甘松馬兜鈴?fù)樾捅栋胼祁惢衔镆约爸苽浞椒ㄅc應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥研究與開發(fā)領(lǐng)域，尤其是甘松馬兜鈴?fù)樾捅栋胼祁惢衔镆约爸?備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 5-羥色胺轉(zhuǎn)運體（SERT)是一種對5-HT有高度親和力的跨膜轉(zhuǎn)運蛋白，約含630 個氨基酸殘基，其編碼基因（SLC6A4)分別位于7號和11號染色體上，由跨度約為35kb的 14個外顯子組成。SERT蛋白包含12~13個跨膜區(qū)，N端及C端位于胞質(zhì)中，靠近N端處 有cAMP依賴性蛋白激酶結(jié)合位點，在第三與第四跨膜區(qū)之間有一位于細(xì)胞外的環(huán)狀部分， 是N-連接的糖基化位點。
[0003] SERT屬于Na+/ci依賴型轉(zhuǎn)運蛋白，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)主要位于5-HT能神經(jīng)元， SERT從神經(jīng)突觸間隙中重新攝取5-HT進(jìn)入突觸前神經(jīng)元，直接影響突觸間隙5-HT濃度，改 變突觸后受體介導(dǎo)信號的量和作用持續(xù)時間。在消化系統(tǒng)SERT主要位于腸粘膜上皮細(xì)胞， 重新攝取腸道黏膜層的嗜鉻細(xì)胞釋放的5-HT來調(diào)節(jié)胃腸功能。此外，SERT在血小板、胎盤 組織、骨髓、腎、肺、心、腎上腺、肝、甲狀旁腺、甲狀腺、胰腺等亦有分布，提示SERT參與多種 生理功能。
[0004] SERT是轉(zhuǎn)運5-HT的重要分子，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)與情緒、食欲、睡眠、記憶、學(xué)習(xí)等 許多生理心理功能相關(guān)，SERT及5-HT表達(dá)改變可引起焦慮、抑郁、強(qiáng)迫癥、恐懼癥，甚至精 神分裂癥，并與藥物成癮性密切相關(guān)；在胃腸道功能性疾病中SERT扮演了重要角色，5-HT 信號系統(tǒng)異?？蓪?dǎo)致胃腸道動力及分泌功能異常、內(nèi)臟高敏感性，與慢性便秘、腸易激綜 合征、腹瀉及功能性消化不良等胃腸道功能性疾病密切相關(guān)。
[0005] SERT是臨床藥物研發(fā)的重要靶點?；赟ERT靶點的經(jīng)典抗抑郁藥多屬于選擇 性SERT抑制劑（SSRI)，如氟西?。‵luoxetine)等；5-羥色胺再攝取促進(jìn)劑（SSRE)則少 有報道，至今已報道SSRE有噻奈普汀（tianeptine)，別名達(dá)體朗（stablon)，其化學(xué)結(jié)構(gòu) 屬三環(huán)類抗抑郁藥，臨床主要用于抗抑郁和抗焦慮。實驗研究發(fā)現(xiàn)噻奈普汀可促進(jìn)5-HT 再攝取，在神經(jīng)結(jié)構(gòu)可塑性方面，噻奈普汀對應(yīng)激/皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元樹突萎縮具 有預(yù)防作用，能夠?qū)箲?yīng)激誘發(fā)的海馬前體細(xì)胞增殖、海馬體積下降和N-乙酰天冬氨酸濃 度下降，并防止杏仁核樹突過度增生。在神經(jīng)興奮性方面，噻奈普汀能夠克服應(yīng)激阻斷海 馬長時程增強(qiáng)作用，逆轉(zhuǎn)應(yīng)激對海馬-前皮層突觸的抑制作用等。在神經(jīng)保護(hù)方面，噻奈 普汀能夠降低海馬和顳葉皮層的細(xì)胞凋亡。在記憶功能方面，噻奈普汀對應(yīng)激誘導(dǎo)空間 記憶損害具有阻斷作用，增加記憶保留，有助于注意力集中行為，拮抗酒精的有害作用等 (McEwenBS,OlieJP. 2005.Neurobiologyofmood,anxiety,andemotionsasrevealed bystudiesofauniqueantidepressant:tianeptine.MolecularPsychiatry10,525 -537)。此外，噻奈普汀能使中樞5-HT代謝物5-羥吲哚乙酸升高，推斷可能由于突觸前膜再攝 取-5-HT增加后，神經(jīng)內(nèi)5-HT分解代謝相應(yīng)增高有關(guān)；噻奈普汀可作用于下丘腦-垂體-腎 上腺軸，使下丘腦皮質(zhì)激素釋放因子及垂體前葉腎上腺皮質(zhì)激素濃度下降。
[0006] 噻奈普汀對重度抑郁癥有效，對抑郁癥長期療效優(yōu)于氟西汀，且安全性高，不良反 應(yīng)少，適合于老年抑郁癥，抗焦慮效果優(yōu)于氟西汀[胡萌，李臻.2007.噻奈普汀藥理研究和 臨床應(yīng)用進(jìn)展.廣東醫(yī)學(xué)28(7) =1192-1193.]噻奈普汀對人體的作用特點包括：對心境紊 亂有一定作用，介于鎮(zhèn)靜性抗抑郁藥和興奮性抗抑郁藥之間；對軀體不適，尤其是對于焦慮 和心境紊亂有關(guān)的胃腸不適有明顯作用；對酒精中毒病人在戒酒期間出現(xiàn)的人格和行為紊 亂有一定作用；而且，噻奈普汀對下列方面無不良作用：睡眠和警覺；心血管系統(tǒng)；膽堿能 系統(tǒng)（無抗膽堿能癥狀）；藥物成癮。以上研究提示了 5-羥色胺再攝取促進(jìn)劑（SSRE)在 臨床應(yīng)用中的特點和優(yōu)勢。
[0007] 甘松（NardostachyschinensisBatal.)是敗醬科甘松屬植物，具有理氣止痛，開 郁醒脾；外用祛濕消腫的功效，甘松已經(jīng)報道的生物活性包括（1)作用于神經(jīng)系統(tǒng)，如抗抑 郁、鎮(zhèn)靜和抗驚厥、抗帕金森和記憶恢復(fù)；（2)作用于心血管系統(tǒng)，如降血壓、抗心律失常、 抗心肌缺血、抗心血管損傷；(3)作用于呼吸系統(tǒng)，如增強(qiáng)耐缺氧能力；(4)抑菌；（5)抗肝 損傷等。甘松的化學(xué)成分包括倍半萜、三萜、環(huán)烯醚萜、香豆素、酚酸、黃酮等，倍半萜是其主 要成分，其中甘松新酮、馬兜鈴烯等研究報道較多，其它活性成分特別是少量或微量成分鮮 有報道，生物活性及相關(guān)機(jī)制還有待進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供甘松馬兜鈴?fù)樾捅栋胼祁惢衔铩?br>[0009] 本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述甘甘松馬兜鈴?fù)樾捅栋胼祁惢?物的制備方法。
[0010] 本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供上述甘松馬兜鈴?fù)樾捅栋胼祁惢衔?的應(yīng)用。
[0011] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0012] 甘松馬兜鈴?fù)樾捅栋胼祁惢衔?具有下述結(jié)構(gòu) < 式⑴式：
[0014]其中，
[0015]A:馬兜鈴烯-9 0 -醇（A: 1 (10)-馬兜鈴烯-9 0 -醇
[1(10)-aristolen-90 -01])；
[0016]B甘松酮（B:1 (10)，8(9)_ 二烯-2-馬兜鈴?fù)猍1 (10)， 8(9)-dien-2-aristolone])；
[0017]C甘松香酮H(C:1 (2)，9(10)_ 二烯-8-馬兜鈴?fù)猍1 (2)， 9 (10)-dien-8-arstolone])；
[0018]D3-氧代甘松香酮H
[0019](D:馬兜鈴?fù)?1⑵，9 (10)-二烯-3,8-二酮[aristol-1 (2)，9 (10) -dien-3， 8-dione])；
[0020]E3-羥基甘松香酮
[0021] (E:馬兜鈴?fù)?1-(2)，9(10)-二烯-30-醇[aristol-l(2)， 9 (10)-dien-3 0 -0l])〇
[0022] 優(yōu)選的，上述甘松馬兜鈴?fù)樾捅栋胼祁惢衔?，各所述馬兜鈴?fù)樾捅栋胼萍捌溲?生物的物理化學(xué)和波譜性質(zhì)為：
[0023] 馬兜鈴稀-9 0 -醇[(1，10) -aristolen-9 0 _01，A]，淡黃色粉末（乙酸乙 酯）。UV(MeOH)Xnax:200nm;CD(c0? 05，Me0H)X(Ae) :215(-0. 21)、232 (+0. 30)、 332(-0. 56)、352(-0. 29)、378(-0. 71)nmJH-匪R(CDC13, 400MHz) :SH 5. 51 (lH，m，H-l)、 1. 94(2H，m，H-2)、1. 38(2H，m，H-3)、1. 70(1H，m，H-4)、0? 56(1H，d，J= 9. 2Hz，H-6)、 0? 77 (1H，m，H-7)、1. 28 (1H，m，H-8a)、2. 31 (1H，m，H-8 0 )、4. 2 7 (1H，m，H-9)、 1. 25 (3H，s，12-CH3)、1. 25 (3H，s，13-CH3)、1. 09 (3H，s，14-CH3)、0? 98 (3H，d，J= 6. 8Hz，15-CH3)、2. 59 (1H，brs，-OH) ;13C-NMR(CDC13, 100MHz) :Sc 116. 3 (C-l)、25. 3 (C-2)、 26. 6(C-3)、36. 8(C-4)、38. 6(C-5)、32. 7(C-6)、18. 2(C-7)、30. 6(C-8)、67. 4(C-9)、 145. 6(C-10)、18. 6(C-11)、23. 8(C-12)、16. 5(C-13)、29. 6(C-14)、15. 9(C-15);
[0024]甘松酮（nardostachone，B)，淡黃色油狀物（乙酸乙酯）。UV(MeOH)人max: 198、 228、329nm;CD(c0? 05，Me0H)X(Ae) :206(-6. 06)、237(+3. 35)、294(-0. 55)、355(+7. 70) nmjH-NMlUCDClh400MHz) :SH 5. 67(1H，s，H-l)、2. 31 ~2. 37(3H，overlapped,H-3,H-4)、 0. 86.lH，d，J= 7.6Hz，H-6)、1.49(lH，dd，J= 5.6,7.6Hz，H-7)、6.36(lH，dd，J= 5.6,9.6Hz，H-8)、6.09(lH，d,J= 9.6Hz，H-9)、0.86(3H，s, 12-CH3)、1.20(3H，s, 13-CH3)、 1. 08 (3H,s, 14-CH3), 1. 11 (3H,d,J= 6. 8Hz, 15-CH3) ； 13C-NMR(CDC13, 100MHz) : 8c 122. 7(C-1)、199. 8(C-2)、43. 3(C-3)、34. 0(C-4)、38. 1 (C-5)、36. 3(C-6)、28. 0(C-7)、 199. 8(C-8)、125.2 (C-9)，163. 1(C-10)、26. 2(C-ll)、14. 8(C-12)、29.0 (C-13)、 15. 3(C-14)、22. 2(C-15);
[0025] 甘松香酮H(kanshoneH，C)，無色針狀結(jié)晶（二氯甲烷）。UV(MeOH) 入nax:287、195nm;CD(c 0.05,Me0H)入（Ae):332(-7.91)、247( + 4.97)、 222( + 2. 32)、213( + 2. 46)、202( +l. 22)nm;iH-NMR(CDC1 3, 4 0 0MHz) :SH 6. 07(1H，dd，2. 0, 10. 0,H-l)、6. 12 (1H，ddd，1. 6, 5. 2, 9. 6,H-2)、2. 03 (1H，m，H-3a)、 2. 20 (1H,m,H-3 0 )，1. 98 (1H,m,H-4)、1. 35 (1H,d,J= 8. 0Hz，H-6)、1. 75 (1H,dd，J =1. 2, 8. 0Hz，H-7)、5. 67 (1H，s，H-9)、1. 20 (3H，s，12