一種雷公藤紅素的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，具體步驟為：將新鮮南蛇藤根洗凈、切片，曬干，粉碎成南蛇藤粉；將南蛇藤粉浸泡提??；將提取液回收溶劑，得到提取物浸膏；將提取物浸膏用有機溶劑溶解，干法上硅膠柱，經(jīng)二氯甲烷和甲醇梯度洗脫，收集含有雷公藤紅素的洗脫部分，回收溶劑，得到雷公藤紅素粗品；將雷公藤紅素粗品用有機溶劑溶解，干法上硅膠柱，經(jīng)二氯甲烷和甲醇梯度洗脫，收集含有雷公藤紅素的洗脫部分回收溶劑，得到雷公藤純品。本發(fā)明操作簡單，工藝簡便，對儀器和設(shè)備要求低，浸泡法獲得的提取物直接進行兩次硅膠柱層分離，避免溶劑萃取、酸堿處理等手段，產(chǎn)品收率高，浸泡溶劑經(jīng)回收可反復(fù)使用，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種雷公藤紅素的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從南蛇藤藥材中制備雷公藤紅素的新方法，尤其涉及一種從南蛇藤中提取、分離、純化雷公藤紅素的制備方法，屬于天然活性產(chǎn)物制備方法的【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]南蛇藤為衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物南蛇藤(celastrus orbiculatus Thunb)根。本品具有驅(qū)風(fēng)除濕，活血解毒，消腫的功效。主治筋骨疼痛，四肢麻木，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，腰腿痛，閉經(jīng)，小兒驚風(fēng)，痧癥、痢疾、腫毒、毒蛇咬傷、跌打損傷。民間常用該藥煎湯或外敷治療風(fēng)濕痹疼，該藥的湯劑和酊劑已在臨床上用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎多年，療效確切。南蛇藤化學(xué)成分復(fù)雜，已從該植物種子、葉及地上部分分離到50多種成分，主要有三萜類、黃酮類、有機酸類、多元醇類、留體、生物堿及鞣質(zhì)。其中三萜類、生物堿類、黃酮類含量較高。南蛇藤以其根入藥，治療風(fēng)濕性和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，原發(fā)性血小板增多癥，以及關(guān)節(jié)神經(jīng)痛強直性脊柱炎和痹癥。近年的國內(nèi)外研究表明，南蛇藤在抗炎，抗腫瘤，抗氧化，抗多藥耐藥性以及抗生育方面都有著廣闊的研究和應(yīng)用前景，尤其最值得關(guān)注的是抗腫瘤方面的顯著作用，其主要活性成分為南蛇藤素(雷公藤紅素)。
[0003]雷公藤紅素:分子式:C29H3804，分子量:450.61，
[0004]結(jié)構(gòu)式為:
[0005]
【權(quán)利要求】
1.一種雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，具體步驟為: 第一步:將新鮮南蛇藤根洗凈、切片，曬干，粉碎成南蛇藤粉； 第二步:將第一步得到的南蛇藤粉用有機溶劑浸泡提取至少一次，合并提取液； 第三步:將第二步得到的提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收溶劑，得到提取物浸膏； 第四步:將第三步得到的提取物浸膏用有機溶劑溶解，以層析用硅膠拌樣，待有機溶劑揮發(fā)干凈后，干法上硅膠柱，經(jīng)二氯甲烷和甲醇梯度洗脫，薄層層析色譜檢測洗脫進程，收集含有雷公藤紅素的洗脫部分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收溶劑，得到雷公藤紅素粗品； 第五步:將第四步得到的雷公藤紅素粗品用有機溶劑溶解，以層析用硅膠拌樣，待有機溶劑揮發(fā)干凈后，干法上硅膠柱，經(jīng)二氯甲烷和甲醇梯度洗脫，薄層層析色譜檢測洗脫進程，收集含有雷公藤紅素的洗脫部分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收溶劑，得到雷公藤純品。
2.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述第二步中的浸泡提取的溫度為0-35°C，南蛇藤粉和有機溶劑的體積比為1: 1-2，每次提取的浸泡時間為24h以上，浸泡期間進行攪拌，浸泡提取8次以上。
3.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述第三步、第四步以及第五步中旋裝蒸發(fā)的溫度為0-50°C，壓力為0.07-0.1MPa0
4.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述第四步中的有機溶劑為醋酸乙酯，提取物浸膏和有機溶劑的重量體積比為20g: 200ml，提取物浸膏和拌樣用的硅膠的重量比為1: 10-15，提取物浸膏與裝柱用的硅膠的重量比為20g: 1000-1200g,二氯甲烷與甲醇的體積比為20: 1-1: 1，所得的雷公藤紅素粗品含有75-90wt%的雷公藤紅素。
5.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述第五步中的有機溶劑為醋酸乙酯，雷公藤紅素粗品和有機溶劑的重量體積比為15g: 150ml,雷公藤紅素粗品和拌樣用的硅膠的重量比為1: 10.15，雷公藤紅素粗品與裝柱用的硅膠的重量比為I: 50-60，二氯甲烷與甲醇的體積比為20: 1-1: I。
6.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述第二步中浸泡提取所用的有機溶劑為正己烷。
7.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述的第四步和第五步中所用的硅膠為200-300目柱層析用硅膠。
8.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述的第四步和第五步中薄層層析色譜的檢測條件為:硅膠GF254板，展開劑為:體積比為30: I的二氯甲烷和甲醇的混合液，以雷公藤紅素對照品對照，直立上行展開，紫外燈254nm下檢視。
9.如權(quán)利要求1所述的雷公藤紅素的制備方法，其特征在于，所述的第五步中使用HPLC檢測所得 到的雷公藤純品的純度，HPLC條件為:C18200mmX 4.6mm色譜柱，采用體積比為87: 13的甲醇和體積濃度為1%的醋酸溶液的混合液為為流動相，流速:1.0mm/min，檢測波長為425nm。
【文檔編號】C07J63/00GK103570795SQ201310574275
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2013年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月15日
【發(fā)明者】卞俊, 陳海飛, 鮑蕾蕾, 楊揚, 王海林, 宮麗, 劉明珠, 劉海軍 申請人:中國人民解放軍第四一一醫(yī)院