專利名稱：：酰基硫脲嘧啶衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種硫脲類化合物及其制備方法和用途，具體為一種酰基硫脲嘧啶衍生物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：大量實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，嘧啶類化合物是一類有著重要的"優(yōu)勢(shì)結(jié)構(gòu)"而且有著特殊作用的一類化合物，此類化合物目前已經(jīng)成為新藥研制中結(jié)構(gòu)選擇的熱點(diǎn)。特別是近幾年來，嘧啶衍生物類藥物的研究發(fā)展得到了國(guó)內(nèi)外越來越多學(xué)者的關(guān)注。研究表明嘧啶環(huán)上不同位置取代會(huì)顯著影響其生理活性。有文獻(xiàn)報(bào)道:2，4-二氨基嘧啶衍生物具有良好的蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶1B抑制活性；2_氨基-4-垸氧基取代嘧啶衍生物具有抑制周期素依賴性激酶的生物活性。此外，嘧啶類化合物在抗腫瘤、抗菌消炎、抗葉酸、抗組胺等方面都具有良好的治療作用，其中部分化合物還被開發(fā)成了商品如氟尿嘧啶片、去氧氟尿苷等作為抗腫瘤藥，磺胺嘧啶(銀)、甲氧芐啶作為廣譜抗菌藥，甲硫氧嘧啶片、丙硫氧嘧啶片在臨床上表現(xiàn)出較好活性。人們通過對(duì)硫脲橋兩端取代基的修飾合成的芳酰基硫脲類化合物，具有廣泛的生物活性。將雜環(huán)引入?；螂?，合成的化合物對(duì)麥草、芥菜等有除草活性。隨后，許多含雜環(huán)的?；螂孱惢衔锉缓铣桑墨I(xiàn)報(bào)道了部分?；螂遴奏ゎ惢衔锞哂辛鞲胁《旧窠?jīng)氨酸酶抑制活性、抗乙肝病毒活性、抗皰疹病毒活性。對(duì)此類化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)上的衍生和優(yōu)化，特別是嘧啶環(huán)外取代基的變化，調(diào)整這些取代基的體積參數(shù)、靜電性質(zhì)、疏水性質(zhì)等，尤其是可以將化學(xué)活潑基團(tuán)(鹵原子、環(huán)氧結(jié)構(gòu)等)或具有光敏作用的基團(tuán)(疊氮基等)引入先導(dǎo)結(jié)構(gòu)中，通過親和標(biāo)記的方法，使之具有可調(diào)控的共價(jià)修飾靶標(biāo)酶的作用，以期獲得活性更佳的化合物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明在現(xiàn)有氨基嘧啶衍生物和芳?；螂孱惢衔锏幕A(chǔ)上提供了一種酰基硫脲嘧啶衍生物及其制備方法和用途。本發(fā)明是由以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，一種酰基硫脲嘧啶衍生物，結(jié)構(gòu)如下HH一種?；螂遴奏ぱ苌锏闹苽浞椒?，2-氨基-4-甲基嘧啶為原料，合成一系列2-氨基-4取代嘧啶衍生物；再以羧酸為原料，與二氯亞砜反應(yīng)合成酰氯(或者直接用酰氯)，再與硫氰酸鉀反應(yīng)得到?；惲蚯杷狨ゴ制罚c嘧啶衍生物反應(yīng)，得到相應(yīng)的?；螂遴奏ゎ惢衔?。具體制備方法如下(1)2-氨基-4-甲基嘧啶與液溴在醋酸體系中，以1:0.51.5的比例混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)，調(diào)pH至中性，過濾，分別得到反應(yīng)物2-氨基-5-溴-4-甲基嘧啶和2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶。(2)2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶分別與甲醇-氫氧化鈉，乙醇-氫氧化鈉，醋酸鈉，苯甲酸鈉，疊氮化鈉，丙烯醇-間氯過氧苯甲酸反應(yīng)得到一系列2-氨基-4-甲基嘧啶的親核取代產(chǎn)物。(3)羧酸與二氯亞砜以1:36混合，80。C攪拌回流反應(yīng)45小時(shí)，蒸去二氯亞砜，得到酰氯。(4)酰氯與硫氰酸鉀以1:l1.5混合，6090。C攪拌回流24小時(shí)，過濾，濾液不需處理，直接滴入嘧啶類化合物的溶液中。繼續(xù)609(TC攪拌回流810小時(shí)，得酰基硫脲嘧啶類化合物。優(yōu)選的，步驟(1)所述的2-氨基-4-甲基嘧啶與液溴的比例分別為1:0.5和l:1.5時(shí)，得到2-氨基-5-溴-4-甲基嘧啶和2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶。優(yōu)選的，步驟(3)所述的羧酸與二氯亞砜的比例為1:5,回流4小時(shí)。優(yōu)選的，步驟(4)所述的酰氯與硫氰酸鉀的比例為1:1.15。上述通式1所表示的化合物的制備方法，反應(yīng)過程如附圖所示意。按照本發(fā)明所述方案制備的?；螂遴奏ぱ苌锞哂锌沽鞲胁《净钚?、抗乙肝病毒活性，及抗氧化作用和抑制血管平滑肌再生作用，所以?；螂遴奏ぱ苌锬軌驊?yīng)用于制備抗流感病毒活性、抗乙肝病毒活性，及抗氧化作用和抑制血管平滑肌的藥物中。藥理活性篩選結(jié)果(1)流感病毒神經(jīng)氨酸酶抑制活性篩選在神經(jīng)氨酸酶反應(yīng)體系中，各種濃度待測(cè)化合物與病毒神經(jīng)氨酸酶懸浮于CaCl2和MES(2-N-Morpholin-ethanesulfonicacid)緩沖液中(pH6.5)，加入熒光底物MUNANA啟動(dòng)反應(yīng)體系，37。C孵育60分鐘后，加反應(yīng)終止液終止反應(yīng)。設(shè)陽性對(duì)照。在激發(fā)波長(zhǎng)360nm和發(fā)射波長(zhǎng)為450nm的參數(shù)條件下，測(cè)定熒光強(qiáng)度值底物的熒光強(qiáng)度可以反映酶的活性。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>(2)抗乙肝病毒活性篩選對(duì)上述已合成的部分化合物進(jìn)行初步的抗乙肝病毒活性篩選，將HepG2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)在24孔板上，72h后加入一定濃度的以上化合物于培養(yǎng)液中，繼續(xù)培養(yǎng)9d，收集上清液，測(cè)定乙肝病毒HBsAg和HBeAg的含量，同是做細(xì)胞空白培養(yǎng),結(jié)果見表二<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>表二抗乙肝病毒活性結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>(3)血管內(nèi)皮細(xì)胞過氧化氫氧化損傷保護(hù)篩選CRL-1730人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞計(jì)數(shù)，培養(yǎng)于96孔平底培養(yǎng)板，每孔1X104個(gè)細(xì)胞。24小時(shí)后，細(xì)胞先用樣品處理4h，然后用H2O2(300umol/L)處理20h造成細(xì)胞氧化損傷模型，用MTT法測(cè)定血管內(nèi)皮細(xì)胞線粒體活性，以觀察樣品對(duì)1~1202所致血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用，見表三。表三血管內(nèi)皮細(xì)胞過氧化氫損傷保護(hù)篩選<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>(4)血清誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制活性原代培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞用0.125%胰酶消化，接種于96孔板，培養(yǎng)24小時(shí)至亞融合狀態(tài)。換成無血清培養(yǎng)24h使細(xì)胞趨于靜止(Go期)，樣品處理4小時(shí)后，加入10%FBS培養(yǎng)20小時(shí)。用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況。抑制率(^增值孔。g，品孔QDx酵,。正?？譕D表四血清誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制活性<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>以上藥理活性結(jié)果表明該系列化合物具有一定的抗流感病毒活性、抗乙肝病毒活性，及抗氧化作用和抑制血管平滑肌再生作用。圖1為本發(fā)明所述制備方法工藝流程示意圖具體實(shí)施例方式實(shí)施例l、2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶(化合物2)的制備化合物(1)1.09g(lOmmol)置于250mL圓底燒瓶中，加入40mL冰醋酸，溶解，加入0.256mL液溴，溶液呈透明黃色。室溫?cái)嚢?，TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)結(jié)束后，NaOH和Na2C03調(diào)pH至7，大量固體析出。抽濾，大量水洗滌，轉(zhuǎn)移濾餅，干燥，得到白色固體。實(shí)施例2、2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶(化合物3)的制備化合物(1)1.09g(10mmol)置于250mL圓底燒瓶中，加入40mL冰醋酸，溶解，滴加0.76mL液溴，溶液呈橙紅色。室溫?cái)嚢瑁?5min后溶液成渾濁狀。繼續(xù)攪拌，當(dāng)溶液由混濁轉(zhuǎn)為澄清時(shí)(約lh)，迅速加入蒸餾水160mL，得到白色粉末狀沉淀及淺黃色上清液。抽濾，少量水洗滌，轉(zhuǎn)移濾餅。甲醇-二氧六環(huán)重結(jié)晶，真空干燥，得到白色固體。實(shí)施例3、N-[5-溴-4-苯甲酰甲基嘧啶-2-基]苯甲?；螂宓暮铣?lt;image>imageseeoriginaldocumentpage9</image>(1)苯甲酸(2-氨基-5-溴-嘧啶-4-基甲基)酯(8)的制備lOOmL錐形瓶中加入化合物(3)3L00g(3.7mmo1)、DMF約10mL，再加入5mL含有苯甲酸鈉1.60g(ll.lmmol)的水溶液。超聲反應(yīng)4h。加入蒸餾水約50mL，冷藏析晶，抽濾，洗滌，真空干燥，得乳白色固體。產(chǎn)率75.8%。m.p.130°C~135°C。(2)苯甲酰異硫氰酸酯的制備100ml茄形瓶中加入KSCN880mg(9mmo1)、約15ml新蒸餾的無水CH3CN，慢慢滴入含有0.84mL苯甲酰氯的無水CH3CN約10mL，回流2h，抽濾。濾液不需要處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。(3)N-[5-溴-4-苯甲酰甲基嘧啶-2-基]苯甲?；螂宓闹苽?00ml的茄形瓶中加入化合物(8)0.500g(4.5mmol)、約20mL的無水CH^N。稍微加熱使固體溶解后，緩慢滴入步驟(2)中的濾液，滴完后，卯'C油浴回流。TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完全后，減壓脫溶劑，柱層析分離提純。[lH]NMR(300MHz，CDC13):S/ppm;8.715(s，1H，Pyrimidine)，8.121-7.269(m，IOH，Ph)，5.507(s，2H，CH2)。ESI-MS:m/z;471.4(M+)，473.3(M>2)。m.p.160°C~163。C。實(shí)施例4、N-[5-溴-4-乙酰氧甲基嘧啶-2-基]-3-氯苯甲酰硫脲的合成(1)乙酸(2-氨基-5-溴-嘧啶-4-基甲基)酯(6)的制備100mL錐形瓶中加入化合物(3)1.00g(3.7mmol)、DMSO約10mL，再加入CH3COONa0.91g(ll.lmmo1)。超聲反應(yīng)2h。加入蒸餾水約50mL，冷藏析晶，抽濾，洗滌，真空干燥，得黃色結(jié)晶狀固體。(2)3-氯苯甲酰異硫氰酸酯的制備100ml茄形瓶中加入KSCN880mg(9mmol)、約15ml新蒸餾的無水CH3COCH3，慢慢滴入含1.0mL3-氯苯甲酰氯的無水CH3COCH3約10mL，60'C回流2h，抽濾。濾液不需要處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。(3)N-[5-溴-4-乙酰氧甲基嘧啶-2-基]-3-氯苯甲酰硫脲的制備100ml的茄形瓶中加化合物(6)1.10g(4.5mmo1)、約10mL的無水CH3COCH3。稍微加熱使固體溶解后，緩慢滴入步驟(2)中的濾液，滴完后，6(TC油浴回流。TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)過程中，反應(yīng)物從反應(yīng)液析出，過濾，無水CH3COCH3洗滌，干燥。反應(yīng)液中的產(chǎn)物用柱層析分離提純。[1H]NMR(500MHz,CDCl3):S/ppm;8.683(s,lH,Pyrimidine);7.5207.943(m,4H,Ph);4.660(s，2H，CH2);3.521(s，3H，CH3)。m/z;443.0(]VO，445.0(M++2)。m.p.171°C~175°C。實(shí)施例5、N-[5-溴-4-乙氧甲基嘧啶-2-基]-2-甲氧基苯甲酰硫脲的合成oO人CH(1)2-氨基-5-溴-4-乙氧基甲基嘧啶(5)的制備100mL茄形瓶中加入化合物3l.OOg(3.7mmol)、乙醇約15mL、NaOH0.88g(22.2mmol)，振搖，得乳白色混濁液體?？販?0'C回流攪拌。當(dāng)反應(yīng)液由混濁變?yōu)槌吻妩S色時(shí)，停止反應(yīng)。減壓脫溶劑。真空干燥。固體中加入二氯甲垸約25mL，抽濾。濾液減壓脫溶劑，真空干燥。柱色譜分離、提純。(2)2-甲氧基苯甲酰異硫氰酸酯的制備50ml的茄形瓶中加入2-甲氧基苯甲酸4.2g，冰浴下加入新蒸的二氯亞砜10mL。8(TC下回流5小時(shí)，蒸去多余的二氯亞砜。得到2-甲氧基苯甲酰氯的粗品，溶于無水CH3COCH3，滴入KSCN880mg(9mmol)的無水CH3COCH3溶液。6(TC回流2h，抽濾。濾液不需要處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。(3)N-[5-溴-4-乙氧甲基嘧卩定-2-基]-2-甲氧基苯甲酰硫脲的制備100ml的茄形瓶中加化合物(5)464mg(2.0mmo1)、約10mL的無水CH3COCH3。稍微加熱使固體溶解后，緩慢滴入步驟(2)中的濾液，滴完后，6(TC油浴回流。TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完畢，柱層析分離提純。^NMR(500MHz，CDCl3):58.631(d,J-4.988,1H);8.234(d,-7.801，lH);7.612(t,/=15.642,lH);7.167(t,/=15.179,lH);7.074(d,-8.380,lH);7.017(d，/=5.032，1H);4.697(s，2H);4.110(s,3H);3.661(s，2H);1.269(s，3H)。ESI-MS:m/z;426.0(]VT)，424.0(W+2)。m.p掘°C183°C。實(shí)施例6、N-[5-溴-4-甲氧甲基嘧啶-2-基]-2-氯煙酰硫脲的合成(1)2-氯煙酰異硫氰酸酯的制備100ml茄形瓶中加入KSCN226mg(2.3mmo1)、約15ml新蒸餾的無水CH3COCH3，慢慢滴入含352mg(2mmol)4-硝基苯甲酰氯的無水CH3COCH3約10mL,6(TC回流2h，抽濾。濾液不需要處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。(2)100ml的茄形瓶中加l109mg(l.Ommol)、約10mL的無水CH3COCH3。稍微加熱使固體溶解后，緩慢滴入(2)中的濾液，滴完后，60"C油浴回流。TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完畢后柱層析分離提純。&NMR(500MHz，DMSO-d6):S2.336(s，3H);6.913(d，《/=5.353Hz，1H);7.945(t，/=13.463Hz，1H);8,186(m，lH);8.502((!，/=5.655Hz,IH);8.633(d,J=5.063Hz,1H)。ESI-MS:m/z;307.0(M+l)+，m.p.174°C177。C。實(shí)施例7、N-[5-溴-4-甲氧甲基嘧啶-2-萄-4-硝基苯甲酰硫脲的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(1)2-氨基-5-溴-4-甲氧基甲基嘧啶(4)的制備100mL茄形瓶中加入化合物(3)1.00g(3.7mmol)、甲醇約15mL、NaOH0.88g(22.2mmo1)，振搖，得乳白色混濁液體?？販?0"C回流攪拌。當(dāng)反應(yīng)液由混濁變?yōu)槌吻妩S色時(shí)，停止反應(yīng)。室溫放置，有大量白色晶體析出。過濾，收集濾餅，濾液減壓脫溶劑。真空干燥。固體中加入適量氯仿約，抽濾，濾液減壓脫溶劑，真空干燥。柱層析分離、提純，得到白色晶體。(2)4-硝基苯甲酰異硫氰酸酯的制備100ml茄形瓶中加入KSCN226mg(2.3mmo1)、約15ml新蒸餾的無水CH3COCH3,慢慢滴入含370mg4-硝基苯甲酰氯的無水CH3COCH3約10mL，6(TC回流2h，抽濾。濾液不需要處理直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。(3)N-[5-溴-4-甲氧甲基嘧啶-2-基]-4-硝基苯甲酰硫脲的制備100ml的茄形瓶中加化合物(4)109mg(l.Ommol)、約10mL的無水CH3COCH3。稍微加熱使固體溶解后，緩慢滴入(2)中的濾液，滴完后，60。C油浴回流。TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)過程中，反應(yīng)物從反應(yīng)液析出，過濾，無水CH3COCH3洗滌濾餅，干燥。濾液繼續(xù)冷藏析出固體干燥后，與前述濾餅合并。岡NMR(500畫z，DMSO-d6):S8.937(s,lH,PyH);8.380(d,/=8.913,2H,PhH;8.170(d,/=58.921,2H，PhH);3.252(s，3H,CH3);4.519(s,2H,CH2)。權(quán)利要求1、一種?；螂遴奏ぱ苌?，其特征在于結(jié)構(gòu)如下，R1＝-F-Cl-Br-I-H2、一種?；螂遴奏ぱ苌锏闹苽浞椒ǎ涮卣魇且?-氨基-4-甲基嘧啶為原料，合成2-氨基-4取代嘧啶衍生物；以酰氯與硫氰酸鉀反應(yīng)得到酰基異硫氰酸酯粗品，再與嘧啶衍生物反應(yīng)，得到相應(yīng)的?；螂遴奏ゎ惢衔铩?、根據(jù)權(quán)利要求2所述的酰基硫脲嘧啶衍生物的制備方法，其特征是酰氯的制備以羧酸為原料，與二氯亞砜反應(yīng)合成酰氯。4、一種酰基硫脲嘧啶衍生物，應(yīng)用于制備抗流感病毒活性、抗乙肝病毒活性，及抗氧化作用和抑制血管平滑肌的藥物。5、一種?；螂遴奏ぱ苌锏闹苽浞椒?，其特征是步驟為(1)2-氨基-4-甲基嘧啶與液溴在醋酸體系中，以1:0.5~1.5的比例混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)，調(diào)pH至中性，過濾，分別得到反應(yīng)物2-氨基-5-溴-4-甲基嘧啶和2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶，(2)2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶分別與甲醇-氫氧化鈉，乙醇-氫氧化鈉，醋酸鈉，苯甲酸鈉，疊氮化鈉，丙烯醇-間氯過氧苯甲酸反應(yīng)得到一系列2-氨基-4-甲基嘧啶的親核取代產(chǎn)物，(3)羧酸與二氯亞砜以1:36混合，8CTC攪拌回流反應(yīng)45小時(shí)，蒸去二氯亞砜，得到酰氯，(4)酰氯與硫氰酸鉀以1:l1.5混合，609(TC攪拌回流24小時(shí)，過濾，直接滴入嘧啶類化合物的溶液中，繼續(xù)609(TC攪拌回流810小時(shí)，得?；螂遴奏ゎ惢衔?。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的?；螂遴奏ぱ苌锏闹苽浞椒ǎ涮卣魇遣襟E(1)所述的2-氨基-4-甲基嘧啶與液溴的比例分別為1:0.5和1:1.5時(shí)，得到2-氨基-5-溴-4-甲基嘧啶和2-氨基-5-溴-4-溴甲基嘧啶，步驟(3)所述的羧酸與二氯亞砜的比例為1:5，回流4小時(shí)，步驟(4)所述的酰氯與硫氰酸鉀的比例為1:1.15。全文摘要本發(fā)明涉及一種硫脲類化合物及其制備方法和用途，具體為一種?；螂遴奏ぱ苌锛捌渲苽浞椒ê陀猛尽７椒ㄊ且?-氨基-4-甲基嘧啶為原料，合成2-氨基-4取代嘧啶衍生物；以酰氯與硫氰酸鉀反應(yīng)得到?；惲蚯杷狨ゴ制罚倥c嘧啶衍生物反應(yīng)，得到相應(yīng)的?；螂遴奏ゎ惢衔铩０凑毡景l(fā)明所述方案制備的?；螂遴奏ぱ苌锞哂锌沽鞲胁《净钚?、抗乙肝病毒活性，及抗氧化作用和抑制血管平滑肌再生作用，所以?；螂遴奏ぱ苌锬軌驊?yīng)用于制備抗流感病毒活性、抗乙肝病毒活性，及抗氧化作用和抑制血管平滑肌的藥物中。文檔編號(hào)C07D401/12GK101602732SQ200910074919公開日2009年12月16日申請(qǐng)日期2009年7月13日優(yōu)先權(quán)日2009年7月13日發(fā)明者李青山,班樹榮,靜田申請(qǐng)人:山西醫(yī)科大學(xué)