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)2004年6月18日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/861,365的美國(guó)專利申請(qǐng)，2003年10月17日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/512,047的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，以及2003年6月23日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/480,906的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，所有這些申請(qǐng)的名稱均為“治療淀粉樣相關(guān)疾病用的方法與組合物”。本發(fā)明還與2004年12月22日提交的名稱為“治療淀粉樣相關(guān)疾病用的方法與組合物”、申請(qǐng)?zhí)枮?0/638,819的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)有關(guān)。
本申請(qǐng)也與以下專利申請(qǐng)有關(guān)2003年10月17日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/512,017的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，2003年6月23日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/480,918的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，以及2004年6月18日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/871,613美國(guó)專利申請(qǐng)，這些申請(qǐng)的名稱均為“治療蛋白質(zhì)凝聚紊亂的方法”。
本申請(qǐng)與下列專利申請(qǐng)有關(guān)2003年10月17日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/512,116的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，2003年6月23日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/480,984的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，以及2004年6月18日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/871,549的美國(guó)專利申請(qǐng)，這些申請(qǐng)的名稱均為“抑制淀粉樣蛋白的化合物的藥物制劑”。
本申請(qǐng)也與以下專利申請(qǐng)有關(guān)2002年12月24日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/436,379的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，2003年6月23日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/482,214的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)(上述兩件申請(qǐng)的名稱為“用于治療阿耳茨海默氏病的聯(lián)合療法”)，2003年12月24日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/746,138的美國(guó)專利申請(qǐng)，2003年12月24日提交的申請(qǐng)?zhí)枮镻CT/CA2003/002011的國(guó)際專利申請(qǐng)，以及2004年6月18日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/871,537的美國(guó)專利申請(qǐng)(后三件申請(qǐng)的名稱為“治療β-淀粉樣蛋白相關(guān)疾病用的治療劑”)。
本申請(qǐng)還與以下專利申請(qǐng)有關(guān)2003年10月17日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/512,135的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，2003年6月23日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/482,058的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)(這兩件申請(qǐng)的名稱均為“制備治療淀粉樣變性用化合物的合成方法”)，以及2004年6月18日提交的名稱為“改進(jìn)的候選藥物及其制備方法”、申請(qǐng)?zhí)枮?0/871.543的美國(guó)專利申請(qǐng)案。
本申請(qǐng)也涉及以下的專利申請(qǐng)2003年10月17日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/512,018的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)和2003年6月23日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/480,928的美國(guó)專利臨時(shí)申請(qǐng)，以及2004年6月18日提交的申請(qǐng)?zhí)枮?0/871,512的美國(guó)專利申請(qǐng)(這些申請(qǐng)的名稱均為“用于治療淀粉樣和癲癇相關(guān)疾病的方法與組合物”)。
本申請(qǐng)還涉及申請(qǐng)?zhí)枮?8/463,548、名稱為“治療淀粉樣變性的方法”的美國(guó)專利(現(xiàn)為美國(guó)專利US 5,972,328)。
上述每件專利申請(qǐng)或?qū)＠娜績(jī)?nèi)容，包括但不限于其說明書、權(quán)利要求書、摘要以及附圖
、表格和圖案，在此都明確地引入本文用作參考。
背景技術(shù)：
淀粉樣變性是指以出現(xiàn)淀粉樣原纖維為特征的病理癥狀。淀粉樣蛋白是通用術(shù)語(yǔ)，是指一組見于多種不同疾病中的各種不同特異性蛋白質(zhì)沉積物(細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外)。盡管它們的存在形式多變，但是所有的淀粉樣沉積物都具有共同的形態(tài)學(xué)特性，可被特殊染料(例如剛果紅)染色，染色后在偏振光中呈現(xiàn)特征性的紅綠色雙折射現(xiàn)象。它們也具有共同的超微結(jié)構(gòu)特征和共同的X-射線衍射和紅外光譜。
淀粉樣相關(guān)疾病既可局限于一種器官，也可以散布到數(shù)種器官。前一種情形稱為“局部性淀粉樣變性”，而后一種稱為“系統(tǒng)性淀粉樣變性”。
一些淀粉樣病可以是原發(fā)性的，但大多數(shù)這類病都是作為早期存在的疾病的并發(fā)癥出現(xiàn)的。例如，原發(fā)性淀粉樣變性(AL淀粉樣蛋白)可以在無(wú)任何其它病癥的情況下發(fā)生或者可以繼漿細(xì)胞惡液質(zhì)或多發(fā)性骨髓瘤之后發(fā)生。
繼發(fā)性淀粉樣變性通常伴隨慢性感染(如肺結(jié)核)或慢性炎癥(如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)并發(fā)。家族性形式的繼發(fā)性淀粉樣變性也可見于其它類型的家族性淀粉樣變性，例如家族性地中海熱(FMF)。這種家族性淀粉樣變性在遺傳學(xué)上是可遺傳的，并且發(fā)生于特定的人群。在原發(fā)性和繼發(fā)性這兩類淀粉樣變性中，在數(shù)種器官中發(fā)生沉積，因此被認(rèn)為是系統(tǒng)性淀粉樣病。
“局部性淀粉樣變性”是指那些往往只累及單個(gè)器官系統(tǒng)的淀粉樣變性。不同的淀粉樣蛋白也是以沉積物中存在的蛋白類型來(lái)表征的。例如，神經(jīng)變性疾病譬如癢病、牛海綿狀腦病炎、克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob病)等疾病的特征是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中出現(xiàn)并蓄積有抗蛋白酶型朊病毒蛋白(稱為AScr或PrP-27)。同樣，阿耳茨海默氏病(另一種神經(jīng)變性疾病)的特征為神經(jīng)炎斑和神經(jīng)原纖維纏結(jié)。在這種情況下，軟組織和血管中的淀粉樣斑是由原纖維Aβ淀粉樣蛋白沉積而形成的。其它疾病例如成人發(fā)作型糖尿病(II型糖尿病)是以淀粉質(zhì)在胰腺中的局部蓄積為特征的。
一旦形成這些淀粉樣蛋白，則目前還沒有已知的、廣泛認(rèn)可的療法或治療物可以在原位明顯消溶淀粉樣沉積物，防止進(jìn)一步的淀粉樣沉積或防止淀粉樣沉積的發(fā)生。
每種淀粉樣形成蛋白都具有發(fā)生構(gòu)象轉(zhuǎn)變和組構(gòu)成多個(gè)β-片層以及形成可在細(xì)胞外或細(xì)胞內(nèi)沉積的不溶性原纖維的能力。雖然每種淀粉樣形成蛋白的氨基酸序列是不同的，但它們都具有形成原纖維和與其他元件如蛋白多糖、淀粉樣P物質(zhì)和補(bǔ)體組分結(jié)合的共同性質(zhì)。此外，每種淀粉樣形成蛋白的氨基酸序列盡管不同，但是它們表現(xiàn)出一些相似性，例如具有能與蛋白聚糖上的粘多糖(GAG)結(jié)合的區(qū)域(稱為GAG結(jié)合位點(diǎn))，以及其他可以促進(jìn)β-片層的區(qū)域。蛋白聚糖是具有各種大小和結(jié)構(gòu)的大分子，分布在身體的幾乎所有部位。它們可見于細(xì)胞內(nèi)小室內(nèi)、細(xì)胞表面上，以及作為細(xì)胞外基質(zhì)的一部分。所有蛋白聚糖的基本結(jié)構(gòu)都是由核心蛋白和至少一條(通常為多條)連接在核心蛋白上的多糖鏈(GAGs)組成。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)很多不同的GAGs，包括硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸角質(zhì)素、肝素和透明質(zhì)酸糖胺多糖。
在特定情況下，淀粉樣原纖維一旦沉積，則可能對(duì)周圍細(xì)胞產(chǎn)生毒性。例如，已經(jīng)證明形成老年斑的Aβ原纖維與阿耳茨海默氏病患者中的死亡神經(jīng)元細(xì)胞、營(yíng)養(yǎng)不良的軸突、星形細(xì)胞增多和微神經(jīng)膠質(zhì)過多癥有關(guān)。體外試驗(yàn)顯示，寡聚(可溶的)以及纖維狀的Aβ肽能夠引發(fā)小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(腦聚噬細(xì)胞)的活化過程，這樣就可以解釋阿耳茨海默氏病患者腦中發(fā)現(xiàn)存在微神經(jīng)膠質(zhì)過多癥和腦炎癥的原因。寡聚和纖維狀A(yù)β肽也可以在體外誘導(dǎo)神經(jīng)元細(xì)胞死亡。參見，例如，MP Lambert等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA95，6448-53(1998)。
已經(jīng)證明，在可見于II型糖尿病患者的另一種淀粉樣變性中，當(dāng)?shù)矸蹣由尚缘鞍?amyloidogenic protein)IAPP形成寡聚形式或原纖維形式時(shí)可體外誘導(dǎo)β胰島細(xì)胞毒性。因此，IAPP原纖維在II型糖尿病患者胰腺中的出現(xiàn)會(huì)引起β胰島細(xì)胞(Langerhans)損失和器官功能紊亂，從而導(dǎo)致胰島素血癥。
另一類淀粉樣變性與β2微球蛋白有關(guān)，并且可見于長(zhǎng)期血液透析患者。接受長(zhǎng)期血液透析的患者在腕管和一些關(guān)節(jié)的膠原富集組織中形成β2-微球蛋白原纖維。這樣會(huì)造成嚴(yán)重的疼痛、關(guān)節(jié)僵硬和腫脹。
淀粉樣變性也是阿耳茨海默氏病的特征。阿耳茨海默氏病是一種能引起進(jìn)行性記憶損傷的腦毀壞性疾病，長(zhǎng)期下去會(huì)導(dǎo)致癡呆、生理缺陷和死亡。隨著發(fā)達(dá)國(guó)家的人口逐漸老齡化，阿耳茨海默氏患者數(shù)量將達(dá)到流行性比例。
阿耳茨海默氏病患者在成人期發(fā)展為進(jìn)行性癡呆，并伴有三種主要的大腦結(jié)構(gòu)變化大腦多處神經(jīng)元彌散性損失；被稱為神經(jīng)原纖維纏結(jié)的細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)沉積物蓄積；和被稱為淀粉樣或老年性斑的細(xì)胞外蛋白質(zhì)沉積物的蓄積。其中所述淀粉樣或衰老性斑被畸形神經(jīng)末端(營(yíng)養(yǎng)不良神經(jīng)元)和活化小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增多和星形細(xì)胞增多)所包圍。這些淀粉樣斑的主要組成是淀粉樣蛋白-β肽(Aβ)，即通過裂解β-淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)而產(chǎn)生的39-43氨基酸肽。人們已經(jīng)對(duì)阿耳茨海默氏病中Aβ沉積物的相關(guān)性進(jìn)行了廣泛研究，例如，參見Selkoe，Trends in Cell Biology 8，447-453(1998)。Aβ是由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(“ER”)、Golgi裝置、內(nèi)體-溶酶體途徑中淀粉樣蛋白前體蛋白(“APP”)的代謝加工過程自然產(chǎn)生，并且大多數(shù)通常分泌成40(“Aβ1-40)”)或42(“Aβ1-42”)氨基酸肽(Selkoe，Annu.Rev.CellBiol.10，373-403(1994))。Aβ的作用是阿耳茨海默氏病的主要病因得到下列證據(jù)的支持阿耳茨海默氏病衰老斑中存在細(xì)胞外Aβ沉積物、庇護(hù)突變性阿耳茨海默氏病相關(guān)締合基因如淀粉樣蛋白前體蛋白、早老蛋白I和早老蛋白II的細(xì)胞中Aβ的產(chǎn)生增多、以及細(xì)胞外可溶性(低聚)或纖維狀A(yù)β對(duì)培養(yǎng)基中細(xì)胞具有毒性。參見，例如，Gervais，Eur.Biopharm.Review，40-42(2001年秋天)；May，DDT 6，459-62(2001)。雖然針對(duì)阿耳茨海默氏病存在對(duì)癥療法，但目前還不能預(yù)防或治愈這種疾病。
阿耳茨海默氏病的特征是存在彌散性和神經(jīng)炎性斑、腦血管病和神經(jīng)原纖維纏結(jié)。據(jù)信，所述斑和血管淀粉樣蛋白是由不溶性Aβ淀粉樣蛋白的沉積而形成，它們可稱作是彌散性或原纖維性的?？扇苄缘途跘β和原纖維Aβ?lián)J(rèn)為也是神經(jīng)毒性和炎癥性的。
另一類淀粉樣變性是腦淀粉樣血管病(CAA)。CAA是淀粉樣蛋白-β原纖維在柔腦膜和皮層的動(dòng)脈壁、小動(dòng)脈和靜脈中的特異性沉積。通常伴有阿耳茨海默氏病、Down綜合癥和正常老化，以及與中風(fēng)和癡呆癥有關(guān)的各種家族性病癥(參見Frangione等，AmyloidJ.Protein Folding Disord.8，Suppl.1，36-42(2001))。
目前，治療β淀粉樣病的可用療法幾乎全部是對(duì)癥性的，只提供暫時(shí)性的或部分臨床效果。雖然已經(jīng)描述了一些藥劑能夠提供部分的癥狀緩解作用，但目前仍然沒有綜合性的藥理學(xué)療法可用于預(yù)防或治療例如阿耳茨海默氏病。
發(fā)明概述 本發(fā)明涉及某些化合物在治療淀粉樣相關(guān)疾病中的用途。具體講，本發(fā)明涉及治療或預(yù)防患者的淀粉樣相關(guān)疾病的方法，包括對(duì)患者給藥治療量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明也涉及本文所描述的本發(fā)明的各種新化合物。本發(fā)明中使用的化合物為下列各式的化合物，當(dāng)給藥它們時(shí)，可減少或抑制淀粉樣原纖維的生成、器官特異性的功能紊亂(例如神經(jīng)變性)、或細(xì)胞毒性。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明至少部分涉及式I化合物或其可藥用鹽
其中 R1為取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基； R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)(即，如同前藥中的一樣，見本文中其它部分所述)；和 L1和L2各自獨(dú)立地為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在，條件是當(dāng)R1為烷基時(shí)，L1是不存在的。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明至少部分涉及式II化合物或其可藥用鹽
其中 R1為取代或未取代的單環(huán)、二環(huán)、三環(huán)、或苯并雜環(huán)基團(tuán)或取代或未取代的C2-C10烷基； R2為氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基，或者與R1連接形成雜環(huán)； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯部分； m是0或1； n是1、2、3或4； L是取代或未取代的C1-C3烷基或或者不存在， 條件是當(dāng)R1為烷基時(shí)，L是不存在的。
在再一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明至少部分涉及式III化合物及其可藥用的鹽和酯
其中 A是氮或氧； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； n是0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； R3，R3a，R4，R4a，R5，R5a，R6，R6a，R7和R7a各自獨(dú)立地為氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，烷基羰基，芳基羰基，烷氧基羰基，氰基，鹵素，氨基，四唑基，或位于相鄰環(huán)原子上的兩個(gè)R基團(tuán)與相應(yīng)的環(huán)原子一起形成雙鍵，條件是R3，R3a，R4，R4a，R5，R5a，R6，R6a，R7和R7a中的一個(gè)為式IIIa部分
其中 m是0，1，2，3，或4； RA’，RB’，Rc’，RD’，和RE’獨(dú)立地選自氫，鹵素，羥基，烷基，烷氧基，鹵代烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，氰基，噻唑基，三唑基，咪唑基，四唑基，苯并噻唑基，和苯并咪唑基； 條件是所述化合物不能是3-(4-苯基-1，2，3，6-四氫-1-吡啶基)-1-丙烷磺酸。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明至少部分涉及式IV化合物及其可藥用的鹽和酯
其中 A是氮或氧； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； n是0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； R4，R4a，R5，R5a，R6，R6a，R7和R7a各自獨(dú)立地為氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，烷基羰基，芳基羰基，烷氧基羰基，氰基，鹵素，氨基，四唑基，R4和R5與它們所連接的環(huán)原子一起形成雙鍵，或者R6和R7與它們所連接的環(huán)原子一起形成雙鍵； m是0，1，2，3，或4； R8，R9，R10，R11，和R12獨(dú)立地選自氫，鹵素，羥基，烷基，烷氧基，鹵代烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，氰基，噻唑基，三唑基，咪唑基，四唑基，苯并噻唑基，和苯并咪唑基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括式V化合物及其可藥用的鹽和前藥
其中 A是氮或氧； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； n是0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； aa是天然或非天然氨基酸的殘基； m是0，1，2，或3； R14是氫或保護(hù)基； R15是氫，烷基或芳基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括式VI化合物或其可藥用鹽
其中 n是1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； A是氧或氮； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； R19是氫，烷基或芳基； Y1是氧，硫，或氮； Y2是碳，氮或氧； R20是氫，烷基，氨基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基或苯并咪唑基； R21是氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基，或當(dāng)Y2為氧時(shí)其不存在； R22是氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基；或者當(dāng)Y1為氮時(shí)，R22是氫，羥基，烷氧基或芳氧基；或者當(dāng)Y1為氧或硫時(shí)，R22不存在；或者當(dāng)Y1為氮時(shí)，R22和R21可連接形成環(huán)狀部分； R23是氫，烷基，氨基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基，或當(dāng)Y2為氮或氧時(shí)其不存在。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括式VII化合物及其可藥用鹽
其中 n是2，3，或4； A是氧或氮； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； G為直接鍵或氧、氮或硫； z為0，1，2，3，4或5； m為0或1； R24選自氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，芳?；?，烷基羰基，氨基烷基羰基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基和苯并咪唑基； 每個(gè)R25獨(dú)立地選自氫，鹵素，氰基，羥基，烷氧基，巰基，氨基，硝基，烷基，芳基，碳環(huán)或雜環(huán)。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括下式化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 R1為氫，取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基； R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)； L1為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在； B為C1-C5烷基，鏈烯基，或炔基，當(dāng)M不存在時(shí)，其任選與W稠合； M為共價(jià)鍵，氨基，C1-C6烷基，鏈烯基，炔基，羧基，氧基，酰胺(amide)，酯，硫醚，硫酯或不存在； W是取代或未取代的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)、雜環(huán)基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基或苯并咪唑基；和 v為1，2，3，4，5，或6； 條件是當(dāng)Y為甲基，R1和R2均為氫，Y為SO3-X+，M為共價(jià)鍵時(shí)，B不能是CH2-CH(M-W)-CH2。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明至少部分涉及式IX化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 R1為取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基； R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基； R3是氫或保護(hù)基； aa為天然或非天然氨基酸的殘基； L3為共價(jià)鍵，氨基，C1-C6烷基，鏈烯基，炔基，羧基，酰胺，氨基烷基，醚，酯，硫醚，硫酯或不存在； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；并且 L1和L2各自獨(dú)立地為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明至少部分涉及式(X)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Ra為氫、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基、烷氧基羰基、或氨基羰基； Rb和Rc各自獨(dú)立選自氫、取代或未取代的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、CONH2，或者Rb、Rc與它們所連接的碳原子可以形成取代或未取代的4-12元環(huán)或稠合環(huán)系的環(huán)狀結(jié)構(gòu)；并且 X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還至少部分涉及式(XI)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Rd是H或烷基； Re和Rf各自獨(dú)立地為氫，C1-C6烷基，或者Re和Rf與它們所連接的碳原子一起形成3-12元的環(huán)； 每次出現(xiàn)時(shí)Rg獨(dú)立選自氫，烷基，烷氧基，鹵素，NO2，和烷基-SO2； q為1，2，3，4或5； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
Ar為芳基或雜芳基；和 Z為-(CH2)0-3-，-(CHOH)-，(CH2)1-3O(CH2)1-3，或羰基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明也至少部分涉及式(XII)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Rh是氫，芐基，芳基-烷基，芳基，或烷基； Ri、Rj、Rk、Rm、Rn和Ro各自獨(dú)立為氫、取代或未取代的芳基、取代或未取代的芐基、烷基、鏈烯基、碳環(huán)基、雜環(huán)基，不存在或者一起可以連接成環(huán)狀結(jié)構(gòu)； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；和 t1和t2各自為單鍵或雙鍵，條件是t1和t2不能同時(shí)為雙鍵。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及式(XIII)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 n1為0，1，2或3； P為共價(jià)鍵，烷基，烷氧基，氨基，烷基氨基，硫，或烷硫基； X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；和 Rp為天然或非天然氨基酸的殘基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括式(XIV)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 n2為0，1，2，或3，其選擇應(yīng)使得SO3-X+基團(tuán)與環(huán)中氮原子之間存在三個(gè)碳原子； X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)； Rs為氫或當(dāng)n2為3時(shí)，Rs為(CH2)3-SO3-X+； Rq和Rr各自獨(dú)立選自氫或烷基。
在再一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明也至少部分涉及式(XV)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Rt為氫，烷基或芳基； Ru和Rv在每次出現(xiàn)時(shí)各自獨(dú)立地選自氫，芳基，芐基，烷基，鏈烯基，碳環(huán)基，雜環(huán)基，或者鄰近碳原子上的兩個(gè)Ru或Rv基團(tuán)可以形成雙鍵，或者與它們所連接的碳原子一起形成碳環(huán)或雜環(huán)； n3為4，5，6，或7；和 X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本文所公開的化合物能夠防止或抑制淀粉樣蛋白裝配到不溶原纖維中(這些原纖維在體內(nèi)沉積在各種器官中)，或者它們能促進(jìn)預(yù)先形成的沉積物的清除或減緩在已含有沉積物的患者體中的沉積速率。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物也可以防止可溶性低聚形式或其原纖維形式的淀粉樣蛋白結(jié)合或粘附到細(xì)胞表面上，從而造成細(xì)胞損傷或毒性。在再一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以阻斷淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性或巨噬細(xì)胞活化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物能阻斷淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性或小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的活化。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物能夠保護(hù)細(xì)胞免受淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的B胰島細(xì)胞的細(xì)胞毒性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物能增大從特定器官如大腦中的清除率，或者它們通過防止在靶器官中形成淀粉樣原纖維的方式降低淀粉樣蛋白的濃度。
可以治療性或預(yù)防性地給藥本發(fā)明的化合物，用于治療與淀粉樣原纖維的形成、聚集或沉積相關(guān)的疾病。本發(fā)明化合物利用以下任何一種機(jī)制(所列機(jī)制是舉例性而非限制性的)可起到緩解淀粉樣相關(guān)疾病進(jìn)程的作用減緩淀粉樣原纖維的形成或沉積的速率；減輕淀粉樣蛋白沉積的程度；抑制、降低或防止淀粉樣原纖維的形成；抑制淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的神經(jīng)變性或細(xì)胞毒性；抑制淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的炎癥；增強(qiáng)淀粉樣蛋白的清除；或促進(jìn)淀粉樣蛋白在其構(gòu)成原纖維之前的降解。
可以治療性或預(yù)防性地給藥本發(fā)明化合物，用于治療與淀粉樣蛋白-β原纖維的形成、聚集或沉積相關(guān)的疾病。本發(fā)明化合物利用以下任何一種機(jī)制(所列機(jī)制是舉例性而非限制性的)可起到緩解淀粉樣蛋白-β相關(guān)疾病進(jìn)程的作用減緩淀粉樣蛋白-β原纖維的形成或沉積的速率；減輕淀粉樣蛋白-β沉積的程度；抑制、降低或防止淀粉樣蛋白-β原纖維的形成；抑制淀粉樣蛋白-β誘導(dǎo)的神經(jīng)變性或細(xì)胞毒性；抑制淀粉樣蛋白-β誘導(dǎo)的炎癥；增強(qiáng)淀粉樣蛋白-β從大腦中的清除；或促進(jìn)淀粉樣蛋白-β在其構(gòu)成原纖維之前的降解。
本發(fā)明治療化合物在進(jìn)入大腦(透過血腦屏障)或從外周釋出之后能有效地控制淀粉樣蛋白-β沉積。當(dāng)從外周起作用時(shí)，化合物可改變大腦和血漿之間Aβ的平衡，從而有利于Aβ從大腦中清除?；衔镆部梢栽黾由窠?jīng)元Aβ的分解代謝和改變從大腦中清除的速率。增加Aβ從大腦的清除將會(huì)降低大腦Aβ和大腦脊髓液(CSF)的濃度，從而便于Aβ沉積減少?；蛘撸瑵B入大腦的化合物通過直接作用于大腦Aβ，例如，通過使其保持為非原纖維形式、促進(jìn)其從大腦的清除、或減慢APP進(jìn)程的方式可以控制沉積。這些化合物也可以防止大腦中的Aβ與細(xì)胞表面相互作用，從而防止神經(jīng)毒性、神經(jīng)變性或炎癥。它們也可以降低活化的小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生Aβ。本發(fā)明化合物還可以增加巨噬細(xì)胞或神經(jīng)元細(xì)胞所致的降解。
在一個(gè)實(shí)施方案中，這種方法用于治療阿耳茨海默氏病(例如散發(fā)性的、家族性的、或早期的AD)。還可以預(yù)防性或治療性地使用這種方法來(lái)治療出現(xiàn)淀粉樣蛋白-β沉淀的其他臨床疾病，例如用于唐氏(Down)綜合癥個(gè)體和患有腦淀粉樣血管病(“CAA”)或遺傳性腦出血的患者。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，該方法用于治療輕度認(rèn)知損傷。輕度認(rèn)知損傷(“MCI”)是一種以認(rèn)識(shí)能力處于輕度但可測(cè)量的損傷狀態(tài)為特征的病癥，與癡呆癥的存在不一定有關(guān)。MCI通常但并不一定發(fā)生在阿耳茨海默氏病之前。
另外，肌纖維中APP和淀粉樣-β蛋白的異常蓄積與散發(fā)性包涵體肌炎(IBM)的病理學(xué)有關(guān)(Askanas等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93，1314-1319(1996)；Askanas等，Current Opinion in Rheumatology 7，486-496(1995))。因此，本發(fā)明的化合物可以預(yù)防性或治療性地用于治療其中淀粉樣-β蛋白在非神經(jīng)區(qū)域異常沉積所致的疾病，例如通過將本發(fā)明化合物傳遞到肌肉纖維來(lái)治療IBM。
此外，已經(jīng)證明，Aβ與稱為脈絡(luò)膜疣(drusen)的異常細(xì)胞外沉積物有關(guān)，這種沉積物沿著患有與年齡有關(guān)的黃斑變性(AMD)個(gè)體的視網(wǎng)膜色素上皮基底表面積聚。AMD是老年人不可逆性失明的病因。據(jù)信，Aβ沉積物是局部炎癥行為的重要組分，而這種炎癥行為會(huì)對(duì)視網(wǎng)膜黃斑變性萎縮、脈絡(luò)膜疣的生物產(chǎn)生、和AMD的發(fā)病機(jī)理產(chǎn)生影響(Johnson等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99(18)，11830-5(2002))。
因此，本發(fā)明涉及式I-XV化合物或本文以其它方式描述的化合物在預(yù)防或治療淀粉樣相關(guān)疾病中的用途，所述疾病尤其包括阿耳茨海默氏病、大腦淀粉樣血管病、輕度認(rèn)知損傷、包涵體肌炎、唐氏綜合癥、黃斑變性、以及其它種類的淀粉樣變性，像IAPP相關(guān)性淀粉樣變性(例如糖尿病)、原發(fā)性(AL)淀粉樣變性、繼發(fā)性(AA)淀粉樣變性和β2微球蛋白相關(guān)性(與透析有關(guān)的)淀粉樣變性。
在與淀粉樣變性(IAPP)有關(guān)的II型糖尿病中，當(dāng)?shù)矸蹣由尚缘鞍?amyloidogenic protein)IAPP形成寡聚形式或原纖維形式時(shí)會(huì)誘發(fā)β胰島細(xì)胞毒性。因此，IAPP原纖維在II型糖尿病患者胰腺中的出現(xiàn)會(huì)引起β胰島細(xì)胞(Langerhans)損失和器官功能紊亂，從而導(dǎo)致胰島素血癥。
原發(fā)性淀粉樣變性(AL淀粉樣)通常與漿細(xì)胞性惡液質(zhì)和多發(fā)性骨髓瘤有關(guān)。也可以特發(fā)病的形式出現(xiàn)。
繼發(fā)性(AA)淀粉樣變性通常與慢性感染(如肺結(jié)核)或慢性炎癥(如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)有關(guān)。家族性形式的繼發(fā)性淀粉樣變性也可見于家族性地中海熱(FMF)。
β2微球蛋白相關(guān)性(與透析有關(guān)的)淀粉樣變性見于長(zhǎng)期血液透析患者。接受長(zhǎng)期血液透析的患者在腕管和一些關(guān)節(jié)的膠原富集組織中形成β2-微球蛋白原纖維。這樣造成嚴(yán)重的疼痛、關(guān)節(jié)僵硬和腫脹。這些沉積物是由于不能維持透析患者血漿中低濃度的β2M所造成的。增加β2M蛋白血漿濃度將會(huì)引起結(jié)構(gòu)變化，從而使得改性的β2M以不溶原纖維的形式沉積在關(guān)節(jié)中。
發(fā)明詳述 本發(fā)明涉及式I-XV的化合物或本文以其它方式描述的化合物在治療淀粉樣相關(guān)疾病中的用途。為方便起見，本文所述的一些術(shù)語(yǔ)的定義解釋如下。
淀粉樣相關(guān)疾病 AA(反應(yīng)性)淀粉樣變性 通常，AA淀粉樣變性是能誘發(fā)持續(xù)性急性期反應(yīng)的多種疾病的一種表現(xiàn)形式。這類疾病包括慢性炎癥性疾病、慢性局部或全身性微生物感染和惡性腫瘤。反應(yīng)性或繼發(fā)性(AA)淀粉樣變性的最常見形式可以認(rèn)為是由長(zhǎng)期炎性癥狀所造成的。例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或家族性地中海熱(一種遺傳性疾病)患者可以發(fā)展成AA淀粉樣變性。術(shù)語(yǔ)“AA淀粉樣變性”和“繼發(fā)性(AA)淀粉樣變性”可以互換使用。
AA原纖維通常是由血清淀粉樣A蛋白(ApoSAA)的蛋白質(zhì)裂解所形成的8000道爾頓片段(AA肽或蛋白質(zhì))組成，血清淀粉樣A蛋白是一種對(duì)應(yīng)于諸如IL-1、IL-6和TNF這類細(xì)胞因子，主要在肝細(xì)胞中合成的循環(huán)載脂蛋白。一旦被分泌，ApoSAA就與HDL復(fù)合。AA原纖維的沉積物可在身體內(nèi)廣泛分布，優(yōu)先分布在實(shí)質(zhì)器官中。腎臟是常見的沉積部位，并且也可以影響肝臟和脾臟。沉積也可發(fā)生于心臟、胃腸道和皮膚。
能導(dǎo)致AA淀粉樣變性進(jìn)展的潛在疾病包括但不限于炎癥性疾病，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、少年慢性關(guān)節(jié)炎、僵硬性脊椎炎，牛皮癬，牛皮癬性關(guān)節(jié)病，瑞特氏綜合癥，成人斯蒂爾病，貝切特氏綜合癥和克羅恩氏病。AA沉積物也產(chǎn)生于慢性微生物感染，例如麻風(fēng)病、結(jié)核、支氣管擴(kuò)張、久臥性潰瘍、慢性腎盂腎炎、骨髓炎和惠普爾病。某些惡性腫瘤也會(huì)產(chǎn)生AA原纖維淀粉樣沉積物。這些包括如霍奇金淋巴瘤、腎癌、腸癌、肺癌和生殖泌尿道癌、基底細(xì)胞癌和多細(xì)胞白血病這類疾病。與AA淀粉樣變性有關(guān)的其它潛在疾病為Castleman病和Schnitzler綜合癥。
AL淀粉樣變性(原發(fā)性淀粉樣變性) AL淀粉樣沉積通常與幾乎所有B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)的惡液質(zhì)有關(guān)，從漿細(xì)胞惡性腫瘤(多發(fā)性骨髓瘤)到良性的單克隆γ-球蛋白病。有時(shí)，淀粉樣沉積物的存在可能是潛在的惡液質(zhì)的主要指標(biāo)。AL淀粉樣變性的詳細(xì)描述也可以參見Current Drug Targets，2004，5159-171。
AL淀粉樣沉積物的原纖維由單克隆免疫球蛋白輕鏈或其片段組成。更具體地說，這些片段來(lái)源于輕鏈(κ和λ)的N-端區(qū)域，并且包含其全部或部分的可變(VL)域。沉積物通常存在于間質(zhì)組織，引發(fā)外周和自發(fā)性神經(jīng)病、脈管綜合癥、巨舌癥、限制性心肌病、大關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)炎、免疫性惡液質(zhì)、骨髓瘤以及隱性惡液質(zhì)。但應(yīng)當(dāng)指出的是其可能牽涉到幾乎所有的組織，特別是內(nèi)臟器官如腎臟、肝臟、脾臟和心臟。
遺傳性系統(tǒng)性淀粉樣變性 遺傳性系統(tǒng)性淀粉樣變性存在多種形式。雖然它們是相對(duì)少見的病癥，但是由于癥狀在成人期發(fā)作以及它們的遺傳圖案(通常呈染色體顯性)，導(dǎo)致這類病癥在總?cè)丝谥谐掷m(xù)存在。一般來(lái)講，這類綜合癥可歸因于導(dǎo)致產(chǎn)生變異的淀粉樣生成肽或蛋白質(zhì)的前體蛋白中的位點(diǎn)突變。表1概括了舉例形式的這些疾病的原纖維組成。
表1-示例性淀粉樣相關(guān)疾病的原纖維組成 數(shù)據(jù)來(lái)源于Tan SY，Pepys MN.淀粉樣變性，Histopathology，25(5)，403-414(1994年11月)， WHO/IUIS命名小組委員會(huì)，淀粉樣蛋白和淀粉樣變性的命名，Bulletin of World Health Organisation 1993；7110508；和Merlini等，Clin Chem Lab Med 2001；39(11)1065-75。
表1提供的資料是舉例性的，而非對(duì)本發(fā)明范圍的限制。例如，已經(jīng)描述了超過40個(gè)轉(zhuǎn)甲狀腺素基因的獨(dú)立的位點(diǎn)突變，在臨床上它們?nèi)紩?huì)引起相似的家族性淀粉樣多神經(jīng)病。
一般來(lái)講，任何遺傳性淀粉樣疾病也可以散發(fā)性發(fā)生，并且遺傳性和散發(fā)性形式的疾病都存在相同的淀粉樣特征。例如，最流行形式的繼發(fā)性AA淀粉樣變性例如由于進(jìn)行中的炎癥而散發(fā)性發(fā)生，且與家族性地中海熱無(wú)關(guān)。因此，下面關(guān)于遺傳性淀粉樣疾病的通論也適用于散發(fā)性淀粉樣變性。
轉(zhuǎn)甲狀腺素(TTR)是14千道爾頓蛋白，有時(shí)可被稱為前白蛋白。它是由肝臟和脈絡(luò)叢產(chǎn)生的，其功能為運(yùn)輸甲狀腺激素和維生素A。至少50種蛋白質(zhì)變體形式(各自以單一氨基酸變化為特征)是各種形式的家族性淀粉樣多神經(jīng)病的產(chǎn)生原因。例如，在丹麥患者中，將55位的亮氨酸置換為脯氨酸會(huì)導(dǎo)致特殊的進(jìn)行性神經(jīng)??；將111位的亮氨酸置換為甲硫氨酸會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的心臟病。
從系統(tǒng)性淀粉樣變性患者的心臟組織分離的淀粉樣蛋白沉積物揭示了這種沉積物是由TTR及其片段的非均勻混合物組成，該混合物統(tǒng)稱為ATTR，其全長(zhǎng)序列已經(jīng)被表征。可按照本領(lǐng)域已知的方法從這種斑塊中提取ATTR原纖維組分，并測(cè)定它們的結(jié)構(gòu)和序列(例如，Gustavsson，A.等，Laboratory Invest.73703-708，1995；Kametani，F(xiàn).等，Biochem.Biophys.Res.Commun.125622-628，1984；Pras，M.等，PNAS 80539-42，1983)。
在分子載脂蛋白A1中具有點(diǎn)突變(例如，Gly→Arg26；Trp→Arg50；Leu→Arg60)的人群表現(xiàn)出以蛋白載脂蛋白AI或其片段(AapoAI)的沉積物為特征的淀粉樣變性形式(“奧斯特塔格型”)。這些患者具有低水平的高密度脂蛋白(HDL)，并會(huì)帶來(lái)外周神經(jīng)病或腎衰竭。
溶菌酶α鏈中的突變(例如Ile→Thr56或Asp→His57)是在英國(guó)家庭中報(bào)道的奧斯特塔格型非神經(jīng)病性遺傳性淀粉樣蛋白的另一種形式的基礎(chǔ)。這里，突變?nèi)芫傅鞍?Alys)的原纖維發(fā)生沉積，患者通常表現(xiàn)出腎功能受損。與本文中描述的大多數(shù)原纖維形式蛋白質(zhì)不同，這種蛋白質(zhì)常以整體(非片段化)的形式存在(Benson，M.D.等，CIBA Fdn.Symp.199104-131，1996)。
免疫球蛋白輕鏈往往趨于形成各種形態(tài)的聚集體，包括纖維狀(例如AL淀粉樣變性和AH淀粉樣變性)，顆粒狀(例如輕鏈沉積疾病(LCDD)、重鏈沉積疾病(HCDD)，和輕-重鏈沉積疾病(LHCDD))，結(jié)晶狀(例如，獲得性Farcon綜合癥)，和微管狀(例如，冷沉球蛋白血癥)。AL和AH淀粉樣變性分別以形成免疫球蛋白輕鏈和重鏈的不溶性原纖維，和/或它們的片段為標(biāo)志。在AL原纖維中發(fā)現(xiàn)λ鏈如λVI鏈(λ6鏈)的濃度高于κ鏈。λIII鏈的濃度也略微增高。Merlini等，CLINCHEM LAB MED 39(11)1065-75(2001)。重鏈淀粉樣變性(AH)通常是以IgG1小類的γ鏈淀粉樣蛋白的聚集體為特征。Eulitz等，PROCNATL ACAD SCI USA 876542-46(1990)。
比較淀粉樣生成性蛋白和非淀粉樣生成性蛋白的輕鏈表明，前者可包括似乎能動(dòng)搖蛋白質(zhì)的折疊和促進(jìn)聚集的置換子或替換子。AL和LCDD由于它們的群體單克隆輕鏈相對(duì)較小而區(qū)別于其它淀粉樣疾病，其中所述輕鏈通過抗體產(chǎn)生B細(xì)胞的增生性擴(kuò)展而生成。AL聚集體通常是λ鏈的良序原纖維。在一些情況κIV中，LCDD聚集體是κ和λ兩種鏈(主要是κ鏈)的相對(duì)為無(wú)定形的聚集體。Bellotti等，JOUENAL OF STRUCTURAL BIOLOGY 13280-89(2000)。比較AH淀粉樣變性患者中的淀粉樣生成和非淀粉樣生成性蛋白重鏈，結(jié)果表明組分減少和/或改變。Eulitz等，PROC NATL ACAD SCI USA 876542-46(1990)(致病重鏈的特征在于與非淀粉樣生成性蛋白重鏈相比具有明顯低的分子量)；和Solomon等，AM J HEMAT 45(2)171-6(1994)(淀粉樣生成重鏈的特征為僅僅由非淀粉樣生成重鏈的VH-D部分組成)。
因此，檢測(cè)和監(jiān)測(cè)治療患有AL、LCDD、AH等或具有這種風(fēng)險(xiǎn)的患者的有效方法包括但不限于免疫測(cè)定血漿或尿，用于確定淀粉樣生成性蛋白輕鏈或重鏈如淀粉樣蛋白λ、淀粉樣蛋白κ、淀粉樣蛋白κIV、淀粉樣蛋白γ或淀粉樣蛋白γ1的存在或沉積減少。
腦淀粉樣變性 腦部最常見類型的淀粉樣蛋白主要由Aβ肽原纖維組成，結(jié)果導(dǎo)致伴有散發(fā)性(非遺傳性)阿爾茨海默氏病的癡呆癥。事實(shí)上，散發(fā)性阿爾茨海默氏病的發(fā)生率大大超過遺傳性的形式。然而，這兩種類型中形成性蝕斑的原纖維肽卻非常相似。腦淀粉樣變性包括其中病原體為淀粉樣蛋白的大腦(包括其組成部分)的結(jié)構(gòu)或功能性疾病、病癥、病狀、及其他異常。在淀粉樣相關(guān)疾病中感染的腦區(qū)可以是包括維管結(jié)構(gòu)的基質(zhì)、或包括功能或組織區(qū)域的軟組織、或神經(jīng)元本身?；颊卟槐亟邮芫唧w確認(rèn)的淀粉樣疾病的確定性診斷。術(shù)語(yǔ)“淀粉樣相關(guān)疾病”包括腦淀粉樣變性。
淀粉樣蛋白-β肽(“Aβ”)是一種從被稱為β淀粉樣前體蛋白(“βAPP”)的大蛋白質(zhì)經(jīng)蛋白質(zhì)水解作用產(chǎn)生得到的39-43個(gè)氨基酸的肽。βAPP中的突變引發(fā)遺傳性的阿爾茨海默氏病、唐氏綜合癥、大腦淀粉樣血管病、和老年性癡呆，其特征在于如下文進(jìn)一步具體描述的Aβ原纖維及其他組分組成的蝕斑大腦沉積物。已知的與阿爾茨海默氏病相關(guān)的APP的突變發(fā)生在靠近β或γ分泌酶的切割位點(diǎn)附近，或在Aβ內(nèi)部。例如，在加工成Aβ過程中，位置717與APP的γ-分泌酶切割的位點(diǎn)相近，而位置670/671則接近β-分泌酶分裂的位點(diǎn)。任何這些殘基中的突變都可能會(huì)導(dǎo)致阿爾茨海默氏病，原因可能是產(chǎn)生自APP的Aβ的42/43個(gè)氨基酸形式的量的增加而造成的。家族性形式的阿爾茨海默氏病僅占患者人群的10％。大多數(shù)的阿爾茨海默氏病的發(fā)生為散發(fā)性病例，其中APP和Aβ不發(fā)生任何突變。不同長(zhǎng)度的Aβ肽的結(jié)構(gòu)和序列在本領(lǐng)域是已知的。可以根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法制造這種肽，或者按照已知的方法從大腦提取這種肽(例如，Glenner和Wong，Biochem.Biophys.Res.Comm.129，885-90(1984)；Glenner和Wong，Biochem.Biophys.Res.Comm.122，1131-35(1984))。另外，可以從商業(yè)來(lái)源獲得各種形式的肽。APP在大多數(shù)細(xì)胞中表達(dá)和不斷分解代謝。主要的分解代謝途徑看來(lái)是在Aβ序列內(nèi)通過一種被臨時(shí)稱為α-分泌酶的APP的切割，導(dǎo)致釋放出一種已知的APPsα的可溶的外功能片段。這種切割排除了Aβ肽形成的可能。相對(duì)于這種非淀粉樣變性性途徑，APP也可以分別被稱為β-和γ-分泌酶的酶在Aβ的N端或C端切割，隨后將Aβ釋放到胞外空間。到目前為止，BACE已經(jīng)被鑒定是一種β-分泌酶(Vasser等，Science286735～741，1999)并且已經(jīng)顯示早老蛋白與γ-分泌酶活性有關(guān)(De Strooper等，Nature，391，387～90(1998))。該39～43個(gè)氨基酸的Aβ肽是由β和γ分泌酶順序蛋白分解該淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)而產(chǎn)生的。盡管Aβ40是所產(chǎn)生的主要形式，但Aβ總量中的5～7％卻是以Aβ42的形式存在的(Cappai等，Int.J.Biochem.，Cell Biol.31，885～89(1999))。
Aβ肽的長(zhǎng)度能顯著地改變其生化/生理性質(zhì)。具體來(lái)說，Aβ42C端的額外兩個(gè)氨基酸是高度親水性的，由此可能提高了Aβ42的聚集的傾向性。例如Jarrett等證明，和Aβ40相比，Aβ42在體外的聚集非常迅速，這表明較長(zhǎng)的Aβ可能是一種與阿爾茨海默氏病中神經(jīng)性蝕斑的起始結(jié)晶有關(guān)的重要病理蛋白(Jarrett等，Biochemistry 32，4693～97(1993))；Jarrett等，Ann.N.Y.Acad.Sci.695，144-48(1993))。最近對(duì)特定形式的Aβ在遺傳家族性形式的阿爾茨海默氏病(“FAD”)中的貢獻(xiàn)的分析，進(jìn)一步支持了這種假說。例如連接到FAD上的APP的“倫敦”式突變形式(APP V7171)相對(duì)于Aβ40選擇性地提高了Aβ42/43的產(chǎn)生(Suzuki等，Science，264，1336～40(1994))，而APP(APPK670N/M671L)的“瑞典”式突變形式提高了Aβ40和Aβ42/43的水平(Citron等，Nature，360，672～674(1992))；Cai等，Science259，514～16，(1993))。還有，已觀察到在早老蛋白-1(“PS-1”)或早老蛋白-2(“PS-2”)基因中的FAD連接的突變將導(dǎo)致Aβ42/43而不是Aβ40的選擇性的增加(Borchelt等，Neuron 17，1005～13(1996))。這一發(fā)現(xiàn)得到如下事實(shí)的進(jìn)一步確證表達(dá)PS突變體的轉(zhuǎn)基因老鼠模型在大腦Aβ42的選擇性的提高(Borchelt，op cit.；Duff等，Neurodegeneration 5(4)，293～98(1996))。由此得出的關(guān)于阿爾茨海默氏病的病源學(xué)的假說是由于Aβ42的產(chǎn)生或釋放的增加導(dǎo)致的Aβ42大腦濃度的增加或清除率(降解或腦清除率)的降低是該疾病病理學(xué)中的一個(gè)病因性事件。
已經(jīng)鑒定出Aβ或APP基因中的多個(gè)突變部位，它們?cè)谂R床上與癡呆癥或腦出血相關(guān)。代表性的CAA病癥包括但不限于冰島型伴有淀粉樣變性的遺傳性腦出血(HCHWA-I)、HCHWA的荷蘭變種(HCHWA-D；Aβ突變)；Aβ的佛蘭德突變；Aβ的北極突變；Aβ的意大利突變；Aβ的衣阿華突變；遺傳性英國(guó)癡呆；以及遺傳性丹麥癡呆。CAA也可以是散發(fā)性的。
除另有描述外，本說明書中所使用的術(shù)語(yǔ)“β-淀粉樣蛋白”和“淀粉樣蛋白-β”等是指淀粉樣β蛋白質(zhì)或肽、淀粉樣β前體蛋白質(zhì)或肽、中間體、及其修飾體或片段。特別地，“Aβ”是指APP基因產(chǎn)物經(jīng)蛋白酶解加工所產(chǎn)生的任何肽，尤其是與淀粉樣蛋白病理學(xué)相關(guān)的肽，包括Aβ1-39、Aβ1-40、Aβ1-41、Aβ1-42、和Aβ1-43。為了命名方便，“Aβ1-42”在這里被稱為“Aβ(1-42)”或簡(jiǎn)單地稱為“Aβ42”或“Aβ42”(同樣也適合于這里所討論的任何其他淀粉樣蛋白肽)。這里所使用的術(shù)語(yǔ)“β淀粉樣蛋白”、“淀粉樣蛋白-β”和“Aβ”為同義詞。
除非另作說明，術(shù)語(yǔ)“淀粉樣蛋白”是指淀粉樣生成性蛋白質(zhì)、肽、或其片段，其可以是可溶性的(例如，單體型或寡聚型)或不溶性的(例如，具有纖絲的結(jié)構(gòu)或位于淀粉樣蛋白蝕斑中的情形)。參閱例如，MP Lambert等，Proc.Nat’l Acad.Sci.USA 95，6448-53(1998)?！暗矸蹣幼冃浴被颉暗矸蹣蛹膊　被颉暗矸蹣酉嚓P(guān)疾病”是指一種以出現(xiàn)淀粉樣纖維為特征的病理癥狀?！暗矸蹣拥鞍住笔且粋€(gè)通用術(shù)語(yǔ)，是指見于多種不同疾病中的一組不同的但特異性的蛋白質(zhì)沉積物(細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外)。盡管它們的存在形式多變，但是所有的淀粉樣沉積物都具有共同的形態(tài)學(xué)特性，可被特定的染料(例如剛果紅)染色，并且染色后在偏振光中顯示出紅綠雙折射現(xiàn)象的特征。它們還具有共同的超結(jié)構(gòu)特征或共同的X射線衍射和紅外光譜。
凝溶膠蛋白是鈣結(jié)合蛋白，它與片段和肌動(dòng)蛋白微絲結(jié)合。在蛋白質(zhì)位置187的突變(例如，Asp→Asn；Asp→Tyr)產(chǎn)生遺傳性系統(tǒng)性淀粉樣變性的形式，常見于芬蘭病人以及荷蘭和日本人種中。在患者個(gè)體中，由凝溶膠蛋白片段(Agel)形成的原纖維通常是由173-243個(gè)氨基酸組成(68kDa羧基端基片段)并且在血管和基底膜中沉積，導(dǎo)致角膜營(yíng)養(yǎng)不良和顱骨神經(jīng)病(進(jìn)而發(fā)展成外周神經(jīng)病)、貧營(yíng)養(yǎng)皮膚變化和在其他器官中的沉積(Kangas，H.等Human Mol.Genet.5(9)1237-1243，1996)。
其他的突變蛋白質(zhì)，例如突變的纖維蛋白原的α鏈(AfibA)和突變的抑半胱氨酸蛋白酶蛋白C(Acys)也形成原纖維并且產(chǎn)生特征性的遺傳性病癥。AfibA原纖維形成特征為伴有腎病的非神經(jīng)病性遺傳性淀粉樣蛋白的沉積物；Acys沉積物的特征為冰島報(bào)導(dǎo)的遺傳性大腦淀粉樣血管病(Isselbacher，Harrison’s Principles of InternalMedicine，McGraw-Hill，San Francisco，1995；Benson等)。在至少一些病理中，大腦淀粉樣血管病(CAA)患者已經(jīng)顯示出具有包含與淀粉樣β蛋白結(jié)合的抑半胱氨酸蛋白酶蛋白C的非突變形式的淀粉樣原纖維(Nagai，A.等，Molec.Chem.Neuropathol.3363-78，1998)。
現(xiàn)在認(rèn)為某些形式的朊病毒體疾病是可遺傳的，這占到了高達(dá)15％的病例，而此前曾被認(rèn)為其本質(zhì)上是非感染性的(Baldwin等，Research Advances in Alzheimer’s Disease and Related Disorders，JohnWiley and Sons，New York，1995)。在遺傳性和散發(fā)性的朊病毒體疾病中，患者出現(xiàn)由正常的朊病毒蛋白質(zhì)(PrPSc)的異常等同形式組成的蝕斑。
一種主要的突變同工型，PrPSc(也稱為Ascr)，與正常細(xì)胞蛋白質(zhì)的不同之處在于其對(duì)蛋白酶降解的耐受性、洗滌劑萃取后的不溶性、次級(jí)溶酶體中的沉積、翻譯后合成、以及高β-折疊片層含量。已經(jīng)確立了至少5種引起克雅氏癥(CJD)、格-施-沙綜合癥(GSS)和致命性家族性失眠癥(FFI)的遺傳關(guān)聯(lián)性。(Baldwin，同上)。從癢病原纖維中提取原纖維肽、測(cè)定序列和制備這種肽的方法在本領(lǐng)域是已知的(例如，Beekes，M.等，J.Gen.Virol.762567-76，1995)。
例如，GSS的一種形式與102位密碼子的PrP突變有關(guān)聯(lián)，而終腦GSS與117位密碼子的突變無(wú)關(guān)。198和217位密碼子的突變產(chǎn)生一種GSS形式，其中作為阿爾茨海默氏病特征的神經(jīng)炎蝕斑包含PrP而非Aβ肽。家族性CJD的某些形式與200和210位密碼子的突變有關(guān)聯(lián)；已經(jīng)在家族性CJD和FFI中發(fā)現(xiàn)了129和178位密碼子的突變(Baldwin，同上)。
大腦性淀粉樣變性 淀粉樣蛋白的局部沉積常發(fā)生于大腦(特別是在年長(zhǎng)的個(gè)體中)。腦部最常見類型的淀粉樣蛋白主要由Aβ肽原纖維組成，是癡呆或散發(fā)性(非遺傳性)阿爾茨海默氏病的病因。最常發(fā)生的大腦淀粉樣變性為散發(fā)性而非家族性的。例如，散發(fā)性阿爾茨海默氏病和散發(fā)性CAA的發(fā)生率遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過家族性AD和CAA。此外，無(wú)法區(qū)分疾病的散發(fā)性形式和家族性形式(它們的不同僅在于是否出現(xiàn)遺傳性基因突變)；例如，散發(fā)性和家族性Aβ中形成的臨床癥狀和淀粉樣蛋白蝕斑即便不同也非常相似的。
大腦淀粉樣血管病(CAA)是指淀粉樣原纖維特異性沉積在柔腦膜壁以及皮質(zhì)動(dòng)脈壁、微動(dòng)脈壁和靜脈壁上。它一般與阿爾茨海默氏病、唐氏綜合征和正常老化，以及各種與中風(fēng)或癡呆相關(guān)的家族性病癥有關(guān)(參閱Frangione等，AmyloidJ.Protein Folding Disor d.8，Suppl.1，36-42(2001))。CAA可以是散發(fā)性的或遺傳性的。
老年系統(tǒng)性淀粉樣變性 系統(tǒng)性的或者病灶性的淀粉樣沉積隨著年齡的增長(zhǎng)而增加。例如，野生型甲狀腺素(TTR)的原纖維通常發(fā)現(xiàn)于年長(zhǎng)個(gè)體的心臟組織中。它們可能是無(wú)癥狀、臨床上無(wú)表征的，或者可能會(huì)導(dǎo)致心力衰竭。無(wú)癥狀的原纖絲狀病灶沉積也可能發(fā)生在腦部(Aβ)、前列腺(β2微球蛋白)的淀粉樣體、關(guān)節(jié)和精囊腺中。
透析相關(guān)的淀粉樣變性(DRA) 長(zhǎng)期接受血液透析或腹膜透析的病人體中也通常會(huì)出現(xiàn)由β2微球蛋白(β2M)原纖維組成的蝕斑。β2微球蛋白是一種11.8千道爾頓的多肽并且是一種存在于所有有核細(xì)胞上的MHC I類抗原的輕鏈。在正常的情況下，除非腎功能受損，β2M通常分布在該細(xì)胞間隙中，這時(shí)β2M被傳送到組織內(nèi)，并在那里聚合形成淀粉樣原纖維。清除失敗(例如在腎功能受損的情形下)造成在腕骨通道及其他部位(主要是在關(guān)節(jié)的富膠原組織中)中沉積。與其他的原纖維蛋白質(zhì)不同，β2M分子不是通過長(zhǎng)鏈前體蛋白的裂解產(chǎn)生的，并且通常以非片段化的形式存在于原纖維中。(Benson，同上)。已經(jīng)證明該淀粉樣蛋白前體的保留和聚集是DRA最根本的主要病原性的過程。DRA的特征在于外周關(guān)節(jié)的骨關(guān)節(jié)病(例如關(guān)節(jié)僵硬、疼痛、膨脹等)。組織中β2M的同工型、糖化的β2M、或β2M的聚合物是最常見的淀粉樣變性形式(和自然β2M相反)。和其他類型的淀粉樣變性不同，β2M很大程度上被限制在骨關(guān)節(jié)部位。內(nèi)臟沉積是非常罕見的。有時(shí)，這些沉積可能累及血管及其他重要的解剖部位。
盡管存在除去β2M的改進(jìn)透析方法，但是大多數(shù)病人的血漿β2M濃度仍然明顯高于正常人。β2M濃度的這些增加通常引發(fā)糖尿病相關(guān)的淀粉樣變性(DRA)和導(dǎo)致死亡的心臟病(cormorbidities)。
胰島淀粉樣蛋白多肽和糖尿病 在一個(gè)世紀(jì)以前，根據(jù)嚴(yán)重的高血糖病人的胰腺中發(fā)現(xiàn)的纖維狀蛋白質(zhì)聚集物，人們首次描述了胰島透明變性(淀粉樣蛋白沉積)(Opie，EL.，J Exp.Med.，5397-428，1901)。今天，胰島淀粉樣蛋白(主要由胰島淀粉樣蛋白多肽(IAPP)組成)或淀粉不溶素是90％以上所有II型糖尿病(又名非胰島素依賴型糖尿病，或NIDDM)病理的組織病理學(xué)特征標(biāo)記物。這些原纖絲的蓄積是由于胰島淀粉樣蛋白多肽(IAPP)或淀粉不溶素(一種37個(gè)氨基酸的多肽，來(lái)源于一種較大的稱為前IAPP的前體肽)的聚集造成的。
IAPP與胰島素在對(duì)β細(xì)胞促分泌素的響應(yīng)中共同分泌。這些病理特征和胰島素依賴性(I型)糖尿病沒有關(guān)聯(lián)，它是被診斷為NIDDM(II型糖尿病)的不同臨床癥狀的共同特征。
對(duì)貓的縱向研究和對(duì)猴子的免疫細(xì)胞化學(xué)研究已經(jīng)表明胰島淀粉樣蛋白的漸進(jìn)性增加與胰島素分泌性β細(xì)胞數(shù)量的劇減以及病情的加重有關(guān)。近年來(lái)，轉(zhuǎn)基因研究已鞏固了IAPP蝕斑形成和β細(xì)胞凋亡和功能紊亂之間的關(guān)系，說明淀粉樣沉淀是II型糖尿病病情加重的一個(gè)主要因素。
IAPP還發(fā)現(xiàn)可以體外誘導(dǎo)β-胰島細(xì)胞毒性，這表明在II型或I型糖尿病患者(后胰島移植)的胰腺中出現(xiàn)IAPP原纖維會(huì)造成β細(xì)胞胰島(Langerhans)的損失和器官功能紊亂。在II型糖尿病患者中，胰腺IAPP的聚集將導(dǎo)致寡聚IAPP的形成，從而引起不溶性纖維沉淀形式IAPP-淀粉樣蛋白堆積，該物質(zhì)最終會(huì)滅除胰島的胰島素產(chǎn)生β細(xì)胞，從而導(dǎo)致β細(xì)胞的損耗和衰竭(Westermark，P.，Grimelius，L，Acta Path.Microbiol.Scand.，sect.A.81291-300，1973，de Koning，EJP.等，Diabetologia 36378-384，1993；和Lorenzo，A.等，Nature368756-760，1994)。作為纖維性沉積物IAPP的聚集還會(huì)影響血漿中通常發(fā)現(xiàn)的pro-IAPP與IAPP的比例，由于沉積物中俘獲有IAPP從而增加該比例?？梢酝ㄟ^高血糖和胰島素血來(lái)證明β細(xì)胞的減少。該β細(xì)胞質(zhì)量損失可能導(dǎo)致需要胰島素治療。
可以通過給患者移植相關(guān)類型的健康細(xì)胞來(lái)治療由于特定類型的細(xì)胞的死亡或功能障礙所產(chǎn)生的疾病。該方法已被用于I型糖尿病人的治療。通常，在移植前先體外培養(yǎng)捐獻(xiàn)者的胰腺胰島細(xì)胞，使它們?cè)诜蛛x過程后能夠恢復(fù)，或者降低它們的免疫力。然而，在許多情況下，由于移植細(xì)胞的死亡，胰島細(xì)胞的移植是不成功的。成功率低的一個(gè)原因在于IAPP，它可以組成有毒的寡聚物。毒性效應(yīng)可能是由原纖維低聚物在胞內(nèi)或胞外的聚集造成的。IAPP低聚物可以形成原纖維并對(duì)體外細(xì)胞產(chǎn)生毒性。另外，IAPP原纖維還可能會(huì)在細(xì)胞移植后繼續(xù)生長(zhǎng)，并導(dǎo)致細(xì)胞的死亡和功能紊亂。即使細(xì)胞來(lái)自健康的捐獻(xiàn)者而接受移植的患者并未患有以原纖維的存在為特征的疾病，也仍然會(huì)發(fā)生這種情況。例如，按照國(guó)際專利申請(qǐng)(PCT)號(hào)WO 01/003680中描述的方法，本發(fā)明的化合物也可用于制備移植用的組織和細(xì)胞。
本發(fā)明的化合物也可以穩(wěn)定pro-IAPP/IAPP的濃度比、pro-胰島素/胰島素的濃度比以及C-肽的水平。另外，作為效力的生物標(biāo)志，不同試驗(yàn)(例如精氨酸-胰島素分泌試驗(yàn)、葡萄糖耐量試驗(yàn)、胰島素抗性和敏感性試驗(yàn))的結(jié)果全部可以用作β細(xì)胞質(zhì)量減少和/或淀粉樣蛋白沉積物的聚集的標(biāo)志。這種藥物還可以和其他的用于胰島素抗性、肝性葡萄糖產(chǎn)生、和胰島素分泌的藥物一起使用。這些化合物可以通過維持β細(xì)胞功能而避免使用胰島素療法，并且可以用于維持胰島移植。
激素衍生的淀粉樣變性 內(nèi)分泌器官可以容納淀粉樣沉積物，特別是在老年個(gè)體中。激素分泌性腫瘤還可以包含激素衍生性淀粉樣斑塊，其中的原纖維是由例如降血素(甲狀腺髓樣癌)和心鈉素(孤立性心房淀粉樣變性)等多肽激素組成。這些蛋白質(zhì)的序列和結(jié)構(gòu)是本領(lǐng)域中公知的。
混雜性淀粉樣變性 存在多種其它淀粉樣病變形式，它們通常表現(xiàn)為淀粉樣蛋白的局部沉積。一般說來(lái)，這些疾病通?？赡苁翘囟ǖ脑w維前體的局部產(chǎn)生或代謝缺乏，或用于原纖維沉積的特定組織(例如關(guān)節(jié))預(yù)沉積所致的結(jié)果。這種突發(fā)性沉積的實(shí)例包括瘤狀A(yù)L淀粉樣蛋白、皮膚淀粉樣蛋白、內(nèi)分泌淀粉樣蛋白、和腫瘤相關(guān)的淀粉樣蛋白。其他的淀粉樣相關(guān)疾病包括如表1所述的那些，例如家族性淀粉樣蛋白多發(fā)性神經(jīng)病(FAP)、老年性系統(tǒng)性淀粉樣變性、Tenosynovium、家族性淀粉樣變性、奧斯特塔格型、非神經(jīng)性的淀粉樣變性、顱骨神經(jīng)病、遺傳性腦出血、家族性癡呆、慢性透析病、家族性克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布癥、格-施-沙綜合癥、遺傳性海綿狀腦病、朊病毒疾病、家族性中海熱、穆-韋綜合癥、腎病、耳聾、蕁麻疹、肢疼痛、心肌病、皮膚沉淀、多發(fā)性骨髓瘤、良性單克隆丙種球蛋白病、maccoglobulinaemia、伴有淀粉樣變性的骨髓瘤、甲狀腺髓樣癌、孤立性心房淀粉樣蛋白和糖尿病。
可以治療性或預(yù)防性地給藥本發(fā)明的化合物來(lái)治療與淀粉樣原纖維的形成、聚集或沉積有關(guān)的疾病，而不管其臨床癥狀如何。本發(fā)明化合物利用以下任何一種機(jī)制可起到緩解淀粉樣相關(guān)疾病進(jìn)程的作用，這些機(jī)制例如包括但不限于降低淀粉樣原纖維的形成或沉積的速率；減輕淀粉樣蛋白沉積的程度；抑制、降低或防止淀粉樣原纖維的形成；抑制淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的炎癥；增加例如大腦中淀粉樣蛋白的清除率；或保護(hù)細(xì)胞免受淀粉樣蛋白誘發(fā)的(低聚物或原纖維狀的)毒性。
在一個(gè)實(shí)施方案中，可以治療性或預(yù)防性地給藥本發(fā)明化合物用于治療與淀粉樣蛋白-β原纖維的形成、聚集或沉積相關(guān)的疾病。本發(fā)明化合物利用以下任何一種機(jī)制(所列機(jī)制是舉例性而非限制性的)可起到緩解淀粉樣蛋白-β相關(guān)疾病進(jìn)程的作用降低淀粉樣蛋白-β原纖維的形成或沉積的速率；減輕淀粉樣蛋白-β沉積的程度；抑制、降低或防止淀粉樣蛋白-β原纖維的形成；抑制淀粉樣蛋白-β誘導(dǎo)的神經(jīng)變性或細(xì)胞毒性；抑制淀粉樣蛋白-β誘導(dǎo)的炎癥；加強(qiáng)淀粉樣蛋白-β從大腦中的清除；或促進(jìn)Aβ的更多代謝。
本發(fā)明治療化合物在進(jìn)入大腦(透過血腦屏障)或從外周釋出后能有效地控制淀粉樣蛋白-β沉積。當(dāng)從外周起作用時(shí)，化合物可改變大腦和血漿之間Aβ的平衡，從而有利于Aβ從大腦中清除。加強(qiáng)Aβ從大腦的清除可降低大腦Aβ的濃度，從而便于Aβ沉淀的減少。另外，透過大腦的化合物通過直接作用于大腦Aβ，例如，通過使其保持在非原纖維形式、或促進(jìn)其從大腦的清除的方式來(lái)控制沉積。這些化合物可以減慢APP進(jìn)程，可以通過巨噬細(xì)胞或神經(jīng)元細(xì)胞提高Aβ原纖維的降解；或者可以通過活化的小神經(jīng)膠質(zhì)減少Aβ原纖維的降解。這些化合物也可以防止大腦中的Aβ與細(xì)胞表面相互作用，從而防止神經(jīng)毒性、神經(jīng)變性或炎癥。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，這種方法用于治療阿耳茨海默氏病(例如散發(fā)性或家族性的AD)。還可以預(yù)防性或治療性地使用這種方法來(lái)治療發(fā)生淀粉樣蛋白-β沉積的其他臨床疾病，例如用于唐氏(Down)綜合癥個(gè)體和患有腦淀粉樣血管病(“CAA”)，或遺傳性腦出血或早期阿耳茨海默氏病的患者。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法用于治療輕度認(rèn)知損傷。輕度認(rèn)知損傷(“MCI”)是一種以認(rèn)知能力處于輕度但可測(cè)量的損傷狀態(tài)為特征的病癥，與癡呆癥的存在不一定有關(guān)。MCI通常(但非必然)發(fā)生在阿耳茨海默氏病之前。
另外，已經(jīng)證明APP和淀粉樣-β蛋白在肌肉纖維中的異常蓄積與散發(fā)性包涵體肌炎(IBM)存在病理學(xué)關(guān)聯(lián)(Askanas等，(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93，1314-1319；Askanas等，(1995)CurrentOpinion in Rheumatology 7，486-496)。因此，本發(fā)明的化合物可以預(yù)防性或治療性地用于治療其中淀粉樣β蛋白在非神經(jīng)區(qū)域異常沉積所致疾病，例如通過將本發(fā)明化合物傳遞到肌肉纖維來(lái)治療IBM。
此外，已經(jīng)證明，Aβ與稱為脈絡(luò)膜疣(drusen)的異常胞外沉積有關(guān)，這種沉積物涉及年齡相關(guān)的黃斑變性(ARMD)個(gè)體中沿著視網(wǎng)膜醛色素上皮的基底面積。ARMD是老年個(gè)體不可逆性失明的病因。據(jù)信，Aβ的沉積是局部炎癥行為的重要組成成分，而這種炎癥行為會(huì)對(duì)視網(wǎng)膜黃斑變性萎縮、脈絡(luò)膜疣的生物形成、和ARMD的發(fā)病機(jī)理產(chǎn)生影響(Johnson等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99(18)，11830-5(2002))。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及治療或預(yù)防患者(優(yōu)選人)的淀粉樣相關(guān)疾病的方法，其包括對(duì)患者給用治療量的下列各式或本文另外描述的化合物，從而降低或抑制淀粉樣原纖維的形成或沉積、神經(jīng)變性、或細(xì)胞毒性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種治療或預(yù)防患者(優(yōu)選人)淀粉樣相關(guān)疾病的方法，其包括給患者給藥治療量的下列各式或本說明書另外描述的化合物，從而改善或穩(wěn)定腦淀粉樣變性(例如，阿爾茨海默氏病、唐氏綜合癥或大腦淀粉樣血管病)患者的認(rèn)知功能，或防止、減緩、或阻止這些患者的認(rèn)知功能的進(jìn)一步惡化。這些化合物還可以改善這些患者的日常生活質(zhì)量。
本發(fā)明的治療化合物可以通過例如穩(wěn)定血糖、預(yù)防或減少β細(xì)胞量的損失、減少或預(yù)防由于β細(xì)胞數(shù)量減少而所致的高血糖，以及通過調(diào)整(例如提高或穩(wěn)定)胰島素的產(chǎn)生來(lái)治療與II型糖尿病相關(guān)的淀粉樣變性。本發(fā)明的化合物也可以穩(wěn)定pro-IAPP/IAPP的濃度比例。
本發(fā)明的治療化合物還可以通過穩(wěn)定腎功能、減少蛋白尿、提高肌酸酐清除率(例如至少50％或更高或至少100％或更高)、或通過引起緩解慢性腹瀉、體重增加(例如，10％或更高)、或通過降低血清肌酸酐用于治療AA(繼發(fā)性)淀粉樣變性和/或AL(原發(fā)性)淀粉樣變性。還可以降低例如根據(jù)SAP閃爍照相術(shù)測(cè)定的內(nèi)臟淀粉樣蛋白的含量。
本發(fā)明化合物 本發(fā)明至少部分涉及某些化合物(及其藥物制劑)在預(yù)防或治療淀粉樣相關(guān)疾病中的用途，所述疾病尤其包括阿耳茨海默氏病、大腦淀粉樣血管病、包涵體肌炎、唐氏綜合癥、糖尿病相關(guān)性淀粉樣變性，透析相關(guān)性淀粉樣變性(β2M)、原發(fā)性淀粉樣變性(例如λ或κ鏈相關(guān)的)、家族性淀粉樣多神經(jīng)病(FAP)、老年性系統(tǒng)性淀粉樣變性、家族性淀粉樣變性、奧斯特塔格型非神經(jīng)病淀粉樣變性、顱神經(jīng)病、遺傳性腦出血、家族性癡呆癥、慢性透析病、家族性克雅氏??；格-施-沙綜合癥、遺傳性海綿狀腦病，朊病毒病、家族性地中海熱、穆-韋綜合癥，腎病，耳聾，荀麻疹，四肢痛、心肌病、皮膚沉淀、多發(fā)性骨髓瘤、良性單克隆丙種球蛋白病、巨球蛋白血癥、骨髓瘤相關(guān)性淀粉樣變性、甲狀腺骨髓癌、和孤立的心房淀粉樣。
本文的化學(xué)結(jié)構(gòu)是按照本領(lǐng)域已知的常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)繪制的。因此，當(dāng)所繪制的原子，例如碳原子，看上去具有未滿足的化合價(jià)時(shí)，則假定該化合價(jià)是用氫原子來(lái)滿足的，即使氫原子未被明確畫出也如此。一些本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)包括立體生成碳原子。應(yīng)當(dāng)理解，除另有說明外，由這種不對(duì)稱性產(chǎn)生的異構(gòu)體(例如所有的對(duì)映體和非對(duì)映體)也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。亦即，除另有規(guī)定外，任何手性碳中心可以具有(R)-或(S)-的立體化學(xué)。利用經(jīng)典的分離技術(shù)和立體化學(xué)控制的合成方法，可以得到基本純形式的這類異構(gòu)體。此外，在適當(dāng)?shù)那闆r下，烯烴可以包括E-或Z-幾何學(xué)構(gòu)型。另外，本發(fā)明化合物可以非溶劑化形式、以及與可接受的溶劑如水、THF、乙醇等形成的溶劑化形式存在。通常，就本發(fā)明的目的而言，溶劑化形式被認(rèn)為等同于非溶劑化的形式。
“小分子”是指其本身非基因轉(zhuǎn)錄和翻譯的產(chǎn)品(例如蛋白質(zhì)、RNA、或DNA)的化合物，并且優(yōu)選具有低分子量，例如低于2500amu。
通常，“親核試劑”是本領(lǐng)域公知的表示具有反應(yīng)性電子對(duì)的化學(xué)基團(tuán)，通過置換離去基團(tuán)(一般為另一種親核試劑)與化合物反應(yīng)，這種反應(yīng)在脂肪族化學(xué)中通常以單分子(稱為”SN1”)或雙分子(稱為”SN2”)反應(yīng)的形式出現(xiàn)。親核試劑的實(shí)例包括不帶電荷化的合物例如胺、硫醇化合物、和醇化合物，以及帶電荷基團(tuán)如醇根、硫醇根、負(fù)碳離子，以及各種有機(jī)和無(wú)機(jī)陰離子。代表性的陰離子型親核試劑特別包括簡(jiǎn)單陰離子，如疊氮化物、氰化物、硫氰化物、乙酸根、甲酸根、或氯甲酸根，以及亞硫酸氫根。在適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件下，有機(jī)金屬試劑如有機(jī)銅酸鹽、有機(jī)鋅、有機(jī)鋰、格利雅試劑、烯醇鹽和乙炔化物將是合適的親核試劑。
同樣，“親電試劑”是指能接受電子對(duì)，特別是來(lái)自于親核試劑的電子對(duì)(典型的是在親電取代反應(yīng)過程中發(fā)生)的原子、分子、或離子。在親電取代反應(yīng)中，親電試劑與底物結(jié)合，同時(shí)驅(qū)逐另一種親電試劑，例如，用另一種親電試劑如硝鎓離子取代芳族底物(例如苯)上的質(zhì)子。親電試劑包括環(huán)狀化合物如環(huán)氧化物，環(huán)乙亞胺類，環(huán)硫化物，環(huán)狀硫酸酯，碳酸酯，內(nèi)酯，和內(nèi)酰胺；以及包括硫酸基，磺酸基(例如甲苯磺酸基)，氯化物，溴化物，和碘化物在內(nèi)的非環(huán)狀親電試劑。通常，親電試劑可以是與離去基團(tuán)結(jié)合的飽和碳原子(例如亞甲基基團(tuán))；但是，親電基團(tuán)也可以是不飽和基團(tuán)，如醛、酮、酯、或其共軛(α，β不飽和的)類似物，經(jīng)反應(yīng)可以與親核試劑形成加合物。
術(shù)語(yǔ)“離去基團(tuán)”通常是指易被親核試劑(例如胺、硫醇、醇、或氰化物)置換和取代的基團(tuán)。這類離去基團(tuán)是公知的，并且包括羧酸酯類、N-羥基琥珀酰亞胺(“NHS”)、N-羥基苯并三唑、鹵素(氟、氯、溴、或碘)、醇鹽、和硫醇鹽。各種基于硫的離去基團(tuán)常用于合成化學(xué)，包括烷烴磺酰氧基(例如C1-C4烷烴例如甲烷磺酰氧基，乙烷磺酰氧基，丙烷磺酰氧基，和丁烷磺酰氧基)和鹵代類似物(例如，鹵代(C1-C4烷烴)磺酰氧基，譬如三氟甲烷磺酰氧基(即三氟甲磺酰氧基)、2，2，2-三氯乙烷磺酰氧基、3，3，3-三溴丙烷磺酰氧基、和4，4，4-三氟丁烷磺酰氧基)，以及芳基磺酰氧基(例如任選被1-3個(gè)C1-C4烷基取代的C6-C10芳基，譬如苯磺酰氧基，α-萘基磺酰氧基、β-萘基磺酰氧基，對(duì)-甲苯磺酰氧基(即甲苯磺酸酯)、4-叔丁基苯磺酰氧基、均三甲苯磺酰氧基、和6-乙基-α-萘基磺酰氧基)。
“活化酯”可以用式-COL表示，其中L為離去基團(tuán)，其典型實(shí)例包括N-羥基磺基琥珀酰亞胺基和N-羥基琥珀酰亞胺基；被吸電子基團(tuán)(例如對(duì)-硝基、五氟、五氯、或?qū)?三氟甲基)取代的芳氧基；以及被碳化二亞胺活化的羧酸所形成的酸酐或混酐，例如-OCORa或-OCNRaNHRb，其中Ra和Rb獨(dú)立地為C1-C6烷基，C5-C8烷基(例如環(huán)己基)，C1-C6全氟烷基，或C1-C6烷氧基?；罨タ梢跃偷匦纬苫蛘咭部梢允强煞蛛x的試劑?；腔牾啺坊ァ⑽宸搅蚍吁?、磺基四氟苯酚是優(yōu)選的活化酯。而且，所述酯離去基團(tuán)可以是例如取代的或未取代的C1-C6烷基(例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基或己基)，或取代的或未取代的C6-C14芳基或雜環(huán)基，譬如2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、2，2-二溴乙基、2，2，2-三氯乙基、3-氟丙基、4-氯丁基、甲氧基甲基、1，1-二甲基-1-甲氧基甲基、乙氧基甲基、N-丙氧基甲基、異丙氧基甲基、N-丁氧基甲基、叔丁氧基甲基、1-乙氧基乙基、1-甲基-1-甲氧基乙基、1-(異丙氧基)乙基、3-甲氧基丙基-4-甲氧基丁基、氟代甲氧基甲基、2，2，2-三氯乙氧基甲基、雙(2-氯乙氧基)甲基、3-氟丙氧基甲基、4-氯丁氧基乙基、二溴甲氧基乙基、2-氯乙氧基丙基、氟代甲氧基丁基、2-甲氧基乙氧基甲基、乙氧基甲氧基乙基、甲氧基乙氧基丙基、甲氧基乙氧基丁基、芐基、苯乙基、3-苯基丙基、4-苯基丁基、α-萘基甲基、β-萘基甲基、二苯基甲基、三苯基甲基、α-萘基二苯基甲基、9-蒽基甲基、4-甲基芐基、2，4，6-三甲基芐基、3，4，5-三甲基芐基、4-甲氧基芐基、4-甲氧基苯基二苯基甲基、2-硝基芐基、4-硝基芐基、4-氯芐基、4-溴芐基、4-氰基芐基、4-氰基芐基二苯基甲基、或雙(2-硝基苯基)甲基基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“吸電子基團(tuán)”是本領(lǐng)域公知的，它描述了取代基從鄰近原子吸引價(jià)電子(例如π電子)的能力，例如取代基的電負(fù)性要大于鄰近原子，與相同位置的氫原子相比，它具有更強(qiáng)的吸引電子到其自身上的能力。哈米特(Hammett)σ值，尤其是σp值，是公認(rèn)的表示基團(tuán)給電子和吸電子能力的量度。例如，參見J.March的“高級(jí)有機(jī)化學(xué)”(Advanced Organic Chemistry)，第5版，John Wiley&Sons，Inc.，New York，pp.368-75(2001)。給電子基團(tuán)的哈米特常數(shù)值通常為負(fù)值(NH2的σp＝-0.66)，吸電子基團(tuán)為正值(硝基的σp＝0.78)，σp表示對(duì)位取代。示例性的吸電子基團(tuán)尤其包括硝基，?；?酮)，甲?；?醛)，磺酰基，三氟甲基，鹵素(例如氯和氟)，以及氰基等等。相反，“給電子基團(tuán)”是指這種取代基，它給出電子的能力大于分子中占據(jù)相同位置的氫的能力。其實(shí)例尤其包括氨基(包括烷基氨基和二烷基氨基)，芳基，烷氧基(包括芳烷氧基)，芳氧基，巰基和烷硫基，以及羥基。
本文使用的“烷基”包括含有一個(gè)或多個(gè)碳原子的飽和烴，包括直鏈烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等)，環(huán)狀烷基(或“環(huán)烷基”或“脂環(huán)”或“碳環(huán)”基團(tuán))(例如環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基等)，支鏈烷基(異丙基、叔丁基、仲丁基、異丁基等)，以及烷基取代的烷基基團(tuán)(例如烷基取代的環(huán)烷基基團(tuán)和環(huán)烷基取代的烷基基團(tuán))。術(shù)語(yǔ)“脂族基”包括以通常含有1-22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈為特征的有機(jī)基團(tuán)。在復(fù)雜結(jié)構(gòu)中，所述鏈可以是支鏈、橋狀或交聯(lián)的。脂族基包括烷基、鏈烯基、和炔基。
在某些實(shí)施方案中，直鏈或支鏈烷基的骨架上可以具有30個(gè)或更少的碳原子，例如直鏈C1-C30或支鏈C3-C30。在某些實(shí)施方案中，直鏈或支鏈烷基的骨架上可以具有20個(gè)或更少的碳原子(例如直鏈C1-C20或支鏈C3-C20)，更優(yōu)選具有18個(gè)或更少個(gè)碳原子。同樣，環(huán)烷基的環(huán)結(jié)構(gòu)優(yōu)選具有4-10個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有4-7個(gè)碳原子。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷基”是指鏈中具有1-6個(gè)碳原子的烷基，并且也指環(huán)結(jié)構(gòu)中具有3-6個(gè)碳的環(huán)烷基基團(tuán)。
除對(duì)碳原子數(shù)另有說明的以外，本文所使用的“低級(jí)脂族”、“低級(jí)烷基”、“低級(jí)鏈烯基”等中的“低級(jí)”是指具有至少一個(gè)但少于約8個(gè)碳原子的部分。在某些實(shí)施方案中，直鏈或支鏈低級(jí)烷基的骨架上具有6個(gè)或更少的碳原子(例如直鏈C1-C6，支鏈C3-C6)，且更優(yōu)選具有4個(gè)或更少的碳原子。同樣，環(huán)烷基的環(huán)結(jié)構(gòu)優(yōu)選具有3-8個(gè)碳原子，更優(yōu)選環(huán)結(jié)構(gòu)具有5或6個(gè)碳原子。術(shù)語(yǔ)“C1-C6烷基”中的“C1-C6”是指包含1-6個(gè)碳原子的烷基。
此外，除另有說明外，術(shù)語(yǔ)烷基將包括“未取代的烷基”和“取代的烷基”，后者是指帶有取代基的烷基，所述取代基取代了烴骨架一個(gè)或多個(gè)碳上的一個(gè)或多個(gè)氫原子。這些取代基可包括，例如，鏈烯基、炔基、鹵素、羥基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基、芳氧基羰氧基、羧酸基(carboxylate)、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷酸基(phosphate)、膦酸負(fù)基(phosphonato)、亞磷酸負(fù)基(phosphinato)、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、和烷基芳基氨基)、?；被?包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲?；碗寤?、亞氨基、巰基(sulfhydryl)、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸基、硫酸基(sulfate)、烷基亞磺酰基、磺酸負(fù)基(sulfonato)、氨基磺?；?、亞磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環(huán)基、烷基芳基、或芳族(包括雜芳族)基團(tuán)。
“芳基烷基”是指被芳基取代的烷基基團(tuán)(例如苯甲基(即芐基))?！巴榛蓟辈糠质侵副煌榛〈姆蓟鶊F(tuán)(例如對(duì)甲基苯基(即對(duì)甲苯基))。術(shù)語(yǔ)“正-烷基”是指直鏈(即非支鏈)的未取代烷基?！皝喭榛笔侵赶鄳?yīng)烷基的二價(jià)類似物。術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”和“炔基”是指類似于烷基的不飽和脂族基，但它們分別包含至少一個(gè)碳-碳雙鍵或三鍵。適宜的鏈烯基和炔基包括具有2至大約12個(gè)碳原子(優(yōu)選2至大約6個(gè)碳原子)的基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“芳族基”或“芳基”包括含有1個(gè)或多個(gè)環(huán)的不飽和且具芳香性的環(huán)狀烴以及不飽和且具芳香性的雜環(huán)。芳基也可以與非芳香性的脂環(huán)或雜環(huán)稠合或橋連，從而形成多環(huán)(例如1，2，3，4-四氫化萘)。“亞芳基”是芳基的二價(jià)類似物。芳基也可以與非芳香性的脂環(huán)或雜環(huán)稠合或橋連，從而形成多環(huán)(例如1，2，3，4-四氫化萘)。
術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基”包括類似于碳環(huán)基團(tuán)的閉環(huán)結(jié)構(gòu)，其中環(huán)中的一個(gè)或多個(gè)碳原子為非碳元素，例如為氮、硫、或氧。雜環(huán)基可以是飽和或不飽和的。另外，雜環(huán)基(例如吡咯基、吡啶基、異喹啉基、喹啉基、嘌呤基和呋喃基)可以具有芳香性質(zhì)，在這種情況下它們可被稱為“雜芳基”或“雜芳族基”。
除另有規(guī)定外，芳基和雜環(huán)基(包括雜芳基)也可以在一個(gè)或多個(gè)組成原子上被取代。雜芳基和雜脂環(huán)基的實(shí)例可以具有1-3個(gè)分離或稠合的環(huán)和一個(gè)或多個(gè)N、O、或S雜原子，其中每個(gè)環(huán)具有3-大約8個(gè)組成原子。通常，術(shù)語(yǔ)“雜原子”包括除碳或氫之外任何元素原子，其優(yōu)選實(shí)例包括氮、氧、硫和磷。雜環(huán)基可以是飽和或不飽和或芳香性的。
雜環(huán)的實(shí)例包括但不限于吖啶基；吖辛因基；苯并咪唑基；苯并呋喃基；苯并異呋喃基；苯并噻吩基；苯并唑基；苯并噻唑基；苯并三唑基；苯并四唑基；苯并異唑基；苯并異噻唑基；苯并咪唑啉基；咔唑基；4aH-咔唑基；咔啉基；苯并二氫吡喃基；色烯基；1，2-二氮雜萘基；十氫喹啉基；2H，6H-1，5，2-二噻嗪基；二氫呋喃并[2，3-b]四氫呋喃；呋喃基；呋咱基；咪唑烷基；咪唑啉基；咪唑基；1H-吲唑基；假吲哚基(indolenyl)；二氫吲哚基；吲嗪基；吲哚基；3H-吲哚基；異苯并呋喃基；異苯并二氫呋喃基；異吲唑基；異二氫吲哚基；異吲哚基；異喹啉基；異噻唑基；異唑基；亞甲二氧基苯基；嗎啉基；萘啶基；八氫異喹啉基；二唑基；1，2，3-二唑基；1，2，4-二唑基；1，2，5-二唑基；1，3，4-二唑基；唑烷基；唑基；唑烷基；嘧啶基；菲啶基；菲咯啉基；吩嗪基；吩噻嗪基；吩噻基(phenoxathiinyl)；吩嗪基；2，3-二氮雜萘基；哌嗪基；哌啶基；哌啶酮基；4-哌啶酮基；胡椒基；喋啶基；嘌呤基；吡喃基；吡嗪基；吡唑烷基；吡唑啉基；吡唑基；噠嗪基；吡啶并唑；吡啶并咪唑；吡啶并噻唑；吡啶基(pyridinyl)；吡啶基(pyridyl)；嘧啶基；吡咯烷基；吡咯啉基；2H-吡咯基；吡咯基；喹唑啉基；喹啉基；4H-喹嗪基；喹喔啉基；奎寧環(huán)基；四氫呋喃基；四氫異喹啉基；四氫喹啉基；四唑基；6H-1，2，5-噻二嗪基；1，2，3-噻二唑基；1，2，4-噻二唑基；1，2，5-噻二唑基；1，3，4-噻二唑基；噻蒽基；噻唑基；噻吩基；噻吩并噻唑基；噻吩并唑基；噻吩并咪唑基；噻吩基；三嗪基；1，2，3-三唑基；1，2，4-三唑基；1，2，5-三唑基；1，3，4-三唑基；和呫噸基。優(yōu)選的雜環(huán)基包括但不限于吡啶基；呋喃基；噻吩基；吡咯基；吡唑基；吡咯烷基；咪唑基；吲哚基；苯并咪唑基；1H-吲唑基；唑烷基；苯并三唑基；苯并異唑基；羥吲哚基；苯并唑啉基；和靛紅基(isatinoyl)。同樣也包括包含例如上述雜環(huán)的稠環(huán)和螺環(huán)化合物。
普通的烴芳基是具有一個(gè)環(huán)的苯基。兩個(gè)環(huán)的烴芳基包括萘基、茚基、苯并環(huán)辛烯基、苯并環(huán)庚烯基、并環(huán)戊二烯基和奧基，及其部分氫化類似物如2，3-二氫茚基和四氫萘基。示例性的三環(huán)烴芳基包括苊烯基、芴基、非那烯基、菲基和蒽基。
芳基也包括雜單環(huán)芳基，亦即單環(huán)雜芳基，如噻吩基、呋喃基、吡喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基和噠嗪基；以及它們的氧化類似物如吡啶酮基，唑酮基、吡唑酮基、異唑酮基、和噻唑酮基。相應(yīng)的氫化(即非芳香性)雜單環(huán)基包括吡咯烷基，吡咯啉基，咪唑烷基，咪唑啉基，吡唑烷基，吡唑啉基，哌啶基和哌啶子基，哌嗪基，以及嗎啉代和嗎啉基。
芳基也包括稠合的雙環(huán)雜芳基，如吲哚基、異吲哚基、吲嗪基、吲唑基、喹啉基、異喹啉基、吩嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、色烯基、異色烯基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、喹嗪基、異喹諾酮基、喹諾酮基、萘啶基、和喋啶基，以及部分氫化的類似物譬如苯并二氫吡喃基、異苯并二氫吡喃基、2，3-二氫吲哚基，異二氫吲哚基，和四氫吲哚基。芳基還包括稠合的三環(huán)基團(tuán)，譬如吩噻基(phenoxathiinyl)，咔唑基，菲啶基，吖啶基，萘嵌間二氮苯基，菲咯啉基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩嗪基，和二苯并呋喃基。
一些典型的芳基包括取代或未取代的5-和6-元單環(huán)基團(tuán)。在另一個(gè)方面中，每個(gè)Ar基團(tuán)選自取代或未取代的苯基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、異噻唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、唑基、異唑基、吡啶基、吡嗪基、噠嗪基、和嘧啶基。更多的實(shí)例包括取代或未取代的苯基、1-萘基、2-萘基、聯(lián)苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-唑基、4-唑基、5-唑基、3-異唑基、4-異唑基、5-異唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基、和6-喹啉基基團(tuán)。
本文中使用的術(shù)語(yǔ)“胺”或“氨基”是指由式-NRaRb表示的未取代或取代的部分，其中Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫，烷基，芳基，或雜環(huán)基，或者Ra和Rb與它們所連接的氮原子一起形成環(huán)狀部分，其中環(huán)中含有3-8個(gè)原子。因此，術(shù)語(yǔ)氨基包括環(huán)狀氨基部分如哌啶基或吡咯烷基，另有說明的除外。這樣，本文使用的術(shù)語(yǔ)“烷基氨基”則表示連接有氨基的烷基。合適的烷基氨基包括具有1至大約12個(gè)碳原子，優(yōu)選具有1至大約6個(gè)碳原子的基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)氨基包括其中氮原子通過共價(jià)鍵與至少一個(gè)碳或雜原子鍵合的化合物或部分。術(shù)語(yǔ)“二烷基氨基”包括其中氮原子與至少兩個(gè)烷基鍵合的基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“芳基氨基”和“二芳基氨基”分別包括其中氮與至少一個(gè)或兩個(gè)芳基基團(tuán)鍵合的基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“烷基芳基氨基”是指與至少一個(gè)烷基和至少一個(gè)芳基鍵合的氨基基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“烷基氨基烷基”是指被烷基氨基取代的烷基、鏈烯基或炔基。術(shù)語(yǔ)“酰胺”或“氨基羰基”包括含有與羰基或硫羰基基團(tuán)中碳鍵合的氮原子的化合物或部分。
術(shù)語(yǔ)“烷硫基“是指烷基，其帶有與之相連的硫基(sulfhydryl)基團(tuán)。合適的烷硫基包括具有1至大約12個(gè)碳原子，優(yōu)選具有1至大約6個(gè)碳原子的基團(tuán)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)“烷基羧基”是指連接有羧基的烷基。
本文使用的術(shù)語(yǔ)“烷氧基”是指連接有氧原子的烷基。代表性的烷氧基包括具有1至大約12個(gè)碳原子，優(yōu)選1至大約6個(gè)碳原子的基團(tuán)，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基等等。烷氧基的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、異丙氧基、丙氧基、丁氧基、和戊氧基。烷氧基基團(tuán)可以被這樣一些基團(tuán)取代，譬如鏈烯基、炔基、鹵素、羥基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸基、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷酸基(phosphate)、膦酸負(fù)基(phosphonato)、亞磷酸負(fù)基(phosphinato)、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、和烷基芳基氨基)、?；被?包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲?；碗寤?、亞氨基、巰基(sulfhydryl)、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸基、硫酸基、烷基亞磺酰基、磺酸負(fù)基(sulfonato)、氨基磺?；喕酋０被?、硝基、三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環(huán)基、烷基芳基、或芳族或雜芳族部分。鹵代烷氧基的實(shí)例包括但不限于氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氯甲氧基、二氯甲氧基、三氯甲氧基等，以及全鹵代烷氧基基團(tuán)。
術(shù)語(yǔ)“酰氨基”包括其中氨基部分與?；I合的基團(tuán)。例如，酰氨基包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲?；碗寤?br> 術(shù)語(yǔ)“烷氧基烷基”、“烷基氨基烷基”和“硫代烷氧基烷基”包括上述烷基，其進(jìn)一步包含取代了烴骨架中一個(gè)或多個(gè)碳原子的氧、氮或硫原子。
術(shù)語(yǔ)“羰基”或“羧基”包括含有通過雙鍵與氧原子連接的碳的化合物或部分。含有羰基之部分的實(shí)例包括醛、酮、羧酸、酰胺、酯、酸酐等。
術(shù)語(yǔ)“醚”或“醚合的”包括含有與兩個(gè)碳原子鍵合的氧原子的化合物或部分。例如，醚或醚合基團(tuán)包括“烷氧基烷基”，它是指被烷氧基取代的烷基、鏈烯基、或炔基。
“磺酸基”(sulfonate)是指與碳原子鍵合的-SO3H或-SO3-X+基團(tuán)，其中X+是陽(yáng)離子抗衡離子基團(tuán)。同樣，“磺酸”化合物具有與碳原子鍵合的-SO3H或-SO3-X+基團(tuán)，其中X+是陽(yáng)離子基團(tuán)。本文使用的“硫酸基”是指與碳原子鍵合的-OSO3H或-OSO3-X+基團(tuán)，并且“硫酸”化合物具有與碳原子鍵合的-SO3H或-OSO3-X+基團(tuán)，其中X+是陽(yáng)離子基團(tuán)。根據(jù)本發(fā)明，適宜的陽(yáng)離子基團(tuán)可以是氫原子。在某些情況下，陽(yáng)離子基團(tuán)實(shí)際上可以是治療化合物上的另一個(gè)基團(tuán)，它在生理pH下呈電荷陽(yáng)性，例如氨基。
“抗衡離子”需要用于維持電中性。陰離子抗衡離子的實(shí)例包括鹵化物、三氟甲磺酸根、硫酸根、硝酸根、氫氧根、碳酸根、碳酸氫根、乙酸根、磷酸根、草酸根、氰化物、烷基羧酸根、N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基苯并三唑、醇鹽、硫醇鹽、烷烴磺酰氧基、鹵代烷烴磺酰氧基、芳基磺酰氧基、硫酸氫根、草酸根、戊酸根、油酸根、十六烷酸根、硬脂酸根、月桂酸根、硼酸根、苯甲酸根、乳酸根、檸檬酸根、馬來(lái)酸根、富馬酸根、琥珀酸根、酒石酸根、萘甲磺酸根、葡庚糖酸根、或乳糖酸根。含有通過共價(jià)鍵與陰離子基團(tuán)鍵合的陽(yáng)離子基團(tuán)的化合物可稱作“內(nèi)鹽”。
術(shù)語(yǔ)“硝基”是指-NO2；術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵代”或“鹵”表示-F，-Cl，-Br或-I；術(shù)語(yǔ)“硫醇”、“硫代”或“巰基”是指SH；并且術(shù)語(yǔ)“羥基”是指-OH。
術(shù)語(yǔ)“?；笔囚驶?，它通過其碳原子與氫連接(即甲?；?、與脂族基連接(例如乙?；?、與芳族基連接(例如，苯甲酰基)等。術(shù)語(yǔ)“取代酰基”包括其中的一個(gè)或多個(gè)碳原子上的一個(gè)或多個(gè)氫原子被以下基團(tuán)取代的?；?，烷基、炔基、鹵素、羥基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸基(carboxylate)、烷基羰基、芳基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基氨基羰基、二烷基氨基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷酸基(phosphate)、膦酸負(fù)基(phosphonato)、亞磷酸負(fù)基(phosphinato)、氰基、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲?；碗寤?、亞氨基、巰基(sulfhydryl)、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸基、硫酸基、烷基亞磺?；⒒撬嶝?fù)基(sulfonato)、氨基磺酰基、亞磺酰氨基、硝基、三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環(huán)基、烷基芳基、或芳族或雜芳族部分。
除另有說明外，本發(fā)明化合物的化學(xué)部分(包括上述基團(tuán))都可以是“取代或未取代的”。在一些實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“取代的”意指該部分在非氫的基團(tuán)位置上具有取代基(即在大多數(shù)情形下，取代了氫)，這樣使得分子能產(chǎn)生其預(yù)期的功效。取代基的實(shí)例包括選自以下的基團(tuán)直鏈或支鏈的烷基(優(yōu)選C1-C5)，環(huán)烷基(優(yōu)選C3-C8)，烷氧基(優(yōu)選C1-C6)，硫代烷基(C1-C6)，鏈烯基(優(yōu)選C2-C6)，炔基(優(yōu)選C2-C6)，雜環(huán)，碳環(huán)，芳基(例如苯基)，芳氧基(例如苯氧基)，芳烷基(例如芐基)，芳氧基烷基(例如苯氧基烷基)，芳基乙酰氨基，烷基芳基，雜芳烷基，烷基羰基和芳基羰基或其它這類?；s芳基羰基，和雜芳基，以及(CR’R”)0-3NR’R”(例如，-NH2)，(CR’R”)0-3CN(例如，-CN)，-NO2，鹵素(例如，-F，-Cl，-Br，或-I)，(CR’R”)0-3C(鹵素)3(例如，-CF3)，(CR’R”)0-3CH(鹵素)2，(CR’R”)0-3CH2(鹵素)，(CR’R”)0-3CONR’R”，(CR’R”)0-3(CNH)NR’R”，(CR’R”)0-3S(O)1-2NR’R”，(CR’R”)0-3CHO，(CR’R”)0-3O(CR’R”)0-3H，(CR’R”)0-3S(O)0-3R’(例如，-SO3H)，(CR’R”)0-3O(CR’R”)0-3H(例如，-CH2OCH3和-OCH3)，(CR’R”)0-3S(CR’R”)0-3H(例如，-SH和-SCH3)，(CR’R”)0-3OH(例如，-OH)，(CR’R”)0-3COR’，(CR’R”)0-3(取代的或未取代的苯基)，(CR’R”)0-3(C3-C8環(huán)烷基)，(CR’R”)0-3CO2R’(例如，-CO2H)，和(CR’R”)0-3OR’基團(tuán)，其中R’和R”各自獨(dú)立地為氫，C1-C5烷基，C2-C5鏈烯基，C2-C5炔基，或芳基；或任何天然氨基酸的側(cè)鏈。
在另一實(shí)施方案中，取代基可以選自直鏈或支鏈的烷基(優(yōu)選C1-C5)，環(huán)烷基(優(yōu)選C3-C8)，烷氧基(優(yōu)選C1-C6)，硫代烷基(優(yōu)選C1-C6)，鏈烯基(優(yōu)選C2-C6)，炔基(優(yōu)選C2-C6)，雜環(huán)，碳環(huán)，芳基(例如苯基)，芳氧基(例如苯氧基)，芳烷基(例如芐基)，芳氧基烷基(例如苯氧基烷基)，芳基乙酰氨基，烷基芳基，雜芳烷基，烷基羰基和芳基羰基或其它這種?；?，雜芳基羰基，或雜芳基，(CR’R”)0-10NR’R”(例如，-NH2)，(CR’R”)0-10CN(例如，-CN)，-NO2，鹵素(例如，F(xiàn)，Cl，Br，或I)，(CR’R”)0-10C(鹵素)3(例如，-CF3)，(CR’R”)0-10CH(鹵素)2，(CR’R”)0-10CH2(鹵素)，(CR’R”)0-10CONR’R”，(CR’R”)0-10(CNH)NR’R”，(CR’R”)0-10S(O)1-2NR’R”，(CR’R”)0-10CHO，(CR’R”)0-10O(CR’R”)0-10H，(CR’R”)0-10S(O)0-3R’(例如，-SO3H)，(CR’R”)0-10O(CR’R”)0-10H(例如，-CH2OCH3和-OCH3)，(CR’R”)0-10S(CR’R”)0-3H(例如，-SH和-SCH3)，(CR’R”)0-10OH(例如，-OH)，(CR’R”)0-10COR’，(CR’R”)0-10(取代的或未取代的苯基)，(CR’R”)0-10(C3-C8環(huán)烷基)，(CR’R”)0-10CO2R’(例如，-CO2H)，或(CR’R”)0-10OR’基團(tuán)，或任何天然氨基酸的側(cè)鏈；其中R’和R”各自獨(dú)立地為氫，C1-C5烷基，C2-C5鏈烯基，C2-C5炔基，或芳基，或者R’和R”一起形成亞芐基或-(CH2)2O(CH2)2-基團(tuán)。
應(yīng)當(dāng)理解，“取代”或“被......取代”包括隱含條件，即這種取代要符合被取代原子和取代基的允許價(jià)態(tài)，并且這種取代要產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物，例如，它不能自發(fā)地通過例如重排、環(huán)化、消除等方式進(jìn)行轉(zhuǎn)化。本文使用的術(shù)語(yǔ)“取代的”旨在包括有機(jī)化合物的所有可允許取代基。廣義上講，可允許的取代基包括有機(jī)化合物的無(wú)環(huán)和環(huán)狀、支鏈和直鏈、碳環(huán)和雜環(huán)、芳族和非芳族的取代基?？稍试S的取代基可以是一個(gè)或多個(gè)。
在一些實(shí)施方案中，“取代基”例如可選自以下基團(tuán)鹵素，三氟甲基，硝基，氰基，C1-C6烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6炔基，C1-C6烷基羰氧基，芳基羰氧基，C1-C6烷氧基羰氧基，芳氧基羰氧基，C1-C6烷基羰基，C1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷氧基，C1-C6烷硫基，芳硫基，雜環(huán)基，芳烷基，和芳基(包括雜芳基)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式I化合物或其可藥用的鹽
其中 R1為取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基； R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；和 L1和L2各自獨(dú)立地為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在，條件是當(dāng)R1為烷基時(shí)，L1是不存在的。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式II化合物或其可藥用的鹽
其中 R1為取代或未取代的單環(huán)、二環(huán)、三環(huán)、或苯并雜環(huán)基團(tuán)或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基； R2為氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基，或與R1連接形成雜環(huán)； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯部分； m是0或1； n是1、2、3或4； L是取代或未取代的C1-C3烷基或者不存在， 條件是當(dāng)R1為烷基時(shí)，L是不存在的。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R2為氫。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是直鏈烷基，例如，乙基、正戊基、正庚基、或正辛基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為叔丁基。在再一個(gè)選擇方案中，R1是C7-C10二環(huán)烷基或三環(huán)烷基，例如三環(huán)[3.3.1.03，7]癸基(或金剛烷基)，二環(huán)[2.1.2]庚基，或吲哚基。在另一個(gè)選擇方案中，R1為四氫萘基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，L2為-(CH2)3-。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，L2為-(CH2)4-或-(CH2)5-。在再一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，L2為-(CH2)2-。在又一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，L2為取代烷基，例如-CH2-(CHOH)-CH2-。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，L1為CH2CH2或不存在。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是支鏈烷基，例如叔丁基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為金剛烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為環(huán)狀烷基，例如環(huán)丙基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基等。該環(huán)烷基部分可以進(jìn)一步被例如另外的烷基或能使分子產(chǎn)生其預(yù)定功能的其它基團(tuán)取代。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為被炔丙基部分(例如HC≡C-)取代的烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是被一個(gè)或多個(gè)甲基或炔丙基取代的環(huán)己基。
在其它實(shí)施方案中，L1為C1-C2烷基連接基(例如，-CH(CH3)-或-(CH2)2-)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是苯基。在某些實(shí)施方案中，R1是被甲氧基取代的。在其它實(shí)施方案中，L1是C3，例如，-(CH2)3-或C(CH3)2-。在某些實(shí)施方案中，L1是被例如烷氧基、羧基(-COOH)、芐基、酰氨基(-C＝O-NH-)、或酯(C＝O-C-O)基團(tuán)取代的。在某些實(shí)施方案中，酯基是甲基、乙基、丙基、丁基、環(huán)己基、或芐基酯。在其它實(shí)施方案中，酯基可以是丙烯基。在其它實(shí)施方案中，L1被羧基取代。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1被取代的酰氨基所取代，其中酰氨基被烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)所取代。在另一個(gè)實(shí)施方案中，烷基R1被-C＝O-NH-OH、C＝O-NH2、或酰氨基所取代。在某些實(shí)施方案中，酰氨基被烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、環(huán)己基等)、芐基或芳基所取代。在另一個(gè)實(shí)施方案中，酰氨基被-CH(CH2)2基團(tuán)所取代。R1本身可被苯基取代或者可以是支鏈或直鏈的烷基。在某些實(shí)施方案中，R1也可以被硫醚部分所取代。硫醚的實(shí)例包括S-Me，S-Et等。在某些實(shí)施方案中，烷基R1部分不僅被芳基或硫醚部分所取代，而且還被酰氨基部分取代。在其它實(shí)施方案中，烷基R1部分可被硫醚和羧基部分同時(shí)取代。在其它實(shí)施方案中，烷基R1基團(tuán)被羥基所取代。R1基團(tuán)，例如烷基R1基團(tuán)，也可以被硫醚和羥基基團(tuán)二者同時(shí)取代。在其它實(shí)施方案中，R1基團(tuán)，例如烷基R1基團(tuán)，被氰基所取代。包括-CN部分在內(nèi)的R1基團(tuán)的實(shí)例包括-C(CH3)2CN，被一個(gè)或多個(gè)氰基取代的環(huán)己基等。
在其它實(shí)施方案中，烷基R1基團(tuán)被芳基所取代。該芳基基團(tuán)例如可被苯基取代。取代苯基可以被一個(gè)或多個(gè)諸如羥基、氰基和烷氧基的取代基所取代。在其它實(shí)施方案中，烷基R1基團(tuán)被四唑基或取代或未取代的芐基所取代。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，L1是-C(CH3)2-(CH2)-。在另一個(gè)實(shí)施方案中，L1是-(C(CH3)2-CHOH-。在再一個(gè)實(shí)施方案中，L1是-(C(CH3)2-CH(OMe)-。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是取代或未取代的苯基。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1是對(duì)位取代的苯基。取代基的實(shí)例包括但不限于氟、氯、溴、碘、甲基、叔丁基、烷氧基、甲氧基等。在其它實(shí)施方案中，R1在間位上被取代。取代基的實(shí)例包括甲氧基、氯、甲基、叔丁基、氟、烷基、烷氧基、碘、三氟烷基、甲氧基等。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1是在鄰位上被類似取代基取代的苯基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，L1包括環(huán)烷基基團(tuán)，例如環(huán)戊基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，L1包括鏈烯基基團(tuán)以及任選的取代芳基(取代基與上文所述的相同)。
在某些實(shí)施方案中，R1是環(huán)丙基或環(huán)己基。在某些實(shí)施方案中，所述環(huán)丙基或環(huán)己基基團(tuán)被醚基或烷基取代。在某些進(jìn)一步的實(shí)施方案中，醚基是芐基醚基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，其中R1是烷基，它被諸如苯基、或羥基之類基團(tuán)所取代。
在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物選自以下的化合物及其可藥用的鹽、酯、和前藥













在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式III化合物及其可藥用的鹽和酯
其中 A是氮或氧； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； n是0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； R3，R3a，R4，R4a，R5，R5a，R6，R6a，R7和R7a各自獨(dú)立地為氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，烷基羰基，芳基羰基，烷氧基羰基，氰基，鹵素，氨基，四唑基，或位于相鄰環(huán)原子上的兩個(gè)R基團(tuán)與這兩個(gè)環(huán)原子一起形成雙鍵，條件是R3，R3a，R4，R4a，R5，R5a，R6，R6a，R7和R7a中的一個(gè)為式IIIa部分
其中 m是0，1，2，3，或4； RA’，RB’，Rc’，RD’，和RE’獨(dú)立地選自氫，鹵素，羥基，烷基，烷氧基，鹵代烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，氰基，噻唑基，三唑基，咪唑基，四唑基，苯并噻唑基，和苯并咪唑基； 條件是所述化合物不能是3-(4-苯基-1，2，3，6-四氫-1-吡啶基)-1-丙烷磺酸。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，n為2，3或4。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R11是成鹽陽(yáng)離子。成鹽陽(yáng)離子的實(shí)例包括本文所述的可藥用鹽以及鋰、鈉、鉀、鎂、鈣、鋇、鋅、鐵、和銨。在另一實(shí)施方案中，R11是成酯基團(tuán)。成酯基團(tuán)包括鍵合時(shí)能形成酯的基團(tuán)。這類基團(tuán)的實(shí)例包括取代或未取代的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、或環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A是氧。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3和R4與它們所連接的碳原子一起形成雙鍵。在另一個(gè)實(shí)施方案中，RA’，RB’，Rc’，RD’和RE’各自為氫。RA’，RB’，RD’和RE’各自為氫且Rc’為鹵素，譬如氟、氯、碘或溴。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3或R5a是式IIIa基團(tuán)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R4、R5、R6和R7各自為氫。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R4a、R5a、R6a和R7a各自為氫。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R3a為羥基，氰基，?；?，或羥基。
在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R11和A一起表示天然或非天然氨基酸殘基或其可藥用的鹽或酯。氨基酸殘基的實(shí)例包括苯丙氨酸和亮氨酸的酯和鹽。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，m為0，1，或3。
式III化合物的實(shí)例包括但不限于
及其可藥用的鹽、酯和前藥。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式IV化合物及其可藥用的鹽和酯
其中 A是氮或氧； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； n是0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； R4，R4a，R5，R5a，R6，R6a，R7和R7a各自獨(dú)立地為氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，烷基羰基，芳基羰基，烷氧基羰基，氰基，鹵素，氨基，四唑基，R4和R5與它們所連接的環(huán)原子一起形成雙鍵，或者R6和R7與它們所連接的環(huán)原子一起形成雙鍵； m是0，1，2，3，或4； R8，R9，R10，R11，和R12獨(dú)立地選自氫，鹵素，羥基，烷基，烷氧基，鹵代烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，氰基，噻唑基，三唑基，咪唑基，四唑基，苯并噻唑基，和苯并咪唑基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R11是成鹽陽(yáng)離子。成鹽陽(yáng)離子的實(shí)例包括本文所述的可藥用鹽以及鋰、鈉、鉀、鎂、鈣、鋇、鋅、鐵、和銨。在另一實(shí)施方案中，R11是成酯基團(tuán)。成酯基團(tuán)包括鍵合時(shí)能形成酯的基團(tuán)。這類基團(tuán)的實(shí)例包括取代或未取代的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、或環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A是氧。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，m是0或1。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，n為2，3或4。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R4，R5，R6和R7各自為氫。R4a，R5a，R6a和R7a同樣也為氫。R8，R9，R10，R11，和R12的實(shí)例包括氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R8，R9，R11，R12各自為氫，且R10為鹵素(例如氟、氯、溴或碘)，硝基，或烷基(例如甲基、乙基、丁基)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A-R11可以是氨基酸殘基，例如苯丙氨酸殘基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R9，R10，R11，和R12各自為氫，而R8則不是氫，例如是鹵素如氟、溴、氯或碘。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述化合物為
及其可藥用的鹽、酯、和前藥。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式V化合物及其可藥用的鹽、酯和前藥
其中 A是氮或氧； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； n是0，1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； aa是天然或非天然氨基酸殘基； m是0，1，2，或3； R14是氫或保護(hù)基； R15是氫，烷基或芳基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R11是成鹽陽(yáng)離子。成鹽陽(yáng)離子的實(shí)例包括本文所述的可藥用鹽以及鋰、鈉、鉀、鎂、鈣、鋇、鋅、鐵、和銨。在另一實(shí)施方案中，R11是成酯基團(tuán)。成酯基團(tuán)包括鍵合時(shí)能形成酯的基團(tuán)。這類基團(tuán)的實(shí)例包括取代或未取代的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、或環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A是氧。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，n是2，3或4。在某些實(shí)施方案中，m為0。在某些實(shí)施方案中，A-R11是天然氨基酸的殘基、或其鹽或酯。氨基酸殘基的實(shí)例包括但不限于亮氨酸或苯丙氨酸殘基，及其可藥用的鹽和酯。可能的酯的實(shí)例包括甲基、乙基、和叔丁基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，m是1。aa的實(shí)例包括天然和非天然氨基酸殘基如苯丙氨酸、甘氨酸、和亮氨酸。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，(aa)m是phe-phe的殘基，或其酯。
在某些實(shí)施方案中，R15是氫或取代烷基，例如芳基烷基。
術(shù)語(yǔ)“非天然氨基酸”是指包括D型在內(nèi)的天然氨基酸的任何衍生物，以及α-和β-氨基酸衍生物。術(shù)語(yǔ)“非天然氨基酸”和“非天然的氨基酸”在本文中互換使用，并且意味著包括相同的部分。應(yīng)當(dāng)指出，在本文中分入非天然氨基酸類別的某些氨基酸(例如羥基脯氨酸)在自然界中也可存在于某些微生物或特殊蛋白質(zhì)內(nèi)。適合在肽固相合成中作為中間體使用的帶有多種不同保護(hù)基的氨基酸可從市場(chǎng)上購(gòu)得。除了20種最常見的天然氨基酸外，例如，下列非天然氨基酸和氨基酸衍生物也可用于本發(fā)明(括號(hào)內(nèi)為常用縮寫)β-丙氨酸(β-ALA)，γ-氨基丁酸(GABA)，2-氨基丁酸(2-Abu)，α，β-脫氫-2-氨基丁酸(8-AU)，1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸(ACPC)，氨基異丁酸(Aib)，2-氨基噻唑啉-4-羧酸，5-氨基戊酸(5-Ava)，6-氨基己酸(6-Ahx)，8-氨基辛酸(8-Aoc)，11-氨基十一烷酸(11-Aun)，12-氨基十二烷酸(12-Ado)，2-氨基苯甲酸(2-Abz)，3-氨基苯甲酸(3-Abz)，4-氨基苯甲酸(4-Abz)，4-氨基-3-羥基-6-甲基庚酸(抑胃酶氨酸，Sta)，氨基羥乙酸(Aoa)，2-氨基-1，2，3，4-四氫化萘-2-羧酸(ATC)，4-氨基-5-環(huán)己基-3-羥基戊酸(ACHPA)，對(duì)氨基苯丙氨酸(4-NH2-Phe)，聯(lián)苯丙氨酸(Bip)，對(duì)溴苯丙氨酸(4-Br-Phe)，鄰氯苯丙氨酸(2-Cl-Phe)，間氯苯丙氨酸(3-Cl-Phe)，對(duì)氯苯丙氨酸(4-Cl-Phe)，間氯酪氨酸(3-Cl-Tyr)，對(duì)苯甲?；奖彼?Bpa)，叔丁基甘氨酸(TLG)，環(huán)己基丙氨酸(Cha)，環(huán)己基甘氨酸(Chg)，2，3-二氨基丙酸(Dpr)，2，4-二氨基丁酸(Dbu)，3，4-二氯苯丙氨酸(3，4-Cl2-Phe)，3，4-二氟苯丙氨酸(3，4-F2-Phe)，3，5-二碘酪氨酸(3，5-I2-Tyr)，鄰氟苯丙氨酸(2-F-Phe)，間氟苯丙氨酸(3-F-Phe)，對(duì)-氟苯丙氨酸(4-F-Phe)，間氟酪氨酸(3-F-Tyr)，高絲氨酸(Hse)，高苯丙氨酸(Hfe)，高酪氨酸(Htyr)，5-羥基色氨酸(5-OH-Trp)，羥基脯氨酸(Hyp)，對(duì)碘苯丙氨酸(4-I-Phe)，3-碘酪氨酸(3-I-Tyr)，2，3-二氫吲哚-2-羧酸(Idc)，六氫異煙酸(Inp)，間甲基酪氨酸(3-Me-Tyr)，1-萘基丙氨酸(1-Nal)，2-萘基丙氨酸(2-Nal)，對(duì)硝基苯丙氨酸(4-NO2-Phe)，3-硝基酪氨酸(3-NO2-Tyr)，正亮氨酸(Nle)，正纈氨酸(Nva)，鳥氨酸(Orn)，鄰磷酸酪氨酸(H2PO3-Tyr)，八氫吲哚-2-羧酸(Oic)，青霉胺(Pen)，五氟苯丙氨酸(F5-Phe)，苯甘氨酸(Phg)，哌可酸(Pip)，炔丙基甘氨酸(Pra)，焦谷氨酸(PGLU)，肌氨酸(Sar)，四氫異喹啉-3-羧酸(Tic)，噻吩基丙氨酸，和噻唑烷-4-羧酸(硫脯氨酸，Th)。此外，也可以使用N-烷基化的氨基酸，以及帶有含胺側(cè)鏈的氨基酸(例如Lys和Orn)，其中所述胺已經(jīng)被?；蛲榛?。
本發(fā)明化合物的實(shí)例包括但不限于
及其可藥用的鹽、酯、和前藥。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明(至少部分)涉及式VI化合物或其可藥用的鹽
其中 n是1，2，3，4，5，6，7，8，9，或10； A是氮或氧； R11是氫，成鹽陽(yáng)離子、成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11共同表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； R19是氫，烷基或芳基； Y1是氧，硫，或氮； Y2是碳，氮或氧； R20是氫，烷基，氨基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基或苯并咪唑基； R21是氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基，或當(dāng)Y2為氧時(shí)其不存在； R22是氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基；或者當(dāng)Y1為氮時(shí)，R22是氫，羥基，烷氧基或芳氧基；或者當(dāng)Y1為氧或硫時(shí)，R22是不存在的；或者當(dāng)Y1為氮時(shí)，R22和R21可連接形成環(huán)狀基團(tuán)； R23是氫，烷基，氨基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，四唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基，或當(dāng)Y2為氮或氧時(shí)其不存在。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R11是成鹽陽(yáng)離子。成鹽陽(yáng)離子的實(shí)例包括本文所述的可藥用鹽以及鋰、鈉、鉀、鎂、鈣、鋇、鋅、鐵、和銨。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述鹽是鈉鹽。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，A為氧。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y1是氧或硫，且R22是不存在的。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y2是氧且R21是不存在的。R20的實(shí)例包括芐基，芳基(例如苯基)，烷基，環(huán)烷基(例如金剛烷基)等。在其它實(shí)施方案中，Y2是氮且R21是氫。在其它實(shí)施方案中，R21是芐基。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R20和R21連接形成吡啶基環(huán)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Y1是硫。
本發(fā)明化合物的實(shí)例包括以下化合物及其可藥用的鹽、酯、和前藥
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式VII化合物或其可藥用的鹽、酯和前藥
其中 n是2，3或4； A是氧或氮； R11為氫，成鹽陽(yáng)離子，成酯基團(tuán)，-(CH2)x-Q，或當(dāng)A為氮時(shí)，A和R11一起表示天然或非天然氨基酸殘基或其鹽或酯； Q是氫，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，或苯并咪唑基； x是0，1，2，3，或4； G是直接鍵或氧、氮或硫； z是0，1，2，3，4，或5； m是0或1； R24選自氫，烷基，巰基烷基，鏈烯基，炔基，芳?；?，烷基羰基，氨基烷基羰基，環(huán)烷基，芳基，芳基烷基，噻唑基，三唑基，咪唑基，苯并噻唑基，和苯并咪唑基； 各個(gè)R25獨(dú)立地選自氫，鹵素，氰基，羥基，烷氧基，巰基，氨基，硝基，烷基，芳基，碳環(huán)或雜環(huán)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R11是氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，A是氧。例如，n可以是3且m可以是1。在其它實(shí)施方案中，R24為氫或芐基。
在某些實(shí)施方案中，z是0，2或3。在其它實(shí)施方案中，R25是羥基或烷氧基，例如甲氧基、乙氧基等。在某些實(shí)施方案中，兩個(gè)或更多個(gè)R25取代基可以連接形成稠環(huán)(例如，形成亞甲二氧基苯基基團(tuán))。
本發(fā)明化合物的實(shí)例包括以下化合物及其可藥用的鹽、酯、和前藥
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括下式化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 R1為氫，取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基； R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)； L1為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在； B為C1-C5烷基，鏈烯基，或炔基，當(dāng)M不存在時(shí)，其任選與W稠合； M為共價(jià)鍵，氨基，C1-C6烷基，鏈烯基，炔基，羧基，氧基，酰胺(amide)，酯，硫醚，硫酯或不存在； W是取代或未取代的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)、雜環(huán)基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基或苯并咪唑基；和 v為1，2，3，4，5，或6； 條件是當(dāng)Y為甲基，R1和R2均為氫，Y為SO3-X+，M為共價(jià)鍵時(shí)，B不能是CH2-CH(M-W)-CH2。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1和R2各自為氫且L1是共價(jià)鍵。在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1為烷基且R2為氫。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Y為SO3-X+。在另一個(gè)實(shí)施方案中，M為共價(jià)鍵或C1-C3烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，W為鏈烯基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，W為芳基(例如取代或未取代的苯基)或雜芳基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，W為取代或未取代的烷基(例如直鏈、支鏈或環(huán)狀的(例如金剛烷基等)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，B為C1-C5烷基。B的實(shí)例包括-CH(M-W)-CH2-CH2-，-CH2-CH(M-W)-CH2-，和-(CH2)-CH2-CH(M-W)-。在另一個(gè)實(shí)施方案中，B為鏈烯基。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述化合物選自以下

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式IX化合物或其可藥用的鹽
其中 R1為取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基； R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基； R3是氫或保護(hù)基； aa為天然或非天然氨基酸的殘基； L3為共價(jià)鍵，氨基，C1-C6烷基，鏈烯基，炔基，羧基，酰胺，氨基烷基，醚，酯，硫醚，硫酯或不存在； Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；并且 L1和L2各自獨(dú)立地為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R2為氫，Y為SO3-X+，且L2為-(CH2)3-。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1為碳環(huán)或雜環(huán)基。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R1為金剛烷基。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，L3為共價(jià)鍵，硫醚，氨基，氧基，氨基烷基，或醚。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，R3為氫。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，aa為甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸或苯丙氨酸。R3基團(tuán)可以通過任何可利用原子(不一定是通過肽鍵)與氨基酸連接。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，式IX化合物選自以下化合物及其可藥用的鹽、酯和前藥
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(X)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Ra為氫、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基、烷氧基羰基、或氨基羰基； Rb和Rc各自獨(dú)立選自氫、取代或未取代的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、CONH2，或者Rb、Rc與它們所連接的碳原子可以形成取代或未取代的4-8元環(huán)或稠合環(huán)系的環(huán)狀結(jié)構(gòu)；并且 X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，X+是氫。
在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Ra是取代或未取代的烷基。Ra基團(tuán)的實(shí)例包括甲基、乙基、羥甲基、或苯基取代的烷基(例如，1-(對(duì)-甲基-苯基)-1-羥甲基)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Ra為氫或氨基羰基(例如，NH2-C(＝O)-)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Rb和Rc中至少一個(gè)為取代或未取代的烷基。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Rb和Rc各自是未取代的烷基。Rb和Rc的實(shí)例包括甲基、乙基、異丙基、丙基、異丁基、正丁基、叔丁基、戊基、己基、或庚基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Rb和Rc中至少一個(gè)為羥基烷基，烷氧基烷基，烷硫基烷基，芳氧基烷基，烷基羰基烷基，或芳基烷基。
在其他實(shí)施方案中，Rb和Rc連接成環(huán)。該環(huán)可以是環(huán)烷基(例如環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、或環(huán)庚基)或環(huán)烯基。在其他實(shí)施方案中，Rb和Rc連接形成橋環(huán)合或稠合的環(huán)系，例如金剛烷基，降冰片烷、2，3-二氫茚基、芴基等。
式(X)化合物的實(shí)例包括但不限于下列化合物N1，N3，N7，N8，N18，N28，N29，N44，N47，N49，N50，N51，N53，N56，N58，N59，N61，N62，N68，N72，N77，N81，MJ，NN，NM，NO，NP，NQ，NR，NT，NW，NZ，OC，OF，OG，ON，OQ，OS，OT，OU，OV，OW，OX，OY，PH，PJ，PK，PL，PM，PN，PO，PP，PR，PS，PT，PU，PV，PW，PX，PY，QB，QE，QF，和QM。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(XI)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Rd是H或烷基； Re和Rf各自獨(dú)立地為氫，C1-C6烷基，或者Re和Rf與它們所連接的碳原子一起形成3-6元的環(huán)； Rg在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立選自氫，烷基，烷氧基，鹵素，NO2，和烷基-SO2； q為1，2，3，4或5； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
Ar為芳基或雜芳基；和 Z為-(CH2)0-3-，-(CHOH)-，(CH2)1-3O(CH2)1-3，或羰基。
在-個(gè)實(shí)施方案中，X+為氫。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Rd為氫。在再一個(gè)實(shí)施方案中，Re和Rf各自獨(dú)立地為氫，甲基，乙基或連接成環(huán)，例如環(huán)己基環(huán)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Z為-CH2-，-CHOH-，或共價(jià)鍵。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Ar為苯基、萘基、噻吩基、呋喃基、或苯并噻吩基。在再一個(gè)實(shí)施方案中，q為1或2。Rg的實(shí)例包括甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，羥基，溴，氯，甲氧基，乙氧基，丙氧基，烷基-SO2-和硝基。
式(XI)化合物的實(shí)例包括但不限于化合物N37，N39，N43，N45，N46，N48，N52，N54，N55，N57，N60，N64，N65，N66，N67，NS，NU，NV，NX，NY，OA，OB，OD，OE，OH，OL，OM，OO，OP，OR，OZ，PA，PB，PD，PE，PF，PI，PQ，PZ，QA，QC，QD，QG，QH，QI，QJ，QK，QL和QW。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(XII)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Rh是氫，芐基，芳基-烷基，芳基，或烷基； Ri、Rj、Rk、Rm、Rn和Ro各自獨(dú)立為氫，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芐基，烷基，鏈烯基，碳環(huán)基，雜環(huán)基，不存在或者可以一起連接成環(huán)狀結(jié)構(gòu)； X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；和 t1和t2各自為單鍵或雙鍵，條件是t1和t2不能同時(shí)為雙鍵。
在一個(gè)實(shí)施方案中，Rh是甲基，苯基，2，3-二氫茚基，叔丁基，氫，芐基，或金剛烷基。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Ri、Rj、Rk、Rm和Rn各自為氫且t1和t2各自為單鍵。在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Ro是芐基，苯基，乙基，丁基，噻吩基-氨基，或丙烯基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Rj，Rm和Ro各自為氫，Rn和Rk各自是不存在的，t1是單鍵，而t2為雙鍵。
在再一個(gè)實(shí)施方案中，Rj、Rk、Rm、Rn和Ro各自為氫且t1和t2各自為單鍵。
在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Ri為芐基，金剛烷基，甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，環(huán)己基，羥基烷基，立方烷基，立方烷基-甲基-，金剛烷基-甲基，苯基-金剛烷基-甲基，氨基羰基-金剛烷基-甲基-，或雜芳基-烷基。
在另一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Ri、Rj、Rm、Rn和Ro各自為氫且t1和t2各自為單鍵。在再一個(gè)實(shí)施方案中，Rk為芐基，取代苯基，叔丁基，金剛烷基，金剛烷基-甲基，苯基-金剛烷基-甲基，氨基羰基-金剛烷基-甲基-，或雜芳基-烷基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，Ri、Rj、Rk和Rn各自為氫且Rm和Ro連接成環(huán)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，所述環(huán)是未取代的或取代的環(huán)烷基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述環(huán)是稠合或橋合的環(huán)。
式(XII)化合物的實(shí)例包括但不限于化合物N2，N4，N5，N6，N9，N10，N11，N12，N13，N14，N15，N16，N17，N19，N20，N21，N22，N23，N24，N25，N26，N30，N32，N33，N34，N35，N36，N38，N40，N41，N42，N63，N69，N70，N71，N73，N74，N75，N76，N78，N79，N80，N82，N83，N84，N85，N86，N87，N88，QN，QO，QQ，QR，QS，QT，QU，QV，QX，QY，QZ，RA，RB，RC，RD，RE，RF，RG，RH，RI，RJ，RK，RL，RM，RN，RO，RP，RQ，RR，RS，RT，RU，RV，RW，RX，RY，RZ，SA，SB，SX，SY，SZ，TA和TB。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及式(XIII)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 n1為0，1，2或3； P為共價(jià)鍵，烷基，烷氧基，氨基，烷基氨基，硫，或烷硫基； X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；和 Rp為天然或非天然氨基酸的殘基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，Rp通過非肽鍵與P連接。該非肽鍵可以發(fā)生于氨基酸殘基的任何碳原子。在某些實(shí)施方案中，Rp可以通過雜原子與P連接。Rp的實(shí)例包括甘氨酸(例如，HO(C＝O)-CHNH-)，苯丙氨酸，和脯氨酸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，P為共價(jià)鍵，CH2，-NH-，-O-，烷硫基，或烷氧基。
式(XIII)化合物的實(shí)例包括但不限于化合物SC，SD，SE，SF，SG，SH，SI，SJ，SK，SL，SM，SN，SO，SP，SQ，SR，SS，ST，SU，SV和SW。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，涉及式(XIV)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 n2為0，1，2，或3，其選擇應(yīng)使得SO3-X+基團(tuán)與環(huán)中氮原子之間存在三個(gè)碳原子； X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)； Rs為氫或當(dāng)n2為3時(shí)，Rs為(CH2)3-SO3-X+； Rq和Rr各自獨(dú)立選自氫或烷基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，X+為氫。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，n2為0且SO3-X+基團(tuán)連接在哌嗪環(huán)的4位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n2為1且SO3-X+基團(tuán)連接在哌嗪環(huán)的3-位。在再一個(gè)實(shí)施方案中，n2為2且SO3-X+基團(tuán)連接在哌嗪環(huán)的2位。在另一個(gè)實(shí)施方案中，n2為2且Rs為(CH2)3-SO3-X+。
式XIV化合物的實(shí)例包括但不限于化合物OI，OJ，OK，PG和QP。
在再一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及式(XV)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中 Rt為氫，烷基或芳基； Ru和Rv在每次出現(xiàn)時(shí)各自獨(dú)立地選自氫，芳基，芐基，烷基，鏈烯基，碳環(huán)基，雜環(huán)基，或者鄰近碳原子上的兩個(gè)Ru或Rv基團(tuán)可以形成雙鍵，或者與它們所連接的碳原子一起形成碳環(huán)或雜環(huán)； n3為4，5，6，或7；和 X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
式XV化合物的實(shí)例包括但不限于化合物N27和N31。
本發(fā)明的其它化合物包括以下化合物及其可藥用的鹽、前藥和酯
本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物的鹽形式以及酸/堿形式。例如，本發(fā)明不僅涉及本文中以鹽形式表示的化合物的特定鹽形式，而且本發(fā)明也包括其它可藥用的鹽，以及所述化合物的酸和/或堿形式。本發(fā)明也涉及本文所示化合物的鹽形式。
本發(fā)明化合物也見下表2A，2B，3A和3B所示。
表2A



















表2B














表3A











表3B







應(yīng)當(dāng)指出，在上表以及本申請(qǐng)中，當(dāng)所示原子沒有氫，而形成穩(wěn)定化合物又需要或者是化學(xué)上必需氫的情況下，則應(yīng)推定氫是化合物的一部分。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明不涉及WO 00/64420和WO 96/28187中描述的化合物。在這一實(shí)施方案中，本發(fā)明不涉及使用WO 00/64420和WO 96/28187中描述的化合物治療其中所述疾病或癥狀的方法。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及使用WO 00/64420和WO96/28187中所述化合物的方法，它用于本申請(qǐng)所述的方法，這些方法在WO00/64420和WO96/28187中沒有記載。WO 00/64420和WO96/28187的全部?jī)?nèi)容在此引入用作參考。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本申請(qǐng)不涉及美國(guó)專利申請(qǐng)10/871,512、10/871,514、或10/871,365中描述的化合物，這三件專利申請(qǐng)的提交日均為2004年6月18日，其內(nèi)容在此引入作為參考。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明不涉及表2A和2B的化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及使用本發(fā)明的方法以及包含表2A、2B、3A或3B化合物的藥物組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及使用本發(fā)明的方法以及包含表2A、2B、3A或3B化合物的藥物組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物不包括表2A或2B的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物不包括表2A或2B的化合物。
應(yīng)當(dāng)理解，此處所述的或“相關(guān)申請(qǐng)”部分的申請(qǐng)中描述的任何化合物的應(yīng)用都落在本發(fā)明的范圍之內(nèi)，并且被本發(fā)明所包括，并且至少出于這些目的，每件申請(qǐng)的內(nèi)容都明確地引入本文，而且出于其他目的也都進(jìn)一步明確地引入本文。
患者和患者群體 術(shù)語(yǔ)“患者”包括其中可以發(fā)生淀粉樣變性或容易感染淀粉樣疾病(例如阿爾茨海默氏病、唐氏綜合癥、CAA、透析相關(guān)性(β2M)淀粉樣變性、繼發(fā)性(AA)淀粉樣變性、原發(fā)性(AL)淀粉樣變性、遺傳性淀粉樣變性、糖尿病等)的活生物體?；颊叩膶?shí)例包括人、雞、鴨、北京鴨、鵝、猴子、鹿、牛、兔子、綿羊、山羊、狗、貓、小鼠、大鼠及其轉(zhuǎn)基因物種。如本文進(jìn)一步所述，可以使用已知的方法，以能有效地抑制患者中淀粉樣蛋白沉積或淀粉樣蛋白有毒的毒性的劑量和治療時(shí)間周期對(duì)受治療的患者給藥本發(fā)明的組合物。達(dá)到治療效果所需治療化合物的有效量隨多種因素而變化，例如患者治療部位已經(jīng)沉積的淀粉樣蛋白的量、患者的年齡、性別、和體重、以及治療化合物調(diào)節(jié)患者體中淀粉樣蛋白聚集的能力?？梢哉{(diào)整給藥方案以獲得最佳治療反應(yīng)。例如，可以每日給藥多個(gè)分劑量，或者根據(jù)治療情況的急迫程度按比例地減少劑量。
在本發(fā)明的某些具體方案中，患者需要通過本發(fā)明的方法進(jìn)行治療，并且基于該需要選擇治療方法。需要治療的患者是本領(lǐng)域公知的，并且包括以下患者已經(jīng)被證實(shí)患有與淀粉樣蛋白沉積或淀粉樣變性有關(guān)的疾病或病癥的患者、具有這種疾病或病癥癥狀的患者，或者處于這種疾病或病癥的危險(xiǎn)之中的患者，以及基于診斷學(xué)(例如內(nèi)科診斷學(xué))預(yù)期能夠通過治療(例如治愈、痊愈、預(yù)防、減輕、緩解、改變、彌補(bǔ)、改善、改進(jìn)或影響該疾病或病癥、以及該疾病或病癥的癥狀、或疾病或病癥的危險(xiǎn))而受益的患者。
在本發(fā)明的示例方案中，患者指人。例如，患者可以是超過30歲的人、超過40歲的人、超過50歲的人、超過60歲的人、超過70歲的人、超過80歲的人、超過85歲的人、超過90歲的人、超過95歲的人?；颊呖梢允桥?，包括絕經(jīng)后婦女，這種婦女可能正在接受(雌激素)替代療法。患者也可以是男性。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者小于40歲。
患者可以是處于阿耳茨海默氏病危險(xiǎn)中的人，例如年齡超過40歲的人，或具有阿耳茨海默氏病傾向的人。科學(xué)文獻(xiàn)中確定的或提出的阿耳茨海默氏病素因性因素尤其包括使患者易患阿耳茨海默氏病的基因型(genotype)；使患者易患阿耳茨海默氏病的環(huán)境因素；使患者易患阿耳茨海默氏病的病毒與細(xì)菌因子引起的過去感染史；以及使患者易患阿耳茨海默氏病的血管因子?；颊咭部梢跃哂幸环N或多種能引起心血管病(例如冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、心絞痛、和心肌梗塞)或腦血管病(例如顱內(nèi)或顱外動(dòng)脈的粥樣硬化、中風(fēng)、暈厥、和短暫性缺血發(fā)作)的危險(xiǎn)病因，例如血膽甾醇過多，高血壓，糖尿病，吸煙，家族性或病史性的冠狀動(dòng)脈病、腦血管病和心血管病。血膽甾醇過多通常定義為血清總膽固醇濃度大于約5.2mmol/L(大約200mg/dL)。
據(jù)信有數(shù)種基因型能夠使患者易患阿耳茨海默氏病。這些包括諸如與家族性阿耳茨海默氏病有關(guān)的早老蛋白-1、早老蛋白-2、和淀粉樣蛋白前體(APP)錯(cuò)義突變的基因型，以及α-2-巨球蛋白和LPR-1基因型，它們被認(rèn)為能增加獲得性散發(fā)性(延期發(fā)作)阿耳茨海默氏病的危險(xiǎn)性。E.van Uden等，J.Neurosci.22(21)，9298-304(2002)；J.J.Goto等，J.Mol.Neurosci.19(1-2)，37-41(2002)。形成阿耳茨海默氏病的另一遺傳風(fēng)險(xiǎn)因子是ApoE的變體，ApoE是編碼載脂蛋白E的基因(特別是apoE4基因型)，后者是低密度脂蛋白顆粒的組分。WJStrittmatter等，Annu.Rev.Neurosci.19，53-77(1996)。各種ApoE等位基因改變發(fā)展成阿耳茨海默氏病可能性的分子機(jī)制是未知的，但ApoE在膽固醇代謝中的作用與關(guān)聯(lián)膽固醇代謝和阿耳茨海默氏病一些不斷增加的證據(jù)一致。例如，近來(lái)發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期使用降膽固醇藥物如他汀類的同時(shí)，阿耳茨海默氏病的發(fā)生率降低，并且已經(jīng)證明降膽固醇藥能減少APP轉(zhuǎn)基因小鼠的病變。這些及其他研究表明，膽固醇可能會(huì)影響APP進(jìn)程。已經(jīng)證明ApoE4能改變(腦內(nèi)外)Aβ運(yùn)轉(zhuǎn)(trafficking)，并且促進(jìn)Aβ在腦中的保留。也已經(jīng)證明，ApoE4能促進(jìn)APP加工形成Aβ。盡管流行病學(xué)證據(jù)尚不明確，但環(huán)境因素已被認(rèn)為能使患者易患阿耳茨海默氏病，包括與鋁接觸。另外，某些病毒或細(xì)菌因子的早期感染可能會(huì)使患者易患阿耳茨海默氏病，這些因子包括單純性皰疹病毒和肺炎衣原體。最后，引起阿耳茨海默氏病的其他素因性因素包括心血管或腦血管病方面的危險(xiǎn)因素，包括吸煙、高血壓和糖尿病。“具有阿耳茨海默氏病危險(xiǎn)性”也包括上面未列出的或尚未確定的其他素因性因素，并且包括頭損傷、藥療法、飲食、或生活方式引起的高阿耳茨海默氏病危險(xiǎn)性。
本發(fā)明的方法可以用于一種或多種以下用途預(yù)防阿耳茨海默氏病，治療阿耳茨海默氏病，或緩解阿耳茨海默氏病的癥狀，或調(diào)節(jié)淀粉樣蛋白β(Aβ)肽的產(chǎn)生或含量。在一個(gè)實(shí)施方案中，人攜帶一個(gè)或多個(gè)編碼β-淀粉樣蛋白前體蛋白、早老蛋白-1或早老蛋白-2的基因的突變。在另一個(gè)實(shí)施方案中，人攜帶載脂蛋白4基因。在另一個(gè)實(shí)施方案中，人具有家族史性阿耳茨海默氏病或癡呆病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，人具有三體性21(唐氏綜合癥)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者具有正常或低的血清總血膽固醇水平。在另一個(gè)實(shí)施方案中，血清總血膽固醇水平低于大約200mg/dL，或低于大約180，并且可以在大約150至大約200mg/dL的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，總LDL膽固醇水平低于大約100mg/dL，或低于大約90mg/dL，并且可以在大約30至大約100mg/dL范圍內(nèi)。測(cè)量血清總血膽固醇和總LDL膽固醇的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，例如包括WO 99/38498第11頁(yè)中描述的方法，該方法在此引入用作參考。測(cè)定血清中其他甾醇水平的方法見H Gylling等所述“Serum Sterols During Stanol EsterFeeding in a Mildyly Hypercholesterolemic Population”，J.Lipid Res.40593-600(1999)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者具有高血清總血膽固醇水平。在另一個(gè)實(shí)施方案中，血清總膽固醇水平至少為大約200mg/dL，或至少大約220mg/dL，并且可以在大約200至大約1000mg/dL的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者具有高總LDL膽固醇水平。在另一個(gè)實(shí)施方案中，總LDL膽固醇水平高于約100mg/dL，或者甚至高于約110mg/dL，并且可以在大約100至大約1000mg/dL. 在另一個(gè)實(shí)施方案中，人至少為大約40歲。在另一個(gè)實(shí)施方案中，人至少為大約60歲。在另一個(gè)實(shí)施方案中，人至少為大約70歲。在另一個(gè)實(shí)施方案中，人至少為大約80歲。在另一個(gè)實(shí)施方案中，人至少為大約85歲。在一個(gè)實(shí)施方案中，人為大約60至大約100歲。
在再一個(gè)實(shí)施方案中，患者通過腦成像診斷技術(shù)(例如，一種測(cè)量腦活性、噬斑沉積、或腦萎縮的技術(shù))被證明處于危險(xiǎn)中。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，患者通過認(rèn)知測(cè)試譬如癡呆臨床分級(jí)法(“CDR”)、阿耳茨海默氏病認(rèn)知評(píng)價(jià)量表(“ADAS-Cog”)、癡呆病殘?jiān)u價(jià)(Disability Assessment for Dementia(“DAD”))或簡(jiǎn)明精神狀態(tài)量表(“MMSE”)被證明處于危險(xiǎn)中。與相似年齡和教育背景的實(shí)際對(duì)照者相比，患者在認(rèn)知試驗(yàn)中顯示低于平均成績(jī)。對(duì)于相同或相似的認(rèn)知試驗(yàn)，與患者以前成績(jī)相比，患者也顯示出成績(jī)降低。
在測(cè)定CDR時(shí)，通常對(duì)患者的以下六種認(rèn)知和行為種類的每一種進(jìn)行評(píng)估并分級(jí)記憶力、定向力、判斷和解決問題的能力、社會(huì)事務(wù)、家庭和愛好，以及個(gè)人護(hù)理能力。評(píng)估可包括患者或(優(yōu)選)充分了解患者的助證者提供的歷史資料。在這些領(lǐng)域中的每一個(gè)領(lǐng)域都對(duì)患者進(jìn)行評(píng)估并分級(jí)，然后確定總的等級(jí)(0，0.5，1.0，2.0或3.0)。0等級(jí)被認(rèn)為是正常的。1.0等級(jí)被認(rèn)為對(duì)應(yīng)于輕度癡呆。具有0.5CDR的患者具有以下特征輕度一貫性(consistent)健忘、事件部分回憶和“良性”健忘。在一個(gè)實(shí)施方案中，采用高于0、高于約0.5、高于約1.0、高于約1.5、高于約2.0、高于約2.5或大約3.0的CDR等級(jí)對(duì)患者進(jìn)行評(píng)價(jià)。
另一項(xiàng)試驗(yàn)是簡(jiǎn)明精神狀態(tài)量表(MMSE)，見Folstein所述“簡(jiǎn)明精神狀態(tài).一種臨床醫(yī)師分級(jí)患者認(rèn)知狀態(tài)的實(shí)用方法”，J.Psychiatr.Res.12189-198，1975。MMSE能評(píng)價(jià)綜合性智力退化的存在。同樣參見Folstein“癡呆癥的鑒別診斷臨床方法”，Psychiatr Clin NorthAm.2045-57，1997。MMSE是一種評(píng)價(jià)在阿耳茨海默氏病和多梗塞性癡呆中觀測(cè)到的癡呆發(fā)作和存在綜合性智力退化的方法。MMSE分1-30個(gè)等級(jí)。MMSE不評(píng)價(jià)基本認(rèn)知潛能(例如象所謂的IQ試驗(yàn)?zāi)菢?，而是測(cè)試智力技能。在MMSE目標(biāo)試驗(yàn)中，一個(gè)“正?！敝橇δ芰Φ娜擞浄譃椤?0”(而在IQ試驗(yàn)中，MMSE成績(jī)?yōu)?0的人可能獲得遠(yuǎn)低于“正?！钡某煽?jī))。例如，參見Kaufer，J.NeuropsychiatryClin.Neurosci.1055-63，1998；Becke，Alzheimer Dis Assoc Disord.1254-57，1998；Ellis，Arch.Neurol.55360-365，1998；Magni，Int.Psychogeriatr.8127-134，1996；Monsch，Acta Neurol.Scand.92145-150，1995.在一個(gè)實(shí)施方案中，患者M(jìn)MSE成績(jī)至少一次低于30。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者的成績(jī)低于大約28，低于大約26，低于大約24，低于大約22，低于大約20，低于大約18，低于大約16，低于大約14，低于大約12，低于大約10，低于大約8，低于大約6，低于大約4，低于大約2，或低于大約1。
另一種評(píng)價(jià)認(rèn)知能力，特別是阿耳茨海默氏病的方法是阿耳茨海默氏病評(píng)價(jià)量表(ADAS-Cog)，或被稱為“標(biāo)準(zhǔn)化阿耳茨海默氏病評(píng)價(jià)量表(SADAS)”的變換方法。這種方法通常在阿耳茨海默氏病以及以認(rèn)知退化為特征的相關(guān)疾病的臨床藥物試驗(yàn)中用作效率的量度。SADAS和ADAS-Cog不是用來(lái)診斷阿耳茨海默氏病；它們用于表征癡呆的癥狀，是癡呆進(jìn)展的相對(duì)敏感指標(biāo)。(參見，例如，Doraiswamy，Neurology 481511-1517，1997；和Standish，J.Am.Geriatr.Soc.44712-716，1996)。未經(jīng)治療的阿耳茨海默氏病患者的每年退化率為大約8點(diǎn)/年(參見，例如，Raskind，M Prim.Care Companion J ClinPsychiatry2000 Aug；2(4)134-138)。
人們已經(jīng)開發(fā)了癡呆病廢量表(“DAD”)來(lái)測(cè)驗(yàn)患者日常生活的能力(Gelinas I等，Development of a Functional Measure for Person withAlzhiemer’s DiseaseThe Disability Assessment for Dementa.Am.J.Occupational Therapy.1999；53471-481)。日常生活活動(dòng)可以根據(jù)自理(例如穿衣和個(gè)人衛(wèi)生)和使用工具活動(dòng)(例如做家務(wù)、烹飪和使用家用設(shè)備)的能力進(jìn)行評(píng)估。DAD量表的目標(biāo)包括定量測(cè)試認(rèn)知損傷個(gè)體日常生活活動(dòng)的功能能力以及有助于描述可能損害日常生活活動(dòng)行為的認(rèn)知缺陷的范圍。通過與關(guān)愛人員(caregiver)面談實(shí)施DAD。在面談之前觀察兩個(gè)2周期限，觀測(cè)患者日常生活活動(dòng)的實(shí)際行為。該量表評(píng)價(jià)下列活動(dòng)范圍衛(wèi)生保健、穿衣、打電話、自制、飲食、膳食準(zhǔn)備、戶外活動(dòng)、理財(cái)和通信，吃藥、休閑活動(dòng)和家務(wù)。通過加合每項(xiàng)問題的得分得到總成績(jī)，進(jìn)而將該總成績(jī)進(jìn)行換算，可以超過100分的范圍。高成績(jī)表示ADL的智力無(wú)能低，而低成績(jī)表示高機(jī)能障礙。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者的DAD成績(jī)至少一次低于100。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者的成績(jī)低于約95，低于約90，低于約85，低于約80，低于約75，低于約70，低于約65，低于約60，低于約55，低于約50，低于約45，低于約40，低于約30，低于約20，或低于約10。
ADAS-Cog是利用調(diào)查表，按照70分量表測(cè)驗(yàn)AD中可觀測(cè)到的認(rèn)知退化的進(jìn)展與嚴(yán)重程度。ADAS-cog量表定量地表示錯(cuò)誤答案的數(shù)量。因此，高的等級(jí)成績(jī)表示認(rèn)知退化的情況越嚴(yán)重。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者顯示高于0、高于大約5、高于大約10、高于大約15、高于大約20、高于大約25、高于大約30、高于大約35、高于大約40、高于大約45、高于大約50、高于大約55、高于大約60、高于大約65、高于大約68、或大約70的成績(jī)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者不顯示阿耳茨海默氏病癥狀。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者是年齡至少40且不顯示阿耳茨海默氏癥狀的人。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者是至少40歲且顯示出一種或多種阿耳茨海默氏病癥狀的人。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有輕度認(rèn)知損傷。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，患者具有大約0.5等級(jí)的CDR。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有早期阿耳茨海默氏病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有腦淀粉樣血管病。
采用本發(fā)明的方法，患者的血漿或腦脊髓液中淀粉樣蛋白β肽的水平按治療前的水平計(jì)降低大約10-大約100％，或者甚至大約50-大約100％。
在一個(gè)可供選擇的實(shí)施方案中，在按照本發(fā)明方法治療之前患者的血液和CSF中可以具有以下的高水平淀粉樣蛋白Aβ40和Aβ42肽高于大約10pg/mL，或高于大約20pg/mL，或高于大約35pg/mL，或甚至高于大約40pg/mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，高水平的淀粉樣蛋白Aβ42肽可以為大約30pg/mL到大約200pg/mL，或者甚至可到大約500pg/mL。本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，隨著阿耳茨海默氏病的進(jìn)展，CSF中的淀粉樣蛋白β肽的可測(cè)量水平可能從疾病發(fā)作前的高水平降下來(lái)。這種結(jié)果的原因在于沉積增多，即捕獲了腦中的Aβ肽，而不是從腦中正常清除到CSF中。
在一個(gè)可供選擇的實(shí)施方案中，在按照本發(fā)明方法治療之前患者的血液和CSF中可以具有以下的高水平淀粉樣蛋白Aβ40肽高于大約5pgAβ42/mL或高于大約50pgAβ40/mL，或高于大約400pg/mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，高水平的淀粉樣蛋白Aβ40肽可以為大約200pg/mL到大約800pg/mL，或者甚至可到大約1000pg/mL。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在按照本發(fā)明方法治療之前患者的CSF中可以具有以下的高水平淀粉樣蛋白Aβ42肽高于大約5pg/mL，或高于大約10pg/mL，或高于大約200pg/mL，或高于大約500pg/mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，淀粉樣蛋白β肽的水平可以為大約10pg/mL到大約1,000pg/mL，或者甚至為大約100pg/mL到大約1,000pg/mL。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在按照本發(fā)明方法治療之前患者的CSF中可以具有以下的高水平淀粉樣蛋白Aβ40肽高于大約10Pg/mL，或高于大約50pg/mL，或甚至高于大約100pg/mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，淀粉樣蛋白β肽的水平可以為大約10pg/mL到大約1,000pg/mL。
患者的腦、CSF、血液或血漿中淀粉樣蛋白β肽的含量可以采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(“ELISA”)或定量免疫印跡測(cè)試法或采用定量SELDI-TOF法評(píng)估，這些方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，例如見Zhang等，J.Biol.Chem.274，8966-72(1999)和Zhang等，Biochemistry40，5049-55(2001)。同樣還可以參見A.K.Vehmas等，DNA Cell Biol.20(11)，713-21(2001)，P.Lewczuk等，Rapid Commun.Mass Spectrom.17(12)，1291-96(2003)；B.M.Austen等，J.Peptide Sci.6，459-69(2000)；和H.Davies等，BioTechniques 27，1258-62(1999)。這些試驗(yàn)采用已經(jīng)按照本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備的腦樣或血樣樣品進(jìn)行。測(cè)量淀粉樣蛋白β肽水平的適用方法的另一實(shí)例是銪免疫測(cè)定法(EIA)。參見WO 99/38498第11頁(yè)。
本發(fā)明的方法可以作為一種治療方法用于阿耳茨海默氏病或癡呆癥患者，或者本發(fā)明方法可以作為預(yù)防阿耳茨海默氏病或癡呆癥的方法用于具有這種素因的患者，例如具有在APP基因、ApoE基因或早老蛋白基因上基因組突變的患者?；颊呖梢曰加?或易于發(fā)展成或被懷疑患有)血管性癡呆，或老年性癡呆，輕度認(rèn)知損傷，或早期阿耳茨海默氏病。除阿耳茨海默氏病外，患者可以患有其他淀粉樣相關(guān)疾病如腦淀粉樣血管病，或者患者也可以患有淀粉樣蛋白沉積病，尤其是淀粉樣蛋白-β在腦中的淀粉樣沉積。
淀粉樣相關(guān)疾病的治療 本發(fā)明涉及使用本發(fā)明化合物及其藥物組合物治療和預(yù)防淀粉樣相關(guān)疾病的方法。可以治療性地或預(yù)防性地給用本發(fā)明的藥物組合物以治療與淀粉樣蛋白(例如，AL淀粉樣蛋白(λ或κ-鏈有關(guān)的，例如淀粉樣蛋白λ、淀粉樣蛋白κ、淀粉樣蛋白κIV、淀粉樣蛋白λVI、淀粉樣蛋白γ、淀粉樣蛋白γ1)，Aβ，IAPP，β2M，AA，或AH淀粉樣蛋白)原纖維的形成、聚集或沉積相關(guān)的疾病。
本發(fā)明的藥物組合物可以利用如下機(jī)制(所列機(jī)制是舉例性而非限制性的)起到緩解淀粉樣相關(guān)疾病進(jìn)程的作用減緩淀粉樣原纖維的形成或沉積速率；減輕淀粉樣蛋白沉積的程度；抑制、降低或預(yù)防淀粉樣原纖維的形成；抑制淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的神經(jīng)變性或細(xì)胞毒性；抑制淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的炎癥；增加淀粉樣蛋白從大腦中的清除；增加Aβ在大腦中的降解；或促進(jìn)淀粉樣蛋白在其構(gòu)成原纖維之前的清除。
淀粉樣蛋白沉積的“調(diào)節(jié)”包括如上所述的抑制以及增強(qiáng)淀粉樣蛋白的沉積或原纖維的形成。因此，術(shù)語(yǔ)“調(diào)節(jié)”旨在包括預(yù)防或阻止淀粉樣蛋白的形成或蓄積、抑制或減緩進(jìn)行性淀粉樣變性(例如已經(jīng)出現(xiàn)淀粉樣蛋白沉積)的患者中的進(jìn)一步的淀粉樣蛋白沉積，并且減少或逆轉(zhuǎn)遭受淀粉樣變性的患者中的淀粉樣蛋白的形成或蓄積；以及提高淀粉樣蛋白沉積，例如增加體內(nèi)或體外淀粉樣蛋白沉積的速率和量。淀粉樣蛋白增強(qiáng)性化合物可被用于淀粉樣變性的動(dòng)物模型中，例如，用于在較短的時(shí)間內(nèi)造成動(dòng)物中淀粉樣蛋白沉積的形成或者用于在選定的時(shí)間內(nèi)提高淀粉樣蛋白沉積。淀粉樣蛋白增強(qiáng)性化合物可以被用于體內(nèi)抑制淀粉樣變性的化合物的篩選試驗(yàn)(例如在動(dòng)物模型中)，淀粉樣變性的細(xì)胞試驗(yàn)和體外試驗(yàn)。這種化合物可被用于例如提供更快或更敏感的化合物的試驗(yàn)。淀粉樣蛋白沉積的調(diào)節(jié)是相對(duì)于未經(jīng)治療的患者或者相對(duì)于治療之前的患者進(jìn)行測(cè)定的。
淀粉樣蛋白沉積的“抑制”包括防止或阻止淀粉樣蛋白形成(例如原纖維化)，從大腦中清除淀粉樣蛋白例如可溶性Aβ，抑制或減緩淀粉樣變性患者(例如已經(jīng)出現(xiàn)淀粉樣蛋白沉積的患者)的進(jìn)一步的淀粉樣蛋白沉積，以及減少或逆轉(zhuǎn)進(jìn)行性淀粉樣變性患者中的淀粉樣蛋白原纖維化或沉積。淀粉樣蛋白沉積的抑制作用是相對(duì)于未接受治療的患者或者相對(duì)于接受過治療的患者(在治療前)進(jìn)行測(cè)定的，或者例如是根據(jù)臨床可測(cè)量的改善度而測(cè)定的，例如對(duì)于腦淀粉樣變性患者(譬如阿耳茨海默氏病患者或腦淀粉樣血管病患者)，根據(jù)認(rèn)知功能的穩(wěn)定或防止其認(rèn)知功能的進(jìn)一步下降(即，防止、減緩或阻止疾病的發(fā)展)而測(cè)定的，或根據(jù)參數(shù)的改善如CSF中Aβ濃度或tau來(lái)測(cè)定。
正如這里所用，對(duì)患者的“治療”包括對(duì)患者涂敷或給用本發(fā)明的組合物，或?qū)颊叩募?xì)胞或組織涂敷或給用本發(fā)明的組合物，所述患者患有淀粉樣蛋白相關(guān)疾病或病癥，具有這種疾病或病癥的癥狀，或者處于這種疾病或病癥的危險(xiǎn)之中(或者對(duì)這種疾病或病癥是易感的)，用于治療、治愈、緩解、減輕、改變、彌補(bǔ)、改善、改進(jìn)、或影響該疾病或病癥、疾病或病癥的癥狀、或者該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)(或易感性)之目的，術(shù)語(yǔ)“治療”是指在損傷、病變或病癥的治療或緩解方面任何成功的標(biāo)志，其包括任何客觀或主觀的參數(shù)，例如癥狀的減輕、緩解、削弱或者使得損傷、病變或病癥對(duì)于患者而言更能耐受；減慢退化或衰退的速度；使得退化的最終點(diǎn)不太虛弱；改善患者的身體或心理狀況；或者，在某些情況下預(yù)防癡呆發(fā)作。癥狀的治療或改善可以基于主觀或客觀的參數(shù)，這包括體檢、精神評(píng)估、或認(rèn)知測(cè)試(例如CDR、MMSE、DAD、ADAS-Cog)、或其他本領(lǐng)域已知的測(cè)試的結(jié)果。例如，本發(fā)明的方法通過減慢認(rèn)知衰退的速度或緩解認(rèn)知衰退的程度成功地治療了患者的癡呆。
在一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”包括將患者的CDR等級(jí)保持為其基線等級(jí)或0。在另一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”包括將患者的“CDR”等級(jí)降低大約0.25或以上、大約0.5或以上、大約1.0或以上、大約1.5或以上、大約2.0或以上、大約2.5或以上、或大約3.0或以上。在另一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”還包括和歷史對(duì)照組相比，降低患者的CDR等級(jí)增加的速率。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該術(shù)語(yǔ)包括將患者的CDR等級(jí)的增加速率(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療對(duì)照組)降低大約5％或以上、大約10％或以上、大約20％或以上、大約25％或以上、大約30％或以上、大約40％或以上、大約50％或以上、大約60％或以上、大約70％或以上、大約80％或以上、大約90％或以上、或大約100％。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”還包括保持患者在MMSE中的得分。術(shù)語(yǔ)“治療”包括將患者的MMSE得分提高大約1、大約2、大約3、大約4、大約5、大約7.5、大約10、大約12.5、大約15、大約17.5、大約20、或者大約25分。該術(shù)語(yǔ)也包括同歷史對(duì)照組相比，降低患者M(jìn)MSE得分降低速率。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該術(shù)語(yǔ)包括可以將患者的MMSE得分降低速率(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療的對(duì)照組)降低大約5％或更少、大約10％或更少、大約20％或更少、大約25％或更少、大約30％或更少、大約40％或更少、大約50％或更少、大約60％或更少、大約70％或更少、大約80％或更少、大約90％或更少或大約100％或更少。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”還包括保持患者在DAD中的得分。術(shù)語(yǔ)“治療”包括將患者在DAD中的得分增加大約1分，約5分，約10分，約14分，約20分，約30分，約35分，約40分，約50分，約60分，約70分，或約80分。該術(shù)語(yǔ)也包括同歷史對(duì)照組相比，降低患者DAD得分的下降速率。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該術(shù)語(yǔ)包括將患者DAD得分的下降速率(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療的對(duì)照組)降低大約5％或更少、大約10％或更少、大約20％或更少、大約25％或更少、大約30％或更少、大約40％或更少、大約50％或更少、大約60％或更少、大約70％或更少、大約80％或更少、大約90％或更少或大約100％或更少。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”還包括保持患者在ADAS-Cog中的得分。術(shù)語(yǔ)“治療”包括將患者在ADAS-Cog中的得分降低大約1分或更多分、大約2分或更多分、大約3分或更多分、大約4分或更多分、大約5分或更多分、大約7.5分或更多分、大約10分或更多分、大約12.5分或更多分、大約15分或更多分、大約17.5分或更多分、大約20分或更多分，或者大約25分或更多分。該術(shù)語(yǔ)還包括同歷史對(duì)照組相比，降低患者ADAS-Cog得分的增加速率。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該術(shù)語(yǔ)包括將患者ADAS-Cog得分的增加速率(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療對(duì)照組)降低大約5％或以上、大約10％或以上、大約20％或以上、大約25％或以上、大約30％或以上、大約40％或以上、大約50％或以上、大約60％或以上、大約70％或以上、大約80％或以上、大約90％或以上、或大約100％。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”，例如對(duì)AA或AL淀粉樣變性而言，包括血清肌酸酐清除率的提高，例如肌酸酐清除率提高10％或更多、20％或更多、50％或更多、80％或更多、90％或更多、100％或更多、150％或更多、200％或更多。術(shù)語(yǔ)“治療”還包括減輕腎丙性綜合癥(NS)。它還包括減緩慢性腹瀉和/或?qū)Ⅲw重增加例如10％或更多、15％或更多、或20％或更多。
不希望受到理論的束縛，在一些方面，本發(fā)明的藥物組合物包含能夠在大腦或其他重要器官(局部作用)或整個(gè)身體(全身作用)中預(yù)防或抑制淀粉樣蛋白原纖維形成的化合物。本發(fā)明的藥物組合物可以在它們進(jìn)入大腦后(在透過血腦屏障后)或從外周有效地控制淀粉樣蛋白沉積。當(dāng)從外周作用時(shí)，藥物組合物中的化合物可以改變大腦和血漿之間的淀粉樣生成肽的平衡，以促進(jìn)淀粉樣生成肽從大腦中排出。它還可能有利于(可溶性)淀粉樣蛋白質(zhì)的清除(或分解代謝)，隨后由于減少在特定的器官(例如，肝臟、脾臟、胰腺、腎臟、關(guān)節(jié)、大腦等器官)中的淀粉樣蛋白匯集而防止淀粉樣蛋白原纖維形成和沉積。淀粉樣生成肽從大腦中排出的增加將導(dǎo)致淀粉樣生成肽大腦濃度的降低，從而促進(jìn)淀粉樣生成肽沉積。特別是，該化合物可以降低淀粉樣蛋白β肽(例如Aβ40和Aβ42)在CSF和血漿中的水平、或該化合物可以降低淀粉樣蛋白β肽(例如Aβ40和Aβ42)在CSF中的水平并提高其在血漿中的水平?；蛘撸溉氪竽X的化合物可以通過直接作用于大腦淀粉樣生成肽來(lái)控制沉積，例如通過將其保持在非纖維狀形式或者促進(jìn)其從大腦中的清除，通過提高其在大腦中的降解，或者通過保護(hù)大腦細(xì)胞免受淀粉樣生成肽的不利影響。化合物還可以引起淀粉樣蛋白的濃度降低(即，在特定的器官中，未達(dá)到引發(fā)淀粉樣蛋白原纖維形成或沉積所需的臨界濃度)。此外，此處所述的化合物可以抑制或減小淀粉樣蛋白與細(xì)胞表面組分(例如糖胺聚糖或基膜的蛋白多糖組分)的相互作用，從而通過對(duì)這種相互作用的抑制或降低而產(chǎn)生可測(cè)定的神經(jīng)保護(hù)和細(xì)胞保護(hù)作用。例如，該化合物還可以預(yù)防淀粉樣蛋白肽結(jié)合或粘合到細(xì)胞表面上，這種結(jié)合是一種已知的導(dǎo)致細(xì)胞損傷或毒性的過程。類似地，該化合物可以阻滯淀粉樣蛋白引起的細(xì)胞毒性或微神經(jīng)膠質(zhì)活化或淀粉樣蛋白引起的神經(jīng)毒性，或抑制淀粉樣蛋白誘發(fā)的炎癥。該化合物還可以減少淀粉樣蛋白聚集、原纖維形成、或沉積的速率或量，或者該化合物可以減小淀粉樣蛋白沉積的程度。上述作用機(jī)制不應(yīng)被認(rèn)為是對(duì)本發(fā)明的范圍的限制，因?yàn)楸景l(fā)明可以在沒有上述信息的條件下實(shí)施。
一些研究小組已經(jīng)證明Aβ肽對(duì)神經(jīng)元是高毒性的。淀粉樣蛋白噬斑與反應(yīng)性神經(jīng)膠質(zhì)增生、營(yíng)養(yǎng)障礙性軸突和編程性細(xì)胞凋亡細(xì)胞(apoptotic cells)直接有關(guān)，這表明這些噬斑誘導(dǎo)神經(jīng)變性性變化。神經(jīng)毒性最后使神經(jīng)元破裂，甚至殺死神經(jīng)元。已經(jīng)證明Aβ在體外能誘導(dǎo)多種不同類型的神經(jīng)元細(xì)胞發(fā)生編程性細(xì)胞凋亡，例如大鼠PC-12細(xì)胞、原發(fā)性大鼠海馬和皮質(zhì)培養(yǎng)物和預(yù)分化人神經(jīng)類SH-SY5Y細(xì)胞系(Dickson DW(2004)J Clin Invest 11423-7；Canu等(2003)Cerebellum 2270-278；Li等(1996)Brain Research 738196-204)。多篇報(bào)道都已經(jīng)證實(shí)Aβ原纖維能夠誘導(dǎo)神經(jīng)變性，而且也已經(jīng)證明神經(jīng)元細(xì)胞在體外與Aβ接觸能夠產(chǎn)生編程性細(xì)胞死亡(Morgan等(2004)Prog.Neurobiol.74323-349；Stefani等(2003)J.Mol.Med.81678-99；La Ferla等(1997)J.Clin.Invest.100(2)310-320)。在阿耳茨海默氏病中，漸進(jìn)性神經(jīng)元細(xì)胞的損失與Aβ淀粉樣蛋白原纖維在老年斑中的沉積同時(shí)進(jìn)行。
本發(fā)明的再一個(gè)方面涉及通過給藥有效量的本發(fā)明化合物抑制Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞死亡的方法。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及對(duì)Aβ淀粉樣相關(guān)疾病(如阿耳茨海默氏病)的患者提供神經(jīng)保護(hù)的方法，包括對(duì)患者給藥有效量的本發(fā)明化合物，從而產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用。
本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了抑制Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞死亡的方法，包括對(duì)患者給藥有效量的本發(fā)明化合物，從而抑制神經(jīng)元細(xì)胞死亡。
本發(fā)明的另一個(gè)方面提供了治療以Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞死亡為特征的疾病的方法，例如對(duì)患者給藥有效量的本發(fā)明化合物。這類疾病的實(shí)例包括阿耳茨海默氏病和Aβ淀粉樣相關(guān)疾病。
術(shù)語(yǔ)“神經(jīng)保護(hù)”包括保護(hù)患者神經(jīng)元細(xì)胞不發(fā)生Aβ誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡，例如Aβ直接或間接誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。Aβ誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡可能會(huì)引發(fā)一些過程，例如細(xì)胞支架的去穩(wěn)定化；DNA裂解；水解酶(如磷酸酯酶A2)的活化；凱氏酶(caspases)、鈣活化蛋白酶和/或鈣活化核酸內(nèi)切酶的活化；巨噬細(xì)胞引發(fā)的炎癥；細(xì)胞中膜電勢(shì)改變；導(dǎo)致細(xì)胞-細(xì)胞交流減弱或不存在的細(xì)胞接合處的分裂；以及與細(xì)胞死亡有關(guān)的基因(如立即早期基因)的表達(dá)的活化。
術(shù)語(yǔ)“淀粉樣蛋白-β疾病”(或“淀粉樣蛋白-β相關(guān)疾病”，這兩個(gè)術(shù)語(yǔ)在本文中互換使用)可用于輕度認(rèn)知損害；血管性癡呆；早期阿耳茨海默氏??；阿耳茨海默氏病，包括散發(fā)性(非遺傳性)阿耳茨海默氏病和家族性(遺傳性)阿耳茨海默氏?。慌c年齡有關(guān)的認(rèn)知力減退；腦淀粉樣血管病(“CAA”)；遺傳性腦出血；老年性癡呆；唐氏綜合癥；散發(fā)性包涵體肌炎(IBM)；或與年齡有關(guān)的黃斑變性(“ARMD”)。根據(jù)本發(fā)明的某些方面，淀粉樣蛋白-β是具有39-43個(gè)氨基酸的肽，或者淀粉樣蛋白-β是由βAPP產(chǎn)生的淀粉樣生成肽。
輕度認(rèn)知損害(“MCI”)是一種以認(rèn)知能力處于輕度但可測(cè)量的損害狀態(tài)為特征的病癥，與癡呆癥的存在不一定有關(guān)。MCI通常(但非必然)發(fā)生在阿耳茨海默氏病之前。它是一種診斷，最常常與輕度記憶困難有關(guān)，但它也可以在其他認(rèn)識(shí)技能如語(yǔ)言或計(jì)劃技能方面的輕度損害為特征。但一般來(lái)講，與具有它們的年齡或教育背景的人所預(yù)期的情況相比，MCI個(gè)體的記憶減退要更加明顯。隨著病癥的發(fā)展，醫(yī)師可能會(huì)將診斷結(jié)果改變?yōu)椤拜p度-中度認(rèn)知損害”，這在本領(lǐng)域中是能夠充分理解的。
大腦淀粉樣血管病(“CAA”)是指淀粉樣原纖維特異性沉積在柔腦膜壁以及皮質(zhì)動(dòng)脈壁、微動(dòng)脈壁和靜脈壁上。它通常與阿爾茨海默氏病、唐氏綜合征和正常老化，以及各種與中風(fēng)或癡呆相關(guān)的家族性病癥有關(guān)(參閱Frangione等，AmyloidJ.Protein Folding Disord.8，Suppl.1，36-42(2001))。CAA可以是散發(fā)性的或遺傳性的。已經(jīng)鑒定出Aβ或APP基因中的多個(gè)突變部位，它們?cè)谂R床上與癡呆癥或腦出血有關(guān)。示例性的CAA病癥包括但不限于冰島型帶有淀粉樣變性的遺傳性腦出血(HCHWA-I)、HCHWA的荷蘭變種(HCHWA-D；Aβ的突變)；Aβ的佛蘭德突變；Aβ的北極突變；Aβ的意大利突變；Aβ的衣阿華突變；遺傳性英國(guó)癡呆；以及遺傳性丹麥癡呆。已知大腦淀粉樣血管病與大腦出血(或出血性中風(fēng))有關(guān)。
另外，APP和淀粉樣-β蛋白在肌纖維中的異常蓄積與散發(fā)性包涵體肌炎(“IBM”)存在病理學(xué)關(guān)聯(lián)(Askanas等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93，1314-1319(1996)；Askanas等，Current Opinion inRheumatology 7，486-496(1995))。因此，本發(fā)明的化合物可以預(yù)防性或治療性地用于治療其中淀粉樣-β蛋白在非神經(jīng)部位異常沉積所致的疾病，例如通過將本發(fā)明化合物給藥到肌纖維來(lái)治療IBM。
此外，已經(jīng)證明，Aβ與稱為脈絡(luò)膜疣(drusen)的不正常的細(xì)胞外沉積有關(guān)，其中在年齡相關(guān)性黃斑變性(ARMD)患者個(gè)體中沿著視網(wǎng)膜色素上皮的基底表面積聚。ARMD是老年患者不可逆性視力損失的病因。據(jù)信，Aβ的沉積是局部炎癥行為的重要組成部分，而這種炎癥行為會(huì)對(duì)視網(wǎng)膜黃斑變性萎縮、脈絡(luò)膜疣的生物產(chǎn)生、和ARMD的發(fā)病機(jī)理產(chǎn)生影響(Johnson等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 99(18)，11830-5(2002))。因此，本發(fā)明也涉及對(duì)年齡相關(guān)性癡呆的治療或預(yù)防。
還有，本發(fā)明涉及預(yù)防或抑制淀粉樣蛋白在患者體中沉積的方法。例如，這種方法包括對(duì)患者給用治療有效量的能降低淀粉樣蛋白(例如，AL淀粉樣蛋白(與λ或κ-鏈有關(guān)，例如淀粉樣蛋白λ、淀粉樣蛋白κ、淀粉樣蛋白κIV、淀粉樣蛋白λVI、淀粉樣蛋白γ、淀粉樣蛋白γ1)，Aβ，IAPP，β2M，AA，AH淀粉樣蛋白，或其他淀粉樣蛋白)濃度的化合物，從而預(yù)防或抑制淀粉樣蛋白的聚集或沉積。
另一方面，本發(fā)明涉及預(yù)防、減少、或抑制患者體中淀粉樣蛋白沉積的方法。例如，這種方法包括對(duì)患者給用治療有效量的能抑制淀粉樣蛋白(例如，AL淀粉樣蛋白(與λ或κ-鏈有關(guān)，例如淀粉樣蛋白λ、淀粉樣蛋白κ、淀粉樣蛋白κIV、淀粉樣蛋白λVI、淀粉樣蛋白γ、淀粉樣蛋白γ1)，Aβ，IAPP，β2M，AA，AH淀粉樣蛋白，或其他淀粉樣蛋白)濃度的化合物，從而預(yù)防、減少或抑制淀粉樣蛋白的沉積。
本發(fā)明還涉及調(diào)節(jié)例如將細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損害降低到最低程度的方法，包括對(duì)患者給用能降低淀粉樣蛋白(例如，AL淀粉樣蛋白(與λ或κ-鏈有關(guān)，例如淀粉樣蛋白λ、淀粉樣蛋白κ、淀粉樣蛋白κIV、淀粉樣蛋白λVI、淀粉樣蛋白γ、淀粉樣蛋白γ1)，Aβ，IAPP，β2M，AA，AH淀粉樣蛋白，或其他淀粉樣蛋白)濃度的化合物的步驟，從而調(diào)節(jié)所述的細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損害。在本發(fā)明的某些方面中，調(diào)節(jié)細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損害的方法包括給用能降低淀粉樣蛋白濃度或能降低淀粉樣蛋白與細(xì)胞表面相互作用的化合物的步驟。
本發(fā)明也包括直接或間接地預(yù)防患者細(xì)胞死亡的方法，該方法包括對(duì)患者給用治療有效量的具有以下功效的化合物，即該化合物能預(yù)防淀粉樣蛋白(例如，AL淀粉樣蛋白(與λ或κ-鏈有關(guān)的，例如淀粉樣蛋白λ、淀粉樣蛋白κ、淀粉樣蛋白κIV、淀粉樣蛋白λVI、淀粉樣蛋白γ、淀粉樣蛋白γ1)，Aβ，IAPP，β2M，AA，AH淀粉樣蛋白，或其他淀粉樣蛋白)介導(dǎo)的能直接或間接導(dǎo)致細(xì)胞死亡的活動(dòng)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法被用于治療阿耳茨海默氏病(例如散發(fā)性或家族性的AD)。也可以預(yù)防性或治療性地使用該方法來(lái)治療發(fā)生淀粉樣蛋白-β沉積的其他臨床疾病，例如用于唐氏(Down)綜合癥個(gè)體和腦淀粉樣血管病(“CAA”)或遺傳性腦出血患者。
本發(fā)明的化合物可以預(yù)防性或治療性地用于治療其中淀粉樣-β蛋白在非神經(jīng)部位異常沉積導(dǎo)致的疾病，例如通過將本發(fā)明化合物傳遞到肌纖維來(lái)治療IBM，或通過將本發(fā)明化合物傳遞到視網(wǎng)膜著色上皮的基底表面來(lái)治療黃斑變性。
本發(fā)明還提供了調(diào)節(jié)細(xì)胞的蛋白相關(guān)性損傷的方法，包括給用能降低Aβ濃度、或能將Aβ(可溶性低聚或原纖維形式)與細(xì)胞表面的相互作用降低到最低程度的化合物的步驟，從而調(diào)控所述的細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損傷。在本發(fā)明的某些方面中，調(diào)控細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損傷的方法包括給用能降低Aβ濃度或能降低Aβ與細(xì)胞表面相互作用的化合物的步驟。
按照本發(fā)明，進(jìn)一步提供了預(yù)防患者細(xì)胞死亡的方法，該方法包括對(duì)患者給用治療有效量的能夠預(yù)防Aβ介導(dǎo)的能直接或間接導(dǎo)致細(xì)胞死亡的活動(dòng)。
本發(fā)明也提供了調(diào)控細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損傷的方法，包括給用能降低IAPP的濃度、或能將(可溶性低聚的或原纖維形式的)IAPP與細(xì)胞表面的相互作用降到最低程度的化合物的步驟，從而調(diào)控所述細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損傷。在本發(fā)明的某些方案中，調(diào)控細(xì)胞的淀粉樣蛋白相關(guān)性損傷的方法包括給用能降低IAPP的濃度或能降低IAPP與細(xì)胞表面相互作用的化合物的步驟。
按照本發(fā)明，進(jìn)一步提供了預(yù)防患者細(xì)胞死亡的方法，該方法包括對(duì)患者給用治療有效量的能預(yù)防IAPP介導(dǎo)的活動(dòng)，這種活動(dòng)能直接或間接地導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
本發(fā)明也提供了一種用于治療淀粉樣變性的方法和組合物。本發(fā)明的方法包括對(duì)患者給用能抑制淀粉樣蛋白沉積的治療化合物。因此，本發(fā)明的組合物和方法能夠用于抑制其中發(fā)生淀粉樣蛋白沉積的疾病中的淀粉樣變性。本發(fā)明的方法可以在治療上用于治療淀粉樣變性或者可以預(yù)防性地用于(遺傳性)淀粉樣變性易感患者或被確定處于正在發(fā)生淀粉樣變性(例如遺傳性的)危險(xiǎn)的患者或被確定處于預(yù)發(fā)生淀粉樣變性危險(xiǎn)的患者。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明包括抑制淀粉樣變性蛋白和基膜組分之間的相互作用以抑制淀粉樣蛋白沉積的方法。所述基膜組分是一種糖蛋白或含蛋白多糖，優(yōu)選硫酸乙酰肝素含蛋白多糖。本發(fā)明的方法中所使用的治療化合物可以干預(yù)基膜組分結(jié)合到淀粉樣變性蛋白的靶結(jié)合部位，從而抑制淀粉樣蛋白沉積。
在一些方案中，本發(fā)明的方法涉及對(duì)患者給用能夠抑制淀粉樣蛋白沉積的治療化合物?！暗矸蹣拥鞍壮练e的抑制”包括預(yù)防淀粉樣蛋白的形成，抑制正在發(fā)生淀粉樣變性的患者體中的淀粉樣蛋白進(jìn)一步沉積和降低正在發(fā)生淀粉樣變性的患者的淀粉樣蛋白沉積。淀粉樣蛋白沉積的抑制是相對(duì)于未經(jīng)治療的患者，或者相對(duì)于在治療前已接受治療的患者來(lái)測(cè)定的。在一個(gè)實(shí)施方案中，淀粉樣蛋白沉積是通過抑制淀粉樣變性蛋白和基膜組分之間的相互作用而抑制的。術(shù)語(yǔ)“基膜”是指包括糖蛋白和含蛋白多糖的胞外基質(zhì)，其包括層粘連蛋白、IV型膠原、纖連蛋白、perlecan、積聚蛋白、硫酸皮膚素、和硫酸乙酰肝素含蛋白多糖(HSPG)。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過干擾淀粉樣變性蛋白質(zhì)和硫酸化的糖胺聚糖(例如HSPG、硫酸皮膚素、perlecan或硫酸積聚蛋白)的相互作用抑制淀粉樣蛋白沉積。已知硫酸糖胺聚糖存在于所有類型的淀粉樣蛋白中(參閱Snow等，Lab.Invest.56，120～123(1987))并且在淀粉樣變性的動(dòng)物模型中同時(shí)發(fā)生淀粉樣蛋白沉積和HSPG沉積(參閱Snow等，Lab.Invest.56，665～675(1987)和Gervais，F(xiàn).等，Curr.Med.Chem.，3，361-370(2003))。人們已經(jīng)描述了HSPG在淀粉樣生成性蛋白中的共有結(jié)合位點(diǎn)圖案(參閱，例如，Cardin and Weintraub Arteriosclerosis 9，21-32(1989))。
化合物防止或阻斷淀粉樣蛋白形成或沉積的能力可歸屬于其與非纖維化的可溶性淀粉樣蛋白結(jié)合并維持其溶解性的能力。
可以通過體外結(jié)合測(cè)定法，例如US 5,164,295中描述的方法(該專利在此全文引入用作參考)，測(cè)定本發(fā)明治療化合物抑制粉樣生成性蛋白和基膜組分糖蛋白或蛋白聚糖之間相互作用的能力。另一方面，可以使用質(zhì)譜測(cè)定法測(cè)定化合物與淀粉樣生成性蛋白結(jié)合的能力或化合物抑制基膜組分(例如HSPG)與淀粉樣生成性蛋白(例如Aβ)結(jié)合的能力，其中可溶性蛋白例如Aβ、IAPP、β2M用所述化合物溫育。與例如Aβ結(jié)合的化合物將會(huì)誘導(dǎo)蛋白質(zhì)的質(zhì)譜發(fā)生變化。使用Aβ和IAPP的質(zhì)譜測(cè)定法的典型方案可見于實(shí)施例，其結(jié)果見表3。為調(diào)整數(shù)據(jù)的敏感性，可以很容易地對(duì)方案進(jìn)行改進(jìn)，例如可以調(diào)整所用蛋白質(zhì)和/或化合物的量。這樣，對(duì)于例如使用不太敏感的試驗(yàn)方案檢測(cè)不到結(jié)合的試驗(yàn)化合物，可以檢測(cè)到結(jié)合。
為提供試驗(yàn)化合物與例如原纖維Aβ結(jié)合的能力的指標(biāo)，也存在可供選擇的篩選化合物的方法，并且這種方法也是專業(yè)技術(shù)人員易采用的。這樣的一種篩選試驗(yàn)是紫外線吸收測(cè)定法。在代表性的方案中，試驗(yàn)化合物(20μM)是在Tris緩沖鹽水(20mM Tris，150mM NaCl，pH7.4，含0.01疊氮化鈉)中用50μM Aβ(1-40)纖維37℃孵育1小時(shí)。孵育后，以20,000g離心溶液20分鐘，使Aβ(1-40)纖維以及任何結(jié)合的試驗(yàn)化合物沉淀。然后通過讀取吸光度可以測(cè)定上清液中剩余的試驗(yàn)化合物的量。隨后通過比較含Aβ的孵育物上清液中剩余的化合物的量與不含Aβ纖維的對(duì)照孵育物中剩余的化合物的量，可以計(jì)算出結(jié)合的試驗(yàn)化合物的百分率。各測(cè)定試驗(yàn)中均可包含硫黃素T和剛果紅作為陽(yáng)性對(duì)照物(已知這兩種物質(zhì)都能與Aβ結(jié)合)。測(cè)定之前，可以將試驗(yàn)化合物稀釋到40μM(該濃度是最終試驗(yàn)濃度的兩倍)，然后使用Hewlett Packard8453 UV/VIS光譜儀掃描進(jìn)行測(cè)定(如果吸光度不足以進(jìn)行檢測(cè)的話)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及改善淀粉樣相關(guān)疾病患者的認(rèn)知能力的方法。該方法包括給用有效量的本發(fā)明治療化合物，使得患者的認(rèn)知能力得到改善。患者的認(rèn)知能力可以采用本領(lǐng)域已知的方法測(cè)試，譬如臨床癡呆分級(jí)法(“CDR”)、簡(jiǎn)明精神狀態(tài)量表(“MMSE”)、癡呆病殘?jiān)u價(jià)法(“DAD”)和阿耳茨海默氏病認(rèn)知能力評(píng)價(jià)量表(“ADAS-Cog”)。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療患者的淀粉樣相關(guān)疾病的方法。該方法包括在給用本發(fā)明化合物之前對(duì)患者進(jìn)行認(rèn)知能力測(cè)試，對(duì)患者給用有效量的本發(fā)明化合物，并且在給用本發(fā)明化合物之后對(duì)患者進(jìn)行認(rèn)知能力測(cè)試，從而治療患者的淀粉樣相關(guān)疾病，其中改善了患者針對(duì)所述認(rèn)知能力測(cè)試的得分。
如果與安慰劑組、歷史對(duì)照組、或?qū)ο嗤颊哌M(jìn)行的后續(xù)試驗(yàn)之間的成員相比，使用本發(fā)明方法所治療的患者的行為之間的正態(tài)方向存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異，則在本發(fā)明的內(nèi)容中標(biāo)為“改善”的認(rèn)知能力。
在一個(gè)實(shí)施方案中，患者的CDR保持為0。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者的CDR降低(例如改善)了大約0.25或更多、大約0.5或更多、大約1.0或更多、大約1.5或更多、大約2.0或更多、大約2.5或更多、或大約3.0或更多。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者CDR等級(jí)的增加速率(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療對(duì)照組)降低大約5％或以上、大約10％或以上、大約20％或以上、大約25％或以上、大約30％或以上、大約40％或以上、大約50％或以上、大約60％或以上、大約70％或以上、大約80％或以上、大約90％或以上、或大約100％。
在一個(gè)實(shí)施方案中，維持患者在MMSE中的得分。另一方面，患者的MMSE得分可以提高大約1、大約2、大約3、大約4、大約5、大約7.5、大約10、大約12.5、大約15、大約17.5、大約20、或者大約25分。在另一個(gè)可選方案中，同歷史對(duì)照組相比，降低了患者的MMSE得分降低速率。例如，患者的MMSE得分的降低速率(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療的對(duì)照組)可降低大約5％或更多、大約10％或更多、大約20％或更多、大約25％或更多、大約30％或更多、大約40％或更多、大約50％或更多、大約60％或更多、大約70％或更多、大約80％或更多、大約90％或更多或大約100％或更多。
在一個(gè)實(shí)施方案中，維持患者在DAD中的得分。另一方面，患者的DAD得分可以提高大約1、大約2、大約3、大約4、大約5、大約7.5、大約10、大約15、大約20、或者大約30、或大約50或更多分。在另一個(gè)可選方案中，同歷史對(duì)照組相比，減少了患者DAD得分降低速率。例如，患者DAD得分的降低速率(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療的對(duì)照組)可減少大約5％或更多、大約10％或更多、大約20％或更多、大約25％或更多、大約30％或更多、大約40％或更多、大約50％或更多、大約60％或更多、大約70％或更多、大約80％或更多、大約90％或更多或大約100％或更多。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療、減緩或阻止伴有認(rèn)知損傷的淀粉樣相關(guān)疾病的方法，該方法包括對(duì)患者給用有效量的本發(fā)明治療化合物，其中按照ADAS-Cog測(cè)定的患者認(rèn)知能力的年減退率低于8分/年，低于6分/年，低于5分/年，低于4分/年，或低于3分/年。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療、減緩或阻止與認(rèn)知有關(guān)的淀粉樣相關(guān)疾病的方法，該方法包括給用有效量的本發(fā)明治療化合物，從而使得按照ADAS-Cog測(cè)試患者的認(rèn)知能力在一年內(nèi)保持恒定?！昂愣ā卑ú怀^2分的波動(dòng)。保持恒定包括在任一個(gè)方向存在兩分或更少分的波動(dòng)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，患者的認(rèn)知能力每年改善2分或更多分、3分或更多分、4分或更多分、5分或更多分、6分或更多分、7分或更多分、8分或更多分等等(按照ADAS-Cog測(cè)量)。在另一個(gè)可選方案中，同歷史對(duì)照組相比，降低了患者ADAS-Cog得分的增加速度。例如，患者的ADAS-Cog得分的增加速度(相對(duì)于歷史對(duì)照組或未治療對(duì)照組)降低大約5％或以上、大約10％或以上、大約20％或以上、大約25％或以上、大約30％或以上、大約40％或以上、大約50％或以上、大約60％或以上、大約70％或以上、大約80％或以上、大約90％或以上、或大約100％。
在另一實(shí)施方案中，患者CSF或血漿中Aβ42∶Aβ40的比率降低了大約15％或更多，大約20％或更多，大約25％或更多，大約30％或更多，大約35％或更多，大約40％或更多，大約45％或更多，或大約50％或更多。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者腦脊髓液中Aβ的水平降低了大約15％或更多，大約25％或更多，大約35％或更多，大約45％或更多，大約55％或更多，大約75％或更多，或大約90％或更多。
還應(yīng)理解的是，當(dāng)提供數(shù)值或范圍時(shí)，例如，患者群體的年齡、劑量和血液水平時(shí)，這些數(shù)值和范圍包括的所有數(shù)值和范圍都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。而且，這些數(shù)值和范圍中的所有數(shù)值也是范圍的上下限。
此外，本發(fā)明也涉及本文所述的任何新化合物。亦即，本發(fā)明涉及新化合物，以及本文所述的使用它們的新方法，這些都在本文所述的通式范圍內(nèi)，而在所引證的專利和專利申請(qǐng)中未曾公開。
本發(fā)明化合物的合成 一般說來(lái)，本發(fā)明的化合物可以通過例如下文所述的通用反應(yīng)流程的方法或其改進(jìn)方法，使用易獲得的起始原料、試劑和常規(guī)合成步驟來(lái)制備。在這些反應(yīng)中，也可以使用本身已知但此處未提及的變型方法。也包括本說明書中所述的且具有相同的一般性質(zhì)的化合物的功能和結(jié)構(gòu)等價(jià)物，其中，對(duì)一個(gè)或多個(gè)取代基進(jìn)行了不會(huì)對(duì)化合物的基本性質(zhì)或效用造成不利影響的簡(jiǎn)單改變。
本發(fā)明的化合物可以容易地按照此處所述的合成路線和方案制備(如所提供的具體步驟所示)。然而，本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到可以使用其他的用于生成本發(fā)明化合物的合成途徑，并且下面提供的內(nèi)容僅僅是舉例，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。參閱例如，“ComprehensiveOrganicTransformations”，R.Larock著，VCH出版社(1989)。還將進(jìn)一步認(rèn)識(shí)到各種保護(hù)或脫保護(hù)策略是本領(lǐng)域的一種常見的做法(參閱例如，“Protective Groups in Organic Synthesis”，Greene和Wuts著)。相關(guān)領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到任何特定保護(hù)基的選擇(例如，胺和羧基保護(hù)基)將取決于該被護(hù)部分在后續(xù)反應(yīng)條件下的穩(wěn)定性并且也能理解所作的適當(dāng)選擇。
下面的大量化學(xué)文獻(xiàn)進(jìn)一步論述了本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員的知識(shí)“Chemistry of the Amino Acids”，J.P.Greenstein和M.Winitz著，JohnWiley & Sons，Inc.，New York(1961)；“Comprehensive OrganicTransformations”，R.Larock著，VCH出版社(1989)；T.D.Ocain等，J.Med.Chem.，31，2193-99(1988)；E.M.Gordon等，J.Med.Chem.31，2199～10(1988)；“Practice of Peptide Synthesis”，M.Bodansky和A.Bodanszky著，Springer-Verlag，New York(1984)；“ProtectiveGroups in Organic Synthesis”，T.Greene和P.Wuts著(1991)；“Asymmetric SynthesisConstruction of Chiral Molecules Using AminoAcids”，G.M.Coppola和H.F.Schuster著，John Wiley & Sons，Inc.，New York(1987)；“The Chemical Synthesis of Peptides”，J.Jones，Oxford University Press，New York(1991)；和“Introduction of PeptideChemistry”，P.D.Bailey著，John Wiley & Sons，Inc.，New York(1992)。
本發(fā)明化合物的合成是在溶劑中進(jìn)行。適宜的溶劑在常溫常壓下為液體，或者在反應(yīng)使用的溫度和壓力下保持液態(tài)。適用的溶劑沒有特殊的限制，只要它們不干擾反應(yīng)本身即可(亦即，它們優(yōu)選是惰性溶劑)，并且它們要能溶解一定量的反應(yīng)物。依據(jù)反應(yīng)情況，溶劑可進(jìn)行蒸餾或脫氣處理。例如，溶劑可以是脂族烴(例如己烷、庚烷、石油英、石油醚、環(huán)己烷或甲基環(huán)己烷)和鹵代烴(例如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、二氯乙烷、氯苯、或二氯苯)；芳族烴(例如苯、甲苯、四氫化萘、乙基苯、或二甲苯)；醚(例如二甘醇二甲醚、甲基-叔丁基醚、甲基-叔戊基醚、乙基-叔丁基醚、乙醚、二異丙基醚、四氫呋喃或甲基四氫呋喃、二烷、二甲氧基乙烷、或二乙二醇二甲醚)；腈(例如乙腈)；酮(例如丙酮)；酯(例如乙酸甲酯或乙酸乙酯)；以及它們的混合物。
一般來(lái)講，在反應(yīng)完成后，使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)從反應(yīng)混合物中分離出產(chǎn)物。例如，如果產(chǎn)物是固體的話，任選在減壓條件下蒸發(fā)或過濾除去溶劑。在反應(yīng)完成之后，向殘留物中加入水，使得水層呈酸性或堿性，并且過濾析出的化合物，但當(dāng)處理水敏感性化合物時(shí)應(yīng)當(dāng)小心。同樣地，可以向反應(yīng)混合物中加入水，用疏水性溶劑萃取目標(biāo)化合物。有機(jī)層用水洗滌，通過無(wú)水硫酸鎂或硫酸鈉干燥，蒸發(fā)溶劑得到目標(biāo)化合物。如果需要，可以通過下述方式純化如此得到的目標(biāo)化合物例如重結(jié)晶、沉淀、色譜法、或者通過加入酸或堿將其轉(zhuǎn)化為鹽。
本發(fā)明化合物可以含適當(dāng)溶劑的溶液形式或無(wú)溶劑的形式(例如凍干形式)提供。在本發(fā)明的另一方案中，實(shí)施本發(fā)明方法必需的化合物和緩沖液可以包裝成藥盒形式，并且任選包含在容器中。該藥盒可在市場(chǎng)上按照本發(fā)明所述方法用于治療或預(yù)防淀粉樣相關(guān)疾病，并且可包括本發(fā)明方法的使用說明書。附加的藥盒組分可包括酸、堿、緩沖劑、無(wú)機(jī)鹽、溶劑、抗氧劑、防腐劑、或金屬螯合物。附加的藥盒成分以純組分形式存在，或以混合了一種或多種附加藥盒組分的水溶液或有機(jī)溶液形式存在。任何或所有的藥盒組分都任選進(jìn)一步包含緩沖劑。
術(shù)語(yǔ)“容器”包括用于容納該治療化合物的任何接受器。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，該容器為一個(gè)包含該化合物的包裝體。在另外的實(shí)施方案中，該容器不是包含該制劑的包裝體，即，該容器為一個(gè)接受器，例如包含已包裝過的化合物或未包裝的化合物以及化合物的使用說明書的盒子或小瓶。此外，包裝技術(shù)也是本領(lǐng)域熟知的。應(yīng)當(dāng)理解的是，治療化合物的使用說明書可以被包含在含有治療化合物的包裝體上，并且，該說明書對(duì)該包裝的產(chǎn)品構(gòu)成提高其功能的關(guān)系。
藥物制劑 在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于治療淀粉樣相關(guān)疾病的藥物組合物(其中包括本文所述各式代表的化合物)，以及制備這類藥物組合物的方法。
一般說來(lái)，本發(fā)明的化合物可以通過例如本文提到的專利和專利申請(qǐng)中所述的通用反應(yīng)流程的方法或其改進(jìn)方法，使用易獲得的起始原料、試劑和常規(guī)合成步驟來(lái)制備。在這些反應(yīng)中，也可以使用本身已知但本文未提及的變型方法。也包括本說明書中所述的且具有相同的一般性質(zhì)的化合物的功能和結(jié)構(gòu)等價(jià)物，其中，對(duì)一個(gè)或多個(gè)取代基進(jìn)行了不會(huì)對(duì)該化合物的基本性質(zhì)或效用造成不利影響的簡(jiǎn)單改變。
本發(fā)明化合物可以含適當(dāng)溶劑的溶液形式或無(wú)溶劑的形式(例如凍干形式)提供。在本發(fā)明的另一方案中，實(shí)施本發(fā)明方法必需的化合物和緩沖劑可以包裝成藥盒形式。該藥盒可在市場(chǎng)上按照本發(fā)明所述方法使用，并且可包括使用本發(fā)明方法的說明書。附加的藥盒組分可包括酸、堿、緩沖劑、無(wú)機(jī)鹽、溶劑、抗氧劑、防腐劑、或金屬螯合物。附加的藥盒成分以純組分形式存在，或以混合了一種或多種附加藥盒組分的水溶液或有機(jī)溶液形式存在。任何或所有的藥盒組分都任選進(jìn)一步包含緩沖劑。
治療化合物也可經(jīng)胃腸外、腹膜內(nèi)、脊柱內(nèi)、或腦內(nèi)給藥。分散液可以在甘油、液體聚乙二醇及其混合物中以及在油中制備。在常規(guī)貯存與使用條件下，這些制劑可含有防腐劑，用以防止微生物的生長(zhǎng)。
通過非腸道給藥以外的方式給藥治療化合物時(shí)，可能需要將化合物用某種物質(zhì)包衣或與某種物質(zhì)共同給用以防止其失活。例如，可以對(duì)患者給用在適宜載體(例如脂質(zhì)體)，或稀釋劑中的治療化合物。藥學(xué)上可接受的稀釋劑包括鹽水和水緩沖溶液。脂質(zhì)體包括包括水包油包水型CGF乳劑以及常規(guī)的脂質(zhì)體(Stregan等，J.Neuroimmunol.7，27(1984))。
適合于注射使用的藥物組合物包括滅菌水溶液(在水溶的情況下)或分散液和用以臨時(shí)配制滅菌注射液或分散液的無(wú)菌粉劑。在所有的情況下，這種組合物必須是無(wú)菌的，并且必須達(dá)到易于注射的流動(dòng)程度。在生產(chǎn)和貯存條件下必須是穩(wěn)定的，而且必須能防御微生物如細(xì)菌和真菌的污染。
適宜的可藥用賦形劑非限制性地包括適合于口服、胃腸外、鼻內(nèi)、粘膜、透皮、血管內(nèi)(IV)、動(dòng)脈內(nèi)(IA)、肌內(nèi)(IM)、和皮下(SC)給藥途徑的任何非致免疫性的藥物佐劑，譬如磷酸緩沖鹽水(PBS)。
賦形劑可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)、其適當(dāng)?shù)幕旌衔镆约爸参镉偷娜軇┗蚍稚⒔橘|(zhì)。適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性可以通過一些方式維持，例如通過使用包衣物例如卵磷脂、在分散液情況下維持需要的粒度以及使用表面活性劑。微生物作用的防止可通過使用各種抗細(xì)菌劑和抗真菌劑實(shí)現(xiàn)，例如對(duì)羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗壞血酸、硫柳汞等。在許多情況下，藥物組合物中包括等滲劑，例如蔗糖、氯化鈉、或多元醇如甘露糖醇或山梨糖醇。組合物中可包括延遲吸收的物質(zhì)例如單硬脂酸鋁或明膠以實(shí)現(xiàn)注射組合物的延長(zhǎng)吸收。
無(wú)菌注射液可以通過在適當(dāng)?shù)娜軇┲袑⑿枰康闹委熁衔锱c一種或幾種(視需要而定)上面列舉的成分混合，接著過濾滅菌來(lái)制備。一般來(lái)講，分散液是通過將治療化合物摻入到無(wú)菌溶媒中制得的，其中的無(wú)菌溶媒中含有基本分散介質(zhì)和其他上文列舉的所需成分。對(duì)于制備無(wú)菌注射液用的無(wú)菌粉劑，其制備方法是真空干燥法和冷凍干燥法，從而產(chǎn)生由活性成分(即治療化合物)加上其先前滅菌過濾溶液中的任何附加需要成分組成的粉末。
治療化合物可以口服給用，例如，與惰性稀釋劑或可吸收的食用載體一起給用。也可以將治療化合物與其他的成分包封入硬或軟明膠膠囊中，壓制成藥片、或直接摻入患者的飲食中。對(duì)于口服治療給藥而言，治療化合物可以與賦形劑混合，以可攝取的片劑、口含片劑、錠劑、膠囊劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑、糯米劑等的形式使用。組合物與制劑中治療化合物的百分比當(dāng)然可以變化。這類治療用組合物中治療化合物的量是能夠獲得適宜的劑量需要的量。
為了便于給藥以及劑量的一致性，將非腸胃組合物配制成將劑量單位形式是特別有利的。此處所使用的劑量單位形式是指適合作為受治療患者的單位劑量的可物理分隔的單位；每一單位含有經(jīng)過計(jì)算能產(chǎn)生所需治療效果的預(yù)定量的治療化合物以及需要的藥物賦形劑。本發(fā)明的劑量單位形式的規(guī)格決定于或直接依賴于(a)該治療化合物獨(dú)有的性質(zhì)和所能取得的特定療效，和(b)將這類治療化合物復(fù)配用于治療患者淀粉樣沉積的工藝中固有的局限性。
因此，本發(fā)明包括藥物制劑，這種制劑包含處于用于氣霧劑、口服和胃腸外給藥用的可藥用賦形劑中的本文所述結(jié)構(gòu)式化合物(包括其可藥用鹽)。還有，本發(fā)明也包括這類化合物或其鹽，它們已被冷凍干燥，并且可以重構(gòu)成可通過靜脈、肌內(nèi)或皮下注射用的可藥用制劑。也可以皮膚內(nèi)或透皮給藥。
按照本發(fā)明，本文所述結(jié)構(gòu)式的化合物及其可藥用鹽可以固體的形式口服給用或吸入給藥，或者以溶液、混懸液或乳液的形式肌內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥?；蛘?，這些化合物或鹽也可以脂質(zhì)體混懸液的形式通過吸入、靜脈內(nèi)或肌內(nèi)給藥。
本發(fā)明也提供適于以氣霧劑吸入給藥的藥物制劑。這些制劑包括本文中任何結(jié)構(gòu)式的需要化合物或其鹽的溶液或懸浮液，或多種所述化合物或其鹽的固體顆粒。所期望的制劑可放入小室內(nèi)霧化。霧化可利用壓縮空氣或利用超聲波形成許多含有所述化合物或其鹽的小液滴或固體顆粒而實(shí)現(xiàn)。小液滴或固體顆粒的粒徑應(yīng)在大約0.5至大約5微米范圍內(nèi)。固體顆?？梢岳帽绢I(lǐng)域已知的任何適當(dāng)方法(例如微粉化處理)加工本文所述結(jié)構(gòu)式化合物的固體而獲得。固體顆?；蛐∫旱蔚某叽缋鐬榇蠹s1至大約2微米。在這種情況下，可以利用市售霧化器而達(dá)到該目的。
適合于以氣霧劑給藥的藥物制劑可以是液體形式，這種制劑包括存在于含水載體中的水溶性的本文所述結(jié)構(gòu)式化合物或其鹽。其中可以存在表面活性劑，以便充分降低制劑的表面張力，形成小液滴，這種液滴具有噴霧給藥于患者時(shí)所期望的粒徑范圍。
經(jīng)口給藥組合物也包括液體溶液、溶液、混懸液等等。適合于制備這類組合物的可藥用賦形劑是本領(lǐng)域公知的。供糖漿劑、酏劑、乳劑和混懸劑用的典型載體組分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液體蔗糖、山梨糖醇和水。對(duì)于混懸劑，典型的懸浮劑包括甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、黃耆膠、和藻酸鈉；典型的濕潤(rùn)劑包括卵磷脂和吐溫80；典型的防腐劑包括尼泊金甲酯和苯甲酸鈉。經(jīng)口液體組合物也可以包含一種或多種諸如上文所述的甜味劑、調(diào)味劑和著色劑之類組分。
藥物組合物可以用常規(guī)方法包衣，典型的是用pH或時(shí)間-依賴性包衣物，從而使得治療化合物在所期望的局部應(yīng)用地區(qū)或者在不同的時(shí)間在胃腸道內(nèi)釋放以延長(zhǎng)需要的作用。這類劑型通常包括但不限于一種或多種醋酞纖維素、聚乙烯醋酸酯鄰苯二甲酸酯、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、乙基纖維素、蠟和蟲膠。
實(shí)現(xiàn)全身性給藥治療化合物用的其他組合物包括舌下、含服和鼻用制劑形式。這類組合物一般包括一種或多種可溶性填料如蔗糖、山梨糖醇和甘露糖醇；和粘合劑如阿拉伯膠、微晶纖維素、羧甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素。也可以包括上面所述的助流劑、潤(rùn)滑劑、甜味劑、著色劑、抗氧劑和調(diào)味劑。
本發(fā)明的組合物也可以通過局部途徑給藥于患者，例如通過直接將該組合物敷設(shè)或攤涂在患者的表皮或上皮組織上，或者通過“貼劑”透皮給藥。這類組合物包括例如洗劑、霜?jiǎng)?、溶液、凝膠劑和固體劑。這些局部組合物可包括有效量(通常至少大約0.1％，或甚至為大約1％～大約5％)的本發(fā)明的化合物。用于局部給藥的適合載體一般以通過出汗或浸漬在水中除去的連續(xù)膜和保護(hù)層的形式保留在皮膚上。一般來(lái)講，該載體本質(zhì)上是有機(jī)物，并能夠使得該治療化合物分散或溶解在其中。載體可以包括可藥用的潤(rùn)滑劑、乳化劑、增稠劑、溶劑等等。
在一個(gè)實(shí)施方案中，活性化合物以足以抑制患者淀粉樣沉積的治療有效劑量給用。相對(duì)于未經(jīng)治療的患者，“治療有效”劑量能抑制例如至少大約20％，或至少大約40％，或者甚至至少大約60％，或至少大約80％的淀粉樣沉積。在阿耳茨海默氏患者中，“治療有效”劑量能穩(wěn)定認(rèn)知功能或能防止認(rèn)知功能的進(jìn)一步減退(即防止、減緩或終止疾病的進(jìn)程)。本發(fā)明因此提供了治療藥物。術(shù)語(yǔ)“治療物”或“藥物”是指對(duì)有生命的人或非人類動(dòng)物特種疾病或病癥具有有益的緩解或預(yù)防效果的物質(zhì)。
對(duì)于AA或AL淀粉樣變性，本發(fā)明化合物能改善或穩(wěn)定特定器官的功能。例如，腎功能可被穩(wěn)定或改善10％或更多、20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多、或大于90％。
對(duì)于IAPP，本發(fā)明化合物能夠維持或增強(qiáng)β-島細(xì)胞功能(根據(jù)胰島素濃度或Pro-IAPP/IAPP比率測(cè)得)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，Pro-IAPP/IAPP比率增加了大約10％或更多、大約20％或更多、大約30％或更多、大約40％或更多、或大約50％。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，該比率增加到50％。另外，治療有效量的化合物能夠有效地改善糖血或胰島素水平。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以治療AA(繼發(fā)性)淀粉樣變性和/或AL(原發(fā)性)淀粉樣變性的治療有效量給用本發(fā)明的活性化合物，這種治療通過穩(wěn)定腎功能、降低蛋白尿、增加肌酸酐清除率(例如增加至少50％或更多，或增加至少100％或更多)、緩解長(zhǎng)期腹瀉、或通過增加體重(例如增加10％或更多)實(shí)現(xiàn)。另外，可以給用足以改善腎病綜合癥的治療有效劑量的本發(fā)明化合物。
此外，可以給用足以降低淀粉樣蛋白例如Aβ40或Aβ42在患者體中沉積的治療有效劑量的活性化合物。與未接受治療的患者相比，治療有效劑量能降低例如至少約15％、或至少約40％、或甚至至少60％、或至少約80％的淀粉樣變性沉積。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，可以給用足以增加或提高患者血液、CSF或血漿中淀粉樣蛋白例如Aβ40或Aβ42的治療有效劑量的活性化合物。與未接受治療的患者的相比，治療有效劑量能增加例如至少約15％、或至少約40％、或甚至至少60％、或至少約80％的濃度。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，以足以將患者的CDR等級(jí)保持為其基線等級(jí)或0的治療有效量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以將患者的CDR等級(jí)降低大約0.25或以上、大約0.5或以上、大約1.0或以上、大約1.5或以上、大約2.0或以上、大約2.5或以上、或大約3.0或以上的治療有效劑量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以降低患者的CDR等級(jí)的升高速度(與歷史或未治療對(duì)照組相比)的治療有效劑量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療有效劑量足以將患者的CDR等級(jí)升高速度(相對(duì)于未接受治療的患者)降低大約5％或以上、大約10％或以上、大約20％或以上、大約25％或以上、大約30％或以上、大約40％或以上、大約50％或以上、大約60％或以上、大約70％或以上、大約80％或以上、大約90％或以上、或大約100％。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，以足以維持患者M(jìn)MSE得分的治療有效劑量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以將患者的MMSE得分提高大約1、大約2、大約3、大約4、大約5、大約7.5、大約10、大約12.5、大約15、大約17.5、大約20、或者大約25分的治療有效劑量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以減少患者的MMSE得分的降低速度(與歷史對(duì)照組相比)的治療有效劑量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療有效劑量足以將患者的MMSE得分降低速度減少(與歷史對(duì)照組或未治療的對(duì)照組相比)大約5％或更少、大約10％或更少、大約20％或更少、大約25％或更少、大約30％或更少、大約40％或更少、大約50％或更少、大約60％或更少、大約70％或更少、大約80％或更少、大約90％或更少或大約100％或更少。
在又一個(gè)實(shí)施方案中，以足以維持患者ADAS-Cog得分的治療有效量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以將患者的ADAS-Cog得分降低大約2分或更多分、大約3分或更多分、大約4分或更多分、大約5分或更多分、大約7.5分或更多分、大約10分或更多分、大約12.5分或更多分、大約15分或更多分、大約17.5分或更多分、大約20分或更多分，或者大約25分或更多分的治療有效劑量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以減少患者的ADAS-Cog得分的上升速度(與歷史或未治療對(duì)照組相比)的治療有效劑量給藥活性化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，治療有效劑量足以將患者ADAS-Cog得分的上升速度降低(與未治療的對(duì)照組相比)大約5％或以上、大約10％或以上、大約20％或以上、大約25％或以上、大約30％或以上、大約40％或以上、大約50％或以上、大約60％或以上、大約70％或以上、大約80％或以上、大約90％或以上、或大約100％。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以將患者的CSF或血漿中Aβ42∶Aβ40比例降低大約15％或更多、大約20％或更多、大約25％或更多、大約30％或更多、大約35％或更多、大約40％或更多、大約45％或更多、或大約50％或更多的治療有效量給藥活性化合物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，以足以將患者CSF或血漿中Aβ的水平降低大約15％或更多，大約25％或更多，大約35％或更多，大約45％或更多，大約55％或更多，大約75％或更多，或大約90％或更多的治療有效量給藥活性化合物。
這些化合物的毒性和治療效力可以采用標(biāo)準(zhǔn)的藥物方法在細(xì)胞培養(yǎng)基或試驗(yàn)動(dòng)物中測(cè)得，例如測(cè)定LD50(試驗(yàn)總體中50％致死的劑量)和ED50(試驗(yàn)總體中50％治療有效的劑量)。毒性與治療效果的劑量比稱為治療指數(shù)，可以表示為L(zhǎng)D50/ED50之比，而且通常治療指數(shù)越大則表示效力越高。盡管可以使用具有毒副作用的化合物，但務(wù)必要設(shè)計(jì)成能將這些化合物靶向到受影響組織部位的給藥系統(tǒng)，以便將對(duì)未受影響的細(xì)胞的可能損傷降低至最低，減少副作用。
應(yīng)當(dāng)理解，適當(dāng)?shù)膭┝咳Q于多種因素，這些因素都在普通專業(yè)醫(yī)生，獸醫(yī)或研究人員的知識(shí)范圍之內(nèi)。小分子的劑量是可變的，例如這取決于患者或受治療樣本的身份、大小和癥狀，進(jìn)一步還取決于給藥所述組合物的途徑(如果合適的話)、以及醫(yī)師期望小分子作用于患者的效果。代表性的劑量包括每千克患者或樣本重量數(shù)毫克或數(shù)微克量的小分子(例如約1微克/千克-約500毫克/千克，約100微克/千克-約5毫克/千克，或約1微克/千克-約50微克/千克)。進(jìn)一步可以理解，合適的劑量取決于效力。這些合適的劑量可以使用本文所述試驗(yàn)測(cè)定。當(dāng)對(duì)動(dòng)物(例如人類)給藥一種或多種這些化合物時(shí)，醫(yī)生、獸醫(yī)或研究人員開始可以先處方較低的劑量，隨后漸漸增大劑量直至獲得需要的反應(yīng)。此外，還應(yīng)當(dāng)理解的是，對(duì)于任何特定的動(dòng)物患者，具體的劑量水平將取決于多種因素，包括所用具體化合物的活性，患者的年齡、體重、健康狀況、性別和飲食習(xí)慣，給藥時(shí)間，給藥途徑，排泄速率，以及任何聯(lián)用藥物。
化合物抑制淀粉樣蛋白沉積的能力可以采用動(dòng)物模型體系評(píng)估，這種動(dòng)物模型體系能夠預(yù)測(cè)抑制人類疾病中淀粉樣蛋白沉積的效力，例如表達(dá)人APP的轉(zhuǎn)基因鼠或其它能觀測(cè)到Aβ沉積的動(dòng)物模型，或者例如發(fā)生AA淀粉樣變性的動(dòng)物模型。同樣地，化合物在模型體系中防止或減輕認(rèn)知損傷的能力可作為其對(duì)人效力的指標(biāo)。另一方面，化合物的能力可以通過測(cè)試化合物體外抑制淀粉樣原纖維形成的能力評(píng)估，例如，使用原纖維生成的測(cè)定方法，譬如本文所述的包括ThT、CD、或EM測(cè)定法在內(nèi)的方法。還有，也可以使用本文所述的MS測(cè)定法來(lái)測(cè)定化合物結(jié)合淀粉樣原纖維的能力。使用生化測(cè)定法體外測(cè)定化合物保護(hù)細(xì)胞免受淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的毒性的能力，以確定淀粉樣蛋白誘發(fā)的細(xì)胞死亡百分率。也可以在適當(dāng)動(dòng)物模型體系中評(píng)估化合物調(diào)節(jié)腎功能的能力。
也可以半體內(nèi)(ex vivo)給藥本發(fā)明的治療化合物用以抑制淀粉樣沉積或治療某些淀粉樣相關(guān)疾病，如β2M淀粉樣變性以及與透析有關(guān)的其它淀粉樣變性。半體內(nèi)(ex vivo)給藥本發(fā)明治療化合物可以按以下方式完成使體液(例如血液、血漿等)與本發(fā)明的治療化合物接觸，從而使得治療化合物能履行其預(yù)定功能，然后將體液給藥于患者。本發(fā)明的治療化合物可以通過半體內(nèi)方式(例如透析過濾)、體內(nèi)方式(例如與體液一起給用)、或二者實(shí)現(xiàn)其功能。例如，本發(fā)明的治療化合物可以通過半體內(nèi)、體內(nèi)或這兩種方式用于降低血液β2M水平和/或保持β2M為其可溶解形式。
前藥 本發(fā)明也涉及本文所述結(jié)構(gòu)式化合物的前藥。前藥是指在體內(nèi)能轉(zhuǎn)化為活性形式的化合物(參閱例如R.B.Silverman，1992，“The OrganicChemistry of Drug Design and Drug Action”，Academic Press，第8章)。前藥可以用來(lái)改變特定藥物的生物分布(例如使得通常不能進(jìn)入的化合物能夠進(jìn)入蛋白酶的活性部位)或藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。例如，羧酸基可以用例如甲基或乙基基團(tuán)酯化，生成酯。當(dāng)將酯給藥于患者時(shí)，酯通過酶解或非酶解、還原、氧化、或水解的方式裂解而顯示出陰離子基團(tuán)。陰離子基團(tuán)能被一些實(shí)體酯化(例如酰氧基甲酯)，它裂解后給出中間化合物，該化合物隨后分解產(chǎn)生活性化合物。前藥部分可在體內(nèi)被酯酶或其它的機(jī)制代謝成羧酸。
前藥的例子和其用途是本領(lǐng)域公知的(例如，參閱Berge等，“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.66，1-19(1977))。前藥可以在最終分離和純化化合物的過程中就地制備，或者單獨(dú)將純化的游離酸形式的化合物與適當(dāng)?shù)难苌瘎┓磻?yīng)制備。羧酸可以通過在催化劑存在下用醇處理轉(zhuǎn)化為酯。
可裂解的羧酸前藥部分的例子包括取代和未取代的、支鏈或直鏈的低級(jí)烷基酯部分(例如乙酯、丙酯、丁酯、戊酯、環(huán)戊酯、己酯、環(huán)己酯)，低級(jí)鏈烯基酯，二低級(jí)烷基氨基低級(jí)烷基酯(例如二甲氨基乙基酯)，酰氨基低級(jí)烷基酯，酰氧基低級(jí)烷基酯(例如新戊酰氧基甲基酯)，芳基酯(苯基酯)，芳基-低級(jí)烷基酯(例如芐基酯)，取代的(例如帶有甲基、鹵素、或甲氧基取代基)芳基和芳基-低級(jí)烷基酯，酰胺，低級(jí)烷基酰胺，二低級(jí)烷基酰胺，和羥基酰胺。
可藥用鹽 本發(fā)明化合物的某些實(shí)例可含有堿性官能團(tuán)(如氨基或烷基氨基)，因而能與可藥用酸形成可藥用鹽。在此，術(shù)語(yǔ)“可藥用鹽”是指本發(fā)明化合物的相對(duì)無(wú)毒的無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸的加成鹽。這些鹽可以在最后分離與純化本發(fā)明化合物的過程中就地制備，或單獨(dú)將純化的游離堿形式的本發(fā)明化合物與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)酸或無(wú)機(jī)酸反應(yīng)，然后分離這樣所形成的鹽來(lái)制備。
代表性的鹽包括氫鹵化物(包括氫溴酸鹽和鹽酸鹽)、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘甲酸鹽(napthylate)，甲磺酸鹽，葡萄糖酸鹽、乳糖酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、和月桂基磺酸鹽等。例如，參見Berge等的“Pharmaceutical Salts”，J.Pharm.Sci.66，1-19(1977)。
在其它情形下，本發(fā)明的化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)酸官能團(tuán)，因而能與可藥用的堿形成可藥用鹽。這些情況下的術(shù)語(yǔ)“可藥用鹽”是指本發(fā)明化合物的相對(duì)無(wú)毒的無(wú)機(jī)堿和有機(jī)堿的加成鹽。
這些鹽同樣可以在制備本發(fā)明化合物的最后的分離與純化步驟期間就地制備，或單獨(dú)將純化的游離酸形式化合物與適當(dāng)?shù)膲A譬如藥學(xué)上可接受的金屬陽(yáng)離子的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽，與氨，或與藥學(xué)上可接受的有機(jī)伯胺、仲胺或叔胺反應(yīng)而制備。代表性的堿金屬或堿土金屬鹽包括鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽和鋁鹽等。有代表性的用于形成堿加成鹽的有機(jī)胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。
“可藥用鹽”也包括例如通過制備化合物的酸式或堿式鹽而改性的化合物的衍生物，見下面的進(jìn)一步描述以及本申請(qǐng)其它部分所述?？伤幱名}的例子包括堿性殘基如胺的無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸的鹽；酸性殘基如羧酸的堿金屬的鹽或有機(jī)鹽?？伤幱名}包括由例如無(wú)毒的無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸形成的母體化合物的常規(guī)無(wú)毒鹽或季銨鹽。這些常規(guī)無(wú)毒鹽包括由無(wú)機(jī)酸制得的鹽(這些酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸)；以及由有機(jī)酸制備的鹽，所述有機(jī)酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、棕櫚酸、馬來(lái)酸、羥基馬來(lái)酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對(duì)氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸和羥乙磺酸?？伤幱名}可以按照常規(guī)化學(xué)方法由含有堿性或酸性基團(tuán)的母體化合物合成。一般來(lái)講，這些鹽可以通過游離酸或堿形式的這些化合物與化學(xué)計(jì)量的適當(dāng)堿或酸在水或有機(jī)溶劑中，或者在兩者的混合物中反應(yīng)制備。
作為本發(fā)明的化合物，包括所述化合物的所有酸、鹽、堿以及其它離子和非離子的形式。例如，如果這里給出的化合物為酸，則也包括該化合物的鹽形式。同樣地，如果給出的化合物為鹽，則也包括其酸和/或堿的形式。
本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員使用不超過常規(guī)的試驗(yàn)，將可以認(rèn)識(shí)到或能夠確定本文所述的具體方法、具體實(shí)施方案、權(quán)利要求和實(shí)施例的多種等同方案。這些等同方案被認(rèn)為落在本發(fā)明的范圍之內(nèi)，并且也被后面所附的權(quán)利要求所包括。本申請(qǐng)中引用的所有參考文獻(xiàn)、公告專利、公開的專利申請(qǐng)?jiān)诖硕既囊胱鳛閰⒖?。本發(fā)明進(jìn)一步用下面的實(shí)施例舉例說明，但它們不得認(rèn)作是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限制。
實(shí)施例 下面提供的實(shí)施例給出了一些本發(fā)明代表性化合物的合成。同時(shí)也給出了測(cè)定本發(fā)明化合物的Aβ結(jié)合親和力、體內(nèi)效力和神經(jīng)保護(hù)活性的方法。
實(shí)施例1本發(fā)明代表性化合物的合成 本發(fā)明也涉及新化合物及其合成。相應(yīng)地，下面提供的實(shí)施例闡述了如何制備這些化合物中的一部分。
以下化合物的合成方案見本申請(qǐng)人共有的PCT公布WO2004/113275(其內(nèi)容在此完整引入)第155-201頁(yè)所述C；D；E；F；G；H；I；J；K；L；M；N；P；Q；R；S；X；Y；Z；AA；AB；AC；AD；AE；AF；AG；AH；AJ；AK；AL；AM，AN；AV；AW；AY；AZ；BA；BB；BW；BY；BZ；CE；CG；CH；CI；CJ；CK；CL；CO；CV；DD；DG；DH；DI；DJ；DK；DL；DM；DO；DP；DQ；DR；DS；DT；DU；DV；DW；DX；DY；DZ；EA；EB；EC；ED；EE；EF；EG；EH；EI；EJ；EK；EN；EO；EP；EQ；ER；ES；ET；EV；EW；FN；FO。
3-{[(1S)-1-芐基-2-(芐氧基)-2-氧代乙基]氨基}丙烷-1-磺酸(化合物EL)的制備 用飽和K2CO3溶液(50mL)處理L-苯丙氨酸芐酯鹽酸鹽(2.0g，6.9mmol)，加入EtOAc(3×50mL)。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并真空干燥。
向L-苯丙氨酸芐酯(1.8g，6.8mmol)的1，4-二烷(10mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(708mg，6.5mmol)。攪拌回流該溶液。1小時(shí)后，加入20mL 1，4-二烷以便于充分?jǐn)嚢?。再在回流狀態(tài)下攪拌反應(yīng)1小時(shí)。冷卻到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將產(chǎn)物懸浮于80％丙酮/EtOH中。攪拌回流所形成的懸浮液30秒鐘。過濾收集固體物，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(1.14g，46％)。 1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 7.27(m，6H)，7.12(m，4H)，5.05(dd，2H，J＝12.3Hz)，4.49(m，1H).3.29(m，1H)，3.00(m，1H)，2.98(m，1H)，2.61(t，2H，J＝6.5Hz)，1.97(m，2H).13C(DMSO，125MHz)δppm 168.88，135.21，134.90，130.00，129.31，129.07，128.01，67.98，60.50，49.77，46.72，35.87，22.43.[α]D＝+4.8°(c＝0.00073，水)，ES-MS 378(M+1). 3-{[(1S)-1-(甲氧基羰基)-2-甲基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物FT)的制備 用飽和K2CO3溶液(75mL)處理L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽(5.0g，29.8mmol)，加入EtOAc(3×75mL)。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)且進(jìn)行真空干燥。
向L-纈氨酸甲酯的THF(25mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.49g，19.9mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×30mL)洗滌。在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(2.52g，50％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.92(m，1H)，3.75(s，3H)，3.13(t，2H，J＝6.8Hz)，2.88(t，2H，J＝6.8Hz)，2.24(m，1H)，2.06(m，2H))，0.96(d，3H，J＝6.8Hz)，0.88(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 169.35，65.85，55.61，48.14，45.59，29.48，21.32，18.25，16.57.[α]D＝+9.6°(c＝0.0014，水)，ES-MS 254(M+1). 3-{[(1R)-1-環(huán)己基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物FU)的制備 向(R)-(-)-環(huán)己基乙胺(2.5g，19.7mmol)的四氫呋喃(25mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.33g，18.7mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(3.47g，74％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm3.09(m，3H)，2.88(t，2H，J＝7.3Hz)，2.00(m，2H)，1.58(m，6H)，1.13(m，5H)，1.03(m，3H).13C(D2O，125MHz)δppm 58.37，48.17，44.00，39.84，29.00，26.01，25.82，25.73，25.47，21.51，11.79.[α]D＝+4.5°(c＝0.0022，水)，ES-MS 250(M-1).3-{[(1S)-1-環(huán)己基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物FW)的制備 向(S)-(+)-環(huán)己基乙胺(5.0g，39.3mmol)的四氫呋喃(50mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.66g，37.4mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將產(chǎn)物懸浮于80％丙酮/EtOH(200mL)中。攪拌回流所形成的懸浮液30秒鐘，之后過濾收集固體物，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(6.13g，66％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.09(m，3H)，2.88(t，2H，J＝7.3Hz)，2.00(m，2H)，1.55(m，6H)，1.13(m，5H)，1.D3(m，3H).13C(D2O，125MHz)δppm59.37，48.17，44.00，39.84，29.00，26.01，25.82，25.73，25.47，21.51，11.78.[α]D＝-2.8°(c＝0.0014，水)，ES-MS 250(M-1). 3-[(4-叔丁基環(huán)己基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物FX)的制備 向4-叔丁基環(huán)己基乙胺(順式與反應(yīng)異構(gòu)體的混合物，2.5g，16.1mmol)的四氫呋喃(30mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.84g，15.3mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×35mL)洗滌。將所得固體懸浮于80％丙酮/EtOH(200mL)中。攪拌回流所形成的懸浮液30秒鐘，之后過濾收集固體物，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(3.07g，72％)。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 3.21(m，0.5H)，3.04(m，2H)，2.89(m，1H)，2.67(m，0.5H)，1.97(m，4H)，1.77(m，1H)，1.52(m，1H)，1.19(m，2H)，0.96(m，2H)，0.81(s，9H).13C(DMSO，125MHz)δppm56.47，53.62，50.44，49.77，47.56，47.04，46.28，44.49，32.98，32.74，29.61，28.10，28.03，25.57，22.68，22.48，21.01.ES-MS 276(M-1). 3-{[(1S，2S)-2-(芐氧基)環(huán)戊基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物FY)的制備 向(1S，2S)-2-芐氧基環(huán)戊胺(1.0g，5.2mmol)的四氫呋喃(12mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(601mg，5.0mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(1.36g，87％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.32(m，5H)，4.53(d，1H，J＝11.2Hz)，4.41(d，1H，J＝11.2Hz)，4.01(m，1H)，3.36(m，1H)，3.00(t，2H，J＝7.8Hz)，2.80(t，2H，J＝7.8Hz)，2.00(m，4H)，1.64(m，3H)，1.49(m，1H).13C NMR (D2O，125MHz)δppm 136.99，129.06，129.01，128.77，81.78，71.81，63.88，48.01，45.33，29.91，27.43，21.60，20.93.[α]D＝+31.1°(c＝0.0064，水)，ES-MS 314(M+1). 3-{[(1R，2R)-2-(芐氧基)環(huán)戊基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物FZ)的制備 向(1R，2R)-2-芐氧基環(huán)戊胺(1.0g，5.2mmol)的四氫呋喃(12mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(601mg，5.0mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌。將產(chǎn)物懸浮于EtOH中，蒸發(fā)溶劑(除去殘留的THF)。真空干燥所得固體，獲得標(biāo)題化合物(717mg，46％)。
1HNMR(D2O，500MHz)δppm 7.32(m，5H)，4.53(d，1H，J＝11.2Hz)，4.42(d，1H，J＝11.2Hz)，4.02(m，1H)，3.36(m，1H)，3.01(t，2H，J＝7.8Hz)，2.81(t，2H，J＝7.8Hz)，2.01(m，4H)，1.65(m，3H)，1.49(m，1H).13C NMR(D2O，125MHz)δppm 137.00，129.07，129.01，128.77，81.78，71.81，63.89，48.02，45.34，29.93，27.43，21.61，20.94.[α]D-38.8°(c＝0.00122，水)，ES-MS 314(M+1). 3-{[(1S)-1-芐基-2-(環(huán)己基氨基)-2-氧代乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GA)的制備 向L-苯丙氨酸環(huán)己基酰胺(2.5g，10.1mmol)的四氫呋喃(25mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.17g，9.7mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(1.39g，39％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.21(m，3H)，7.08(m，2H)，4.42(m，0.5H)，3.83(m，1H).3.29(m，1H)，3.15(m，1H)，3.02(m，2H)，2.86(m，3H)，2.49(m，0.5H)，2.01(m，2H)，1.54(m，1H)，1.45(m，1H)，1.33(m，2H)，1.02(m，4H)，0.55(m，1H).13C(D2O，125MHz)δppm 133.71，129.54，129.18，128.03，62.08，49.25，47.97，45.41，36.29，31.73，31.46，24.86，24.28，24.20，21.39.[α]D＝+36.4°(c＝0.0019，水)，ES-MS 369(M+1). 3-{[(1S，2S)-2-(芐氧基)環(huán)戊基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GB)的準(zhǔn)備 向(1S，2S)-2-芐氧基環(huán)己胺(1.0g，5.2mmol)的四氫呋喃(12mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(601mg，5.0mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(1.15g，75％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.34(m，5H)，4.62(d，1H，J＝11.2Hz)，4.42(d，1H，J＝11.2Hz)，3.40(m，1H)，2.97(m，2H)，2.90(m，1H)，2.76(t，2H，J＝6.5Hz)，2.26(m，1H)，1.92(m，3H)，1.66(m，2H)，1.18(m，4H).13C NMR(D2O，125MHz)δppm 137.22，129.34，129.11，128.84，76.74，70.26，60.84，48.02，42.74，29.49，26.43，23.57，23.02，21.53.[α]D＝+74.8°(c＝0.00207，水).ES-MS 326(M-1). 3-{[(1R，2R)-2-(芐氧基)環(huán)戊基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GD)的準(zhǔn)備 向(1R，2R)-2-芐氧基環(huán)己胺(1.0g，5.2mmol)的四氫呋喃(12mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(601mg，5.0mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×35mL)洗滌。將該固體物懸浮于80％丙酮/EtOH(200mL)中。攪拌回流所形成的懸浮液30秒鐘，過濾固體物，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(844mg，55％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.32(m，5H)，4.60(d，1H，J＝11.2Hz)，4.40(d，1H，J＝11.2Hz)，3.39(m，1H)，2.94(m，2H)，2.85(m，1H)，2.74(t，2H，J＝6.5Hz)，2.24(m，1H)，1.90(m，3H)，1.64(m，2H)，1.14(m，4H).13C NMR(D2O，125MHz)δppm 137.35，129.28，129.19，128.90，76.90，70.35，60.97，48.12，42.90，29.59，26.53，23.64，23.09，21.63.[α]D＝-68.9°(c＝0.0026，水).ES-MS 326(M-1). 3-({(1S)-1-[(芐氧基)羰基]-2-甲基丙基}氨基)-1-丙烷磺酸(化合物GE)的制備 用飽和K2CO3溶液(50mL)和EtOAc(3×50mL)處理L-纈氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽(2.5g，6.6mmol)。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)且進(jìn)行真空干燥。
向L-纈氨酸芐酯的MeOH(12mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(604mg，5.0mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(649mg，39％)。1H NMR (D2O，500MHz)δppm 7.47(m，5H)，5.41(d，1H，J＝11.7Hz)，5.31(d，3H，J＝11.7Hz)，4.04(m，1H)，3.19(m，2H)，2.95(t，2H，J＝6.8Hz)，2.35(m，1H)，2.14(m，2H)，1.04(d，3H，J＝6.3Hz)，0.95(d，3H，J＝6.3Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 168.75，134.81，129.38，129.31，129.17，69.00，65.96，48.24，46.71，29.67，21.40，18.39，16.65.[α]D＝-7.2°(c＝0.0015，水)，ES-MS 330(M+1). 3-{[(1S)-2-乙氧基-1-甲基-2-氧代乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GF)的制備 用飽和K2CO3溶液(50mL)和EtOAc(3×50mL)處理L-丙氨酸乙酯鹽酸鹽(2.5g，16.3mmol)。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)且進(jìn)行真空干燥。
向L-丙氨酸乙酯(1.67g，14.3mmol)的四氫呋喃(25mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.42g，11.9mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，真空干燥得到標(biāo)題化合物(1.19g，42％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 4.16(m，2H)，4.01(m，1H)，3.12(m，2H)，2.87(t，2H，J＝7.3Hz)，2.01(m，2H)，1.43(d，3H，J＝7.3Hz)，1.14(t，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 170.22，63.84，55.69，47.94，44.73，21.51，14.05，13.25.[α]D＝-2.4°(c＝0.0022，水)，ES-MS 240(M+1). (2S)-3-甲基-2-[(3-磺基丙基)氨基]丁酸(化合物GC)的制備 用飽和K2CO3溶液(75mL)和EtOAc(3×75mL)處理L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽(5.0g，29.8mmol)。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)且進(jìn)行真空干燥。
向L-纈氨酸甲酯的四氫呋喃(25mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.49g，19.9mmol)。攪拌回流該溶液2.5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×30mL)洗滌。真空干燥得到所要的酯。
將上述酯(860mg，3.4mmol)溶于2M NaOH(1.20g NaOH和15mL水)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。向溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，真空干燥得到標(biāo)題化合物(645mg，79％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.66(m，1H)，3.09(t，2H，J＝6.3Hz)，2.86(t，2H，J＝7.3Hz)，2.17(m，1H)，2.07(m，2H))，0.93(d，3H，J＝6.8Hz)，0.87(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 171.24，66.83，48.28，46.77，29.33，21.44，18.30，16.98.[α]D＝-16.5°(c＝0.0020，水)，ES-MS 238(M-1). 3-{[(1S)-1-(甲氧基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GH)的制備 用飽和K2CO3溶液(50mL)處理L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽(5.0g，27.5mmol)，加入EtOAc(3×50mL)。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)且進(jìn)行真空干燥。
向L-纈氨酸甲酯(3.74g，25.6mmol)的四氫呋喃(35mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.04g，17.2mmol)。攪拌回流該溶液3小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物。向溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于丙酮(50ml)中，過濾，真空干燥得到標(biāo)題化合物(1.80g，39％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.99(m，1H)，3.72(s，3H)，3.12(m，2H)，2.87(t，2H，J＝7.3Hz)，2.02(m，2H)，1.74(m，1H)，1.60(m，2H)，0.81(d，3H，J＝5.4Hz)，0.87(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 170.60，58.91，53.81，48.08，45.50，38.17，24.44，22.15，21.59，20.93.[α]D＝+13.8°(c＝0.0016，水)，ES-MS 268(M+1). 3-({(1S)-1-[(叔丁基氨基)羰基-2-甲基丙基}氨基)-1-丙烷磺酸(化合物GI)的制備 用飽和K2CO3溶液(50mL)處理L-纈氨酸叔丁基酰胺鹽酸鹽(2.5g，12.0mmol)，加入EtOAc(3×50mL)。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)且進(jìn)行真空干燥。
向L-纈氨酸叔丁基酰胺(1.87g，11.0mmol)的1，4-二烷(20mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.07g，9.0mmol)。攪拌回流該溶液5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×30mL)洗滌，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(801mg，25％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.43(m，1H)，3.00(m，2H)，2.85(m，2H)，2.03(m，3H)，1.21(m，9H)，0.92(d，3H，J＝6.3Hz)，0.85(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 166.47，66.55，52.56，48.23，46.11，29.91，27.81，21.29，18.30，17.44.[α]D＝-11.6°(c＝0.0023，水)，ES-MS 293(M-1). 3-{[(1S)-1-(羥甲基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GJ)的制備 向L-(+)-亮氨醇(5.0g，42.8mmol)的THF(65mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.85g，40.7mmol，在10mL THF中)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×50mL)洗滌。將該固體溶于50％水/EtOH(400mL)。向此溶液中加入DowexMarathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于丙酮(150ml)中，過濾，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(6.11g，63％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.77(m，1H)，3.59(m，1H)，3.23(m，1H)，3.13(m，2H)，2.90(m，2H)，2.02(m，2H)，1.53(m，2H)，1.35(m，1H)，0.81(d，3H，J＝16.1Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 58.72，58.00，48.17，43.54，35.96，24.34，22.53，21.62，20.89.[α]D＝+16.6°(c＝0.0022，水)，ES-MS 240(M+1). 3-{[(1S)-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GK)的制備 向L-(+)-異亮氨醇(2.0g，17.1mmol)的THF(30mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.94g，16.3mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將該固體溶于70％水/EtOH(240mL)。向此溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性，15g)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于丙酮(60ml)中，過濾，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(1.70g，44％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.78(d，1H，J＝13.1Hz)，3.64(m，1H)，3.14(m，3H)，2.03(m，2H)，1.75(m，1H)，1.32(m，1H)，1.17(m，1H)，0.79(m，6H).13C (D2O，125MHz)δppm63.42，57.38，48.27，44.77，33.64，25.91，21.52，13.31，10.94.[α]D＝+20.4°(c＝0.00212，水)，ES-MS 240(M+1). 3-{[(1R)-1-(羥甲基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GL)的制備 向D-(-)-亮氨醇(2.0g，17.1mmol)的THF(30mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.94g，16.3mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將該固體溶于50％水/EtOH(240mL)。向此溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于丙酮(50ml)中，過濾，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(2.55g，65％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.74(d，1H，J＝12.7Hz)，3.56(d，1H，J＝12.7Hz)，3.20(m，1H)，3.10(t，2H，J＝7.3Hz)，2.87(t，2H，J＝7.3Hz)，2.00(m，2H)，1.49(m，2H)，1.31(m，1H)，0.80(d，3H，J＝6.3Hz)，0.76(d，3H，J＝6.3Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 58.74，58.01，48.19，43.56，35.98，24.34，22.54，21.63，20.90.[α]D＝-16.3°(c＝0.0019，水)，ES-MS 238(M-1). 3-{[(1S)-2-氨基-2-氧代-1-苯基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GN)的制備 用K2CO3溶液(20mL)處理L-苯基甘氨酰胺鹽酸鹽(1.0g，6.7mmol)。將所得混合物用EtOAc(3×20mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥。過濾除去固體物，減壓濃縮濾液至干。
向L-苯基甘氨酰胺(670g，5.9mmol)在四氫呋喃(10mL)和1，4-二烷(4mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(674mg，5.6mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將該固體溶于50％水/EtOH mL)。向溶液中加入DowexMarathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于丙酮(50ml)中，過濾，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(743mg，50％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.38(m，5H)，4.92，(s，1H)，3.01(m，1H)，2.91(m，1H)，2.78(t，2H，J＝7.3Hz)，2.0(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 170.15，130.95，130.24，129.94，128.74，63.40，47.99，44.92，21.27.[α]D＝-124°(c＝0.0041，水)，ES-MS 271(M-1). 3-{[(1S)-2-叔丁氧基-1-甲基-2-氧代乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GO)的制備 用K2CO3溶液(75mL)處理L-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽(2.61g，14.4mmol)。將所得混合物用EtOAc(3×75mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥。過濾除去固體物，將濾液減壓濃縮至干。
向L-丙氨酸叔丁酯(1.53g，10.5mmol)的四氫呋喃(20mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(116g，9.6mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將該固體溶于水(80mL)。向該溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于丙酮(80ml)中，過濾，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(1.37g，54％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.88(m，1H)，3.09(m，2H)，2.86(t，2H，J＝7.3Hz)，2.00(m，2H)，1.39(d，3H，J＝7.3Hz)，1.35(s，9H).13C(D2O，125MHz)δppm 169.13，86.12，56.24，47.94，44.71，27.11，21.52，14.17.[α]D＝-1.1°(c＝0.0027，水)，ES-MS 266(M-1). 3-{[(1S)-2-氨基-2-氧代-1-苯基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GP)的制備 用K2CO3溶液(20mL)處理D-苯基甘氨酰胺鹽酸鹽(1.0g，6.7mmol)。將所得混合物用EtOAc(3×20mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥。過濾除去固體物，減壓濃縮濾液至干。
向D-苯基甘氨酰胺(850g，7.5mmol)在四氫呋喃(10mL)和1，4-二烷(4mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(818mg，6.8mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將該固體溶于50％水/EtOH mL)。向溶液中加入DowexMarathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于丙酮(50ml)中，過濾，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(720mg，34％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.38(m，5H)，4.92，(s，1H)，3.00(m，1H)，2.90(m，1H)，2.78(m，2H)，1.97(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 170.14，130.95，130.24，129.94，128.74，63.40，47.99，44.92，21.27.[α]D＝+106°(c＝0.0016，水)，ES-MS 273(M+1). (2S)-3-甲基-2-[(3-磺基丙基)氨基]丙酸(化合物GQ)的制備 用飽和K2CO3溶液(75mL)處理L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(5.0g，35.8mmol)?；旌衔镉肊tOAc(3×75mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)且進(jìn)行真空干燥。
向L-丙氨酸甲酯(2.37g，23.3mmol)的四氫呋喃(35mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.41g，20.0mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×30mL)洗滌并且進(jìn)行真空干燥。
將所得酯(2.21g，9.8mmol)溶于2M NaOH(2.40g NaOH和30mL水)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。向溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，凍干得到標(biāo)題化合物(1.81g，87％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.76(m，1H)，3.07(m，2H)，2.85(t，2H，J＝7.3Hz)，1.99(m，2H)，1.38(d，3H，J＝7.3Hz)，0.87(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 173.31，56.66，47.97，44.76，21.56，14.51.[α]D＝+3.5°(c＝0.0023，水)，ES-MS 210(M-1). (2S)-3-苯基-2-[(3-磺基丙基)氨基]丙酸(化合物GR)的制備 將N-(3-磺基-丙基)-苯丙氨酸乙酯(DM-258-069，860mg，2.7mmol)溶于2N NaOH(1.20g NaOH和15mL水)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。向溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，凍干得到標(biāo)題化合物(654mg，84％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.20(m，5H)，3.96(t，1H，J＝6.3Hz)，3.11(m，4H)，2.80(t，2H，J＝7.3Hz)，1.95(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 171.46，134.03，129.50，129.28，128.10，62.02，47.97，45.64，35.23，21.39.[α]D+14.9°(c＝0.0013，水)，ES-MS 286(M-1). 3-{[(1S)-1-異丙基-2-氧代戊-4-烯基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GS)的制備 用飽和K2CO3溶液(30mL)處理L-纈氨酸烯丙酯對(duì)甲苯磺酸鹽(3.0g，9.1mmol)。將所得混合物用EtOAc(3×30mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥。過濾并且減壓蒸發(fā)。
向L-纈氨酸烯丙酯(1.30g，8.3mmol)在四氫呋喃(6mL)、1，4-二烷(6mL)和MeOH(0.5mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(910mg，7.5mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，減壓蒸發(fā)溶劑。將所得粘稠糊狀物懸浮于20％丙酮/乙醚中，過濾固體物，進(jìn)而再溶于EtOH(75ml)。向該溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液至干，得到標(biāo)題化合物(605mg，26％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 5.84(m，1H)，5.27(d，1H，J＝17.1Hz)，5.19(m，1H，J＝10.3Hz)，3.91(d，1H，J＝3.9Hz)，3.10(t，2H，J＝7.3Hz)，2.85(t，2H，J＝7.3Hz)，2.22(m，1H)，2.03(m，2H)，0.93(d，3H，J＝6.8Hz)，0.85(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 168.55，130.90，120.31，67.58，65.82，48.09，46.57，29.53，21.29，18.25，16.57.[α]D＝+5.0°(c＝0.0011，水)，ES-MS 278(M-1). 3-{[(1S)-1-(氨基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GT)的制備 用飽和K2CO3溶液(100mL)處理L-亮氨酰胺鹽酸鹽(5.0g，30.0mmol)。將所得混合物用EtOAc(3×100mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥。過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向L-亮氨酰胺(3.20g，24.5mmol)的四氫呋喃(35mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.82g，23.3mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將該固體溶于50％EtOH/水(200mL)。向所得溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性，25g)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液至干。將固體物懸浮于丙酮(75ml)中，過濾，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(3.13g，53％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm3.79(m，1H)，3.04(m，2H)，2.85(m，2H)，2.02(m，2H)，1.65(m，1H)，1.54(m，2H)，0.80(m，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 171.46，59.42，48.04，45.46，39.04，24.27，22.24，21.49，21.17.[α]D＝+13.5°(c＝0.0026，水)，ES-MS 251(M-1). 3-{[(1S)-1-(芐氧基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GU)的制備 用飽和K2CO3溶液(100mL)處理L-亮氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽(5.0g，12.7mmol)。將所得混合物用EtOAc(3×100mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥。過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向L-亮氨酸芐酯(2.81g，12.7mmol)在四氫呋喃(6mL)、1，4-二烷(6mL)和MeOH(6mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.40g，11.5mmol)。攪拌回流該溶液2.5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物并用丙酮(2×20mL)洗滌。減壓蒸發(fā)濾液，將殘留物溶于丙酮(20mL)。產(chǎn)物用Et2O(200mL)分配。過濾固體物。合并這兩批固體物，進(jìn)而溶于50％EtOH/水(200mL)。向所得溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，凍干得到標(biāo)題化合物(1.87g，47％)。
1H NMR(DMSO，500Mz)δppm 9.34(s(寬峰)，1H)，7.39(m，5H)，5.25(s，2H)，4.10(m，1H)，3.09(m，2H)，2.60(m，2H)，1.95(m，2H)，1.64(m，3H)，0.86(m，6H).13C(DMSO，125MHz)δppm 168.90，134.91，128.53，128.50，128.41，67.38，57.37，49.17，45.79，38.06，24.07，22.79，21.78，21.33.[α]D＝+1.8°(c＝0.0017，水)，ES-MS 344(M+1). 3-{[(1S)-1-(甲氧基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物GZ)的制備 用飽和K2CO3溶液(100mL)處理L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽(5.0g，27.5mmol)?；旌衔镞M(jìn)而用EtOAc(3×100mL)提取。分離有機(jī)層，合并，硫酸鈉干燥，過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向L-異亮氨酸甲酯(3.43g，23.6mmol)的丙酮(30mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.62g，21.5mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物并用丙酮(2×20mL)洗滌。減壓蒸發(fā)濾液。將殘留物懸浮于丙酮(50mL)中。過濾固體。合并這兩批固體物并且溶于水(100mL)中。向所得溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液至干。將固體產(chǎn)物懸浮于丙酮(100ml)中，過濾，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(3.23g，56％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 4.00(m，1H)，3.74(s，3H)，3.14(t，2H，J＝7.8Hz)，2.89(t，2H，J＝7.3Hz)，2.05(m，2H)，1.97(m，1H)，1.41(m.1H)，1.23(m，1H)，0.83(m，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 169.29，64.51，53.55，48.14，46.52，36.07，25.92，21.34，13.76，11.09.[α]D＝+22.6°(c＝0.0023，水)，ES-MS 266(M-1). 3-{[(1S)-1-(羥基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HA)的制備 用飽和K2CO3溶液(100mL)處理L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽(5.0g，27.5mmol)。混合物進(jìn)而用EtOAc(3×100mL)提取。分離有機(jī)層，合并，硫酸鈉干燥，過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向L-異亮氨酸甲酯(3.43g，23.6mmol)的丙酮(30mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.62g，21.5mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物并用丙酮(2×20mL)洗滌。減壓蒸發(fā)濾液。將殘留物懸浮于丙酮(50mL)中。過濾固體。合并這兩批固體物并且溶于水(100mL)中。向所得溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液至干。將固體產(chǎn)物懸浮于丙酮(100ml)中，過濾，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(3.23g，56％)。
將上面所得固體(1.0g，3.7mmol)溶于2M NaOH(30mL)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過夜。向溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性，15g)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。將濾液與EtOH-同蒸發(fā)，凍干得到標(biāo)題化合物(740mg，83％)1H NMR(D2O，500MHz)δppm 4.00(m，1H)，3.59(m，3H)，3.07(t，2H，J＝7.3Hz)，2.86(m，2H)，2.02(m，2H)，1.84(m，1H)，1.39(m.1H)，1.19(m，1H)，0.81(m，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 169.29，64.51，53.55，48.14，46.52，36.07，25.92，21.34，13.76，11.09.[α]D＝+30.4°(c＝0.0031，水)，ES-MS 252(M-1). 3-{[(1S)-1-氨基甲?；?2-苯基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HB)的制備 用飽和K2CO3溶液(75mL)處理L-苯丙氨酰胺鹽酸鹽(5.0g，24.9mmol)?；旌衔镞M(jìn)而用EtOAc(3×75mL)提取。分離有機(jī)層，合并，硫酸鈉干燥，過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向L-苯丙氨酰胺(3.93g，23.9mmol)的乙腈(25mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.70g，21.8mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物并用乙腈(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(100mL)中。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)。過濾固體物，真空干燥得到標(biāo)題化合物(5.18g，83％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.24(m，3H)，7.16(m，2H)，4.02(m，1H)，3.15(m，1H)，3.01(m，3H)，2.83(m，2H)，2.02(m，2H)，1.98(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 170.48，133.72，129.58，129.21，128.11，61.55，47.95，45.52，36.21，21.44.[α]D＝+23.1°(c＝0.0021，水)，ES-MS 285(M-1). 3-{[(1R)-1-(甲氧基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HC)的制備 用飽和K2CO3溶液(50mL)處理D-亮氨酸甲酯鹽酸鹽(2.63g，14.5mmol)。含水混合物進(jìn)而用EtOAc(3×50mL)提取。分離有機(jī)層，合并，硫酸鈉干燥，過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向D-亮氨酸甲酯(1.58g，10.9mmol)的乙腈(35mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.21g，9.9mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用EtOH重結(jié)晶，真空干燥后得到標(biāo)題化合物(1.59g，60％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.98(m，1H)，3.70(s，3H)，3.11(m，2H)，2.85(m，2H)，2.00(m，2H)，1.72(m，1H)，1.60(m，2H)，0.81(m，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 170.51，58.78，53.69，47.97，45.36，38.09，24.34，22.07，21.51，20.82.[α]D＝+13.1°(c＝0.0019，水)，ES-MS 266(M-1). 3-{[(1R)-1-(氨基羰基)-2-甲基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HD)的制備 用K2CO3溶液(50mL)處理D-纈氨酰胺鹽酸鹽(2.49g，14.7mmol)。有機(jī)混合物用EtOAc(3×50mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)，進(jìn)而真空干燥。
向D-纈氨酰胺(1.76g，14.7mmol)的乙腈(30mL)溶液中緩慢加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.75g，14.4mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物并用乙腈(2×25mL)洗滌。將固體產(chǎn)物溶于水(75mL)。向該溶液中加入Dowex Marathon C樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體物懸浮于乙腈(50ml)中，過濾，真空干燥，得到標(biāo)題化合物(1.57g，51％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.80(m，1H)，3.19(m，2H)，3.00(m，2H)，2.25(m，1H)，2.16(m，2H)，1.08(d，3H，J＝6.8Hz)，1.02(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 169.94，65.86，48.10，46.27，29.54，21.23，17.99，17.02.[α]D＝-12.4°(c＝0.0037，水)，ES-MS 237(M-1). 3-{[(1R)-1-氨基甲酰基-2-苯基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HE)的制備 用飽和K2CO3溶液(50mL)處理D-苯丙氨酰胺鹽酸鹽(2.53g，12.6mmol)?；旌衔镞M(jìn)而用EtOAc(3×50mL)提取。分離有機(jī)層，合并，硫酸鈉干燥，過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向D-苯丙氨酰胺(1.83g，11.1mmol)的乙腈(20mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.29g，10.6mmol)。攪拌回流該溶液2.5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物并用乙腈(2×20mL)洗滌。將固體產(chǎn)物懸浮于EtOH(75mL)中。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)。過濾固體物，用丙酮(1×25mL)洗滌，真空干燥得到標(biāo)題化合物(2.62g，89％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.28(m，3H)，7.19(m，2H)，4.05(m，1H)，3.19(dd，1H，J＝5.3Hz，14.2Hz)，3.04(m，3H)，2.86(t，2H，J＝5.8Hz)，2.03(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 170.39，133.73，129.62，129.26，128.15，61.57，47.99，45.57，36.21，21.45.[α]D＝-20.7°(c＝0.0038，水)，ES-MS 285(M-1). 3-({(1S)-1-[(芐氧基)羰基]-2-甲基丁基}氨基)-1-丙烷磺酸(化合物HF)的制備 用飽和K2CO3溶液(30mL)處理L-異亮氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽(2.50g，6.4mmol)。混合物進(jìn)而用EtOAc(3×30mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向L-異亮氨酸芐酯(1.41g，6.4mmol)的乙腈(12mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(706mg，5.8mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物并用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體物溶于50％EtOH/水(50mL)。向該溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性，10g)。攪拌懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，凍干得到標(biāo)題化合物(778mg，39％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.49(m，5H)，5.42(d，1H，J＝11.7Hz)，5.31(d，1H，J＝11.7Hz)，3.24(m，2H)，2.98(m，2H)，2.13(m，3H)，1.46(m，1H)，1.34(m，1H)，0.93(m，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 168.53，134.69，129.28，129.22，129.06，68.86，64.45，48.12，46.56，36.21，25.97，21.31，13.73，11.05.[α]D＝-1.5°(c＝0.0031，水)，ES-MS 342(M-1). 3-{[(1R)-1-(氨基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HG)的制備 用飽和K2CO3溶液(30mL)處理D-亮氨酰胺鹽酸鹽(1.0g，6.0mmol)。含水混合物進(jìn)而用EtOAc(3×30mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾并且進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向D-亮氨酰胺(6.0mmol)的乙腈(35mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(666mg，5.5mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用MeCN(2×20mL)洗滌。將該固體懸浮于EtOH(50mL)。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫。過濾固體物，用丙酮(1×20mL)洗滌，在真空烘箱(50℃)中干燥，得到標(biāo)題化合物(1.03g，74％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.81(m，1H)，3.07(m，2H)，2.85(t，2H，J＝7.3Hz)，2.03(m，2H)，1.68(t，1H，J＝7.8Hz)，1.58(m，2H)，0.83(m，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 171.45，59.39，48.01，45.41，39.02，24.24，22.21，21.47，21.13.[α]D＝-13.7°(c＝0.0019，水)，ES-MS 251(M-1). 3-[(1-甲基環(huán)戊基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物FQ) 對(duì)于Ritter反應(yīng)，將燒瓶用隔膜封閉并且與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。一次性向乙酸(30mL)中加入氰化鈉(粉末，5.5g，112mmol)。混合物在室溫下攪拌。在20分鐘內(nèi)逐滴加入在乙酸(15mL)中的硫酸(16mL)溶液。然后在5分鐘內(nèi)逐滴加入1-甲基-1-環(huán)戊醇(10g，99.8mmol)的乙酸(5mL)溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，然后倒在冰(約100g)上。溶液的pH值通過加50％NaOH(約135g)調(diào)節(jié)到9。分離各層，將水層用乙醚(1×40mL)提取。合并有機(jī)層，進(jìn)而用飽和碳酸鈉(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到淺棕色油體(12.04g，94.7mmol，95％)。該油體被證實(shí)為順式與反式甲酰胺的混合物，但其純度足夠直接使用。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ[1.40和1.45(s，3H)]，1.68-1.76(m，7H)，1.97-1.98(m，1H)，[5.42和6.24(br s，1H)]，[8.05(s)和8.24(d，J＝12.2Hz)for 1H]；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ23.1，23.6，25.5，28.2，39.5，40.7，60.7，61.3，160.7，163.9 向上述粗制1-甲基-1-環(huán)戊基甲酰胺(12.00g，94.7mmol)中加入NaOH溶液(25％，80mL)。加熱回流混合物2.5小時(shí)，然后在室溫下冷卻。為便于相分離再加入一些氯化鈉(20g)。分離各層，水層用甲苯(1×15mL)提取。攪拌合并的有機(jī)層。加入異丙醚(2.5mL)、氯仿(1g)和環(huán)己烷(6.5g)不能改善對(duì)溶液的分離。將合并的有機(jī)層用鹽水(1×10mL)洗滌，然后硫酸鈉干燥，過濾。濾液直接用于下一步驟。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.22(s，3H)，1.47-1.75(4m，9H)13C NMR(125MHz，CDCl3)δ24.1，29.6，42.2，58.4 向粗制1-甲基-1-環(huán)戊胺溶液(溶劑的混合物來(lái)自前步)中逐滴加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(9.4g，75mmol)在2-丁酮(35mL)中的溶液。
加熱回流上述混合物20小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)沖洗。在真空烘箱中45℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為細(xì)小白色固體(16.26g，73.47mmol，74％總收率)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.31(s，3H)，1.591.6-1-85(m，8H)，2.03-2.06(m，2H)，2.96(t，J＝6.8Hz，2H)，3.15(t，J＝7.6Hz，2H)；13C NRM(125MHz，D2O)δ22.1，22.5，23.6，36.5，41.4，48.1，66.8.1；ES-MS 220(M-H) 3-[(1-甲基環(huán)己基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物FR) 對(duì)于Ritter反應(yīng)，將燒瓶用隔膜封閉并且與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。分次向乙酸(13mL)中加入氰化鉀(粉末，3.3g，50mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。在10分鐘內(nèi)逐滴加入硫酸(7mL)在乙酸(7mL)中的溶液。然后再在5分鐘內(nèi)逐滴加入1-甲基-1-環(huán)己醇(5g，43.8mmol)的乙酸(4mL)溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，然后倒在冰(約50g)上。溶液的pH值通過加50％NaOH(約70g)調(diào)節(jié)到9。分離各層，將水層用乙醚(2×20mL)提取。合并有機(jī)層，進(jìn)而用飽和碳酸鈉(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到清亮黃色油體(6.56g，定量)。該油體被證實(shí)為順式與反式甲酰胺的混合物，但其純度足夠直接使用。 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.33-1.53(3m，11H)，1.67(br s，1H)，1.99(m，1H)，[5.16和6.09(br s，1H)]，[8.11(s)和8.25(d，J＝12.2Hz)for 1H]；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ23.1，23.6，25.5，28.2，39.5，40.7，60.7，61.3，160.7，163.9 向上述粗制1-甲基-1-環(huán)己基甲酰胺(43.8mmol)中加入NaOH溶液(20％，40mL)。加熱回流混合物3小時(shí)，然后在室溫下冷卻。為便于相分離再加入一些氯化鈉(7.5g)。分離各層，水層用MTBK(1×10mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水(1×5mL)洗滌，硫酸鈉干燥并過濾。濾液直接用于下一步驟。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.08(s，3H)，1.33-1.51(m，10H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ22.8，25.8，29.6，40.8，48.6 向粗制1-甲基-1-環(huán)己胺的MTBK溶液(總體積30mL)中逐滴加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.00g，40mmol)在甲苯(10mL)中的溶液。加熱回流該混合物18小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×8mL)沖洗。在真空烘箱中45℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為細(xì)小白色固體(9.22g)。但質(zhì)子NMR和ES-MS顯示為非純物。將該固體懸浮于甲醇(45mL)中，加熱回流懸浮液。滴加水(12mL)直至獲得清亮黃色溶液。攪拌下緩慢冷卻混合物至室溫。抽濾收集固體物，用甲醇(2×5mL)沖洗。從濾液中收集另一批產(chǎn)物。將這兩批產(chǎn)物在真空烘箱中于45℃干燥過夜。得到標(biāo)題化合物，為細(xì)小白色固體(6.82g，29.0mmol，66％總收率)。這兩批產(chǎn)物是相同的，合并得到所要化合物。1HNMR(500MHz，D2O)δ1..04-1.11(m，1H)，1.19(s，3H)，1.31(q，，J＝12.2Hz，2H)，1.40(qt，J＝12.2Hz，2H)，1.46-1.62(m，2H)，1.63(br d，J＝11.7Hz，2H)，1.94(q，J＝7.3Hz，2H)，2.86(t，J＝7.1Hz，2H)，3.03(t，J＝7.6Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ19.1，21.5，22.0，24.6，34.1，39.1，48.2，60.2；ES-MS 236(M+H) 3-[(1-甲基環(huán)庚基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物FS) 對(duì)于Ritter反應(yīng)，將燒瓶用隔膜封閉并與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。分批向乙酸(10mL)中加入氰化鉀(粉末，2.8g，43mmol)。混合物在室溫下攪拌10分鐘。在20分鐘內(nèi)逐滴加入硫酸(7mL)在乙酸(7mL)中的溶液。然后在5分鐘內(nèi)逐滴加入1-甲基-1-環(huán)庚醇(5g，39.0mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，然后用冰/水浴冷卻到0℃。加50％NaOH(約70g)調(diào)節(jié)溶液的pH值到9。分離各層，將水層用乙醚(1×20mL)提取。合并有機(jī)層，進(jìn)而用飽和碳酸鈉(1×5mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到亮黃色油體(5.71g，94％)。該油體被證實(shí)為順式與反式甲酰胺的混合物，但其純度足夠直接使用。 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.34(s，1.5H)，1.43(s，1.5H)，1.49-1.60(m，8H)，1.96-2.00(m，1H)，[5.28和5.95(br s，1H]，[8.06(s)和8.28(d，J＝12.2Hz)for 1H]；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ22.2，22.4，27.7，29.3，29.4，30.7，40.5，42.5，56.0，57.4，160.5，163.3 向上述粗制1-甲基-1-環(huán)庚基甲酰胺(5.7g)中加入NaOH溶液(25％，40mL)。加熱回流混合物3小時(shí)，然后在室溫下冷卻。為便于相分離再加入一些氯化鈉(7.5g)。分離各層，水層用MTBK(1×10mL)提取。將合并的有機(jī)層用鹽水(1×5mL)洗滌，然后硫酸鈉干燥，過濾。濾液直接用于下一步驟。 1HNMR(500MHz，CD3OD)δ1.10(s，3H)，1.40-1.48(m，2H)，1.5-1.65(m，10H)；13CNMR(125MHz，CD3OD)δ24.0，31.2，31.4，44.4，53.6. 向粗制1-甲基-1-環(huán)庚胺溶液的MTBK溶液(總體積30mL)中逐滴加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.3g，35mmol)在甲苯(10mL)中的溶液。加熱回流上述混合物18小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。在真空烘箱中45℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為細(xì)小白色固體(7.77g，31.2mmol，80％總收率)。 1H NMR(500MHz，D2O)δ1.27(s，3H)，1.40-1.60(m，8H)，1.71-1.81(m，4H)，2.00-2.06(m，2H)，2.95(t，J＝6.3Hz，2H)，3.13(t，J＝7.1Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ22.0，22.1，23.3，29.5，37.1，40.0，48.3，64.0；ES-MS 250(M+H) 3-{[(1R)-1-(芐氧基羰基)-3-甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HI)的制備 用飽和K2CO3溶液(30mL)處理D-亮氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽(2.5g，6.3mmol)。混合物進(jìn)而用EtOAc(3×30mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并且在真空下干燥。
向D-亮氨酸芐酯(6.3mmol)在乙腈(9mL)和MeOH(3mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(691mg，5.7mmol)。攪拌回流該溶液2.5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物，用乙腈(2×20mL)洗滌。將該固體溶于20％水/EtOH(75mL)。向溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，經(jīng)真空干燥得到標(biāo)題化合物(960mg，49％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.52(m，5H)，5.41(d，1H，J＝12.2Hz)，5.35(d，1H，J＝12.2Hz)，4.16(m，1H)，3.22(m，2H)，2.97(t，2H，J＝6.8Hz)，2.16(m，2H)，1.88(m，1H)，1.79(m，1H)，1.76(m，1H)，0.94(d，6H，J＝3.9Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 169.60，135.62，129.24，129.21，129.11，68.08，58.09，49.87，46.48，24.77，23.50，22.50，22.04.[α]D＝-2.1°(c＝0.00095，水)，ES-MS 344(M+1). 3-[(5-羥基-1，5-二甲基己基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物HJ)的制備 向6-氨基-2-甲基-2-庚醇(2.5g，17.2mmol)的乙腈(22mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.0g，16.4mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物，用乙腈(2×20mL)洗滌。將該固體溶于20％MeOH(75mL)。向溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液。將固體懸浮液丙酮(150mL)中，然后過濾固體物，經(jīng)真空干燥得到標(biāo)題化合物(3.08g，70％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm3.19(m，1H)，3.08(m，2H)，2.88(t，2H，J＝7.3Hz)，1.99(m，2H)，1.60(m，2H)，1.36(m，4H)，1.18(d，3H，J＝6.8Hz)，1.07(s，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 71.63，54.73，48.08，43.46，42.27，32.97，27.78，27.73，21.64，19.67，15.43.ES-MS 268(M+1). 3-{[(1R)-2-甲氧基-1-甲基-2-氧代乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物HK)的制備 用K2CO3水溶液(50mL)處理D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(3.0g，21.5mmol)?；旌衔镞M(jìn)而用EtOAc(3×50mL)提取。分離有機(jī)提取物，合并，硫酸鈉干燥，過濾并進(jìn)行減壓蒸發(fā)。
向D-丙氨酸甲酯(1.33g，12.9mmol)的乙腈(15mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.42g，11.7mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物，用乙腈(2×15mL)洗滌。將該固體溶于水(30mL)，向該溶液中加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。攪拌所得懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，真空干燥得到標(biāo)題化合物(1.52g，42％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 4.07(m，1H)，3.72(s，3H)，3.14(m，2H)，2.89(t，2H，J＝7.3Hz)，2.03(m，2H)，1.46(dd，3H，J＝1.95Hz，7.3Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 170.74，55.62，53.82，47.96，44.76，21.53，14.03.[α]D＝+1.4°(c＝0.0088，水)，ES-MS 224(M-1). 4-(1，2，3，4-四氫-1-萘基氨基)-2-丁烷磺酸(化合物JF)的制備 向1，2，3，4-四氫-1-萘基胺(2.01g，13.6mmol)的丁酮(15mL)溶液中加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.95g，14.3mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，進(jìn)而真空干燥。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.56(s(寬峰)，1H)，7.49(dd，1H，J＝8.0Hz，11.9Hz)，7.29(m，1H)，7.26(m，1H)，7.19(d，1H，J＝8.0Hz)，4.40(d，1H，J＝13.7Hz)，3.14(m，2H)，2.75(m，3H)，1.96(m，5H)，1.40(m，1H)，1.23(m，3H).13C(DMSO，125MHz)δppm138.81，131.81，130.40，130.28，130.16，129.41，126.76，126.73，54.97，54.58，54.08，44.18，43.23，29.50，28.84，24.84，24.76，18.23，18.20，17.79，17.01.ES-MS 284(M+1). 4-(辛基氨基)-2-丁烷磺酸(化合物JG)的制備 向辛胺(2.00g，15.5mmol)的2-丁酮(17mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.21g，16.2mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，進(jìn)而真空干燥。將該固體懸浮于25％EtOH/丙酮(50mL)，攪拌懸浮液5分鐘過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。
1HNMR(DMSO，500MHz)δppm 8.45(s(寬峰)，1H)，3.01(m，1H)，2.84(m，2H)，2.58(m，1H)，1.92(m，1H)，1.75(m，1H)，1.51(m，2H)，1.10(d，1H，J＝6.8Hz)，0.85(t，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 53.05，47.27，46.15，31.83，29.42，29.13，26.51，26.27，22.75，17.19，14.64.ES-MS 266(M+1). 4-(金剛烷基)氨基-2-丁烷磺酸(化合物JH)的制備 用1N NaOH(20mL)和CH2Cl2(3×20mL)處理1-金剛烷胺鹽酸鹽(2.51g，13.3mmol)。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并且在真空下干燥。
向2-金剛烷胺(1.99g，13.1mmol)的乙腈(15mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.87g，13.8mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用乙腈(2×20mL)洗滌，然后真空干燥。 1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.53(s(寬峰)，1H)，3.33(m，2H)，2.61(m，1H)，2.10(s，3H)，1.93(m，1H)，1.77(m，7H)，1.61(m，6H)，1.12(d，1H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 56.20，53.34，35.85，29.75，29.04，17.206.ES-MS 288(M+1). 4-(2-金剛烷基)氨基-2-丁烷磺酸(化合物JI)的制備 用1N NaOH(20mL)和CH2Cl2(3×20mL)處理2-金剛烷胺鹽酸鹽(2.50g，13.3mmol)。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并且在真空下干燥。
向1-金剛烷胺(1.99g，13.1mmol)的乙腈(15mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.87g，13.8mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用乙腈(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 3.20(m，1H)，3.05(m，2H)，2.67(m，1H)，2.07(m，2H)，2.00(m，1H)，1.95(m，4H)，1.82(m，4H)，1.69(m，4H)，1.55(m，4H)，1.12(d，1H，J＝8.0Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm62.27，53.91，44.33，37.30，36.82，36.77，30.30，30.20，29.57，29.50，28.95，17.12，26.85，17.44.ES-MS 288(M+1). 4-(二環(huán)[2.2.1]庚-2-基氨基)-2-丁烷磺酸(化合物JJ)的制備 向2-氨基降冰片烷(1.0g，9.0mmol)的四氫呋喃(THF，10mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.28g，9.3mmol)。攪拌回流該溶液3小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用THF(2×20mL)洗滌，然后真空干燥。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.43(s(寬峰)，1H)，2.96(m，3H)，2.62(m，1H)，2.38(m，1H)，2.28，(m，1H)，1.91(m，1H)，1.82(m，1H)，1.61(m，1H)，1.54(m，2H)，1.42(m，2H)，1.12(m，6H).13C(DMSO，125MHz)δppm 60.92，60.79，53.61，53.21，44.55，44.36，39.80，39.55，36.27，36.15，36.11，35.98，35.19，35.13，29.62，29.43，28.07，26.88，17.56，14.11.ES-MS 248(M+1). 4-(氮雜二環(huán)[2.2.2]辛-2-基氨基)-2-丁烷磺酸鹽(化合物JK)的制備 用1N NaOH(20mL)和CH2Cl2(4×20mL)處理奎寧環(huán)鹽酸鹽(2.50g，16.9mmol)。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并在真空下干燥。
向奎寧環(huán)(900g，8.2mmol)在四氫呋喃(THF，18mL)和MeOH(0.5mL)中的溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.16g，8.6mmol)。攪拌回流該溶液過夜。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用THF(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 3.40(m，7H)，3.20(td，1H，J＝3.9Hz，12.7Hz)，2.38(m，1H)，2.01(m，2H)，1.83，(m，6H)，1.70(m，1H)，1.10(d，3H，J＝12.7Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 62.63，54.23，52.18，25.67，24.07，19.78，17.04.ES-MS 208(M+1). 4-[(d1)-1-羥基-2-戊基]氨基-2-丁烷磺酸(化合物JL)的制備 向DL-2-氨基戊醇(1.0g，9.7mmol)的四氫呋喃(11mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.45g，10.2mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。移去上清液，真空干燥所得固體。將該產(chǎn)物懸浮于2-丙醇(100mL)中，攪拌混合物5分鐘。過濾白色固體，用2-丙醇洗滌，然后真空干燥。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.74(d，1H，J＝12.7Hz，)，3.59(dd，1H，J＝5.4Hz，12.9Hz)，3.13(m，3H)，2.89(m，1H)，2.07(m，1H)，1.82，(m，1H)，1.52(m，2H)，1.28(m，2H)，1.18(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 59.43，58.80，53.47，42.88，29.30，28.43，18.40，14.99，13.23.ES-MS240(M+1). 4-(壬基氨基)-2-丁烷磺酸(化合物JN)的制備 向壬胺(2.00g，14.0mmol)的四氫呋喃(THF，15mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.08g，14.7mmol)。攪拌回流該溶液5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用THF(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。
將上述產(chǎn)物(1.10g，3.9mmol)在加熱下溶于由EtOH(20mL)、水(600μL)和NaOH(163mg，4.1mmol)形成的溶液中。數(shù)分鐘后有白色固體析出。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 2.70(m，1H)，2.52(m，2H)，2.37(m，1H)，1.95(m，1H)，1.46(m，1H)，1.34(m，1H)，1.14(m，17H)，0.70(t，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 54.31，52.90，50.44，31.31，28.80，28.74，28.57，27.31，26.95，22.20，14.60，13.57.ES-MS 302(M+1). 4-(二甲氨基)-2-丁烷磺酸(化合物JO)的制備 向二甲胺的冰冷溶液(40％w/w，溶在水中)內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.27g，8.9mmol)。0℃攪拌該溶液4小時(shí)。真空蒸發(fā)溶劑至全干。用丙酮(50mL)洗滌所得固體，過濾收集，真空干燥。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.18(t，2H，J＝8.1Hz)，2.85(m，1H)，2.76(s，6H)，2.09(m，1H)，1.81(m，1H)，1.17(d，3H，J＝7.3Hz).13C(D2O，125MHz)δppm55.65，53.05，42.88，26.72，14.g1.ES-MS 182 a(M+1). 4-(芐基氨基)-2-丁烷磺酸，鈉鹽(化合物JP)的制備 向芐胺(1.50g，14.0mmol)的四氫呋喃(THF，18mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.98g，14.6mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用THF(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。
在加熱下將上述產(chǎn)物(2.55g，10.5mmol)溶于由EtOH(25mL)、水(1.6mL)和NaOH(440mg，11.0mmol)形成的溶液中。向?yàn)V液中加入乙醚(150mL)。過濾固體物，然后真空干燥。收率27％。 1HNMR(DMSO，500MHz)δppm 7.29(m，4H)，7.20(m，1H)，3.67(m，2H)，2.56(m，1H)，2.45(m，2H)，1.98(m，1H)，1.36(m，1H)，1.04(d，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 141.49，128.73，128.61，127.16，53.49，52.88，47.31，32.67，16.53.ES-MS 266(M+1). 4-(乙基氨基)-2-丁烷磺酸，鈉鹽(化合物JQ)的制備 于5℃、2小時(shí)內(nèi)，利用注射泵向乙胺(70％w/w，在水中，12.0mL，186.0mmol)中加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.33g，9.3mmol)的四氫呋喃(THF，3.0mL)溶液。于5℃再攪拌溶液2小時(shí)。然后與EtOH(3×25mL)一起蒸發(fā)溶劑。將所得固體懸浮于丙酮(25mL)中，攪拌該懸浮液5分鐘，然后過濾固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，進(jìn)而真空干燥。收率70％。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.06(t，2H，J＝8.1Hz)，2.97(m，2H)，2.87(m，2H)，2.06(m，1H)，1.77(m，1H)，1.18(d，3H，J＝7.3Hz)，1.14(t，3H，J＝7.3Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 53.16，44.91，43.03，28.20，14.76，10.66.ES-MS 182(M+1). 4-(叔丁基氨基)-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)D)的制備 室溫下，向叔丁胺(1.0mL，9.5mmol)的四氫呋喃(4mL)溶液中加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.36g，10.0mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，然后真空干燥。收率690mg(34％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 2.92(t，2H，J＝7.1Hz)，2.82(t，2H，J＝7.1Hz)，1.68(m，4H)，1.22(s，9H).13C(D2O，125MHz)δppm 57.07，50.30，40.95，25.28，24.96，21.62.ES-MS 210(M-1). 4-氨基-2-丁烷磺酸(化合物JR)的制備 于5℃、4小時(shí)內(nèi)，利用注射泵向氫氧化銨(28-30％NH3，43mL，350mmol)中加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.0g，7mmol)的四氫呋喃(THF，4.0mL)溶液。于5℃再攪拌溶液30分鐘。然后與EtOH(3×25mL)一起蒸發(fā)溶劑。真空干燥所得固體。收率94％。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.05(m，2H)，2.90(m，1H)，2.05(m，1H)，2.06(m，1H)，1.77(m，1H)，1.18(d，3H，J＝6.8Hz)，1.14(t，3H，J＝7.3Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 52.75，38.20，30.87，17.27.ES-MS 154(M+1). 4-哌啶-1-基-2-丁烷磺酸(化合物JS)的制備 向哌啶(1.50g，17.6mmol)的四氫呋喃(THF，20mL)中加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.50g，18.5mmol)。攪拌回流該溶液3小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體，用THF(2×20mL)洗滌，然后真空干燥。
在加熱下將上述產(chǎn)物(3.53g，15.9mmol)溶于由EtOH(30mL)、水(1.3mL)和NaOH(670mg，16.7mmol)形成的溶液中。將該溶液倒入大大過量的Et2O(500mL)中。過濾固體物，用Et2O(1×25mL)和丙酮(1×20mL)洗滌，然后真空干燥。收率64％。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 2.72(m，1H)，2.33(m，6H)，1.97(m，1H)，1.48(m，1H)，1.43(m，4H)，131(m，1H)，1.13(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 55.78，54.42，53.61，27.73，24.92，23.59，14.61.ES-MS 244(M+1). 4-(乙基氨基)-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)E)的制備 于5℃、4小時(shí)內(nèi)，利用注射泵向乙胺(70％w/w水溶液，24mL，372mmol)中加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.66g，18.6mmol)的四氫呋喃溶液(總體積4mL)。于5℃再攪拌溶液3小時(shí)，然后溫?zé)岬绞覝?。在這些條件下攪拌反應(yīng)過夜。溶劑與EtOH(1×25mL)一起蒸發(fā)。將所得固體懸浮于50％丙酮/EtOH(50mL)中。攪拌懸浮液5分鐘，過濾固體物，真空干燥。收率75％。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 2.95(m，4H)，2.82(m，2H)，1.68(m，4H)，1.13(t，3H，J＝7.3Hz)，1.14(t，3H，J＝7.3Hz).13C(D2O，125MHz)δppm50.27，46.68，42.99，24.66，21.48，10.64.ES-MS 182(M+1). 4-(氮雜二環(huán)[2.2.2]辛-2-基氨基)-1-丁烷磺酸鹽(化合物L(fēng)F)的制備 室溫下，向奎寧環(huán)(1.5g，13.5mmol)的四氫呋喃(THF，15mL)溶液中加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.0g，14.4mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。過濾收集固體物，用THF(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。 1HNMR(D2O，500MHz)δppm 3.26(m，6H)，3.02(m，2H)，2.82(t，2H，J＝17.3Hz)，2.04(m，1H)，1.84，(m，6H)，1.75(m，2H)，1.64(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 63.68，54.81，50.14，23.51，21.45，20.58，19.19.ES-MS 248(M+1). 3-(二甲氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(化合物JT)的制備 攪拌下，于4小時(shí)內(nèi)利用注射泵向二甲胺冰冷(2.8-3.1℃)溶液(40％wt水溶液，300mL)中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(10g，48.3mmol)的水溶液(總體積40mL)。緩慢溫?zé)峄旌衔锏绞覝剡^夜。然后將混合物與無(wú)水乙醇(20mL)一起蒸發(fā)，并且濃縮至干。在真空烘箱中于60℃干燥所得固體過夜。然后將該固體懸浮于乙醇(40mL)中，攪拌回流2小時(shí)。冷卻懸浮液到5℃，抽濾收集固體，抽干5分鐘，然后在真空烘箱中于60℃干燥過周末(濕餅13.74g)，得到所要物質(zhì)，為灰白色固體(11.65g，定量)。
4-二甲氨基-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)H)的制備 利用注射泵于4小時(shí)內(nèi)向二甲胺冷(4.3℃)溶液(40％wt水溶液，275mL)中加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(7.5mL，73.6mmol)的1，4-二烷溶(總體積10mL)。加完后于4℃攪拌混合物3小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物至干。將所得固體懸浮于無(wú)水乙醇(50mL)中，攪拌回流混合物90分鐘。冷卻懸浮液到5℃，抽濾收集固體，用乙醇(2×10mL)沖洗。在真空烘箱中于60℃干燥所得固體18小時(shí)，得到所要物質(zhì)，為白色細(xì)粉末13.21g，72.9mmol，99％收率。1H和13NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
3-(乙基氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸(化合物JU)的制備 在5小時(shí)內(nèi)，利用注射泵向乙胺的冰冷(4.7℃)水溶液中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸鈉鹽(10g，50.9mmol)在水中的溶液(總體積40mL)?；旌衔镉?.7℃另攪拌2小時(shí)，然后在室溫下攪拌18小時(shí)。NMR定量產(chǎn)率。濃縮混合物，未能獲得固體鈉鹽太具吸濕性。將該溶液用Amberlite IR-120 Plus(一種酸型離子樹脂)處理，得到游離酸。其吸濕性依然過強(qiáng)，從而不能獲得固體形式。以溶液形式提供d＝1.314g/mL，62.5％w/w游離酸水溶液。1H和13C NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
3-(叔丁基氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸(化合物JV)的制備 在5分鐘內(nèi)，向由叔丁胺(12.5mL)、水(6mL)和甲醇(3mL)組成的混合物中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(15g，25mmol)在水中的溶液(總體積12mL)?；旌衔镉?5℃加熱1小時(shí)，40℃加熱1小時(shí)，最后于45℃再加熱1.5小時(shí)。濃縮混合物得到粘稠油體。將該反應(yīng)混合物粗品上Dowex 50 X8(125g)柱。濃縮含產(chǎn)品餾分至干。將所得固體在真空烘箱中60℃干燥過夜，進(jìn)而在甲醇(25mL)與水(7mL)混合液中重結(jié)晶。緩慢冷卻該混合物至室溫，然后再冷卻到5℃。抽濾收集固體物，用乙醇(1×10mL)沖洗。固體物然后在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)，得到所要物質(zhì)，為灰白色固體(3.11g，14.7mmol，59％)。1H和13C NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
1-(N-辛基氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸(化合物JW)的制備 在70-75℃，于2小時(shí)內(nèi)向由辛胺(8mL)、水(20mL)和1，4-二烷(11mL)組成的混合物中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(4g，20mmol)在水中的溶液(總體積17.5mL)。加畢后于該溫度下再攪拌混合物2小時(shí)。然后減壓除去1，4-二烷，混合物加水(10mL)稀釋?；旌衔镉?0％乙酸乙酯/己烷(3×40mL)提取。濃縮水層，然后將混合物通過Dowex50 X8(125g)柱。濃縮含純凈產(chǎn)品餾分至粘稠油體，隨后冷凍干燥。從而得到所要物質(zhì)，為白色絨毛狀固體(150mg，0.56mmol，3％)。1H和13C NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
1-(3-磺基-2-羥基丙基)奎寧環(huán)，內(nèi)鹽(化合物JX)的制備 在80℃，于1小時(shí)內(nèi)向由奎寧環(huán)(1.63g，4.7mmol)、水(10mL)和1，4-二烷(10mL)組成的混合物中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(2g，10mmol)的水溶液(總體積12mL)。加畢后于該溫度下再攪拌混合物2小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，然后將混合物通過Dowex50 X8(125g)柱。濃縮含純凈產(chǎn)品餾分得到白色固體。在真空烘箱中60℃干燥該固體18小時(shí)，得到所要物質(zhì)，為白色固體(1.92g，7.7mmol，77％)。
1H和13C NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
1-(N-芐基氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(化合物JY)的制備 在80℃，于2小時(shí)內(nèi)向由芐胺(4.28g.40mmol)、水(10mL)和1，4-二烷(5mL)組成的混合物中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(4g，20mmol)的水溶液(總體積12.5mL)。加畢后于該溫度下再攪拌混合物2.5小時(shí)。用氯仿(2×40mL)提取反應(yīng)混合物，然后濃縮至干。將該粗制固體在乙醇(30mL)與水(4mL)混合液中重結(jié)晶。自然冷卻混合物至室溫過夜。抽濾收集固體，用乙醇(10mL)沖洗，隨后在真空烘箱中于60℃干燥，從而得到所要物質(zhì)，為白色固體(2.67g，10mmol，50％)。1H和13C NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
2-羥基-3-(1，2，3，4-四氫化萘-1-基氨基)丙烷-1-磺酸(化合物JZ)的制備 在40℃，于8小時(shí)內(nèi)向由1，2，3，4-四氫-1-萘胺(2g，13.6mmol)、水(10mL)和1，4-二烷(4mL)組成的混合物中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(2g，10mmol)的水溶液(總體積9.75mL)。加畢后于該溫度下再攪拌混合物18小時(shí)。反應(yīng)未完全，故再加熱回流混合物2小時(shí)。然后加水(10mL)稀釋混合物，再加入50％w/w NaOH(0.25mL)。反應(yīng)混合物用氯仿(2×25mL)提取。然后濃縮得到粘稠油體。將該溶液上Dowex50 W8(100g)柱。濃縮含產(chǎn)物餾分，用活性炭處理(無(wú)效果)，隨后冷凍干燥。從而得到所要物質(zhì)，為玻璃狀固體(0.85g，3mmol，30％)。1H和13C NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
2-羥基-3-哌啶-1-基丙烷-1-磺酸(化合物KA)的制備 在70℃，于5小時(shí)內(nèi)向哌啶(8mL g，80mmol)的水(15mL)溶液中加入3-氯-2-羥基-1-丙烷磺酸，鈉鹽(4g，20mmol)的水溶液(總體積13.35mL)。80℃攪拌混合物2小時(shí)，反應(yīng)完成。然后在室溫下再攪拌混合物過夜。加水(10mL)稀釋混合物，進(jìn)而以氯仿(3×30mL)提取。濃縮得到粘稠油體。將該溶液上Dowex50 W8(100g)柱。濃縮含產(chǎn)物餾分至干，隨后在乙醇(30mL)與水(2.1mL)混合液中重結(jié)晶。混合物在室溫下緩慢冷卻。抽濾收集固體物，用乙醇(2×5mL)沖洗，之后風(fēng)干5分鐘，再在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)，從而得到所要物質(zhì)，為白色細(xì)碎固體(3.06g，13.7mmol，68％)。1H和13C NMR以及MS與所述結(jié)構(gòu)一致。
4-(金剛烷基)氨基-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)I)的制備 用1N NaOH(20mL)和CH2Cl2(3×20mL)處理1-金剛烷胺鹽酸鹽(2.67g，13.3mmol)。搖動(dòng)雙相溶液。合并有機(jī)提取物，Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并且在真空下干燥。
向2-金剛烷胺(1.87g，12.4mmol)的四氫呋喃(THF，15mL)溶液內(nèi)加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.76g，13.0mmol)。攪拌回流該溶液過夜。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用THF(1×15mL)洗滌，然后真空干燥。攪拌回流所得固體在EtOH(25mL)中的懸浮液1小時(shí)。過濾溫?zé)峄旌衔?。真空干燥所得固體。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 2.92(m，2H)，2.82(m，1H)，2.05(s，3H)，1.75(s，6H)，1.63(m，6H)，1.52(m，3H).13C(D2O，125MHz)δppm 57.62，50.30，39.03，38.14，35.09，28.98，25.25，21.63.ES-MS 288(M+1). 4-(辛基氨基)-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)J)的制備 向辛胺(2.20g，17.0mmol)的四氫呋喃(11mL)溶液內(nèi)加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.30g，16.2mmol)。加熱回流該溶液5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。產(chǎn)物形成凝集體。加入數(shù)滴EtOH來(lái)溶解產(chǎn)物。將所得溶液倒入大大過量的丙酮(25mL)中。5分鐘后，有白色固體析出。過濾收集固體，真空干燥。將產(chǎn)物溶于EtOH，向該溶液中加入Dowex50 X8樹脂(預(yù)先洗滌過，6g)。攪拌該懸浮液15分鐘，然后濾去樹脂。減壓蒸發(fā)濾液，真空干燥所得產(chǎn)物。收率31％。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.24(s(寬峰)，1H)，2.85(m，4H)，2.45(m，2H)，1.64(m，4H)，1.61(m，2H)，1.25(m，10H)，(m，2H)，0.85(t，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm51.22，47.54，47.38，31.82，29.14，26.59，26.13，25.51，22.95，22.75，14.64.ES-MS 266(M+1). 4-(環(huán)己基氨基)-2-丁烷磺酸(化合物KM)的制備 向環(huán)己胺(1.50g，15.1mmol)的四氫呋喃(15mL)溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.04g，14.4mmol)。攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，隨后真空干燥。收率59％。 1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.50(s(寬峰)，1H)，3.02(m，2H)，2.93(m，1H)，2.60(m，1H)，1.93(m，3H)，1.75(m，3H)，1.57(m，1H)，1.21(m，4H)，1.11(m，4H).13C(DMSO，125MHz)δppm 56.23，53.20，43.09，29.54，29.41，29.39，25.40，24.42，17.23.ES-MS 234(M-1). 4-[(d1)-1-羥基-2-戊基]氨基-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)L)的制備 室溫下，向DL-2-氨基戊醇(1.0g，9.7mmol)的四氫呋喃(6mL)溶液內(nèi)加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.31g，9.2mmol)。攪拌回流該溶液5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。除去上清液，真空干燥所得固體物。過濾白色固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，然后真空干燥。收率45％。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.20(s(寬峰)，1H)，5.23(m，1H)，3.66(m，1H)，3.49(m，1H)，3.02(m，1H)，2.91(m，2H)，2.46(t，2H，J＝7.3Hz)，1.65，(m，4H)，1.54(m，2H)，1.38(m，2H)，0.88(t，3H，J＝7.3Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 58.83，58.54，51.23，44.77，29.91，25.56，23.06，18.95，14.48.ES-MS 238(M-1). 4-[(3，4-二甲氧基芐基)氨基]-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)M)的制備 室溫下，向藜蘆基胺(1.50g，9.0mmol)的1，4-二烷(8mL)溶液中加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.21g，8.5mmol)。加熱回流該混合物2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，然后抽吸干燥。收率18％。1H NMR(D2O，500MHz)δ6.96(m，3H)，4.04(s，2H)，3.74(m，6H)，2.95(t，2H，J＝6.8Hz)，2.80(t，2H，J＝7.3Hz)，1.68，(m，4H).13C(D2O，125MHz)δppm149.19，148.50，123.82，123.36，113.25，112.17，55.91，50.88，50.24，46.41，24.55，21.50.ES-MS 302(M-1). 4-(金剛烷-1-基氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸(化合物KB)的制備 用1N NaOH(20mL)和CH2Cl2(3×20mL)處理1-金剛烷胺鹽酸鹽(2.67g，14.2mmol)。合并有機(jī)提取物，Na2SO4干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并且在真空下干燥。
利用注射泵向1-金剛烷胺(2.15g，14.2mmol)在1，4-二烷(10mL)和水(5mL)中的80℃溶液內(nèi)加入3-氯-2-羥基-丙烷磺酸，鈉鹽(1.93g，9.7mmol)在1，4-二烷(0.5mL)與水(10mL)中的溶液(加料1小時(shí))。攪拌回流該溶液過夜。冷卻反應(yīng)到室溫。減壓蒸發(fā)溶劑。將固體物懸浮在25％丙酮/EtOH中。加熱回流混合物1小時(shí)。過濾收集固體。純凈產(chǎn)物在濾液中結(jié)晶析出。過濾產(chǎn)物，用EtOH(2×10mL)洗滌，再溶于水，凍干。收率15％。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 4.18(m，1H)，3.22(m，1H)，3.01(m，2H)，2.94(m，1H)，2.06(s，3H)，1.77(m，7H)，1.61(d，3H)，1.53(m，3H).13C(D2O，125MHz)δppm 64.23，57.99，55.05，44.10，38.10，35.07，29.03.ES-MS 288(M-Na(23)). 4-(2-金剛烷基)氨基-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)N)的制備 用1N NaOH(20mL)和CH2Cl2(3×20mL)處理2-金剛烷胺鹽酸鹽(2.50g，13.3mmol)。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并且在真空下干燥。
向2-金剛烷胺(1.06g，7.0mmol)的1，4-二烷(6mL)溶液內(nèi)加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(955mg，6.7mmol)。攪拌回流該溶液5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫，過濾收集固體物，進(jìn)而懸浮于EtOH(25mL)中，加熱回流該混合物1分鐘，然后過濾固體物。用EtOH(1×15mL)洗滌，然后真空干燥。收率55％。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.29(m，1H)，2.97(m，2H)，2.83(m，2H)，2.02(m，2H)，1.83(m，2H)，1.68(m，14H).13C NMR(D2O，125MHz)δppm63.07，50.25，45.03，36.55，36.31，29.85，29.05，26.68，26.41，24.47，21.61.ES-MS 286(M-1). 3-(2-金剛烷基氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸(化合物KJ)的制備 利用注射泵向2-金剛烷胺鹽酸鹽(2.50g，13.3mmol)和氫氧化鈉(586mg，14.6mmol)在1，4-二烷(7mL)與水(7mL)中的80℃溶液內(nèi)加入3-氯-2-羥基-丙烷磺酸，鈉鹽(1.76g，8.9mmol)在1，4-二烷(1mL)與水(9mL)中的溶液(加料1小時(shí))。再于80℃攪拌該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。減壓蒸發(fā)溶劑。將固體物懸浮在EtOH(25mL)中。加熱回流混合物1分鐘。濾除固體。純凈產(chǎn)物在濾液中結(jié)晶析出。過濾產(chǎn)物，用EtOH(1×10mL)洗滌，然后真空干燥。收率30％。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 4.30(m，1H)，3.35(m，2H)，3.03(m，3H)，2.07(m，2H)，1.84(m，2H)，1.75(m，4H)，1.65(d，6H).13C(D2O，125MHz)δppm 63.31，55.03，49.51，36.51，36.33，36.26，29.78，29.23，28.81，26.63，26.38.ES-MS 289(M+1). 3-(二環(huán)[2.2.1]庚-2-基氨基)-2-羥基-1-丙烷磺酸(化合物KI)的制備 利用注射泵向外-2-氨基降冰片烷(910mg，8.2mmol)和氫氧化鈉(242mg，6.1mmol)在1，4-二烷(4mL)與水(4mL)中的80℃溶液內(nèi)加入3-氯-2-羥基-丙烷磺酸，鈉鹽(1.09g，5.5mmol)在1，4-二烷(0.5mL)與水(5.5mL)中的溶液(加料1小時(shí))。再于80℃攪拌該溶液5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。減壓蒸發(fā)溶劑。將固體物懸浮在EtOH(25mL)中。加熱回流混合物1分鐘。過濾回收固體，再通過離子交換柱(Dowex50 X8，100g，溶劑水)。產(chǎn)物在EtOH/水(99/1)中結(jié)晶。收率17％。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 4.25(m，1H)，3.25(m，2H)，3.01(m，4H)，2.39(m，1H)，2.27(m，1H)，1.69(m，1H)，1.51(m，1H)，1.38(m，3H)，1.19(m，1H)，1.07(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 63.66，63.50，62.21，61.98，54.94，50.11，50.04，39.26，39.21，36.02，35.97，35.91，35.80，34.70，34.61，27.11，27.08，26.50，26.45.ES-MS 250(M-1). 4-[(3-甲基丁基)氨基]-2-丁烷磺酸(化合物KH)的制備 利用注射泵向異戊胺(2.0g，22.9mmol)的四氫呋喃(THF，11mL)熱溶液中加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯溶液(3.1g，21.8mmol，在THF中(總量5mL))(加料時(shí)間2小時(shí))。再攪拌回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。過濾回收固體，用THF(25mL)和丙酮(25mL)洗滌。將該固體物溶于水(20mL)中，在該溶液中懸浮入Dowex50 X8(10g)。攪拌混合物15分鐘，然后過濾樹脂。減壓蒸發(fā)溶劑。收率28％。 1H NMR(H2O，500MHz)δppm3.07(t，2H，J＝7.8Hz)，2.92(t，2H，J＝7.8Hz)，2.87(m，1H)，2.06(m，1H)，1.77(m，1H)，1.51(m，1H)，1.42(m，2H)，1.18(d，3H，J＝6.8Hz)，0.78(d，3H，J＝6.3Hz).13C(H2O，125MHz)δppm 53.21，46.32，45.37，34.36，28.16，25.35，21.51，14.79.ES-MS224(M+1). 2-羥基-3-[(3-甲基丁基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物KK)的制備 利用注射泵向異戊胺(2.0g，22.9mmol)在1，4-二烷(9mL)和水(3mL)中的80℃溶液內(nèi)加入3-氯-2-羥基-丙烷磺酸，鈉鹽(3.04g，15.3mmol)在1，4-二烷(9.5mL)與水(0.5mL)中的溶液(加料時(shí)間1小時(shí))。再于80℃攪拌該溶液過夜。蒸發(fā)溶劑。將產(chǎn)物通過離子交換柱(Dowex50 X8，100g，溶劑水)。用無(wú)水EtOH重結(jié)晶，然后凍干。收率27％。
1H NMR(H2O，500MHz)δppm 4.24(m，1H)，3.22(m，1H)，3.02(m，5H)，1.49(m，3H)，0.79(d，3H，J＝6.3Hz).13C(H2O，125MHz)δppm 63.54，54.89，51.53，46.48，34.12，25.46，21.56，21.46.ES-MS 226(M+1). 3-[(d1)-1-羥基-2-戊基]氨基-1-丙烷磺酸(化合物KL)的制備 利用注射泵向DL-2-氨基-1-戊醇(1.0g，9.7mmol)在1，4-二烷(5mL)和水(3mL)中的80℃溶液內(nèi)加入3-氯-2-羥基-丙烷磺酸，鈉鹽(1.84g，9.2mmol)在1，4-二烷(6mL)與水(0.5mL)中的溶液(加料時(shí)間1小時(shí))。80℃攪拌該溶液過夜。蒸發(fā)溶劑。將產(chǎn)物通過離子交換柱(Dowex50 X8，100g，溶劑水)。將產(chǎn)物溶解。在無(wú)水乙醇中重結(jié)晶，然后凍干。收率27％。
1H NMR(H2O，500MHz)δppm 4.26(m，1H)，3.77(m，1H)，3.32(m，1H)，3.24(m，1H)，3.03(m，3H)，1.54(m，2H)，1.29(m，2H)，0.81(t，3H，J＝7.3Hz).13C(H2O，125MHz)δppm 63.69，63.60，59.49，59.38，58.81，58.36，54.98，48.68，48.27，29.32，28.85，18.40，18.38，13.12.ES-MS 242(M+1). 4-(環(huán)己基氨基)-1-丁烷磺酸(化合物L(fēng)K)的制備 向環(huán)己胺(2.0g，20.2mmol)的1，4-二烷(13mL)溶液中加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(2.61g，19.2mmol)。加熱回流該溶液2小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×20mL)洗滌，然后真空干燥。收率52％。1H NMR(D2O，500MHz)δppm 2.95(m，3H)，2.81(m，2H)，1.92(m，2H)，1.67(m，6H)，1.52(m，1H)，1.18(m，4H)，1.02(m，1H).13C(D2O，125MHz)δppm 57.32，50.31，44.01，29.02，24.84，24.68，24.07，24.55.ES-MS 236(M+1). 3-[(1-乙基-1-甲基丙基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物FP) 將燒瓶用隔膜封閉并與一個(gè)用于Ritter反應(yīng)的20％NaOH洗滌器連接。向乙酸(13mL)中加入氰化鉀(3.25g，50mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。加入在乙酸(6mL)中的硫酸(7mL)溶液，室溫?cái)嚢杷纬傻膽腋∫?0分鐘。然后在5分鐘內(nèi)逐滴加入3-甲基-3-戊醇(5g，48.9mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，此時(shí)仍可觀察到一些塊狀氰化鉀。
加入另一份氰化鉀(0.6g，粉末)，室溫?cái)嚢杌旌衔?8小時(shí)?；旌衔镉玫?dú)鉀_洗1小時(shí)，然后倒到冰(約50g)上。加20％NaOH(下次使用50％以減少體積量)調(diào)節(jié)溶液的pH值到9。分離各層，將水層用乙醚(1×20mL)提取。合并有機(jī)層，用飽和碳酸鉀(1×5mL)洗滌，然后用硫酸鎂干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到亮黃色油體(4.11g，31.8mmol，64％)。該油體被證實(shí)為順式與反式甲酰胺的混合物，然而其純度足夠直接使用。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.75-0.80(m，6H)，1.11-1.12(m，3H)，1.40-1.54(m，2H)，1.66-1.73(m，2H)，7.35-7.45(br s和br d，1H)，[7.88(s)和8.08(d，J＝11.7Hz)for 1H)；13CNMR(125MHz，DMSO-d6)δ7.7，7.9，23.4，24.2，30.6，33.8，55.6，160.3，163.3. 將1-乙基-1-甲基-丙基甲酰胺(4.00g，31.3mmol)加到20％NaOH(40mL)中。加熱回流混合物4小時(shí)，然后在室溫下放置過夜。加入甲苯(10mL)，分離各層。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，然后過濾。濾液的最后體積約30mL。它直接用于下一步驟。
向3-甲基-3-乙基-3-丙胺甲苯溶液(總體積30mL)中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.5g，20mmol)在2-丁酮(10mL)中的溶液。加熱回流混合物5小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。在真空烘箱中45℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(3.63g，16.3mmol，33％總收率)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.79(t，J＝7.3Hz，6H)，1.15(s，3H)，1.53-1.59(m，4H)，1.97-2.00(m，2H)，2.89(t，J＝7.1Hz，2H)，3.03(t，J＝7.6Hz，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ6.8，20.2，21.9，27.7，39.7，48.2，63.3ES-MS 224；(M+H) 3-({2-羥基-1，1-二甲基-2-(3-甲氧基苯基)乙基]氨基)-1-丙烷磺酸(化合物NG)的制備 在10分鐘內(nèi)，利用注射器向甲醇鈉冷溶液(0.5M MeOH溶液，25mL)中加入2-硝基丙烷(5.0g，56mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物30分鐘，然后再次冷卻，加入間茴香醛(6.8mL，56mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過夜?；旌衔镉肁mberlite IR-120(強(qiáng)酸性)中和。過濾除去樹脂，用MeOH(2×20mL)洗滌。蒸發(fā)濾液。所得油體通過快速色譜純化98％己烷/EtOAc-90％己烷/EtOAc。得到需要的硝基化合物(5.70g，45％)。
向上述硝基化合物(5.70g，25.3mmol)的MeOH(25mL)溶液中加入6M HCl(25mL)。冷卻到5℃后，加入鋅粉(8.2g，125mmol)。在0-5℃攪拌此懸浮液，此后再于室溫?cái)嚢柽^夜?；旌衔锿ㄟ^硅藻土墊過濾。濾餅用MeOH(2×20mL)洗滌。減壓蒸發(fā)合并的濾液。將殘留物溶于EtOAc(40mL)?；旌衔镉?0％NaOH(1×40mL)提取。水相用EtOAc(2×40mL)提取。合并的有機(jī)提取物用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)，經(jīng)真空干燥得到相應(yīng)的胺。該胺(2.15g，44％)無(wú)需進(jìn)一步純化直接使用。
向上述胺(2.15g，11.0mmol)在頻哪酮(6mL)和甲苯(6mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.28g，10.5mmol)。攪拌回流該溶液過夜。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(30mL)。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫。過濾白色固體，用丙酮(2×15mL)洗滌，并且在真空烘箱中于50℃干燥，從而得到標(biāo)題化合物，2.26g(66％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.45(s(寬峰)，1H)，7.26(t，1H，J＝7.9Hz)，6.89(m，3H)，6.30(d，1H，J＝3.2Hz)，4.69(d，1H，J＝3.8Hz)，3.74(s，3H)，3.10(m，2H)，2.62(t，2H，J＝6.7Hz)，2.00(m，2H)，1.07(m，6H).13C(DMSO，125MHz)δppm 159.24，142.09，129.45，120.80，114.30，113.76，74.16，62.48，55.92，50.10，41.57，23.30，21.18，19.37.ES-MS 316(M-1). 3-{[1-(4-甲基芐基)環(huán)己基]氨基}-1-丙烷-1-磺酸(化合物NH)的制備 向硝基環(huán)己烷(2.58g，20mmol)中加入NaOMe(0.5M，40mL)，攪拌所得溶液30分鐘，然后濃縮，得到白色固體。向該固體中加入4-甲基芐基吡啶(6.6g，13mmol)和DMSO(20mL)。100℃加熱混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫，加HCl(1M)和EtOAc稀釋。分離兩相后，將有機(jī)層用HCl(1M)洗滌兩次，然后濃縮得到油狀粗品。加入甲醇用以沉淀吡啶副產(chǎn)物，過濾除去。濃縮濾液，使用Hex∶EtOAc 90∶10進(jìn)行柱純化，得到需要的硝基化合物(仍含有吡啶鹽雜質(zhì))，2g，66％收率。
向上述硝基化合物(2.0g，8.58mmol)的甲醇(20mL)攪拌溶液中加入一刮刀在水中的阮氏鎳。在氫氣壓下氫化懸浮液15小時(shí)(TLC顯示起始原料完全耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。粗產(chǎn)物使用CH2Cl2∶MeOH 80∶10進(jìn)行柱純化，得到1.2g相應(yīng)的胺。
向上述胺(800mg，3.93mmol)的THF(8mL)攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(480mg，3.93mmol)。攪拌回流該溶液15小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(10mL)。攪拌回流1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，1.1g(86％)。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.18-1.78(m，10H)，2.00(m，2H)，2.29(s，3H)，2.65(m，2H)，2.92(s，2H)，3.12(m，2H)，7.10-7.16(m，2H)，8.39(bs，2H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ20.74，21.35，22.80，25.05，31.60，41.04，50.24，61.63，129.71，131.38，132.44，136.80.ES-MS 324(M-1). 3-{[2-(4-甲氧基苯基)-1，1-二甲基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NI)的制備 向苯酚(233mg，1mmol)的DMF/THF(2.5mL/2.5mL)攪拌溶液中加入MeI(93μL，1.5mmol)，接著加入K2CO3(276mg，2mmol)。加熱回流該懸浮液15小時(shí)，然后用HCl(1M)和EtOAc稀釋。有機(jī)層用HCl(1M)洗滌，隨后在高真空下濃縮。粗品使用Hex∶EtOAc 90∶10進(jìn)行柱純化，得到215mg甲氧基化合物(87％收率)。
向上述硝基化合物(300mg，1.2mmol)的甲醇(5mL)攪拌溶液中加入一小刮刀在水中的阮氏鎳。在氫氣壓下氫化懸浮液3小時(shí)(TLC顯示起始原料完全耗盡)，然后通過預(yù)先洗滌過的硅藻土過濾，減壓濃縮。粗胺直接用于下一步驟。
向上述粗胺(240mg，1.34mmol)的THF(3mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(181mg，1.48mmol)，攪拌回流該含THF的混合物12小時(shí)。冷卻懸浮液，過濾。干燥固體得到270mg高?；撬?，為白色固體(67％收率)。1H NMR(500MHz，D2O)δ1.11(s，6H)，2.00(m，2H)，2.67(m，2H)，2.80(m，2H)，3.12(m，2H)，3.74(s，3H)，6.90(m，2H)，7.14(m，2H)，8.61(bs，2H).ES-MS 272(M-1).ES-MS 300(M-1). 3-{[2-羥基-1，1-二甲基-2-(4-甲基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NJ)的制備 向由2-硝基丙烷(3.0g，34mmol)、對(duì)甲苯甲醛(4.0mL，34mmol)和四氫呋喃(30mL)形成的溶液中加入Amberlyst A-21(7g)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物40小時(shí)。過濾除去樹脂，用THF(2×20mL)洗滌。蒸發(fā)濾液。所得油體通過快速色譜純化98％己烷/EtOAc-90％己烷/EtOAc，得到需要的硝基化合物(820mg，12％)。
在H2(1atm)壓下攪拌Pd/C與上述硝基化合物(820mg，3.9mmol)在EtOAc(10mL)中形成的懸浮液過夜。混合物通過硅藻土墊過濾。用EtOAc(2×15mL)洗滌硅藻土墊。減壓蒸發(fā)合并的濾液，得到相應(yīng)的胺。該胺(470mg，67％)無(wú)需進(jìn)一步純化直接使用。
向上述胺(470mg，2.6mmol)在頻哪酮(5mL)和甲苯(5mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(310mg，2.5mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)，冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，196mg(26％)。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.46(s(寬峰)，1H)，7.24(d，2H，J＝7.8Hz)，7.16(d，2H，J＝8.3Hz)，6.23(d，1H，J＝3.9Hz)，4.68(d，1H，J＝3.9Hz)，3.11(m，2H)，2.63(t，2H，J＝6.8Hz)，2.29(s，3H)，2.00(m，2H)，1.04(s，6H).13C(DMSO，125MHz)δppm 137.69，137.56，129.03，128.45，74.07，62.38，49.91，41.35，22.99，21.39，20.81，18.76.ES-MS 300(M-1). 3-{[1，1-二甲基-2-(4-甲基苯基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NK)的制備 向2-硝基丙烷(890mg，10mmol)中加入NaOMe(0.5M，20mL)，攪拌該溶液30分鐘，濃縮得到白色固體。向該固體中加入4-甲基芐基哌啶(3.3g，15mmol)和DMSO(15mL)?；旌衔镉?00℃加熱15小時(shí)，然后冷卻到室溫，加HCl(1M)和EtOAc稀釋。分離兩相后，有機(jī)層用HCl(1M)洗滌兩次，然后濃縮得到油狀粗產(chǎn)物。加入甲醇用以沉淀吡啶副產(chǎn)物，過濾除去。濃縮濾液，使用Hex∶EtOAc 90∶10進(jìn)行柱純化，得到需要的硝基化合物(仍含有吡啶鹽雜質(zhì))，1.32g，66％收率。
向上述硝基化合物(700mg，3.62mmol)的甲醇(10mL)攪拌溶液中加入一小刮刀在水中的阮氏鎳。在氫氣壓下氫化懸浮液15小時(shí)(TLC顯示起始原料完全耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。粗胺直接用于下一步驟。
向上述胺(550mg，3.39mmol)的THF(8mL)攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(414mg，3.39mmol)。攪拌回流該溶液6小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(5mL)。攪拌回流1小時(shí)。然后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，210mg(22％)。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.13(s，6H)，2.00(m，2H)，2.66(dd，J＝7.0 & 7.0Hz，2H)，2.75(s，2H)，3.10(dd，J＝7.0 & 7.0Hz，2H)，6.72(d，J＝8.3Hz，2H)，7.00(d，J＝8.3Hz，2H)，8.60(bs，2H)，9.36(s，1H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ23.1，41.2，43.2，49.8，59.4，115.7，125.8，132.3，157.1.ES-MS 284(M-1). 4-(二環(huán)[2.2.1]庚-2-基氨基)-1-丁烷磺酸(化合物MX)的制備 室溫下，向外-2-氨基降冰片烷(800mg，7.2mmol)的1，4-二烷(5mL)溶液內(nèi)加入1，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.00g，7.0mmol)。攪拌回流該溶液5小時(shí)。冷卻反應(yīng)到室溫。過濾收集固體，用1，4-二烷(2×20mL)洗滌，真空干燥。將固體物懸浮在EtOH(20mL)中。攪拌回流混合物5分鐘，然后過濾固體，在真空下干燥。收率51％。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm，3.00(m，1H)，2.95(m，2H)，2.81(m，2H)，2.34(m，1H)，2.26(m，1H)，1.68(m，5H)，1.48(m，1H)，1.37(m，3H)，1.18(d，1H，J＝10.7Hz)，1.06(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm.61.82，50.26，45.44，39.37，35.93，35.78，34.67，27.11，26.40，24.63，21.56.ES-MS 248(M+1). 4-(1H-苯并咪唑-2-基硫基)-2-丁烷磺酸(化合物NE)的制備 利用注射泵向2-巰基苯并咪唑(2.0g，13.3mmol)在1，4-二烷(12mL)與水(3mL)中的熱溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.80g，12.7mmol，在1，4-二烷中(總計(jì)3mL))(加料時(shí)間1小時(shí))。再攪拌回流該溶液3小時(shí)。過濾收集固體。用丙酮(2×20mL)洗滌，真空干燥。收率86％。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 7.64(m，2H)，7.44(m，2H)，3.63(t，2H，J＝7.3Hz)，2.68(m，1H)，2.10(m，1H)，1.90(m，1H)，1.15(d，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 152.64，133.32，125.66，113.67，53，10，39.72，33.48，30.14，16.85.ES-MS 287(M+1). 3-[(1，1-二乙基丙基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物NM)的制備 對(duì)于Ritter反應(yīng)，將燒瓶用隔膜封閉并且與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。2分鐘內(nèi)分?jǐn)?shù)次向乙酸(28mL)中加入氰化鉀(粉末，6.19g，95mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。在2分鐘內(nèi)加入在乙酸(11mL)中的硫酸(14mL)溶液，并且在室溫下攪拌所形成的懸浮液10分鐘。然后再在12分鐘內(nèi)逐滴加入3-乙基-3-戊醇(10g，86mmol)。混合物在室溫下攪拌22小時(shí)，然后倒在冰(約100g)上。通過加50％NaOH(約120g)調(diào)節(jié)溶液的pH值到9。分離各層，將水層用乙醚(1×50mL)提取。合并有機(jī)層，進(jìn)而用飽和碳酸鈉(1×5mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到米色蠟狀固體(12.31g，84.76mmol，99％)。該固體顯示為順式與反式甲酰胺的混合物，然而其純度足夠直接使用。 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ
，[1.55(q，J＝7.3Hz)和1.70(q，J＝7.3Hz)for 9H]，[4.83和5.65(br s，1H)]，[8.09(s)和8.16(d，J＝12.7Hz)for 1H]；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ7.2，26.7，29.5，58.3，60.0，160.2，163.4 向上述粗制1，1-二乙基-1-丙基甲酰胺(12.31g，84.8mmol)的甲苯(10mL)溶液中加入NaOH溶液(20％，80mL)?；亓?小時(shí)后未完全水解。加入催化量Triton X-100和1，4-二烷(2mL)。加熱回流混合物48小時(shí)，然后冷卻混合物到室溫。為便于相分離再加入一些氯化鈉(10g)。分離各層，水層用甲苯(1×20mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水(1×10mL)洗滌，隨后硫酸鈉干燥并過濾。濾液的終體積約40mL。其直接用于下一步驟。
在10分鐘內(nèi)向1，1-二乙基-3-丙基胺的甲苯溶液(總共40mL)中逐滴加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(8.4g，68mmol)在2-丁酮(20mL)中的溶液。加熱回流該混合物5小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。在真空烘箱中于45℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(13.33g，56.16mmol，65％總收率)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.81(m，9H)，1.59(m，6H)，2.04(m，2H)，2.94(m，2H)，3.05(m，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ6.5，21.9，25.1，39.6，48.3，66.1；ES-MS238(M+H) 3-[(1-乙基環(huán)戊基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物NN)的制備 對(duì)于Ritter反應(yīng)，將燒瓶用隔膜封閉并且與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。一次性向乙酸(5mL)中加入氰化鈉(粉末，1.07g，22mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?分鐘。在2分鐘內(nèi)加入在乙酸(3mL)中的硫酸(3mL)溶液。在室溫下攪拌所形成的懸浮液10分鐘，然后再在2分鐘內(nèi)逐滴加入1-乙基-1-環(huán)戊醇(2g，17.5mmol)的乙酸(1ml)溶液。混合物在室溫下攪拌22小時(shí)，然后倒在冰(約50g)上。通過加50％NaOH(約24g)調(diào)節(jié)溶液的pH值到9。分離各層，將水層用乙醚(2×10mL)提取。合并有機(jī)層，進(jìn)而用飽和碳酸鈉(1×5mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到黃色透明油體(2.35g，16.6mmol，95％)。該油體顯示為順式與反式甲酰胺的混合物，然而其純度足夠直接使用。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.85-0.96(m，3H)，1.61-1.97(m，10H)，[5.23和5.77(br s，1H)]，[8.06(s)和8.17(d，J＝12.3Hz)for 1H]；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ9.0，9.3，23.0，23.8，30.1，34.0，37.8，38.6，160.3，163.4 向由上述粗制1-乙基-1-環(huán)戊基甲酰胺(2.3g)、Triton X-100(2滴)和四丁基溴化銨(45mg)組成的混合物中加入NaOH溶液(20％，20mL)。加熱回流混合物3天，然后冷卻到室溫。為便于相分離再加入一些氯化鈉(5g)。分離各層，水層用MTBK(2×10mL)和甲苯(1×2mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水(1×5mL)洗滌，隨后硫酸鈉干燥并過濾。濾液直接用于下一步驟。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ0.95(t，J＝7.3Hz，3H)1.15-1.65(m，8H)，1.76-1.80(m，2H)；13C NMR(125MHz，CD3OD)δ9.3，25.2，36.7，40.6，62.4 向粗制1-乙基-1-環(huán)戊胺的MTBK/甲苯溶液(總共30mL)中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.9g，15mmol)在甲苯(2mL)中的溶液。加熱回流該混合物20小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。得到干燥粗制固體(3.15g)。將該固體用熱90％乙醇重結(jié)晶。在真空烘箱中于60℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(2.35g，10mmol，57％總收率)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.81(t，J＝7.3Hz，3H)，1.53-1.67(m，8H)，1.71-1.77(m，2H)，1.98(q，J＝7.6Hz，2H)，2.88(t，J＝7.8Hz，2H)，3.04(t，J＝7.3Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)7.3，22.0，24.3，29.3，34.6，41.1，48.2，70.4；ES-MS 234(M-H) 3-[(1-乙基環(huán)庚基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物NO)的制備 將環(huán)庚酮(5.69mL，50mmol)溶液逐滴加到1M乙基溴化鎂的THF冷(0℃)溶液(50mL)中。室溫?cái)嚢杌旌衔?.5小時(shí)，然后再回流攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物用冰-水浴冷卻，進(jìn)而通過加入飽和氯化銨(20mL)溶液終止反應(yīng)。分層，水相用乙醚(1×20mL)提取一次。合并的有機(jī)層用硫酸鎂干燥，然后減壓除去乙醚。蒸餾所得油粗品(6.34g)，得到清亮油體(3.81g)，其中含有一些環(huán)庚酮。將產(chǎn)物在高真空下一直放置到其中環(huán)庚酮含量低于5mol％為止(2.81g，19.8mmol，39％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.91(t，J＝12.3Hz，3H)，1.19(br s，1H)，1.36-1.68(m，14)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ7.9，22.6，30.0，35.9，40.8，75.5 對(duì)于Ritter反應(yīng)，將燒瓶用隔膜封閉并且與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。一次性向乙酸(5mL)中加入氰化鈉(粉末，1.20g，24mmol)。混合物在室溫下攪拌5分鐘。在5分鐘內(nèi)加入在乙酸(4mL)中的硫酸(3.5mL)溶液。在室溫下攪拌所形成的懸浮液10分鐘，然后再在5分鐘內(nèi)逐滴加入1-乙基-1-環(huán)庚醇(2g，17.5mmol)的乙酸(31ml)溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，然后倒在冰(約50g)上。通過加50％NaOH(約24g)調(diào)節(jié)溶液的pH值到9。分離各層，將水層用乙醚(2×10mL)提取。合并有機(jī)層，進(jìn)而用飽和碳酸鈉(1×5mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到黃色透明油體(3.18g，18.8mmol，95％)。直至NMR顯示仍存在痕量環(huán)庚酮。該油體顯示為順式與反式甲酰胺的混合物，然而其純度足夠直接使用。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ0.80-0.91(m，3H)，1.49-1.96(m，14H)，[5.07和5.70(br s，1H)]，[8.07(d，J＝2.1Hz)和8.17(d，J＝12.3Hz)for 1H]；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ7.9，8.2，22.3，22.5，29.6，29.7，31.2，35.7，38.3，39.9，58.7，60.4，160.1，163.3 向由上述粗制1-乙基-1-環(huán)庚基甲酰胺(3.18g)、曲通(Triton)X-100(2滴)和四丁基溴化銨(45mg)組成的混合物中加入NaOH溶液(20％，20mL)。加熱回流混合物4天，然后冷卻到室溫。分層，水層用乙醚(2×5mL)提取。醚溶液用硫酸鎂干燥，過濾。隨后，加入2N HCl溶液，濃縮混合物得到粘稠油體。將該油體用1N HCl稀釋，繼用乙醚(2×10mL)洗滌。水層的pH通過加50％NaOH調(diào)節(jié)到10。分出有機(jī)層，水相用MTBK(2×4mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水(1×5mL)洗滌，之后硫酸鈉干燥并過濾。濾液直接用于下一步驟。在質(zhì)子NMR上仍然可觀測(cè)到痕量的環(huán)庚酮和1-乙基-1-環(huán)庚基甲酰胺。1H NMR(500MHz，CD3OD)δ0.90(t，J＝7.2Hz，3H)1.42-1.64(m，14H)；13C NMR(125MHz，CD3OD)δ8.1，23.9，31.6，36.6，42.1，55.7 向粗制1-乙基-1-環(huán)庚胺的MTBK/甲苯溶液(共20mL)中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.0g，8mmol)在甲苯(3mL)中的溶液。加熱回流該混合物20小時(shí)，然后在室溫下過夜，接著再回流1小時(shí)。冷卻混合物到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)和乙醇(1×5mL)沖洗。將所得固體在真空烘箱中于60℃干燥5小時(shí)。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(1.35g，5.12mmol，10％總收率)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.87(t，J＝7.6Hz，3H)，1.37-1.41(m，2H)，1.49(br s，4H)，1.58-1.77(m，8H)，2.00(q，J＝6.2Hz，2H)，2.68(t，J＝6.3Hz，2H)，2.99(br s，2H)，8.42(br s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)7.1，21.6，21.9，28.6，29.7，34.8，40.8，49.9，64.1；ES-MS 262(M-H) 3-[(1，3-二甲基丁基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物NP)的制備 向1，3-二甲基丁胺(5g，49mmol)在MTBK/甲苯混合液(60∶40，25mL)中的溶液內(nèi)一次性加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(6.1g，50mmol)在MTBK/甲苯混合液(60∶40，15mL)中的溶液。加熱回流該混合物3小時(shí)，然后在室溫下過夜。加入乙醇(5mL)，加熱回流混合物1小時(shí)，隨后冷卻到4℃。抽濾收集固體物，用丙酮(3×10mL)沖洗。在真空烘箱中于60℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(9.33g，41.8mmol，85％總收率)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.75(d，J＝6.8Hz，3H)，0.81(d，J＝6.8Hz，3H)，1.17(d，J＝6.3Hz，3H)，1.55-1.60(m，1H)，1.95-2.02(m，2H)，2.88(t，J＝7.3Hz，2H)，3.03-3.11(m，2H)，3.21-3.25(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)15.7，50.6，21.7，22.7，24.3，41.7，43.3，48.1，53.4；ES-MS 222(M-H) 3-{[(1S)-1，2，2-三甲基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NQ)的制備 向(S)-3，3-二甲基-2-丁胺(5g，49mmol)在MTBK(20mL)中的溶液內(nèi)一次性加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(6.6g，54mmol)的甲苯(20mL)溶液。加熱回流該混合物。1小時(shí)內(nèi)開始結(jié)塊。加入更多溶劑(10mLMTBK，5mL甲苯，最后4mL乙醇)以恢復(fù)攪拌。隨后加熱回流混合物18小時(shí)，然后冷卻到3℃。抽濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)沖洗。在真空烘箱中于60℃干燥所得固體過夜。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(9.79g，43.8mmol，89％總收率)。1H NMR(300MHz，D2O)δ0.88(s，9H)，1.15(d，J＝6.7Hz，3H)，1.94-2.14(m，2H)，2.87-3.10(m，4H)，3.18-3.28(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)11.2，21.2，25.2，33.2，45.5，48.3，64.1；ES-MS 222(M-H) 3-[(1-乙基環(huán)己基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物NR)的制備 對(duì)于Ritter反應(yīng)，將燒瓶用隔膜封閉并且與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。一次性向乙酸(10mL)中加入氰化鉀(粉末，3.0g，46mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。在10分鐘內(nèi)加入在乙酸(5mL)中的硫酸(6mL)溶液。在室溫下攪拌所形成的懸浮液10分鐘，然后逐滴加入1-乙基-1-環(huán)庚醇(5g，39.0mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，然后倒在冰(約50g)上。通過加50％NaOH(約70g)調(diào)節(jié)溶液的pH值到9。分離各層，將水層用乙醚(2×20mL)提取。合并有機(jī)層，用飽和碳酸鈉(1×5mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)乙醚，得到黃色透明油體(5.44g，90％)。該油體顯示為順式與反式甲酰胺的混合物，然而其純度足夠直接使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.81-0.90(m，3H)，1.19-1.60(m，9H)，1.68-1.71(m，1H)，1.78-1.84(m，1H)，2.02-2.06(m，1H)，[5.03和5.65(br s，1H)]，[8.15(s)和8.18(d，J＝12.4Hz)for1H]；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ7.2，7.6，21.5，21.9，25.8，25.9，31.0，34.7，35.1，36.4，55.0，56.9，160.7，163.8 向上述粗制1-乙基-1-環(huán)己基甲酰胺(5.44g)中加入NaOH溶液(20％，40mL)。加熱回流混合物3小時(shí)，質(zhì)子NMR顯示未完全反應(yīng)。再加熱回流過夜，反應(yīng)仍未完全進(jìn)行。加入催化量的四丁基溴化銨(200mg)。再加熱回流混合物3天，然后在室溫下冷卻。分離各層，水層用MTBK(2×10mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水(1×5mL)洗滌，隨后硫酸鈉干燥并過濾。濾液直接用于下一步驟。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ0.84-0.88(m，3H)，1.30-1.55(m，12H)；13C NMR(100MHz，CD3OD)δ6.2，22.0，25.8，37.4，50.3，66.9 向粗制1-乙基-1-環(huán)己胺的MTBK溶液(總共30mL)中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.2g，26mmol)在甲苯(6mL)中的溶液。加熱回流該混合物18小時(shí)。加入另一份在甲苯(6mL)中的1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.7g)。進(jìn)一步加熱回流混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將所得固體在真空烘箱中60℃干燥過夜。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(3.55g，14.2mmol，36％總收率)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.84(t，J＝7.3Hz，3H)，1.18-1.24(m，1H)，1.39-1.49(m，4H)，1.54-1.60(m，3H)，1.73-1.81(m，4H)，2.06(q，J＝7.6Hz，2H)，2.96(t，J＝7.8Hz，2H)，3.10(t，J＝7.3Hz，2H))；13C NMR(100MHz，D2O)6.1，21.2，22.0，23.7，24.6，32.0，39.1，48.3，62.9；ES-MS 248(M-H) 3-{[1-(4-羥基苯基)-2-甲基]-2-丙基氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NS)的制備 在密封管中放入芐醇(1.2g，10mmol)、四丁基氟化銨(5mL，5mmol)和2-硝基丙烷(1.78g，20mmol)，于130℃加熱15小時(shí)。冷卻反應(yīng)，加EtOAc稀釋。水洗所形成的溶液，干燥，濃縮得到黑色油體。使用Hex∶EA 70∶30進(jìn)行硅膠層析，得淡黃色固體1.42g，73％。
向上述硝基化合物(800mg，4.12mmol)在甲醇(10mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入一小刮刀在水中的阮氏鎳。在氫氣壓下氫化懸浮液15小時(shí)(TLC顯示起始原料完全耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。所生成的相應(yīng)胺直接用于下一步驟。
向上述胺(750mg，4.57mmol)的THF(9mL)攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(614mg，5.02mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(10mL)。攪拌回流1小時(shí)。然后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，1.1g(85％)。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.21(s，6H)，1.42-1.48(m，2H)，1.55-1.50(m，2H)，1.90-2.00(m，2H)，2.68(dd，J＝7.0 & 7.0Hz，2H)，3.00(dd，J＝7.0 & 7.0Hz，2H)，3.40(dd，J＝6.2Hz，2H).13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ23.0，23.6，27.1，35.1，41.1，50.0，58.8，61.3.ES-MS 286(M-1). 3-[(5-羥基-1，1-二甲基丁基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物NT)的制備 攪拌由丙烯酸(2.7mL，30mmol)、硝基丙烷(5.4mL，60mmol)和NaOMe(0.5M，12mL)組成的混合物15小時(shí)。加HCl(1M)猝滅反應(yīng)混合物，繼用EtOAc提取。干燥有機(jī)層并且減壓濃縮。粗品使用Hex∶EtOAc80∶20柱純化，得到需要產(chǎn)物，4.5g(85％收率)。
于-10℃，向上述硝基-酯(1.7g，10mmol)在MeOH/THF50mL/5mL中的攪拌溶液中一次性加入LiBH4(436mg，20mmol)。攪拌反應(yīng)2小時(shí)，然后加入另一份LiBH4(436mg，20mmol)。移去冷卻浴，使反應(yīng)物升溫到室溫，繼續(xù)攪拌6小時(shí)。反應(yīng)物用HCl(1M)酸化，減壓濃縮除去甲醇。反應(yīng)物用EtOAc(3×100mL)提取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，進(jìn)而濃縮。粗品使用Hex∶EA 80∶20-50∶50通過硅膠柱純化，得到需要產(chǎn)物(1g，70％)，除此外還得到起始原料(340mg，20％)。
向上述硝基化合物(1.47g，10mmol)的甲醇(20mL)攪拌溶液中加入一小刮刀在水中的阮氏鎳。在氫氣壓下氫化懸浮液3小時(shí)(TLC顯示起始原料完全耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。所生成的相應(yīng)胺直接用于下一步驟。
向上述胺(600mg，5.12mmol)的THF(10mL)攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(626mg，5.12mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(10mL)。攪拌回流1小時(shí)。然后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，770mg(87％)。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.13(s，6H)，2.00(m，2H)，2.66(dd，J＝7.0 & 7.0Hz，2H)，2.75(s，2H)，3.10(dd，J＝7.0 & 7.0Hz，2H)，6.72(d，J＝8.3Hz，2H)，7.00(d，J＝8.3Hz，2H)，8.60(bs，2H)，9.36(s，1H).13N MR(125MHz，DMSO-d6)δ23.1，41.2，43.2，49.8，59.4，115.7，125.8，132.3，157.1.ES-MS 238(M-1). 3-{[(1S)-1-(4-氯苯基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NU)的制備 向(1S)-(-)-1-(4-氯苯基)乙胺(5.0g，32.1mmol)在頻哪酮(20mL)和甲苯(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.7g，30.6mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(60mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.14g(84％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.39(dd，2H，J＝2.4Hz，6.6Hz)，7.32(dd，2H，J＝2.4Hz，6.6Hz)，4.30(q，1H，J＝6.8Hz)，3.00(m，1H)，2.84(m，1H)，2.79(t，2H，J＝7.3Hz)，1.94(m，2H)，1.53(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 135.16，134.43，129.56，129.36，57.93，48.03，44.45，21.50，18.12.[α]D＝-22.8°(c＝0.0029，水)，ES-MS 276(M-1). 3-{[(1R)-1-(4-氯苯基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NV)的制備 向(1R)-(-)-1-(4-氯苯基)乙胺(5.07g，32.6mmol)在頻哪酮(20mL)和甲苯(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.79g，31.0mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(60mL)。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，6.84g(79％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.39(dd，2H，J＝2.4Hz，6.8Hz)，7.32(dd，2H，J＝2.4Hz，6.3Hz)，4.31(q，1H，J＝6.8Hz)，3.00(m，1H)，2.84(m，1H)，2.79(t，2H，J＝7.3Hz)，1.94(m，2H)，1.53(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 135.16，134.41，129.57，129.36，57.93，48.02，44.44，21.49，18.11.[α]D＝+20.3°(c＝0.0018，水)，ES-MS 276(M-1). 3-({1-[羥基(4-甲基苯基)甲基]環(huán)己基}氨基)-1-丙烷磺酸(化合物NW)的制備 在10分鐘內(nèi)，利用注射器向甲醇鈉冷溶液(0.5M的MeOH溶液，80mL，40mmol)中加入硝基環(huán)己烷(5.0g，38.7mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物30分鐘，然后再次冷卻，加入對(duì)甲苯甲醛(4.6mL，38.7mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過夜?；旌衔镉肁mberlite IR-120(強(qiáng)酸性)中和。過濾除去樹脂，用MeOH(2×20mL)洗滌。蒸發(fā)濾液。將得到的油體通過快速色譜純化98％己烷/EtOAc-95％己烷/EtOAc。得到需要的硝基化合物(1.2g)。
向上述硝基化合物(1.26g，5.0mmol)的MeOH溶液中加入6M HCl(5mL)。冷卻到5℃后，加入鋅粉(1.63g，25.0mmol)。室溫?cái)嚢柙搼腋∫哼^夜?；旌衔锿ㄟ^硅藻土墊過濾。濾餅用MeOH(2×20mL)洗滌。減壓蒸發(fā)合并的濾液。得到相應(yīng)的胺。該胺(1.03g，67％)無(wú)需進(jìn)一步純化直接使用。
向上述胺(1.03g，4.7mmol)在頻哪酮(9mL)和甲苯(9mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(558g，4.5mmol)。攪拌回流該溶液過夜。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌，經(jīng)真空干燥到標(biāo)題化合物，930mg(62％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.26(s(寬峰)，1H)，8.13(s(寬峰)，1H)，7.24(d，2H，J＝8.3Hz)，7.16(d，2H，J＝7.8Hz)，6.19(s，1H)，4.74(s，1H)，3.22(m，1H)，3.11(m，1H)，2.72(m，1H)，2.64(m，1H)，2.30(s，3H)，2.07(m，2H)，1.86(m，2H)，1.56(m，2H)，1.41(m，3H)，1.21(m，2H)，0.88(m，1H).13C(DMSO，125MHz)δppm 148.33，137.67，129.07，128.82，73.18，64.57，50.11，41.45，28.13，27.65，25.23，23.46，22.70，21.42，19.85，19.58.ES-MS 340(M-1). 3-{[(1S)-1-(4-甲基苯基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物NX)的制備 向(1S)-(-)-1-(4-甲基苯基)乙胺(5.00g，37.0mmol)在頻哪酮(24mL)和甲苯(24mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.30g，35.2mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(60mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.72g(85％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm7.22(m，4H)，4.26(q，1H，J＝6.8Hz)，2.97(m，1H)，2.80(m，3H)，2.22(s，3H)，1.92(m，2H)，1.53(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 140.38，132.79，130.09，127.71，58.34，48.06，44.34，21.50，20.41，18.31.[α]D＝-26.4°(c＝0.0019，水)，ES-MS 256(M-1). 3-{[(1R)-1-(4-甲基苯基)乙基]氨基}丙烷-1-磺酸(化合物NY)的制備 向(1R)-(+)-1-(4-甲基苯基)乙胺(5.30g，39.1mmol)在頻哪酮(25mL)和甲苯(25mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.55g，37.3mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(60mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.65g(80％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm7.21(m，4H)，4.25(q，1H，J＝6.8Hz)，2.96(m，1H)，2.79(m，3H)，2.22(s，3H)，1.92(m，2H)，1.52(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 140.40，132.79，130.10，127.72，58.34，48.05，44.34，21.49，20.39，18.30.[α]D＝+28.8°(c＝0.0025，水)，ES-MS 256(M-1). 3-[(環(huán)丙基甲基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物NZ)的制備 向環(huán)丙烷甲胺(5.12g，72.0mmol)在頻哪酮(40mL)和甲苯(40mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(8.36g，68.7mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。產(chǎn)物在燒瓶底部形成粘糊物。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。移去上清液。在加熱下將殘留物溶于最少量的MeOH中。然后將溶液傾入丙酮(300mL)中以沉淀產(chǎn)物。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(40mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。隨后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×15mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，3.48g(27％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.04(t，2H，J＝7.8Hz)，2.81(m，4H)，1.96(m，2H)，0.90(m，1H)，0.51(m，2H)，0.18(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 52.82，48.21，46.01，21.75，7.09，3.83.ES-MS 192(M-1). 3-{[(1R)-1-(3-甲氧基苯基)乙基]氨基}丙烷-1-磺酸(化合物OA)的制備 向(1S)-(-)-1-(3-甲氧基苯基)乙胺(5.00g，39.1mmol)在頻哪酮(20mL)和甲苯(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.84g，31.5mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。產(chǎn)物在燒瓶底部形成粘糊物。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。移去上清液，在加熱下將殘留物溶于MeOH。加入丙酮(3×50mL)來(lái)沉淀產(chǎn)物。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(60mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，3.49g(41％)。 1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.27(t，1H，J＝8.0Hz)，6.90(m，3H)，4.22(q，1H，J＝6.7Hz)，3.68(s，3H)，2.93(m，1H)，2.77(m，3H)，1.90(m，2H)，1.49(d，3H，J＝6.7Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 159.41，137.34，130.81，120.10，115.24，113.27，58.65，55.72，48.18，44.62，21.76，18.65.[α]D＝-23.0°(c＝0.0019，水)，ES-MS 272(M-1). 3-{[(1S)-1-苯基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OB)的制備 向(S)-(-)-1-苯基丙胺(10.0g，74.1mmol)在頻哪酮(40mL)和甲苯(40mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(8.60g，70.6mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(80mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，14.38g(79％)。1H NMR(D2O，500MHz)δppm7.32(m，5H)，4.00(dd，1H，J＝4.4Hz，10.7Hz)，2.91(m，1H)，2.74(m，3H)，1.90(m，4H)，0.62(t，3H，J＝7.3Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 133.85，129.89，129.56，128.41，64.46，48.01，44.48，25.77，21.40，9.46.[α]D＝-15.6°(c＝0.00077，水)，ES-MS 256(M-1). 3-{[(1R)-(1-萘基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OD)的制備 向(R)-(+)-1-(萘基)乙胺(5.02g，29.3mmol)在頻哪酮(15mL)和甲苯(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.40g，27.9mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(40mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，6.46g(79％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.21(d，1H，J＝8.3Hz)，7.98(m，2H)，7.73(d，1H，J＝7.3Hz)，7.59(m，3H)，5.27(m，1H)，3.15(m，1H)，2.95(m，1H)，2.55(m，2H)，1.96(m，2H)，1.59(d，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 134.86，134.05，130.84，129.67，129.57，127.62，126.92，126.25，124.34，123.35，52.55，49.96，46.21，22.64，20.38.[α]D＝-45.5°(c＝0.0010，水)，ES-MS 292(M-1). 3-{[(1S)-(1-萘基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OE)的制備 向(S)-(-)-1-(萘基)乙胺(5.00g，29.2mmol)在頻哪酮(15mL)和甲苯(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.39g，27.8mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(40mL)。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。然后冷卻混合物到室溫。過濾收集固體，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，6.34g(78％)。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.21(d，1H，J＝8.3Hz)，7.97(m，2H)，7.72(d，1H，J＝7.3Hz)，7.59(m，3H)，5.27(m，1H)，3.15(m，1H)，2.95(m，1H)，2.61(m，2H)，1.96(m，2H)，1.59(d，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 134.85，134.06，130.86，129.68，129.58，127.64，126.92，126.26，124.35，123.36，52.55，49.92，46.20，22.63，20.36.[α]D＝+47.3°(c＝0.00047，水)，ES-MS 292(M-1). 3-{[4-甲氧基-1，1-二甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OF)的制備 向醇(500mg，3.40mmol)的DMF(6mL)攪拌溶液中加入碘甲烷(423μL，6.80mmol)，接著加入NaH(163mg，6.80mmol)。攪拌反應(yīng)混合物15小時(shí)，然后用HCl(1M)和EtOAc稀釋。有機(jī)層用HCl(1M)洗滌，隨后在高真空下濃縮。粗品使用Hex∶EtOAc 80∶20進(jìn)行柱純化，得到450mg需要產(chǎn)物(82％收率)。
向上述硝基化合物(400mg，2.45mmol)的甲醇(5mL)攪拌溶液中加入一小刮刀在水中的阮氏鎳。在氫氣壓下氫化該懸浮液3小時(shí)(TLC顯示起始原料完全耗盡)，然后通過預(yù)先洗滌過的硅藻土過濾，減壓濃縮。粗胺直接用于下一步驟。
向上述粗胺(300mg，2.29mmol)的THF(5mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(300mg，2.52mmol)，加熱回流混合物15小時(shí)。冷卻懸浮液，過濾。固體物在高真空下干燥，從而得到400mg相應(yīng)高?；撬幔瑸榘咨腆w(69％收率)。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 1.21(s，6H)，1.56(m，4H)，1.95(m，2H)，2.65(m，2H)，3.00(m，2H)，3.23(s，3H)，3.32(m，2H)，8.53(bs，2H).13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δppm 22.93，23.43，23.85，35.23，41.16，50.10，58.52，58.75，72.28.ES-MS 328(M-1). 3-[(1，1-二甲基-3-氧代丁基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物OG)的制備 攪拌亞異丙基丙酮(4g，40mmol)與氨水的混合物15小時(shí)，然后加EtOAc稀釋。向溶液中吹入氮?dú)庖猿ミ^量的氨。加水，分離兩相。水相用CH2Cl2提取，合并兩相，干燥(Na2SO4)，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)和泵真空下濃縮。
將上述粗胺溶于THF(20mL)，加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.2g，13.13mmol)，攪拌回流反應(yīng)混合物6小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將該固體懸浮于EtOH(10mL)，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫，過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，1g(10％，低收率是由于終產(chǎn)物在EtOH和Et2O中部分溶解造成)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.27(s，6H)，1.99(m，2H)，2.12(s，3H)，2.88(m，2H)，2.92(s，2H)，3.03(m，2H)，4.65(s，2H).13NMR(125MHz，D2O)δ21.99，22.58，23.61，30.72，40.30，47.33，47.98，58.02，110.00.ES-MS 236(M-1). 3-{[4-(芐氧基)-1，1-二甲基丁基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OH)的制備 向醇(500mg，3.40mmol)的DMF(5mL)攪拌溶液中加入芐基溴(456μL，3.74mmol)，接著加入NaH(106mg，4.42mmol)。攪拌反應(yīng)混合物15小時(shí)，然后用HCl(1M)和EtOAc稀釋。有機(jī)層用HCl(1M)洗滌，隨后在高真空下濃縮。粗產(chǎn)物使用Hex∶EtOAc 90∶10進(jìn)行柱純化，得到605mg需要產(chǎn)物(74％收率)。
向上述硝基化合物(237mg，1.2mmol)的乙醇(8mL)攪拌溶液中順序加入HCL(6N)(2mL)、Zn粉。攪拌該懸浮液10分鐘，之后過濾并濃縮。反應(yīng)混合物粗品用EtOAc稀釋，加飽和K2CO3中和。水洗有機(jī)層，硫酸鈉干燥，濃縮。所得粗胺直接用于下一步驟。
向上述粗胺(500mg，2.41mmol)的THF(5mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(234mg，2.65mmol)，加熱回流該含THF的混合物15小時(shí)。冷卻懸浮液，過濾。干燥所得固體物，獲得300mg高?；撬?，為白色固體(38％收率)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.21(s，6H)，1.60(m，4H)，1.95(m，2H)，2.65(m，2H)，3.00(m，2H)，3.42(m，2H)，4.46(s，2H)，7.25-7.38(m，5H)，8.48(bs，2H).13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ22.93，23.43，24.04，35.29，41.18，50.08，58.79，70.07，72.56，128.09，128.19，128.96，139.23.ES-MS 328(M-1). 3-哌啶基甲烷磺酸(化合物OI)的制備 將3-羥甲基哌啶(15g，129mmol)的無(wú)水CHCl3(120mL)溶液用HCl(g)飽和，然后在回流狀態(tài)下滴加SOCl2(24mL)進(jìn)行處理?；亓魉没旌衔?小時(shí)，濃縮產(chǎn)生白色固體，過濾收集，用Et2O洗滌。然后溶于EtOH，用EtOH/Et2O重結(jié)晶，獲得22g需要的氯化物(96％收率)。
將上述氯化物(21.5g，121mmol)的水(30mL)溶液逐滴加到Na2SO3(30.41g，242mmol)在水(120mL)中的回流溶液。加畢后攪拌回流反應(yīng)60分鐘，然后冷卻，減壓濃縮。加入75mL HCl(濃)來(lái)溶解氨基磺酸和沉淀無(wú)機(jī)鹽，之后濾除無(wú)機(jī)鹽。濃縮濾液，隨后加入乙醇使得氨基酸以白色固體形式出現(xiàn)，過濾收集。用EtOH和Et2O洗滌，然后在高真空下干燥，得到18g白色固體(88％收率)。 1H NMR(500MHz，D2O)δ1.25(ddd，J＝12.0，9.0和3.0Hz，1H)，1.55-1.65(m，1H)，1.82(m，1H)，1.90(m，1H)，2.10-2.20(m，1H)，2.68(m，1H)，2.72-2.86(m，3H)，3.25(dd，J＝12.0和3.0Hz，1H)，3.50(dd，J＝12.0 & 3.0Hz，1H)，4.69(s，2H).13NMR(125MHz，D2O)δ21.78，28.08，30.67，44.05，47.75，54.07.ES-MS 178(M-1). 3-[3-(羥基甲基)哌啶-1-基]-1-丙烷磺酸(化合物OJ)的制備 向3-哌啶甲醇(1.15g，10mmol)的THF(20mL)攪拌溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.2g，10mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(20mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，2.12g(90％)。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.12(m，1H)，1.50-1.85(m，5H)，1.55-1.75(m，2H)，1.80-1.95(m，2H)，1.992-2.10(m，2H)，2.60(m，1H)，2.70-2.80(m，1H)，2.85(t，J＝9.0Hz，2H)，3.15(t，J＝9.0Hz，2H)，3.35-3.50(m，2H)，4.65(s，1H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ19.58，22.43，24.34，36.84，48.01，53.18，55.10，56.06，63.37.ES-MS 236(M-1). 3-[2-(2-羥基乙基)哌啶-1-基]-1-丙烷磺酸(化合物OK)的制備 向2-哌啶乙醇(1.3g，10mmol)的THF(20mL)攪拌溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.2g，10mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(20mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，2.10g(84％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.42(m，2H)，1.50-1.85(m，5H)，1.90-2.10(m，3H)，2.95(m，1H)，3.10-3.22(m，3H)，3.30-3.70(m，3H)，4.63(s，1H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ19.03，20.80，22.37，27.66，32.20，49.35，51.49，52.38，57.76，61.16.ES-MS 250(M-1). (S)-3-[1-(4-溴苯基)乙基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物OL)的制備 向(S)-(-)-1-(4-溴苯基)乙胺(1g，5.00mmol)的MTBK(5mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯的甲苯溶液(1M，5mL)。加熱回流混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(1.12g，3.48mmol，70％)。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.50(d，J＝6.8Hz，3H)，1.93(qt，J＝6.6Hz，2H)，2.61(t，J＝6.6Hz，2H)，2.79(qt，J＝6.3Hz，2H)，3.01(qt，J＝6.3Hz，2H)，4.38(q，J＝6.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，1H)，7.67(d，J＝8.8Hz，2H)，9.06(br s，1H)，9.20(br s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)19.0，21.9，45.1，49.1，56.1，122.3，129.9，131.9，136.6；ES-MS 320-322(M-H)；[α]D＝-34°(c＝0.00401，0.1N NaOH). (S)-3-[1-(4-硝基苯基)乙基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物OM)的制備 向(S)-(-)-1-(4-硝基苯基)乙胺(0.895g，5.39mmol)的MTBK(5mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯的甲苯溶液(1M，5.40mL)。加熱回流混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(0.73g，2.53mmol，47％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.55(d，J＝6.8Hz，3H)，1.95(qt，J＝6.6Hz，2H)，2.63(t，J＝6.6Hz，2H)，2.84(qt，J＝6.3Hz，2H)，3.07(qt，J＝6.2Hz，2H)，4.58(q，J＝6.4Hz，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，1H)，8.33(d，J＝8.8Hz，2H)，9.23(br s，1H)，9.38(br s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)18.9，21.9，45.3，49.1，56.0，124.1，129.1，144.5，147.8；ES-MS 287(M-H)；[α]D＝-37°，c＝0.0043，0.1N NaOH 3-(1-氨基甲?；?1-環(huán)己基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物ON)的制備 在劇烈攪拌下，向含有30％NH4OH(120mL)的250mL單頸燒瓶中加入NaCN(15.34g，0.31mmol)和NH4Cl(19.75g，0.37mmol)。然后在室溫下，于20分鐘內(nèi)逐滴加入相應(yīng)的酮。室溫?cái)嚢杌旌衔?天，之后用二氯甲烷(50mL)提取。分出有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥2小時(shí)。濾除硫酸鈉，減壓除去溶劑得到氨基腈粗品。所要物質(zhì)以亮棕色油體形式獲得(90％粗產(chǎn)率)。
1H NMR(500MHz，CD3OD-d6)δ1.23-1.28(m，1H)，1.43-1.49(m，2H)，1.51-1.60(m，2H)，1.69-1.73(m，1H)，1.78-1.83(m，2H)，2.02(br s，1H)，2.05(br s，1H)；13C NMR(125MHz，CD3OD-d6)24.2，25.9，38.9，52.9，124.9；FT-IR 2221cm-1(CN). 向在冰冷水浴中攪拌的10g濃硫酸中逐滴加入上述氨基腈(41mmol)在30mL CH2Cl2中的溶液，加料過程中維持內(nèi)部溫度為15℃。然后移去水浴，加熱混合物到40℃保持1小時(shí)。在冰浴中冷卻混合物，隨后倒入200g碎冰中?；旌衔锏膒H用28％氨水調(diào)節(jié)到7-8，繼用EtOAc(3×100mL)提取。收集提取液，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)至干。粗制固體用EtOAc/Hex中重結(jié)晶。得到需要產(chǎn)物，為白色泡沫狀固體0.89g，6.26mmol，43％。 1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.12-1.23(m，1H)，1.27(br s，1H)，1.30(br s，1H)，1.40-1.45(m，2H)，1.49-1.27(m，3H)，1.67-1.72(m，4H)，7.34(br s，1H)，6.82(br s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)21.0，25.4，34.7，56.4，180.3. 向1-氨基環(huán)己烷甲酰胺(0.880g，6.19mmol)的MTBK(5mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯的甲苯溶液(1M，6.20mL)。加熱回流混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)(0.79g)。將所得固體在乙醇(5mL)和水(5mL)中重結(jié)晶。干燥后得到白色細(xì)碎固體狀標(biāo)題化合物(0.4477g，1.69mmol，27％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.42(br s，4H)，1.63(br s，2H)，1.67-1.72(m，2H)，1.99(qt，J＝6.6Hz，2H)，2.06-2.10(m，2H)，2.63(t，J＝6.6Hz，2H)，2.93(br s，2H)，7.69(s，1H)，7.80(s，1H)，8.77(br s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)20.7，22.1，24.1，29.9，42.5，49.0，64.4，170.5；ES-MS263(M-H). 3-{[(1R)-1-(2-萘基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OO)的制備 向(R)-(+)-1-(2-萘基)乙胺(5.00g，29.2mmol)在頻哪酮(20mL)和甲苯(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.39g，27.8mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)沖洗。將該固體懸浮于EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.36g(90％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.15(s(寬峰)，1H)，8.01(m，2H)，7.93(m，2H)，7.62(d，1H，J＝8.3Hz)，7.56(m，2H)，4.52(m，1H)，3.03(m，1H)，2.81(m，1H)，2.60(m，2H)，1.94(m，2H)，1.60(d，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 135.30，133.60，133.34，129.51，128.67，128.37，127.91，127.45，125.22，57.67，49.92，45.91，22.56，19.87.[α]D＝+15.2°(c＝0.00084，水)，ES-MS 292(M-1). 3-{[(1SR)-1-(2-萘基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OP)的制備 向(S)-(-)-1-(2-萘基)乙胺(5.00g，29.2mmol)在頻哪酮(20mL)和甲苯(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.39g，27.8mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)沖洗。將該固體懸浮于EtOH(40mL)中。懸浮液攪拌回流1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.62g(93％)。1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.20(s(寬峰)，1H)，8.01(m，2H)，7.95(m，2H)，7.62(d，1H，J＝8.3Hz)，7.56(m，2H)，4.52(m，1H)，3.04(m，1H)，2.81(m，1H)，2.61(m，2H)，1.93(m，2H)，1.60(d，3H，J＝6.8Hz).13C(DMSO，125MHz)δppm 135.30，133.60，133.32，129.51，128.65，128.37，127.90，127.46，125.20，57.64，49.95，45.94，22.55，19.85.[α]D＝-17.3°(c＝0.00052，水)，ES-MS 292(M-1). (R)-(-)-3-(1-甲基丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OQ)的制備 向(R)-(-)-2-丁胺(1g，13.7mmol)的丙酮(10mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.83g，15.0mmol)的甲苯(15mL)溶液。加熱回流混合物24小時(shí)。冷卻混合物到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗，然后真空干燥(2.59g)。將該固體懸浮于乙醇(17mL)中。加熱回流懸浮液。隨后加入水(0.1mL)，形成清亮溶液。緩慢冷卻混合物到室溫，抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌，在真空烘箱中60℃干燥2小時(shí)。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(2.39g，12.2mmol，89％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.82(t，J＝7.6Hz，3H)，1.14(d，J＝6.3Hz，3H)，1.39-1.46(m，1H)，1.59-1.66(m，1H)，1.96(q，J＝7.7Hz，2H)，2.86(t，J＝7.3Hz，2H)，3.00-3.12(m，3H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ8.8，15.0，21.6，25.7，43.5，48.1，56.0；ES-MS 194(M-H)；[α]D＝-1.2(c＝0.0157，H2O) 3-{[(1R)-1-苯基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OR)的制備 向(R)-(+)-1-苯基丙胺(10.0g，74.1mmol)在頻哪酮(40mL)和甲苯(40mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(8.60g，70.4mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)沖洗。將該固體懸浮于EtOH(80mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，13.11g(72％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm7.31(m，5H)，4.00(dd，1H，J＝4.7Hz，10.5Hz)，2.89(m，1H)，2.74(m，3H)，1.89(m，4H)，0.62(t，3H，J＝7.3Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 133.73，129.80，129.47，128.32，64.60，48.21，44.70，26.07，21.72，9.83.[α]D＝+15.4°(c＝0.00081，水)，ES-MS 256(M-1). 3-(1-氨基甲?；?1-甲基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OS)的制備 在劇烈攪拌下，向含有30％NH4OH(120mL)的250mL單頸燒瓶中加入NaCN(15.34g，0.31mmol)和NH4Cl(19.75g，0.37mmol)。然后在室溫下，于20分鐘內(nèi)逐滴加入相應(yīng)的酮。室溫?cái)嚢杌旌衔?天，之后用二氯甲烷(50mL)提取。分出有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥2小時(shí)。濾除硫酸鈉，減壓除去溶劑得到氨基腈粗品。所要物質(zhì)以亮棕色油體形式獲得(清亮油體，80％粗產(chǎn)率)。直接使用。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.35(s，6H)，2.56(s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)28.94，45.7，125.9 向在冰冷水浴中攪拌的10g濃硫酸中逐滴加入上述氨基腈(41mmol)在30mL CH2Cl2中的溶液，加料過程中維持內(nèi)部溫度為15℃。然后移去水浴，加熱混合物到40℃保持1小時(shí)。在冰浴中冷卻混合物，隨后倒入200g碎冰中。混合物的pH用28％氨水調(diào)節(jié)到7-8，繼用EtOAc(3×100mL)提取。收集提取液，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)至干。粗制固體用EtOAc/Hex中重結(jié)晶。得到需要產(chǎn)物，為白色泡沫狀固體0.4462g，4.37mmol，4％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.15(s，6H)，1.82(br s，2H)，6.84(br s，1H)，7.26(br s，1H)；13CNMR(125MHz，DMSO-d6)28.7，54.1，108.1 向2-氨基-2-甲基丙酰胺(0.4350g，4.26mmol)在MTBK(6mL)和乙醇(0.5mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯的甲苯溶液(1M，4.30mL)。加熱回流混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)(0.56g)。將所得固體在乙醇(5mL)和水(5mL)中重結(jié)晶。干燥后得到白色細(xì)碎固體狀標(biāo)題化合物(0.3500g，1.56mmol，37％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.47(s，6H)，1.99(qt，J＝7.6Hz，2H)，2.87(t，J＝7.3Hz，2H)，3.01(t，J＝7.8Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)21.7，21.9，42.0，48.0，62.5，174.6；ES-MS 223(M-H) 3-(1-氨基甲酰基-1-環(huán)戊基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OT)的制備 在劇烈攪拌下，向含有30％NH4OH(120mL)的250mL單頸燒瓶中加入NaCN(15.34g，0.31mmol)和NH4Cl(19.75g，0.37mmol)。然后在室溫下，于20分鐘內(nèi)逐滴加入相應(yīng)的酮。室溫?cái)嚢杌旌衔?天，之后用二氯甲烷(50mL)提取。分出有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥2小時(shí)。濾除硫酸鈉，減壓除去溶劑得到氨基腈粗品。再經(jīng)減壓蒸餾獲得無(wú)色油狀所要物質(zhì)(14.03g，127mmol，51％產(chǎn)率)。直接使用。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.61-1.71(m，2H)，1.72-1.83(m，4H)，1.8-1.94(m，2H)，2.42(s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)23.0，40.0，54.2，125.7 向在冰冷水浴中攪拌的10g濃硫酸中逐滴加入上述氨基腈(41mmol)在30mL CH2Cl2中的溶液，加料過程中維持內(nèi)部溫度為15℃。然后移去水浴，加熱混合物到40℃保持1小時(shí)。在冰浴中冷卻混合物，隨后倒入200g碎冰中。混合物的pH用28％氨水調(diào)節(jié)到7-8，繼用EtOAc(3×100mL)提取。收集提取液，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)至干。粗制固體用EtOAc/Hex中重結(jié)晶。得到需要產(chǎn)物，為白色固體1.36g，10.6mmol，27％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.37-1.41(m，2H)，1.57-1.63(m，2H)，1.68-1.76(m，2H)，1.78(br s，2H)，1.88-1.94(m，2H)，6.91(br s，1H)，7.40(br s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)24.2，39.3，64.7，180.0. 向2-氨基-2-甲基丙酰胺(0.4350g，4.26mmol)在MTBK(7mL)和乙醇(0.5mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯的甲苯溶液(1M，6.30mL)。加熱回流混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)(0.74g)。將所得固體在乙醇(5mL)和水(5mL)中重結(jié)晶。干燥后得到白色細(xì)碎固體狀標(biāo)題化合物(0.39g，2.80mmol，45％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.72-1.76(m，4H)，1.91-2.02(m，4H)，2.08-2.14-(m，2H)，2.86(t，J＝7.3Hz，2H)，3.00(t，J＝7.6Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)22.0，24.6，34.8，43.3，48.0，72.4，174.8；ES-MS 249(M-H) 3-(1-氨基甲?；?環(huán)庚基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OU)的制備 在劇烈攪拌下，向含有30％NH4OH(120mL)的250mL單頸燒瓶中加入NaCN(15.34g，0.31mmol)和NH4Cl(19.75g，0.37mmol)。然后在室溫下，于20分鐘內(nèi)逐滴加入相應(yīng)的酮。室溫?cái)嚢杌旌衔?天，之后用二氯甲烷(50mL)提取。分出有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥2小時(shí)。濾除硫酸鈉，減壓除去溶劑得到氨基腈粗品。所要物質(zhì)為亮黃色油體(33.09g，239mmol，96％粗產(chǎn)率)。進(jìn)一步減壓蒸餾試圖進(jìn)行純化失敗，蒸餾后獲得的物質(zhì)的純度反而低于粗產(chǎn)物，故將上述粗產(chǎn)物直接用于下一步驟。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.41-67(m，10H)，1.91-95(m，2H)，2.47(s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)21.8，27.4，40.1，53.8，125.8 向攪拌著的置于冰水浴中的10g濃硫酸內(nèi)逐滴加入上述氨基腈(41mmol)在30mL CH2Cl2中的溶液，加料過程中維持內(nèi)部溫度為15℃。然后移去水浴，加熱混合物到40℃保持1小時(shí)。在冰浴中冷卻混合物，隨后倒入200g碎冰中。混合物的pH用28％氨水調(diào)節(jié)到7-8，繼用EtOAc(3×100mL)提取。收集提取液，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)至干。粗制固體用EtOAc/Hex重結(jié)晶。得到需要產(chǎn)物，為白色固體2.15g，13.8mmol，31％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.34-1.38(m，2H)，1.49(br s，8H)，1.74(s，2H)，1.88-1.93(m，2H)，6.76(br s，1H)，7.27(br s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)22.4，29.6，39.1，59.6，181.1 向2-氨基-2-甲基丙酰胺(0.4350g，4.26mmol)在MTBK(5mL)和乙醇(0.5mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯的甲苯溶液(1M，5.20mL)。加熱回流混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)(0.62g)。將所得固體在乙醇(5mL)和水(5mL)中重結(jié)晶。干燥后得到白色細(xì)碎固體狀標(biāo)題化合物(0.39g，1.40mmol，27％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.53(br s，6H)，1.65-1.69(m，2H)，1.83-1.88-(m，2H)，1.97(qt，J＝6.7Hz，2H)，2.06-2.11(m，2H)，2.61(t，J＝6.6Hz，2H)，2.91(br s，2H)，7.57(s，1H0，7.79(s，1H)，8.75(br s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)21.8，22.2，29.1，33.1，43.0，49.1，68.3，172.0；ES-MS 277(M-H) 3-(1，4-二甲基-戊基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OV)的制備 在回流狀態(tài)下，于20分鐘內(nèi)，將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(10.90g，89mmol)在甲苯(75ml)中的溶液逐滴加到2-氨基-5-甲基己烷(10.00g，88.6mmol)的丙酮(80mL)溶液中。加熱回流混合物7小時(shí)，然后室溫放置過夜。抽濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥1小時(shí)(15.20g)。將所得固體在甲醇(90mL)和水(5mL)中重結(jié)晶。在攪拌下放置冷卻混合物到室溫。抽濾收集固體，用甲醇(2×15mL)沖洗。固體物在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)。得到白色細(xì)碎固體狀標(biāo)題化合物(12.67g，53.38mmol，60％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δppm 0.88(dd，J＝6.6，2.2Hz，6H)，1.22-1.27(m，2H)，1.29(d，J＝6.3Hz，3H)，1.51-1.60(m，2H)，1.71-1.78(m，1H)，2.08-2.14(m，2H)，3.00(t，J＝7.3Hz，2H)，3.15-3.24(m，2H)，3.25-3.31(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δppm 15.5，21.5，21.6，21.9，27.3，30.4，33.5，43.4，48.1，55.1；ES-MS 236(M-H) 3-(1，5-二甲基-己基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OW)的制備 在回流狀態(tài)下，于30分鐘內(nèi)，將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(9.80g，80mmol)在甲苯(70ml)中的溶液逐滴加到2-氨基-6-甲基庚烷(10.00g，78mmol)的丙酮(75mL)溶液中。加熱回流混合物7小時(shí)，然后室溫放置過夜。抽濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥1小時(shí)(15.20g)。將所得固體在甲醇(45mL)中重結(jié)晶。在不攪拌情形下放置冷卻混合物到室溫。將結(jié)塊破碎，用丙酮稀釋。抽濾收集固體，用丙酮(2×25mL)沖洗。固體物在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)。得到標(biāo)題化合物，為白色固體(14.10g，56.10mmol，72％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.86(dd，J＝6.6，2.0Hz，6H)，1.20(q，J＝7.3Hz，2H)，1.30(d，J＝6.8Hz，3H)，1.32-1.45(m，2H)，1.49-1.58(m，2H)，1.68-1.75(m，1H)，2.07-2.16(m，2H)，3.01(t，J＝7.3Hz，2H)，3.15-3.25(m，2H)，3.27-3.34(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)15.5，21.6，21.8，22.0，22.4，27.2，32.7，37.9，43.4，48.1，54.9；ES-MS250(M-H) 3-(1-甲基-丁基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OX)的制備 在回流狀態(tài)下，于30分鐘內(nèi)，將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(10.05g，115mmol)在甲苯(100ml)中的溶液逐滴加到2-氨基戊烷(10.00g，115mmol)的丙酮(100mL)溶液中。加熱回流混合物24小時(shí)，然后在冰/水浴冷卻下冷卻到0℃。抽濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥1小時(shí)(19.42g)。將所得固體在甲醇(45mL)中重結(jié)晶。在不攪拌情形下放置冷卻混合物到室溫。將結(jié)塊破碎，用丙酮稀釋。抽濾收集固體，用乙醇(2×20mL)沖洗。固體物在真空烘箱中60℃干燥3天。得到標(biāo)題化合物，為白色固體(15.53g，74.20mmol，65％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.92(t，J＝7.3Hz，3H)，1.29(d，J＝6.3Hz，3H)，1.31-1.47(m，2H)，1.50-1.57(m，1H)，1.67-1.74(m，1H)，2.06-2.16(m，2H)，3.01(t，J＝7.3Hz，2H)，3.15-3.26(m，2H)，3.28-3.34(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)13.1，15.4，18.1，21.6，34.7，43.4，48.1，54.6；ES-MS 208(M-H) (R)-(+)-3-(1-甲基-辛基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物OY)的制備 在回流狀態(tài)下，將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(7.465g，39.0mmol)在甲苯(30ml)中的溶液加到(R)-(-)-2-氨基壬烷(5.49g，38.3mmol)的丙酮(30mL)溶液中。加熱回流混合物8小時(shí)，然后在室溫下放置過周末。加入乙醚(20mL)，然后抽濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)沖洗。將該固體在真空烘箱中60℃干燥1小時(shí)(7.97g)。將所得固體懸浮在乙醇(40mL)中，加熱回流90分鐘。隨后冷卻混合物到0℃。抽濾收集固體，用乙醇(2×10mL)沖洗。將固體物在真空烘箱中60℃干燥18小時(shí)。得到標(biāo)題化合，為白色細(xì)碎固體(7.82g，29.5mmol，77％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.87(t，J＝6.8Hz，3H)，1.16(d，J＝6.8Hz，3H)，1.26-1.40(m，11H)，1.60-1.65(m，1H)，1.93(qt，J＝6.6Hz，2H)，2.64(t，J＝6.6Hz，2H)，3.04-3.11(m，3H)，8.47(br s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ13.9，15.7，21.9，22.1，24.5，28.5，28.7，31.2，32.5，44.0，49.2，53.1；ES-MS 264(M-H)；[α]D＝1.34±0.14(c＝0.008753，0.1N NaOH) 3-{[1-(3，5-二甲氧基)環(huán)己基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物OZ)的制備 向硝基環(huán)己烷(2.58g，20mmol)中加入NaOMe(0.5M，40mL)中，攪拌溶液30分鐘，然后濃縮得到白色固體。向該固體中加入3，5-二甲氧基芐基吡啶(5.45g，10mmol)和DMSO(20mL)。100℃加熱混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫，用HCl(1M)和EtOAc稀釋。分離兩相后，將有機(jī)層用HCl(1M)洗滌兩遍，之后濃縮得到混有一些固體的油狀粗品。加入甲醇來(lái)沉淀吡啶副產(chǎn)物，濾除，將濾液在高真空下濃縮。所得粗品不進(jìn)行進(jìn)一步純化直接用于氫化。
向攪拌著的上述硝基化合物粗品的甲醇溶液(20mL)中加入一刮刀在水中的阮氏鎳。將懸浮液在氫氣壓下氫化15小時(shí)(TLC顯示起始原料耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。粗產(chǎn)物使用CH2Cl2∶MeOH80∶10進(jìn)行柱純化，得到1.2g相應(yīng)的胺。
向攪拌著的上述胺(800mg，3.20mmol)在THF(10mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(390mg，3.20mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將固體懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，從而得到標(biāo)題化合物，1.1g(86％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.31(m，2H)，1.54-1.68(m，8H)，1.96(m，2H)，2.62(m，2H)，2.89(s，2H)，3.08(m，2H)，6.32(m，2H)，6.42(s，1H)，8.39(bs，2H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ20.92，22.81，25.07，31.84，41.04，50.09，55.82，61.64，109.47，161.01.ES-MS 370(M-1). 3-{[1-(3，5-二甲氧基)環(huán)己基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PA)的制備 向硝基環(huán)己烷(2.58g，20mmol)中加入NaOMe(0.5M，40mL)中，攪拌該溶液30分鐘，然后濃縮得到白色固體。向該固體中加入3，5-二甲氧基芐基吡啶(5.45g，10mmol)和DMSO(20mL)。100℃加熱混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫，用HCl(1M)和EtOAc稀釋。分離兩相后，將有機(jī)層用HCl(1M)洗滌兩遍，之后濃縮得到混有一些固體的油狀粗品。加入甲醇來(lái)沉淀吡啶副產(chǎn)物，濾除，將濾液在高真空下濃縮。所得粗品不進(jìn)行進(jìn)一步的純化直接用于氫化。
向攪拌著的上述硝基化合物粗品的甲醇溶液(20mL)中加入一刮刀在水中的阮氏鎳。將懸浮液在氫氣壓下氫化15小時(shí)(TLC顯示起始原料耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。粗產(chǎn)物使用CH2Cl2∶MeOH80∶10進(jìn)行柱純化，得到1.2g相應(yīng)的胺。
向攪拌著的上述胺(800mg，3.20mmol)在THF(10mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(390mg，3.20mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將固體懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，從而得到標(biāo)題化合物，1.1g(86％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.31(m，2H)，1.54-1.68(m，8H)，1.96(m，2H)，2.62(m，2H)，2.89(s，2H)，3.08(m，2H)，6.32(m，2H)，6.42(s，1H)，8.39(bs，2H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ20.92，22.81，25.07，31.84，41.04，50.09，55.82，61.64，109.47，161.01.ES-MS 370(M-1). 3-{[2-(3，5-二甲氧基苯基)-1，1-二甲基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PB)的制備 向2-硝基丙烷(1.78g，20mmol)中加入NaOMe(0.5M，40mL)中，攪拌該溶液30分鐘，然后濃縮得到白色固體。向該固體中加入3，5-二甲氧基芐基吡啶(5.45g，10mmol)和DMSO(20mL)。100℃加熱混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫，用HCl(1M)和EtOAc稀釋。分離兩相后，將有機(jī)層用HCl(1M)洗滌兩遍，之后濃縮得到混有一些固體的油狀粗品。加入甲醇來(lái)沉淀吡啶副產(chǎn)物，濾除，將濾液在高真空下濃縮。所得粗品不進(jìn)行進(jìn)一步的純化直接用于氫化。
向攪拌著的上述硝基化合物粗品的甲醇溶液(20mL)中加入一刮刀在水中的阮氏鎳。將懸浮液在氫氣壓下氫化15小時(shí)(TLC顯示起始原料耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。粗產(chǎn)物使用CH2Cl2∶MeOH80∶10進(jìn)行柱純化，得到1.2g(57％)相應(yīng)的胺。
向攪拌著的上述胺(1.1g，5.25mmol)在頻哪酮/甲苯(8mL/2mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(642mg，5.25mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將固體懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，從而得到標(biāo)題化合物，1.4g(80％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.19(s，6H)，1.98(m，2H)，2.67(m，2H)，2.82(s，2H)，3.11(m，2H)，3.74(s，6H)，6.38(s，2H)，6.42(s，1H)，8.60(bs，2H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ23.07，23.53；41.37，44.20，49.86，55.83，59.28，99.49，109.49，137.83，160.91.ES-MS 330(M-1). 3-{[2-(2，4-二氯苯基)-1，1-二甲基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PD)的制備 向2-硝基丙烷(1.78g，20mmol)中加入NaOMe(0.5M，40mL)中，攪拌該溶液30分鐘，然后濃縮得到白色固體。向該固體中加入2，4-二氯芐基吡啶(5.5g，10mmol)和DMSO(20mL)。100℃加熱混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫，用HCl(1M)和EtOAc稀釋。分離兩相后，將有機(jī)層用HCl(1M)洗滌兩遍，之后濃縮得到混有一些固體的油狀粗品。加入甲醇來(lái)沉淀吡啶副產(chǎn)物，濾除，將濾液在高真空下濃縮。所得粗品無(wú)需進(jìn)一步純化便直接用于氫化。
向攪拌著的上述硝基化合物粗品的甲醇溶液(20mL)中加入一刮刀在水中的阮氏鎳。將懸浮液在氫氣壓下氫化15小時(shí)(TLC顯示起始原料耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。粗產(chǎn)物使用CH2Cl2∶MeOH80∶10進(jìn)行柱純化，得到980mg(45％)相應(yīng)的胺。
向攪拌著的上述胺(960mg，4.40mmol)在頻哪酮/甲苯(8mL/2mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(537mg，4.40mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將固體懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，從而得到標(biāo)題化合物，1.4g(80％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.20(s，6H)，2.00(m，2H)，2.70(m，2H)，3.10(s，2H)，3.20(m，2H)，3.7.40(s，2H)，7.65(s，1H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ23.08，23.18，41.37，49.83，60.13，128.04，129.85，132.88，133.49，135.14，135.90.ES-MS 340&338(M-1). 3-{[2-(2，4-二氯苯基)-1，1-二甲基乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PE)的制備 向2-硝基丙烷(1.78g，20mmol)中加入NaOMe(0.5M，40mL)中，攪拌該溶液30分鐘，然后濃縮得到白色固體。向該固體中加入2，4-二氯芐基吡啶(5.5g，10mmol)和DMSO(20mL)。100℃加熱混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫，用HCl(1M)和EtOAc稀釋。分離兩相后，將有機(jī)層用HCl(1M)洗滌兩遍，之后濃縮得到混有一些固體的油狀粗品。加入甲醇來(lái)沉淀吡啶副產(chǎn)物，濾除，然后將濾液在高真空下濃縮。所得粗品不進(jìn)行進(jìn)一步的純化直接用于氫化。
向攪拌著的上述硝基化合物粗品的甲醇溶液(20mL)中加入一刮刀在水中的阮氏鎳。將懸浮液在氫氣壓下氫化15小時(shí)(TLC顯示起始原料耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。粗產(chǎn)物使用CH2Cl2∶MeOH80∶10進(jìn)行柱純化，得到980mg(45％)相應(yīng)的胺。
向攪拌著的上述胺(960mg，4.40mmol)在頻哪酮/甲苯(8mL/2mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(537mg，4.40mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將固體懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，從而得到標(biāo)題化合物，1.4g(80％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)□1.20(s，6H)，2.00(m，2H)，2.70(m，2H)，3.10(s，2H)，3.20(m，2H)，3.7.40(s，2H)，7.65(s，1H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)□23.08，23.18，41.37，49.83，60.13，128.04，129.85，132.88，133.49，135.14，135.90.ES-MS 340&338(M-1). 3-{[1，1-二甲基乙基-2-(4-丙氧基苯基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PF)的制備 向攪拌著的苯酚(195mg，1mmol)在DMF(10mL)中的溶液內(nèi)依次加入NaH(48mg，2mmol)、AllBr(170μL，2mmol)。加熱回流該懸浮液15小時(shí)，用HCl(1M)和EtOAc稀釋。將有機(jī)層用HCl(1M)洗滌，在高真空下濃縮。所得200mg需要產(chǎn)物(97％收率)。
向攪拌著的上述硝基化合物粗品的甲醇溶液(15mL)中加入一小刮刀在水中的阮氏鎳。將懸浮液在氫氣壓下氫化15小時(shí)(TLC顯示起始原料耗盡)，然后通過預(yù)先洗滌過的硅藻土過濾，減壓濃縮。粗產(chǎn)物直接用于下一步驟。
向上述粗胺(207mg，1mmol)在頻哪酮(3mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(122mg，1mmol)。攪拌回流混合物12小時(shí)，冷卻混合液，之后過濾。干燥固體物，得到270mg高?；撬?，為白色固體(79％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.97(t，J＝7.5Hz，3H)，1.14(s，6H)，1.70(m，2H)，1.99(m，2H)，2.67(m，2H)，2.81(s，2H)，3.12(m，2H)，3.90(t，J＝6.4Hz，2H)，6.88(d，J＝7.5Hz，2H)，7.12(d，J＝7.5Hz，2H)，8.59(bs，2H).13NMR(125MHz，DMSO-d6)δ11.13，22.75，23.11，41.24，43.06，49.82，59.44，69.50，114.86，127.38，132.37，158.43.ES-MS 328(M-1). 2-哌啶基乙烷磺酸(化合物PG)的制備 將2-哌啶乙醇(含10％雜質(zhì))(6g，46.44mmol)的無(wú)水CHCl3溶液用HCl(g)飽和，然后在回流狀態(tài)下滴加SOCl2進(jìn)行處理?；亓魉纬傻幕旌衔?小時(shí)，濃縮得到棕色固體。將該固體溶于EtOH，之后在EtOH/Et2O中重結(jié)晶，得到6.4g需要的氯化物(76％收率)。
向回流著的Na2SO3(5.04g，40mmol)的水(18mL)溶液中逐滴加入上述氯化物(3.7g，20mmol)的水(4mL)溶液。加畢后，攪拌回流反應(yīng)混合物40分鐘，之后冷卻并且減壓濃縮。加入12mL HCl(濃)來(lái)溶解氨基磺酸并沉淀無(wú)機(jī)鹽，過濾除去后者，濃縮濾液，然后加入乙醇使氨基磺酸以白色固體形式析出，過濾收集，用EtOH和Et2O洗滌，然后在高真空下干燥，得到2.84g白色固體(73％收率)。
1HNMR(500MHz，D2O)δ1.33-1.53(m，3H)，1.75(m，2H)，1.82-1.92(m，2H)，1.93-2.00(m，1H)，2.80-2.92(m，3H)，3.13(m，1H)，3.30(m，1H)，4.65(s，2H).13NMR(125MHz，D2O)δ21.59，21.94，27.97，28.60，45.02，46.79，55.79.ES-MS 178(M-1). 3-(1，1-二甲基-丙-2-炔基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物PH)的制備 向1，1-二甲基炔丙胺(0.8300g，10.00mmol)在MeCN(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.22g，10mmol)。加熱混合物到75℃保持4.5小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌。將固體物在真空烘箱中60℃于干燥18小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(1.46g，7.11mmol，71％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.65(s，6H)，2.13(qt，J＝7.7Hz，2H)，3.03(t，J＝7.6Hz，2H)，3.12(s，1H)，3.37(t，J＝7.8Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ21.8，25.6，41.7，48.0，54.1，76.8，50.5；ES-MS 204(M-H). (R)-(+)-3-[1-(4-溴苯基)乙基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物PI)的制備 向(R)-(+)-1-(4-溴苯基)乙胺(1g，5.00mmol)在MeCN(10mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.6110g，5mmol)。加熱混合物到75℃保持4.5小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥18小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(1.63g，5.06mmol，100％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.50(d，J＝6.8Hz，3H)，1.93(qt，J＝6.6Hz，2H)，2.61(t，J＝6.6Hz，2H)，2.79(qt，J＝6.3Hz，2H)，3.01(qt，J＝6.3Hz，2H)，4.38(q，J＝6.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，1H)，7.67(d，J＝8.8Hz，2H)，9.05(br s，1H)，9.21(br s，1H)13C NMR(125MHz，DMSO-d6)19.0，21.8，45.1，49.2，56.1，122.3，129.9，131.9，136.6；ES-MS 320-322(M-H)；[α]D＝+34.2±0.2°(c＝0.003345，0.1N NaOH) (S)-(+)-3-(1-甲基丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物PJ)的制備 向(S)-(+)-2-丁胺(1g，13.7mmol)在丙酮(7mL)與甲苯(7mL)混合液中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.67g，13.7mmol)。加熱回流混合物6小時(shí)。冷卻混合物到室溫，抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌并在真空下干燥。從而得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(1.90g，9.73mmol，71％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.96(t，J＝7.6Hz，3H)，1.29(d，J＝6.3Hz，3H)，1.54-1.60(m，1H)，1.76-1.81(m，1H)，2.12(q，J＝7.7Hz，2H)，3.01(t，J＝7.3Hz，2H)，3.15-3.27(m，3H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ8.8，14.9，21.6，25.7，43.5，48.1，56.0；ES-MS 194(M-H)；[α]D＝1.10±0.04°(c＝0.01364，水) (-)-3-[(1R，2S，5R)-2-異丙基-5-甲基-環(huán)己基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物PK)的制備 向L-薄荷胺(0.500g，3.22mmol)在丙酮(3mL)與甲苯(4mL)混合液中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.3940g，3.22mmol)。加熱回流混合物6小時(shí)。冷卻混合物到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥2小時(shí)(0.68g)。所得固體用乙醇(7mL)重結(jié)晶。冷卻混合物到室溫，抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥18小時(shí)。得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(0.3200g，1.15mmol，36％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.75(d，J＝6.8Hz，3H)，0.78-1.07(m，3H)，0.91(d，J＝6.3Hz，6H)，1.31-1.35(m，1H0，1.40-1.42(m，1H)，1.95-2.03(m，4H)，2.63-2.70(m，2H)，2.95-3.05(m，2H)，3.10-3.20(m，1H)，8.40(br s，1H)，8.65(br s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ15.4，21.0，21.8，22.0，22.4，24.5，30.8，33.3，36.1，43.4，44.4，49.6，56.8；ES-MS 276(M-H)；[α]D＝-46.2±0.3°(c＝0.0568，水)， 3-{[(1S)-1-甲基戊基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PL)的制備 向(S)-2-氨基己烷(5.10g，50.4mmol)在丙酮(20mL)和甲苯(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.85g，48.0mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.86g(73％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.06(m，3H)，2.83(t，2H，J＝7.3Hz)，1.93(quintet，2H，J＝7.4Hz)，1.56(m，1H)，1.37(m，1H)，1.16(m，7H)，0.71(m，3H).13C(D2O，125MHz)δppm 54.96，48.26，43.57，32.46，26.97，22.16，21.91，15.79，13.54.[α]D＝-6.3°(c＝0.0051，水)，ES-MS 222(M-1).3-{[(1SR)-1-甲基戊基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PM)的制備 向(R)-2-氨基己烷(5.12g，50.6mmol)在丙酮(20mL)和甲苯(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.87g，48.2mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.66g(71％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.01(m，3H)，2.86(t，2H，J＝7.3Hz)，1.97(m，2H)，1.59(m，1H)，1.40(m，1H)，1.19(m，7H)，0.74(t，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 54.83，48.08，43.38，32.22，26.70，21.87，21.64，15.50，13.21.[α]D＝+6.4°(c＝0.0025，水)，ES-MS 222(M-1). 3-{[(1S)-1，2-二甲基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PN)的制備 向(S)-(+)-3-甲基-2-丁胺(5.00g，57.4mmol)在丙酮(35mL)和甲苯(35mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(6.68g，54.7mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，4.95g(43％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm3.07(m，3H)，2.87(td，2H，J＝1.2Hz，7.3Hz)，1.95(m，3H)，1.07(d，3H，J＝6.8Hz)，0.83(d，3H，J＝6.8Hz)，0.78(t，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 59.76，48.16，44.15，29.71，21.49，18.42，14.99，10.66.[α]D＝+2.3°(c＝0.0015，水)，ES-MS 208(M-1). 3-{[(1R)-1，2，2-三甲基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PO)的制備 向(R)-3，3-二甲基-2-丁胺(10.0g，98.8mmol)在丙酮(40mL)和甲苯(40mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(11.5g，94.1mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將固體物用EtOH重結(jié)晶。過濾結(jié)晶后用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物，11.94g(57％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.20(m，1H)，3.05(m，1H)，2.95(quartet，1H，J＝6.8Hz)，2.89(t，2H，J＝6.8Hz)，2.02(m，2H)，1.13(d，3H，J＝6.8Hz)，0.86(s，9H).13C(D2O，125MHz)δppm 64.03，48.30，45.42，33.20，25.11，21.15，11.15.[α]D＝-28.6°(c＝0.0026，水)，ES-MS 222(M-1). 3-{[(1R)-1，2-二甲基丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PP)的制備 向(R)-3-甲基-2-丁胺(10.0g，115mmol)在丙酮(70mL)和甲苯(70mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(13.4g，110mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，11.36g(49％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm3.07(m，3H)，2.86(td，2H，J＝1.2Hz，7.3Hz)，1.95(m，3H)，1.07(d，3H，J＝6.8Hz)，0.83(d，3H，J＝6.8Hz)，0.78(t，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 59.77，48.17，44.16，29.72，21.50，18.43，15.00，10.67.[α]D＝-2.9°(c＝0.0026，水)，ES-MS 208(M-1). 3-(1-甲基-3-苯基丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物PQ)的制備 向3-氨基-1-苯基丁烷(10.50g，70.36mmol)的丙酮(35mL)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(8.60g，70.40mmol)。加熱回流混合物4小時(shí)。冷卻混合物到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)沖洗，在真空烘箱中60℃干燥1小時(shí)(14.02g)。將固體物懸浮在乙醇(90mL)中，混合物加熱回流1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，抽濾收集固體物，用乙醇(2×15mL)沖洗，在真空烘箱中于60℃干燥18小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(13.95g，51.40mmol，73％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.25(d，J＝6.8Hz，3H)，1.67-1.74(m，1H)，1.92-2.01(m，3H)，2.57-2.72(m，4H)，3.04-3.18(m，3H)，7.19-7.25(m，3H)，7.29-7.32(m，2H)，8.56(br s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ15.7，22.0，30.7，34.3，43.9，49.1，52.9，126.1，128.3，128.5，140.8；ES-MS 270(M-H) 3-({1-[羥基(3-甲氧基苯基)甲基]環(huán)戊基}氨基)-1-丙烷磺酸(化合物PR)的制備 在10分鐘內(nèi)，利用注射器向甲醇鈉冷溶液(0.5M MeOH溶液，20mL)中加入2-硝基環(huán)戊烷(3.00g，26mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物30分鐘，然后再次冷卻，加入間茴香醛(3.2mL，26mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過夜?；旌衔镉肁mberlite IR-120(強(qiáng)酸性)中和。過濾除去樹脂，用MeOH(2×15mL)洗滌。蒸發(fā)濾液。所得油體通過快速色譜純化100％己烷-90％己烷/EtOAc。得到需要的硝基化合物(1.6g，22％)。
向上述硝基化合物(1.60g，5.6mmol)的MeOH(12mL)溶液中加入6M HCl(7mL)。冷卻到5℃后，加入鋅粉(1.85g，28.2mmol)。在0-5℃攪拌此懸浮液30分鐘，此后再于室溫?cái)嚢?小時(shí)?；旌衔锿ㄟ^硅藻土墊過濾。濾餅用MeOH(2×15mL)洗滌。減壓蒸發(fā)合并的濾液。將殘留物溶于EtOAc(40mL)?；旌衔镉?0％NaOH(1×40mL)提取。水相用EtOAc(2×40mL)提取。合并的有機(jī)提取物用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)，經(jīng)真空干燥得到相應(yīng)的胺。該胺(0.920g，66％)無(wú)需進(jìn)-步純化直接使用。
向上述胺(1.3g，6.3mmol)在丙酮(5mL)和甲苯(5mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.422g，3.4mmol)。攪拌回流該溶液過夜。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(15mL)。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫。過濾白色固體，用丙酮(2×15mL)洗滌，并且在真空烘箱中于50℃干燥，從而得到標(biāo)題化合物，0.637g(51％)。
1H NMR(DMSO，300MHz)δppm 8.51(s(寬峰)，2H)，7.26(t，1H，J＝8.1Hz)，7.01(m，2H)，6.87(dd，1H，J＝1.9Hz，7.3Hz)，6.29(d，1H，J＝3.5Hz)，4.84(d，1H，J＝3.2Hz)，3.74(s，3H)，3.16(m，2H)，2.63(t，2H，J＝6.8Hz)，2.13(m，1H)，2.01(m，2H)，1.80(m，2H)，1.51(m，3H)，0.92(m，1H)，0.71(m，1H).13C(DMSO，75MHz)δppm 159.37，142.03，129.62，120.97，114.51，113.76，72.89，72.54，55.96，50.10，42.78，31.96，31.56，25.35，25.20，23.29.ES-MS 342(M-1). 3-{[(1S)-1-甲基己基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PS)的制備 向(S)-(+)-2-氨基庚烷(5.19g，45.0mmol)在丙酮(25mL)和甲苯(25mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.23g，42.9mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，6.77g(63％)。
1H NMR(D2O，300MHz)δppm 3.08(m，3H)，2.84(t，2H，J＝7.3Hz)，1.94(m，2H)，1.55(m，1H)，1.38(m，1H)，1.18(m，9H)，0.70(m，3H).13C(D2O，75MHz)δppm 55.00，48.27，43.59，32.70，31.06，24.48，22.17，21.93，15.79，13.70.[α]D＝-6.4°(c＝0.0020，水)，ES-MS 236(M-1). 3-{[(1S)-1-甲基庚基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PT)的制備 向(S)-(+)-2-氨基辛烷(5.50g，42.5mmol)在丙酮(25mL)和甲苯(25mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.95g，40.5mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，6.11g(57％)。
1H NMR(D2O，300MHz)δppm 3.08(m，3H)，2.84(t，2H，J＝7.3Hz)，1.94(m，2H)，1.56(m，1H)，1.39(m，1H)，1.16(m，11H)，0.70(m，3H).13C(D2O，75MHz)δppm 55.00，48.27，43.59，32.74，31.19，28.49，24.75，22.33，21.93，15.80，13.79.[α]D＝-6.5°(c＝0.0031，水)，ES-MS 250(M-1). 3-(1-丙基氨基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物PU)的制備 加熱由丙胺(1.20g，20mmol)、1，3-丙烷磺內(nèi)酯(9.5mL，2.0M丙酮溶液)以及甲苯(7mL)組成的混合物到50℃保持3小時(shí)。過濾收集褐色懸浮液中的固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌，真空干燥1小時(shí)(1.59g)。將固體物懸浮在乙醇(10mL)中。加熱回流該懸浮液。加入水(0.7mL)，混合物變?yōu)橥该魅芤骸；旌衔镫S后用冰/水浴冷卻。過濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌，在真空烘箱中60℃干燥3天，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)小粉末1.36g，7.56mmol，39％。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.97(t，J＝7.6Hz，3H)，1.69(hex，J＝7.5Hz，2H)，2.12(qt，J＝7.6Hz，2H)，3.01(qt，J＝7.3Hz，4H)，3.19(t，J＝7.8Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ10.3，19.3，21.4，46.2，48.0，49.4；ES-MS 180(M-H) 3-{[(1R)-1-甲基庚基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PV)的制備 向(R)-(-)-2-氨基辛烷(5.00g，38.7mmol)在丙酮(25mL)和甲苯(25mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.50g，36.8mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，5.72g(56％)。
1H NMR(D2O，300MHz)δppm 3.09(m，3H)，2.84(t，2H，J＝7.3Hz)，1.95(m，2H)，1.56(m，1H)，1.38(m，1H)，1.15(m，11H)，0.70(m，3H).13C(D2O，75MHz)δppm 55.00，48.26，43.59，32.74，31.19，28.48，24.74，22.31，21.91，15.79，13.78.[α]D＝+6.8°(c＝0.0024，水)，ES-MS 250(M-1). (R)-3-{[1-甲基己基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物PW)的制備 向(R)-(-)-2-氨基庚烷(5.0g，43.4mmol)在丙酮(25mL)和甲苯(25mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.04g，41.3mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，6.77g(63％)。
1H NMR(D2O，300MHz)δppm 3.15(m，1H)，3.04(m，2H)，2.85(t，2H，J＝7.3Hz)，1.96(m，2H)，1.57(m，1H)，1.39(m，1H)，1.19(m，9H)，0.72(m，3H).13C(D2O，75MHz)δppm 54.84，48.08，43.38，32.45，30.80，24.18，21.88，21.63，15.49，13.35.[α]D＝+6.4°(c＝0.0023，水)，ES-MS 236(M-1). 3-[(3-氧代環(huán)己-1-烯-1-基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物PX)的制備 向3-氨基-2-環(huán)己烯酮(0.5558g，5.00mmol)在MeCN(5mL)與DMF(1.0mL)混合液中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯溶液(1.0M MeCN溶液，5.00mL)。利用Radley caroussel加熱混合物到85℃保持3小時(shí)。冷卻懸浮液到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)洗滌。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥18小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(0.64g，2.74mmol，55％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ2.01(qt，J＝6.5Hz，2H)，2.22(qt，J＝6.8Hz，2H)，，2.57(t，J＝6.3Hz，2H)，2.74(t，J＝6.6Hz，2H)，3.05(t，J＝7.6Hz，2H)，4.28(t，J＝6.3Hz，2H)，5.85(s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ20.2，23.7，28.8，28.9，47.5，68.7，95.2，183.4，186.2；ES-MS 340，232(M-H). 3-(1-丁基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物PY)的制備 在回流狀態(tài)下，于10分鐘內(nèi)將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.45g，20mmol)的甲苯(20mL)溶液逐滴加到丁胺(1.46g，20mmol)的丙酮(20mL)溶液中。加熱回流混合物2小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥1小時(shí)(1.96g)。所得固體在乙醇(20mL)中重結(jié)晶。在不攪拌的情形下使混合物自然冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥18小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.55g，7.94mmol，40％)。
1HNMR(500MHz，D2O)δ0.92(t，J＝7.3Hz，3H)，1.38(hex，J＝7.5Hz，2H)，1.65(qt，J＝7.7Hz，2H)，2.12(qt，J＝7.6Hz，4H)，3.00(t，J＝7.3Hz，2H)，3.05(t，J＝7.6Hz，2H)，3.18(t，J＝7.8Hz，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ12.9，19.3，21.5，27.7，46.3，47.6，48.1；ES-MS 194(M-H). 3-[芐基(叔丁基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物PZ)的制備 加熱回流由1，3-丙烷磺內(nèi)酯(12.30g，100mmol)、甲苯(20mL)和N-芐基-N-叔丁基胺(16.33g，100mmol)在環(huán)己烷酮(100mL)中形成的混合物2小時(shí)，加甲苯稀釋，隨后冷卻到室溫。室溫?cái)嚢杌旌衔镞^夜，然后用丙酮(100mL)稀釋。抽濾收集固體物，用丙酮(2×50mL)沖洗。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥6小時(shí)(23g)。所得固體在乙醇(150mL)和水(38mL)中重結(jié)晶。放置混合物冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用甲醇(2×5mL)沖洗。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥18小時(shí)，得到第一批標(biāo)題化合物，為白色固體12.75。濃縮母液到粘稠糊狀物，與乙醇(80mL)一起回流30分鐘。過濾收集固體物，用乙醇(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于60℃干燥18小時(shí)，得到第二批產(chǎn)物6.42g，總收率19.17g，67.17mmol，67％。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.99(m，1H)，1.54(s，9H)，1.80(m，1H)，2.53(m，1H)，2.64(m，1H)，3.21(m，1H)，3.59(m，1H)，4.08(br d，J＝12.7Hz，3H)，4.71(br d，J＝12.7Hz，3H)，7.50-7.58(m，5H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ22.8，24.3，47.8，49.3，66.3，129.7，130.1，130.4，131.3；ES-MS 284(M-H). (R)-3-{[1-(3-甲氧基苯基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物QA)的制備 向(1R)-(-)-(3-甲氧基苯基)乙胺(5.0g，33.1mmol)在乙腈(30mL)和甲苯(10mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.85g，31.5mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，7.98g(91％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.298(td，1H，J＝1.0Hz，7.8Hz)，6.92(m，3H)，4.23(q，1H，J＝6.8Hz)，3.69(s，3H)，2.95(m，1H)，2.78(m，3H)，1.92(m，2H)，1.50(d，3H，J＝6.8Hz).13C(D2O，125MHz)δppm 159.69，137.59，130.99，120.23，115.36，113.38，58.53，55.64，48.08，44.50，21.52，18.42.[α]D＝+23.7°(c＝0.0036，水)，ES-MS 272(M-1). 3-[(1，1-二甲基丁-3-烯基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QB)的制備 在配置有攪拌攪拌棒、滴液漏斗、和低溫溫度計(jì)的100mL三口燒瓶?jī)?nèi)放入2.03g(15.8毫摩爾)的2，2-二甲基戊烯酸和15mL的丙酮。攪拌混合物，在5分鐘內(nèi)加入2.45mL(17.4mmol)三乙胺。在冰鹽浴中將溶液急冷到-5至0℃。維持溫度在-5至0℃之間，緩慢加入在5mL丙酮中的1.67mL(17.4mmol)氯碳酸乙酯(25分鐘)。加畢后再攪拌冰冷混合物15分鐘。在25分鐘內(nèi)加入2.05g(31.6mmol)疊氮化鈉在8mL水中的溶液，加料期間保持溫度介于-5至0℃之間。在該溫度下再攪拌混合物30分鐘，隨后倒入75mL冰水中，與四份25ml的甲苯一起搖動(dòng)。合并的甲苯提取液用無(wú)水硫酸鎂干燥，之后轉(zhuǎn)移到配置有雙口Claisen型接管、攪拌器和回流冷凝器的250mL三口燒瓶?jī)?nèi)。小心加熱回流攪拌溶液1小時(shí)(最初觀測(cè)到有氮?dú)庖莩?。濃縮所述胺鹽酸鹽溶液至干。將胺鹽酸鹽溶于最少量的熱甲醇(4mL)中，再倒入乙醚(20mL)內(nèi)。過濾收集胺，真空干燥。質(zhì)子NMR顯示其純度大約97％(含有痕量的三乙胺鹽酸鹽)(1.27g，9mmol，59％)。將該胺溶于水中，溶液的pH用用飽和碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)到12。胺用MTBK(4×5mL)提取，硫酸鈉干燥，甲苯(5mL)沖洗。所得溶液直接用于下一步驟。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.34(s，6H)，1.38(hex，J＝7.5Hz，2H)，2.39(d，J＝7.3Hz，2H)，5.23-5.29(m，2H)，5.84-5.92(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ24.7，44.0，54.1，121.2，131.3 向1，1-二甲基丁-3-烯基胺(9mmol)在MTBK(20mL)/甲苯(5mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.8mL，9mmol)。加熱混合物至微回流狀態(tài)保持5小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將固體物在真空烘箱中于60℃干燥60小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為米色固體(0.83g，3.75mmol，按胺鹽酸鹽算42％，24％總收率)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.34(s 6H)，2.08(qt，J＝7.6Hz，2H)，2.44(d，J＝7.3Hz，4H)，3.00(t，J＝7.3Hz，2H)，3.19(t，J＝7.8Hz，2H)，5.28-5.31(m，2H)，5.82-5.90(m.2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ12.9，19.3，21.5，27.7，46.3，47.6，48.1；ES-MS 194(M-H) 3-[(4-甲基芐基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QC)的制備 向4-甲基芐胺(5.0g，41.3mmol)在乙腈(35mL)和甲苯(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.80g，39.3mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中于50℃干燥，得到標(biāo)題化合物，8.62g(90％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.20(d，2H，J＝7.8Hz)，7.17(d，2H，J＝7.8Hz)，4.04(s，2H)，3.05(t，2H，J＝7.8Hz)，2.82(t，2H，J＝7.3Hz)，2.20(s，3H)，1.97(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm 140.37，129.99，127.77，51.00，48.09，45.78，21.43，20.48.ES-MS 242(M-1). 3-{[2-(4-甲氧基苯基)-2-氧代乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物QD)的制備 用飽和K2CO3溶液(65mL)處理2-氨基-4-甲氧基苯乙酮鹽酸鹽(2.5g，12.4mmol)，加入EtOAc(3×65mL)。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并在真空下干燥。
向2-氨基-4-甲氧基苯乙酮(12.4mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.34g，11.0mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。在加熱下，將所得米色固體物溶于50％MeOH/水(200mL)中，隨后加入Dowex Marathon C離子交換樹脂(強(qiáng)酸性)。室溫?cái)嚢钁腋∫?分鐘。濾除樹脂，用50％MeOH/水(2×15mL)洗滌。蒸餾濾液。將所余固體懸浮在丙酮中，之后過濾收集，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中(50℃)干燥，得到標(biāo)題化合物，1.84g(58％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.06(s(寬峰)，1H))，7.98(d，2H，J＝8.8Hz)，7.12(d，2H，J＝8.8Hz)，4.72(m，2H)，3.87(s，3H)，3.13(m，2H)，2.62(t，2H，J＝6.6Hz)，2.02(m，2H).13C(D2O，75MHz)δppm 191.04，164.69，131.24，127.09，114.97，56.64，52.82，49.95，47.80，22.63.ES-MS 286(M-1). 3-[(1，1-二甲基丙-2-烯基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QE)的制備 對(duì)250mL三口干燥燒瓶配置磁力攪拌棒、壓力平衡滴液漏斗、低溫溫度計(jì)和氮?dú)馊肟诠?。用氮?dú)鉀_洗該裝置，然后放入410mg(0.0103摩爾)分散在礦物油中的氫化鈉和15mL己烷。攪拌所得懸浮液，使氫化物沉降。利用長(zhǎng)滴管吸去己烷，加入60mL無(wú)水乙醚，再于5分鐘內(nèi)加入8.55g(0.0993摩爾)3-甲基-2-丁烯醇在15mL無(wú)水乙醚中的溶液。在無(wú)氫氣逸出后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)混合物15分鐘。所形成的清澈溶液然后在冰鹽浴中冷卻到-10至0℃。向攪拌著的上述溶液內(nèi)逐滴加入三氯乙腈(10.0mL，14.4g，0.0996摩爾)，加料期間維持反應(yīng)溫度低于0℃。15分鐘加料完畢，使反應(yīng)混合物升溫至室溫。將淺琥珀色的混合物倒入250mL圓底燒瓶?jī)?nèi)，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去乙醚。加入己烷[150mL，含有0.4ml(0.01摩爾)的甲醇]，劇烈搖動(dòng)混合物1分鐘，通過重力過濾除去少量深色不溶物。殘留物用己烷(共50mL)洗滌兩遍，合并的濾液利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去。
在500-mL圓底燒瓶?jī)?nèi)加入上述亞氨酸酯和300mL二甲苯?；亓魅芤?小時(shí)。冷卻到室溫后將所得深色二甲苯溶液通過填充有硅膠和甲苯的短柱過濾。柱用另外的250mL甲苯洗脫，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮合并的淡黃色洗脫液。
在500mL圓底燒瓶?jī)?nèi)放入9.0g(0.030摩爾)上述粗酰胺、160mL乙醇和150mL 6N氫氧化鈉水溶液?？諝鈸Q成氮?dú)?，室溫?cái)嚢柙撊芤?0小時(shí)。加入乙醚(300mL)，分離有機(jī)層，水層用50mL乙醚洗滌兩次。
在乙醚(5×100mL)提取后，胺粗品用6N HCl(2×20mL)反提取。合并的有機(jī)提取物用乙醚(1×100mL)洗滌。所得酸溶液的pH用50％NaOH調(diào)節(jié)至12。堿性水層用乙醚(2×50mL)提取。加入2M HCl乙醚溶液(100mL)，濃縮胺鹽酸鹽溶液至干。將胺鹽酸鹽溶解在最少量的熱甲醇(10mL)中，再倒入乙醚(100mL)內(nèi)。過濾收集胺，真空干燥。分兩批得到胺鹽酸鹽純品(6.92g，56.9mmol，57％)。將胺溶解在水中，利用50％NaOH調(diào)節(jié)該溶液的pH至12。所得胺先用甲苯(3×13mL)提取，然后再用MTBK(1×10mL)提取，碳酸鉀干燥(20分鐘)，繼用丙酮(5mL)沖洗。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.34(s 6H)，5.30(d，J＝10.7Hz，1H)，5.31(d，J＝17.6Hz，1H)，5.98(dd，J＝17.6和11.2Hz，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)25.1，54.9，115.5，139.3 3-[(1-氨基甲?；?1-乙基)丙基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QF)的制備 在劇烈攪拌下，向裝有30％NH4OH(120mL)的250mL單口燒瓶?jī)?nèi)加入NaCN(15.34g，0.31mol)和NH4Cl(19.75g，0.37mol)。在室溫下于20分鐘內(nèi)逐滴加入相應(yīng)的酮。室溫?cái)嚢杌旌衔?天，接著用二氯甲烷(50mL)提取。分離有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鈉干燥2小時(shí)。濾除硫酸鈉，減壓除去溶劑，得到氨基腈粗品。以淺棕色油體形式得到所要物質(zhì)(無(wú)色油體，89％粗產(chǎn)率)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.95(t，J＝7.6Hz，6H)，1.52(hex，J＝7.2Hz，2H)，1.61(hex，J＝7.3Hz，2H)，2.39(br s，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ8.3，31.9，54.6，124.2 向在冰冷水浴中攪拌著的10g濃硫酸中逐滴加入上述氨基腈(41mmol)在30mL CH2Cl2中的溶液，加料期間維持內(nèi)部溫度為15℃。然后移去冷水浴，加熱混合物到40℃保持1小時(shí)。然后在冰浴中冷卻混合物，再倒在200g碎冰上?；旌衔锏膒H用28％氨水調(diào)節(jié)至7-8，繼用EtOAc(3×100mL)提取。收集提取物，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)至干。將該粗制固體在EtOAc/Hex中重結(jié)晶。得到白色泡沫狀固體形式所要物質(zhì)0.941g，7.23mmol，6％。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.77(t，J＝7.6Hz，6H)，1.29-1.36(m，2H)，1.57-1.65(m，2H)，6.95(br s，1H)，7.23(br s，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ8.2，32.5，60.6，178.2 向2-氨基-2-乙基丙酰胺(0.941g，7.23mmol)溶液中加入一當(dāng)量的1，3-丙烷。反應(yīng)后得到糊狀物。將該糊狀物溶于水，用乙酸乙酯洗滌。利用1N NaOH制備其鈉鹽，濃縮溶液至干。粗產(chǎn)物采用制備型RP-HPLC(Delta Prep填充柱C18，215nm，50mL/min，含0.01％TFA的0％-30％MeCN/水)純化。凍干得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(0.3700g，1.47mmol，20％)。
1HNMR(300MHz，D2O)δ0.89(t，J＝7.5Hz，6H)，1.83(q，J＝7.3Hz，4H)，2.05(qt，J＝7.4Hz，4H)，2.84-2.86(m，2H)，2.99(t，J＝7.3Hz，2H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ7.4，23.5，26.0，41.5，48.9，68.3，176.9；ES-MS 251(M-H). 3-[(4-叔丁基芐基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QG)的制備 向4-叔丁基芐胺(5.0g，30.6mmol)在25％甲苯/乙腈(30mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯溶液(3.56g，29.1mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(50mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物，7.58g(91％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.95(s(broad)，1H)，7.44(d，2H，J＝8.3Hz)，7.38(d，2H，J＝8.3Hz)，4.07(s，2H)，3.08(t，2H，J＝6.3Hz)，2.63(t，2H，J＝6.5Hz)，1.96(m，2H)，1.27(s，9H).13C(DMSO，75MHz)δppm 154.21，132.32，132.05，128.31，52.77，52.32，49.89，.34.17，24.81.ES-MS 2849(M-1). 3-{[1-(3-甲氧基苯基)丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物QH)的制備 向間甲氧基苯甲醛(27mL，22mmol)在無(wú)水四氫呋喃(THF，5mL)中的溶液(0℃)內(nèi)逐滴加入雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰(1M THF溶液，26mL，26mmol)。0℃攪拌該溶液20分鐘，然后經(jīng)注射器加入乙基溴化鎂(1M THF溶液，28mL，28mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物24小時(shí)。冷卻到室溫后，將反應(yīng)混合物傾入飽和的NH4Cl溶液中(50mL)。混合物用EtOAc(3×75mL)提取。合并有機(jī)提取物，減壓濃縮。殘留物與3MHCl(40mL)一起攪拌30分鐘。所得混合物用EtOAc(3×40mL)提取。合并的有機(jī)提取物用Na2SO4干燥，過濾，蒸發(fā)，在真空下干燥，從而得到1-(3-甲氧基苯基)-1-丙胺(2.47g，67％)。
向1-(3-甲氧基苯基)-1-丙胺(2.45g，14.8mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.72g，14.1mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將固體物懸浮在EtOH(20mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物，3.16g(78％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm，7.28(t，1H，J＝7.9Hz)，6.90(m，3H)，3.98(m，1H)，3.69(m，3H)，2.89(m，1H)，2.74(m，3H)，1.89(m，4H)，0.63(t，2H，J＝7.3Hz).13C(D2O，75MHz)δppm159.47，135.45，130.81，120.84，115.32，113.87，64.50，55.72，48.23，44.73，26.14，21.72，9.80.ES-MS 286(M-1). 3-{[2-(2-羥基苯基)-1，1-二甲基乙基]氨基}丙烷-1-磺酸(化合物QI)的制備 在密封管內(nèi)放入芐醇(1.2g，10mmol)、四丁基氟化銨(5mL，5mmol)和相應(yīng)的硝基化合物(1.78g，20mmol)，130℃加熱15小時(shí)。冷卻反應(yīng)物，加EtOAc稀釋。水洗所得溶液，干燥，濃縮后得到黑色油體。以Hex∶EA 80∶20為洗脫劑進(jìn)行硅膠層析，得到淡黃色固體0.48g，25％收率。
向上述硝基化合物(800mg，4.12mmol)的甲醇(20mL)攪拌溶液中加入一小刮刀在水中的阮氏鎳。在氫氣壓下氫化懸浮液15小時(shí)(TLC顯示起始原料完全耗盡)，然后通過硅藻土過濾，減壓濃縮。得到相應(yīng)胺直接用于下一步驟。
向上述胺(420mg，2.58mmol)的THF(5mL)攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(614mg，5.02mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(10mL)。攪拌回流1小時(shí)。然后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，75mg(10％收率)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.17(s，6H)，2.00(m，2H)，2.64(m，2H)，2.85(s，2H)，3.12(m，2H)，6.70-6.82(m，2H)，7.10(m，2H)，8.49(bs，2H)，9.64(s，1H，OH).13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ23.42，23.73，37.98，41.51，49.89，60.54，115.99，119.44，122.09，128.87，133.14，156.30.ES-MS 286(M-1). 3-[(1-甲基-1-噻吩-2-基乙基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QJ)的制備 在140℃-150℃干燥CeCl3-7H2O 15小時(shí)。向該固體中加入THF(80mL)，攪拌30分鐘后冷卻形成的懸浮液到-78℃，向其中加入MeLi。攪拌30分鐘后，逐滴加入2-噻吩甲腈，在-78℃至-35℃下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。加入濃氨水(25mL)，溫?zé)峄旌衔锏绞覝?，通過硅藻土過濾。濾液用EtOAc提取，干燥(Na2SO4)，濃縮。使用CH2Cl2/MeOH(95/05)柱層析，分離到需要產(chǎn)物，600mg(23％收率)。
向上述胺(500mg，3.5mmol)的頻哪酮(7mL)攪拌溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(427mg，3.5mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用THF洗滌。將所得固體懸浮于EtOH(10mL)。攪拌回流1小時(shí)。然后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，800mg(87％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.70(s，6H)，1.85(m，2H)，2.75(t，J＝7.0Hz，2H)，2.84(t，J＝7.0Hz，2H)，7.00(m，1H)，7.16(m，1H)，7.40(m，1H)13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ21.75，25.82，41.07，48.07，59.52，127.67，127.90，127.95.ES-MS 262(M-1). 3-{[4-(甲磺?；?芐基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物QK)的制備 用飽和K2CO3溶液(40mL)處理4-甲基磺?；S胺鹽酸鹽(2.5g，11.8mmol)，加入EtOAc(3×40mL)。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)并在真空下干燥。
向4-甲磺酰基芐胺(2.11g，11.4mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.35g，10.8mmol)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH(20mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物，3.10g(91％)。
1H NMR(D2O，300MHz)δppm 7.87(dd，2H，J＝1.9Hz，6.6Hz)，7.57(dd，2H，J＝1.9Hz，6.6Hz)，4.22(s，2H)，3.12(m，3H)，2.84(t，2H，J＝7.3Hz)，2.00(m，2H).13C(D2O，75MHz)δppm139.83，137.22，130.92，128.02，50.59，48.17，46.50，43.48，21.69.ES-MS 306(M-1). (R)-(+)-3-[1-(4-硝基苯基)乙基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QL)的制備 向(R)-(+)-1-(4-硝基苯基)乙胺(0.8185g，4.93mmol)的甲苯(10mL)溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯的乙腈溶液(1M，5.0mL)。攪拌回流該混合物24小時(shí)，然后冷卻到0℃。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將固體物在真空烘箱中60℃干燥4小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(1.14g，3.95mmol，80％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.55(d，J＝6.7Hz，3H)，1.97(qt，J＝6.5Hz，2H)，2.62(t，J＝6.4Hz，2H)，2.84(br s，1H)，3.05(br s，2H)，4.58(br s，1H)，7.77(d，J＝8.8Hz，1H)，8.31(d，J＝8.8Hz，2H)，9.21(br s，1H)，9.37(br s，1H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)19.0，22.0，45.2，49.0，56.0，123.8，128.8，147.4，147.4；ES-MS 287(M-H)；[α]D＝+37.1°±0.1，c＝0.005512，0.1N NaOH 3-[(1，1-二乙基丙-2-烯基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物QM)的制備 于0℃，向氫化鈉(60％油分散物，2.20g，55mmol)的乙醚(100mL)懸浮液中逐滴加入膦酰乙酸三乙酯(11.4g，50.8mmol)的乙醚(50mL)溶液。室溫?cái)嚢杌旌衔?小時(shí)。將形成的清澈溶液再次冷卻到0℃，在20分鐘內(nèi)逐滴加入3-戊酮(5.85mL，55mmol)的乙醚(20mL)溶液。然后加熱回流混合物過夜。從燒瓶中潷烯出液體，余下磷酸鈉鹽。該固體物用乙醚(3×20mL)沖洗。合并的有機(jī)相用水(1×20mL)、1N NaOH(1×20mL)和鹽水(1×20mL)沖洗。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，之后減壓濃縮溶液，得到油狀體。將該粗制殘留物在Biotage系統(tǒng)上通過70g硅膠短柱快速層析，得到所要物質(zhì)，為透明油體(5.37g，34.4mmol，68％收率，約90％的純度含有一些磷酸鹽)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.069(t，J＝7.3Hz，3H)，1.073(t，J＝7.6Hz，3H)，2.190(q，J＝7.5Hz，1H)，2.192(q，J＝7.5Hz，1H)，2.62(q，J＝7.6Hz，2H)，4.15(qt，J＝7.2Hz，2H)，5.60(s，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ12.2，13.2，14.5，25.6，30.9，59.5，113.5，166.3，167.0. 在20分鐘內(nèi)，向LAH(1.5g)在乙醚(150g)中的冰冷懸浮液內(nèi)逐滴加入3-乙基-2-戊烯酸乙酯(5.30g，34mmol)的乙醚(40mL)溶液。混合物用甲醇猝滅，然后加入飽和酒石酸鈉鹽溶液。分層，有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮至干。將所得到的醇粗品使用20％-30％在己烷中的乙醚通過70g硅膠短柱(Biotage)快速層析。得到需要產(chǎn)物，為透明油體，1.55g，14.5g，43％。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ0.96-1.03(m，6H)，1.36(m，1H)，2.07-2.12(m，4H)，4.17(d，J＝6.8Hz，2H)，5.36(t，J＝7.1Hz，1H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ12.6，13.9，23.7，29.2，59.1，121.3，147.1. 在50mL三口干燥燒瓶上配置磁力攪拌棒、壓力平衡滴液漏斗、溫度計(jì)和氮?dú)馊肟诠?。該將該裝置用氮?dú)鉀_刷，然后放入55mg分散在礦物油中的氫化鈉和3mL己烷。攪拌所得懸浮液，使氫化物沉降。利用長(zhǎng)滴管吸去己烷，加入8mL無(wú)水乙醚，再于5分鐘內(nèi)加入8.55g(0.0993摩爾)3-甲基-2-戊烯醇在3mL無(wú)水乙醚中的溶液。在無(wú)氫氣逸出后，繼續(xù)攪拌反應(yīng)混合物15分鐘。所形成的清澈溶液然后在冰鹽浴中冷卻到-10℃。向攪拌著的上述溶液內(nèi)逐滴加入三氯乙腈(1.35mL，13.4毫摩爾)，加料期間保持反應(yīng)溫度低于0℃。15分鐘加料完畢，使反應(yīng)混合物升溫至室溫。將淺琥珀色混合物倒入100mL圓底燒瓶?jī)?nèi)，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去乙醚。加入己烷[20mL，含有1滴甲醇]，劇烈搖動(dòng)混合物1分鐘，通過重力過濾除去少量深色不溶物。殘留物用己烷(共10mL)洗滌兩遍，合并的濾液利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器除去。
在100-mL圓底燒瓶?jī)?nèi)加入上述亞氨酸酯和40mL二甲苯?；亓魅芤?小時(shí)。冷卻到室溫后將所得深色二甲苯溶液通過填充有硅膠(20g)和甲苯的短柱過濾。柱用另外的40mL甲苯洗脫，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮合并的淡黃色洗脫液。
向上述粗產(chǎn)物中加入60mL乙醇和60mL 6N氫氧化鈉水溶液?？諝庥玫?dú)庵脫Q，室溫?cái)嚢柙撊芤?0小時(shí)。加入乙醚(300mL)，分離有機(jī)層，水層用50mL乙醚洗滌兩次。
在乙醚(5×20mL)提取后，胺粗品用6N HCl(2×20mL)反提取。合并的有機(jī)提取物用乙醚(1×100mL)洗滌。所得酸溶液的pH用50％NaOH調(diào)節(jié)至12。堿性水層用乙醚(2×50mL)提取。加入2M HCl乙醚溶液(100mL)，濃縮胺鹽酸鹽溶液至干。將所得胺鹽酸鹽溶解在最少量的熱甲醇(4mL)中，再倒入乙醚(50mL)內(nèi)。過濾收集胺，真空干燥。分兩批得到胺鹽酸鹽純品(0.67g，4.48mmol，34％)。將胺溶解在水中，利用50％NaOH調(diào)節(jié)該溶液的pH至12。所得胺先用甲苯(1×5mL)提取，然后再用MTBK(2×5mL)提取，碳酸鉀干燥(20分鐘)。胺鹽酸鹽的NMR數(shù)據(jù) 1H NMR(500MHz，D2O)δ0.91(t，J＝7.6Hz，6H)，1.74-1.79(m，4H)，5.22(d，J＝17.6Hz，1H)，5.40(d，J＝11.2Hz，1H)，5.85(dd，J＝18.1和11.2Hz，1H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ12.6，13.9，23.7，29.2，59.1，121.3，147.1 向1，1-二乙基丙-2-烯胺(4.48mmol)在20％MTBK/甲苯(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.40mL，4.5mmol)。攪拌回流混合物20小時(shí)，然后冷卻到0℃。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗。將所得固體在真空烘箱中50℃干燥6小時(shí)。得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.58g，2.46mmol，55％，5％總收率)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.82(t，J＝7.5Hz，6H)，1.69(non，J＝7.3Hz，4H)，1.99(qt，J＝6.4Hz，2H)，2.65(t，J＝6.4Hz，2H)，2.87-2.90(m，2H)，5.35(d，J＝17.6Hz，1H)，5.48(d，J＝11.1Hz，1H)，5.75(dd，J＝17.6和11.1Hz，1H)，8.71(br s，2H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)δ7.1，22.1，24.2，41.2，64.5，119.7，136.0；ES-MS 234(M-H). 4-(叔丁基氨基)-1-苯基-2-丁烷磺酸(化合物QN)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1eq)在無(wú)水四氫呋喃(THF，1.8M)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2M己烷溶液，1.5eq)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入芐基溴(1eq，THF稀釋)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，之后緩慢加入水(100mL)?；厥沼袡C(jī)層，加EtOAc(20mL)稀釋。所得溶液用硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)。產(chǎn)物通過硅膠墊純化(90％Hex/EtOAc-60％Hex/EtOAc)，得到1-芐基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯。
向1-芐基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1eq)在25％甲苯/乙腈中的溶液(0.8M)內(nèi)加入叔丁胺(1.05eq)。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.23(m，5H)，3.28(dd，1H，J＝3.7Hz，13.9Hz)，3.06(m，1H)，2.87(m，1H)，2.58(m，2H)，1.90(m，1H)，1.76(m，1H)，1.06(s.9H).13C(D2O，125MHz)δppm 138.09，129.45，129.13，127.25，59.41，57.09，39.49，36.11，26.40，24.90.ES-MS 284(M-1). 1-(叔丁基氨基)己-5-烯-3-磺酸(化合物QO)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.0g，41mmol)在無(wú)水四氫呋喃(THF，150mL)中的-48℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，18mL，45mmol)。在-78℃攪拌該溶液30分鐘，然后在30分鐘內(nèi)通過注射泵加入芐基溴(3.5mL，41mmol)。在-48℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，之后緩慢加入水(100mL)?；厥沼袡C(jī)層，加EtOAc(20mL)稀釋。所得溶液用硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)。產(chǎn)物通過硅膠墊純化(90％Hex/EtOAc-70％Hex/EtOAc)，得到相應(yīng)的1-烯丙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.03g，46％)。
向在25％乙腈/甲苯(5mL)中的1-烯丙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.03g，18.6mmol)內(nèi)加入叔丁胺(1.43g，19.6mmol)在25％乙腈/甲苯(20mL)中的溶液。攪拌回流該溶液4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH(25mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物，3.97g(90％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 5.71(m，1H)，5.04(m，2H)，3.05(m，2H)，2.85(m，1H)，2.53(m，1H)，2.20(m，1H)，1.90(m，2H)，1.20(s.9H).13C(D2O，125MHz)δppm 132.26，116.10，55.15，55.02，37.15，31.97，24.08，22.82.ES-MS 234(M-1). 4-氨基-1-苯基-2-丁烷磺酸(化合物QQ)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1eq)在無(wú)水四氫呋喃(THF，1.8M)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，1.5eq)。在-78℃攪拌該溶液30分鐘，然后在30分鐘內(nèi)通過注射泵加入芐基溴(1eq，THF稀釋)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，之后緩慢加入水(100mL)。回收有機(jī)層，加EtOAc(20mL)稀釋。所得溶液用硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)。產(chǎn)物通過硅膠墊純化(90％Hex/EtOAc-60％Hex/EtOAc)，得到1-芐基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向0℃氫氧化銨(28-30％NH3，50eq)中加入1-芐基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1eq)在四氫呋喃中的溶液(0.8M)。將所得溶液于0℃繼續(xù)攪拌30分鐘，然后與EtOH一起蒸發(fā)。將固體物懸浮于EtOH中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻到室溫后過濾收集固體物，用EtOH(2×20mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(57％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ(ppm)1.77(m，1H)，1.89(m，1H)，2.57(t，1H，J＝10.5Hz)，2.76(m，1H)，2.94(m，1H)，3.05(m，1H)，3.23(dd，1H，J＝4.1Hz，13.9Hz)，7.22(m，5H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ(ppm)26.89，36.05，37.79，59.42，127.12，129.03，129.48，138.16；ES-MS230(M+H). 1-氨基己-5-烯-3-磺酸(化合物QR)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.0g，41mmol)在無(wú)水四氫呋喃(THF，150mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，18mL，45mmol)。在-78℃攪拌該溶液30分鐘，然后在30分鐘內(nèi)通過注射泵加入烯丙基溴(3.5mL，41mmol)。在-48℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，之后緩慢加入水(100mL)?；厥沼袡C(jī)層，加EtOAc(20mL)稀釋。所得溶液用硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)。產(chǎn)物通過硅膠墊純化(100％己烷-80％Hex/EtOAc)，得到相應(yīng)的1-烯丙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.76g，43％)。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向0℃氫氧化銨(28-30％NH3，230mL，1.8mol)中加入1-烯丙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(6.66g，0.041mol)在四氫呋喃(25mL)中的溶液。將所得溶液于0℃繼續(xù)攪拌30分鐘，然后與EtOH一起蒸發(fā)。將固體物懸浮于丙酮中，過濾收集，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物，4.96g(68％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 5.73(m，1H)，5.01(m，2H)，3.06(m，2H)，2.85(m，1H)，2.54(m，1H)，2.20(m，1H)，1.93(m，2H).13C(D2O，125MHz)δppm134.42，118.26，57.24，37.63，34.20，26.95.ES-MS 180(M+1). (R)-(-)-3-(1-甲基丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物QS)的制備 將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(9.35g，75mmol，Avocado A11923 lot D14N12)在甲苯(50mL，F(xiàn)isher T290-4，lot041983)中的溶液加入到(R)-(-)-2-丁胺(5.45g，74mmol，Lancaster 3889 lot FA018393)在丙酮(24mL，EMD AX0115-1，lot 4215432)中的溶液內(nèi)。加熱回流混合物24小時(shí)。冷卻混合物到0℃，抽濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)沖洗，在高真空下干燥(13.28g)。將固體物懸浮于乙醇中(60mL，ADSO-7，lot5730)，加熱回流該懸浮液。然后加水(0.1mL)得到清澈溶液。緩慢冷卻混合物到0℃，抽濾收集固體物，用EtOH(2×10mL)沖洗，在真空烘箱中于60℃干燥20小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎固體(10.51g，53.82mmol，73％)。
1H NMR(300MHz，D2O)δ0.92(t，J＝7.6Hz，3H)，1.28(d，J＝6.3Hz，3H)，1.48-1.63(m，1H)，1.71-1.85(m，1H)，2.10(q，J＝7.7Hz，2H)，3.00(t，J＝7.3Hz，2H)，3.11-3.29(m，3H)；13C NMR(75MHz，D2O)δ9.2，15.3，21.9，26.0，43.6，48.2，56.2；ES-MS 194(M-H)；[α]D＝-1.2±0.1(c＝0.0157，H2O). (1E，3S)-3-氨基-4-苯基丁-1-烯-1-磺酸(化合物QT)的制備 在-78℃，向甲磺酸酯(4.17mL，40.3mmol)溶液中加入n-BuLi(24mL，60mmol，2.5M THF溶液)。攪拌混合物15分鐘，然后逐滴加入氯膦酸酯。使反應(yīng)緩慢升溫到室溫過夜。加入NH4Cl溶液，反應(yīng)物用EtOAc提取。有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并且濃縮。粗品使用Hex∶EtOAc 50/50進(jìn)行柱純化，得到2.5g(50％收率)需要產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.37(t，J＝7.0Hz，6H)，1.44(t，J＝7.0Hz，3H)，3.71(d，J＝17.0Hz，2H)，4.23(m，4H)，4.43(q，J＝2H). 在2小時(shí)內(nèi)，向上述酯(7.2g，25.77mmol)在CH2Cl2(60mL)中的冷(-78℃)溶液內(nèi)緩慢加入Dibal(39mL，1M環(huán)己烷溶液)。加畢后，在-78℃攪拌肺炎1小時(shí)，然后在-78℃下用MeOH小心猝滅。向所形成的白色乳液中加入HCl(1M)(170mL)，攪拌混合物15分鐘，含水混合物用CH2Cl2提取。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過濾并進(jìn)行濃縮。粗產(chǎn)物使用己烷∶EtOAc 70∶30進(jìn)行柱純化，得到所要醛，為白色固體5g(78％收率)。
于0℃，向NaH(173mg，7.23mmol)的THF(5mL)懸浮液中逐滴加入膦酸酯(2.55g，9.46mmol)的THF(40mL)溶液。加畢，攪拌反應(yīng)15分鐘，然后一次性加入上述醛(1.2g，4.82mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物30分鐘，然后加水和EtOAc猝滅。有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并進(jìn)行濃縮。粗產(chǎn)物使用Hex∶EtOAc 90∶10---70∶30進(jìn)行柱純化，得到1.6g(93％)所要產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ1.1.32(m，12H0，3.00(m，2H)，4.05(m，2H)，4.60(m，1H)，4.70(bs，1H)，6.12(m，1H)，6.85(m，1H)，7.15-7.40(m，5H). 將上述磺內(nèi)酯(800mg，2.25mmol)在甲酸/水(5mL/0.2mL)混合液中的溶液加熱回流48小時(shí)，然后減壓濃縮。在劇烈攪拌下加入EtOH(15mL)，加熱回流30分鐘。冷卻懸浮液，然后加丙酮(5mL)稀釋，過濾。白色固體用EtOH和Et2O洗滌，之后在高真空下干燥，得到420mg(82％收率)。
1H NMR(D2O，500MHz)δ2.94(d，J＝7.3Hz，2H)，4.10(m，1H)，6.33(m，2H)，7.10-7.32(m，5H).13C(D2O，125MHz)δ38.53，52.82，127.77，129.10，129.71，132.70，134.50.ES-MS 226(M-1). (3S)-3-氨基-4-苯基丁烷-1-磺酸(化合物QU)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.4g，3.94mmol)在MeOH的攪拌溶液內(nèi)加入Pd/C(300mg)。在氫氣壓下攪拌懸浮液3小時(shí)，然后通過硅藻土過濾，濃縮濾液得到白色固體1.2g，86％收率。
1HNMR(CDCl3，500MHz)δ1.34(t，J＝7Hz，3H)，1.39(s，9H)，1.83(m，1H)，2.10(m，1H)，2.80(m，2H)，3.15(m，2H)，3.90(m，1H)，4.23(q，J＝7.0hz，2H)，4.40(bd，NH)，7.14-7.30(m，5H). 加熱上述磺內(nèi)酯(1.3g，3.63mmol)在甲酸/水(8mL/0.4mL)混合液中的溶液3天，然后減壓濃縮。在劇烈攪拌下加入EtOH(15mL)，加熱回流30分鐘。冷卻懸浮液，，然后加丙酮(5mL)稀釋，過濾。白色固體用EtOH和Et2O洗滌，之后在高真空下干燥，得到700mg(84％收率)。
1H NMR(D2O，500MHz)δ2.00(m，2H)，2.70和2.95(ABX，J＝15.0和8.0Hz，2H)，2.88(m，2H)，3.55(m，1H)，7.14-7.30(m，5H).13C(D2O，125MHz)δ27.82，38.18，47.29，52.25，127.70，129.22，129.48，135.33.ES-MS 228(M-1). 3-{[1-(3-氟苯基)丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物QV)的制備 向氨基酸(5g，48.54mmol)的THF(100mL)溶液中逐滴加入硼烷溶液(120mL，1M THF溶液)，加熱回流反應(yīng)混合物15小時(shí)。反應(yīng)物小心用MeOH猝滅，然后減壓濃縮。進(jìn)而再用MeOH和濃HCl稀釋，然后加熱回流1小時(shí)，減壓濃縮。殘留物(～6g)在泵真空下干燥，得到油狀體。
1H NMR(300MHz，D2O)δ0.81(d，J＝7.0Hz，3H)，1.88(m，1H)，2.75&2.92(ABX，J＝14.0&7.0Hz，2H)，3.53&3.45(ABX，J＝14.0和7.0Hz，2H). 將上述氨基醇粗品(6g，48mmol)在無(wú)水CHCl3中的溶液用HCl(g)飽和，然后在回流狀態(tài)下滴加SOCl2。加畢后，有白色固體沉淀出現(xiàn)?；亓?小時(shí)后，反應(yīng)混合物變?yōu)榍辶痢饪s反應(yīng)物，得到無(wú)色漿體，試用不同的溶劑體系都不能使之沉淀。1H、13C NMR和MS顯示為包括需要氯化物在內(nèi)的至少兩種產(chǎn)物的混合物。
將上述粗制氯化物在水(5mL)中的溶液逐滴加到攪拌著的N2SO3(8g，63.5mmol)的水(25mL)溶液內(nèi)。加畢后，攪拌回流反應(yīng)20分鐘，然后冷卻，減壓濃縮。加入16mL HCl(濃)來(lái)溶解氨基磺酸并沉淀無(wú)機(jī)鹽，濾除后者，濃縮濾液，然后加乙醇使氨基磺酸以白色固體形成析出，過濾收集。用EtOH和Et2O洗滌，然后在高真空下干燥，得到1.9g白色固體(25％收率，基于三步步驟)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.05(d，J＝7.0Hz，3H)，2.27(m，1H)，2.84&2.88(ABX J＝15.0和7.0Hz，2H)，2.86&3.10(ABX，J＝15.0和7.0Hz，2H).13NMR(125MHz，D2O)δ17.26，28.90，44.49，54.99.ES-MS 152(M-1). 4-(2-氨基乙基)庚-1，5-二烯-4-磺酸(化合物N2)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.0g，41mmol)在THF(150mL)中的-48℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，18mL，45mmol)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入烯丙基溴(3.5mL，41mmol)。在-48℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，之后緩慢加入水(100mL)?；厥沼袡C(jī)層，水層用EtOAc(3×100mL)提取。合并有機(jī)提取物，用硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸發(fā)。產(chǎn)物通過硅膠柱純化(90％己烷/EtOAc-70％己烷/EtOAc)，得到相應(yīng)的1，1-二烯丙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.73g)。
于0℃，利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向1，1-二烯丙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.73g，3.6mmol)的THF(5mL)溶液中加入氫氧化銨水溶液(28-30％NH3，21mL，180mmol)。0℃繼續(xù)攪拌溶液0.5小時(shí)。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。將殘留物溶于水(15mL)，然，溶液然后用EtOH(3×15mL)提取。回收水相，蒸發(fā)至干，冷凍干燥得到標(biāo)題化合物(493mg，63％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 5.81(m，2H)，5.04(m，4H)，3.08(m，2H)，2.37(t，4H，J＝8.3Hz)，1.86(m，2H)；13C(D2O，125MHz)δppm 133.40，119.81，62.21，38.38，35.86，31.97；ES-MS 217(M-1). 3-(1，1-二甲基-2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基-1-丙烷磺酸(化合物N3)的制備 用飽和K2CO3水溶液(50mL)和EtOAc(3×50mL)處理α-氨基異丁酸甲酯鹽酸鹽(10.0g，65.1mmol)。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)并在真空下干燥，得到α-氨基異丁酸甲酯。
向α-氨基異丁酸甲酯(3.58g，30.6mmol，得自步驟1)在甲苯/乙腈溶劑混合液(40mL，v/v＝1∶1)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.56g，29.1mmol)。攪拌回流該溶液過夜。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(6.35g，87％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.87(s，3H)，3.24(t，2H，J＝7.3Hz)，3.03(t，2H，J＝7.3Hz)，2.17(m，2H)，1.62(s，6H)；13C(D2O，125MHz)δppm172.44，62.64，54.21，48.12，42.16，22.01，21.47；ES-MS 238(M-1). 3-氨基-2-芐基-1-丙烷磺酸(化合物N4)的制備 向3-羥基丙腈(1g，14.06mmol)在THF(30mL)中的冷(-78℃)溶液內(nèi)逐滴加入雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰(1M THF溶液，28mL，28mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)后，逐滴加入芐基溴(1.67mL，14.06mmol)，溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，在該溫度下攪拌混合物過夜。反應(yīng)用1N HCl猝滅，進(jìn)而用EtOAc提取。有機(jī)層用1N HCl洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮。殘留物上硅膠柱(洗脫劑己烷∶EtOAc 70∶30-50∶50)，得到1.3g(69％)2-芐基-3-羥基丙腈。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.80(bs，1H)，2.95(m，3H)，3.77(m，2H)，7.20-7.35(m，5H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ34.71，37.03，61.98，120.78，127.58，129.06，129.25，136.71. 以8.5％的收率分離到二烷基化產(chǎn)物。
向2-芐基-3-羥基丙腈(得自步驟1，3g，24.75mmol)的EtOH(60mL)溶液中加入NH4OH水溶液(30％，20mL)，接著加入Ra-Ni(3g)。在氫氣壓下攪拌懸浮液15小時(shí)，之后過濾。濾液在高真空下濃縮，殘留產(chǎn)物(3-氨基-2-芐基-1-丙醇)無(wú)需純化直接用于下一步驟。
將3-氨基-2-芐基-1-丙醇(4.5g，27.23mmol)在無(wú)水CHCl3(24mL)中的溶液用HCl(g)飽和，隨后在回流狀態(tài)下逐滴加入SOCl2(5.2mL，71.0mmol)。繼續(xù)回流反應(yīng)2小時(shí)。然后濃縮反應(yīng)，得到漿體產(chǎn)物。如此得到的3-氯-2-芐基-1-丙胺粗品不進(jìn)行進(jìn)一步純化而直接用于下一步驟。
在回流狀態(tài)下，向Na2SO3(6.8g，54.46mmol)的水(25mL)溶液中逐滴加入3-氯-2-芐基-1-丙胺粗品(得自步驟3)的水(10mL)溶液。加畢后，攪拌回流反應(yīng)物1小時(shí)，然后冷卻，減壓濃縮。加入HCl(濃，16mL)來(lái)溶解氨基磺酸并沉淀無(wú)機(jī)鹽，濾除后者，濃縮濾液，然后加入乙醇。標(biāo)題氨基磺酸以白色固體形式沉淀析出，過濾收集，用EtOH和Et2O洗滌，之后在高真空下干燥，得到白色固體(1.87g，三步收率30％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ2.52(m，1H)，2.8(m，2H)，2.94(m，2H)，3.08&3.18(ABX，J＝13.0&7.0Hz，2H)，7.25-7.37(m，5H).13C NMR(125MHz，D2O)δ35.47，37.78，42.67，52.55，127.15，129.09，129.54，138.32.ES-MS 228(M-1). 1-氨基戊烷-3-磺酸(化合物N5)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.0g，41mmol)在無(wú)水THF(150mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，18mL，45mmol)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入碘乙烷(3.3mL，41mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物4小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，之后緩慢加入水(100mL)?；厥沼袡C(jī)層，水層用EtOAc(3×100mL)提取。合并有機(jī)提取物，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。殘留物通過硅膠柱純化(己烷/EtOAcv/v＝9∶1-v/v 8∶2)，得到1-乙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.19g，52％)。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向0℃的氫氧化銨水溶液(28-30％NH3，153mL，1.31mol)中加入1-乙基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(3.19g，26.4mmol)的THF(26mL)溶液。0℃攪拌溶液3小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。固體物用丙酮(150mL)處理，過濾收集，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(2.96g，67％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.21(m，2H)，2.83(m，1H)，2.09(m，2H)，1.93(m，1H)，1.63(m，1H)，1.03(t，3H，J＝7.3Hz)；13C(D2O，125MHz)δppm 59.39，37.75，26.90，22.87，10.69；ES-MS 166(M-1). 以β-氨基酸為原料合成化合物的通用步驟。

在1小時(shí)內(nèi)，向β-氨基酸(1equiv)在THF(1mL/mmol)中的冷(0℃)懸浮液內(nèi)逐滴加入硼酸四氫呋喃復(fù)合物溶液(1M，3-4mL/mmol＝3-11 equiv.β-氨基酸)。加畢后在室溫下攪拌混合物20分鐘，然后加熱回流22小時(shí)。混合物隨后冷卻到0℃，在30分鐘內(nèi)加入甲醇(2mL/mmol)。再加熱回流混合物20分鐘，接著濃縮，得到粘稠油體。將該油體與甲醇(3×200mL)一起蒸發(fā)。所得固體在真空下干燥，從而獲得相應(yīng)的3-取代的3-氨基-1-丙醇衍生物，為白色蠟狀固體(定量產(chǎn)率)。
向裝有3-取代的3-氨基-1-丙醇(1 equiv.)的燒瓶?jī)?nèi)緩慢加入HBr水溶液(48％，每當(dāng)量醇使用2mL)。加熱回流混合物6小時(shí)，然后濃縮至干。粗產(chǎn)物直接用于下一步驟。
將1-取代的3-溴-1-丙胺鹽酸鹽(得自步驟2)加到亞硫酸鈉(1.0 equiv.，相對(duì)于1-取代的3-溴-1-丙胺)在水和1，4-二烷中的溶液內(nèi)。加熱回流混合物6小時(shí)，然后濃縮至干。殘留物用濃HCl處理。過濾除去無(wú)機(jī)物，將濾液用乙醇處理，使相應(yīng)的磺酸沉淀析出。將粗制磺酸懸浮于乙醇中，加熱回流混合物1小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾收集固體物，用乙醇沖洗，在真空烘箱中于60℃干燥過夜，得到相應(yīng)的3-取代的3-氨基-1-丙烷磺酸，為白色細(xì)碎結(jié)晶固體。
3-氨基-1-丁烷磺酸，(化合物N6) 總收率5.4％(0.29g)；NMR(500MHz，D2O)δ1.22(d，J＝6.8Hz，3H)，1.85-1.93(m，1H)，1.99-2.06(m，1H)，2.86-2.96(m，2H)，3.04-3.44(m，1H)；13C(125MHz，D2O)δ17.6，29.5，46.9，47.3；ES-MS 152(M-1) 3-氨基-3-環(huán)己基-1-丙烷磺酸，(化合物N10) 總收率60％(14.5g)；1H NMR(500MHz，D2O)δ0.87-1.04(m，3H)，1.07-1.17(m，2H)，1.47-1.65(m，6H)，1.84-1.92(m，1H)，1.99-2.06(m，1H)，2.81-2.91(m，2H)，3.11-3.15(m，1H)；13C(125MHz，D2O)δ25.0，25.5，25.6，25.7，27.4，28.2，39.1，47.2，55.5；ES-MS220(M-1) 3-氨基-1-庚烷磺酸，(化合物N16) 總收率48％(3.1g)；1H NMR(500MHz，D2O)δ0.73(t，J＝5.9Hz，3H)，1.20(極寬單峰，4H)，1.46-1.57(m，2H)，1.87-1.99(m，2H)，2.86(t，J＝7.8Hz，2H)，3.26-3.31(m，1H)；13C(125MHz，D2O)δ14.1，21.8，26.4，27.4，31.3，47.0，50.8；ES-MS(M-1) 3-氨基-5-甲基-1-己烷磺酸，(化合物N17) 1H NMR(500MHz，D2O)δ0.76-0.77(m，6H)，1.37(oct，J＝7.4Hz，2H)，1.54(hep，J＝6.8Hz，1H)，1.92(dec，J＝7.3Hz，2H)，2.84-2.90(m，2H)，3.56(qt，J＝6.7Hz，1H)；13C(125MHz，D2O)δ21.3，31.8，23.9，27.9，41.0，46.9，49.1；ES-MS 194(M-1) 3-環(huán)庚基甲基-1-丙烷磺酸(化合物N7)的制備 將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.20g，9.5mmol)的甲苯(6mL)溶液內(nèi)加到環(huán)庚烷甲胺(1.19g，9.35mmol)的丙酮(6mL)溶液中。攪拌回流混合物4小時(shí)。加入乙醇(10mL)，冷卻混合物到室溫。抽濾收集固體物，用乙醇(2×5mL)沖洗，進(jìn)而在真空烘箱中于60℃干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.83g，79％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.18-1.20(m，2H)，1.41-1.79(m，11H)，1.95(br s，2H)，2.64(br s，2H)，2.74-2.76(m，2H)，3.04(br s，2H)，5.51(br s，2H)；13C(125MHz，DMSO-d6)δ21.6，25.3，27.8，31.1，36.1，47.6，49.4，53.0；ES-MS 248(M-1) 3-[(R)-(3-芐硫基-1-羥基-2-丙基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物N8)的制備 將S-芐基-L-半胱醇(1g，4.9mmol)在丙酮(6mL)中的溶液通過紙過濾。向溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.70g，5.5mmol)的甲苯(6mL)溶液。攪拌回流混合物4小時(shí)。加入乙醇(5mL)，冷卻混合物到室溫。過濾收集固體物，用乙醇(2×2.5mL)沖洗，進(jìn)而在真空烘箱中于60℃干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.85g，54％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.94(qt，J＝6.7Hz，2H)，2.59-2.74(m，4H)，3.08(m，2H)，3.22(m，1H)，3.34(s，1H)，3.82(t，J＝3.7Hz，1H)，5.37(T，J＝4.7Hz，1H)，7.22-7.36(m，5H)，8.64(BR S，2H)；13C(125MHz，DMSO-d6)δ21.9，28.2，35.3，44.8，49.1，57.3，57.5，126.7，128.2，128.7，137.8；ES-MS 318(M-1)；[α]D-13.5±0.1(c＝0.0103，水). 1-氨基-5-甲基-3-己烷磺酸(化合物N9)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(10g，82mmol)在無(wú)水THF(300mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，36mL，90mmol)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入1-碘-2-甲基丙烷(9.5mL，82mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物4小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，之后緩慢加入水(200mL)。回收有機(jī)層，水層用EtOAc(3×100mL)提取。合并有機(jī)提取物，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。殘留物通過硅膠柱純化(100％己烷-80％己烷/EtOAc)，得到1-異丁基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.3g，2％)。
步驟2利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向0℃的氫氧化銨水溶液(28-30％NH3，10mL，85mmol)中加入1-異丁基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.3g，1.7mmol)的THF(5mL)溶液。0℃攪拌溶液1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。固體物在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(0.258g，78.7％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.21(m，2H)，2.95(m，1H)，2.06(m，2H)，1.71(m，2H)，1.45(m，1H)，0.94(d，3H，J＝6.3Hz)，0.94(d，3H，J＝6.3Hz)，0.90(d，3H，J＝6.3Hz)；13C(D2O，125MHz)δppm 56.19，38.69，37.58，27.77，25.19，22.55，20.97；ES-MS 196(M+1). 6-(氨基甲基)-3，4-二甲基環(huán)己-3-烯-1-磺酸(化合物N11)的制備 向烯丙醇(20mL，300mmol)和NEt3(26mL，186mmol)在THF(150mL)中的冷(-40℃)溶液內(nèi)逐滴加入2-氯乙烷磺酰氯(10.4mL，100mmol)。反應(yīng)在-40至-20℃下攪拌5小時(shí)，用HCl(1M)猝滅，進(jìn)而用EtOAc提取。水洗有機(jī)層，硫酸鈉干燥。產(chǎn)物使用己烷/EtOAc 80/20周圍洗脫劑通過柱層析純化，得到乙烯基磺酸烯丙酯，為淡黃色油體(7g，47％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ4.55(m，2H)，5.34(m，2H)，5.85(m，1H)，6.06(d，J＝6.0Hz，1H)，6.35(d，J＝17.0Hz，1H)，6.50(dd，J＝17&9.5Hz，1H). 向乙烯磺酸烯丙酯(3g，20.24mmol)在CH2Cl2(1L)中的脫氣(通過吹入氮?dú)馔瓿?溶液中加入Grubbs催化劑(170mg，0.2mmol)。加熱回流反應(yīng)2小時(shí)，然后濃縮。將殘留物上硅膠柱，使用己烷/EtOAc 80/20-50/50為洗脫劑，從而得到1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯2.2g(92％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ5.11(dd，J＝2.2&2.2Hz，2H)，6.80(dt，J＝6.6&2.2Hz，1H)，7.00(dt，J＝6.6&2.0Hz，1H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ72.54，124.76，137.04. 將1，3-丙烯磺內(nèi)酯(1.44g，12mmol)、2，3-二甲基-1，3-丁二烯(9.5mL，84mmol)在30mL甲苯中的混合液放入密封管中，在150℃加熱15小時(shí)。除去溶劑，將殘留物上硅膠柱，使用己烷/EtOAc 80∶20-70∶30為洗脫劑，得到700mg(86％)狄爾斯-阿德耳加成物。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.62(s，3H)，1.66(s，3H)，1.88-1.92(m，1H)，2.28-2.42(m，3H)，3.12-3.18(m，1H)，3.48(q，J＝7.6Hz，1H)，3.96(t，J＝8.5Hz，1H)，4.40(dd，J＝8.50&7.25Hz，1H).13C NMR(125MHz，CDCl3)δ19.13，19.25，27.20，30.79，34.18，53.04，72.61，122.70，123.44. 利用注射泵，向氫氧化銨水溶液(28-30％水溶液，22mL，168mmol)在THF與EtOH共溶劑(20mL，v/v＝1∶1)中的冰冷溶液內(nèi)緩慢加入步驟3的狄爾斯-阿德耳加成物(680mg，3.36mmol)的溶液。加畢(2小時(shí))，再攪拌反應(yīng)2小時(shí)，直至TLC顯示起始原料完全耗盡。蒸發(fā)溶劑，將所得固體懸浮在EtOH、丙酮與乙醚的混合溶劑中，加熱15分鐘，然后冷卻。過濾收集固體物，用乙醚洗滌，干燥得到標(biāo)題化合物(450mg，61％)。
1H MR(500MHz，D2O)δ1.49(s，3H)，1.52(s，3H)，1.86-1.92(m，1H)，2.14-2.28(m，3H)，2.44-2.49(m，1H)，2.80(dd，J＝13.0&6.0Hz，1H)，3.10-3.16(m，1H)，3.27(dd，J＝14.0&6.0Hz，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ18.02，18.28，28.93，32.36，34.69，38.79，57.85，123.09，123.72.ES-MS 218(M-1). 6-[(叔丁基氨基)甲基]-3，4-二甲基環(huán)己-3-烯-1-磺酸(化合物N13)的制備 向得自化合物N11的合成步驟3的狄爾斯-阿德耳加成物(607mg，3mmol)在頻哪酮(6mL)中的溶液內(nèi)加入叔丁胺(381μL，3.6mmol)。攪拌回流混合物3小時(shí)，然后再加入381μL胺。再攪拌回流反應(yīng)2小時(shí)，然后濃縮。將固體懸浮在EtOH中，加熱15分鐘，然后冷卻。過濾收集固體物，得到標(biāo)題化合物(720mg，87％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.22(s，9H)，1.57(s，3H)，1.60(s，3H)，1.84-1.90(m，1H)，2.03(m，2H)，2.36-2.42(m，1H)；2.58(m，1H)，2.64(m，1H)，2.82(m，1H)，3.00(m，1H)；13CNMR(125MHz，DMSO-d6)δ19.33，19.48，25.81，29.67，31.78，38.40，41.38，56.10，57.64，123.30，124.02.ES-MS 274(M-1). 6-(2-金剛烷基氨基)甲基-3，4-二甲基環(huán)己-3-烯-1-磺酸(化合物N14)的制備 向得自化合物N11的合成步驟3的狄爾斯-阿德耳加成物(607mg，3mmol)在頻哪酮(6mL)中的溶液內(nèi)加入2-金剛烷胺(544mg，3.6mmol)。攪拌回流混合物5小時(shí)，然后濃縮。將固體懸浮在MeOH中，加熱15分鐘，之后冷卻。過濾收集固體物，得到標(biāo)題化合物(260mg，24％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.25-1.69(m，9H)，1.70(m，5H)，1.80(s，3H)，1.64(s，3H)，2.00(m，1H)，2.08(m，2H)，2.23(m，2H)，2.41(m，1H)，2.50(s，1H)，2.73(m，2H)，2.82(m，1H)，3.02(m，1H)，3.20(m，1H)，8.49(bs，1H)，9.31(bs，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ19.30，19.46，26.82，27.12，28.15，29.64，30.03，30.25，30.47，31.59，36.69，36.89，37.29，38.89，46.14，57.43，62.73，123.23，124.04.ES-MS 352(M-1). 1-氨基-4-羥基-4-甲基-3-戊烷磺酸(化合物N15)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.0g，41mmol)在無(wú)水THF(150mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，18mL，45mmol)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入丙酮(3.0mL，41mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物4小時(shí)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到0℃，緩慢加入水(100mL)。分離有機(jī)層，水層用EtOAc(3×100mL)提取，合并有機(jī)層，合并的有機(jī)提取物用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。殘留物通過硅膠柱分離(100％己烷-80％己烷/EtOAc)，得到相應(yīng)的磺內(nèi)酯衍生物(4.36g，60％)。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向0℃的氫氧化銨水溶液(28-30％NH3，140mL，12.1mol)中加入步驟1的磺內(nèi)酯衍生物(4.36g，24.2mmol)的THF(25mL)溶液。0℃攪拌混合物1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。固體物在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(4.37g，92％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.10(m，1H)，3.05(m，1H)，2.80(m，1H)，1.26(d，3H，J＝8.8Hz)，1.19(d，3H，J＝8.8Hz)；13C(D2O，125MHz)δppm 72.26，67.22，39.38，26.80，26.10，25.55；ES-MS 198(M+1). 3-(2-芐硫基-1-乙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N18)的制備 將S-芐基胱胺鹽酸鹽(2.40g，11.8mmol)溶于水，利用碳酸鉀調(diào)節(jié)其pH呈堿性。含水混合物用乙酸乙酯(3×15mL)提取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓除去溶劑。殘留物為淡黃色油體與白色固體的混合物，將其于乙腈(10mL)混合，混合物通過濾紙過濾，將濾紙上的殘留物用甲苯(10mL)沖洗。向均相有機(jī)溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.00mL，含有11mmol 1，3-丙烷磺內(nèi)酯)。攪拌回流混合物20小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用丙酮(2×5mL)沖洗，進(jìn)而真空干燥1小時(shí)。將所得固體懸浮于乙醇(10mL)，加熱回流混合物1小時(shí)，然后冷卻到室溫。抽濾收集固體物，用乙醇(2×3mL)洗滌，在60℃干燥4小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.60，47％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.93(qt，J＝6.7Hz，2H)，2.60-2.64(m，4H)，3.08(v br d，4H)，3.81(s，2H)，7.26(t，J＝7.6Hz，1H)，7.32-7.39(m，4H)，8.62(br s，2H)；13C(125MHz，DMSO-d6)δ21.7，26.2，34.5，45.4，46.7，48.9，127.0，128.5，129.0，138.1；ES-MS 288(M-1). 6-(1-金剛烷基氨基)甲基-3，4-二甲基環(huán)己-3-烯-1-磺酸(化合物N19)的制備 向得自化合物N11的制備步驟3的狄爾斯-阿德耳加成物(607mg，3mmol)的頻哪酮(6mL)溶液中加入1-金剛烷胺(544mg，3.6mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物5小時(shí)，然后濃縮至干。將固體殘留物懸浮在MeOH中，加熱15分鐘，然后冷卻到室溫，過濾收集，得到標(biāo)題化合物(260mg，24％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.54-1.66(m，11H)，1.75(s，3H)，1.77(s，3H)，1.84(m，1H)，2.10(s，4H)，2.22(m，2H)，2.40(m，1H)，2.58(m，1H)，2.64(m，1H)，2.84(m，1H)，3.00(m，1H)，8.30(bs，1H)，9.40(bs，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ19.34，19.48，29.05，29.36，31.63，35.84，38.42，38.55，39.54，56.23，57.71，123.33，124.01.ES-MS 352(M-1). (Z)-3-(叔丁基氨基)丙-1-烯-1-磺酸(化合物N20)的制備 向烯丙基溴(21.6mL，250mmol)在EtOH/H2O溶劑混合液(200mL，v/v＝3∶1)中的沸騰溶液中逐滴加入亞硫酸鈉(15.75g，125mmol)的水(60mL)溶液。加熱回流反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后減壓濃縮至干。將得到的白色固體懸浮在EtOH乙醇水溶液中(130mL，90％)，加熱30分鐘，冷卻到室溫，過濾收集，得到丙-2-烯-1-磺酸鈉(14g，76％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ3.55(d，J＝7.3Hz，2H)，5.35-5.41(m，2H)，5.85-6.00(m，1H). 在攪拌下，向得到步驟1的磺酸鹽(12.0g，84mmol)在水(48mL)中的攪拌溶液內(nèi)逐滴加入溴(約4.5mL)，直至溶液變?yōu)闇\棕色。室溫?cái)嚢柙撊芤?小時(shí)。加入少量Na2SO3來(lái)分解過量的溴。隨后真空除去溶劑，得到白色固體。無(wú)需進(jìn)一步純化，將如此得到的2，3-二溴-1-丙烷磺酸鹽在攪拌下用濃HCl(50mL)室溫處理1天。過濾除去沉淀物(無(wú)機(jī)鹽)。濃縮濾液得到黃色漿體。不用再進(jìn)一步純化，將這種漿體殘留物直接在140-150℃下進(jìn)行真空蒸餾，得到2-溴-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(6.5g，32％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ3.52(dd，J＝14.0&7.0Hz，1H)，3.88(dd，J＝14.0&7.0Hz，1H)，4.50-4.60(m，1H)，4.70-4.82(m，2H). 向2-溴-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(得自步驟2，8.0g，39.80mmol)的甲苯(200mL)溶液中加入NEt3(9mL，65mmol)。攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)(或者攪拌到起始原料耗盡為止)，用HCl水溶液(1M)稀釋，繼而用EtOAc提取兩次。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮得到1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯(4.5g，94％)，為白色固體。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ5.11(dd，J＝2.2&2.2Hz，2H)，6.80(dt，J＝6.6&2.2Hz，1H)，7.00(dt，J＝6.6&2.0Hz，1H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ72.54，124.76，137.04. 向1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯(得自步驟3，36mg，3mmol)的THF(5mL)溶液中加入叔丁胺(316μL，3mmol)?；亓鞣磻?yīng)混合物4小時(shí)，然后濃縮至干。將殘留的固體物懸浮在EtOH、丙酮與乙醚的溶劑混合液中，加熱15分鐘，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用乙醚洗滌，干燥后得到標(biāo)題化合物(130mg，22％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.24(s，9H)，4.00(d，J＝7.0Hz，2H)，5.94(m，1H)，6.50(d，J＝11.0Hz，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ25.08，37.84，57.63，127.81，136.08.ES-MS 192(M-1). (1Z)-(3-(1-金剛烷基氨基)丙-1-烯-1-磺酸(化合物N21)的制備 向1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯(得自化合物N20的制備步驟3，360mg，3mmol)的THF(5mL)溶液中加入1-金剛烷胺(545mg，3.6mmol)。回流反應(yīng)混合物6小時(shí)，然后濃縮至干。將殘留的固體物懸浮在EtOH與乙醚(2.5mL/2.5mL)的溶劑混合液中，加熱回流15分鐘，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用乙醚洗滌，干燥后得到標(biāo)題化合物(130mg，22％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.40-1.70(m，12H)，2.00(m，3H)，3.7(d，J＝7.0Hz，2H)，5.90(m，1H)，6.30(d，J＝11.0Hz，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ28.95，29.23，35.05，35.68，36.67，40.05，40.75，128.00，132.98.ES-MS270(M-1). (1Z)-3-氨基丙-1-烯-1-磺酸(化合物N22)的制備 向1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯(得自化合物N20的制備步驟3，360mg，3mmol)在THF和EtOH的溶劑混合液(10mL，v/v＝1∶1)中的溶液內(nèi)緩慢加入氫氧化銨水溶液(28％，26mL，200mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物4小時(shí)，然后濃縮至干。將殘留的固體物懸浮在EtOH中，加熱回流15分鐘，然后冷卻。過濾收集固體物，用乙醚洗滌，干燥后得到標(biāo)題化合物(500mg，91％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ3.95(d，J＝6.3Hz，2H)，5.96(m，1H)，6.44(d，J＝11.5Hz，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ36.25，129.10，135.10.ES-MS 136(M-1). 反式-4-氨基-1-羥基-1-苯基-2-丁烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N23)、順式-4-氨基-1-羥基-1-苯基-2-丁烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N24)和4-氨基-1-羥基-1-苯基-2-丁烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N25)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.0g，41mmol)在無(wú)水THF(150mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，18mL，45mmol)。在-78℃攪拌混合物0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入苯甲醛(4.2mL，41mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物4小時(shí)，然后溫?zé)岬?℃，緩慢加入水(100mL)。分離有機(jī)層，水層用EtOAc(3×100mL)提取，合并有機(jī)相和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。殘留物通過硅膠柱分離(100％己烷-70％己烷/EtOAc)，得到相應(yīng)的磺內(nèi)酯衍生物(3.04g，33％)。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向0℃的氫氧化銨水溶液(28-30％NH3，78mL，665mmol)中加入磺內(nèi)酯衍生物(得自步驟1，3.04g，13.3mmol)的THF(15mL)溶液。0℃攪拌混合物1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。采用制備HPLC分離非對(duì)映體混合物，將相應(yīng)的餾分凍干，得到下面三個(gè)化合物 反式-4-氨基-1-羥基-1-苯基-2-丁烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N23)對(duì)映體混合物(204mg)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm7.30(m，5H)，4.87(d，1H，J＝8.0Hz)，3.17(m，1H)，2.86(m，1H)，2.66(m，1H)，1.74(m，1H)，1.65(m，1H)；13C(D2O，125MHz)δppm 139.51，128.93，127.65，73.82，63.14，37.96，25.40；ES-MS 244(M-1). 順式-4-氨基-1-羥基-1-苯基-2-丁烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N24)對(duì)映體混合物(131mg)。
1H NMR(D2O，500MEz)δppm7.30(m，4H)，7.26(m，1H)，5.30(d，1H，J＝2.8Hz)，3.05(m，1H)，2.94(m，1H)，2.66(m，1H)，1.96(m，1H)；13C(D2O，125MHz)δppm 141.35，128.84，128.05，125.91，71.54，63.65，38.44，22.22；19F NMR δppm-76.31；ES-MS 244(M-1). 4-氨基-1-羥基-1-苯基-2-丁烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N25)非對(duì)映體混合物(165mg)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.30(m，5H)，5.30(d，0.5H，J＝2.8Hz)，4.87(d，0.5H，J＝8.0Hz)，3.17(m，0.5H)，3.05(m，0.5H)，2.94(m，0.5H)，2.86(m，0.5H)，2.66(m，1H)，1.96(m，1H)，1.74(m，0.5H)，1.65(m，0.5H)；13C(D2O，125MHz)δppm 141.35，128.84，128.05，125.91，71.54，63.65，38.44，22.22；ES-MS 244(M-1). 3-氨基-1-苯基-1-丁烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N26)的制備 向α-甲苯磺酰氯(5g，26mmol)在無(wú)水二氯甲烷(100mL)中的0℃溶液內(nèi)加入乙醇(3mL，52mmol)和三乙胺(5.5mL，39mmol)。0℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后加入水(100mL)。分離有機(jī)層，用2N HCl(1×100mL)和鹽水(1×100mL)提取。有機(jī)層用Na2SO4干燥，減壓蒸發(fā)，經(jīng)真空干燥后得到苯甲磺酸乙酯(4.76g，91％)。
向苯甲磺酸乙酯(4.76g，23.8mmol)在無(wú)水THF(100mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，10mL，25mmol)。在-78℃攪拌混合物1小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入烯丙溴(3.1mL，35.7mmol)。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌5小時(shí)，然后溫?zé)岬?℃，緩慢加入水(60mL)。分離有機(jī)層，水層用EtOAc(3×60mL)提取，合并有機(jī)相和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)至干，得到相應(yīng)的磺內(nèi)酯(4.83g，80％)。
于0℃，向氫氧化銨水溶液(28-30％NH3，87mL，750mmol)中加入上述磺內(nèi)酯(3.19g，15.0mmol)在THF(25mL)和EtOH(20mL)中的溶液。70℃攪拌該溶液過夜。將溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。固體殘留物采用制備HPLC純化，合并相應(yīng)的餾分，凍干后得到非對(duì)映體混合物(170mg)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.28(m，5H)，4.02(m，0.8H)，3.92(m，0.2H)，3.52(m，0.2H)，3.27(m，0.3H)，2.94(m，0.5H)，2.44(m，1H)，2.21(m，1H)，1.12(d，1.5H，J＝6.3Hz)，1.08(d，0.9H，J＝6.3Hz)，1.00(d，0.6H，J＝6.3Hz)；13C(D2O，125MHz)δppm 135.15，133.87，129.37，129.35，129.09，129.00，128.91，128.81，128.79，128.40，65.84，63.60，63.02，62.66，46.67，45.61，39.18，35.84，34.85，21.15，18.56，16.64；ES-MS 228(M-1). 4-氨基-4-甲基-1-苯基-1-戊烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N27)的制備 向α-甲苯磺酰氯(10g，52mmol)在無(wú)水二氯甲烷(200mL)中的0℃溶液內(nèi)加入乙醇(6mL，104mmol)和三乙胺(11mL，78mmol)。0℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后加入水(200mL)。分離有機(jī)層，用2NHCl(1×200mL)和鹽水(1×200mL)提取。有機(jī)相用Na2SO4干燥，減壓蒸發(fā)，經(jīng)真空干燥后得到苯甲磺酸乙酯(9.19g，93％)。
向苯甲磺酸乙酯(4.59g，22.9mmol)在無(wú)水THF(100mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，10mL，25mmol)。在-78℃攪拌混合物1小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入1-溴-3-甲基-2-丁烯(2.9mL，25.0mmol)。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌4小時(shí)，然后溫?zé)岬?℃，緩慢加入水(60mL)。分離有機(jī)層，水層用EtOAc(3×60mL)提取，合并有機(jī)層和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)，得到4-甲基-1-苯基戊-3-烯-1-磺酸乙酯(3.93g，64％)。
攪拌回流4-甲基-1-苯基戊-3-烯-1-磺酸乙酯(3.01g，11.2mmol)在2％TFA/CH2Cl2(20mL)中的溶液24小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑。將所得油粗品溶于20％TFA/CH2Cl2(20mL)。攪拌回流該溶液24小時(shí)。冷卻到室溫后，加入水(20mL)。分離有機(jī)相，用飽和NaHCO3溶液(1×20mL)提取。有機(jī)層用Na2SO4干燥，蒸發(fā)，然后真空干燥，從而得到相應(yīng)的磺內(nèi)酯衍生物(2.42g，90％)。
于0℃，向氫氧化銨水溶液(28-30％NH3，78mL，665mmol)中加入得自步驟3的磺內(nèi)酯衍生物(2.42g，10.1mmol)在THF(25mL)和EtOH(20mL)中的溶液。70℃攪拌該溶液過夜。將溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。固體殘留物采用制備HPLC純化，合并相應(yīng)的餾分，凍干后得到標(biāo)題化合物(222mg)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.27(m，5H)，3.82(dd，1H，J＝3.2Hz，11.5Hz)，2.14(m，1H)，1.98(m，1H)，1.32(m，1H)，1.10(m，1H)，1.02(s，6H)；13C(D2O，125MHz)δppm 135.70，129.50，128.92，128.77，128.34，71.34，40.13，27.74，27.54，25.24；ES-MS 256(M-1). 3-氨基-1-苯基-1-戊烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N30)的制備 向α-甲苯磺酰氯(10g，52mmol)在無(wú)水二氯甲烷(200mL)中的0℃溶液內(nèi)加入乙醇(6mL，104mmol)和三乙胺(11mL，78mmol)。0℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后加入水(100mL)。分離有機(jī)層，用2NHCl(1×100mL)和鹽水(1×100mL)提取。有機(jī)相用Na2SO4干燥，減壓蒸發(fā)，經(jīng)真空干燥后得到苯甲磺酸乙酯(10.47g，99％)。
向苯甲磺酸乙酯(4.70g，23.5mmol)在無(wú)水THF(100mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，10mL，25mmol)。在-78℃攪拌該溶液1小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入巴豆基溴(2.4mL，23.5mmol)。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌5小時(shí)，然后溫?zé)峄旌衔锏?℃，緩慢加入水(60mL)。分離有機(jī)層，水層用EtOAc(3×60mL)提取，合并有機(jī)層和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)，得到1-苯基丁-3-烯-1-磺酸乙酯(4.06g，70％)。
攪拌回流1-苯基丁-3-烯-1-磺酸乙酯(4.06g，11.2mmol)在2％TFA/CH2Cl2(30mL)中的溶液30小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑。將殘留油狀物溶于20％TFA/CH2Cl2(30mL)。攪拌回流該溶液36小時(shí)。冷卻到室溫后，加入水(30mL)。分離有機(jī)相，用飽和NaHCO3溶液(1×30mL)提取。有機(jī)相用Na2SO4干燥，蒸發(fā)至干，進(jìn)一步在真空下干燥。殘留物采用快速色譜純化(100％己烷-80％己烷/乙酸乙酯)，從而得到磺內(nèi)酯衍生物的混合物(1.36g)。
向氫氧化銨(28-30％NH3，30mL，260mmol)中加入上述磺內(nèi)酯(1.38g，6.1mmol)在1，4-二烷(20mL)中的溶液。室溫?cái)嚢柙撊芤?0小時(shí)。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。將殘留物溶于水(30mL)，進(jìn)而用乙酸乙酯(30mL)提取該水溶液。分離水相，蒸發(fā)至干。固體殘留物采用制備HPLC純化，合并相應(yīng)的餾分，凍干后得到標(biāo)題化合物(72mg)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 7.29(m，5H)，4.07(m，1H)，2.99(m，1H)，2.35(m，2H)，1.49(m，1H)，0.75(t，3H，J＝7.3Hz)；13C(D2O，125MHz)δppm 134.80，129.41，129.03，128.84，62.90，51.68，33.37，25.91，8.66；ES-MS 242(M-1). 4-氨基-1-苯基-1-戊烷磺酸，三氟乙酸鹽(化合物N31)的制備 向α-甲苯磺酰氯(10g，52mmol)在無(wú)水二氯甲烷(200mL)中的0℃溶液內(nèi)加入乙醇(6mL，104mmol)和三乙胺(11mL，78mmol)。0℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后加入水(100mL)。分離有機(jī)層，用2NHCl(1×100mL)和鹽水(1×100mL)提取。合并有機(jī)相和提取物，用Na2SO4干燥，減壓蒸發(fā)，經(jīng)真空干燥得到苯甲磺酸乙酯(10.47g，99％)。
向苯甲磺酸乙酯(4.70g，23.5mmol)在無(wú)水THF(100mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，10mL，25mmol)。在-78℃攪拌混合物1小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入巴豆基溴(2.4mL，23.5mmol)。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌5小時(shí)，然后溫?zé)岬?℃，緩慢加入水(60mL)。分離有機(jī)層，水層用EtOAc(3×60mL)提取，合并有機(jī)層和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)，得到1-苯基丁-3-烯-1-磺酸乙酯(4.06g，70％)。
攪拌回流1-苯基丁-3-烯-1-磺酸乙酯(4.06g，11.2mmol)在2％TFA/CH2Cl2(30mL)中的溶液30小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑。將所得油溶于20％TFA/CH2Cl2(30mL)。攪拌回流該溶液36小時(shí)，然后冷卻到室溫，加入水(30mL)。分離有機(jī)相，用飽和NaHCO3溶液(1×30mL)提取。有機(jī)相用Na2SO4干燥，蒸發(fā)至干，進(jìn)一步在真空下干燥。殘留物采用快速色譜純化(100％己烷-80％己烷/乙酸乙酯)，得到磺內(nèi)酯衍生物(1.36g)。
向氫氧化銨(28-30％NH3，30mL，260mmol)中加入上述磺內(nèi)酯(1.38g，6.1mmol)在1，4-二烷(20mL)中的溶液。室溫?cái)嚢柙撊芤?0小時(shí)。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。將殘留物溶于水(30mL)，所得溶液用乙酸乙酯(30mL)提取。回收有機(jī)層，用硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)和真空干燥，得到丁烷磺內(nèi)酯(0.777g)。
向氫氧化銨(28-30％NH3，15mL，130mmol)中加入步驟4中得到的磺內(nèi)酯衍生物(0.777g，3.4mmol)在1，4-二烷(20mL)中的溶液。85℃攪拌該溶液48小時(shí)。將溶劑與EtOH一起蒸發(fā)，殘留固體物利用制備HPLC純化。合并相應(yīng)的餾分，凍干后得到標(biāo)題化合物(213mg)，為標(biāo)題化合物的一對(duì)非對(duì)映體。
1H NMR (D2O，500MHz)δppm 7.26(m，5H)，3.87(dd，1H，J＝3.6Hz，11.4Hz)，3.66(m，1H)，2.07(m，2H)，1.25(M，1H)，1.11(m，1H)，0.94(d，3H，J＝6.3Hz)；13C(D2O，125MHz)δppm 135.61，129.52，128.77，128.34，67.31，66.37，35.47，26.32，21.97；ES-MS 243(M-1). 3-(氨基甲基)二環(huán)[2.2.2]辛-5-烯-2-磺酸(化合物N32)的制備 將1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯(得自化合物N20的制備步驟3，720mg，6mmol)和2，3-環(huán)己二烯(4.0mL，42mmol)在甲苯(20mL)中的混合物放入密封管內(nèi)，在150℃加熱30小時(shí)。除去溶劑，將殘留物上硅膠柱，使用己烷/EtOAc 80/20-70/30作為洗脫劑，得到相應(yīng)的狄爾斯-阿德耳加成物(1.1g，92％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.30-1.62(m，4H)，2.76(m，1H)，3.00(m，1H)，3.18(，1H)，3.48(dd，J＝1.0.0&2.0Hz，1H)，3.94(dd，J＝10.0&3.5Hz，1H)，4.30(t，J＝8.5Hz，1H)，6.30(t，J＝8.5Hz，1H)，6.41(t，J＝8.5Hz，1H). 將步驟1中獲得的狄爾斯-阿德耳加成物(1.1g，5.49mmol)在THF與EtOH溶劑混合液(20mL，v/v＝1∶1)中的溶液緩慢加到氫氧化銨水溶液(28％，32mL，253mmol)中。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物7小時(shí)，減壓濃縮。將所得固體懸浮在EtOH中，加熱回流15分鐘，然后冷卻到室溫。過濾收集固體，用乙醚洗滌，然后干燥，得到標(biāo)題化合物(700mg，59％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.1.0-1.28(m，2H)，1.40-1.58(m，2H)，2.40(m，1H)，2.56(m，1H)，2.87-2.95(m，2H)，3.30(m，1H)，6.12(t，J＝8.0Hz，1H)，6.30(t，J＝8.0Hz，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ22.82，25.70，32.43，34.28，40.72，40.82，62.64，130.72，134.49；ES-MS 216(M-1). 3-(氨基甲基)二環(huán)[2.2.2]辛烷-2-磺酸(化合物N33)的制備 向制備3-(氨基甲基)二環(huán)[2.2.2]辛-5-烯-2-磺酸(化合物N32)的步驟1中獲得的狄爾斯-阿德耳加成物(300mg，1.5mmol)在EtOAc與甲醇共溶劑(15mL，v/v＝2∶1)中的溶液內(nèi)加入Pd/C(100mg)。在氫氣壓下攪拌懸浮液6小時(shí)，然后過濾。濃縮濾液，得到300mg還原產(chǎn)物。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.40-1.85(m，8H)，2.10-2.20(m，2H)，2.88-2.92(m，1H)，3.38(m，1H)，4.28(dd，J＝10.0&2.0Hz，1H)，4.41(dd，J＝10.0&8.0Hz，1H). 在如上步驟1所述制備的還原產(chǎn)物(607mg，3mmol)在THF與EtOH溶劑混合液(10mL，v/v＝1/1)中的溶液緩慢加到氫氧化銨水溶液(28％，32mL，253mmol)中。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物6小時(shí)，之后濃縮。將殘留固體懸浮在EtOH中，加熱回流該混合物15分鐘，然后冷卻到室溫。過濾收集固體，用乙醚洗滌，然后干燥，得到標(biāo)題化合物(520mg，79％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.30-1.60(m，8H)，1.80-1.90(m，1H)，1.98(m，1H)，2.22-2.29(m，1H)，3.10(dd，J＝13.0&7.0Hz，1H)，3.20(d，J＝10.5Hz，1H)，3.64(dd，J＝13.0&7.0Hz，1H)；13CNMR(125MHz，D2O)δ18.96，19.93，25.06，25.91，26.94，27.97，36.12，40.20，59.69.ES-MS 218(M-1). 3-氨基-3-甲基-1-丁烷磺酸(化合物N34)的制備 向氯乙烷磺酰氯在MeOH(10mL)中的冷(0℃)溶液內(nèi)緩慢加入NaOMe(25％，4.3g，20mmol)。加料NaOMe過程中有NaCl析出。0℃攪拌混合物1小時(shí)，移去冷卻浴。向混合物中加入2-硝基丙烷。pH值顯示為1-2，加NaOMe直至pH呈堿性。攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后過濾。濃縮濾液，用HCl水溶液(1M)稀釋，之后用EtOAc提取兩次。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，進(jìn)而濃縮。所得殘留物使用己烷/EtOAc 80∶20-50∶50作為洗脫劑進(jìn)行柱層析純化，得到500mg(23％)需要的中間體。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.65(s，6H)，2.42(m，2H)，3.17(m，2H)，3.92(s，3H)；13C NMR(125MHz，CDCl3)δ50.01，56.17，59.13，66.11. 向攪拌著的上述硝基中間體(得自步驟1，400mg，1.89mmol)溶液中加入Ra-Ni(100mg)。在氫氣壓下攪拌懸浮液5小時(shí)。TLC顯示起始原料完全耗盡。過濾混合物，濃縮濾液得到殘留物。殘留物的NMR顯示所需產(chǎn)物中混有可能由環(huán)化產(chǎn)生的磺內(nèi)酰胺。將粗產(chǎn)物溶于HCl(12N)。加熱回流該溶液2小時(shí)，然后減壓濃縮，得到淡綠色泡沫體。將該粗制物溶于MeOH，加Et2O進(jìn)行沉淀。過濾分離產(chǎn)物，用MeOH和乙醚洗滌，得到標(biāo)題化合物(140mg，兩步總收率42％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.24(s，6H)，1.92-1.98(m，2H)，2.82-2.89(m，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ24.36，34.68，46.04，53.81.ES-MS 166(M-1). 2-(1-氨基環(huán)己基)-1-乙烷磺酸(化合物N35)的制備 向2-氯乙烷磺酰氯(2.14mL，20mmol)在MeOH(10mL)中的冷(0℃)溶液內(nèi)緩慢加入NaOMe(25％，4.3g，20mmol)。加料NaOMe過程中有NaCl析出。0℃攪拌混合物1小時(shí)，移去冷卻浴，然后加入硝基環(huán)己烷(2.58g，20mmol)。pH值顯示為1-2，隨后加NaOMe一直到混合物呈堿性。攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后過濾。濃縮濾液，用HCl水溶液(1M)稀釋，之后用EtOAc提取兩次。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮至干。所得殘留物使用己烷/EtOAc 80∶20-50∶50作為洗脫劑進(jìn)行柱層析純化。合并相應(yīng)的餾分，蒸發(fā)至干，得到相應(yīng)中間體(500mg，23％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.35-1.70(m，8H)，2.35(m，2H)，2.38-2.45(m，2H)，3.08(m，2H)，3.90(s，3H).13C NMR(125MHz，CDCl3)δ22.36，24.75，34.17，44.57，89.88. 向攪拌著的硝基中間體(得自步驟1，1g，3.58mmol)溶液中加入Ra-Ni(300mg)。在氫氣壓下攪拌懸浮液3小時(shí)。TLC顯示起始原料完全耗盡。過濾反應(yīng)物，并濃縮濾液。殘留物的NMR顯示所需產(chǎn)物中混有可能由環(huán)化產(chǎn)生的磺內(nèi)酰胺。將粗產(chǎn)物溶于HCl(6N，5mL)。加熱回流該溶液2小時(shí)，然后減壓濃縮，得到泡沫狀殘留物。將該泡沫物溶于MeOH，加Et2O沉淀所需產(chǎn)物。過濾分離產(chǎn)物，用MeOH和乙醚洗滌，得到標(biāo)題化合物(422mg，兩步總收率42％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.20-1.32(m，2H)，1.32-1.56(m，6H)，1.60-1.74(m，2H，2.24(m，2H)，2.86(m，2H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ20.82，24.21，31.52，33.34，45.06，56.20.ES-MS 206(M-1). 3-(氨基甲基)-4，5-二甲基-1-環(huán)己烷磺酸(化合物N36)的制備 向6-(氨基甲基)-3，4-二甲基環(huán)己-3-烯-1-磺酸(420mg，1.92mmol)在EtOH(60％水溶液，50mL)中的溶液內(nèi)加入Pd/C(100mg)。在氫氣壓下攪拌懸浮液6小時(shí)，過濾并進(jìn)行濃縮，得到380mg還原產(chǎn)物，為1∶1的順式/反式非對(duì)映體混合物。
1H NMR(500MHz，H2O)δ0.70(d，J＝5.5Hz，1.5H)，0.73(d，J＝5.5Hz，1.5H)，0.76(d，J＝5.5Hz，1.5H)，0.79(d，J＝5.5Hz，1.5H)，1.03(m，1H)，1.23(m，1H)，1.40(m，0.5H)，1.60(1.78(m，3H)，1.85(m，0.5H)，2.32-2.43(m，1H)，2.91-3.02(m，2H)，3.30-3.38(m，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ14.12，18.51，18.90，19.19，25.50，30.57，31.18，31.98，33.56，33.77，34.31，36.87，37.13，38.10，38.16，41.01，60.75，60.91.ES-MS 220(M-1). 3-{[(2S)-2-羥基-2-苯基乙基]氨基}-2-丙烷磺酸(化合物N37)的制備 向(S)-(+)-2-氨基-1-苯基乙醇(5.0g，36.4mmol)在25％甲苯/乙腈(35mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.2g，34.7mmol)。攪拌回流該溶液3小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH(40mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(7.77g，86％)。
1H NMR(D2O，300MHz)δppm 7.31(m，5H)，4.91(dd，1H，J＝3.9Hz，9.3Hz)，3.18(m，2H)，3.12(t，2H，J＝6.8Hz)，2.87(t，2H，J＝7.3Hz)，2.02(m，2H)；13C NMR(D2O，75MHz)δppm 139.58，129.16，128.97，126.31，69.05，53.21，48.07，46.60，21.29；ES-MS 258(M-1). 3-{[(2R)-2-羥基-2-苯基乙基]氨基}-2-丙烷磺酸(化合物N39)的制備 向(R)-(-)-2-氨基-1-苯基乙醇(5.0g，36.4mmol)在25％甲苯/乙腈(40mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.2g，34.7mmol)。攪拌回流該溶液3小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH(50mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物，(8.10g，90％)。
1H NMR(D2O，300MHz)δppm 7.46(m，5H)，5.06(dd，1H，J＝4.1Hz，9.0Hz)，3.36(m，2H)，3.29(m，2H)，3.02(t，2H，J＝7.3Hz)，2.18(m，2H)；13C NMR(D2O，75MHz)δppm 139.56，129.16，128.97，126.12，69.03，53.20，48.06，46.59，21.27；[α]D＝-36.9°(c＝0.0116，水)；ES-MS 260(M+1). 3-[(噻吩-2-甲基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物N43)的制備 利用注射泵，在3小時(shí)內(nèi)向2-噻吩甲胺(1.0g，8.8mmol)在40％甲苯/乙腈(15mL)中的0℃溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.0g，8.4mmol)在40％甲苯/乙腈(3mL)中的溶液。當(dāng)徐徐加畢后，使反應(yīng)混合物上溫到室溫，產(chǎn)物開始析出。在這些條件下攪拌混合物60小時(shí)。過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH(15mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(1.24g，63％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm1.99(m，2H)，2.85(t，2H，J＝7.3Hz)，3.10(t，2H，J＝7.3Hz)，4.35(s，2H)，6.99(t，1H，J＝4.4Hz)，7.14(d，1H，J＝2.4Hz)；13C NMR(D2O，125MHz)δppm 21.39，45.03，45.47，48.01，128.00，128.85，131.07，131.55；ES-MS 234(M-1). 3-[1-(2-噻吩基)-環(huán)己基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物N45)的制備 向劇烈攪拌著的鎂(干燥，5g，205mmol)在THF(無(wú)水，60mL)中的懸浮液內(nèi)緩慢加入2-溴噻吩(5.7g，35mmol)(注意放熱反應(yīng))。混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，接著逐滴加入環(huán)己酮(3g，31mmol)在THF(10mL)中的溶液。攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，小心加入HCl(2.5N，10mL)進(jìn)行猝滅，然后用Et2O(100mL)稀釋。將液體部分轉(zhuǎn)移到分液漏斗內(nèi)，向其中加入HCl(1M，50mL)。分離有機(jī)層，干燥(MgSO4)，濃縮。殘留物不用進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
將步驟1的殘留物在CH2Cl2(60mL)中稀釋。向所得溶液中加入NaN3(4.7g，73mmol)，接著加入TFA(6mL)。攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，加水猝滅，進(jìn)而用乙醚稀釋。有機(jī)層用水和1N NH4OH順序洗滌，硫酸鈉干燥，小心濃縮。所得疊氮化物衍生物無(wú)需進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
向疊氮化物衍生物(得自步驟2)在乙醚(80mL)中的溶液分批加入LAH(1g，26mmol)。攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后用NaOH(1N)猝滅。猝滅混合物用Et2O提取兩次。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，濃縮得到一殘留物，進(jìn)而使用CH2Cl2/MeOH 95∶0.5-90∶10作為洗脫劑進(jìn)行柱層析純化，得到需要的胺中間體(2g)。
向胺中間體(得自步驟3，1.5g，8.27mmol)在CH3CN(25mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.01g，8.27mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過周末。過濾收集固體物，再懸浮在EtOH(40mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。冷卻到室溫，過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(1.3g，78％)。
1H NMR(500MHz，D2O+1滴NaOD)δ1.10-1.28(m，4H)，1.40(m，2H)，2.52(m，4H)，1.95(m，2H)，2.13(t，J＝8.0Hz，2H)，2.57(t，J＝8.0Hz，2H)，6.82(m，2H)，7.16(m，1H).13C NMR(125MHz，D2O+1滴NaOD)δ22.20，24.77，25.40，37.10，40.32，49.27，57.44，124.46，124.63，125.39，126.86.ES-MS302(M-1). 3-[(2-呋喃基甲基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物N48)的制備 利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.5g，12.28mmol)在CH3CN(10mL)中的溶液緩慢加到(2-呋喃基甲基)胺(6g，61.78mmol)在CH3CN(120mL)中的沸騰溶液內(nèi)。攪拌反應(yīng)1小時(shí)，然后減壓濃縮。殘留物加水和EtOAc稀釋。棄去有機(jī)層，水相用EtOAc洗滌兩次，在高真空下濃縮，得到白色固體標(biāo)題化合物(2.6g，96％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.94(m，2H)，2.83(m，2H)，3.03(m，2H)，4.12(s，2H)，6.35(m，1H)，6.46(m，1H)，7.44(m，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ21.60，43.30，45.54，48.08，11.11，112.43，144.79，154.27.ES-MS 218(M-1). 3-[(四氫呋喃-2-基甲基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物N47)的制備 利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.5g，12.28mmol)在CH3CN(10mL)中的溶液緩慢加到四氫呋喃胺(6g，59.91mmol)在CH3CN(120mL)中的沸騰溶液內(nèi)。攪拌反應(yīng)1小時(shí)，然后減壓濃縮。殘留物加水和EtOAc稀釋。棄去有機(jī)層，水相用EtOAc洗滌兩次，在高真空下濃縮，得到需要產(chǎn)物，為與四氫呋喃胺的復(fù)合物。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.40-1.52(m，1H)，1.75-2.00(m，5H)，2.71-2.88(m，5H)，3.62-3.75(m，2H)，4.00(m，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ22.61，25.10，25.18，28.38，28.89，43.43，47.03，48.59，51.69，28.25，28.31，76.11，76.89. 向步驟1所得產(chǎn)物在水(20mL)中的溶液內(nèi)加入一當(dāng)量的NaOH，接著加入CH2Cl2(30mL)，劇烈攪拌該混合物。棄去有機(jī)層，水相用CH2Cl2洗滌兩次，減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物(1.8g，96％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.42(m，1H)，1.78(m，4H)，1.90(m，1H)，2.55(m，4H)，2.80(m，2H)，3.63(m，1H)，3.70(m，1H)，3.90(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ24.05，25.19，29.12，47.52，49.14，52.49，67.96，78.25.ES-MS 246(M+1). 3-[2-(呋喃-2-基)-2-丙基氨基]-1-丙烷磺酸(化合物N46)的制備 在140℃-150℃下干燥CeCl3-7H2O(8.00g，21.48mmol)15小時(shí)。將該干燥固體置于THF(100mL)中。劇烈攪拌混合物1小時(shí)，冷卻到-78℃，加入MeLi(13.42mL，21.48mmol)。攪拌該懸浮液2小時(shí)，然后逐滴加入2-呋喃甲腈(1g，10.74mmol)。反應(yīng)混合物在-78℃攪拌6小時(shí)，然后加入濃NH4OH水溶液(70mL)。溫?zé)峄旌衔锏绞覝?，通過硅藻土過濾。濾液用EtOAc提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，進(jìn)而濃縮。柱層析殘留物(CH2Cl2/MeOH 95∶5作為洗脫劑)，得到需要的胺中間體(500mg，36％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ1.45(s，6H)，5.60(bs，NH2)，6.05(m，1H)，6.26(m，1H)，7.31(m，1H).13C NMR(125MHz，CDCl3)δ29.74，49.79，102.28，110.08，141.18，163.17. 向胺中間體(得自步驟1，200mg，1.55mmol)在CH3CN(10mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.16g，17.7mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，再懸浮在EtOH(40mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)，隨后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(120mg，31％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.59(m，6H)，1.87(m，2H)，2.75-2.83(m，4H)，6.36(m，1H)，6.46(m，1H)，7.45(m，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ21.72，22.80，41.18，48.08，57.95，110.17，110.91，144.36，151.12.ES-MS 246(M-1). 3-(2，3-二氫化茚-5-基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N49)的制備 將1，3-丙烷磺內(nèi)酯(8.67g，71mmol)的甲苯(30mL)溶液加到5-氨基-2，3-二氫化茚(10g，71mmol)在MeCN(70mL)中的溶液內(nèi)。加熱回流混合物。20分鐘后，混合物結(jié)塊。加入乙醇(50mL)以恢復(fù)攪拌，再加熱回流懸浮液2小時(shí)。混合物利用冰浴冷卻到5℃。抽濾收集固體物，用乙醇(2×20mL)沖洗。抽氣干燥濕濾餅10分鐘。進(jìn)而在真空烘箱中于60℃干燥固體過夜。將所得固體(13.57g)在乙醇(80mL)與水(20mL)混合液中重結(jié)晶。冷卻該懸浮液到1.0℃。抽濾收集固體，用乙醇(2×20mL)沖洗，抽氣干燥15分鐘，進(jìn)一步在真空烘箱中于60℃干燥過夜，得到標(biāo)題化合物，為白色細(xì)碎粉末(12.23g，67％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.94(m，2H)，2.01(m，2H)，2.79(m，4H)，2.85(m，2H)，3.41(m，2H)，7.07(m，1H)，7.19(m，1H)，7.27(m，1H)；13C(125MHz，D2O)δ21.07，25.45，32.13，32.51，47.91，50.53，118.41，120.13，125.89，132.66，146.81，147.47；ES-MS 254(M-1) 3-(2，3-二氫化茚-4-基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N50)的制備 向4-氨基-2，3-二氫化茚(5.0g，37.5mmol)在25％甲苯/乙腈(50mL)中的0℃溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(4.37g，35.8mmol)。攪拌回流混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH(60mL)中。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×25mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(7.75g，85％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 2.01(m，4H)，2.84(m，6H)，3.42(t，2H，J＝7.8Hz)，7.05(d 1H，J＝7.8Hz)，7.18(t，1H，J＝7.6Hz)，7.26(d，1H，J＝7.3Hz)；13C NMR(D2O，125MHz)δppm 21.16，25.25，29.87，32.60，47.94，49.10，119.84，125.81，128.39，137.50，148.73；ES-MS 254(M-1). 3-{[2-(2-苯并噻吩基)-2-丙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物N52)的制備 在115℃攪拌苯并噻吩-2-甲醛(1.5g，9.2mmol)、羥胺鹽酸鹽(760mg，11.0mmol)在N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP，15mL)中的溶液4小時(shí)。待反應(yīng)混合物冷卻到室溫后，倒入水中(50mL)。所形成的混合物用乙醚(2×20mL)提取。合并有機(jī)提取物，Na2SO4干燥，蒸發(fā)至干，進(jìn)一步在真空下干燥。殘留物利用快速色譜純化(Rf＝0.45，10％EtOAc/己烷)，得到1-苯并噻吩-2-甲腈(0.850g，58％)。
在150℃真空干燥氯化鈰七水合物(7.5g，20.2mmol)過夜，然后置于無(wú)水THF(40mL)中。室溫?cái)嚢钁腋∫?，用超聲波處?5分鐘。冷卻混合物到-50℃，緩慢加入甲基鋰(1.6M Et2O溶液，12.6mL，20.2mmol)。在-50℃攪拌該混合物1小時(shí)，然后通過注射器加入1-苯并噻吩-2-甲腈(得自步驟1，0.850g，5.3mmol)。反應(yīng)混合物在-50℃攪拌2小時(shí)，然后用濃NH4OH水溶液(15mL)猝滅。溫?zé)峄旌衔锏?℃，過濾除去固體物。分離有機(jī)相，蒸發(fā)溶劑。將殘留物溶于乙醚(25mL)。該溶液用鹽水(2×25mL)提取。有機(jī)相用Na2SO4干燥。蒸除溶劑后，將殘留物在真空下干燥，進(jìn)而通過快速色譜純化(Rf＝0.33，5％MeOH/CH2Cl2)，得到2-(2-苯并噻吩基)-2-丙胺(0.620g，61％)。
向2-(2-苯并噻吩基)-2-丙基胺(0.620g，3.2mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.377g，3.1mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌。固體物用EtOH(10mL)和水(2mL)重結(jié)晶。將得到的淺藍(lán)色結(jié)晶溶于熱溶劑混合液(15％水/EtOH)，并且用活性炭處理所形成的溶液。在硅藻土上過濾熱懸浮液。蒸發(fā)濾液至干。再將所得固體懸浮在丙酮(20mL)中，過濾收集，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(0.514g，51％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 1.77(s，6H)，1.92(m，2H)，2.59(t，2H，J＝6.3Hz)，2.90(m，2H)，7.40(m，2H)，7.59(s，1H)，7.85(m，1H)，7.95(m，1H)，9.38(s(br)，2H)；13C NMR(DMSO，125MHz)δppm 144.66，139.60，139.55，125.97，125.58，124.89，123.26，59.04，50.07，42.73，26.62，22.78；ES-MS 312(M-1). 3-(4-氯苯基-2-丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N54)的制備 在150℃下干燥CeCl3-7H2O(20.15g，59.1mmol)15小時(shí)。將干燥固體置于THF(200mL)中。劇烈攪拌混合物1.5小時(shí)，冷卻到-78℃，向懸浮液中加入MeLi(1.6M，37mL，59.2mmol)。溫?zé)釕腋∫旱?50℃，攪拌1小時(shí)，然后再冷卻到-78℃，逐滴加入4-氯硫代苯甲酰胺(2.0g，11.6mmol)的THF(15mL)溶液。在2.5小時(shí)內(nèi)緩慢升溫到0℃，然后再冷卻到-50℃，接著加入濃NH4OH水溶液(50mL)。溫?zé)峄旌衔锏绞覝?，通過硅藻土過濾。濾液用EtOAc提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，濃縮至干。使用硅膠柱層析(CH2Cl2/MeOH作為洗脫劑)進(jìn)行純化后得到需要的胺衍生物(0.80g，41％)。
向胺衍生物(得自步驟1，0.8g，4.7mmol)在CH3CN(10mL)與甲苯(3mL)溶劑混合液中的攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(600mg，5mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，再懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫，過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(1.11mg，81％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.66(s，6H)，1.91-1.95(m，2H)，2.61(t，J＝6.3Hz，2H)，2.75(br s，2H)，7.54(d，J＝8.8Hz，2H)，7.60(d，J＝8.8Hz，2H)，9.21(br s，2H)；13C(125MHz，DMSO-d6)δ22.13，25.09，41.86，49.31，59.73，128.23，128.82，133.37，138.56；ES-MS290(M-1) 3-[(1-噻吩-2-基乙基)氨基]-1-丙烷磺酸(化合物N55)的制備 向1-噻吩-2-基乙基胺(0.500g，3.9mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.457g，3.7mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物3小時(shí)。冷卻到室溫后過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌。將固體產(chǎn)物懸浮在EtOH(20mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)，隨后冷卻到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(0.556g，60％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 1.57(d，3H，J＝6.8Hz)，1.91(m，2H)，2.59(t，2H，J＝6.8Hz)，2.86(m，1H)，3.15(m，1H)，4.71(m，1H)，7.09(t，1H，J＝3.9Hz)，7.26(d，1H，J＝2.9Hz)，7.62(d，1H，J＝4.9Hz)，9.11(s(br)，2H)；13CNMR(DMSO，125MHz)δppm20.24，22.43，45.39，49.91，52.32，128.00，128.94，139.80；ES-MS 248(M-1). 3-(4-氟苯基-2-丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N57)的制備 在150℃下干燥CeCl3-7H2O(21.5g，57.7mmol)15小時(shí)。向該固體中加入THF(250mL)。劇烈攪拌混合物1.5小時(shí)，冷卻到-78℃，向懸浮液中加入MeLi(1.6M，38mL，60.8mmol)。溫?zé)釕腋∫旱?50℃，攪拌1小時(shí)，然后再冷卻到-78℃，逐滴加入4-氟硫代苯甲酰胺(2.2g，14mmol)。在2.25小時(shí)內(nèi)緩慢升溫混合物到0℃，然后再冷卻到-50℃，接著加入濃NH4OH水溶液(40mL)。溫?zé)峄旌衔锏绞覝?，通過硅藻土過濾。濾液用EtOAc提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，濃縮。殘留物利用硅膠柱層析(CH2Cl2/MeOH作為洗脫劑)進(jìn)行純化，從而得到相應(yīng)的胺衍生物(0.78g，36％)。
向胺衍生物(得自步驟1，780mg，5.09mmol)在CH3CN(7mL)與甲苯(3mL)溶劑混合液中的攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(650mg，5.10mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，再懸浮在EtOH(7mL)中，攪拌回流1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫，過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(1.16mg，83％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.65(s，6H)，1.91(qt，J＝6.3Hz，2H)，2.60(t，J＝6.3Hz，2H)，2.75(br s，2H)，7.30-7.33(m，2H)，7.60-7.63(m，2H)，9.21(br s，2H)；13C(125MHz，DMSO-d6)δ22.05，25.22，41.89，49.46，59.60，115.63(d，J＝21.1Hz)，128.56(d，J＝8.6Hz)，135.83，161.91(d，J＝245Hz)；19F(282MHz，DMSO-d6)δ-114.0to-114.1(m)；ES-MS 274(M-1). 3-{[1-甲基-1-(5-甲基噻吩-2-基)乙基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物N60)的制備 在115℃攪拌5-甲基-2-噻吩甲醛(3.0g，23.8mmol)、羥胺鹽酸鹽(2.0g，28.7mmol)在N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP，40mL)中的溶液4小時(shí)。冷卻到室溫后，將溶液倒入水中(50mL)，用乙醚(3×40mL)提取。合并有機(jī)提取物，Na2SO4干燥，蒸發(fā)溶劑，將殘留物在真空下干燥，并且通過快速色譜純化(Rf＝0.41，10％EtOAc/己烷)，得到純凈的5-甲基噻吩-2-甲腈(1.30g，44％)。
在150℃真空干燥氯化鈰七水合物(10g，26.9mmol)過夜。向該固體中加入無(wú)水THF(100mL)。室溫?cái)嚢钁腋∫?0分鐘。冷卻反應(yīng)混合物到-50℃，緩慢加入甲基鋰(1.6M Et2O溶液，26.9mL，26.9mmol)。在-50℃攪拌該混合物1小時(shí)，然后冷卻到-78℃，通過注射器加入步驟1中得到的5-甲基噻吩-2-甲腈(1.3g，10.6mmol)。反應(yīng)混合物在-50℃攪拌2小時(shí)，然后用濃NH4OH水溶液(30mL)猝滅。溫?zé)峄旌衔锏?℃，過濾除去固體物。有機(jī)相蒸發(fā)至干。將殘留物溶于乙醚(30mL)。該溶液用鹽水(2×30mL)提取。合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥，然后蒸發(fā)溶劑。殘留物在真空下干燥，進(jìn)而通過快速色譜純化(Rf＝0.48，5％MeOH/CH2Cl2)，得到1-甲基-1-(5-甲基噻吩-2-基)乙胺(920mg，61％)。
向1-甲基-1-(5-甲基噻吩-2-基)乙胺(920mg，6.5mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(758mg，6.2mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌，再懸浮在EtOH(20mL)中。攪拌回流懸浮液1小時(shí)，隨后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(1.26g，74％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 1.82(s，6H)，1.92(m，2H)，2.48(s，3H)，2.90(t，2H，J＝7.3Hz)，3.00(t，2H，J＝7.8Hz)，6.87(m，1H)，7.09(d，1H，J＝3.4Hz)；13C NMR(D2O，125MHz)δppm 14.48，21.77，25.66，41.03，48.10，59.71，125.81，128.02，139.53，142.84；ES-MS 276(M-1). 4-氨基-1-羥基-1-(5-甲基噻吩-2-基)-2-丁烷磺酸(化合物N63)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.5g，20.5mmol)在無(wú)水THF(100mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，9mL，22.5mmol)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入5-甲基-2-噻吩甲醛(2.2mL，20.5mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后溫?zé)岬?℃，緩慢加入水(50mL)。分離有機(jī)層，水層用Et2O(2×50mL)提取，合并有機(jī)相和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。殘留物通過快速色譜純化(Rf＝0.26，70％Hex/EtOAc)，得到相應(yīng)的磺內(nèi)酯衍生物(2.08g，41％)。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向0℃的氫氧化銨濃溶液(28-30％NH3，50mL)中加入上述磺內(nèi)酯(3.04g，13.3mmol)的THF(15mL)溶液。0℃攪拌該溶液1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。將得到固體懸浮在EtOH(15mL)中。攪拌回流混合物1小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾固體，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物，為非對(duì)映體的混合物(0.785g，35％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 6.80(d，0.2H，J＝3.4Hz)，6.72(d，0.8H，J＝2.9Hz)，6.65(m，1H)，5.43(d，0.8H，J＝2.4Hz)，5.12(d，0.2H，J＝7.3Hz)，3.08(m，1.6H)，2.97(m，0.4H)，2.85(m，1H)，2.31(m，3H)，2.04(m，1.6H)，1.84(m，0.4H)；13C(D2O，125MHz)δppm 14.44，22.85，38.54，63.80，68.70，124.18，125.36，140.26，142.98；ES-MS264(M-1). 3-(4-三氟甲基苯基-2-丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N64)的制備 在150℃下干燥CeCl3-7H2O(21.0g，56.4mmol)15小時(shí)。向該固體中加入THF(250mL)。劇烈攪拌混合物1.5小時(shí)，冷卻到-78℃，向懸浮液中加入MeLi(1.6M，38mL，60.8mmol)。溫?zé)釕腋∫旱?50℃，攪拌1小時(shí)，然后再冷卻到-78℃，逐滴加入4-三氟甲基硫代苯甲酰胺(2.46g，12mmol)的THF(20mL)溶液。在2.5小時(shí)內(nèi)緩慢升溫混合物到0℃，然后再冷卻到-50℃，加入濃NH4OH水溶液(70mL)。溫?zé)峄旌衔锏绞覝兀ㄟ^硅藻土過濾。濾液用EtOAc提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，濃縮。殘留物采用柱層析進(jìn)行分離(使用CH2Cl2/MeOH作為洗脫劑)，從而得到相應(yīng)的胺(1.69g，69％)。
向胺衍生物(得自步驟1，1.69g，8.3mmol)在CH3CN(10mL)與甲苯(3mL)溶劑混合液中的攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.75g，8.5mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，再懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)，之后冷卻到室溫，過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，2.39g(89％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.69(s，6H)，1.94(qt，J＝6.4Hz，2H)，2.60(t，J＝6.4Hz，2H)，2.79(br s，2H)，7.82(q，J＝8.5Hz，4H)，9.32(br s，2H)；13C(75MHz，DMSO-d6)δ22.25，25.15，41.97，49.26，59.93，123.70(q，J＝271Hz)，125.52(d，J＝3.5Hz)，126.89，128.71(q，J＝31.9Hz)，143.84；19F(282MHz，DMSO-d6)δ-61.87(s)；ES-MS 324(M-1) 3-(2-苯基-2-丁基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N65)的制備 將燒瓶用隔膜封閉并且與一個(gè)20％NaOH洗滌器連接。
一次性向乙酸(10mL)中加入氰化鈉(粉末，2.6g)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘。在20分鐘內(nèi)逐滴加入在乙酸(10mL)中的硫酸(8mL)溶液。然后在5分鐘內(nèi)逐滴加入2-苯基-2-丁醇(5g，33.3mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，然后用冰水浴冷卻到0℃。溶液的pH值通過加氫氧化銨(460mL)調(diào)節(jié)到9。分離有機(jī)相，將水層用乙醚(3×30mL)提取。合并有機(jī)相和提取物，用飽和碳酸鈉(1×5mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)溶劑。殘留物通過硅膠快速色譜純化(MeOH/CH4Cl2)，得到黃色清亮油體(3.84g，65％)。
向步驟1粗產(chǎn)物(3.84)中加入NaOH溶液(20％，30mL)。加熱回流混合物2小時(shí)，然后冷卻到室溫。為便于相分離再加入一些氯化鈉(7.5g)。分離有機(jī)層，水層用甲苯與MTBK的混合溶劑(3×5mL，v/v＝1∶3)提取。合并的有機(jī)層用鹽水(1×5mL)洗滌，然后硫酸鈉干燥，過濾。濾液不用進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
加熱回流由1，3-丙烷磺內(nèi)酯(400mg，3.3mmol)和2-苯基-2-氨基丁烷(425mg，2.85mmol，得自步驟2)在甲苯與CH3CN混合溶劑(5mL，v/v＝3∶7)中的溶液22小時(shí)，然后冷卻到室溫。產(chǎn)物形成膠狀物。用乙醚/乙醇研制，得到淡棕色固體。抽濾收集固體物。粗制固體利用反相制備型HPLC純化(299mg，39％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ0.77(t，J＝7.3Hz，3H)，1.77(s，3H)，1.99-2.11(m，3H)，2.20-2.279m，1H)，2.66-2.71(m，1H)，2.79-2.89(m，2H)，3.06-3.11(m，1H)，7.42-7.45(m，1H)，7.49-7.55(m，4H)；13C(125MHz，D2O)δ8.62，19.90，23.37，34.22，43.15，50.29，66.31，127.93，130.38，130.60，138.16；ES-MS 270(M-1) 3-(4-甲氧基苯基-2-丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N66)的制備 在150℃下干燥CeCl3-7H2O(21.5g，57.7mmol)15小時(shí)。向該固體中加入THF(250mL)。劇烈攪拌混合物1.5小時(shí)，冷卻到-78℃，向懸浮液中加入MeLi(1.6M，38mL，60.8mmol)。溫?zé)釕腋∫旱?50℃，攪拌1小時(shí)，然后再冷卻到-78℃，逐滴加入4-三氟甲基硫代苯甲酰胺(2.00g，12mmol)的THF(20mL)溶液。在4小時(shí)內(nèi)緩慢升溫混合物到-50℃，加入濃NH4OH水溶液(70mL)，溫?zé)峄旌衔锏绞覝兀ㄟ^硅藻土過濾。濾液用EtOAc提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，濃縮。殘留物利用硅膠柱層析(CH2Cl2/MeOH作為洗脫劑)進(jìn)行分離，從而得到相應(yīng)的胺衍生物(0.60g，30％)。
向所述胺(得自步驟1，0.60g，3.6mmol)在CH3CN(10mL)與甲苯(2mL)混合溶劑中的攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.34mL，3.8mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，再懸浮在EtOH(10mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)。隨后冷卻懸浮液到室溫，過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物，0.97g(94％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.64(s，6H)，1.91(qt，J＝6.5Hz，2H)，2.58(t，J＝6.3Hz，2H)，2.71(br s，2H)，3.77(s，3H)，6.99-7.02(m，2H)，7.47-7.50(m，2H)，9.06(br s，2H)；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)δ22.09，25.27，41.77，49.40，55.20，59.67，114.04，127.54，131.34，159.21；ES-MS 286(M-1). 3-(3-氯苯基-2-丙基氨基)-1-丙烷磺酸(化合物N67)的制備 在150℃下干燥CeCl3-7H2O(21.5g，57.7mmol)15小時(shí)。向該固體中加入THF(250mL)。劇烈攪拌混合物1.5小時(shí)，冷卻到-78℃，向懸浮液中加入MeLi(1.6M，40mL，64mmol)。溫?zé)釕腋∫旱?50℃，攪拌1小時(shí)，然后再冷卻到-78℃，逐滴加入3-氯硫代苯甲酰胺(2.5g，18mmol)的THF(20mL)溶液。在2.5小時(shí)內(nèi)緩慢升溫混合物到0℃，然后再冷卻到-50℃。加入濃NH4OH水溶液(45mL)，溫?zé)峄旌衔锏绞覝兀ㄟ^硅藻土過濾。濾液用EtOAc提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，濃縮。殘留物通過柱層析(CH2Cl2/MeOH作為洗脫劑)分離，得到相應(yīng)的胺衍生物(2.1g，69％)。
向所述胺(得自步驟1，2.1g，12.4mmol)在CH3CN(12mL)與甲苯(3mL)混溶劑中的攪拌溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.6g，13mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，再懸浮在EtOH(20mL)中，攪拌回流懸浮液1小時(shí)，隨后冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(3.1g，86％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.66(s，6H)，1.93(qt，J＝6.5Hz，2H)，2.64(t，J＝6.6Hz，2H)，2.78(br s，2H)，7.48-7.57(m，3H)，7.63(s，1H)，9.25(br s，2H)；13C(100MHz，DMSO-d6)δ22.13，25.02，41.95，49.34，59.86，124.90，126.31，128.63，130.79，133.69，142.10；ES-MS 290，292(M-1). 4-[(1R)-2，3-二氫化茚-1-基氨基]-2-丁烷磺酸(化合物N69)的制備 向(R)-(-)-1-氨基-2，3-二氫化茚(2.0g，15.0mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.95g，14.3mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌。將所得固體懸浮在EtOH(20mL)中。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(3.04g，79％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 1.14(d，1.5H，J＝2.9Hz)，1.16(d，1.5H，J＝2.9Hz)，1.78(m，1H)，2.09(m，2H)，2.40(m，1H)，2.92(m，2H)，3.00(m，1H)，3.12(t，2H，J＝8.0Hz)，4.67(m，1H)，7.21(m，1H)，7.28(m，2H)，7.38(d，1H，J＝7.8Hz)；13C NMR(D2O，125MHz)δppm 14.74，14.82，28.29，28.37，28.64，28.65，29.83，43.03，43.09，53.28，53.31，62.91，62.95，125.52，125.71，127.19，130.28，136.44，145.34；[α]D＝-0.5°(c＝0.0083，水)；ES-MS 268(M-1). 4-[(1S)-2，3-二氫化茚-1-基氨基]-2-丁烷磺酸(化合物N70)的制備 向(S)-(+)-1-氨基-2，3-二氫化茚(2.0g，15.0mmol)在25％甲苯/乙腈(15mL)中的溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(1.95g，14.3mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×15mL)洗滌，然后將所得固體懸浮在EtOH(20mL)中。攪拌回流該懸浮液1小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮(2×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(3.32g，86％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 1.16(m，3H)，1.78(m，1H)，2.10(m，2H)，2.42(m，1H)，2.86(m，2H)，3.01(m，1H)，3.13(t，2H，J＝7.8Hz)，4.68(m，1H)，7.22(m，1H)，7.29(m，2H)，7.39(d，1H，J＝7.8Hz)；13C NMR(D2O，125MHz)δppm14.74，14.82，28.29，28.37，28.64，28.65，29.83，43.03，43.09，53.28，53.31，62.91，62.95，125.51，125.70，127.19，130.28，136.43，145.34；[α]D＝+0.8°(c＝0.0126，水)；ES-MS 268(M-1). 4-氨基-1-(1-苯并噻吩-2-基)-2-丁烷磺酸(化合物N71)的制備 分兩批向苯并[b]噻吩-2-甲醛(2.0g，12.3mmol)在乙醇(15mL)中的0℃溶液內(nèi)加入硼氫化鈉(250mg，6.5mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物2小時(shí)。通過蒸發(fā)將溶劑量減少到1/3。加入乙醚(20mL)和水(20mL)。分離有機(jī)層，水相用乙醚(2×20mL)提取。合并有機(jī)層和提取物，硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)溶劑，得到1-苯并噻吩-2-基甲醇(2.02g，99％)。
向1-苯并噻吩-2-基甲醇(2.02g，12.3mmol)在無(wú)水CH2Cl2(25mL)中的0℃溶液內(nèi)加入三溴化磷(1.7mL，18.4mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物1小時(shí)。在冷卻混合物到0℃后，緩慢加入20mL水。分出有機(jī)相，水相用CH2Cl2(2×20mL)提取。合并提取物與有機(jī)相，用硫酸鈉干燥。減壓蒸發(fā)溶劑，得到2-(溴甲基)-1-苯并噻吩(2.57g，92％)。
向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.38g，11.3mmol)在無(wú)水THF(100mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，5.0mL，12.5mmol)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入2-(溴甲基)-1-苯并噻吩(2.57g，11.3mmol，得自步驟2)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后溫?zé)岬?℃，緩慢加入水(100mL)。分離有機(jī)層，水層用Et2O(2×100mL)提取，合并有機(jī)層和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。殘留物通過快速色譜純化(Rf＝0.15，70％Hex/EtOAc)，得到相應(yīng)的磺內(nèi)酯(970mg，32％)。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向氫氧化銨水溶液(28-30％，50mL)在丙酮(10mL)中的0℃溶液內(nèi)加入上述磺內(nèi)酯(3.04g，13.3mmol，得自步驟3)的丙酮(15mL)溶液。0℃攪拌該溶液1小時(shí)，然后在室溫下攪拌3小時(shí)。溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。將得到的固體懸浮在EtOH(20mL)中，隨后過濾收集，用丙酮(1×10mL)洗滌，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(0.390g，38％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 1.81(m，2H)，2.81(m，1H)，2.90(m，2H)，3.00(m，1H)，3.48(m，1H)，7.28(m，3H)，7.61(s(寬峰)，2H)，7.71(d，1H，J＝7.8Hz)，7.88(d，1H，J＝7.8Hz)；13C NMR(DMSO，125MHz)δppm27.90，32.81，38.38，59.05，122.95，123.23，123.60，124.46，125.00，139.58，140.54，144.08；ES-MS 284(M-1). 3-{[3-(甲氧基羰基)噻吩-2-基]氨基}-1-丙烷磺酸(化合物N72)的制備 向2-氨基-3-噻吩甲酸甲酯(3.0g，19.1mmol)在25％甲苯/乙腈(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(2.22g，18.2mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物5小時(shí)，然后冷卻到室溫。減壓濃縮反應(yīng)混合物。將油狀殘留物用乙醚(1×30mL)和水(1×30mL)提取。將從水相得到的殘留物通過制備HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(0.55g，10％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 1.91(m，2H)，2.82(t，2H，J＝7.6Hz)，3.36(t，2H，J＝7.1Hz)，3.70(s，3H)，6.84(m，1H)，7.56(d，1H，J＝5.4Hz)；13C NMR(D2O，125MHz)δppm 23.76，45.55，48.26，52.25，119.36，134.48，149.98，165.46；ES-MS 278(M-1). 4-氨基-1-二芐基-2-丁烷磺酸(化合物N75)的制備 向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(5.0g，41mmol)在無(wú)水THF(150mL)中的-78℃溶液內(nèi)加入丁基鋰(2.5M己烷溶液，18mL，45mmol)。在-78℃攪拌該溶液0.5小時(shí)，然后在0.5小時(shí)內(nèi)通過注射泵加入芐基溴(4.9mL，41mmol)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后溫?zé)岬?℃，緩慢加入水(100mL)。收集有機(jī)層，水相用EtOAc(2×25mL)提取，合并有機(jī)層和提取液，用硫酸鈉干燥，減壓蒸發(fā)。殘留物通過快速色譜純化(Rf＝0.25，80％Hex/EtOAc)，得到1，1-二芐基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.637g)。
利用注射泵，在4小時(shí)內(nèi)向氫氧化銨水溶液(28-30％，10mL)在丙酮(5mL)中的0℃溶液內(nèi)加入1，1-二芐基-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.636g，2.1mmol)的丙酮(10mL)溶液。室溫?cái)嚢柙撊芤哼^夜。使溶劑與EtOH一起蒸發(fā)。將得到的固體懸浮在丙酮(20mL)中，隨后過濾收集，在真空烘箱中干燥(50℃)，得到標(biāo)題化合物(0.420g，63％)。
1H NMR(500MHz，DMSO)δ(ppm)1.67(t，2H，J＝6.8Hz)，2.69(d，2H，J＝14.2Hz)，3.15(m，4H)，7.18(m，10H)，7.61(s(br)，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO)δ(ppm)30.39，35.61，40.57，60.89，125.95，127.46，131.36，137.71；ES-MS 318(M-1). 3-氨基-2-(噻吩-2-基甲基)丙烷-1-磺酸(化合物N4)的制備(兩種方法) 方法1 向3-羥基丙腈(2g，28.12mmol)在THF(60mL)中的冷(-78℃)溶液內(nèi)逐滴加入雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰(1M THF溶液，56mL)。在該溫度下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)后，逐滴加入2-噻吩基甲基溴(4.98g，28.12mmol)，使反應(yīng)混合物自然升溫到0℃，在該溫度下攪拌混合物2小時(shí)。反應(yīng)用1N HCl猝滅，進(jìn)而用EtOAc提取。有機(jī)層用1N HCl洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮。殘留物上硅膠柱(洗脫劑己烷∶EtOAc70∶30-50∶50)，得到3-羥基-2-(2-噻吩基甲基)-1-羥基丙腈(2.0g，42％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.60(bs，1H)，3.00(m，1H)，3.20(m，2H)，3.80(m，2H).6.97(m，2H)，7.22(m，1H)； 以23％的收率分離到二烷基化產(chǎn)物。
攪拌下，向3-羥基-2-(2-噻吩基甲基)-1-丙腈(得自步驟1，1g，6mmol)的THF(60mL)溶液中分批加入LAH(450mg，12mmol)。攪拌反應(yīng)2小時(shí)，用NaOH(1M)終止反應(yīng)，然后劇烈攪拌1小時(shí)，再加入Boc2O(1.6g，7.2mmol)。攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后用Et2O稀釋。分離兩相，然后干燥有機(jī)層并進(jìn)行濃縮。殘留物通過柱層析純化(使用己烷/EtOAc 70∶30作為洗脫劑)，得到相應(yīng)的醇產(chǎn)物(1.43g，88％收率)。
向步驟2醇產(chǎn)物(630mg，2.32mmol)在CH2Cl2(30mL)中的冷(0℃)溶液內(nèi)加入NEt3(646μL，4.64mmol)，接著加入MsCl(200μL，2.55mmol)。攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，加水稀釋。分離有機(jī)層，濃縮得到相應(yīng)的甲磺酸酯，其無(wú)需進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
向Na2SO3回流溶液(440mg，3.48mmol)中逐滴加入甲磺酸酯(得自步驟3)的EtOH(5mL)溶液。15分鐘后，起始原料完全耗盡。反應(yīng)混合物用水和EtOAc稀釋。分離有機(jī)層，濃縮。殘留物通過柱層析分離(己烷/EtOAc，50∶50)，得到N-Boc保護(hù)的標(biāo)題化合物(300mg)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)δ1.43(s，9H)，2.40(m，1H)，2.82(m，2H)，3.02(m，2H)，3.20&3.28(ABX，J＝15和8Hz，2H)，6.91(m，2H)，7.20(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ27.77，31.62，38.39，42.81，52.34，79.23，123.70. 濃縮水層，通過柱層析純化殘留物(CH2Cl2/MeOH 80/20)，也得到少量標(biāo)題化合物(40mg，3％)。
用TFA(1mL)處理在CH2Cl2中的上述N-Boc保護(hù)的標(biāo)題化合物(100mg)。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，濃縮，進(jìn)而再懸浮于EtOH中。過濾收集白色固體物，得到標(biāo)題化合物(65mg，93％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ2.43(m，1H)，2.83(dd，J＝7.8&15Hz，1H)，2.85(m，1H)，2.92(m，2H)，3.03&3.10(ABX，J＝13和7Hz，2H)，6.83(m，1H)，6.88(m，1H)，7.20(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ31.68，35.81，42.44，52.32，125.18，127.04，127.54，140.31；ES-MS 234(M-1). 方法2 步驟1-3同方法1。
向甲磺酸酯(步驟3中獲得)的CH2Cl2(2mL)溶液中加入TFA(1mL)。攪拌反應(yīng)1小時(shí)，濃縮得到相應(yīng)胺TFA鹽。
1H NMR(500MHz，D2O)δ2.39(m，1H)，2.85-3.08(m，4H)，3.03(s，3H)，4.13(m，1H)，4.22(m，1H)，6.83(m，1H)，6.88(m，1H)，7.18(m，1H). 向Na2SO3(1.17g，9.28mmol)的回流溶液中緩慢加入上述胺TFA鹽(得自步驟4)在水(5mL)中的溶液。攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，除去溶劑。加入濃HCl(5mL)以沉淀無(wú)機(jī)鹽，并且濾除后者。濃縮濾液，殘留物使用CH2Cl2/MeOH 90∶10-80∶20作為洗脫劑通過柱層析純化，從而得到標(biāo)題化合物，收率37％；NMR和MS光譜與方法1中的數(shù)據(jù)相同。
4-氨基-1-(2-噻吩基)-2-丁烷磺酸(化合物N84)的制備 向2-噻吩甲醇(5g，43.80mmol)的無(wú)水乙醚(80mL)溶液中加入PBr3(17.7g，65.51mmol)在乙醚(20mL)中的溶液。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物30分鐘，小心加水猝滅。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥。小心除去溶劑，殘留物迅速通過快速色譜純化(使用己烷/Et2O 90∶10作為洗脫劑)，得到2-噻吩基甲基溴(6.2g，80％)。
向1，3-丙烷磺內(nèi)酯(1.6g，13mmol)在THF(70mL)中的冷(-50℃)溶液內(nèi)加入BuLi(2M THF溶液，6.5mL，13mmol)。攪拌30分鐘后，加入2-噻吩基甲基溴(獲自步驟1，2.3g，13mmol)，攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，在此期間控制溫度介于-50℃到-20℃之間。冷卻反應(yīng)混合物到-78℃，用1N HCl猝滅，進(jìn)而加EtOAc稀釋。分出有機(jī)相，用1N HCl洗滌，濃縮。殘留物加甲苯(10mL)稀釋，進(jìn)而通過柱層析分離(使用己烷/EtOAc 70/30作為洗脫劑)，得到1-(2-噻吩基)-2，4-丁烷磺內(nèi)酯(800mg，35％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.40(m，1H)，2.60(m，1H)，3.15(m，1H)，3.55(m，2H)，4.38(m 1H)，4.43(m，1H)，6.94(m，2H)，7.22(m，1H).13C NMR(125MHz，CDCl3)δ29.31，29.54，56.76，67.00，125.29，126.95，127.60，137.92. 另外還分離得到1，1-雙(2-噻吩基甲基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯，收率9％(380mg)。
向氫氧化銨(28-30％，10mL，80mmol)中緩慢加入1-(2-噻吩基)-2，4-丁烷磺內(nèi)酯(在步驟2中獲得，218mg，1mmol)在THF與EtOH共溶劑(20mL，v/v＝1∶1)中的溶液。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物4小時(shí)，然后濃縮。將所得固體懸浮在EtOH中，加熱回流15分鐘，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用乙醚洗滌，干燥得到標(biāo)題化合物(170mg，71％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.84-2.00(m，2H)，2.80-3.10(m，4H)，3.38(m，1H)，6.88(m，2H)，7.20(m，1H)；13C NMR(125MHz，D2O)δ27.05，30.28，37.78，59.55，125.16，126.96，127.54；ES-MS 234(M-1). 4-氨基-1-(2-噻吩基)-2-(2-噻吩基甲基)-2-丁烷磺酸(化合物N85)的制備 向1，1-雙(2-噻吩基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(在化合物N84的制備步驟2中獲得，150mg，0.48mmol)在THF與EtOH共溶劑(10mL，v/v＝1∶1)中的溶液內(nèi)緩慢加入氫氧化銨水溶液(28％，5mL，38mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物8小時(shí)，然后濃縮。將得到的固體懸浮在EtOH中，加熱回流15分鐘，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用乙醚洗滌，干燥后得到標(biāo)題化合物(140mg，88％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.78(t，J＝7.0Hz，2H)，3.07-3.10(m，4H)，3.28(s，2H)，6.87(m，2H)，6.92(m，2H)，7.30(m，2H)，7.60(bs，2H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ31.88，34.96，36.31，60.74，125.34，127.37，128.88，139.60；ES-MS 330(M-1). 4-(叔丁基氨基)-1-(噻吩-2-基)丁烷-2-磺酸(化合物N86)的制備 向1-(2-噻吩基甲基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(在化合物N84的制備步驟2中獲得，218mg，1mmol)的THF(5mL)溶液中加入叔丁胺(1mL)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物15小時(shí)，然后濃縮。將得到的固體懸浮在EtOH(10mL)中，加熱回流1小時(shí)，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用乙醚洗滌，干燥后得到標(biāo)題化合物(142mg，63％)。
1H NMR(500MHz，D2O)δ1.12(s，9H)，1.82(m，1H)，1.95(m，1H)，2.70(m，1H)，2.96(m，2H)，3.07(m，1H)，3.40(m，1H)，6.90(m，2H)，7.21(m，1H).13C NMR(125MHz，D2O)δ24.92，26.50，30.25，39.46，57.16，59.56，125.27，126.99，127.63；ES-MS 290(M-1). 4-[2-(2-噻吩-2-基丙基)氨基]-2-丁烷磺酸(化合物N87)的制備 向2-(2-噻吩基)-2-丙胺(400mg，2.84mmol)在THF(9mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入2，4-丁烷磺內(nèi)酯(386mg，2.84mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物15小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體，懸浮在EtOH(5mL)中，再攪拌回流1小時(shí)。冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(450mg，57％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.06(d，J＝6.8Hz，3H)，1.62(m，1H)，1.71(s，6H)，1.95(m，1H)，2.75(m，1H)，2.85(t，J＝8.0Hz，2H)，6.99(m，1H)，7.18(m，1H)，7.42(m，1H)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ14.65，25.83，25.87，28.41，40.20，53.28，59.50，127.68，127.95，142.27；ES-MS 276(M-1). 4-[2-(2-噻吩-2-基丙基)氨基]-1-(2-噻吩基)-2-丁烷磺酸(化合物N88)的制備 向2-(2-噻吩-2-基丙基)胺(110mg，1.3mmol)在頻哪酮(9mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入1-(噻吩-2-基甲基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(得自化合物N84的制備步驟2，218mg，1.0mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物24小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體，懸浮在EtOH(5mL)中，再攪拌回流1小時(shí)。冷卻懸浮液到室溫。過濾收集固體，用乙醇洗滌，在高真空下干燥，得到標(biāo)題化合物(280mg，78％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.68(s，6H)，1.82(m，2H)，2.50-2.88(m，4H)，6.82(m，1H)，6.92(m，1H)，7.12(m，1H)，7.26(m，1H)，7.34(m，1H)，7.65(m，1H)，9.00(bs，1H)，9.26(bs，1H).13C NMR(125MHz，DMSO-d6)δ26.31，26.56，26.85，31.24，58.41，60.14，125.06，126.64，127.74，127.80，127.92，128.24，142.11，144.00；ES-MS 358(M-1). 3-(1-金剛烷基)-3-氨基丙烷-1-磺酸(化合物QX)的制備 在室溫、15分鐘內(nèi)，向氯鉻酸吡啶(18.5g，86mmol)的二氯甲烷(120mL)懸浮液中加入1-金剛烷基甲醇(10g，60mmol)的二氯甲烷(90mL)溶液。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物90分鐘，接著加熱庚烷(450mL)。過濾混合物，濃縮濾液。將殘留物溶于戊烷(100mL)，所得混合液用NaOH(0.2N，3×50mL)和水洗滌。硫酸鎂干燥，濃縮得到金剛烷-1-甲醛，為白色固體(7.2g，73％)。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δppm 9.32(s，1H)，2.08-2.03(m，3H)，1.92-1.91(m，3H)，1.80-1.75(m，3H)，1.73-1.68(m，6H). 將丙二酸(4.6g，43.8mmol)、乙酸銨(7.0g，91mmol)和步驟1的金剛烷-1-甲醛(7.2g，43.8mmol)在乙醇(11mL)中回流4小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物，過濾。濃縮所得溶液，將殘留物分配在二氯甲烷和水之間。此時(shí)有沉淀形成，過濾過濾收集。凍干水相，將該固體物與過濾獲得的固體物合并，得到3-(1-金剛烷基)-3-氨基丙酸，為白色固體(6.82g，70％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 2.96(dd，1H，J＝2.9和11.2Hz)，2.48(dd，1H，J＝2.9和16.6Hz)，2.23(dd，1H，J＝11.7和16.6Hz)，2.04(bs，3H)，1.80-1.69(m，6H)，1.61(m，6H). 向3-(1-金剛烷基)-3-氨基丙酸(得自步驟2，5.98g，26.8mmol)的無(wú)水THF(25mL)溶液中加入硼烷(1M THF溶液，80.4mL，80.4mmol)。加熱回流并且攪拌反應(yīng)混合物過夜。加數(shù)滴甲醇終止反應(yīng)，然后與甲醇一起蒸發(fā)。在回流狀態(tài)下，將殘留物用甲醇(5mL)和濃HCl(5mL)處理30分鐘。蒸發(fā)溶劑，將殘留物溶于最少量的甲醇中，隨后用乙醚沉淀，過濾收集，真空干燥后得到3-(1-金剛烷基)-3-氨基丙-1-醇，為白色固體(4.77g，72％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.86-3.82(m，1H)，3.75-3.71(m，1H)，2.91(d，1H，J＝10.7Hz)，2.04(bs，3H)，1.98-1.94(m，1H)，1.80-1.78(m，3H)，1.72-1.70(m，3H)，1.67-1.58(m，7H). 在氫溴酸(47％，45mL)中回流步驟3的醇(4.77g，19.4mmol)過夜。減壓除去溶劑，固體物在真空下干燥，從而得到1-(1-金剛烷基)-3-溴丙-1-胺，為白色固體(6.04g，88％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.70-3.66(m，1H)，3.55-3.49(m，1H)，2.93(dd，1H，J＝2.4和9.5Hz)，2.39-2.32(m，1H)，2.06(b8，3H)，2.00-1.93(m，1H)，1.81-1.78(m，3H)，1.73-1.70(m，3H)，1.62(m，6H). 將步驟4的1-(1-金剛烷基)-3-溴丙-1-胺(6.04g，17.1mmol)和亞硫酸鈉(3.23g，25.7mmol)在水中攪拌回流過夜。過濾收集固體物，干燥。然后用濃HCl(15mL)處理，加熱15分鐘后，冷卻溶液到室溫，過濾收集固體物，用最少量的水洗滌，再用乙醚洗滌，經(jīng)真空干燥得到標(biāo)題化合物，為白色固體(2.75g，59％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 7.83(bs，3H)，2.81-2.78(m，1H)，2.72-2.70(m，1H)，2.06-2.02(m，1H)，2.01-1.97(m，3H)，1.68-1.49(m，13H)；13C NMR(DMSO，500MHz)δppm 107.0，61.0，50.1，37.7，36.8，35.3，28.1，23.7；ES-MS 272(M-1). 2-(2-金剛烷基)-3-氨基丙烷-1-磺酸(化合物SX)的制備 在-78℃下，向二異丙胺(5.0mL，0.036mol)的THF(30mL)溶液中加入n-BuLi(21mL，1.6M，0.035mol)。于-78℃攪拌所得溶液30分鐘，然后溫?zé)岬?℃，再攪拌30分鐘。冷卻溶液到-78℃，用2-金剛烷基乙腈(4.5g，0.015mol)的THF(10mL)溶液處理?；旌衔镉?78℃攪拌30分鐘，溫?zé)岬绞覝乇３?0分鐘。隨后再次冷卻混合物到-78℃，用碳酸二乙酯(2.0mL，0.016mol)處理。于-78℃攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)?；旌衔镉蔑柡蚇H4Cl水溶液(10mL)猝滅，隨后加入水。水相用乙醚提取，合并有機(jī)相，用5％HCl洗滌，硫酸鎂干燥。加入己烷，過濾混合物。濾液通過Biotage純化(5％EtOAc/己烷)，得到α-氰基-金剛烷-2-乙酸乙酯(2.74g，74％)，其中含有約20％的起始原料。該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化直接用于下面的反應(yīng)中。
向乙基酯粗品(得自步驟1，1.29g，5.22mmol)的THF(4mL)溶液中緩慢加入LAH 2.0M(8.0mL，16mmol)。加熱回流混合物過夜，用最少量的20％KOH水溶液猝滅。將混合物通過CeliteTM過濾。真空蒸發(fā)濾液，將殘留物溶于二氯甲烷(15mL)。向該二氯甲烷溶液中加入(BOC)2O(1.5g)，攪拌混合物過夜。蒸除溶劑，殘留物在Biotage上純化，得到2-(2-金剛烷基)-N-Boc-3-氨基-1-丙醇(425mg，26％)。
2-(2-金剛烷基)-N-Boc-3-氨基-1-丙醇(425mg，得自步驟2，1.38mmol)用HBr 48％(20mL)處理，加熱回流過夜。蒸除水，所得固體用乙醚研制，得到2-(2-金剛烷基)-3-溴-1-丙胺HBr鹽(486mg，100％)，為米色固體。
將2-(2-金剛烷基)-3-溴-1-丙胺HBr鹽(486mg，得自步驟3，1.38mmol)和亞硫酸鈉(260mg，2.06mmol)在脫氣水(3mL)中加熱回流過夜。過濾固體，用水(20mL)洗滌。將固體物轉(zhuǎn)移到甲醇(20mL)中，回流混合物1小時(shí)。過濾收集固體物，得到標(biāo)題化合物(105mg，28％)。
1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δ3.06(dd，J＝1.9Hz，J＝12.7Hz，1H)，2.73(m，2H)，2.60(m，1H)，2.31(m，1H)，1.84-1.79(m，8H)，1.68-1.62(m，4H)，1.45(m，3H)；ES-MS 272(M-1). 3-(2-金剛烷基)-3-氨基丙烷-1-磺酸(化合物SY)的制備 將金剛烷-2-甲醛(9.6g，0.058mol)、乙酸銨(9.4g，0.12mol)和丙二酸(6.0g，0.058mol)在乙醇(30mL)中的混合物加熱回流過夜。冷卻混合物到室溫，濾除固體。將濾液倒入二氯甲烷/水(150mL/150mL)混合液中。過濾收集如此形成的固體物，在真空下干燥，得到3-氨基-3-(2-金剛烷基)丙酸(4.6g，35％)。
向上步所得酸(2.0g，0.0090mol)在無(wú)水THF(10mL)中的溶液內(nèi)加入BH3-THF 1M(27mL，0.0027mol)。加熱回流混合物過夜。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，小心用甲醇猝滅。蒸發(fā)溶劑，留下殘留物，然后在回流狀態(tài)下用甲醇(20mL)和濃HCl(20mL)處理30分鐘。蒸發(fā)所有揮發(fā)物，將固體殘?jiān)苡诩状?100mL)中，用乙醚(150mL)沉淀，過濾收集固體，得到3-氨基-3-(2-金剛烷基)-1-丙醇，為鹽酸鹽形式(1.6g，74％)。
加熱回流上步氨基醇(820mg，得自步驟2，3.34mmol)在HBr水溶液(48％，25mL)中的懸浮液過夜。再加入HBr水溶液(48％，25mL)，繼續(xù)回流混合物24小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，得到HBr鹽形式的3-溴-1-(2-金剛烷基)-丙胺(1.27g，100％)。
將步驟3產(chǎn)物(1.27g，3.59mmol)和Na2SO3(680mg，5.40mmol)在脫氣水(10mL)中加熱回流過夜。冷卻混合物到室溫；過濾收集固體物，用少量水(5-10mL)洗滌。將得到的固體用乙醇(10mL)回流處理30分鐘。過濾收集固體物，真空干燥，得到白色固體標(biāo)題化合物(658mg，67％)。
1H NMR(500MHz，CD3OD)，δ3.69(m，1H)，2.87(t，2H，J＝6.3Hz)，2.22(m，1H)，1.93-1.73(m，14H)，1.57(m，2H)；ES-MS 272(M-1). 2-(1-金剛烷基)-3-氨基丙烷-1-磺酸(化合物SZ)的制備 將甲磺酸乙酯(1.21mL，11.7mmol)的THF(10mL)溶液冷卻到-78℃。向該冷溶液中逐滴加入LiHMDS 1M THF溶液(12.5mL，12.5mmol)。攪拌生成的黃色溶液30分鐘，然后在-78℃下通過套管轉(zhuǎn)移到另一個(gè)裝有金剛烷基溴甲基酮(2.00g，7.80mmol)的THF(40mL)溶液的燒瓶?jī)?nèi)?；旌衔镉?78℃攪拌1.5小時(shí)，緩慢升溫到-45℃，再進(jìn)一步攪拌2.5小時(shí)。加飽和NH4Cl水溶液(100mL)終止反應(yīng)。混合物用AcOEt(3×100mL)提取，鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，減壓濃縮后得到2-(1-金剛烷基)-1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯，為黃色固體(1.93g，97％)。
在PyrexTM高壓瓶?jī)?nèi)，向上步得到的磺內(nèi)酯(0.66g，2.59mmol)在MeOH(60mL)中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，0.198g)，在40psi下氫化48小時(shí)。反應(yīng)混合物通過CeliteTM過濾，濃縮濾液至干，得到2-(1-金剛烷基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯白色固體(0.65g，98％)。
將2-(1-金剛烷基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.620g，得自步驟2，2.42mmol)溶于DMF(10mL)。加入NaN3(0.188g，2.90mmol)，于130℃加熱所得溶液過夜。蒸發(fā)溶劑，得到米色固體。將該固體溶于甲醇，使所得溶液通過AmberliteTM IR-120(+)離子交換樹脂(10g，預(yù)先用水、甲醇順序洗滌)。蒸發(fā)溶劑，得到黃色粘性液體，在真空下變?yōu)槊咨腆w(0.43g，76％)。
在PyrexTM高壓瓶?jī)?nèi)，向步驟3的磺酸衍生物(0.4176g，1.79mmol)在甲醇(36mL)與乙酸(4mL)的溶劑混合液中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，0.150g)。在30psi下氫化混合物過夜。反應(yīng)混合物通過CeliteTM過濾，濃縮濾液至干，得到白色固體標(biāo)題化合物(0.210g，57％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 7.81(大單峰，3H)，3.11(d，1H，J＝12.7Hz)，2.90(d，1H，J＝13.7Hz)，2.70(dd，1H，J＝10.1Hz，J＝12.4Hz)，1.9(大單峰，3H)，1.67-1.59(m，7H)，1.49-1.31(m，6H).1H is partially hidden with DMSOsignal. 2-[(芐基氨基)甲基]-3，3-二甲基丁烷-1-磺酸(化合物N42)的制備 向4-叔丁基-1，2-氧硫雜戊環(huán)2，2-二氧化物(167mg，0.94mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入芐胺(0.153mL)。130℃攪拌溶液24小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，用乙醇研制。過濾收集固體物，連續(xù)用乙醇(2×20mL)和丙酮(2×20mL)洗滌，得到標(biāo)題化合物(205mg，77％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 7.24(m，5H)，4.21(q，2H，J＝13&12.5Hz)，3.43(d，1H，J＝13Hz)，3.23(d，1H，J＝14Hz)，3.09(m，1H)，2.87(dd，1H，J＝9.5，J＝10Hz)，2.05(br t，1H，J＝9.5Hz)，1.02(s，9H)；ES-MS 284(M-1). 3-(9H-芴-9-基氨基)丙烷-1-磺酸(化合物N44)的制備 將9-氨基芴鹽酸鹽(1.02g，4.69mmol)用飽和K2CO3溶液(100mL)處理，混合物用EtOAc(3×75mL)提取。合并有機(jī)提取物，硫酸鈉干燥，濃縮留下殘留物，再與甲苯共沸，得到9-氨基芴(0.831g，4.59mmol)。將該游離胺溶于25％甲苯/乙腈(10mL)中。向所得溶液中加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(532mg，4.36mmol)。攪拌回流反應(yīng)混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集固體物，用丙酮洗滌，然后在回流狀態(tài)下用乙醇處理1小時(shí)。待混合物冷卻到室溫后，過濾收集固體物，用丙酮洗滌，經(jīng)真空干燥得到標(biāo)題化合物(808mg，74％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.96(大單峰，2H)，7.96(d，2H，J＝7.3Hz)，7.88(d，2H，J＝7.8Hz)，7.56(t，2H，J＝7.3Hz)，7.45(t，2H，J＝7.3Hz)，5.66(s，1H)，2.98(s，1H)，2.64(t，2H，J＝5.9Hz)，1.96(t，2H，J＝5.9Hz).13C NMR(CD3OD，125MHz)δppm 141.02，137.63，130.10，128.12，126.15，120.80，59.44，49.64，43.43，21.82. 3-[(4，7-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N51)的制備 向4，7-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮(515mg，2.67mmol)在乙醇(10mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(447mg，6.43mmol)在乙醇/水(1mL/1mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(527mg，6.43mmol)在乙醇/水(1mL/1mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物3.5小時(shí)。加入水，過濾收集由此形成的白色固體，得到4，7-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(463mg，84％)。
向步驟1得到的4，7-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(463mg，2.23mmol)在甲醇(45mL)與乙酸(5mL)混合液中的脫氣溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，100mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓(1Atm)下氫化過夜。用氮?dú)鉀_洗反應(yīng)混合物，然后通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到1-氨基-4，7-二甲氧基-2，3-二氫化茚(定量)。
向1-氨基-4，7-二甲氧基-2，3-二氫化茚(2.23mmol)在25％乙腈/甲苯溶液(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(259mg，2.12mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。濃縮混合物得到米色固體，隨后通過加熱將該固體溶于乙醇中。冷卻熱混合物到室溫，放置過夜。過濾收集由此形成的結(jié)晶固體，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(223mg，32％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.86(bs，1H)，8.66(bs，1H)，6.95(d，1H，J＝8.8Hz)，6.85(d，1H，J＝8.8Hz)，4.73(m，1H)，3.78(s，3H)，3.75(s，3H)，3.05(m，2H)，3.00-2.94(m，1H)，2.79-2.74(m，1H)，2.62-2.60(m，2H)，2.39-2.34(m，1H)，2.19-2.15(m，1H)，1.98(m，2H)；ES-MS 314(M-1). 3-[(5，6-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N53)的制備 向5，6-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮(565mg，2.94mmol)在乙醇(10mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(490mg，7.05mmol)在乙醇/水(1mL/1mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(578mg，7.05mmol)在乙醇/水(1mL/1mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物3.5小時(shí)。加入水，過濾收集由此形成的白色固體，真空干燥，得到5，6-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(488mg，80％)。
向步驟1得到的酮肟(285mg，1.37mmol)在甲醇(35mL)與乙酸(4mL)中的脫氣溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，80mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓(1Atm)下氫化過夜。用氮?dú)鉀_洗反應(yīng)混合物，然后通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到1-氨基-5，6-二甲氧基-1-茚滿(定量)，其中包含少量溶劑。
向1-氨基-4，7-二甲氧基-1-茚滿(1.37mmol)在25％甲苯/乙腈溶液(10mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(159mg，1.30mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)。過濾收集所形成的白色固體，用丙酮洗滌，然后在乙醇中于回流狀態(tài)下處理1小時(shí)。冷卻乙醇混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮洗滌，真空干燥后得到標(biāo)題化合物(191mg，44％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 8.87(大單峰，2H)，7.17(s，1H)，6.94(s，1H)，4.65-4.64(m，1H)，3.76(s，6H)，3.14-2.98(m，3H)，2.83-2.77(m，1H)，2.68-2.65(m，2H)，2.44-2.37(m，1H)，2.15-2.11(m，2H)；ES-MS314(M-1). 3-[(5-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N56)的制備 向5-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮(1.06g，6.5mmol)在乙醇(20mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(1.08g，15.6mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(1.28g，15.6mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物3.5小時(shí)。加入水，過濾收集由此形成的米色固體，得到5-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1g，87％)。
向步驟1得到的5-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1g，5.64mmol)在甲醇(90mL)與乙酸(10mL)混合液中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，100mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓下攪拌過夜，然后用氮?dú)鉀_洗，再通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到1-氨基-5-甲氧基-2，3-二氫化茚(定量)。
向1-氨基-5-甲氧基-1-茚滿(5.64mmol)在25％乙腈/甲苯溶液(50mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(654mg，5.36mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)。過濾收集由此形成的白色固體，然后轉(zhuǎn)移到乙醇中，加熱回流1小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾收集固體物，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(985mg，64％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.05(bs，1H)，8.86(bs，1H)，7.46(d，1H，J＝8.8Hz)，6.92(d，1H，J＝2Hz)，6.86(dd，1H，J＝2.4和8.5Hz)，4.65-4.63(m，1H)，3.76(s，3H)，3.11(t，2H，J＝6.8Hz)，3.08-3.03(m，1H)，2.87-2.81(m，1H)，2.69-2.64(m，2H)，2.44-2.37(m，1H)，2.17-2.11(m，1H)，2..00-1.95(m，2H)；13C NMR(DMSO，500MHz)δppm 161.3，147.3，130.2，127.2，113.8，110.6，61.7，56.0，50.0，45.4，30.7，29.1，22.5；ES-MS 284(M-1). 3-[(5-氟-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N58)的制備 向5-氟-2，3-二氫化茚-1-酮(1g，6.7mmol)在乙醇(20mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(1.11g，16mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(1.31g，16mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物3.5小時(shí)。加入水，過濾收集由此形成的白色固體，得到5-氟-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1.1g，99％)。
向步驟1得到的5-氟-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1.1g，6.6mmol)在甲醇(90mL)與乙酸(10mL)混合液中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，200mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓下攪拌過夜。隨后用氮?dú)鉀_洗反應(yīng)混合物，再通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到1-氨基-5-氟-2，3-二氫化茚(定量)。
向1-氨基-5-氟-2，3-二氫化茚(6.6mmol)在25％乙腈/甲苯溶液(50mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(766mg，6.3mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)。過濾收集由此形成的白色固體，然后轉(zhuǎn)移到乙醇中，加熱回流1小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾收集固體物，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.16g，68％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.16(bs，1H)，8.96(bs，1H)，7.60(dd，1H，J＝8.3和5.4Hz)，7.21(dd，1H，J＝2和9Hz)，7.17-7.13(m，1H)，4.73-4.70(m，1H)，3.18-3.13(m，2H)，3.11-3.06(m，1H)，2.92-2.86(m，1H)，2.71-2.65(m，2H)，2.47-2.41(m，1H)，2.21-2.14(m，1H)，2.03-1.96(m，2H)；ES-MS 272(M-1). 3-[(2-甲基-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N59)的制備 向2-甲基-2，3-二氫化茚-1-酮(1g，6.8mmol)在乙醇(20mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(1.14g，16mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(1.34g，16mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物5小時(shí)，冷卻到室溫，倒入水中?；旌衔镉肁cOEt提取兩次。合并提取物，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮至干，得到2-甲基-2，3-二氫化茚-1-酮肟，為無(wú)色油體(定量)。
向步驟1得到的2-甲基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1.1g，6.6mmol)在甲醇(90mL)與乙酸(10mL)中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，200mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓下攪拌過夜，然后用氮?dú)鉀_洗，再通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到1-氨基-2-甲基-2，3-二氫化茚(定量)。
向1-氨基-2-甲基-2，3-二氫化茚(6.8mmol)在25％乙腈/甲苯溶液(50mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(794mg，6.5mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫。過濾收集白色固體物，然后轉(zhuǎn)移到乙醇中，加熱回流30分鐘。冷卻混合物到室溫后，過濾收集由此形成的固體物，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為異構(gòu)體混合物(267mg，15％)。主要異構(gòu)體的1H NNMR(DMSO，500MHz) δppm 8.95(bs，2H)，7.51(d，1H，J＝7.3Hz)，7.38-7.33(m，2H)，7.29-7.26(m，1H)，4.54-4.53(m，1H)，3.18-3.17(m，1H)，3.10-3.08(m，1H)，2.99-2.95(m，1H)，2.82-2.75(m，2H)，2.70-2.67(m，2H)，2.04-1.99(m，2H)，1.17(d，3H，J＝6.8Hz)；ES-MS 268(M-1). 3-[(4-甲氧基-2，3-二氫-1H-茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N61)的制備 向4-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮(1g，6.5mmol)在乙醇(20mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(1.08g，15.6mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(1.28g，15.6mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)，然后冷卻到室溫，加入水。過濾收集白色固體物，得到4-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1.1g，定量)。
向步驟1得到的4-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1.1g，6.5mmol)在甲醇(90mL)與乙酸(10mL)中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，200mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓下攪拌過夜，然后用氮?dú)鉀_洗，再通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到1-氨基-4-甲氧基-2，3-二氫化茚(定量)。
向4-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-胺(6.5mmol)在25％乙腈/甲苯溶液(50mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(754mg，6.2mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)。過濾收集白色固體物，然后轉(zhuǎn)移到乙醇中，加熱回流30分鐘。冷卻到室溫后，過濾收集固體物，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.08g，59％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.20(bs，1H)，8.94(bs，1H)，7.31(t，1H，J＝8.3Hz)，7.15(d，1H，J＝7.3Hz)，6.99(d，1H，J＝8.3Hz)，4.75-4.73(m，1H)，3.81(s，3H)，3.12-3.11(m，2H)，2.98-2.92(m，1H)，2.81-2.75(m，1H)，2.68-2.66(m，2H)，2.45-2.37(m，1H)，2.16-2.10(m，1H)，2.00-1.95(m，2H).13C NMR(DMSO，500MHz)δppm 156.5，139.9，132.6，129.4，118.0，111.8，62.4，55.9，50.0，45.5，28.4，27.5，22.5；ES-MS 284(M-1). 3-[(6-甲氧基茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N62)的制備 向5-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮(1.00g，6.16mmol)在乙醇(20mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(1.03g，14.8mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(1.28g，15.6mmol)在乙醇/水(4mL/4mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物3小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，過濾收集由此形成的白色固體，得到6-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(0.81g，74％)。
向酮肟(得自步驟1，0.810g，4.57mmol)在甲醇(54mL)與乙酸(6mL)中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，180mg)。在氫氣壓下攪拌反應(yīng)混合物過夜，然后用氮?dú)鉀_洗，再通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到米色固體6-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-胺(定量)，其中含有少量溶劑，該產(chǎn)物無(wú)需純化直接用于下一步驟。
向6-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-胺(4.57mmol)在25％甲苯/乙腈溶液(20mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(714mg，5.85mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)。過濾收集由此形成的白色固體，用丙酮洗滌，然后轉(zhuǎn)移到乙醇中，加熱回流1小時(shí)。隨后冷卻到室溫，過濾收集固體物，用丙酮洗滌，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(568mg，44％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 7.25(d，1H，J＝8.3Hz)，7.15(d，1H，J＝2.0Hz)，6.95(dd，1H，J＝2.4Hz，J＝8.8Hz)，4.75(dd，1H，J＝4.4Hz，J＝7.8Hz)，3.81(s，3H)，3.30-3.24(m，2H)，3.13-3.07(m，1H)，2.97-2.88(m，3H)，2.61-2.53(m，1H)，2.27-2.21(m，1H)，2.19-2.14(m，2H)13C NMR(CD3OD，125MHz)δppm 161.00，139.50，137.73，127.29，117.89，111.22，64.37，56.20，50.07，46.24，30.37，30.35，23.24；ES-MS 284(M-1). 3-[(4-甲基-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N68)的制備 向4-甲基-2，3-二氫化茚-1-酮(1g，6.8mmol)在乙醇(20mL)中的攪拌溶液內(nèi)加入羥胺鹽酸鹽(1.14g，16mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液，接著再加入乙酸鈉(1.35g，16mmol)在乙醇/水(2mL/2mL)中的懸浮液。加熱回流反應(yīng)混合物3.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，過濾收集由此形成的白色固體，得到4-甲基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1.1g，定量)。
向4-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(1.1g，6.8mmol)在甲醇(90mL)與乙酸(10mL)中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，200mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓下攪拌過夜，然后用氮?dú)鉀_洗，再通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到4-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-胺(定量)。
向4-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-胺(6.8mmol)在25％乙腈/甲苯溶液(50mL)中的溶液內(nèi)加入1，3-丙烷磺內(nèi)酯(794mg，6.5mmol)。加熱回流反應(yīng)混合物4小時(shí)。過濾收集得到的白色固體，然后轉(zhuǎn)移到乙醇中，加熱回流30分鐘，之后冷卻到室溫。過濾收集固體物，真空干燥，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(395mg，25％)。
1H NMR(DMSO，500MHz)δppm 9.19(bs，1H)，8.92(bs，1H)，7.39(d，1H，J＝7.3Hz)，7.24-7.19(m，2H)，4.74(m，1H)，3.14(m，2H)，3.02-2.96(m，1H)，2.84-2.78(m，1H)，2.68-2.66(m，2H)，2.44-2.38(m，1H)，2.25(s，3H)，2.16-2.10(m，1H)，2.01-1.97(m，2H)；ES-MS 268(M-1). (3R)-3-氨基-5-甲基己烷-1-磺酸(化合物N73)的制備 向亮氨酸甲酯鹽酸鹽(5g，28mmol)和三乙胺(7.7mL，55mmol)在二氯甲烷(200mL)中的溶液內(nèi)加入二碳酸二叔丁酯(9g，41mmol)。室溫?cái)嚢璺磻?yīng)混合物過夜，用檸檬酸(10％)、飽和NaHCO3和鹽水順序洗滌，硫酸鈉干燥。濃縮溶液得到油狀殘留物。使用EtOAc/己烷30％將殘留物通過快速色譜純化，得到Boc-Leu-Ome，為無(wú)色油體(定量)。
在配有低溫溫度計(jì)的3頸500mL干燥燒瓶?jī)?nèi)加入上面獲得的酯(27.5mmol)和甲苯(70mL)。冷卻該溶液到-78℃，然后利用加料漏斗逐滴加入在甲苯中的二異丁基氫化鋁1M溶液(38.5mL，38.5mmol)，使內(nèi)部溫度保持低于-65℃(2小時(shí))。于-78℃繼續(xù)攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后緩慢加10mL冷甲醇(-78℃)猝滅，期間同樣維持內(nèi)部溫度低于-65℃。攪拌下，在15分鐘內(nèi)將反應(yīng)混合物緩慢倒入100mL冰冷HCl 1N溶液中。含水混合物用EtOAc(3×500mL)提取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮得到相應(yīng)的醛，為無(wú)色油體(定量)。
在0℃下，向氫化鈉(334mg，14mmol)在無(wú)水THF(100mL)中的懸浮液內(nèi)加入(二乙氧基磷酰基)甲磺酸乙酯(4.8g，18.6mmol)。0℃攪拌反應(yīng)混合物15分鐘，然后一次性加入2g(9.3mmol)醛。反應(yīng)混合物于0℃攪拌2小時(shí)，然后在室溫下攪拌1小時(shí)。將混合物倒入水中，用EtOAc提取。合并的提取物用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，濃縮得到無(wú)色油體。使用EtOAc/己烷50％，將殘留物通過Biotage色譜純化，得到(1E，3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-甲基己-1-烯-1-磺酸乙酯，為無(wú)色油體，抽吸產(chǎn)生結(jié)晶(2.43g，81％)。
氮?dú)夥障?，向步驟3產(chǎn)物(1.89g，5.87mmol)在乙醇(50mL)中的溶液內(nèi)加入鈀-活性炭(10％，200mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓下攪拌1.5小時(shí)，然后用氮?dú)鉀_洗混合物，再通過CeliteTM，用乙醇洗滌數(shù)次。除去溶劑，得到(3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-甲基己烷-1-磺酸酯，為無(wú)色油體，真空放置發(fā)生固化(1.72g，91％)。
將步驟4的反應(yīng)產(chǎn)物(1.72g，5.3mmol)在甲酸(15mL)和水(0.6mL)中于50℃加熱24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，在真空下干燥。將如此得到的膠狀物溶于盡量少的甲醇中，用乙醚沉淀。過濾收集固體。進(jìn)行兩次該沉淀步驟，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.571g，55％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 3.39-3.36(m，1H)，2.89(t，2H，J＝7.3Hz)，1.98-1.91(m，2H)，1.57-1.55(m，1H)，1.41-1.36(m，2H)，0.78(dd，6H，J＝3.4和7.2Hz)13C NMR(D2O，500MHz)δppm 49.1，46.9，41.0，27.9，23.9，21.8，21.3；ES-MS194(M-1). (1E，3R)-3-氨基-5-甲基己-1-烯-1-磺酸(化合物N74)的制備 于50℃加熱在甲酸(5mL)和水(0.2mL)中的(1E，3R)-3-[(叔丁氧羰基)氨基]-5-甲基己-1-烯-1-磺酸乙酯(參見制備NRM8588的步驟3)(532mg，1.7mmol)24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，在真空下干燥。將如此得到的膠狀物溶于最少量的甲醇中，用乙醚沉淀。過濾收集固體。進(jìn)行兩次該沉淀步驟，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.082g，26％)。
1H NMR(D2O，500MHz)δppm 6.57(d，1H，J＝15Hz)，6.30(dd，1H，J＝8.2和15Hz)，3.90-3.87(m，1H)，1.55-1.46(m，3H)，0.80-0.77(m，6H).ES-MS192(M-1). 2-{[(1R)-2，3-二氫-1H-茚-1-基氨基]甲基}-3，3-二甲基丁烷-1-磺酸(化合物N76)的制備 向4-叔丁基-1，2-氧硫雜戊環(huán)-2，2-二氧化物(225mg，1.26mmol)的二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入過量的(R)-茚滿胺(410mg)。于130℃攪拌該溶液48小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，減壓蒸發(fā)溶劑。殘留物用乙醇研制。過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，得到標(biāo)題化合物(295mg，75％收率)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 7.43(m，1H)，7.16(m，3H)，4.25(m，1H)，3.14(m，1H)，2.00(m，2H)，2.72(m，2H)，2.69(m，1H)，2.23(m，1H)，1.88(m，2H)，1.00(s，9H)；ES-MS 310(M-1). 3-[(4，5-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N77)的制備 將4，5-甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮(1.06g，5.5mmol)、羥胺鹽酸鹽(0.92g)和乙酸鈉(1.08g)的混合物在EtOH(100mL)與水(10mL)混合液中加熱回流4小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾收集沉淀物，用水(2×50mL)洗滌，真空干燥得到4，5-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(0.80g，72％)。
向酮肟粗品(得自步驟1，0.80g，3.80mmol)在EtOH/AcOH(9/1，50mL)中的脫氣溶液內(nèi)加入Pd-C(10％，100mg)。混合物在氫氣壓下氫化過夜，然后通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到4，5-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-胺(乙酸鹽)，該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
將在乙腈/甲苯(15mL/5mL)混合液中的4，5-二甲氧基-2，3-二氫化茚-1-胺(0.93g，3.67mmol)與磺內(nèi)酯(0.49g，3.67mmol)的混合物加熱回流5小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾收集所形成的固體物，然后再懸浮在EtOH(40mL)中。加熱回流該懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，真空干燥得到標(biāo)題化合物(0.75g，65％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 7.09(d，1H，J＝8.5Hz)，6.87(d，1H，J＝8.0Hz)，4.18(t，1H，J＝6.5Hz)，3.32(s，3H)，3.31(s，3H)，3.04(m，1H)，2.88(m，1H)，2.78(m，3H)，2.34(m，1H)，2H)，2.02(m，2H)，1.91(m，1H)；ES-MS 314(M-1). 2-(氨基甲基)-3，3-二甲基丁烷-1-磺酸(化合物N78)的制備 向4-叔丁基-1，2-氧硫雜戊環(huán)2，2-二氧化物(468mg，26.3mmol)的二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入疊氮化鈉(187mg)。130℃加熱該溶液36小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，真空蒸發(fā)溶劑。殘留物用乙醇研制；過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，得到相應(yīng)的疊氮基衍生物(420mg，72％)。
向上步所得疊氮基衍生物(400mg)在EtOH(75mL)中的脫氣溶液內(nèi)加入Pd-C(10％，80mg)?；旌衔镌跉錃鈮合職浠?4小時(shí)，然后通過CeliteTM過濾，定量得到標(biāo)題化合物的鈉鹽。將該鹽溶于MeOH(20mL)，所得的甲醇溶液用AmberliteIR-120(+)離子交換樹脂(4g，經(jīng)甲醇和水預(yù)先洗滌)。室溫?cái)嚢杌旌衔?0分鐘，過濾除去不溶物。蒸發(fā)溶劑，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(400mg，98％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.08(m，H)，2.95(m，1H)，2.74(m，1H)，2.63(m，1H)，1.76(br t，1H，J＝9.5Hz)，0.95(s，9H)；ES-MS 194(M-1). (1E，3S)-3-氨基-5-甲基己-1-烯-1-丙烷磺酸(化合物N79)的制備 氮?dú)夥障?，在配置有磁力攪拌棒、加液漏斗和溫度?jì)的500mL干燥三口圓底燒瓶?jī)?nèi)加入N-Boc.Leu.Ome(6.0g，23.4mmol)。加入干燥甲苯，冷卻所得溶液到-78℃。在1小時(shí)內(nèi)向反應(yīng)混合物中逐滴加入DIBAL-H 1M甲苯溶液(36mL，36mmol)。調(diào)整加料速度，維持內(nèi)部低于-65℃。然后在氮?dú)夥諊杏?78℃再攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。緩慢加入5mL濃MeOH(-78℃)猝滅反應(yīng)。再次將內(nèi)部溫度維持在-65℃以下，在攪拌下，于15分鐘內(nèi)將反應(yīng)混合物小心倒入HCl 1N(100mL)冷溶液內(nèi)。含水混合物然后用EtOAc(3×150mL)提取。合并有機(jī)層，用鹽水(3×100mL)洗滌，硫酸鎂干燥。減壓蒸發(fā)溶劑，定量得到相應(yīng)的醛，其不用進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
0℃，向氫化鈉(400mg，1.67mmol)的無(wú)水THF(100mL)懸浮液中逐滴加入(二乙氧基磷?；?甲磺酸乙酯(5.05，19.4mmol)。0℃攪拌反應(yīng)混合物15分鐘，接著加入步驟1中制備的醛(4.8g，22mmol)。0℃攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)，然后室溫?cái)嚢?0分鐘。將反應(yīng)混合物倒入水中，用EtOAc(3×10mL)提取。合并提取物，用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，濃縮至干。油狀殘留物使用EtOAc/己烷(1∶1)通過Biotage色譜純化，得到相應(yīng)的不飽和磺酸乙酯，為無(wú)色油體，真空放置產(chǎn)生結(jié)晶(5.43g，77％收率)。
將步驟2的酯產(chǎn)物(1.0g，4.6mmol)溶于甲酸(10mL)和水(0.5mL)中。50℃加熱混合物24小時(shí)，冷卻到室溫，減壓濃縮。真空干燥所得殘留物。所得膠狀物經(jīng)乙醇研制轉(zhuǎn)化為固體。過濾收集該固體，用乙醇洗滌，得到標(biāo)題化合物(0.495g，82％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 6.66(d，1H，J＝15Hz)，6.32(dd，1H，J＝8.3&7.3Hz)，3.88-3.93(m，1H)，1.52-1.65(m，3H)，0.97(dd，6H，J＝6和7.0Hz)；ES-MS 192(M-1). 3-[(6-甲基-2，3-二氫化茚-1-基)氨基]丙烷-1-磺酸(化合物N81)的制備 將6-甲基-2，3-二氫化茚-1-酮(0.97g，6.64mmol)、羥胺鹽酸鹽(1.1g)和乙酸鈉(1.31g)的混合物在乙醇/水(50mL/1.5mL)與水(10mL)中加熱回流5小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾收集產(chǎn)生的沉淀物，用水(2×50mL)洗滌，真空干燥得到6-甲基-2，3-二氫化茚-1-酮肟(0.98g，91％)，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
向肟粗品(得自步驟1，1g，6.2mmol)在EtOH/AcOH(9/1，50mL)中的脫氣溶液內(nèi)加入Pd-C(10％，200mg)?；旌衔镌跉錃鈮合職浠^夜，然后通過CeliteTM過濾。濃縮濾液，將殘留物與甲苯共沸兩次，得到6-甲基-2，3-二氫化茚-1-胺乙酸鹽(1.24g，定量)，該產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
將在乙腈/甲苯混合液(15mL/5mL)中的6-甲基-2，3-二氫化茚-1-胺乙酸(1.2g，6.15mmol)與1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.75g，5.5mmol)的混合物加熱回流5小時(shí)。冷卻到室溫后，過濾收集所形成的白色固體物，然后再懸浮在EtOH(40mL)中。加熱回流該懸浮液1小時(shí)。冷卻混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，真空干燥得到標(biāo)題化合物(0.85g，53％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm7.20(s，1H)，7.08(d，1H，J＝7.5Hz)7.00(d，1H，J＝5.3Hz)，4.20(t，1H，J＝7.0Hz)，2.87(m，1H)，2.78(m，3H)，2.36(m，1H)，2.31(s，3H)，2H)，2.02(m，2H)，1.84(m，1H).ES-MS 268(M-1). (3S)-3-氨基-5-甲基己烷-1-磺酸(化合物N82)的制備 向3-(叔丁氧基脲基)-5-甲基己-1-烯-1-磺酸乙酯(1.0g，2mmol)在EtOH/AcOH(9/1，50mL)中的脫氣溶液內(nèi)加入Pd-C(10％，100mg)。反應(yīng)混合物在氫氣壓下氫化1.5小時(shí)，然后用氮?dú)鉀_洗，再通過CeliteTM過濾。濾餅用乙醇洗滌數(shù)次。合并濾液和洗滌液；蒸除溶劑，得到(3-(叔丁氧基脲基)-5-甲基己烷-1-磺酸乙酯(0.99g，98％)，其未經(jīng)進(jìn)一步純化直接用于下一步驟。
將3-(叔丁氧脲基)-5-甲基己烷-1-磺酸乙酯(1.0g，3.0mmol)在甲酸(10mL)和水(0.5mL)中于50℃處理24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，在真空下干燥。將得到的膠狀物用乙醇研制。過濾收集固體，用乙醇洗滌，得到標(biāo)題化合物(0.430g，72％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.39-3.36(m，1H)，3.45-3.41(m，1H)，2.95-2.91(m，2H)2.04-1.98(m，1H)，1.74-1.70(m，1H)，1.56-1.41(m，2H)，0.98(dd，6H，J＝3.4和7.2Hz)；ES-MS 194(M-1). 化合物N38，N40和N41的制備 這三個(gè)化合物采用相同的原料即2-(叔丁基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯制備。其中2-(叔丁基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯制備如下在-78℃下，向攪拌著的雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰1.0M THF溶液(42mL，42mmol)中逐滴加入甲磺酸乙酯(4.30mL，10mmol)的無(wú)水THF(5mL)溶液?；旌衔镌?78℃攪拌30分鐘，然后逐滴加入在無(wú)水THF(10mL)中的溴頻哪酮(5g，27.9mmol)。混合物然后在-78℃攪拌2小時(shí)，再于-50℃攪拌2小時(shí)，最后用飽和氯化銨溶液(100mL)猝滅。將混合物用EtOAc(3×100mL)提取。合并有機(jī)層，用水(2×50mL)、鹽水(100mL)洗滌，硫酸鎂干燥，減壓濃縮。殘留物使用己烷∶EtOAc(9∶1)通過Biotage純化，得到2-(叔丁基)-1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯(3.78g，75％)。向2-(叔丁基)-1，3-丙-1-烯磺內(nèi)酯(1g，5.67mmol)在MeOH(50mL)中的脫氣溶液內(nèi)加入10％Pd-C(10％，150mg)?；旌衔镌?0Psi氫氣壓下氫化48小時(shí)。然后通過CeliteTM過濾混合物，濃縮得到2-(叔丁基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.90g，89％)。
2-[(叔丁基氨基)甲基]-3，3-二甲基丁烷-1-磺酸(化合物N38) 向2-(叔丁基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(83mg，0.466mmol)的二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入叔丁胺(2mL)。130℃攪拌該溶液48小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，減壓除去溶劑。殘留物用乙醇研制；過濾收集固體物，連續(xù)用乙醇(2×20mL)、丙酮(2×20mL)洗滌，經(jīng)高真空干燥，得到標(biāo)題化合物(56mg，62％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.29(m，2H)，2.98(m，1H)，2.82(m，1H)，1.98(br t，1H，J＝9.5Hz)，1.36(s，9H)，1.05(s，9H)；ES-MS 250(M-1). 2-[(1-金剛烷基氨基)甲基]-3，3-二甲基丁烷-1-磺酸(化合物N40) 向2-(叔丁基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(240mg，1.34mmol)的二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入1-金剛烷胺(204mg，1.34mmol)。130℃加熱該溶液24小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，用乙醇研制；過濾收集固體物，連續(xù)用乙醇(2×20mL)、丙酮(2×20mL)洗滌，再經(jīng)LC-MS純化，得到標(biāo)題化合物(25mg，5％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm3.00(m，2H)，2.98(m，1H)，2.81(m，1H)，2.21(br s，3H)，1.94(brt，1H，J＝9.5Hz)，1.92(m，6H)，1.75(m，6H)，1.02(s，9H)；ES-MS 328(M-1). 3，3-二甲基-2-[(甲基氨基)甲基]丁烷-1-磺酸(化合物N41) 在金屬圓筒中于130℃加熱2-(叔丁基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(70mg，0.39mmol)與過量甲胺1M THF溶液(5mL)的混合物72小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物到室溫，過濾收集固體物，用丙酮(2×20mL)洗滌，得到標(biāo)題化合物(50mg，62％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.13(m，1H)，2.79(m，1H)，2.70(m，1H)，2.53(m，1H)，2.35(s，3H)，1.86(m，1H)，0.98(s，9H)；ES-MS 208(M-1). (3S)-3-氨基-5-甲基己烷-1-磺酸(化合物N89)的制備 在-78℃，向攪拌著的雙(三甲基甲硅烷基)氨化鋰在THF(9mL，9mmol)中的1.0M溶液內(nèi)逐滴加入(3S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基-5-甲基己烷-1-磺酸乙酯(1.96g，6.0mmol)在無(wú)水THF(50mL)中的溶液。混合物在-78℃攪拌30分鐘，然后逐滴加入在無(wú)水THF(10mL)中的甲基碘(0.47mL，7.6mmol)。混合物然后在-78℃攪拌4小時(shí)，用飽和氯化銨溶液(10mL)猝滅。將混合物用EtOAc(3×50mL)提取。合并有機(jī)層，用水(2×50mL)、鹽水(100mL)洗滌，硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到無(wú)色油體。使用EtOAc/己烷1/5通過Biotage色譜純化所得油體，從而獲得相應(yīng)的α-甲基化中間體(0.85g，42％)。將該甲基化中間體(0.85g，2.5mmol)用甲酸(5mL)和水(0.25mL)于50℃處理24小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，真空干燥。將如此得到的膠狀物用乙醇研制。過濾收集固體物，用乙醇洗滌，得到標(biāo)題化合物(0.273g，54％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.47-3.45(1m，1H)，3.45-3.41(m，1H)，2.99-2.91(m，1H)，2.24-2.18(m，1H)，2.09-2.03(m，1H)，1.86-1.80(m，2H)，1.78-1.69(m，2H)，1.32(d，3H，J＝4.3)，0.98(dd，6H，J＝3.9和4.2Hz)；ES-MS 208(M-1). 2-(1-金剛烷基氨基)-3-(叔丁基氨基)丙烷-1-磺酸(化合物N90)和2-(1-金剛烷基)-3-(甲基氨基)丙烷-1-磺酸(化合物N91)的制備 將甲磺酸乙酯(1.21mL，11.7mmol)在THF(10mL)中的溶液冷卻到-78℃。向該冷溶液中逐滴加入LiHMDS 1M THF溶液(12.5mL，12.5mmol)。攪拌混合物30分鐘，然后在-78℃和氮?dú)夥諊型ㄟ^套管轉(zhuǎn)移到另一個(gè)裝有金剛烷基溴甲基酮(2.00g，7.80mmol)的THF(40mL)溶液的燒瓶?jī)?nèi)。-78℃攪拌所得混合物1.5小時(shí)，然后緩慢升溫到-45℃，在該溫度下再攪拌2.5小時(shí)。加飽和NH4Cl水溶液(100mL)終止反應(yīng)?；旌衔镉肊tOAC(3×100mL)提取，鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，減壓濃縮后得到黃色固體(1.93g，97％)。在PyrexTM高壓瓶?jī)?nèi)，在鈀-活性炭(10％，0.198g)存在下在MeOH(60mL)中氫化上述固體(0.66g，2.59mmol)，在40psi下氫化48小時(shí)。反應(yīng)混合物通過CeliteTM過濾，濃縮得到2-(1-金剛烷基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯白色固體(0.65g，98％)。
2-(1-金剛烷基)-3-(叔丁基氨基)丙烷-1-磺酸(化合物N90) 將上面制備的2-(1-金剛烷基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.12g，0.466mmol)溶于DMF，然后加入叔丁胺(0.074mL，0.699mmol)?；旌衔镉?30℃加熱。向反應(yīng)混合物中再加入叔丁胺(0.07mL，0.663mmol)。次日冷卻反應(yīng)混合物到室溫，加入更多的叔丁胺(1.0mL)，并且于130℃加熱所得混合物。攪拌8小時(shí)后，加入更多的叔丁胺(3mL)。再于130℃加熱反應(yīng)混合物3天。蒸發(fā)濃縮反應(yīng)混合物，有白色固體析出?；旌衔镉肕eOH(1mL)稀釋，過濾收集白色固體，用Et2O洗滌，真空干燥后得到標(biāo)題化合物(0.062g，51％)。
1HNMR(CD3OD，500MHz)δppm 3.36-3.32(m，2H)，2.93(dd，1H，J＝9.8Hz，J＝12.7)，2.75(dd，1H，J＝9.3Hz，J＝14.6Hz)，2.02(大單峰，3H)，1.78-1.50(m，13H)，1.37(s，9H).13C NMR(CD3OD，125MHz)δppm 56.70，51.71，48.43，43.53，43.31，38.87，36.58，35.52，28.75，24.67.ES-MS328(M-1). 2-(1-金剛烷基)-3-(甲基氨基)丙烷-1-磺酸(化合物N91) 在PyrexTM高壓瓶?jī)?nèi)放入2-(1-金剛烷基)-1，3-丙烷磺內(nèi)酯(0.104g，0.405mmol)，再加入2M甲胺的THF溶液(8mL)。密封高壓瓶，110℃加熱過夜，然后冷卻到室溫。過濾收集白色沉淀物，用Et2O洗滌，經(jīng)真空干燥，得到標(biāo)題化合物(0.0681g，59％)。
1H NMR(CD3OD，500MHz)δppm 4.39-4.36(m，1H)，3.27-3.24(m，1H)，3.0(dd，1H，J＝9.3Hz，J＝12.7Hz)，2.78(dd，1H，J＝9.8Hz，J＝14.2Hz)，2.71(s，3H)，2.02(large s，3H)，1.80-1.57(m，13H)；ES-MS286(M-1). 實(shí)施例2結(jié)合和抗原纖維生成測(cè)定 除從商業(yè)途徑購(gòu)買的特定化合物外，大量代表性的本發(fā)明化合物是我們合成的并經(jīng)質(zhì)譜檢測(cè)(“MS”)篩選。MS檢測(cè)能給出選定化合物結(jié)合蛋白(在本實(shí)施例中，是與Aβ40結(jié)合)的能力的數(shù)據(jù)。
將樣品制成水溶液形式(如果需要加20％乙醇以增加在水中的溶解)。對(duì)于選自表2A的那些化合物，結(jié)合試驗(yàn)采用200μM的試驗(yàn)化合物和20μM的加溶Aβ40，或400μM的試驗(yàn)化合物和40μM的加溶Aβ40來(lái)進(jìn)行。對(duì)于選自表3A和表3B的化合物，結(jié)合試驗(yàn)采用150μM的試驗(yàn)化合物和30μM的加溶Aβ40來(lái)進(jìn)行。通過加入0.1％的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)各樣品的pH值到7.4(±0.2)。然后使用WatersZQ 4000TM質(zhì)譜儀通過電噴霧電離質(zhì)譜法分析所得溶液。樣品在制備后2小時(shí)內(nèi)以25μL/min的流速直接注入。對(duì)于所有的分析，源溫都保持在70℃，(電弧)錐部電壓為20V。數(shù)據(jù)采用Masslynx 3.5TM軟件處理。MS檢測(cè)給出化合物結(jié)合可溶性Aβ的能力的數(shù)據(jù)，而ThT、EM和CD檢測(cè)能給出抑制原纖維生成的數(shù)據(jù)。選自表2A的化合物與Aβ結(jié)合的檢測(cè)結(jié)果概括在表4中，而選自表3A和3B的化合物與Aβ結(jié)合的檢測(cè)數(shù)據(jù)概括在表5中。
表4-表2A中特定化合物的相對(duì)結(jié)合親和性 表5-表3A和3B中特定化合物的相對(duì)結(jié)合親和性 實(shí)施例3短期治療過度表達(dá)βAPP的成年轉(zhuǎn)基因CRND8小鼠的效果 表達(dá)人淀粉樣蛋白前體蛋白(hAPP)的轉(zhuǎn)基因小鼠TgCRND8發(fā)展成病理學(xué)類似的阿耳茨海默氏病。具體講，已經(jīng)確證這些8-9周齡動(dòng)物的血漿和腦中存在高水平的Aβ40和Aβ42，隨后證實(shí)存在與在AD患者中觀測(cè)到的衰老斑類似的淀粉樣蛋白斑的早期蓄積。這些動(dòng)物也表現(xiàn)出與退化性變化的表象相似的進(jìn)行性認(rèn)知缺陷。例如參閱Chishti等，J.Biol.Chem.276，21562-70(2001)。
本文研究了本發(fā)明19種化合物的短期治療效果。連續(xù)給藥這些化合物14或28天，在給藥結(jié)束時(shí)測(cè)定TgCRND8動(dòng)物的血漿和腦中Aβ肽的水平。
方法 在本實(shí)施例中使用第3代和第4代B6C3F1的雄性和雌性轉(zhuǎn)基因小鼠，每天皮下或口服給藥系列化合物之一，連續(xù)給藥14或28天。在本方案中使用下列縮寫來(lái)表示由第3代和第4代世代回交得到的這些動(dòng)物TgCRND8-2.B6C3F1(N3)；TgCRND8-2.B6C3F1(N4)。
基準(zhǔn)動(dòng)物(第1組)由11±1周齡的原始(naive)TgCRND8-2.B6C3F1(N3)組成。使用這些小鼠測(cè)定治療開始時(shí)原始轉(zhuǎn)基因動(dòng)物血漿和大腦中Aβ的水平。
使用11周齡(±1周)動(dòng)物開始，每天給藥它們各自的治療物，連續(xù)給藥14或28天(第2-21組)，劑量250mg/kg(在10ml/kg時(shí))或只給藥賦形劑(水，第2組)或只給藥1％甲基纖維素(第21組)。給藥途徑對(duì)于水溶性化合物而言為皮下給藥，對(duì)于在甲基纖維素1％(MC 1％)中加溶的化合物而言則口服給藥。在治療期結(jié)束時(shí)，收集血漿和灌注大腦，定量測(cè)定Aβ水平。
本試驗(yàn)使用的小鼠是在Institut Armand Frappier由繁殖集落生成的，并且在試驗(yàn)開始之前對(duì)動(dòng)物設(shè)備環(huán)境進(jìn)行了充分適應(yīng)。按照年齡和性別，將動(dòng)物分配成下列試驗(yàn)組 表6-小鼠組 動(dòng)物健康監(jiān)控 在每天早晨給用每日的治療物時(shí)檢查所有動(dòng)物的不健康征兆，并且每天兩次檢查死亡率(周末和假期每天一次)。治療開始時(shí)進(jìn)行詳細(xì)檢查，試驗(yàn)期間每周都要進(jìn)行詳細(xì)的檢查，最終步驟之前再詳細(xì)檢查一次。在認(rèn)為必要時(shí)進(jìn)行更多次的觀測(cè)。分別記錄死亡和所有個(gè)體的臨床征兆。隨機(jī)記錄個(gè)體體重，試驗(yàn)期間每周記錄一次，并且在最終步驟之前記錄一次。
樣品收集 殺死基準(zhǔn)組11±1周齡的小鼠，對(duì)于第2-21組在治療期(14或28天)結(jié)束時(shí)即在最后給藥化合物后24小時(shí)殺死動(dòng)物，并且收集樣品。從眼眶凹陷處(orbital sinus)采取大約500μl血液，置于冰上，在4℃以3,000rpm最小速度離心10分鐘。速凍血漿樣品，-80℃貯存供分析備用。移出大腦，冷凍，-80℃貯存供分析備用。
檢測(cè)Aβ水平 稱重冷凍的大腦，用4體積的含蛋白酶抑制劑合劑(cocktail)的冰冷50mM Tris-C1 pH 8.0緩沖液(1g潮腦使用4mL緩沖液)勻化。以15000g旋轉(zhuǎn)樣品20分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到新管內(nèi)。從每種上清液中取出150μl與250μl 8M胍-HCl/50mM Tris-HCl pH 8.0混合(比例為0.6vol上清液1vol 8M胍鹽/Tris-HCl 50mM pH8.0)，加入400μL 5M胍鹽/Tris-HCl 50mM pH 8.0。渦旋各管30秒鐘，于-80℃冷凍。并行的是，將沉淀物用7體積的5M胍-HCL/50mM Tris-HCL pH8.0處理(1g濕腦使用7mL胍)，渦旋30秒鐘，于-80℃冷凍。室溫解凍樣品，于80℃超聲波處理15分鐘，之后再次冷凍。重復(fù)該循環(huán)3次以確保均勻性，最后將樣品再置于-80℃供分析用。
使用Biosource的Human Aβ40和Aβ42Fluorometric ELISA藥盒(Cat.No.89-344和89-348)，按照生產(chǎn)商推薦的方法，通過ELISA評(píng)估血漿和大腦中的Aβ水平。簡(jiǎn)言之，是將樣品在室溫下解凍，于80℃超聲處理5分鐘(對(duì)于腦勻漿進(jìn)行超聲處理，而血漿樣品不進(jìn)行超聲處理)，然后置于冰上。使用100μL稀釋樣品將Aβ肽捕獲到平板上，在不搖動(dòng)的情形下于4℃孵育過夜。吸出樣品，各孔用從BiosourceELISA藥盒中得到的洗滌緩沖液沖洗4遍。加入抗-Aβ40或抗-Aβ42兔多克隆抗血清(對(duì)Aβ40或Aβ42呈專一性)(100μl)，在搖動(dòng)下室溫孵育平板2小時(shí)。抽吸各孔，洗滌4遍，然后加入100μl堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗兔抗體，搖動(dòng)下于室溫孵育2小時(shí)。然后沖洗平板5次，向平板中加入熒光底物(100μl)。將平板在室溫下孵育35分鐘，在460nm激發(fā)波長(zhǎng)和560nm發(fā)射波長(zhǎng)下使用滴定板讀數(shù)器讀取平板。
基于它們調(diào)節(jié)血漿中Aβ肽的水平和腦中小腦可溶性/不溶性Aβ水平的能力對(duì)化合物進(jìn)行評(píng)價(jià)。利用從賦形劑處理(水)或甲基纖維素處理對(duì)照組得到數(shù)值，對(duì)在處理動(dòng)物的血漿或腦中觀測(cè)到的Aβ水平進(jìn)行歸一化處理，并且按照藥理學(xué)效果的強(qiáng)度分等級(jí)。結(jié)果見表3-11。Aβ水平的增加采用符號(hào)“+”表示，而Aβ水平的降低采用符號(hào)“-”表示。最強(qiáng)的效果記錄為“+++”或“---”，而最弱的效果以“+”或“-”表示。
具體講，(相對(duì)于未處理對(duì)照組)Aβ水平增加20-39％記錄為“+”，增加40-69％記錄為“++”；增加70％或更高記錄為“+++”。Aβ水平降低5-19％記錄為“-”，降低20-38％記錄為“--”，降低39％或更多記錄為“---”。
數(shù)據(jù)列在表6-11內(nèi)。用這些化合物處理14和/或28天后致使大腦Aβ40和/或Aβ42的水平發(fā)生顯著改變(表8-11)。而且，用這些化合物例如化合物BX(3-(叔丁基)氨基-1-丙烷磺酸)處理在14和28天后(表6-7)導(dǎo)致血漿中Aβ肽的水平顯著增高。這表明，這些化合物中的一些可以通過外周吸收(sink)效應(yīng)起作用，螯合血漿中的Aβ肽，從而促進(jìn)它們從CNS中的清除，正如早先采用抗-Aβ單克隆抗體m266通過被動(dòng)免疫法進(jìn)行的處理所揭示的一樣(DeMattos等，Science 295(5563)2264-7)。
以下各表給出用本發(fā)明化合物處理14和28天的TgCRND8小鼠血漿和腦中Aβ肽的水平。
表6A和6C分別給出血漿賦形劑組第14天和第28天的數(shù)據(jù)。表6B和7分別給出血漿甲基纖維素組第14和第28天的數(shù)據(jù)。表8和10分別給出腦勻漿賦形劑組第14和第28天的數(shù)據(jù)。表9和11分別給出腦勻漿甲基纖維素組第14和第18天的數(shù)據(jù)。
表6A-血漿賦形劑組，第14天 表6B-血漿甲基纖維素組，第14天 表6C-血漿賦形劑組，第28天 表7-血漿甲基纖維素組，第28天 表8-腦勻漿賦形劑組，第14天 **該化合物在腦中的效果僅測(cè)試了其調(diào)節(jié)Aβ40和Aβ42肽總水平的能力，而沒有單獨(dú)測(cè)量可溶性的和不溶性的水平。
表9-腦勻漿甲基纖維素組，第14天 表10-腦勻漿賦形劑組，第28天 **該化合物在腦中的效果僅測(cè)試了其調(diào)節(jié)Aβ40和Aβ42肽總水平的能力，而沒有單獨(dú)測(cè)量可溶性的和不溶性的水平。
表11-腦勻漿甲基纖維素組，第28天 實(shí)施例4長(zhǎng)期治療過度表達(dá)βAPP成年轉(zhuǎn)基因CRND8小鼠的效果 使用如短期治療中使用的轉(zhuǎn)基因小鼠CRND8，用Swedish和Indiana突變過度表達(dá)人APP基因，導(dǎo)致產(chǎn)生高水平的淀粉樣蛋白肽，形成早期發(fā)作、攻擊性進(jìn)展(aggressive development)的腦淀粉樣變性。高水平的Aβ肽以及與Aβ40相比相對(duì)過豐富的Aβ42據(jù)認(rèn)為與觀測(cè)到的早期變性性嚴(yán)重病變有關(guān)。在該轉(zhuǎn)基因鼠系中充分證明了淀粉樣蛋白沉積模式、營(yíng)養(yǎng)不良神經(jīng)炎的存在、和認(rèn)知缺損。這些小鼠腦中Aβ的水平隨動(dòng)物年齡顯著增高。而總淀粉樣蛋白肽的水平在9-17周齡之間從～1.6×105Pg/g腦降低到～3.8×106。
盡管在該模型中淀粉樣蛋白的早期沉積允許在相對(duì)短的時(shí)間框架內(nèi)快速測(cè)試化合物，但該模型的攻擊性(aggressivity)和高水平的Aβ態(tài)使得長(zhǎng)期的治療評(píng)估成為更加困難的任務(wù)。
本文研究了本發(fā)明化合物對(duì)表達(dá)人淀粉樣蛋白前體蛋白(hAPP)的轉(zhuǎn)基因小鼠TgCRND8的血漿和大腦中大腦淀粉樣蛋白沉積和β-淀粉樣蛋白(Aβ)水平的長(zhǎng)期治療效果。給藥這些化合物，歷時(shí)8或16周，給藥結(jié)束時(shí)測(cè)定TgCRND8動(dòng)物的血漿和大腦中Aβ肽的水平。本試驗(yàn)的目標(biāo)是評(píng)估本發(fā)明化合物調(diào)節(jié)阿耳茨海默氏病(AD)轉(zhuǎn)基因小鼠模型的大腦和血漿中淀粉樣生成過程進(jìn)展情況的效果。
方法 在本試驗(yàn)中使用的小鼠載有一個(gè)來(lái)源于第2和第3子代(N2和N3)的hAPP基因(+/-)的拷貝，所述后代來(lái)源于TgCRND8.FVB(N2)AJ(N3)與B6AF1/J雜交動(dòng)物的回交。
N1＝TgCRND8.FVB(N2)AJ(N3)×B6AF1/J N2＝TgCRND8.FVB(N2)AJ(N3).B6AF1/J(N1)×B6AF1/J N3＝TgCRND8.FVB(N2)AJ(N3).B6AF1/J(N2)×B6AF1/J 本試驗(yàn)中使用下列縮寫來(lái)表示這些動(dòng)物TgCRND8.B6AD1/J(N2)；TgCRND8-B6AF1(N3)。對(duì)雌性轉(zhuǎn)基因小鼠每天皮下(化合物BX)或口服(化合物BW和BZ)給藥適當(dāng)?shù)幕衔?，連續(xù)給藥8或16周。
基準(zhǔn)動(dòng)物由9±1周齡的第2和第3代的原始(naive)TgCRND8-2.B6AF1/J動(dòng)物組成。這些小鼠用來(lái)測(cè)定治療開始時(shí)原始轉(zhuǎn)基因動(dòng)物血漿和大腦中腦淀粉樣蛋白沉積程度和Aβ的水平。
使用9周齡(±1周)動(dòng)物開始，每天給藥它們各自的治療物，連續(xù)給藥8或16周，劑量30或100mg/kg(10ml/kg時(shí))。給藥途徑對(duì)于水溶性化合物(化合物BX)為皮下給藥，對(duì)于在甲基纖維素1％(MC 1％)中加溶的化合物(化合物BW和BZ)則口服給藥。在治療期結(jié)束時(shí)，收集血漿和灌注的大腦用于定量測(cè)定Aβ水平。
如上面短期治療試驗(yàn)中所述，監(jiān)測(cè)動(dòng)物健康，收集樣品并測(cè)量Aβ的水平?；谒鼈冋{(diào)節(jié)血漿中Aβ肽的水平和大腦中腦可溶性/不溶性水平的能力對(duì)化合物進(jìn)行評(píng)價(jià)。比較治療動(dòng)物組與賦形劑處理(水)或甲基纖維素處理對(duì)照組動(dòng)物血漿和大腦中觀測(cè)到的Aβ水平，按照藥理學(xué)效果的強(qiáng)度進(jìn)行分級(jí)。結(jié)果見表12。Aβ水平的增加采用符號(hào)“+”表示，而Aβ水平的降低則采用符號(hào)“-”表示。最強(qiáng)的效果記錄為“+++”或“---”，而最弱的效果以“+”或“-”表示。
具體講，(相對(duì)于未處理對(duì)照組)Aβ水平增加5-14％記錄為“+”，增加15-29％記錄為“++”；增加30％或更高記錄為“+++”。Aβ水平降低5-14％記錄為“-”，降低15-29％記錄為“--”，降低30％或更多記錄為“---”。另外，無(wú)論在哪個(gè)方向，4％或更低的變化均記錄為“0”。
表12給出用本發(fā)明化合物連續(xù)處理8和16周的TgCRND8小鼠的血漿和大腦中Aβ肽的水平。在很多情況下，用這些化合物處理8和/或16周后會(huì)引起血漿和/或大腦中Aβ40和/或Aβ42的水平發(fā)生變化。例如，給藥化合物BX，在第8周以及第16周時(shí)都會(huì)導(dǎo)致大腦中Aβ的水平顯著降低。第8周時(shí)化合物BW也導(dǎo)致大腦和血漿中Aβ的水平顯著降低，第16周時(shí)導(dǎo)致血漿水平顯著降低。
關(guān)于ThioS試驗(yàn)，小鼠腦中斑塊的數(shù)量如下確定經(jīng)賁門給小鼠灌注鹽水溶液。切出大腦，分離成兩半球。在4℃下將左半球浸入新制備的4％低聚甲醛中3小時(shí)，然后于4℃轉(zhuǎn)移到30％的蔗糖中。當(dāng)完成低溫保護(hù)后(24-48小時(shí))，將大腦于-45℃冷凍在異戊烷中，隨后-80℃貯存?zhèn)浣馄视?。切?0μM后的冠狀部分，用硫黃素S(1％水溶液)染色8分鐘。在硫黃素S染色分化之后，將上述冠狀部分用蘇木精對(duì)染5分鐘。同時(shí)捕捉兩套圖案。第一套圖案在明視場(chǎng)照射下捕捉，得到所述冠狀部分的形態(tài)學(xué)詳細(xì)資料；第二套圖案在綠色特定熒光濾器(熒光蛋白濾器，Ex 495nm，Em 525nm)下捕捉。利用Image Pro Plus軟件(Media Cybernetics，MD USA)進(jìn)行確定斑塊數(shù)量以及這些斑塊所占據(jù)面積的影像分析。
組織學(xué)ThioS試驗(yàn)獲得的數(shù)據(jù)見表13。斑塊面積和數(shù)量的增加采用符號(hào)“+”表示，而斑塊面積和數(shù)量的減少則采用符號(hào)“-”表示。利用ThioS染色腦部的初步組織化學(xué)試驗(yàn)表明，在用30mg/kg化合物BX處理過的小鼠中，斑塊的數(shù)量以及斑塊所占據(jù)的面積都減少。
具體講，(相對(duì)于未處理對(duì)照組)Aβ斑塊的面積和數(shù)量增加10-19.99％記錄為“+”，斑塊的面積和數(shù)量減少10-19.99％記錄為“-”。另外，無(wú)論在哪個(gè)方向，9.99％或更低的變化均記錄為“0” 表12-化合物BX，BW和BZ對(duì)血漿和大腦中Aβ水平的影響 表13-化合物BW和BX對(duì)斑塊的數(shù)量和斑塊占據(jù)面積的組織學(xué)影響 實(shí)施例5利用質(zhì)譜法評(píng)價(jià)化合物與NAC肽的結(jié)合 最近的發(fā)現(xiàn)已經(jīng)證明，有很高比例的阿耳茨海默氏病(AD)患者也形成Lewy體，在扁桃體中最為豐富(Hamilton.2000.Brain Pathol，10378；Mukaetova-Ladinska等，2000.J Neuropathol Exp Neurol 59408)。有意義的是，α-synuclein的高疏水性非淀粉樣蛋白組分(NAC)區(qū)域被認(rèn)為是Aβ之后AD患者腦中淀粉樣斑的次豐富組分。已經(jīng)證明α-synuclein能體外形成原纖維。而且它能夠與Aβ結(jié)合，促進(jìn)其聚集(Yoshimoto等，1995.Proc Natl Acad Sci USA 92914)。事實(shí)上，它最初被鑒定為AD斑的非淀粉樣蛋白β(Aβ)組分(NAD)的前體(Ueda等.1993.Proc Natl Acad Sci USA 9011282；Iwai.2000.BiochemBiophys Acta 150295；Masliah等，1996.Am J Pathol 148201)。NAC是具有一段高疏水性序列的35氨基酸長(zhǎng)肽，在體外它可以自發(fā)聚集并形成原纖維。此外，這些原纖維在體外可以有效地活化Aβ原纖維的形成(Han等，1995.Chem Biol.2163-169；Iwai等，1995.Biochemistry 3410139)。事實(shí)上，通過其NAC域，α-synuclein保留了其原纖維生成性質(zhì)。因此，用本發(fā)明化合物調(diào)節(jié)NAC的特性或靶向NAC可能是一條有效的治療途徑，用以抑制與α-synucleopathies有關(guān)的蛋白質(zhì)聚集體和包含體的形成，以及α-synuclein的β-淀粉樣蛋白肽與NAC之間的聚集體的形成。
本文評(píng)估了本發(fā)明化合物在水溶液中結(jié)合NAC肽的能力。結(jié)合能力與利用電噴射質(zhì)譜觀測(cè)到的肽-化合物復(fù)合體的強(qiáng)度相關(guān)。使用微孔蒸餾去離子水來(lái)制備所有的水溶液。對(duì)于pH的測(cè)定，使用安裝有Coring Semi-Micro Combination pH Electrode的BeckmanΦ36pH儀。
首先在pH7.40下分析20μM的NAC(MW 3260.6Da)，相應(yīng)地在m/z 1335.5，1116.7和843.4處觀測(cè)到+2，3和4處的普通鈉簇。測(cè)得的最適宜錐電壓為20V。
質(zhì)譜光譜法-質(zhì)譜分析使用裝備有Waters 2795樣品管理器的Waters ZQ4000質(zhì)譜儀進(jìn)行。數(shù)據(jù)加工與分析使用MassLynx 4.0(早期使用MassLynx 3.5)。在水介質(zhì)(6.6％EtOH)中以5∶1的比例混合試驗(yàn)化合物和解聚肽(20μM NAC100μM試驗(yàn)化合物或40μM NAC200μM試驗(yàn)化合物)。用0.1％NaOH 3-5μL)調(diào)節(jié)混合物的pH到7.4(±0.2)。定期按照相同方法也制備20μM或40μM的NAC肽溶液，用作對(duì)照組。采用利用注射泵以25μl/min的流速直接注入的方式，將溶液加到電噴射源頭，以正模式從100-2100Da掃描，得到光譜。掃描時(shí)間為0.9sec/掃描，掃描間延遲時(shí)間0.1秒鐘，每個(gè)樣品的運(yùn)行時(shí)間為5分鐘。所有的質(zhì)譜的掃描總數(shù)為300次。去溶劑化和離子源的溫度為70℃。錐頭和毛細(xì)管電壓分別保持在20V和3.2kV。
對(duì)于每種受試化合物，求出結(jié)合的NAC-化合物復(fù)合物的峰下總面積除以未結(jié)合NAC峰下總面積得到的值。結(jié)果概括于下表14中。
表14-NAC肽結(jié)合數(shù)據(jù)
*+++＝強(qiáng)；總結(jié)合率為120％或更高 ++＝中等；總結(jié)合率介于120％-70％之間 +＝弱；總結(jié)合率介于70％-30％之間 -＝無(wú)；總結(jié)合率介于30％-0％之間 試驗(yàn)6成神經(jīng)細(xì)胞瘤SH-SY5Y的保存、處理和Hoechst染色 對(duì)前面表2和3中所示的小組代表性化合物的神經(jīng)保護(hù)活性進(jìn)行測(cè)試。簡(jiǎn)言之，是按照美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)推薦的方法培養(yǎng)SH-SY5Y細(xì)胞。簡(jiǎn)單講，是將細(xì)胞在含10％胎牛血清(Gibco)，1x非必需氨基酸在1∶1 Eagle極限必需培養(yǎng)基(Sigma)和Ham’s F12培養(yǎng)基(Gibco)的混合液的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
將合成Aβ42(美國(guó)肽)再懸浮在1，1，1，3，3，3-六氟-2-丙醇(HFIP)中，超聲波處理，貯存于-80℃。解凍樣品，在氮?dú)夥障赂稍?，然后再溶?.04M Tris，0.3M NaCl(pH7.4)，濃度120μM。將SH-SY5Y細(xì)胞接種在24孔板中的玻璃蓋玻片上，密度3×105細(xì)胞/孔。次日進(jìn)行處理。將細(xì)胞用12μM Aβ1-42培養(yǎng)24小時(shí)，在有或無(wú)240μM NRM化合物(1∶20Aβ∶藥物比例)存在下，在由120μM貯存物制備的培養(yǎng)基中稀釋。
使用用于檢測(cè)凝聚或裂解染色質(zhì)的DNA-結(jié)合染色Hoehst(33342)(分子探針)評(píng)價(jià)細(xì)胞死亡情況。將含有SH-SY5Y細(xì)胞的蓋玻片用Hoechst 33342(2μgml)染色10分鐘，在4％低聚甲醛(ElectronMicroscopy Science)中室溫固定30分鐘，在磷酸鹽緩沖鹽水溶液(Gibco)洗滌，使用延長(zhǎng)抗凋謝試劑(Molecular Probes)，再安放到玻璃載物片上。使用熒光顯微鏡以200x放大倍數(shù)目測(cè)細(xì)胞核。計(jì)數(shù)活細(xì)胞和從形態(tài)學(xué)上被認(rèn)為編程性細(xì)胞死亡的細(xì)胞。編程性細(xì)胞死亡細(xì)胞核是凝聚形式，在偶然情況下為片段化形式。在盲式情形下，對(duì)于每種條件捕捉五個(gè)隨機(jī)區(qū)。通過人工檢查確定每個(gè)區(qū)中編程性細(xì)胞死亡和正常細(xì)胞核的數(shù)量。結(jié)果概括在下面的表15中。
表15本發(fā)明特定化合物的神經(jīng)保護(hù)活性 應(yīng)當(dāng)理解，這里所描述的各實(shí)施例與實(shí)施方案只是用于說明目的，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)其教導(dǎo)能夠確定它們的各種變化與改變，并且這些變化與改變都包括在本申請(qǐng)的精神與范圍之內(nèi)以及附加權(quán)利要求的范疇之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.下式化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
R1為氫，取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基；
R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基；
Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+；
X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；
L1為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在；
B為C1-C5烷基，鏈烯基，或炔基，當(dāng)M不存在時(shí)，其任選與W稠合；
M為共價(jià)鍵，氨基，C1-C6烷基，鏈烯基，炔基，羧基，氧基，酰胺，酯，硫醚，硫酯或不存在；
W是取代或未取代的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)、雜環(huán)基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基或苯并咪唑基；和
v為1，2，3，4，5，或6；
條件是當(dāng)Y為甲基，R1和R2均為氫，Y為SO3-X+，M為共價(jià)鍵時(shí)，B不能是CH2-CH(M-W)-CH2。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2各自為氫且L1為共價(jià)鍵。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中Y為SO3-X+。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中v為1。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中M為共價(jià)鍵。
6.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中M為C1-C3烷基。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中W為鏈烯基。
8.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中W為芳基。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中W為取代或未取代的苯基。
10.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中W為取代或未取代的烷基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中W為取代或未取代的金剛烷基。
12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的化合物，其中B為C1-C5烷基。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中B為-CH(M-W)-CH2-CH2-。
14.權(quán)利要求12的化合物，其中B為-CH2-CH(M-W)-CH2-。
15.權(quán)利要求12的化合物，其中B為-(CH2)-CH2-CH(M-W)-。
16.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的化合物，其中B為鏈烯基。
17.式IX化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
R1為取代或未取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基環(huán)烷基、二環(huán)或三環(huán)基、二環(huán)或三環(huán)稠環(huán)基團(tuán)，或?yàn)槿〈蛭慈〈腃2-C10烷基；
R2選自氫、烷基、巰基烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、芳基烷基、噻唑基、三唑基、咪唑基、苯并噻唑基、和苯并咪唑基；
R3是氫或保護(hù)基；
aa為天然或非天然氨基酸的殘基；
L3為共價(jià)鍵，氨基，C1-C6烷基，鏈烯基，炔基，羧基，酰胺，氨基烷基，醚，酯，硫醚，硫酯或者不存在；
Y是SO3-X+，OSO3-X+，或SSO3-X+；
X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；并且
L1和L2各自獨(dú)立地為取代或未取代的C1-C5烷基或者不存在。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中R2和R3各自為氫，Y為SO3-X+，以及L2為-(CH2)3-。
19.權(quán)利要求17或18的化合物，其中R1為碳環(huán)或雜環(huán)基。
20.權(quán)利要求17或18的化合物，其中R1為金剛烷基。
21.權(quán)利要求17-20中任一項(xiàng)的化合物，其中L3為共價(jià)鍵，硫醚，氨基，氧基，氨基烷基，或醚。
22.權(quán)利要求17-21中任一項(xiàng)的化合物，其中aa為甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸或苯丙氨酸。
23.式(X)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
Ra為氫、取代或未取代的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基、烷氧基羰基、或氨基羰基；
Rb和Rc各自獨(dú)立選自氫、取代或未取代的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、CONH2，或者Rb、Rc與它們所連接的碳原子可以形成取代或未取代的4-8元環(huán)或稠合環(huán)系的環(huán)狀結(jié)構(gòu)；并且
X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
24.權(quán)利要求23的化合物，其中X+是氫。
25.權(quán)利要求23或24的化合物，其中Ra是取代或未取代的烷基。
26.權(quán)利要求25的化合物，其中Ra為甲基、乙基、羥甲基、或苯基取代的烷基。
27.權(quán)利要求24或25的化合物，其中Ra為氫或氨基羰基。
28.權(quán)利要求26-29中任一項(xiàng)的化合物，其中Rb和Rc中至少一個(gè)為取代或未取代的烷基。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中Rb和Rc各自獨(dú)立地為甲基、乙基、異丙基、丙基、異丁基、正丁基、叔丁基、戊基、己基、或庚基。
30.權(quán)利要求29的化合物，其中Rb和Rc中至少一個(gè)為羥基烷基，烷氧基烷基，烷硫基烷基，芳氧基烷基，烷基羰基烷基，或芳基烷基。
31.權(quán)利要求23-28中任一項(xiàng)的化合物，其中Rb和Rc連接成環(huán)。
32.權(quán)利要求31的化合物，其中所述環(huán)是環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基；或環(huán)庚基。
33.權(quán)利要求32的化合物，其中Rb和Rc連接形成稠合環(huán)系。
34.權(quán)利要求33的化合物，其中所述稠合環(huán)結(jié)構(gòu)為取代或未取代的2，3-二氫化茚基或芴基。
35.式(XI)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
Rd是H或烷基；
Re和Rf各自獨(dú)立地為氫，C1-C6烷基，或者Re和Rf與它們所連接的碳原子一起形成3-6元的環(huán)；
Rg在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立選自氫，烷基，烷氧基，鹵素，NO2，和烷基-SO2；
q為1，2，3，4或5；
X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
Ar為芳基或雜芳基；和
Z為-(CH2)0-3-，-(CHOH)-，(CH2)1-3O(CH2)1-3，或羰基。
36.權(quán)利要求35的化合物，其中X+為氫。
37.權(quán)利要求35或36的化合物，其中Rd為氫。
38.權(quán)利要求35-37中任一項(xiàng)的化合物，其中Re和Rf各自獨(dú)立地為氫，甲基，乙基或連接成環(huán)。
39.權(quán)利要求35-38中任一項(xiàng)的化合物，其中Z為-CH2-，-CHOH-，或共價(jià)鍵。
40.權(quán)利要求35-39中任一項(xiàng)的化合物，其中Ar為苯基、萘基、噻吩基、呋喃基、或苯并噻吩基。
41.權(quán)利要求35-40中任一項(xiàng)的化合物，其中q為1或2。
42.權(quán)利要求35-41中任一項(xiàng)的化合物，其中Rg為甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，羥基，溴，氯，甲氧基，乙氧基，丙氧基，烷基-SO2-或硝基。
43.式(XII)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
Rh是氫，芐基，芳基-烷基，芳基，或烷基；
Ri、Rj、Rk、Rm、Rn和Ro各自獨(dú)立為氫，取代或未取代的芳基，取代或未取代的芐基，烷基，鏈烯基，碳環(huán)基，雜環(huán)基，不存在或者可以一起連接成環(huán)狀結(jié)構(gòu)；
X+是氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；和
t1和t2各自為單鍵或雙鍵，條件是t1和t2不能同時(shí)為雙鍵。
44.權(quán)利要求43的化合物，其中Rh是甲基，苯基，2，3-二氫茚基，叔丁基，氫，芐基，或金剛烷基。
45.權(quán)利要求43或44的化合物，其中Ri、Rj、Rk、Rm和Rn各自為氫且t1和t2均為單鍵。
46.權(quán)利要求43-45中任一項(xiàng)的化合物，其中Ro是芐基，苯基，乙基，丁基，噻吩基-氨基，或丙烯基。
47.權(quán)利要求43的化合物，其中Rj，Rm和Ro各自為氫，Rn和Rk各自是不存在的，t1是單鍵，且t2為雙鍵。
48.權(quán)利要求47的化合物，其中Rj、Rk、Rm、Rn和Ro各自為氫且t1和t2各自為單鍵。
49.權(quán)利要求47或48的化合物，其中Ri為芐基，金剛烷基，甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，環(huán)己基，羥基烷基，立方烷基，立方烷基-甲基-，金剛烷基-甲基，苯基-金剛烷基-甲基，氨基羰基-金剛烷基-甲基-，或雜芳基-烷基。
50.權(quán)利要求43的化合物，其中Ri、Rj、Rm、Rn和Ro各自為氫且t1和t2各自為單鍵。
51.權(quán)利要求43的化合物，其中Rk為芐基，取代苯基，叔丁基，金剛烷基，金剛烷基-甲基，苯基-金剛烷基-甲基，氨基羰基-金剛烷基-甲基-，或雜芳基-烷基。
52.權(quán)利要求43的化合物，其中Ri、Rj、Rk和Rn各自為氫且Rm和Ro連接成環(huán)。
53.權(quán)利要求52的化合物，其中所述環(huán)是稠合或橋合的環(huán)。
54.式(XIII)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
n1為0，1，2或3；
P為共價(jià)鍵，烷基，烷氧基，氨基，烷基氨基，硫，或烷硫基；
X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；和
Rp為天然或非天然氨基酸的殘基。
55.權(quán)利要求54的化合物，其中Rp通過非肽鍵與P連接。
56.權(quán)利要求54或55的化合物，其中Rp為甘氨酸，苯丙氨酸，或脯氨酸。
57.權(quán)利要求54-56中任一項(xiàng)的化合物，其中P為共價(jià)鍵，CH2，-NH-，-O-，烷硫基，或烷氧基。
58.式(XIV)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
n2為0，1，2，或3，其選擇應(yīng)使得SO3-X+基團(tuán)與環(huán)中氮原子之間存在三個(gè)碳原子；
X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)；
Rs為氫或當(dāng)n2為3時(shí)，Rs為(CH2)3-SO3-X+；
Rq和Rr各自獨(dú)立選自氫或烷基。
59.權(quán)利要求58的化合物，其中X+為氫。
60.式(XV)化合物或其可藥用的鹽、酯或前藥
其中
Rt為氫，烷基或芳基；
Ru和Rv在每次出現(xiàn)時(shí)各自獨(dú)立地選自氫，芳基，芐基，烷基，鏈烯基，碳環(huán)基，雜環(huán)基，或者相鄰碳原子上的兩個(gè)Ru或Rv基團(tuán)可以形成雙鍵，或者與它們所連接的碳原子一起形成碳環(huán)或雜環(huán)；
n3為4，5，6，或7；和
X+為氫，陽(yáng)離子基團(tuán)，或成酯基團(tuán)。
61.權(quán)利要求60的化合物，其中X+為氫。
62.表3A或表3B的化合物，或其可藥用的鹽、酯或前藥。
63.一種用于治療淀粉樣相關(guān)疾病的藥盒，其包括權(quán)利要求1-62中任一項(xiàng)的化合物，以及供本發(fā)明方法使用的說明書。
64.一種治療或預(yù)防患者淀粉樣相關(guān)疾病的方法，其包括對(duì)需要的患者給藥能有效治療或預(yù)防淀粉樣相關(guān)疾病的量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中所述的化合物。
65.根據(jù)權(quán)利要求64的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為阿耳茨海默氏病，大腦淀粉樣血管病，包涵體肌炎、黃斑變性、MCI、或唐氏綜合癥。
67.根據(jù)權(quán)利要求64或65的方法，其中通過給藥所述化合物能夠減少或抑制淀粉樣原纖維的形成或沉積、神經(jīng)變性、細(xì)胞毒性或小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)。
68.根據(jù)權(quán)利要求64的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為糖尿病、AA淀粉樣變性、AL淀粉樣變性、或血液透析相關(guān)性淀粉樣變性(β2M)。
69.根據(jù)前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是人。
70.上述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述患者患有阿耳茨海默氏病、輕度認(rèn)知損傷、或大腦淀粉樣血管病，并且通過給藥能夠穩(wěn)定認(rèn)知功能，防止認(rèn)知功能的進(jìn)一步降低，或者防止、減緩、或阻止所述患者的疾病進(jìn)程。
71.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括給患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B所述的治療化合物或其可藥用鹽，結(jié)果所述治療化合物抑制淀粉樣生成蛋白質(zhì)和基膜的糖蛋白或蛋白聚糖組分之間的相互作用，從而抑制淀粉樣蛋白沉積。
72.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)所述患者口服給藥有效量的權(quán)利要求1-57任一項(xiàng)、表2A、表2B所述的治療化合物或其可藥用鹽。
73.一種用于減少淀粉樣蛋白沉積患者體中淀粉樣蛋白沉積的方法，該方法包括對(duì)所述患者給藥有效量的權(quán)利要求1-57任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的治療化合物或其可藥用鹽，
74.根據(jù)前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中的治療化合物口服給用。
75.根據(jù)前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述治療化合物是在可藥用賦形劑中給用的。
76.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的治療化合物或其可藥用鹽，從而抑制淀粉樣蛋白沉積。
77.權(quán)利要求76的方法，其中所述治療化合物通過口服給用。
78.權(quán)利要求76或77的方法，其中所述治療化合物是在可藥用賦形劑中給用的。
79.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，結(jié)果在保持化合物的活性的同時(shí)又不會(huì)阻止化合物針對(duì)預(yù)期靶標(biāo)部位的生物分布，從而抑制淀粉樣蛋白沉積。
80.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，從而抑制淀粉樣蛋白沉積，結(jié)果在保持化合物的活性的同時(shí)又不會(huì)阻止化合物針對(duì)預(yù)期靶標(biāo)部位的生物分布。
81.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，結(jié)果所述化合物抑制淀粉樣生成蛋白質(zhì)與基膜組分之間的相互作用從而抑制淀粉樣蛋白沉積。
82.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，結(jié)果抑制了淀粉樣生成蛋白質(zhì)與基膜組分之間的相互作用，從而抑制淀粉樣蛋白沉積。
83.一種用于減少淀粉樣蛋白沉積患者體中淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，從而減少了患者體中的淀粉樣蛋白沉積。
84.一種用于抑制患者淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，結(jié)果所述化合物抑制淀粉樣生成蛋白質(zhì)與基膜的糖蛋白或蛋白聚糖組分之間的相互作用，從而抑制淀粉樣蛋白沉積。
85.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)中所述的化合物在制備治療或預(yù)防淀粉樣相關(guān)疾病用的藥物中的應(yīng)用。
86.一種用于治療或預(yù)防淀粉樣相關(guān)疾病的藥物組合物，其包括權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、或表2B中所述的化合物。
87.一種藥物組合物，其包括權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、或表2B中所述的化合物。
88.一種用于治療淀粉樣變性的藥物組合物，其包括一定量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，其中所述的量足以抑制淀粉樣蛋白在患者體中的沉積。
89.一種用于治療淀粉樣變性的藥物組合物，其包括一定量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，其中所述的量足以抑制患者體中淀粉樣生成蛋白與基膜組分之間的相互作用以及抑制淀粉樣蛋白的沉積。
90.一種用于預(yù)防淀粉樣變性的藥物組合物，其包括一定量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，其中所述的量足以抑制患者體中淀粉樣生成蛋白與基膜組分之間的相互作用以及抑制淀粉樣蛋白的沉積。
91.一種用于治療淀粉樣變性的藥物組合物，其包括一定量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽，其中所述的量足以抑制淀粉樣蛋白在患者體中的沉積。
92.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能預(yù)防或抑制淀粉樣蛋白原纖維的形成。
93.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能夠防止可溶性寡聚形式或原纖維形式的淀粉樣蛋白肽與細(xì)胞表面的結(jié)合或粘合以及引起的細(xì)胞損傷或毒性。
94.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能阻止淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性或小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化。
95.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物阻止淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性。
96.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能降低淀粉樣蛋白聚集、原纖維形成、或沉積的速度或量。
97.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能減慢淀粉樣蛋白原纖維的形成或沉積的速度。
98.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能減輕淀粉樣蛋白沉積的程度。
99.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能抑制、減少、或防止淀粉樣蛋白原纖維的形成。
100.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能抑制淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的炎癥。
101.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能增強(qiáng)淀粉樣蛋白從大腦中的清除。
102.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中相對(duì)于未接受治療患者體中的平衡分布，所述化合物改變CSF或大腦與血漿之間的淀粉樣蛋白平衡，并且降低大腦中淀粉樣蛋白-β的量。
103.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物能夠逆轉(zhuǎn)淀粉樣蛋白沉積患者體中淀粉樣蛋白的沉積。
104.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物促進(jìn)淀粉樣沉積患者體中淀粉樣蛋白的沉積。
105.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物在淀粉樣沉積患者體中促進(jìn)斑塊清除或減少沉積。
106.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中相對(duì)于未接受治療的患者，所述化合物降低患者腦中淀粉樣蛋白的濃度。
107.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物滲透進(jìn)入大腦。
108.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物維持可溶性淀粉樣蛋白為非纖維狀形式。
109.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中相對(duì)于未接受治療的患者，所述化合物增大可溶性淀粉樣蛋白從患者腦中的清除率。
110.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物抑制或降低淀粉樣蛋白與細(xì)胞表面組分之間的相互作用。
111.權(quán)利要求110的方法，其中所述細(xì)胞表面組分是基膜的糖蛋白或蛋白聚糖。
112.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣蛋白是具有39-43個(gè)氨基酸的淀粉樣蛋白-β肽。
113.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣蛋白是由βAPP產(chǎn)生的淀粉樣蛋白生成肽。
114.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為輕度認(rèn)知損傷或中輕度認(rèn)知損傷。
115.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是血管性癡呆。
116.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣血管疾病是阿耳茨海默氏病。
117.權(quán)利要求116的方法，其中所述阿耳茨海默氏病是散發(fā)性(非遺傳性)阿耳茨海默氏病，家族性(遺傳性)阿耳茨海默氏病，或早期阿耳茨海默氏病。
118.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是β2M淀粉樣變性，AL淀粉樣變性，AA淀粉樣變性或糖尿病。
119.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是大腦淀粉樣血管病或遺傳性大腦出血。
120.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為老年性癡呆，唐氏綜合癥，包涵體肌炎、或年齡相關(guān)性黃斑變性。
121.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為家族性淀粉樣多神經(jīng)病(FAP)，老年性系統(tǒng)性淀粉樣變性，腱鞘炎，家族性淀粉樣變性，奧斯特塔格型非神經(jīng)病性淀粉樣變性，顱神經(jīng)病，遺傳性腦出血，家族性癡呆癥，慢性透析病，家族性克雅氏??；格-施-沙綜合癥、遺傳性海綿狀腦病，朊病毒病，家族性地中海熱，穆-韋綜合癥，腎病，耳聾，荀麻疹，四肢痛、心肌病、皮膚沉著病，多發(fā)性骨髓瘤，良性單克隆丙種球蛋白病，巨球蛋白血癥，骨髓瘤相關(guān)性淀粉樣變性，甲狀腺骨髓癌，孤立性心房淀粉樣病，或糖尿病。
122.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述藥物組合物是治療性或預(yù)防性地給藥于患者。
123.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述藥物組合物口服給藥于患者。
124.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是人。
125.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是40歲以上的人。
126.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是50歲以上的人。
127.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是60歲以上的人。
128.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是70歲以上的人。
129.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是80歲以上的人。
130.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是85歲以上的人。
131.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是婦女。
132.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是絕經(jīng)后的婦女。
133.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是在接受激素替補(bǔ)療法。
134.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是男性。
135.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者患有阿耳茨海默氏病或具有發(fā)展成阿耳茨海默氏病的遺傳素因。
136.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者患有血管性癡呆。
137.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者患有老年性癡呆。
138.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者患有輕度認(rèn)知損傷。
139.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者具有APP基因中的基因組突變。
140.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者是ApoE2等位基因的攜帶者。
141.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者具有早老蛋白基因的基因組突變。
142.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者患有家族性、散發(fā)性或原發(fā)性的阿耳茨海默氏病或大腦淀粉樣血管病。
143.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者存在淀粉樣蛋白沉積。
144.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者的大腦存在淀粉樣-β淀粉樣蛋白沉積。
145.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物能預(yù)防或抑制淀粉樣蛋白原纖維的形成。
146.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物能夠防止可溶性寡聚形式或原纖維形式的淀粉樣蛋白肽與細(xì)胞表面的結(jié)合或粘合以及引起的細(xì)胞損傷或毒性。
147.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物能夠阻止淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性或小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化。
148.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物能阻止淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性。
149.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物能減少降低淀粉樣蛋白聚集、原纖維形成、或沉積的速度或量。
150.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物減慢淀粉樣蛋白原纖維的形成或沉積的速度。
151.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物減輕淀粉樣蛋白沉積的程度。
152.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物抑制、減少、或防止淀粉樣蛋白原纖維的形成。
153.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物抑制淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的炎癥。
154.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物能加大淀粉樣蛋白從大腦中的清除。
155.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中相對(duì)于未接受治療患者體中的平衡分布，所述化合物改變大腦與血漿之間的淀粉樣蛋白平衡，并且降低大腦中淀粉樣蛋白-β的含量。
156.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物能夠逆轉(zhuǎn)或促進(jìn)轉(zhuǎn)淀粉樣蛋白沉積患者體中淀粉樣蛋白的沉積。
157.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物在淀粉樣沉積患者體中促進(jìn)斑塊清除或減少沉積。
158.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中相對(duì)于未接受治療的患者，所述化合物降低患者腦中淀粉樣蛋白的濃度。
159.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物滲透進(jìn)入大腦。
160.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物維持可溶性淀粉樣蛋白為非纖維狀形式。
161.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中相對(duì)于未接受治療的患者，所述化合物增大可溶性淀粉樣蛋白從患者的CSF或大腦中的清除率。
162.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物抑制或降低淀粉樣蛋白-β與細(xì)胞表面組分之間的相互作用。
163.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述細(xì)胞表面組分是基膜的糖蛋白或蛋白聚糖。
164.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣蛋白-β是具有39-43個(gè)氨基酸的肽。
165.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣蛋白-β是由βAPP產(chǎn)生的淀粉樣蛋白生成肽。
166.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為輕度認(rèn)知損傷或中輕度認(rèn)知損傷。
167.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是血管性癡呆。
168.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣血管疾病是阿耳茨海默氏病。
169.權(quán)利要求124的藥物組合物，其中所述阿耳茨海默氏病是散發(fā)性(非遺傳性)阿耳茨海默氏病，早期阿耳茨海默氏病，或家族性(遺傳性)阿耳茨海默氏病。
170.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是AA淀粉樣變性，AL淀粉樣變性，β2M淀粉樣變性，或糖尿病。
171.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是大腦淀粉樣血管病或遺傳性大腦出血。
172.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為老年性癡呆，唐氏綜合癥，輕度認(rèn)知損傷，包涵體肌炎，或年齡相關(guān)性黃斑變性。
173.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病為家族性淀粉樣多神經(jīng)病(FAP)，老年性系統(tǒng)性淀粉樣變性，家族性淀粉樣變性，奧斯特塔格型非神經(jīng)病性淀粉樣變性，顱神經(jīng)病，遺傳性腦出血，家族性癡呆癥，慢性透析病，家族性克-雅氏??；格-施-沙綜合癥、遺傳性海綿狀腦病，朊病毒病，家族性地中海熱，穆-韋綜合癥，腎病，耳聾，荀麻疹，四肢痛、心肌病、皮膚沉著病，多發(fā)性骨髓瘤，良性單克隆丙種球蛋白病，巨球蛋白血癥，骨髓瘤相關(guān)性淀粉樣變性，甲狀腺骨髓癌，孤立性心房淀粉樣病，或糖尿病。
174.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述藥物組合物進(jìn)一步包括可藥用的酸、堿、緩沖劑、無(wú)機(jī)鹽、溶劑或防腐劑。
175.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，進(jìn)一步包括能增加所述化合物的腦生物利用度的化合物。
176.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物溶解在液態(tài)可藥用賦形劑中。
177.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物是以在膠囊或藥丸中的均勻混合物的形式存在。
178.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中患者體中淀粉樣蛋白的沉積至少減少15％。
179.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中患者體中淀粉樣蛋白的沉積至少減少40％。
180.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中患者體中淀粉樣蛋白的沉積減少至少60％。
181.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中患者體中淀粉樣蛋白的沉積減少至少80％。
182.一種用于抑制患者體中淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括使體液與權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的化合物或其可藥用鹽接觸，并且將所述體液給于該患者，從而抑制所述患者體中的淀粉樣蛋白沉積。
183.權(quán)利要求182的方法，其中所述體液是血液。
184.權(quán)利要求182或183的方法，其中所述體液通過半體內(nèi)方式與所述化合物接觸。
185.權(quán)利要求182的方法，其中所述患者患有血液透析相關(guān)性淀粉樣變性。
186.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是糖尿病，其中糖血被穩(wěn)定。
187.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是糖尿病，其中防止或減少了β細(xì)胞質(zhì)量損失。
188.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是糖尿病，其中由β細(xì)胞質(zhì)量損失引起的高血糖被降低。
189.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是糖尿病，其中pro-IAPP/IAPP之比的變化被穩(wěn)定。
190.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是糖尿病，其中調(diào)節(jié)了胰島素的產(chǎn)生。
191.權(quán)利要求190的方法，其中穩(wěn)定或增加了胰島素的產(chǎn)生。
192.前面涉及β2M的方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中防止或減少了原纖維在所述患者關(guān)節(jié)中的聚集。
193.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病通過減輕或防止炎癥而得以治療或預(yù)防。
194.一種防止、減緩或阻止疾病進(jìn)程的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B的化合物，從而防止、減緩或終止該疾病的進(jìn)展。
195.權(quán)利要求194的方法，其中所述疾病是輕度認(rèn)知損傷，中輕度認(rèn)知損傷，血管性癡呆，阿耳茨海默氏病，大腦淀粉樣血管病，遺傳性大腦出血，老年性癡呆，唐氏綜合癥，包涵體肌炎，或年齡相關(guān)性黃斑變性。
196.一種用于治療患者的淀粉樣相關(guān)疾病的方法，其包括在給藥權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B的化合物之前對(duì)患者進(jìn)行認(rèn)知能力測(cè)試，然后對(duì)患者給藥有效量的所述化合物，并且在給藥所述化合物之后對(duì)患者進(jìn)行認(rèn)知能力測(cè)試，從而治療所述患者的淀粉樣相關(guān)疾病，其中改善了患者針對(duì)所述認(rèn)知能力測(cè)試的得分。
197.權(quán)利要求196的方法，其中所述認(rèn)知能力測(cè)試是CDR，CDR，MMSE或ADAS-Cog。
198.權(quán)利要求196或197的方法，其中患者的得分被維持。
199.權(quán)利要求196或197的方法，其中所述認(rèn)知能力測(cè)試是CDR或ADAS-Cog，其中減少了所述患者的得分。
200.權(quán)利要求196或197的方法，其中所述認(rèn)知能力測(cè)試是MMSE或DAD，其中提高了患者的得分。
201.權(quán)利要求196的方法，其中患者在CDR或ADAS-Cog中的得分增加速度低于未接受治療的對(duì)照組。
202.權(quán)利要求196的方法，其中患者在MMSE或DAD中的得分降低速度低于未接受治療的對(duì)照組。
203.權(quán)利要求196-202任一項(xiàng)的方法，其中所述淀粉樣相關(guān)疾病是輕度認(rèn)知損傷，中輕度認(rèn)知損傷，血管性癡呆，阿耳茨海默氏病，老年性癡呆，或唐氏綜合癥。
204.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中淀粉樣蛋白是AH淀粉樣蛋白，AL淀粉樣蛋白，淀粉樣蛋白λ，淀粉樣蛋白κ，淀粉樣蛋白κIV，淀粉樣蛋白γ，或淀粉樣蛋白γ1。
205.一種用于減少或防止淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)需要的患者給藥權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中的化合物，其中所述淀粉樣蛋白是AA淀粉樣蛋白，AL淀粉樣蛋白，淀粉樣蛋白λ，淀粉樣蛋白κ，淀粉樣蛋白κIV，淀粉樣蛋白γ，或淀粉樣蛋白γ1。
206.一種用于降低淀粉樣蛋白沉積所致器官功能改變的速率的方法，其包括對(duì)需要的患者給藥權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中所述的化合物，從而降低淀粉樣蛋白沉積所致器官功能改變的速率。
207.一種用于抑制原纖維形成的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中所述的化合物，其中所述有效量能有效地抑制蛋白-蛋白相互作用，從而抑制原纖維的形成。
208.一種用于治療CAA或遺傳性大腦出血的方法，其包括給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中所述的化合物，其中所述有效量能有效地防止或降低出血發(fā)作的復(fù)發(fā)。
209.一種用于抑制患者體中淀粉樣蛋白沉積的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的治療化合物或其可藥用鹽，結(jié)果所述治療化合物抑制淀粉樣生成蛋白之間的蛋白-蛋白相互作用。
210.一種用于抑制淀粉樣蛋白原纖維形成的方法，其包括對(duì)患者給藥有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A、表2B中所述的治療化合物或其可藥用鹽，結(jié)果加大了淀粉樣蛋白的清除或分解代謝或者降低了淀粉樣蛋白的濃度。
211.前述藥物組合物權(quán)利要求中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述化合物抑制淀粉樣蛋白之間的蛋白-蛋白相互作用。
212.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中腦脊髓液或血漿中淀粉樣蛋白-β的濃度降低至少15％。
213.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中腦脊髓液或血漿中淀粉樣蛋白-β的濃度降低至少40％。
214.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中腦脊髓液或血漿中淀粉樣蛋白-β的濃度降低至少60％。
215.前述方法權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中腦脊髓液或血漿中淀粉樣蛋白-β的濃度降低至少80％。
216.一種治療患者阿耳茨海默氏病的方法，包括對(duì)需要的患者給藥治療阿耳茨海默氏病有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中所述的化合物。
217.一種治療患者輕度認(rèn)知損傷的方法，包括對(duì)需要的患者給藥治療輕度認(rèn)知損傷有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中所述的化合物。
218.一種治療患者的與Aβ淀粉樣蛋白有關(guān)的神經(jīng)中毒性的方法，包括對(duì)需要的患者給藥治療與Aβ淀粉樣蛋白有關(guān)的神經(jīng)中毒性有效量的權(quán)利要求1-62任一項(xiàng)、表2A或表2B中所述的化合物。
219.一種藥物組合物，其包括選自表3A和3B的化合物以及可藥用的載體。
220.一種用于對(duì)Aβ淀粉樣相關(guān)疾病患者提供神經(jīng)保護(hù)作用的方法，該方法包括對(duì)需要的患者給藥能夠有效提供神經(jīng)保護(hù)作用的量的權(quán)利要求1-62中任一項(xiàng)、表2A或表2B所述的化合物。
全文摘要
本發(fā)明描述了式(VIII)、(IX)、(X)、(XI)、(XII)、(XIII)、(XIV)和(XV)的化合物(其中各變量如權(quán)利要求書中定義)，以及治療或預(yù)防淀粉樣相關(guān)疾病用的方法、藥物組合物和藥盒。
文檔編號(hào)C07D211/54GK101128421SQ200580048486
公開日2008年2月20日 申請(qǐng)日期2005年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月22日
發(fā)明者X·孔, X·吳, A·鮑茲德, I·瓦拉德, D·米格諾特, F·格瓦伊斯, D·德洛默, B·巴陳德, M·阿特阿尼, S·勒弗斯奧, B·薩米姆 申請(qǐng)人:神經(jīng)化學(xué)(國(guó)際)有限公司