專利名稱：：用于治療rho激酶介導的疾病和病狀的(吲唑-5-基)-吡嗪和(1,3-二氫-吲哚-2-酮)-吡嗪的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及。引唑-5-基)-吡嗪和(l，3-二氫-吲哚-2-酮)-吡嗪，以及此類化合物用于治療rho激酶介導的疾病和病狀的用途。本發(fā)明特別地涉及此類化合物用于降低和/或控制正?；蛱岣叩难蹆?nèi)壓(IOP)和治療青光眼的用途。
背景技術(shù)：
：稱為青光眼的疾病狀態(tài)的特征在于，由于對視神經(jīng)的不可逆破壞導致的視覺功能的永久性喪失。幾個形態(tài)學或功能上不同的青光眼類型的典型特征在于，被認為通常與疾病的病程(pathologicalcourse)相關(guān)的提高的IOP。眼高壓是其中眼內(nèi)壓力提高但沒有發(fā)生視覺功能的明顯喪失的病狀；此類患者被認為處于最終發(fā)生與青光眼相關(guān)的視覺喪失的高風險中。一些具有青光眼視野缺損的患者具有相對低的眼內(nèi)壓。這些壓力正常或低眼壓性青光眼患者也可受益于降低和控制IOP的試劑。如果在早期檢測出青光眼或眼高壓并且用有效地減小升高的眼內(nèi)壓的藥物迅速治療，可通常改善視覺功能的喪失或其進行性的衰退。已證明對于減少眼內(nèi)壓是有效的藥物療法包括減少房水產(chǎn)生的藥物和增加排出率(outflowfacility)的藥物。通常通過兩個可能的途徑(局部(對眼的直接施用)或口服)中的一種施用該療法。然而，藥物眼抗高壓法(pharmaceuticalocularanthypertensionapproach)已展示各種不希望的副作用。例如，縮瞳劑例如毛果蕓香堿可引起視力模糊(blurringofvision)、頭痛和和其他負面的視覺副作用。全身性施用的碳酸酐酶抑制劑還可引起惡心、消化不良、疲勞和代謝性酸中毒。某些前列腺素引起充血、眼癢以及睫毛和眼眶周圍組織的發(fā)黑。此外，某些p-受體阻斷劑日益與可歸因于其對肺組織中的(3-2受體的作用而產(chǎn)生的嚴重肺副作用相關(guān)。擬交感神經(jīng)藥引起心動過速(tachycardia)、心律不齊和高血壓。此類負面的副作用可導致減少的患者順從性或?qū)е轮委煹慕K結(jié)，這樣正常視力持續(xù)惡化。此外，當用某些現(xiàn)有的青光眼療法治療時，存在對其簡直沒有反應的個體。因此，存在對控制IOP的其他治療劑的需要。小rhoGTP酶參與許多細胞功能，包括細胞粘著、細胞運動性、細胞遷移和細胞收縮。與該種類蛋白相關(guān)的細胞功能的一個主要效應物是形成Rho相關(guān)巻曲螺旋的蛋白激酶(rho-associatedcoiled-coil-formingproteinkinase)(rho激酶)，該酶表現(xiàn)出在調(diào)控平滑肌收縮的力量和速度、腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和軸索向外生長的抑制中具有重要作用。Rho激酶是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，其以兩種同種型R0CK1(R0Kj3)和R0CK2(R0Ka)的形式存在[N.Wettschureck，S.Offersmanns，JournalofMolecularMedicine80:629-638，2002;M.Uehata等人，Nature389:990-994，1997;T.Ishizaki等人，MolecularPharmacology，57:976-983，2000，C.Loge等人，JournalofEnzymeInhibitionandMedicinalChemistry17:381-390,2002].已發(fā)現(xiàn)rho激酶的某些抑制劑有效地降低和控制正常的和提高的I0P[M.Honjo，等人,InvestigativeOphthalmologyandVisualScience42:137—144，2001;M.Honjo等人，ArchivesofOphthalmology119:1171-1178，2001;P.V.Rao等人;InvestigativeOphthalmologyandVisualScience42:10291690，2001;M.Waki，CurrerntEyeResearch22:47—474,2001;B.Tian等人，Archivesof0/7力^2細/o^F122:1171-1177，2004]。Rho激酶抑制劑例如H-7和Y-27632抑制睫狀肌收縮和小梁細胞收縮，其效果可能與該類化合物的降低眼壓效應相關(guān)[H.Thieme等人，/"FeW/^a〃p^0/7力^a/zz7o7o^Fa/dh"a/5We/ce41:4240-4246，2001;C.Fukiage等人，288:296-300，2001]。充當rho激酶抑制劑的化合物是熟知的且已顯示多種用途。Takami等人，i9/.orga/7/cfli7d#ed/c//7fl/C力e/zz/Wr/12:2115-2137，2004描述了具有rho激酶活性的吡啶、丐l唑和異會啉化合物。美國專利6，218，410和6，451,825公開了rho激酶抑制劑用于治療高血壓、視網(wǎng)膜病、腦血管收縮、哞喘、炎癥、心絞痛、外周循環(huán)病癥、早產(chǎn)(immaturebirth)、骨質(zhì)疏松、癌癥、炎癥、免疫性疾病、自身免疫性疾病等的用途。美國專利6,794,398描述了具有rho激酶活性的化合物用于預防或治療肝病的用途。美國專利6，720，341描述了具有rho激酶活性的化合物用于治療腎病的用途。W099/23113描述了rho激酶抑制劑用于阻斷軸索向外生長的抑制的用途。W003/062227描述了作為rho激酶抑制劑的2，4-二氨基嘧啶衍生物。W003/059913描述了作為rho激酶抑制劑的二環(huán)4-氨基嘧啶類似物。W002/100833描述了作為rho激酶抑制劑的雜環(huán)化合物。W001/68607描述了作為rho激酶抑制劑的酰胺衍生物。W004/024717描述了作為rho激酶抑制劑的氨基異喹啉衍生物。W004/009555描述了作為rho激酶抑制劑用于治療青光眼、支氣管哮喘和慢性阻塞性肺疾病的5-取代異喹啉衍生物。EP103W93描述了rho激酶抑制劑用于治療青光眼的作用。美國專利6，503，924、6，649，625和6，673，812公開了作為rho激酶抑制劑的酰胺衍生物用于治療青光眼的用途。美國專利5,798,380和6,110,912公開了使用絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑治療青光眼的方法。美國專利6，586，425描述了使用絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑治療青光眼的方法。美國專利申請公開號2002/0045585描述了使用絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑治療青光眼的方法。下列參考文獻公開了異喹啉磺酰胺類似物作為rho激酶抑制劑的活性Y.Sasaki,6W/w/ar腸/o^r淑鄉(xiāng)/arZe〃er":506，2001;S.Satoh等人，"尸e5We腳"9:1441-1453，2001;Y.Sasaki，池層co7wa/z"力e，eu〃"93:225-232，2002;C.Loge等人，18:127-138。美國專利6，271，224和6，403，590中已公開了某些異喹啉磺酰基化合物用于治療青光眼的用途。此外，W004/000318描述了氨基取代單環(huán)作為AKT-1激酶調(diào)節(jié)劑的用途。幾個出版物已描述了吡喚的合成。W004/084824描述了用作鈉通道阻滯劑的二芳基取代的六元雜環(huán)的制備。W004/085409描述了能夠結(jié)合蛋白激酶的活性位點的化合物(包括吡噪)集合的制備。涉及吡漆合成的方法的其他出版物包括Sato等人，/o"r加/ofC力e邊/ca/Wesearc力7:250—1，1997;Sato等人，9:931—4，1994;Sato，/owr/fl/ofMeC力e邊/ca/Soc/eO"7:885-8，1994;Sato，/our"a/o尸。r^//cC力e邁/"r/43(2):341-3,1978;Adachi，J等人，/oz/r""of。，/7/cC/e/z7/'W/r37(2):221-5，1972。發(fā)明概述本發(fā)明涉及(p引唑-5-基)-吡嗪和(l，3-二氫-吲哚-2-酮)-吡溱和此處描述的衍生物以及其用于治療rho激酶介導的疾病和病狀的用途。下面描述的式(I)的受試化合物可用于在溫血動物包括人中降低和/或控制與正常眼壓性青光眼、眼高壓以及青光眼相關(guān)的IOP。在某些實施方案中，當用于治療正常眼壓性青光眼或眼高壓時，所述化合物可以配制成適合用于對眼進行局部遞送的藥學上可接受的組合物。本發(fā)明的另一個實施方案涉及用于治療青光眼和控制眼內(nèi)壓的眼用藥物組合物，其包含有效量的式(I)的化合物。本發(fā)明的另一個實施方案包括控制眼內(nèi)壓的方法，所述方法包括對人或其他哺乳動物施用治療有效量的用于治療青光眼和控制眼內(nèi)壓的眼用藥物組合物，其中組合物包含有效量的式(I)的化合物。本發(fā)明的其他實施方案包括治療rho激酶介導的疾病或rho激酶介導的病狀的方法，所述方法包括對人或其他哺乳動物施用治療有效量的式(I)的化合物。如此處所用的，術(shù)語"rho激酶介導的疾病"或"rho激酶介導的病狀"意指已知rho激酶在其中起作用的任何疾病或其他有害病狀。此類病狀包括，但不限于，高血壓、青光眼、視網(wǎng)膜病、腦血管收縮、眼高壓、正常眼壓性青光眼、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、炎癥、心絞痛、外周循環(huán)病癥、早產(chǎn)、骨質(zhì)疏松、癌癥、炎癥、免疫性疾病、自身免疫性疾病。上述簡短的概述廣泛地描述了本發(fā)明的某些實施方案的特性和技術(shù)有利方面。在下面的本發(fā)明的詳細描述中描述了另外的特性和技術(shù)有利方面。當與任意附隨的實施例結(jié)合考慮時，根據(jù)本發(fā)明的詳細描述將更好地理解據(jù)認為是本發(fā)明的特征的新特性。然而，此處提供的實施例意圖幫助說明本發(fā)明或幫助增進對本發(fā)明的理解，而不是本發(fā)明的范圍的界定。發(fā)明詳述在一個實施方案中，本發(fā)明提供了式(I)的化合物R7其中Y是且其中Rl、R9獨立地-H、烷基、氨基、烯基、芳基；R2、R3、R4、R6、R7獨立地-H、烷基、卣素、氨基、羥基、氰基、烷氧基；R5、R8獨立地-H、烷基、經(jīng)胺取代的烷基、經(jīng)羥基取代的烷基、(C-0)R1、(C-0)0R1、(C=0)NR1、芳基；Rl和R2可形成5-7元環(huán)；R5和R6可形成5-7元環(huán)；和R5和R8可形成5-7元環(huán)。要認識到式(I)的化合物可包含一個或多個手性中心。本發(fā)明涉及式(I)的所有對映體、非對映體和它們的混合物。此外，本發(fā)明的某些實施方案包括式(I)的化合物的藥學上可接受的鹽。藥學上可接受的鹽包括，但不限于，適合用于治療疾病而無不適當?shù)牟幌Ｍ男?例如過敏反應或毒性)的式(I)的化合物的可溶性或可分散性形式。代表性藥學上可接受的鹽包括，但不限于，酸加成鹽例如醋酸鹽、檸檬酸鹽、苯曱酸鹽、乳酸鹽或磷酸鹽以及堿加成鹽例如鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽或鋁鹽。此處使用的術(shù)語"芳基"是指具有總共5至14個環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)、三環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中系統(tǒng)中至少一個環(huán)是芳香族的，其中系統(tǒng)中各環(huán)包含3至7個環(huán)成員。術(shù)語"芳基"可與術(shù)語"芳環(huán)"互換使用。此處使用的術(shù)語"雜環(huán)"、"雜環(huán)基"、"雜環(huán)的"是指具有3至14個環(huán)成員(其中一個或多個環(huán)成員是雜原子)的非芳香族的、單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中系統(tǒng)中每個環(huán)包含3至7個環(huán)成員。術(shù)語"雜芳基"是指具有3至14個環(huán)成員的單環(huán)、二環(huán)或三環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中系統(tǒng)中至少一個環(huán)是芳香族的，系統(tǒng)中至少一個環(huán)包含一個或多個雜原子，以及其中系統(tǒng)中各個環(huán)包含3至7個環(huán)成員。在上述定義中，取代基中的碳原子的總數(shù)用Ch字首(prefix)標示，其中數(shù)字i和j定義碳原子的數(shù)目；該定義包括直鏈、支鏈和環(huán)狀烷基或(環(huán)狀烷基)烷基基團。重要的是要認識到當整合入經(jīng)標示的結(jié)構(gòu)單位時，取代基可以單個地或多個地存在。例如，取代基卣素(其是指氟、氯、溴或碘)將顯示其附著的單位可用一個或多個可以是相同的或不同的卣原子取代。下列化合物是特別優(yōu)選的(S)-N1-[6-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)—吡"秦-2-基]-3-苯基-丙垸-l，2-二胺、Nl-[6-(3-曱基-1H-吲唑-5-基)-吡溱-2-基]-3-苯基-丙烷-1，2-二胺、(S)-N1-[6-(3-曱基-lH-吲唑-5-基)-吡嗪-2-基]-3-(4-三氟曱基-苯基)-丙烷-l，2-二胺、Nl-[6-(3-甲基-lH-吲唑-5-基)-吡嗪-2-基]-3-(4-三氟甲基-苯基)-丙烷-1，2-二胺、(S)-Nl-[6-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-吡嚷-2-基]-3-(4-溴-苯基)-丙烷-l，2-二胺、Nl-[6-(3-甲基-lH-吲唑-5-基)-吡溱-2-基]-3-(4-溴-苯基)-丙烷-1，2-二胺、(S)-Nl-[6-(3-曱基-lH-吲唑-5-基)-吡嗪-2-基]-3-(2-三氟甲基-苯基)-丙烷-1，2-二胺、Nl-[6-(3-曱基-lH-吲唑-5-基)-吡喚-2-基]-3-(2-三氟曱基-苯基)-丙烷-1，2-二胺、(S)-N1-[6-(lH--引唑-5-基)-吡溱-2-基]-3-苯基-丙烷-1，2-二胺、Nl-[6-(1H-吲哇-5-基)-吡溱-2-基]-3-苯基-丙烷-l，2-二胺、5-[6-((S)-2-氨基-3-苯基-丙基氨基)-吡溱-2-基]-1,3-二氫-巧|哚-2-酮、5-[6-(2-氨基-3-苯基-丙基氨基)-吡*-2-基]-1，3-二氫-丐l咮-2-酮、5-[6-((S)-2-氨基-3-苯基-丙基氨基)-吡嗪-2-基]-l，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-(2-氨基-3-苯基-丙基氨基)-吡嗪-2-基]-l，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-((S)-2-氨基-4-曱基-戊基氨基)-吡嗪-2-基]-l，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-(2-氨基-4-甲基-戊基氨基)-吡溱-2-基]-l，3-二氬-吲咮-2-酮、5-[6-((S)-2-氨基-3-(4-溴-苯基)-丙基氨基)-吡喚-2-基]-l，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-(2-氨基-3-(4-溴-苯基)-丙基氨基)-吡嗪-2-基]-1，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-((S)-2-氨基-3-(4-三氟曱基-苯基)-丙基氨基)-吡喚-2-基]-1，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-(2-氨基-3-(4-三氟甲基-苯基)-丙基氨基)-吡嗪-2-基]-1，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-((S)-2-氨基-3-(2-三氟甲基-苯基)-丙基氨基)-吡嗪-2-基]-l，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[6-(2-氨基-3-(2-三氟甲基-苯基)-丙基氨基)-吡嗪-2-基]-l，3-二氫-吲哚-2-酮、5-[5-氨基-6-((S)-2-氨基-3-苯基-丙基氨基)-吡嗪-2-基]-1，3-二氫-吲哚-2-酮和5-[5-氨基-6-(2-氨基-3-苯基-丙基氨基)-吡溱-2-基]-1，3-二氫-吲哚-2-酮。合成實施例可使用幾種合成方法中的一種方法制備式(I)的化合物。例如，可如下面方案1中所概述的從適當保護的5-溴-3-甲基-吲唑和6-氯-p比嗪-2-基胺制備6-(1H-吲唑-5-基)-吡溱-2-基胺。如此處所用的，"Pg"表示確保在指定的化學反應期間使特定的原子不被改性的合適的保護基團。方案1suzuki偶合可通過本領(lǐng)域內(nèi)熟知的StUle偶合從相同的起始材料制備式(I的其他化合物，如下面方案2所描述的。方案2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>可從起始材料9(下面顯示的)和4(上面顯示的)制備式(I)的某些化合物。如下面方案3中所示，Suzuki偶合或Stille偶合用于通過中間產(chǎn)物11制備化合物12的用途在本領(lǐng)域內(nèi)是熟知的。方案3通過使用上述方案l-3、下面實施例1中所描述的步驟和熟知的步驟，本領(lǐng)域技術(shù)人員可制備此處公開的化合物。遞送模式可將式(I)的化合物整合入各種類型的用于遞送的眼用制劑?？墒褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員熟知的技術(shù)對眼直接遞送(例如局部滴眼劑或軟骨；緩釋裝置例如植入結(jié)膜官窿或靠近鞏膜或眼內(nèi)植入的藥物給藥海綿；眼周、結(jié)膜、囊下(sub-tenon)、前眼房、玻璃體內(nèi)或小管內(nèi)注射)或全身性遞送(例如口服、靜脈內(nèi)、皮下或肌內(nèi)注射；胃腸外、經(jīng)皮膚或經(jīng)鼻遞送)式(I)的化合物。還涉及可以以眼內(nèi)植入物或植入裝置的形式配制本發(fā)明的藥物。優(yōu)選將式(I)的化合物整合入具有大約4-8的pH的局部眼用配制劑以將其遞送至眼?？蓪⒒衔锱c眼科可接受的防腐劑、表面活性劑、粘度增強劑、穿透促進劑、緩沖劑、氯化鈉和水混合以形成水性、無菌眼用懸浮劑或溶液。可通過將化合物溶解在生理可接受的等滲水性緩沖液中來制備眼用溶液配制劑。此外，眼用溶液可包含眼科可接受<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>的表面活性劑以幫助溶解化合物。此外，眼用溶液可包含增加粘度的試劑例如羥曱基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基曱基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等以延長制劑在結(jié)膜嚢中的貯留。也可使用膠凝劑，包括，但不限于，膠凝糖和黃原膠。為了制備無菌眼骨配制劑，將活性組分在合適的載體例如礦物油、液體羊毛脂或白軟石蠟中與防腐劑聯(lián)合?？赏ㄟ^將化合物懸浮在親水性基質(zhì)(按照類似的眼制劑的公開的配方聯(lián)合例如卡波姆-974等制備的)中來制無菌眼凝膠配制劑;可整合入防腐劑和張度劑。以足以降低經(jīng)歷提高的IOP的患者中的10P和/或維持青光眼患者的正常IOP水平的量在組合物中包含優(yōu)選實施方案中的化合物。這樣的量此處稱為"控制IOP的有效量"或更簡單地"有效量"。在這些配制劑中，通常按照重量/體積("w/v%，，)計算以0.01至5%的量，但優(yōu)選0.25至2w/v%的量包含化合物。因此，對于局部施用(topicalpresentation),可根據(jù)熟練臨床醫(yī)生的判斷，每天1至4次遞送1至2滴此類配制劑至眼表面。還可將式(I)的化合物與其他青光眼治療劑例如但不限于卩-阻滯劑、前列腺素類似物、碳酸酐酶抑制劑、仏激動劑、縮瞳劑和神經(jīng)保護劑一起使用。生物學活性的確定通過體外測定法評估式(I)的某些化合物抑制rho激酶的能力。使用人重組Rho激酶(R0Ka/R0CK-n，(aa11-552)，人活性的，目錄號#14-451，UpstateBiotechnologyCo.,LakePlacid,NY)、MgCl2/ATP混合物和酶底物(Upstate)。使用Biomek2000RoboticWorkstation(BeckmanInstruments,PaloAlto，CA)在96孔板中進行熒光偏振測定。如下使用IMAPROCKII試劑盒(MolecularDevices,Sunnyvale,CA)進行測定。使用的底物和ATP濃度分別為200nM和lO^M,而酶濃度是每孔3.96xl(T個單位。使用由提供商提供的反應緩沖液制備底物、酶和ATP稀釋物。將受試化合物稀釋在10:10DMSO-乙醇(體積/體積)中。對于實際的測定，以每孔20^1的終體積向黑色、底部干凈的96孔板(Costar，Corning,NY)中加入各種組分。在酶反應(在23。C下進行60分鐘)后，每孔加入60jul結(jié)合溶液(由提供商提供的IMAP試劑盒)，在黑暗中在23t:下再溫育另外30分鐘。然后在AnalystHT儀(MolecularDevices,Sunnyvale,CA)上測量反應混合物的熒光偏振。然后使用購自IDBS(Emeryville,CA)的非線性、迭代、S形曲線擬合計算機程序和如之前所述(Sharif等人，/.戶力ar則co/.fx;.77/er.286:1094-1102，1998;Sharif等人，/.泡r磨o/.f抓7%er.293:321-328，2000;Sharif等人，/.。c"/ar尸/ar則co/.r/er.18:141-162，2002a;Sharif等人，/.漲r雄.尸力證歸/.54:539-547,2002b)分析產(chǎn)生的數(shù)據(jù)，從而產(chǎn)生受試化合物的抑制常數(shù)。使用上述方案分析下列式(I)的化合物以確定其ICs。常數(shù)。表1提供了上述化合物的分析結(jié)果，表明此類化合物具有生物學活性且抑制rho激酶活性。表l:Rho激酶II結(jié)合數(shù)據(jù)實施例<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>實施例提供下列實施例以舉例說明本發(fā)明的某些實施方案，但不應當解釋為表示對權(quán)利要求的任何限制。實施例1:(S)-N1-[6-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-吡嗪-2-基]-3-苯基-丙烷-1，2-二胺二鹽酸鹽的制備。制備l:5-溴-3-甲基-lH-吲唑的制備步驟A:1-(5-溴-2-氟-苯基)-乙酮在3分鐘內(nèi)通過注射器向在氮氣下在無水乙醚(IOOmL)中配制的5-溴-2氟-苯曱醛(5.00g，24.6mmol)的0C攪拌的溶液中加入MeMgBr(3M于乙醚中配制的溶液，10mL，30mmol)。將混合物倒入碳酸氫鈉飽和溶液(100mL)中，分離有機層，用乙酸乙酯(100mL)萃取水層。在硫酸鎂上干燥混合的有機層，過濾，然后濃縮產(chǎn)生粘稠的油。將該油與丙酮(100mL)混合，然后用瓊斯試劑(1.1M，40mL，1.79mmol)進行處理。攪拌混合物過夜，蒸發(fā)丙酮，用乙酸乙酯(60mLx2)萃取殘留物。用水(50mL)洗滌萃取物，然后用飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)進行洗滌。蒸發(fā)產(chǎn)生以油的形式存在的酮類(4.63g，87%)，所述酮類用于下一步反應而無需進一步純化。步驟B:5-溴-3-曱基-lH-吲唑?qū)⒁叶?5mL)中配制的來自步驟A的酮類的混合物(0.64g，2.95mmol)置于密封的瓶中，在165°C下加熱過夜(大約15小時)。將混合物與水(50mL)混合，然后用乙酸乙酯(50mLx2)進行萃取。干燥、過濾和蒸發(fā)合并的萃取物，從而產(chǎn)生油。通過層析(硅膠，己烷/乙酸乙酯3:1)純化油，從而產(chǎn)生以黃色固體形式存在的標題化合物(0.25g，43%)。LC/MS(+APCI)211，213m/z。制備2:((S)-2-M-l-千基-l-芐基-乙基)-M甲酸叔丁酯的制備步驟A:((S)-2-疊氮基-l-千基-l-千基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯在氮氣下向無水THF中的(S)-1-芐基-2-羥基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(5.00g，19.9mmol)、三乙胺(6.03g，59.7mmol)的0。C攪拌的溶液中加入甲烷磺酸酐(4.50g，25.9mmo1)。20分鐘后，去除水浴，使反應繼續(xù)進行大約IO分鐘。蒸發(fā)揮發(fā)物，然后向殘留物中加入疊氮化鈉(6.47g，99.5mmol)和無水DMSO(50mL)。在50C下加熱混合物過夜，然后冷卻，與水(100mL)混合，然后用乙酸乙酯(IOOmLx2)萃取。萃取物的蒸發(fā)產(chǎn)生了殘留物，所述殘留物通過層析(硅膠，0%至25%乙酸乙酯/己烷)進行純化，從而產(chǎn)生通過LC/MS(+APCI)m/z177(M+H-BOC)純化的標題化合物(3.56g，65%)。步驟B:((S)-2-氨基-1-節(jié)基-1-節(jié)基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯向Pd/C(10°/。，0.27g)中加入在曱醇(100mL)中的來自步驟A的疊氮化合物的混合物(3.56g，12.9mmo1)，脫氣，然后置于氫氣下，攪拌過夜。將混合物過濾，然后濃縮濾液，從而產(chǎn)生油(3.17g，98%)。LCMS(+APCI)m/z251(M+H)。示例性制備步驟A:l-節(jié)氧甲基-5-溴-3-甲基"引唑(4)在氮氣下向在無水DMF(30mL)中的5-溴-3-甲基-吲唑(來自制備1，l.OOg,4.33mmol)的0'C攪拌的溶液中加入氫化鈉(60y。于礦物油中，0.21g，5.19mmol)。30分鐘后，通過注射器在大約1分鐘內(nèi)加入節(jié)基氯曱醚(60%，1.47g，5.63mmol)。繼續(xù)攪拌1小時。將混合物倒入水水(IOOmL)中，用乙酸乙酯萃取。干燥、過濾和濃縮合并的萃取物，從而產(chǎn)生油，所述油通過在硅膠(己烷/乙酸乙酯10:l)上層析來進行純化，從而產(chǎn)生通過NMR是純凈的標題化合物(O.72g，50%)。步驟B:1-千氧甲基-3-甲基-5-吲唑硼酸(5)在氮氣條件下向在無水曱苯/THF(5mL/3mL)中的來自步驟A的化合物(O.72g，2.18mmol)的-78"U攪拌的溶液中加入硼酸三異丙酯(O.53g，2.83mmo1)，然后加入丁基鋰(2.5M在己烷中，1.22mL，3.05mmol)，所述加入在大約10分鐘內(nèi)緩慢進行。IO分鐘后，去除干冰浴，繼續(xù)攪拌2Q分鐘。將混合物在-78X:下冷卻，加入硼酸三異丙酯(0.32g，1.71mmol)和丁基鋰(2.5M于己烷中，0.85mL，2.14匪ol)。去除干冰浴，允許混合物溫熱至環(huán)境溫度，然后在用飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)淬滅前再攪拌另外20分鐘。用乙酸乙酸(50mLx2)萃取該混合物。干燥萃取物，并濃縮以產(chǎn)生固體。用乙酸乙酯/己烷(l:1)研磨固體，并干燥以產(chǎn)生標題化合物(O.47g，81%)。步驟C:[(S)-l-芐基-2-(6-氯-吡嗪-2-基氨基)-乙基]-氨基曱酸叔丁酯在回流下加熱來自制備2(3.18g，12.7,ol)的2，6-二氯吡喚(3.OOg，20.1mmol)和在無水THF(50mL)中的二異丙基乙胺(1.80g，14.0mmol)的溶液2小時。加入二異丙基乙胺(1.11g，8.6mmol)，繼續(xù)回流另外3小時。蒸發(fā)揮發(fā)物，然后用乙酸乙酯(60mLx2)萃取殘留物。在硅石上進行層析，使用20%至80%的乙酸乙酯/己烷梯度洗脫產(chǎn)生標題化合物(l.38g，30%)。LCMS(+APCI)m/z251(M+H)。步驟D:{1-芐基-2-[6-(l-節(jié)氧曱基-3-甲基-lH-吲唑-5-基)-吡嗪-2-基氨基]-乙基}-氨基曱酸叔丁酯將來自步驟C的化合物(0.42g，1.17mmol)、來自步驟B的硼酸5(0.47g,0.58mmol)和在,/水(5mL/2mL)中的碳酸鉀(O.16g，1.17mmo1)的混合物脫氣，置于氮氣下，將其加入至PdC12(dppf)(29mg，0.035mmol)中。在氮氣下在75"C下加熱混合物11小時，然后冷卻，用乙酸乙酯(50mLx2)萃取。在硅石上的層析，使用20%至70%的乙酸乙酯/己烷梯度洗脫產(chǎn)生標題化合物(0.54g，81%)。LCMS(+APCI)m/z579(M+H)。步驟E:(S)-Nl-[6-(3-甲基-lH-吲唑-5-基)-吡喚-2-基]-3-苯基-丙烷-1，2-二胺二鹽酸化物將來自步驟D的化合物(0.53g，0.92mmol)與乙醇(8mL)和2NHC1(8mL)混合，然后在901C下加熱2小時，在50t:下過夜。將混合物蒸發(fā)至干燥，然后通過用具有0.1%TFA的10%至60%乙腈/水的梯度洗脫的反相HPLC來進行純化。將所希望的級分蒸發(fā)至千燥，并用2NHCl/乙醇處理，從而產(chǎn)生HC1鹽。將該鹽在高真空中在78X:下干燥過夜，從而產(chǎn)生標題化合物(0.18g，45%)。LCMS(+APCI)359(M+H)。實施例2<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>實施例3組分濃度(w/v%)式(I)的化合物0.01-2%甲基纖維素4.0%磷酸氬二鈉(無水)0.2%氯化鈉0.5%EDTA二鈉(依地酸二鈉)0.01%聚山梨醇酯800.05°/。氯化苯甲烴銨0.01%氫氧化鈉/鹽酸用于調(diào)整pH至7.3-7.4純水q.s.至調(diào)實施例4組分濃度(w/v%)式(n)的化合物0.01-2%瓜爾膠0.4-6.0%磷酸氬二鈉(無水)0.2°/。氯化鈉0.5%EDTA二鈉(依地酸二鈉)0.01%聚山梨醇酯800.05%氯化苯曱烴銨0.01%氫氧化鈉/鹽酸用于調(diào)整pH至7.3-7.4純水q.s.至畫實施例5<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>已詳細描述了本發(fā)明和其實施方案。然而，本發(fā)明的范圍不希望限定于本說明書中描述的任何方法、制造、物質(zhì)的組合物、化合物、手段、方法和/或步驟的特定實施方案?？蓪_的材料進行各種改性、置換和變化而不背離本發(fā)明的精神和/或本質(zhì)特征。因此，根據(jù)公開內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地理解可按照本發(fā)明的此類相關(guān)實施方案使用后來基本上進行與此處描述的實施方案基本上相同的功能或獲得與之基本上相同的結(jié)果的改性、置換和/或變化。因此，下列權(quán)利要求意圖在其范圍內(nèi)包括此處公開的改性、取代和加工、制造、相關(guān)組合物、化合物、手段、方法和/或步驟的變化。權(quán)利要求1.用于治療青光眼和控制眼內(nèi)壓的眼用藥物組合物，其包含有效量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽其中Y是id="icf0002"file="A2006800482840002C2.tif"wi="25"he="23"top="84"left="67"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>或id="icf0003"file="A2006800482840002C3.tif"wi="31"he="23"top="84"left="120"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>和其中R1、R9獨立地＝H、烷基、氨基、烯基、烷氧基、芳基；R2、R3、R4、R6、R7獨立地＝H、烷基、鹵素、氨基、羥基、氰基、烷氧基；R5、R8獨立地＝H、烷基、經(jīng)胺取代的烷基、經(jīng)羥基取代的烷基、(C＝O)R1、(C＝O)OR1、(C＝O)NR1、芳基；R2和R8可形成5-7元環(huán)；R5和R6可形成5-7元環(huán)；R5和R8可形成5-7元環(huán)；和，它們的藥學上可接受的載體。2.權(quán)利要求l的組合物，其還包含選自下列的化合物眼科可接受的防腐劑、表面活性劑、增稠劑、滲透促進劑、膠凝劑、疏水性基質(zhì)、載體、緩沖劑、氯化鈉和水。3.權(quán)利要求l的組合物，其中除了式(I)的化合物外，所述組合物還包含青光眼治療劑。4.權(quán)利要求3的組合物，其中青光眼治療劑選自p-阻滯劑、前列腺素類似物、碳酸酐酶抑制劑、仏激動刑、縮瞳劑、神經(jīng)保護劑、和它們的混合物。5.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物包含大約0.01%的重量/體積至大約5%的重量/體積的所述化合物。6.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物包含大約0.25%的重量/體積至大約2%的重量/體積的所述化合物。7.控制眼內(nèi)壓的方法，其包括對人或其他哺乳動物的受影響的眼施用治療有效量的用于治療青光眼和控制眼內(nèi)壓的眼用藥物組合物，該組合物包含有效量的式(I)的化合物，或其藥學上可接受的鹽R7其中Y是和其中Rl、R9獨立地-H、烷基、氨基、烯基、烷氧基、芳基；R2、R3、R4、R6、R7獨立地-H、烷基、卣素、氨基、羥基、氰>^、坑氧>^5R5、R8獨立地-H、烷基、經(jīng)胺取代的烷基、經(jīng)羥基取代的烷基、(C-0)R1、(C-0)0R1、(C-0)NR1、芳基;R2和R8可形成5-7元環(huán)；R5和R6可形成5-7元環(huán)；R5和R8可形成5-7元環(huán)；和，它們的藥學上可接受的栽體。8.權(quán)利要求7的方法，其中所述施用包括每天施用1至2滴包含大約0.01%的重量/體積至大約5%的重量/體積的式(1)的化合物的組合物1至4次。9.權(quán)利要求7的方法，其中除了式(I)的化合物外，所述組合物還包含青光眼治療劑。10.權(quán)利要求9的方法，其中青光眼治療劑選自P-阻滯劑、前列腺素類似物、碳酸酐酶抑制劑、(X2激動劑、縮瞳劑、神經(jīng)保護劑、和它們的混合物。11.治療rho激酶介導的疾病或rho激酶介導的病狀的方法，該方法包括對人或其他哺乳動物施用治療有效量的式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中Y是和其中Rl、R9獨立地-H、烷基、氨基、烯基、烷氧基、芳基；R2、R3、R4、R6、R7獨立地-H、烷基、卣素、氨基、羥基、氰基、烷氧基；R5、R8獨立地-H、烷基、經(jīng)胺取代的烷基、經(jīng)羥基取代的烷基、(C=0)R1、(C=0)0R1、(C-0)NR1、芳基;R2和R8可形成5-7元環(huán)；R5和R6可形成5-7元環(huán)；R5和R8可形成5-7元環(huán)；和它們的藥學上可接受的栽體。12.權(quán)利要求11的方法，其中所述施用包括每天施用1至2滴包含大約0.01%的重量/體積至大約5%的重量/體積的式(1)的化合物的組合物1至4次。13.權(quán)利要求ll的方法，其中除了式(I)的化合物外，所述組合物還包含青光眼治療劑。14.權(quán)利要求13的方法，其中青光眼治療劑選自(3-阻滯劑、前列腺素類似物、碳酸酐酶抑制劑、Ot2激動劑、縮瞳劑、神經(jīng)保護劑、和它們的混合物。15.由式(I)表示的化合物，或其藥學上可接受的鹽R7其中Y是和其中Rl、R9獨立地-H、烷基、氨基、烯基、烷氧基、芳基；R2、R3、R4、R6、R7獨立地-H、烷基、卣素、氨基、羥基、氰基、烷氧基；R5、R8獨立地-H、烷基、經(jīng)胺取代的烷基、經(jīng)羥基取代的烷基、(C-0)R1、(C-0)0R1、(C-0)NR1、芳基；R2和R8可形成5-7元環(huán)；R5和R6可形成5-7元環(huán)；R5和R8可形成5-7元環(huán)。全文摘要在此公開了使用(吲唑-5-基)-吡嗪和(1，3-二氫-吲哚-2-酮)-吡嗪治療rho激酶介導的疾病和rho激酶介導的病癥(包括控制眼內(nèi)壓和治療青光眼)的方法。在此公開了用于治療眼疾病例如青光眼和另外地用于控制眼內(nèi)壓的眼用藥物組合物，該組合物包含有效量的(吲唑-5-基)-吡嗪和(1，3-二氫-吲哚-2-酮)-吡嗪。文檔編號C07D403/02GK101340912SQ200680048284公開日2009年1月7日申請日期2006年12月19日優(yōu)先權(quán)日2005年12月22日發(fā)明者A·魯辛科,J·A·梅,M·R·赫爾伯格,N·A·沙利夫,陳煌興申請人:愛爾康研究有限公司