3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的合成方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的化學(xué)合成方法，包括：（1）以D-核糖為起始原料制備單磷酸-3-乙酰吡啶-α-D-核苷；（2）以腺嘌呤核苷為主要原料制備嗎啡啉單磷酸腺苷；（3）將嗎啡啉單磷酸腺苷和單磷酸-3-乙酰吡啶-α-D-核苷進(jìn)行對接反應(yīng)，制備得到3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸。本發(fā)明化學(xué)合成的方法的起始原料為商品化的工業(yè)品D-核糖，中間體制備過程中沒有用到任何酶，原料價格低廉、易于購買，大大降低了產(chǎn)品的生產(chǎn)成本；此外，本發(fā)明化學(xué)合成方法的產(chǎn)品收率高，反應(yīng)的總收率為4.2%，顯著高于現(xiàn)有的生物合成方法的產(chǎn)品收率。
【專利說明】3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的合成方法【技術(shù)領(lǐng)域】[0001]本發(fā)明涉及一種嘌呤衍生物的合成方法，尤其涉及3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的化學(xué)合成方法，屬于3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的合成領(lǐng)域。【背景技術(shù)】[0002]3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸能夠作為生化試劑原料廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域。最早報道的有關(guān)3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的合成方法的是一篇1956年的文獻(xiàn)(The Journal of Biological Chemistry, 1956，221，823-832.)，該方法所公開的 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的合成方法屬于生物合成方法。此后，Nathan 0.Kaplan等人公開了一種從煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)制備3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的生物合成方法，該方法以NAD為原料，利用豬腦NPD酶的糖苷轉(zhuǎn)移作用，將煙酰胺部分轉(zhuǎn)化成3-乙酰吡啶從而制得3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸。上述這些生物合成方法所用的原料——煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD)——均存在不易獲得的問題。NAD的化學(xué)合成方法最早見于Todd等人的報道。然而，這也只是從單磷酸腺苷和單磷酸煙酰胺核苷為原料的半合成方法。后來，David R.Walt 等人以游離的單磷酸腺苷為原料，經(jīng)過一步水解，脫去腺嘌呤。再通入氨氣形成胺基糖。胺基糖與活化過的煙酰胺反應(yīng)，形成單磷酸煙酰胺核苷。再在酶的作用下和三磷酸腺苷二鈉鹽作用，形成煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) (JACS, 1980，102，7805.JACS, 1984，106，234)；[0003]生物合成方法需要專用的場地和設(shè)備，所需要的專一性酶只能在實驗室制備，并沒有商業(yè)化的酶可以購買。后處理若處理不好，很容易造成產(chǎn)品酶解。原料NAD和各種酶的成本都很高。[0004]因此，實踐中亟待需要開發(fā)一種制備成本相對低廉、產(chǎn)物收率高、不需要專一性酶的3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的化學(xué)合成方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明的主要目的是提供一種制備成本相對低廉、產(chǎn)物收率高的3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的化學(xué)合成方法。[0006]本發(fā)明的主要目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的:[0007]—種3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的化學(xué)合成方法，包括以下步驟:[0008](I)以D-核糖為起始原料制備單憐酸-3-乙酸吡唳-a -D-核苷；[0009](2)以腺嘌呤核苷為主要原料制備嗎啡啉單磷酸腺苷；[0010](3)將嗎啡啉單磷酸腺苷和單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷進(jìn)行對接反應(yīng)，制備得到3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸。[0011]其中，優(yōu)選的，步驟(3)中在甲酰胺，二氯化錳和無水硫酸鎂存在下，將嗎啡啉單磷酸腺苷和單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷混合攪拌，室溫下進(jìn)行反應(yīng)， 制備得到3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸；所述的室溫優(yōu)選為20_25°C。[0012]其中，各成分的用量優(yōu)選為:按摩爾比計，二氯化錳:無水硫酸鎂:嗎啡啉單磷酸腺苷；單磷酸-3-乙酰吡啶-a-D-核苷=1: (2-3): (0.9_1): 1，甲酰胺過量；[0013]所述的單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷可通過以下方法制備得到:[0014](I)、用三苯基氯甲烷作為D-核糖5-位的保護(hù)基，制備得到5-Tr-D-核糖；[0015]優(yōu)選的，在無水吡啶存在下，將D-核糖與三苯基氯甲烷混合攪拌，在60_85°C，攪拌反應(yīng)；優(yōu)選的，按摩爾比計，將D-核糖與三苯基氯甲烷按照1: (1-1.2)的摩爾用量配比在75°C條件下攪拌反應(yīng)4小時。[0016](2)、由5-Tr-D-核糖制備得到5_Tr_l-胺基-D-核糖；[0017]優(yōu)選的，步驟(2)中通過以下反應(yīng)制備得到5-Tr-l-胺基-D-核糖:[0018]將5-Tr-D-核糖在過量的甲醇氨飽和溶液中0_4°C反應(yīng)，制備得到5_Tr_l-胺基-D-核糖。[0019](3)將5-Tr-l-胺基-D-核糖與3_乙酰吡啶反應(yīng)，制得3_乙酰吡啶-5_Tr- a -D-核苷;[0020]優(yōu)選的，步驟(3)中在無水甲醇和三氟甲磺酸三甲基硅酯存在的條件下，將5-Tr-l-胺基-D-核糖的甲醇溶液加入到3-乙酰吡啶中，室溫下攪拌進(jìn)行反應(yīng)；將反應(yīng)粗產(chǎn)物用柱層析分離，得到3-乙酰吡啶-5-Tr-a-D-核苷。[0021]其中5-Tr-l-胺基-D-核糖與3_乙酰吡啶的摩爾比優(yōu)選為1: (1-1.2)；[0022](4)將3-乙酰吡啶-5-Tr- a -D-核苷脫掉保護(hù)基，得到3_乙酰吡啶-a -D-核苷 (化合物4)。[0023]優(yōu)選的，步驟(4)中將3-乙酰吡啶-5-Tr- a -D-核苷在甲醇-稀鹽酸中攪拌反應(yīng)， 脫去保護(hù)基。[0024](5)將3-乙酰吡啶-a -D-核苷在三氯氧磷和磷酸三甲酯的作用下，制得單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷(化合物5)。[0025]優(yōu)選的，步驟(5)中在保持0-4°C溫度條件下，將3-乙酰吡啶-a -D-核苷加入到三氯氧磷和磷酸三甲酯中攪拌反應(yīng)，即得；[0026]進(jìn)一步，本發(fā)明提供了從上述反應(yīng)產(chǎn)物中分離純化得到單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷的方法，包括:向反應(yīng)產(chǎn)物中加入Dowex樹脂調(diào)節(jié)pH到5 ；Dowex樹脂用水沖洗后合并水相濃縮后上離子柱，用水洗脫，將洗脫液蒸干水，析出固體，即得。[0027]優(yōu)選的，本發(fā)明通過以下方法以腺嘌呤核苷為主要原料制備嗎啡啉單磷酸腺苷:[0028](I)將腺嘌呤核苷在三氯氧磷和磷酸三甲酯的作用下，制得單磷酸腺嘌呤核苷(化合物6)。[0029]在保持0_4°C下，向三氯氧磷和磷酸三甲酯中加入腺嘌呤核苷。保持0_4°C反應(yīng)； 即得；[0030]本發(fā)明還進(jìn)一步提供了從上述反應(yīng)產(chǎn)物中分離純化得到單磷酸腺嘌呤核苷的方法，包括:向反應(yīng)產(chǎn)物中加入Dowex樹脂調(diào)節(jié)pH到5 ；Dowex樹脂用水沖洗后合并水相濃縮后上離子柱，用水洗脫，將洗脫液蒸干水，析出固體，即得。[0031](2)將單磷酸腺 嘌呤核苷在DCC、嗎啡啉作用下，制得嗎啡啉單磷酸腺苷。[0032]現(xiàn)有的3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸合成方法均為生物合成方法，本發(fā)明用完全采用化學(xué)合成的方法制備了 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸，起始原料為商品化的工業(yè)品 D-核糖。中間體制備過程中沒有用到任何酶，都是常用的化學(xué)試劑，化學(xué)原料價格低廉、易于購買，因此總成本遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于生物合成方法，大大降低了產(chǎn)品的生產(chǎn)成本；此外，本發(fā)明方法的產(chǎn)品收率高，八步反應(yīng)的總收率為4.2%，現(xiàn)有的的生物合成方法(The Journal of Biological Chemistry, 1956，221，823-832.JACS, 1980，102，7805)從全乙酰-D-核糖計算， 總收率僅有2%左右，本發(fā)明化學(xué)合成方法的總收率顯著高于現(xiàn)有的生物合成方法。[0033]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，主要具備以下優(yōu)點(diǎn):[0034]第一，本發(fā)明完全采用化學(xué)方法合成，避開了較為昂貴的酶催化劑。所選用的化學(xué)原料在各大試劑公司均有銷售。化學(xué)原料價格低廉、易于購買，因此總成本遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于生物合成方法，大大降低了產(chǎn)品的生產(chǎn)成本。[0035]第二，在合成路線上，本發(fā)明設(shè)計了兩個關(guān)鍵中間體:單磷酸-3-乙酰吡啶-a-D-核苷和嗎啡啉單磷酸腺苷，分別用獨(dú)立的路線合成出其中一個關(guān)鍵中間體，然后再進(jìn)行對接，這樣有效的避免了線性合成路線可能帶來的合成風(fēng)險，也顯著提高了產(chǎn)物的收率?！緦＠綀D】

【附圖說明】[0036]圖1本發(fā)明3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的化學(xué)合成方法的工藝路線圖。【具體實施方式】 [0037]下面結(jié)合具體實施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)將會隨著描述而更為清楚。但這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。[0038]實施例15-Tr-D-核糖(化合物I)的合成。[0039]將15.0g D-核糖加入到250ml三口瓶中，加入100ml無水吡啶，開啟攪拌。加入 27.8g三苯基氯甲烷。加熱到75°C，攪拌反應(yīng)4小時。減壓下蒸出大部分吡啶，再用甲苯帶三次，蒸干得棕色糖漿狀產(chǎn)物。再用200ml氯仿溶解，依次用冰水和飽和食鹽水洗三次。有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥，過濾，旋干，乙醇重結(jié)晶得到39.4g產(chǎn)品。即為5-Tr-D-核糖。[0040]LC-MS:【M+Na】+=415。HNMR (MeOH_d4): δ:7.605-7.104 (m, 15H) ；6.260 (d, 1H);5.832 (d, 1H) ;5.201 (d, 1H) ; 5.006 (d, 1H) ppm.[0041]實施例2:5-Tr-l-胺基_D_核糖(化合物2)的合成。[0042]將39.4g5-Tr-D-核糖溶于200ml無水甲醇中，置于恒溫低溫水浴中，保持(TC。 攪拌下，不斷通入干燥的氨氣，20小時后檢測原料消失，幾乎定量的轉(zhuǎn)變成5-Tr-l-胺基-D-核糖。得39.2g黃色固體，即為產(chǎn)物。[0043]LC-MS:【M+H】+=392。HNMR (MeOH_d4): δ:7.523-7.078 (m, 15H) ；5.891 (d, 1H) ;5?755 (d, 1H) ; 4.568 (d, 1H) ; 4.306 (d, 1H) ppm.[0044]實施例3:3-乙酰吡啶-5-Tr- a -D-核苷(化合物3)的合成。[0045]室溫下，250ml三口瓶中加入50ml無水甲醇，攪拌下滴入6.0g3_乙酰吡啶。緩慢滴加11.6g三氟甲磺酸三甲基硅酯(TMSOTf )。半小時后，加入5-Tr-l-胺基-D-核糖的甲醇溶液(19.6克5-Tr-l-胺基-D-核糖溶在50ml甲醇中)。滴加完畢，室溫攪拌5個小時。 減壓蒸出溶劑。用盡量少體積的甲醇溶解，緩慢加入無水乙醚，有固體析出。過濾，干燥，得粗產(chǎn)品。柱層析，用二氯甲烷和甲醇體系洗脫，得3-乙酰吡啶-5-Tr-a-D-核苷9.65g。[0046]LC-MS:[M] +=496 (扣除三氟甲磺酸根之后)。HNMR (DMS0_d6): δ:9.472 (s ，1H) ;9.387 (s, 1H) ;9.165 (d, 1H) ;9.076 (d, 1H) ;8.245-8.134 (m, 1H) ; 7.412-7.30 5 (m, 15H) ; 6.784 (d, 1H) ; 6.543 (d, 1H) ; 4.851-4.741 (m, 1H) ; 4.562-4.021 (m, 2H);-3.623-3.268 (m, 2H) ; 2.656 (s, 3H) ppm.[0047]實施例4:3-乙酰吡啶-a -D-核苷(化合物4)的合成。[0048]室溫下，將10.0g3-乙酰吡啶-5-Tr-a-D-核苷溶解在50ml無水甲醇中，開啟攪拌，緩慢加入25mll%的稀鹽酸。攪拌15分鐘左右，出現(xiàn)大量沉淀。過濾,濾液減壓蒸出溶劑。用盡量少體積的水溶解，用C-2反相柱(Merck，70-230目)做柱層析。層析液旋干，幾乎定量的得到3-乙酰吡啶-a -D-核苷。干燥稱重:6.22g。[0049]LC-MS:[M]+=254 (扣除三氟甲磺酸根之后)。HNMR (DMS0-d6): δ:10.512 (s, 1H);9.772 (s, 1H) ;9.310 (d, 2H) ;8.642 (s, 1H) ; 8.154(t, 1H) ; 7.220 (d, 1H) ; 5.985 (t, 1H) ; 5.53 2 (t, 1H) ;5.218 (d, 1H) ; 4.496 (dd, 1H) ; 4.348 (dd, 1H) ; 2.716 (s, 3H) ppm.[0050] 實施例5單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷(化合物5 )的合成[0051](TC下，向反應(yīng)瓶中加入0.06ml三氯氧磷和0.36ml磷酸三甲酯。開啟攪拌,加入 10011^3-乙酰吡啶-0-0-核苷。反應(yīng)物保持O度，反應(yīng)4小時。加入幾滴水，再加入Dowex 樹脂(Dowex resinl X 8，HCO3-型，20-50目)調(diào)節(jié)pH到5。樹脂用200ml水沖洗。水相合并，濃縮至IOml,上樣到離子柱。填料為Dowex resinl X 2, CH3COO-型,200-400目，8 X Icm, 用水洗脫。通過和標(biāo)準(zhǔn)樣品比對，確定產(chǎn)品所在的層析液，合并，30度下蒸干水。加入丙酮析出固體，過濾得到無定形粉末56mg。[0052]LC-MS:【Μ-1=332。HNMR (D2O): δ:9.987 (s, 1Η) ; 9.885 (d, 1Η) ; 9.654 (d, 1Η) ; 8?876 (t, 1Η) ; 5.223 (d, 1Η) ; 4.865 (t, 2Η) ; 4.436 (d, I H) ; 3.912 (d, I H) ; 3.658 (t, 1Η) ; 2.665 ( s, 3Η) ppm.[0053]實施例6:單磷酸腺嘌呤核苷(化合物6)的合成。[0054](TC下，向反應(yīng)瓶中加入0.6ml三氯氧磷和3.6ml磷酸三甲酯。開啟攪拌，加入 80Img腺嘌呤核苷。反應(yīng)物保持(TC，反應(yīng)5小時。加入2ml /K，再加入Dowex樹脂(Dowex resinl X 8，HCO3-型，20-50目)調(diào)節(jié)pH到5。樹脂用1000ml水沖洗。水相合并，濃縮至 50ml，上樣到離子柱。填料為Dowex resinl X 2，CH3COO-型，200—400目，8 X lcm，用水洗脫。 通過和標(biāo)準(zhǔn)樣品比對，確定產(chǎn)品所在的層析液，合并，30°C下蒸干水。加入丙酮析出固體，過濾得到無定形粉末0.56g。收率54%。[0055]LC-MS:[M-1 ]_=346ο HNMR (D2O): δ:8.956 (s, 1H) ; 8.458 (s, 1H) ; 6.054 (d, 1H) ; 5?147 (t, 1H) ; 4.763 (t, 2H) ;4.261 (d, 1H) ;4.013 (d, 1H) ; 3.657 (d, 1H) ppm.[0056]實施例7嗎啡啉單磷酸腺嘌呤核苷(化合物7)的合成。[0057]反應(yīng)瓶中加入347mg單磷酸腺苷和IOml水，IOml叔丁醇,0.34ml (4mmol)純化過的嗎啡啉。加熱至回流。緩慢滴加DCC的叔丁醇溶液。(824mg，4mmolDCC溶在15ml叔丁醇中。)整個滴加過程約3-4小時。反應(yīng)液繼續(xù)攪拌幾個小時，直至在HPLC上顯示一個主點(diǎn)。 此時，反應(yīng)液冷卻至室溫，析出的固體用過濾的方法除去，并且用叔丁醇洗滌濾餅。濾液在真空下蒸干，直至大部分叔丁醇除去。剩下的水相用乙醚提取三次。提取過程中如有需要可以過濾除去固體。乙醚相蒸干，最后剩余的一點(diǎn)水用油泵抽干，得到玻璃狀的殘留物。用盡可能少的甲醇溶解，轉(zhuǎn)移到單口瓶中。緩慢蒸出甲醇，加入干燥乙醚，沉淀，得白色固體粉末。干燥，稱重:295mg，收率:71%。[0058]LC-MS:【Μ-1=415。HNMR (D2O): δ:9.235 (s, 1Η) ; 8.391 (s, 1Η) ; 5.964 (d, 1Η) ; 4?648 (t, 1Η) ; 4.542 (t, 2Η) ; 4.139 (d, 1Η) ; 4.007 (d, I H) ; 3.912 (d, I H) ; 3.689 (m, 4Η) ; 3.457 ( m, 4Η) ppm.[0059]實施例83-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(化合物8)的合成。[0060]反應(yīng)瓶中加入20ml甲酰胺，加入187mg 二氯化錳和240mg無水硫酸鎂。再加入 416mg的嗎啡啉單磷酸腺嘌呤核苷，攪拌15分鐘。再加入362mg的3-乙酰吡啶-a -D-核苷。室溫攪拌16小時。反應(yīng)完畢，反應(yīng)液加入乙腈，粗產(chǎn)品析出。再用樹脂(S印hadex QAE A-25)純化，用0.25M的碳酸氫銨溶液洗脫。再用Amberite XAD-16純化，用水-甲醇梯度洗脫。之后，冷凍干燥。得到黃色粉末355mg。HPLC純度98%。[0061]LC-MS:[M+l]+=663o HNMR (D2O): δ:9.332 (s, 1H) ; 9.156 (d, 1H) ; 8.965 (d, 1H) ; 8?440 (s, 1H) ;8.241 (s, 1H) ;8.110 (t, 1H) ;6.100 (t, 2H) ;4.614(t, 1H) ;4.465-4.102 (9H) ;2.756 (s, 3H) ppmo
【權(quán)利要求】
1.一種3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸的化學(xué)合成方法，包括以下步驟:(1)以D-核糖為起始原料制備單憐酸-3-乙酸吡唳-a-D-核苷；(2)以腺嘌呤核苷為主要原料制備嗎啡啉單磷酸腺苷；(3)將嗎啡啉單磷酸腺苷和單磷酸-3-乙酰吡啶-a-D-核苷進(jìn)行對接反應(yīng)，制備得到3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸。
2.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(3)中在甲酰胺、二氯化錳和無水硫酸鎂存在下，將嗎啡啉單磷酸腺苷和單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷混合攪拌，室溫下進(jìn)行反應(yīng)，制備得到3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸；其中，各成分的用量優(yōu)選為:按摩爾比計， 二氯化錳:無水硫酸鎂:嗎啡啉單磷酸腺苷；單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷=1: (2-3): (0.9-1):1，甲酰胺過量。
3.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的單磷酸-3-乙酰吡啶-a-D-核苷可通過以下方法制備得到:(1)、用三苯基氯甲烷作為D-核糖5-位的保護(hù)基，制備得到5-Tr-D-核糖；(2)、由5-Tr-D-核糖制備得到5-Tr-l-胺基-D-核糖；(3)將5-Tr-l-胺基-D-核糖與3-乙酰吡啶反應(yīng)，制得3-乙酰吡啶_5_Tr-a -D-核苷;(4)將3-乙酰吡啶-5-Tr-a -D-核苷脫掉保護(hù)基，得到3_乙酰吡啶-a -D-核苷；(5)將3-乙酰吡啶-a-D-核苷在三氯氧磷和磷酸三甲酯的作用下，制得單磷酸-3-乙酰吡啶-a-D-核苷。
4.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于:步驟(I沖在無水吡啶存在下，將D-核糖與三苯基氯甲烷混合攪拌，在60-85°C，攪拌反應(yīng)；優(yōu)選的，按摩爾比計，將D-核糖與三苯基氯甲烷按照1: (1-1.2)的摩爾用量配比在75°C條件下攪拌反應(yīng)4小時。
5.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于:步驟(2)中通過以下反應(yīng)制備得到5-Tr-l-胺基-D-核糖:將5-Tr-D-核糖在過量的甲醇氨飽和溶液中0_4°C反應(yīng)。
6.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于:步驟(3)中在無水甲醇和三氟甲磺酸三甲基硅酯存在的條件下，將5-Tr-l-胺基-D-核糖的甲醇溶液加入到3-乙酰吡啶中，室溫下攪拌進(jìn)行反應(yīng)；將反應(yīng)粗產(chǎn)物用柱層析分離，得到3-乙酰吡啶-5-Tr-a -D-核苷。
7.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于:步驟(4)中將3-乙酰吡啶-5-Tr-a-D-核苷在甲醇-稀鹽酸中攪拌反應(yīng)，脫去保護(hù)基；步驟(5)中在保持0-4°C溫度條件下，將3-乙酰吡啶-a-D-核苷加入到三氯氧磷和磷酸三甲酯中攪拌反應(yīng)，即得單磷酸-3-乙酰吡啶-a -D-核苷粗產(chǎn)物。
8.按照權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于:步驟(5)中還包括向單磷酸-3-乙酰吡唳-a -D-核苷粗產(chǎn)物中加入Dowex樹脂調(diào)節(jié)pH到5 ；Dowex樹脂用水沖洗后合并水相濃縮后上離子柱，用水洗脫，將洗脫液蒸干水，析出固體，即得單磷酸-3-乙酰吡啶- a -D-核苷純品。
9.按照權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(2)中以腺嘌呤核苷為主要原料制備嗎啡啉單磷酸腺苷的方法包括:(1)將腺嘌呤核苷在三氯氧磷和磷酸三甲酯的作用下，制得單磷酸腺嘌呤核苷；(2)將單磷酸腺嘌呤核苷在DCC、嗎啡啉作用下，制得嗎啡啉單磷酸腺苷。
10.按照權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于:步驟(1)在保持0-4°C溫度條件下，向三氯氧磷和磷酸三甲酯中加入腺嘌呤核苷，保持0-4°C溫度進(jìn)行反應(yīng)，即得單磷酸腺嘌呤核苷;其中， 將單磷酸腺嘌呤核苷粗產(chǎn)物制備成單磷酸腺嘌呤核苷純品的方法，包括:向粗產(chǎn)物中加入Dowex樹脂調(diào)節(jié)pH到5 ；Dowex樹脂用水沖洗后合并水相濃縮后上離子柱，用水洗脫，將洗脫液蒸干水，析出固體，即得純品。
【文檔編號】C07H21/02GK103601780SQ201310520771
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年10月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月29日
【發(fā)明者】不公告發(fā)明人 申請人:北京利德曼生化股份有限公司