用去氧膽酸純化番茄紅素的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，該方法包括以下步驟：⑴將番茄紅素含量為4~8%的番茄紅素油樹脂用強(qiáng)極性有機(jī)溶劑溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液；⑵所述番茄紅素油樹脂溶液中加入去氧膽酸，在避光條件下加入弱極性有機(jī)溶劑，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物；⑶所述去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入飽和碳酸氫鈉的水溶液，而后用所述弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相；⑷所述萃取液經(jīng)蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體；⑸所述水相中加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH=1，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。本發(fā)明提取率高、操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)品品質(zhì)好。
【專利說明】用去氧膽酸純化番茄紅素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品、保健品及藥品【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及用去氧膽酸純化番茄紅素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]番茄紅素是一種天然的抗氧化劑，它的抗氧化性是β_胡蘿卜素的兩倍，是維生素E的十倍，其能夠有效地減少人類癌癥以及心臟病的發(fā)病率。此外，番茄紅素有著巨大的需求量，不僅可用于制藥工業(yè)，還能用于食品工業(yè)、化妝品等。但是目前其應(yīng)用受到的主要限制是從天然產(chǎn)物中提取出來(lái)的番茄紅素油樹脂中番茄紅素的含量一般是6%。因此，對(duì)于番茄紅素油樹脂的純化是一個(gè)很有應(yīng)用價(jià)值的問題。
[0003]番茄紅素油樹脂的純化方法目前已有多種方法，主要有⑴有機(jī)溶劑法，如專利CN102126911A中利用烷烴類溶劑首先進(jìn)行結(jié)晶，而后將結(jié)晶物用烷烴類溶劑進(jìn)行洗脫，原理即洗脫所用的有機(jī)溶劑可以將結(jié)晶物中的油相溶解，但是基本上不溶解番茄紅素。⑵色譜法，如專利CN1405235利用反相色譜分離純化真空濃縮冷凍得到99%以上純度的番茄紅素。該類辦法優(yōu)點(diǎn)在于得到的番茄紅素的純度較高，缺點(diǎn)是操作復(fù)雜，且設(shè)備運(yùn)行成本較高。⑶結(jié)晶法，如專利CN1472183主要是利用有機(jī)溶劑在較高溫度及氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將番茄紅素油樹脂溶于有機(jī)相中，而后冷卻結(jié)晶，得到高純度的番茄紅素。該法的缺點(diǎn)是番茄紅素的得率較低，大部分番茄紅素留在了母液中。⑷大孔樹脂吸附分離法，如專利CN1439678A主要是利用大孔樹脂吸附番茄紅素油樹脂，然后用流動(dòng)相洗脫β_胡蘿卜素等物質(zhì)，最后將吸附在樹脂上面的番茄紅素洗脫下來(lái)，濃縮，結(jié)晶，得到番茄紅素。很明顯，這樣的操作方法需要大量的有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫。(5)再如傳統(tǒng)的采用柱層析法、重結(jié)晶法、高效液相制備色譜法、皂化法等，但這些純化方法或所需設(shè)備昂貴，或操作復(fù)雜，或效率較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種提取率高、操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)品品質(zhì)好的用去氧膽酸純化番茄紅素的方法。
[0005]為解決上述問題，本發(fā)明所述的用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為4~8%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的20-30倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液；
⑵所述番茄紅素油樹脂溶液中加入與所述番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在0°C，攪拌f 3h后加入弱極性有機(jī)溶劑，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物；所述弱極性有機(jī)溶劑為所述番茄紅素油樹脂質(zhì)量的15~25倍；
⑶所述去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的20-90倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，而后用所述弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相；所述弱極性有機(jī)溶劑為所述去氧膽酸番茄紅素的包合物 質(zhì)量的80-100倍；⑷所述萃取液經(jīng)35~45°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體；
(5)所述水相中加入質(zhì)量濃度為2~8%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0006]所述步驟⑴中的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑是指乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯中的一種。
[0007]所述步驟⑵或所述步驟⑶中的弱極性有機(jī)溶劑是指石油醚、乙醚、正己烷中的一種或幾種。
[0008]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):
1、由于本發(fā)明采用了分子包合法，能夠利用去氧膽酸選擇性包合油樹脂中的番茄紅素(參見圖1~ 4)，因此，提取率高，所得產(chǎn)品品質(zhì)好。
[0009]2、由于本發(fā)明所用到的提取劑去氧膽酸能夠通過加入碳酸氫鈉溶液的方式轉(zhuǎn)化為鈉鹽，使其溶解于水相中，通過加酸的方式使其轉(zhuǎn)變?yōu)槿パ跄懰?，從而從水相中析出而加以回收利用，因此，不僅操作簡(jiǎn)單，而且由于去氧膽酸能夠重復(fù)利用而具有較好的利用前景?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0010]下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0011]圖1為本發(fā)明紫外吸收光譜圖。其中A為番茄紅素油樹脂溶液，B為番茄紅素油樹脂包合后的殘余液。
[0012]圖2為未純化的番茄紅素油樹脂液相色譜圖。
[0013]圖3為純化后的番茄紅素油樹脂液相色譜圖。
[0014]圖4為番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)樣品的液相色譜圖。
[0015]上述液相色譜條件為:色譜柱:Alltima C18(4.6 X 250mm, 5 μ m);流動(dòng)相:甲醇-乙醚(1:1);檢測(cè)波長(zhǎng):472nm ;流速:1.2mL.L-1 ;柱溫:30°C。
【具體實(shí)施方式】
[0016]實(shí)施例1用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為4%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的20倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑乙酸乙酯溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液。
[0017]⑵番茄紅素油樹脂溶液中加入與番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在0°c，攪拌Ih后加入弱極性有機(jī)溶劑石油醚，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物。
[0018]其中:弱極性有機(jī)溶劑為番茄紅素油樹脂質(zhì)量的15倍。
[0019]⑶去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的40倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，在去氧膽酸溶解的同時(shí)，內(nèi)部包合的番茄紅素同時(shí)也被釋放出來(lái)，而后用弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相。
[0020]其中:弱極性有機(jī)溶劑為去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的80倍。
[0021]⑷萃取液經(jīng)35°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體。該固體番茄紅素純度經(jīng)分析為78%，產(chǎn)率為70%。
[0022] (5)水相中加入質(zhì)量濃度為2%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0023]該固體去氧膽酸的回收率為52%。
[0024]實(shí)施例2用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為8%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的30倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑二氯甲烷溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液。
[0025]⑵番茄紅素油樹脂溶液中加入與番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在0°c，攪拌3h后加入弱極性有機(jī)溶劑乙醚，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物。
[0026]其中:弱極性有機(jī)溶劑為番茄紅素油樹脂質(zhì)量的25倍。
[0027]⑶去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的20倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，在去氧膽酸溶解的同時(shí)，內(nèi)部包合的番茄紅素同時(shí)也被釋放出來(lái)，而后用弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相。
[0028]其中:弱極性有機(jī)溶劑為去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的100倍。
[0029]⑷萃取液經(jīng)45°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體。該固體番茄紅素純度經(jīng)分析為84%，產(chǎn)率為82%。
[0030](5)水相中加入質(zhì)量濃度為8%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0031]該固體去氧膽酸回收率為67%。
[0032]實(shí)施例3用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為5%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的22倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑甲苯溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液。
[0033]⑵番茄紅素油樹脂溶液中加入與番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在0°c，攪拌2h后加入弱極性有機(jī)溶劑正己烷，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物。
[0034]其中:弱極性有機(jī)溶劑為番茄紅素油樹脂質(zhì)量的20倍。
[0035]⑶去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的50倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，在去氧膽酸溶解的同時(shí)，內(nèi)部包合的番茄紅素同時(shí)也被釋放出來(lái)，而后用弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相。
[0036]其中:弱極性有機(jī)溶劑為去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的90倍。
[0037]⑷萃取液經(jīng)40°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體。該固體番茄紅素純度經(jīng)分析為70%，產(chǎn)率為75%。
[0038](5)水相中加入質(zhì)量濃度為5%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0039]該固體去氧膽酸回收率為70%。
[0040]實(shí)施例4用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為6%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的24倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑乙酸乙酯溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液。
[0041]⑵番茄紅素油樹脂溶液中加入與番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在0°c，攪拌1.5h后加入弱極性有機(jī)溶劑，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物。
[0042]其中:弱極性有機(jī)溶劑為番茄紅素油樹脂質(zhì)量的17倍。
[0043]弱極性有機(jī)溶劑是指石油醚與乙醚等體積混合而成的溶劑。
[0044]⑶去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的60倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，在去氧膽酸溶解的同時(shí)，內(nèi)部包合的番茄紅素同時(shí)也被釋放出來(lái)，而后用弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相。
[0045]其中:弱極性有機(jī)溶劑為去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的85倍。
[0046]⑷萃取液經(jīng)37°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體。該固體番茄紅素純度經(jīng)分析為80%，產(chǎn)率為65%。
[0047](5)水相中加入質(zhì)量濃度為3%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0048]該固體去氧膽酸純度回收率為49%。
[0049]實(shí)施例5用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為7%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的26倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑二氯甲烷溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液。 [0050]⑵番茄紅素油樹脂溶液中加入與番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在0°c，攪拌2.5h后加入弱極性有機(jī)溶劑，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物。
[0051]其中:弱極性有機(jī)溶劑為番茄紅素油樹脂質(zhì)量的22倍。
[0052]弱極性有機(jī)溶劑是指石油醚與正己烷等體積混合而成的溶劑。
[0053]⑶去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的70倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，在去氧膽酸溶解的同時(shí)，內(nèi)部包合的番茄紅素同時(shí)也被釋放出來(lái)，而后用弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相。
[0054]其中:弱極性有機(jī)溶劑為去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的95倍。
[0055]⑷萃取液經(jīng)42°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體。該固體番茄紅素純度經(jīng)分析為90%，產(chǎn)率為87%。
[0056](5)水相中加入質(zhì)量濃度為4%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0057]該固體去氧膽酸回收率為65%。
[0058]實(shí)施例6用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為4.5%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的28倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑甲苯溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液。
[0059]⑵番茄紅素油樹脂溶液中加入與番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在o°c，攪拌1.Sh后加入弱極性有機(jī)溶劑，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物。
[0060]其中:弱極性有機(jī)溶劑為番茄紅素油樹脂質(zhì)量的18倍。
[0061]弱極性有機(jī)溶劑是指乙醚與正己烷等體積混合而成的溶劑。
[0062]⑶去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的80倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，在去氧膽酸溶解的同時(shí)，內(nèi)部包合的番茄紅素同時(shí)也被釋放出來(lái)，而后用弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相。
[0063]其中:弱極性有機(jī)溶劑為去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的82倍。
[0064]⑷萃取液經(jīng)36°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體。該固體番茄紅素純度經(jīng)分析為86%，產(chǎn)率為73%。
[0065](5)水相中加入質(zhì)量濃度為6%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0066]該固體去氧膽酸回收率為72%。
[0067]實(shí)施例7用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟:
⑴將番茄紅素含量為5.5%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的29倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑乙酸乙酯溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液。
[0068]⑵番茄紅素油樹脂溶液中加入與番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控 制溫度在0°c，攪拌2.4h后加入弱極性有機(jī)溶劑，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物。
[0069]其中:弱極性有機(jī)溶劑為番茄紅素油樹脂質(zhì)量的24倍。
[0070]弱極性有機(jī)溶劑是指石油醚、乙醚、正己烷等體積混合而成的溶劑。
[0071]⑶去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的90倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，在去氧膽酸溶解的同時(shí)，內(nèi)部包合的番茄紅素同時(shí)也被釋放出來(lái)，而后用弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相。
[0072]其中:弱極性有機(jī)溶劑為去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的92倍。
[0073]⑷萃取液經(jīng)44°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體。該固體番茄紅素純度經(jīng)分析為82%，產(chǎn)率為70%。
[0074](5)水相中加入質(zhì)量濃度為7%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
[0075]該固體去氧膽酸回收率為62%。
【權(quán)利要求】
1.用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，包括以下步驟: (1)將番茄紅素含量為4~8%的番茄紅素油樹脂用其質(zhì)量的20-30倍的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑溶解后，得到番茄紅素油樹脂溶液； (2)所述番茄紅素油樹脂溶液中加入與所述番茄紅素油樹脂等質(zhì)量的去氧膽酸，在避光條件下用冰水浴控制溫度在0°C，攪拌f 3h后加入弱極性有機(jī)溶劑，過濾后得到去氧膽酸番茄紅素的包合物；所述弱極性有機(jī)溶劑為所述番茄紅素油樹脂質(zhì)量的15~25倍； (3)所述去氧膽酸番茄紅素的包合物中加入其質(zhì)量的20-90倍的飽和碳酸氫鈉的水溶液，而后用所述弱極性有機(jī)溶劑萃取后，分別得到萃取液和水相；所述弱極性有機(jī)溶劑為所述去氧膽酸番茄紅素的包合物質(zhì)量的80-100倍； (4)所述萃取液經(jīng)35~45°C蒸發(fā)濃縮后，得到番茄紅素晶體； (5)所述水相中加入質(zhì)量濃度為2~8%的鹽酸，調(diào)節(jié)pH=l，使去氧膽酸從水相中析出，經(jīng)過濾洗滌后，即得可重復(fù)使用的固體去氧膽酸。
2.如權(quán)利要求1所述的用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，其特征在于:所述步驟⑴中的強(qiáng)極性有機(jī)溶劑是指乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯中的一種。
3.如權(quán)利要求1所述的用去氧膽酸純化番茄紅素的方法，其特征在于:所述步驟⑵或所述步驟⑶中的弱極性有機(jī)溶劑是指石油醚、乙醚、正己烷中的一種或幾種。
【文檔編號(hào)】C07C11/21GK103910597SQ201410113272
【公開日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2014年3月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月25日
【發(fā)明者】龍海濤, 蒲陸梅, 李靜, 王農(nóng), 吳龍婷 申請(qǐng)人:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)