專(zhuān)利名稱(chēng)：一種芪族化合物及含有其的葡萄植物提取物及提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從葡萄植物中提取的芪族化合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
白藜,醇(resveratrol )，化學(xué)結(jié)構(gòu)為3, 4，， 5-三輕基芪，為反 式二苯乙烯類(lèi)(即茂，stilbene)化合物，其結(jié)構(gòu)如下
葡萄素(viniferin)，是兩分子的白藜蘆醇自由結(jié)合而形成，其結(jié) 構(gòu)如下
將白藜,醇、葡萄素及3, 4，， 5-三羥基芪的低聚體定義為芪族 化合物，它們具有多樣的生物學(xué)活性，例如抗氧化、抑制腫瘤的形成 和發(fā)展、改善微循環(huán)以及對(duì)休克的治療作用等，具有防止血栓形成、 保護(hù)肝臟和清除自由基等功效，對(duì)老年人的退化疾病如帕金森癥、癡 呆癥、早老性癡呆、風(fēng)濕性疾病等都有較好的預(yù)防和治療作用；在化
妝品方面，它們具有祛除黃褐斑和增白的功效；對(duì)脂類(lèi)代謝和血小板 的凝固亦有影響，可以防治冠心病和動(dòng)脈粥樣硬化等疾病。
近年來(lái)，人們發(fā)現(xiàn)天然植物虎杖中含有大量的白藜,醇，從中提 取白黎,醇并且取得了可喜的進(jìn)展，如公開(kāi)號(hào)為CN1341587A、名稱(chēng) 為"一種從虎杖中制備白黎蘆醇的方法"的專(zhuān)利申請(qǐng)中便公開(kāi)了 一種 將虎杖作為原料來(lái)提取白黎蘆醇的方法，但由于其原料虎杖為中藥， 原料來(lái)源較少，從中提取白黎，醇存在與藥爭(zhēng)源。據(jù)報(bào)道花生根中也 含有白黎蘆醇，雖然含量比虎杖中要低，但原料來(lái)源豐富，價(jià)格低廉。 在公開(kāi)號(hào)為CN1709846A,名稱(chēng)為"花生根提取白黎蘆醇的生產(chǎn)方法" 的專(zhuān)利申請(qǐng)中便公開(kāi)了將花生根經(jīng)有機(jī)溶劑提取濃縮后經(jīng)高壓層析 洗脫、精制得白黎，醇產(chǎn)品的工藝流程。
上述專(zhuān)利文獻(xiàn)中的白黎,醇提取工藝主要是經(jīng)過(guò)有機(jī)溶劑直接 浸泡萃取后經(jīng)高壓硅膠柱層析等步驟提取而成，其分離效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如 大孔吸附樹(shù)脂處理的效果。
而且，目前也沒(méi)有從葡萄植物中提取芪族化合物的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供一種從葡萄植物中提取的芪(st他ene) 族化合物。
本發(fā)明所述的芪族化合物，是以化學(xué)結(jié)構(gòu)為3, 4，， 5-三羥基芪 為單體的聚合物，即以反式二苯乙烯為單體的聚合物，其結(jié)構(gòu)如下
<formula>formula see original document page 5</formula>
當(dāng)n=l時(shí)，化學(xué)結(jié)構(gòu)為3， 4，， 5-三羥基芪，為反式二笨乙烯 即白藜蘆醇(萌eratrol),其結(jié)構(gòu)如下<formula>formula see original document page 6</formula>當(dāng)n-2時(shí)，是兩分子的3， 4，， 5-三羥基芪自由結(jié)合而形成，即 葡萄素(viniferin),其結(jié)構(gòu)如下<formula>formula see original document page 6</formula>當(dāng)n-3時(shí)，是三分子的3， 4，， 5-三羥基芪自由結(jié)合而形成，為 3, 4，， 5-三羥基芪的三聚體。<formula>formula see original document page 6</formula>當(dāng)11=4時(shí)，是四分子的3， 4，， 5-三羥基芪自由結(jié)合而形成，為 3, 4，， 5-三羥基芙的四聚體。
n=5, 6, ......Ut類(lèi)4侏。
本發(fā)明所述的芪族化合物，從葡萄植物中提取得到，提取物為茶 褐色、褐色或類(lèi)白色、白色，粉末狀，味苦澀，含有白藜,醇、葡萄 素、3, 4，， 5-三羥基芪的三聚體和/或3, 4，， 5-三羥基芪的四聚體， 其中白藜蘆醇和/或葡萄素的重量含量為1%以上
本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方案為葡萄植物提取物中白藜蘆醇和/或葡萄 素的重量含量為10%以上
本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的方案為葡萄植物提取物中白藜蘆醇和/或葡
萄素的重量含量為90%以上。
本發(fā)明同時(shí)提供了 一種從葡萄植物中提取茂族化合物的方法。 其工藝步驟為
前處理將干制后的原料粉碎，過(guò)篩；
提取將處理后的原料置于提取溶媒中加熱回流提取2次，體積 配比分別為原料的8-10倍、5-7倍，提取時(shí)間為一個(gè)小時(shí)以上，提取 溫度為50-60。C，合并提取液，濃縮、離心過(guò)濾得稠膏，備用，干燥 后，產(chǎn)物中白藜，醇和/或葡萄素的重量含量為1%以上；
純化1)、向膏狀的稠膏中加入l-2倍重量的50%乙醇，稀釋、 混勻；2)、將稀釋后的溶液通過(guò)柱層析，用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行吸附； 3 )、層析洗脫采用濃度遞增的乙醇-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相層析洗脫；4 )、 收集或分別收集含有白藜,醇和/或葡萄素和/或其它聚體洗脫部分， 干燥后，產(chǎn)物中白藜蘆醇和/或葡萄素的重量含量為10%以上；
精制將所收集到的洗脫液，采用氧化鋁脫色、靜置、濃縮、反 復(fù)重結(jié)晶，干燥，產(chǎn)物中白藜蘆醇和/或葡萄素的重量含量為90%以 上。
采用本發(fā)明方法提取純化芪族化合物，原料為植物葡萄(Vitis Vinifera)的新鮮或干制后的葡萄藤和/或葉和/或根莖。
本發(fā)明方法中所述4是取溶^ 某為水、曱醇、乙醇或丙酮，所述曱醇 或乙醇的重量濃度為50%~95%;優(yōu)化選擇，所述曱醇或乙醇的重量 濃度為60%~80%。
本發(fā)明所述柱層析樹(shù)脂選自型號(hào)為DlOl、 D102、 AB-8或HP-20 型的大孔吸附樹(shù)脂。
本發(fā)明方法中所述遞增濃度梯度的乙醇-水系統(tǒng)中所指的梯度濃 度依次為20-30%, 30-60%, 60-95%。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)
從葡萄藤植物中提取出了芪族化合物，分離出單體、二聚體、三 聚體等等；
以葡萄植物為原料，是對(duì)葡萄種植業(yè)的產(chǎn)物的廢物利用； 工藝簡(jiǎn)單，適于工業(yè)化生產(chǎn)。


圖1為純度為98%的白藜蘆醇的HPLC圖譜。
圖2為白藜,醇和葡萄素的HPLC圖譜。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
1) 前處理將陰干或曬干后的原料粉碎，過(guò)篩；
2) 提取將處理后的原料置于純凈水中加熱回流提取2次，體 積配比分別為原料的8倍、5倍，提取時(shí)間比分別為3: 2， ^是取溫度 為5(TC,合并提取液，濃縮、離心過(guò)濾得稠膏；
3) 將稠膏干燥后，產(chǎn)物中白藜,醇含量為0.66%,葡萄素的重 量含量為0.45%;
實(shí)施例2
1) 前處理將陰千或曬干后的原剩-#分碎，過(guò)篩；
2) 提取將處理后的原料置于50%曱醇中加熱回流提取2次， 體積配比分別為原料的8倍、5倍，提取時(shí)間比分別為3: 2,提取溫 度為5(TC,合并提取液，濃縮、離心過(guò)濾得稠膏，備用；
3 )純化①向膏狀的稠膏中加入1倍重量的50%乙醇，稀釋、 混勻；②將稀釋后的溶液通過(guò)柱層析，用D101樹(shù)脂進(jìn)行吸附；③層 析洗脫采用濃度遞增的乙醇-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相層析洗脫，濃度分別 為20%， 30%, 60%; 收集60%的洗脫部分，干燥后，產(chǎn)物中白藜 ，醇含量為5.6%，葡萄素的重量含量為6.1%;
4) 精制將所收集到的60%洗脫液，采用氧化鋁脫色、靜置、 濃縮、反復(fù)重結(jié)晶，干燥后，白藜蘆醇含量為41.5%,葡萄素含量為 51.1%。
實(shí)施例3
l)前處理將干制后的原料粉碎，過(guò)篩；2 )提取將處理后的原料置于70%乙醇中加熱回流提取2次， 體積配比分別為原料的10倍、7倍，提取時(shí)間比分別為3:2，提取溫 度為55。C,合并提取液，濃縮、離心過(guò)濾得稠膏，備用；
3) 純化①向膏狀的稠膏中加入2倍重量的50%乙醇，稀釋、 混勻；②將稀釋后的溶液通過(guò)柱層析，用D101樹(shù)脂進(jìn)行吸附；③層 析洗脫采用濃度遞增的乙醇-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相層析洗脫，濃度分別 為30%， 60%, 95%; 收集60%的洗脫部分，干燥后，產(chǎn)品中葡萄 素含量為15.5%;
4) 精制將所收集到的60%洗脫液，采用氧化鋁脫色、靜置、 濃縮、反復(fù)重結(jié)晶，干燥后，葡萄素含量為95.5%。
實(shí)施例4
1) 前處理將陰干或曬干后的原料粉碎，過(guò)篩；
2) 提取將處理后的原料置于95%乙醇中加熱回流提取2次， 體積配比分別為原料的8倍、7倍，提取時(shí)間比分別為3: 2,提取溫 度為55。C,合并提取液，濃縮、離心過(guò)濾得稠膏，備用；
3) 純化①向膏狀的稠膏中加入2倍重量的50%乙醇，稀釋、 混勻；②將稀釋后的溶液通過(guò)柱層析，用D102樹(shù)脂進(jìn)行吸附；③層 析洗脫采用濃度遞增的乙醇-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相層析洗脫,濃度分別 為25%, 50%， 80%;④收集80呢的洗脫部分，干燥后，產(chǎn)品中三聚 體的芘族化合物含量為13.5%;
4) 精制將所收集到的80%洗脫液，采用氧化鋁脫色、靜置、 濃縮、反復(fù)重結(jié)晶，干燥后，產(chǎn)品中三聚體的芪族化合物含量93.1%。 實(shí)施例5
1) 前處理將曬干后的原料賴(lài)、淬，過(guò)篩；
2) 提取將處理后的原料置于丙酮中加熱回流提取2次，體積 配比分別為原料的8倍、7倍，提取時(shí)間比分別為3: 2，提取溫度為 60°C,合并提取液，濃縮、離心過(guò)濾得稠膏，備用；
3) 純化①向膏狀的稠膏中加入2倍重量的50%乙醇，稀釋、
混勻；②將稀釋后的溶液通過(guò)柱層析，用AB-8型樹(shù)脂進(jìn)行吸附；③ 層析洗脫釆用濃度遞增的乙醇-水系統(tǒng)作為流動(dòng)相層析洗脫,濃度分 別為30%， 60%, 90%;④收集三次的洗脫部分，干燥后，產(chǎn)物中白 藜，醇的含量為5.3%、葡萄素的含量為6.7%、四聚體芪族化合物的 含量為10.3%;
4)精制將所收集到的洗脫液，采用氧化鋁脫色、靜置、濃縮、 反復(fù)重結(jié)晶，干燥后，產(chǎn)物中白藜，醇的含量為31.3%、葡萄素的含 量為44.7%、四聚體芪族化合物的含量為20.3%。
純度為98%的白藜,醇的HPLC圖譜如圖1所示。 白藜，醇和葡萄素混合的HPLC圖語(yǔ)如圖2所示。 最后應(yīng)說(shuō)明的是以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明而并非限制本發(fā) 明所描述的技術(shù)方案；因此，盡管本說(shuō)明書(shū)參照上述的各個(gè)實(shí)施例對(duì) 本發(fā)明已進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，但是，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解， 仍然可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行修改或等同替換；而一切不脫離本發(fā)明的精神 和范圍的技術(shù)方案及其改進(jìn)，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍 中。
權(quán)利要求
1、一種芪族化合物，其特征在于它具有下列分子結(jié)構(gòu)id="icf0001" file="S2007103020045C00011.gif" wi="92" he="37" top="5" left = "5" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>其中，n＝1，2，3，……。
2、 一種含有權(quán)利要求1所述的芪族化合物的葡萄植物提取物， 其特征在于所述提取物為茶褐色、褐色或類(lèi)白色、白色，粉末狀， 味苦澀，含有白藜蘆醇和/或葡萄素和/或3， 4，， 5-三羥基芪的三聚體 和/或3， 4，， 5-三羥基芪的四聚體，其中白藜蘆醇和/或葡萄素的重量 含量為1%以上。
3、 如權(quán)利要求2所述的含有芪族化合物的葡萄植物提取物，其 特征在于所述提取物中白藜F醇和/或葡萄素的重量含量為10%以 上。
4、 如權(quán)利要求2所述的含有芪族化合物的葡萄植物提取物，其 特征在于所述提取物中白藜蘆醇和/或葡萄素的重量含量為90%以 上。
5、 一種如權(quán)利要求2-4之任一所述的含有芪族化合物的葡萄植物 提取物的制備方法，包括如下步驟(1) 前處理將干制后的葡萄植物原料粉碎，過(guò)篩；(2) 提取將處理后的原料置于提取溶媒中加熱回流提取2次， 體積配比分別為原料的8-10倍、5-7倍，提取時(shí)間比分別為 3:2,時(shí)間為一個(gè)小時(shí)或更多，提取溫度為50-60°C,合并提 取液，濃縮、離心過(guò)濾得稠膏，備用，千燥后，產(chǎn)物中白藜 ,醇和/或葡萄素的重量含量為1%以上；(3) 純化1)、向膏狀的稠膏中加入1-2倍重量的50%乙醇，稀 釋、混勻；2)、將稀釋后的溶液通過(guò)柱層析，用大孔吸附樹(shù) 脂進(jìn)行吸附；3)、層析洗脫采用濃度遞增的乙醇-水系統(tǒng)作 為流動(dòng)相層析洗脫；4)、收集或分別收集含有白藜蘆醇和/ 或葡萄素和/或其它聚體的洗脫部分，干燥后，產(chǎn)物中白藜蘆 醇和/或葡萄素的重量含量為10%以上； (4)精制將所收集到的洗脫液，采用氧化鋁脫色、靜置、濃縮、 反復(fù)重結(jié)晶，干燥，產(chǎn)物中白藜蘆醇和/或葡萄素的重量含量 為90%以上。
6、 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述的原料為 新鮮或干制后的葡萄藤和/或葉和/或根莖。
7、 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述提取溶媒 為水、曱醇、乙醇或丙酮。
8、 如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于所述曱醇或乙 醇的重量濃度為50% ~ 95%。
9、 如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于所述甲醇或乙 醇的重量濃度為60% ~ 80%。
10、 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述柱層析樹(shù) 脂型號(hào)為D101、 D102、 AB-8或HP-20型的大孔吸附樹(shù)脂。
11、 如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述遞增濃度 梯度的乙醇-水系統(tǒng)中的梯度濃度依次為20-30%， 30-60%, 60_95%。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種以3，4’，5-三羥基芪為單體進(jìn)行聚合的芪族化合物及含有其的葡萄植物提取物及提取物制備方法，提取物為茶褐色、褐色或者類(lèi)白色、白色，粉末狀，味苦澀，含有白藜蘆醇和/或葡萄素和/或3，4’，5-三羥基芪的三聚體和/或3，4’，5-三羥基芪的四聚體，其中白藜蘆醇和/或葡萄素的重量含量為1％以上。所述制備方法，以葡萄植物為原料，以水、甲醇、乙醇或丙酮作為提取溶媒，經(jīng)提取、濃縮、柱層析、重結(jié)晶、干燥，得到含有芪族化合物的葡萄植物提取物。本發(fā)明制備方法工藝簡(jiǎn)單，而且，以葡萄藤和/或葉和/或根莖為原料，是對(duì)葡萄種植業(yè)的產(chǎn)物的廢物利用。
文檔編號(hào)C07C39/00GK101182286SQ20071030200
公開(kāi)日2008年5月21日 申請(qǐng)日期2007年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月19日
發(fā)明者孫步祥, 易永基, 湯凌志, 王智慧, 胡厚才 申請(qǐng)人:桂林萊茵生物科技股份有限公司