專利名稱：：伐馬洛韋多形體的制作方法伐馬洛韋多形體相關(guān)申請(qǐng)的交互參考本申請(qǐng)依據(jù)35U.S.C.§119(e)(1)，要求2007年9月21日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?0/994，719的權(quán)益，所述申請(qǐng)通過全文引用結(jié)合于本文。1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及結(jié)晶形式的伐馬洛韋(valomaciclovir)、用于制備結(jié)晶形式的伐馬洛韋的方法、其藥用組合物及其使用方法。2.
背景技術(shù)：
：化合物以不同結(jié)晶結(jié)構(gòu)存在的能力被稱為多晶形現(xiàn)象。這些不同的結(jié)晶形式被稱為“多形體修飾”或“多形體(polymorphs)”。雖然多形體具有相同的化學(xué)組成，但是它們?cè)谕庥^(packing)和幾何排列上不同，并且表現(xiàn)出不同的物理性質(zhì)，諸如熔點(diǎn)、形狀、顏色、密度、硬度、可塑性、穩(wěn)定性、溶解性等(“藥用固體的多形性”中的多形性的理論禾口起源(TheoryandOriginofPolymorphismin"PolymorphisminPharmaceuticalSolids"(1999)ISBN:0-8247_0237)。伐馬洛韋[L-纈氨酸，(3R)-3[(2_氨基_1，6_二氫_6_氧代_9H_嘌呤_9_基)甲基]-4-[(1-氧代十八烷基)氧基]丁基酯]，也由USAN稱為伐馬洛韋硬脂酸鹽，或所有者編碼為EPB-348、MIV-606或RP-606(圖1A)，是一種強(qiáng)力廣譜抗皰疹藥無(wú)環(huán)鳥苷衍生物H2G(圖1B)的二酯前藥(纈氨酸和硬脂酸)。H2G具有強(qiáng)力抗人水痘帶狀皰疹病毒(VZV)、愛潑斯坦_巴爾(Epstein-Barr)病毒(EBV)、人類皰疹病毒_6(HHV-6)、HSV_1和HSV-2的活性。美國(guó)專利號(hào)5，869，493描述伐馬洛韋的制備和活性。伐馬洛韋已經(jīng)被開發(fā)成口服用抗帶狀皰疹(shingles)(帶狀皰疹(zoster))和其它病毒性疾病的活性劑。如在幾項(xiàng)I期人體臨床研究中所顯示的，伐馬洛韋在多次給藥后總?cè)談┝孔罡哌_(dá)6.0g是安全的并且耐受良好。II期研究(M98-829)，使用250、500和750mg的伐馬洛韋懸浮劑，每天2次(BID)，給予帶狀皰疹患者7天，用阿昔洛韋作對(duì)照，結(jié)果提供對(duì)于帶狀皰疹損傷愈合的概念證明(proof-of-conc印t)和在皰疹后神經(jīng)痛患者中進(jìn)一步使用伐馬洛韋的基礎(chǔ)。伐馬洛韋包含鳥嘌呤部分、氨基酸酯和長(zhǎng)鏈脂肪酸酯。這些成分中的每一個(gè)已經(jīng)與各種制劑困難相關(guān)聯(lián)，而伐馬洛韋也不例外。已公布的專利申請(qǐng)(如，國(guó)際公布號(hào)TO98/34917,W000/08025和W003/02564)和美國(guó)專利號(hào)6，184，376描述用于伐馬洛韋的多種合成路徑。然而，這些合成路徑的在先技術(shù)傾向于產(chǎn)生非結(jié)晶形物質(zhì)、非結(jié)晶形和晶質(zhì)原料的混合物或具有差的特征性部分排列規(guī)則的物質(zhì)的混合物。所產(chǎn)生的物質(zhì)常常經(jīng)歷非常差的流動(dòng)性和凝聚、明顯地妨礙處理和加工。前期的使用伐馬洛韋的I期和II期臨床試用采用因?yàn)樵系奈锢硇再|(zhì)避免處理和加工困難的懸浮液。然而，懸浮液并不是臨床優(yōu)選的制劑，因?yàn)樗鼈儾灰子诮o藥，特別是給予占主要患者群體的老年患者作為帶狀皰疹藥物。因此，存在對(duì)于穩(wěn)定的結(jié)晶形式的伐馬洛韋和用于生產(chǎn)這些穩(wěn)定形式的可重復(fù)的方法的需求。發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明，在第一方面，通過提供包括多形體A富含的伐馬洛韋的穩(wěn)定結(jié)晶形式的伐馬洛韋，滿足這些和其它需求。多形體A為伐馬洛韋的最為晶質(zhì)的和在熱力學(xué)上最穩(wěn)定的多形體。在第二方面，提供包含穩(wěn)定的結(jié)晶形式的伐馬洛韋和藥學(xué)上適配的載體或稀釋劑的藥用組合物。在第三方面，提供可重復(fù)的制備穩(wěn)定結(jié)晶形式的伐馬洛韋的方法程。該方法包括通過加熱至適當(dāng)?shù)膬?nèi)部溫度，將伐馬洛韋溶解于低級(jí)烷醇溶劑或低級(jí)烷醇的混合溶劑中，在邊攪拌下冷卻，以實(shí)現(xiàn)伐馬洛韋的基本結(jié)晶化和收集結(jié)晶產(chǎn)物。在第四方面，本發(fā)明提供在患者中治療病毒性感染的方法，該方法包括給予患者有效治療量的穩(wěn)定的結(jié)晶形式的伐馬洛韋或其藥用組合物。使用本發(fā)明的方法可治療的病毒性感染，由以下病毒引起，例如且不限于，水痘帶狀皰疹病毒、單純皰疹病毒(HSV-1和HSV-2)、人類皰疹病毒(HHV-6、HHV-7和HHV-8)、愛潑斯坦巴爾病毒、巨細(xì)胞病毒和用V。圖的簡(jiǎn)述圖1顯示伐馬洛韋(A)和H2G(B)的結(jié)構(gòu)。圖2顯示伐馬洛韋多形體A的特征性X-射線衍射圖。圖3顯示伐馬洛韋多形體A的特征性DSC溫度記錄圖。圖4A和4B顯示用于制備伐馬洛韋的合成路徑。圖5A-D顯示在制備伐馬洛韋中的最后步驟的變化。圖5E顯示樣品批號(hào)45-548-YS-00和12_03_011的粉末XRD圖。圖5F顯示樣品批號(hào)45-548-YS-00的DSC圖。圖5G顯示樣品批號(hào)2-03-011H的DSC圖。圖5H顯示伐馬洛韋樣品批號(hào)12-03-018、06-01159-2和146756的DSC圖。圖51顯示伐馬洛韋樣品批號(hào)12-03-018、06-01159-2和146756的粉末XRD圖。圖6顯示在再結(jié)晶過程中的冷卻曲線。圖7顯示再結(jié)晶的伐馬洛韋樣品的X-射線衍射圖。圖8顯示再結(jié)晶的伐馬洛韋樣品的DSC溫度記錄圖。圖9顯示10-100g批次的多形體A的HPLC重疊繪圖。圖10A-D顯示在多形體篩選研究中的再結(jié)晶參數(shù)表。圖11A顯示A組的衍射特征。圖11B顯示A組的衍射特征。圖12A顯示B1組的衍射特征。圖12B顯示B1組的衍射特征。圖13A顯示形式B1(批號(hào)12-03-011)的可變溫度XRD特征。圖13B顯示形式B1(批號(hào)12-03-011)的可變熱特性。圖14A顯示B2組的衍射特征。圖14B顯示B2組的熱特性。圖15A顯示B2組的循環(huán)熱特性。圖15B顯示B2組的循環(huán)熱特性。圖16A顯示B3組的衍射特征。圖16B顯示B3組的衍射特征。圖17A顯示B3組的循環(huán)熱特性。圖17B顯示B3組的循環(huán)熱特性。圖18A顯示B4組的衍射特征。圖18B顯示B4組的熱特性。圖19A顯示B4組的循環(huán)熱特性。圖19B顯示B4組的循環(huán)熱特性。圖20A顯示C組的衍射特征。圖20B顯示C組的熱特性。發(fā)明詳述鑒于以下定義和注釋可更好地理解本說明書。除了在操作實(shí)施例中，或另有所指，所有用于本說明書和權(quán)利要求書中表示組分、反應(yīng)條件等的量的數(shù)字，在所有情況下應(yīng)該理解為是被術(shù)語(yǔ)“約”修飾的。貫穿本說明書，單詞“包含(comprise)”或其變化，諸如含有(comprises)或包括(comprising)，應(yīng)該理解為意味著包含規(guī)定的要素、整數(shù)或步驟，或要素、整數(shù)或步驟的組合，但不排除任何其它要素、整數(shù)或步驟，或要素、整數(shù)或步驟的組合。“藥學(xué)卜.可梓等的鹽”指具有所需母體化合物的藥理活件的伐馬洛韋的鹽。這樣的鹽包括(1)酸加成鹽，與無(wú)機(jī)酸，諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的鹽；或與有機(jī)酸，諸如乙酸、丙酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3_(4_羥基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、苦杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基雙環(huán)[2.2.2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、粘康酸等形成的鹽；或(2)當(dāng)存在于母體化合物中的酸性質(zhì)子被金屬離子，如堿金屬離子、堿土金屬離子或鋁離子替代時(shí)形成的鹽；或與有機(jī)堿，諸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、N-甲基葡糖胺等配位形成的鹽?！八帉W(xué)上可接警的溶媒”指與伐馬洛韋一起服用的稀釋劑、佐劑、賦形劑或載體。術(shù)語(yǔ)“受治療者”、“個(gè)體”或“患者”在本文中交互使用并且是指脊椎動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物。哺乳動(dòng)物包括，但不限于鼠科動(dòng)物、嚙齒動(dòng)物、猿類、人類、家畜、運(yùn)動(dòng)動(dòng)物和寵物?！胺乐?Preventing)”或“預(yù)防(prevention)”指的是減少患病或失調(diào)的風(fēng)險(xiǎn)(即導(dǎo)致疾病的至少一種臨床癥狀不在患者中發(fā)展，所述患者可暴露于或易患該疾病，但是尚未經(jīng)歷或表現(xiàn)出疾病的癥狀)?！爸委煛被颉疤幚怼比魏渭膊』蚴д{(diào)，在一些實(shí)施方案中，指改善疾病或失調(diào)(即，阻礙或減輕疾病或其至少一種臨床癥狀的發(fā)展)。在其它的實(shí)施方案中，“治療(treating)”或“處理(treatment)”指改善至少一種不可由患者辨別的物理參數(shù)。在其它另外的實(shí)施方案中，“治療”或“處理，，指抑制疾病或失調(diào)，表現(xiàn)在物理上(如，使可辨別的癥狀穩(wěn)定)、生理學(xué)上(如，使物理參數(shù)穩(wěn)定)或者兩者。在其它另外的實(shí)施方案中，“治療”或“處理”指延遲疾病或失調(diào)的發(fā)作或進(jìn)展。“追^Miil”意指當(dāng)給予患者用于治療疾病的伐馬洛韋的量，其足以有效用于疾病的這種治療?！坝行е委熈俊笨梢罁?jù)疾病及其嚴(yán)重程度以及被治療的患者的年齡、體重等變化。伐馬洛韋的多形體篩選研究揭示幾個(gè)不同的形式，包括，但不限于A、Bl、B2、B3、B4、C和H形式。各組具有不同的衍射特征以及不同的熱特性。可采用以下分析方法對(duì)伐馬洛韋多形體進(jìn)行特征鑒定，所述方法包括，但不限于差示掃描量熱法(DSC)、偏振光熱臺(tái)顯微鏡法(HSM)、熱重分析法(TGA)、傅里葉變換紅外光譜法(FTIR)、傅里葉變換核磁共振(NMR)光譜法、變溫粉末X-射線衍射法(XRD)和高效液相色譜法(HPLC)。形式A的特征性X-射線衍射數(shù)據(jù)示于表1中，衍射圖示于圖2中；和特征性差示掃描熱量計(jì)溫度記錄圖示于圖3中。表1列出在XRD頻譜中發(fā)現(xiàn)的一些峰。也可存在具有較低強(qiáng)度的其它峰。多形體A的特征性DSC性質(zhì)包括從約105°C至約125°C的吸熱譜線(endotherm)且其中心值接近115°C(典型地為20-30J/g)和從約170°C至約180°C的熔融吸熱譜線且其中心值接近171°C(典型地約為20-30J/g)。某些樣品顯示額外的小信號(hào)(大約為6J/g)。表1.多形體AX-射線粉末衍射圖的特征峰列表<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>應(yīng)該理解，精確的衍射和熱特征依據(jù)所使用的儀器類型和分析條件的不同而有微小變化。例如，用于X-射線衍射圖的儀器對(duì)于測(cè)量的2-0角典型地具有+/-0.2的誤差。依據(jù)本發(fā)明，“多形體A”是伐馬洛韋的晶體形式，其具有如表1或圖2中所示基本上相同的X-射線衍射圖，或具有如圖3中所示基本上相同的DSC溫度記錄圖。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋含有至少約90%的多形體A。在其它的實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋含有至少約95%的多形體A。在另外的其它實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋含有至少約99%的多形體A?？刹捎帽绢I(lǐng)域已知的以下方法確定本文描述的多形體的多形體A含量或多形體純度，所述方法包括，但不限于X-射線衍射法(XRD)、差示掃描量熱法(DSC)、偏振光熱臺(tái)顯微鏡法(HSM)、熱重分析法(TGA)、傅里葉變換紅外光譜法(FTIR)和可變溫粉末XRD。本文也提供可重復(fù)的、制備高質(zhì)量富含多形體A的伐馬洛韋的方法。該方法包括，通過加熱至適當(dāng)?shù)膬?nèi)部溫度，使伐馬洛韋溶解于低級(jí)烷醇溶劑或低級(jí)烷醇的混合溶劑中，在邊攪拌下冷卻實(shí)現(xiàn)伐馬洛韋的基本結(jié)晶化和收集結(jié)晶產(chǎn)物。將依據(jù)示于圖5A的方案制備的一批伐馬洛韋(批號(hào)45-548-YS-00)如下純化將粗產(chǎn)物溶解于CH2C12中，用水洗滌該溶液，并于真空去除CH2C12。使殘余物溶解于i-PrOH中，并用乙酸異丙酯使產(chǎn)物沉淀。過濾沉淀物、干燥和振蕩通過10目篩。將依據(jù)示于圖5B的方案制備的另一批伐馬洛韋(批號(hào)12-03-011)如下純化將粗產(chǎn)物溶解于i-PrOH中，加熱至70°C，過濾該熱溶液，并用5小時(shí)冷卻至20°C。收集產(chǎn)物，用i-PrOH洗滌并于45°C真空下干燥15h。依據(jù)示于圖5C的方案制備另一批伐馬洛韋(批號(hào)12-03-018)。合成和純化的最后步驟包括如下將甲磺酸鹽溶解于i-PrOH中，加入NEt3，并將混合物加熱至70°C。使該熱溶液經(jīng)4h冷卻至20°C，并于20°C攪動(dòng)至少2h。過濾結(jié)晶產(chǎn)物，用i-PrOH洗滌和真空干>]f§Ko依據(jù)其中CBZ保護(hù)基團(tuán)被Boc保護(hù)基團(tuán)替代(圖5D)的方法，制備兩個(gè)其它批次的伐馬洛韋(批號(hào)146756和批號(hào)06-01159-2。批號(hào)146756的最后的純化步驟包括兩個(gè)反復(fù)的以下步驟在邊加熱中，將粗品EPB-348游離堿溶解于CH2C1中，并加入甲烷磺酸，使該溶液冷卻至20°C，攪拌16h，過濾和干燥。將殘余物溶解于i-PrOH中，并加入NEt3。將該混合物加熱至使全部固體溶解，冷卻至20°C，攪拌4h，過濾和干燥。在批號(hào)06-01159-2的純化中的最后步驟，包括兩個(gè)反復(fù)的以下步驟將粗品EPB-348游離堿溶解于CH2C12中，并加熱至35°C。加入甲烷磺酸，使該溶液冷卻至20°C，攪拌16h，過濾和干燥。將殘余物溶解于i-PrOH中，加入NEt3，并將該溶液加熱至70°C，冷卻至20°C，攪拌2h，過濾和干燥。這些批次的XRD和DSC分析揭示不同的多形體形式。如圖5E、5F和5G中所示，所觀察到的對(duì)于批號(hào)45-548-YS-00和批號(hào)12-03-011的粉末XRD圖和DSC溫度記錄圖，與那些多形體A明顯不同。它們分別被鑒別為B2和B1形式。所觀察到的對(duì)于批號(hào)12-03-018、批號(hào)146756和批號(hào)06_01159_2的粉末XRD圖和DSC溫度記錄圖(圖5H和I)，類似于那些對(duì)多形體A所觀察到的。然而，這些原料的流動(dòng)性和可操縱性差和/或不協(xié)調(diào)(表2)。例如，批號(hào)146756原料具有檢測(cè)到的卡爾指數(shù)(CarrIndex)為64，標(biāo)志極端差的流動(dòng)性。該原料還產(chǎn)生肉眼可見的、長(zhǎng)度為數(shù)百微米的凝聚塊。肉眼可見的結(jié)果是，原料具有粘性性質(zhì)，如由目測(cè)觀察所確定的可操縱性差和粉末流動(dòng)差。表2.伐馬洛韋批次物理特征卡爾指數(shù)、粒度和凝聚塊大小<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>在一些實(shí)施方案中，如下提供用于制備多形體A的方法。將比率為每升溶劑IOOg伐馬洛韋的伐馬洛韋和低級(jí)烷醇溶劑的混合物進(jìn)行攪拌并加熱至適當(dāng)?shù)膬?nèi)部溫度，以實(shí)現(xiàn)完全溶解。在邊攪拌下、控制溫度梯度下將該溶液冷卻，實(shí)現(xiàn)伐馬洛韋的基本結(jié)晶化。過濾得到的混合物，將得到的固態(tài)空氣干燥和真空烤爐干燥，以得到富含多形體A的伐馬洛韋的白色固體。如在本文所使用的，短語(yǔ)“如示于表1或圖2的基本上相同的X-射線衍射圖”，意指在一些實(shí)施方案中，多形體A具有的2-θ角為22.9°+/-0.2°和18.6°+/-0.2°。也意指在其它的實(shí)施方案中，多形體A具有的2-θ角為22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°和24.3°+/-0.2°。在另外的其它實(shí)施方案中，多形體A具有的2-θ角為22.9°+/-0.2°、18·6°+/-0.2°、19·5°+/-0.2°、24·3°+/20.2°,20.8°+/-0.2°、21.8°+/-0.2°和27.0°+/-0.2°。在另外的其它實(shí)施方案中，多形體A具有的2-θ角%22.9°+/"O.2°,18.6°+/-0.2°,19.5°+/-0.2°,24.3°+/-0.2°、20·8+/-0.2°、21.8°+/-0.2°,27.0°+/-0.2°,14.7°+/-0.2°和15.5°+/-0.2°。在另外的其它實(shí)施方案中，多形體A具有的2-Θ角為22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°,19.5°+/-0.2°、24.3°+/-0.2°、20·8°+/-0.2°、21·8+/-0.2°、27·0+/-0.2°、14.7°+/-0.2°、15.5°+/-0.2°、25.5°+/-0.2°和29.9°+/-0.2°。如在本文所使用的，短語(yǔ)“如示于圖3的基本上相同的DSC溫度記錄圖”，意指在一些實(shí)施方案中，多形體A具有的特征性DSC性質(zhì)為從約105°C至約125°C的吸熱譜線且其中心值接近115°C(典型地為20-30J/g)和從約170°C至約180°C的熔融吸熱譜線且其中心值接近171°C(典型地約為20-30J/g)。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷醇溶劑”意指伐馬洛韋可溶解于其中的仵何低級(jí)烷醇，并目.包括那㈣1-6個(gè)碳原子的伯醇、仲醇和叔醇。適宜的低級(jí)烷醇溶劑包括，例如，甲醇、乙醇、1-丙醇、2_丙醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-2-丙醇、2，2_二甲基-1-丙醇和環(huán)己醇。用于制備富含多形體A的伐馬洛韋的低級(jí)烷醇溶劑可為甲醇、乙醇或2-丙醇。955(ν/ν)乙醇/2-丙醇可被用作混合溶劑。典型地，依據(jù)某些實(shí)施方案，將伐馬洛韋和溶劑(如果使用混合溶劑預(yù)先混合)的混合物在邊攪拌下加熱至適當(dāng)?shù)膬?nèi)部溫度(例如，于從65°C至74°C，或從68°C至72°C，如果使用乙醇或乙醇/2-丙醇的混合物)，以達(dá)到幾乎完全溶解。加熱過程發(fā)生約一個(gè)半小時(shí)。攪拌持續(xù)任選再進(jìn)行30分鐘以得到完全溶液。然后設(shè)定溫度冷卻速率為每小時(shí)從5°C至15°C，或每小時(shí)從8°C至12°C，整個(gè)冷卻循環(huán)中不停攪拌。當(dāng)內(nèi)部溫度達(dá)到55°C和61°C之間時(shí)，固體形成和大的結(jié)晶從溶液中析出。在回到室溫(大約18至25°C)后，攪拌持續(xù)1至4小時(shí)，過濾得到的混合物，在真空烤爐(溫度40至50°C，壓力315in.Hg，慢速氮清洗)中使得到的濕濾餅干燥過夜，以得到富含多形體A的白色固體。溶劑選擇和溫度控制的組合使得該過程具有高度的可重復(fù)性并且是可升級(jí)的。該過程在從IOg至30kg范圍的規(guī)模得到檢驗(yàn)。當(dāng)使用其它溶劑或組合時(shí)，溫度、溶解性和加載特性(profiles)可為與前述方法引用的不同，并且可依據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員鑒于本文公開的內(nèi)容加以調(diào)整。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明方法中使用的混合溶劑為955(ν/ν)乙醇/異丙醇，其與特殊變性酒精(SDA)3C等當(dāng)量。使用SDA3C，相對(duì)低成本的市售產(chǎn)品，使得該方法更具商業(yè)可行性。多形體A是最為晶質(zhì)的和在熱力學(xué)上最穩(wěn)定的伐馬洛韋的多形體。競(jìng)爭(zhēng)性和非-競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)顯示最終形式的多形體Α，而不論起始的多形體形式。多形體A的固體粉末更具流動(dòng)性，使得其更易于被制成片劑。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有如在表1或圖2中顯示的基本上相同的X-射線衍射圖。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有如示于圖3中的基本上相同的DSC溫度記錄圖。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有基本上與參考標(biāo)準(zhǔn)一致的IR光譜?？赏ㄟ^卡爾指數(shù)(PharmaceuticalPreformulationandFormulation,Apracticalguidefromcandidateselectiontocommercialdosageform,MarkGibson，Ed.；Interpharm出版社，2002；第386-7頁(yè))檢測(cè)本發(fā)明固體產(chǎn)物的流動(dòng)特征。通過使粉末經(jīng)歷機(jī)械力，可觀察到粉末流動(dòng)的阻力。經(jīng)歷叩打(tapping)的粉末的容積密度(可壓縮性)的增加可用于確定卡爾指數(shù)。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有范圍從約35至約50的卡爾指數(shù)值?？墒褂闷窆鈱W(xué)顯微鏡在硅油中評(píng)估本發(fā)明固體產(chǎn)物的粒度。在一些實(shí)施方案中，如使用該系統(tǒng)檢測(cè)時(shí)，富含多形體A的伐馬洛韋具有范圍從約10至約300微米的粒度。在一些實(shí)施方案中，通過肉眼檢視，富含多形體A的伐馬洛韋是白色或淡棕褐色粉末。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)溶解于溶劑，例如二氯甲烷時(shí)，富含多形體A的伐馬洛韋形成澄清至幾乎澄清的溶液。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有不多于0.2%的熾灼殘?jiān)Ｔ谝恍?shí)施方案中，存在于富含多形體A的伐馬洛韋中的重金屬(如Pb)不多于0.002%。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有不多于1.0%的含水量?？赏ㄟ^卡爾·費(fèi)歇爾(KarlFischer)滴定法分析含水量?？赏ㄟ^GC分析確定本發(fā)明產(chǎn)物中的溶劑含量。在一些實(shí)施方案中，關(guān)于殘留溶齊U，富含多形體A的伐馬洛韋符合以下標(biāo)準(zhǔn)丙酮、乙酸乙酯、庚烷、異丙醇、四氫呋喃、乙醇的NMT0.5%；乙腈、二氯甲烷、甲苯的NMT0.1%；乙二醇二甲基醚的NMT0.05%；任何其它單個(gè)溶劑的NMT0.05%；總?cè)軇┓薚1.0%?？赏ㄟ^HPLC分析檢測(cè)產(chǎn)物的純度和雜質(zhì)的量。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋的純度在無(wú)水和無(wú)溶劑基礎(chǔ)上不低于970mcg/mg。在其它的實(shí)施方案中，除了在富含多形體A的伐馬洛韋中存在高于1.5%的硬脂酸鳥嘌呤醇，無(wú)單個(gè)已知雜質(zhì)。還在其它實(shí)施方案中，存在的硬脂酸鳥嘌呤醇不多于2.5%。在另外的其它實(shí)施方案中，不存在多于1.0%的單個(gè)未知雜質(zhì)。在另外的其它實(shí)施方案中，存在的總雜質(zhì)不多于3.0%。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋的保留時(shí)間與參考標(biāo)準(zhǔn)的差異不超過2.0%。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋符合以下關(guān)于非對(duì)映體和對(duì)映體雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)(S，S)-非對(duì)映體不多于4.0%；(R，R)-非對(duì)映體加(S，R)-對(duì)映體不多于3.0%。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋的效能在無(wú)水和無(wú)溶劑基礎(chǔ)上不低于900mcg/mg。效能是組合物純度的定量檢測(cè)值。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有以上描述的兩個(gè)或更多個(gè)特征。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有如在表1或圖2中顯示的基本上相同的X-射線衍射圖、如示于圖3中的基本上相同的DSC溫度記錄圖、基本上與參考標(biāo)準(zhǔn)一致的IR光譜、卡爾指數(shù)值范圍從約35至約50、粒度范圍從約10至約300微米、熾灼殘?jiān)欢嘤?.2%、含水量不多于1.0%、殘留溶劑不多于如上的定義和/或純度不低于97%。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋具有如在表1或圖2中顯示的基本上相同的X-射線衍射圖、如示于圖3中的基本上相同的DSC溫度記錄圖、基本上與參考標(biāo)準(zhǔn)一致的IR光譜、卡爾指數(shù)值范圍從約35至約50、粒度范圍從約10至約300微米、熾灼殘?jiān)欢嘤?.2%、含水量不多于1.0%、殘留溶劑不多于如上的定義和純度不低于97%。伐馬洛韋的其它多形體包括，但不限于B1、B2、B3、B4、C和H形式。采用如在本文實(shí)施例5-伐馬洛韋的多形體篩選中描述的方法和條件得到這些多形體。這些多形體形式在評(píng)估伐馬洛韋藥物產(chǎn)品的多形體純度中被用作分析標(biāo)準(zhǔn)品。多形體B1、B2、B3、B4、C和H易于轉(zhuǎn)化為單獨(dú)的A形式，或在組合中，使用本文描述的方法，并且因此可用于產(chǎn)生本發(fā)明的富含多形體A的伐馬洛韋組合物中用作原料源。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有其它多形體形式。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有Bl形式。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有B2形式。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有B3形式。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有B4形式。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有Bl、B2、B3或B4形式。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有C形式。在一些實(shí)施方案中，富含多形體A的伐馬洛韋基本上沒有B1、B2、B3、B4或C形式。本文還提供用于治療和/或預(yù)防病毒性感染的方法，該方法包括給予有需要的患者有效治療量的本發(fā)明的富含多形體A的伐馬洛韋。使用本文描述方法可治療的病毒性感染，由例如，水痘帶狀皰疹病毒、單純皰疹病毒(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒(HHV-6、HHV-7和HHV-8)、愛潑斯坦巴爾病毒、巨細(xì)胞病毒和HIV引起。在一些實(shí)施方案中，所述病毒性感染是選自水痘帶狀皰疹、單純皰疹病毒(HSV-1和HSV-2)、人皰疹病毒6、人皰疹病毒7、人皰疹病毒8、愛潑斯坦巴爾病毒和巨細(xì)胞病毒的皰疹病毒感染。在這些實(shí)施方案中，所述病毒性感染可呈現(xiàn)為多種形式的人體失調(diào)，諸如水痘、帶狀皰疹、口唇皰疹/單純性皰疹(coldsores)、生殖器皰疹、單核細(xì)胞增多癥、卡波濟(jì)氏(Kaposi’s)肉瘤、慢性疲勞、嬰兒玫瑰疹、多發(fā)性硬化癥、鼻咽癌和其它惡性腫瘤。在其它的實(shí)施方案中，所述病毒性感染是HIV或共同感染的HIV/HBV或HIV/HCV或其它條件性疾病，諸如CMV或臨床表現(xiàn)為皰疹角膜炎的HIV感染或AIDS。富含多形體A的伐馬洛韋可被用于藥物的制備，所述藥物用于治療或預(yù)防病毒性感染，尤其是經(jīng)由口服或其它全身給藥。富含多形體A的伐馬洛韋是晶質(zhì)的，具有良好的流動(dòng)特征，并且可被采用本領(lǐng)域已知的程序和方法易于轉(zhuǎn)變?yōu)榭诜o藥的片劑。預(yù)防或治療病毒性感染的額外的實(shí)施方案包括在移植之前、之中或之后使用富含多形體A的伐馬洛韋。在一些實(shí)施方案中，典型地經(jīng)口服或全身，與免疫調(diào)節(jié)劑，例如，糖皮質(zhì)激素共同給予本文描述的多形體。代表性的糖皮質(zhì)激素包括，但不限于阿氯米松、地奈德、氟潑尼定、氟米松、氫化可的松及其酯，諸如丁酸氫化可的松或乙酸氫化可的松、氯倍他松、曲安奈德、倍他米松、布地奈德(budenoside)、地塞米松(desoximethasone)、二氟拉松(diflorosane)、氟輕松(fluocinolone)、醋酸氟輕松(fluoccinonideacetonide)、氟可龍、氟替卡松、醋丙甲潑尼龍、莫米松、羅氟奈德等。Glucorticoids，諸如氫化可的松或倍他米松或dextromethasone典型地以它們常規(guī)免疫調(diào)節(jié)給藥方案給藥。對(duì)于以上表明的效用和適應(yīng)癥，所需要的伐馬洛韋API的量將取決于多種因素，包括要治療的病癥的嚴(yán)重程度和接受者的特性，并且將最終在于主治醫(yī)師的判斷?？墒牵话愣?，適宜的有效劑量將在每公斤接受者體重每天1至150mg范圍內(nèi)。其它適宜的有效劑量在每天每公斤體重5至120mg的范圍內(nèi)(除非另有所指，活性成分的所有重量均以伐馬洛韋計(jì))。在給藥日需要的劑量可呈現(xiàn)為全天以適當(dāng)間期的一、二、三或四次或更多次亞劑量給藥。這些亞劑量可以單位劑型給予，例如，每單位劑型含有約50至2000mg或從約250、500、1000、2000或3000mg的活性成分。在一些實(shí)施方案中，單位劑量是IOOOmg/天。為了指導(dǎo)起見給出以下給藥方案治療水痘帶狀皰疹病毒感染(例如帶狀皰疹)給予約500mg至3g每天單一劑量三至七天；或者，約500mg至3g的每天總劑量，以每天兩次給予250mg至1.5g，三至七天。例如，可在帶狀疹發(fā)紅開始的72小時(shí)內(nèi)用1000mg、2000mg或3000mg的每天劑量治療患者七天。在一些實(shí)施方案中，治療或預(yù)防水痘帶狀皰疹病毒感染的給藥方案是給予Igm七天。在其它的實(shí)施方案中，治療或預(yù)防水痘帶狀皰疹病毒感染的給藥方案是給予2gm七天。為了指導(dǎo)起見給出以下給藥方案治療愛潑斯坦_巴爾病毒感染(例如，單核細(xì)胞增多癥)以每天兩次，每次1.Og給予約2.Og的每天總劑量7至21天。對(duì)于移植患者，給予該每天劑量三至六個(gè)月應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)期；和對(duì)于HIV陽(yáng)性患者，給予如通常指示的每天劑量以提高生活質(zhì)量，例如用兩年或更久的時(shí)間。在一些實(shí)施方案中，用于治療或預(yù)防愛潑斯坦-巴爾病毒(例如，單核細(xì)胞增多癥)的給藥方案是給予Ig七天。為了指導(dǎo)起見給出以下給藥方案抑制人皰疹病毒6A(HHV_6A)每天一次給予500mg至3.Og的每天總劑量三至六個(gè)月應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)期。為了指導(dǎo)起見給出以下給藥方案抑制人皰疹病毒8(HHV-8):每天一次給予500mg至3.Og的每天總劑量三至六個(gè)月應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)期。為了指導(dǎo)起見給出以下給藥方案治療1型和2型單純皰疹病毒的病毒感染給予1.0至4g的每天總劑量(500mg每天兩次或2.Og每天兩次，5至10天)；抑制1型和2型單純皰疹病毒感染給予250mg至Ig的每天總劑量約一至十年(取決于患者)。雖然，例如，富含多形體A的伐馬洛韋可單獨(dú)以膠囊形式給予，其也可呈現(xiàn)為藥物制劑。這樣的制劑包含富含多形體A的伐馬洛韋，連同一種或多種可接受的載體/賦形劑和任選其它治療成分。載體必須是可接受的，其含義即與制劑中的其它成分相容的且不傷害接受者。制劑包括，但不限于那些適宜于直腸、鼻腔、局部(包括口頰和舌下)、陰道或胃腸外(包括皮下、肌肉內(nèi)、靜脈和皮內(nèi))給藥的制劑。在一些實(shí)施方案中，制劑是口服給藥制齊U。制劑可常規(guī)呈現(xiàn)為單位劑型，如片劑和緩釋膠囊劑，并可由制藥領(lǐng)域熟知的任何方法制備。這樣的方法包括將多形體與載體相組合。通常，通過將富含多形體A的伐馬洛韋與液體載體或細(xì)微粉碎的固體載體或兩者均勻地和密切地組合，然后如果需要，使產(chǎn)物定型，制備制劑。本發(fā)明擴(kuò)展到用于制備藥用組合物的方法，該方法包括將富含多形體A的伐馬洛韋與藥學(xué)上可接受的載體或溶媒結(jié)合或組合。如果藥用制劑的制備包括藥用賦形劑的密切混合，通常是所使用的賦形劑為性質(zhì)上是非堿性的，即為或者酸性或者中性的。本發(fā)明的用于口服給藥的制劑可呈現(xiàn)為不連續(xù)的單位，諸如膠囊劑、囊片劑或片齊U，每種制劑含有預(yù)定量的活性劑?；蛘?，它們可呈現(xiàn)為粉末劑或顆粒劑，諸如在水性液體、非水性液體、水包油液體乳劑、油包水液體乳劑、大劑量注射劑(bolus)等中的活性劑的溶液劑或混懸劑。關(guān)于口服給藥的組合物(如，片劑和膠囊劑)，術(shù)語(yǔ)“適宜的載體”包括溶媒，諸如常用的賦形劑，例如，粘合劑，諸如糖漿、阿拉伯樹膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠、聚乙烯吡咯烷酮(聚維酮)、甲基纖維素、乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基_纖維素、蔗糖和淀粉；填充劑和載體，例如，玉米淀粉、明膠、乳糖、蔗糖、微晶纖維素、高嶺土、甘露醇、磷酸氫二鈣、氯化鈉和褐藻酸；和潤(rùn)滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈉和其它的硬脂酸金屬鹽、硬脂酸甘油酯、硬脂酸、硅油、滑石粉、蠟、類和硅膠。也可使用矯味劑，諸如胡椒油、鹿蹄草油、櫻桃調(diào)味品等?？芍档眯枰氖羌尤胫珓┮允箘┬鸵子谧R(shí)別。也可采用本領(lǐng)域熟知的方法對(duì)片劑進(jìn)行包衣?？赏ㄟ^壓制或模制，任選與一種或多種成分一起，制備片劑?？赏ㄟ^以自由流動(dòng)形式，諸如粉末或顆粒呈現(xiàn)的活性劑，任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑混合，在適宜的機(jī)器中壓縮，制備壓制片劑?？赏ㄟ^在適宜的機(jī)器中對(duì)用惰性液體稀釋劑濕潤(rùn)的、粉末化的化合物的混合物進(jìn)行模壓，制備模制片劑。片劑可任選被包衣或劃痕，并且可配制以提供慢速或者控制釋放的活性劑。其它適宜用于口服給藥的制劑包括含有在矯味劑基質(zhì)，通常為蔗糖和阿拉伯樹膠或黃蓍膠中的活性劑的菱形錠劑；含有在惰性基質(zhì)，諸如明膠和丙三醇或蔗糖和阿拉伯樹膠中的活性劑的錠劑；和含有在適宜的液體載體中的活性劑的嗽口劑。在一些實(shí)施方案中，藥用組合物是包含晶質(zhì)的伐馬洛韋、交聯(lián)羥甲纖維素鈉、聚維酮K-30、吐溫-80、滑石粉和硬脂酸鎂的囊片劑。在其它實(shí)施方案中，藥用組合物是包含晶質(zhì)的伐馬洛韋(77%w/w)、交聯(lián)羥甲纖維素鈉(13.90%，w/w)、聚維酮K-30(3.25%)、吐溫-80(1.10%)、滑石粉(4.10%)和硬脂酸鎂(0.74%)的囊片劑。在一些實(shí)施方案中，通過使用聚維酮Κ-30和吐溫-80將晶質(zhì)的伐馬洛韋和交聯(lián)羥甲纖維素鈉濕法制粒，制備上述藥用組合物。使顆粒干燥，然后通過網(wǎng)篩(#16)過篩。干燥和過篩制粒，然后使交聯(lián)羥甲纖維素鈉和滑石粉混合。加入硬脂酸鎂，然后將混合的原料通過#30目網(wǎng)篩過篩，混合，然后卸料。然后使用高速旋片壓縮機(jī)壓制原料，和用AccelaCota包衣機(jī)用OpadyrII33G99020對(duì)囊片進(jìn)行包衣。然后將巴西棕間蠟加至包衣鍋中和對(duì)囊片拋光，然后包裝。在一些實(shí)施方案中，片劑加工包括濕法制粒、干燥、過篩、混合和壓制操作。用OpadyrII藍(lán)33G99020對(duì)原料囊片進(jìn)行包衣，并用巴西棕間蠟NF拋光。藥用組合物和/或多形體可與其它其它抗病毒劑，諸如用于皰疹適應(yīng)癥的阿昔洛韋、伐昔洛韋、噴昔洛韋、泛昔洛韋、更昔洛韋及其前藥、西多福韋、膦甲酸等聯(lián)合給予。對(duì)于HIV治療，典型地藥用組合物和/或多形體與其它HIV療法共同給予，以在免疫受損的個(gè)體中避免產(chǎn)生藥物逃逸突變和治療伴隨的感染。然而，某些抗感染劑可與允許以比相應(yīng)單一療法中較低的劑量給予的一種或兩種活性成分，產(chǎn)生協(xié)同反應(yīng)。例如，在傾向于由Cyp3A4快速代謝的藥物中，與HIV蛋白酶抑制劑利托那韋共同給藥可允許給予較低劑量的給藥方案。典型地，本文描述的多形體和各個(gè)其它的抗病毒劑，以反映它們各自的活性和生物利用度的摩爾比率共同-給予。一般地，這樣的比率相對(duì)多形體而言，將為2501至1250或251至125，但是可以更低，例如在細(xì)胞色素P450拮抗劑，諸如利托那韋的情況下。代表性的HIV抗病毒劑，包括，但不限于核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTI)，諸如阿洛夫定(FLT)、齊多夫定(AZT、ZDV)、司他夫定(d4T，Zerit)、扎西他濱(ddC)、去羥肌苷(ddl，Videx)、阿巴卡韋、(ABC,Ziagen)、拉米夫定(3TC，Epivir)、恩曲他濱(FTC,Emtriva)、racevir(外消旋的FTC)、阿德福韋(ADV)、恩替卡韋(BMS30200475)、阿洛夫定(FLT)、富馬酸替諾福韋酯(TNF，Viread)、氨多索韋(amdoxavir)(DAPD)、D-d4FC(DPC-817)、-dOTC(ShireSPD754)、艾夫西他濱(AchillionACH-126443)、BCH10681(Shire)、SPD-756、racivir,D-FDOC,GS7340、INK-20(硫醚磷脂AZT，Kucera)、2'3'-二脫氧-3'-氟代鳥苷(FLG)及其前藥，諸如MIV-210和reverset(RVT，D-D4FC，PharmassetDPC-817)。代表性的非-核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTI)包括，但不限于地拉韋啶(Rescriptor)、依法韋倉(cāng)(DMP-266，Sustiva)、奈韋拉平(BIRG-587，Viramune)、(+)紅厚殼素植物提取物A和B(AdvancedLifeSciences)、卡普韋林(AG1549fS-1153；Pfizer)、Gff-695634(Gff-8248；GSK)、MIV-150(Medivir)、MV026048(R-1495；MedivirAB/Roche)>NV-0522(IdenixPharm.)>R-278474(Johnson&Johnson)、RS—1588(IdenixPharm.)、TMC-120/125(Johnson&Johnson)、TMC-125(R-165335Johnson&Johnson)、UC-781(BiosynInc.)和YM215389(Yamanoushi)。代表性的HIV蛋白酶抑制劑包括，但不限于PA-457(Panacos)、KPC-2(KuceraPharm.)、5HGTV-43(EnzoBiochem)、氨普那韋(VX-478，Agenerase)、阿扎那韋(Reyataz)、硫酸茚地那韋(MK-639，Crixivan)、Lexiva(膦沙那韋鈣、Gff-433908或908、VX-175)、利托那韋(Norvir)、洛匹那韋+利托那韋(ABT-378，Kaletra)、替拉那韋、甲磺酰奈非那韋(Viracept),沙奎那韋(Invirase,Fortovase)、AG1776(JE-2147、KNI-764；NipponMiningHoldings)、AG—1859(Pfizer)、DPC—681/684(BMS)、GS224338(GileadSciences)、KNI-272(NipponMiningHoldings)、Nar-DG-35(Narhex)、P(PL)-100(P-1946；ProcyonBiopharma)、P-1946(ProcyonBiopharma)、R-944(Hoffmann-LaRoche)、R0-0334649(Hoffmann-LaRoche)、TMC-114(Johnson&Johnson)、VX-385(GW640385；GSK/Vertex)、VX-478(Vertex/GSK)。其它HIV抗病毒劑包括，但不限于侵入抑制劑，包括融合(fusion)抑制劑、⑶4受體抑制劑、CCR5共同受體抑制劑和CXCR4共同受體抑制劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥。侵入抑制劑的實(shí)例為AMD-070(AMD11070；AnorMed)、BlockAide/CR(ADVENTRXPharm.)、BMS806(BMS-378806;BMS)、恩夫韋肽(T-20、R698，F(xiàn)uzeon)、KRH1636(KurehaPharmaceuticals)、0N0-4128(Gff-873140>AK—602、E-913；ONOPharmaceuticals)、PR0-140(ProgeniesPharm)、PRO-542(ProgeniesPharm.)、SCH-D(SCH-417690；Schering-Plough)、T-1249(R724；Roche/Trimeris)、TAK-220(TakedaChem.IncL)、TNX-355(Tanox)和UK427，857(Pfizer)。整合酶抑制劑的實(shí)例為L(zhǎng)-870810(Merck&Co.)、c-2507(Merck&Co.)和S(RSC)-1838(shionogi/GSK)?，F(xiàn)在將通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行闡述。所述實(shí)施例并不意欲限制本發(fā)明的范圍，而是應(yīng)該與以上描述的細(xì)節(jié)和一般描述聯(lián)合閱讀，以提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解和概述制備需要的本發(fā)明的方法所產(chǎn)生的產(chǎn)物的過程，以及本發(fā)明其它部分。實(shí)施例實(shí)施例1.-用于伐馬洛韋API的分析的檢驗(yàn)證書用于批號(hào)A501S8-07-001的伐馬洛韋API的分析的檢驗(yàn)證書在表3中顯示，以證明對(duì)本發(fā)明產(chǎn)物所獲得的分析數(shù)據(jù)。表3.用于伐馬洛韋API的分析的檢驗(yàn)證書說明書~lm白色至淡棕褐色粉末鑒別(IR)符合參考標(biāo)準(zhǔn)濕度(KF)NMT1.0%溶液澄明度澄清至幾乎澄清；可存在少量纖維<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實(shí)施例2.-用于伐馬洛韋多形體A的再結(jié)晶方法向裝配有機(jī)械攪拌器，由210TJKEM型號(hào)溫度控制器/熱電偶控制油浴溫度的，內(nèi)在的熱電偶連接至Yokagowa溫度記錄儀和烘干管的2L圓底燒瓶中加入批號(hào)146756的IlOg的EPB348、1.IL的由55mL的2-丙醇(Fisher，批號(hào)050564)和1045mL的200Proof乙醇(Aaper，批號(hào)06128WA)(SDA3C變性無(wú)水酒精的等價(jià)物)組成的預(yù)混合溶液。將得到的經(jīng)攪拌的混合物加熱至內(nèi)部溫度72°C，達(dá)到固體幾乎完全溶解。加熱過程歷經(jīng)約一個(gè)半小時(shí)。大批固體易于形成溶液；最后一小塊需要在約72°C內(nèi)部溫度攪拌30分鐘，直至達(dá)到完全溶解。允許內(nèi)部溫度高達(dá)74°C。*然后將該溶液以每小時(shí)10°C的速率冷卻**，在整個(gè)冷卻循環(huán)中不停攪拌。當(dāng)內(nèi)部溫度達(dá)到55和ere之間時(shí)，從溶液中有固體和大量結(jié)晶析出。作為結(jié)晶化的結(jié)果，有2°C的放熱曲線。在將回到室溫(大約25°C)后攪拌持續(xù)一個(gè)小時(shí)，過濾得到的混合物并且風(fēng)干得到的固體，然后在真空烤爐干燥過夜(50°C，大約半個(gè)大氣壓的真空，慢速氮清洗)，得到106g的白色固體(52772-10-6)。*HPLC證據(jù)(柱PhenomenexInersil0DS-2,250X4.6讓，5微米粒度；流動(dòng)相在6238乙腈水/乙腈中的0.2%高氯酸；梯度經(jīng)25分鐘0至95%；流速1.5mL/min；檢測(cè)254nm)提示，通過使結(jié)晶化的時(shí)間延長(zhǎng)(包括結(jié)晶后的混懸液的過夜攪拌)，雜質(zhì)(硬脂酸鳥嘌呤醇)構(gòu)成從最初開始時(shí)的約0.3面積％水平至約0.9面積％。通過以下報(bào)告的時(shí)間和溫度，雜質(zhì)構(gòu)成限制在0.6面積％，其是普遍認(rèn)為可接受的。**已經(jīng)探究和發(fā)現(xiàn)的冷卻速率范圍從每小時(shí)5°C、每小時(shí)約12°C，以得到可比較的化學(xué)純度和多形體形式的產(chǎn)物。產(chǎn)物的特征具有與那些在圖2和3中發(fā)現(xiàn)的類似的衍射特征，其為代表性的伐馬洛韋多形體A。實(shí)施例3.-結(jié)晶化過程發(fā)展使用批號(hào)146756作為原材料實(shí)施小規(guī)模的(l_5g)結(jié)晶化。確定幾種傾向于產(chǎn)生良好的物質(zhì)固體的溶劑(吡啶、DMF、乙醇等)。由于這些溶劑中的許多具有低可行性和由乙醇顯示的前景，選擇乙醇用于進(jìn)一步研究。第一個(gè)10g規(guī)樽再結(jié)晶使10.lg的EPB348(批號(hào)#146756)樣品從100mL的無(wú)水乙醇(AaperUSP)中再結(jié)晶。在達(dá)到完全溶解前需要將內(nèi)部溫度升至68°C。于75°C攪拌溶液一個(gè)小時(shí)，然后停止加熱，并將攪拌的混合物任其在機(jī)械攪拌中緩慢冷卻至室溫過夜。過濾得到的晶體塊，于50°C干燥至恒重，得到9.3g的白色固體(樣品52772-2-7)。第二個(gè)10g規(guī)樽再結(jié)晶為了證明重現(xiàn)性，用10.0g的同樣批號(hào)的EPB348起始，重復(fù)該過程。分離和干燥后，此次得到9.3g白色固體(樣品52772-3-17)。通過質(zhì)子NMR分析，該原料與EPB348的原始樣品一致。第三個(gè)10g規(guī)模再結(jié)晶為了使該方法更具商業(yè)可行性，重復(fù)該過程，不同的是使用新鮮制備的變性乙醇，其與特殊變性乙醇(SDA)3C等價(jià)。其通過加入5體積的2-丙醇至95體積的無(wú)水乙醇中并且使得到的溶液充分混合制備。向100mL的該3C變性乙醇中加入10.0g的EPB348，并將得到的混合物加熱至內(nèi)部溫度為70°C，允許其在機(jī)械攪拌中緩慢回至室溫。定時(shí)周期記錄內(nèi)部溫度并作圖，如圖6中所示。使混合物于61.5°C完全溶解，但是隨著時(shí)間的推移冷卻至55.3°C的內(nèi)部溫度而形成固體。在攪拌后，使混懸液冷卻至室溫，過濾、風(fēng)干，然后真空烤爐干燥(50°C，大約半個(gè)大氣壓真空，用慢速氮清洗)，得到9.37g的白色固體，樣品52772-5-8。第一個(gè)100g規(guī)模再結(jié)晶在更大規(guī)模上重復(fù)從SDA3C乙醇中的再結(jié)晶，控制冷卻曲線于每小時(shí)5°C下降，并且在整個(gè)冷卻過程中記錄內(nèi)部溫度。向裝配有機(jī)械攪拌器的，由210TJKEM型號(hào)溫度控制器/熱電偶控制油浴溫度的，內(nèi)在的熱電偶連接至Yokagowa溫度記錄儀、烘干管的的2L圓底燒瓶中加入批號(hào)146756的110g的EPB-348、1.1L的由55mL的2-丙醇(Fisher，批號(hào)050564)和1045mL的200Proof乙醇(Aaper，批號(hào)06128WA)組成的預(yù)混合溶液。將得到的經(jīng)攪拌的混合物加熱至內(nèi)部溫度72°C，這樣達(dá)到完全溶解。然后設(shè)定溫度至以每小時(shí)5°C速率冷卻，在整個(gè)冷卻循環(huán)中不停攪拌。當(dāng)內(nèi)部溫度達(dá)到60和61°C之間時(shí)，固體從溶液中結(jié)晶出來(lái)。持續(xù)攪拌過夜，然后過濾得到的混合物，并且風(fēng)干得到的固體，然后在真空烤爐中干燥(50°C，大約半個(gè)大氣壓的真空，慢速氮清洗)，得到106.7g的白色固體(52772-8-10)。另外的100g規(guī)模再結(jié)晶如前描述的，使兩個(gè)額外批次的EPB-348從批號(hào)146756以100g規(guī)模在3C乙醇中再結(jié)晶。該過程中的變化包括1)更快速分離(溶液達(dá)到室溫后過濾固體，而不是靜置于母液中過夜)和2)冷卻速率目標(biāo)為10和15°C/hr，而不是之前用于100g批次的5°C/hr。將第一批次于10°C/hr下冷卻，而將第二批次于起先速率為13°C/hr后由于室溫條件減緩至約每小時(shí)12°C下冷卻。分別指定它們的批次為52772-10-6和52772-12-27。冷卻至室溫后分離該兩個(gè)批次，得到好的固體，并通過XRD分析多形體形式和通過HPLC分析雜質(zhì)分布。衍射和熱特征得自以上10-克規(guī)模的再結(jié)晶方法的樣品的X-射線衍射圖和DSC溫度記錄圖分別示于圖7和8中。晶體化樣品的X-射線衍射和熱特征均與多形體A的一致。粒度和流動(dòng)特征通過使粉末經(jīng)歷機(jī)械力，可觀察到粉末流動(dòng)阻力。經(jīng)歷叩打(tapping)的粉末的容積密度(可壓縮性)的增加可用于確定卡爾指數(shù)。檢測(cè)四個(gè)再結(jié)晶批次各自的該指數(shù)并列表如下。采用偏振光學(xué)顯微鏡評(píng)估硅油中再結(jié)晶樣品的粒度范圍。粒度范圍在表4中與粉末流動(dòng)數(shù)據(jù)一起報(bào)告。總之，卡爾指數(shù)范圍從38至56。隨著粒度增加，卡爾指數(shù)改善，這似乎與規(guī)模的增加相關(guān)。通過此方法制備的原料，比之前由肉眼觀察確定的批次具有較好的加工性和粉末流動(dòng)性。表4.再結(jié)晶的伐馬洛韋樣品的卡爾指數(shù)和粒度批次描述卡爾指數(shù)典型粒度范圍52772-2-71st10g5320-5052772-3-172nd10g5610-3052772-5-83rdlOg4435-5052772-8-10110g38150-300HPLC分析對(duì)四個(gè)批次的再結(jié)晶原料實(shí)施HPLC分析。(柱Phenomenexlnersil0DS-2，250X4.6mm，5微米粒度；流動(dòng)相在6238乙腈水/乙腈中的0.2%高氯酸；梯度經(jīng)25分鐘0至95%；流速1.5mL/min；檢測(cè)254nm)。將樣品與用作再結(jié)晶的起始原料的批號(hào)146756比較。表5.經(jīng)HPLC分析的伐馬洛韋樣品的純度17<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>一般地，乙醇再結(jié)晶原料的雜質(zhì)分布與起始原料的類似。低于0.05面積百分比的單個(gè)雜質(zhì)未整合進(jìn)去。將得自三個(gè)log規(guī)模結(jié)晶的樣品和得自第一個(gè)100g規(guī)模結(jié)晶的樣品一起分析(分析序列1)。主要雜質(zhì)通過保留時(shí)間列于表6中。HPLC重疊圖示于顯示代表性的色譜的圖9中。表6.再結(jié)晶的伐馬洛韋(批次52772-2-7、52772-3-17、52772-5-8和52772-8-10)的雜質(zhì)分布<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>有六種雜質(zhì)>0.05面積％。對(duì)于所有再結(jié)晶樣品，于RRT0.62、1.24和1.50的雜質(zhì)減少。兩種雜質(zhì)，RRT1.53和RRT2.27，在再結(jié)晶過程中似乎無(wú)變化。雜質(zhì)之一，RRT1.37，經(jīng)觀察在再結(jié)晶原料中升高。在再結(jié)晶原料中未觀察到新的雜質(zhì)。于RRT1.37的雜質(zhì)在每個(gè)樣品中隨著時(shí)間的過去增加。觀察到于室溫在“標(biāo)準(zhǔn)”溶液中經(jīng)約14小時(shí)從0.3增加至0.5。雖然觀察到該雜質(zhì)隨著時(shí)間的過去增加緩慢，在分析過程中溶液穩(wěn)定性的缺乏，解釋不了觀察到的該雜質(zhì)的變化。一起分析得自兩個(gè)額外的100g規(guī)模結(jié)晶的樣品(分析序列2)。主要雜質(zhì)通過保留時(shí)間列于表7中。表7.再結(jié)晶的伐馬洛韋(批次52772-10-6和52772_12_27)的雜質(zhì)分布<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>得自兩個(gè)HPLC運(yùn)行的第一個(gè)觀察比較數(shù)據(jù)是，信號(hào)的保留時(shí)間是不同的。此歸因于在具有冷卻的自動(dòng)進(jìn)樣器樣品托盤(序列2)、預(yù)混合的流動(dòng)相制備和其它精細(xì)差異的不同HPLC上運(yùn)行所致。保留時(shí)間在該方法的系統(tǒng)適宜性標(biāo)準(zhǔn)之內(nèi)。第二點(diǎn)是，在結(jié)晶化過程的雜質(zhì)分離中觀察到相同的一般傾向。主要的問題是于RRT1.54的雜質(zhì)(對(duì)應(yīng)于之前于RRT1.37的雜質(zhì))。還觀察到雜質(zhì)在再結(jié)晶時(shí)增加；然而，由于更快速分離(不使固體在收集前成熟過夜)和更快的冷卻速率(更少的時(shí)間暴露于升高的溫度中)，該雜質(zhì)的量的增加似乎已經(jīng)被減弱。HPLC數(shù)據(jù)表明，起始批次(146756)具有約0.26面積％的RRT1.54，其在第二個(gè)和第三個(gè)再結(jié)晶100g批次中增加至0.55和0.62面積％。使用冷凍的自動(dòng)進(jìn)樣器樣品托盤使在HPLC分析過程中的該雜質(zhì)的任何增長(zhǎng)減至最小。在兩個(gè)新的再結(jié)晶批次中未觀察到新的雜質(zhì)(0.05面積％以上)。HPLC結(jié)果表明，通過使用10至12_13°C/hr的冷卻速率和在達(dá)到室溫后收集固體，于RRT1.54(之前RRT1.37)的雜質(zhì)的形成稍微減少。注意到保留時(shí)間可依據(jù)所用的HPLC儀器不同而異。內(nèi)標(biāo)用作對(duì)照。LCMS分析LCMS分析用于確認(rèn)在分離的產(chǎn)物中增長(zhǎng)(或濃縮)的雜質(zhì)的特性。自供應(yīng)的方法的HPLC條件被用于產(chǎn)生在LCMS上的相同雜質(zhì)分布，如使用HPLC所觀察到的。用LCMS經(jīng)得起檢驗(yàn)的酸(TFA)取代高氯酸，如在LC方法中要求的。令人懷疑的是，該主要雜質(zhì)是伐馬洛韋的des纈氨酸類似物。推定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)顯示如下。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>在與雙重酯化的前藥一致的陽(yáng)性離子模式中，觀察到母體API具有619.4的m/z。觀察到主要雜質(zhì)(經(jīng)由二極管陣列)具有520.3的m/z，與在去除纈氨酸取代基后的母體結(jié)構(gòu)的MH+—致(如上所示)。暫時(shí)的結(jié)論是，在再結(jié)晶過程中的雜質(zhì)增長(zhǎng)是des纈氨酸雜質(zhì)。殘留溶劑分析在采用較早報(bào)告的結(jié)晶方法的、多批次的10和100g規(guī)模再結(jié)晶的伐馬洛韋上，實(shí)施對(duì)異丙醇(IPA)和乙醇的GC分析。各批次的結(jié)果概述于表8中。采用于0.5、1和1.5乘以乙醇和IPA的ICH限(5000ppm)的3點(diǎn)校準(zhǔn)曲線分析樣品。也對(duì)樣品溶液進(jìn)行示蹤回收(SpikeRecoveries)，以證明在樣品基質(zhì)中的回收是適宜的。表8.10-100g規(guī)模多形體A批次的殘留溶劑分析<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>GC殘留溶劑分析的結(jié)果表明，顯著量的EtOH和IPA不被產(chǎn)物保留。示蹤回收表明，分析物反應(yīng)適宜用作分析。實(shí)施例4.-用于伐馬洛韋多形體A的大規(guī)模再結(jié)晶方法4Kr規(guī)樽再結(jié)晶兩個(gè)額外批次的伐馬洛韋從批號(hào)146756于4+kg規(guī)模在如前描述的3C乙醇中再結(jié)晶。兩個(gè)批次均產(chǎn)生好的、白色原料，經(jīng)XRD證實(shí)為多形體A。每個(gè)4+kg批次均在優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室規(guī)范(GLP)下進(jìn)行特征鑒定。結(jié)果表明，結(jié)晶化過程在多公斤規(guī)模上產(chǎn)生可接受的結(jié)果。30Kg規(guī)樽再結(jié)晶向184.7kg的乙醇200Proof和12.6kg的異丙醇的混合物中加入31.6kg的伐馬洛韋，經(jīng)20min將得到的混合物加熱至內(nèi)部溫度為68.2V(從18.4°C起始)，得到澄清溶液。在攪動(dòng)中，經(jīng)4小時(shí)以每小時(shí)10-15°C的速率使該溶液冷卻至室溫(20.0°C)。再于20°C下攪動(dòng)該混合物另外4小時(shí)，且在過濾前使其靜置另外7小時(shí)。用69.8kg的乙醇和3.6kg的異丙醇的混合物洗滌固體殘留物，得到69.3kg的濕餅。在真空烤爐((45°C，27in.Hg真空，用慢速氮清掃)中干燥濕餅，得到29.8kg白色固體，批次A501S807001。實(shí)施例5.-伐馬洛韋的多形體篩選對(duì)伐馬洛韋活性藥用成分實(shí)施多形體篩選研究。篩選需要使用溶劑再結(jié)晶、從熔化、退火再結(jié)晶試驗(yàn)和漿液試驗(yàn)，使原料再結(jié)晶。總之，API在超過100種不同的晶體生長(zhǎng)條件下再結(jié)晶并用粉末X-射線衍射分析。對(duì)X-射線數(shù)據(jù)的化學(xué)計(jì)量處理被用于將樣品類分為不同的組別。采用熱的、光學(xué)的、分光鏡的和其它工具研究這些組別，以闡明哪些組別表現(xiàn)出獨(dú)特的固態(tài)形式的API。一般地，API顯示出許多不同的多形體形式，其中的許多似乎具有低順序(loworder)。無(wú)一被鑒定的固態(tài)形式是溶劑化物或水合物。除了多形體形式外，所述原料還似乎以液晶態(tài)存在。在研究中被鑒定的最穩(wěn)定的多形體形式被指定為A形式(多形體A)。溶劑再結(jié)晶為了實(shí)施基于溶劑_部分的多形體篩選，將測(cè)試原料在大約100種不同的晶體生長(zhǎng)條件進(jìn)行溶劑再結(jié)晶。再結(jié)晶試驗(yàn)的規(guī)模為大約15mL。改變晶體生長(zhǎng)條件的主要方式通過使用溶劑混合物的二進(jìn)位梯度陣列(binarygradientarrays)完成。也改變飽和溫度、生長(zhǎng)溫度和蒸發(fā)速率(相對(duì)過飽和度)，以在晶體生長(zhǎng)條件中產(chǎn)生額外的差異?？傊瑢⒍嘈误w篩選分為四個(gè)不同的再結(jié)晶階段(panels)。從四個(gè)再結(jié)晶階段產(chǎn)生的固體連同通過其它方式(漿液、退火等)產(chǎn)生的樣品一起經(jīng)粉末XRD分析。為了減輕晶粒效應(yīng)，將二維探測(cè)系統(tǒng)用于收集所有的XRD掃描數(shù)據(jù)。采用全方位化學(xué)計(jì)量學(xué)方法(fullprofilechemometric)處理評(píng)估收集的XRD數(shù)據(jù)，以確定樣品的晶型在再結(jié)晶時(shí)是否改變。衍射數(shù)據(jù)的化學(xué)計(jì)量學(xué)分析將樣品類分為8個(gè)不同的組別(或群)，從A至H進(jìn)行標(biāo)記。有三個(gè)主要的組別和五個(gè)具有小量成員的組別。再結(jié)晶樣品的范圍從完全結(jié)晶至完全非結(jié)晶形(或液晶)，表明在研究過程中探測(cè)到適宜范圍的結(jié)晶率。A組含有24個(gè)成員。一些“如被承認(rèn)的”批次進(jìn)入該組中。相對(duì)于其它組別而言，該組具有高的結(jié)晶度。B組是最大的組，其含有43個(gè)成員。該組具有低的結(jié)晶度，并且最終被細(xì)分為額外的組別(從B1至B4)。C組含有23個(gè)成員。該組代表非結(jié)晶形或LC樣品。其它5個(gè)組別(從D至H)各自具有少量成員(1個(gè)或2個(gè)成員)。顯示各組(從A直至H)成員數(shù)的概要示于表9中。得到的、對(duì)于單個(gè)(基于溶劑的)再結(jié)晶試驗(yàn)的組別的命名示于圖10-A至D中的較低部分。<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>非_競(jìng)爭(zhēng)件漿液試騎除了溶劑再結(jié)晶試驗(yàn)外，還為了搜尋新的固態(tài)形式實(shí)施非競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)。這些試驗(yàn)依賴于不同的多形體形式(如果化合物以不同的多形體形式存在)的溶解度差異。如此，僅具有比最初溶解的晶型更低的溶解度(更穩(wěn)定)的多形體形式(和溶劑化物)，可由非競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)產(chǎn)生。從本質(zhì)上看，當(dāng)固體溶解于(漿液)溶劑時(shí)，最終產(chǎn)生飽和溶液。如果多形體形式溶解，該溶液將是飽和的。然而，如果比最初溶解的多形體形式更穩(wěn)定的任何多形體形式(更穩(wěn)定形式具有較低的溶解度)，該溶液將是過飽和的。因此，任何更穩(wěn)定的多形體形式可成核并從溶液中沉淀出來(lái)。此外，非競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)常被用于鑒定與API形成溶劑化物的溶劑。通過將更多的原料暴露于少量的純?nèi)軇┲?，并于室溫下攪?dòng)得到的混懸液大約1周，實(shí)施漿液試驗(yàn)。固體經(jīng)機(jī)械過濾和通過XRD分析，確定得到的形式。為了避免分離后可能的解溶劑化或物理變化，在X-射線分析前，不使樣品經(jīng)歷干燥過程。表10顯示這些非競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)的結(jié)果。<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>大多數(shù)漿液試驗(yàn)導(dǎo)致基于X-射線散射行為的起始多形體形式無(wú)顯著性變化。一種溶劑，MeOH確實(shí)改變固體的衍射特征，充分改變其所屬的組別。在該樣品上所實(shí)施額外的研究，在標(biāo)記為“組別的特征鑒定”的段落中更詳細(xì)地描述。退火(annealing)試驗(yàn)除了溶劑再結(jié)晶試驗(yàn)和非競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)外，實(shí)施退火試驗(yàn)以搜尋新的固態(tài)形式。這些試驗(yàn)需要尋找作為溫度的函數(shù)的結(jié)構(gòu)變化。此通過采用變溫粉末X-射線衍射、熱_臺(tái)顯微鏡法和DSC試驗(yàn)完成，以搜尋可存在于多形體系統(tǒng)中的相變。該項(xiàng)工作的主體是針對(duì)理解多種形式的熱特性。通過使退火樣品加熱和尋找在熱、X-射線、光學(xué)等行為中的變化，可確定是否導(dǎo)致新的固態(tài)形式。自熔融中再結(jié)晶通過使用HS顯微鏡或DSC實(shí)施自熔融中再結(jié)晶，以加熱樣品直至熔融，然后通過冷卻至不同的溫度，或者以不同的速率冷卻它們，試圖使它們結(jié)晶。然后，通過XRD、DSC等分析樣品，以確定是否觀察到不同的晶型。組別的特征鑒定在將再結(jié)晶數(shù)據(jù)編碼入基于衍射行為的不同的組別后(見表7)，研究各組以確定各組別的其它性能是否可加以區(qū)別。各組的特征由將各組的代表性衍射數(shù)據(jù)與其它組別的比較開始。此一般隨后進(jìn)行DSC分析、TGA分析、熱臺(tái)顯微鏡法、NMR分析和其它分析。A組該組有大約24個(gè)成員。該組的特征性衍射性質(zhì)示于圖11A中，連同在圖11B中的相應(yīng)的熱特性。該組的成員命名為形式A。導(dǎo)致形式A的樣品源自不同類型的多形體篩選試驗(yàn)(多形體形式對(duì)照結(jié)晶試驗(yàn)、結(jié)晶篩選試驗(yàn)和漿液試驗(yàn))。形式A的樣品的特征包括良好程度的結(jié)晶度和兩個(gè)主要的熱事件。接近115-125°C的大的吸熱事件意味著形式A轉(zhuǎn)化為液晶態(tài)。有時(shí)接近115_125°C的主要的吸熱信號(hào)，伴隨有在低和/或高溫度側(cè)的較小的可辨別的信號(hào)。可變溫XRD工作提示，形式A可逆性轉(zhuǎn)化為接近的相關(guān)形式，其被命名為形式AE。在形式A原料的樣品中觀察到的第二個(gè)主要的吸熱事件，歸因于在大約170°C的熔融。形式A的分子光譜和TGA表明，其是無(wú)水、無(wú)溶劑的API的多形體形式。B(B1-B4)組未加工的化學(xué)計(jì)量學(xué)數(shù)據(jù)描述為含有大約43個(gè)成員的B組。組中的衍射行為的可變性表明，其由四個(gè)亞組組成。這些亞組被命名為B1、B2、B3和B4組。一般地，B亞組的樣品展現(xiàn)出彼此相當(dāng)類似的行為，并且具有比形式A的樣品較低的順序(結(jié)晶度)。B1組B1組的衍射和熱特征分別示于圖12A和12B中。特征性熱行為包括三個(gè)獨(dú)特的特性。第一個(gè)特性是在75-110°C區(qū)域的一對(duì)吸熱譜線。第二個(gè)特性是在接近115-125°C溫度范圍的小的吸熱譜線。第三個(gè)特性是接近170°C的熔融吸熱譜線。接近75-110°C的吸熱譜線對(duì)歸因于一對(duì)可逆的固體-固體多形體性轉(zhuǎn)型，其將形式B1轉(zhuǎn)變?yōu)樾问紿。采用可變溫X-射線衍射跟蹤這些轉(zhuǎn)換。接近115_125°C的吸熱信號(hào)歸因于形式H至液晶的轉(zhuǎn)化，隨后于170°C的液化(熔融)。需要注意的是示于圖12B中的溫度記錄圖中的可變性可歸因于某些程度上樣品的結(jié)晶度的差異。如示于圖13A的，形式H的衍射圖完全未能解析分辨(unresolved)。圖13B中的循環(huán)DSC溫度記錄圖顯示，隨著溫度升高和降低，轉(zhuǎn)換是可逆的。形式B1樣品的分子光譜和TGA表明，其為API的無(wú)水、無(wú)溶劑的多形體形式。B2組B2組是B亞組中最大的一組。該形式的衍射和熱特性分別示于圖14A和14B中。基于更大數(shù)目和更好解析的衍射峰，該組似乎具有比B1組更高的結(jié)晶度。該組的熱特性包括三個(gè)區(qū)域的吸熱特性。第一個(gè)特性通常是在100-110°C范圍大的、回旋的吸熱譜線。采用DSC，該特性顯示為可逆的(見圖15A和15B)，并且提示形式B2可逆地轉(zhuǎn)變?yōu)楸幻麨樾问紹2E的亞穩(wěn)態(tài)的形式，后者轉(zhuǎn)型為形式H。第二個(gè)熱特性是接近125°C的小的吸熱譜線，其使形式H轉(zhuǎn)化為液晶態(tài)。最后，液晶態(tài)在大約170°C經(jīng)歷液化。形式B2樣品的NMR和TGA表明，其是API的無(wú)水、無(wú)溶劑的多形體形式。B3組該組的典型衍射和熱行為分別示于圖16A和16B中。B3樣品的衍射和熱特征與其它的B組樣品的類似。形式B3的熱特性與B1的最類似，只是B3樣品一般在75-110°C溫度區(qū)域具有一個(gè)獨(dú)特的吸熱譜線，而形式B1具有兩個(gè)獨(dú)特的吸熱譜線。相信在75-110°C區(qū)域的最初的吸熱譜線代表多形體性轉(zhuǎn)化為形式H。于大約125°C形式H轉(zhuǎn)變?yōu)橐壕B(tài)，然后于大約170°C液化。圖17A和17B顯示循環(huán)DSC溫度記錄圖表明形式B3至H的轉(zhuǎn)化是可逆的，如同其它形式B/H互變體對(duì)。可變溫XRD還提示，形式B3緩慢地和可逆地轉(zhuǎn)換為被命名為形式_的密切相關(guān)的結(jié)構(gòu)，之后轉(zhuǎn)換為形式H。形式B3樣品的分子光譜和TGA表明，其是API的無(wú)水、無(wú)溶劑的多形體形式。B4組衍射和熱行為分別示于圖18A和18B中。該組與B2組間在XRD行為中的細(xì)微差異包括在多個(gè)角度的一些增強(qiáng)的和缺乏的反射。該組熱特征表明，其與B2組相似但又不同。B4組在大約75-110°C的溫度區(qū)域顯示出兩個(gè)吸熱譜線，然而B2組僅顯示出一個(gè)吸熱譜線。在通過接近75-110°C的吸熱譜線區(qū)域后，B4組可逆地轉(zhuǎn)變(見圖19A和19B)為被命名為形式H的亞穩(wěn)態(tài)的多形體形式。其伴隨使原料轉(zhuǎn)變?yōu)橐壕B(tài)的接近125°C的較小的吸熱譜線。該態(tài)維持直至溫度達(dá)到大約170°C時(shí)原料被液化?？勺儨豖RD用于研究作為溫度函數(shù)的原料。似乎是，形式B4也經(jīng)歷細(xì)微的可逆的變化，在轉(zhuǎn)變?yōu)樾问紿之前，變成被命名為形式B4E的密切相關(guān)的結(jié)構(gòu)。形式B4樣品的分子光譜和TGA表明，其為API的無(wú)水、無(wú)溶劑的多形體形式。B1-B4組基于少量的衍射峰，并且觀察到它們是寬峰并常?；匦模蠦組成員的XRD圖具有低的結(jié)晶度。由于衍射表現(xiàn)的類型的相似性，這種普通的特性使得難以辨別和編碼B1至B4組以及它們相應(yīng)的明顯的亞穩(wěn)態(tài)的形式(B2E、B3E、B4E)。應(yīng)該注意的是，可變溫XRD和循環(huán)DSC表明，一旦冷卻時(shí)，這些升高的溫度形式(H、B2E、B3E、B4E)可逆地轉(zhuǎn)變回B1至B4。形式H、B2E、B3E和B4E的在冷卻至室溫時(shí)的轉(zhuǎn)化，防止這些形式在室溫下被分離和進(jìn)一步研究。C組該組具有大約23個(gè)成員。該組的衍射和熱特征分別示于圖20A和20B中。該組代表的液晶或非結(jié)晶形態(tài)的樣品。X-射線衍射圖僅顯示出在低角度具有較小衍射信號(hào)的軔致輻射散射。一般地，其它形式的樣品，被加熱直至它們轉(zhuǎn)化為液晶態(tài)，即使在冷卻至室溫后仍傾向于維持在此態(tài)。應(yīng)該注意的是有許多類型的液晶并且液晶態(tài)的確切性質(zhì)尚未確定，除了其為熱致變的?？赡艿氖?，存在一種以上的液晶態(tài)或在研究過程中所鑒別的不同的多形體形式形成不同的類型的液晶態(tài)。H組H組描述僅通過加熱B組樣品穿過它們的第一個(gè)吸熱活性區(qū)域所觀察的樣品。觀察到每個(gè)B組樣品可逆地轉(zhuǎn)換為被命名為形式H的另一個(gè)多形體形式。形式H在118°C的衍射行為通過如在圖13中如此標(biāo)記的曲線顯示(標(biāo)記25°C的曲線是形式B1和標(biāo)記140°C的曲線是液晶)。能量關(guān)系采用各種形式于乙醇中的混合物(通常5050)并且于大約25°C攪動(dòng)數(shù)天實(shí)施競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)。通過于室溫?cái)噭?dòng)在乙醇中的一種形式的過多固體，實(shí)施非-競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)?；谄鋵?duì)于手頭多形體形式的適中的溶解性選擇乙醇，并且應(yīng)該理解的是乙醇似乎不與多形體形式形成溶劑化物。在競(jìng)爭(zhēng)性和非競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)兩者中，固體經(jīng)真空過濾和通過XRD分析。XRD圖用于確定未溶解的固體是否轉(zhuǎn)化為不同的多形體形式。在一種情況下，不同的多形體形式顯現(xiàn)的是，不同于最初存在的兩種形式中的任一種。此表明這兩種起始形式對(duì)于被分離的最終形式而言是亞穩(wěn)態(tài)的。一般地，在形式A的存在下，B多形體樣品易于轉(zhuǎn)變?yōu)樾问紸。此表明形式A比B多形體溶解性更小并且在熱力學(xué)上更穩(wěn)定。觀察到兩種形式B的多形體之間的一些競(jìng)爭(zhēng)性漿液導(dǎo)致形式A，其進(jìn)一步支持該能量關(guān)系的描述。非-競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)表明，易于轉(zhuǎn)換為A的B組多形體甚至沒有形成晶種(或引導(dǎo)入形式A)。漿液數(shù)據(jù)概述于表11.中。表11.多種多形體形式的漿液互變現(xiàn)象<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>形式C是該原料的液晶態(tài)。由于在工藝上是液體，其不經(jīng)歷漿液試驗(yàn)。形式H多形體，對(duì)于其給出可逆的吸熱(互變的)關(guān)系的、相應(yīng)的B多形體配對(duì)物而言，被認(rèn)為是亞穩(wěn)態(tài)的。此意味著形式H多形體比B多形體具有更好地溶解性和在熱力學(xué)上較不穩(wěn)定性。此與H多形體由于轉(zhuǎn)化為更穩(wěn)定的B家族多形體不能在室溫下分離的觀察一致。多形體篩詵結(jié)論采用化學(xué)計(jì)量學(xué)處理方法，將產(chǎn)生自多形體篩選試驗(yàn)(溶劑再結(jié)晶、自熔融中再結(jié)晶、退火、非-競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn))的、未加工的衍射數(shù)據(jù)初步類分為8個(gè)不同的組別。對(duì)這些不同的組別的分析用于實(shí)施額外的試驗(yàn)(如DSC、TGA、HSM、NMR等)，以使通過化學(xué)計(jì)量學(xué)處理的組別被精確判定。對(duì)這些組別的精確劃分導(dǎo)致于表12中概述的多形體形式被編石馬(codification)。表12.不同的多形體形式的概述<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>在表10中顯示的所有不同的形式命名為非-溶劑化的、非-水合的形式。實(shí)際上，在研究期間沒有觀察到明顯的溶劑化物。盡管對(duì)各種形式?jīng)]有實(shí)施正式的吸附/水合研究，未發(fā)現(xiàn)明顯的水合物。一般地，API實(shí)際上不溶解于水而有相當(dāng)?shù)闹苄裕崾酒淇刹粌A向于形成水合物。競(jìng)爭(zhēng)性漿液用于闡明在室溫條件下能夠被分離的多形體形式之間的能量關(guān)系。非_競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)(由形式A起始，見表10)不顯示任何多形體性變化。此，與非_競(jìng)爭(zhēng)性漿液試驗(yàn)數(shù)據(jù)相符，提示在多形體篩選過程中發(fā)現(xiàn)的形式，形式A似乎是API的熱力學(xué)上穩(wěn)定的形式。試驗(yàn)方法顯微鏡使用配置偏振可見光源和可極化檢偏器的蔡司(Zeiss)通用顯微鏡評(píng)估樣品的光學(xué)性能。典型地，將標(biāo)本固定于具有滴加浸鏡油和蓋玻片的顯微鏡載玻片上。典型地，放大倍率為250X。記錄觀察到的粒子/晶體大小和形狀。還注意雙折射的存在。分子光譜法」H_WR通過使l-10mg樣品溶解于含0.05%(v/v)四甲基硅烷(TMS)的二甲亞砜(DMS0)-d6中，制備樣品。于室溫在VarianGemini300MHzFT_NMR分光計(jì)上收集光譜。紅外光譜法(FTIR)用裝配HarrickSplitpea衰減全反射儀的、Nicolet510M-0傅里葉變換紅外分光計(jì)獲得紅外光譜。用分辨率4CHT1、自^OOlOOcnT1獲得光譜，并收集128行掃描用于每一次分析。差示掃描量熱法(DSC)在TAInstruments2910DSC上收集DSC數(shù)據(jù)。一般地，在鋁質(zhì)樣品鍋中將質(zhì)量范圍為1至10mg的樣品卷曲，并用清洗速率為50mL/min的氮從25至約175°C、以10°C/分鐘速率掃描。熱重分析儀法(TGA)在TAInstruments2950DSC上收集TGA數(shù)據(jù)。一般地，將5至15mg質(zhì)量范圍的樣品置于打開的、預(yù)稱皮重的鉬樣品鍋中，并用氮清洗從25至約150°C、以10°C/分鐘速率掃描。熱臺(tái)顯微鏡法(HSM)使用配置偏振可見光源和梅特勒(Mettler)熱臺(tái)附件的蔡司通用顯微鏡。將標(biāo)本固定于滴加浸鏡油和蓋玻片的顯微鏡載玻片上。典型地，放大倍率為200X。將樣品以3或10°C/分鐘的速率從25°C加熱至175°C.記錄觀察到的相變化、再結(jié)晶、泡沫的進(jìn)展演化寸。粉末流動(dòng)采用卡爾指數(shù)比較粉末流動(dòng)特征。通過使粉末經(jīng)歷機(jī)械力，可觀察粉末流動(dòng)的阻力。經(jīng)歷叩打的粉末的容積密度(可壓縮性)的增加可用于確定卡爾指數(shù)?？栔笖?shù)的概要和定性的流動(dòng)性概述于下表13中。<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>實(shí)驗(yàn)前使各批次過<1000微米篩。此對(duì)去除樣品中的任何結(jié)塊是必需的。高效液相色譜(HPLC)采用PerkinElmerHPLC,用LC-410泵，LC-235二極管陣列檢測(cè)器和200系列自動(dòng)進(jìn)樣器，收集LC數(shù)據(jù)。HPLC配備peltier控制器樣品托盤和柱加熱器。通過經(jīng)驗(yàn)證的客戶機(jī)-服務(wù)器LIMS收集數(shù)據(jù)。所使用的HPLC方法如下柱PhenomenexInersil0DS-2，250X4.6mm，5微米粒度；流動(dòng)相于6238乙腈水/乙腈中的0.2%高氯酸；梯度25分鐘自0至95%；流速1.5mL/min；檢測(cè)254nm)提示，通過延長(zhǎng)結(jié)晶化時(shí)間(包括結(jié)晶化后的混懸液攪拌過夜)，雜質(zhì)(硬脂酸鳥嘌呤醇)從最初起始水平的約0.3面積％達(dá)到約0.9面積％。通過提供以下時(shí)間和溫度，雜質(zhì)的構(gòu)成限制至現(xiàn)行認(rèn)為可接受的0.6面積％。液相色譜質(zhì)譜法(LCMS)采用由以下部件組成的Agilent1100LC/MS系統(tǒng)收集數(shù)據(jù)G1367A孔板進(jìn)樣器，G1316A柱加熱室，G1315A二極管陣列檢測(cè)器，G1322A真空除氣器，G1312A二元泵和G1946C質(zhì)譜檢測(cè)器(電噴霧單-quad)?；谥懊枋龅腍PLC方法選擇LC條件。對(duì)于該方法的主要修改是使用甲酸而不是高氯酸。使用由UV二極管陣列電噴霧和陽(yáng)離子型MS分析樣品。X-射線粉末衍射(XRD)使用裝配XYZ調(diào)整臺(tái)、用于定位的激光視頻顯微鏡和兩個(gè)二維HiStar面積檢測(cè)器的BrukerD8Discovery衍射計(jì)獲得X-射線粉末衍射圖。采集時(shí)間名義上為60秒。于40kV和40mA運(yùn)行的CuKa放射1.5406埃源用于照射樣品。X-射線光學(xué)由連接0.5mm的針孔瞄準(zhǔn)儀的Gobel鏡組成。采用配有給出有效20范圍為4-40°的距離15cm的樣品-檢測(cè)器的e-e連續(xù)掃描儀。將樣品固定于低背景石英板中。使用可變溫?zé)崤_(tái)操縱樣品溫度用于某些試驗(yàn)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，可在不背離廣義的本發(fā)明概念時(shí)對(duì)以上描述的實(shí)施方案作出修改。因此，應(yīng)該理解，本發(fā)明并不受限于所公開的具體實(shí)施方案，但意欲涵蓋于如在所附權(quán)利要求書中限定的本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)的修改。權(quán)利要求結(jié)晶伐馬洛韋或其藥學(xué)上可接受的鹽。2.依據(jù)權(quán)利要求1的結(jié)晶伐馬洛韋，其在X-射線粉末衍射圖中的22.9°+/-0.2°、18.6°+/-0.2°、19.5°+/-0.2°、24·3°+/-0.2°、20·8°+/-0.2°、21·8°+/-0.2°、27.0°+/-0.2°,14.7°+/-0.2°,15.5°+/-0.2°,25.5°+/-0.2°和29.9°+/-0.2°處具有特征吸收峰。3.一種藥用組合物，其包含結(jié)晶伐馬洛韋或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的賦形劑或稀釋劑。4.權(quán)利要求3的藥用組合物，其中的結(jié)晶伐馬洛韋在X-射線粉末衍射圖中的22.9°+/-0.2°、18·6°+/-0.2°、19·5°+/-0.2°、24·3°+/-0.2°、20·8°+/-0.2°、21.8°+/-0.2°,27.0°+/-0.2°,14.7°+/-0.2°,15.5°+/-0.2°,25.5°+/-0.2°和29.9°+/-0.2°處具有特征吸收峰。5.權(quán)利要求1或2的結(jié)晶伐馬洛韋，其純度至少為90%。6.權(quán)利要求1或2的結(jié)晶伐馬洛韋，其純度至少為95%。7.權(quán)利要求1或2的結(jié)晶伐馬洛韋，其純度至少為99%。8.一種制備結(jié)晶伐馬洛韋的方法，其包括以下步驟通過加熱至適當(dāng)?shù)膬?nèi)部溫度，將伐馬洛韋溶解于低級(jí)烷醇溶劑或低級(jí)烷醇的混合溶劑中；在邊攪拌下，使該溶液冷卻，以實(shí)現(xiàn)伐馬洛韋的基本結(jié)晶化；和收集結(jié)晶伐馬洛韋。9.權(quán)利要求8的方法，其中的低級(jí)烷醇溶劑是乙醇。10.權(quán)利要求8的方法，其中的低級(jí)烷醇的混合溶劑是955(ν/ν)乙醇/2-丙醇的混合物。11.權(quán)利要求8的方法，其中的內(nèi)部溫度為從約65°C至約74°C。12.權(quán)利要求11的方法，其中的內(nèi)部溫度為從約68°C至約72°C。13.權(quán)利要求8的方法，其中的冷卻速率為每小時(shí)從約5°C至約15°C。14.權(quán)利要求13的方法，其中的冷卻速率為每小時(shí)從約8°C至約12°C。15.一種在患者中治療或預(yù)防病毒性感染的方法，所述方法包括給予有需要的患者有效治療量的權(quán)利要求1的結(jié)晶化合物或權(quán)利要求3的藥用組合物。16.權(quán)利要求15的方法，其中的病毒性感染是水痘帶狀皰疹病毒感染。17.權(quán)利要求15的方法，其中的病毒性感染是單純皰疹病毒感染。18.權(quán)利要求15的方法，其中的病毒性感染是人類皰疹病毒感染。19.權(quán)利要求15的方法，其中的病毒性感染是愛潑斯坦巴爾病毒感染。20.權(quán)利要求15的方法，其中的病毒性感染是巨細(xì)胞病毒感染。21.權(quán)利要求15的方法，其中的病毒性感染是HIV感染。全文摘要本發(fā)明涉及結(jié)晶形式的伐馬洛韋、用于制備結(jié)晶形式的伐馬洛韋的程序、其藥用組合物及其使用方法。文檔編號(hào)C07D473/00GK101827846SQ200880108607公開日2010年9月8日申請(qǐng)日期2008年9月18日優(yōu)先權(quán)日2007年9月21日發(fā)明者G·P·布特克,M·H·奧奈爾申請(qǐng)人:伊皮芬尼生物科學(xué)公司