專利名稱：：拉格唑拉(Largazole)及其類似物的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥生化領(lǐng)域，具體涉及一種Largazole和它的類似物的合成方法。
背景技術(shù)：
：Largazole是組蛋白去乙?；敢种苿軌蛴行б种颇[瘤細(xì)胞的增殖。組蛋白去乙酰化酶抑制劑是一類新型靶向抗癌物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)基因表達、抑制增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞分化以及腫瘤細(xì)胞凋亡等作用。臨床前研究表明Largazole能夠選擇性殺死腫瘤細(xì)胞。Largazole是由美國佛羅里達大學(xué)的Dr.HendrikLuesch研究團隊由藍綠菌中分離出來.但由于來源菌種培養(yǎng)不易，研究材料不足而不能進行大規(guī)模生理活性研究。這促使人們希望能夠通過簡短高效的合成這類化合物，以便應(yīng)用于更進一步的臨床研究。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種合成Largazole及其類似物的全新方法。該方法簡便、合成路線短、經(jīng)濟。本發(fā)明是從L-蘋果酸二甲酯為原料經(jīng)過14步反應(yīng)合成了目標(biāo)化合物L(fēng)argazole。反應(yīng)式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>鋰；3)在有機溶劑中和ot:5(rc下，化合物3、三甲硅基乙醇、縮合劑和有機堿反應(yīng)5-10小時得化合物4;其中，化合物3、三甲硅基乙醇，縮合劑和有機堿的摩爾比為i.o:i.o5:i.o5:i.o5;建議反應(yīng)在惰性氣體保護下進行，如氮氣保護下；4)在有機溶劑中和-40°COt:下，化合物4和樟腦磺酸反應(yīng)3-10小時得化合物5;其中，化合物4和樟腦磺酸的摩爾比為1.0:0.050.5;5)在有機溶劑中和_78°COt:下，化合物5和氧化劑反應(yīng)1-5小時得化合物6;其中，化合物5和氧化劑的摩爾比為1.0:1.05;6)在有機溶劑中和-78"C(TC下，化合物6、化合物7和有機堿如NaHMDS反應(yīng)l-5小時得化合物8;其中，化合物6、化合物7和有機堿的摩爾比為1.0:1.02.0:1.01.8;建議反應(yīng)在惰性氣體保護下進行，如氮氣保護下；7)在有機溶劑中和_40°COt:下，化合物8和樟腦磺酸反應(yīng)3-10小時得化合物9;其中，化合物8和樟腦磺酸的摩爾比為1.0:0.050.5;8)在有機溶劑中和ot:室溫下，化合物9、硫代辛酸、三苯基磷和偶氮二羧酸酯反應(yīng)1-5小時得化合物10;其中，化合物9、硫代辛酸、三苯基磷和偶氮二羧酸酯的摩爾比為i.o:i.o3.o:i.o5.o:i.o5.o;建議反應(yīng)在惰性氣體保護下進行，如氮氣保護下；9)在有機溶劑中和-4(TC(TC下，化合物10和樟腦磺酸反應(yīng)3-12小時得化合物11;其中，化合物IO和樟腦磺酸的摩爾比為1.0:0.051.0;10)在有機溶劑中和Ot:室溫下，化合物11、Fmoc保護的氨基酸、縮合劑和有機堿反應(yīng)5-20小時得化合物12;其中，化合物11、Fmoc保護的氨基酸、縮合劑和有機堿的摩爾比為i.o:i.o5:i.o5:i.o5。建議反應(yīng)在惰性氣體保護下進行，如氮氣保護下；11)在有機溶劑中，化合物12和有機堿如哌啶反應(yīng)0.5-5小時得化合物13;其中，化合物12和有機堿的摩爾比為1.0:0.15;12)在有機溶劑中和Ot:室溫下，化合物13、化合物14、縮合劑和有機堿反應(yīng)5-20小時得化合物15;其中，化合物3三甲硅基乙醇，縮合劑和有機堿的摩爾比為i.o:i.o2:i.o5:i.o5;13)在有機溶劑中和Ot:室溫下，化合物15和酸反應(yīng)1-5小時得化合物16;其中，化合物15和酸的摩爾比為1.0:1.010;14)在有機溶劑中和Ot:室溫下，化合物16、縮合劑如HATU和有機堿反應(yīng)5-20小時得化合物17;其中，化合物16、縮合劑和有機堿的摩爾比為i.o:i.o20:i.o20。建議反應(yīng)在惰性氣體保護下進行，如氮氣保護下；上述有機溶劑可以是特征是所述的有機溶劑是二氯甲烷、四氫呋喃、DMF、乙二醇二甲醚、1，2-二氯乙烷、DMP、甲醇、乙醇、石油醚、正己烷或乙醚等。本發(fā)明是一種方法簡便，合成路線短及經(jīng)濟適用的合成方法。本發(fā)明的化合物具有高的抗癌活性及選擇性。具體實施例方式通過下述實施例將有助于理解本發(fā)明，但并不限制本發(fā)明的內(nèi)容。實施例19H9TBSCI，imidazole,TBS(、DMFOCH3-^OTBS121)氮氣保護下，化合物l(5g，37.3mmol，在有機溶劑中和0。C室溫下，化合物L(fēng)-蘋果酸甲酯和硼烷的二甲硫醚溶液反應(yīng)l-3小時獲得化合物1)DMAP(4-二甲氨基吡啶0.5g，0.41mmol)和咪唑(8.6g，126.3mmo1)溶于100ml二氯甲烷中配成溶液。在冰浴下，緩慢滴加TBDMSCl(叔丁基二甲基氯硅烷，11.2g，74.6mmo1)的二氯甲烷(10ml)溶液。滴完后，室溫攪拌過夜。反應(yīng)液依次用水，飽和食鹽水洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑，硅膠柱層析得到無色油狀物9.2g(化合物2)，產(chǎn)率89%。2)TRQr>OTBSOmi5UWKOH,THF/H20，OCH3化合物2(5.43g，15.Ommol)溶于75ml四氫呋喃中。在冰浴下，緩慢滴加K0H(0.84g，15.0mmo1)的水(5ml)溶液。滴完后，室溫攪拌l小時。反應(yīng)液用稀鹽酸調(diào)值為3，然后加入乙酸乙酯100ml。有機相依次用水，飽和食鹽水洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑，硅膠柱層析得到無色油狀物4.96g(化合物3)，產(chǎn)率95%。3)TBSOOTBSO9DCC,TMSEOH'OH「v、OTMSEOTBS4室溫攪拌，氮氣保護下，化合物3(3.48g，10.0mmol)DCC(縮合劑N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺0.5g，lOmmol)禾PTMSEOH(8.三甲硅基乙醇6g，lOmmol)溶于100ml二氯甲烷中配成溶液。在冰浴下，緩慢滴加TBDMSCl(ll.2g，74.6,1)的二氯甲烷(10ml)溶液。滴完后，室溫攪拌過夜。反應(yīng)液依次用水，飽和食鹽水洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑，硅膠柱層析得到無色油狀物9.2g(化合物4)，產(chǎn)率89%。[a]23D:-31.7(cl，CHC13).丄HNMR(400MHz，CDC13):S4.17—4.12(m，3H)，3.58(dd，J=9.6，5.2Hz，1H)，3.41(dd，J=9.6，7.2Hz，1H)，2.61(dd，J=14.8，4.4Hz，1H)，2.33(dd，J=14.8，8.OHz，1H)，0.98(dd，J=9.6，7.2Hz，2H)，0.89(s，9H)，0.86(s，9H)，0.05(s，12H)，0.04(s，9H)卯m.13CNMR(lOOMHz，CDC13):S172.1，70.4，67.0，62.4，40.4，25.9，25.8，18.3，18.0，17.3，-4.4，-5.0，-5.4ppm.MS(EI，m/z):449(M++1).匪S(ESI):calcdforC21H48Na04Si,[MNa+]471.2758，found471.2753。84)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>化合物4(9.2g，20.5mmo1)溶解在50ml50%的甲醇/二氯甲烷溶液中，冷卻至-l(TC下，將0.96g樟腦磺酸溶解在0.5ml甲醇中并加入到反應(yīng)瓶中，保持-l(TC，攪拌8小時。用5ml飽和碳酸氫鈉淬滅反應(yīng)，蒸干有機溶劑，二氯甲烷提取3次，水洗，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(10%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物5.5g(化合物5)，產(chǎn)率82X。[a]23D:-23.8(c0.6，CHC13).力畫R(400MHz，CDC13):S4.22-4.17(m，3H)，3.61(m，1H)，3.55(m，1H)，2.53(dd，J=6.2，2.2Hz，2H)，1.92(dd，J=7.2，5.6，OH)，0.99(t，J=4.0Hz，2H)，0.89(s，9H)，0.10(s，3H)，0.08(s，3H)，0.04(s，9H)ppm.13C腿(100MHz，CDC13):S171.3，68.6，66.2，62.9，38.1，25.9，18.3，17.3，-1.52，-5.42卯m.MS(EI，m/z):335(M++1).HRMS(ESI):calcdforC15H34Na04Si2[MNa+]357.1893，found357.1896。5.)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>-78。C下，將3ml干燥匿S0緩慢加入到1.8ml重蒸草酰氯的二氯甲烷溶液中，攪拌30分鐘后，將溶解有化合物5(3.5g，10.5mmo1)的二氯甲烷溶液緩慢加入反應(yīng)瓶。攪拌1小時后，緩慢滴加12ml干燥三乙胺，升至室溫，反應(yīng)一小時。飽和氯化銨淬滅，飽和食鹽水洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，得到淡黃色油狀物3.32g(化合物6)，產(chǎn)率95%。6.)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>氮氣保護下，化合物6(3.5g，10.5mmo1)和化合物7(4.02g，10.5mmo1)溶于四氫呋喃50ml中，冷卻至-78°C，緩慢滴力口2MNaHMDS的THF溶液(5.4ml，10.8,1)，反應(yīng)1小時，飽和氯化銨淬滅，乙酸乙酯提取三次，污水硫酸鈉干燥有機層，濃縮，柱層析純化(5%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物3.68g(化合物8)，產(chǎn)率72%。[a]23D:-22.8(c0.5，CHC13)丄HNMR(400MHz，CDC13):S5.63(ddd，J=15.6，6.8，6.8Hz，1H)，5.49(dd，J=15.6，6.8Hz，1H)，4.54(dd，J=12.4，7.2Hz，1H)，4.14(m，2H)，3.63(t，J=6.8Hz，2H)，2.49(dd，J=14.4，8.4Hz，1H)，2.38(dd，J=14.4，4.8Hz，1H)，2.22(dt，J=13.4，6.8Hz，2H)，0.98(m，2H)，0.89(s，9H)，0.85(s，9H)，0.07—0.03(m，21H)ppm.13CNMR(100MHz，CDC13):S171.3，134.0，127.7，126.4(minor)，70.7，66.1，62.8，62.6，62.5，44.2，31.5，26.0，25.8，25.7，18.3，18.0，17.3，_1.5，-4.2，-4.3，-5.0，_5.3ppm.MS(EI，m/z):489(M++1).HRMS(ESI):calcdforC24H5304Si3[MH+]489.3253，found489.3258。7)QTBSQCS^lfc5I37QTBSQ8I9I3.68g化合物8溶解在45ml二氯甲烷溶液中，冷卻至_10°C，將0.36g樟腦磺酸溶解在5ml甲醇中并加入到反應(yīng)瓶中，攪拌8小時。用5ml飽和碳酸氫鈉淬滅反應(yīng)，蒸干有機溶劑，水洗，二氯甲烷提取3次，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(15%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物1.95g，(化合物9)產(chǎn)率70%。[a]23D=一22.0(c0.63，CHC13).丄HNMR(400MHz，CDC13):S5.58(m，2H)，4.54(dd，J=12.4，6.6Hz，1H)，4.13(m，2H)，3.65(m，2H)，2.51(dd，J=14.4，7.2Hz，1H)，2.41(dd，J=14.4，5.8Hz，1H)，2.27(dt，J=12.4，6.0Hz，2H)，0.97(m，2H)，0.88(s，9H)，0.05(s，15H)ppm.13CNMR(100MHz，CDC13):S171.3，135.6，126.9，70.4，62.6，61.7，44.1，35.5，25.8，25.7，18.1，17.3，-1.5，-4.3，-5.O卯m.MS(EI，m/z):375(M++1).HRMS(ESI):calcdforC18H38Na04Si2[MNa+]397.2206，found397.2206.8.)OTBSOi…，一0OTBSOHO-^^^^^^OZ^0'-"/vv/YvDPPA,THF9冰浴，氮氣保護下，將DIAD(l.66ml)滴加到三苯基膦(2.16g，8.23mmol)的二氯甲烷溶液中，攪拌15分鐘，將化合物9(1.95g，5.20mmol)，硫代正辛酸(1.32g，8.23,1)依次加入反應(yīng)瓶，室溫攪拌過夜。依次用飽和碳酸氫鈉溶液，飽和食鹽水洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(10%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物2g(化合物10)，產(chǎn)率74%。.[a]23D:-ll.2(c0.30，CHC13)丄HNMR(400MHz,CDC13):S5.62(m，1H)，5.51(dd，J=15.6，6.4Hz，1H)，4.54(dd，J=13.6，6.0Hz，1H)，4.14(m，2H)，2.90(t，J=7.2Hz，2H)，2.54-2.46(m，3H)，2.38(dd，J=14.4，5.2Hz，1H)，2.27(dd，J=14.0，7.2Hz，2H)，1.65(t，J=7.2Hz，2H)，1.30-1.27(m，8H)，0.99(m，2H)，0.96-0.89(12H)，0.07-0.03(m，15H)ppm.13C腿(100MHz，CDC13):S199.5，199.3(minor)，171.3，171.0(minor)，134.3，128.4，127.3(minor)，70.4，65.9(minor)，62.6，44.2，43.9(minor)，32.0，31.6，28.9，28.3，27.9(minor)，25.8，25.7，22.6，18.0，17.3，14.0，-1.5，-4.2，-4.4，-5.Oppm.MS(EI，m/z):517(M++1).HRMS(ESI):calcdforC26H52Na04SSi2[MNa+]539.3023，found539.3027。9.)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>化合物10(2g，3.87mmol)溶解在50%的甲醇/二氯甲烷(20ml)溶液中，冷卻至0°C，將0.91g樟腦磺酸溶解在lml甲醇中并加入到反應(yīng)瓶中，攪拌過夜。用5ml飽和碳酸氫鈉淬滅反應(yīng)，蒸干有機溶劑，水洗，二氯甲烷提取3次，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(20%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物1.12g(化合物11)，產(chǎn)率71%。[a]23D:-lO.l(cO.95，CHC13).'HNMR(400MHz，CDC13):S5.71(m，1H)，5.54(dd，J=15.2，6.4Hz，1H)，4.8and4.49(m，1H)，4.20(m，2H)，2.91(t，J=7.6Hz，2H)，2.56-2.45(m，4H)，2.30(dd，J=14.0，7.0Hz，2H)，1.65(m，2H)，1.29-1.26(m，8H)，1.00(m，2H)，0.88(t，J=7.2Hz，3H)，0.03(s，9H)卯m,MS(EI，m/z):403(M++1).HRMS(ESI):calcdforC2CIH38Na04SSi[MNa+]425.2158，found425.2159。11.)OOHO^/Si-llFmoc-Val-OHEDC,HOAt,冰浴，氮氣保護下化合物11(0.2g，0.5,1)和Fmoc-val-OH(O.87g，2.67,1)溶于10ml無水二氯甲烷中，依次加入EDCI(l-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimideHydrochlorideO.47g，)、DMAP(4-二甲氨基妣啶10mg)，DIEA(N，N-二異丙基乙胺0.34ml)，室溫反應(yīng)一小時，依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(15%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物0.31g(化合物12)，產(chǎn)率84%。[a]23D:-13.5(c0.52，CHC13).'HNMR(400MHz,CDC13):S7.76(d，J=7.6Hz，2H)，7.60(m，2H)，7.40(dd，J=7.4Hz，2H)，7.31(dd，J=7.4Hz，2H)，5.84and5.76(m，1H)，5.67(dd，J=13.6，7.2Hz，1H)，5.53(dd，J=15.2，7.2Hz，1H)，5.32(d，J=8.8Hz，1H)，4.39(t，J=6.8Hz，2H)，4.29(dd，J=9.2，4.4Hz，1H)，4.23(t，J=7.2，1H)，4.17(t，J=8.4Hz，2H)，2.88(t，J=7.2Hz，2H)，2.71(dd，J=15.6，7.6Hz，1H)，2.59(dd，J=15.6，5.6Hz，1H)，2.52(t，J=7.2Hz，2H)，2.29(dt，J=13.6，6.8Hz，2H)，2.18(m，1H)，1.65(m，2H)，1.30-1.27(m，8H)，0.97-0.83(m，11H)，0.03(s，9H)ppm.13C畫R(lOOMHz，11CDC13):S199.2，170.9，169.5，156.2，144.0，141.3，133.3，128.4，127.7，127.6，127.1，125.1，120.0，71.8，67.1，63.1，58.9，47.1，44.1，39.7，32.2，31.6，31.4，29.7，28.9，28.1，25.6，23.0，22.6，20.1，19.0，17.4，14.0，-1.30ppm.MS(EI，m/z):723(M++1).匪S(ESI):calcdforC4。H57NNa07SSi[MNa+]746.3523，found746.3521。12)化合物12(0.31g，0.52,1)加入到10%哌啶/二氯甲烷混合溶液(10ml)中，室溫攪拌四小時。蒸干溶劑，快速柱層析(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到粗產(chǎn)物。氮氣保護下，將上一步粗產(chǎn)物和化合物14(0.201g，0.56mmol)加入10ml干燥二氯甲烷中，再依次加入0.072gH0At(l-羥基-7-偶氮苯并三氮唑)，0.2gHATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯)，0.076mlDIEA，室溫攪拌過夜。依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物化合物150.175g，產(chǎn)率53X。[a]23D:-36.l(cl.2，CHC13).力NMR(400MHz，CDC13):S7.99(s，1H)，7.20(d，J=8.8Hz，1H)，5.84and5.76(m，1H)，5.67(dd，J=13.7，7.2Hz，1H)，5.53(dd，J=15.6，7.2Hz，1H)，4.62(d，J=6.0Hz，2H)，4.49(dd，J=9.2，4.7Hz，1H)，4.17(t，J=8.4Hz，2H)，3.78(d，J=11.6Hz，1H)，3.33(d，J=11.6Hz，1H)，2.88(t，J=7.2Hz，2H)，2.72(dd，J=15.6，7.6Hz，1H)，2.61(dd，J=15.6，5.6Hz，1H)，2.52(t，J=7.6Hz，2H)，2.28(dt，J=13.6，6.8Hz，2H)，2.15(m，1H)，1.65(m，2H)，1.63(s，3H)，1.48(s，9H)，1.30-1.20(m，8H)，0.98(m，2H)，0.96—0.85(m，9H)，0.03(s，9H)ppm.13CNMR(100MHz，CDC13):S199.3，174.5，170.4，169.5，163.2，155.6，148.8，133.2，128.4，121.4，85.2，80.5，71.7，63.1，56.9，44.1，42.4，41.5，39.8，32.2，31.6，31.2，30.0，29.7，29.3，28.9，27.9，27.7，25.6，24.8，22.5，19.1，17.5，-1.51ppm.MS(EI，m/z):841(M++1).HRMS(ESI):calcdforC39H65N408S3Si[MH+]841.3734，found841.3731。13)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>將化合物15(0.175g，0.24mmol)溶解在5ml二氯甲烷中，冰浴下滴加lmlTFA(Trifluoroaceticacid)，室溫下反應(yīng)過夜。蒸干溶劑，加入5ml甲苯，蒸干溶劑，再加入5ml甲苯，蒸干溶劑得化合物16。將化合物16溶解在100ml干燥二氯甲烷中，加入0.05mlDIEA，攪拌三十分鐘，再依次加入O.79gHOAT，O.22gHATU，0.05mlDIEA，室溫攪拌三天。蒸干溶劑，柱層析純化(50X乙酸乙酯/石油醚)，得到60mg目標(biāo)物，產(chǎn)率68%。[a]23D:+18.O(c0.06，CHC13)力NMR(400MHz,CDC13):S7.76(s，1H)，7.16(d，J=9.2Hz，1H)，6.46(dd，J=9.6，2.5Hz，1H)，5.82(dt，J=15.6，6.8Hz，1H，)，5.65(ddd，J=9.7，7.5，1.8Hz，1H)，5.50(dd，J=15.6，6.8Hz，1H)，5.29(dd，J=17.6，9.6Hz，1H)，4.61(dd，J=9.2，3.2Hz，1H)，4.27(dd，J=17.6，3.2Hz，1H)，4.04(d，J=11.2Hz，lH)，3.27(d，J=11.2Hz，1H)，2.89(t，J=7.2Hz，2H)，2.84(dd，J=16.4，10.4Hz，1H，)，2.68(dd，J=16.0，2.4Hz，1H)，2.53(t，J=7.6Hz，2H，)，2.31(dt，J=14.4，7.2Hz，2H)，2.10(m，1H)，1.87(s，3H)，1.67—1.59(2H，m)，1.28—1.25(m，8H)，0.87(t，J=6.8Hz，3H，)，0.68(d，J=6.8Hz，3H)，0.51(d，J=6.8Hz，3H)ppm.13CNMR(lOOMHz，CDC13):S199.3，173.5，169.4，168.8，167.9，164.5，147.6，132.7，128.4，124.0，84.5，72.0，57.8，44.1，43.3，41.1，40.5，34.1，32.3，31.6，29.7，29.3，28.9，27.9，25.6，24.2，22.6，18.8，16.7，14.Oppm.MS(EI，m/z):623(M++1).HRMS(ESI):calcdforC29H43N405S3[MH+]623.2396，found623.2398.實施例2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>冰浴，氮氣保護下化合物11(0.2g，0.5,1)和Fmoc-Leu-OH(O.535g，1.51,1)溶于10ml無水二氯甲烷中，依次加入EDCI(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimideHydrochloride0.235g，)、DMAP(4-二甲氨基妣啶10mg)，DIEA(N，N-二異丙基乙胺0.34ml)，室溫反應(yīng)一小時，依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(15%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物0.335g(化合物12b)，產(chǎn)率91%?；衔?2b(0.31g，0.47mmol)加入到10%哌啶/二氯甲烷混合溶液(10ml)中，室溫攪拌四小時。蒸干溶劑，快速柱層析(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到粗產(chǎn)物。氮氣保護下，將上一步粗產(chǎn)物和化合物14(0.26g，0.47mmol)加入10ml干燥二氯甲烷中，再依次加入0.072gH0At(l-羥基-7-偶氮苯并三氮唑)，0.2gHATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'_四甲基脲六氟磷酸酯)，0.076mlDIEA，室溫攪拌過夜。依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物化合物15b0.202g，產(chǎn)率55X。[a]23D:-37.8(cl.8，CHC13).力畫R(400MHz，CDC13):S7.95(s，1H)，7.12(d，J=8.OHz，1H)，5.86and5.79(m，1H)，5.64(dd，J=13.6，6.8Hz，1H)，5.53(dd，J=15.6，7.2Hz，1H)，5.28(brs，NH)，4.63(d，J=6.0Hz，2H)，4.55(m，1H)，4.18(t，J=8.2Hz，2H)，3.75(d，J=11.6Hz，1H)，3.33(d，J=11.6Hz，1H)，2.88(t，J=7.2Hz，2H)，2.72(dd，J=15.6，7.6Hz，1H)，2.62-2.50(m，3H)，2.29(dt，J=14.0，7.2Hz，2H)，1.65—1.62(m，7H)，1.47(s，9H)，1.26-1.28(m，8H)，0.99(m，2H)，0.90—0.83(m，10H)，0.04(s，9H)ppm.13CNMR(lOOMHz，CDC13):S199.3，174.3，171.3，169.6，163.0，148.7，132.9，128.4，121.7，85.1，80.5，71.6，63.1，50.9，44.2，42.3，41.3，41.2，39.8，32.2，31.6，29.7，28.9，28.3，27.9，25.6，25.0，24.7，22.8，22.5，22.0，17.4，14.0，-1.51ppm.MS(EI，m/z):855(M++1).HRMS(ESI):calcdforC4。H67N4Na08S3Si[MH+]855.3890，found855.3894.實施例314Fmoc-Phe-OHEDC,HOAt,NHBoc冰浴，氮氣保護下化合物11(0.2g，0.5mmo1)和Fmoc-Phe-0H(0.585g，1.51mmol)溶于10ml無水二氯甲烷中，依次加入EDCI(l-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimideHydrochloride0.235g)、DMAP(4-二甲氨基妣啶10mg)，DIEA(N，N-二異丙基乙胺0.26ml)，室溫反應(yīng)一小時，依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(15%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物0.347g(化合物12b)，產(chǎn)率90%?；衔?2c(0.347g，0.46mmol)加入到10%哌啶/二氯甲烷混合溶液(10ml)中，室溫攪拌四小時。蒸干溶劑，快速柱層析(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到粗產(chǎn)物。氮氣保護下，將上一步粗產(chǎn)物和化合物14(0.25g，0.46mmol)加入10ml干燥二氯甲烷中，再依次加入0.072gH0At(l-羥基-7-偶氮苯并三氮唑)，0.2gHATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'_四甲基脲六氟磷酸酯)，0.076mlDIEA，室溫攪拌過夜。依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物化合物15c0.203g，產(chǎn)率53X。[a]23D:-22.3(c2.2，CHC13).力匪R(400MHz,CDC13):S7.82(s，1H)，7.10-6.99(m，6H)，5.81and5.76(m，1H)，5.64(dd，J=13.6，6.8Hz，1H)，5.50(dd，J=15.6，7.2Hz，1H)，5.28(brs，1H)，4.83(m，1H)，4.65(d，J=5.6Hz，2H)，4.18(m，2H)，3.72(d，J=11.2Hz，1H)，3.25(d，J=11.6Hz，1H)，3.05(dd，J=11.6，6.2Hz，2H)，2.90(t，J=7.2Hz，2H)，2.69(dd，J=15.6，7.6Hz，1H)，2.59-2.50(m，3H)，2.30(dt，J=13.6，6.8Hz，2H)，1.63(m，2H)，1.57(s，3H)，1.49(s，9H)，1.28—1.26(m，8H)，0.98(m，2H)，0.85(t，3H)，0.04(s，9H)卯m.13CNMR(100MHz，CDC13):S199.2，170.0，169.5，163.2，148.7，135.6，133.2，129.5，128.3，126.9，121.4，85.1，80.6，72.0，63.1，52.8，44.2，41.2，39.7，37.8，32.2，31.6，28.9，28.3，27.9，27.7，25.6，25.1，22.6，17.4，14.0，-1.51ppm.MS(EI，m/z):889(M++1).HRMS(ESI):calcdforC43H65N408S3Si[MH+]889.3734，found889.3738.實施例415<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>OH冰浴，氮氣保護下化合物11(0.2g，0.5mmo1)和Fmoc-Tyr-0H(0.585g，1.51mmol)溶于10ml無水二氯甲烷中，依次加入EDCI(1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimideHydrochloride0.235g，)、DMAP(4-二甲氨基妣啶10mg)，DIEA(N，N-二異丙基乙胺0.26ml)，室溫反應(yīng)一小時，依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(15%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物0.327g(化合物12b)，產(chǎn)率83%?；衔?2d(0.33g，0.52mmol)加入到10%哌啶/二氯甲烷混合溶液(10ml)中，室溫攪拌四小時。蒸干溶劑，快速柱層析(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到粗產(chǎn)物。氮氣保護下，將上一步粗產(chǎn)物和化合物14(0.201g，0.52mmol)加入10ml干燥二氯甲烷中，再依次加入0.072gH0At(l-羥基-7-偶氮苯并三氮唑)，0.2gHATU(2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸酯)，0.076mlDIEA，室溫攪拌過夜。依次用水，飽和氯化鈉洗滌，收集有機層，無水硫酸鈉干燥，濃縮，柱層析純化(30%乙酸乙酯/石油醚)，得到無色油狀物化合物15d0.195g，產(chǎn)率50X。[a]23D:-35.2(cl.9，CHC13).丄HNMR(400MHz，CDC13):S7.83(s，1H)，7.05(d，J=8.OHz，1H)，6.88(m，2H)，6.67(m，2H)，5.86and5.78(ddd，J=15.2，6.8Hz，1H)，5.62(dd，J=13.6，6.8Hz，1H)，5.50and5.41(m，2H)，4.75(m，1H)，4.63(d，J=5.2Hz，2H)，4.18(m，2H)，3.71(d，J=11.6Hz，1H)，3.53(dd，J=5.6Hz，1H)，3.38(d，J=5.6Hz，1H)，3.23(d，J=11.6Hz，1H)，3.05(m，1H)，2.89(t，J=7.2Hz，2H)，2.69(dd，J=15.6，7.6Hz，1H)，2.51(t，J=7.6Hz，2H)，2.29(dt，J=15.6，7.6Hz，2H)，1.64(m，2H)，1.59(s，3H)，1.47(s，9H)，1.28-1.26(m，8H)，1.25(s，9H)，0.99(m，2H)，0.85(m，3H)，0.03(s，9H)卯m.13CNMR(100MHz，CDC13):S199.2，174.1，171.5，170.0，169.5，163.2，154.3，148.5，133.2，132.9，130.4，129.9，127.6，123.9，121.6,85.0,78.4,71.9,67.8,63.1,52.8，46.7，44.1，42.6，41.3，39.8，37.1，33.5，32.2，31.7，31.6，29.7，29.1，28.9，28.8，28.3，28.1，27.9，26.7,25.6,25.1，24.6,22.6，17.4，14.0，-1.51ppm.MS(EI，m/z):961(M++1)匪S(ESI):calcdforC47H73N409S3Si[MH+]961.4309，found961.4310.實施例5將化合物15b(0.043g，0.05mmol)溶解在5ml二氯甲烷中，冰浴下滴加lmlTFA(Trifluoroaceticacid)，室溫下反應(yīng)過夜。蒸干溶劑，加入5ml甲苯，蒸干溶劑，再加入5ml甲苯，蒸干溶劑得化合物16。將化合物16溶解在100ml干燥二氯甲烷中，加入0.05mlDIEA，攪拌三十分鐘，再依次加入O.79gHOAT，O.22gHATU，0.05mlDIEA，室溫攪拌三天。蒸干溶劑，柱層析純化(50%乙酸乙酯/石油醚)，得到17.8mg目標(biāo)物，產(chǎn)率56%。[a]23D:+18.O(cO.05，CHC13).力NMR(400MHz，CDC13):S7.73(s，1H)，7.22(d，J=8.4Hz，1H)，6.44(d，J=6.4Hz，1H)，5.82(dt，J=15.6，6.9Hz，1H)，5.69(m，1H)，5.52(dd，J=15.6，6.8Hz，1H)，5.26(dd，J=17.6，9.6Hz，1H)，4.60(dd，J=8.0，5.6Hz，1H)，4.28(dd，J=17.6，3.2Hz，1H)，4.07(d，J=11.2Hz，1H)，3.26(d，J=11.2Hz，1H)，2.91—2.84(m，3H)，2.68(dd，J=16.4，2.4Hz，1H)，2.53(t，J=7.6Hz，2H)，2.31(dt，J=14.0，7.OHz，2H)，1.85(s，3H)，1.67-1.59(m，2H)，1.46(m，2H)，1.36—1.19(m，9H)，0.88(t，J=6.8Hz，3H)，0.69(d，J=6.4Hz，3H)，0.50(3H，d，J=6.4Hz)ppm.13CNMR(lOOMHz，CDC13):S199.5，173.5，169.5，169.3，167.8，164.2，147.8，133.0，128.4，124.2，84.6，72.2，53.4，52.2，44.1，43.0，42.3，41.2，40.4，32.2，31.6，28.9，28.0，25.6，24.5，24.3，22.6，22.4，22.3，14.Oppm.MS(EI，m/z):637(M"+l)HRMS(ESI):calcdforC30H45N405S3[MH+]637.2552，found637.2557.實施例6H17c將化合物15c(0.049g，0.055mmol)溶解在5ml二氯甲烷中，冰浴下滴加lmlTFA(Trifluoroaceticacid)，室溫下反應(yīng)過夜。蒸干溶劑，加入5ml甲苯，蒸干溶劑，再加入5ml甲苯，蒸干溶劑得化合物16c。將化合物16c溶解在100ml干燥二氯甲烷中，加入0.05mlDIEA，攪拌三十分鐘，再依次加入O.79gHOAT，O.22gHATU，0.05mlDIEA，室溫攪拌三天。蒸干溶劑，柱層析純化(50X乙酸乙酯/石油醚)，得到20.3mg目標(biāo)物，產(chǎn)率55%。[a]23D:+18.6(c0.033，CHC13).丄HNMR(400MHz，CDC13):S7.65(1H，s)，7.27(d，J=9.2Hz，1H)，6.88(d，J=7.6Hz，2H)，6.83-6.78(m，3H)，5.98(brs，1H)，5.82(dt，J=15.2，6.8Hz，1H)，5.74(m，1H)，5.54(dd，J=15.2，6.8Hz，1H)，4.93(m，1H)，4.80(dd，J=17.6，7.2Hz，1H)，4.39(dd，J=17.6，3.6Hz，1H)，4.13(d，J=11.6Hz，1H)，3.27(d，J=11.6Hz，lH)，3.21(dd，J=14.0，3.2Hz，1H)，3.07(dd，J=14.0，5.4Hz，1H)，2.86(m，2H)，2.68(dd，J=16.0，7.6Hz，1H)，2.59(dd，J=16.0，3.0Hz，1H)，2.50(t，J=7.6Hz，2H)，2.28(dd，J=14.0，7.2Hz，2H)，1.83(s，3H)，1.63(m，2H)，1.27—1.25(m，8H)，0.87(t，J=6.6Hz，3H)ppm.13C畫R(100MHz，CDC13):S199.3，173.8，168.9，168.4，166.6，163.6，147.4，135.4，132.8，129.9，127.8，127.6，126.0，123.2，84.4,72.6，54.4，44.1，42.6，41.0，40.7，38.0，32.3，31.6，28.9，27.9，25.6，25.0，22.6，14.lppm.MS(EI，m/z):671(M++1).HRMS(ESI):calcdforC33H43N405S3[MH+]671.2396，found671.2397.實施例7將化合物15d(0.065g，0.065mmol)溶解在5ml二氯甲烷中，冰浴下滴加lmlTFA(Trifluoroaceticacid)，室溫下反應(yīng)過夜。蒸干溶劑，加入5ml甲苯，蒸干溶劑，再加入5ml甲苯，蒸干溶劑得化合物16d。將化合物16d溶解在100ml干燥二氯甲烷中，加入0.05mlDIEA，攪拌三十分鐘，再依次加入O.79gHOAT，O.22gHATU，0.05mlDIEA，室溫攪拌三天。蒸干溶劑，柱層析純化(50%乙酸乙酯/石油醚)，得到20.lmg目標(biāo)物，產(chǎn)率45%。[a]23D:+20(c0.04，CHC13).工HNMR(400MHz，CDC13):S7.72(s，1H)，7.31(d，J=8.0Hz，1H)，6.70(d，J=8.0Hz，2H)，6.37(brs，1H)，6.23(d，J=8.0Hz，2H)，5.83(dt，J=14.8，6.8Hz，1H)，5.69(m，1H)，5.54(dd，J=15.2，6.4Hz，1H)，4.92(m，2H)，4.37(d，J=17.2Hz，1H)，4.15(d，J=11.6Hz，1H)，3.28(d，J=11.6Hz，1H)，3.12(dd，J=13.6，2.OHz，1H)，2.97(dd，J=14.0，4.8Hz，1H)，2.87(m，2H)，2.67(d，J=4.8Hz，2H)，2.49(t，J=7.2Hz，2H)，2.28(dt，J=14.0，7.2Hz，2H)，1.84(s，3H)，1.67—1.59(m，2H)，1.36-1.19(m，8H)，0.87(t，J=7.2Hz，3H)ppm.13CNMR(lOOMHz，CDC13):S199.2，173.7，168.9，168.7，166.3，163.6，154.5，147.3，132.7，131.0，127.5，127.1，123.3，114.8，84.4，72.2，54.6，44.1，42.6，41.1，40.6，37.3，32.3，31.6，29.7，28.9，27.9，25.6，24.9，22.6，14.0卯m.MS(EI，m/z):687(M"+l)HRMS(ESI):calcdforC33H43N406S3[MH+]687.2345，found687.2342.實施例8生物活性實驗化合物L(fēng)argazole，17b，171c，17d按照MTT方法對A549，MCF-7，HCT-116等癌細(xì)胞的半數(shù)有效抑制濃度(IC50)測定于下列表中將2500個HCT-116，A549，HEK-293andHLF細(xì)胞放于96孔版中。喂養(yǎng)16小時后，加入樣品Largazole，17b，171c，17d和(0.Olto10yMforHCT-116andA549cells;0.lto100iiMforHEK293andHLFcells)空白(DMSO)細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)72小時，然后和MTT培養(yǎng)4小時。隨后用讀數(shù)記在570nm下讀數(shù)。實驗重復(fù)四次，數(shù)據(jù)按以下公式計算:(%)=A0D(compouds)-A0D(Blank)]/[AOD(controls)-AOD(Blank)]}X100%。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>權(quán)利要求一種Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，包括下述步驟(1)在有機溶劑中，0℃～50℃化合物1、叔丁基二甲基硅氯和有機堿反應(yīng)5-10小時，得化合物2；其中，化合物1、叔丁基二甲基硅氯和有機堿的摩爾比為1.0∶2.0～3.0∶2.0～3.1；(2)在混合溶劑中，0℃～室溫下，化合物2和無機堿反應(yīng)1-5小時，得化合物3；其中，化合物2和無機堿的摩爾比為1.0∶1.0～1.5；(3)在有機溶劑中，0℃～50℃下，化合物3、三甲硅基乙醇、縮合劑和有機堿反應(yīng)5-10小時得化合物4；其中，化合物3三甲硅基乙醇，縮合劑和有機堿的摩爾比為1.0∶1.0～5∶1.0～5∶1.0～5；(4)在有機溶劑中，-40℃～0℃下，化合物4和樟腦磺酸反應(yīng)3-10小時得化合物5；其中，化合物4和樟腦磺酸的摩爾比為1.0∶0.05～0.5；(5)在有機溶劑中，，-78℃～0℃下，化合物5和氧化劑反應(yīng)1-5小時得化合物6；其中，化合物5和氧化劑的摩爾比為1.0∶1.0～5；(6)在有機溶劑中，-78℃～0℃下，-78℃～0℃，化合物6、化合物7和有機堿反應(yīng)1-5小時得化合物8；其中，化合物6、化合物7和有機堿的摩爾比為1.0∶1.0～2.0∶1.0～1.8；(7)在有機溶劑中，-40℃～0℃下，化合物8和樟腦磺酸反應(yīng)3-10小時得化合物9；其中，化合物8和樟腦磺酸的摩爾比為1.0∶0.05～0.5；(8)在有機溶劑中，0℃～室溫下，化合物9、硫代辛酸、三苯基磷和偶氮二羧酸酯反應(yīng)1-5小時得化合物10；其中，化合物9、硫代辛酸、三苯基磷和偶氮二羧酸酯的摩爾比為1.0∶1.0～3.0∶1.0～5.0∶1.0～5.0；(9)在有機溶劑中，-40℃～0℃下，化合物10和樟腦磺酸反應(yīng)3-12小時得化合物11；其中，化合物10和樟腦磺酸的摩爾比為1.0∶0.05～1.0；(10)在有機溶劑中，0℃～室溫下，化合物11、Fmoc保護的氨基酸、縮合劑和有機堿反應(yīng)5-10小時得化合物12；其中，化合物11、Fmoc保護的氨基酸、縮合劑和有機堿的摩爾比為1.0∶1.0～5∶1.0～5∶1.0～5；(11)在有機溶劑中，化合物12和有機堿反應(yīng)0.5-5小時得化合物13；其中，化合物12和有機堿的摩爾比為1.0∶0.1～5；(12)在有機溶劑中，0℃～室溫下，化合物13、化合物14、縮合劑和有機堿反應(yīng)5-20小時得化合物15；其中，化合物3三甲硅基乙醇，縮合劑和有機堿的摩爾比為1.0∶1.0～2∶1.0～5∶1.0～5；(13)在有機溶劑中，0℃～室溫下，化合物15和酸反應(yīng)1-5小時得化合物16；其中，化合物15和酸的摩爾比為1.0∶1.0～10；(14)在有機溶劑中，0℃～室溫下，化合物16、縮合劑和有機堿反應(yīng)5-20小時得化合物17，其中，化合物16、縮合劑和有機堿的摩爾比為1.0∶1.0～20∶1.0～20；其中，化合物1-17的結(jié)構(gòu)式分別如下FSA00000031091400021.tif,FSA00000031091400031.tif2.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的方法步驟(1)、(4)、(6)、(7)、(9)、(11)、(13)和/或(15)是在惰性氣體保護下進行。3.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的有機溶劑是二氯甲烷、四氫呋喃、DMF、乙二醇二甲醚、1，2-二氯乙烷、DMP、甲醇、乙醇、石油醚、正己烷或乙醚。4.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的有機堿是咪唑，三乙胺，二異丙基乙基胺，哌啶，二甲氨基吡啶丄iHMDS,KHMDS,NaHMDS,N-甲基嗎啡啉或吡啶。5.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的無機堿是氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、碳酸鈉、碳酸鉀、或碳酸氫鈉。6.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的縮合劑是DCC、EDC、HATU、H0At、H0Bt、DIPCDI、HBTU或PyB0P。7.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的偶氮二羧酸酯是偶氮二羧酸二甲酯、偶氮二羧酸二乙酯或偶氮二羧酸二異丙酯。8.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的氧化劑是Dess-Martin氧化劑、Swern氧化劑、PDC或PCC。9.如權(quán)利要求1所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述的酸是三氟乙酸、鹽酸、硫酸或硝酸。10.如權(quán)利要求1-9任一項所述的Largazole及其類似物的合成方法，其特征是，所述Largazole及其類似物具有以下結(jié)構(gòu)式之一<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>全文摘要本發(fā)明公開了一種Largazole及其類似物的合成方法，該合成方法以在有機溶劑中，L-蘋果酸二甲酯和硼烷的二甲硫醚溶液起始反應(yīng)，最后得到具有以下結(jié)構(gòu)式的化合物17，本發(fā)明所述合成方法簡便，合成路線短及經(jīng)濟適用，且本發(fā)明所述方法合成的化合物具有高的抗癌活性及選擇性，文檔編號C07D513/18GK101781321SQ20101011092公開日2010年7月21日申請日期2010年2月8日優(yōu)先權(quán)日2010年2月8日發(fā)明者周光飚,尹標(biāo)林,曾鑫,胡政,蔣晟申請人:中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院