專利名稱：一種烷基卟啉類化合物及其制備和在醫(yī)農(nóng)藥領(lǐng)域的應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬卟啉類化合物及其制備和應用領(lǐng)域，特別是涉及一種烷基卟啉類化合物及其制備和在醫(yī)農(nóng)藥領(lǐng)域的應用。

背景技術(shù)：
光動力療法是近20年發(fā)展起來的一種最有前途的新技術(shù)。自20世紀70年代進入臨床研究以來，已經(jīng)在腫瘤的治療上取得了突破進展，目前光動力療法不僅局限于惡性腫瘤的治療，在其他多種疾病的治療中也表現(xiàn)出良好的前景。
在光動力治療中，光敏劑作為能量的載體、反應的橋梁而起著決定性的作用。理想的光敏劑最好是具有固定成分的純化合物，在沒有光的情況下沒有毒性，容易在靶組織上聚集，而且要足夠快的從身體里排除以避免全身皮膚過敏。它不會在身體內(nèi)發(fā)生過多的積聚，有效的吸收長波長的光，以致得到盡可能深入的光動力治療效果，而且所使用的光源不會對健康組織造成光敏性。好的光敏劑不應過強的吸收處于400-600nm范圍內(nèi)的光，使由于太陽光所引起的全身過敏的危險性要盡可能的小。第一代光敏劑是以1993年在荷蘭上市的第一個光敏劑photofrin II為代表，它是組成復雜的血卟啉衍生物的混合物，其適應癥為腫瘤；第二代光敏劑以卟啉類衍生物為主，該類化合物的化學結(jié)構(gòu)明確，有較高的純度，較好的光熱穩(wěn)定性，紅光區(qū)的吸收較強，同時通過對卟啉環(huán)的化學修飾可以調(diào)節(jié)光敏劑的疏水分配系數(shù)，有利于光敏劑在病變組織的吸收和聚積，是較為理想得光敏劑。其中在吡咯環(huán)上有各種烷基取代基的卟啉化合物的代表是八乙基紅紫素錫。這是一個光療性能很好的化合物，它在光療中不傷正常組織，且皮膚光敏性反應小。其作用機理是引起細胞膜的損傷。
人類用光作為醫(yī)療技術(shù)已經(jīng)有幾千年的歷史，但直到20世紀70年代末PDT方得到長足發(fā)展。目前PDT已廣泛應用于腫瘤(如肺癌、皮膚癌、食管癌、膀胱癌、頭頸部癌等)、視網(wǎng)膜黃斑變性、光化性角化病、鮮紅斑痣、銀屑病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、血管成形術(shù)后再狹窄等疾患的治療，應用前景十分可喜。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種烷基卟啉類化合物及其制備和在醫(yī)農(nóng)藥領(lǐng)域的應用，該烷基卟啉類化合物具有良好的脂溶性和水溶性，使其在腫瘤細胞中有高度的選擇性吸收，是較為理想的光敏劑；該合成路線操作簡單，成本低，對環(huán)境友好，具有良好的經(jīng)濟效益和應用前景。
本發(fā)明的化學反應方程式如下
本發(fā)明的一種烷基卟啉類化合物，其化學結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示
式(I)中，R1為烷基、環(huán)烷基或含雜原子的環(huán)烷基；R2為烷基、環(huán)烷基或含雜原子的環(huán)烷基；R1、R2相同或不同；性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
優(yōu)選的R1為C2～C3直鏈烷基或C4環(huán)烷基，R2為C2～C3直鏈烷基或C4環(huán)烷基；R1、R2相同或不同； 所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四-(5-嗎啉戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四-(5-四氫吡咯戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四-(5-二正丙胺戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四(5-二乙胺戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
本發(fā)明的一種烷基卟啉類化合物的制備方法，包括如下步驟 (1)以摩爾比1∶1～1.2的吡咯和6-氯-1-己醛為原料，在Lewis酸作用下，于有機溶劑中攪拌，吡咯與有機溶劑的比為1mmol∶15～20ml，然后加入與吡咯摩爾比為1～0.5∶1.2四氯苯醌進行氧化，于45℃有機溶劑回流1h～2h后，制得重要中間體5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩； (2)在有機溶劑介質(zhì)中，將5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩與胺類化合物在鉀鹽和催化劑存在下，按1mmol∶5～25ml的比例進行取代反應，反應溫度為有機溶劑的回流溫度，回流1～12h，除去溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱層析洗脫，收集產(chǎn)物。
所述步驟(1)中的Lewis酸為BF3·Et2O、丙酸或蒙脫土，Lewis酸的用量與吡咯的摩爾比為1.2∶1；優(yōu)選蒙脫土k10； 所述步驟(1)中的有機溶劑為二氯甲烷、氯仿或二氯甲烷與1％～8％乙醇的混合溶液；優(yōu)選二氯甲烷； 所述步驟(2)中的有機溶劑為乙腈，其用量為0～120ml的乙腈:1mmol的5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩； 所述步驟(2)中的胺類化合物為嗎啉、四氫吡咯、二正丙胺或二乙胺； 所述步驟(2)中的鉀鹽和催化劑分別為K2CO3和KI，K2CO3和KI的摩爾比為1∶1，并且5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩與K2CO3的摩爾比為1∶5～16； 所述步驟(2)中的洗脫，所用的洗脫液選自石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇中的一種或幾種的混合溶劑。
本發(fā)明的烷基卟啉類化合物作為光敏劑應用于治療腫瘤類疾病和作為光活化殺蟲劑。
通過對合成的此類光敏劑對結(jié)腸癌細胞的光動力試驗發(fā)現(xiàn)，在有光照時，光敏劑能明顯的抑制結(jié)腸癌細胞的增殖；通過對合成的此類光敏劑對小鼠S180肉瘤的光動力試驗發(fā)現(xiàn)，該類光敏劑可明顯抑制小鼠S180肉瘤，對腫瘤具有顯著的殺傷作用，具有成為光動力抗腫瘤藥物的前景；通過對果腹果蠅的光動力活化毒性試驗，發(fā)現(xiàn)該類化合物是一類較好的光活化殺蟲劑。
有益效果 本發(fā)明中的烷基卟啉類化合物在四吡咯化合物的5，10，15，20位引入了不同的基團，提高了其脂溶性和水溶性，有利于光敏劑通過血液被輸送到病灶，也有利于光敏劑穿透細胞壁，而使其在腫瘤細胞中有高度的選擇性吸收，是較為理想的光敏劑；該合成路線操作簡單，成本低，對環(huán)境友好，具有良好的經(jīng)濟效益和應用前景。



圖1是八乙基紅紫素錫的化學結(jié)構(gòu)式； 圖2是本發(fā)明的烷基卟啉類化合物化學結(jié)構(gòu)通式； 圖3是5，10，15，20-四-(5-嗎啉戊基)-卟吩的數(shù)據(jù)分析圖譜(其中，a.分子結(jié)構(gòu)式，b.紫外吸收圖)； 圖4是5，10，15，20-四-(5-四氫吡咯戊基)-卟吩的數(shù)據(jù)分析圖譜(其中，a.分子結(jié)構(gòu)式，b.紫外吸收圖)； 圖5是5，10，15，20-四-(5-二正丙胺戊基)-卟吩的數(shù)據(jù)分析圖譜(其中，a.分子結(jié)構(gòu)式，b.紫外吸收圖)； 圖6是5，10，15，20-四-(5-二乙胺戊基)-卟吩的數(shù)據(jù)分析圖譜(其中，a.分子結(jié)構(gòu)式，b.紫外吸收圖)。

具體實施例方式 下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定的范圍。
實施例1 1.5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩的合成 (5，10，15，20-tetrakis(5-chloropentyl)-21H，23H-Porphine)的合成
稱取12g蒙脫土k10于500mL三口燒瓶中放入烘箱在120℃下活化3小時，隨后將其取出，搭置好回流裝置，充入氮氣，瓶壁用鋁箔包住避光。加入350mL二氯甲烷和溶有6-氯-1-己醛(2.87g，21mmol)的10mL二氯甲烷，攪拌半小時。充分攪拌的情況下，室溫下，慢慢滴入吡咯(1.52mL，22mmol)，繼續(xù)攪拌1小時。然后加入四氯苯醌(3.87g，15.75mmmol)，45℃下回流1小時。過濾去除固體粉末，乙酸乙酯洗濾餅至其無色。將濾液旋干，乙酸乙酯和石油醚過柱，得到5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩1.02g，產(chǎn)率27％。
HNMR(δ，CDCl3，ppm)-2.80(s，2H)，1.86～1.89(m，16H)，2.46～2.47(m，8H)，3.49～3.53(m，8H)，4.87(t，J＝8.96Hz，8H)，9.37(s，8H)，該化合物的核磁數(shù)據(jù)與文獻值(Chemistry Letters，1993，22(1)117-120.)一致。
2.5，10，15，20-四-(5-嗎啉戊基)-卟吩的合成 (5，10，15，20-tetrakis(5-morpholinopentyl)-21H，23H-Porphine)的合成
將5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩(2g，2.84mmol)溶于40mL嗎啉中，加入100mL搭有回流裝置，充滿氮氣保護的三口燒瓶中，其中三口燒瓶中已加入碘化鉀(2.66g，16mmol)和碳酸鉀(2.21g，16mmol)，加熱回流1小時，反應基本完全。冷卻，加入200mL乙酸乙酯萃取，用水洗多次，再用飽和食鹽水洗幾次，收集有機相，加入無水硫酸鎂干燥，過濾，旋蒸。柱層析(二氯甲烷∶甲醇20∶1)，得到化合物5，10，15，20-四-(5-嗎啉戊基)-卟吩1.26g，產(chǎn)率49％。
MS(ESI)931.8(M+1). HNMR(δ，CDCl3，ppm)-2.74(s，2H)，1.63～1.72(m，16H)，2.29～2.36(m，24H)，2.45(m，8H)，3.64(t，J＝4.16Hz，16H)，4.86(t，J＝7.52Hz，8H)，9.38(s，8H). UV/visλmax(CH2Cl2)nm421，530，568，672. 實施例2 5，10，15，20-四-(5-四氫吡咯戊基)-卟吩的合成 (5，10，15，20-tetrakis(5-(pyrrolidin-1-yl)pentyl)-21H，23H-Porphine)的合成
將實施例1合成的5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩(950mg，1.3mmol)、四氫吡咯(18mL)、碳酸鉀(1.44g，10.4mmol)和碘化鉀(1.73g，10.4mmol)按上述5，10，15，20-四-(5-嗎啉戊基)-卟吩的方法制備。得到化合物5，10，15，20-四-(5-四氫吡咯戊基)-卟吩338mg，產(chǎn)率30％。
MS(ESI)867.7(M+1). HNMR(δ，CDCl3，ppm)-2.78(s，2H)，1.66(m，32H)，2.37～2.44(m，32H)，4.82(t，J＝7.8Hz，8H)，9.34(s，8H)。
UV/visλmax(CH2Cl2)nm422，528，564，672。
實施例3 5，10，15，20-四-(5-二正丙胺戊基)-卟吩的合成 (5，10，15，20-tetrakis((5-dipropylamino)pentyl)-21H，23H-Porphine)的合成
在100mL三口燒瓶中，加入實施例1合成的5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩(175mg，0.24mmol)、二正丙胺(2mL，15.36mmol)、碘化鉀(0.64g，3.84mmol)、碳酸鉀(0.53g，3.84mmol)和乙腈25mL，加熱回流12小時，停止反應，冷卻。加入200mL二氯甲烷萃取，水洗多次至中性，飽和氯化鈉洗。收集有機相，加入無水硫酸鎂干燥，過濾，旋干。由于胺的吸附性，采用爬大板將產(chǎn)物收集(CH2Cl2∶CH3OH∶Et3N 15∶1∶0.1)，得到化合物5，10，15，20-四-(5-二正丙胺戊基)-卟吩47mg，產(chǎn)率20％。
MS(ESI)987.9(M+1). HNMR(δ，CDCl3，ppm)-2.88(s，2H)，0.63～0.64(m，24H)，1.74～1.94(m，32H)，2.45(m，8H)，2.66～2.75(m，16H)，3.00～3.02(m，8H)，4.87～4.89(m，8H)，9.39(s，8H). UV/visλmax(CH2Cl2)nm419，532，568. 實施例4 5，10，15，20-四(5-二乙胺戊基)-卟吩的合成 (5，10，15，20-tetrakis((5-diethylamino)pentyl)-21H，23H-Porphine)的合成
將實施例1合成的5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩(350mg，0.48mmol)、二乙胺(10mL)、碳酸鉀(1.06g，7.68mmol)和碘化鉀(1.27g，7.68mmol)按5，10，15，20-四-(5-二正丙胺戊基)-卟吩的合成方法制備。得到化合物5，10，15，20-四(5-二乙胺戊基)-卟吩61mg，產(chǎn)率14.5％。
MS(ESI)875.8(M+1). HNMR(δ，CDCl3，ppm)-2.77(s，2H)，0.94(m，24H)，1.86～1.96(m，16H)，2.42～2.47(m，32H)，4.85(m，8H)，9.37(s，8H). UV/visλmax(CH2C12)nm419，533，568，670. 實施例5 1.光敏劑對結(jié)腸癌SW480細胞的光動力抗增殖實驗 受試細胞結(jié)腸癌細胞SW480 受試藥物光敏劑1，2，3，4，血卟啉衍生物HpD(北京制藥工業(yè)研究所生產(chǎn))。
光源MTZ-1型脈沖激光治癌機；SD2490型激光功率測量儀。
光動力抗腫瘤細胞增殖作用實驗將處于對數(shù)生長期的細胞用胰酶消化后，完全培養(yǎng)基重懸成細胞懸液，隨之將其接種于96孔板，每孔100μl，置于37℃5％CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，24h后加入相同濃度五種不同的光敏劑；48h換成新鮮培養(yǎng)基，然后進行光照(XD-635AB型光動力PDT激光治療儀，功率15mW/cm2，波長630mm，輻射細胞20min，光劑量18J/cm2)；72h時進行MTT檢測。培養(yǎng)終止前4h加入10μl 5mg/ml的MTT，吸棄培養(yǎng)液后加100μl DMSO終止反應，酶標儀570nm檢測OD值。實驗重復三次。
實驗結(jié)果見圖1，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四種光敏劑對結(jié)腸癌細胞均有抗增殖作用。
五種光敏劑的IC50值分別為4.4μmol/L，5.5μmol/L，7.2μmol/L，0.87μmol/L，1.57μmol/L.。
表1光敏劑1，2，3，4對SW480結(jié)腸癌細胞增殖抑制作用
光敏劑暗光學毒性測試將處于對數(shù)生長期的細胞用胰酶消化后，完全培養(yǎng)基重懸成細胞懸液，隨之將其接種于96孔板，每孔100μl，置于37℃5％CO2培養(yǎng)箱避光培養(yǎng)，24h后加入相同濃度五種不同的光敏劑；48h換成新鮮培養(yǎng)基72h時進行MTT檢測。培養(yǎng)終止前4h加入10μl 5mg/ml的MTT，吸棄培養(yǎng)液后加100μl DMSO終止反應，酶標儀570nm檢測OD值。實驗重復三次。實驗結(jié)果見圖2，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四種光敏劑均無暗光學毒性。
表2光敏劑1，2，3，4對SW480結(jié)腸癌細胞暗光學毒性
2.光敏劑對小鼠S180肉瘤的光動力治療實驗 受試動物遠交昆明株小鼠平均體重18～24g，S180肉瘤種鼠(中國科學院藥物研究所提供) 受試藥物光敏劑1，2，3，4，在無菌條件下將上述藥物溶于最小量吐溫-80中的生理鹽水稀釋至0.5mg/mL溶液備用，血卟啉衍生物HpD(北京制藥工業(yè)研究所生產(chǎn))。
光源MTZ-1型脈沖激光治癌機；SD2490型激光功率測量儀。
小鼠S180肉瘤光動力損傷實驗無菌條件下于小鼠前胸部皮下接種S180肉瘤，待腫瘤長至直徑4～6mm時，選取生長良好、無潰瘍具半球狀單一腫瘤的小鼠，按同窩同性別隨機分組，每組8只，小鼠腹腔注射給藥，并以藥物溶劑作為空白對照，將HpD配成相同濃度溶液作為陽性對照，給藥后2h用功率密度為220mW/cm2銅蒸汽一染料激光(波長630mm)輻射腫瘤20min(光劑量260J/cm2)；光照后5天，處死小鼠，剝離腫瘤，稱重，并與對照組比較抑制率。


式中，T給藥組平均瘤重；C對照組平均瘤重 實驗結(jié)果見表3，四種光敏劑對腫瘤具有明顯的抑制作用。
表3光敏劑1，2，3，4對腫瘤的抑制效果 *P＜0.05與空白對照比較 3.光敏劑對果腹果蠅的光動力作用實驗 選擇羽化一周內(nèi)的果腹果蠅試蟲，用乙醚麻醉分組(不分雌雄)，放入含有不同濃度受試藥樣的(0.5，1.0，2.0個g/L)培養(yǎng)管中，每管20只，用尼龍紗布封緊蓋口。每種處理重復3次。將培養(yǎng)管置于暗處，模擬黑暗中進食48h，然后轉(zhuǎn)移基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，在不同光照強度的白熾燈下20cm均勻受照一段時間后(光照時管壁溫度不超過35度)，轉(zhuǎn)移至黑暗處定時觀察死亡個數(shù)，計算死亡率。實驗結(jié)果見表4、5、6、7，發(fā)現(xiàn)四種光敏劑表現(xiàn)出較好的光活化殺蟲活性。
表4光敏劑1對果腹果蠅的光活化毒性實驗
表5光敏劑2對果腹果蠅的光活化毒性實驗
表6光敏劑3對果腹果蠅的光活化毒性實驗
表7光敏劑4對果腹果蠅的光活化毒性實驗

權(quán)利要求
1.一種烷基卟啉類化合物，其化學結(jié)構(gòu)通式如式(I)所示
式(I)中，R1為烷基、環(huán)烷基或含雜原子的環(huán)烷基；R2為烷基、環(huán)烷基或含雜原子的環(huán)烷基；R1、R2相同或不同；性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烷基卟啉類化合物，其特征在于所述的R1為C2～C3直鏈烷基或C4環(huán)烷基，R2為C2～C3直鏈烷基或C4環(huán)烷基；R1、R2相同或不同。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烷基卟啉類化合物，其特征在于所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四-(5-嗎啉戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烷基卟啉類化合物，其特征在于所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四-(5-四氫吡咯戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烷基卟啉類化合物，其特征在于所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四-(5-二正丙胺戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種烷基卟啉類化合物，其特征在于所述的烷基卟啉類化合物為5，10，15，20-四(5-二乙胺戊基)-卟吩，其化學結(jié)構(gòu)如下
性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解。
7.一種烷基卟啉類化合物的制備方法，包括如下步驟
(1)以摩爾比1∶1～1.2的吡咯和6-氯-1-己醛為原料，在Lewis酸作用下，于有機溶劑中攪拌，吡咯與有機溶劑的比為1mmol∶15～20ml，然后加入與吡咯摩爾比為1～0.5∶1.2四氯苯醌進行氧化，于45℃有機溶劑回流1h～2h后，制得重要中間體5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩；
(2)在有機溶劑介質(zhì)中，將5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩與胺類化合物在鉀鹽和催化劑存在下，按1mmol∶5～25ml的比例進行取代反應，反應溫度為有機溶劑的回流溫度，回流1～12h，除去溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱層析洗脫，收集產(chǎn)物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種烷基卟啉類化合物的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中的Lewis酸為BF3·Et2O、丙酸或蒙脫土，Lewis酸的用量與吡咯的摩爾比為1.2∶1；有機溶劑為二氯甲烷、氯仿或二氯甲烷與1％～8％乙醇的混合溶液。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種烷基卟啉類化合物的制備方法，其特征在于所述步驟(2)中的有機溶劑為乙腈，其用量為0～120ml的乙腈1mmol的5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩；胺類化合物為嗎啉、四氫吡咯、二正丙胺或二乙胺；鉀鹽和催化劑分別為K2CO3和KI，K2CO3和KI的摩爾比為1∶1，并且5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩與K2CO3的摩爾比為1∶5～16；洗脫所用的洗脫液選自石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇中的一種或幾種的混合溶劑。
10.一種烷基卟啉類化合物作為光敏劑應用于治療腫瘤類疾病和作為光活化殺蟲劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種烷基卟啉類化合物，其化學結(jié)構(gòu)通式如右所示。其中，R1為烷基、環(huán)烷基或含雜原子的環(huán)烷基；R2為烷基、環(huán)烷基或含雜原子的環(huán)烷基；R1、R2相同或不同；性狀紫紅色固體，熔點300℃以上分解；其制備是以吡咯和6-氯-1-己醛為原料，在Lewis酸作用下，加入四氯苯醌進行氧化，有機，制得重要中間體5，10，15，20-四-(5-氯戊基)-卟吩；再將該中間體與不同的胺類化合物進行取代反應，殘余物經(jīng)硅膠柱層析洗脫，收集產(chǎn)物。該烷基卟啉類化合物具有良好的脂溶性和水溶性，使其在腫瘤細胞中有高度的選擇性吸收，是較為理想的光敏劑；該合成路線操作簡單，成本低，對環(huán)境友好，具有良好的經(jīng)濟效益和應用前景。
文檔編號C07D487/22GK101591341SQ20091005399
公開日2009年12月2日 申請日期2009年6月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月26日
發(fā)明者陳志龍, 張丹萍, 楊曉霞, 王紅弟, 張薇莉, 丁志樓, 孫經(jīng)建, 呂書晴, 丹 吳, 朱林鋒 申請人:東華大學, 陳志龍