專利名稱：一種萬壽菊素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥提取分離技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種從母菊中分離制備萬壽菊素的方法。
背景技術(shù)：
母菊主產(chǎn)于我國新疆北部和西部。生于河谷曠野、田邊。北京和上海庭園有栽培，供觀賞。歐洲、亞洲北部和西部也有分布。母菊味微苦、甘香，明目、退肝火，治療失眠，降低血壓，可增強(qiáng)活力、提神；增強(qiáng)記憶力、降低膽固醇；祛痰止咳，可有效緩解支氣管炎及氣喘，可舒緩頭痛、偏頭痛或感冒引起的肌肉痛，對中和胃酸、舒緩神經(jīng)有幫助；可消除感冒所引起的肌肉痠痛，能鎮(zhèn)定精神、紓緩情緒，提升睡眠質(zhì)量，還可改善過敏的皮膚；有幫助睡目民、潤澤肌膚、可治長期便秘、能消除緊張、眼睛疲勞、潤肺、養(yǎng)生，并可治療焦慮和緊張?jiān)斐傻南涣迹覍κ?、神?jīng)痛及月經(jīng)痛、腸胃炎都有所助益、減輕頭痛。母菊富含黃酮類活性成分，該成分具有抗氧化、抗血管增生、消炎、抗變應(yīng)性、和抗病毒的功效。萬壽菊素,黃色針晶,來源于菊科植物母菊ifeiricaria chamomilla L.。萬壽菊素具有對抗氧活性，在DPPH測試中能清除自由基形成，其IC50為9.0 μ g/mL ;在細(xì)胞色素C還原作用測試中，其IC50為10.1 μ g/mL(陽性對照品gallic acid的IC50分別為3.7 μ g/mL和3.2 μ g/mL。萬壽菊素還具有細(xì)胞毒活性，在MTT測試中降低堆心菊素誘導(dǎo)的細(xì)胞毒活性。本品I μ M時(shí)，提高堆心菊素對人肺癌細(xì)胞株GLC4的IC50值(由單用堆心菊素時(shí)的100%提高至134.7 ±7.5%)。在200 μ M時(shí)，對GLC4 (人型肺癌細(xì)胞株)和C0L0320 (人型結(jié)直腸癌細(xì)胞株)抑制率達(dá)67.8%和84.4%，IC50 ( μ Μ)分別為160和147。目前，萬壽菊素 的純化方法很少見，如專利(申請?zhí)?01110075820.3)“一種高純度槲皮萬壽菊素制備方法”，該方法是采用有機(jī)溶劑提取和高速逆流色譜分離。如上所述，現(xiàn)有純化萬壽菊素的方法存在著收率低、周期長、溶劑用量大、收率低等不足。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種萬壽菊素的制備方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
一種萬壽菊素的制備方法，其特征在于包括以下步驟:
(1)取母菊，經(jīng)粉碎處理，置于閃式提取器中，加5-12倍70-85%乙醇溶液，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液；
(2)提取液通過截留分子量為1000-3000的超濾膜超濾和截留分子量為300的納濾膜濃縮，操作壓力為0.7-2.5MPa，膜濃縮液減壓濃縮干燥，得粗提物；
(3 )采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分；
(4)將萬壽菊素組分進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得萬壽菊素。所述步驟(I)中閃式提取電壓為140-160V，提取時(shí)間為60s_90s。
所述步驟(3)中制備型液相色譜以78-80%甲醇溶液為流動(dòng)相。本方法積極效果是:
(1)本方法采用閃式提取法，快速高效、低耗能、環(huán)保；
(2)本方法采用膜分離技術(shù)，能有效去除多種雜質(zhì)，且不會(huì)破壞有效成分的生物活性；
(3)本方法采用制備型液相色譜，收率高、制備量大、制備周期短，解決了柱層析效率低而且污染嚴(yán)重的技術(shù)缺陷；
(4)本方法工藝步驟操作較簡單，易操作，所得產(chǎn)品純度高。下面將結(jié)合·具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施方式
:
實(shí)施例1:
取母菊，經(jīng)粉碎處理，稱取1kg，加6倍85%乙醇溶液，提取電壓為140V，提取時(shí)間為90s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液通過截留分子量為3000的超濾膜超濾和截留分子量為300的納濾膜濃縮，操作壓力為0.8MPa，膜濃縮液減壓濃縮干燥，得粗提物；采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，以78%甲醇溶液為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分，進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得萬壽菊素，含量94.3%。實(shí)施例2:
取母菊，經(jīng)粉碎處理，稱取1kg，加12倍70%乙醇溶液，提取電壓為140V，提取時(shí)間為80s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液通過截留分子量為1000的超濾膜超濾和截留分子量為300的納濾膜濃縮，操作壓力為1.8MPa，膜濃縮液減壓濃縮干燥，得粗提物；采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，以78%甲醇溶液為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分，進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得萬壽菊素，含量95.2%。實(shí)施例3:
取母菊，經(jīng)粉碎處理，稱取2kg，加5倍70%乙醇溶液，提取電壓為140V，提取時(shí)間為90s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液通過截留分子量為1000的超濾膜超濾和截留分子量為300的納濾膜濃縮，操作壓力為2.0MPa，膜濃縮液減壓濃縮干燥，得粗提物；采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，以79%甲醇溶液為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分，進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得萬壽菊素，含量96.2%。實(shí)施例4:
取母菊，經(jīng)粉碎處理，稱取5kg，加8倍80%乙醇溶液，提取電壓為160V，提取時(shí)間為60s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液通過截留分子量為3000的超濾膜超濾和截留分子量為300的納濾膜濃縮，操作壓力為0.7MPa，膜濃縮液減壓濃縮干燥，得粗提物；采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，以78%甲醇溶液為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分，進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得萬壽菊素，含量95.6%。實(shí)施例5:取母菊，經(jīng)粉碎處理，稱取10kg，加12倍85%乙醇溶液，提取電壓為160V，提取時(shí)間為90s，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液，提取液通過截留分子量為1000的超濾膜超濾和截留分子量為300的納濾膜濃縮，操作壓力為2.5MPa，膜濃縮液減壓濃縮干燥，得粗提物；采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，以80%甲醇溶液為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分，進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得萬壽 菊素，含量95.9%。
權(quán)利要求
1.一種萬壽菊素的制備方法，其特征在于包括以下步驟: (1)取母菊，經(jīng)粉碎處理，置于閃式提取器中，加5-12倍70-85%乙醇溶液，進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液； (2)提取液通過截留分子量為1000-3000的超濾膜超濾和截留分子量為300的納濾膜濃縮，操作壓力為0.7-2.5MPa，膜濃縮液減壓濃縮干燥，得粗提物； (3 )采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分； (4)將萬壽菊素組分進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，過濾、洗滌干燥即得萬壽菊素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種萬壽菊素的制備方法，其特征在于:所述步驟(I)中閃式提取電壓為140-160V，提取時(shí)間為60s-90s。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種萬壽菊素的制備方法，其特征在于:所述步驟(3)中制備型液相色譜以78-80%甲醇溶液為流動(dòng)相。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種操作簡單、污染少的萬壽菊素的制備方法，工藝步驟為(1)取母菊，經(jīng)粉碎處理，用70-85%乙醇溶液進(jìn)行閃式提取，過濾得到提取液；(2)提取液通過膜分離系統(tǒng)，濃縮干燥得粗提物；(3)采用制備型液相色譜分離純化粗提物中的萬壽菊素，紫外在線監(jiān)測，收集萬壽菊素組分；(4)將萬壽菊素組分進(jìn)行真空濃縮，析出結(jié)晶，濾出結(jié)晶，即得萬壽菊素。本發(fā)明制備萬壽菊素，產(chǎn)品純度高，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號C07D311/30GK103242280SQ20131018884
公開日2013年8月14日 申請日期2013年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月21日
發(fā)明者劉東鋒, 萬冬梅 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司