專利名稱：嘧啶化合物和使用方法
相關(guān)申請的交叉參考
本申請要求2005年3月16日提交的美國專利申請流水號60/662,947的根據(jù)35U.S.C.$119(e)的優(yōu)先權(quán)的權(quán)益，其全部內(nèi)容在此引用作為參考。
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明一般涉及化合物治療多種疾患、疾病和病理癥狀的用途，更具體涉及嘧啶化合物用于治療各種疾患的用途。
背景 蛋白激酶是催化蛋白質(zhì)中特定殘基的磷酸化作用的酶家族，基于被磷酸化的氨基酸可以主要地分類為酪氨酸或絲氨酸/蘇氨酸激酶。這種共價(jià)的轉(zhuǎn)譯后修飾是正常細(xì)胞通訊和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定維持的關(guān)鍵組分。酪氨酸激酶信號傳導(dǎo)途徑在正常情況下防止失控的增殖或者有助于細(xì)胞程序死亡性刺激敏感性。這些信號傳導(dǎo)途徑經(jīng)常在癌細(xì)胞中被遺傳性或外遺傳性改變，將選擇優(yōu)勢賦予癌細(xì)胞。因此可以理解，發(fā)源于酪氨酸激酶的異常增強(qiáng)的信號賦予這些酶以顯性致癌蛋白狀態(tài)，導(dǎo)致信號傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)的功能障礙。由于生長因子或細(xì)胞因子的突變、過量表達(dá)或者不適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)異常、錯(cuò)誤調(diào)節(jié)或失調(diào)以及超量產(chǎn)生或產(chǎn)生不足而產(chǎn)生的不適當(dāng)?shù)募っ富钚砸呀?jīng)牽連到很多疾病中，包括但不限于癌癥、心血管疾病、變態(tài)反應(yīng)、哮喘與其他呼吸性疾病、自體免疫疾病、炎性疾病、骨疾病、代謝疾患和神經(jīng)病性與神經(jīng)變性疾患，例如阿爾茨海默氏病。不適當(dāng)?shù)募っ富钚砸l(fā)多種生物學(xué)細(xì)胞應(yīng)答，涉及牽連到上述疾病中的細(xì)胞生長、細(xì)胞分化、存活、細(xì)胞程序死亡、有絲分裂發(fā)生、細(xì)胞周期控制和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性。目前的證據(jù)表明，若干不同的酪氨酸激酶家族在這些應(yīng)答中的每一種中發(fā)揮功能，并且不同受體途徑之間的廣泛串?dāng)_導(dǎo)致額外的復(fù)雜性。能夠與大量不同受體通訊的一個(gè)胞質(zhì)酪氨酸激酶家族是Src蛋白酪氨酸激酶家族。c-Src原癌基因在多種人類癌癥的形成、生長、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中起重要作用。Src過度活化的形式為提高的激酶活性和蛋白質(zhì)表達(dá)水平，已經(jīng)在若干主要癌癥類型中得到證明，包括結(jié)腸、乳腺、胰腺、肺和腦癌。Src激酶通過多重致癌途徑調(diào)控信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，包括EGFR、Her2/neu、PDGFR、FGFR和VEGFR。蛋白酪氨酸激酶Src家族的原型成員被首次鑒定為致癌逆轉(zhuǎn)錄病毒勞斯肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化蛋白(v-Src)。v-Src是通過進(jìn)化被遍在性表達(dá)和高度保守的細(xì)胞蛋白質(zhì)的突變變體。Src家族激酶與細(xì)胞受體之間和Src家族激酶對受體誘導(dǎo)的被這些激酶調(diào)節(jié)的生物活性的結(jié)構(gòu)性與功能性相互作用是相當(dāng)突出的。
因而，預(yù)期通過抑制Src的激酶活性來阻斷信號傳導(dǎo)將是調(diào)控異常途徑的有效方式?；蛱蕹龑?shí)驗(yàn)提示，抑制Src家族的一些成員可能具有潛在的治療益處。
c-Src是被無遍在性表達(dá)的Src家族的三個(gè)成員之一。c-Src在大多數(shù)細(xì)胞類型中被低水平表達(dá)并且，在沒有適當(dāng)?shù)募?xì)胞外刺激的存在下，通過調(diào)節(jié)性酪氨酸結(jié)構(gòu)域在Tyr 530上的磷酸化作用維持無活性構(gòu)象。c-Src的活化通過Tyr 530位點(diǎn)的去磷酸化作用和存在于該酶的激酶結(jié)構(gòu)域中的第二個(gè)酪氨酸Tyr 419的磷酸化作用而發(fā)生。
在若干人類腫瘤類型中，最主要在結(jié)腸和乳腺腫瘤中，存在失調(diào)或錯(cuò)誤調(diào)節(jié)的c-Src激酶活性增加的大量證據(jù)。錯(cuò)誤調(diào)節(jié)的c-Src TK活性也已經(jīng)與腫瘤細(xì)胞和其他細(xì)胞中的粘著和細(xì)胞骨架變化有關(guān)，最終導(dǎo)致侵占表型，該表型可能是游動(dòng)性的。已經(jīng)顯示c-Src TK活性是上皮向間質(zhì)過渡中的重要組分，這種過渡發(fā)生在癌細(xì)胞侵入的早期階段。c-Src活性也已知是局部粘著更新所必需的，這是一種關(guān)鍵的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性組分。在轉(zhuǎn)移的體內(nèi)模型中，c-Scr抑制明顯降低淋巴和肝臟轉(zhuǎn)移的速度。臨床數(shù)據(jù)證明了錯(cuò)誤調(diào)節(jié)的Src活性與腫瘤細(xì)胞侵入潛力增加之間的聯(lián)系。在結(jié)腸腫瘤中，已經(jīng)顯示c-Src TK活性增加與腫瘤進(jìn)展相關(guān)聯(lián)，最高的活性見于轉(zhuǎn)移組織中。結(jié)腸腫瘤中Src活性增加可能是預(yù)后較差的指征。在乳腺和卵巢癌癥中已經(jīng)報(bào)道過Src激酶活性的增強(qiáng)，在膀胱的過渡細(xì)胞癌中，如同淺表腫瘤達(dá)到峰值的c-Src活性變?yōu)榧∪馇秩胄缘摹?br> 在生物化學(xué)上引起Src活化的細(xì)胞刺激導(dǎo)致Src與細(xì)胞骨架之間的結(jié)合增加。其結(jié)果是，Src介導(dǎo)很多細(xì)胞內(nèi)底物，例如EGFR、FAK、PYK2、樁蛋白、Stat3和細(xì)胞周期蛋白D的磷酸化作用。這些相互作用的生物學(xué)效應(yīng)影響細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性、粘著、細(xì)胞周期進(jìn)展和細(xì)胞程序死亡，并且可能與上述的疾病相關(guān)效應(yīng)具有一定的聯(lián)系。因而，Src在響應(yīng)局部低氧、養(yǎng)分有限和自我毀滅的內(nèi)在細(xì)胞效應(yīng)中起作用。
c-Src TK活性增加導(dǎo)致E-鈣粘著蛋白介導(dǎo)的上皮細(xì)胞-細(xì)胞粘著的分解，這可以被Src抑制作用所恢復(fù)。VEGF活性、Src活性與涉及血管溢漏的細(xì)胞屏障功能之間的緊密聯(lián)系也已經(jīng)得到證實(shí)。在體內(nèi)研究中給予外源性VEGF時(shí)，Src的抑制作用導(dǎo)致血管溢漏的減少。過度血管滲透性引起特別有害效應(yīng)的實(shí)例包括肺水腫、腦水腫和心水腫。
引起內(nèi)皮屏障功能喪失的事件級聯(lián)是復(fù)雜的和認(rèn)識不充分的。數(shù)據(jù)證明了激酶在這一過程中的一定作用。例如，已經(jīng)顯示VEGF介導(dǎo)的水腫牽涉Src家族激酶、蛋白激酶C和Akt激酶所致的細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)。Rho相關(guān)激酶已經(jīng)與凝血酶介導(dǎo)的血管溢漏有聯(lián)系，蛋白激酶C與TNF-誘導(dǎo)的溢漏相關(guān)聯(lián)。據(jù)信激酶介導(dǎo)接頭蛋白，例如β-聯(lián)蛋白和血管內(nèi)皮VE-鈣粘著蛋白的磷酸化作用，引起粘著連接的溶解和鈣粘著蛋白-聯(lián)蛋白復(fù)合體從它們的細(xì)胞骨架錨上解離。調(diào)節(jié)細(xì)胞間縮機(jī)制的蛋白質(zhì)，例如肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)和肌球蛋白輕鏈(MLC)也被活化，導(dǎo)致細(xì)胞收縮，并因此導(dǎo)致胞間連接點(diǎn)的打開。
抑制血管溢漏的一般方法可以是干擾任何基礎(chǔ)機(jī)械途徑，無論是通過抑制激酶信號傳導(dǎo)還是細(xì)胞間收縮器或其他細(xì)胞過程。這然后可以導(dǎo)致對水腫及其相關(guān)病變的潛在治療。例如，抑制水腫形成應(yīng)當(dāng)有益于在諸如炎癥、變應(yīng)性疾病、癌癥、腦中風(fēng)、心肌梗塞、肺與心機(jī)能不全、腎衰竭和視網(wǎng)膜病的情形中患者的總體結(jié)果，僅舉數(shù)例。此外，由于水腫是組織低氧的普遍后果，所以也可以得出這樣的結(jié)論，即，抑制血管溢漏代表組織低氧治療的潛在手段。例如，使用血管溢漏的抑制劑有可能急性和預(yù)防性治療血流被病變(例如血栓形成)或醫(yī)療干預(yù)(例如心麻痹、器官移植和血管成形術(shù))所中斷，尤其在Src抑制劑的情況下。
由于Src的活化和或許Src的過量表達(dá)已經(jīng)牽連到癌癥、骨質(zhì)疏松、中風(fēng)、心肌梗塞和血管溢漏等中，c-Src的小分子抑制劑可以有益于若干疾病狀態(tài)的治療。
概述 本發(fā)明提供某些化合物，例如激酶抑制劑治療各種疾病、疾患和病變，例如癌癥和血管疾患，諸如心肌梗塞(MI)、中風(fēng)或局部缺血的使用方法。
本發(fā)明所述的嘧啶化合物可以有益于治療其中疾患影響細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性、粘著和細(xì)胞周期進(jìn)展的疾病，另外具有相關(guān)低氧癥狀的疾病、骨質(zhì)疏松和起因于或涉及血管滲透性增加、炎癥或呼吸窘迫的病癥、腫瘤生長、侵入、血管生成、轉(zhuǎn)移瘤和細(xì)胞程序死亡。
按照本發(fā)明的實(shí)施方案，一些能夠用于產(chǎn)生有益治療結(jié)果的激酶抑制劑的實(shí)例包括Src激酶的抑制劑。
按照本發(fā)明的一種實(shí)施方案，提供具有結(jié)構(gòu)(A)的化合物。

在結(jié)構(gòu)(A)中，每個(gè)A可以獨(dú)立地是CH、N、NH、O、S之一或者可以是稠合構(gòu)成第二個(gè)環(huán)的環(huán)的一部分，其中該第二個(gè)環(huán)可以是芳族、雜芳族、二環(huán)芳族或二環(huán)芳族雜環(huán)的環(huán)； 每個(gè)B可以獨(dú)立地是CH或者可以是稠合構(gòu)成第二個(gè)環(huán)的環(huán)的一部分，其中該第二個(gè)環(huán)可以是芳族、二環(huán)芳族或二環(huán)的環(huán)，只有第一個(gè)環(huán)是芳族的； A1可以是NRa、C(O)、S(O)、S(O)2、P(O)2、O、S或CRa之一，其中R可以是H、低級烷基、支鏈烷基、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、烷基羥基、烷硫基或烷基氨基之一，其中如果A1是NRa，則a＝1，而如果A1是CRa，則a＝2； A2可以是NR、C(O)、S(O)、S(O)2、P(O)2、O或S之一，其條件是A1與A2之間的連接是化學(xué)上正確的； R0可以是H、低級烷基或支鏈烷基之一； L1可以是價(jià)鍵、O、S、C(O)、S(O)、S(O)2、NRa、C1-C6烷基之一；L2可以是價(jià)鍵、O、S、C(O)、S(O)、S(O)2、C1-C6烷基、NRa之一；或者L1和L2一起可以是價(jià)鍵； 每個(gè)Rb、Rd、Re、Rf要么不存在，要么獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、環(huán)烷基、支鏈烷基、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、烷基羥基、烷硫基或烷基氨基之一； 每個(gè)p、q、m、r獨(dú)立地是0至6的整數(shù)； Rb和Rd一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rb和Re一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rd和Rf一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rb和Rf一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rd和Re一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一； R1可以是(CRa)m、O、N、S、C(O)(O)R′、C(O)N(R′)2、SO3R′、OSO2R′、SO2R′、SOR′、PO4R′、OPO2R′、PO3R′、PO2R′或者具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的3-6元雜環(huán)之一，其中R′可以是氫、低級烷基、烷基羥基、支鏈烷基、支鏈烷基羥基之一，或者可以構(gòu)成具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的閉合3-6元雜環(huán)，其中每個(gè)R′在存在一個(gè)以上R′的情況下是獨(dú)立的； R2可以是氫、烷基、支鏈烷基、苯基、取代的苯基、鹵素、烷基氨基、烷基氧代、CF3、磺酰氨基、取代的磺酰氨基、烷氧基、硫代烷基、磺酸鹽、磺酸酯、磷酸鹽、磷酸酯、膦酸鹽、膦酸酯、羧基、酰氨基、脲基、取代的羧基、取代的酰氨基、取代的脲基或者具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的3-6元雜環(huán)，進(jìn)一步的條件是在環(huán)中可以存在一個(gè)或兩個(gè)取代基R2，如果存在一個(gè)以上取代基R2，則每個(gè)取代基可以是相同或不同的； R3可以是氫、烷基、支鏈烷基、烷氧基、鹵素、CF3、氰基、取代的烷基、羥基、烷基羥基、巰基、烷硫基、硫代烷基、氨基或氨基烷基之一； n是可以在1與5之間的整數(shù)，進(jìn)一步的條件是如果n≥2，那么每個(gè)基團(tuán)R3獨(dú)立于其他基團(tuán)R3。
在另一種實(shí)施方案中，提供藥物組合物，包括至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物和其藥學(xué)上可接受的載體。
在另一種實(shí)施方案中，提供制品，包括包裝材料和包含在該包裝材料內(nèi)的藥物組合物，其中該包裝材料包括表明該藥物組合物能夠用于治療與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的標(biāo)簽，其中該藥物組合物包含至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物。
在另一種實(shí)施方案中，提供制品，包括包裝材料和包含在該包裝材料內(nèi)的藥物組合物，其中該包裝材料包括表明該藥物組合物能夠用于治療與血管滲透性溢漏或受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的標(biāo)簽，所述疾患選自心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、局部缺血或再灌注損傷、癌癥、關(guān)節(jié)炎或其他關(guān)節(jié)病、視網(wǎng)膜病或另一種眼科疾病(例如黃斑變性)、自體免疫疾病、血管溢漏綜合征、炎性疾病、水腫、移植物排斥、灼傷或者急性或成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)，其中該藥物組合物包含至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的方法，包括對需要這類治療的受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、晶型和個(gè)別非對映體。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的方法，包括對需要這類治療的受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、晶型和個(gè)別非對映體與抗炎劑、化療劑、免疫調(diào)控劑、治療性抗體或蛋白激酶抑制劑的組合。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有心肌梗塞或者面臨危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有血管溢漏綜合征(VLS)或者面臨危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有癌癥或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有中風(fēng)或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有ARDS或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有灼傷或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有關(guān)節(jié)炎或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有水腫或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有血管溢漏綜合征(VLS)或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有視網(wǎng)膜病或另一種眼科疾病或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有局部缺血或再灌注相關(guān)的組織損傷或傷害或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有自體免疫疾病或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有移植物排斥或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供治療患有炎性疾病或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物，從而治療該受治療者。
在另一種實(shí)施方案中，提供制備藥物組合物的方法，包括合并至少一種結(jié)構(gòu)(A)化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、晶型鹽和個(gè)別非對映體與藥學(xué)上可接受的載體的組合。
詳細(xì)說明 A.術(shù)語和定義 下列術(shù)語和定義適用于本申請，一般依照由國際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(IUPAC)推薦的術(shù)語 術(shù)語“雜原子”表示除碳以外的任何原子，例如N、O或S。
術(shù)語“芳族”表示環(huán)狀共軛的分子實(shí)體，由于離域作用，其穩(wěn)定性顯著大于假設(shè)的定域結(jié)構(gòu)，例如凱庫勒結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。
術(shù)語“雜環(huán)基”在用于描述芳族環(huán)時(shí)，表示含有至少一個(gè)雜原子的如上所定義的芳族環(huán)。
術(shù)語“雜環(huán)基”在不用于描述芳族環(huán)時(shí)，表示除芳族基團(tuán)以外的環(huán)狀(即含環(huán)的)基團(tuán)，該環(huán)狀基團(tuán)是由3至約14個(gè)碳原子和至少一個(gè)上述雜原子所構(gòu)成的。
術(shù)語“取代的雜環(huán)基”就芳族和非芳族結(jié)構(gòu)而言，都表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)下述取代基的雜環(huán)基團(tuán)。
術(shù)語“烷基”表示具有1至約12個(gè)碳原子的一價(jià)直鏈或支鏈烴基團(tuán)，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。術(shù)語“低級烷基”表示具有1至約6個(gè)碳原子的烷基。
術(shù)語“取代的烷基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)取代基的烷基，例如所述取代基為羥基、烷氧基、巰基、環(huán)烷基、取代的環(huán)烷基、雜環(huán)基、取代的雜環(huán)基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、芳氧基、取代的芳氧基、鹵素、氰基、硝基、氨基、酰氨基、醛、酰基、氧基酰基、羧基、磺?；⒒酋０?、硫?；取?br> 術(shù)語“烯基”表示直鏈或支鏈烴基團(tuán)，具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵，并且具有約2至約12個(gè)碳原子，術(shù)語“取代的烯基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的烯基。
術(shù)語“炔基”表示直鏈或支鏈烴基團(tuán)，具有至少一個(gè)碳-碳三鍵，并且具有約2至約12個(gè)碳原子，術(shù)語“取代的炔基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的炔基。
術(shù)語“芳基”表示具有約5至約14個(gè)碳原子的芳族基團(tuán)，術(shù)語“取代的芳基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的芳基。
術(shù)語“雜芳基”表示芳族環(huán)，其中該環(huán)結(jié)構(gòu)是由3至約14個(gè)碳原子和至少一個(gè)上述雜原子所構(gòu)成的，術(shù)語“取代的雜芳基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的雜芳基。
術(shù)語“烷氧基”表示-O-烷基部分，其中烷基是如上所定義的，術(shù)語“取代的烷氧基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的烷氧基。
術(shù)語“環(huán)烷基”表示具有排列成環(huán)的3至約8個(gè)碳原子的烷基，術(shù)語“取代的環(huán)烷基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的環(huán)烷基。
術(shù)語“烷基芳基”表示烷基取代的芳基，術(shù)語“取代的烷基芳基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的烷基芳基。
術(shù)語“芳基烷基”表示芳基取代的烷基，術(shù)語“取代的芳基烷基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的芳基烷基。
術(shù)語“芳基烯基”表示芳基取代的烯基，術(shù)語“取代的芳基烯基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的芳基烯基。
術(shù)語“芳基炔基”表示芳基取代的炔基，術(shù)語“取代的芳基炔基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的芳基炔基。
術(shù)語“亞芳基”表示具有5至約14個(gè)碳原子的二價(jià)芳族基團(tuán)，術(shù)語“取代的亞芳基”表示進(jìn)一步攜帶一個(gè)或多個(gè)上述取代基的亞芳基。
術(shù)語“激酶”表示任何催化磷酸基團(tuán)添加到蛋白質(zhì)殘基上的酶；例如絲氨酸和蘇氨酸激酶催化磷酸基團(tuán)添加到絲氨酸和蘇氨酸殘基上。
術(shù)語“Src激酶”、“Src激酶家族”和“Src家族”表示屬于哺乳動(dòng)物Src激酶家族的相關(guān)同系物或類似物，例如，包括c-Src、Fyn、Yes和Lyn激酶，和造血限制性激酶Hck、Fgr、Lck和BIk。
術(shù)語“Src激酶信號傳導(dǎo)途徑”和“Src級聯(lián)”表示Src信號級聯(lián)放大的上游和下游組分。
術(shù)語“治療有效量”表示化合物或藥物組合物將引發(fā)研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)生或其他臨床醫(yī)師所尋求的組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人的生物或醫(yī)學(xué)應(yīng)答的量，例如所述的應(yīng)答為血管穩(wěn)定的恢復(fù)或維持或者危害或喪失或血管穩(wěn)定的防止；腫瘤負(fù)荷的降低；發(fā)病率和/或死亡率的降低。
術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”表示載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑的其他成分相容并且對其接受者無害的事實(shí)。
術(shù)語“化合物的給藥”或“給予化合物”表示向需要治療的受治療者提供本發(fā)明的化合物或藥物組合物的行為。
術(shù)語“抗體”表示多克隆或單克隆抗體的完整分子及其片段，例如Fab和F(ab’)2、Fv和SCA片段，它們能夠結(jié)合表位決定子。
術(shù)語“血管穩(wěn)定”表示引起正常生理功能的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性血管功能的維持。
術(shù)語“血管穩(wěn)定劑”表示通過防止血管穩(wěn)定的喪失或者恢復(fù)或維持血管穩(wěn)定而設(shè)法對付其中血管穩(wěn)定受損的狀況的藥劑。
B.發(fā)明實(shí)施方案 按照本發(fā)明的實(shí)施方案，提供具有結(jié)構(gòu)(A)的化合物，用于治療各種疾病、疾患和病變。

在結(jié)構(gòu)(A)中，每個(gè)A可以獨(dú)立地是CH、N、NH、O、S之一或者可以是稠合構(gòu)成第二個(gè)環(huán)的環(huán)的一部分，其中該第二個(gè)環(huán)可以是芳族、雜芳族、二環(huán)芳族或二環(huán)芳族雜環(huán)的環(huán)。
在結(jié)構(gòu)(A)中，每個(gè)B可以獨(dú)立地是CH或者可以是稠合構(gòu)成第二個(gè)環(huán)的環(huán)的一部分，其中該第二個(gè)環(huán)可以是芳族、二環(huán)芳族或二環(huán)的環(huán)，只有第一個(gè)環(huán)是芳族的。
在結(jié)構(gòu)(A)中，A1可以是NRa、C(O)、S(O)、S(O)2、P(O)2、O、S或CRa之一，其中R可以是H、低級烷基、支鏈烷基、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、烷基羥基、烷硫基或烷基氨基之一，其中如果A1是NRa，則a＝1，而如果A1是CRa，則a＝2。
在結(jié)構(gòu)(A)中，A2可以是NR、C(O)、S(O)、S(O)2、P(O)2、O或S之一，其條件是A1與A2之間的連接是化學(xué)上正確的。
在結(jié)構(gòu)(A)中，R0可以是H、低級烷基或支鏈烷基之一。
在結(jié)構(gòu)(A)中，L1可以是價(jià)鍵、O、S、C(O)、S(O)、S(O)2、NRa、C1-C6烷基之一；L2可以是價(jià)鍵、O、S、C(O)、S(O)、S(O)2、C1-C6烷基、NRa之一；或者L1和L2一起可以是價(jià)鍵。
在結(jié)構(gòu)(A)中，每個(gè)Rb、Rd、Re、Rf要么不存在，要么獨(dú)立地是H、C1-C6烷基、環(huán)烷基、支鏈烷基、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、烷基羥基、烷硫基或烷基氨基之一。
在結(jié)構(gòu)(A)中，每個(gè)p、q、m、r獨(dú)立地是0至6的整數(shù)。
在結(jié)構(gòu)(A)中，Rb和Rd一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rb和Re一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rd和Rf一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rb和Rf一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一；或者 Rd和Re一起可以是(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m或(CH2)r-O-(CH2)m之一。
在結(jié)構(gòu)(A)中，R1可以是(CRa)m、O、N、S、C(O)(O)R′、C(O)N(R′)2、SO3R′、OSO2R′、SO2R′、SOR′、PO4R′、OPO2R′、PO3R′、PO2R′或者具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的3-6元雜環(huán)之一，其中R′可以是氫、低級烷基、烷基羥基、支鏈烷基、支鏈烷基羥基之一，或者可以構(gòu)成具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的閉合3-6元雜環(huán)，其中每個(gè)R′在存在一個(gè)以上R′的情況下是獨(dú)立的。
在結(jié)構(gòu)(A)中，R2可以是氫、烷基、支鏈烷基、苯基、取代的苯基、鹵素、烷基氨基、烷基氧代、CF3、磺酰氨基、取代的磺酰氨基、烷氧基、硫代烷基、磺酸鹽、磺酸酯、磷酸鹽、磷酸酯、膦酸鹽、膦酸酯、羧基、酰氨基、脲基、取代的羧基、取代的酰氨基、取代的脲基或者具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的3-6元雜環(huán)，進(jìn)一步的條件是在環(huán)中可以存在一個(gè)或兩個(gè)取代基R2，如果存在一個(gè)以上取代基R2，則每個(gè)取代基可以是相同或不同的。
在結(jié)構(gòu)(A)中，R3可以是氫、烷基、支鏈烷基、烷氧基、鹵素、CF3、氰基、取代的烷基、羥基、烷基羥基、巰基、烷硫基、硫代烷基、氨基或氨基烷基之一。
在結(jié)構(gòu)(A)中，n是可以在1與5之間的整數(shù)，進(jìn)一步的條件是如果n≥2，那么每個(gè)基團(tuán)R3獨(dú)立于其他基團(tuán)R3。
一類可以使用的結(jié)構(gòu)(A)所述的示范性化合物包括如下所示的化合物I至LX








本發(fā)明的方法、化合物和組合物在單獨(dú)或者與其他藥劑(例如如下所述化療劑或蛋白質(zhì)治療劑)聯(lián)合給予時(shí)可用于治療多種與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患和其他疾患，包括但不限于中風(fēng)，心血管疾病，心肌梗塞，充血性心力衰竭，心肌病，心肌炎，缺血性心臟病，冠狀動(dòng)脈疾病，心源性休克，血管性休克，肺性高血壓，肺水腫(包括心源性肺水腫)，癌癥，胸膜滲漏，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，糖尿病性視網(wǎng)膜病，色素性視網(wǎng)膜炎和視網(wǎng)膜病，包括糖尿病性視網(wǎng)膜病(DR)和早產(chǎn)的視網(wǎng)膜病，炎性疾病，再狹窄，水腫(包括與病理情形，例如癌癥有關(guān)的水腫，或者由醫(yī)療干預(yù)，例如化療誘發(fā)的水腫，或者糖尿病性黃斑水腫(DME))，哮喘，急性或成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)，狼瘡，血管溢漏，移植物(例如器官移植物、急性移植物或者異種移植物或同種移植物(例如在灼傷治療中所采用的))排斥；局部缺血或再灌注損傷，例如在器官移植，移植耐受性誘導(dǎo)期間招致的局部缺血或再灌注損傷的保護(hù)；血管成形術(shù)后的局部缺血或再灌注損傷；關(guān)節(jié)炎(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)炎)；多發(fā)性硬化；炎性腸疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏?。焕钳?系統(tǒng)性紅斑狼瘡)；移植物抗宿主疾??；T-細(xì)胞介導(dǎo)的過敏性疾病，包括接觸性過敏、遲發(fā)型超敏反應(yīng)和麩質(zhì)敏感性腸病(乳糜瀉)；1型糖尿??；牛皮癬；接觸性皮炎(包括由毒常春藤引起的)；橋本氏甲狀腺炎；斯耶格倫氏綜合征；自體免疫性甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)，例如格雷夫氏??；阿狄森氏病(腎上腺的自體免疫疾病)；自體免疫性多腺疾病(也被稱為自體免疫性多腺綜合征)；自體免疫性脫發(fā)；惡性貧血；白癜風(fēng)；自體免疫性垂體機(jī)能減退；格-巴氏綜合征；其他自體免疫疾??；癌癥，包括其中激酶，例如Src家族激酶被活化或過量表達(dá)的那些癌癥，例如結(jié)腸癌和胸腺瘤，或者其中激酶活性促進(jìn)腫瘤生長或存活的癌癥；腎小球性腎炎，血清??；蕁麻疹；變應(yīng)性疾病，例如呼吸性變態(tài)反應(yīng)(哮喘、枯草熱、變應(yīng)性鼻炎)或皮膚變態(tài)反應(yīng)；蕈樣真菌?。患毙匝装Y反應(yīng)(例如急性或成人呼吸窘迫綜合征和局部缺血/再灌注損傷)；皮膚肌炎；斑禿；慢性光化性皮炎；濕疹；貝切特氏?。徽契拍摪挷?；壞疽性膿皮病；賽塞利氏綜合征；特應(yīng)性皮炎；系統(tǒng)性硬化??；硬斑?。煌庵芩闹毖腿毖运闹膊?；骨疾病，例如骨質(zhì)疏松、骨軟化、甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)、佩吉特氏病和腎性骨營養(yǎng)不良；血管溢漏綜合征，包括由化療劑或免疫調(diào)控劑，例如IL-2誘發(fā)的血管溢漏綜合征；脊髓和腦損傷或創(chuàng)傷；青光眼；視網(wǎng)膜疾病，玻璃體視網(wǎng)膜疾病，包括黃斑變性，例如年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)，包括干性AMD，或者另一種眼科疾病；胰腺炎；脈管炎，包括結(jié)節(jié)性脈管炎、川崎病、血栓閉塞性脈管炎、韋格內(nèi)氏肉芽腫病和貝切特氏病；硬皮?。幌日鬃影B；地中海貧血；卡波濟(jì)氏肉瘤；VHL病；等等。本發(fā)明的化合物、組合物和方法可以用于降低眼科疾病進(jìn)展的危險(xiǎn)。
本發(fā)明的化合物、組合物和方法可以用于抑制嗜中性白細(xì)胞中Fcγ誘導(dǎo)的呼吸爆發(fā)反應(yīng)，也可以用于抑制Fcγ依賴性TNFα產(chǎn)生。抑制Fcγ受體依賴性嗜中性白細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞反應(yīng)的能力可以導(dǎo)致用于本發(fā)明方法中的化合物額外的抗炎活性。這種活性可以用于例如治療炎性疾病，例如關(guān)節(jié)炎或炎性腸疾病。本發(fā)明的化合物、組合物和方法也可以用于治療自體免疫性腎小球性腎炎和由免疫復(fù)合物沉積在腎臟中所誘發(fā)的其他腎小球性腎炎情形，它們觸發(fā)Fcγ受體反應(yīng)并可以引起腎臟損傷。
本發(fā)明的化合物、組合物和方法也可以用于抑制Fcε誘導(dǎo)的脫粒反應(yīng)。抑制Fcε受體依賴性肥大細(xì)胞和嗜堿細(xì)胞反應(yīng)的能力可以導(dǎo)致本發(fā)明化合物超出它們對T細(xì)胞的作用的額外的抗炎活性。
本發(fā)明也提供制品，包含包裝材料和包含在該包裝材料內(nèi)的藥物組合物，其中該包裝材料包括表明該藥物組合物能夠用于治療疾患的標(biāo)簽，其中該藥物組合物包含根據(jù)本發(fā)明的化合物。因而，在一方面，本發(fā)明提供藥物組合物，包含治療劑和本發(fā)明的化合物，其中該化合物以有效減少與適應(yīng)癥或者具有血管溢漏副作用的治療劑相關(guān)的血管溢漏的濃度存在。例如，本發(fā)明的化合物可以與IL-2、免疫毒素、抗體或化療劑一起給藥。在這些情況下，IL-2、免疫毒素、抗體或化療劑的濃度可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)治療方案加以確定，或者例如，通過體內(nèi)動(dòng)物測定法加以確定。
本發(fā)明也提供藥物組合物，包含IL-2、免疫毒素、抗體或化療劑和有效抑制血管滲透性量的至少一種本發(fā)明化合物，和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。本發(fā)明的組合物可以含有其他治療劑，并且在配制時(shí)可以例如采用常規(guī)的固體或液體載體或稀釋劑，以及適合于所需給藥方式類型的藥物添加劑(例如賦形劑、粘合劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、矯味劑等)，按照藥物制劑領(lǐng)域已知的技術(shù)配制。
本發(fā)明的化合物可以被配制成天然或鹽形式的治療組合物。藥學(xué)上可接受的無毒性鹽包括堿加成鹽(與游離羧基或其他陰離子基團(tuán)生成的)，它們可以衍生于無機(jī)堿，例如鈉、鉀、銨、鈣或鐵的氫氧化物，和有機(jī)堿，例如異丙胺、三甲胺、2-乙基氨基-乙醇、組胺、普魯卡因等。這類鹽也可以與任何游離陽離子基團(tuán)生成酸加成鹽，一般與無機(jī)酸，例如鹽酸、硫酸或磷酸，或者有機(jī)酸，例如乙酸、檸檬酸、對-甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、酒石酸、扁桃酸等生成。本發(fā)明的鹽包括通過用無機(jī)酸使氨基質(zhì)子化所生成的胺鹽，無機(jī)酸例如為鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸等。本發(fā)明的鹽也包括通過用適合的有機(jī)酸使氨基質(zhì)子化所生成的胺鹽，有機(jī)酸例如為對-甲苯磺酸、乙酸等。另外打算用于實(shí)施本發(fā)明的賦形劑是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可得到的那些，例如參見United States Pharmacopeia Vol.XXII and NationalFormulary Vol.XVII，U.S.Pharmacopeia Convention，Inc.，Rockville，MD(1989)，其有關(guān)內(nèi)容在此引用作為參考。此外，本發(fā)明化合物的多晶型也包括在本發(fā)明內(nèi)。
本發(fā)明的藥物組合物可以通過任何適宜的方式給藥，例如口服，劑型例如為片劑、膠囊劑、顆粒劑或粉劑；舌下；含服；腸胃外，例如通過皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、鞘內(nèi)或腦池內(nèi)注射或輸注技術(shù)(例如作為無菌可注射的水性或非水性溶液或懸浮液)；鼻用，例如通過吸入噴霧；局部，劑型例如為霜?jiǎng)┗蜍浉鄤?；或者直腸用，劑型例如為栓劑；以含有無毒的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的劑量單位制劑形式。本發(fā)明化合物可以例如以適合于即刻釋放或延長釋放的形式給藥。使用包含本發(fā)明化合物的適宜的藥物組合物可以實(shí)現(xiàn)即刻釋放或延長釋放，或者特別是在延長釋放的情況下，使用諸如皮下植入物或滲透泵等裝置。本發(fā)明化合物也可以以脂質(zhì)體方式給藥。
除了靈長類，例如人類以外，多種其他哺乳動(dòng)物也可以按照本發(fā)明的方法治療。例如，可以治療包括但不限于牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、豚鼠、大鼠或其他牛類、羊類、馬類、犬類、貓類、嚙齒動(dòng)物或鼠類的哺乳動(dòng)物。不過，該方法也可以實(shí)施于其他物種，例如鳥類(例如雞)。
用于本實(shí)施方案的化合物單獨(dú)或者與IL-2、免疫毒素、抗體或化療劑聯(lián)合給藥的藥物組合物可以適宜地呈劑量單位形式，并且可以借助制藥領(lǐng)域熟知的任何方法加以制備。所有方法都包括使活性成分與載體結(jié)合的步驟，該載體構(gòu)成一種或多種輔助成分。一般而言，藥物組合物是如下制備的，使活性成分與液體載體或細(xì)碎的固體載體或者這兩種載體均勻而緊密地結(jié)合，然后，如果必要的話，使產(chǎn)物成形為所需的制劑。在藥物組合物中包括的活性化合物的量足以對疾病的過程或狀況產(chǎn)生所需的效應(yīng)。含有活性成分的藥物組合物可以是適合于口服使用的形式，例如片劑、錠劑(troche)、錠劑(lozenge)、水性或油性懸浮液、可分散性粉劑或顆粒劑、乳液、硬或軟膠囊劑或者糖漿劑或酏劑。
打算口服使用的組合物可以按照藥物組合物制造領(lǐng)域已知的任何方法加以制備，這類組合物可以含有一種或多種選自甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑的成分，目的是提供藥學(xué)上完美的和可口的制備物。片劑含有活性成分并混合有適合于片劑制造的無毒的藥學(xué)上可接受的賦形劑。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒和崩解劑，例如玉米淀粉或藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯樹膠；和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以是未包衣的，或者它們可以借助已知技術(shù)包衣，以延遲在胃腸道中的崩解和吸收，從而提供長時(shí)間的持續(xù)作用。例如，可以采用延時(shí)材料，例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它們也可以被包衣以形成控制釋放的滲透性治療片劑。
口服使用的制劑也可以呈硬明膠膠囊劑形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑，例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或者呈軟明膠膠囊劑形式，其中活性成分與水或者油介質(zhì)，例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水性懸浮液含有活性成分并混合有適合于水性懸浮液制造的賦形劑。這類賦形劑是懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯樹膠；分散或濕潤劑可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或者氧化乙烯與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物，例如十七碳烯氧基鯨蠟醇，或者氧化乙烯與從脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或者氧化乙烯與從脂肪酸和己糖醇酐混合物衍生的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯。增溶劑也是有用的，例如聚乙二醇。水性懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑，例如乙基或正丙基的對羥基苯甲酸酯，一種或多種著色劑，一種或多種矯味劑，和一種或多種甜味劑，例如蔗糖或糖精。
油性懸浮液可以如下配制，將活性成分懸浮在植物油，例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油，或者礦物油，例如液體石蠟中。油性懸浮液可以含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胩鹞秳缟鲜瞿切?，和矯味劑，以提供可口的口服制備物。加入抗氧化劑，例如抗壞血酸可以保存這些組合物。
適合于通過加入水制備水性懸浮液的可分散性粉劑和顆粒劑含有活性成分并混合有分散或潤濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。適合的分散或潤濕劑和懸浮劑例如為上文已經(jīng)提到的那些。也可以含有另外的賦形劑，例如甜味劑、矯味劑和著色劑。
糖漿劑和酏劑可以用甜味劑，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。這類制劑還可以含有緩和劑、防腐劑和矯味與著色劑。
藥物組合物可以是無菌可注射的水性或油性懸浮液的形式。這種懸浮液可以按照已知技術(shù)配制，使用上文已經(jīng)提到的那些適合的分散或潤濕劑和懸浮劑。無菌可注射的制備物還可以是無菌可注射的溶液或懸浮液，溶于或懸浮于腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑或助溶劑或配合劑或分散劑或賦形劑或其組合，例如1，3-丁二醇、聚乙二醇、聚丙二醇、乙醇或其他醇、聚維酮、各種品牌的吐溫表面活性劑、十二烷基硫酸鈉、脫氧膽酸鈉、二甲基乙酰胺、聚山梨醇酯、泊洛沙姆、環(huán)糊精、脂質(zhì)和賦形劑，例如無機(jī)鹽(例如氯化鈉)、緩沖劑(例如檸檬酸鈉、磷酸鈉)和糖(例如蔗糖和葡萄糖)?？梢允褂玫目山邮艿妮d體和溶劑有水、葡萄糖溶液、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，通常使用無菌的固定油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此，可以采用任何品牌的固定油，包括合成的單或二甘油酯。另外，脂肪酸，例如油酸可用于注射劑的制備。
取決于所治療的病癥，這些藥物組合物可以被配制供全身或局部給藥。配制和給藥的技術(shù)可以參見最新版的″Remington′sPharmaceutical Sciences″(Mack Publishing Co，Easton Pa.)。適合的途徑可以例如包括口服或經(jīng)粘膜給藥；以及腸胃外遞送，包括肌內(nèi)、皮下、髓內(nèi)、鞘內(nèi)、心室內(nèi)、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)或鼻內(nèi)給藥。就眼科應(yīng)用而言，可以將藥物組合物以玻璃體內(nèi)或眼周方式給藥至眼睛后部。
就注射而言，本發(fā)明的藥物組合物可以被配制在水溶液，優(yōu)選生理學(xué)上相容的緩沖液，例如漢克氏溶液、林格氏溶液或生理鹽水緩沖液中。就組織或細(xì)胞給藥而言，在制劑中使用適合于所要滲透的特定屏障的滲透劑。這類滲透劑是本領(lǐng)域公知的。腸胃外給藥的藥物制劑包括水溶形式活性化合物的水溶液。另外，活性化合物的懸浮液可以被制成適當(dāng)?shù)挠托宰⑸鋺腋∫骸＿m合的親脂性溶劑或載體包括脂肪油，例如芝麻油，或者合成脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯，或者脂質(zhì)體。水性注射懸浮液可以含有增加懸浮液粘度的物質(zhì)，例如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或葡聚糖。任選地，懸浮液還可以含有適合的穩(wěn)定劑或者增加化合物溶解度的物質(zhì)，以允許高度濃縮溶液的制備。就眼科應(yīng)用而言，藥物組合物可以被配制成滴眼劑的形式給藥。
本發(fā)明化合物也可以被配制成栓劑的形式供直腸給藥。這些組合物可以如下制備，混合藥物與適合的非刺激性賦形劑，它在常溫下是固體，但是在直腸溫度下是液體，因此將在直腸中熔化，釋放藥物。這類材料有可可脂和聚乙二醇。
就局部使用而言，采用霜?jiǎng)?、軟膏劑、膠凍劑、溶液或懸浮液等，其中含有本發(fā)明的化合物。(就這種應(yīng)用而言，局部應(yīng)用應(yīng)當(dāng)包括漱口劑和含漱劑。) 一方面，將本發(fā)明化合物與抗炎劑、抗組胺劑、化療劑、免疫調(diào)控劑、治療性抗體或蛋白激酶抑制劑，例如酪氨酸激酶抑制劑聯(lián)合對需要這類治療的受治療者給藥。不希望受到限制，化療劑包括抗代謝藥，例如甲氨蝶呤，DNA交聯(lián)劑，例如順鉑/卡鉑；烷基化劑，例如canbusil；拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑，例如放線菌素；微管抑制劑，例如紫杉醇等。其他化療劑包括例如長春花屬生物堿、絲裂霉素型抗生素、博萊霉素型抗生素、抗葉酸劑、秋水仙堿、地美可辛、依托泊苷、紫杉烷、蒽環(huán)抗生素、阿霉素、柔紅霉素、洋紅霉素、表柔比星、伊達(dá)比星、米托蒽醌、4-二甲氧基-柔紅霉素、11-脫氧柔紅霉素、13-脫氧柔紅霉素、阿德里亞霉素-14-苯甲酸鹽、阿德里亞霉素-14-辛酸鹽、阿德里亞霉素-14-萘乙酸鹽、安吖啶、卡莫司汀、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、依托泊苷、洛伐他汀、美法侖、托泊替康、奧沙利鉑、苯丁酸氮芥、甲氨蝶呤、羅莫司汀、硫代鳥嘌呤、天冬酰胺酶、長春花堿、長春地辛、他莫昔芬或氮芥。不希望受到限制，治療性抗體包括針對HER2蛋白的抗體，例如trastuzumab；針對生長因子或生長因子受體的抗體，例如bevacizumab，它靶向血管內(nèi)皮生長因子，和OSI-774，它靶向內(nèi)皮生長因子；靶向整聯(lián)蛋白受體的抗體，例如Vitaxin(也稱為MEDI-522)等。適合用于本發(fā)明的組合物和方法中的抗癌劑類別包括但不限于1)生物堿，包括微管抑制劑(例如長春新堿、長春花堿和長春地辛等)、微管穩(wěn)定劑(例如紫杉醇和Docetaxel、Taxotere等)和染色質(zhì)功能抑制劑，包括拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，例如表鬼臼毒素(例如依托泊苷[VP-16]和替尼泊苷[VM-26]等)，和靶向拓?fù)洚悩?gòu)酶I的藥物(例如喜樹堿和伊立替康[CPT-11]等)；2)共價(jià)DNA-結(jié)合劑(烷基化劑)，包括氮芥(例如氮芥、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺和白消安[Myleran]等)、亞硝基脲(例如卡莫司汀、羅莫司汀和塞莫司汀等)和其他烷基化劑(例如達(dá)卡巴嗪、羥甲基密胺、噻替派和Mitocycin等)；3)非共價(jià)DNA-結(jié)合劑(抗腫瘤抗生素)，包括核酸抑制劑(例如放線菌素(放線菌素D)等)、蒽環(huán)(例如柔紅霉素(道諾霉素和紅比霉素)、阿霉素(阿德里亞霉素)和伊達(dá)比星(伊達(dá)霉素)等)、蒽二酮(例如蒽環(huán)類似物，例如米托蒽醌等)、博萊霉素(Blenoxane)等和plicamycin(光輝霉素)等；4)抗代謝藥，包括抗葉酸劑(例如甲氨蝶呤、Folex和Mexate等)、嘌呤抗代謝藥(例如6-巰基嘌呤[6-MP，巰基嘌呤]、6-硫代鳥嘌呤[6-TG]、硫唑嘌呤、阿昔洛韋、更昔洛韋、氯脫氧腺苷、2-氯脫氧腺苷[CdA]和2’-脫氧助間型霉素[Pentostatin]等)、嘧啶拮抗劑(例如氟嘧啶(例如5-氟尿嘧啶(Adrucil)、5-氟脫氧尿苷(FdUrd)(氟尿苷)等)和胞嘧啶阿糖苷(例如Cytosar[ara-C]和氟達(dá)拉濱等)；5)酶，包括L-天冬酰胺酶和羥基脲等；6)激素，包括糖皮質(zhì)激素，例如抗雌激素(例如他莫昔芬等)、非甾族抗雄激素(例如氟他胺等)和芳構(gòu)化酶抑制劑(例如阿那曲唑[Arimidex]等)；7)鉑化合物(例如順鉑和卡鉑等)；8)與抗癌藥、毒素和/或放射性核素等綴合的單克隆抗體；9)生物反應(yīng)調(diào)節(jié)物(例如干擾素(例如IFN-α等)和白介素(例如IL-2等)等)；10)過繼免疫治療；11)造血生長因子；12)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化的藥物(例如全-反式-視黃酸等)；13)基因治療技術(shù)；14)反義治療技術(shù)；15)腫瘤疫苗；16)針對腫瘤轉(zhuǎn)移的療法(例如Batimistat等)；和17)血管生成抑制劑。
本發(fā)明的藥物組合物和方法可以進(jìn)一步包含其他如本文所述的通常應(yīng)用于治療上文提到的病變的治療活性化合物。其他治療劑的實(shí)例包括如下環(huán)孢菌素(例如環(huán)孢菌素A)，CTLA4-Ig，抗體，例如ICAM-3、抗-IL-2受體(抗-Tac)、抗-CD45RB、抗-CD2、抗-CD3(OKT-3)、抗-CD4、抗-CD80、抗-CD86，阻斷CD40與gp 39之間相互作用的藥物，例如CD40和/或gp 39(即CD154)特異性抗體，從CD40和gp 39構(gòu)建的融合蛋白(CD40Ig和CD8gp 39)，NF-κB功能抑制劑，例如核易位抑制劑，例如脫氧精胍菌素(DSG)，膽固醇生物合成抑制劑，例如HMG CoA還原酶抑制劑(洛伐他汀和辛伐他汀)，非甾族消炎藥(NSAID)，例如布洛芬，環(huán)加氧酶抑制劑，例如羅非考昔，甾族化合物，例如潑尼松或地塞米松，金化合物，抗增殖劑，例如甲氨蝶呤，F(xiàn)K 506(他克莫司，Prograf)，霉酚酸莫非替克，細(xì)胞毒性藥，例如硫唑嘌呤和環(huán)磷酰胺，TNF-α抑制劑，例如替尼達(dá)普，抗-TNF抗體或可溶性TNF受體，和雷帕霉素(西羅莫司或Rapamune)或其衍生物。
可以與本發(fā)明化合物聯(lián)合給藥的其他藥物包括蛋白質(zhì)治療劑，例如細(xì)胞因子、免疫調(diào)控劑和抗體。本文所用的術(shù)語“細(xì)胞因子”涵蓋趨化因子、白介素、淋巴因子、單核因子、集落刺激因子和受體相關(guān)蛋白，和其功能片段。本文所用的術(shù)語“功能片段”表示具有通過所限定的功能測定法所鑒定的生物功能或活性的多肽或肽。
細(xì)胞因子包括內(nèi)皮單核細(xì)胞活化性多肽II(EMAP-II)、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞-CSF(GM-CSF)、粒細(xì)胞-CSF(G-CSF)、巨噬細(xì)胞-CSF(M-CSF)、IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-12和IL-13、干擾素等，它與細(xì)胞或細(xì)胞機(jī)構(gòu)中的特定生物學(xué)、形態(tài)學(xué)或表型改變有關(guān)。
當(dāng)其他治療劑與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用時(shí)，它們可以使用例如Physician Desk Reference(PDR)中所述的量，或者由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來確定其用量。
在牽涉受損的血管穩(wěn)定的病癥的治療或預(yù)防中，適當(dāng)?shù)膭┝克揭话憧梢栽诩s0.01與約500mg每1kg患者體重每天之間，可以在單一或多個(gè)劑量中給予。例如，劑量水平可以在約0.01與約250mg/kg每天之間；更狹窄地在約0.5與約100mg/kg每天之間。適合的劑量水平可以在約0.01與約250mg/kg每天之間，在約0.05與約100mg/kg每天之間，或者在約0.1與約50mg/kg每天之間，或者約1.0mg/kg每天。例如，在此范圍內(nèi)，劑量可以在約0.05與約0.5mg/kg每天之間，或者在約0.5與約5mg/kg每天之間，或者在約5與約50mg/kg每天之間。就口服給藥而言，可以提供片劑形式的組合物，其中含有約1.0與約1,000mg之間的活性成分，例如約1.0、約5.0、約10.0、約15.0、約20.0、約25.0、約50.0、約75.0、約100.0、約150.0、約200.0、約250.0、約300.0、約400.0、約500.0、約600.0、約750.0、約800.0、約900.0和約1,000.0mg的活性成分，根據(jù)所治療患者的癥狀調(diào)節(jié)劑量。化合物可以按照每天1至4次的服法給藥，例如每天一次或兩次。在另一種給藥方案之前可以有一段時(shí)間不給藥。優(yōu)選地，化合物的給藥與IL-2給藥的安排密切相關(guān)。例如，給藥可以在IL-2給藥之前、同時(shí)或之后不久。
不過將被理解到，就任何特定患者而言的具體劑量水平和給藥頻率可以各不相同，將取決于多種因素，包括所采用的具體化合物的活性、該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用時(shí)間的長短、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥的方式和時(shí)間、排泄的速率、藥物組合、特定病癥的嚴(yán)重性和接受治療的宿主。
本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)或者與有效量的治療性抗體(或其治療性片段)、化療劑或免疫毒性劑聯(lián)合用于腫瘤的治療。盡管阿霉素、docetaxel或紫杉醇在本申請中作為化療劑的說明性實(shí)例被描述，不過應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明包括聯(lián)合療法，包括本發(fā)明的化合物，包括但不限于血管靜態(tài)劑，例如酪氨酸、絲氨酸或蘇氨酸激酶抑制劑，例如Src-家族抑制劑，和任何化療劑或治療性抗體。
C.實(shí)施例 下列實(shí)施例供進(jìn)一步闡述本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特征，但是不打算限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1.一般方法 所有實(shí)驗(yàn)都是在無水條件下(即無水溶劑)、在氬氣氛中進(jìn)行的，另有規(guī)定除外，使用經(jīng)過烘箱干燥的設(shè)備，在處理空氣敏感性材料時(shí)采用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。碳酸氫鈉(NaHCO3)和氯化鈉(鹽水)的水溶液是飽和的。分析型薄層色譜(TLC)是在Merck Kieselgel 60 F254平板上進(jìn)行的，用紫外線和/或浸入茴香醛、高錳酸鉀或磷鉬酸觀察。反相HPLC色譜是在Gilson 215液體處理器上進(jìn)行的，所述處理器配有WatersSymmetryShieldTM RP 187μm(40×100mm)Prep-Pak柱體。移動(dòng)相由標(biāo)準(zhǔn)乙腈(ACN)和DI水組成，各自加入有0.1％TFA。純化是在40mL/min的流速下進(jìn)行的。NMR光譜1H核磁共振光譜是在500MHz下記錄的。數(shù)據(jù)表示如下化學(xué)漂移，峰裂數(shù)(s＝單峰，d＝雙峰，t＝三重峰，q＝四重峰，qn＝五重峰，dd＝雙重雙峰，m＝多重峰，bs＝寬的單峰)，偶合常數(shù)(J/Hz)和積分。偶合常數(shù)直接獲自光譜，未經(jīng)校正。低分辨率質(zhì)譜利用電子噴射(ES+)電離。引述質(zhì)子化母離子(M+H)或最高質(zhì)量的片段。分析型梯度由含10％ACN的水，歷經(jīng)5分鐘上升至100％ACN組成，另有規(guī)定除外。
實(shí)施例2.N-(2-二甲氨基-乙基)-3-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰胺(1)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(1.11mmol，1.0當(dāng)量)、Pd2(dba)3(0.111mmol，0.1當(dāng)量)、Cs2CO3(3.33mmol，3.0當(dāng)量)、Xantphos(0.222mmol，0.2當(dāng)量)和3-溴-N-(2-二甲氨基-乙基)-苯磺酰胺(1.67mmol，1.5當(dāng)量)溶于6mL二烷，用真空清除空氣。將反應(yīng)混合物置于氬氣氛下，在100℃下回流18h。通過Celite過濾鈀和Cs2CO3，然后用EtOAc、飽和NaHCO3和鹽水萃取。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。用EtOAc/己烷(1∶5v/v)沉淀出殘余物，得到標(biāo)題化合物，為黃褐色固體(216mg，22％)。
實(shí)施例3.3-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-N-(2-二甲氨基-乙基)苯磺酰胺(2)
將化合物1(0.464mmol，1.0當(dāng)量)溶于6mL MeOH。然后將排空空氣的樣品置于氬氣罩下；向反應(yīng)混合物加入Pd/C(10％wt)，然后用氫籠罩排空氬的樣品。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4h。產(chǎn)物通過Celite過濾除去鈀，然后在減壓下濃縮。殘余物經(jīng)過快速色譜純化，在5cm×40cm柱上使用DCM/MeOH 50∶50作為洗脫劑。用MeOH/Et2O(1∶5v/v)沉淀出純產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(43mg，28％)。MS(ES+)m/z 337(M+H)+LC保留時(shí)間1.26min。
實(shí)施例4.N-{2-[3-(2-二甲氨基-乙基氨磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-2，6-二甲基-苯甲酰胺(I)
將實(shí)施例3所述化合物2(0.055mmol，2.0當(dāng)量)、2，6-二甲基苯甲酰氯(0.030mmol，1.0當(dāng)量)和TEA(0.12mmol，4.0當(dāng)量)溶于5mL甲苯。使反應(yīng)混合物在111℃氬氣氛下回流18h。冷卻至室溫后，將反應(yīng)物溶于DCM，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。進(jìn)行制備型HPLC，使用10-50-75乙腈和水作為移動(dòng)相，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(6.7mg，48％)。
Rf＝0.14(DCM/MeOH 9∶1).1H NMR(DMSO-d6)δ2.08(bs，3H)，2.29(s，6H)，2.88(bs，3H)，3.32(smear under water，6H)，7.13(d，J＝7.7Hz，1H)，7.24(t，J＝7.6Hz，2H)，7.34(d，J＝8.2Hz，1H)，7.47(t，J＝8.0Hz，2H)，7.66(d，J＝8.6Hz，2H)，7.87(t，J＝8.5Hz，2H)，8.36(s，1H)，8.84(s，2H)，10.02(s，1H)，10.51(s，1H).MS(ES+)m/z＝469(M+H)+.LC保留時(shí)間2.02min. 實(shí)施例5.(5-溴-吡啶-2-基)-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-甲烷酮(3)
向2-哌嗪-1-基-乙醇(1.0g，7.7mmol)與5-溴-吡啶-2-羧酸(1.0g，5.0mmol)的無水DMF溶液(0.05-0.2M)加入HBTU(1.5摩爾當(dāng)量)和HOBt(1.3摩爾當(dāng)量)，繼之加入DIEA(3.0摩爾當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h，然后用EtOAc稀釋。將有機(jī)層用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。在減壓下濃縮濾液，在己烷/Et2O(5∶1v/v)中研制，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.0g，65％)。
實(shí)施例6.[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-[5-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-吡啶-2-基]甲烷酮(4)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.85g，6.1mmol)、實(shí)施例5所述化合物3(2.5g，8.0mmol)、Pd(OAc)2(0.4g，0.44mmol)、Xantphos(0.5g，0.86mmol)與Cs2CO3(4.0g，12mmol)的混合物懸浮在30mL二烷中，在100℃氬氣氛下回流18h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。濃縮濾液，粗產(chǎn)物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(5％MeOH/DCM至15％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.9g，40％)。MS(ES+)m/z＝374(M+H)+. 實(shí)施例7.[5-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-吡啶-2-基]-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-甲烷酮(5)
將實(shí)施例6所述化合物4(0.7g，1.9mmol)溶于MeOH(0.05-1.0M)，排空空氣，置于氬氣罩下；加入Pd/C(10％wt)。排空混合物，然后重新填充氫，在室溫下攪拌4h。通過Celite過濾產(chǎn)物，用MeOH洗滌，在減壓下濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。粗的氨基化合物無需純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z＝344(M+H)+. 實(shí)施例8.2，6-二氯-N-(2-{6-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-羰基]-吡啶-3-基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(II)
將實(shí)施例7所述化合物5(0.292mmol，1.0當(dāng)量)和2，6-二氯苯甲酰氯(0.437mmol，1.5當(dāng)量)溶于8mL THF。經(jīng)由注射器合并TEA(0.584mmol，2.0當(dāng)量)，在70℃氬氣氛下回流18h。在減壓下濃縮溶劑，將殘余物懸浮在EtOAc中，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。用MeOH/己烷(1∶5v/v)沉淀出殘余物，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(89.0mg，60％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.17(t，J＝7.2Hz，2H)，2.42(m，4H)，3.51(q，J＝11.6Hz，J＝6.0Hz，4H)，3.62(bs，2H)，7.57(m，smeared together)，8.32(dd，J＝8.6Hz，J＝2.6Hz，1H)，8.84(s，2H)，8.88(d，J＝2.6Hz，1H)，10.19(s，1H)，10.97(s，1H)MS(ES+)m/z＝516(M+H)+.LC保留時(shí)間1.78min. 實(shí)施例9.4-溴-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯磺酰胺(6)
將4-溴-苯磺酰氯(3.36g，13.1mmol，1當(dāng)量)溶于50mL DCM，用TEA(9.16mL，65.7mmol，5當(dāng)量)處理。在攪拌溶液的同時(shí)，向其中加入2-吡咯烷-1-基-乙基胺(3g，26.3mmol，2當(dāng)量)。3小時(shí)后，將反應(yīng)物倒在DCM/水混合物上，洗滌一次。水相用新鮮的DCM反萃取一次。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌一次，經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾，繼之加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到所需產(chǎn)物。白色針晶(3.92g，90％)。Rf＝0.35，10％MeOH/DCM。
實(shí)施例10.4-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯磺酰胺(7)
將2-氨基-5-硝基嘧啶(7.14mmol，1.0當(dāng)量)、實(shí)施例9所述化合物6(10.71mmol，1.5當(dāng)量)、Pd(OAc)2(0.357mmol，0.05當(dāng)量)、Xantphos(0.714mmol，0.1當(dāng)量)與叔丁醇鉀(14.28mmol，2.0當(dāng)量)的混合物懸浮在40mL二烷中，在100℃氬氣氛下回流18h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。濃縮濾液，用EtOAc/己烷(1∶5v/v)沉淀出粗產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(1.67g，60％)。MS(ES+)m/z＝393(M+H)+。LC保留時(shí)間1.79min。
實(shí)施例11.4-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)苯磺酰胺(8)
將實(shí)施例10所述化合物7(4.26mmol，1.0當(dāng)量)溶于MeOH(0.05-1.0M)，排空空氣，置于氬氣罩下；加入Pd/C(10％wt)。排空混合物，然后重新填充氫，在室溫下攪拌4h。通過Celite過濾，用MeOH洗滌，繼之加入在減壓下濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(100mg，7％)。粗的氨基-化合物無需純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z＝363(M+H)+.LC保留時(shí)間1.34min。
實(shí)施例12.2，6-二氯-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(III)
將實(shí)施例11所述化合物8(0.276mmol，1.0當(dāng)量)和2，6-二氯苯甲酰氯(0.414mmol，1.5當(dāng)量)溶于8mL THF。經(jīng)由注射器合并TEA(0.552mmol，2.0當(dāng)量)，在70℃氬氣氛下回流18h。在減壓下濃縮溶劑，將殘余物懸浮在EtOAc中，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。用MeOH/己烷(1∶5v/v)沉淀出殘余物，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(26.4mg，20％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.71(bs，4H)，2.61(m，4H)，2.88(bs，2H)，3.38(m，smeared under water)，7.54(dd，J＝7.3Hz，J＝8.9Hz，1H)，7.61(d，J＝7.6Hz，2H)，7.71(q，J＝7.1Hz，2H)，7.94(m，J＝7.2Hz，2H)，8.84(s，2H)，10.24(s，1H)，11.01(s，1H).MS(ES+)m/z＝535(M+H)+.LC保留時(shí)間2.07min. 實(shí)施例13.N-甲基-4-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯磺酰胺(9)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.964mmol，1.0當(dāng)量)、4-溴-N-甲基-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯磺酰胺(1.45mmol，1.5當(dāng)量)、Pd2(dba)3(0.096mmol，0.1當(dāng)量)、Cs2CO3(2.89mmol，3.0當(dāng)量)和Xantphos(0.193mmol，0.2當(dāng)量)溶于25mL二烷，用真空清除空氣。將反應(yīng)混合物置于氬氣氛下，在100℃下回流18h。通過Celite過濾溶劑以除去過量鈀和Cs2CO3，然后用EtOAc、飽和NaHCO3和鹽水萃取。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。將殘余物溶于MeOH，用二氧化硅塞純化(5％-20％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物，為黃褐色固體(41.6mg，11％)。MS(ES+)m/z＝409(M+H)+。LC保留時(shí)間1.95min。
實(shí)施例14.4-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-N-甲基-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯磺酰胺(10)
將實(shí)施例13所述化合物9(0.099mmol，1.0當(dāng)量)溶于MeOH(0.05-1.0M)，排空空氣，置于氬氣罩下；加入Pd/C(10％wt)。排空混合物，然后重新填充氫，在室溫下攪拌4h。通過Celite過濾產(chǎn)物，用MeOH洗滌，在減壓下濃縮，得到標(biāo)題化合物，為奶油固體，無需純化即可用于下一步(16mg，43％)。MS(ES+)m/z＝377(M+H)+。LC保留時(shí)間1.5min。
實(shí)施例15.2，6-二氯-N-(2-{4-[甲基-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-氨磺?；鵠-苯基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(IV)
將實(shí)施例14所述化合物10(0.043mmol，1.0當(dāng)量)和2，6-二氯苯甲酰氯(0.064mmol，1.5當(dāng)量)溶于8mL THF。經(jīng)由注射器合并TEA(0.086mmol，2.0當(dāng)量)，在70℃氬氣氛下回流18h。在減壓下濃縮溶劑，將殘余物懸浮在EtOAc中，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。對殘余物進(jìn)行制備型HPLC，使用10-50-75梯度的乙腈和水，流速為40mL/min，得到標(biāo)題化合物的TFA鹽，為黃色的油(1.25mg，11％收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.25(s，4H)，1.73(t，J＝7.0Hz，2H)，1.98(s，3H)，3.16(s，4H)，4.02(q，J＝7.2Hz，2H)，7.39(t，J＝7.4Hz，1H)，7.48(d，J＝7.6Hz，2H)，7.61(t，J＝7.5Hz，2H)，7.73(dd，J＝8.9Hz，J＝3.0Hz，2H)，7.99(dd，J＝22.4Hz，J＝8.9Hz，2H)，8.85(d，1H).MS(ES+)m/z＝549(M+H)+.LC保留時(shí)間2.17min. 實(shí)施例16.[4-(4-甲基-哌嗪-1-磺?；?-苯基]-(5-硝基-嘧啶-2-基)-胺(11)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(1.78mmol，1.0當(dāng)量)、1-(4-溴-苯磺?；?-4-甲基-哌嗪(2.68mmol，1.5當(dāng)量)、Pd(OAc)2(0.089mmol，0.05eq)、Xantphos(0.178mmol，0.1當(dāng)量)和叔丁醇鉀(3.56mmol，2.0當(dāng)量)懸浮在15mL二烷中，在100℃氬氣氛下回流18h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。在減壓下濃縮濾液，經(jīng)過二氧化硅塞純化產(chǎn)物(5％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(758mg，95％)。MS(ES+)m/z＝379(M+H)+。LC保留時(shí)間1.76min。
實(shí)施例17.N-[4-(4-甲基-哌嗪-1-磺?；?-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(12)
將實(shí)施例16所述化合物11(2.005mmol，1.0當(dāng)量)溶于MeOH(0.05-1.0M)，排空空氣，置于氬氣罩下；向反應(yīng)物加入Pd/C(10％wt)，排空，然后重新填充氫，在室溫下攪拌4h。通過Celite過濾，用MeOH洗滌，在減壓下濃縮，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(413mg，59％)。粗的氨基-化合物無需純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z＝349(M+H)+。LC保留時(shí)間1.39min。
實(shí)施例18.2，6-二氯-N-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(V)
將實(shí)施例17所述化合物12(1.186mmol，1.0當(dāng)量)和2，6-二氯苯甲酰氯(1.78mmol，1.5當(dāng)量)溶于8mL THF。經(jīng)由注射器合并TEA(2.372mmol，2.0當(dāng)量)，在70℃氬氣氛下回流18h。在減壓下濃縮溶劑，將殘余物懸浮在EtOAc中，用飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。用EtOAc/DCM(1∶5v/v)沉淀出殘余物，得到標(biāo)題化合物，為奶油固體(4.86mg，1％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.14(s，3H)，2.36(s，4H)，2.86(s，4H)，7.54(dd，J＝9.3Hz，J＝7.4Hz，1H)，7.61(d，J＝8.7Hz，2H)，7.63(d，J＝9.0Hz，2H)，7.99(d，J＝7.0Hz，2H)，8.86(s，2H)，10.31(s，1H)，10.99(s，1H).MS(ES+)m/z＝520(M+H)+.LC保留時(shí)間2.07min. 實(shí)施例19.2，6-二甲基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(VI)
將實(shí)施例11所述化合物8(0.05g，0.14mmol，1當(dāng)量)用4mL DCM稀釋，用DIEA(53μL，0.30mmol，2.2當(dāng)量)和2，6-二甲基-苯甲酰氯(0.023g，0.14mmol，1當(dāng)量)處理。18h后，加入另外1.0當(dāng)量2，6-二甲基-苯甲酰氯和4mL甲苯。然后加熱至回流達(dá)2小時(shí)。然后將反應(yīng)物冷卻至環(huán)境溫度，蒸發(fā)成褐色殘余物。HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.01g，15％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.84-1.88(m，2H)，1.98-2.02(m，2H)，2.29(s，6H)，2.97-3.05(m，4H)，3.19-3.25(m，2H)，3.48(bs，1H)，3.52-3.60(m，2H)，7.13(d，J＝7.6Hz，2H)，7.26(t，J＝7.6Hz，1H)，7.73(d，J＝9.0Hz，2H)，7.76(t，J＝6.2Hz，1H)，7.97(d，J＝8.9Hz，2H)，8.88(s，2H)，9.55(bs，1H)，10.22(s，1H)10.55(s，1H).MS(ES+)m/z＝496(M+H)+.LC保留時(shí)間2.06min. 實(shí)施例20.2-氯-5-甲氧基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨磺酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(13)
將2-氯-5-甲氧基-苯甲酸(0.051g，0.27mmol，1當(dāng)量)與2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT)(0.058g，0.329mmol，1.2當(dāng)量)合并，用DCM(4mL)稀釋。立即用4-甲基嗎啉(60μL，0.55mmol，2當(dāng)量)處理，在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。然后一次性加入實(shí)施例11所述化合物8(0.1g，0.27mmol，1當(dāng)量)。繼續(xù)攪拌過夜。將反應(yīng)物用氯仿(50mL)稀釋，用水洗滌一次。水相用新鮮的氯仿反萃取一次。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌一次，經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾，繼之加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物，為黃色的油。硅膠色譜處理(6∶1DCM/MeOH)得到所需酰胺產(chǎn)物，為白色固體(0.065g，44％)。MS(ES+)m/z＝532(M+H)+。LC保留時(shí)間2.07min。
實(shí)施例21.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(VII)
將實(shí)施例20所述化合物13(0.065g，0.12mmol，1當(dāng)量)用5mLDCM稀釋，利用冰浴冷卻至0℃。然后分若干份加入1.0M BBr3的DCM溶液(1mL，0.99mmol，8當(dāng)量)，導(dǎo)致深色反應(yīng)混合物。一旦加入完全，使反應(yīng)物達(dá)到環(huán)境溫度，攪拌5小時(shí)。然后將反應(yīng)物小心倒在飽和碳酸氫鈉溶液上，繼之加入聲波處理3-5分鐘，進(jìn)行淬滅。濾出所得固體。HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.042g，66％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.84-1.88(m，2H)，1.97-2.02(m，2H)，2.99-3.05(m，4H)，3.18-3.25(m，2H)，3.50-3.58(m，2H)，6.92(dd，J＝8.7Hz，J＝2.9Hz，1H)，6.96(d，J＝2.9Hz，1H)，7.35(d，J＝8.8Hz，1H)，7.73(d，J＝9.0Hz，2H)，7.77(t，J＝6.2Hz，1H)，7.98(d，J＝9.0Hz，2H)，8.86(s，2H)，9.58，(bs，1H)，10.09(bs，1H)，10.22(s，1H)，10.62(s，1H).MS(ES+)m/z＝519(M+H)+.LC保留時(shí)間1.85min. 實(shí)施例22.5-溴-吡啶-2-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(14)
將5-溴-吡啶-2-羧酸(0.81g，4mmol，1當(dāng)量)與2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT)(0.85g，4.8mmol，1.2當(dāng)量)合并，用DCM(20mL)稀釋。立即用4-甲基嗎啉(0.81g，8mmol，2當(dāng)量)處理，在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。然后一次性加入2-吡咯烷-1-基-乙基胺(0.46g，4mmol，1當(dāng)量)。繼續(xù)攪拌過夜。除去反應(yīng)溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯，用水洗滌一次。水相用新鮮的乙酸乙酯反萃取一次。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌一次，經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾，繼之加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，為黃色的油，放置后固化，變?yōu)闇\黃色固體(0.5g，42％)。
實(shí)施例23.5-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-吡啶-2-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(15)
在干燥的50mL圓底燒瓶中合并5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.2g，1.36mmol，1當(dāng)量)、實(shí)施例22所述化合物14(0.61g，2.04mmol，1.5當(dāng)量)、碳酸銫(1.33g，4.08mmol，3當(dāng)量)、4，5-雙(二苯膦基)-9，9-二甲基呫噸(0.157g，0.272mmol，0.2當(dāng)量)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0.124g，0.136mmol，0.1當(dāng)量)。將反應(yīng)劑用氬沖洗，用二烷(8mL)稀釋，配備回流冷凝器。將反應(yīng)物加熱至回流達(dá)18小時(shí)。然后趁熱過濾反應(yīng)物，蒸發(fā)溶劑，得到深色固體。硅膠色譜處理(6∶1DCM/MeOH)得到所需產(chǎn)物，為黃色粉末(0.17g，33％)。Rf＝0.23(10％MeOH/DCM)。
實(shí)施例24.5-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-吡啶-2-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(16)
將實(shí)施例23所述化合物15(0.17g，0.476mmol，1當(dāng)量)與10％披鈀碳(0.14g)合并，用氬沖洗。然后用甲醇(15mL)稀釋反應(yīng)劑，排空反應(yīng)氣氛，用氫代替。附加氫氣囊，將反應(yīng)物攪拌2.5小時(shí)。然后向反應(yīng)混合物通入氬，通過CeliteTM墊過濾內(nèi)容物。蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物。用庚烷研制，繼之加入過濾，得到所需的胺，為米色固體(0.14g，90％)。MS(ES+)m/z＝328(M+H)+。LC保留時(shí)間1.12min。
實(shí)施例25.5-[5-(2，6-二氯-苯甲酰氨基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(VIII)
將實(shí)施例24所述化合物16(0.06g，0.183mmol，1.0當(dāng)量)溶于10mL THF，用2，6-二氯-苯甲酰氯(0.046g，0.22mmol，1.2當(dāng)量)處理，在環(huán)境溫度下攪拌5小時(shí)。然后除去溶劑，所得殘余物經(jīng)過色譜處理。HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為米色固體(0.012g，13％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.85-1.89(m，2H)，1.97-2.03(m，2H)，3.01-3.09(m，2H)，3.31-3.38(m，2H)，3.59-3.67(m，5H)，4.20(bs，1H)，7.52-7.56(m，1H)，7.62(d，J＝8.5Hz，2H)，8.00(d，J＝8.7Hz，1H)，8.42(dd，J＝8.6Hz，J＝2.5Hz，1H)，8.86(s，2H)，8.94(t，6.0Hz，1H)，8.99(d，J＝2.6Hz，1H)，9.38(bs，1H)，10.31(s，1H)，11.0(s，1H).MS(ES+)m/z＝502(M+H)+.LC保留時(shí)間1.95min. 實(shí)施例26.5-[5-(2-氯-5-甲氧基-苯甲酰氨基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(17)
將2-氯-5-甲氧基-苯甲酸(0.046g，0.24mmol，1當(dāng)量)與2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT)(0.052g，0.29mmol，1.2當(dāng)量)合并，用DCM(4mL)稀釋。立即用4-甲基嗎啉(53μL，0.49mmol，2當(dāng)量)處理，在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。然后一次性加入實(shí)施例24所述化合物16(0.08g，0.22mmol，1當(dāng)量)。加入1mL DMF以提高溶解度，繼續(xù)攪拌過夜。將反應(yīng)物用乙酸乙酯(50mL)稀釋，用水洗滌一次。水相用新鮮的乙酸乙酯反萃取一次。合并有機(jī)相，用鹽水洗滌一次，經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾，繼之加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到產(chǎn)物，為微粘性白色固體(0.1g，83％)。MS(ES+)m/z＝497(M+H)+。LC保留時(shí)間1.98min。
實(shí)施例27.5-[5-(2-氯-5-羥基-苯甲酰氨基)-嘧啶-2-基氨基]-吡啶-2-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(IX)
將實(shí)施例26所述化合物17(0.08g，0.1612mmol，1當(dāng)量)用10mLDCM稀釋，利用冰浴冷卻至0℃。分若干份加入1.0M BBr3的DCM溶液(1.6mL，1.6mmol，8當(dāng)量)，導(dǎo)致深色反應(yīng)混合物。一旦加入完全，使反應(yīng)物來到環(huán)境溫度，攪拌5小時(shí)。然后將反應(yīng)物小心倒在飽和碳酸氫鈉溶液上，繼之加入聲波處理3-5分鐘，進(jìn)行淬滅。潷析水層，蒸發(fā)有機(jī)相成褐色殘余物。HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.04g，51％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.84-1.87(m，2H)，1.99-2.02(m，2H)，3.00-3.09(m，2H)，3.33(bs，2H)，3.60-3.65(m，4H)，6.91(dd，J＝8.7Hz，J＝2.9Hz，1H)，6.96(d，J＝2.9Hz，1H)，7.35(d，J＝8.7Hz，1H)，8.00(d，J＝8.6Hz，1H)，8.43(dd，J＝8.6Hz，J＝2.5Hz，1H)，8.87(s，2H)，8.94(t，J＝6.2Hz，1H)，8.97(d，J＝2.4Hz，1H)，9.38(bs，1H)，10.08(s，1H)，10.26(s，1H)，10.63(s，1H).MS(ES+)m/z＝483(M+H)+.LC保留時(shí)間1.76min. 實(shí)施例28.(5-硝基-嘧啶-2-基)-吡啶-3-基-胺(18)
在干燥的50mL圓底燒瓶中合并5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.63g，4.5mmol，1當(dāng)量)、3-溴-吡啶(1.07g，6.8mmol，1.5當(dāng)量)、碳酸銫(4.4g，13.5mmol，3當(dāng)量)、4，5-雙(二苯膦基)-9，9-二甲基呫噸(0.523g，9.03mmol，0.2當(dāng)量)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0.42g，0.45mmol，0.1當(dāng)量)。將反應(yīng)劑用氬沖洗，用二烷(15mL)稀釋，配備回流冷凝器。將反應(yīng)物加熱至回流達(dá)18小時(shí)。然后趁熱過濾反應(yīng)物，蒸發(fā)溶劑，得到深色固體。硅膠色譜處理(6∶1DCM/MeOH)得到所需產(chǎn)物，為黃色粉末(0.36g，37％)。
實(shí)施例29.N-吡啶-3-基-嘧啶-2，5-二胺(19)
將實(shí)施例28所述化合物18(0.36g，0.476mmol，1當(dāng)量)與10％披鈀碳(0.3g)合并，用氬沖洗。反應(yīng)劑然后用甲醇(15mL)稀釋，排空反應(yīng)氣氛，用氫代替。附加氫氣囊，將反應(yīng)物攪拌2.5小時(shí)。然后向反應(yīng)混合物通入氬，通過CeliteTM墊過濾內(nèi)容物。蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物。用庚烷研制，繼之加入過濾，得到所需的胺，為米色固體(0.28g，90％)。
實(shí)施例30.2，6-二氯-N-[2-(吡啶-3-基氨基)-嘧啶-5-基]-苯甲酰胺(X)
將實(shí)施例29所述化合物19(0.077g，0.41mmo l，1.0當(dāng)量)溶于10mL THF，用2，6-二氯-苯甲酰氯(0.103g，0.494mmol，1.2當(dāng)量)處理，在環(huán)境溫度下攪拌4小時(shí)。然后除去溶劑，所得殘余物經(jīng)過色譜處理，得到標(biāo)題化合物，為米色固體(0.026g，18％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ3.73(bs，1H)，7.54-7.57(m，1H)，7.62(d，J＝8.7Hz，2H)，7.73-7.76(m，1H)，8.37(bs，1H)，8.49(d，J＝8.7Hz，1H)，8.88(s，2H)，9.20(bs，1H)，10.45(s，1H)，11.03(s，1H).MS(ES+)m/z＝360(M+H)+.LC保留時(shí)間1.84min. 實(shí)施例31.2-氯-5-甲氧基-N-[2-(吡啶-3-基氨基)-嘧啶-5-基]-苯甲酰胺(20)
將2-氯-5-甲氧基-苯甲酸(0.073g，0.392mmol，1當(dāng)量)與2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT)(0.0828g，0.47mmol，1.2當(dāng)量)合并，用DCM(10mL)稀釋。立即用4-甲基嗎啉(0.086mL，0.785mmol，2當(dāng)量)處理，在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。然后一次性加入實(shí)施例29所述化合物19(0.073g，0.392mmol，1當(dāng)量)。2h后，加入1mL DMF以提高溶解度。繼續(xù)攪拌過夜。除去反應(yīng)溶劑，將殘余物溶于DCM，裝上硅膠柱。經(jīng)過色譜處理(100％EtOAc)，得到所需產(chǎn)物，為白色粉末(0.13g，95％)。
實(shí)施例32.氯-5-羥基-N-[2-(吡啶-3-基氨基)-嘧啶-5-基]-苯甲酰胺(XI)
將實(shí)施例31所述化合物20(0.092g，0.26mmol，1當(dāng)量)用10mLDCM稀釋，利用冰浴冷卻至0℃。分若干份加入1.0M BBr3的DCM溶液(2.0mL，2.07mmol，8當(dāng)量)，導(dǎo)致深色反應(yīng)混合物。一旦加入完全，使反應(yīng)物來到環(huán)境溫度，攪拌5小時(shí)。然后將反應(yīng)物小心倒在飽和碳酸氫鈉溶液上，繼之加入聲波處理3-5分鐘，進(jìn)行淬滅。潷析水層，蒸發(fā)有機(jī)相成褐色殘余物。HPLC純化得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.03g，34％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ3.80(bs，1H)，6.91(dd，J＝2.9Hz，J＝8.7Hz，1H)，6.97(d，J＝2.9Hz，1H)，7.35(d，J＝8.6Hz，1H)，7.73-7.77(m，1H)，8.36(bs，1H)，8.49(d，J＝8.6Hz，1H)，8.89(s，2H)，9.20(bs，1H)，10.09(bs，1H)，10.41(s，1H)，10.67(s，1H).MS(ES+)m/z＝343(M+H)+.保留時(shí)間1.64min. 實(shí)施例33.(5-硝基-嘧啶-2-基)-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-胺(21)
在干燥的100mL圓底燒瓶中合并5-硝基-嘧啶-2-基胺(2g，14.3mmol，1當(dāng)量)、1-[2-(4-溴-苯氧基)-乙基]-吡咯烷(4.45mL，21.4mmol，1.5當(dāng)量)、碳酸銫(14g，42.9mmol，3當(dāng)量)、4，5-雙(二苯膦基)-9，9-二甲基呫噸(1.65g，1.43mmol，0.2當(dāng)量)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(1.3g，0.714mmol，0.1當(dāng)量)。將反應(yīng)劑用氬沖洗，用二烷(50mL)稀釋，配備回流冷凝器。將反應(yīng)物加熱至回流達(dá)18小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫，過濾。硅膠色譜處理得到所需硝基產(chǎn)物，為黃色粉末(1.5g，32％)。
實(shí)施例34.N-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(22)
將實(shí)施例33所述化合物21(1.5g，6.48mmol)的甲醇溶液用氬凈化若干分鐘，然后用10％披鈀碳(0.85g)處理。排空反應(yīng)氣氛，用氫代替，經(jīng)由填充有氫的氣囊加入。2小時(shí)后，除去氫氣囊，用氬凈化反應(yīng)溶劑。向反應(yīng)溶劑加入Celite，所得漿液通過Celite墊過濾。然后除去溶劑，得到所需的胺，為黃色固體(0.36g，26％)。
實(shí)施例35.N′-(2，6-二氯-芐基)-N-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(XII)
將2-溴甲基-1，3-二氯-苯(0.45g，1.87mmol，1.4當(dāng)量)與實(shí)施例34所述化合物22(0.4g，1.34mmol，1當(dāng)量)、碳酸銫(1.09g，3.34mmol，2.5當(dāng)量)合并，用二烷(25mL)稀釋。加熱至100℃，攪拌過夜。然后除去反應(yīng)溶劑，所得粗固體經(jīng)由硅膠色譜純化。分離產(chǎn)物，為黃色的油(0.20g)，然后用DCM(10mL)稀釋，用0.33mL 4M HCl/醚處理。然后除去溶劑，得到所需產(chǎn)物的HCl鹽，為淡黃色固體(0.20g，33％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.85-1.9(m，2H)，1.96-2.05(m，2H)，3.05-3.1(m，2H)，3.55-3.61(m，8H)，4.27(t，J＝4.8Hz，2H)，4.39(s，2H)，6.9(d，J＝9.15Hz，2H)，7.38(t，J＝7.65Hz，1H)，7.52(d，J＝8.05Hz，2H)，7.6(d，J＝9.1Hz，2H)，8.08(s，2H)，8.97(bs，1H)，10.61(bs，1H). 實(shí)施例36.3-(3-溴-苯基)-丙烷-1-醇(23)
將3-(3-溴-苯基)-丙酸(3.88g，16.9mmol，1當(dāng)量)用THF(50mL)稀釋，冷卻至0℃。緩慢加入1M LAH溶液，以便不使內(nèi)部反應(yīng)溫度升至10-15℃以上。一旦LAH加入完全，使反應(yīng)物來到室溫，攪拌3h。然后先后加入水(0.5mL)、15％NaOH(0.5mL)和水(1.5mL)，淬滅反應(yīng)。然后過濾，蒸發(fā)溶劑，得到產(chǎn)物，為蒼白色油(2.75g，98％)。Rf＝0.42(30％EtOAc/己烷)。
實(shí)施例37.1-溴-3-(3-溴-丙基)-苯(24)
將實(shí)施例36所述醇23(4g，18.6mmol，1當(dāng)量)用THF(100mL)稀釋，用CBr4(9.27g，27.9mmol，1.5當(dāng)量)、三苯膦(7.31g，27.9mmol，1.5當(dāng)量)處理，隨后攪拌16h。然后將反應(yīng)物用EtOAc(125mL)稀釋，用鹽水洗滌(2×75mL)。從水相中分離有機(jī)相，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)，得到所需溴化物，為澄清的油(4g，78％)。
實(shí)施例38.1-[3-(3-溴-苯基)-丙基]-吡咯烷(25)
將實(shí)施例37所述溴化物24(1g，3.68mmol，1當(dāng)量)用二烷(30mL)稀釋，用吡咯烷(0.61mL，7.35mmol，2當(dāng)量)、碳酸銫(2.4g，7.35mmol，2當(dāng)量)處理，攪拌18h。然后將反應(yīng)物用水(125mL)稀釋，用EtOAc萃取(2×100mL)。從水相中分離有機(jī)相，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)，得到所需產(chǎn)物，為澄清的油(0.6g，61％)。
實(shí)施例39.(5-硝基-嘧啶-2-基)-[3-(3-吡咯烷-1-基-丙基)-苯基]-胺(26)
在干燥的50mL圓底燒瓶中合并5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.35g，2.5mmol，1當(dāng)量)、實(shí)施例38所述化合物25(0.8g，3mmol，1.2當(dāng)量)、碳酸銫(2.43g，7.5mmol，3當(dāng)量)、4，5-雙(二苯膦基)-9，9-二甲基呫噸(0.288g，0.5mmol，0.2當(dāng)量)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0.228g，0.25mmol，0.1當(dāng)量)。將反應(yīng)劑用氬沖洗，用二烷(20mL)稀釋，配備回流冷凝器。將反應(yīng)物加熱至回流達(dá)18小時(shí)。然后將反應(yīng)物冷卻至室溫，過濾。硅膠色譜處理得到所需硝基產(chǎn)物，為黃色粉末(0.5g，61％)。
實(shí)施例40.N-[3-(3-吡咯烷-1-基-丙基)-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(27)
將實(shí)施例39所述化合物26(0.15g，0.459mmol，1當(dāng)量)與10％披鈀碳(0.10g)合并，用氬沖洗。然后用甲醇(25mL)稀釋反應(yīng)劑，排空反應(yīng)氣氛，用氫代替。附加氫氣囊，將反應(yīng)物攪拌2.5小時(shí)。然后向反應(yīng)混合物通入氬，通過CeliteTM墊過濾內(nèi)容物。蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物。用庚烷研制，繼之加入過濾，得到所需的胺，為黃色固體(0.10g，74％)。
實(shí)施例41.2，6-二氯-N-{2-[3-(3-吡咯烷-1-基-丙基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XIII)
將實(shí)施例40所述胺27(0.138g，0.47mmol，1當(dāng)量)用THF(15mL)稀釋，用2，6-二氯-苯甲酰氯(0.116mL，0.56mmol，1.2當(dāng)量)處理，攪拌18h。然后除去反應(yīng)溶劑，所得粗固體經(jīng)由HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(0.140g，64％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.8-1.88(m，2H)，1.9-2.05(m，4H)，2.61(t，J＝7.65Hz，2H)，2.95-3.04(m，2H)，3.1-3.18(m，2H)，3.5-3.59(m，2H)，6.81-6.82(d，J＝7.5Hz，1H)，7.22(t，J＝7.85Hz，1H)，7.5-7.53(m，1H)，7.58-7.62(m，4H)，8.75(s，2H)，9.59(bs，1H)，9.69(s，1H)，10.87(s，1H). 實(shí)施例42.(4-(5-硝基嘧啶-2-基氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲烷酮(28)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(504mg，3.6mmol)、(4-溴-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲烷酮(1.1g，3.9mmol)、Cs2CO3(4.6g，14.2mmol)、Xantphos(420mg，0.7mmol)、Pd2(dba)3(330mg，0.4mmol)與3分子篩在二烷(70mL)中的混合物用氬凈化5min，在氬下加熱至回流達(dá)18h。在真空中除去二烷，使所得混合物在EtOAc與水(各200mL)之間分配。分離各層，水層用EtOAc(200mL)萃取兩次。合并有機(jī)層，在真空中濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)過快速柱色譜純化(0.5％NH4OH/10％MeOH/89.5％二氯甲烷)，得到灰白色固體(657mg，53％)。
Rf0.07(0.5％NH4OH，10％MeOH in CHCl3).1H NMR(DMSO-d6)δ2.19(s，3H)，2.31(bs，4H)，3.48(bs，4H)，7.38(d，J＝8.6Hz，2H)，7.69(d，J＝8.4Hz，2H)，9.16(s，2H)，11.01(bs，1H).MS(ES+)m/z＝343(M+H)+.LC保留時(shí)間1.62min. 實(shí)施例43.(4-(5-氨基嘧啶-2-基氨基)苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲烷酮(29)
用氬沖洗后，向?qū)嵤├?2所述中間體28(656mg，1.9mmol)的THF(30mL)溶液加入10％Pd/C(655mg，1.9mmol)。向該懸浮液通入氫達(dá)10min，在H2氣氛下攪拌2h。將懸浮液用氬凈化，通過Celite過濾，使用甲醇充分洗滌濾餅。在真空中濃縮有機(jī)溶液，溶于甲苯，再次在真空中濃縮，得到灰白色固體(608mg，quant)。MS(ES+)m/z＝313(M+H)+。LC保留時(shí)間0.72min。
實(shí)施例44.2-(5-硝基嘧啶-2-基氨基)-N-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)噻唑-4-羧酰胺(30)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(251mg，1.8mmol)、2-溴-噻唑-4-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(540mg，1.8mmol)、Cs2CO3(2.3g，7.1mmol)、Xantphos(211mg，0.4mmol)、與Pd2(dba)3(161mg，1.2mmol)在二烷(36mL)中的混合物用氬凈化5min。將反應(yīng)漿液在氬下加熱至回流達(dá)18h。在真空中除去二烷，使所得粗混合物吸附到硅膠上，利用Isco快速色譜系統(tǒng)純化(0％至30％甲醇的DCM溶液，含有1％NH4OH)，得到白色固體(270mg，42％)。Rf0.31(0.5％NH4OH，10％MeOH in CHCl3)。MS(ES+)m/z＝364(M+H)+。LC保留時(shí)間1.74min。
實(shí)施例45.2-(5-氨基嘧啶-2-基氨基)-N-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)噻唑-4-羧酰胺(31)
在用氬沖洗后，向?qū)嵤├?4所述中間體30(270mg，0.7mmol)在MeOH(3mL)與THF(60mL)中的溶液加入10％Pd/C(270mg，0.07mmol)。向該懸浮液通入氫達(dá)10min，在H2氣氛下攪拌2h。將懸浮液用氬凈化，通過Celite過濾，使用甲醇充分洗滌濾餅。在真空中濃縮有機(jī)溶液，溶于MeOH和DCM。用乙醚和己烷沉淀出產(chǎn)物，得到灰白色固體(粗品192mg，79％；重結(jié)晶后136.7mg，56％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.71(bs，4H)，2.53(bs，4H)，2.61(bs，2H)，3.38-3.41(m，2H)，5.09(s，2H)，7.52(s，1H)，7.70(bs，1H)，8.06(s，2H)，11.22(bs，1H).MS(ES+)m/z＝334(M+H)+.LC保留時(shí)間1.30min. 實(shí)施例46.3-溴-N-(2-羥基乙基)-N-異丙基苯甲酰胺(32)
向2-異丙基氨基-乙醇(1.5mL，9.1mmol，70％純)與TEA(2.5mL，18mmol)在DCM(40mL)中的混合物一次性加入3-溴-苯甲酰氯(1mL，7.6mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌30min，連續(xù)用10％NaHCO3(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，干燥(Na2SO4)，在真空中濃縮。在丙酮/EtOAc/己烷混合物中重結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(1.78g，82％)。Rf0.33(EtOAc)。MS(ES+)m/z＝286/288(M+H)+。LC保留時(shí)間2.32min。
實(shí)施例47.3-(5-硝基嘧啶-2-基氨基)-N-(2-羥基乙基)-N-異丙基苯甲酰胺(33)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(141mg，1.0mmol)、實(shí)施例46所述溴化物中間體32(301mg，1.1mmol)、Cs2CO3(1.3g，4.0mmol)、Xantphos(117mg，0.2mmol)與Pd2(dba)3(92mg，0.1mmol)在二烷(20mL)中的混合物用氬凈化5min，將該懸浮液在氬下加熱至回流達(dá)16h。在真空中除去二烷，使粗混合物吸附到硅膠上，利用Isco快速色譜系統(tǒng)純化(0％至30％甲醇的DCM溶液，含有1％NH4OH)，得到黃褐色固體(142mg，41％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.11(bs，6H)，3.33-3.36(m，2H)，3.56(bs，2H)，3.87(bs，1H)，4.76(bs，1H)，7.08(d，J＝7.6Hz，1H)，7.43(t，J＝7.9Hz，1H)，7.78(bs，1H)，7.79(dd，J＝8.0，1.5Hz，1H)，9.25(s，2H)，10.94(s，1H).MS(ES+)m/z＝346(M+H)+.LC保留時(shí)間2.21min. 實(shí)施例48.3-(5-氨基嘧啶-2-基氨基)-N-(2-羥基乙基)-N-異丙基苯甲酰胺(34)
在用氬沖洗后，向?qū)嵤├?7所述中間體33(140mg，0.4mmol)的1∶1THF/MeOH(10mL)溶液加入10％Pd/C(143mg，0.04mmol)，向所得懸浮液通入氫達(dá)10min。然后將反應(yīng)物在H2氣氛下攪拌90min。將懸浮液用氬凈化，通過Celite過濾，使用甲醇充分洗滌濾餅。在真空中濃縮有機(jī)溶液，得到黃褐色固體(90mg，71％)。MS(ES+)m/z＝316(M+H)+。LC保留時(shí)間1.55min。
實(shí)施例49.4-溴苯甲酰氯(35)
向4-溴-苯甲酸(5g，24.9mmol)的DCM(40mL)溶液加入草酰氯(3.4mL，39.6mmol)，繼之加入DMF(0.25mL，3.2mmol)。加入DMF后，發(fā)生劇烈的冒泡。約45min后冒泡停止。將反應(yīng)物再攪拌15min，總計(jì)1小時(shí)。在真空中小心地濃縮反應(yīng)混合物，得到粗的黃-褐色固體，無需進(jìn)一步純化即可原樣使用(5.6g，quant.)。
實(shí)施例50.4-溴-N-(2-羥基乙基)-N-異丙基苯甲酰胺(36)
向?qū)嵤├?9所述酰氯中間體35(3.26g，14.9mmol)與TEA(9.2mL，66.2mmol)在DCM(140mL)中的混合物一次性加入2-異丙基氨基-乙醇(2.5mL，15.2mmol)，攪拌30min。在真空中濃縮反應(yīng)物，吸附到硅膠上，利用Isco快速色譜系統(tǒng)純化(100％EtOAc)，得到白色固體(2.62g，62％)。
Rf0.29(0.5％NH4OH，10％MeOH in CHCl3).1H NMR(DMSO-d6)δ1.07(bs，6H)，3.30(bs，2H)，3.54(bs，2H)，3.73(bs，1H)，4.74(bs，1H)，7.30(dt，J＝8.7，2.1Hz，2H)，7.63(bd，J＝8.0Hz，2H).MS(ES+)m/z＝286/288(M+H)+.LC保留時(shí)間2.35min. 實(shí)施例51.4-(5-硝基嘧啶-2-基氨基)-N-(2-羥基乙基)-N-異丙基苯甲酰胺(37)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(142mg，1.0mmol)、實(shí)施例50所述溴化物中間體36(285mg，1.0mmol)、Cs2CO3(1.4g，4.3mmol)、Xantphos(114mg，0.2mmol)與Pd2(dba)3(91mg，0.1mmol)在二烷(20mL)中的混合物用氬凈化5min，將該懸浮液在氬下加熱至回流達(dá)2.5小時(shí)。在真空中除去二烷，使粗混合物吸附到硅膠上，利用Isco快速色譜系統(tǒng)純化(0％至10％甲醇的DCM溶液，含有1％NH4OH)，得到粗的黃褐色固體(357mg，quant.)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.10(bs，6H)，3.54(bs，2H)，4.74(bs，1H)，7.36(d，J＝8.5Hz，2H)，7.82(d，J＝8.5Hz，2H)，9.26(s，2H)，10.99(s，1H).MS(ES+)m/z＝346(M+H)+.LC保留時(shí)間2.18min. 實(shí)施例52.4-(5-氨基嘧啶-2-基氨基)-N-(2-羥基乙基)-N-異丙基苯甲酰胺(38)
在用氬沖洗后，向?qū)嵤├?1所述中間體37(357mg，1.0mmol)在1∶1THF/MeOH(26mL)溶液加入10％Pd/C(360mg，0.01mmol)，向所得懸浮液通入氫達(dá)10min。然后將反應(yīng)物在H2氣氛下攪拌18h。將懸浮液用氬凈化，通過Celite過濾，使用甲醇充分洗滌濾餅。在真空中濃縮有機(jī)溶液，用乙醚研制，得到黃褐色固體，過濾收集(252mg，78％)。MS(ES+)m/z＝316(M+H)+。LC保留時(shí)間1.51min。
實(shí)施例53.2-氯-5-甲氧基苯甲酸(39)
將2-氯-5-甲氧基-溴苯(5g，22.6mmol)的THF(55mL)溶液冷卻至-78℃，歷經(jīng)15min滴加2.5M正BuLi的己烷溶液(10.8mL)，保持反應(yīng)溫度低于-60℃。當(dāng)反應(yīng)已經(jīng)完全冷卻回到-78℃時(shí)，摩擦除去13片固體CO2(2-4cm×1cm圓柱)的冰，緩慢加入到反應(yīng)物中。除去冷卻浴，使反應(yīng)物緩慢升溫至室溫(約1.5小時(shí))。將反應(yīng)物用85mL EtOAc和100mL NaHCO3(sat.)稀釋，用30％NaOH調(diào)節(jié)pH至10-12。分離各層，水層用HCl(conc.)酸化，以沉淀出標(biāo)題化合物，為灰白色固體，過濾收集，用冷水沖洗。在真空中除去痕量溶劑(2.2g，52％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ3.33(s，3H)，7.10(dd，J＝8.9，3.3Hz，1H)，7.28(d，J＝3.2Hz，1H)，7.43(d，J＝8.9Hz，1H).MS(ES+)m/z＝169(M+H)+.LC保留時(shí)間2.20min. 實(shí)施例54.2，6-二氯-N-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XIV)
向?qū)嵤├?3所述中間體29(50mg，0.2mmol)的THF(25mL)溶液一次性加入2，6-二氯苯甲酰氯(1.5mL，10.7mmol)，將反應(yīng)物攪拌15min，此時(shí)已有固體生成。將反應(yīng)物攪拌18h，粗混合物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(14mg，15％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.83(s，3H)，3.08(bs，2H)，3.27(bs，2H)，4.23(bs，2H)，7.42(d，J＝8.8Hz，2H)，7.54(dd，J＝9.0，7.1Hz，1H)，7.62(d，J＝8.8Hz，2H)，7.86(d，J＝8.7Hz，2H)，8.81(s，2H)，9.86(bs，1H)，10.05(s，1H)，10.94(s，1H).MS(ES+)m/z＝485/487/489(M+H)+.LC保留時(shí)間1.89min. 實(shí)施例55.2，6-二甲基-N-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XV)
采用與實(shí)施例49所述中間體35相似的工藝，將2，6-二甲基苯甲酸(29mg，0.19mmol)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酰氯，使用DCM(1mL)、草酰氯(0.026mL，0.3mmol)和DMF(約20μL)。當(dāng)反應(yīng)完全時(shí)(約20min)，在真空中小心地濃縮溶液。加入THF(1mL)以溶解酰氯，繼之加入加入實(shí)施例43所述胺中間體29(52mg，0.17mmol)。反應(yīng)歷經(jīng)18h生成沉淀，經(jīng)過HPLC純化，得到淡黃色固體(36mg，40％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，6H)，2.83(s，3H)，3.08(bs，2H)，3.27(bs，2H)，3.42-3.48(m，2H)，4.22(bs，2H)，7.13(d，J＝7.6Hz，2H)，7.26(t，J＝7.6Hz，1H)，7.42(d，J＝8.8Hz，2H)，7.86(dd，J＝6.9，1.9Hz，2H)，8.84(s，2H)，9.85(bs，1H)，9.99(s，1H)，10.50(s，1H).MS(ES+)m/z＝446(M+H)+.LC保留時(shí)間1.86min. 實(shí)施例56.2-氯-5-甲氧基-N-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(40)
采用與實(shí)施例49所述中間體35相似的工藝，將實(shí)施例53所述中間體39(74mg，0.4mmol)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酰氯，使用DCM(3mL)、草酰氯(0.053mL，0.6mmol)和DMF(約0.02mL)。當(dāng)反應(yīng)完全時(shí)(約45min)，在真空中小心地濃縮溶液。加入THF(3mL)以溶解酰氯，繼之加入實(shí)施例43所述胺中間體29(104mg，0.3mmol)。反應(yīng)生成中間體沉淀，攪拌18h。真空過濾收集固體，用乙醚沖洗，在真空中除去殘留溶劑，得到白色固體(117mg，68％)。MS(ES+)m/z＝481/483(M+H)+。LC保留時(shí)間1.89min。
實(shí)施例57.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基]-苯甲酰胺(XVI)
向?qū)嵤├?6所述化合物40的HCl鹽(117mg，0.2mmol)的DCM(20mL)懸浮液加入1.5mL 1M BBr3的DCM溶液(1.5mmol)。1小時(shí)后，加入另外0.138mL凈的BBr3(1.5mmol)。將反應(yīng)物攪拌18h，加入另外0.138mL凈的BBr3(1.5mmol)，攪拌另外24h。將反應(yīng)物用NaHCO3淬滅，在真空中濃縮。粗殘余物經(jīng)過HPLC純化，得到淡黃色固體(13mg，10％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.83(s，3H)，3.05-3.12(m，2H)，3.26(bs，2H)，3.41-3.47(m，2H)，4.15(bs，2H)，6.91(dd，J＝8.8，2.9Hz，1H)，6.96(d，J＝2.9Hz，1H)，7.35(d，J＝8.8Hz，1H)，7.42(d，J＝8.7Hz，2H)，7.86(d，J＝8.8Hz，2H)，8.82(s，2H)，9.78(bs，1H)，9.99(s，1H)，10.07(bs，1H)，10.57(s，1H).MS(ES+)m/z＝467/469(M+H)+.LC保留時(shí)間1.68min. 實(shí)施例58.2-甲基-3-乙酰氧基-N-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(41)
采用與實(shí)施例54所述化合物XIV相似的工藝合成標(biāo)題化合物，使用3-(氯羰基)-2-甲基苯基乙酸酯(75mg，0.35mmol)與實(shí)施例43所述胺中間體29(104mg，0.33mmol)的THF(3mL)溶液。分離產(chǎn)物，得到白色固體(131mg，75％)。MS(ES+)m/z＝490(M+H)+。LC保留時(shí)間1.80min。
實(shí)施例59.2-甲基-3-羥基-N-{2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XVII)
向?qū)嵤├?8所述化合物41的HCl鹽(131mg，0.27mmol)的甲醇(1mL)懸浮液加入0.5M甲醇鈉的甲醇溶液(1mL，0.5mmol)。生成中間體沉淀，10min后加入HCl以淬滅反應(yīng)?；旌衔锝?jīng)過HPLC純化，除去過量鹽，分離標(biāo)題化合物，為黃色固體(88mg，58％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.18(s，3H)，2.83(s，3H)，3.03-3.13(m，2H)，3.27(bs，2H)，3.40-3.49(m，2H)，4.24(bs，2H)，6.92(d，J＝7.4Hz，1H)，6.93(d，J＝8.1Hz，1H)，7.12(t，J＝7.8Hz，1H)，7.42(d，J＝8.7Hz，2H)，7.86(d，J＝8.8Hz，2H)，8.84(s，2H)，9.65(bs，1H)，9.80(bs，1H)，9.95(s，1H)，10.34(s，1H).MS(ES+)m/z＝447(M+H)+.LC保留時(shí)間1.56min. 實(shí)施例60.2-[5-(2-氯-5-甲氧基-苯甲酰氨基)嘧啶-2-基氨基]-噻唑-4-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(42)
采用與實(shí)施例56所述化合物40所用相似的工藝，使用實(shí)施例53所述酸中間體39(74mg，0.40mmol)、草酰氯(0.053mL，0.62mmol)和實(shí)施例45所述胺31(115mg，0.35mmol)，HPLC純化后分離標(biāo)題化合物，為黃色固體(89mg，41％)。MS(ES+)m/z＝502(M+H)+。LC保留時(shí)間2.01min。
實(shí)施例61.2-[5-(2-氯-5-羥基-苯甲酰氨基)-嘧啶-2-基氨基]-噻唑-4-羧酸(2-吡咯烷-1-基-乙基)-酰胺(XVIII)
采用與實(shí)施例57所述化合物XV I相似的工藝，使用實(shí)施例60所述化合物42的HCl鹽(89mg，0.17mmol)，歷經(jīng)150min一次性加入BBr3(0.156mL，1.7mmol)的15mL DCM溶液，得到標(biāo)題化合物的TFA鹽，為白色固體(19.1mg，19％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.82-1.92(m，2H)，1.97-2.06(m，2H)，3.01-3.09(m，2H)，3.33(q，J＝5.8Hz，2H)，3.60-3.64(m，2H)，6.92(dd，J＝8.8，2.9Hz，1H)，6.98(d，J＝2.9Hz，1H)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H)，7.75(s，1H)，8.15(t，J＝6.1Hz，1H)，8.95(s，2H)，9.40(bs，1H)，10.09(s，1H)，10.71(s，1H)，11.83(s，1H).MS(ES+)m/z＝488(M+H)+.LC保留時(shí)間1.80min. 實(shí)施例62.2，6-二氯-N-(2-{3-[(2-羥基-乙基)-異丙基-氨甲?；鵠-苯基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(XIX)
采用與實(shí)施例54所述化合物XIV相似的工藝，使用實(shí)施例48所述胺中間體34(45mg，0.14mmol)、2，6-二氯苯甲酰氯(0.022mL，0.16mmol)與TEA(0.040mL，0.28mmol)的THF(2mL)溶液，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(45mg，64％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.11(bs，6H)，3.29-3.37(m，2H)，3.53-3.54(m，2H)，3.88-3.95(m，2H)，6.89(d，J＝7.4Hz，1H)，7.33(t，J＝7.9Hz，1H)，7.53(dd，J＝9.0，7.2Hz，1H)，7.58-7.63(m，2H)，7.74-7.78(m，2H)，8.77(s，2H)，10.89(s，1H).MS(ES+)m/z＝488/490/492(M+H)+.LC保留時(shí)間2.38mi. 實(shí)施例63.2-氯-5-甲氧基-N-(2-{3-[(2-羥基-乙基)-異丙基-氨甲酰基]-苯基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(43)
采用與實(shí)施例56所述化合物40所用相似的工藝，使用實(shí)施例53所述酸中間體39(30mg，0.16mmol)、草酰氯(0.022mL，0.25mmol)和實(shí)施例48所述胺中間體34(45mg，0.14mmol)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(7.5mg，11％)。MS(ES+)m/z＝484/486(M+H)+。LC保留時(shí)間2.38min。
實(shí)施例64.2-氯-5-羥基-N-(2-{3-[(2-羥基-乙基)-異丙基-氨甲?；鵠-苯基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(XX)
采用與化合物XVI相似的工藝，使用實(shí)施例63所述化合物43(7.5mg，0.015mmol)，歷經(jīng)2小時(shí)兩次加入BBr3(14.7μL，0.15mmol和29.4μL，0.31mmol)的0.5mL DCM溶液，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(6mg，88％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.11(bs，3H)，3.92(bs，2H)，6.88(d，J＝8.4Hz，1H)，6.90(dd，J＝8.6，3.0Hz，1H)，6.96(d，J＝3.0Hz，1H)，7.30-7.36(m，2H)，7.75(s，1H)，7.77(s，1H)，8.79(s，2H)，9.80(s，1H)，10.05(bs，1H)，10.53(s，1H).MS(ES+)m/z＝471/473(M+H)+.LC保留時(shí)間2.11min. 實(shí)施例65.2，6-二氯-N-(2-{4-[(2-羥基-乙基)-異丙基-氨甲?；鵠-苯基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(XXI)
采用與實(shí)施例54所述化合物XIV相似的工藝，使用實(shí)施例52所述胺中間體38(57mg，0.18mmol)、2，6-二氯苯甲酰氯(0.026mL，0.18mmol)與TEA(0.063mL，0.45mmol)的THF(1.5mL)溶液，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(46mg，51％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.12(bs，6H)，3.51(bs，2H)，4.73(t，J＝5.5Hz，1H)，7.28(d，J＝8.6Hz，2H)，7.53(dd，J＝9.1，7.1Hz，1H)，7.61(d，J＝7.7Hz，2H)，7.80(d，J＝8.7Hz，2H)，8.79(s，2H)，9.93(s，1H)，10.91(s，1H).MS(ES+)m/z＝488/490/492(M+H)+.LC保留時(shí)間2.34min. 實(shí)施例66.2-氯-5-羥基-N-(2-{4-[(2-羥基-乙基)-異丙基-氨甲酰基]-苯基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(XXII)
采用與實(shí)施例56所述化合物40所用相似的工藝，使用實(shí)施例53所述酸中間體39(68mg，0.36mmol)、草酰氯(49.9μL，0.58mmol)和實(shí)施例52所述胺中間體38(115mg，0.37mmol)，得到2-氯-5-甲氧基-N-(2-{4-[(2-羥基-乙基)-異丙基-氨甲酰基]-苯基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺，為淡黃色固體。利用與實(shí)施例57所述化合物XVI所用相似的工藝，使用該粗固體和BBr3(0.345mL，3.6mmol)的DCM(20mL)溶液得到標(biāo)題化合物。用NaHCO3淬滅反應(yīng)，分離有機(jī)層，在真空中濃縮。粗混合物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(15.5mg，9％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.12(bs，6H)，3.28-3.33(m，2H)，6.90(dd，J＝8.7，3.0Hz，1H)，6.96(d，J＝2.9Hz，1H)，7.27(d，J＝8.6Hz，2H)，7.35(d，J＝8.8Hz，1H)，7.79(d，J＝8.7Hz，2H)，8.80(s，2H)，9.87(s，1H)，10.04(s，1H)，10.54(s，1H).MS(ES+)m/z＝470/472(M+H)+.LC保留時(shí)間2.07min. 實(shí)施例67.4-溴-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯甲酰胺(44)
向4-溴苯甲酸(5g，24.8mmol)的二氯甲烷(125mL)溶液加入亞硫酰氯(18.15mL，248.7mmol)，繼之加入DMF(1mL)。將反應(yīng)混合物在回流下加熱5h，直至觀察到?jīng)]有氣體放出。在減壓下蒸發(fā)揮發(fā)物，將殘余物溶于己烷-乙酸乙酯(200mL，3∶1)。通過小硅膠塞過濾漿液，蒸發(fā)。得到粗的氯化物，為黃色糖漿，最終變?yōu)楣腆w(4.47g，82％)。在0℃下向該酰氯(2.0g，9.11mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液加入三乙胺(6.35mL，45.55mmol)和吡咯烷乙基胺(1.15mL，9.11mmol)，升溫至室溫。在室溫下攪拌16h后，用飽和含水碳酸氫鈉(30mL)淬滅反應(yīng)混合物。分離有機(jī)層，水層再次用二氯甲烷(100mL)萃取。合并有機(jī)相，分離，干燥(MgSO4)，通過二氧化硅塞過濾，在減壓下除去揮發(fā)物，得到白色固體(2.4g，89％)。
實(shí)施例68.4-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯甲酰胺(45)
將2-氨基-5-硝基嘧啶(140mg，1.0mmol)、實(shí)施例67所述化合物44(297mg，1.0mmol)、Pd2(dba)3(9.0mg，0.01mmol)、Xantphos(12mg，0.02mmol)與碳酸銫(650mg，2.0mmol)的混合物懸浮在二烷(15mL)中，在氬氣氛下加熱至回流達(dá)15h。蒸發(fā)溶劑，殘余物用氯仿-水-鹽水(50mL，1∶1∶1)研制。分離氯仿層，干燥，蒸發(fā)。將殘余物(400mg)溶于甲醇(50mL)，經(jīng)過Pd/C(10％，120mg)氫化3hr。過濾除去催化劑，蒸發(fā)溶劑。將殘余物用氯仿-甲醇混合物結(jié)晶，得到標(biāo)題化合物(344mg，quant.)，為黃色固體。
實(shí)施例69.2-溴-5-甲氧基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(46)
向?qū)嵤├?8所述中間體45(50mg，0.15mmol)的THF(1mL)溶液一次性加入2-溴-5-甲氧基苯甲酰氯(45mg，0.18mmol)的1mL THF溶液，將反應(yīng)物攪拌2h，此時(shí)加入醚使產(chǎn)物沉淀完全。過濾反應(yīng)物，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽，為淺黃色固體(58mg，65％)。MS(ES+)m/z＝539/541(M+H)+。LC保留時(shí)間2.03min. 實(shí)施例70.2-溴-5-羥基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXIII)
向?qū)嵤├?9所述化合物46的HCl鹽(58mg，0.1mmol)的DCM(2mL)懸浮液加入57μL BBr3(0.6mmol)。20min后用MeOH和水淬滅反應(yīng)，在真空中濃縮。粗殘余物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物的TFA鹽，為灰白色固體(23mg，36％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.82-1.92(m，2H)，1.97-2.07(m，2H)，3.02-3.11(m，2H)，3.29-3.35(m，2H)，3.54-3.59(m，2H)，3.60-3.68(m，2H)，6.85(dd，J＝8.7，2.9Hz，1H)，6.95(d，J＝2.9，Hz，1H)，7.49(d，J＝8.8Hz，1H)，7.81(d，J＝9.0Hz，2H)，7.86(d，J＝8.9Hz，2H)，8.53(t，J＝5.5Hz 1H)，8.83(s，2H)，9.42(bs，1H)，10.02(s，1H)，10.09(s，1H)，10.57(s，1H).MS(ES+)m/z＝525/527(M+H)+.LC保留時(shí)間1.79min. 實(shí)施例71.4-[5-(3-羥甲基-苯基氨基)-嘧啶-2-基氨基]-N-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-苯甲酰胺(XXIV)
將實(shí)施例68所述胺中間體45(18.4μL，0.15mmol)、3-溴芐基醇(48.5mg，0.15mmol)、KOtBu(40.6mg，0.36mmol)、Xantphos(23.4mg，0.04mmol)與Pd(OAc)2(4.5mg，0.02mmol)的二烷(3mL)懸浮液用氬凈化5min，在氬下加熱至回流達(dá)2.5小時(shí)。在真空中除去二烷，粗混合物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物的TFA鹽，為玻璃狀固體(11.3mg，14％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.82-1.92(m，2H)，1.97-2.07(m，2H)，3.02-3.11(m，2H)，3.50-3.62(m，4H)，3.63-3.67(m，2H)，4.42(s，2H)，6.72(d，J＝7.4Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.0Hz，J＝1.9Hz，1H)，6.92(s，1H)，7.15(t，J＝7.8Hz，1H)，7.80(d，J＝9.0Hz，2H)，7.85(d，J＝9.0Hz，2H)，7.98(s，1H)，8.42(s，2H)，8.51(t，J＝5.7Hz，1H)，9.45(bs，1H)，9.81(s，1H).MS(ES+)m/z＝433(M+H)+.LC保留時(shí)間1.72min. 實(shí)施例72.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(47)
將實(shí)施例68所述化合物45(344mg，0.95mmol)、2-氯-5-甲氧基苯甲酸(176mg，0.95mmol)與DIPEA(827μL，4.75mmol)的混合物溶于DMF(5mL)，在室溫下用HATU(433mg，1.14mmol)處理16h。將反應(yīng)混合物萃取，用乙酸乙酯-水-鹽水(30mL，1∶1∶1)研制。分離有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)。殘余物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為褐色固體(317mg，63％)。
實(shí)施例73.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲?；?苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXV)
向?qū)嵤├?2所述化合物47(27mg，0.05mmol)的10mL二氯甲烷溶液加入1M三溴化硼的二氯甲烷溶液(0.5mmol，0.5mL)。將反應(yīng)混合物攪拌2h。再加入一批三溴化硼(0.5mL 1M二氯甲烷溶液)，繼續(xù)在室溫下攪拌2h。蒸發(fā)反應(yīng)混合物，將殘余物溶于DMSO。經(jīng)過制備型HPLC分離產(chǎn)物，得到標(biāo)題化合物，為褐色糖漿(10mg，37％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ2.03-2.12(m，2H)，2.16-2.27(m，2H)，3.15-3.24(m，2H)，3.44(t，J＝6.0Hz，2H)，3.75(t，J＝5.8Hz，2H)，3.77-3.86(m，2H)，6.91(dd，J＝8.7Hz，J＝3.0Hz，1H)，7.00(d，J＝2.9Hz，1H)，7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.85-7.92(m，4H)，8.81(s，2H).MS(ES+)m/z＝481(M+H)+ 實(shí)施例74.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXVI)
向?qū)嵤├?8所述胺45(35mg，0.1mmol)的2mL DMF溶液加入2-氯-4-羥基苯甲酸(19mg，0.1mmol)和二異丙基乙基胺(41μL，0.3mmol)。將混合物在冰浴中冷卻，加入HATU(49mg，0.13mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜。利用制備型HPLC分離粗產(chǎn)物，得到奶油色固體(2.0mg，12％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ1.27-1.41(m，6H)，2.06-2.09(m，2H)，2.29(s，3H)，3.18-3.28(m，2H)，3.65-3.73(m，2H)，6.83(dd，J＝8.5Hz，J＝2.3Hz，1H)，6.92(d，J＝2.3Hz，1H)，7.49(d，J＝8.6Hz，1H)，7.82-7.9(m，4H)，8.80(s，2H).MS(ES+)m/z＝481(M+H)+. 實(shí)施例75.3-羥基-2-甲基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXVII)
向?qū)嵤├?8所述胺45(50mg，0.15mmol)的10mL THF溶液加入3-乙酰氧基-2-甲基苯甲酰氯(21mg，0.12mmol)和二異丙基乙基胺(78μL，0.45mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h，繼之加入回流6h。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于5mol無水甲醇。將甲醇溶液用1mL 25％甲醇鈉的甲醇溶液處理15分鐘。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于2mL DMSO，利用制備型HPLC分離，得到奶油色固體(29mg，34％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ2.02-2.12(m，2H)，2.16-2.27(m，2H)，2.29(s，3H)，3.14-3.23(m，q2H)，3.44(t，J＝6.0Hz，2H)，3.75(t，J＝5.6Hz，2H)，3.77-3.86(m，2H)，6.91(dd，J＝8.0Hz，J＝0.8Hz，1H)，6.98(dd，J＝7.7Hz，J＝0.9Hz，1H)，7.13(t，J＝7.7Hz，1H)，8.82(s，2H).MS(ES+)m/z＝461(M+H)+. 實(shí)施例76.2，6-二氯-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXVIII)
向?qū)嵤├?8所述胺45(32mg，0.1mmol)的10mL THF溶液加入2，6-二氯苯甲酰氯(16μL，0.11mmol)和二異丙基乙基胺(52μL，0.3mmol)。使反應(yīng)混合物回流過夜。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于DMSO，利用制備型HPLC分離，得到綠色/黃色固體(7mg，12％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ2.02-2.12(m，2H)，2.16-2.27(m，2H)，3.14-3.23(m，2H)，3.44(t，J＝5.9Hz，2H)，3.75(t，J＝5.7Hz，2H)，3.77-3.86(m，2H)，7.47(dd，J＝7.7Hz，J＝6.8Hz，1H)，7.85-7.92(m 4H)，8.81(s，2H).MS(ES+)m/z＝499(M+H)+. 實(shí)施例77.2，6-二甲基-N-{2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙基氨甲?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXIX)
向?qū)嵤├?8所述胺45(35mg，0.1mmol)的10mL THF溶液加入2，6-二甲基苯甲酰氯(21mg，0.12mmol)和二異丙基乙基胺(52μL，0.3mmol)。使反應(yīng)混合物回流過夜。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于DMSO，利用制備型HPLC分離，得到褐色糖漿(6mg，12％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ2.01-2.12(m，2H)，2.15-2.25(m，2H)，2.39(s，6H)，3.14-3.22(m，2H)，3.44(t，J＝5.8Hz，2H)，3.75(t，J＝5.8Hz，2H)，3.76-3.85(m，2H)，7.13(d，J＝7.7Hz，2H)，7.25(t，J＝7.6Hz，1H)，7.87(dd，J＝8.1Hz，J＝6.6Hz，4H)，8.83(s，2H).MS(ES+)m/z＝460(M+H)+. 實(shí)施例78.2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基氨基]-4-三氟甲基-嘧啶-5-羧酸乙酯(48)
將2-氨基-4-三氟甲基-嘧啶-5-羧酸乙酯(280mg，1.2mmol)、1-[2-(4-溴苯氧基)乙基]吡咯烷(640mg，2.4mmol)、碳酸銫(1.16g，3.6mmol)、Xantphos(140mg，0.24mmol)、Pd2(dba)3(110mg，0.12mmol)在20mL無水二烷中的混合物用氬脫氣5分鐘，在氬下回流過夜。冷卻下來后，在減壓下除去溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)過硅膠柱(3.5×16cm)色譜純化，使用20％CH3OH的CHCl3溶液作為洗脫劑，得到淡黃色固體(300mg，59％)。
實(shí)施例79.2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基氨基]-4-三氟甲基-嘧啶-5-碳酰氯(49)
使實(shí)施例78所述化合物48(250mg，0.59mmol)與KOH(330mg，5.9mmol)的EtOH(20mL)溶液回流5h。TLC顯示沒有原料。在減壓下除去溶劑。將粗產(chǎn)物溶于水(5mL)，用含水HBr酸化至pH 2，得到黃色沉淀。過濾收集固體，用水洗滌，在真空中干燥，得到淡黃色固體(180mg，77％)。將粗的羧酸(80mg，0.20mmol)溶于2.0M亞硫酰氯的二氯甲烷溶液(20mL，40mmol)。使反應(yīng)混合物在氬下回流4h。在真空下除去揮發(fā)物，粗產(chǎn)物在高真空下干燥過夜。
實(shí)施例80.2-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基氨基]-4-三氟甲基-嘧啶-5-羧酸(2-氯-5-羥基-苯基)-酰胺(XXX)
將實(shí)施例79所述粗的酰氯49溶于無水甲苯(10mL)，在氬下用3-氨基-4-氯苯酚(140mg，1mmol)在回流下處理2h。粗產(chǎn)物經(jīng)過硅膠柱色譜純化，使用20％CH3OH的CHCl3溶液作為洗脫劑。合并相似的級分，在減壓下除去溶劑，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(80mg，64％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.69(m，4H)，2.54(m，4H)，2.80(m，2H)，4.05(t，J＝5.9Hz，2H)，6.66(dd，J＝8.7Hz，J＝2.8Hz，1H)，6.94(d，J＝9.0Hz，2H)，7.29(d，J＝8.8Hz，2H)，7.62(d，J＝9Hz，2H)，8.83(s，1H)，9.82(s，1H)，10.09(s，1H)，10.32(s，1H).MS(ES+)m/z＝522(M+H)+. 實(shí)施例81.1-溴-4-(3-溴-丙烷-1-磺?；?-苯(50)
向4-溴苯硫酚(4.0g，21.2mmol)的甲醇(50mL)溶液加入NaOMe(2.28g，42mmol)。將混合物在室溫下攪拌直至澄清。在室溫下將該澄清溶液滴加到22mL 1，3-二溴丙烷(42.5g，210mmol)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h，用20mL二氯甲烷(二氯甲烷)和50mL水稀釋。合并有機(jī)相，干燥(MgSO4)，在減壓下除去揮發(fā)物。在0℃下向粗產(chǎn)物的150mL二氯甲烷溶液加入3-氯過苯甲酸(4.9g，20mmol)。在相同溫度下攪拌1h后，加入另一批mCPBA(4.9g，20mmol)。繼續(xù)在0℃下攪拌30min，然后使混合物升溫至室溫。用二氯甲烷(40mL)稀釋，用飽和NaHCO3水溶液洗滌兩次。將有機(jī)相干燥(MgSO4)，產(chǎn)物經(jīng)過硅膠柱色譜純化，得到標(biāo)題化合物，為無色固體(5.35g，76％)。Rf＝0.50(EtOAc/己烷＝1/1). 實(shí)施例82.1-[3-(4-溴-苯磺?；?-丙基]-吡咯烷(51)
向?qū)嵤├?1所述中間體50(1.0g，3.27mmol)的20mL無水1，4-二烷溶液加入Cs2CO3(2.13g，6.54mmol)和吡咯烷(540μL，6.54mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h。將反應(yīng)混合物用EtOAc(100mL)稀釋，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。合并有機(jī)相，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)溶劑。在真空中干燥產(chǎn)物，得到褐色的油1(994mg，91％)，無需進(jìn)一步純化即可使用。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.62(m，4H)，1.65-1.70(m，2H)，2.32(m，2H)，2.39(t，J＝7.0Hz，2H)，3.34(m，2H)，7.83(d，J＝9.0Hz，2H)，7.88(d，J＝9.0Hz，1H).MS(ES+)m/z＝333(M+H)+. 實(shí)施例83.N-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺?；?-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(52)
向2-氨基-5-硝基嘧啶(350mg，2.5mmol)的20mL無水1，4-二烷溶液加入實(shí)施例82所述中間體51(1.25g，3.76mmol)的5mL無水1，4-二烷溶液、Xantphos(289mg，0.5mmol)、Pd2(dba)3(229mg，0.25mmol)和Cs2CO3(1.63g，5mmol)。在氬下將反應(yīng)混合物在100℃下攪拌5h。將反應(yīng)混合物用甲醇和二氯甲烷(各5mL)稀釋，然后過濾。濾液用鹽水洗滌。將有機(jī)相干燥(Na2SO7)，除去溶劑。將殘余物溶于甲醇和乙酸乙酯(各2mL)，用20mL己烷稀釋。過濾分離所沉淀的黃-褐色固體，在真空中干燥(800mg)。將粗產(chǎn)物在20mL甲醇中用Pd/C(10％，500mg)氫化2h。過濾除去鈀催化劑，蒸發(fā)溶劑。在真空中干燥殘余物，得到標(biāo)題化合物(550mg，73％)，無需進(jìn)一步純化即可使用。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.60-1.68(m，6H)，2.32(m，4H)，2.39(m，2H)，3.19(m，2H)，5.02(bs，2H)，7.68(d，J＝9.0Hz，2H)，7.87(d，J＝9.0Hz，1H)，8.02(s，2H)，9.68(s，1H).MS(ES+)m/z＝362(M+H)+. 實(shí)施例84.3-氰基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXXI)
向?qū)嵤├?3所述中間體52(60mg，0.166mmol)與3-氰基苯甲酸(49mg，0.332mmol)的15mL乙腈溶液加入亞乙基碳二亞胺(EDC)(64mg，0.332mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h，除去溶劑。將殘余物溶于20mL二氯甲烷，用飽和NaHCO3水溶液(20mL)洗滌。水層用二氯甲烷(50mL)萃取。合并有機(jī)相，干燥(Na2SO4)，除去溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(60mg，60％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.83(m，2H)，1.92(m，2H)，1.99(m，2H)，2.97(m，2H)，3.21(m，2H)，3.34(t，J＝7.6Hz，2H)，3.53(m，2H)，7.80(dd，J＝8.0Hz，J＝7.8Hz，1H)，7.81(d，J＝8.9Hz，2H)，8.04(d，J＝8.9Hz，2H)，8.11(ddd，J＝7.8Hz，J＝1.5Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.28(ddd，J＝8.0Hz，J＝1.5Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.42(dd，J＝1.5Hz，J＝1.5Hz，1H)，8.92(s，2H)，10.33(s，1H)，10.65(s，1H).MS(ES+)m/z＝491(M+H)+. 實(shí)施例85.2-氯-5-甲氧基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(53)
向?qū)嵤├?3所述中間體52(108mg，0.3mmol)與2-氯-5-甲氧基苯甲酸(112mg，0.6mmol)的20mL乙腈溶液加入EDC(115mg，0.6mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h，除去溶劑。將殘余物溶于20mL二氯甲烷，用飽和NaHCO3水溶液(20mL)洗滌。水層用二氯甲烷(20mL)萃取。合并有機(jī)相，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(50mg，26％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.82(m，2H)，1.92(m，2H)，1.99(m，2H)，2.97(m，2H)，3.21(m，2H)，3.34(t，J＝7.6Hz，2H)，3.53(m，2H)，3.82(s，3H)，7.11(dd，J＝8.9Hz，J＝3.0Hz，1H)，7.21(d，J＝3.0Hz，1H)，7.49(d，J＝8.9Hz，1H)，7.80(d，J＝9.0Hz，2H)，8.03(d，J＝9.0Hz，2H)，8.89(s，2H)，10.33(s，1H)，10.69(s，1H).MS(ES+)m/z＝531(M+H)+. 實(shí)施例86.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXXII)
向?qū)嵤├?5所述化合物53(42mg，0.065mmol)的3mL無水二氯甲烷溶液加入BBr3(31μL，0.33mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h，倒入飽和含水硫代硫酸鈉中。產(chǎn)物用20mL二氯甲烷/甲醇(90∶10)萃取。合并有機(jī)相，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(29mg，71％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.82(m，2H)，1.92(m，2H)，1.99(m，2H)，2.97(m，2H)，3.21(m，2H，3.34(t，J＝7.7Hz，2H)，3.53(m，2H)，6.92(dd，J＝8.7Hz，J＝2.9Hz，1H)，6.96(d，J＝2.9Hz，1H)，7.36(d，J＝8.7Hz，1H)，7.80(d，J＝9.0Hz，2H)，8.03(d，J＝9.0Hz，2H)，8.88(s，2H)，10.09(s，OH)，10.32(s，1H)，10.65(s，1H).MS(ES+)m/z＝516(M+H)+. 實(shí)施例87.3-羥基-2-甲基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXXIII)
向?qū)嵤├?3所述中間體52(47mg，0.13mmol)的5mL無水THF溶液加入3-乙酰氧基-2-甲基苯甲酰氯(33.2mg，0.156mmol)的5mL無水THF溶液。將混合物在室溫下攪拌40h，除去溶劑。將殘余物在5mL甲醇中用25％w/w NaOMe的甲醇溶液(250mg，1.16mmol)處理2h。將反應(yīng)混合物用鹽水(10mL)淬滅，粗產(chǎn)物用二氯甲烷(50mL)萃取。合并有機(jī)相，干燥(MgSO4)，除去溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(20mg，25％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.82(m，2H)，1.92(m，2H)，1.99(m，2H)，2.97(m，2H)，3.21(m，2H)，3.34(t，J＝7.6Hz，2H)，3.53(m，2H)，6.92-6.95(m，2H)，7.12(t，J＝7.8Hz，1H)，7.80(d，J＝9.0Hz，2H)，8.03(d，J＝9.0Hz，2H)，8.90(s，2H)，9.66(s，OH)，10.29(s，1H)，10.42(s，1H).MS(ES+)m/z＝496(M+H)+. 實(shí)施例88.2，6-二氯-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXXIV)
將2，6-二氯苯甲酰氯(46mg，0.22mmol)的2mL無水THF溶液滴加到實(shí)施例83所述中間體52(65mg，0.18mmol)的3mL無水THF溶液中。將混合物在室溫下攪拌40h。除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(14mg，12％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.82(m，2H)，1.92(m，2H)，1.99(m，2H)，2.97(m，2H)，3.21(m，2H)，3.34(t，J＝7.7Hz，2H)，3.53(m，2H)，7.54(dd，J＝8.7Hz，J＝7.2Hz，1H)，7.62(d，J＝8.7Hz，2H)，7.80(d，J＝8.9Hz，2H)，8.03(d，J＝8.9Hz，2H)，8.87(s，2H)，10.38(s，1H)，11.02(s，1H).MS(ES+)m/z＝534(M+H)+. 實(shí)施例89.2-氯-4-羥基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXXV)
向4-芐氧基-2-氯-苯甲酸(58mg，0.22mmol)的2mL無水二氯甲烷溶液加入CDMT(44mg，0.25mmol)和NMM(66μL，0.6mmol)。在室溫下攪拌1h后，加入實(shí)施例83所述中間體52(72mg，0.2mmol)，繼續(xù)攪拌16h。除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化。將經(jīng)過純化的前體溶于1mL無水二氯甲烷，在0℃下用BBr3(15.1μL，0.16mmol)處理1h。將反應(yīng)混合物用10mL二氯甲烷稀釋，用飽和硫代硫酸鈉水溶液(10mL)洗滌兩次。將有機(jī)相干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(5mg，4％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ2.02(m，2H)，2.11-2.18(m，4H)，3.09(m，2H)，3.27-3.37(m，4H)，3.66(m，2H)，6.84(dd，J＝8.5Hz，J＝2.2Hz，1H)，6.93(d，J＝2.2Hz，1H)，7.49(d，J＝8.5Hz，1H)，7.86(d，J＝9.0Hz，2H)，8.05(d，J＝9.0Hz，2H)，8.85(s，2H).MS(ES+)m/z＝516(M+H)+. 實(shí)施例90.3-羥基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXXVI)
向3-羥基苯甲酸(28mg，0.2mmol)的2mL無水二氯甲烷溶液加入CDMT(39mg，0.22mmol)和N-甲基嗎啉(44μL，0.4mmol)。在室溫下攪拌1h后，加入實(shí)施例83所述中間體52(65mg，0.18mmol)在二氯甲烷與DMF(各1mL)中的溶液，繼續(xù)攪拌16h。除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過制備型TLC純化，使用CHCl3/MeOH/NH4OH(90∶10∶1)作為移動(dòng)相，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(8mg，9％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ1.81(m，4H)，1.90(m，2H)，2.54(m，4H)，2.58(t，J＝7.5Hz，2H)，3.26(m，2H)，7.02(d，J＝8.0Hz，1H)，7.35(dd，J＝8.0Hz，J＝8Hz，1H)，7.38(bs，1H)，7.42(d，J＝8.0Hz，1H)，7.83(d，J＝9.0Hz，2H)，8.04(d，J＝9Hz，2H)，8.86(s，2H).MS(ES+)m/z＝482(M+H)+. 實(shí)施例91.2，5-二氯-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XXXVII)
將2，5-二氯苯甲酰氯(48mg，0.23mmol)的2mL無水THF溶液滴加到實(shí)施例83所述中間體52(65mg，0.18mmol)的3mL無水THF溶液中。在氬下將混合物在室溫下攪拌5h。除去溶劑，粗產(chǎn)物經(jīng)過反相制備型HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(12mg，11％)。
1H NMR(MeOH-d4)δ2.02(m，2H)，2.12-2.18(m，4H)，3.08(m，2H)，3.31-3.37(m，4H)，3.66(m，2H)，7.52-7.56(m，2H)，7.68(bs，1H)，7.86(d，J＝9.0Hz，2H)，8.05(d，J＝9.0Hz，2H)，8.86(s，2H).MS(ES+)m/z＝534(M+H)+. 實(shí)施例92.N2-(4-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)嘧啶-2，5-二胺(54)
向2-氨基-5-硝基嘧啶(0.54g，4mmol)的無水1，4-二烷(20mL)溶液加入1-[2-(4-溴苯氧基)乙基]吡咯烷(1.62g，6mmol)、Cs2CO3(5.2g，16mmol)、Pd2(dba)3(0.36g，0.4mmol)和Xantphos(0.7g，1.2mmol)。在氬下將該懸浮液在回流下加熱2h。濾出固體，用EtOAc洗滌。將濾液用鹽水洗滌(1×100mL)，水相用EtOAc萃取(3×50mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)，濃縮直至剩余10mL溶液，然后加入己烷(100mL)。混合物用聲波處理2min。過濾收集固體，用己烷洗滌。粗產(chǎn)物進(jìn)一步經(jīng)過快速柱純化(二氯甲烷∶MeOH∶NH3.H2O＝100∶10∶1)。將所得黃色固體溶于MeOH(200mL)，通入Ar達(dá)2min，然后加入10％Pd-C。使混合物在室溫下氫化1h。濾出催化劑，用MeOH洗滌。在真空中濃縮濾液。得到所需產(chǎn)物，為黃色固體(0.48g，40％)。
實(shí)施例93.N-(2-(4-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基)-2-氯-5-羥基苯甲酰胺(XXXVIII)
向2-氯-5-甲氧基苯甲酸(97mg，0.52mmol)的無水CH2Cl2(10mL)溶液加入2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT，92mg，0.52mmol)和4-甲基嗎啉(NMM，0.2mL，1.73mmol)。將混合物在室溫下攪拌0.5h，繼之加入加入實(shí)施例92所述化合物54(130mg，0.43mmol)。將混合物在室溫下攪拌另外2h。加入飽和NaHCO3(20mL)，將混合物攪拌5min。分離有機(jī)層，水層用CH2Cl2萃取(3×10mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于無水CH2Cl2(10mL)，加入1.0M BBr3的CH2Cl2溶液(3.5mL，3.5mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4h。加入飽和NaHCO3(20mL)，聲波處理。產(chǎn)物沉淀出來，過濾收集，用H2O和CH2Cl2洗滌，得到最終產(chǎn)物(95mg，45％)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.88-191(m，2H)，1.99-2.01(m，2H)，3.08-3.11(m，2H)，3.54-3.58(m，4H)，4.32(t，J＝4.8Hz，2H)，6.92(dd，J＝8.7Hz，J＝2.8Hz，1H)，6.93(d，J＝9.0Hz，2H)，6.98(d，J＝2.9Hz，1H)，7.32(d，J＝8.7Hz，1H)，7.65(d，J＝9.0Hz，2H)，8.73(s，2H)，9.52(s，1H)，10.49(s，1H)，11.16(s，1H).MS(ES+)m/z＝454(M+H)+. 實(shí)施例94.N-(2-(4-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基)-2，6-二甲基-苯甲酰胺(XXXIX)
向?qū)嵤├?2所述化合物54(109mg，0.36mmol)的無水PhMe(6mL)溶液加入2，6-二甲基苯甲酰氯(74mg，0.44mmol)。將混合物在回流下加熱18h。加入飽和NaHCO3(30mL)和CH2Cl2(30mL)。分離有機(jī)相，水相用CH2Cl2萃取(3×10mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)。產(chǎn)物經(jīng)過制備型HPLC純化，合并含有產(chǎn)物的級分。加入EtOAc(20mL)和飽和NaHCO3(20mL)，分離有機(jī)相。水相用EtOAc萃取(2×10mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)，得到最終產(chǎn)物(33mg，16％)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.88-191(m，2H)，1.98-2.03(m，2H)，2.29(s，6H)，3.08-3.12(m，2H)，3.54-3.59(m，4H)，4.30(t，J＝4.9Hz，2H)，6.96(d，J＝7.0Hz，2H)，7.12(d，J＝7.7Hz，2H)，7.24(t，J＝7.6，1H)，7.66(d，J＝7.0Hz，2H)，8.74(s，2H)，9.52(s，1H)，10.40(s，1H)，10.57(br，1H).MS(ES+)m/z＝433(M+H)+. 實(shí)施例95.N-(2-(4-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基)-2-氯-6-甲基苯磺酰基酰胺(XL)
借助類似于實(shí)施例94所述化合物XXXIX所述的方法制備標(biāo)題產(chǎn)物，使用2-氯-6-甲基苯磺酰氯(81.2mg，0.36mmol)和實(shí)施例92所述化合物54(90mg，0.3mmol)，得到最終產(chǎn)物的HCl鹽(25mg，13％)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.87-190(m，2H)，1.98-2.02(m，2H)，2.49(s，3H)，3.05-3.10(m，2H)，3.51-3.56(m，4H)，4.29(t，J＝4.9Hz，2H)，6.92(d，J＝9.2Hz，2H)，7.34(d，J＝7.2Hz，2H)，7.47(t，J＝7.6Hz，1H)，7.51(d，J＝7.2，1H)，7.56(d，J＝9.2，2H)，8.07(s，2H)，9.58(s，1H)，10.15(s，1H)，10.88(br，1H).MS(ES+)m/z＝490(M+H)+. 實(shí)施例96.3-((2-(4-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基氨基)甲基)-4-氯苯酚(XLI)
向?qū)嵤├?2所述化合物54(46mg，0.15mmol)的無水1，4-二烷(10mL)溶液加入Cs2CO3(100mg，0.31mmol)、2-氯-5-甲氧基芐基溴(37mg，0.15mmol)。將混合物在60℃下加熱18h。濾出固體。產(chǎn)物經(jīng)過制備型HPLC純化，合并含有產(chǎn)物的級分。加入EtOAc(20mL)和飽和NaHCO3(20mL)，分離有機(jī)相。水相用EtOAc萃取(2×10mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶劑，將殘余物溶于無水CH2Cl2(10mL)，加入1.0M BBr3的CH2Cl2溶液(3.5mL，3.5mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4h。加入飽和NaHCO3(20mL)，聲波處理。分離有機(jī)層，水層用CH2Cl2萃取(3×10mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)，得到最終產(chǎn)物(16mg，21％)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.87-190(m，2H)，1.98-2.03(m，2H)，3.08-3.12(m，2H)，3.54-3.59(m，4H)，4.26(t，J＝4.8Hz，2H)，6.68(dd，J＝8.7Hz，J＝2.9Hz，1H)，6.85(d，J＝2.9Hz，1H)，6.89(d，J＝9.0Hz，2H)，7.22(d，J＝8.6Hz，1H)，7.58(d，J＝9.0Hz，2H)，7.90(s，2H)，8.97(s，1H)，9.20(s，1H).MS(ES+)m/z＝440(M+H)+. 實(shí)施例97.1-[2-(3-溴-苯氧基)-乙基]-吡咯烷(55)
合并3-溴苯酚(5.34g，30.9mmol)和1-(2-氯-乙基)-吡咯烷鹽酸鹽(5.24g，30.9mmol)，用DMF(100mL)稀釋。然后加入碳酸鉀(34g，247mmol)，將所得混合物在環(huán)境溫度下攪拌72h。然后將反應(yīng)物倒在水上，用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)成無色的油。粗產(chǎn)物然后經(jīng)過色譜處理，除去任何未反應(yīng)的溴化物。合并純的級分，蒸發(fā)成澄清淺黃色油(3.6g，43％)。
實(shí)施例98.N2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)嘧啶-2，5-二胺(56)
向2-氨基-5-硝基嘧啶(200mg，1.4mmol)的無水1，4-二烷(20mL)溶液加入實(shí)施例97所述化合物55(380mg，1.4mmol)、Cs2CO3(1.82g，5.6mmol)、Pd2(dba)3(128mg，0.14mmol)和Xantphos(243mg，0.42mmol)。在Ar下將該懸浮液在回流下加熱2h。濾出固體，用EtOAc洗滌。將濾液用鹽水洗滌(1×100mL)，水相用EtOAc萃取(3×50mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)，濃縮直至剩余10mL溶液，然后加入己烷(100mL)?；旌衔镉寐暡ㄌ幚?min。過濾收集固體，用己烷洗滌。粗產(chǎn)物進(jìn)一步經(jīng)過快速柱純化(SiO2/CH2Cl2，然后CH2Cl2∶MeOH∶NH3·H2O＝100∶10∶1)。將所得黃色固體溶于MeOH(200mL)，通入Ar達(dá)2min，然后加入10％Pd-C。使混合物在室溫下氫化1h。濾出催化劑，用MeOH洗滌。在真空中濃縮濾液。得到所需產(chǎn)物，為黃色固體(350mg，83％)。
實(shí)施例99.N-(2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基)-2-氯-5-羥基苯甲酰胺(XLII)
借助類似于實(shí)施例94所述化合物XXXIX的方法制備標(biāo)題化合物，使用實(shí)施例98所述化合物56(174mg，0.58mmol)，得到標(biāo)題化合物(80mg，68％)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.88-191(m，2H)，1.99-2.04(m，2H)，3.08-3.14(m，2H)，3.57-3.60(m，4H)，4.32(t，J＝4.8Hz，2H)，6.59(dd，J＝8.5Hz，J＝2.4Hz，1H)，6.92(dd，J＝8.9Hz，J＝2.91H)，6.97(d，J＝2.9Hz，1H)，7.21(t，J＝8.3Hz，1H)，7.31(dd，J＝8.4Hz，J＝1.7Hz，1H)，7.34(d，J＝8.8Hz，1H)，7.58(t，J＝2.3Hz，1H)，8.79(s，2H)，9.71(s，1H)，10.55(s，1H).MS(ES+)m/z＝455(M+H)+. 實(shí)施例100.N-(2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基)-2，6-二甲基苯甲酰胺(XLIII)
借助類似于實(shí)施例94所述化合物XXXIX所述的方法制備標(biāo)題產(chǎn)物，使用實(shí)施例98所述化合物56(132mg，0.44mmol)，得到標(biāo)題化合物(16mg，8％)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.88-191(m，2H)，1.99-2.03(m，2H)，2.29(s，6H)，3.08-3.13(m，2H)，3.56-3.59(m，4H)，4.33(t，J＝4.8Hz，2H)，6.58(dd，J＝8.3，Hz，J＝2.4Hz，1H)，7.12(d，J＝7.7Hz，2H)，7.20(t，J＝8.1，1H)，7.25(t，J＝7.6，1H)，7.31(dd，J＝8.0Hz，J＝1.6Hz，1H)，7.59(t，J＝2.2，1H)，8.81(s，2H)，9.71(s，1H)，10.48(s，1H)，10.80(br，1H).MS(ES+)m/z＝433(M+H)+. 實(shí)施例101.N-(2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基)-2，6-二氯苯甲酰胺(XLIV)
借助類似于實(shí)施例94所述化合物XXXIX的方法制備標(biāo)題產(chǎn)物，使用實(shí)施例98所述化合物56(126mg，0.42mmol)和2，6-二氯苯甲酰氯，得到標(biāo)題化合物(30mg，14％)，為黃色固體。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.88-191(m，2H)，1.99-2.03(m，2H)，3.08-3.13(m，2H)，3.56-3.59(m，4H)，4.33(t，J＝4.9Hz，2H)，6.60(dd，J＝8.0，Hz，J＝2.4Hz，1H)，7.21(t，J＝8.1，1H)，7.32(dd，J＝7.6Hz，J＝1.0Hz，1H)，7.53(t，J＝7.5，1H)，7.58(t，J＝2.1Hz，1H)，7.61(d，J＝8.2Hz，2H)，8.78(s，2H)，9.77(s，1H)，10.94(s，1H)，10.68(br，1H).MS(ES+)m/z＝474(M+H)+. 實(shí)施例102.3-(2-(3-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基氨基)嘧啶-5-基氨基)-4-氯苯酚(XLV)
向?qū)嵤├?8所述化合物56(100mg，0.33mmol)的無水1，4-二烷(30mL)溶液加入2-溴-1-氯-4-甲氧基苯(82mg，0.36mmol)、Cs2CO3(436mg，1.33mmol)、Pd2(dba)3(31mg，0.03mmol)和Xantphos(58mg，0.10mmol)。在Ar下將該懸浮液在回流下加熱4h。濾出固體，用EtOAc洗滌。將濾液用鹽水洗滌(1×100mL)，水相用EtOAc萃取(3×50mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)，濃縮直至剩余10mL溶液，然后加入己烷(100mL)?；旌衔镉寐暡ㄌ幚?min。過濾收集固體，用己烷洗滌。在真空中除去溶劑，粗產(chǎn)物進(jìn)一步經(jīng)過快速柱純化(SiO2/CH2Cl2，然后CH2Cl2∶MeOH∶NH3·H2O＝100∶10∶1)。將所得黃色固體溶于無水CH2Cl2(10mL)。加入1.0M BBr3的CH2Cl2溶液(1.0mL，1.0mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4h。加入飽和NaHCO3(20mL)，聲波處理。分離有機(jī)層，水層用CH2Cl2萃取(3×20mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶劑。粗產(chǎn)物用HPLC純化。合并含有產(chǎn)物的HPLC級分，用飽和NaHCO3(50mL)中和。游離堿用EtOAc萃取(2×50mL)。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶劑。將游離堿溶于MeOH(2mL)，加入2.0M HCl的Et2O溶液(0.2mL，0.4mmol)。將溶液在室溫下攪拌5min，然后除去溶劑。將殘余物溶于MeOH(1mL)，加入無水Et2O(20mL)。離心收集固體，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(28mg，18％)，為黃色固體。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.88-191(m，2H)，1.99-2.04(m，2H)，3.08-3.13(m，2H)，3.54-3.58(m，4H)，4.31(t，J＝4.8Hz，2H)，6.20(dd，J＝8.5Hz，J＝2.6Hz，1H)，6.26(d，J＝2.8Hz，2H)，6.59(dd，J＝7.9Hz，J＝2.4Hz，1H)，7.13(d，J＝8.6Hz，1H)，7.21(t，J＝8.2Hz，1H)，7.34(m，2H)，7.57(t，J＝2.2Hz，1H)，8.38(s，2H)，9.65(s，1H).MS(ES+)m/z＝426(M+H)+. 實(shí)施例103.4-(4-(5-氨基嘧啶-2-基氨基)苯基磺?；?哌啶-1-羧酸叔丁基酯(57)
向2-氨基-5-硝基嘧啶(200mg，1.4mmol)的無水1，4-二烷(20mL)溶液加入4-(4-溴苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(404mg，1.0mmol)、Cs2CO3(1.30g，4.0mmol)、Pd2(dba)3(92mg，0.10mmol)和Xantphos(173mg，0.30mmol)。在氬下將該懸浮液在回流下加熱2h。濾出固體，用EtOAc洗滌。將濾液用鹽水洗滌(1×100mL)，水相用EtOAc萃取(3×50mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)，濃縮直至剩余10mL溶液，然后加入己烷(100mL)?；旌衔镉寐暡ㄌ幚?min。過濾收集固體，用己烷洗滌。粗產(chǎn)物進(jìn)一步經(jīng)過快速柱純化(SiO2/CH2Cl2，然后CH2Cl2∶MeOH∶NH3.H2O＝100∶10∶1)。將所得黃色固體溶于MeOH(200mL)，通入Ar達(dá)2min，然后加入阮內(nèi)鎳。使混合物在室溫下氫化1h。濾出催化劑，用MeOH洗滌。在真空中濃縮濾液。得到所需產(chǎn)物，為黃色固體。
實(shí)施例104.N-(2-(4-(哌啶-4-基磺?；?苯基氨基)嘧啶-5-基)-3-羥基苯甲酰胺(XLVI)
向3-甲氧基苯甲酸(183mg，1.20mmol)的無水CH2Cl2(20mL)溶液加入2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT，211mg，1.20mmol)和4-甲基嗎啉(NMM，0.44mL，4.0mmol)。將混合物在室溫下攪拌0.5h，繼之加入加入實(shí)施例103所述化合物57(1.0mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。加入飽和NaHCO3(40mL)，將混合物攪拌5min。分離有機(jī)層，水層用CH2Cl2萃取(3×20mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶劑。將殘余物溶于無水CH2Cl2(10mL)，加入1.0M BBr3的CH2Cl2溶液(3.0mL，3.0mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌4h。加入飽和NaHCO3(20mL)，聲波處理。分離有機(jī)層，水層用CH2Cl2萃取(3×20mL)。合并有機(jī)溶液，干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶劑。粗產(chǎn)物用HPLC純化。合并含有產(chǎn)物的HPLC級分，用飽和NaHCO3(50mL)中和。有機(jī)堿用EtOAc萃取(2×50mL)。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)。在真空中除去溶劑。將游離堿溶于MeOH(2mL)，加入2.0M HCl的Et2O溶液(0.5mL，1.0mmol)。將溶液在室溫下攪拌5min，然后除去溶劑。將殘余物溶于MeOH(1mL)，加入無水Et2O(20mL)。離心收集固體，得到標(biāo)題化合物的HCl鹽(70mg，14％)，為黃色固體。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.64-173(m，2H)，2.02(d，J＝13.1Hz，2H)，2.82-2.89(m，2H)，3.44-3.50(m，4H)，7.01(dd，J＝8.0Hz，J＝2.4Hz，1H)，7.33-7.37(m，2H)，7.42(d，J＝7.7Hz，1H)，7.73(d，J＝9.0Hz，2H)，8.05(d，J＝9.0Hz，2H)，8.40-8.44(m，1H)，8.93(s，2H)，9.84(s，1H)，10.31(s，1H)，10.40(s，1H).MS(ES+)m/z＝454(M+H)+. 實(shí)施例105.硝基化合物還原的一般工藝(方法A) 可以將硝基化合物(1.0摩爾當(dāng)量)的MeOH(0.05-1.0M)溶液用氬沖洗，然后加入Pd/C(10％wt)?？梢耘趴栈旌衔铮缓笾匦绿畛錃?，在室溫下攪拌2-4h?？梢詫⒍嘞喾磻?yīng)混合物通過Celite墊過濾，用MeOH洗滌，在真空中濃縮，得到相應(yīng)的氨基-化合物。粗的氨基-化合物無需純化即可用于下一步。
實(shí)施例106.酰胺鍵形成的一般工藝(方法B) 可以向氨基-化合物(1.0摩爾當(dāng)量)與羧酸(1.2摩爾當(dāng)量)的無水DMF(0.05-0.2M)溶液中加入HBTU(1.5摩爾當(dāng)量)和HOBt(1.3摩爾當(dāng)量)，繼之加入DIPEA(3.0摩爾當(dāng)量)?？梢詫⒎磻?yīng)混合物在室溫下攪拌16h，然后用EtOAc稀釋。可以將有機(jī)層用水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾。可以在真空中濃縮濾液，如下所述純化粗產(chǎn)物。
實(shí)施例107.用BBr3使甲氧基前體去保護(hù)的一般工藝(方法C) 可以在室溫下向甲氧基前體(1.0摩爾當(dāng)量)的DCM(0.01-0.03M溶液或懸浮液)中加入BBr3(5-10摩爾當(dāng)量)，將混合物在室溫下攪拌4-12h?？梢詫⒎磻?yīng)用飽和NaHCO3溶液淬滅，直至pH為約7，過濾所得固體?？梢詫⑺^濾的固體用大量的水和乙醚洗滌?？梢灾苯訙y試所得固體的酶活性，或者如果需要的話進(jìn)一步純化所得固體。
實(shí)施例108.4-(4-溴-苯磺酰基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(58)
向4-溴-苯磺酰氯(1.0g，3.9mmol)與哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.0g，5.4mmol)的無水DCM(15mL)溶液加入三乙胺(1.6mL，11mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2.5h，然后用EtOAc稀釋。將有機(jī)層用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾。濃縮濾液，得到標(biāo)題化合物，無需純化即可用于下一步。
實(shí)施例109.4-[4-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-苯磺酰基]-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(59)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.25g，1.8mmol)、實(shí)施例108所述化合物58(1.0g，2.5mmol)、Pd(OAc)2(20mg，0.09mmol)、Xantphos(0.1g，0.17mmol)與叔丁醇鉀(0.40g，3.6mmol)的混合物懸浮在二烷(15mL)中，在氬氣氛下加熱至回流達(dá)16h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。濃縮濾液，在DCM-Et2O(1∶5v/v)中研制殘余物，過濾固體。將固體用Et2O洗滌，得到標(biāo)題化合物(0.25g，30％)，為橙色固體。粗的標(biāo)題化合物無需純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z 365(M+H-Boc)+。
實(shí)施例110.4-[4-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-苯磺?；鵠-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(60)
從實(shí)施例109所述化合物59(0.25g，0.54mmol)制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例105所述方法A，無需純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z335(M+H-Boc)+。
實(shí)施例111.4-{4-[5-(2-氯-5-甲氧基-苯甲酰氨基)-嘧啶-2-基氨基]-苯磺?；鶀-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(61)
從實(shí)施例110所述化合物60(0.20g，0.45mmol)和2-氯-5-甲氧基-苯甲酸制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例106所述方法B，粗產(chǎn)物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(40％EtOAc/己烷)，得到4(0.1g，33％)，為白色固體。MS(ES+)m/z 503(M+H-Boc)+。
實(shí)施例112.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(哌嗪-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(XLVII)
從實(shí)施例111所述化合物61制備標(biāo)題化合物，借助實(shí)施例107所述方法C，同時(shí)除去Boc-保護(hù)基團(tuán)。淡黃色固體(50mg，67％收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.65-2.85(m，8H)，6.91(dd，J＝8.8Hz，J＝2.9Hz，1H)，6.97(d，J＝2.9Hz，1H)，7.35(d，J＝8.8Hz，2H)，7.63(d，J＝8.9Hz，2H)，7.99(d，J＝8.9Hz，2H)，8.87(s，2H)，10.06(bs，1H)，10.25(s，1H)，10.63(s，1H).MS(ES+)m/z 489(M+H)+. 實(shí)施例113.2-氯-N-(2-{6-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-羰基]-吡啶-3-基氨基}-嘧啶-5-基)-5-甲氧基-苯甲酰胺(62)
從實(shí)施例7所述化合物5(0.25g，0.73mmol)和2-氯-5-甲氧基-苯甲酸制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例106所述方法B，粗產(chǎn)物(0.25g)無需純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z 512(M+H)+。
實(shí)施例114.2-氯-5-羥基-N-(2-{6-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-羰基]-吡啶-3-基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(XLVIII)
從實(shí)施例113所述化合物62(0.10g，0.20mmol)制備標(biāo)題化合物，借助實(shí)施例107所述方法C，粗產(chǎn)物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(13mg，11％收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ3.05-3.30(m，4H)，3.40-3.65(m，4H)，3.65-3.75(m，2H)，4.40-4.65(m，2H)，5.41(bs，1H)，6.91(dd，J＝8.8Hz，J＝2.9Hz，1H)，6.97(d，J＝2.9Hz，1H)，7.35(d，J＝8.7Hz，1H)，7.70(d，J＝8.7Hz，1H)，8.38(dd，J＝8.8Hz，J＝2.6Hz，1H)，8.87(s，2H)，8.91(d，J＝2.5Hz，1H)，9.75(bs，1H)，10.08(s，1H)，10.23(s，1H)，10.63(s，1H)).MS(ES+)m/z498(M+H)+. 實(shí)施例115.2-[4-(5-溴-吡啶-2-基)-哌嗪-1-基]-乙醇(63)
將5-溴-2-碘-吡啶(5.0g，18mmol)與2-哌嗪-1-基-乙醇(5.0g，39mmol)在乙腈(40mL)中的混合物在回流下加熱1天。使混合物冷卻至室溫，倒入水中，用EtOAc萃取。將有機(jī)層用水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(5％MeOH/DCM至10％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物(1.3g，26％)，為白色固體。
實(shí)施例116.2-{4-[5-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-吡啶-2-基]-哌嗪-1-基}-乙醇(64)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.30g，2.1mmol)、實(shí)施例115所述化合物63(2.5g，2.8mmol)、Pd2(dba)3(0.10g，0.11mmol)、Xantphos(0.13g，0.22mmol)與碳酸銫(1.4g，4.3mmol)的混合物懸浮在二烷(30mL)中，在氬氣氛下加熱至回流達(dá)18h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。濃縮濾液，粗產(chǎn)物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(10％MeOH/DCM至15％MeOH/DCM)，得到最終標(biāo)題產(chǎn)物(0.30g，41％)，為灰白色固體。MS(ES+)m/z 346(M+H)+。
實(shí)施例117.2-{4-[5-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-吡啶-2-基]-哌嗪-1-基}-乙醇(65)
從實(shí)施例116所述化合物64(0.30g，0.87mmol)制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例105所述方法A，無需純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z316(M+H)+。
實(shí)施例118.2，6-二氯-N-(2-{6-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-吡啶-3-基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(XLIX)
向?qū)嵤├?17所述化合物65(0.25g，0.80mmol)與2，6-二氯-苯甲酰氯(0.40g，1.9mmol)的THF(20mL)溶液加入三乙胺(0.30mL，2.2mmol)。將混合物在回流下加熱17h。使混合物冷卻至室溫，除去大多數(shù)THF。將所得殘余物重新溶于EtOAc，用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(5％MeOH/DCM至20％MeOH/DCM)，得到游離堿化合物，得到最終標(biāo)題產(chǎn)物(30mg，8％總收率)，暴露于空氣后變?yōu)榈S色凝膠。
1H NMR(DMSO-d6)δ3.15-3.30(m，4H)，3.50-3.70(m，4H)，3.83(t，J＝5.2Hz，2H)，4.35-4.45(m，2H)，7.30-7.40(m，1H)，7.52(d，J＝7.3Hz，1H)，7.54(d，J＝7.3Hz，1H)，7.60(d，J＝8.7Hz，1H)，8.19(dd，J＝9.4Hz，J＝2.3Hz，1H)，8.66(d，J＝2.6Hz，1H)，8.80(s，2H)，9.98(bs，1H)，10.96(bs，1H)，11.00(s，1H).MS(ES+)m/z 448(M+H)+. 實(shí)施例119.4-(4-溴-苯甲?；?-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(66)
向4-溴-苯甲酰氯(1.0g，4.5mmol)與哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(1.1g，5.9mmol)的無水DCM(15mL)溶液加入三乙胺(1.5mL，11mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12h，然后用EtOAc稀釋。將有機(jī)層用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾。濃縮濾液，在己烷-Et2O(10∶1v/v)研制所得固體，過濾固體。將固體用Et2O洗滌，得到標(biāo)題化合物(1.6g，95％)，為白色固體。
實(shí)施例120.4-[4-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)-苯甲?；鵠-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(67)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.90g，6.4mmol)、實(shí)施例119所述化合物66(3.1g，8.4mmol)、Pd(OAc)2(0.10g，0.44mmol)、Xantphos(0.52g，0.89mmol)與叔丁醇鉀(1.5g，13mmol)的混合物懸浮在二烷(15mL)中，在氬氣氛下加熱至回流達(dá)5h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。濃縮濾液，在Et2O中研制殘余物，過濾后得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.70g)。再次濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(40％EtOAc/己烷)，得到額外的產(chǎn)物(0.70g，51％總收率) 1H NMR(DMSO-d6)δ2.35-2.45(m，4H)，3.45-3.55(m，4H)，3.60-3.70(m，2H)，4.43(t，J＝5.4Hz，2H)，7.64(d，J＝8.5Hz，1H)，8.31(dd，J＝8.7Hz，J＝2.5Hz，1H)，8.93(d，J＝2.2Hz，1H)，9.30(s，2H)，11.17(s，1H).MS(ES+)m/z 329(M+H-Boc)+. 實(shí)施例121.4-[4-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-苯甲?；鵠-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(68)
從實(shí)施例120所述化合物67(1.3g，3.0mmol)制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例105所述方法A，在Et2O中研制殘余物，過濾后得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.50g)。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(5％MeOH/DCM)，得到額外的產(chǎn)物(0.15g，54％總收率)。MS(ES+)m/z 399(M+H)+。
實(shí)施例122.4-{4-[5-(2，6-二甲基-苯甲酰氨基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲酰基}-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(69)
向?qū)嵤├?21所述化合物68(0.20g，0.50mmol)與2，6-二甲基-苯甲酰氯(0.20g，1.2mmol)的THF(15mL)溶液加入三乙胺(0.20mL，1.4mmol)。將混合物在回流下加熱19h。使混合物冷卻至室溫，除去大多數(shù)THF。將所得殘余物重新溶于EtOAc，用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(5％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(60mg，23％)。
實(shí)施例123.2，6-二甲基-N-{2-[4-(哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(L)
將實(shí)施例122所述化合物69在30％TFA/DCM(6mL)中的溶液在室溫下攪拌30min。除去溶劑，殘余物經(jīng)過HPLC純化。將所合并的級分倒入飽和NaHCO3溶液中，用EtOAc萃取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾。濃縮濾液，在DCM-Et2O(1∶5v/v)中研制殘余物，過濾后得到標(biāo)題化合物，為白色固體(10mg，22％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，6(s，2.65-2.75(m，4H)，3.45-3.50(m，4H)，7.13(d，J＝7.6Hz，2H)，7.25(t，J＝7.7Hz，1H)，7.32(d，J＝7.0Hz，2H)，7.81(d，J＝7.0Hz，2H)，8.83(s，2H)，9.90(s，1H)，10.48(s，1H).MS(ES+)m/z 431(M+H)+. 實(shí)施例124.4-{4-[5-(2-氯-5-甲氧基-苯甲酰氨基)-嘧啶-2-基氨基]-苯甲?；鶀-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(70)
從實(shí)施例121所述化合物68(0.20g，0.50mmol)和2-氯-5-甲氧基-苯甲酸制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例106所述方法B，粗產(chǎn)物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(60％EtOAc/己烷)，得到標(biāo)題化合物(0.15g，53％)，為淡黃色固體。MS(ES+)；m/z 567(M+H)+。
實(shí)施例125.2-氯-5-羥基-N-{2-[4-(哌嗪-1-羰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(LI)
從實(shí)施例124所述化合物70制備標(biāo)題化合物，借助實(shí)施例107所述方法C，同時(shí)除去Boc-保護(hù)基團(tuán)。粗產(chǎn)物經(jīng)過HPLC純化，在高真空中濃縮所合并的級分，得到標(biāo)題化合物，為灰白色固體(12mg，9％). 1H NMR(DMSO-d6)δ3.10-3.20(m，4H)，3.60-3.75(m，4H)，6.91(dd，J＝8.8Hz，J＝3.0Hz，1H)，6.96(d，J＝2.9Hz，1H)，7.35(d，J＝8.7Hz，1H)，7.42(d，J＝8.8Hz，2H)，7.85(d，J＝8.8Hz，2H)，8.82(s，2H)，8.86(bs，1H)，9.97(s，1H)，10.08(s，1H)，10.57(s，1H).MS(ES+)m/z 453(M+H)+. 實(shí)施例126.N’-(2，6-二氯-芐基)-N-[3-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(LII)
將實(shí)施例98所述化合物56(0.10g，0.33mmol)、2，6-二氯芐基溴(0.10g，0.42mmol)與碳酸銫(0.25g，0.77mmol)的二烷/DMF(18mL，5/1v/v)溶液在105℃下攪拌1天。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后倒入水中。水層用EtOAc萃取，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過HPLC純化。將正確的級分倒入飽和NaHCO3中，用EtOAc萃取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，得到游離堿化合物。游離堿化合物得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(20mg，12％總收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ1.85-1.95(m，2H)，1.95-2.05(m，2H)，3.05-3.15(m，2H)，3.50-3.60(m，4H)，4.29(t，J＝4.9Hz，2H)，4.41(s，2H)，6.49(dd，J＝7.7Hz，J＝2.4Hz，1H)，7.15(t，J＝8.1Hz，1H)，7.25(dd，J＝8.3Hz，J＝1.6Hz，1H)，7.40(t，J＝7.8Hz，1H)，7.50(t，J＝2.2Hz，1H)，7.53(d，J＝8.1Hz，2H)，8.12(s，2H)，9.18(bs，1H)，10.41(bs，1H).MS(ES+)m/z 458(M+H)+. 實(shí)施例127.2-[4-(6-氯-2-甲基-嘧啶-4-基)-哌嗪-1-基]-乙醇(71)
向4，6-二氯-2-甲基-嘧啶(5.0g，31mmol)與2-哌嗪-1-基-乙醇(2.7g，21mmol)的二烷(25mL)溶液加入DIPEA(3.0mL，17mmol)。將混合物在回流下加熱16h。使混合物冷卻至室溫，倒入水中。所得水層用EtOAc萃取，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(5-10％MeOH/DCM)，得到標(biāo)題化合物，為褐色液體(2.1g，39％)。MS(ES+)m/z 257(M+H)+。
實(shí)施例128.2-{4-[2-甲基-6-(5-硝基-嘧啶-2-基氨基)嘧啶-4-基]-哌嗪-1-基}-乙醇(72)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.45g，3.2mmol)、實(shí)施例127所述化合物71(1.0g，3.9mmol)、Pd(OAc)2(50mg，0.22mmol)、Xantphos(0.26g，0.45mmol)與叔丁醇鉀(0.72g，6.4mmol)的混合物懸浮在二烷(15mL)中，在氬氣氛下加熱至回流達(dá)15h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。將所過濾的固體用水和DCM洗滌，得到標(biāo)題化合物(0.60g，52％)，無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。MS(ES+)m/z 361(M+H)+。
實(shí)施例129.2-{4-[6-(5-氨基-嘧啶-2-基氨基)-2-甲基-嘧啶-4-基]-哌嗪-1-基}-乙醇(73)
從實(shí)施例128所述化合物72(0.60g，1.7mmol)制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例105所述方法A，在Et2O中研制殘余物，過濾后得到標(biāo)題化合物，為淡黃色固體(0.47g，85％)。MS(ES+)m/z 331(M+H)+. 實(shí)施例130.2，6-二氯-N-(2-{6-[4-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-基]-2-甲基-嘧啶-4-基氨基}-嘧啶-5-基)-苯甲酰胺(LIII)
將實(shí)施例129所述化合物73(0.10g，0.30mmol)、2，6-二氯-苯甲酰氯(90mg，0.43mmol)與碳酸銫(0.20g，0.61mmol)的二烷/DMF(11mL，10/1，v/v)溶液在105℃下加熱16h。使混合物冷卻至室溫，倒入水中。水層用EtOAc萃取，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過快速HPLC純化。將正確的級分倒入飽和NaHCO3中，用EtOAc萃取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，得到游離堿化合物，得到標(biāo)題化合物，為白色固體(30mg，19％總收率)。
1H NMR(DMSO-d6)δ2.55(s，3H)，3.15-3.25(m，4H)，3.55-3.70(m，6H)，3.81(t，J＝4.9Hz，2H)，7.28(bs，1H)，7.50-7.65(m，3H)，9.05(s，2H)，10.90(bs，1H)，11.15(bs，1H)，11.34(s，1H).MS(ES+)m/z 504(M+H)+. 實(shí)施例131.6-氯-2-氟-3-羥基-苯甲酸(74)
在-78℃氬氣氛下，向4-氯-2-氟-1-甲氧基-苯(2.0g，12.5mmol)的THF(20mL)溶液緩慢加入正丁基鋰(2.5M己烷溶液；7.5mL，19mmol)。將混合物在相同溫度下攪拌30min，加入幾塊干冰顆粒。歷經(jīng)4h升高溫度至室溫。將反應(yīng)物用水小心地淬滅，然后用NaOH溶液稀釋至pH～10?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿。蛛x有機(jī)層。將有機(jī)層用濃HCl酸化至pH～2，過濾所得白色固體。將該固體(2.7g，98％)用水洗滌，無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ7.27(t，J＝9.0Hz，1H)，7.32(dd，J＝8.9Hz，J＝1.4Hz，1H)，3.70(s，3H). 實(shí)施例132.6-氯-2-氟-3-甲氧基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(75)
從實(shí)施例83所述化合物52(0.30g，0.84mmol)和化合物74(1.9g，0.93mmol)制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例106所述方法B，粗產(chǎn)物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(20％MeOH/DCM至18％MeOH和2％TEA/DCM)，得到標(biāo)題化合物(0.37g，81％)，為黃色泡沫。MS(ES+)m/z 548(M+H)+。
實(shí)施例133.6-氯-2-氟-3-羥基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺?；?-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(LIV)
從實(shí)施例132所述化合物75(0.16g，0.33mmol)制備標(biāo)題化合物，借助實(shí)施例107所述方法C，粗產(chǎn)物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物，為橙色固體(TFA鹽；30mg，16％)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.65-1.75(m，6H)，2.40-2.60(m，4H)，3.20-3.30(m，2H)，3.30-3.40(m，2H)，7.09(t，J＝9.1Hz，1H)，7.23(dd，J＝8.9Hz，J＝1.4Hz，1H)，7.78(d，J＝9.0Hz，2H)，8.01(d，J＝9.0Hz，2H)，8.87(s，2H)，10.32(s，1H)，10.99(s，1H).MS(ES+)m/z534(M+H)+. 實(shí)施例134.(3-溴-4-甲基-苯基)-甲醇(76)
在0℃氬氣氛下，向3-溴-4-甲基-苯甲酸(2.0g，9.3mmol)的THF(10mL)溶液加入LiAlH4(1.0M THF溶液；10mL，10mmol)。加入后，升高溫度至室溫，將混合物攪拌2h。然后使混合物回流另外2h，冷卻至室溫。將反應(yīng)物用1M HCl淬滅至pH～4，過濾所得固體，用乙酸乙酯洗滌。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ2.32(s，3H)，4.45(d，J＝5.8Hz，2H)，7.20(dd，J＝7.8Hz，J＝1.2Hz，1H)，7.29(d，J＝7.8Hz，1H)，7.51(s，1H). 實(shí)施例135.5-羥甲基-2-甲基-苯甲酸(77)
在-78℃氬氣氛下，向?qū)嵤├?34所述化合物76(1.8g，9.0mmol)的THF(20mL)溶液緩慢加入正丁基鋰(2.5M己烷溶液；7.0mL，15mmol)。將混合物在相同溫度下攪拌30min，加入幾塊干冰顆粒。歷經(jīng)4h升高溫度至室溫，將反應(yīng)物用1M HCl小心地淬滅，然后用乙酸乙酯萃取?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿?，分離有機(jī)層。將有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
實(shí)施例136.5-羥甲基-2-甲基-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙烷-1-磺酰基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(LV)
從實(shí)施例135所述化合物77(0.50g，3.0mmol)和實(shí)施例83所述化合物52(0.10g，0.30mmol)制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例106所述方法B，粗產(chǎn)物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(TFA鹽；30mg，16％)，為褐色固體。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.75-2.05(m，6H)，2.39(s，3H)，2.90-3.00(m，2H)，3.15-3.25(m，2H)，3.30-3.40(m，2H)，3.50-3.60(m，2H)，4.54(s，2H)，7.28(d，J＝7.8Hz，1H)，7.36(d，J＝7.9Hz，1H)，7.46(s，1H)，7.80(d，J＝8.9Hz，2H)，8.03(d，J＝8.9Hz，2H)，8.91(s，2H)，10.29(s，1H)，10.48(s，1H).MS(ES+)m/z 510(M+H)+. 實(shí)施例137.3-(4-溴-苯基)-丙-1-醇(78)
在0℃氬氣氛下，向3-(4-溴-苯基)-丙酸(4.0g，18mmol)的THF(30mL)溶液加入LiAlH4(1.0M THF溶液；14mL，14mmol)。加入后，除去冰浴，使混合物回流18h。冷卻至室溫后，將反應(yīng)物用1M HCl淬滅，混合物用乙酸乙酯萃取。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，粗產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
實(shí)施例138.1-溴-4-(3-溴-丙基)-苯(79)
在0℃氬氣氛下，向?qū)嵤├?37所述化合物78(4.0g，19mmol)的THF(30mL)溶液加入PPh3(6.3g，24mmol)，繼之加入CBr4(8.0g，24mmol)。將混合物在相同溫度下攪拌15min，然后在室溫下攪拌另外15h。除去大多數(shù)溶劑，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(己烷)，得到標(biāo)題化合物(3.5g，66％)，為無色的油。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ2.03-2.12(m，2H)，2.68(t，J＝7.5Hz，2H)，3.49(t，J＝6.5Hz，2H)，7.19(d，J＝8.3Hz，2H)，7.47(d，J＝8.3Hz，2H). 實(shí)施例139.1-[3-(4-溴-苯基)-丙基]-吡咯烷(80)
向?qū)嵤├?38所述化合物79(3.5g，13mmol)的二烷(40mL)溶液加入吡咯烷(2.1mL，25mmol)，繼之加入碳酸銫(8.2g，25mmol)。將混合物在室溫下攪拌15h，倒入水中?；旌衔镉靡宜嵋阴ポ腿?，分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(10％MeOH/DCM至25％MeOH和2％TEA/DCM)，得到標(biāo)題化合物(1.8g，53％)，為淡橙色油。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.60-1.65(m，6H)，2.35(t，J＝7.3Hz，2H)，2.35-2.43(m，4H)，2.57(t，J＝7.7Hz，2H)，7.16(d，J＝8.3Hz，2H)，7.44(d，J＝8.4Hz，2H). 實(shí)施例140.(5-硝基-嘧啶-2-基)-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙基)-苯基]-胺(81)
將5-硝基-嘧啶-2-基胺(0.15g，1.1mmol)、實(shí)施例139所述化合物80(0.30g，1.1mmol)、Pd2(dba)2(75mg，0.082mmol)、Xantphos(96mg，0.17mmol)與碳酸銫(0.69g，2.1mmol)的混合物懸浮在二烷(15mL)中，在氬氣氛下加熱至回流達(dá)15h。使混合物冷卻至室溫，過濾，用DCM洗滌。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過硅膠快速色譜純化(10％MeOH/DCM至20％MeOH和2％TEA/DCM)，得到標(biāo)題化合物，為黃色固體(0.20g，56％)。
實(shí)施例141.N-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙基)-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(82)
從實(shí)施例140所述化合物81(0.20g，0.61mmol)制備標(biāo)題化合物，按照實(shí)施例105所述方法A，無需進(jìn)一步純化即可用于下一步。
實(shí)施例142.2，6-二氯-N-{2-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙基)-苯基氨基]-嘧啶-5-基}-苯甲酰胺(LVI)
向?qū)嵤├?41所述化合物82(0.10g，0.33mmol)的THF(10mL)溶液加入2，6-二氯-苯甲酰氯(0.11g，0.53mmol)，繼之加入三乙胺(0.15mL，1.1mmol)。將混合物在RT下攪拌15h，然后倒入飽和NaHCO3溶液中?；旌衔镉肊tOAc萃取，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(TFA鹽；25mg，13％)，為褐色固體。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.80-2.05(m，6H)，2.59(t，J＝7.6Hz，2H)，2.95-3.05(m，2H)，3.05-3.15(m，2H)，3.50-3.60(m，2H)，7.14(d，J＝8.6Hz，2H)，7.53(dd，J＝9.0，J＝7.1Hz，1H)，7.60(d，J＝7.3Hz，1H)，7.61(d，J＝8.6Hz，1H)，7.67(d，J＝8.5Hz，2H)，8.73(s，2H)，9.50(bs，1H)，9.67(s，1H)，10.84(s，1H).MS(ES+)m/z470(M+H)+. 實(shí)施例143.N’-(2，6-二氯-芐基)-N-[4-(3-吡咯烷-1-基-丙基)-苯基]-嘧啶-2，5-二胺(LVII)
將實(shí)施例141所述化合物82(0.30g，1.0mmol)、2，6-二氯芐基溴(0.35g，1.5mmol)與碳酸銫(0.90g，2.8mmol)的DMF(15mL)溶液在100℃下攪拌8h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后倒入水中。水層用EtOAc萃取，合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾。濃縮濾液，殘余物經(jīng)過HPLC純化，得到標(biāo)題化合物(TFA鹽；0.14g，25％)，為淡黃色固體。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ1.75-2.05(m，6H)，2.55(t，J＝7.6Hz，2H)，2.90-3.05(m，2H)，3.05-3.15(m，2H)，3.50-3.60(m，2H)，4.40(s，2H)，5.52(bs，1H)，7.07(d，J＝8.6Hz，2H)，7.39(t，J＝8.1Hz，1H)，7.52(d，J＝8.0Hz，2H)，7.62(d，J＝8.5Hz，2H)，8.09(s，2H)，9.03(s，1H)，9.59(bs，1H).MS(ES+)m/z456(M+H)+. 實(shí)施例144.激酶抑制作用的測試 測試本發(fā)明的化合物抑制三組激酶活性的能力。所測試的激酶包括src家族(主要為src和yes)、血管生長因子受體(FGFR1，PDGFRb和VEGFR2)和肝配蛋白，EphB4。在96-孔平板中進(jìn)行全部激酶反應(yīng)，最終反應(yīng)體積為50μl。
Src家族 重組人c-Src或Yes(28ng/孔，Panvera/Invitrogen，MadisonWI)、ATP(3μM)、酪氨酸激酶底物(PTK2，250μM，Promega Corp.，Madison WI)和待測物質(zhì)(濃度從約1nM/L至約100μM/L)，在Src激酶反應(yīng)緩沖液(Upstate USA，Lake Placid NY)的存在下。在室溫下反應(yīng)約90分鐘后，利用基于螢光素酶的測定法(KinaseGlo，PromegaCorp.)測定殘留的ATP，作為激酶活性的量度。然后取四孔數(shù)據(jù)的平均值，用于測定供試化合物的IC50值(Prism software package，GraphPad Software，San Diego CA)。
生長因子受體 將PDGFRb(0.16μg/孔，Panvera/Invitrogen)、500nM ATP和PTK2肽(700μM)與如上關(guān)于src所述的化合物和反應(yīng)緩沖液合并。在37℃下溫育反應(yīng)物達(dá)60分鐘，利用也如上所述的基于螢光素酶的技術(shù)測定殘留的ATP濃度。
與之相似進(jìn)行FGFR1和VEGFR2激酶測定。將FGFR1(76ng/孔，Panvera/Invitrogen)與12.5mg/ml聚(glu4tyr)(Sigma)和2.5μM ATP合并。VEGFR2(14.1U/孔，Cell Signaling/ProQinase)與0.3mg/ml聚(glu4tyr)和1.5μM ATP一起使用。二者都在37℃下溫育60分鐘，按照上述程序，經(jīng)由螢光測量殘留的ATP。
EphB4 利用上述基于螢光素酶的技術(shù)，與之相似測量EphB4激酶活性。使28.9mU/孔EphB4(Upstate)與1mg/ml聚(glu4tyr)、6μMATP和試劑反應(yīng)。將反應(yīng)物在37℃下溫育60分鐘，測量殘留的ATP濃度。
Src激酶抑制作用的試驗(yàn)結(jié)果列在表1中，一些其他激酶(即，Yes，Vegfr，EphB4，Pdgfrβ和Fgfr1)抑制作用的試驗(yàn)結(jié)果列在表2中。縮寫“IC50”意指特定的本發(fā)明化合物當(dāng)以指定濃度存在時(shí)抑制激酶達(dá)50％。
表1.一些本發(fā)明的化合物對Src激酶的抑制作用的測試結(jié)果







表2.一些本發(fā)明的化合物對所選激酶的抑制作用的測試結(jié)果 全部數(shù)據(jù)代表IC50，以nM計(jì)。


盡管已經(jīng)參照上述實(shí)施例描述了本發(fā)明，不過將被領(lǐng)會到，修改和變化也包括在本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)。因此，本發(fā)明僅受下列權(quán)利要求所限。
權(quán)利要求
1.結(jié)構(gòu)A化合物
其中
每個(gè)A獨(dú)立地選自CH、N、NH、O、S，或者A是稠合構(gòu)成第二個(gè)環(huán)的環(huán)的一部分，其中該第二個(gè)環(huán)選自芳族、雜芳族、二環(huán)芳族和二環(huán)芳族雜環(huán)；
每個(gè)B獨(dú)立地是CH，或者是稠合構(gòu)成第二個(gè)環(huán)的環(huán)的一部分，其中該第二個(gè)環(huán)選自芳族、二環(huán)芳族或二環(huán)的環(huán)，進(jìn)一步的條件是當(dāng)該第二個(gè)環(huán)存在時(shí)，只有第一個(gè)環(huán)是芳族的；
A1選自NRa、C(O)、S(O)、S(O)2、P(O)2、O、S或CRa，其中R選自H、低級烷基、支鏈烷基、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、烷基羥基、烷硫基和烷基氨基，其中如果A1是NRa，則a＝1，而如果A1是CRa，則a＝2；
A2選自NR、C(O)、S(O)、S(O)2、P(O)2、O和S，A1與A2之間的連接是化學(xué)上正確的；
R0選自H、低級烷基和支鏈烷基；
L1選自價(jià)鍵、O、S、C(O)、S(O)、S(O)2、NRa和C1-C6烷基；L2選自價(jià)鍵、O、S、C(O)、S(O)、S(O)2、C1-C6烷基和NRa；或者L1和L2一起為價(jià)鍵；
每個(gè)Rb、Rd、Re、Rf要么不存在，要么選自H、C1-C6烷基、環(huán)烷基、支鏈烷基、羥基烷基、氨基烷基、硫代烷基、烷基羥基、烷硫基和烷基氨基；
每個(gè)p、q、m、r獨(dú)立地是0至6的整數(shù)；
Rb和Rd一起是選自(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m和(CH2)r-O-(CH2)m的部分；或者
Rb和Re一起是選自(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m和(CH2)r-O-(CH2)m的部分；或者
Rd和Rf一起是選自(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m和(CH2)r-O-(CH2)m的部分；或者
Rb和Rf一起是選自(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m和(CH2)r-O-(CH2)m的部分；或者
Rd和Re一起是選自(CH2)m、(CH2)r-S-(CH2)m、(CH2)r-SO-(CH2)m、(CH2)r-SO2-(CH2)m、(CH2)r-NRa-(CH2)m和(CH2)r-O-(CH2)m的部分；
R1選自(CRa)m、O、N、S、C(O)(O)R′、C(O)N(R′)2、SO3R′、OSO2R′、SO2R′、SOR′、PO4R′、OPO2R′、PO3R′、PO2R′和具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的3-6元雜環(huán)，其中R′選自氫、低級烷基、烷基羥基、支鏈烷基、支鏈烷基羥基，或者構(gòu)成具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的閉合3-6元雜環(huán)，其中每個(gè)R′在存在一個(gè)以上R′的情況下是獨(dú)立的；
R2選自氫、烷基、支鏈烷基、苯基、取代的苯基、鹵素、烷基氨基、烷基氧代、CF3、磺酰氨基、取代的磺酰氨基、烷氧基、硫代烷基、磺酸鹽、磺酸酯、磷酸鹽、磷酸酯、膦酸鹽、膦酸酯、羧基、酰氨基、脲基、取代的羧基、取代的酰氨基、取代的脲基和具有一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)原子的3-6元雜環(huán)，進(jìn)一步的條件是在環(huán)中可以存在一個(gè)或兩個(gè)取代基R2，如果存在一個(gè)以上取代基R2，則每個(gè)取代基R2可以是相同或不同的；
R3選自氫、烷基、支鏈烷基、烷氧基、鹵素、CF3、氰基、取代的烷基、羥基、烷基羥基、巰基、烷硫基、硫代烷基、氨基和氨基烷基；
n是1與5之間的整數(shù)，進(jìn)一步的條件是如果n≥2，那么每個(gè)基團(tuán)R3獨(dú)立于其他基團(tuán)R3。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XXXVIII和XXXIX
3.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XII和XLI
4.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XLII、XLIII和XLIV
5.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XXXI、XXXII、XXXIII、XXXIV、XXXV、XXXVI、XXXVII、LIV、LV和LX
6.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物III、IV、VI和VII
7.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物I和LXI
8.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XIV、XV、XVI、XVII、L和LI
9.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XXIII、XXV、XXVI、XXVII、XXVIII和XXIX
10.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物VIII和IX
11.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物II和XLVIII
12.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物V和XLVII
13.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物XVIII
14.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物L(fēng)XII
15.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XXI和XXII
16.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物XIX和XX
17.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物XXX
18.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物L(fēng)II
19.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物XLIX
20.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物X和XI
21.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物XIII
22.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物XLVI
23.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物是化合物L(fēng)III
24.權(quán)利要求1的化合物，其中該化合物選自化合物L(fēng)VI和LVII
25.治療與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的方法，包含對有需要的受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
26.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、局部缺血或再灌注損傷、癌癥、關(guān)節(jié)炎或其他關(guān)節(jié)病、視網(wǎng)膜病或玻璃體視網(wǎng)膜疾病、黃斑變性、自體免疫疾病、血管溢漏綜合征、炎性疾病、水腫、移植物排斥、灼傷或者急性或成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)。
27.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是血管溢漏綜合征(VLS)。
28.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是癌癥。
29.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是一種眼科疾病。
30.權(quán)利要求29的方法，其中該眼科疾病選自年齡-相關(guān)性黃斑變性(AMD)、糖尿病性視網(wǎng)膜病(DR)、糖尿病性黃斑水腫(DME)、癌癥、青光眼和眼睛的其他病理癥狀。
31.權(quán)利要求29的方法，其中該化合物經(jīng)玻璃體內(nèi)或眼周途徑被給藥至眼睛后部。
32.權(quán)利要求29的方法，其中該化合物在滴眼劑形式的制劑中。
33.權(quán)利要求29的方法，其中該化合物對患有干性AMD的受治療者給藥。
34.權(quán)利要求29的方法，其中給予該化合物以降低該眼科疾病進(jìn)展的危險(xiǎn)。
35.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是ARDS。
36.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是自體免疫疾病。
37.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是灼傷。
38.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是中風(fēng)。
39.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是心肌梗塞。
40.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是局部缺血或再灌注損傷。
41.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是關(guān)節(jié)炎。
42.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是水腫。
43.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是移植物排斥。
44.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是炎性疾病。
45.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患是充血性心力衰竭。
46.權(quán)利要求25的方法，其中該疾患與激酶有關(guān)。
47.權(quán)利要求46的方法，其中該激酶是酪氨酸激酶。
48.權(quán)利要求46的方法，其中該激酶是絲氨酸激酶或蘇氨酸激酶。
49.權(quán)利要求46的方法，其中該激酶是Src家族激酶。
50.藥物組合物，包含至少一種權(quán)利要求1的化合物和其藥學(xué)上可接受的載體。
51.制品，包括包裝材料和含有在該包裝材料內(nèi)的藥物組合物，其中該包裝材料包括表明該藥物組合物能夠用于治療與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的標(biāo)簽，且其中該藥物組合物包含至少一種權(quán)利要求1的化合物。
52.制品，包括包裝材料和含有在該包裝材料內(nèi)的藥物組合物，其中該包裝材料包括表明該藥物組合物能夠用于治療與血管滲透性溢漏或受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的標(biāo)簽，所述疾患選自心肌梗塞、中風(fēng)、充血性心力衰竭、局部缺血或再灌注損傷、癌癥、關(guān)節(jié)炎或其他關(guān)節(jié)病、視網(wǎng)膜病或另一種眼科疾病、黃斑變性、自體免疫疾病、血管溢漏綜合征、炎性疾病、水腫、移植物排斥、灼傷或者急性或成人呼吸窘迫綜合征(ARDS)，且其中該藥物組合物包含至少一種權(quán)利要求1的化合物。
53.權(quán)利要求52的制品，其中該疾患是癌癥。
54.治療與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的方法，包括對需要這類治療的受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、晶型和個(gè)別非對映體。
55.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是血管溢漏綜合征(VLS)。
56.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是癌癥。
57.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是眼科疾病。
58.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是ARDS。
59.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是自體免疫疾病。
60.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是灼傷。
61.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是中風(fēng)。
62.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是心肌梗塞。
63.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是局部缺血或再灌注損傷。
64.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是關(guān)節(jié)炎。
65.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是水腫。
66.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是移植物排斥。
67.權(quán)利要求54的方法，其中該疾患是炎性疾病。
68.治療與受損的血管穩(wěn)定有關(guān)的疾患的方法，包括對需要這類治療的受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、晶型和個(gè)別非對映體與抗炎劑、化療劑、免疫調(diào)控劑、治療性抗體或蛋白激酶抑制劑的組合。
69.治療患有心肌梗塞或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
70.治療患有血管溢漏綜合征(VLS)或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
71.治療患有癌癥或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
72.治療患有中風(fēng)或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
73.治療患有ARDS或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
74.治療患有灼傷或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
75.治療患有關(guān)節(jié)炎或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
76.治療患有水腫或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
77.治療患有血管溢漏綜合征(VLS)或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
78.治療患有視網(wǎng)膜病或另一種眼科疾病或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
79.治療患有局部缺血或再灌注相關(guān)的組織損傷或傷害或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
80.治療患有自體免疫疾病或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
81.治療患有移植物排斥或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
82.治療患有炎性疾病或者面臨此危險(xiǎn)的受治療者的方法，包括對該受治療者給予治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物，從而治療該受治療者。
83.制備藥物組合物的方法，包括合并至少一種權(quán)利要求1的化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物、溶劑化物、晶型鹽和個(gè)別非對映體與藥學(xué)上可接受的載體的組合。
全文摘要
本發(fā)明提供式(A)的嘧啶化合物。本發(fā)明的嘧啶化合物能夠抑制激酶，例如Src激酶家族的成員，和各種其他特異性受體與非受體激酶。
文檔編號C07D401/12GK101155799SQ200680011651
公開日2008年4月2日 申請日期2006年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月16日
發(fā)明者曹建國, R.M.索爾, G.諾龍哈, K.巴雷特, C.戈里森, J.胡德, 麥志清, A.麥克弗森, V.P.帕薩克, J.雷尼克, U.斯普利特戈博, 曾斌琦 申請人:塔格根公司