專利名稱：：一種牦牛骨肽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域，特別是動(dòng)物活性肽；還涉及其制備方法。二
背景技術(shù)：
：骨肽是從動(dòng)物骨內(nèi)提取出的具有生物活性的功能肽。研究表明，骨肽具有除補(bǔ)鈣及營養(yǎng)功能之外的廣泛的生理調(diào)節(jié)功能，如降血壓、降低膽固醇，促進(jìn)免疫以及促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，且其在體內(nèi)的消化吸收性能明顯優(yōu)于單個(gè)氨基酸。隨著人們對(duì)于自身健康意識(shí)的不斷增強(qiáng)，人們逐漸傾向于非藥物療法，而隨著對(duì)生物活性肽的作用機(jī)制、生理效果以及制備方法的研究深入，食用動(dòng)物骨生產(chǎn)功能肽將具有良好的應(yīng)用前景。我國是擁有牦牛數(shù)量最多的國家，約有1370多萬頭，占世界牦?？倲?shù)的90%以上，大都繁衍生息在我國藏區(qū)及周圍海拔3000m以上的高寒地，常稱為"高原之舟"。牦牛由于其獨(dú)特的高寒生存環(huán)境，使得牦牛體內(nèi)的功能性營養(yǎng)物質(zhì)含量要比普通肉牛豐富得多，如下牦牛肉與其他牛肉營養(yǎng)成分對(duì)比表<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>而研究表明，牦牛骨內(nèi)的鈣鹽及蛋白含量也十分的豐富。但目前尚沒有提取牦牛骨肽制品，也沒有較好的制備方法以滿足消費(fèi)需求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是克服上述不足問題，提供一種牦牛骨肽，蛋白含量高，保健功能顯著；另外還提供其制備方法，簡單易操作，便于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的所采用的技術(shù)方案是一種牦牛骨肽，蛋白含量》90%，分子量為100-2000D。所述牦牛骨肽的制備方法，具體工藝為(1)制備骨湯取牦牛骨清洗除臟后將牦牛骨進(jìn)行破碎，將牦牛骨破碎至直徑小于3cm的骨塊；稱取單位重量牦牛骨塊，放入容器，牦牛骨加水在壓力為0.1-0.5MPa，溫度為100-12(TC條件下蒸煮，蒸煮8小時(shí)后，過濾進(jìn)行固液分離，將牦牛骨及部分固體分離出去；離心分離固液分，分離后的混合液再進(jìn)行油水分離，將油層脂肪除去，將水層骨湯分離至容器，對(duì)骨湯的固形物含量進(jìn)行測定得固含量值，并計(jì)算骨湯中固形物重量；(2)酶解骨湯對(duì)分離后的骨湯進(jìn)行酶解，加酶量為骨湯中固形物重量的0.1-0.5%，酶解溫度為45-65°C，酶解時(shí)間為8-9小時(shí)，ffl值為7;酶解后進(jìn)行酶滅活，條件是溫度9(TC-95。C下水浴10-15分鐘；滅活后，將酶解液進(jìn)行超濾；超濾后將溶液進(jìn)行噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為150°C-160°C。噴霧后得牦牛骨多肽粉。所述加水蒸煮采用骨塊中添加蒸餾水，使水基本沒過骨頭，骨塊與水重量比l:1.2-1:1.5。所述過濾采用管道過濾器進(jìn)行固液分離，濾網(wǎng)濾徑為100目；離心分離固液份采用蝶式離心機(jī)進(jìn)行分離。所述酶解用酶為復(fù)合蛋白酶、復(fù)合風(fēng)味酶、堿性蛋白酶、木管蛋白酶PSM500、肽酶R或胰蛋白酶中的一種或兩種。所述酶解用酶為復(fù)合蛋白酶與復(fù)合風(fēng)味酶按1:2的比例配制而成。所述酶解用酶為堿性蛋白酶與復(fù)合風(fēng)味酶按1:2的比例配制而成。所述酶解用酶為木管蛋白酶PSM500與復(fù)合風(fēng)味酶按1:2的比例配制而成。所述酶解用酶為胰蛋白酶與復(fù)合風(fēng)味酶按1:2的比例配制而成。所述酶解用酶為木管蛋白酶PSM500與肽酶R按1:2的比例配制而成。本發(fā)明成功的從牦牛骨中提取出牦牛骨肽，其蛋白質(zhì)含量高，具有抗氧化、淬滅自由基、螯合金屬離子、促進(jìn)鈣吸收及降低血壓、降低血脂及降低血糖的功能。而且制法簡單，易操作，適合于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，滿足消費(fèi)需求。四圖1為本發(fā)明牦牛骨肽的測序報(bào)告。五具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于具體實(shí)施例。實(shí)施例1(1)制備骨湯取牦牛骨，進(jìn)行清洗，常溫常壓下，用水清洗,除去表面臟污；將牦牛骨進(jìn)行破碎，使用碎骨機(jī)，將牦牛骨破碎至直徑小于3cm的骨塊；稱取單位重量牦牛骨，放入容器，添加蒸餾水，使水基本沒過骨頭，加水比1:1.2-1:1.5;對(duì)牦牛骨及水進(jìn)行高溫高壓蒸煮，壓力為0.1-0.5MPa，溫度為100-120°C，蒸煮時(shí)間8小時(shí)；蒸煮后，使用管道過濾器進(jìn)行固液分離，濾網(wǎng)濾徑為100目，將牦牛骨及部分固體分離出去；使用蝶式離心機(jī)對(duì)固液分分離后的混合液進(jìn)行油水分離，將油層脂肪除去，將水層骨湯分離至容器；用固含量測定儀對(duì)骨湯的固形物含量進(jìn)行測定，得固含量值，并計(jì)算骨湯中固形物重量；(2)酶解骨湯采用復(fù)合蛋白酶對(duì)骨湯進(jìn)行酶解，加酶量為骨湯中固形物重量的0.1-0.5%，酶解溫度為45-65°C，酶解時(shí)間為8小時(shí)，PH值為7;酶解后進(jìn)行酶滅活，條件是溫度9(TC下水浴10-15分鐘；滅活后，將酶解液進(jìn)行超濾；超濾后將溶液進(jìn)行噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為150'C。噴霧后得牦牛骨多肽粉。實(shí)施例2-9按照實(shí)施例1所述的制備方法制備牦牛骨肽，其中酶解所使用的酶的配比見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>復(fù)合蛋白酶(P)，復(fù)合風(fēng)味酶(F)，堿性蛋白酶(A)，木管蛋白酶PSM500(木)，肽酶R(P印)，胰蛋白酶(胰)，全部由諾維信公司購買。上述實(shí)施例l-9所得牦牛骨肽經(jīng)測試，蛋白含量均》90%，分子量為100-2000D，并具有抗氧化、淬滅自由基、螯合金屬離子、促進(jìn)轉(zhuǎn)吸收及降低血壓、降低血脂及降低血糖的功能。實(shí)施例l-9所得產(chǎn)品物狀指標(biāo)如下:<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>實(shí)施例1-9所得產(chǎn)品達(dá)到下述理化指標(biāo):<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>由表l可見，本發(fā)明牦牛骨肽具有優(yōu)良的抗氧化效果。表2:淬滅自由基研究結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由表2可見本發(fā)明牦牛骨肽具有淬滅自由基功能。表3:牦牛骨肽對(duì)金屬離子的螯合能力<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>由表3可見本發(fā)明牦牛骨肽具有表4:牦牛骨肽對(duì)鈣的吸收能力(用火焰原子分光光度法測得)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>Ca2+的含量(g/100g)7.194Ca2+結(jié)合量100制換算100由表4可見，本發(fā)明牦牛骨肽對(duì)鈣的吸收能力較高。表5:牦牛骨肽對(duì)血脂的調(diào)節(jié)(以小鼠進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn))服用牦牛骨肽前后血脂、脂蛋白LP(a)和載脂蛋白變化<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL)、脂蛋白(LPa)、AI載脂蛋白(APOAI)、B100載脂蛋白(APOB100)表6:牦牛骨肽對(duì)膽固醇的調(diào)節(jié)牦牛骨肽、消膽胺和纖維素降鼠膽固醇的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由表6可見，本發(fā)明牦牛骨肽具有降低膽固醇的功效，且效果顯著。權(quán)利要求1、一種牦牛骨肽，其特征是蛋白含量≥90％，分子量為100-2000D。2、牦牛骨肽的制備方法，其特征是具體工藝為(1)制備骨湯取牦牛骨清洗除臟后將牦牛骨進(jìn)行破碎，將牦牛骨破碎至直徑小于3cm的骨塊；稱取單位重量牦牛骨塊，放入容器，牦牛骨加水在壓力為O.l-0.5MPa，溫度為100-12(TC條件下蒸煮，蒸煮8小時(shí)后，過濾進(jìn)行固液分離，將牦牛骨及部分固體分離出去；離心分離固液分，分離后的混合液再進(jìn)行油水分離，將油層脂肪除去，將水層骨湯分離至容器，對(duì)骨湯的固形物含量進(jìn)行測定得固含量值，并計(jì)算骨湯中固形物重量；(2)酶解骨湯對(duì)分離后的骨湯進(jìn)行酶解，加酶量為骨湯中固形物重量的0.1-0.5%，酶解溫度為45-65。C，酶解時(shí)間為8-9小時(shí)，PH值為7;酶解后進(jìn)行酶滅活，條件是溫度9(TC-95'C下水浴10-15分鐘；滅活后，將酶解液進(jìn)行超濾；超濾后將溶液進(jìn)行噴霧干燥，進(jìn)風(fēng)溫度為150°C-160°C。噴霧后得牦牛骨多肽粉。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的牦牛骨肽的制備方法，其特征是加水蒸煮采用骨塊中添加蒸餾水，使水基本沒過骨頭，骨塊與水重量比h1.2-1:1.5。4、根據(jù)權(quán)利要求2所述的粍牛骨肽的制備方法，其特征是過濾采用管道過濾器進(jìn)行固液分離，濾網(wǎng)濾徑為100目以上；離心分離固液分采用蝶式離心機(jī)進(jìn)行分離。5、根據(jù)權(quán)利要求2-4任一所述的牦牛骨肽的制備方法，其特征是酶解用酶為復(fù)合蛋白酶、復(fù)合風(fēng)味酶、堿性蛋白酶、木管蛋白酶PSM500、肽酶R或胰蛋白酶中的一種或兩種。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的牦牛骨肽的制備方法，其特征是酶解用酶為復(fù)合蛋白酶與復(fù)合風(fēng)味酶按1:2的比例配制而成。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述的牦牛骨肽的制備方法，其特征是酶解用酶為堿性蛋白酶與復(fù)合風(fēng)味酶按1:2的比例配制而成。8、根據(jù)權(quán)利要求5所述的牦牛骨肽的制備方法，其特征是酶解用酶為木管蛋白酶PSM500與復(fù)合風(fēng)味酶按1:2的比例配制而成。9、根據(jù)權(quán)利要求5所述的牦牛骨肽的制備方法，其特征是酶解用酶為胰蛋白酶與復(fù)合風(fēng)味酶按l:2的比例配制而成。10、根據(jù)權(quán)利要求5所述的牦牛骨肽的制備方法，其特征是酶解用酶為木管蛋白酶PSM500與肽酶R按1:2的比例配制而成。全文摘要本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域，特別是動(dòng)物活性肽。一種牦牛骨肽，蛋白含量≥90％，分子量為100-2000D。本發(fā)明成功的從牦牛骨中提取出牦牛骨肽，其蛋白質(zhì)含量高，具有抗氧化、淬滅自由基、螯合金屬離子、促進(jìn)鈣吸收及降低血壓、降低血脂及降低血糖的功能。而且制法簡單，易操作，適合于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，滿足消費(fèi)需求。文檔編號(hào)C07K7/00GK101418037SQ20081022882公開日2009年4月29日申請(qǐng)日期2008年11月14日優(yōu)先權(quán)日2008年11月14日發(fā)明者華子昂申請(qǐng)人:華子昂