專利名稱：三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡及其生產(chǎn)和使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡，屬于免疫學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
三聚氰胺(英文名=Melamine),是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物，重要的氮雜 環(huán)有機(jī)化工原料。由于食品和飼料工業(yè)蛋白質(zhì)含量測(cè)試方法的缺陷，三聚氰胺也常被不法 商人用作食品添加劑，以提升食品檢測(cè)中的蛋白質(zhì)含量指標(biāo)，因此三聚氰胺也被人稱為“蛋 白精”。蛋白質(zhì)主要由氨基酸組成。蛋白質(zhì)平均含氮量為16%左右，而三聚氰胺的含氮量 為66%左右。常用的蛋白質(zhì)測(cè)試方法“凱氏定氮法”是通過(guò)測(cè)出含氮量乘以6. 25來(lái)估算蛋 白質(zhì)含量，因此，添加三聚氰胺會(huì)使得食品的蛋白質(zhì)測(cè)試含量虛高，從而使劣質(zhì)食品和飼料 在檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)只做粗蛋白質(zhì)簡(jiǎn)易測(cè)試時(shí)蒙混過(guò)關(guān)。有人估算在植物蛋白粉和飼料中使測(cè)試蛋 白質(zhì)含量增加一個(gè)百分點(diǎn)，用三聚氰胺的花費(fèi)只有真實(shí)蛋白原料的1/5。三聚氰胺作為一種 白色結(jié)晶粉末，沒(méi)有什么氣味和味道，所以摻雜后不易被發(fā)現(xiàn)。三聚氰胺進(jìn)入人體后，發(fā)生取代反應(yīng)(水解)，生成三聚氰酸，三聚氰酸和三聚氰 胺形成大的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，動(dòng)物長(zhǎng)期攝入三聚氰胺會(huì)造成生殖、泌尿系統(tǒng)的損害，膀胱、腎部結(jié) 石，并可進(jìn)一步誘發(fā)膀胱癌。2008年9月，中國(guó)爆發(fā)三鹿嬰幼兒奶粉受污染事件，導(dǎo)致食用 了受污染奶粉的嬰幼兒產(chǎn)生腎結(jié)石病癥，其原因正是奶粉中含有三聚氰胺。三聚氰胺是小分子化合物，常用的檢測(cè)方法有高效液相色譜分析法(HPLC)和氣 相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析法(GC/MS)或液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析法(LC/MS)。這些方法普遍 存在著儀器昂貴，方法復(fù)雜，操作煩瑣，試劑消耗量大的局限性。20世紀(jì)80年代興起的膠體 金免疫層析檢測(cè)，基于免疫學(xué)檢測(cè)原理，操作簡(jiǎn)單快捷、結(jié)果清晰易于判斷、無(wú)需復(fù)雜的實(shí) 驗(yàn)技能和設(shè)備，特別適于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。而國(guó)內(nèi)外尚無(wú)該技術(shù)監(jiān)控三聚氰胺的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上訴問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡，該快速診斷卡檢測(cè)快 速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供該膠體金檢測(cè)卡的應(yīng)用。上述三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡的制備包括以下步驟(1)三聚氰胺半抗原的合成(2)三聚氰胺免疫抗原的合成；(3)三聚氰胺單克隆抗體的制備；(4)膠體金顆粒的制備；(5)膠體金標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體；(6)樣品墊的制備，該墊附置一段膠體金標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體的膜；(7)三聚氰胺包被抗原的合成；
(8)三聚氰胺固相硝酸纖維素膜的制備，該膜包被一條含三聚氰胺包被抗原的檢 測(cè)帶和一條包被羊抗鼠IgG的質(zhì)控帶；(9)樣品墊的處理選擇適當(dāng)?shù)姆忾]試劑、表面活性劑和(或)非離子型去污劑單 獨(dú)或以適當(dāng)比例組合后均勻浸于玻璃纖維素膜，室溫干燥備用；(10)組裝三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡，該檢測(cè)卡用PVB作為背襯，在PVC襯板的中部疊 置硝酸纖維素膜，兩端分別疊置吸水墊和樣品墊，硝酸纖維素膜和吸水墊、樣品墊相搭連。所述的半抗原具有式(I)所示結(jié)構(gòu)
權(quán)利要求
1.三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡，其特征在于其包括試紙條和外殼兩部分，試紙條置于外 殼內(nèi)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的三聚氰胺抗體膠體金檢測(cè)卡，其特征在于所述的試紙條用 PVB作為背襯，在PVC襯板的中部疊置硝酸纖維素膜，兩端分別疊置吸水墊和樣品墊，硝酸 纖維素膜和吸水墊、樣品墊相搭連，在樣品區(qū)附置一段含有三聚氰胺單克隆抗體的膜，在硝 酸纖維素膜上有一條含三聚氰胺抗原的檢測(cè)帶和一條含羊抗兔IgG的質(zhì)控帶。
3.三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡的生產(chǎn)方法，其特征在于由下列過(guò)程與步驟組成(1)三聚氰胺免疫半抗原的合成(2)三聚氰胺免疫抗原的合成；(3)三聚氰胺單克隆抗體的制備；(4)膠體金顆粒的制備；(5)膠體金標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體；(6)樣品墊的制備，該墊附置一段膠體金標(biāo)記三聚氰胺單克隆抗體的膜；(7)三聚氰胺包被抗原的合成；(8)三聚氰胺固相硝酸纖維素膜的制備，該膜包被一條含三聚氰胺包被抗原的檢測(cè)帶 和一條包被羊抗鼠IgG的質(zhì)控帶；(9)樣品墊的處理選擇適當(dāng)?shù)姆忾]試劑、表面活性劑和(或)非離子型去污劑單獨(dú)或 以適當(dāng)比例組合后均勻浸于玻璃纖維素膜，室溫干燥備用；(10)組裝三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡，該檢測(cè)卡用PVB作為背襯，在PVC襯板的中部疊置硝 酸纖維素膜，兩端分別疊置吸水墊和樣品墊，硝酸纖維素膜和吸水墊、樣品墊相搭連。
4.根據(jù)權(quán)利要求4所述的三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的半抗 原具有式(I)所示結(jié)構(gòu)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的免疫 抗原具有式(II)所示結(jié)構(gòu)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的包被 抗原具有式(III)所示結(jié)構(gòu)。
7.三聚氰胺膠體金檢測(cè)卡的使用方法，其特征在于將30μ 1待檢液加入到加樣孔中， 并充分吹打混勻，放置5-10分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種三聚氰胺體金檢測(cè)卡及其生產(chǎn)和使用方法，屬于免疫學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。該快速診斷卡包括外殼和試紙條，其特征在于所述外殼殼體開(kāi)有加樣孔和觀察窗，所述試紙條安放于外殼內(nèi)，在PVC襯板的中部疊置硝酸纖維素膜，兩端分別疊置吸水墊和樣品墊，硝酸纖維素膜和吸水墊、樣品墊相搭連，在樣品區(qū)附置一段含有三聚氰胺單克隆抗體免疫膠體金復(fù)合物的膜，在硝酸纖維素膜上有一條含三聚氰胺包被抗原的檢測(cè)帶和一條含羊抗鼠IgG的質(zhì)控帶。本發(fā)明是一種快速、準(zhǔn)確、靈敏的診斷卡，無(wú)需專門(mén)儀器，操作簡(jiǎn)單，能滿足食品安全、畜牧業(yè)、檢測(cè)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)要求。
文檔編號(hào)C07D251/70GK102004152SQ20091018977
公開(kāi)日2011年4月6日 申請(qǐng)日期2009年8月28日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月28日
發(fā)明者張世偉, 李細(xì)清, 譚攀, 鐘松清 申請(qǐng)人:深圳市三方圓生物科技有限公司