專利名稱：：治療分子及方法-1的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明主要涉及治療由細胞活化導致的疾病或病癥，例如炎性或癌性疾病或病癥。具體地講，本發(fā)明涉及雜環(huán)衍生物在抑制巨噬細胞移動抑制因子(MIF)的細胞因子或生物活性和與MIF的細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥中的用途。
背景技術(shù)：
：MIF是第一種確定的T-細胞來源的可溶性淋巴因子。開始時MEF被描述為具有修飾巨噬細胞移動的能力的可溶性因子(l)。在1989年，確定并克隆出對歸因于MIF的生物作用響應(yīng)的分子(2)。最初發(fā)現(xiàn)它在發(fā)炎部位激活巨噬細胞，現(xiàn)已表明在免疫系統(tǒng)中具有多能作用。已表明MIF在包括炎癥、損傷、局部出血或惡性腫瘤的人類疾病中表達。MIF還通過促進它們的抗炎效果而與糖皮質(zhì)激素具有獨特的關(guān)系。最近研究表明MIF的單克隆抗體拮抗作用可用于治療膿毒病、某些類型的癌癥和遲發(fā)型超敏反應(yīng)。也表明MIF的抗體拮抗作用對佐劑-或膠原蛋白-誘發(fā)關(guān)節(jié)炎動物模型和其它炎性疾病和免疫疾病模型具有活性。盡管MIF的抗體拮抗作用是一條可能提供治療處理的途徑，但商業(yè)上制備這類生物分子比較昂貴，并且還受它們的給藥途徑(一般經(jīng)注射)的限制，使它們不能容易地配制成經(jīng)其它途徑例如口服給藥的制劑。小分子抑制劑可克服一個或多個這類與生物治療處理的應(yīng)用有關(guān)的難題。因此存在對小分子的MIF細胞因子或生物活性抑制劑的需要。小分子的MIF抑制劑將對寬范圍的疾病具有治療作用，其中小分子的MIF抑制劑可單獨給予或與其它治療藥物聯(lián)合給予?？膳c式(I)化合物聯(lián)合使用的試劑實例包括糖皮質(zhì)激素、抗風濕藥、免疫抑制藥、抗-細胞因子治療藥、氮-激活的蛋白質(zhì)(MAP)激酶拮抗劑或抑制劑、核因子K-B(NF-KB)信號轉(zhuǎn)導途徑拮抗劑或抑制劑、抗體、與粘著分子和共同刺激分子相互作用的蛋白質(zhì)治療藥物或小分子治療藥物、支氣管擴張藥、類花生酸合成途徑拮抗劑、用于治療腸炎的藥物、抗癌藥、反義寡核苷酸、干擾RNA(interferingRNA)和核酶，例如，50年來糖皮質(zhì)激素一直用于治療人類疾病，對包括炎癥、損傷、局部出血或惡性腫瘤等范圍的疾病有效。盡管有關(guān)它們對疾病預后影響的爭論一直繼續(xù)，但它們對炎癥的癥狀和體征的作用，尤其在短期內(nèi)的作用是非常顯著的。盡管糖皮質(zhì)激素的益處和功效，但由于它們普遍的、可預測的劑量依賴性毒性，所以在使用上受到限制。模仿庫欣病(MimickingCushing)(—種腎上腺產(chǎn)生過多內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素的疾病)，與糖皮質(zhì)激素治療有關(guān)的副作用包括免疫抑制(由對感染的敏感性提高所致)、體重增加、體型改變、高血壓、水腫、糖尿病、白內(nèi)障、骨質(zhì)疏松癥、不良傷口愈合、皮膚變薄、血管脆性、多毛癥和其它男性化特征(女性患者)。對于兒童，生長遲緩也比較顯著。這些副作用稱為類庫欣綜合征(Cushingoid)副作用。由于糖皮質(zhì)激素的副作用呈劑量依賴性，所以一直研究嘗試減少必需劑量，包括其中糖皮質(zhì)激素與其它治療藥物一起給予的聯(lián)合療法。這些聯(lián)合療法有時稱為"類固醇-節(jié)省(steroid-sparing)"療法。但由于其它治療藥物不針對抑制糖皮質(zhì)激素有效性的生物作用，所以目前可采用的聯(lián)合療法是非特異性的。這類聯(lián)合療法一般也具有嚴重的副作用。此外，糖皮質(zhì)激素對許多疾病控制不完全有效，導致"類固醇耐藥性"疾病。擴大或促進糖皮質(zhì)激素效果的試劑不僅將減少這些試劑的劑量，而且也可能使"類固醇耐藥性"疾病成為類固醇敏感性疾病。需要保證減少糖皮質(zhì)激素劑量水平的有效療法。也需要"類固醇耐藥性"疾病的有效治療。優(yōu)選這類療法或治療將針對直接限制糖皮質(zhì)激素有效性的因素。MIF的治療拮抗作用可提供"類固醇-節(jié)省"效果或用于"類固醇耐藥性"疾病的治療。與例如細胞因子的其他促炎分子不同，MIF的表達和/或釋放可被糖皮質(zhì)激素誘導((3)、(4))。而且，MIF能直接拮抗糖皮質(zhì)激素的作用。已表明巨噬細胞TNF、IL-l|3、IL-6和IL-8分泌((5)、(6))、T細胞增殖和IL-2釋放(7)屬這種情況。在包括內(nèi)毒素休克和實驗性關(guān)節(jié)炎的模型中，MIF在體內(nèi)產(chǎn)生很強的糖皮質(zhì)激素-拮抗劑作用((5)、(8))。在用糖皮質(zhì)激素治療炎性疾病或其他疾病的過程中，MIF被表達但產(chǎn)生防止糖皮質(zhì)激素抑制炎癥的作用。因此，推斷MIF的治療拮抗作用將削弱MIF在抑制糖皮質(zhì)激素抗炎作用中的作用，由此使糖皮質(zhì)激素的使用盛行起來。這將是真正"類固醇-節(jié)省"療法的第一個實例?？芍С衷摷僭O(shè)的是，發(fā)現(xiàn)抗-MIF抗體療法使大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎中的腎上腺切除術(shù)的效果逆轉(zhuǎn)(9)。通過中和MIF的自然糖皮質(zhì)激素"反向調(diào)節(jié)"作用，可預期在炎性疾病、特別是在那些與抗糖皮質(zhì)激素有關(guān)的疾病中，伴隨MIF的拮抗作用，可降低類固醇劑量甚至不用類固醇(lO)，(ll)。因此，需要MIF細胞因子或生物活性的治療拮抗劑。
發(fā)明內(nèi)容除非上下文中另有聲明，否則本說明書及權(quán)利要求書中，術(shù)語"包括"或"包含"應(yīng)理解為表示包括指定的整體、步驟或整體集合、步驟集合，但并不排除任何其它整體、步驟或整體集合、步驟集合。在第一方面，本發(fā)明提供一種抑制MIF細胞因子或生物活性的方法，所述方法包括使mif與細胞因子或生物活性抑制有效量的式(IM匕合物，或其藥學上可接受的鹽或前藥接觸，0)其中x選自-o、-s-、-c(r5)(r5.:m^-n(R6)-，并優(yōu)選包含氬鍵供體或受體；Y選自-N(R7)-、-O-、-S"isL-C(R7)2-;Z選自-C(O)-、-C(S)-、-C(=NR6)-、-S(0"V(S)Or;R,選自氫、C'.3烷基、(CR5R5.)nOR7、(CR5R5')nSR7、(CR5R5')nN(R6)2和(CRsRs.)n鹵基；R2選自C廣C2。烷基、C2-C2Q烯基、C2-C2Q炔基、(CR12Ri2')mC(0)R8、(CR12R12')mC(S)R8、(CR12R12')mS(0)R8、(CR12R12，)mS(0)2R8、(CR12R12')mOR9、(CR12R12')mSR9、(CR、2Ru,)mNRoR"、(CRuR、2.)mC(-NR24)R22和(CR,2Ru.)mRB;Rs選自氫、C廣C6烷基、(CRi6R16.)PNR14R15、(CR16R16,)pOR17、(CR16R16.)PSR17、(CRwRw)p鹵基、(CR16R16')pn02、(CR16R16')nC(0)R28、(CR16R16,)nC(=NR24)R22、(CR16R16')nS(0)R17、(CR16Ri6')nS(0)2R17、(CR,6R，6.)nS(0)3Rn和(CR!6R,6')pC(R,8)3;R4選自氫、卣素C廣C3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基和(CR12Rl2')nC(Rl8)3;Rs和Rs各自獨立選自氫、C廣C3烷基、鹵基、OR7、SR7和N(Re)2;R6各自獨立選自氫、C廣C3烷基和OR7;R7各自獨立選自氫和CrC3烷基；Rs選自氫、Q-C2o烷基、CrC2。烯基、C2-C2。炔基、0R19、SR19、N(R2o)2、[NH-CH(R2,)-C(0)q-OR29、[糖]q和(CRuRu.)tRu;R9選自氬、C!-C20坑基、C2-C2O烯基、C2-C20塊基、(CRi2Rl2')tRl3、C(0)R23、C02R23、C(S)R23、C(S)OR23、S(O)R"、S(0>2R23、[C(0)CH(R21)NH]q-R23和[糖]q;R10和R"獨立選自氫、C廣C2o烷基、C2-C2o烯基、CrC2o炔基、(CR12R、2')mR13、C(O)R"、C(S)R"、S(O)R"、S(0)2R23、[C(0)CH(R21)NHq-R23、-糖q和NHC(=NR25)-NH2;R12和R12各自獨立選自氫、Ci-C6烷基、C2-C6烯基、CrC6炔基、OR24、SR24、卣基、N(R24)2、C02R24、CN、N02、芳基或雜環(huán)基；R，3選自O(shè)R25、SR25、卣基、N(R25)2、C(0)R3、CN、C(R18)3、芳基或雜環(huán)基；R"和R，5獨立選自氫、C廣C3烷基、0RI7、(CR16R16,)PC(R18)3;R,6和R,6'各自獨立選自氫、C廣C3烷基、鹵基、0R17、SRn和N(R")2;Rn各自獨立選自氫和Q-C3烷基；R，s各自獨立選自氫和鹵基；Ri9和各R20《蟲立選自氛、C-C20坑基、C2-C20彿基、C2-C20炔基、(CR26R26')tR27;R21為氨基酸的特征基團；R22選自C廣C6烷基、NH2、NH(d-6烷基)、N(d.6烷基)2、OR29或SR29;R23選自氫、d-C20烷基、C2-C2G烯基、C2-C2G炔基、芳基(CR26R26')tR27;R24各自獨立選自氫和Q-C6烷基；R25各自獨立選自氫、C廣C6烷基、Cw烷氧基C).3烷基、芳基和雜環(huán)基；R26和R26各自獨立選自氫、C廣C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、OR29、SR29、鹵基、N(R29)2、C02R29、CN、N02、芳基和雜環(huán)基；R27選自氬、OR30、SR30、鹵基、N(R30)2、CO2R30、芳基和雜環(huán)基；R28選自氬、C卜6烷基、OR29、SR29或N(R29)2;R29各自獨立選自氫和Q-C3烷基；R3o各自獨立選自氫、Q-C3烷基、芳基和雜環(huán)基；R3,選自d.3烷基、0H、d.3烷氧基、芳基、芳氧基、雜環(huán)基和雜環(huán)基氧基；n為0或1-3中的一個整數(shù)；m為0或1-20中的一個整數(shù)；p為0或1-6中的一個整數(shù)；q為1-5中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。在另一方面，本發(fā)明提供一種治療、預防或診斷與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予有需要的患者治療、預防或診斷有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在還一方面，本發(fā)明提供式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備用于治療、預防或診斷與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的藥物中的用途。本發(fā)明特別提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病、實體瘤或造血系腫瘤、或慢性或急性炎性疾病的方法，所述疾病或瘤包括選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊推關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、賴特爾綜合征)，結(jié)晶性關(guān)節(jié)病(包括^f旦不限于痛風、假痛風、焦磷酸鈣沉積病)，萊姆病，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼掩、全身性硬皮病、多肌炎、皮肌炎、斯耶格倫綜合征)，血管炎(包括但不限于結(jié)節(jié)性多動脈炎、韋格納肉芽腫病、丘-施綜合征)，腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，消化性潰瘍，胃炎，食管炎，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力、硬化性膽管炎、原發(fā)性膽汁性肝硬變)，肺部疾病(包括但不限于彌漫性間質(zhì)性肺部疾病、塵肺病、纖維化肺泡炎、哮喘、支氣管炎、支氣管擴張癥、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌(包括但不限于結(jié)腸癌、淋巴瘤、肺癌、黑色素瘤、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病、宮頸癌、多發(fā)性骨髄瘤和轉(zhuǎn)移性癌)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞、中風、周圍血管疾病)，下丘腦-垂體-腎上腺軸障礙，腦功能障礙(例如癡呆、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、脫髓鞘病)，角膜病，虹膜炎，虹膜睫狀體炎，白內(nèi)障，葡萄膜炎，結(jié)節(jié)病，以變形血管發(fā)生為特征的疾病(例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥)，子宮內(nèi)膜功能性疾病(月經(jīng)、植入、分娩、子宮內(nèi)膜異位)，銀屑病，內(nèi)毒素(膿毒性)休克，外毒素(膿毒性)休克，感染性(純濃毒性)休克，其它感染并發(fā)癥，骨盆炎，移4直排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，骨病(例如骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病)，異位性皮炎，UV(B)-誘發(fā)的皮膚細胞活化(例如曬傷、皮膚癌)，瘧疾并發(fā)癥，糖尿病，疼痛，創(chuàng)傷或局部出血導致的炎癥，睪丸機能障礙和傷口愈合；所述方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。本發(fā)明的再一方面提供式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備用于治療上述疾病或病癥的藥物中的用途。本發(fā)明的再一方面提供一種藥用組合物，所迷組合物包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥和藥學上可接受的栽體、稀釋劑或賦形劑。在另一方面，本發(fā)明提供一種治療或預防與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予哺乳動物式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥和第二種治療藥物.在另一方面，本發(fā)明提供一種預防或治療需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予哺乳動物糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在還一方面，本發(fā)明提供一種治療類固醇耐藥性疾病的方法，所述方法包括給予哺乳動物糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥，再一方面，本發(fā)明提供一種提高糖皮質(zhì)激素對哺乳動物作用的方法，所述方法包括同時、各自或依次將所述糖皮質(zhì)激素與式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥給予所述哺乳動物。還再一方面，本發(fā)明提供一種藥用組合物，所迷組合物包含糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。再一方面，本發(fā)明提供一種糖皮質(zhì)激素在制備將其與式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥一起給藥的、用于治療或預防需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥的藥物中的用途。還再一方面，本發(fā)明提供一種式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備將其與糖皮質(zhì)激素一起給藥的、用于治療或預防需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥的藥物中的用途。還再一方面，本發(fā)明提供一種糖皮質(zhì)激素和式(l)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備用于治療或預防需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥的藥物中的用途，在優(yōu)選的實施方案中，使用式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥來治療或預防疾病或病癥，特別是人類患者的疾病或病癥。還再一方面，本發(fā)明提供一種式(III)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>其中X為-O-，-NH-，-0-或-012-;Y為-NH-,.0-或-CH2-;Z為:-C(O)-,-C(S)曙或-S(O)-;R,cn選自氫，Cw烷基，OH,SH，NH2,NHd.3烷基，F(xiàn),CI或Br;R102選自C卜2。烷基，C2.2Q烯基，C02H，C02R,。5,-NH2,F,Cl,Br,(CH2)WR1()6，C(0)N(R,07)2,C(-N)NHC,.6烷基，SC^d-e烷基，C(O)[NHCH(R,08)C(O)]q-OR,09,C(O)糖，C(0)NH(CH2)n芳基，NHC(0)(CH2)nS雜環(huán)基，C(O)SCw烷基，C(0)(CH2)nC02H,SOzOd.jo烷基和S02NHCwo烷基；R朋選自氫，F(xiàn),Cl，Br,Cw烷基，-(CH2)nNH2，-(CH2)n-OH,-(CH2)n-CF3,-(CH^CO^C"烷基或-(CH。n-SH;R)04選自氫，甲基，乙基，CH2C(R0)3,C(R110)3,-CH2=CH2，氟基，氯基或溴基；Ros選自氬，C,.2o烷基，C2-2o烯基或(CH2)tOC-3烷基；Rio6選自SH,SCi-6烷基，OH，OC,-6烷基，糖，C02H,NH2,雜環(huán)基或芳基；R,o7各自獨立選自氫，d.2Q烷基，C2-2o烯基，(CH2)t芳基和(CH》t雜環(huán)基；Rios為氨基酸的特征基團；R，。9為氛，C!-3坑基；R,，o各自獨立選自氫和鹵基；且n為O或1-3中的一個整數(shù)，q為1-5中的一個整數(shù)，w為1-6中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中各烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。附困說明圖1圖示苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(benzimidazol-2-one-5-pentanoate)(化合物5)對白介素-1(IL-l)-誘導的環(huán)氧合酶II(COX-2)表達的劑量效應(yīng)。圖2圖示地塞米松和苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)的聯(lián)合給藥對IL-1誘導的COX-2表達的影響。圖3圖示MIF拮抗劑苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)和地塞米松對IL.I誘導的ERK(細胞外信號調(diào)控的激酶)磷酸化(活化)的影響，按照蛋白質(zhì)印跡法測定。圖4圖示在鼠內(nèi)毒素休克模型中，苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)對體內(nèi)血清IL-6的產(chǎn)生的影響。圖5圖示在鼠內(nèi)毒素休克模型中，苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)對體內(nèi)血清IL-1的產(chǎn)生的影響。圖6圖示苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)的體外細胞毒性效應(yīng)。圖7圖示多個式(I)化合物的體外細胞毒性效應(yīng)。圖8圖示苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)對未用mBSA免疫的小鼠的脾T淋巴細胞的抗原特異性活化的影響。采用與測定抗原-誘導的T細胞增值的相同方法，用氚標記pH)-胸苷摻入法測定活化。圖9圖示苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)在體內(nèi)對皮膚遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響。圖10圖示苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)對鼠抗原誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎(一種類風濕性關(guān)節(jié)炎動物模型)的體內(nèi)作用。圖11圖示使用化合物5和13的體內(nèi)治療對在響應(yīng)mBSA中的淋巴結(jié)和脾T細胞的離體抗原特異性活化的影響。圖12圖示苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)對用重組人MIF處理的細胞增殖的影響。發(fā)明詳述按本文所用，單獨使用或用于例如NHC烷基、N(C烷基)2等復合術(shù)語中的術(shù)語"烷基"，是指酌情含l-3個、1-6個、1-10個或1-20個碳原子的單價直鏈烷基、支鏈烷基或環(huán)狀脂基(如果合適)，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基和環(huán)丁基、正戊基、l-甲基丁基、2-曱基丁基、3-甲基丁基、環(huán)戊基、正己基、l-、2-、3-或4-甲基戊基、卜、2-或3-乙基丁基、l或2-丙基丙基或環(huán)己基。烷基可任選被以下的基團取代一次或一次以上卣基(例如氯基、氟基或溴基)，CN,N02，C02H,C02CV6烷基，CONH2，CONH(C!.6烷基)，CONH(d-6烷基)2，OH,羥烷基，烷氣基，甲基，乙基，丙基，丁基，曱氧基，乙氧基，丁lL^，?；?，羧基烷基，乙酰基，三氟甲基，,氧基，苯氧基，NH2,NH(C^烷基)或NH(Cl6坑基)2。優(yōu)選的任選取代基為極性取代基。優(yōu)選的任選取代基有羥基、NH2和C02H,烷氧基的實例包括甲lL基、乙H正丙氣基、異丙lL基、環(huán)丙lL^和丁ll^(正-、仲-、叔-和環(huán))戊氧基和己氧基。烷氧基的"烷基"部分可凈皮如上取代。本文使用的術(shù)語"烯基"是指在碳原子之間含一個或一個以上雙鍵的直鏈烯基、支鏈烯基或含碳的環(huán)基(如果合適)。這類基團的實例包括乙烯基、烯丙基、丁烯基或例如那些衍生自棕櫚烯酸、油酸、亞油酸、亞麻酸或花生四烯酸的較長碳鏈。烯基可任選被以下的基團取代一次或一次以上囟基(例如氯基、氟基或溴基)，CN,N02,C02H,C02C!-6烷基，CONH2，CONH(Cw烷基)，CONH(C.6烷基h,OH,羥烷基，甲基，乙基，丁基，丙基，烷氧基、?；然榛?，乙酰基，三氟甲基，千氧基，苯氧基，NH2,NH(C!-6烷基)或NH(C-6烷基)2。優(yōu)選的任選取代基為極性取代基，例如麗2、OH或C02H。本文使用的術(shù)語"炔基，，是指在碳原子之間含一個或一個以上的三鍵的直鏈或支鏈含碳基團。這類基團的實例有炔丙基、丁炔基和己炔基。炔基可任選被以下的基團取代一次或一次以上卣基(例如氯基、氟基或溴基)，CN，N02，C02H，COC卜6烷基，CONH2,CONH(d.6烷基)，CONH(Cw烷基)2，OH，羥烷基，烷氧基、?；?，M烷基，乙?；?，三氟甲基，千氧基，苯氧基，NH2,NH(C卜6烷基)或NH(C,.6烷基)2。優(yōu)選的任選取代基為極性取代基，例如NH2、OH和C02H。合適的NH(烷基)和N(烷基)2的實例包括甲基氨基、乙基氨基、異丙基M、二甲基M、正丙基M、二乙基M和二異丙基M。術(shù)語"卣素，，(或"囟基")是指氟(氟基)、氯(氯基)、溴(溴基)或碘(碘基)。術(shù)語"糖"是指例如那些衍生自葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿洛糖、阿卓糖、古洛糖、伊杜糖、塔羅糖、核糖、阿拉伯糖或木糖的吡喃糖基部分或呋喃糖基部分。該類糖的衍生物包括脫氧、氨基吡喃糖基或呋喃糖基糖衍生物。各糖部分通過所述糖部分的羥基引入式(I)化合物中。本文使用的術(shù)語"氨基酸的特征基團"是指自然存在或非自然存在的氬基酸的C2位取代基，且由其定義所述氨基酸。所述氨基酸可'為L-構(gòu)型或D-構(gòu)型。例如甲基為丙氨酸的特征基團，苯甲基為苯丙氨酸的特征基團，羥甲基為絲氨酸的特征基團，羥乙基為高絲氨酸的特征基團以及正丙基為正纈氨酸的特征基團。本文使用的芳基是指C6-C,q芳基，例如苯基或萘。芳基可任選被以下的基團取代一次或一次以上鹵基(例如lL&、氟基或溴基)，CN，N02，C02H，C02d-6烷基，CONH2，CONH(C^烷基)，CONH(C,.6烷基)2，oh，羥烷基，烷氧基、?；?，M烷基，乙?；?，三氟甲基,千氧基，苯氧基，NH2,NH(d-6烷基)或NH(Cw烷基)2。優(yōu)選的任選取代基為極性取代基，特別為羥基、羥烷基或囟基。本文使用的術(shù)語"雜環(huán)基"是指含有至少一個獨立選自o、n或s的雜原子的環(huán)狀脂基或芳基。合適的雜環(huán)基包括呋喃基、吡"先基、嘧咬基、p比p坐基、p底咬基、p比咯基、噢汾基、嗨嗤基、咪唑基、噢唑基、異嗯唑基、異噻唑基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、三唑基、四唑基、嗨二唑基和嘌呤基。雜環(huán)基可任選被以下的基團取代一次或一次以上鹵基(例如氯基、氟基或溴基)，cn,N02,C02h，C02d-6烷基，conh2,conh(q.6烷基)，conh(c卜6烷基)2，oh,羥烷基，烷氧基、?；?，羧基烷基，乙?；?，三氟甲基，千氧基，苯氧基，NH2,NH(CL6烷基)或NH(Cw烷基)2,在第一方面，本發(fā)明提供一種抑制mif細胞因子或生物活性的方法，所述方法包括使mf與細胞因子或生物活性抑制有效量的式(i)化合物，或其藥學上可接受的鹽或前藥接觸。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>其中x選自-o-、-s-、-c(r5)(r5,;M^n(r6)-,并優(yōu)選包含氫鍵供體或受體；y選自-n(R7)-、-o-、.s-或-c(R7)2-;z選自-c(o)-、-c(s)-、-c(=NR6)-、-3(0)-或-(5)02-;r,逸自氫、c,.3烷基、(cr5r5')nor7、(cr5r5.)nsr7、(cr5r5)nn(R6)2和(CRsR5,)n鹵基；R2選自C廣Qm烷基、C2-C2。烯基、C2-C2o炔基、(CR12Ri2')mC(0)R8、(CR12R12.)mC(S)R8、(CR12R2,)mS(0)R8、(CR12R12.)mS(0)2R8、(CR12R12')mOR9、(CR12R12')mSR9、(CR12R12')mNR10R"、(CR12R12.)mC(=NR24)R2^(CR12R12')mR13;R3選自氬、C廣C6烷基、(CR16R16')PNRi4Ri5、(CR16Rl6.)POR17、(CR16R16')PSR17、(CR16R16)P鹵基、(CR16R16.)PN02、(CR16R16,)nC(0)R28、(CR16R16.)nC(=NR24)R22、(CR16R,6')nS(0)R17、(CR16R16.)nS(0)2R,7、(CR16R16')nS(0)3R^(CR16Rl6')PC(R18)3;R4選自氬、卣素、Q-C3烷基、C2.3烯基、C2.3炔基和(CRi2R，2')nC(Rl8)3;Rs和Rs各自獨立選自氫、C廣C3烷基、鹵基、OR7、SR7和N(R6)2;R6各自獨立選自氫、C,-C3烷基和OR7;R7各自獨立選自氫和d-C3烷基；R8選自氛、C廣C2o坑基、C2-C20彿基、C2-C20快基、OR9、SRi"N(R2。)2、[NH-CH(R21)-C(0)lq-OR29、[糖,和(01121112.)0113;R9選自氛、C廣C20坑基、C2-C20彿基、C2-G20丈夬基、(CRi2Rl2'乂R"13、C(0)R23、C02R23、C(S)R23、C(S)OR23、S(0)R23、S(0)2R23、[C(0)CH(R21)NHq-R23和[糖q;R10和R"獨立選自氫、C廣C20烷基、C2-C20彿基、C2-C20丈絲、(CR12R12')mR13、C(O)R"、C(S)R23、S(0)R23、S(0)2R23、[C(0)CH(R21)NHq-R23、-[糖]q和NHC(=NR25)-NH2;R,2和R,2,各自獨立選自氫、C廣C6烷基、CVC6烯基、CVC6炔基、OR24、SR24、鹵基、N(R24)2、C02R24、CN、N02、芳基或雜環(huán)基；R)3選自O(shè)R25、SR25、鹵基、N(R25)2、C(O)R"、CN、C(R8)3、芳基或雜環(huán)基；R)4和Rs獨立選自氫、C廣C3烷基、ORn、(CR16R16.)PC(R18)3;Ri6和Ri6,各自獨立選自氫、Q-C3烷基、鹵基、OR，7、SRn和N(R17)2;Rn各自獨立選自氫和d-C3烷基；R,s各自獨立選自氫和鹵基；Rl9和各R加獨立選自氫、C廣C20烷基、C2-C20烯基、C2-C2。炔基、(CR26R26')tR27;Ru為氨基酸的特征基團；R22選自C廣C6烷基、NH2、NH(d-6烷基)、N(C,.6烷基)2、OR29或SR29;R23選自氫、C廣C20烷基、CVC20烯基、C2-C20炔基、芳基(CR26R26')tR27;R24各自獨立逸自氫和CrC6烷基；R25各自獨立選自氫、Cl-C6烷基、C,.3烷氧基Cl.3烷基、芳基和雜環(huán)基；R26和R26'各自獨立選自氫、C,-C6烷基、C2-C6烯基、02-06炔基、OR29、SR29、鹵基、N(R29)2、C02R29、CN、N02、芳基和雜環(huán)基；R27選自氬、OR30、SR30、鹵基、N(R30)2、CO2R30、芳基和雜環(huán)基；R28選自氬、C,-6烷基、OR29、SR29或N(R29)2;R29各自獨立選自氫和CrC3烷基；R犯各自獨立選自氫、d-C3烷基、芳基和雜環(huán)基；R3,選自C,.3烷基、0H、Cw烷氧基、芳基、芳氡基、雜環(huán)基和雜環(huán)基軋基；n為0或1-3中的一個整數(shù)；m為0或1-20中的一個整數(shù)；p為0或1-6中的一個整數(shù)；q為1-5中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。在一個優(yōu)選的實施方案中，采用一個或多個以下定義23X為陽N(H)-、-N(Cw烷基)-、-N(OH)-、-N(OCi.3烷基)-、-O-、-S畫、-CH2-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-、-CH(C.3烷基)-、-CH(卣基)-、-CH(SH)-、-CH(OCw烷基)或-CH(SCw烷基)-;更優(yōu)選X為-N(H)-、-CH2-、-S-或-O-;Y為-NH-、-1^(01.3烷基)-、-O-、-3-或-012-;更優(yōu)選Y為-O-、-順-或-042-;Z為-C(O)畫、-C(S)-、-S(O)-、-C(-NH)-、-C(-NCw烷基)-、-C(-NOH)-或-C(-NOd.3烷基)，更優(yōu)選為-C(O)-、-C(S)-或-S(O)-;R為氫、CH3、OH、SH、NH2、NHCH3、F、Cl或Br，更優(yōu)選為氬、CH3、Br或NHCH3;R2選自C,.20烷基、Q.2Q烯基、(CR2R2')m雜環(huán)基、(CR12R12,)m芳基、(CR12Ri2')m鹵基、(CR12Ri2')mOH、(CRi求i2')mOCi.20烷基、(CR,2R12')mOC2.2o烯基、(CR,2R，2)mOC(0)d.20烷基、(CR12R12')mOC(0)C2.2o烯基、(CR12R12.)mOC(0)芳基、(CR12R12')mO[C(0)CH(R21)NHr-H、(CR12R12.)mO，〗r、(CR12R12,)mNH2(CR2R2')mNHC,.20烷基、(CR)2R,2')mN(Q.2。烷基)2、(CR12R12,)mNHC2-20烯基、(CR，2R,2，)mN(C2-2Q烯基)2、(CRuR,2.)mN(d.20烷基)(02.2。烯基)、(CRuRu,)mNHC(0)C卜20烷基、(CR12R12.)mNHC(0)C2.2o烯基、(CR12R12.)mNHC(0)芳基、(CR12R12')mNHlC(0)CH(R21)NH]rH、(CR12R12')mNH-[糖]r、(CR12R12.)mS03H、(CRuRWmSCbCwo烷基、(CR12R12')mS03C2.2。烯基、(CR)2R2,)mC(0)C,.2o烷基、(CR12R12')mC(0)C2-20烯基、(CR12R12.)mC02H、(CR2R,2')mC02Q.20烷基、(CR12R12)mC02C2.2o烯基、(CRuRt2，)mC(0)NHC、.2Q烷基、(CR)2R,2,)mC(0)N(C,-2。烷基)2、(CR12R12')mC(O)NHC2.20烯基、(CR12R12')mC(0)N(C2.2Q烯基)2、(CRuRu.)mC(O)N(Cwo烷基)((32.2()烯基)、(CR12R12')mC(0)[NHCH(R21)C(0)r-OH、(CR12R12')mC(0)NHCH(R21)C(0)lr-OCH3、(CR12R12,)mC(0)糖jr、(CR,2R,2')mSd-6烷基、C(-N)NHC.6烷基；其中1112和1112各自獨立選自氫、Cw烷基、C2-6烯基、C2,6炔基、鹵素、OH、羥基C"烷基、OCl6坑基、C02H、C02C,.3烷基、NH2、NHCw烷基、N(C,.3烷基)2、CN、N02、芳基或雜環(huán)基；R21為氨基酸的特征基團，m為0或1-20中的一個整數(shù)，且r為卜5中的一個整數(shù)；更優(yōu)選R2選自(CH2)卜6C02H、C,.2Q烷基、d-20烯基、C02d-6烷基、(CH2V6NH2、(CH2)u6雜環(huán)基、其中芳基任選被一個或一個以上的OH或羥基d.3烷基取代的(CH2)w芳基、其中Cw烷基任選被OH取代的C02C^亞烷基OC卜6烷基、C(0)[NHCH(R21)C(0)r-OH、C(0)[NHCH(R21)C(0)]r-OCH3、S03C'.,o烷基、SOzNHd.io烷基、C(-N)NHC,.6烷基、(CH2),.30糖、(CH2)wSCi.6烷基、C(0)C.6烷基C02H、C)O)SCw烷基、NHC(0)C,.3烷基S雜環(huán)基、其中芳基任選被一個或一個以上的OH基團取代的C(0)NH(CH2)w芳基；R3為氫、鹵素、C廣C6烷基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nN02、-(CH2)n-OH、(CH2)nC(0)d-3烷基、-(CH2)n-CF^V(CH2)n-SH,其中n為0或1-3中的一個整數(shù)；更優(yōu)選R3為氫、NH2、(CH2)nC(0)d.3烷基、N02、Br、OH或CH3;R4為氫、甲基、乙基、-CH2=CH2、CH2CF3、氟基、氯基或溴基，更優(yōu)選為氬或溴基，特別優(yōu)選為氬。在各(CRsR5,)中，Rs和Rs沖至少一個為氫，且其中(CRsR5,)的數(shù)目n大于2,優(yōu)選少于2個R5和Rs,不為氫，更優(yōu)選(CRsR5,)n表示未取代的亞烷基鏈，其中鏈上具有n個亞甲基。在各(CR，2R，r)中，R,2和R,2沖至少一個為氫，其中(CR,2R,2.)的數(shù)目m大于5，優(yōu)選少于5個^2和1112.不為氫，更優(yōu)選(CRuR^^表示未取代的亞烷基鏈，其中鏈上具有m個亞曱基。在各(CR,6R,6,)中，Rw和R,6沖至少一個為氫，其中(CR!6R,6,)的數(shù)目n大于2，優(yōu)選少于2個R,6和R^不為氫，且其中(CR,6R,6,)的數(shù)目p大于4,優(yōu)選少于4個R16和Rw不為氫，更優(yōu)選(CRwRw,)n和(CRwRw)p表示未取代的亞烷基鏈，其中鏈上具有n或p個亞甲基。在各(CR26R26,)中，R26和R26,中至少一個為氫，其中(0126&26.)的數(shù)目t大于5，優(yōu)選少于5個R26和R26,不為氫，更優(yōu)選(CR26R26,)t表示未取代的亞烷基鏈，其中鏈上具有t個亞甲基。烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被一個或一個以上的選自以下的取代基取代卣素，羥基，羥烷基，烷氧基，Cw烷基，羧酸，羧酸酯，氨基，烷基取代的氨基，-CN和-N02;特別是任選被卣素，羥基，幾烷基和羧酸取代。在本發(fā)明的某些優(yōu)選方案中，式(I)化合物包括其中X選自-O-、-S-、-(:(115)(115,)-或-1^116)-,并優(yōu)選包含氫鍵供體或受體；Y選自-N(R7)"1-C(R7)2-;Z選自-C(O)-、-C(S)-、-C(=NR6)-、鄰)-或-(S)02誦；R選自氫、Cw烷基、(CR5R5.)nOR7、(CR5R5,)nSR7、(CR5R5,)nN(R6)2和(CRsR5,)n鹵基；R2選自C廣C2o烷基、C2-Qo烯基、C2-C2o炔基、(CR12R12.)mC(0)R8、(CR12R12')mC(S)R8、(CR12R'2')mS(0)R8、(CR12R12，)mS(0)2R8、(CR12R12')mOR9、(CR12R12')mSR9、(CRuR,2')mNR。Rn、(CR12Rl2')mC(-NR24)R2XCR'2R12')mR13;R3選自氮、C廣C6烷基、(CR16R16')PNR14R15、(CR16R16')PORn、(CR16R16)PSR17、(CR,6R,6')p鹵基、(CR16R16')pN02、(CR16R16.)nC(0)R28、(CR16R16.)nC(=NR24)R22、(CR16R16')nS(0)R17、(CR16R16,)nS(0)2R17、(CR16R16,)nS(0)3R17和(CR,6R,6')pC(Rs)3;R4選自氫、鹵素、C廣C3烷基、C2.3烯基、C2-3炔基和(CR12R12.)nC(R18)3;Rs和Rs各自獨立選自氫、C廣C3烷基、鹵基、OR7、SR和N(R6)2;R6各自獨立選自氫、C,-C3烷基和OR7;R7各自獨立選自氫和CrC3烷基；Rg選自氫、C，-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、OR19、SRi9、N(R20)2、[NH-CH(R21)-C(0)]q-OR29、[糖]q和(CR,2R,2')tR,3;R9選自氛、C廣C20坑基、C2-C2O彿基、C2-C20^^、(CRl2Rl2')tRl3、C(O)R"、C02R23、C(S)R23、C(S)OR"、S(0)R23、S(0)2R23、[C(0)CH(R21)NHq-R23和[糖〗q;Rhj和R"獨立選自氫、C廣C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20丈絲、(CR12R12.)mR13、C(0)R23、C(S)R23、S(0)R23、S(0)2R23、[C(0)CH(R21)NH]q-R23、-[糖jq和NHC(-NR25)-NH2;R,2和R,2各自獨立選自氫、C廣C6烷基、C2-Ce烯基、C2-C6炔基、OR24、SR24、鹵基、N(R24)2、C02R24、CN、N02、芳基或雜環(huán)基；R3選自O(shè)R25、R，4和R，5獨立選自氫、C廣C3烷基、ORI7、(CR16Ri6.)pC(R18)3;R"和Rw各自獨立選自氫、C-C3烷基、由基、OR17、SRn和N(R17)2;Rn各自獨立選自氫和d-C3烷基；Rw各自獨立選自氫和鹵基；R，9和各R203蟲立選自氛、C廣C20坑基、C2-C20彿基、C2-C20炔基、(CR26R26')tR27;R21為氨基酸的特征基團；R22選自C廣C6烷基、NH2、NH(Cw烷基)、N(C，.6烷基)2、OR29或SR29;R23選自氫、C廣C2o烷基、CrC2o烯基、CrC2o炔基、芳基(CR26R26')tR27;R24各自獨立選自氫和Q-C6烷基；R25各自獨立選自氫、d-C6烷基、Cw烷氧基Cw烷基、芳基和雜環(huán)基；R26和R26各自獨立選自氫、CrC6烷基、C2-Q烯基、C2-C6炔基、OR29、SR29、卣基、N(R29)2、C02R29、CN、N02、芳基和雜環(huán)基；R27選自氬、OR30、SR30、鹵基、N(R30)2、CO2R30、芳基和雜環(huán)基；R28選自氬、Cw烷基、OR29、SR29或N(R29)2;R29各自獨立選自氫和Q-C3烷基；R3o各自獨立選自氫、d-C3烷基、芳基和雜環(huán)基；Rw選自C,.3烷基、0H、Q.3炕氧基、芳基、芳氧基、雜環(huán)基和雜環(huán)氧基；n為0或1-3中的一個整數(shù)；m為0或1-20中的一個整數(shù)；p為0或1-6中的一個整數(shù)；q為1-5中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。在本發(fā)明的某些優(yōu)選方案中，式(I)化合物包括<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>R4其中X為-O-、-S-、.C(R5)2-或-N(R6)-;Y為-N(R7)-、-O-、-5-或-(:(117)2-;Z為-C(O)-、-C(S)-、.S(0)-或-C(-NR6);R為氛、CH3、OH、SH、NH2、NHCH3、F、Cl或Br;R2為C廣C2o烷基、C2-C2o烯基、C2-C2o炔基、(CR12R2')mC(0)R8、-(CR12R'2')mC(S)R8、-(CR12R12')mS(0)R8、-(CR12R12.)mS(0)2R8、-(CR12R12')mOR9、-(CR12R12.)mSR9、-(CRuR^mNI^oR"、(CR12R12')mC(=NR24)R2^(CR12R12)mRi3，其中m、R7、R8、R9、R10、Rii、Ru、Ri2.、Rn、R22和R24的定義同上；R3為氫、鹵素、Cw烷基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nN02、-(CH2)n-OH、-(CH2)nC(0)C,.3烷基、-((^2)^&或-((^2)113!，其中n的定義同上；R4為氫、鹵素、曱基、乙基、CH2CF3或-CH產(chǎn)CH2。優(yōu)選的式(I)化合物包括其中X為-N(R6)-;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>Y為-N(R7)-或畫C(R7)2-;Z為-C(O)-、-C(S)曙、-S(O)-或歸C(-NH);R!為氫、CH3、NH2、NHCH3、F、Cl或Br;R2的定義同上；R3為氫、鹵素、d.3烷基、(CH2)nNH2、(CH2)nN02、(CH2)nOH、(CH2)nC(0)CH3或(CH2)nCF3，其中n的定義同上；R4為氫、鹵素、甲基、乙基、CH2CF4-CH2-CH2。優(yōu)選的式(I)化合物為式(II)的苯并咪唑類化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>R,為氬、CH3、NHCH3、F、Cl或Br;R2的定義同上述R2;R3為氫、鹵素、Q.C3烷基、(CH2)nNH2、(CH2)nN02、(CH2)nOH、(CH2)nC(0)CH3、(CH2)nCF3，其中n的定義同上；R4為氫、鹵素、甲基、乙基、CH2CF^-CH2=CH2。其它優(yōu)選的式(I)化合物為式(m)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>其中X為-O-、.NH-或-CH2-;Y為-NH-、-0"1-CH2-;Z為-C(O)-、-C(S)-或-S(O)-;R，(H選自氫、Cw烷基、OH、SH、NH2、NHCw烷基、F、Cl或Br;R,02選自C,.2Q烷基、C2-2Q烯基、C02H、C02Rk)5、-NH2、F、Cl、Br、(CH2)WR106、C(0)N(R'o7)2、C(-N)NHC"6烷基、S02Cw烷基、C(0)[NHCH(R,。8)C(0)]q-ORn)9、C(O)糖、C(0)NH(CH2)n芳基、NHC(0)(CH2)nS雜環(huán)基、C(0)SC^烷基、C(0)(CH2)nC02H、SC^OCwo烷基和S02NHd.，。烷基；Rjo3選自氫、F、Cl、Br、Cl6貌基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nN02、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-CF3、-,)1.3烷基或仰2)11觀；R，04選自氫、甲基、乙基、CH2C(R110)3、C(R110)3、-CH2=CH2、氟基、氯基或溴基；R朋選自氫、C卜2Q烷基、C2.2。烯基或(CH2)tOCw烷基；R,。6選自SH、SC)-6烷基、OH、OC)-6烷基、糖、C02H、NH2、雜環(huán)基或芳基；R07各自獨立選自氫、C卜20烷基、Cwo烯基、(CH2)t芳基和(CH2)t雜環(huán)基；Rn)8為氨基酸的特征基團；Ri。9為氛、C卜3坑基；Ruo各自獨立選自氫和卣基；且n為0或1-3中的一個整數(shù)，q為卜5中的一個整數(shù)，w為1-6中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中各烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。優(yōu)選的式(I)化合物為式(IV)的苯并咪唑類化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>其中Rn),選自氫、CH3、OH、SH、NH2、NHCH3、F、Cl或Br;R102選自C,.2o烷基、C2.20彿基、C02H、CO2R105、-NH2、F、Cl、Br、(CH2)WR106、C(O)N(R107)2、C(-N)NHC.6烷基、S02C-6烷基、C(O)[NHCH(R,08)C(O)q匿OR，09、C(O)糖、CONH(CH2)n芳基、NHC(0)(CH2)nS雜環(huán)基、C(0)SC^烷基、CO(CH2)nC02H、SC^OCwo烷基和S02NHCwo烷基；R朋選自氫、F、Cl、Br、Cw烷基、(CH2)nNH2、-(CH2)nN02、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-CF3、CH2C(0)CH3或-(CH2)n-SH;R,04選自氫、甲基、乙基、CH2CF3、-CH2=CH2、氟基、氯基或溴基；Rl05選自氫、Cl.lQ烷基、C2.H)烯基、(CH2)tOCw烷基；R賜選自SH、SC卜6烷基、OH、OCL6烷基、糖、C02H、NH2、雜環(huán)基或芳基；Rn)7各自獨立選自氫、C,-H)烷基、Cwo烯基、(CH2)t芳基和(CH》t雜環(huán)基；R咖為氨基酸的特征基團；R、o9為氛、C"3坑基；R,H)各自獨立選自氫和卣基；且n為0或1-3中的一個整數(shù)，q為1-5中的一個整數(shù)，w為1-6中的一個整數(shù)，t為1-10中的一個整數(shù)；其中各烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。合適的化合物實例包括<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage34</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>式(I)化合物可采用本文描述的方法或本領(lǐng)域已知方法制備?？衫斫夂铣墒?I)的具體化合物可能需要對本文描述的方法或本領(lǐng)域已知方法進行很小的修改。適用于合成所迷化合物的通用合成方法可見于普通參考文獻,例如Co/w/"e/ze"j/veOga"/c!Tra"^/brma"oAW,R.C.Larock:1989，VCHPublishers和爿ofv""cedOrg朋/cC/jew/W/y,J.March,笫4版(1992),WileyInterScience,及其中的參考文獻，還需認識到在合成過程中某些活性基團可能需要保護和脫保護。合適的用于活性官能團的保護和脫保護方法為本領(lǐng)域所熟知，例如在尸rafec"veOow/w/"Oga"/c■/s,T.W.Green&P.Wutz,JohnWiley&Son,第3版，1999中描述的方法。因此,對于本發(fā)明的某些實施方案，其中X和Y為N而Z為-C(O)-、-S(0)-或-(C-NR6)-的式(I)化合物可按照流程1(3)所示的示例性通用方法制備。合適的原料可通過購買得到或采用本領(lǐng)域已知方法制備得到。\流程1當R為-C02H或-C(S)OH時，這類化合物可通過標準烷基化、酯化或酰胺化的方法進一步衍生化，以提供酮、疏酮、酯、硫代酸酯、酰胺和硫代酰胺。當R為羥基、硫醇或氨基時，這些基團可通過標準?；蛲榛椒ㄟM一步衍生化，以提供酯、疏代酸酯、酰胺、醚、石危醚和N-烷基。通過例如NH3/無水甲醇的氨解，可實現(xiàn)酰胺到C-NH(NH2)的轉(zhuǎn)化。當R為C02H時，通過Arndt-Eistert反應(yīng)，例如將羧酸轉(zhuǎn)化為酰鹵，然后再將酰鹵轉(zhuǎn)化為重氮甲酮(diazoketone),可在苯核和羧g之間插入一個亞甲基。重氮甲酮(diazoketone)重排(例如用氧化銀和水)提供獲得CH2-C02H基團的途徑。重復這些步驟，可進一步引入多個亞甲基。所迷C02H基團可如上轉(zhuǎn)化。在其它實施方案中，其中R2為取代的甲基的式(I)化合物可通過將該曱基取代基(R2)轉(zhuǎn)化(例如用N-卣代琥珀酰亞胺如NBS處理)為由代甲基取代基，接著通過適當親核試劑的親核取代反應(yīng)和/或通過例如Wittig反應(yīng)插入其它亞甲基制備(參見流程2,其中11*可為例如(CH2)mOH、(CH2)mSH、(CH2)mNH2、(CH2)加C(0)d.2。烷基、36(CH2XnOC(0)C，.!o烷基、(CH2)mOd.2Q烷基、(CH2)mO苯基、(CH2)mO芐基、(CH2)mNHC，.2Q烷基、(CH2)mN(C,.20烷基)2、(CH2)mNH苯基、(CH。mNH千基、(CH2)mSd.2Q烷基、(CH2)mSC(0)Cwo烷基、(CH2)mS苯基、(CH2)mS芐基、(CH2)mNH糖、(CH2)mS糖、(CH2)mO糖、(CH2)mNHC(0)d.,Q烷基、(CH2)mNHC(0)苯基、(CH2)mNHC(0)芐基、(CH2)mNHC02CL6烷基、(CH2)mNHC02苯基或(CH2)mNHC02芐基，其中m為0或1-20)。卩1在其它實施方案中，其中R2為CH2囟基的化合物可通過合適的羧酸衍生物與還原劑(如LiAlH4)反應(yīng)，接著通過囟化反應(yīng)(如用氯化亞砜處理)制備(流程3)。親核取代和/或Wittig反<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>流程2流程3在CuLi存在下，其中112為CH2囟基的化合物與Cw烷基卣化物、卣代(CH2)n雜環(huán)基的偶合反應(yīng)得到相應(yīng)的化合物(其中R2取代基為Cw烷基、(CH2)n雜環(huán)基)。在堿存在下，CH2囟基與NH2-NH-C(-NH)-NH2的反應(yīng)提供獲得其中112為CH2-NH-NH-C(-NH)-NH2的化合物的途徑，或者，CH2面基與鹵代(CH2)pNH-NH-C(-NH)-NH2(其中p為1或2)的反應(yīng)可得到基團(CH2)pNH-NH-C(-NH)-NH2(其中p為2或3)。其它實施方案中的式(I)化合物可通過已知方法制備.例如，呋喃、噢吩和吲哚衍生物可分別通過輕基酸、硫羥酸或氨基酸的環(huán)化制備。例如,流程4術(shù)語"鹽或前藥"包括任何藥學上可接受的鹽、酯、溶劑合物、水合物或任何一旦給予接受者就能(直接或間接)提供本文描述的式(I)化合物的其它化合物。術(shù)語"前藥"按廣義使用并包含那些在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為本發(fā)明化合物的衍生物。該類衍生物對本領(lǐng)域技術(shù)人員來講是顯而易見的，并包括例如其中游離羥基轉(zhuǎn)化為酯(如乙酸酯)的化合物，或者其中游離氨基轉(zhuǎn)化為酰胺的化合物，?；景l(fā)明化合物的羥基或氨基的方法在本領(lǐng)域是熟知的，并可包括在合適的催化劑或堿存在下，使用合適的羧酸、酸酐或酰氯處理所述化合物。合適的藥學上可接受的鹽包括但不限于以下藥學上可接受的無機酸的鹽，如鹽酸、疏酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、M磺酸和氫溴酸；或以下藥學上可接受的有機酸的鹽，如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、馬來酸、羥基馬來酸、富馬酸、馬來酸、檸檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲笨璜酸、M酸、水楊酸、對氨基苯磺酸(sulphanilic)、天冬氨酸、谷氨酸、乙二胺四乙酸、硬脂酸、棕櫚酸、油酸、月桂酸、泛酸、鞣酸、抗壞血酸和戊酸。堿鹽包括但不限于那些與藥學上可接受的陽離子所成的鹽，所述陽離子如鈉離子、鉀離子、鋰離子、鈣離子、鎂離子、銨離子和烷基銨離子。堿性含氮基團可用例如低級烷基鹵化物、硫酸二烷基酯及其它試劑季銨化(quarternised)，所述低級烷基囟化物如曱基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和石W匕物；石克酸二烷基酯如石危酸二甲酯和石危酸二乙酯。還應(yīng)認識到一些式(I)化合物可具有不對稱中心并因此能以一種以上的立體異構(gòu)體形式存在，因此，本發(fā)明也涉及相對于一個或多個不對稱中心來說基本上為純的異構(gòu)體形式的化合物(例如大于約90%ee(對映體過量)，如約95%ee或97%ee或大于99%ee)及其混合物(包括外消旋混合物)。這些異構(gòu)體可通過不對稱合成制備，例如使用手性中間體制備，或通過手性拆分制備。在另一個方面，本發(fā)明提供一種治療、預防或診斷與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予有需要的患者治療、預防或診斷有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在再一方面，本發(fā)明提供式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備用于治療、預防或診斷與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的藥物中的用途。在再一方面，本發(fā)明提供一種用于治療、預防或診斷與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的藥物，所述藥物包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。本文所使用的MIF包括人類或其它動物MIF及其衍生物和自然存在的變體，它們至少部分保留了MIF細胞因子或生物活性。因此，治療的患者可為人類或例如哺乳動物等其它動物。非人類患者包括但不限于靈長目動物、牲畜動物(例如綿羊、母牛、馬、豬、山羊)、家養(yǎng)動物(例如狗、貓)、鳥類和實驗室實驗動物(例如小鼠、大鼠、豚鼠、兔)。MIF也可在植物中表達(因此"MIF，也可指才直物MIF)并且如果合適，式(I)化合物也可用于植物/農(nóng)業(yè)應(yīng)用中，例如用于農(nóng)作物控制。本文所稱MIF的"細胞因子或生物活性，，包括通過自分泌、內(nèi)分泌、旁分泌、細胞因子、激素或生長因子活性或通過細胞作用，對細胞功能的細胞因子或生物作用。具體地講，本發(fā)明提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病、實體瘤或造血系腫瘤、或慢性或急性炎性疾病的方法，所述疾病或瘤包才舌選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊推關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、賴特爾綜合征)，結(jié)晶性關(guān)節(jié)病(包括但不限于痛風、假痛風、焦磷酸鉤沉積病)，萊姆病，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼疳、全身性硬皮病、多肌炎、皮肌炎、斯耶格倫綜合征)，血管炎(包括但不限于結(jié)節(jié)性多動脈炎、韋格納肉芽腫病、丘-施綜合征)，腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，消化性潰瘍，胃炎，食管炎，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力、硬化性膽管炎、原發(fā)性膽汁性肝硬變)，肺部疾病(包括但不限于彌漫性間質(zhì)性肺部疾病、塵肺病、纖維化肺泡炎、哮喘、支氣管炎、支氣管擴張癥、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌(包括但不限于結(jié)腸癌、淋巴瘤、肺癌、黑色素瘤、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病、宮頸癌、多發(fā)性骨髓瘤和轉(zhuǎn)移性癌)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞、中風、周圍血管疾病)，下丘腦-垂體-腎上腺軸障礙，腦功能障礙(例如癡呆、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、脫髄鞘病)，角膜病，虹膜炎，虹膜睫狀體炎，白內(nèi)障，葡萄膜炎，結(jié)節(jié)病，以變形血管發(fā)生為特征的疾病(例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥)，子宮內(nèi)膜功能性疾病(月經(jīng)、植入、分娩、子宮內(nèi)膜異位)，銀屑病，內(nèi)毒素(膿毒性)休克，外毒素(膿毒性)休克，感染性(純膿毒性)休克，其它感染并發(fā)癥，盆腔炎，移植排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，骨病(例如骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病)，異位性皮炎，UV(B)-誘發(fā)的皮膚細胞活化(例如曬傷、皮膚癌)，疾疾并發(fā)癥，糖尿病，疼痛，創(chuàng)傷或局部出血導致的炎癥，睪丸機能障礙和傷所迷方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病、實體瘤或造血系腫瘤、或慢性或急性炎性疾病的方法，所迷疾病或瘤包括選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊椎關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、賴特爾綜合41征)，結(jié)晶性關(guān)節(jié)病(包括但不限于痛風、假痛風、焦磷酸鈣沉積病)，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身性硬皮病、多肌炎、皮肌炎、斯耶格倫綜合征)，腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，消化性潰瘍，胃炎，食管炎，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力)，肺部疾病(包括但不限于彌漫性間質(zhì)性肺部疾病、哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌(包括但不限于結(jié)腸癌、淋巴瘤、肺癌、黑色素瘤、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病、宮頸癌、多發(fā)性骨髄瘤和轉(zhuǎn)移性癌)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心M塞)，腦功能障礙(例如多發(fā)性硬化、脫髄鞘病)，虹膜炎，虹膜睫狀體炎，葡萄膜炎，結(jié)節(jié)病，以變形血管發(fā)生為特征的疾病(例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥)，銀屑病，內(nèi)毒素(膿毒性)休克，外毒素(膿毒性)休克，感染性(純膿毒性)休克，盆腔炎，移植排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，骨病(包括但不限于骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病)，異位性皮炎，痗疾并發(fā)癥，糖尿病，疼痛，創(chuàng)傷或局部出血導致的炎癥和傷口愈合；所述方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在還一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病、實體瘤或造血系腫瘤、或慢性或急性炎性疾病的方法，所述疾病或瘤包括選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊推關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎)，結(jié)晶性關(guān)節(jié)病(包括但不限于痛風、假痛風、焦磷酸鈣沉積病)，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身性硬皮病、多肌炎、皮肌炎)，腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括4旦不限于糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力)，肺部疾病(包括但不限于孝喘、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌(包括但不限于結(jié)腸癌、淋巴瘤、肺癌、白血病、宮頸癌、多發(fā)性骨髄瘤和轉(zhuǎn)移性癌)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞)，腦功能障礙(例如多發(fā)性硬化、脫髄鞘病)，葡萄膜炎，結(jié)節(jié)病，以變形血管發(fā)生為特征的疾病(例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥)，銀屑病，內(nèi)毒素(膿毒性)休克，外毒素(膿毒性)休克，感染性(純膿毒性)休克，移植排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，骨病(包括但不限于骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病)，異位性皮炎，瘧疾并發(fā)癥，糖尿病，疼痛，創(chuàng)傷或局部出血導致的炎癥和傷口愈合；所述方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在還一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病、實體瘤或造血系腫瘤、或慢性或急性炎性疾病的方法，所述疾病或瘤包括選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊椎關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊稚炎，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎)，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身性硬皮病)，腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)^:性回腸炎)，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力)，肺部疾病(包括但不限于哞喘、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌(包括但不限于結(jié)腸癌、淋巴瘤、肺癌、白血病、宮頸癌、多發(fā)性骨髓瘤和轉(zhuǎn)移性癌)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞)，腦功能障礙(例如多發(fā)性硬化、脫髄鞘病)，銀屑病，移植排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，異位性皮炎和傷口愈合；所述方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病或慢性或急性炎性疾病的方法，所述疾病包括選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊堆關(guān)節(jié)病(包括4旦不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎)，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身性硬皮病)，腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、曱狀腺炎、重癥肌無力)，肺部疾病(包括但不限于哞喘、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞)，腦功能障礙(例如多發(fā)性硬化、脫髓鞘病)，銀屑病，移植排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，異位性皮炎和傷口愈合；所迷方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在一個還再優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病或慢性或急性炎性疾病的方法，所述疾病包括選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊推關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎)，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡)，腎小球腎炎，間質(zhì)性腎炎，腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力)，肺部疾病(包括但不限于哞喘、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞)，腦功能障礙(例如多發(fā)性硬化、脫髓鞘病)，銀屑病，移植排斥，過敏性鼻炎和異位性皮炎；所迷方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在一個還再優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供一種治療、診斷或預防自身免疫性疾病或慢性或急性炎性疾病的方法，所述疾病包括選自以下的疾病或病癥風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊推關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎)，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡)，腎小球腎炎，間質(zhì)性腎炎，腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，肺部疾病(包括但不限于哮喘、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞)，腦功能障礙(例如多發(fā)性硬化、脫髓鞘病)，銀屑病和移植排斥；所述方法包括給予有需要的患者治療、診斷或預防有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。本發(fā)明的再一方面提供了式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備用于治療上述疾病或病癥的藥物中的用途。本文所用的術(shù)語"有效量"是指當按所需要的給藥方案給藥時，提供所需的MIF細胞因子抑制或處理或治療活性、或疾病/病癥預防所需用的化合物的量。可以分鐘、小時、天、周、月或年的間隔進行給藥或在這些間隔的任何一種間隔內(nèi)連續(xù)給藥。細胞因子或生物活性抑制量是至少部分抑制MIF細胞因子或生物活性的量。治療或處理有效量是指對于治療中的具體疾病狀況而言，當按所需的給藥方案給藥時，足以至少部分達到所需治療效果或延遲其發(fā)生、或抑制其進展、或終止或部分或全部逆轉(zhuǎn)其發(fā)生或進展所需的化合物的量。預防有效量是指當按所需給藥方案給藥時，足以至少部分預防或延遲具體疾病或病癥發(fā)生所需的化合物的量?；衔锏脑\斷有效量是指足以結(jié)合至MIF上以確保檢測到MIF-化合物復合物(complex),從而診斷出可能的疾病或病癥所需的量。合適的劑量可約為0.1ng/kg體重/劑量-1g/kg體重/劑量的范圍。優(yōu)選所述劑量為lng/kg體重/劑量-lg/kg體重/劑量的范圍，例如在lmg/kg體重/劑量-lg/kg體重/劑量的范圍。在一個實施方案中，劑量在lmg/kg體重/劑量-500mg/kg體重/劑量的范圍。在另一個實施方案中，劑量在lmg/kg體重/劑量-250mg/kg體重/劑量的范圍。在還一個優(yōu)選的實施方案中，劑量在lmg/kg體重/劑量-100mg/kg體重/劑量的范圍，例如為50mg/kg體重/劑量。在還一個實施方案中，劑量在lpg/kg體重/劑量-lmg/kg體重/劑量的范圍。合適的劑量和給藥方案可由主治醫(yī)師或獸醫(yī)確定并可取決于所需的抑制活性水平、被治療的具體病癥、所述病癥的嚴重性以及患者的一般年齡、健康狀況和體重?？梢詥蝿┝炕蛳盗袆┝拷o予所述活性組分。對于活性組分而言，當有可能單獨給藥時，優(yōu)選采用組合物形式、更優(yōu)選采用藥用組合物形式。在再一方面，本發(fā)明提供一種藥用組合物，所迷組合物包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥以及藥學上可接受的栽體、稀釋劑或賦形劑。這類組合物的制劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。所述組合物可包含藥學上可接受的添加劑，例如栽體、稀釋劑或賦形劑。這些添加劑包括(如果合適)所有常規(guī)溶劑、分散劑、填充劑、固體栽體、包衣材料、抗真菌劑和抗菌劑、皮膚滲透促進劑、表面活性劑、等滲劑和吸收劑等?？衫斫獗景l(fā)明組合物也可包括其它輔加的生理活性劑。所述栽體必須是藥學上可接受的，即與所迷組合物的其它組分相容且不會對患者有害。組合物包括那些適用于經(jīng)口、直腸、吸入、鼻、透皮、局部(包括口頰和舌下)、陰道或腸胃夕卜(包括皮下、肌內(nèi)、脊柱內(nèi)、靜脈內(nèi)和皮內(nèi))給藥的組合物。所述組合物通?？梢詥挝粍┬痛嬖诓⒖赏ㄟ^藥劑學領(lǐng)域熟知的任何方法制備，這些方法包括將所迷活性組分與構(gòu)成一種或一種以上輔助組分的栽體混合的步驟，一般而言，所述組合物可通過將活性組分與液體栽體或細顆粒固體栽體或兩者均勻并充分地混合，然后(如果需要)使產(chǎn)品成形制備。根據(jù)需治療的疾病或病癥，式(I)化合物可能或不需通過血/腦屏障。因此，本發(fā)明的組合物可配制成為水溶性或脂溶性。適用于口服給藥的本發(fā)明組合物可以以下的離散單位存在例如膠嚢劑、小袋或片劑，各自包含預先確定量的活性組分；散劑或顆粒劑；在水性或非水性液體中的溶液劑或混懸劑；或水包油型液體乳劑或油包水型液體乳劑。所述活性組分可以大丸劑(bolus)、藥糖劑或糊劑形式存在?？赏ㄟ^壓縮或模壓，任選與一種或多種輔加組分一起制備片劑。在合適的機器中，可通過壓縮例如粉末或顆粒等自由流動形式的活性組分制備壓縮片，所述活性組分任選與粘合劑(例如惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如羥乙酸淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉》、表面活性劑或分散劑混合。在合適的機器中，通過模壓用惰性液體稀釋劑潤濕的粉末狀化合物的混合物，可制備才莫壓的片，這些片可任選被包衣或刻痕，并且可配制成以便其中所述活性成分緩釋或控釋的片，使用例如可變比例的羥丙基甲基纖維素來提供所需的釋放特征。這些片可任選進行包腸溶衣，以使其在部分腸內(nèi)而不是胃內(nèi)釋放。適用于在口內(nèi)局部給藥的組合物包括糖錠劑、錠劑和漱口劑，所述糖錠劑包含在調(diào)味基質(zhì)中的活性組分，調(diào)味基質(zhì)通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃芪膠；所述錠劑包含在例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠等惰性基質(zhì)中的活性組分；所述漱口劑包含在合適的液體栽體中的活性組分。式(I)化合物可經(jīng)鼻內(nèi)或經(jīng)吸入給藥，例如通過霧化器、氣霧刑或噴霧器方法。適用于局部給予皮膚的組合物可包含溶于或懸浮在任何合適栽體或基質(zhì)中的所述化合物，并可為洗劑、凝膠、軟骨劑、糊劑、乳骨劑等形式。合適的栽體包括礦物油、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、乳化蠟、失水山梨糖醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨酯蠟、十六/十八醇、2-辛基十二烷醇、千醇和水。也可使用例如貼劑等透皮裝置來給予本發(fā)明化合物。用于直腸給藥的組合物可以具有合適栽體基質(zhì)的栓劑形式存在，所述栽體基質(zhì)包含例如可可油、明膠、甘油或聚乙二醇。適用于陰道給藥的組合物可以陰道栓劑、棉塞、乳骨、凝膠、糊劑、泡沫材料或噴霧劑形式存在，所述組合物除含有所迷活性組分外，還適量含有本領(lǐng)域熟知的栽體。適用于腸胃外給藥的組合物包括水性和非水性等滲無菌注射溶液，所述無菌注射溶液可含有抗氧化劑、緩沖劑、殺菌劑和使所迷組合物與預定接受者的血液等滲的溶質(zhì)；和水性和非水性無菌混懸劑，所述混懸劑可包括懸浮劑和增稠劑。所述組合物可存在于單劑量或多劑量密閉容器中，例如安瓿和小瓶，并且可在凍干(低壓凍干)條件下儲存，在臨用前只需立即加入無菌液體栽體，如注射用水。臨時注射溶液和混懸劑可從前述類別的無菌散劑、顆粒劑和片劑制備。優(yōu)選單位劑量組合物是那些含有如本文以上描述的日劑量或單位、日亞劑量、或適當份數(shù)的所述活性組分的組合物。應(yīng)理解除上述特別提及的活性組分外，本發(fā)明組合物可包括本領(lǐng)域的相關(guān)類型組合物的其它常規(guī)試劑，例如那些適用于口服給藥的組合物還可進一步包括如粘合劑、增甜劑、增稠劑、矯味劑、崩解劑、包衣材料、防腐劑、潤滑劑和/或時間延遲劑(timedelayagents)等試劑。合適的增甜劑包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、天冬甜素或糖精。合適的崩解劑包括玉米淀粉、曱基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、黃原膠、膨潤土、藻酸或瓊脂。合適的矯味劑包括薄荷油、冬青油、櫻桃、橙或紅莓調(diào)味劑合適的包衣材料包括丙烯酸和/或甲基丙烯酸和/或它們的酯的聚合物或共聚物、蠟、脂肪醇、玉米蛋白、蟲膠或谷蛋白。合適的防腐劑包括苯甲酸鈉、維生素E、ct-生育盼、抗壞血酸、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、亞硫酸氫鈉。合適的潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸、油酸鈉、氯化鈉或滑石粉。合適的時間延遲劑包括甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯?？烧J識到例如抗炎藥物(例如類固醇，如糖皮質(zhì)激素)或抗癌藥物等其它治療活性藥物可與式(I)化合物聯(lián)合使用。當與其它治療活性藥物聯(lián)合給藥時，式(I)化合物可表現(xiàn)出相加或協(xié)同作用。這些藥物可以組合形式(即含有所述活性藥物的單一組合物)或以離散的劑量同時給予?；蛘?，可依次給予或分開給予所述其它治療活性藥物與本發(fā)明化合物。因此，本發(fā)明也涉及藥劑盒和聯(lián)合藥物，所述藥劑盒和聯(lián)合藥物包含式(I)化合物和一種或一種以上用于治療本文描述的疾病或病癥的其它治療活性成分?？捎糜谂c式(I)化合物聯(lián)合給藥的藥物實例包括但不限于糖皮質(zhì)激素，抗風濕藥(包括但不限于甲氨蝶呤，來氟米特，柳氮磺胺吡啶，羥基氯喹，金鹽)；免疫抑制藥(包括但不限于環(huán)孢菌素，霉酚酸嗎乙酯(mycophenyllatemofetil),硫唑噪呤，環(huán)磷酰胺)；抗-細胞因子治療藥物(包括但不限于腫瘤壞死因子的拮抗劑、抗體、結(jié)合蛋白或可溶性受體，白介素l,白介素3，白介素5，白介素6，白介素8，白介素12，白介素18，白介素17，及如在相關(guān)病理階段發(fā)現(xiàn)的其他促炎細胞因子)；促細胞分裂劑激活蛋白(MAP)激酶拮抗劑或抑制劑(包括但不限于細胞外信號調(diào)控激酶(ERK)拮抗劑或抑制劑，c-JunN-末端激酶/應(yīng)力激活蛋白激酶(JNK/SAPK)，p38MAP激酶，及涉及MAP激降農(nóng)賴性細胞活化的其它激酶或酶或蛋白質(zhì))；核因子k-B(NF-kB)信號轉(zhuǎn)導途徑的拮抗劑或抑制劑(包括但不限于I-KB-激酶、白介素受體激活激酶、及其他涉及NF-kB-依賴性細胞活化的激酶或酶或蛋白質(zhì)的拮抗劑或抑制劑)；抗體，蛋白質(zhì)治療藥物，或與粘著分子和共同刺激分子相互作用的小分子治療藥物(包括但不限于直接抗細胞間粘著分子-l、CD40、CD40-配體、CD28、CD4、CD-3、例如P-選擇蛋白或E-選擇蛋白的選擇蛋白的治療藥物)；支氣管擴張藥，例如(3-腎上腺素受體激動劑或抗-膽堿能藥物；類二十烷酸合成途徑拮抗劑，例如非甾體抗炎藥、環(huán)氧合酶-2抑制劑、血栓素抑制劑或脂氧合酶抑制劑；直接抗白細胞表面抗原的抗體或其它藥物(包括但不限于直接抗CD3、CD4、CD5、CD19、CD20、HLA分子的抗體或其它藥物)；用于治療腸炎的藥物(包括但不限于柳氮磧胺吡啶、美沙拉秦、水楊酸衍生物)；抗癌藥(包括但不限于細胞毒藥物、溶胞藥物、單克隆抗體)。在另一方面，本發(fā)明提供一種治療或預防與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的方法，所迷方法包括給予哺乳動物式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥和第二種治療藥物。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，所述第二種治療藥物為糖皮質(zhì)激素類化合物。MIF拮抗劑對糖皮質(zhì)激素影響的機制還不完全清楚。式激活，或者取決于對細胞活化產(chǎn)生剌激作用的基因的反式激活。反式阻抑作用部分通過對例如核因子kB(nf-kb)和促細胞分裂劑激活蛋白激酶(MAPK)途徑等細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導途徑的影響介導。不希望受理論的約束，通過MIF抑制劑抑制信號轉(zhuǎn)導途徑的激活使糖皮質(zhì)激素更加有效是可能的。不能確定糖皮質(zhì)激素抑制MAPK途徑激活的能力。多方面報道了在各種條件下糖皮質(zhì)激素可抑制或不能抑制MAPK激活(13-15)。被稱為ERK(細胞外信號調(diào)控激酶，也稱為p44/42MAP激酶)的MAPK途徑的激活，可通過例如白介素-1(IL-1)刺激提高，通過ERK蛋白磷酸化并使用磷酸-特異性抗體檢測來測定(圖3)。ERK途徑也因被MIF激活而熟知(16)。在實驗中，使用人皮膚成纖維細胞，糖皮質(zhì)激素地塞米松不能抑制IL-1激活的ERK途徑。但是，地塞米松與可抑制MIF細胞因子或生物活性的化合物的組合能抑制ERK激活(圖3)。盡管不能完全理解所涉及的相互作用途徑，但是抑制MIF細胞因子或生物活性的化合物與糖皮質(zhì)激素聯(lián)合給藥可能對信號轉(zhuǎn)導途徑產(chǎn)生抑制作用，比單獨用糖皮質(zhì)激素的作用強。在例如炎性疾病的病癥中，已知其中這些信號轉(zhuǎn)導途徑在調(diào)控細胞活化中比較重要，該增強的作用有可能使給定的患者使用較低劑量的糖皮質(zhì)激素；即抑制MIF細胞因子或生物活性的化合物將具有"類固醇-節(jié)省，，效果，在另一方面，本發(fā)明提供一種預防或治療需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥，所述方法包括給予哺乳動物糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在還一方面，本發(fā)明提供一種治療類固醇耐藥性疾病的方法，所迷方法包括給予哺乳動物糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在再一方面，本發(fā)明提供一種提高糖皮質(zhì)激素對哺乳動物作用的方法，所述方法包括同時、各自或依次給予所述哺乳動物式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥和所述糖皮質(zhì)激素。在還再一方面，本發(fā)明提供一種組合物，所述組合物包含糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥。在再一方面，本發(fā)明提供了糖皮質(zhì)激素在制備用于將其與式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥一起給藥以治療或預防需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥的藥物中的用途。在還再一方面，本發(fā)明提供一種式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備用于將其與糖皮質(zhì)激素一起給藥以治療或預防需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥的藥物中的用途。在還再一方面，本發(fā)明提供一種糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物或其藥疾病或病癥的藥物中的用途。優(yōu)選用于本發(fā)明的方法、用途和組合物中的糖皮質(zhì)激素的量少于其在不含式(I)化合物時的有效量。在對糖皮質(zhì)激素無響應(yīng)的類固醇耐藥性疾病或病癥的治療中，認為與式(I)化合物聯(lián)合給藥時有效的糖皮質(zhì)激素的任何量都小于其在不含式(I)化合物時的有效量。相應(yīng)地，本發(fā)明提供了一種類固醇-節(jié)省療法。在本發(fā)明優(yōu)選的實施方案中，使用糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物來治療或預防哺乳動物、優(yōu)選人類患者的疾病或病癥。術(shù)語"需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥"是指能通過給予糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥，包括但不限于自身免疫性疾病、實體瘤或造血系腫瘤、或慢性或急性炎性疾病，這些疾病或病癥的實例包括風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊堆關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、賴特爾綜合征)，結(jié)晶性關(guān)節(jié)病(包括但不限于痛風、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，消化性潰瘍，胃炎，食管炎，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力、硬化性膽管炎、原發(fā)性膽汁性肝硬變)，肺部疾病(包括但不限于彌漫性間質(zhì)性肺部疾病、塵肺病、纖維化肺泡炎、哮喘、支氣管炎、支氣管擴張癥、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌(包括但不限于結(jié)腸癌、淋巴瘤、肺癌、黑色素瘤、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病、宮頸癌、多發(fā)性骨髄瘤和轉(zhuǎn)移性癌)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞、中風、周圍血管疾病)，下丘腦-垂體-腎上腺軸障礙，腦功能障礙(例如癡呆、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、脫髄鞘病)，角膜病，虹膜炎，虹膜睫狀體炎，白內(nèi)障，葡萄膜炎，結(jié)節(jié)病，以變形血管發(fā)生為特征的疾病(例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、類風濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥)，子宮內(nèi)膜功能性疾病(月經(jīng)、植入、分娩、子宮內(nèi)膜異位)，銀屑病，內(nèi)毒素(膿毒性)休克，外毒素(膿毒性)休克，感染性(純膿毒性)休克，其它感染并發(fā)癥，盆腔炎，移植排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，骨病(例如骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病)，異位性皮炎，UV(B)4秀發(fā)的皮膚細胞活化(例如曬傷、皮膚癌)，癡疾并發(fā)癥，糖尿病，疼痛，創(chuàng)傷或局部出血導致的炎癥，睪丸機能障礙和傷口愈合。這些疾病或病癥也可包括類固醇耐藥性疾病或病癥，其中需用糖皮質(zhì)激素治療，但是糖皮質(zhì)激素無效或達不到預期效果，當與糖皮質(zhì)激素聯(lián)合給藥，式(I)化合物在治療選自自身免疫性疾病或慢性或急性炎性疾病的疾病或病癥時特別有效，所述疾病或病癥包括風濕性疾病(包括但不限于類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、4艮屑病關(guān)節(jié)炎、風濕性多肌病)，脊推關(guān)節(jié)病(包括但不限于關(guān)節(jié)強硬性脊推炎，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、賴特爾綜合征)，結(jié)晶性關(guān)節(jié)病(包括但不限于痛風、假痛風、焦磷酸鈣沉積病)，結(jié)締組織病(包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身性硬皮病、多肌炎、皮肌炎、斯耶格倫綜合征)，血管炎(包括但不限于結(jié)節(jié)性多動脈炎、韋格納肉芽腫病、丘-施綜合征)，腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎(包括但不限于潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎)，肝病(包括但不限于肝硬變、肝炎)，自身免疫性疾病(包括但不限于糖尿病、曱狀腺炎、重癥肌無力、硬化性膽管炎、原發(fā)性膽汁性肝硬變)，肺部疾病(包括但不限于彌漫性間質(zhì)性肺部疾病、纖維化肺泡炎、哞喘、支氣管炎、支氣管擴張癥、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征)，原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌(包括但不限于骨賦瘤、淋巴瘤、肺癌、白血病、宮頸癌和轉(zhuǎn)移性癌)，動脈粥樣硬化(例如缺血性心臟病、心肌梗塞、中風、周圍血管疾病)，下丘腦-垂體-腎上腺軸障礙，腦功能障礙(包括但不限于多發(fā)性硬化、脫髄鞘病)，角膜病，虹膜炎，虹膜睫狀體炎，葡萄膜炎，結(jié)節(jié)病，銀屑病，內(nèi)毒素(膿毒性)休克，外毒素(膿毒性)休克，感染性(純膿毒性)休克，其它感染并發(fā)癥，移植排斥，變應(yīng)性疾病，過敏性鼻炎，骨病(包括但不限于骨質(zhì)疏松癥)，異位性皮炎，瘧疾并發(fā)癥，創(chuàng)傷或局部出血導致的炎癥和傷口愈合。當以"類固醇-節(jié)省"方式使用時，糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物的聯(lián)合給藥可特別有效。術(shù)語"類固醇-節(jié)省"是指允許減少糖皮質(zhì)激素給予的量而仍然為治療或預防的疾病或病癥提供有效治療的聯(lián)合治療方法。類固醇耐藥性疾病或病癥為需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥，但是其中糖皮質(zhì)激素無效或達不到預期效果。該術(shù)語包括其中有效劑量的糖皮質(zhì)激素產(chǎn)生不能接受的副作用和/或毒性的疾病或病癥，一些類固醇耐藥性疾病或病癥可能需要大劑量的糖皮質(zhì)激素以致于它們被認為對糖皮質(zhì)激素無響應(yīng)，因此不能成功地用糖皮質(zhì)激素治療。一些類固醇耐藥性疾病或病癥可能需要大劑量的糖皮質(zhì)激素僅為獲得對所述疾病或病癥較小的作用。此外，一些患者、疾病或病癥具有對糖皮質(zhì)激素治療無響應(yīng)的癥狀，或可能對規(guī)定時間內(nèi)的糖皮質(zhì)激素治療變得不敏感。通常可表現(xiàn)出類固醇耐藥性特征的疾病實例有哞喘、慢性阻塞性肺部疾病、類風濕關(guān)節(jié)炎、腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腸炎和移植排斥。糖皮質(zhì)激素是一類類固醇激素，用于治療或預防寬范圍的疾病或病癥。合適的糖皮質(zhì)激素可合成或自然存在，并包括但不限于潑尼松龍、潑尼松、醋酸可的松、倍氯米松(beclamethasone)、氟替卡松、氫化可的松、地塞米松、甲基潑尼松龍、曲安西龍、布地奈德和倍他米松。本領(lǐng)域技術(shù)人員將能確定其它可受益于與MIF拮抗劑聯(lián)合治療的合適糖皮質(zhì)激素。在優(yōu)選的本發(fā)明的實施方案中，所用糖皮質(zhì)激素選自潑尼松、潑尼松龍、氫化可的松、氟替卡松、倍氯米松、倍他米松、甲基潑尼松龍、布地奈德、曲安西龍、地塞米松和可的;f^。最優(yōu)選所述糖皮質(zhì)激素選自潑尼松、潑尼松龍、甲基潑尼松龍、氟替卡松和倍氯米松。特別優(yōu)選倍氯米松和氟替卡松用于治療詳喘。在全身或局部炎性疾病的治療中，特別優(yōu)選使用潑尼松、潑尼松龍和甲基潑尼松龍。選擇糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物的用量，以便它們聯(lián)合對需要糖皮質(zhì)激素的疾病或病癥提供完全或部分的治療或預防。優(yōu)選式(I)化合物的量為至少部分抑制MIF細胞因子或生物活性的量。糖皮質(zhì)激素的量優(yōu)選少于不含式(I)化合物時的需用量。選擇用于治療或療法的糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物的量，以便它們聯(lián)合治療疾病或病癥時，至少部分達到所需的治療效果，或延遲其發(fā)作、或抑制其進展、或終止、或部分或完全逆轉(zhuǎn)其發(fā)作或進展。選擇用于預防疾病或病癥的糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物的量，以便它們聯(lián)合給藥時至少部分預防或延遲所述疾病或病癥的發(fā)作?？梢苑昼姟⑿r、天、周、月或年的間隔進行給藥，或者以這些周期中的任何一個內(nèi)連續(xù)給藥。式(I)化合物的合適劑量可約為0.lng/kg體重/劑量-lg/kg體重/劑量的范圍。優(yōu)選所述劑量為1ing/kg體重/劑量-lg/kg體重/劑量的范圍，例如在lmg/kg體重/劑量-lg/kg體重/劑量的范圍。在一個實施方案中，劑量在1mg/kg體重/劑量-500mg/kg體重/劑量的范圍。在另一個實施方案中，劑量在lmg/kg體重/劑量-250mg/kg體重/劑量的范圍。在還一個優(yōu)選的實施方案中，劑量在lmg/kg體重/劑量-100mg/kg體重/劑量的范圍，例如為50mg/kg體重/劑量。在還一個實施方案中，劑量在ljLig/kg體重/劑量-1mg/kg體重/劑量的范圍。糖皮質(zhì)激素的合適劑量將部分取決于給藥方式以及劑量是否以單劑量、日劑量或分劑量給予，或者以連續(xù)輸注給予。當經(jīng)口、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、損傷內(nèi)或腔內(nèi)(例如關(guān)節(jié)腔內(nèi)、鞘內(nèi)、胸內(nèi))給予時，每劑劑量一般在lmg-1000mg之間，優(yōu)選為lmg-100mg，更優(yōu)選lmg-50mg或lmg-10mg。當以單劑量、日劑量或分劑量經(jīng)局部或經(jīng)吸入給藥時，劑量一般為lng-lng、lng-lmg或lpg-ljLig。合適的劑量和給藥方案可由主治醫(yī)師或獸醫(yī)確定并取決于所需的抑制活性水平、治療的具體病癥、所述病癥的嚴重性以及患者的一般年齡、健康狀況和體重?？赏瑫r給予或依次給予所述糖皮質(zhì)激素和式(I)化合物。所述活性成分可單獨給予但優(yōu)選以藥學上可接受的組合物或各自的藥學上可接受的組合物給予。有關(guān)式(I)化合物的該類組合物的制劑為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知并在以上進行了描述。所迷組合物可含有藥學上可接受的添加劑，例如栽體、稀釋劑或賦形劑。這些添加劑包括(如果合適)所有常規(guī)溶劑、分散劑、填充劑、固體栽體、包衣材料、抗真菌劑和抗菌劑、皮膚滲透促進劑、表面活性劑、等滲劑和吸收劑等?？衫斫獗景l(fā)明組合物也可包括其它輔加的生理活性劑。優(yōu)選單位劑量組合物為那些含有如本文以上描述的日劑量或單位劑量、日亞劑量、或其合適份數(shù)的所述糖皮質(zhì)激素和/或抑制MIF細胞因子或生物活性的式(I)化合物。在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，式(I)化合物可與糖皮質(zhì)激素一起同時給予或依次給予。在該類療法中，可顯著降低需用糖皮質(zhì)激素的量，式(I)化合物，作為唯一的活性劑或者與另一種活性劑例如糖皮質(zhì)激素一起，也可用于獸用組合物。這些組合物可通過任何本領(lǐng)域已知的適當方法制備。該類組合物的實例包括適用于以下的那些組合物(a)口服給予、外用(例如獸用頓服藥，包括水性和非水性溶液或混懸劑)、片劑、大丸劑、散劑、顆粒劑、用于與飼料混合的小丸、施用于舌的糊劑；(b)腸胃外給藥，例如皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi)注射，為無菌溶液劑或混懸劑；和(c)局部施用，例如軟骨、乳骨、凝膠、洗劑等。由于它們結(jié)合或拮抗MIF的能力，式(I)化合物或鹽或其衍生物可用作實驗室或診斷或體內(nèi)成像試劑，對于該類用途，所述化合物一般將以例如放射性同位素、焚光或顯色標記等某種方式標記，或者與螯合物結(jié)合。式(I)化合物可特別用作MIF測定系統(tǒng)的部分，或者在篩選中作為對照用于確定其它抑制劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知該類篩選法(screens)并能容易地采用式(I)化合物建立該類篩選。本領(lǐng)域技術(shù)人員也將熟知用于體內(nèi)診斷成像的螯合螯合物結(jié)合分子的應(yīng)用，在再一方面，本發(fā)明提供一種式(Ill)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥("，)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>其中X為-O-、-順-或-(^2-;Y為-NH-、-O-、-S-或-CHr;Z為-C(O)-、-C(S)-或-S(O)-;R,(H選自氫、C,.3烷基、OH、SH、NH2、NHd.3烷基、F、Cl或Br;R102選自Q.2。烷基、C2.2。烯基、C02H、F、Cl、Br、CO2R105、(CH2)WR，。6、C(0)N(R,07)2、C—N)NHC,.6烷基、SC^Cw烷基、C(0)[NHCH(RK)8)C(0)]q-OR朋、NH2、C(O)糖、C(0)NH(CH2)n芳基、NHC(0)(CH2)nS雜環(huán)基、C(0)SCL6烷基、C(0)(CH2)nC02H、SC^OCwo烷基、S02NHd.io烷基；R，o3選自氫、F、Cl、Br、C卜6烷基、-(CH力具、-(CH2)nN02、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-CF3、-(CH^QCOCw烷基或-(CH2)n-SH;R!04選自氬、甲基、乙基、CH2C(R110)3、C(R110)3、-CH2=CH2、氟基、氯基或溴基；R附選自氫、d-2Q烷基、C2-2Q烯基或(CH2)tOCw烷基；R,o6選自SH、Sd—6烷基、OH、OC卜6烷基、糖、C02H、NH2、雜環(huán)基或芳基；R，07各自獨立選自氫、d.2Q烷基、C2-20烯基、(CH2)t芳基和(CHz)t雜環(huán)基；Rios為氛基酸的特征基團；R,o9為氫、C，.3烷基；Rno各自獨立選自氫和卣基；且n為0或1-3中的一個整數(shù)，q為1-5中的一個整數(shù)，w為1-6中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中各烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選4皮取代。優(yōu)選的式(m)化合物為具有式(1V)的笨并咪唑化合物(IV)其中Rioi選自氫、CH3、0H、SH、NH2、NHCH3、F、Cl或Br;R,o2選自C).2o烷基、C2.2o烯基、C02H、F、Cl、Br、CO2R105、(CH2)WR106、C(0)N(R,。7)2、C(-N)NHC,.6烷基、SOzCw烷基、C(0)[NHCH(R咖)C(0)]q-OR,。9、NH2、C(O)糖、C(0)NH(CH2)n芳基、NHC(0)(CH2)nS雜環(huán)基、C(0)SC,-6烷基、C(0)(CH2)nC02H、SO2OCw0烷基、SO2NHd.1。烷基；R，03選自氫、F、Cl、Br、Cw烷基、(CH2)nNH2、-(CH2)nN02、-(CH2VOH、-(CH2)n-CF3、(CH2)C(0)CH3或-(CH2)n-SH;R,04選自氫、甲基、乙基、CH2CF3、-CH2=CH2、氟基、氯基或溴基；Rios選自氫、Cwo烷基、C2.io烯基或(CH2)tOC，.3烷基；R賜選自SH、SC,-6烷基、OH、OCl6貌基、糖、C02H、NH2、雜環(huán)基或芳基；R,07各自獨立選自氫、C,.o烷基、Cwo烯基、(CH2)t芳基和(CH2)t雜環(huán)基；Rios為氨基酸的特征基團；R咖為氫、C,.3烷基；Riio各自獨立選自氫和卣基；且n為0或1-3中的一個整數(shù)，q為卜5中的一個整數(shù)，w為卜6中的一個整數(shù)，t為卜10中的一個整數(shù)；其中各烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選^皮取代。優(yōu)選式(IH)或式(IV)化合物為那些適用其中至少一項或一項以上下述定義的化合物Rioi為氬、F、Cl或Br;R102為C,.2o烷基、鹵素、NH2、C02H、C02C"o烷基、C(O)糖、C02(CH2)nOC卜6烷基、C(O)NHC，.,o烷基、C(0)NH(CH2)n芳基、C(0)fNHCH(R1()7)C(0)]-OH、C(0)[NHCH(Rk)7)C(0)]OC卜3烷基、NHC(0)(CH2)nS雜環(huán)基、C(0)SC卜6烷基、C(0)(CH2)nC02H、SCbOCwo烷基、S02NHCwo烷基或C(-N)NHC^烷基；R朋為氫、鹵素、C，-3烷基、(CH2)nNH2、(CH2)nN02、CH2)nOH或(CH2)nCF3;Rio4為氫、F、Cl或Br;R108為氨基酸的特征基團，優(yōu)選所述特征基團選自絲氨酸(CH20H)或苯丙氨酸(CH2Ph);n為0或1-3中的一個整數(shù)；且其中各烷或芳基任選被取代，優(yōu)選被一個或一個以上OH、羧酸或鹵基取代。優(yōu)選的式(III)化合物包括1)苯并咪唑-2-酮-5-甲酸正戊酯(pentanoate)，2)苯并咪唑-2-酮-5-甲酸-[2(l-氧-2-羥乙基)乙基]酯，3)苯并咪唑-2-酮-5-甲酸甲酯(methanoate),4)苯并咪唑-2-酮-5-甲酸乙酯(ethanoate),5)苯并咪唑-2J危代-5-甲酸戊酯，6)苯并咪唑-2-酮-5-甲酸-{3,4,5-三(乙酰狄)-6-[(乙酰狄)曱基]四氬-2H-吡喃-2-基)酯，7)5-溴-6-甲基苯并咪唑-2-酮，8)5-羥基-6-甲基苯并咪唑-2-酮，9)5-十三烷基苯并咪唑-2-酮，10)4，5，7-三溴-6-甲基苯并咪唑-2-酮，11)4，5，6，7-四溴苯并咪唑-2-酮，12)5-甲基-6-賄基苯并咪唑-2-酮，13)5-氨基-6-甲基苯并咪唑-2-酮，14)1^(6-甲基苯并咪唑-5-基)-2-嘧啶-2-基-硫基)-乙酰胺，15)苯并咪唑-2-酮-5-曱疏代-S-酸戊酯，16)5-(苯并咪唑-2(3H)-酮-6-基)-5-氣代戊酸，17)2(3H)-苯并咪唑酮-5-橫酸戊酯，18)2(3H)-苯并咪唑酮-5-(N-戊基)磺酰胺，19)2-氧代-2，3-二氫-lH-l,3-苯并咪唑-5-(N-丁基)甲亞氨酰胺(carboximidamide)，20)5-庚?；讲⑦秽?2(3H)-酮，21)3-羥基-2-U(2-氧代-2，3-二氫-lH-l,3-苯并咪唑-5-基)羰基]絲)丙酸甲酯，22)3-羥基-2-([(2-氧代-2，3-二氫-lH-l,3-苯并咪唑-5-基)羰基#^}丙酸，23)2-U(2-氧代-2，3-二氫-lH-l,3-苯并咪唑-5-基)羰基]氨基卜3-苯基丙酸甲酯，24)2-U(2-氣代-2,3-二氫-lH-l,3-苯并咪唑-5-基)羰基]氨基卜3-苯基丙酸，和25)2-氧代-2，3-二氫-lH-l，3-苯并咪唑-5-[N-(3,4-二羥基苯乙基)曱酰胺。除非上下文另外指明，否則在本說明書中對任何先有技術(shù)的？1用不視為且不應(yīng)被視為對該先有技術(shù)在澳大利亞形成共有一般技術(shù)的一部分的肯定或任何形式的意見。本領(lǐng)域那些技術(shù)人員將認識到本文描迷的發(fā)明除那些特別描迷的以外，允許作出其他的變更和修改?？衫斫獗景l(fā)明包括所有在本發(fā)明宗旨和范圍內(nèi)的該類變更和修改。本發(fā)明也包括本說明書各自或共同引用或指出的所有步驟、特征、組合物和化合物，以及任何兩個或兩個以上所述步驟或特征的任何和所有組合?，F(xiàn)在，將通過以下實施例來描述本發(fā)明，這些實施例僅為舉例說之目的，并無意限定以上描述的本發(fā)明的范圍。實施例式U〗化合物的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>該產(chǎn)物按Harvey等(12)所述方法制備，氮氣保護下，將尿素(6.00g，0.1000mol)和3,4-二氨基甲苯(1)(12.20g，0.0999mol)在1-戊酵(40mL)中的溶液劇烈攪拌并加熱回流。2小時后，停止加熱并在冷卻至室溫時，有粉紅色固體沉淀析出。將固體過濾并在沸騰的乙醇(17.98g,400mL)中重結(jié)晶，得到兩批5-甲基苯并咪唑-2-酮(2)，呈粉紅色粉末。回收的總質(zhì)量為8.21g(56。/。收率)；Rf0.40(9:1CHC13:MeOH)，mp:300-302°C,文獻3mp:297-300'C;'HNMR(CDC13/CD30D):S2.12(s,3H,CH3),6.63-6.70(m,3H,ArH);LRESI質(zhì)語w/z149(100%,MH")。實施歹'J2:苯并咪唑-2酮-5-甲酸(4)H采用Harvey等(12)所述并用于實施例1中制備5-甲基苯并咪唑-2酮(2)的方法，不同之處在于該制備中以3,4-二氨基苯曱酸(3)為原料氮氣保護下，將尿素(1.20g,0.0200mol)和3,4-二氨基苯甲酸(3)(3.04g,0.0200mol)在I-戊醇(IOmL)中的溶液劇烈攪拌并加熱回流，4小時后，停止加熱并在冷卻至室溫時，加入水(30mL)。用濃HC1調(diào)節(jié)pH為l。將得到的深色固體過濾，再用水洗滌(2x20mL)并干燥，得到3.00g(84%收率)苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)，呈黑色粉末；Rf:0.09(9:1CHC13:MeOH),0.20(4:CHC13:MeOH)，NMR(d6-DMSO):S6.98(d,1H，J7,68.1Hz,H-7)，7.45(d,1H,J4,61.2Hz，H-4),7.60(dd,1H,H-6),10.78(bs，1H，NH),10.94(bs,1H，NH);LRESI負離子質(zhì)語m々177(100%,M-H')。實施歹'J3:苯并咪哇-2-酮曱酸正戊酯(Benzimidazol-2-one-5-n-pentanoate)(5)HHCH3(GH2)40'將苯并咪唑-2酮-5-甲酸(4)(250mg，0.9070mmol)和Dowex50W-X8(H")樹脂(250mg)懸浮在1-戊醇(40mL)中，并將該混合物加熱回流42小時。將固體過濾并用甲醇洗涂(3x20mL)，然后蒸發(fā)合并的濾液至千，得到苯并咪唑-2-酮-5-甲酸正戊酯(5)(310mg，43%收率)，呈類白色粉末；R/0.63(4:1CHCl3:MeOH),mp:227-228。C，，HNMR(CDCh/CD3OD):50.88^0.92(pseudot,3HCH}),1.33-1.43(m,4H，2xCH2),I.70-1.79(m,2H,CHj),4.254.29(ps加dot,2H,CH3),7.04(d,1H,^,68.4Hz,H-7),7.44(bs,1HNH),7.55(bs，1H,卿7.66(bs，1H4),7.75(賊1Jw1.5取H-6);LRESI負離子質(zhì)譜/w々247(100%,[M-H')；HRESI正離子質(zhì)譜d3HnN203的計算值249.12391,C13H16N203的計算值C，62.97;H，6.50;N,11.29，實測值C，63.1,H，6.54,N,II.05。實施歹'j4:苯并咪唑-2-酮-5-甲酸-『2d-氯-2-羥乙基)乙基1酯(6)46將苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)(300mg,1.6853mmol)和Dowex50W-X8(IT)樹脂(300mg)懸浮在二甘醇(50mL)中，并將該混合物加熱回流44小時。將固體過濾并用甲醇洗滌(3x20mL)，然后采用真空蒸餾使合并的濾液體積減小(約2mL)。剩余物通過柱層析(Si02,用4:1CHC13:MeOH等度洗脫)純化，并蒸發(fā)至千，得到苯并咪唑-2-酮-5-甲酸-[2(1-氣-2-羥乙基)乙基]酯(6)(310mg,43%收率)，呈類白色粉末。Rf:0.63(4:1CHC&MeOH),mp:227-2280C，'HNMR(CDCI3/CD3OD):&0.88"0.92(pscudot>3H,CH3),1.33-1.43(m,4H,2xCH2),1,7(M.79(m,2H,CH2),(pscudot,2H,CH2),7.04(d1HJ7l68.4Hz,H-7),7.44(bs,1H,NH),7.55(bs,IH,卿，7.66(bs,1HH4),7.75(dd,1H,Jw1.5HzH-你LRESI負離子質(zhì)傳w々247(100°/。，[M-H]-);實施歹'j5:苯并咪唑-2-6同-5-甲酸甲酯〖benzimidazol-2-one-5-methanoate)將苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)(100mg;0,56mmol)和DCC(100mg)懸浮在曱醇中，并將該混合物加熱回流42小時。將固體過濾并用甲醇洗滌(3x3mL),然后蒸發(fā)合并的濾液至干，得到苯并咪唑-2-酮-5-曱酸甲酯(7)'收率61%。NMR(d^-DMSO):53.80(s，3H，C02CH3)，6.70(d，1H，J鄰8.1Hz，芳氫)，7.46(bs，1H，4-H芳氫)，7.61(d，1H,J鄰8.1Hz，芳氫)，10.82(bs,1H,NH)和10.99(bs,1H,NH)。負離子質(zhì)語w/z191(40%，M-l+)。實施歹'J6:將苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)(100mg)和濃H2SO4(0.25mL)懸浮在乙醇中，并將該混合物加熱回流20小時。將固體過濾并用乙醇(50mL)洗滌，然后蒸發(fā)合并的濾液至千，得到苯并咪唑-2-酮-5-甲酸乙酯(8)，收率69%。、HMR(A-DMSO):S1.20(t,3H，J=6.9Hz,CH3-)，4.26(q.2H,J=6.9Hz，OCH2-)，7.00(d,1H，J鄰8.1Hz,H-7芳氫)，7.46(d，1H,J間1.5Hz,4-H芳氫)，7.62(dd，1H，J鄰8.2Hz和J間1.5Hz，6-H芳氫)和10.88(bs,2H,NH)。負離子質(zhì)語w々205(100%,M-l+)。實施列7:3-羥基-2"『f2-氣代-2.3-二氫-lH-U-苯并咪唑-5-基)羰基l氛基l丙酸曱酯(9)HOOC一H將苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)(356mg,2.00mmol)和L-絲氨酸-甲酯鹽酸鹽(3Umg，2.00mmol)在濾過的無水DMF(6mL)中的懸浮液在冰浴中冷卻。然后按以下順序依次加入l-羥基苯并三唑一水合物(612mg,654.00mmol)、二異丙基乙胺(0.696mL,517mg,4.00mmol,Hunnig氏堿)和1，3-二環(huán)己基碳二亞胺(412mg,2.00mmol)。將該反應(yīng)物平衡(equilibrate)至室溫并攪拌41小時。將白色固體二環(huán)己脲過濾出并用DMF(5mL)進一步洗滌。然后將合并的濾液真空蒸餾，得到黑色油狀物(2.09g)。在冰冷卻下，用氯仿(20mL)研磨該油狀物，得到深色固體，將該深色固體過濾出。制備DMF濃溶液樣品(250mg),將其進行柱層析(Si02，用4:1CHC13:MeOH等度洗脫)純化，得到208mg苯并咪唑-2-酮-5-絲氨酸-M-偶合加合物(9)，呈淡棕色粉末；IV0,41(4:1CHCl3:MeOH)，lHNMR(d6-DMSO):83.63(s,3H,CO2CH3〉,3.75-3,79(pseudot2IiCH2),4.4S4.54(m，1H,CH),5,00(t,1H,OH),6.97(d,1H^,68.1取H-7),7.47(bs,1H,H4),7.54(dd^1H,Aa1.5Hz,H6),8.35(d1HJ柳7.5他,NH),10.83(bs,2H,2xNH);LRESI質(zhì)語w/z280(100。/。，MJT)。實施列8:3-羥基-2"IY2-氣代-2,3-二氫-lH-1.3-苯并咪唑-5-基)羰基l氨基l丙酸(IO)910將甲酯加合物苯并咪唑-2-酮-5-(N-(L-絲氨酸))曱酰胺(9)(100mg，0.3584mmol)懸浮在甲醇(10mL)中，并在加入1M氫氧化鈉水溶液(0.68mL,0.680mmol)時迅速溶解。用TLC監(jiān)控原料消失，在室溫下攪拌過夜后原料完全消失。再加入甲醇(30mL)使體積增加，并小心加入Dowex50W-X8(T)樹脂將pH從10調(diào)節(jié)至5。迅速將樹脂過濾拌并用甲醇進一步洗涂(4x20mL)，然后將合并的濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到苯并咪唑-2-酮-5-(N-(L-絲氨酸》甲酰胺(10)(91mg，96%收率)，呈白色粉末；幼,04(4:1CHCb:MeOH),HNMR(de-DMSO):S3.74-3.80(ro,2H,CH2),4.384.45(邁，1H,CH),6.97(d,IH,/7(68.1取H-7)，7.46(bs,1H,fr4),7.53(叫1玩1.5HzH-6),8.16(A1H,J湘7.5取NH);LRESI質(zhì)語陽離子w/z266(100%，MH"),陰離子w々264(100%,M鄰-)。實施列9:2-爪2-氯代-2.3-二氳-lH-1.3-苯并咪唑-5-基)羰基l氨基"3-苯基丙酸甲酯ni)將苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)(356mg，2.00mmol)和L-苯丙氨酸-甲酯鹽酸鹽(431mg,2.00mmol)在濾過的無水DMF(6mL)中的懸浮液在水浴中冷卻。然后按以下順序依次加入1-羥基苯并三唑一水合物(612mg,4.00mmol)、二異丙基乙胺(0.696mL,517mg，4.00mmol，Hunnig氏堿)和1>二環(huán)己基碳二亞胺(412mg，2.00mmol)。將該反應(yīng)物平衡(equilibrate)至室溫并攪拌44小時。將白色固體二環(huán)己脲過濾出并用DMF(5mL)進一步洗滌，然后將合并的濾液真空蒸餾，得到黑色油狀物(2.00g)。將該黑色油狀物進行柱層析(Si02，用6:1CHC13:MeOH等度洗脫)純化,得到1.15g主產(chǎn)物，呈棕色固體。取150mg并再將其進行柱層析(SiO2，用9:1CHC13:MeOH等度洗脫)純化，得到81mg(相當于90%總收率)苯并咪唑-2-酮-5-苯丙氨酸-M-偶合加合物(n)，呈類白色粉末；JV0.38(9:1CHCl3:McOH),mp:220-221oC;lHNMR(OWCDsOD):83.063.13(叫2H,CH2)，3.63(s,3H,C02CH3),4.S6(pseudot1H,CH),6,90(bd1H，J8,1Hz),7.03-7.05(m,2H),7.10-7,18(m，3H),728-7.3il(m,2H,J8.1取幾5Hz);LRESI質(zhì)鐠w々340(41%,MIT),225(100%)。實施列10:2-爪2-氣代-2.3-二氪-lH-U-苯并咪唑-5-基、狻基l氨基"3-苯基丙敏12)將1M氫氧化鈉(0.75mL,0.75mmol)水溶液加至溶于甲醇(7.5mL)中的苯并咪唑-2-酮-5-(N-(L-苯丙氨酸》甲酰胺的甲酯加合物(l1)(65mg,0.1917mmol)內(nèi)，并在室溫下攪拌過夜。然后再加入甲醇使體積增加至50mL，并小心加入Dowex50W-X8(H"")樹脂將pH從10調(diào)節(jié)至5。迅速將樹脂過濾掉并用甲醇(4x20mL)進一步洗滌，然后將合并的濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到油狀物。將該油狀物溶于熱乙醇中，冷卻時有白色固體從溶液中沉淀析出。將固體過濾并千燥，得到苯并咪唑-2-酮-5-(N-(L-苯丙氨酸))曱酰胺(12)(60mg,97%收率)，呈白色粉末；R/幼.03(9:1CHCl3:MeOH),mp:222-223。C,)HNMR(CD3OD):S3.13(dd,1H,13.5HzJ7.S私芐基-CH2),3.34(dd,1H,芐基-CH2),4.76(pseudot,1H,/7.5Hz,CH),7.03(M,1H,J8.1Hz),7.12-7.27(m,5H)，7.43-7.47(m,2H,/8.4Hz幾5Hz);LRESI質(zhì)譜w/z326(100。/。，Mir)。68實施列n2-氯代-2.3-二氫-lH-1.3-苯并。耒唑-5-(N-(3.4-二輕基笨乙D甲酰<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>將苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)(356mg，2.00mmol)和3，4-二羥基苯乙胺鹽酸鹽(379mg，2.00mmol)在濾過的無水DMF(6mL)中的懸浮液在水浴中冷卻，然后按以下順序依次加入1-羥基苯并三唑一水合物(612mg,4.00mmol)、二異丙基乙胺(0.696mL,517mg，4.00mmol，Hunnig氏堿)和1,3-二環(huán)己基碳二亞胺(412mg，2.00mmol)。將該反應(yīng)物平衡(叫uilibrate)至室溫并攪拌44小時。然后將白色固體二環(huán)己脲過濾出并用DMF(2x5mL)進一步洗滌。然后將合并的濾液真空蒸餾，得到深棕色油狀物(2.39g)。將該深棕色油狀物溶于甲醇(5mL)中并加入氯仿(lOmL)，溶液中有深色固體沉淀析出。將該沉淀物過濾并溶于盡可能少量的DMF中，然后經(jīng)柱層析純化(Si02，用4:1CHC13:MeOH等度洗脫)，得到604mg(96%收率)苯并咪唑-2-酮-5-多巳胺-絲-偶合加合物(13)，呈淡棕色粉末。將樣品用CHC13:MeOH為4:1的冷混合溶劑研磨，過濾并干燥，得到用于光語分析和生物測定分析的物質(zhì)。1^0.38(9:1CHCl3:MeOH)，mp:>250°C,顏色變深未熔化；lHNMR(dfiI)MSO):S2,49"2H,/1,8Hz.CH2),2.62(t2H,/78Hz.CH2),6.45(dd,1H,J6.,3.8.1,/6,2'1.8HzH-61)6.6CK6,64(m,2H,H-2'，H-5*),6.94(d，1H,/7,68.4Hz,H-7)，7.42(bs，1汰H4)，7.47(dd，1H,1.5Hz,H-4),8.33(bt1H,/5.4Hz酰胺NH),8.63(bs，1H，雜環(huán)NH)>8.73(bs，1H,雜環(huán)NH);LRESI質(zhì)語:w々,負離子312(63%,[M-H]-),(249,39%)，(134,100%);正離子314(37%，MT),(211，69%)，(130，100%)。實施列12苯并咪唑-2-硫代-5-甲酸(14)H采用Harvey等(12)所述并用于實施例2中制備苯并咪唑-2-酮-5-甲酸(4)的方法，不同之處在于該制備中使用疏脲代替尿素，氮氣保護下，將硫尿(1.52g,2mmol)和3,4-二氨基苯甲酸(3)(3.04g,2mmol)在1-戊醇(14mL)中的溶液劇烈攪拌并加熱回流。5小時后，停止加熱，并繼續(xù)攪拌12小時。加入水，并將pH調(diào)節(jié)至l。除去溶劑，然后將得到的黑色固體用冷水(10mL)研磨并過濾，得到1.94g黑色粉末。LRESI負離子質(zhì)譜w/z193(M-H')。實施例13苯并咪唑-2-疏代-5-甲酸戊酯fl5)向二胺(500mg,3.28mmol)在無水1-戊醇(50mL)中的混合物中加入硫脲(300mg，3.94mmo1)。將該混合物回流6小時，然后冷卻，過濾得到黑色固體(471mg，74%)。用1MHC1和水洗涂固體。然后將干燥的固體(200mg)懸浮在無水1-戊醇(25mL)中，并加入DowexlT樹脂(200mg)?；亓髟摶旌衔?2小時。將反應(yīng)混合物冷卻并過濾，濃縮濾液，得到題述化合物，呈黑色膠狀物(193mg，總收率52%).，HNMR(CDC13):58.41(s,1H,ArH),8.03(d,1H,ArH),7.82(d1H,ArH),4.30仏2H,-OC%CH2CH2CH2CH3),1.75(m,1H,-OCHjCftCHaCHzCHs),1.38(m,4H,,-OCH2CH2Of;CJ2CH3),0.89(叫3H，，>00120120120!20^);LRMS卿:m/z265[M+lf];C"Hi6N2O2S:264.34實施例14苯并咪唑-2-酮-5-甲酸-D.4.5-三(乙酰氣基)-6-ff乙酰氯基)甲基四氫-2H-吡喃-2-基l酯H6)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage71</formula>向所述酸(128mg，0.72mmol)的無水吡啶(20mL)溶液中加入Ag2C03(265mg,0.96mmol)和分子篩(4A，2,7g),在氮氣保護下，室溫攪拌該混合物30分鐘，將四-O-乙?；?吡喃型葡萄糖基溴(IOOmg，0.24mmol)加至該反應(yīng)混合物中，并室溫下攪拌過夜。通過celite硅藻土過濾該混合物，并濃縮濾液，得到琥珀色膠狀物。將該膠狀物溶于氯仿(5mL)，并用乙醚研磨，得到題述化合物，呈白色固體(19mg，15%),NMR(CDCl3):S8.70,8.60(2xbs,2x1H,2xNH),7.80(d1H,ArH),7.70(s,1H,ArH),7.10(s，1H,ArH),5.92(d1H，H-l,3.8Hz)，5.36(m,2H,H-3+H-2),5.23(ra,1HH4),4.33(dd,1H,H>6，/鯽11.7Hz,/詠4.6Hz),4.15(d,1HH'6,,11.8Hz),3.96(恥1H,H-5),2.07,2,05,2,0,1.59(4xs,4x3H,4xOAc);LRMS(ESI):526[M+NH4勺；CaH24NA2:508.43實施例155-溴-6-甲基苯并咪唑-2-酮(17)將按實施例1方法制備的6-甲基-1，3-二氫-苯并咪唑-2-酮(1.00g,6.76mmol)、N-溴代琥珀酰亞胺(1.30g，7.30mmol)和3-氯過苯甲酸(0.05g,0.29mmol)在四氯化碳(15ml)中的混合物加熱回流4h。冷卻至室溫時，過濾該混合物，并將固體用甲醇重結(jié)晶，得到化合物(17),呈米色固體(0.80g)。此外，收集不溶于甲醇的固體，得到另一批化合物(17)(0.50g)，合并得到的固體(1.30g,850/。)。，HNMR(d6-DMSO):82.29(s3H,CH3),6.89(s,1H^ArH),7.06(s,1&AiH),10.59(s,1H,NH),10.67(s,1H,NH).13CNMR(d6-DMSO):S22.9(CH3),111.0<CH),112.0(CH),114.8(C),128.9(C),129.7(C),130.0(C),155.7(C).ESMS:w/z225.0(M").實施例165-羥基-6-甲基苯并咪唑-2-酮H8)(18)將產(chǎn)物(16)(0.30g,1.32mmol)在10%氫氧化鈉(5ml)和乙醇(5ml)72中的溶液加熱回流1.5h。冷卻至室溫后，真空除去乙醇并過濾該混合物，得到(18)產(chǎn)物，呈白色固體(0.20g,920/0)。JHNMR(d^-DMSO):S2.28(s,3H,CH3),6.88(s，1H，ArH),7.05(s,1H,ArH)，10.61(s，1H，NH)，10.66(s,1H,NH)。實施例175-十三烷基苯并咪唑-2-酮(19)將鈉(0，05g，2.17mgatom)溶于乙醇(5ml)中，并加入6-甲基-1,3-二氫-苯并咪唑-2-酮(0.20g,1.35mmol)，然后將該溶液在室溫下攪拌1小時。真空除去溶劑并將白色固體溶于四氬呋喃(5ml)和二甲亞砜(5ml)中，并加入l-溴十二烷(0.34g,1,36mrno1)，并在室溫下攪拌所有反應(yīng)物2h。將N，N-二甲基甲酰胺(5ml)加至混合物中，并再攪拌所有混合物2h。過濾該混合物并真空蒸發(fā)濾液，得到黃色剩余物。將該剩余物置于硅膠柱上并用12.5%己烷-乙酸乙酯層析純化，得到產(chǎn)物(19),呈黃色油狀物。!HNMR(dc-DMS0)^0,84(t,3H,M,5Hz,CH3),U0(s,18H,9CH2),1.32-U7(m,2H,CH2),1.7冬1.79(m,2H,CH2),3.49(t2H,Hz,CH3),6.71-6.76(m,3H,3ArH)，0.45(bs,諷2NH).ESMS:w/;r317.3(M+l).實施例184.5.7-三溴-6-甲基笨并咪唑-2-酮(20)將6-曱基-1，3-二氫-苯并咪唑-2-酮(0.50g,3.38mmol)、乙酸鈉(1.70g,20.48mmol)在乙酸(4ml)中的混合物在70。C下加熱。IO分鐘內(nèi)，緩慢加入溴(1.60g，10.0mmol)的乙酸(5ml)溶液。然后將該混合物加熱回流lh。冷卻至室溫后，將該黃色混合物倒入冰冷卻的水(IOOml)中并過濾。固體用乙醇重結(jié)晶，得到(20)產(chǎn)物，呈米色固體(0.76&58%)。NMR(dfi-DMSO):52.56(s,3H,CH3)，11.33(s,2H,2NH).WCNMR(d6-DMS0):30.8(CH3)，102.7(Q,103.4(0,117.0(C),1292(CBr),129.3(CBr)，129.6(CBr),154,6(C).實施例194.5.6.7-四溴苯并咪唑-2-酮(21)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage74</formula>將2-氧代-2,3-二氫-lH-苯并咪唑-5-甲酸(0.3g,1.7mmol)、乙酸鈉(0.83g，10.0mmol)在乙酸(3ml)中的混合物在70°C下加熱。10分鐘內(nèi)，緩慢加入溴(0.80g，5,0mmol)的乙酸(3ml)溶液，然后將該混合物加熱回流lh。冷卻至室溫時，將該黃色混合物倒入冰冷卻的水(100ml)中并過濾。該固體用乙醇重結(jié)晶，得到(21)產(chǎn)物，呈金黃色樣固體(0.25g，330/0)。NMR(d6-DMS0):511.59(s，1H，COOH)。ESMS:w々444.8(25%)(M-l)，446.9(70%),448.9(100%)，450.9(70%),452.9(15%)。實施例205-甲基-6-硝基苯并咪唑-2-酮(22)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>(22)冰浴中，攪拌6-甲基-1,3-二氫-苯并咪唑-2-酮(0.30g,2.03mmol)在69%確酸(5ml)中的混合物2h。將該黃色混合物過濾并用水洗滌，得到(22)產(chǎn)物，呈淺黃色固體(0.39g,99.7%)。>HNMR(d6-DMSO):S2.53(s,3H,CH3),6.94(s，1H，ArH),7.57(s，1H,ArH)，10.96(s，1H，NH),11.20(s，1H，NH)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>將(22)產(chǎn)物(0.25g,1.30謹ol)和10%披他碳(0.05g)在乙醇(15ml)中的混合物常壓氬化4h。通過Celite硅藻土過濾出催化劑，并真空除去溶劑，得到(23)產(chǎn)物，呈白色固體。'HNMR(do-DMSO):S2.01(s,3H,CH3),"0(s，2H,NH2),6.29(s,1H,ArH),6.50(s,1H，ArH),9.96(s，1H,NH),10.08(s,1H,NH).ESMS:m/z164.0(M+l).實施例22N-(6-曱基苯并咪唑-5-基V2-嘧啶-2-基-硫基V乙酰胺(24)(24)將(2-嘧咬基疏基)乙酸(0.14g,0.82mmol)和1,1'-羰基二咪唑(0.24g,1.48mmol)在二嗯烷(5ml)中的溶液加熱回流lh。冷卻該溶液，加入(23)產(chǎn)物(0.10g,0.61mmol),并將該混合物加熱回流2h。當冷卻至室溫時，過濾該混合物并真空蒸發(fā)濾液。將剩余物溶于10%氫氧化鉀(20ml)中并過濾混合物，得到深棕色固體。該深棕色固體用乙睛重結(jié)晶，得到(24)產(chǎn)物，呈棕色固體。HNMR(d6-DMSO):&2.20(s,3H,CH3)，3.29(s,2H,CH2)，6.71(s，1H,ArH)，7.30(s，1H,ArH),7.93(s,1H,ArH)，8.56-8.65(m,2H，2ArH),10.33(s，1H,NH),10.35(s，1H,NH)。ESMS:附々314.2(M-l)。76將2-氧代-2，3-二氫-lH-苯并咪唑-5-甲酸(0.20g,1.12mmol)的氯化亞砜(5ml)溶液加熱回流30分鐘。真空除掉過量的氯化亞砜并將剩余物溶于吡"定(5ml)中。加入1-戊硫醇(0.23g，2.21mmol)并將所有反應(yīng)物回流2h,當冷卻至室溫時，過濾該混合物并真空蒸發(fā)濾液。將剩余物溶于10%氫氧化鉀中并用乙酸乙酯萃取，經(jīng)硫酸鈉干燥，真空除去溶劑，得到(25)產(chǎn)物，呈白色固體。,HNMR(d6-DMS0):60.86(t,JH5.9Hz,CH3),131(m,4H,2CH2)，1.60(m,2H,CH2),2.99(t,2H,>7.2Hz,CH2),7.00(d,1H,>8.1Hz,ArH),7.40(s,1H，H4),7.61(s,1H,風4Hz,ArH).實施例245-(苯并咪唑-2(3HV酮-6-基V5-氯代戊酸(26)oo(26)按Kosyakovskaya(17)方法。向戊二酸酐(3.42g，30mmol)和苯并咪唑-2(3H)-酮(4.02g,30mmol)在四氯乙烷(100ml)中的懸浮液中少量分次加入剛開啟容器內(nèi)的氯化鋁(14.0g，105mmol)。將該混合物在120'C加熱105分鐘，然后冷77卻至室溫，并倒入水(75g)和濃鹽酸(20ml)的混合物中。將該懸浮液攪拌過夜以攪碎形成的固體，減壓下，將四氯乙烷從其與水的混合物中共沸蒸餾出，剩下棕色固體懸浮在水相中。將固體過濾出，并依次用稀鹽酸和水洗滌。將該固體加至沸騰的碳酸鈉水溶液(5。/。w/v，150ml)中并過濾溶液。將脫色碳加至冷卻的濾液中，然后煮沸5分鐘。過濾除掉碳，用濃鹽酸處理濾液直至該溶液的pH為4,將沉淀出的固體攪拌過夜，過濾并在50'C/20mmHg下、在真空干燥箱中干燥至恒重(1.6g，棕色固體)。NMR表明仍然存在一些原料。按Kosyakovskaya的方法，取固體的一部分用乙酸重結(jié)晶，沒有得到任何回收產(chǎn)物。將棕色固體的一部分(300mg)溶于碳酸氫鈉水溶液(5。/。w/v,10mJ)中并過濾除去不溶物質(zhì)。用濃鹽酸酸化濾液，將形成的沉淀物過濾并在泵抽真空下干燥(30mg)。/w々(EI)實測值248.0799，理論值248.0797(Q2Hi2N204)248.0797;'H-NMR(200MHz,d6-DMS0)S11.05(brs，1H),10.89(brs,1H),7.66(dd,1H),7.47(d,1H)，7.00(d，1H)，3.00(t，2H),2.29(t，2H),1.81(p,2H)。實施例252(3HV苯并咪唑酮-5-fN-戊基)磺酰胺f27)(27)將氯磺酸(5m)冷卻至-5'C并在攪拌下滴加2(3H)-苯并咪唑酮(1g)。撤掉冷浴并將反應(yīng)物升溫至室溫反應(yīng)30分鐘>接著在95'C下再加熱30分鐘，冷卻至室溫后，將2ml反應(yīng)溶液加至正戊胺(IOml)/水(20g)中。出現(xiàn)沉淀，將該懸浮液放置過夜。過濾然后用水充分洗潦，得到760mg銀灰色板狀物。取少量用甲醇重結(jié)晶，得到題迷化合物，為幾乎無色的結(jié)晶。Mp316-318C;wi(EI)實測值283.0992,理論值(CuHnNsOsS)283.0991;，H-nmr(500MHzd6-DMSO)S11.01(bs,2H),7.38(ddIH),7.34(bt,IH)，7,28(d,IH)、7.04(4,IH),2.64(in,2H),1.35-1,29(叫2H),U7-U4(叫線0.78(t,3H);l3C-nmr(125.8MHzd6-DMSO)8155.35，132.83,132.35,129.63,119,91，108.13,106.59,42.47,28,53,28,21,21,61，13.76,實施例262(3H)-苯并咪唑酮-5-磺酸戊酯(78)(28)同樣，用正戊醇代替正戊胺將實施例25的反應(yīng)混合物樣品猝滅。使用甲醇層析純化，導致該樣品部分分解，回收題迷化合物，呈無色固體(2.1mg);加々(EI)實測必84.0S29,理論值(C:i2H，6N204S)284.0831;,H-nmr(200MHz,de-DMSO)8H.03(bs,2H),7.38(dd,IH),7.29(d,IH),7.06(d,IH),2.65(m,2H)，1.4(MJ2(m，2H),(叫4H),0.78(t3H);"C-咖(50.3MH2,d6-DMSO)15527,132.75,132.27,129.56,119.856,108.07,106.53,70.88,70.82,42.41,28.46,28.14,21.54,13.70.79實施例274-j^-3-確基笨甲亞氨酸(benzenecarboximidoate)乙酯(29)根據(jù)Pinner反應(yīng)進行從腈到脒的合成(18)。將4-氨基芐睛(0.5g，3.1mmol)溶于30ml無水乙醇中，并在冰/水浴中冷卻。通入干燥HC1使溶液飽和并保持2CTC的最高溫度。飽和1h后，溶液在室溫下攪拌過夜。將得到的沉淀物收集并過濾，得到題述產(chǎn)物0.55g(86。/。)，呈黃色粉末，該產(chǎn)物純度足可用于以下反應(yīng)而無需進一步純化。NMR(DMSO)51.46(tJ6.9他,3H,CH3),4.59(q,J6.9他,2H,OCH!)，7.17(d,J9.3Hz,1H,Ar-H),8.09(dd,J2.1,9.0Hz1H,Ar-H)8.81(d^J2.1Hz,1&Ar-H).實施例284-氨基-3-硝基-(N-丁基)苯甲亞氨酰胺fbenzenecarboximidamide)(30)將正丁胺(0.292g，4.0mmol)在使用前蒸餾，然后加至攪拌下的4-M-3-硝基苯甲亞氨酸乙酯(0.7g,3,3mmol)在15ml無水乙醇中的懸浮液中。將該混合物在室溫下攪拌12h,然后在5(TC下再攪拌1h,過濾收集得到的深黃色沉淀物并用沸騰的乙醇重結(jié)晶，收率89%，為黃色棱晶物。NMR(DMSO)S0.92(tJ7,2Hz,CH3),138(m.2H,CH，)，1.59(m,2H,C私)，3.38(m,2H，NH-CH2)，7.6(d>J9.0Hzl汰Ar-H)，7.76(dd,J1.8,8.7Hz1H,Ar-H)8.49(d,J,2.1,IH,Ar-H),,n/z(+BSI,30V)237.3(MH*).(19)實施例293.4-二^A-fN-丁基)苯甲亞氨酰胺0)enzenecarboximinamine)(31)將4-iJ^-3-確基-(N-丁基)苯曱亞氨酰胺和0.125g10%Pd/C在100ml無水甲醇中的混合物在50psi壓力下氫化約lh。將催化劑通過Celite硅藻土過濾出并用熱曱醇洗滌。蒸發(fā)濾液，得到粘性剩余物，用無水乙醚研磨并真空千燥。該產(chǎn)物用沸騰的乙醇重結(jié)晶純化，得到題迷產(chǎn)物，呈紫色粉末0.56g(97%)mp150.4'C。，HNMRpMSO)50.92ftJ7.2Hz,3H,CH3)，1.38(邁，2H，CH2)，1.59(m,2H,CH!)，3,35(m,2H，NH-CH2),6.91(dJ8.4Hz,IH,Ar-H),7.32(dJ8.4IH,Ar-H)7.43(s,IH,Ar-H).(+ESI,30V)207.1(MH*).09)實施例302-氡代-2.3-二氫-lH-U-苯并咪唑-5-(N-丁基、甲亞氨酰胺(32、(32)氮氣保護下，將尿素(0.15g,2.5n加ol)和3,4-二M-(N-丁基)苯甲亞氨酰胺(0.4g，1.9mmol)在10ml1-戊醇中的溶液劇烈攪拌并加熱回流。2h后停止加熱，并在冷卻至室溫時過濾該溶液。減壓除去濾液，得到膠質(zhì)油狀物，用無水乙醚研磨并真空干燥，得到題述產(chǎn)物0.3g(66%),mpl68。C，呈粉紅色粉末。(12)'HNMR(DMSO)50,92(t，J7.2取3HCB3),1.38(邁,2H,CH2)，1.59(nw2H，CH2),3.35(m,2H,:NH-CH2),7.11(d，Jf8.1Hz;1H,Ar-H),7.31(81H,Ar-H),7.37(d,J8.4取1H,Ar鄰.(+ESI,30V)233.1(MH".實施例31(33)按照US4695648(Pharmacia)方法，將2-羥基苯乙酸轉(zhuǎn)化為其甲基酯，然后通過同篇專利中給出的如下的Friedel-Craft改進方法轉(zhuǎn)化成題述化合物。向2-羥基苯乙酸甲酯(1000mg,6.02mmol)的硝基苯(10ml)溶液中加入庚酰氯(900mg,6.02mmol),接著加入氯化鋁(1.6g,12.0mmol，2當量)。將該溶液在60'C下加熱18h，然后用水冷卻，用鹽酸(lM,50ml)猝滅。將混合物用二氯甲烷(3x50ml)萃取并濃縮。使用乙酸乙酯/石油溶劑油(20:80)為冼脫液，進行硅膠層析純化，得到半固體狀黃色剩余物。用二氯甲烷/石油溶劑油在-I5'C重結(jié)晶，得到題述化合物，呈淡黃色固體(129mg)。Mp64-67'C;m/z(EI)實測值246.1258，理論值((:15^803)246,1256;'H-rnnr(500MHzCDC13)87.93(d,1H),7.91(s,1H),7.13(d,1H),3.77(s,2H),2.卯(t,2H),1.69(p,2H),1.2(M.4C(叫6H),0.86(t,3H);"C-nmr(125.8MHz,CDC13)S198.79,173.10,157.82,133.48,129.85,124.69，123.47,110.46,38.40,32,53，31.54,28.91,24.26,22.42，13.94.實施例32:5-戊基苯并咪唑-2-酮(34)氮氣保護下，向5-甲基-苯并咪唑-2-酮(50mg,3.378x104mol)的無水乙醇(5ml)溶液中逐滴加入新鮮制備的乙醇鈉的乙醇溶液(1M，1.01x10-3摩爾當量)。氮氣保護下，室溫攪拌該混合物3h，然后減壓除去乙醇。向該剩余物中加入無水DMSO(3ml)和l-溴丁烷(54p1,5.1xl0^mo1)，并在氮氣保護下室溫攪拌過夜，然后將該反應(yīng)混合物用水猝滅，并用1M鹽酸溶液中和，生成白色固體產(chǎn)物，該固體經(jīng)過濾收集，并使用10%甲醇/氯仿、經(jīng)制備型薄層層析(thinliquidchromatography)純化。83Rf-0.78ESMSw々205[(M+生物學試驗#戎#>^好琳^浙定在生物測定中運用人皮膚成纖維細胞的MIF-依賴性激活來研究化合物的活性。Sampey等(20)已表明細胞因子白介素1(IL-1)對環(huán)氧合酶-2(C0X-2)表達的誘導依賴于MIF的存在，即可使用特殊的抗-MIF單克隆抗體來防止這種誘導。因此IL-l-誘導COX-2表達為MIF-依賴性事件(event)。將S112人皮膚成纖維細胞在RPMI/10o/o胎牛血清(FCS)中繁殖，試驗前，將細胞以10S細胞/mL的濃度接種在RPMI/0.1。/。BSA中，持續(xù)18小時。用重組人IL-1(0.1ng/ml)處理細胞并用l-100Mm濃度的各種化合物處理。對照物只用重組人IL-1(0.1ng/ml)和溶媒(DMSO))處理。6小時后，收集細胞并經(jīng)透化流式細胞儀測定細胞內(nèi)COX-2蛋白。細胞用0.1%急普透化處理，隨后用小鼠抗-人COX-2單克隆抗體標記，并將綿羊-抗-小鼠F(ab)2片斷用熒光素(fluoroscein)異疏氛酸鹽標記。使用流式細胞器測定細胞熒光。每次解讀計數(shù)至少5000事件，每次重復進行兩次，結(jié)果以減去陰性對照物-標記的細胞熒光后的平均熒光強度(MFI)表示。從IL-1-處理的細胞(對照)MFI中減去IL-1+化合物-處理的細胞MFI來確定每種化合物的作用，并以％抑制率表示。結(jié)果如下表1所示.在每種情況中，IL-l-誘導的COX-2表達的0/。抑制率用平均值、或平均值士SEM表示，其中結(jié)果得自多重試驗。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage85</column></row><table>圖1表示在試驗3中觀測到的化合物5的劑量反應(yīng)曲線，其中加入化合物5的量為lym、lO)am、50pm和100Mm,并且按上述方法分析樣品對IL-1誘導的COX-2表達的抑制。在糖皮質(zhì)激素存在下，體外測定MIF拮抗作用。使用化合物5(50ym)(欄1)、地塞米松(10'9M)(欄2)或化合物5(50um)和地塞米松(l(T9M)的組合(欄3)重復進行上述分析IL-1誘導的COX-2表達的體外試驗。結(jié)果如表2和圖2所示。表2試驗化合物%抑制率1化合物545.12地塞米松46.83化合物5+地塞米松73.6伴〃浙定肘/尸#祐浙，#發(fā)>#歡##/￡-/滲爭付E/WT褲磁必#多詢按本文描迷的方法，使用0.1ng/ml重組人IL-1刺激在RPMI(無血清)培養(yǎng)基中培養(yǎng)的S112人皮膚成纖維細胞30分鐘，并加入或不加入IO力M地塞米松或苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)(50mm),運用蛋白質(zhì)印跡法，使用對磷酸化(激活)形式的ERK具特異性的mAb評價ERK的磷酸化(激活)。簡而言之，經(jīng)21號針反復吸出破壞細胞。在冰上培養(yǎng)IO分鐘后，以3000rpm轉(zhuǎn)速微量離心15分鐘(4匸)，除去上清液，測定蛋白質(zhì)濃度，并將溶胞產(chǎn)物在-80'C儲存。將等量的細胞蛋白質(zhì)通過10。/oSDS-聚丙烯酰胺電泳凝膠分部分離，然后轉(zhuǎn)移至聚偏二氟乙烯膜上。按照制造商的操作規(guī)程，采用直接抗磷酸-p44/42(ERK)和所有p44/42的抗體進行免疫印跡。ERK激活的強度與得到印跡的大小和光密度(暗度)成正比。所有ERK印跡起荷栽對照的作用，這樣在磷酸化ERK的變化表示磷酸化的變化而非所有ERK蛋白質(zhì)的變化。86在這些試驗中，測定了響應(yīng)IL-1(泳道2)的ERK激活，與未處理的細胞(對照)(泳道l)比較。IL-1激活的ERK激活不是由苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯(化合物5)(IL-l+M!F-a)(泳道3)或地塞米+iK未顯示)單獨抑制，而是由苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊S旨(化合物5)和地塞米松的組合(IL-l+MIF-a+DEX)(泳道4)顯著抑制。結(jié)果如圖3所示。琳^浙定3//尸#戎伊^;力辜,糸義在鼠內(nèi)毒素休克模型中研究化合物5的活性。以前表明該才莫型依賴于MIF(21)。給予可抑制MIF細胞因子或生物活性的物質(zhì)預期將導致例如IL-1或IL-6的細胞因子血清水平的降低。腹膜內(nèi)注射脂多糖(LPS)(15mg/kg)的鹽水(400pL)溶液誘發(fā)內(nèi)毒素血癥(Endotoxaemia),經(jīng)腹膜內(nèi)注射LPS前24小時、12小時和1小時，單純用鹽水溶液(對照)、鹽水溶液和LPS、或LPS和劑量為15mg/kg體重的化合物5經(jīng)腹膜內(nèi)注射給予處理小鼠。1.5小時后，使小鼠吸入C02而人道處死，然后將頸部移位。從死亡前經(jīng)心穿刺獲得的血液中取得血清，用于經(jīng)ELISA測定包括白介素1(IL-l)和白介素6(IL-6)在內(nèi)的細胞因子。先前已表明IL-1和IL-6的生成依賴于MIF(22)。用標準鹽水灌洗腹膜腔獲得巨噬細胞，并置于24孔組織培養(yǎng)板中用RPMI710。/。FCS培養(yǎng)18小時。然后分析培養(yǎng)的腹膜巨噬細胞上清液中包括IL-6在內(nèi)的細胞因子.也分析腹膜灌洗的上清液中包括IL-6在內(nèi)的細胞因子。結(jié)果如表3和圖4中提供。表3試驗血清IL-6(ng/ml)培養(yǎng)的腹膜巨噬細胞IL-6(ng/ml)腹膜灌洗液IL-6(ng/ml)對照8.813.390單純LPS261.053.4016.11LPS+化合物599.781.337.07圖5顯示得自小鼠的血清IL-1(ng/ml)的分析結(jié)果，其中LPS單獨給予或與化合物5聯(lián)合給予。在用化合物5處理的動物中觀察到血清IL-1濃度的顯著降低。在處于如上所述通過經(jīng)腹膜內(nèi)注射15mg/kgLPS誘發(fā)內(nèi)毒素休克的動物中，在各種條件下測試化合物5的作用。在每例中，以15mg/kg的劑量經(jīng)腹膜內(nèi)注射給予化合物。不管經(jīng)腹膜內(nèi)注射(IP)給予還是經(jīng)口管詞法給予，在各種給藥方案中，化合物5給予與IL-1、IL-6和TNF血清濃度下降均有關(guān)。這些數(shù)據(jù)表明式(I)化合物為體內(nèi)MIF生物或細^^因子活性的活性抑制劑。表4響應(yīng)LPS的血清細胞因子水平化合物5作用治療方案*結(jié)果對照LPSLPS+cpd抑制作用IP注射15mg/kg-24,-6,-lh血清IL-l,1.5h23,5342.4939.82Y口服管飼法15mg/kg-24，-6,誦lh血清IL-1，1.5h103.747.1YIP注射15mg/kg-24,-6,-lh血清IL-l,6h786.6170.2YIP注射15mg/kg-24,-12,-lh血清IL-1,1.5h484.8283.8YIP注射15mg/kg-18h血清IL-l,1.5h301.5105.9Y口服管飼法15mg/kg-24h血清IL-l,1.5h23.53292.0152.6Y88<table>tableseeoriginaldocumentpage89</column></row><table>性的細胞標記為活細胞。結(jié)果以具有這些標簽中的每一種的細胞百分率(％)表示。沒有式(I)化合物誘導的細胞凋亡水平高于對照，而SNP誘導出高水平的細胞凋亡?；衔?的結(jié)果如圖6所示。多個式(I)化合物的結(jié)果如圖7所示。m/f潛戎伊^^脊/Z^/定.'r勿^承^j在自身免疫性疾病和慢性炎性疾病的發(fā)生過程中，T淋巴細胞響應(yīng)的激活為關(guān)鍵事件。已知體外、體內(nèi)的T淋巴細胞活化取決于生物活性的MIF的存在。例如，已表明給予直接抗MIF的特殊單克隆抗體，可抑制體外T細胞活化的發(fā)生和體內(nèi)的皮膚遲發(fā)型超敏反應(yīng)(22)(7)。在體外，化合物對MIF細胞因子和生物活性的抑制為T細胞活化的抑制，這個證椐作為這些化合物提供的MIF生物和功能的拮抗作用的支持將為本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解。C57BL6/J雄性小鼠，7-10周大，經(jīng)皮下注射溶于20juL鹽水、用200ml弗氏完全佐劑(fca)乳化的200yg甲基化的牛血清白蛋白(mBSA)免疫。七(7)天后，通過皮下注射100ygmBSA的lOjuL鹽水溶液和100pLFCA使小鼠獲得加強免疫，再經(jīng)七(7)天后，處死小鼠，并將無菌條件下收集的脾置于Hanks緩沖鹽溶液(HBSS)中。在培養(yǎng)皿中，使用26號針和2mL注射器通過沖洗DMEM，制備單細胞懸浮液。將得到的細胞懸浮液離心5-7分鐘，然后棄去上清液。在37'c水浴中，采用含有0.579%NH4C1、0.000037%EDTA和0.1%NaHC03的溶液溶解紅細胞。然后將試管加滿DMEM并離心5-7分鐘。然后，將含有細胞的片狀沉淀物以lxl06細胞/mL的濃度再懸浮在含5。/。胎牛血清(FCS)和0.05。/。2-巰基-乙醇的DMEM中，并以lx105細胞/孔的濃度置于96-孔塑料組織培養(yǎng)板中。加入測試物質(zhì)(化合物或溶媒)并在37'C、5。/。C02培養(yǎng)箱中孵育1小時。隨后以10-50yg/ml加入特異性刺激抗原mBSA并在37t;、5%(302培養(yǎng)箱中孵育30小時。然后以0.5juCi/孔的濃度加入氚標記的^-胸腺嘧啶脫氧核苷并再醉育18小時。在Packard細胞收集器上收獲細胞，并將收獲的物質(zhì)加至750m1/管閃爍液中。在Wallace-發(fā)射計數(shù)器上讀取閃爍計數(shù)。將311-胸腺嘧啶脫氧核苷結(jié)合至DNA上是一種測定細胞增殖的方法，并由此測定抗原-特異性T細胞活化。如圖8所示，在50pg/ml的特異性敏化抗原mBSA存在下，T細胞增殖顯著提高。以遞增濃度加入化合物5，對抗原-特異性T細胞活化顯示出劑量-依賴性和統(tǒng)計學意義的抑制作用。在圖8中，*表示統(tǒng)計學意義的結(jié)果(*口<0.05,**p<0.01，***p<0.001)。使用Prism⑧軟件計算與只用溶媒處理的細胞比較的抑制T細胞活化50。/。的濃度(EC5())。在其中用50Mg/mlmBSA刺激T細胞的試驗中，化合物5的ECso為13,75yM。運用該試驗還測試了更多化合物抑制抗原-特異性T細胞活化的能力，作為抑制MIF細胞因子或生物活性的標志。表5列出了該試驗中各化合物的EC50，mBSA使用的濃度為50pg/ml或10mg/ml。表5化合物抑制T細胞活化inBSA50pg/mlmBSA〗0/tg/ml化合物EC50(mM)試驗編號2712919.151262.31110.181287.3712.191199.3612.2511510.1219.4011710,7212.91113,7515.3023313,95124.77191<table>tableseeoriginaldocumentpage92</column></row><table>琳力,/定M/F潛戎謬,:發(fā)炎^/nAy/4付i^《;^^U^rDT坊如上所述，皮膚遲發(fā)型超敏反應(yīng)(DTH)是一種T細胞活化的體內(nèi)試驗。已表明DTH反應(yīng)依賴于生物活性的MIF的存在，如通過使用單克隆抗-MIF抗體抑制這些反應(yīng)所顯示的那樣(22)。抑制MIF細胞因子或生物活性的化合物可期望抑制體內(nèi)DTH反應(yīng)的發(fā)生，通過發(fā)生抗原-誘導的關(guān)節(jié)炎誘導小鼠DTH反應(yīng)(參見下面)。C57BL6/J雄性小鼠，7-10周大，在0天，通過皮下注射用200yL弗氏完全佐劑(FCA)乳化的200Mg甲基化的BSA(mBSA)至脅皮膚內(nèi)免疫。以15mg/kg體重的劑量每24小時1次，經(jīng)腹膜內(nèi)注射給予化合物5處理小鼠，七天后，經(jīng)皮注射至尾底部使小鼠獲得100mgmBSA和100plfca,再經(jīng)14天后，將30jugmBSA的10pL滅菌鹽水溶液經(jīng)關(guān)節(jié)腔注射至左膝誘發(fā)關(guān)節(jié)炎，而右膝只注射無菌鹽水。按以下方法誘導DTH反應(yīng)在該試驗結(jié)束前24小時，經(jīng)皮注射50mgmBSA的20yL鹽水溶液至一只后爪墊，測試這些小鼠。將相同體積的鹽水注射至對側(cè)爪墊作為對照。24小時后，使用測微計測量爪墊肺脹。以注射mBSA和鹽水的爪墊之間的皮膚腫脹差異來記錄DTH,并以爪墊厚度的變化(厶mm)表示。皮膚厚度的減少與對MIF生物或細胞因子活性的抑制作用一致。如圖9所示，與用溶媒處理的小鼠相比，在用化合物5處理的小鼠中觀察到統(tǒng)計學意義的皮趺DTH反應(yīng)下降(p<0.05)。伴力浙定M/F潛戎伊席戎j^iit付^伊乂類風濕性關(guān)節(jié)炎是一種常見、嚴重、慢性影響滑膜關(guān)節(jié)的炎性疾病>其病因未知。類風濕性關(guān)節(jié)炎是一種最常見的自身免疫性疾病或慢性炎性疾病，可視作其他少見的自身免疫性疾病和慢性炎性疾病的典型。在幾種類風濕性關(guān)節(jié)炎動物模型中，通過其中單克隆抗-MIF抗體的MIF拮抗作用對疾病產(chǎn)生顯著抑制作用的研究，已證實MIF為重要的遞質(zhì)(23)、(24)、(8)。在顯示MIF為重要因素的類風濕性關(guān)節(jié)炎動物模型中包括鼠抗原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎(8)。抑制MIF細胞因子或生物活性的化合物可預期在體內(nèi)抑制鼠抗原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎的發(fā)展。在小鼠中用抗原-誘發(fā)關(guān)節(jié)炎。C57BL6/J雄性小鼠，7-10周大，在0天，皮下注射用200ml弗氏完全佐劑(fca)乳化的200yg甲基化的BSA(mBSA)至脅皮膚內(nèi)免疫。以15mg/kg體重的劑量每24小時1次，經(jīng)腹膜內(nèi)注射給予化合物5處理小鼠。七天后，經(jīng)皮注射至尾底部使小鼠獲得100MgmBSA和100mLFCA。再經(jīng)14天后，將30mgmBSA的10mL滅菌鹽水溶液經(jīng)關(guān)節(jié)腔注射至左膝誘發(fā)關(guān)節(jié)炎，而右膝只注射滅菌鹽水。首次免疫后28天，組織學分析關(guān)節(jié)炎。將膝關(guān)節(jié)切開并固定在10%緩沖福爾馬林溶液中7天。固定的組織用15。/o乙二胺四乙酸(EDTA)脫鈣3周，脫水并埋入石蠟中。將膝關(guān)節(jié)的矢狀切面(5Mm)用番紅-0染色并用固綠/鐵蘇木精復染，組織切片通過4個參數(shù)從0至3計分,貨^^乂定義為包括血管掛結(jié)構(gòu)在內(nèi)的滑膜多細胞結(jié)構(gòu)，^仏腔滲^鍵確定為分散或聚集在關(guān)節(jié)腔內(nèi)的白細胞。我#7^#定義為番紅-0染色的關(guān)節(jié)軟骨損失(O-完全染色的軟骨，3-完全沒有染色的軟骨)。談定義為血管翳侵入軟骨下骨組織的范圍和深度。根據(jù)這4個參數(shù)的和可產(chǎn)生總分(最高為12)。用化合物5處理小鼠的結(jié)果如圖IO所示。在圖10a中，溶媒和化合物處理動物的總關(guān)節(jié)炎計分以圖表示?？梢娍傟P(guān)節(jié)炎計分為統(tǒng)計學意義的降低(p-0.0024)。在圖10b中，關(guān)節(jié)炎的各參數(shù)以圖表示?？稍谟没衔?處理的動物中發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)炎的所有單個參數(shù)的嚴重度呈現(xiàn)統(tǒng)計學意義的降低。在鼠抗原誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎模型中還測試了式(I)的其他化合物。表6提供了化合物13的測試結(jié)果。化合物13也對鼠抗原誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎的嚴重度產(chǎn)生抑制作用。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage94</column></row><table>琳^浙定3//尸#^《席.*弟糸r浙應(yīng)承化由于MIF在T細胞活化中很重要，能抑制MIF細胞因子或生物活性的化合物可預期對T細胞反應(yīng)性產(chǎn)生抑制作用。體內(nèi)給予該類化合物可預期對T細胞反應(yīng)性產(chǎn)生影響，即便T細胞已切除不再暴露在所述化合物中，即T細胞在體內(nèi)用MIF拮抗劑化合物處理后可離體研究。為測定離體抗原-特異性T細胞活化，將關(guān)節(jié)炎肢或脾的引流淋巴結(jié)從具有用鼠抗原誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎的小鼠中切除，所迷關(guān)節(jié)炎如上用mBSA在首次免疫后第28天誘發(fā)產(chǎn)生，并在含有5。/。FCS和0.05%2-巰基乙醇的DMEM中制備單細胞懸浮液。在或沒有mBSA(O.l，1.0，10Mg/mL)存在下，一式三份以1x105細胞/200ML的濃度在96-孔板中孵育48小時(37。C，5%C02)。在最后18小時中，通過測定力-胸腺嘧啶脫氧核苷結(jié)合測定T細胞增殖響應(yīng)。將細胞收獲并用Wallac1409液體閃爍計數(shù)器測定其放射性結(jié)合至DNA上。計算每三份培養(yǎng)物的平均值。每次試驗包含至少3只單獨的動物并且得到的結(jié)果以平均值士SEM(每次試驗的動物組)表示。采用從溶媒-處理的動物細胞的力-胸腺嗜咬脫氧核苷結(jié)合中減去化合物-處理的動物細胞的^-胸腺嘧啶脫氧核苷結(jié)合的結(jié)果來計算T細胞增殖的抑制率％,圖Ua圖示體內(nèi)用化合物5處理淋巴結(jié)T細胞對其離體響應(yīng)mBSA的激活的作用。正如所見，同用溶^f某處理的小鼠的細胞相比，體內(nèi)用化合物5處理的小鼠細胞(實心條)對mBSA顯示出下降的增殖反應(yīng)。典型地至少三次獨立的試驗，每次一式三份并且每份包括幾只單獨的動物。圖lib圖示體內(nèi)用化合物5處理脾結(jié)T細胞對其離體響應(yīng)mBSA激活的作用。正如所見，與用溶媒質(zhì)處理的小鼠細胞相比，體內(nèi)用化合物13處理的小鼠細胞(虛線條)對mBSA顯示出下降的增殖反應(yīng)，正如從表7所見，體內(nèi)給予化合物13和化合物5，各自對離體脾T細胞增殖產(chǎn)生抑制作用。表7經(jīng)體內(nèi)用化合物處理后對離體脾T細胞活化的抑制化合物%抑制率[mBSA(pg/mL)試驗編號1328%10130%103533%13伴/A浙定M/F潛祐#岸；^JNM/F譯爭發(fā)炎4卑舉浙^^J^f本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知MIF能誘導包括源自類風濕性關(guān)節(jié)炎患者的細胞的多種類型細胞的增殖(25)。也已經(jīng)證實單克隆抗-MIF抗體的MIF拮抗作用可在體外抑制細胞增殖，能夠抑制MIF細胞因子或生物功能的化合物可預期抑制MIF的增殖作用。采用MIF-誘導人皮膚成纖維細胞增殖，經(jīng)生物測定法研究化合物5的活性。將S112人皮膚成纖維細胞在RPMI/10。/。胎牛血清(FCS)中95繁殖。試驗前，將細胞以10s細胞/mL的濃度接種在RPMI/0."/。BSA中，連續(xù)18小時.在O時間點，用RPMI/10。/()FCS替換培養(yǎng)基并進行預處理。使用重組人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)50ng/ml和/或以與MIF濃度摩爾比為1-1000的化合物5處理細胞，在時間點30小時后，使用1MCi/孔的SH-胸腺嘧啶脫氧核苷脈沖(pulsed)作用于細胞。在試驗開始后的48小時時間點，用半自動細胞收集器收獲細胞。通過液體閃爍計數(shù)來測定放射性結(jié)合DNA，結(jié)果以SH-胸腺嗜夂脫氧核苷結(jié)合表示。圖12圖示化合物5(0.013mm)對用重組人MIF處理的Sl12細胞增殖的影響.觀察到顯著并有統(tǒng)計學意義的抑制結(jié)果。提供的數(shù)據(jù)在4個獨立試驗中具有代表性。在表8中，化合物5的抑制作用以與rhMIF-處理的細胞增殖比較的增殖的％抑制率來表示。<table>tableseeoriginaldocumentpage96</column></row><table>舉/,浙定M/F潛戎斧岸；一步/iT處^"效浙^ife^厲f付,i已知MIF是對例如細菌內(nèi)毒素脂多糖(LPS)的毒素的先天免疫反應(yīng)的參入者。如上所示，MIF拮抗劑可在體內(nèi)抑制內(nèi)毒素-誘導的巨噬細胞細胞因子的產(chǎn)生。能夠抑制MIF細胞因子或生物功能的化合物可預期抑制響應(yīng)LPS的巨噬細胞產(chǎn)生的細胞因子產(chǎn)生的激活。將2ml巰基乙酸經(jīng)腹膜內(nèi)注射至C57BL6/J雄性小鼠。五(5)天后，通過灌洗用3ml冷Hanks緩沖鹽溶液麻醉的小鼠的腹膜，收集腹膜巨噬細胞。將幾只小鼠的細胞混合，洗滌并再懸浮在用5。/。FCS補料的DMEM中。將細胞以lxl05細胞/孔的濃度置于96孔塑料組織培養(yǎng)板上。在37。C、5。/oCCb培養(yǎng)箱中，用化合物或溶々某處理細胞1小時。然后將細胞用LPS(10-100ngZml)或重組人千擾素-Y(10單位/mL)處理并孵育24小時。24小時后，仔細從各孔中移取50ML上清液并轉(zhuǎn)移至ELISA板上，采用ELISA測定白介素(IL-l)或白介素(IL-6)。與只用溶媒處理的細胞相比，抑制LPS-或干擾素-y-誘導的細胞因子釋》欠500/。的化合物濃度(ECso)采用Prism⑧軟件計算。表9列出了該試驗中測試的兩個化合物的EC50。表9抑制鼠腹膜巨噬細胞細胞因子的產(chǎn)生.<table>tableseeoriginaldocumentpage97</column></row><table>舉/A浙定M/F潛戎《席押賴度鍵^虔浙應(yīng)一真必it斧放MIF能誘導或促進各種促炎和/或破壞性分子的表達和釋放。在巨噬細胞的情況，除促進細胞因子釋放外，MIF還能促進一氣化氮(NO)的釋放(26)。能抑制MIF細胞因子或生物功能的化合物可預期抑制巨噬細胞激活NO產(chǎn)生。將2ml巰基乙酸酯經(jīng)腹膜內(nèi)注射至C57BL6/J雄性小鼠。五(5)天后，通過灌洗用3ml冷Hanks緩沖鹽溶液麻醉的小鼠的腹膜，收集腹膜巨噬細胞。將幾只小鼠的細胞混合，洗滌并再懸浮在用5。/。FCS補料的DMEM中。將細胞以lx105細胞/孔的濃度置于96孔塑料組織培養(yǎng)板上。在37'C、5。/。C02培養(yǎng)箱中，用化合物或溶^(某處理細胞1小時。然后將細胞用LPS(10ng/ml)或重組人干擾素-Y(10單位/mL)處理并孵育24小時。24小時后，仔細從各孔中移取50ML上清液并轉(zhuǎn)移至ELISA板上。運用Greiss測定法測定培養(yǎng)物上清液中的亞硝酸鹽濃度(27)。結(jié)果以與用溶媒-處理的細胞比較的用化合物-處理的細胞培養(yǎng)物上清液中的硝酸鹽濃度的抑制率％表示。表10顯示了該試驗中測試的兩個化合物的結(jié)果。在用化合物處理的細胞的上清液中觀察到顯著并有統(tǒng)計學意義的硝酸鹽濃度降低。表10鼠腹膜巨噬細胞一氣化氮產(chǎn)生的抑制化合物濃度(PM)%硝酸鹽濃度抑制率(以對照計算)P值1125fiM3.1+/-1.2%50jiM28.1+/-1.0%P<0.001,M65.5+/-0.8%PO.00125jiM11.1+/-1.3%PO.00119.7+/-1.6%PO細lOO(iM28.6+/-1.5%PO.001MfF潛戎^W:^浙人類^C濕遂^，義凈4T成斧舉勿顛賴已知MIF在與疾病狀態(tài)有關(guān)的多種類型細胞的增殖中為刺激物或參與者。例如，對于本國居民的人類風濕性關(guān)節(jié)炎的滑膜損傷細胞，即成纖維-樣滑膜細胞(FLS),就是這種情況。Lacey等(26)報道了重組MIF誘導FLS增殖，而且單克隆抗-MIF抗體能抑制另外的細胞因子白介素1(IL-1)誘導的FLS的增殖。能抑制MIF細胞因子或生物活性的化合物將預期能抑制IL-l-誘導的人類風濕性關(guān)節(jié)炎FLS的增殖。成纖維-樣滑膜細胞(FLS)得自經(jīng)過關(guān)節(jié)置換手術(shù)的類風濕性關(guān)節(jié)炎(RA)患者的滑膜并按照Lacey等(26)的方法制備。將FLS采用酶消化法分離出并按前述方法培養(yǎng)在RPMI/10。/o胎牛血清(FCS)中'用2.4mg/mlDispase(II級，5U/mg)、1mg/ml膠原酶(II型)和DNase(I型)消化切碎的滑膜組織，得到單細胞懸浮液。在5%(302、37。'C濕潤培養(yǎng)箱中，F(xiàn)LS在10cm培養(yǎng)板的以K)o/oFCS補料的RPMI中繁殖。超過第3代的細胞中，CD45-超過99%。使用第4代和第9代之間的細胞。所用的細胞來自4個單獨的人RA供體的FLS。為確定化合物5對FLS增殖的影響，通過[3司胸腺嘧咬脫氧核苷結(jié)合測定DNA合成。將FLS以0.5x105細胞/孔的濃度《*妄種在24孔組織培養(yǎng)板的RPMI/10%FCS中過夜。同時通過將FLS培養(yǎng)在RPMI/0.1%牛血清白蛋白中24小時使細胞生長。用人重組EL-lB(O.lng/ml)和化合物5(50pM)或溶媒處理FLS54小時，接著用lnCi/mL力-胸腺嘧啶脫氣核苷脈沖處理細胞18小時，每次測定按說明使用一式兩份或一式三份培養(yǎng)物。FLS使用Trypsin-EDTA分離，使用細胞收集器收獲，并使用Wallac1409液體閃爍計數(shù)器測定放射性結(jié)合DNA。結(jié)果以對照(未處理)纟田胞增殖％表示，并計算四次實驗的平均值±SEM,如表11所示，IL-1統(tǒng)計學顯著地誘導人類風濕性關(guān)節(jié)炎FLS的增殖。溶媒對增殖無影響，但化合物5處理與對IL-1-誘導的FLS增殖的顯著并有統(tǒng)計學意義地抑制有關(guān)。這些數(shù)據(jù)與為MIF細胞因子和生物活性抑制劑的化合物5相符.表11<table>tableseeoriginaldocumentpage99</column></row><table>參考文獻(l)David，J，體外遲發(fā)型超敏反應(yīng)其由淋巴細胞-抗原相互作用開j成6々無纟田胞物質(zhì)介導。尸rocee力'"gso/f/ie7Va"o"a/v4cacfemyo/園，1966;56:72-77。(2)Weiser，WY，TemplePA,Witek-GianottiJS，RemoldHG，ClarkSC，DavisJR,分子克隆編碼人巨噬細胞移動抑制因子的cDNA，尸roceed/力gso//4cacfew^o/SdewcejWS>1,1989;86:7522-7526。(3)LeechM，MetzCN，SmithM，WeedonH，HoldsworthSR，BucalaR,等。在類風濕性關(guān)節(jié)炎中的巨噬細胞移動抑制因子(MIF):促炎功能及糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)的證據(jù)。力W/n'to&朋ewwatow1999;42:薩-1608。(4)MorandEF，BucalaR，LeechM.巨噬細胞移動抑制因子(MIF):出現(xiàn)的一個類風濕性關(guān)節(jié)炎的治療耙。/lr^ntoc&朋eww加'縮2003;48:291-299。(5)CalandraT，BernhagenJ，MetzCN，SpiegelLA,BacherM，DonnellyT,等。作為糖皮質(zhì)激素-誘導的細胞因子產(chǎn)生調(diào)制器的MIF。淑wre簡；377:68-71。(6)DonnellySC,HaslettC，ReidPT,GrantIS,WallaceWAH，MetzCN,I.在急性呼吸窘迫綜合征中的巨噬細胞移動抑制因子的調(diào)節(jié)作用。Wcm^eMe力'c/'"e1997;3:320-323。(7)BacherM，MetzCN，CalandraT,MayerK,ChesneyJ，LohoffM,等。巨噬細胞移動抑制因子在T-細胞活化中的重要調(diào)節(jié)作用。尸wceecZ/"gso/M^/owa//4cacfewyo/Sc/e/icej1996;3:7849-7854。(8)S加tosLL,HallP,MetzCN,BucalaR,Mor加dEF.巨噬細胞移動抑制因子(MIF)在鼠抗原-誘發(fā)的關(guān)節(jié)炎中的作用與糖皮質(zhì)激素相互作用。C//w./畫,/.2001;123:309-314。(9)LeechM,SantosLL，MetzC，HoldsworthSR,BucalaR，MorandEF.在大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎中內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素對巨噬細胞移動抑制因子(MIF)的4空制。^W/m'tecfe朋ewwatow2000;43:827-833。(10)BucalaR.重新發(fā)現(xiàn)的MIF:免疫反應(yīng)的細胞因子、垂體激素1和糖皮質(zhì)激素-誘導的調(diào)制器。/^S五及/1996;10:1607-1613。(11)SabroeI,PeaseJE,WilliamsTJ.哮喘和MIF:先天Thl和Th2。C//"￡^力〃ergy2000;30(9):1194-6。(12)Harvey,I.W.;McFarlane,M.D.;Moody,D.J.;Smith,D.M./.C/iew.Soc.尸eA/"7>ww.，1988,1，681-689。(13)Swantek幾，CobbMH，G印pertTD.需要JunN-末端激酶/應(yīng)力激活蛋白激酶(JNK/SAPK)用于oc-腫瘤壞死因子(TNF)翻譯的脂多糖刺激糖皮質(zhì)激素通過阻斷JNK/SAPK抑制TNF翻譯。M/ecw/w朋dCe〃w/w編ogy1997;17:6274-6282。(14)RogatskyI,LoganSK,GarabedianMJ.c-JunN-末端激酶對糖皮質(zhì)激素受體轉(zhuǎn)錄激活的拮抗作用。尸wc.A^/.爿cac/.Sc/."A1998;95:2050-2055。(15)KasselO，SanconoA,KratzschmarJ,KreftB,StassenM,CatoAC.糖皮質(zhì)激素通過增強MKP-1表達和減少MKP-1降解來抑制MAP激酶。￡w6oc/2001;20(24):7108-16。(16)Mitchell,RA,MetzCN,PengT,BucalaR.巨噬細胞移動抑制因子(MIF)持續(xù)激活的促細胞分裂劑激活蛋白激酶(MAPK)和胞質(zhì)磷脂酶A2。在細胞增殖和糖皮質(zhì)激素作用中的調(diào)節(jié)作用。Jowwo/o/C/je/w加Ay,1999;274:18100-18106。(17)M.N.Kosyakovskaya，A.V.Gordeeva，Ch.Sh.Kadyrov，C/jew.Co附，"浙1972,8,351)(18)Berg,S.S.;Newbery,G.CTew.Soc.，1946,642.(19)Hopkins,K.T,;Wilson,D.W.;Bender,B，C.;McCurdy,D.R.;Hall,丄E.Med.CZiew.，1998,41,3872-3878。(20)SampeyAV,HallP，BucalaR，MorandEF.類風濕性滑膜細胞的巨嗟細胞移動抑制因子(MIF)激活。/JW/w加&朋ewwcr&附1999;44:S283。(21)Bernhagen，J,CalandraT,MitchellRA，MartinSB，TraceyKJ，VoelterW,等。MIF為垂體來源的加劇致命性內(nèi)毒素血癥的細胞因子。1993;365:756-759。(22)BozzaM,SatoskarAB，LinG，LuB，HumblesAA，GerardC,等，移動抑制因子基因的靶破壞揭示其在膿毒病中的關(guān)鍵作用。J0WW7/o/Ex/7er/we"to/Mefi/c/"e1999;189:341-346。(23)BernhagenJ,BacherM,Cal加draT,MetzCN,DotySB,DonnellyT，等。巨噬細胞移動抑制因子在結(jié)核菌素遲發(fā)型超敏反應(yīng)中的重要作用。Jowwa/0/Ex/7enwe"^r/Me^c/"e1996;183:277-282。(24)MikulowskaA,MetzCN，BucalaR，HolmdahlR.在II型膠原蛋白-誘發(fā)的小鼠關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機理中涉及巨噬細胞移動抑制因子。Journaloflmmunology1997;158:5514-5517。(25)LeechM,MetzCN，SantosLL,PengT,HoldsworthSR，BucalaR,等。在大鼠佐劑關(guān)節(jié)炎的發(fā)展中涉及巨噬細胞移動抑制因子。爿W/w"s&尺/iewwa^w1998;41:910-917。(26)LaceyDC,SampeyAV，MitchellR，BucalaR,SantosL,LeechM，等。通過巨噬細胞移動抑制因子(MIF)控制成纖維-樣滑膜細胞增殖。&2003;48:103-9。(27)JuttnerS,BERNHAGENJ，MetzCN,RollinghoffM,BucalaR,GessnerA.主要通過巨噬細胞移動抑制因子誘導殺死利什曼蟲(Leishmania):依靠反應(yīng)性氮中間體和內(nèi)源性TNF。J./mwwo/.1998;161:2383-2390。(28)SantosLL，MorandEF，HoldsworthSR.通過一氣化氮合酶抑制劑N-亞氨基乙基-L-鳥氨酸可誘導一氧化氮抑制佐劑關(guān)節(jié)炎和滑膜巨謹細胞。/"y/awwa"ort1997;21:299-311,權(quán)利要求1.式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥在制備用于治療、預防或診斷與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的藥物中的用途，其中X選自-O-、-S-、-C(R5)(R5′)-或-N(R6)-；Y選自-N(R7)-、-O-、-S-或-C(R7)2-；Z選自-C(O)-、-C(S)-、-C(＝NR6)-、-S(O)-或-S(O)2-；R1選自氫、C1-3烷基、(CR5R5′)nOR7、(CR5R5′)nSR7、(CR5R5′)nN(R6)2和(CR5R5′)n鹵基；R2選自C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、(CR12R12′)mC(O)R8、(CR12R12′)mC(S)R8、(CR12R12′)mS(O)R8、(CR12R12′)mS(O)2R8、(CR12R12′)mOR9、(CR12R12′)mSR9、(CR12R12′)mNR10R11、(CR12R12′)mC(＝NR24)R22和(CR12R12′)mR13；R3選自氫、C1-C6烷基、(CR16R16′)PNR14R15、(CR16R16′)POR17、(CR16R16′)PSR17、(CR16R16′)P鹵基、(CR16R16′)PNO2、(CR16R16′)nC(O)R28、(CR16R16′)nC(＝NR24)R22、(CR16R16′)nS(O)R17、(CR16R16′)nS(O)2R17、(CR16R16′)nS(O)3R17和(CR16R16′)PC(R18)3；R4選自氫、鹵素、C1-C3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基和(CR12R12′)nC(R18)3；R5和R5′各自獨立選自氫、C1-C3烷基、鹵基、OR7、SR7和N(R6)2；R6各自獨立選自氫、C1-C3烷基和OR7；R7各自獨立選自氫和C1-C3烷基；R8選自氫、C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、OR19、SR19、N(R20)2、[NH-CH(R21)-C(O)]q-OR29、[糖]q和(CR12R12′)tR13；R9選自氫、C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、(CR12R12′)tR13、C(O)R23、CO2R23、C(S)R23、C(S)OR23、S(O)R23、S(O)2R23、[C(O)CH(R21)NH]q-R23和[糖]q；R10和R11獨立選自氫、C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、(CR12R12′)mR13、C(O)R23、C(S)R23、S(O)R23、S(O)2R23、[C(O)CH(R21)NH]q-R23、-[糖]q和NHC(＝NR25)-NH2；R12和R12′各自獨立選自氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、OR24、SR24、鹵基、N(R24)2、CO2R24、CN、NO2、芳基或雜環(huán)基；R13選自O(shè)R25、SR25、鹵基、N(R25)2、C(O)R31、CN、C(R18)3、芳基或雜環(huán)基；R14和R15獨立選自氫、C1-C3烷基、OR17、(CR16R16′)pC(R18)3；R16和R16′各自獨立選自氫、C1-C3烷基、鹵基、OR17、SR17和N(R17)2；R17各自獨立選自氫和C1-C3烷基；R18各自獨立選自氫和鹵基；R19和各R20獨立選自氫、C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、(CR26R26′)tR27；R21為氨基酸的特征基團；R22選自C1-C6烷基、NH2、NH(C1-6烷基)、N(C1-6烷基)2、OR29或SR29；R23選自氫、C1-C20烷基、C2-C20烯基、C2-C20炔基、芳基(CR26R26′)tR27；R24各自獨立選自氫和C1-C6烷基；R25各自獨立選自氫、C1-C6烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、芳基和雜環(huán)基；R26和R26′各自獨立選自氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、OR29、SR29、鹵基、N(R29)2、CO2R29、CN、NO2、芳基和雜環(huán)基；R27選自氫、OR30、SR30、鹵基、N(R30)2、CO2R30、芳基和雜環(huán)基；R28選自氫、C1-6烷基、OR29、SR29或N(R29)2；R29各自獨立選自氫和C1-C3烷基；R30各自獨立選自氫、C1-C3烷基、芳基和雜環(huán)基；R31選自C1-3烷基、OH、C1-3烷氧基、芳基、芳氧基、雜環(huán)基和雜環(huán)基氧基；n為0或1-3中的一個整數(shù)；m為0或1-20中的一個整數(shù)；p為0或1-6中的一個整數(shù)；q為1-5中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。2.權(quán)利要求1的用途，其中X選自-N(H)-、-N(Cw烷基)-、-N(OH)-、N(OC卜3烷基)-、-O、-S-、-CH2-、-CH(OH)-、-CH(NH2)-、-CH(Cw烷基)-、-CH(卣基)-、-CH(SH)-、-CH(OCw烷基)、-CH(SCw烷基)-,3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的用途，其中Y選自-NH-、-O-、-S-、-1^((:1.3烷基)-或-(^2-。45.權(quán)利要求1-4中任一項的用途，其中R,選自氬、CH3、OH、SH、NH2、NHCH3、F、Cl或Br。6.權(quán)利要求1-5中任一項的用途，其中R2選自C,.20烷基、Cwo烯基、(CRuRu.)m雜環(huán)基、(CR2R,2')m芳基、(CR12R12.)m鹵基、(CRi2Rl2')mOH、(CR2Rl2')mOCi-20坑基、(CR12R2)mOC2-20烯基、(CRuRu')mOC(0)C,.2Q烷基、(CRl2R12.)mOC(0)C2.2o浠基、(CR,2R,2,)mOC(0)芳基、(CR12R12.)mO[C(0)CH(R21)NHr-H、(CR,2R)2')mO[糖]r、(CR12R12.)mNH2(CR,2R,2'VNHC).2。烷基、(CRuR，2)mN(d.2o烷基)2、(CRuRu，)mNHCwo烯基、(CR12R12.)mN(C2.20烯基)2、(CR,2R,2')mN(d.20烷基)(C2-2()烯基)、(CR)2R,2.)mNHC(0)d.20烷基、(CR,2R，2.)mNHC(O)C2.20烯基、(CRuRi2.)mNHC(0)芳基、(CR12R12.)mNH[C(0)CH(R21)NH〗r-H、(CR12R12.)mNH-^]r、(CR12Ri2')mSO3H、(CRi2Rl2')mS03C-20坑基、(CR12Ri2')mSO3C2-20烯基、(CR，2R12.)mC(0)C,.2。烷基、(CRl2R12')mC(0)C2.2。烯基、(CR12R12.)mC02H、(CR12R12')mCO2C1-20坑基、(CR12R12')mCO2C2-20彿基、(CR,2R,2')mC(0)NHd.2。烷基、(CR,2R,2')mC(0)N(C,.20烷基)2、(CRuRt2')mC(0)NHCwo烯基、(CRuRu')mC(O)N(C2.20烯基)2、(CRuR,2')mC(0)N(C,.2Q烷基)(C2-2Q彿基)、(CR12R'2.)mC(0)[NHCH(R21)C(0)Ir-OH、(CR12R12.)mC(0)[NHCH(R21)C(0)r-OCH3、(CR12R12')mC(0)^]r、(CR,2R,2')mSQ-6烷基、C(-N)NHC卜6烷基；其中Ri2和R,2各自獨立選自氫、c,-6烷基、(:2.6烯基、(:2.6炔基、鹵素、OH、羥基Cw烷基、OC卜6烷基、C02H、C02d.3烷基、NH2、NHCw烷基、N(Cw烷基》、CN、N02、芳基或雜環(huán)基；1121為氨基酸的特征基團，m為0或l-20中的一個整數(shù)且r為1-5中的一個整數(shù)。7.權(quán)利要求1-6中任一項的用途，其中R3選自氫、鹵素、CrC6烷基、-(CH2)nNH2、-(CH2)nN02、-(CH2)n-OH、-(CH2)n-CF3或畫(CH2)n-SH，其中n的定義同權(quán)利要求1。8.權(quán)利要求l-7中任一項的用途，其中R4選自氫、曱基、乙基、-CH2=CH2、-CH2CF3、氟基、H&或溴基，9.權(quán)利要求1-8中任一項的用途，其中所述疾病或病癥選自自身免疫性疾病、實體瘤或造血系腫瘤和慢性或急性炎性疾病。10.權(quán)利要求1-8中任一項的用途，其中所迷疾病或病癥選自風濕性疾病、脊推關(guān)節(jié)病、結(jié)晶性關(guān)節(jié)病、萊姆病、結(jié)締組織病、血管炎、腎小球腎炎、間質(zhì)性腎炎、腸炎、消化性潰瘍、胃炎、食管炎、肝病、自身免疫性疾病、肺部疾病、原發(fā)性癌或轉(zhuǎn)移性癌、動脈粥樣硬化、下丘腦-垂體-腎上腺軸障礙、腦功能障礙、角膜病、虹膜炎、虹膜睫狀體炎、白內(nèi)障、葡萄膜炎、結(jié)節(jié)病、以變形血管發(fā)生為特征的疾病、子宮內(nèi)膜功能性疾病、銀屑病、內(nèi)毒素(膿毒性)休克、外毒素(膿毒性)休克、感染性(純膿毒性)休克、其它感染并發(fā)癥、盆腔炎、移植排斥、變應(yīng)性疾病、過敏性鼻炎、骨病、異位性皮炎、UV(B)-誘發(fā)的皮膚細胞活化、癡疾并發(fā)癥、糖尿病、疼痛、創(chuàng)傷或局部出血導致的炎癥、睪九機能障礙和傷口愈合。11.權(quán)利要求1-8中任一項的用途，其中所迷疾病或病癥選自類風濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)強硬性脊推炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎、賴特爾綜合征、痛風、假痛風、焦磷酸鉀沉積病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、全身性硬皮病、多肌炎、皮肌炎、斯耶格倫綜合征、結(jié)節(jié)性多動脈炎、韋格納肉芽腫病、丘-施綜合征、潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎、肝硬變、肝炎、糖尿病、甲狀腺炎、重癥肌無力、硬化性膽管炎、原發(fā)性膽汁性肝硬變、彌漫性間質(zhì)性肺部疾病、塵肺病、纖維化肺泡炎、哞喘、支氣管炎、支氣管擴張癥、慢性阻塞性肺部疾病、成人呼吸窘迫綜合征、結(jié)腸癌、淋巴瘤、肺癌、黑色素瘤、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、白血病、宮頸癌和轉(zhuǎn)移性癌、缺血性心臟病、心肌梗塞、中風、周圍血管疾病、阿爾茨海默病、多發(fā)性硬化、糖尿病性視網(wǎng)膜病、分娩、子宮內(nèi)膜異位、骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、曬傷和皮膚癌。12.權(quán)利要求l-ll中任一項的用途，所迷用途包括在制備所述藥物中使用第二種治療藥物。13.權(quán)利要求12的用途，其中所述第二種治療藥物為糖皮質(zhì)激素。14.糖皮質(zhì)激素和權(quán)利要求1-8中任一項所定義的式(I)化合物或其藥學上可^:受的鹽或前藥在制備用于預防或治療需用糖皮質(zhì)激素治療的疾病或病癥的藥物中的用途，15.糖皮質(zhì)激素和權(quán)利要求1-8中任一項所定義的式(I)化合物或其藥學上可^妄受的鹽或前藥在制備用于治療哺乳動物類固醇耐藥性疾病的藥物中的用途。16.—種藥用組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1-8中任一項所定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥和藥學上可接受的栽體、稀釋劑或賦形劑。17.權(quán)利要求16的藥用組合物，所述組合物還包含糖皮質(zhì)激素。18.—種式(III)化合物或其藥學上可接受的鹽或前藥其中X為-O-或-NH-;Y為-NH-;Z為-C(O)-;R101選自氫或Br;R啦選自C02R1()5、C(0)N(R1()7)2、C(-N)NHC卜6烷基、C(0)[NHCH(R咖)C(0)]q-OR,09、C(O)糖、NHC(0)(CH2)nS雜環(huán)基、0(0)5(:，.6烷基和S02NHCw。烷基；R朋選自氪、F、Cl、Br、C,-6烷基、NH2、N02、OH、CF3、C(0)d.3烷基或SH;Ru)4選自氫或溴基；Rios選自C2.2o烯基或(CH2)tOCi.3烷基；Rn)7各自獨立選自氫、Cw。烷基、C2.2o烯基、(CH2)t芳基和(CH2)t雜環(huán)基；Rios為M酸的特征基團；R咖為氫、C，.3烷基；n為0或1-3中的一個整數(shù)，q為1-5中的一個整數(shù)；t為1-10中的一個整數(shù)；其中各烷基、烯基、炔基、芳基和雜環(huán)基可任選被取代。19.化合物苯并咪唑-2-酮-5-甲酸戊酯。全文摘要本發(fā)明涉及治療分子及方法-1。本發(fā)明提供抑制巨噬細胞移動抑制因子(MIF)的細胞因子或生物活性的方法，所述方法包括用本文定義的式(I)化合物與MIF接觸。本發(fā)明也涉及治療與MIF細胞因子或生物活性有關(guān)的疾病或病癥的方法，所述方法包括單獨或作為聯(lián)合療法的部分給予式(I)化合物。本發(fā)明也提供新的雜環(huán)化合物。文檔編號C07C45/46GK101675927SQ200910173489公開日2010年3月24日申請日期2003年6月6日優(yōu)先權(quán)日2002年6月7日發(fā)明者B·丹勒,E·F·莫蘭德,M·N·伊斯坎德申請人:科蒂科股份有限公司